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KR20170076587A - 모노테르페닐 마그놀올을 유효성분으로 하는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 조성물 및 후박 분획물의 제조방법 - Google Patents

모노테르페닐 마그놀올을 유효성분으로 하는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 조성물 및 후박 분획물의 제조방법 Download PDF

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KR20170076587A
KR20170076587A KR1020160175890A KR20160175890A KR20170076587A KR 20170076587 A KR20170076587 A KR 20170076587A KR 1020160175890 A KR1020160175890 A KR 1020160175890A KR 20160175890 A KR20160175890 A KR 20160175890A KR 20170076587 A KR20170076587 A KR 20170076587A
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KR
South Korea
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extract
fraction
obesity
hyperlipidemia
fatty liver
Prior art date
Application number
KR1020160175890A
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English (en)
Inventor
엄기안
연성흠
최강인
홍성운
임종환
황덕규
전성훈
Original Assignee
(주)휴온스
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Publication date
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Abstract

본 발명은 모노테르페닐 마그놀올(monoterpenyl magnolol)을 유효성분으로하는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 조성물 및 모노테르페닐 마그놀올(monoterpenyl magnolol)을 포함하는 후박 분획물의 제조방법에 관한 것이다.

Description

모노테르페닐 마그놀올을 유효성분으로 하는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 조성물 및 후박 분획물의 제조방법{Composition comprising Monoterpenyl magnolol as an effective ingredient for preventing or treating of obesity, hyperlipidemia or fatty Liver and Method for preparing fraction of Magnolia cortex}
본 발명은 모노테르페닐 마그놀올을 유효성분으로 하는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 조성물 및 후박 분획물의 제조방법에 관한 것이다.
식습관 등 생활환경의 변화에 의해 내장지방형 비만이 증가하면서 지방간, 지질대사이상, 당뇨병, 인슐린저항성, 고혈압 등을 수반하는 대사증후군(metabolic syndrome)의 발병이 점점 더 사회적인 문제로 되고 있다. 이들 질환은 상호간의 발생위험을 증가시키며, 노화, 스트레스 및 면역기능저하 등의 다원적인 생체대사변화와 관련이 있는 공통 질환이다.
지방간은 만성적인 음주벽, 과식에 의한 비만증과 당뇨병이 주요 원인으로 꼽히며, 그밖에 독성이 강한 약제의 복용, 임신 중에 항생제를 잘못 복용하였을 경우, 어린아이에게서의 발열성 감염질환이 있을 경우에 해열목적으로 아스피린을 함부로 남용하였을 경우에도 지방간이 생길 수 있다. 이러한 지방간은 면역상태 등의 신체적 여건이 좋으면 간세포의 재생으로 쉽게 회복되지만 그렇지 못할 경우에는 간세포 속의 지방 덩어리가 커지면서 핵을 포함한 세포의 중요한 구성성분이 한쪽으로 밀려 간세포의 기능이 저하되며, 세포내에 축적된 지방으로 인하여 팽창된 간세포들이 간세포 사이에 있는 미세혈관과 임파선을 압박하여 간 내의 혈액과 임파액의 순환에 장애가 생기게 되고, 간세포는 산소와 영양공급을 적절히 받을 수 없어 간기능이 저하되며, 간경변증까지 진행될 수가 있다.
고지혈증은 필요 이상으로 많은 지방성분 물질이 혈액 내에 존재하면서 혈관벽에 쌓여 염증을 일으키고 그 결과 심혈관계질환을 일으키는 상태로서 고중성 지방혈증과 혈증과 고콜레스테롤혈증으로 구분하며, 최근에는 이상지질혈증(dyslipidemia)이라고 해서 혈액 내 중성지방, 총 콜레스테롤 및 LDL- 콜레스테롤이 증가되거나 HDL- 콜레스테롤이 감소된 상태도 고지혈증의 한 부류에 포함시키기도 한다. 이 질환은 특별한 증상은 없으나 동맥경화의 원인이 되어 이로 인해 관상동맥 심장질환이나 뇌혈관 질환, 말초혈관 폐쇄 등을 발생시킬 수 있다. 뿐만 아니라, 과도한 지방의 축적은 간에도 영향을 미칠 수 있어 지방간 발생과도 밀접한 관계가 있다 할 수 있다.
비만은 단순히 체중이 많이 나가는 것이 아니라 체지방이 과도하게 축적된 상태를 말한다. 겉으로 정상체중으로 보여도 체지방 비율이 높으면 비만이라고 할 수 있다는 의미이다. 보통 비만을 판정하는 방법은 체질량지수 (BMI)를 이용하게 되는데 23~24.9인 경우에 과체중, 25~29.9까지를 경도비만으로 판정하며, 30~34.9는 중등도비만, 35 이상일 경우는 고도비만으로 판정하고 있다. 비만은 한가지 원인보다는 여러 원인이 복합적으로 작용하여 발생하는데, 서구화된 식습관을 포함하여 잘못된 식습관과 활동량 감소, 정서적 요인, 유전적 요인 등을 들 수 있으며 이렇게 발생한 비만은 결국 고지혈증, 당뇨병, 고혈압 등 만성질환의 발생 위험을 높이게 된다.
한편, 후박(Magnolia cortex)에는 일본후박나무(Magnolia obovate Thunberg), 중국후박나무(Magnolia officinale Rehder et Wils) 및 왕후박나무(Machilus thunbergii Sieb. et Zucc)가 있으며, 후박나무의 성분으로는 β-유데스몰(β-eudesmol), 마그놀올(magnolol), 호노키올(honokiol), 마그노쿠라린(magnocurarine), 탄닌(tannin) 등이 알려진바 있으며, 상기 성분 중 마그놀올(magnolol) 및 호노키올(honokiol)은 클로로헥시딘과 같은 기존의 항생물질보다 더욱 안전하고 뛰어난 항생 효과를 가진다는 사실이 입증된 바 있다.
대한민국 등록특허 제10-0919625호에서는 호노키올을 주요 유효성분으로 함유하는 후박 추출물 또는 후박 추출정제물이 지방간 질환 치료제의 성분으로 사용될 수 있고, 대한민국 등록특허 제10-0895500호에서는 후박에서 분리, 정제된 호노키올이 지방간 질환 치료제의 성분으로 사용될 수 있음을 밝히고 있으며, 대한민국 공개특허 제10-2014-0095167호에서는 호노키올 및 마그놀올을 유효성분으로 하는 지방간 질환 예방 또는 치료용 조성물로서, 호노키올이 마그놀올과 특정 조성비로 혼합되었을 때 중성지방 축적 억제 효과가 현저히 증진된다는 사실을 밝힌 바 있다.
그러나, 후박에서 추출 및 정제된 분획물에 포함된 모노테르페닐 마그놀올(Monoterpenyl magnolol) 및 이의 지방간, 고지혈증 내지 비만에 대한 효과가 보고된 연구는 지금껏 없었다.
본 발명은 모노테르페닐 마그놀올을 유효성분으로 하는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물 등을 제공하고자 한다.
그러나, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 모노테르페닐 마그놀올(monoterpenyl magnolol)을 유효성분으로 함유하는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다:
[화학식 1]
Figure pat00001
.
상기 모노테르페닐 마그놀올은 후박(Magnolia cortex)으로부터 유래한 것일 수 있다.
상기 모노테르페닐 마그놀올은 후박 추출물, 후박 연조엑스, 또는 후박 건조 엑스 추출물의 헥산 분획물에 포함된 것일 수 있다.
상기 후박 연조엑스는 후박을 물, C1 내지 C4 저급알코올 또는 이들의 혼합물로 추출한 후, 에틸아세테이트로 정제한 아틸아세테이트 분획물일 수 있다.
상기 모노테르페닐 마그놀올은 후박 건조엑스 추출물의 헥산 분획물에, 헥산 및 에틸아세테이트의 혼합용매의 농도구배를 100:1(v/v) ~ 1:1(v/v)로 하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 추가적으로 수행하여 얻어진 헥산 활성 분획물에 포함된 것일 수 있다.
상기 모노테르페닐 마그놀올의 용량은 0.1㎍/㎖ 내지 100㎍/㎖일 수 있다.
본 발명의 일 구현예로, 하기 화학식 1로 표시되는 모노테르페닐 마그놀올(monoterpenyl magnolol)을 유효성분으로 함유하는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 개선용 건강기능식품을 제공한다:
[화학식 1]
Figure pat00002
.
상기 모노테르페닐 마그놀올은 후박(Magnolia cortex) 으로부터 유래한 것일 수 있다.
본 발명의 다른 구현예로, a) 후박 건조엑스를 물, C1 내지 C4 저급알코올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 추출물을 제조하는 단계; 및 b) 상기 a) 단계에서 제조된 추출물을 헥산으로 정제한 후, 감압농축하여 헥산 분획물을 제조하는 단계를 포함하고, 상기 b) 단계에서 제조된 헥산 분획물은 하기 화학식 1로 표시되는 모노테르페닐 마그놀올(monoterpenyl magnolol)을 포함하는 후박 분획물의 제조방법을 제공한다:
[화학식 1]
Figure pat00003
.
상기 a) 단계 전, 후박 연조엑스에 흡착물질을 혼합 및 건조하여 후박 건조 엑스를 제조하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
상기 후박 연조엑스는 후박을 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 추출한 후, 에틸아세테이트로 정제된 에틸아세테이트 분획물일 수 있다.
상기 흡착물질은 규산칼슘, 이산화규소, 카올린, 산화알루미늄, 수산화알루미늄, 인산알루미늄, 애타풀자이트, 벤토나이트, 규산알루미늄, 마그네슘 및 사포나이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다.
c) 상기 b) 단계에서 제조된 헥산 분획물에 헥산 및 에틸아세테이트의 혼합용매의 농도 구배를 100:1(v/v) ~ 1:1(v/v)로 하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 헥산 활성 분획물을 제조하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명은 모노테르페닐 마그놀올을 유효성분으로 하는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 상기 모노테르페닐 마그놀올은 중성지방 축적 억제 활성이 뛰어난바, 지방간, 고지혈증 또는 비만 등을 포함하는 대사성 증후군에 대한 예방 또는 치료에 이용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따라 모노테르페닐 마그놀올을 포함하는 후박 분획물의 제조방법을 도시한 것이다.
도 2는 실시예 1~3 및 비교예 1~3의 간세포 내 중성지방 축적 억제 효능을 비교한 그래프이다.
도 3은 실시예 1, 3 및 비교예 2~3의 HMG CoA reductase 억제 효능을 비교한 그래프이다.
도 4는 실시예 2, 3 및 비교예 1~3의 지방세포형성(Adipogenesis) 억제 효능을 비교한 그래프이다.
본 발명자들은 후박에서 추출 및 정제된 분획물에 포함된 모노테르페닐 마그놀올(Monoterpenyl magnolol)을 분리하고, 이의 지방간, 고지혈증 또는 비만 등을 포함하는 대사성 증후군에 대한 효능을 밝혀내고, 본 발명을 완성하였다.
본 발명에서 “모노테르페닐 마그놀올(Monoterpenyl magnolol)”은 식물, 동물 및 미생물을 포함하는 천연물로부터 추출 및 정제되거나, 합성된 화합물로서, 하기 화학식 1로 표시되고, IUPAC명은 4-알릴-2-(5-알릴-2-하이드록시페닐)-6-(6-이소프로필-3-메틸 사이클로헥-2-엔-1-일)페놀[4-allyl-2-(5-allyl-2-hydroxyphenyl)-6-(6-isopropyl-3-methylcyclohex-2-en-1-yl)phenol]이다:
[화학식 1]
Figure pat00004
.
상기 모노테르페닐 마그놀올이 가지는 효능과 관련하여, 종래 피부암으로의 촉진을 억제한다는 보고(Journal of Natural Products, 54 (3) 816-822, 1991)와 항균 및 세포독성에 대한 보고(Chem Biodivers. 2004 Mar;1(3):530-7)가 있었을 뿐, 대사성 증후군과 연관된 보고는 없었다.
본 발명에서 “지방간”은 알콜성 지방간, 비알콜성 지방간, 영양성 지방간, 기아성 지방간, 비만성 지방간, 당뇨병성 지방간 등을 포함한다.
본 발명에서 “연조엑스(soft extract)”는 생약의 침출액을 농축하여 물엿 과 같은 상태로 만든 제형을 의미하는 것으로, 수분 함량이 15~25%로 실내에서 용기를 기울려도 흐르지 않으며 약솜에 묻혀 잡아당기면 실처럼 늘어나는 제형을 말한다. 본 발명에서 “건조엑스(dried extract)”는 생약의 침출액을 농축한 후, 건조하여 분쇄하여 균일한 분말로 만든 제형을 의미한다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 모노테르페닐 마그놀올(monoterpenyl magnolol)을 유효성분으로 함유하는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다:
[화학식 1]
Figure pat00005
.
상기 모노테르페닐 마그놀올은 후박(Magnolia cortex)으로부터 유래한 것일 수 있다. 이때, 상기 후박은 일본후박나무(Magnolia obovata Thunberg), 중국후박나무(Magnolia officinale Rehder et Wils) 및 왕후박나무(Machilus thunbergii Sieb. et Zucc)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 이때, 상기 후박의 잎, 줄기, 꽃, 뿌리, 껍질, 열매 또는 이들의 혼합물이 추출 대상이 될 수 있다.
구체적으로, 상기 모노테르페닐 마그놀올은 후박 추출물, 후박 연조엑스, 또는 후박 건조엑스 추출물의 헥산 분획물에 포함된 것일 수 있다.
상기 모노테르페닐 마그놀올은 후박 추출물에 포함된 것일 수 있고, 상기 후박 추출물은 후박을 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 추출한 것으로, 상기 후박 추출물은 모노테르페닐 마그놀올 외에, 호노키올 및 마그놀올을 포함할 수 있다. 이때, 모노테르페닐 마그놀올, 호노키올 및 마그놀올의 중량비는 1:10:20 내지 10:30:40인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
또한, 상기 모노테르페닐 마그놀올은 후박 연조엑스에 포함된 것일 수 있고, 상기 후박 연조엑스는 후박을 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 추출한 후, 에틸아세테이트로 정제된 에틸아세테이트 분획물인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 상기 후박의 추출에 사용되는 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것이 더욱 바람직하며, 에탄올인 것이 가장 바람직하다. 추출시 건조된 후박을 세절한 후 물, 알코올 또는 이의 혼합물을 후박 무게의 2배 내지 20배를 첨가하여 추출하는 것이 바람직하고, 3배 내지 10배를 첨가하여 추출하는 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 추출온도는 30℃ 내지 100℃인 것이 바람직하며, 60℃ 내지 100℃인 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 추출시간은 1시간 내지 10시간인 것이 바람직하며, 2시간 내지 5시간인 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 추출방법은 냉침, 초음파 추출 또는 환류 냉각 추출 방법이 모두 이용가능하며, 환류 냉각 추출방법을 이용하는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 추출 회수는 1회 내지 5회인 것이 바람직하며, 2회 내지 3회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
상기 후박 연조엑스 역시 모노테르페닐 마그놀올 외에, 호노키올 및 마그놀올을 포함할 수 있다. 이때, 모노테르페닐 마그놀올, 호노키올 및 마그놀올의 중량비는 1:10:20 내지 10:30:40인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다.
또한, 상기 모노테르페닐 마그놀올은 후박 건조엑스 추출물의 헥산 분획물에 포함된 것일 수 있고, 상기 후박 건조엑스 추출물의 헥산 분획물은 상기 후박 연조엑스에 흡착물질을 혼합 및 건조하여 제조된 후박 건조엑스를 물, C1 내지 C4 저급 알코올 또는 이들의 혼합물로 추출한 후, 헥산으로 정제한 헥산 분획물인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 혹은 헥산 정제 후, 헥산 및 에틸아세테이트의 혼합용매의 농도구배를 100:1(v/v) ~ 1:1(v/v)로 하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 추가적으로 수행하여 얻어진 헥산 활성 분획물일 수 있다.
상기 후박 건조엑스의 제조에 사용되는 흡착물질은 규산칼슘, 이산화규소, 카올린, 산화알루미늄, 수산화알루미늄, 인산알루미늄, 애타풀자이트, 벤토나이트, 규산알루미늄, 마그네슘 및 사포나이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있고, 규산칼슘 또는 이산화 규소와 같은 실리카 흡착물질인 것이 바람직하고, 규산칼슘인 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 상기 흡착물질로 규산칼슘을 사용하는 경우, 낮은 함량으로도 타정 능력 향상 및 원료 배어 나옴 방지 효과를 달성할 수 있고, 유기용매의 제거 효과도 뛰어나다. 한편, 미결정셀룰로오스 등과 같은 셀룰로오스 흡착물질 또는 유당, 덱스트린 등의 당류 등은 규산칼슘 또는 이산화규소와 유사한 수준의 타정 능력 향상 및 원료 배어 나옴 방지 효과를 달성하기 위해서는 규산칼슘 또는 이산화규소에 비하여 현저히 많은 양을 사용해야 하는 문제점이 있다. 상기 흡착물질은 상기 후박 연조엑스 100중량부에 대하여, 10 내지 100 중량부 포함할 수 있다.
또한, 상기 후박 건조엑스의 추출에 사용되는 저급 알코올 역시 에탄올 또는 메탄올인 것이 더욱 바람직하며, 에탄올인 것이 가장 바람직하다. 추출시 후박 건조엑스를 세절한 후 물, 알코올 또는 이의 혼합물을 후박 건조엑스 무게의 2배 내지 20배를 첨가하여 추출하는 것이 바람직하고, 3배 내지 10배를 첨가하여 추출하는 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 추출온도는 30℃ 내지 100℃인 것이 바람직하며, 60℃ 내지 100℃인 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 추출시간은 1시간 내지 10시간인 것이 바람직하며, 2시간 내지 5시간인 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 추출방법은 냉침, 초음파 추출 또는 환류냉각 추출방법이 모두 이용가능하며, 환류 냉각 추출방법을 이용하는 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 추출 회수는 1회 내지 5회인 것이 바람직하며, 2회 내지 3회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되지 않는다.
상기 모노테르페닐 마그놀올의 용량은 1㎍/㎖ 내지 100㎍/㎖인 것이 바람직하나, 이에 한정되지 않는다. 이때, 모노테르페닐 마그놀올이 상기 중량부 미만인 경우, 중성지방 축적 억제 활성이 저하되어, 지방간, 고지혈증 또는 비만의 질환 예방 또는 치료 효과를 발휘하기 어려운 문제점이 있고, 모노테르페닐 마그놀올이 상기 중량부를 초과하는 경우, 세포독성을 포함한 독성의 우려사항이 있을 수 있다.
본 발명에 따른 지방간, 고지혈증 또는 비만의 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구제 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화되어 사용할 수 있고, 제형화를 위하여 약학 조성물의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다.
상기 담체 또는, 부형제 또는 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리게이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 포함한 다양한 화합물 혹은 혼합물을 들 수 있다.
제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 중량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조할 수 있다.
경구 투여를 위한 고형제제는 상기 모노테르페닐 마그놀올에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘보네이트, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 제조할 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용할 수 있다.
경구를 위한 액상 제제로는 현탁액, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용하는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 포함할 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수용성제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등을 사용할 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤젤라틴 등을 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 지방간, 고지혈증 또는 비만의 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태, 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서는 1일 0.0001 내지 2,000 mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 내지 2,000 mg/kg으로 투여할 수 있다. 투여는 하루에 한 번 투여할 수도 있고, 수회 나누어서 투여할 수도 있다. 다만, 상기 투여량에 의해서 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명에 따른 지방간, 고지혈증 또는 비만의 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유 동물에 다양한 경로로 투여할 수 있다. 투여의 모든 방식은 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해서 투여할 수 있다.
지방간, 고지혈증 또는 비만의 개선용 건강기능식품
또한, 하기 화학식 1로 표시되는 모노테르페닐 마그놀올(monoterpenyl magnolol)을 유효성분으로 함유하는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 개선용 건강기능식품을 제공한다:
[화학식 1]
Figure pat00006
.
상기 모노테르페닐 마그놀올은 후박(Magnolia cortex)으로부터 유래한 것일 수 있고, 상기 모노테르페닐 마그놀올에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 발명에 따른 지방간, 고지혈증 또는 비만의 질환 개선용 건강기능식품에 있어서, 상기 모노테르페닐 마그놀올을 건강기능식품의 첨가물로 사용하는 경우 이를 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 예방, 건강 또는 치료 등의 각 사용 목적에 따라 적합하게 결정할 수 있다.
건강기능식품의 제형은 산제, 과립제, 환, 정제, 캡슐제의 형태뿐만 아니라 일반 식품 또는 음료의 형태 어느 것이나 가능하다.
상기 식품의 종류에는 특별히 제한은 없고, 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸콜렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함할 수 있다.
일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 상기 모노테르페닐 마그놀올은 원료 100 중량부에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가할 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 또한 본 발명은 천연물로부터의 분획물을 이용하는 점에서 안전성 면에서 문제가 없으므로 상기 범위 이상의 양으로도 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 건강기능식품 중 음료는 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명에 따른 음료 100 mL당 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g일 수 있다.
상기 외에 본 발명에 따른 지방간, 고지혈증 또는 비만의 개선용 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제를 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 수면 개선용 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 제한되지 않으나 본 발명의 건강기능식품 100 중량부 대비 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
후박 분획물의 제조방법
또한, 본 발명은 a) 후박 건조엑스를 물, C1 내지 C4 저급알코올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 추출물을 제조하는 단계; 및 b) 상기 a) 단계에서 제조된 추출물을 헥산으로 정제한 후, 감압농축하여 헥산 분획물을 제조하는 단계를 포함하고, 상기 b) 단계에서 제조된 헥산 분획물은 하기 화학식 1로 표시되는 모노테르페닐 마그놀올(monoterpenyl magnolol)을 포함하는 후박 분획물의 제조방법을 제공한다:
[화학식 1]
Figure pat00007
.
본 발명의 일 실시예에 따라 모노테르페닐 마그놀올을 포함하는 후박 분획물의 제조방법에 대해서는 도 1에 도시한 바와 같다.
먼저, 본 발명에 따른 후박 분획물은 모노테르페닐 마그놀올(monoterpenyl magnolol)을 포함하는 것으로, 후박 건조엑스를 물, C1 내지 C4 저급알코올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 추출물을 제조하는 단계[a) 단계]를 포함한다.
상기 후박 건조엑스의 구체적인 내용에 대해서는 전술한 바와 같다.
a) 단계 전, 후박 연조엑스에 흡착물질을 혼합 및 건조하여 후박 건조 엑스를 제조하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
구체적으로, 상기 후박 연조엑스는 후박을 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 추출한 후, 에틸아세테이트로 정제된 에틸아세테이트 분획물일 수 있고, 상기 흡착물질은 규산칼슘, 이산화규소, 카올린, 산화알루미늄, 수산화알루미늄, 인산알루미늄, 애타풀자이트, 벤토나이트, 규산알루미늄, 마그네슘 및 사포나이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다.
상기 후박 연조엑스 및 상기 흡착물질의 구체적인 내용에 대해서는 전술한 바와 같다.
다음으로, 본 발명에 따른 후박 분획물의 제조방법은 상기 a) 단계에서 제조된 추출물을 헥산으로 정제한 후, 감압농축하여 헥산 분획물을 제조하는 단계[b) 단계]를 포함한다.
이후, 본 발명에 따른 후박 분획물의 제조방법은 상기 b) 단계에서 제조된 헥산 분획물에 헥산 및 에틸아세테이트의 혼합용매의 농도 구배를 100:1(v/v) ~ 1:1(v/v)로 하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 헥산 활성 분획물을 제조하는 단계[c) 단계]를 추가로 포함할 수 있다.
따라서, 본 발명은 모노테르페닐 마그놀올을 유효성분으로 하는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 상기 모노테르페닐 마그놀올은 중성지방 축적 억제 활성이 뛰어난바, 지방간, 고지혈증 또는 비만 등을 포함하는 대사성 증후군에 대한 예방 또는 치료에 이용될 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
[ 실시예 ]
실시예 1: 후박 추출물의 제조
건조 후박(중국사천성 産, 대명제약) 10kg에 에탄올 80L를 가하여 70℃에서 5시간 동안 2회 환류냉각 추출하였다. 이를 여과지(Advantec no. 2 filter paper)를 이용하여 여과한 다음, 여액을 감압농축기(EYELA사, N-1000, 일본)를 이용하여 감압농축하여 건조된 상태의 후박 추출물 0.8kg을 제조하였다.
이때, 제조된 후박 추출물의 성분에 해당하는 호노키올, 마그놀올 및 모노테르페닐 마그놀올의 함량을 Halo RP-Amide (2.7 um, 2.1 × 150 mm) Acquity UPLC, Waters, 이동상은 용매 구매법으로 표 1와 같이 유속 0.5 mL/min, UV 216 nm에서 검출하여 UPLC방법으로 측정하여 표 2에 나타내었다.
시간(분) 0 5 15 20
0.1% 트리플루오로아세트산
첨가 물(부피%)		 70 70 0 0
0.1% 트리플루오로아세트산 첨가
아세토니트릴 (부피%)		 30 30 100 100
호노키올 함량
(중량%)		 마그놀올 함량
(중량%)		 모노테르페닐 마그놀올 함량(중량%)
후박 추출물 14.40 27.40 3.41
실시예 2: 후박 연조엑스의 제조
실시예 1에서 제조된 후박 추출물 0.8kg을 증류수 4L에 현탁시킨 후 동량의 에틸아세테이트를 사용하여 3회 분획하고 에틸아세테이트층만 분취하여 여과 및 감 압농축한 후 후박 연조엑스(soft extract) 0.6kg을 제조하였다.
이때, 제조된 후박 연조엑스의 성분에 해당하는 호노키올, 마그놀올 및 모노테르페닐 마그놀올의 함량을 Halo RP-Amide (2.7 um, 2.1 × 150 mm) Acquity UPLC, Waters, 이동상은 용매 구매법으로 표 1와 같이 유속 0.5 mL/min, UV 216 nm에서 검출하여 UPLC방법으로 측정하여 표 3에 나타내었다.
호노키올 함량
(중량%)		 마그놀올 함량
(중량%)		 모노테르페닐 마그놀올 함량(중량%)
후박 연조엑스 15.50 29.10 3.51
실시예 3: 모노테르페닐 마그놀올 제조
실시예 2에서 제조된 후박 연조엑스 0.6kg에 규산칼슘(Calcium silicate NF, Tomita Pharmaceutical Co., Ltd) 0.2kg을 혼합한 후, 이를 65~75℃에서 건조 및 정립하여 후박 건조엑스(dried extract) 0.8kg을 제조하였다.
후박 건조엑스 60g을 70% 메탄올 750mL로 실온에서 추출 및 여과하여 추출물을 제조하고, 동량의 노르말 헥산(n-Hexane)을 사용하여 3회 분획하였고 헥산에 용출되어 녹은 층만 분취하여 여과 및 회전 감압농축한 후 헥산 분획물을 제조하였다. 제조된 헥산 분획물 2.91g을 대상으로 헥산 및 에틸아세테이트 혼합용매의 농도 구배를 10:1(v/v)로 한 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 9개의 소분획물을 얻었다. 9개의 소분획 중 2번과 3번을 합쳐 (296mg) 아세톤, 메탄올 및 물을 이용한 ODS 컬럼크로마토그래피를 수행한 결과, 다시 5개의 소분획물을 얻을 수 있었다. 이 중 3번 소분획 (19mg)에 대하여 HPLC및 박층 크로마토그래피(TLC)를 실시한 결과, 순수하다고 판단하였다. 실시예를 통해 분리된 화합물은 무색의 무정형 오일상 화합물로서, 다음과 같은 분광학적인 데이터를 통해 구조동정을 실시하였다.
네가티브(Negative) ESI MS: 401.28 [M-H]-
1H-NMR (400 MHz, Chloroform-d): δ 0.88, 0.92 (각 3H, d, J=7Hz, H3-9'', 10''), 1.40~1.70(4H, m, H4'', H-8'', H2-5''), 1.77(3H, brs, H3-7''), 2.11(2H, m, H2-6''),3.39(4H, d, J=6Hz, H2-7, H2-7'),3.60(1H, d, J=9Hz, H-3''), 5.09(4H, m, H2-9, H2-9'), 5.48(1H, brs, H-2''), 6.0(2H, m, H-8, H-8'), 6.9~.1(5H, m, H-2, H-2', H-5', H-6, H-6')
13C-NMR(100 MHz, Chloroform-d): δ 132.0 (C-1), 129.0 (C-2), 125.0 (C-3), 148.9 (C-4), 132.0 (C-5), 129.0 (C-6), 39.3 (C-7), 137.3 (C-8), 115.3 (C-9), 132.4 (C-1'), 131.1 (C-2'), 125.0 (C-3'), 150.8 (C-4'), 116.4 (C-5'), 129.8 (C-6'), 39.3 (C-7'), 137.3 (C-8'), 115.3 (C-9'), 136.8 (C-1''), 124.3 (C-2''), 44.8 (C-3''), 41.0 (C-4''), 21.6 (C-5''), 30.1 (C-6''), 23.5 (C-7''), 27.0 (C-8'')
상기 MS 및 NMR 데이터를 토대로 문헌과 비교해본 결과 최종 구조를 모노테르페닐 마그놀올(Monoterpenyl magnolol)로 동정하였다(Journal of Natural Pro du t s Vol. 54(3), pp. 816-822, 1991).
비교예 1: 후박 추출물의 물 분획물의 제조
실시예 2 에서 후박 연조엑스(soft extract)를 제조한 후 남은 수층을 분취하여 여과 및 감압농축한 다음 후박 추출물의 물 분획물 0.1kg을 제조하였다.
이때, 제조된 후박 추출물의 물 분획물의 성분에 해당하는 호노키올, 마그놀올 및 모노테르페닐 마그놀올의 함량을 Halo RP-Amide (2.7 um, 2.1 × 150 mm) Acquity UPLC, Waters, 이동상은 용매 구매법으로 표 1와 같이 유속 0.5 mL/min, UV 216 nm에서 검출하여 UPLC방법으로 측정하여 표 4에 나타내었다.
호노키올 함량
(중량%)		 마그놀올 함량
(중량%)		 모노테르페닐 마그놀올 함량(중량%)
후박 추출물의 물 분획물 0.00 0.00 0.00
비교예 2: 호노키올 준비
TCI(Tokyo Chemical Industry)로부터 구입한 호노키올 표준품을 준비하였다.
비교예 3: 마그놀올 준비
TCI(Tokyo Chemical Industry)로부터 구입한 마그놀올 표준품을 준비하였다.
[ 실험예 ]
중성지방 축적 억제 효능 측정
실시예 1에서 제조된 후박 추출물, 실시예 2에서 제조된 후박 연조엑스, 실시예 3에서 제조된 모노테르페닐 마그놀올, 비교예 1에서 제조된 후박 추출물의 물 분획물, 비교예 2에서 준비된 호노키올 및 비교예 3에서 준비된 마그놀올을 표 5의 농도로 준비한 후, 각각 배양액에 1:100, 1:200, 1:400으로 희석하여 시험물질을 준비하였다.
총 농도 호노키올 농도 마그놀올 농도 모노테르페닐 마그놀올 농도
(㎎/㎖) (㎎/㎖) (㎎/㎖) (㎎/㎖)
실시예 1 6.46 0.93 1.77 0.22
실시예 2 6.46 1.00 1.88 0.23
실시예 3 8.04 - - 8.04
비교예 1 6.46 - - -
비교예 2 5.33 5.33 - -
비교예 3 5.33 - 5.33 -
중성지방 축적 억제 효능을 측정하기 위하여 간세포(HepG2 cell)을 48 well plate에 2X105/well만큼 분주한 후, 10% fetal bovine serum (FBS), 1% penicillinstreptomycin을 포함한 DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium) 배양액에서 24시간 배양하였다. 지방산 (1mM sodium palmitate와 1mM sodium oleate=1:2, v/v)을 포함한 배양액으로 교환하고, 시험물질을 처리하였다. 지방산과 시험물질을 처리하고 37℃, 5% CO2에서 18시간동안 배양하였다. 배양상등액를 제거하고 인산완충용액(PBS)을 이용하여 세포를 세척한 후, Nile red (10μg/ml)가 포함된 PBS를 각 well에 200μl씩 처리하여 37℃에서 1시간동안 세포내 중성지방을 염색하였다. 세포내에 축적된 중성지방량은 PBS 세척 후, 10% DMSO 1M NaOH를 well당 100μl씩 넣고 60℃에서 1시간동안 방치하고, microplate reader(excitation 535nm, emission 580nm)를 이용하여 측정하였다. 중성지방 축적 억제효능은 지방산을 처리하지 않은 대조구의 형광세기를 100%로 하여 지방산 및 시험물질을 처리한 시험구의 형광세기를 상대적으로 평가하였다.
도 2는 실시예 1~3 및 비교예 1~3의 간세포 내 중성지방 축적 억제 효능을 비교한 그래프이다.
도 2에 나타난 바와 같이, 실시예 1 및 2의 경우, 1:100 희석액(모노테르페 닐마그놀올 농도=2.2㎍/㎖, 2.3㎍/㎖)에서 중성지방 축적 억제 효능을 나타내었고, 실시예 3의 경우, 1:100~1:400 희석액(모노테르페닐마그놀올 농도=20.1㎍/㎖~80.4㎍/㎖)에서 모두 중성지방 축적 억제 효능을 나타내었으나, 모노테르페닐마그놀올을 포함하지 않는 비교예 1의 경우, 1:100~1:400 희석액에서 모두 중성지방 축적 억제 효능을 나타내지 못함을 확인할 수 있었다.
또한, 호노키올 함량이 100%인 비교예 2 및 마그놀올 함량이 100%인 비교예 3에 비해, 모노테르페닐마그놀올 함량이 100%인 실시예 3의 경우, 1:200~1:400 희석액에서 중성지방 축적 억제 효능이 월등함을 확인할 수 있었다.
HMG CoA (3- hydroxy -3- methylglutaryl -coenzyme A) reductase 억제 효능 측정
실시예 1에서 제조된 후박 추출물 (15, 30, 50, 100 μg/mL), 실시예 3에서 제조된 모노테르페닐 마그놀올, 비교예 2에서 준비된 호노키올 및 비교예 3에서 준비된 마그놀올 (10, 20, 50, 100 μg/mL)을 농도별로 희석하여 준비하였다. HMG-CoA 환원효소 억제효능은 HMG CoA reductase에 의한 NADPH의 소비량을 OD=340nm에서 시간에 따라 측정하여 억제효능을 하기 수학식 1에 따라 계산하였다.
[수학식 1]
Figure pat00008
대조물질로서는 HMG CoA reductase 억제효능이 우수한 것으로 잘 알려진 atrovastatin을 사용하였다.
도 3은 실시예 1, 3 및 비교예 2~3의 HMG CoA reductase 억제 효능을 비교한 그래프이다.
도 3에 나타난 바와 같이, 실시예 3의 모노테르페닐 마그놀올은 농도 의존적으로 HMG CoA reductase 억제효능을 나타내었으며, 비교예 2, 3의 호노키올 및 마그놀올도 농도 의존적 HMG CoA reductase 억제 효능을 나타내었다. 또한, 호노키올, 마그놀올 및 모노테르페닐 마그놀올을 모두 포함한 실시예 1에서도 농도 의존적으로 HMG CoA reductase 억제 효능을 나타냄을 확인할 수 있었다.
즉, 본 발명의 모노테르페닐 마그놀올은 콜레스테롤 합성에 관여하는 HMG CoA reductase를 억제함으로써 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 조성물로서 적용될 수 있다.
Adipogenesis 억제 효능 측정
실시예 1에서 제조된 후박 추출물, 실시예 2에서 제조된 후박 연조엑스, 실시예 3에서 제조된 모노테르페닐 마그놀올, 비교예 1에서 제조된 후박 추출물의 물 분획물, 비교예 2에서 준비된 호노키올 및 비교예 3에서 준비된 마그놀올을 100 에서 10ug/ml의 농도로 준비한 후, 분화를 유도한 3T3-L1 cell에 동시에 처리하여 분화 억제를 측정하였다.
3T3-L1 cell을 MDI 배지를 처리하여 분화를 유도하고 동시에 희석된 천연물 추출물을 처리하여 37, 5% CO2에서 총 10일간 배양하고, 매 2일마다 천연물 추출물을 포함하는 배지를 갈아주었다. 10일째 10% formalin으로 고정시킨 후 0.3% ORO staining solution으로 축적된 지방을 염색하고 DW로 충분히 washing해준 후 하루 동안 말려주었다. ORO stain을 isopropanol로 추출하여 500nm에서 흡광도를 측정하여 활성 정도를 평가하였다.
도 4는 실시예 2, 3 및 비교예 1~3의 지방세포형성(Adipogenesis) 억제 효능을 비교한 그래프이다.
도 4에 나타난 바와 같이, 실시예 3의 모노테르페닐 마그놀올의 경우, 대조구에 비해, 지방세포형성 억제 효능이 월등함을 확인할 수 있었고, 비교예 3의 마그놀올과 비교하였을 때에도, 지방세포형성 억제 효능이 월등함을 확인할 수 있었다. 즉, 본 발명의 모노테르페닐 마그놀올은 지방세포형성을 억제함으로써 지방간, 고지혈증 또는 비만 예방 또는 치료용 조성물로서 적용될 수 있다.
하기에 본 발명의 추출물을 함유하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1: 산제의 제조
모노테르페닐 마그놀올 20 ㎎
유당수화물 100 ㎎
탈크 10 ㎎
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
제제예 2: 정제의 제조
모노테르페닐 마그놀올 10 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유당수화물 100 ㎎
스테아르산마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
제제예 3: 캅셀제의 제조
모노테르페닐 마그놀올 10 ㎎
미결정셀룰로오스 3 ㎎
유당수화물 14.8 ㎎
스테아르산마그네슘 0.2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캅셀제의 제조방법에 다라서 젤라틴캡슐에 충전하여 캅셀제를 제조하였다.
제제예 4: 주사제의 제조
모노테르페닐 마그놀올 10 ㎎
만니톨 180 ㎎
주사용 멸균 증류수 2974 ㎎
인산일수소나트퓸 26 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 주사제의 제조방법에 따라 1앰플당(2mL) 상기의 성분 함량으로 제조하였다.
제제예 5: 액제의 제조
모노테르페닐 마그놀올 10 ㎎
이성화당 10 ㎎
만니톨 5 ㎎
정제수 적량
레몬향 적량
상기의 성분을 통상의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 정제수를 가하여 전체 100mL로 조절한 후 멸균시켜 갈색병에 충진하여 액제를 제조한다.
제제예 6: 건강기능식품의 제조
모노테르페닐 마그놀올 10 ㎎
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이드 70 ㎍
비타민 E 1.0 ㎎
비타민 B1 0.13 ㎎
비타민 B2 0.15 ㎎
비타민 B6 0.5 ㎎
비타민 B12 0.2 ㎍
비타민 C 10 ㎎
비오틴 10 ㎍
니코틴산아미드 1.7 ㎎
엽산 50 ㎍
판토텐산 칼슘 0.5 ㎎
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75 ㎎
산화아연 0.82 ㎎
탄산마그네슘 25.3 ㎎
제1인산칼륨 15 ㎎
제2인산칼슘 55 ㎎
구연산칼륨 30 ㎎
탄산칼슘 100 ㎎
염화마그네슘 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
제제예 7: 건강음료의 제조
모노테르페닐 마그놀올 10 mg
비타민 C 15 g
비타민 E(분말) 100 g
젖산철 19.75 g
산화아연 3.5 g
니코틴산아미드 3.5 g
비타민 A 0.2 g
비타민 B1 0.25 g
비타민 B2 0.3 g
정제수 정량
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1 시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.

Claims (13)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 모노테르페닐 마그놀올(monoterpenyl magnolol)을 유효성분으로 함유하는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물:
    [화학식 1]
    Figure pat00009
    .
  2. 제1항에 있어서,
    상기 모노테르페닐 마그놀올은 후박(Magnolia cortex)으로부터 유래한 것인
    지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 모노테르페닐 마그놀올은 후박 추출물, 후박 연조엑스, 또는 후박 건조엑스 추출물의 헥산 분획물에 포함된 것인
    지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  4. 제3항에 있어서,
    상기 후박 연조엑스는 후박을 물, C1 내지 C4 저급알코올 또는 이들의 혼합물로 추출한 후, 에틸아세테이트로 정제한 아틸아세테이트 분획물인
    지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  5. 제3항에 있어서,
    상기 모노테르페닐 마그놀올은 후박 건조엑스 추출물의 헥산 분획물에, 헥 및 에틸아세테이트의 혼합용매의 농도구배를 100:1(v/v) ~ 1:1(v/v)로 하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 추가적으로 수행하여 얻어진 헥산 활성 분획물에 포함된 것인
    지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 모노테르페닐 마그놀올의 용량은 0.1㎍/㎖ 내지 100㎍/㎖인
    지방간, 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  7. 하기 화학식 1로 표시되는 모노테르페닐 마그놀올(monoterpenyl magnolol)을 유효성분으로 함유하는 지방간, 고지혈증 또는 비만의 개선용 건강기능식품:
    [화학식 1]
    Figure pat00010
    .
  8. 제7항에 있어서,
    상기 모노테르페닐 마그놀올은 후박(Magnolia cortex)으로부터 유래한 것인
    지방간, 고지혈증 또는 비만의 개선용 건강기능식품.
  9. a) 후박 건조엑스를 물, C1 내지 C4 저급알코올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 추출물을 제조하는 단계; 및
    b) 상기 a) 단계에서 제조된 추출물을 헥산으로 정제한 후, 감압농축하여 헥산 분획물을 제조하는 단계를 포함하고,
    상기 b) 단계에서 제조된 헥산 분획물은 하기 화학식 1로 표시되는 모노테르페닐 마그놀올(monoterpenyl magnolol)을 포함하는
    후박 분획물의 제조방법:
    [화학식 1]
    Figure pat00011
    .
  10. 제9항에 있어서,
    상기 a) 단계 전, 후박 연조엑스에 흡착물질을 혼합 및 건조하여 후박 건조엑스를 제조하는 단계를 추가로 포함하는
    후박 분획물의 제조방법.
  11. 제10항에 있어서,
    상기 후박 연조엑스는 후박을 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 추출한 후, 에틸아세테이트로 정제된 에틸아세테이트 분획물인
    후박 분획물의 제조방법.
  12. 제10항에 있어서,
    상기 흡착물질은 규산칼슘, 이산화규소, 카올린, 산화알루미늄, 수산화알루미늄, 인산알루미늄, 애타풀자이트, 벤토나이트, 규산알루미늄, 마그네슘 및 사포나이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인
    후박 분획물의 제조방법.
  13. 제9항에 있어서,
    c) 상기 b) 단계에서 제조된 헥산 분획물에 헥산 및 에틸아세테이트의 혼합용매의 농도 구배를 100:1(v/v) ~ 1:1(v/v)로 하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 헥산 활성 분획물을 제조하는 단계를 추가로 포함하는
    후박 분획물의 제조방법.

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20210079828A (ko) * 2019-12-20 2021-06-30 주식회사 지앤피바이오사이언스 개똥쑥 추출물, 후박 추출물 또는 이들의 혼합 추출물을 포함하는 항염증, 비만 및 비알콜성 지방간 질환의 개선, 예방 또는 치료용 조성물

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KR20210079828A (ko) * 2019-12-20 2021-06-30 주식회사 지앤피바이오사이언스 개똥쑥 추출물, 후박 추출물 또는 이들의 혼합 추출물을 포함하는 항염증, 비만 및 비알콜성 지방간 질환의 개선, 예방 또는 치료용 조성물

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