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KR20160068738A - 운시알라마이신의 유도체, 합성 방법 및 항종양 제제로서 이들의 용도 - Google Patents

운시알라마이신의 유도체, 합성 방법 및 항종양 제제로서 이들의 용도 Download PDF

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KR20160068738A
KR20160068738A KR1020167006599A KR20167006599A KR20160068738A KR 20160068738 A KR20160068738 A KR 20160068738A KR 1020167006599 A KR1020167006599 A KR 1020167006599A KR 20167006599 A KR20167006599 A KR 20167006599A KR 20160068738 A KR20160068738 A KR 20160068738A
Authority
KR
South Korea
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substituted
alkyl
acyl
hydrogen
protecting group
Prior art date
Application number
KR1020167006599A
Other languages
English (en)
Inventor
키리아코스 씨. 니콜라우
민 루
데바시스 만달
산지브 강과르
나이두 에스. 차우다리
얌 비. 포델
Original Assignee
윌리엄 마쉬 라이스 유니버시티
브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니
더 스크립스 리서치 인스티튜트
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 윌리엄 마쉬 라이스 유니버시티, 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니, 더 스크립스 리서치 인스티튜트 filed Critical 윌리엄 마쉬 라이스 유니버시티
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Abstract

일 측면에서, 본 발명은 운시알라마이신 (uncialamycin)의 신규한 유사체를 제공한다. 본 발명은 또한 운시알라마이신 및 이의 유사체를 수득하기 위한 신규한 합성 경로를 제공한다. 부가적으로, 본 발명은 또한 운시알라마이신 및 이의 유사체의 사용 방법을 기술한다. 다른 측면에서, 본 발명은 암 또는 기타 질환 또는 장애를 치료하기 위해 사용될 수 있는 항체-약물 접합체를 제공한다.

Description

운시알라마이신의 유도체, 합성 방법 및 항종양 제제로서 이들의 용도{DERIVATIVES OF UNCIALAMYCIN, METHODS OF SYNTHESIS AND THEIR USE AS ANTITUMOR AGENTS}
본 출원은, 각각의 전체가 참고로서 본원에 포함되는, 2013년 8월 14일자로 출원된 미국 가특허출원 제61/865,896호, 2013년 8월 22일자로 출원된 미국 가특허출원 제61/868,783호, 및 2014년 2월 7일자로 출원된 미국 가특허출원 제61/937,003호의 이익을 주장한다.
본 발명은 의약, 약학 및 종양학 분야에 관한 것이다. 구체적으로, 운시알라마이신 (uncialamycin) 및 이의 유사체와 관련된 화합물, 약물 접합체, 치료 방법 및 합성 방법이 기술된다.
운시알라마이신은 잠재적인 항암제로서 대단한 장래성을 나타내고 있는 항생제이다. 항암제로서 운시알라마이신의 사용은 문헌 [Nicolaou, et al., 2007 및 Nicolaou, et al., 2008]에 기술되어 있고, 이 둘 모두는 참조로서 본원에 포함된다. 본 화합물은 피코몰 수준의 IC50을 갖는 강력한 항종양 암 제제인 것으로 나타났다. 나아가, 본 화합물은 잠재적인 항체 페이로드 (payload)로서 고려되고 있다. 불행히도, 현행 합성 방법은 다양한 유사체를 생산하고 목적하는 화합물의 충분한 양을 생성하기에는 유연성이 부족하다. 암의 광범위하고 전 세계적인 영향을 고려하면, 신규한 치료제는 상업적으로 중요하다.
이에, 본 발명에 따라서, 하기 화학식의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 제공된다:
Figure pct00001
(I) 또는
Figure pct00002
(II)
상기 식에서: Y1는 -O(CH2)mY', -NH(CH2)mY', -S(CH2)mY', 또는 -(CH2)mNR1R2이거나, 하기에 정의된 바와 같은 Z1과 함께 취해지고; 여기서: Y'은 히드록시, 할로, 머캅토, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C≤12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 또는 치환된 알킬아미노(C1-12)이고; m은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고; R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12); 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-A1, -C(O)O(CH2)nS(O)-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1로부터 독립적으로 선택되고, 여기서: A1은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
Figure pct00003
이고, 여기서: A2는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고; 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고; n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이거나; 또는 R1 및 R2는 함께 취해져 2가 아민 보호기, 알칸디일(C1-12), 알킬아미노디일(C1-8); 알콕시디일(C1-8); 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이거나; 또는 Y1은 Z1과 취해져 알킬아미노디일(C1-8) 치환된 알킬아미노디일(C1-8); -알칸디일(C1-6)-NZ2-알칸디일(C1-6), 또는 -치환된 알칸디일(C1-6)-NZ2-치환된 알칸디일(C1-6)이고, 여기서: Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C6-12), 치환된 아실(C6-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고, 여기서: A3은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
Figure pct00004
이고, 여기서: A4는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A4는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고; Z1은 부재하거나 수소이거나 상기에 정의된 Y1과 함께 취해지고; R3 및 Z2는 각각 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전로부터 독립적으로 선택되고; o는 1, 2, 또는 3이고; R4는 수소, 알킬(C1-12), 1가 아민 보호기, 또는 치환된 알킬(C1-12)이고; R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는 알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; 여기서: X1은 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 티올 보호기이고; R8는 히드록시, 아미노, 또는 머캅토; 또는 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; R9, R10, R11, 및 R12는 각각 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R13으로부터 독립적으로 선택되고; 여기서: X1은 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 티올 보호기이고; Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고; R13은 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; p 및 q는 각각 독립적으로 1 또는 2이고; Z3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; 단 Y1은 -NHMe 또는 -NHCH2CH2NH2이 아니다.
일부 실시양태에서, 본 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00005
(III) 또는
Figure pct00006
(IV)
상기 식에서: Y1은 -O(CH2)mY', -NH(CH2)mY', -S(CH2)mY' 또는 -CH2NR1R2이고, 여기서: Y'은 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C≤12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 또는 치환된 알킬아미노(C1-12)이고; m은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고; R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아르알킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로시클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전로부터 독립적으로 선택되고; R1 및 R2는 함께 취해져 2가 보호기, 알칸디일(1-12), 알콕시디일(C1-8); 또는 이들 기의 어느 하나의 치환된 버전; 또는 -C(O)O(CH2)nS-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1이고, 여기서: A1은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
Figure pct00007
이고, 여기서: A2는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고; 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고; n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이고; R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; R4는 수소, 알킬(C1-12), 1가 아민 보호기, 또는 치환된 알킬(C1-12)이고; R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는 알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; 여기서: X1은 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 티올 보호기이고; R8는 히드록시, 아미노, 또는 머캅토; 또는 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; R9, R10, 및 R11은 각각 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R12로부터 독립적으로 선택되고; 여기서: X1은 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 티올 보호기이고; Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이거나; 또는 R12는 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이거나; 또는 단 Y1은 -NHMe, -NHC(O)C6H4NH2, -NHC(O)CH2NH2, -NHC(O)CH(CH2OH)NH2, -NHC(O)CH(NH2)CH2CH2CH2CH2NH2, 또는 -NHCH2CH2NH2이 아니다.
일부 실시양태에서, 본 화학식 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00008
(V)
상기 식에서: Y1은 -O(CH2)mY', -NH(CH2)mY', -S(CH2)mY', 또는 -(CH2)mNR1R2이거나, 하기에 기술된 바와 같은 Z1과 함께 취해지고; 여기서: Y'은 히드록시, 할로, 머캅토, 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C≤12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 또는 치환된 알킬아미노(C1-12)이고; m은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고; R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12); 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-A1, -C(O)O(CH2)nS(O)-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1로부터 독립적으로 선택되고, 여기서: A1은 아릴(C6-12) 또는 치환된 아릴(C6-12)이고; n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이고; R1 및 R2는 함께 취해져 2가 보호기, 알칸디일(C≤12), 알킬아미노디일(C≤8); 알콕시디일(C≤8); 또는 이들 기의 어느 하나의 치환된 버전이거나; 또는 Y1은 Z1과 취해져 알킬아미노디일(C1-8) 치환된 알킬아미노디일(C1-8); 또는 알칸디일(C1-6)NZ2알칸디일(C1-6)이고, 여기서: Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C6-12), 치환된 아실(C6-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고, 여기서: A3은 아릴(C6-12) 또는 치환된 아릴(C6-12)이고; Z1은 부재하거나 수소이거나 상기에 정의된 바와 같은 Y1과 함께 취해지고; R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; o는 1, 2, 또는 3이고; R4는 수소, 알킬(C1-12), 1가 아민 보호기, 또는 치환된 알킬(C1-12)이고; R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는 알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; 여기서: X1은 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 티올 보호기이고; R8은 히드록시, 아미노, 또는 머캅토; 또는 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이다.
일부 실시양태에서, 본 화학식 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00009
(VI)
상기 식에서: R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12); 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-A1, -C(O)O(CH2)nS(O)-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1로부터 독립적으로 선택되고, 여기서: A1은 아릴(C6-12) 또는 치환된 아릴(C6-12)이고; n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이고; R3은 수소, 히드록시, 할로, 또는 알콕시(C1-12) 또는 치환된 알콕시(C1-12)이고; o는 1, 2, 또는 3이고; R4는 수소, 1가 아민 보호기, 알킬(C1-12), 또는 치환된 알킬(C1-12)이고; R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는 알킬(C1-12) 또는 치환된 알킬(C1-12)이고; 여기서: X1은 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 티올 보호기이고; R8은 히드록시, 아미노, 또는 머캅토이다.
일부 실시양태에서, 본 화학식 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00010
(VII)
상기 식에서: R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 아릴(6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-C6H5, -C(O)O(CH2)nS(O)-C6H5, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2C6H5, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 R1 및 R2가 함께 취해져 2가 아민 보호기, 또는 알킬(C1-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 아실(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; R3은 수소, 히드록시, 할로, 또는 알콕시(C1-12) 또는 치환된 알콕시(C1-12)이고; o는 1, 2, 또는 3이다.
일부 실시양태에서, 본 화학식 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00011
(VIII)
상기 식에서: R4는 수소, 알킬(C1-12), 1가 아민 보호기, 또는 치환된 알킬(C1-12)이고; R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, OX1, NX2X3, 또는 SX4; 또는 알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; 여기서: X1은 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 티올 보호기이고; R8는 히드록시, 아미노, 또는 머캅토; 또는 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; R9, R10, R11, 및 R12는 각각 수소, 히드록시, 아미노, -NX2X3, 또는 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C2-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R13으로부터 독립적으로 선택되고; 여기서: X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이거나; 또는 R13은 히드록시, 아미노, 또는 NX2X3, 또는 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이거나; 또는 p 및 q는 각각 독립적으로 1 또는 2이다.
일부 실시양태에서, 본 화학식 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00012
(IX)
상기 식에서: R9, R10, R11, 및 R12는 각각 수소, 히드록시, 아미노, -NX2X3, 또는 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R13으로부터 독립적으로 선택되고; 여기서: X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이거나; 또는 R13은 히드록시, 아미노, 또는 NX2X3, 또는 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; p 및 q는 각각 독립적으로 1 또는 2이다.
일부 실시양태에서, 본 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00013
(X)
상기 식에서: Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, -C(O)O(CH2)nS(O)-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고, 여기서: A3은 아릴(C6-12) 또는 치환된 아릴(C6-12)이고; R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; o는 1 또는 2이고; R4는 수소, 1가 아민 보호기, 알킬(C1-12), 또는 치환된 알킬(C1-12)이고; R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는 알킬(C1-12) 또는 치환된 알킬(C1-12)이고; 여기서: X1은 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 티올 보호기이고; R8는 히드록시, 아미노, 또는 머캅토이다.
일부 실시양태에서, 본 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00014
(XI)
상기 식에서: Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C6-12), 치환된 아실(C6-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, -C(O)O(CH2)nS(O)-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고, 여기서: A3은 아릴(C6-12) 또는 치환된 아릴(C6-12); R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; o는 1 또는 2이다.
일부 실시양태에서, 본 화학식 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00015
(VII)
상기 식에서: X1은 히드록시 보호기이고; R1 및 R2는 각각 수소, 알킬(C1-12), 또는 치환된 알킬(C1-12)로부터 독립적으로 선택되고; R3은 수소, 알콕시(C1-12), 또는 치환된 알콕시(C1-12)이고; o는 2이다.
일부 실시양태에서, 본 화학식은 화학식 I이다. 일부 실시양태에서, 본 화학식은 화학식 II이다. 일부 실시양태에서, Y1은 Z1과 함께 취해져 -알칸디일(C≤6)-NZ2-알칸디일(C≤6)이다. 일부 실시양태에서, Y1은 Z1과 함께 취해져 -CH2CH2-NZ2-CH2CH2이다. 일부 실시양태에서, Z2는 수소이다. 다른 실시양태에서, Z2는 아민 보호기이다. 일부 실시양태에서, 아민 보호기는 2-(트리메틸실릴)에톡시카르보닐 또는 t-부톡시카르보닐이다. 일부 실시양태에서, Z2는 -C(O)O(CH2)nS-C6H5이다. 일부 실시양태에서, Z2는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-C6H5이다. 일부 실시양태에서, Z1은 수소이다. 일부 실시양태에서, Y1은 -O(CH2)mY', -S(CH2)mY', 또는 -(CH2)mNR1R2이다. 일부 실시양태에서, Y1은 -(CH2)mNR1R2이다. 일부 실시양태에서, m은 1, 2, 또는 3이다. 일부 실시양태에서, m은 1 또는 2이다. 일부 실시양태에서, R1은 -C(O)O(CH2)nS-A1 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1이고, 여기서: A1은 아릴(C≤12), 치환된 아릴(C≤12), 또는
Figure pct00016
이고, 여기서: A2는 아실옥시(C≤12), 치환된 아실옥시(C≤12), 알콕시(C≤12), 치환된 알콕시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 치환된 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 또는 치환된 디알킬아미노(C≤12)이고, 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고; n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 일부 실시양태에서, R1은 수소이다. 다른 실시양태에서, R1은 알킬(C≤12) 또는 치환된 알킬(C≤12)이다. 일부 실시양태에서, R1은 알킬(C≤12)이다. 일부 실시양태에서, R1은 메틸이다. 다른 실시양태에서, R1은 1가 아민 보호기이다. 일부 실시양태에서, R1은 2-(트리메틸실릴)에톡시카르보닐 또는 t-부톡시카르보닐이다. 다른 실시양태에서, R1은 -C(O)O(CH2)2SC6H5이다. 다른 실시양태에서, R1은 -C(O)O(CH2)2S(O)2C6H5이다. 다른 실시양태에서, R1은 R2와 함께 취해져 2가 보호기이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 프탈리미드 또는 치환된 프탈리미드이다. 일부 실시양태에서, R2는 수소이다. 다른 실시양태에서, R2는 알킬(C≤12) 또는 치환된 알킬(C≤12)이다. 다른 실시양태에서, R2는 알킬(C≤12)이다. 일부 실시양태에서, R2는 메틸이다. 다른 실시양태에서, R2는 1가 아민 보호기이다. 일부 실시양태에서, R2는 2-(트리메틸실릴)에톡시카르보닐 또는 t-부톡시카르보닐이다. 다른 실시양태에서, R2는 -C(O)O(CH2)nS-A1 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1이고, 여기서: A1은 아릴(C≤12), 치환된 아릴(C≤12), 또는
Figure pct00017
이고, 여기서: A2는 아실옥시(C≤12), 치환된 아실옥시(C≤12), 알콕시(C≤12), 치환된 알콕시(C≤12), 알킬아미노(C≤12), 치환된 알킬아미노(C≤12), 디알킬아미노(C≤12), 또는 치환된 디알킬아미노(C≤12)이고, A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이고; n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이다. 다른 실시양태에서, R2는 -C(O)O(CH2)2SC6H5이다. 다른 실시양태에서, R2는 -C(O)O(CH2)2S(O)2C6H5이다. 다른 실시양태에서, R2는 R1과 함께 취해져 2가 보호기이다. 일부 실시양태에서, R1 및 R2는 프탈리미드 또는 치환된 프탈리미드이다. 일부 실시양태에서, R3은 수소이다. 다른 실시양태에서, R3은 알콕시(C≤12)이다. 일부 실시양태에서, R3은 메톡시이다. 일부 실시양태에서, R4는 수소이다. 다른 실시양태에서, R4는 1가 아민 보호기이다. 일부 실시양태에서, R4는 -C(O)CH2CH=CH2이다. 일부 실시양태에서, R5는 알킬(C≤12)이다. 일부 실시양태에서, R5는 메틸이다. 일부 실시양태에서, R6은 히드록시이다. 일부 실시양태에서, R7은 히드록시이다. 일부 실시양태에서, R8은 히드록시이다. 일부 실시양태에서, R9는 아미노이다. 다른 실시양태에서, R9는 알킬(C≤12)이다. 일부 실시양태에서, R9는 메틸이다. 다른 실시양태에서, R9는 Y2-R12이다. 일부 실시양태에서, Y2는 알칸디일(C≤12)이다. 일부 실시양태에서, Y2는 -CH2-이다. 일부 실시양태에서, R12는 아미노이다. 다른 실시양태에서, R12는 -NX2X3이다. 일부 실시양태에서, X2 및 X3은 함께 취해져 프탈리미드를 형성한다. 다른 실시양태에서, X2 및 X3은 함께 취해져 치환된 프탈리미드를 형성한다. 다른 실시양태에서, X2는 수소이다. 일부 실시양태에서, X3은 t-부톡시카르보닐이다. 일부 실시양태에서, R10은 아미노이다. 다른 실시양태에서, R10은 알킬(C≤12)이다. 일부 실시양태에서, R10은 메틸이다. 다른 실시양태에서, R10은 Y2-R12이다. 일부 실시양태에서, Y2는 알칸디일(C≤12)이다. 일부 실시양태에서, Y2는 -CH2-이다. 일부 실시양태에서, R12는 아미노이다. 다른 실시양태에서, R12는 -NX2X3이다. 일부 실시양태에서, X2 및 X3은 함께 취해져 프탈리미드를 형성한다. 다른 실시양태에서, X2 및 X3은 함께 취해져 치환된 프탈리미드를 형성한다. 다른 실시양태에서, X2는 수소이다. 다른 실시양태에서, X3은 t-부톡시카르보닐이다. 일부 실시양태에서, R11은 수소이다. 일부 실시양태에서, 탄소 원자 17은 R 배열 내에 있다. 일부 실시양태에서, 탄소 원자 17은 S 배열 내에 있다.
일부 실시양태에서, 본 화합물은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00018
또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
일부 실시양태에서, 본 화합물은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00019
,
Figure pct00020
,
Figure pct00021
,
Figure pct00022
,
Figure pct00023
,
Figure pct00024
,
Figure pct00025
,
Figure pct00026
,
Figure pct00027
,
Figure pct00028
,
Figure pct00029
,
Figure pct00030
,
Figure pct00031
,
Figure pct00032
,
Figure pct00033
,
Figure pct00034
,
Figure pct00035
,
Figure pct00036
,
Figure pct00037
, 또는
Figure pct00038
,
또는 이의 약학적으로 하용가능한 염.
일부 실시양태에서, 본 화합물은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00039
,
Figure pct00040
,
Figure pct00041
,
Figure pct00042
,
Figure pct00043
,
Figure pct00044
,
Figure pct00045
,
Figure pct00046
,
Figure pct00047
,
Figure pct00048
,
Figure pct00049
,
Figure pct00050
,
Figure pct00051
,
Figure pct00052
,
Figure pct00053
,
Figure pct00054
,
Figure pct00055
,
Figure pct00056
,
Figure pct00057
,
Figure pct00058
,
Figure pct00059
,
Figure pct00060
,
Figure pct00061
,
Figure pct00062
,
Figure pct00063
,
Figure pct00064
,
Figure pct00065
,
Figure pct00066
,
Figure pct00067
,
Figure pct00068
,
Figure pct00069
,
Figure pct00070
,
Figure pct00071
, 또는
Figure pct00072
,
또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
다른 측면에서, 본 발명은 화합물 및 부형제를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 일부 실시양태에서, 본 조성물은 경구, 지방내, 동맥내, 관절내, 두개내, 진피내, 병변내, 근육내, 비내, 안구내, 심막내, 복강내, 흉강내, 전립샘내, 직장내, 경막내, 기관내, 종양내, 제대내, 질내, 정맥내, 소포내, 유리체내, 리포좀, 국소(local), 점막, 비경구, 직장, 결막하, 피하, 설하, 국부 (topical), 협측(transbuccal), 경피, 질, 카테터에 의한, 세척에 의한, 연속 주입에 의한, 주입에 의한, 흡입에 의한, 주사에 의한, 국소 전달에 의한, 또는 국소화 관류에 의한 투여를 위해 제형화된다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 하기 화학식의 화합물을 제조하는 방법을 제공하는데:
Figure pct00073
(V) 또는
Figure pct00074
(VIII)
(상기 식에서: Y1은 -O(CH2)mY', -NH(CH2)mY', -S(CH2)mY', 또는 -(CH2)mNR1R2이거나, 또는 하기에 기술된 바와 같은 Z1과 함께 취해지고; 여기서: Y'은 히드록시, 할로, 머캅토, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 또는 치환된 알킬아미노(C1-12)이고; m은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고; R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12); 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-A1, -C(O)O(CH2)nS(O)-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1,로부터 독립적으로 선택되고, 여기서: A1은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
Figure pct00075
이고, 여기서: A2는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고; n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이거나; 또는 R1 및 R2는 함께 취해져 2가 아민 보호기, 알칸디일(C1-12), 알킬아미노디일(C1-8); 알콕시디일(C1-8); 또는 이들 기의 어느 하나의 치환된 버전이거나; 또는 Y1은 Z1과 취해져 알킬아미노디일(C1-8) 치환된 알킬아미노디일(C1-8); -알칸디일(C1-6)-NZ2-알칸디일(C1-6), 또는 -치환된 알칸디일(C1-6)-NZ2-치환된 알칸디일(C1-6)이고, 여기서: Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C6-12), 치환된 아실(C6-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고, 여기서: A3은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
Figure pct00076
이고, 여기서: A4는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A4는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고; Z1은 부재하거나 수소이거나 상기에 정의된 바와 같은 Y1과 취해지고; R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; o는 1, 2, 또는 3이고; R4는 수소, 알킬(C1-12), 1가 아민 보호기, 또는 치환된 알킬(C1-12)이고; R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는 알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; 여기서: X1은 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 티올 보호기이고; R8는 히드록시, 아미노, 또는 머캅토; 또는 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; R9, R10, 및 R11은 각각 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R13으로부터 독립적으로 선택되고; 여기서: X1은 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 티올 보호기이고; Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고; R13은 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; p 및 q는 각각 독립적으로 1 또는 2임);
상기 방법은 반응을 야기하기에 충분한 조건으로 용매 중의 비-친핵성 강염기의 존재하에서 하기 화학식의 화합물과:
Figure pct00077
(XII)
(상기 식에서: R4는 수소, 알킬(C1-12), 1가 아민 보호기, 또는 치환된 알킬(C1-12)이고; R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는 알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; 여기서: X1은 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 티올 보호기이고; R14는 -O-, -S-, 또는 -NR15-이고; 여기서: R15는 수소, 알킬(C1-6), 또는 치환된 알킬(C1-6)이고; R15는 시아노, 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬티오(C1-12), 치환된 알킬티오(C1-12), 알킬설포닐(C1-12), 치환된 알킬설포닐(C1-12), 아릴설포닐(C1-12), 치환된 아릴설포닐(C1-12) 알킬설포닐옥시(C1-12), 치환된 알킬설포닐옥시(C1-12), 아릴설포닐옥시(C1-12), 또는 치환된 아릴설포닐옥시(C1-12)임);
하기 화학식의 화합물을 혼합하는 것을 포함하는 반응을 수행하는 것에 의한다:
Figure pct00078
(XIII) 또는
Figure pct00079
(XIV)
(상기 식에서: Y1은 -O(CH2)mY', -NH(CH2)mY', -S(CH2)mY', 또는 -(CH2)mNR1R2이거나, 또는 하기에 기술된 바와 같은 Z1과 취해지고; 여기서: Y'은 히드록시, 할로, 머캅토, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 또는 치환된 알킬아미노(C1-12)이고; m은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고; R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12); 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-A1, -C(O)O(CH2)nS(O)-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1로부터 독립적으로 선택되고, 여기서: A1은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
Figure pct00080
이고, 여기서: A2는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고; n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이거나; 또는 R1 및 R2는 함께 취해져 2가 아민 보호기, 알칸디일(C1-12), 알킬아미노디일(C1-8); 알콕시디일(C1-8); 또는 이들 기의 어느 하나의 치환된 버전이거나; 또는 Y1은 Z1과 취해져 알킬아미노디일(C1-8) 치환된 알킬아미노디일(C1-8); -알칸디일(C1-6)-NZ2-알칸디일(C1-6), 또는 -치환된 알칸디일(C1-6)-NZ2-치환된 알칸디일(C1-6)이고, 여기서: Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고, 여기서: A3은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
Figure pct00081
이고, 여기서: A4는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A4는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고; Z1은 부재하거나 수소이거나 상기에 정의된 바와 같은 Y1과 함께 취해지고; R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; o는 1 또는 2이거나; 또는 R9, R10, R11, 및 R12는 각각 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R13으로부터 독립적으로 선택되고; 여기서: X1은 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 티올 보호기이고; Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이거나; 또는 R13은 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는 헤테로아릴(C6-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; p 및 q는 각각 독립적으로 1 또는 2임).
일부 실시양태에서, Y1은 -NH2, -NHMe, 또는 -NHCH2CH2NH2이 아니다. 일부 실시양태에서, 염기는 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드, 소듐 비스(트리메틸실릴)아미드, 포타슘 비스(트리메틸실릴)아미드, 리튬 디이소프로필 아미드, 소듐 디이소프로필 아미드, 포타슘 디이소프로필 아미드, 리튬 테트라메틸피페리딘, 리튬 t-부톡사이드, 소듐 t-부톡사이드, 또는 포타슘 t-부톡사이드, 수소화리튬, 수소화나트륨, 또는 수소화칼륨이다. 일부 실시양태에서, 염기는 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드이다. 일부 실시양태에서, 용매는 테트라히드로퓨란이다. 일부 실시양태에서, 본 방법은 화학식 III의 화합물을 화학식 IV 또는 화학식 V의 화합물과 접촉시키기 전에 화학식 IV 또는 화학식 V의 화합물을 염기와 혼합하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 화학식 III의 화합물은 THF에 용해되어 캐뉼라를 통해 첨가된다.
일부 실시양태에서, 본 방법은 화학식 I 또는 화학식 II의 화합물을 유기용매에 용해시키고 하기 화학식의 화합물과:
Figure pct00082
(V) 또는
Figure pct00083
(VIII)
(상기 식에서: Y1은 -O(CH2)mY', -NH(CH2)mY', -S(CH2)mY', 또는 -(CH2)mNR1R2이거나, 또는 하기에 기술된 바와 같은 Z1과 함께 취해지고; 여기서: Y'은 히드록시, 할로, 머캅토, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 또는 치환된 알킬아미노(C1-12)이고; m은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고; R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12); 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-A1, -C(O)O(CH2)nS(O)-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1로부터 독립적으로 선택되고, 여기서: A1은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
Figure pct00084
이고, 여기서: A2는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고; n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이거나; 또는 R1 및 R2는 함께 취해져 2가 아민 보호기, 알칸디일(C1-12), 알킬아미노디일(C1-8); 알콕시디일(C1-8); 또는 이들 기의 어느 하나의 치환된 버전이거나; 또는 Y1은 Z1과 취해져 알킬아미노디일(C1-8) 치환된 알킬아미노디일(C1-8); -알칸디일(C1-6)-NZ2-알칸디일(C1-6), 또는 -치환된 알칸디일(C1-6)-NZ2-치환된 알칸디일(C1-6)이고, 여기서: Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고, 여기서: A3은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
Figure pct00085
이고, 여기서: A4는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고; Z1은 부재하거나 수소이거나 상기에 정의된 바와 같은 Y1과 함께 취해지고; R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; o는 1 또는 2이고; R4는 수소, 알킬(C1-12), 1가 아민 보호기, 또는 치환된 알킬(C1-12)이고; R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는 알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; 여기서: X1은 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 티올 보호기이고; R8는 히드록시, 아미노, 또는 머캅토; 또는 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; R9, R10, R11, 및 R12는 각각 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R13으로부터 독립적으로 선택되고; 여기서: X1은 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 티올 보호기이고; Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고; R13은 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; p 및 q는 각각 독립적으로 1 또는 2임);
하기 화학식의 화합물을 형성하기 위한 반응을 야기하기에 충분한 조건으로 염기의 존재하에서 팔라듐 염과 반응시키는 것을 추가로 포함한다:
Figure pct00086
(XV) 또는
Figure pct00087
(XVI)
(상기 식에서: Y1은 -O(CH2)mY', -NH(CH2)mY', -S(CH2)mY', 또는 -(CH2)mNR1R2이거나, 또는 하기에 기술된 바와 같은 Z1과 함께 취해지고; 여기서: Y'은 히드록시, 할로, 머캅토, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 또는 치환된 알킬아미노(C1-12)이고; m은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고; R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12); 1가 아민 보호기, C(O)O(CH2)nS-A1, C(O)O(CH2)nS(O)-A1, 또는 C(O)O(CH2)nS(O)2A1로부터 독립적으로 선택되고, 여기서: A1은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
Figure pct00088
이고, 여기서: A2는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고; n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이거나; 또는 R1 및 R2는 함께 취해져 2가 아민 보호기, 알칸디일(C1-12), 알킬아미노디일(C1-8); 알콕시디일(C1-8); 또는 이들 기의 어느 하나의 치환된 버전이거나; 또는 Y1은 Z1과 취해져 알킬아미노디일(C1-8) 치환된 알킬아미노디일(C1-8); -알칸디일(C1-6)-NZ2-알칸디일(C1-6), 또는 -치환된 알칸디일(C1-6)-NZ2-치환된 알칸디일(C1-6)이고, 여기서: Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고, 여기서: A3은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
Figure pct00089
이고, 여기서: A4는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고; Z1은 부재하거나 수소이거나 상기에 정의된 바와 같은 Y1과 함께 취해지고; R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; o는 1 또는 2이고; R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는 알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; 여기서: X1은 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 티올 보호기이고; R8는 히드록시, 아미노, 또는 머캅토; 또는 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; R9, R10, R11, 및 R12는 각각 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R13으로부터 독립적으로 선택되고; 여기서: X1은 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 히드록시 보호기이고; X2 및 X3은 수소, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고; X4는 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 티올 보호기이고; Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고; R13은 히드록시, 아미노, 머캅토, OX1, NX2X3, 또는 SX4, 또는 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고; p 및 q는 각각 독립적으로 1 또는 2임).
일부 실시양태에서, 팔라듐 염은 리간드 또는 기타 금속 착체 또는 염의 존재하에서 팔라듐 포스핀 착체 또는 팔라듐 염을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 팔라듐 염은 Pd(PPh3)4이다. 일부 실시양태에서, 염기는 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, 에틸렌디아민, 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데스-7-엔, 또는 모르폴린이다. 일부 실시양태에서, 염기는 모르폴린이다. 일부 실시양태에서, 용매는 테트라히드로퓨란이다. 일부 실시양태에서, 본 방법은 하나 이상의 보호기를 제거하는 단계를 추가로 포함한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 하기 화학식의 접합체를 제공한다:
(A5-L)r-A6 (XVII)
상기 식에서: A5는 제1항의 화합물이고; L은 링커이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12이고; A6은 세포 표적화 모이어티이다. 일부 실시양태에서, L은 세포내 효소에 의해 절단가능한 폴리펩티드를 포함한다. 일부 실시양태에서, 효소는 카텝신 B이다. 일부 실시양태에서, L은 자기-희생기(self-immolating group)를 포함한다. 일부 실시양태에서, L은 하기이다:
Figure pct00090
.
일부 실시양태에서, A6은 종양 관련 항원에 대한 항체이다. 일부 실시양태에서, 항원은 메소텔린, 글리피칸-3, 또는 CD70이다. 일부 실시양태에서, A5는 화학식 (I)에 따른 화합물이다. 일부 실시양태에서, 본 접합체는 하기 화학식의 구조물을 추가로 포함한다:
Figure pct00091
상기 식에서: A6은 항체이고 r은 1, 2, 3, 또는 4이다. 일부 실시양태에서, 항체는 항-메소텔린, 항-글리피칸-3, 또는 항-CD70 항체이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 본 발명의 접합체 및 부형제를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 일부 실시양태에서, 화합물은 경구, 지방내, 동맥내, 관절내, 두개내, 진피내, 병변내, 근육내, 비내, 안구내, 심막내, 복강내, 흉강내, 전립샘내, 직장내, 경막내, 기관내, 종양내, 제대내, 질내, 정맥내, 폐포내, 유리체내, 리포좀, 국소(local), 점막, 비경구, 직장, 결막하, 피하, 설하, 국부 (topical), 협측(transbuccal), 경피, 질, 카테터에 의한, 세척에 의한, 연속 주입에 의한, 주입에 의한, 흡입에 의한, 주사에 의한, 국소 전달에 의한, 또는 국소화 관류에 의한 투여를 위해 제형화된다.
다른 측면에서, 본 발명은 본 발명의 화합물, 접합체, 또는 조성물의 약학적 유효량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 질환 또는 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 장애는 암이다. 일부 실시양태에서, 암은 방광, 혈액, 뼈, 뇌, 유방, 중추신경계, 자궁경부, 결장, 자궁내막, 식도, 담낭, 생식기, 비뇨생식관, 두부, 신장, 후두, 간, 폐, 근육조직, 목, 구강점막 또는 코점막, 난소, 췌장, 전립샘, 피부, 비장, 소장, 대장, 위, 정소, 또는 갑상샘의 암이다. 다른 실시양태에서, 암은 암종, 육종, 백혈병, 흑색종, 중피종, 다발골수종, 또는 고환종이다. 일부 실시양태에서, 암은 폐암, 위암, 난소암, 간암, 신장암, 또는 유방암이다. 일부 실시양태에서, 암은 H226 폐암, N87 위암, OVCAR3 난소암, Hep3B 간암, HepG2 간암, 786-O 신장암, 또는 ADR 다약제 내성 유방암이다. 일부 실시양태에서, 암은 하나 이상의 종양 마커를 나타낸다. 일부 실시양태에서, 종양 마커는 메소텔린, 전립샘 특이적 막 항원, CD19, CD22, CD30, CD70, B7H4, 단백질 티로신 키나제 7, 글리피칸-3, RG1, CTLA4, 또는 CD44이다. 일부 실시양태에서, 종양 마커는 메소텔린, 글리피칸-3, 또는 CD70이다. 일부 실시양태에서, 본 방법은 본 발명의 화합물 또는 화합물의 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 본 방법은 본 발명의 접합체 또는 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 화합물은 항체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 항체는 암세포의 표면상에서 항원에 결합한다. 일부 실시양태에서, 세포 표면상에서 항원에 대한 항체의 결합은 화합물의 내재화(internalization)를 유발한다. 일부 실시양태에서, 화합물의 내재화는 항체로부터 치료 화합물의 절단을 유발한다. 일부 실시양태에서, 본 방법은 제2 치료제를 투여하는 것을 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 제2 치료제는 제2 화학요법제, 수술, 방사선요법, 유전자요법, 또는 면역요법이다. 일부 실시양태에서, 본 방법은 화합물을 1회 투여하는 것을 포함한다. 다른 실시양태에서, 본 방법은 화합물을 2회 이상 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 질환 또는 장애는 세균 감염이다. 일부 실시양태에서, 세균 감염은 스타필로코커스 아우레우스, 대장균, 또는 버크홀데리아 세파시아의 감염이다. 일부 실시양태에서, 세균 감염은 버크홀데리아 세파시아의 감염이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 하기 화학식의 화합물을 제조하는 방법을 제공하는데:
Figure pct00092
(XVIII)
(상기 식에서: X1, X2, X3은 수소 또는 히드록시 보호기이고; X4는 수소 또는 아미노 보호기이고; R1 및 R2는 각각 독립적으로 부재하거나 수소이거나, 또는 R1 및 R2는 함께 취해져 알킬아미노디일(C1-12), 치환된 알킬아미노디일(C1-12); 알켄디일(C2-12), 또는 치환된 알켄디일(C2-12)이고; R3은 수소, 아미노, 카르복시, 시아노, 할로, 히드록시, 또는 알킬(C1-12), 아실(C1-12), 아미도(C1-12), 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 -Y1-A1이고; 여기서: Y1은 알칸디일(C1-8) 또는 치환된 알칸디일(C1-8)이고; A1은 하기 화학식을 갖는 링커이고:
Figure pct00093
상기 식에서: R5는 수소, 알킬(C1-6), 또는 치환된 알킬(C1-6)이고; R6은 -C(O)-Y3-A3이고, 여기서: Y3은 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고; A3은 티올 반응기이고; Y2는 -C(O)-, -C(O)-알칸디일(C1-12); 치환된 -C(O)-알칸디일(C1-12), 또는 자기 희생기이고; A2는 공유 결합, 아미노산 잔기, 또는 폴리펩티드이고; o는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8이고; n은 1, 2, 3, 또는 4이고; R4는 알킬(C1-12) 또는 치환된 알킬(C1-12)임); 상기 방법은 하기 단계를 포함한다:
a) 하기 화학식의 화합물을:
Figure pct00094
(XIX)
(상기 식에서: R1, R2, R3, R4, X1, X2, X3, 및 X4는 상기에 정의된 바와 같고; n은 0, 1, 2, 또는 3이고; R3'은 -Y1-A1이고; 여기서: Y1은 알칸디일(C1-8) 또는 치환된 알칸디일(C1-8)이고; A1은 NPhth임);
하기 화학식의 화합물을 형성하기 위한 반응을 야기하기에 충분한 조건으로 용매 중의 물과 함께 알킬아민(C1-12), 디알킬아민(C1-18), 또는 이들 기의 어느 하나의 치환된 버전과 반응시키는 단계:
Figure pct00095
(XX)
(상기 식에서: R1, R2, R3, R4, n, X1, X2, X3, 및 X4 는 상기에 정의된 바와 같고; R3'은 -Y1-NH2이고; 여기서: Y1은 알칸디일(C1-8) 또는 치환된 알칸디일(C1-8)임);
b) 화학식 XX의 화합물을 하기 화학식의 링커:
Figure pct00096
(XXI)
(상기 식에서: R5 및 R6은 수소, 알킬(C1-6), 치환된 알킬(C1-6), 또는 아민 보호기이고; Y2는 -C(O)OH, HOC(O)-알칸디일(C1-12); 치환된 HOC(O)-알칸디일(C1-12), 자기 희생기, 또는 활성화된 자기 희생기이고; A2는 공유 결합, 아미노산 잔기, 또는 폴리펩티드이고; o는 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8이다.);
및 용매 중의 염기와 하기 화학식의 화합물을 형성하기 위한 반응을 야기하기에 충분한 조건으로 반응시키는 단계:
Figure pct00097
(XXII)
(상기 식에서: R1, R2, R3, R4, X1, X2, X3, X4, n, o, Y1, Y2, A1, A2, 및 R5는 상기에 정의된 바와 같다);
c) 하기 화학식의 화합물을 형성하기 위한 반응을 야기하기에 충분한 조건으로 화학식 XXII의 화합물과 보호기를 제거하는 시약을 반응시키는 것을 포함하는 화학식 XXII의 화합물 상에서 하나 이상의 관능기를 탈보호하는 단계:
Figure pct00098
(XXIII)
(상기 식에서: R1, R2, R3, R4, X1, X2, X3, X4, n, o, Y1, Y2, A1, 및 A2는 상에 정의된 바와 같다);
d) 화학식 XXIII의 화합물을, 화학식 XVIII의 화합물을 형성하기 위한 반응을 야기하기에 충분한 조건으로 용매 중의 염기의 존재하에서 하기 화학식의 화합물과 반응시키는 단계:
Figure pct00099
(XXIV)
(상기 식에서: X5는 수소 또는 활성화제이고; Y3은 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고; A3은 티올 반응기이다).
일부 실시양태에서, 본 화학식의 화합물은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00100
(XXV)
상기 식에서: X2 및 X3은 수소 또는 히드록시 보호기이고; X4는 수소 또는 아미노 보호기이고; R1 및 R2는 각각 독립적으로 부재하거나 수소이거나, 또는 R1 및 R2는 함께 취해져 알킬아미노디일(C1-8); 치환된 알킬아미노디일(C1-8); 알켄디일(C2-8), 또는 치환된 알켄디일(C2-8)이고; R3은 수소, 아미노, 카르복시, 시아노, 할로, 히드록시, 또는 알콕시(C1-12) 또는 치환된 알콕시(C1-12)이거나; 또는 Y2는 -C(O)-, -C(O)-알칸디일(C1-12), 치환된 -C(O)-알칸디일(C≤12), 또는 자기 희생기이고; A2는 공유 결합, 아미노산 잔기, 또는 폴리펩티드이고; o는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8이고; n은 1, 2, 또는 3이고; Y3은 공유 결합, 알칸디일(C1-12), 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이다.
일부 실시양태에서, 화학식 XXV의 화합물은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00101
(XXVI)
상기 식에서: X2 및 X3은 수소 또는 히드록시 보호기이고; X4는 수소 또는 아미노 보호기이고; R1 및 R2는 각각 독립적으로 부재하거나 수소이거나, 또는 R1 및 R2는 함께 취해져 알킬아미노디일(C1-8); 치환된 알킬아미노디일(C1-8); 알켄디일(C2-8), 또는 치환된 알켄디일(C2-8)이고; R3은 수소, 아미노, 카르복시, 시아노, 할로, 히드록시, 또는 알콕시(C1-12) 또는 치환된 알콕시(C1-12)이고; n은 1, 2, 또는 3이다.
일부 실시양태에서, 화학식 XIX의 화합물은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00102
(XXVII)
상기 식에서: R1, R2, R3, n, X2, X3, 및 X4는 상기에 정의된 바와 같다.
일부 실시양태에서, 화학식 XXI의 화합물은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00103
(XXVIII)
상기 식에서: R5는 아민 보호기이고; A2는 공유 결합, 아미노산 잔기, 또는 폴리펩티드이고; o는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8이다.
일부 실시양태에서, 화학식 XXIV의 화합물은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00104
(XXIX)
상기 식에서: X5는 수소 또는 활성화제이고; Y3은 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이다.
일부 실시양태에서, 화학식 XXIV의 화합물은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00105
(XXX)
상기 식에서: Y3은 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이다. 일부 실시양태에서, R1은 수소이다. 다른 실시양태에서, R1은 알콕시(C1-12)이다. 일부 실시양태에서, R1은 메톡시이다. 다른 실시양태에서, R1 및 R2는 함께 취해져 알켄디일(C2-12) 또는 치환된 알켄디일(C2-12)이다.
일부 실시양태에서, 화학식은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00106
(XXXI)
상기 식에서: R3, R4, n, X1, X2, X3, 및 X4 는 상기에 정의된 바와 같다. 다른 실시양태에서, R1 및 R2는 함께 취해져 알킬아미노디일(C1-12) 또는 치환된 알킬아미노디일(C1-12)이다.
일부 실시양태에서, 화학식은 하기와 같이 추가로 정의된다:
Figure pct00107
(XXXII)
상기 식에서: R3, R4, n, X1, X2, X3, 및 X4는 상기에 정의된 바와 같고; R7은 수소 또는 아미노 보호기이다. 일부 실시양태에서, R3은 -Y1-A1이고; 여기서: Y1은 알칸디일(C1-8) 또는 치환된 알칸디일(C1-8)이고; A1 은 하기 화학식을 갖는 링커이다:
Figure pct00108
상기 식에서: R5는 수소, 알킬(C1-6), 또는 치환된 알킬(C1-6)이고; R6은 -C(O)-Y3-A3이고, 여기서: Y3은 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고; A3 은 티올 반응기이고; Y2는 -C(O)-, -C(O)-알칸디일(C1-12), 치환된 -C(O)-알칸디일(C1-12), 또는 자기 희생기이고; A2는 공유 결합, 아미노산 잔기, 또는 폴리펩티드이고; o는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8이다. 일부 실시양태에서, R3은 하기이다:
Figure pct00109
(XXXIII)
상기 식에서 Y2, A2, 및 Y3은 상기에 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서, A2는 -HN-Val-Cit-C(O)O이다. 일부 실시양태에서, Y2는 자기-희생기이다. 일부 실시양태에서, Y2는 하기이다:
Figure pct00110
.
일부 실시양태에서, R4는 메틸이다. 일부 실시양태에서, X1, X2, 또는 X3은 수소이다. 일부 실시양태에서, X3은 히드록시 보호기이다. 일부 실시양태에서, X4는 수소이다. 일부 실시양태에서, X4는 아민 보호기이다. 일부 실시양태에서, 단계 a)의 알킬아민(C1-12) 또는 치환된 알킬아민(C1-12)은 메틸아민이다. 일부 실시양태에서, 단계 b)의 염기는 질소성 염기이고 이 염기는 디이소프로필에틸아민이다. 일부 실시양태에서, 단계 c)의 보호기를 제거하는 시약은 염기이고 이 염기는 피페리딘이다. 일부 실시양태에서, 단계 d)의 염기는 질소성 염기이고 이 염기는 디이소프로필에틸아민이다. 일부 실시양태에서, 본 방법은 하나 이상의 탈보호 단계를 추가로 포함한다. 다른 실시양태에서, 본 발명의 이들 화합물은, 이들 모두가 참고로서 본원에 포함되는, 미국특허 제8,798,431호, 미국특허출원 제2013/0209494호 및 PCT 특허출원 제WO2013/122823호에 기술된 바와 같은 항체 또는 기타 세포 표적화 모이어티에 결합되는 것으로 구상된다.
본 발명의 실시양태에서, 반응이 일어나는 것을 야기하기에 충분한 조건은 이 반응의 효능에 효과적인 다양한 인자를 포함할 수 있는 것으로 고려된다. 이러한 것들의 변형이 본 방법의 임의의 실시양태 내에서 구상된다. 이러한 조건에는 화합물의 다수의 등가물, 용매의 선택, 온도의 선택, 또는 반응 시간이 포함된다. 본 발명의 일부 측면에서, 본 발명의 반응은 임의의 유기용매 중에서 수행될 수 있다. 일부 실시양태에서, 용매는 아미드(C1-12), 에스테르(C1-12), 알코올(C1-12), 아렌(C1-12), 치환된 아렌(C1-12), 알칸(C1-12), 치환된 알칸(C1-12), 헤테로시클로알칸(C1-12), 또는 에테르(C1-12)이다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 용매는 is 디에틸 에테르, 아세토니트릴, 디메틸포름아미드, 테트라히드로퓨란, 디메틸설폭사이드, 클로로포름, 디클로로메탄, 헥산, 메탄올, 에탄올, 펜탄, 벤젠, 톨루엔, 에틸 아세테이트, 또는 N-메틸-2-피롤리돈이다. 나아가, 이 조건은 반응 온도에 영향을 미칠 수 있다. 일부 실시양태에서, 온도는 실온이다. 일부 실시양태에서, 실온 또는 25℃가 또한 약 10℃ 내지 약 40℃ 또는 더욱 바람직하게는 약 20℃ 내지 약 30℃의 온도에서 수행될 수 있다. 일부 실시양태에서, 온도는 반응의 효율을 향상시키기 위하여 감소될 수 있다. 일부 실시양태에서, 감소된 온도는 실온 미만의 온도이다. 일부 실시양태에서, 온도는 0℃ 또는 -78℃의 어느 하나이다. 일부 실시양태에서, 온도는 지시된 온도의 20℃ 이내 및 더욱 바람직하게는 지시된 온도의 10℃ 이내이다. 일부 실시양태에서, 온도는 반응 속도를 증가시키기 위해 상승될 수 있다. 일부 실시양태에서, 반응 온도는 약 50℃ 내지 약 100℃의 온도이다. 일부 실시양태에서, 온도는 지시된 온도의 20℃ 이내 및 더욱 바람직하게는 지시된 온도의 10℃ 이내이다. 부가적으로, 반응 시간은 반응의 효율을 증가시키기 위해 달라질 수 있다. 일부 실시양태에서, 반응은 예시된 시간의 약 절반 내지 예시된 시간의 약 2배이다. 비-제한적인 예시로서, 1시간 동안 반응하는 것으로 예시되었던 반응은, 반응 시간이 약 30분 내지 2시간이다. 마지막으로, 첨가된 등가물의 양이 또한 반응의 효율을 변경할 수 있다. 일부 실시양태에서, 시약의 첨가는 예시된 양의 약 절반 내지 예시된 양의 약 3배인 것으로 구상된다. 비-제한적인 예시로서, 시약의 첨가는 최종 산물에서 나타나는 탄소 원자를 함유하는 출발 물질의 하나를 기준으로 측정된다. 부가적으로, 소모되는 (즉, 촉매가 아닌) 시약의 당량은 1 당량 미만인 것으로 구상된다.
본원에 기술된 임의의 방법 또는 조성물이 본원에 기술된 임의의 다른 방법 또는 조성물과 관련하여 시행될 수 있는 것으로 고려된다.
청구범위 및/또는 명세서 내에서 용어 "포함하는"과 함께 사용될 때 단어 "a" 또는 "an"의 사용은 "하나"를 의미할 수 있지만, 이는 또한 "하나 이상", "적어도 하나" 및 "하나 또는 하나 초과"의 의미와 일치한다. 단어 "약"은 지시된 수의 더하기 또는 빼기 5%를 의미한다.
본 발명의 다른 목적, 특징 및 이점이 하기 상세한 설명으로부터 자명할 것이다. 그러나 본 발명의 요지 및 범주 내에서 다양한 변화 및 변형이 이 상세한 설명으로부터 통상의 기술자에게 자명할 것이기 때문에, 본 발명의 특정 실시양태를 지시하더라도, 상세한 설명 및 구체적인 실시예는 단지 예시의 수단으로 제공되는 것으로 이해되어야 한다.
본 발명은 운시알라마이신의 신규한 유사체를 제공하고 운시알라마이신 및 유사체를 합성하는 개선된 방법을 제공한다. 이들 화합물은 암세포에서 피코몰의 IC50을 갖는 것으로 나타났다. 나아가, 이들 유사체는, 이로 제한되는 것은 아니지만, 항체-약물 접합체와 같은 신규한 치료제를 생성하기 위해 세포 표적화 모이어티를 변형하는데 사용될 수 있는 아민기로 관능화된다.
I. 운시알라마이신 및 이의 제형
본 발명에 의해 제공된 화합물은, 예를 들어 상기 요약 항목 및 하기 청구범위에 나타나 있다. 이들은 실시예 항목에서 개요된 방법을 이용하여 제조될 수 있다. 운시알라마이신 및 이의 유사체는, 예를 들어 하기 실시예 항목에 기술된 방법에 따라 합성될 수 있다. 이들 방법은 통상의 기술자에 의해 적용되는 바와 같은 유기화학의 원리 및 기술을 이용하여 추가로 변형되고 최적화될 수 있다. 이러한 원리 및 기술은, 예를 들어 본원에 참고로서 포함되는, 문헌 [March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure (2007)]에 교시되어 있다.
본 발명의 운시알라마이신 및 이의 유사체는 하나 이상의 비대칭으로-치환된 탄소 또는 질소 원자를 함유할 수 있고, 광학적으로 활성 또는 라세미체 형태로 분리될 수 있다. 따라서, 특정 입체화학 또는 이성체 형태가 특별하게 지시되지 않는 한, 화학식의 모든 키랄, 이성체, 라세미체 형태, 에피머체 형태, 및 모든 기하이성체 형태가 의도된다. 화합물은 라세미체 및 라세미체 혼합물, 단일 에난티오머, 부분입체이성체 혼합물 및 개별적 부분입체이성체로서 발생할 수 있다. 일부 실시양태에서, 단일 부분입체이성체가 수득된다. 운시알라마이신 및 이의 유사체의 키랄 중심은 S 또는 R 배열을 가질 수 있다.
본 발명의 화합물을 나타내기 위해 사용된 화학식은 가능한 여러 상이한 호변이성체들 중 단지 하나만을 전형적으로 나타낼 것이다. 예를 들어, 다수 유형의 케톤 기가 상응하는 에놀 기와 평형 상태로 존재하는 것으로 알려져 있다. 유사하게, 다수 유형의 이민 기는 엔아민 기와 평형 상태로 존재한다. 어느 호변이성체가 주어진 화합물에 대해 묘사되는지, 그리고 어느 하나가 가장 우세한 것인지에 무관하게, 주어진 화학식의 모든 호변이성체가 의도된다.
본 발명의 화합물은, 본원에 지시된 적응증에 또는 다른 어떤 것에 사용하기 위한 것이든지 간에, 당해 분야에 공지된 화합물에 비해 더 효과적이고, 덜 독성을 가지며, 더 길게 작용하고, 더 강력하고, 더 적은 부작용을 야기하며, 더 쉽게 흡수되고/되거나, 더 우수한 약동학적 프로파일 (예컨대, 더 높은 경구 생체이용률 및/또는 더 낮은 소거율)을 가지고/가지거나, 기타 유용한 약리학적, 물리학적 또는 화학적 특성을 가질 수 있다는 이점을 또한 가질 수 있다
또한, 운시알라마이신 및 이의 유사체를 구성하는 원자는 이러한 원자의 모든 동위원소 형태를 포함하는 것으로 의도된다. 본원에 사용된 바와 같이, 동위원소는 동일한 원자 개수를 갖지만 상이한 질량수를 갖는 그러한 원자를 포함한다. 제한 없는 일반적인 예시로서, 수소의 동위원소에는 삼중수소 및 중수소가 포함되고, 탄소의 동위원소에는 13C 및 14C가 포함된다.
본 발명의 화합물은 또한 전구약물 형태로 존재할 수 있다. 전구약물은 약제의 다양한 바람직한 특성 (예컨대, 용해도, 생체이용률, 제조 등)을 증강시키는 것으로 알려져 있기 때문에, 본 발명의 일부 방법에 이용된 화합물은, 바람직하다면, 전구약물 형태로 전달될 수 있다. 따라서, 본 발명은 본 발명의 화합물의 전구약물뿐만 아니라 전구약물을 전달하는 방법을 고려한다. 본 발명에 사용된 화합물의 전구약물은, 그 변형이 통상적인 조작으로 또는 생체 내에서, 모체 화합물에 대해 절단되는 방식으로 화합물에 존재하는 관능기를 변형함으로써 제조될 수 있다. 따라서, 전구약물에는, 예를 들어, 전구약물이 개체에 투여될 때, 히드록시 기, 아미노 기, 또는 카르복시 기가 각각 히드록시산, 아미노산, 또는 카르복실산을 형성하도록 절단되는 임의의 기에 결합된, 본원에 기술된 화합물이 포함된다.
본 발명의 임의의 염의 일부를 형성하는 특정 음이온 또는 양이온은, 이 염이, 전반적으로, 약학적으로 허용가능한 한, 결정적이지 않은 것으로 인식되어야 한다. 약학적으로 허용가능한 염 및 이들의 제조 및 사용 방법에 대한 부가적인 예시는, 참고로서 본원에 포함되는, 문헌 [Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, and Use (2002)]에 제시되어 있다.
II. 세포 표적화 모이어티
일부 측면에서, 본 발명은 세포 표적화 모이어티에 직접적으로 또는 링커를 통해 접합된 화합물을 제공한다. 일부 실시양태에서, 세포 표적화 모이어티에 대한 화합물의 접합은 질환 또는 장애를 치료하는데 있어 화합물의 효능을 증가시킨다. 본 실시양태에 따른 세포 표적화 모이어티는, 예를 들어, 항체, 성장인자, 호르몬, 펩티드, 앱타머, 호르몬, 영상화제, 또는 보조인자와 같은 소분자, 또는 사이토카인일 수 있다. 예를 들어, 본 실시양태에 따른 세포 표적화 모이어티는 Hep3B 세포와 같은 간암 세포에 결합할 수 있다. gp240 항원은 정상 조직이 아닌 다양한 흑색종에서 발현되는 것으로 입증되었다. 따라서, 일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 정상 조직이 아닌 암세포에 의해 발현되는 특정 항원에 대한 항체와의 접합체로서 사용될 수 있다.
특정 부가적인 실시양태에서, 암세포 표적화 모이어티는 다양한 유형의 암세포에 결합하는 것으로 구상된다. 예를 들어, 8H9 단일클론 항체 및 이로부터 유래된 단쇄 항체는 유방암, 육종 및 신경모세포종에서 발현되는 당단백질에 결합한다 (Onda et al., 2004). 다른 예시는 미국특허 공개 제2004/005647호 및 문헌 [Winthrop et al., 2003]에 기술된, 다양한 유형의 암에서 발현되는 항원인, MUC-1에 결합하는 세포 표적화 제제이다. 따라서, 특정 실시양태에서, 본 실시양태에 따른 세포 표적화 작제물은 복수의 암 또는 종양 유형에 대해 표적될 수 있는 것으로 이해될 것이다.
부가적으로, 인간 만성 고나도트로핀 수용체 및 고나도트로핀 분비 호르몬 수용체와 같은 호르몬 수용체를 비롯해 특정 세포 표면 분자가 종양 세포에서 고도로 발현된다 (Nechushtan et al., 1997). 따라서, 상응하는 호르몬이 암 요법에서 세포-특이적 표적화 모이어티로서 사용될 수 있다. 부가적으로, 사용될 수 있는 세포 표적화 모이어티에는 보조인자, 당, 약물 분자, 영상화제, 또는 형광 염료가 포함된다. 다수의 암성 세포가 엽산 수용체를 과발현하는 것으로 알려져 있고, 따라서 엽산 또는 기타 엽산 유도체는 본 발명의 접합체와 세포 사이에서 세포-특이적 상호작용을 유발하기 위한 접합체로서 사용될 수 있다 (Campbell, et al., 1991; Weitman, et al., 1992).
대다수의 세포 표면 수용체가 다양한 계통의 조혈세포에서 확인되었기 때문에, 이들 수용체에 특이적인 리간드 또는 항체는 세포-특이적 표적화 모이어티로서 사용될 수 있다. IL2는 또한 IL2R+ 세포를 표적하기 위해 키메라 단백질에서 세포-특이적 표적화 모이어티로서 사용될 수 있다. 대안적으로, B7-1, B7-2 및 CD40과 같은 기타 분자가 활성화된 T 세포를 특이적으로 표적하기 위해 사용될 수 있다 (The Leucocyte Antigen Facts Book, 1993, Barclay et al. (eds.), Academic Press). 나아가, B 세포는 CD19, CD40 및 IL4 수용체를 발현하고 CD40 리간드, IL4, IL5, IL6 및 CD28과 같은, 이들 수용체에 결합하는 모이어티에 의해 표적될 수 있다. T 세포 및 B 세포와 같은 면역세포의 제거는 림프구 종양의 치료에 특히 유용하다.
특정 세포 아집단을 표적하기 위해 사용될 수 있는 기타 사이토카인에는 인터류킨 (IL1 내지 IL15), 과립구-콜로니 자극인자, 대식구-콜로니 자극인자, 과립구-대식구-콜로니 자극인자, 백혈병 억제인자, 종양 괴사인자, 형질전환 성장인자, 표피 성장인자, 인슐린-유사 성장인자, 및/또는 섬유모세포 성장인자가 포함된다 (Thompson (ed.), 1994, The Cytokine Handbook, Academic Press, San Diego). 일부 측면에서, 표적화 폴리펩티드는 TWEAK와 같은 Fn14 수용체에 결합하는 사이토카인이다 (예컨대, 본원에 참고로서 포함되는, 문헌[Winkles, 2008; Zhou et al., 2011 및 Burkly et al., 2007] 참조).
헤마토포이에틴 (4-나선 다발)(예컨대, EPO (에리쓰로포이에틴), IL-2 (T-세포 성장인자), IL-3 (다중콜로니 CSF), IL-4 (BCGF-1, BSF-1), IL-5 (BCGF-2), IL-6 IL-4 (IFN-β2, BSF-2, BCDF), IL-7, IL-8, IL-9, IL-11, IL-13 (P600), G-CSF, IL-15 (T-세포 성장인자), GM-CSF (과립구 대식구-콜로니 자극인자), OSM (OM, 온코스타틴 M), 및 LIF (백혈병 억제인자)); 인터페론 (예컨대, IFN-γ, IFN-α, 및 IFN-β); 면역글로불린 슈퍼패밀리 [예컨대, B7.1(CD80), 및 B7.2(B70, CD86)]; TNF 패밀리 [예컨대, TNF-α(악액질), TNF-β(림프독소, LT, LT-α), LT-β, CD40 리간드 (CD40L), Fas 리간드 (FasL), CD27 리간드 (CD27L), CD30 리간드 (CD30L), 및 4-1BBL)]; 및 특정 패밀리로 지정되지 않은 것들 (예컨대, TGF-β, IL-1α, IL-1β, IL-1 RA, IL-10 (사이토카인 합성 억제제 F), IL-12 (NK 세포 자극인자), MIF, IL-16, IL-17 (mCTLA-8), 및/또는 IL-18 (IGIF, 인터페론-γ 유발인자))를 포함하는 다양한 공지의 사이토카인이 존재함을 통상의 기술자는 인식한다. 또한, 항체 중쇄의 Fc 부위가 비만세포 및 호염기구를 표적하기 위한 IgE 항체의 사용과 같이 Fc 수용체-발현 세포를 표적하기 위해 사용될 수 있다
나아가, 일부 측면에서, 세포-표적화 모이어티는 펩티드 서열 또는 시클릭 펩티드일 수 있다. 본 실시양태에 따라 사용될 수 있는 예시적인, 세포- 및 조직-표적화 펩티드가, 예를 들어, 각각이 참조로서 본원에 포함되는, 미국특허 제6,232,287호; 제6,528,481호; 제7,452,964호; 제7,671,010호; 제7,781,565호; 제8,507,445호; 및 제8,450,278호에 제공된다.
따라서, 일부 실시양태에서, 세포 표적화 모이어티는 항체 또는 아비머(avimers)이다. 항체 및 아비머는 실질적으로 임의의 세포 표면 마커에 대해 생성될 수 있고, 따라서 실질적으로 임의의 관심 세포 집단에 GrB의 전달을 표적화하는 방법을 제공한다. 세포 표적화 모이어티로 사용될 수 있는 항체를 생성하는 방법은 하기에 상세히 기술된다. 주어진 세포 표면 마커에 결합하는 아비머를 생성하는 방법은, 각각이 참조로서 본원에 포함되는, 미국특허 공개 제2006/0234299호 및 제2006/0223114호에 기술된다.
A. 항체 및 항체-유사 표적화 모이어티
상기에 지시된 바와 같이, 일부 측면에서 세포-표적화 모이어티는 항체이다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "항체"는 지정된 단백질 또는 펩티드, 또는 이의 단편에 대해 특이적으로 반응성인 면역글로불린 및 이의 단편을 포함하는 것으로 의도된다. 적합한 항체에는, 이로 제한되는 것은 아니지만, 인간 항체, 영장류화된 (primatized) 항체, 탈-면역화된 항체, 키메라 항체, 이중-특이적 항체, 인간화된 항체, 접합된 항체 (즉, 다른 단백질, 방사선표지, 세포독소에 접합되거나 융합된 항체), 소 분자 면역약제 (Small Modular ImmunoPharmaceuticals, "SMIPsTM "), 단쇄 항체, 타원형 (cameloid) 항체, 항체-유사 분자 (예컨대, 안티칼린), 및 항체 단편이 포함된다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "항체"에는 또한 also includes 무손상 (intact) 단일클론 항체, 다중클론 항체, 단일 도메인 항체[예컨대, 상어 (shark) 단일 도메인 항체 (예컨대, IgNAR 또는 이의 단편)], 적어도 2개의 무손상 항체로부터 형성된 다중특이적 항체 (예컨대, 이중-특이적 항체), 및 이들이 목적하는 생물학적 활성을 나타내는 한 항체 단편이 포함된다. 일부 측면에서, 항체는 중쇄만을 포함하는 VHH (즉, 항원-특이적 VHH) 항체일 수 있다. 예를 들어, 이러한 항체 분자는 라마 (llama) 또는 기타 낙타 (camelid) 항체 (예컨대, 낙타 IgG2 또는 IgG3, 또는 이러한 낙타 Ig로부터의 CDR-디스플레이 프레임) 또는 상어 항체로부터 유래될 수 있다. 본원에 사용하기 위한 항체 폴리펩티드는 임의의 유형 (예컨대, IgG, IgM, IgA, IgD 및 IgE)일 수 있다. 일반적으로, IgG 및/또는 IgM이 생리적 상태에서 가장 흔한 항체이고 실험실 환경에서 가장 용이하게 제조될 수 있기 때문에 이들이 선호된다.
본원에 사용된 바와 같이, "항체 단편"은, 예를 들어, 항체의 항원-결합 또는 가변 영역과 같은 무손상 항체의 일부를 포함한다. 항체 단편의 예시에는 Fab, Fab', F(ab')2, Fc 및 Fv 단편; 트리아바디 (triabodies); 테트라바디 (tetrabodies); 선형 항체; 단쇄 항체 분자; 및 항체 단편으로부터 형성된 다중 특이적 항체가 포함된다. 용어 "항체 단편"은 또한 복합체를 형성하기 위해 특정 항원에 결합함으로써 항체와 같이 작용하는 임의의 합성 또는 유전적으로 조작된 단백질을 포함한다. 예를 들어, 항체 단편에는 단리된 단편, 중쇄 및 경쇄의 가변 영역으로 이루어진 "Fv" 단편, 경쇄 및 중쇄 가변 영역이 펩티드 링커에 의해 연결된 재조합 단쇄 폴리펩티드 분자 ("ScFv 단백질"), 및 초가변 영역을 모방하는 아미노산 잔기로 이루어진 최소 인식 단위가 포함된다.
"미니-항체" 또는 "미니바디 (minibodies)"가 또한 본 실시양태에 사용하기 위해 고려된다. 미니바디는 힌지 영역에 의해 sFv로부터 분리된, 이들의 C-말단에 올리고머화 도메인을 포함하는 sFv 폴리펩티드 쇄이다 (Pack et al., 1992). 올리고머화 도메인은 부가적인 이황화 결합에 의해 추가적으로 안정화될 수 있는 자기-연합 나선 (self-associating-helices), 예컨대, 류신 지퍼를 포함한다. 올리고머화 도메인은 폴리펩티드의 기능적 결합 단백질로의 생체 내 중첩을 촉진하는 것으로 추정되는 과정인, 막을 가로지르는 지향적 (vectorial) 중첩과 호환 가능하도록 고안된다. 일반적으로, 미니바디는 당해 분야에 잘 알려진 재조합 방법을 이용하여 생산된다. 예컨대, 문헌 [Pack et al. (1992); Cumber et al. (1992)]을 참고하라.
일부 사례에서 항체-유사 분자는 항체 CDR 도메인을 표시하기 위해 사용될 수 있는 단백질 스캐폴드 (scaffolds)이다. 이러한 단백질 스캐폴드의 기원은, 이로 제한되는 것은 아니지만: 피브로넥틴 타입 III 도메인 10을 포함하는 피브로넥틴 (예컨대, 참조로서 본원에 포함되는, 미국특허 공개 제2009/0253899호 참고), 스타필로코커스 아우레우스의 단백질 A의 도메인 B로부터 발생하는 단백질 Z, 티오레독신 (thioredoxin) A 또는 "안키린(ankyrin) 반복" (Kohl et al., 2003), "아르마딜로 (armadillo) 반복", "류신-풍부 반복" 및 "테트라트리코펩티드 (tetratricopeptide) 반복"과 같은 반복 모티프를 갖는 단백질로부터 선택된 구조일 수 있다. 항체-기반 작제물 및 단편을 제조하고 사용하는 기술은 당해 분야에 잘 알려져 있다. 항-칼린 (anti-calins)과 같은 부가적인 항체-유사 분자가, 본원에 참조로서 포함되는, 미국 특허공개 제2010/0285564호, 제2006/0058510호, 제2006/0088908호, 제2005/0106660호, PCT 공개 제WO 2006/056464호 및 문헌 [Skerra, 2001]에 상세히 기술되어 있다.
항체-유사 결합 펩티도미메틱 (peptidomimetics)이 또한 본 실시양태에 고려된다. 문헌 [Liu et al. (2003)]은 "항체 유사 결합 펩티도미메틱" (ABiPs)을 기술하고 있는데, 이는 페어드-다운 (pared-down) 항체로 작용하고 덜 복잡한 합성 방법뿐만 아니라 더 긴 혈청 반감기의 특정 이점을 갖는 펩티드이다. 유사하게, 일부 측면에서, 항체-유사 분자는 시클릭 또는 바이시클릭 펩티드이다. 예를 들어, 항원-결합 바이시클릭 펩티드를 (예컨대, 파아지 디스플레이에 의해) 분리하고 이러한 펩티드를 사용하는 방법이, 본원에 참조로서 포함되는, 미국특허 공개 제2010/0317547호에 제공된다.
단일클론 항체 (MAbs)는, 예컨대, 재현성 및 대규모 생산과 같은 특정 이점을 갖는 것으로 인식된다. 본 발명의 실시양태는 인간, 쥐, 원숭이, 래트, 햄스터, 토끼 및 닭 기원의 단일클론 항체를 제공한다. 일부 실시양태에서, 인간 단일클론 항체 또는 이의 단편이 사용된다.
인간 불변 및/또는 가변영역 도메인을 포함하는, 마우스, 래트, 또는 기타 종으로부터의 키메릭 항체, 이중특이적 항체, 재조합 및 조작된 항체 및 이의 단편과 같이, "인간화된" 항체가 또한 고려된다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "인간화된" 면역글로불린은 인간 프레임워크 영역 및 비-인간 (보통 마우스 또는 래트) 면역글로불린으로부터의 하나 이상의 CDR's를 포함하는 면역글로불린을 지칭한다. CDR's를 제공하는 비-인간 면역글로불린은 "공여자"로 불리고 프레임워크를 제공하는 인간 면역글로불린은 "수용자"로 불린다. "인간화된 항체"는 인간화된 경쇄 및 인간화된 중쇄 면역글로불린을 포함하는 항체이다. 항체를 인간화하는 방법은 당해 분야에, 예컨대, 본원에 참조로서 포함되는, 문헌 [Harvey et al., 2004]에 잘 알려져 있다.
B. 제형
마이크로스피어 및/또는 마이크로캡슐의 제조에 사용하기 위한 재료는 폴리갈락틴, 폴리-(이소부틸 시아노아크릴레이트), 폴리(2-히드록시에틸-L-글루타민) 및, 폴리(락트산)과 같은, 예컨대 생분해성/생침식성 (bioerodible) 고분자이다. 제어 방출 비경구 제형을 조제하는데 사용될 수 있는 생체적합성 담체는 탄수화물 (예컨대, 덱스트란), 단백질 (예컨대, 알부민), 지질단백, 또는 항체이다. 임플란트에 사용하기 위한 재료는 비-생분해성 (예컨대, 폴리디메틸 실록산) 또는 생분해성 (예컨대, 폴리(카프로락톤), 폴리(락트산), 폴리(글리콜산) 또는 폴리(오르쏘 에스테르) 또는 이의 조합)일 수 있다.
경구 사용을 위한 제형에는 비-독성 약학적으로 허용가능한 부형제와의 혼합물로서 활성 성분(들) (예컨대, 운시알라마이신 및 이의 유사체)을 포함하는 정제가 포함된다. 이러한 제형은 통상의 기술자에게 공지되어 있다. 부형제는, 예를 들어, 불활성 희석제 또는 충전제 (예컨대, 수크로스, 소르비톨, 당, 만니톨, 미결정질 셀룰로스, 감자 전분을 포함하는 전분, 탄산칼슘, 염화나트륨, 락토스, 칼슘 포스페이트, 칼슘 설페이트, 또는 소듐 포스페이트); 과립화제 및 붕해제 (예컨대, 미결정질 셀룰로스를 포함하는 셀룰로스 유도체, 감자 전분을 포함하는 전분, 크로스카멜로스 나트륨, 알지네이트, 또는 알긴산); 결합제 (예컨대, 수크로스, 글루코스, 소르비톨, 아카시아, 알긴산, 알긴산나트륨, 젤라틴, 전분, 전호화 전분, 미결정질 셀룰로스, 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 카복시메틸셀룰로스 나트륨, 메틸셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 에틸셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 또는 폴리에틸렌 글리콜); 및 윤활제, 활택제, 및 항접착제 (예컨대, 마그네슘 스테아레이트, 징크 스테아레이트, 스테아르산, 실리카, 수소화 식물성 오일, 또는 탈크)일 수 있다. 기타 약학적으로 허용가능한 부형제는 착색제, 향미제, 가소제, 습윤제, 완충화제 등일 수 있다.
정제는 비코팅되거나, 선택적으로 위장관에서의 붕괴 및 흡수를 지연시키고 그로써 더 긴 기간 동안에 걸쳐서 지속된 작용을 제공하도록, 공지된 기술에 의해 코팅될 수 있다. 코팅은 미리 지정된 방식으로 활성 약물을 방출하도록 (예컨대, 제어 방출 제형을 달성하도록) 개조될 수 있거나, 이는 위를 통과할 때까지 활성 약물이 방출되지 않도록 (장용 코팅) 개조될 수 있다. 코팅은 당 코팅, 필름 코팅 (예컨대, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 메틸셀룰로스, 메틸 히드록시에틸셀룰로스, 히드록시프로필셀룰로스, 카르복시메틸셀룰로스, 아크릴레이트 공중합체, 폴리에틸렌 글리콜 및/또는 폴리비닐피롤리돈 기반), 또는 장용 코팅 (예컨대, 메타크릴산 공중합체, 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트, 히드록시프로필 메틸셀룰로스 프탈레이트, 히드록시프로필 메틸셀룰로스 아세테이트 석시네이트, 폴리비닐 아세테이트 프탈레이트, 쉘락, 및/또는 에틸셀룰로스 기반)일 수 있다. 나아가, 예컨대, 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트와 같은 시간 지연 재료가 사용될 수 있다.
III. 요법
A. 적응증
i. 암 및 기타 과증식성 질환
과증식성 질환은 세포가 통제 불가능한 재생을 개시하도록 야기하는 임의의 질환과 연관될 수 있지만, 모범적 예시는 암이다. 암의 중요 요소 중 하나는 세포의 정상적인 세포자멸 주기가 차단된다는 것이고, 따라서 세포의 성장을 차단하는 제제가 이들 질환을 치료하기 위한 치료제로서 중요하다. 본 발명에서, 운시알라마이신 유사체는 감소된 세포 수를 초래하기 위해 사용될 수 있고 그로서 다양한 유형의 암 계통을 치료하기 위해 잠재적으로 사용될 수 있다. 다양한 측면에서, 본 발명의 운시알라마이신 유사체는 임의의 악성종양을 실질적으로 치료하기 위해 사용될 수 있는 것으로 전망된다.
본 발명의 화합물로 치료될 수 있는 암세포에는, 이로 제한되는 것은 아니지만, 방광, 혈액, 뼈, 골수, 뇌, 유방, 결장, 식도, 위장, 잇몸, 두부, 신장, 간, 폐, 코인두, 목, 난소, 전립샘, 피부, 위, 췌장, 정소, 혀, 자궁경부, 또는 자궁으로부터의 세포가 포함된다. 또한, 암은 특이적으로, 이들로 제한되는 것은 아니지만, 다음의 조직학적 유형일 수 있다: 신생물, 악성; 암종; 암종, 미분화; 거대세포 및 방추세포 암종; 소세포 암종; 유두 암종; 편평세포 암종; 림프상피성 암종; 기저세포 암종; 모기질 암종; 이행세포 암종; 유두 이행세포 암종; 샘암종; 가스트린종, 악성; 담관암종; 간세포 암종; 복합 간세포 암종 및 담관암종; 소주상 샘암종; 샘낭암종; 샘종폴립 내 샘암종; 샘암종, 가족성 대장폴립증; 고형 암종; 카시노이드 종양, 악성; 인두-폐포 샘암종; 유두 샘암종; 혐색소성 (chromophobe) 암종; 호산성 암종; 호산세포 샘암종; 호염성 암종; 투명세포 샘암종; 과립세포 암종; 소포 샘암종; 유두 및 소포 샘암종; 비캡슐화 (nonencapsulating) 경화 암종; 부신피질 암종; 자궁내막모양 암종; 피부 부속기관 암종; 아포크린 샘암종; 피지선 샘암종; 귀지샘 샘암종; 점막표피모양 암종; 낭샘암종; 유두 낭샘암종; 유두 장액 낭샘암종; 점액 낭샘암종; 점액 샘암종; 반지세포 암종; 침윤성 관상 암종; 속질 암종; 소엽성 암종; 염증성 암종; 파제트병, 유방; 세엽세포 암종; 편평상피 암종; 샘암종 w/편평상피 화생; 가슴샘종, 악성; 난소 간질종양, 악성; 난포막종, 악성; 과립막세포 종양, 악성; 남성모세포종, 악성; 세르톨리세포 암종; 레이디히세포 종양, 악성; 지질세포 종양, 악성; 부신경절종, 악성; 이소성-유방 (extra-breast) 부신경절종, 악성; 크롬친화세포종; 사구맥관종; 악성 흑색종; 멜라닌결핍 흑색종; 표재성 확산 흑색종; 거대색소모반 내 악성흑색종; 상피모양세포 흑색종; 청색모반, 악성; 육종; 섬유육종; 섬유조직구종, 악성; 점액육종; 지방육종; 평활근육종; 횡문근육종; 배아형 횡문근육종; 폐포 횡문근육종; 간질 육종; 혼합종양, 악성; 뮐러리안 (mullerian) 혼합종양; 신장모세포종; 간모세포종; 암육종; 중간엽종, 악성; 브렌너 종양, 악성; 엽상 종양, 악성; 윤활막 육종; 중피종, 악성; 미분화세포종; 배아 암종; 기형종, 악성; 난소 갑상선종, 악성; 융모막암종; 중간콩팥종, 악성; 혈관육종; 혈관내피종, 악성; 카포시육종; 혈관주위세포종, 악성; 림프관육종; 골육종; 측피질 골육종; 연골육종; 연골모세포종, 악성; 중간엽 연골육종; 뼈의 거대세포 종양; 유잉육종; 치원성 종양, 악성; 사기질모세포 치아육종; 사기질모세포종, 악성; 사기질모세포 섬유육종; 솔방울샘종, 악성; 척삭종; 신경아교종, 악성; 뇌실막종; 별아교세포종; 원형질성 별아교세포종; 섬유성 별아교세포종; 별아교모세포종; 아교모세포종; 희소돌기아교세포종; 희소돌기아교모세포종; 원시 신경외배엽; 소뇌 육종; 신경절신경모세포종; 신경모세포종; 망막모세포종; 후신경원성 종양; 수막종, 악성; 신경섬유육종; 신경집종, 악성; 과립세포 종양, 악성; 악성 림프종; 호지킨병; 호지킨; 파라육아종; 악성 소림프구림프종; 악성 미만성 대세포임파종; 악성 소포림프종; 균상식육종; 기타 특정된 비-호지킨 림프종; 악성 조직구종; 다발골수종; 비만세포 육종; 면역증식성 소창자병; 백혈병; 림프 백혈병; 형질세포 백혈병; 적백혈병; 림프육종세포 백혈병; 골수성 백혈병; 호염기 백혈병; 호산구 백혈병; 단핵구 백혈병; 비만세포 백혈병; 거대모구성 백혈병; 골수성 육종; 및 털모양세포 백혈병.
ii. 세균 감염
본 발명의 일부 측면에서, 본원에 기술된 화합물은 세균 감염을 치료하기 위해 사용될 수 있다. 인간은 그들의 신체 표면 및 내부에 무수히 다양한 세균을 포함하고 있지만, 세균 수준의 불균형 또는 병원성 세균의 유입은 증후성 세균 감염을 야기할 수 있다. 병원성 세균은, 이로 제한되는 것은 아니지만, 다수의 식품매개 질병, 장티푸스, 결핵, 폐렴, 매독 및 나병을 포함하는 다양한 상이한 질환을 야기한다.
부가적으로, 여러 세균이 신체와의 광범위한 상호작용을 가지며 그러한 상호작용은 감염을 야기하는 세균의 능력을 조절한다. 예를 들어, 세균은 이들이 단지 특정 조건하에서만 감염을 야기하도록 조건적으로 병원성일 수 있다. 예를 들어, 스타필로코커스 (Staphylococcus) 및 스트렙토코커스 (Streptococcus) 세균은 정상적인 인간 세균 생태군 (biome)에 존재하지만, 이들이 신체의 다른 부위에서 집락을 형성하는 경우 이들 세균은 피부 감염, 폐렴, 또는 패혈증을 야기한다. 기타 세균이 기회감염 병원체로 알려져 있으며 이들은 약화된 면역체계 또는 또 다른 질환 또는 장애를 갖는 환자에서만 질환을 야기한다.
세균은 또한 숙주 유기체의 세포내에서 성장하고 복제할 수 있는 세포내 병원체일 수 있다. 이러한 세균은 절대 세포내 병원체 또는 조건 세포내 병원체 중 어느 하나로서 2개의 주된 범주로 구분될 수 있다. 절대 세포내 병원체는 복제하기 위하여 숙주세포를 요구하고, 이로 제한되는 것은 아니지만, 폐렴, 요로 감염, 티푸스, 및 록키산 홍반열을 야기하는 것으로 알려진 클라마이도필라 (Chlamydophila), 리켓치아 (Rickettsia), 및 에흘리치아 (Ehrlichia)와 같은 세균이 포함된다. 조건 세포내 병원체는 세포내 또는 세포외에서 복제할 수 있다. 조건 세포내 병원체의 일부 비-제한적인 예시에는 식중독, 장티푸스, 패혈증, 수막염, 레지오넬라병, 결핵, 나병, 및 브루셀라증을 야기하는 것으로 알려진 살모넬라 (Salmonella), 리스테리아 (Listeria), 레지오넬라 (Legionella), 마이코박테리움 (Mycobacterium), 및 브루셀라 (Brucella)가 포함된다.
마지막으로, 세균 감염은 신체 내 또는 그 표면의 특정 위치로 표적될 수 있다. 예를 들어, 단지 특정 장기에만 노출된다면 세균은 무해할 수 있지만, 특정 장기 또는 조직과 접촉하게 되는 경우에, 세균은 복제하기 시작하여 세균 감염을 야기할 수 있다.
특히, 본 발명자들은 스타필로코커스 아우레우스 (Staphyloccoccus aureus)에 의해 야기되는 것들을 비롯한 세균 감염의 치료를 고려한다. S. 아우레우스는 경증 피부 및 연조직 감염 및 식중독 내지 심부 수술후 감염, 패혈증, 심내막염, 괴사성 폐렴, 및 독성 쇼크 증후군과 같은 생명을 위협하는 질병에 이르는 범위의 매우 다양한 질병을 야기하는, 주된 인간 병원체이다. 이들 유기체는 추가적인 항생제 내성 결정인자를 축적하는 상당한 능력을 가지고 있어서, 다중-약제-내성 균주의 형성을 초래한다.
부가적으로, 본 발명에 의해 제공되는 화합물은 버크홀데리아 세파시아의 감염을 치료하기 위해 사용될 수 있다. B. 세파시아는 특히 면역손상된 환자에서 폐렴을 야기하는, 주된 인간 병원체이다. 이 특정 병원체는 다수의 항생제에 대해 내성인 것으로 알려져 있고 따라서 새로운 항생제가 치료적으로 중요하다.
B. 약학적 제형 및 투여 경로
임상 적용이 고려되는 경우, 의도된 적용에 적합한 형태로 약학적 조성물을 제조하는 것이 필요할 것이다. 일반적으로, 이는 인간 또는 동물에 유해할 수 있는 기타 불순물뿐만 아니라, 필수적으로 발열원을 포함하지 않는 조성물의 제조를 수반할 것이다.
당업자는 전달 벡터를 안정하게 하여 표적 세포에 의한 섭취를 허용하도록 적합한 염 및 완충제의 사용을 희망할 것이다. 완충제는 또한 재조합 세포를 환자에게 도입하는 경우에 이용될 것이다. 본 발명의 수성 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체 또는 수성 매질에 용해 또는 분산된, 세포에 대한 벡터의 유효량을 포함한다. 이러한 조성물은 또한 접종물 (inocula)로서 지칭된다. 문구 "약학적으로 또는 약리학적으로 허용가능한"은 동물 또는 인간에 투여될 때 유해 반응, 알러지 반응 또는 기타 바람직하지 않은 반응을 유발하지 않는 분자 단위 및 조성물을 지칭한다. 본원에 사용된 바와 같이, "약학적으로 허용가능한 담체"에는 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 코팅, 항생제 및 항균제, 등장화제 및 흡수 지연제 등이 포함된다. 약학적으로 활성인 성분을 위한 이러한 매질 및 제제의 사용은 당해 분야에 잘 알려져 있다. 임의의 통상적인 매질 또는 제제가 본 발명의 벡터 또는 세포와 양립할 수 없는 경우를 제외하고, 치료적 조성물에서 이들의 사용이 고려된다. 보조 활성 성분이 또한 본 조성물 내로 도입될 수 있다.
본 발명의 활성 조성물은 전통적인 약학적 제조물을 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 이들 조성물의 투여는 표적 조직이 그 경로를 통해 이용가능한 한 임의의 통상적인 경로를 통해서일 것이다. 이러한 경로에는 경구, 코, 볼, 직장, 질 또는 국부 (topical) 경로가 포함된다. 대안적으로, 투여는 동소 (orthotopic), 진피내, 피하, 근육내, 종양내, 복강내, 또는 정맥내 주사일 수 있다. 이러한 조성물은 일반적으로 상기에 기술된, 약학적으로 허용가능한 조성물로서 투여될 것이다.
활성 화합물은 또한 비경구로 또는 복강내로 투여될 수 있다. 유리 염기 또는 약리학적으로 허용가능한 염으로서 활성 화합물의 용액이 히드록시프로필셀룰로스와 같은 계면활성제와 적절히 혼합된 물 중에서 제조될 수 있다. 분산액이 또한 글리세롤, 액체 폴리에틸렌 글리콜, 및 이들의 혼합물 중에서, 그리고 오일 중에서 제조될 수 있다. 통상적인 보관 및 사용 조건하에서, 이들 제조물은 미생물의 성장을 방지하기 위해 방부제를 함유한다.
주사용으로 적합한 약학적 형태는 멸균 주사 용액 또는 분산액의 즉석 제조를 위해 멸균 수용액 또는 분산액을 포함한다. 모든 경우에서 이들 형태는 멸균 상태여야 하고 용이한 주사능 (syringability)이 나타나는 정도로 유동성이어야 한다. 이는 제조 및 보관 조건하에서 안정해야만 하고 세균 및 진균과 같은 미생물의 오염 작용에 대해 보존되어야 한다. 담체는 예를 들어, 물, 에탄올, 폴리올 (예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등), 이들의 적합한 혼합물, 및 식물성 오일을 포함하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 적절한 유동성이, 예를 들어 레시틴과 같은 코팅의 사용에 의해, 분산액의 경우 요구된 입자 크기의 유지에 의해, 그리고 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다. 미생물 작용의 방지는 다양한 항균제 및 항진균제, 예를 들어, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 소르브산, 티메로살 등에 의해 이루어질 수 있다. 다수의 사례에서, 등장화제, 예를 들어, 당 또는 염화나트륨을 포함하는 것이 바람직할 것이다. 주사가능 조성물의 연장된 흡수는 흡수를 지연시키는 제제, 예를 들어, 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴의 조성물 내 사용에 의해 이루어질 수 있다.
멸균 주사 용액은, 필요한 경우, 상기에 열거된 다양한 기타 성분들과 함께 요구량의 활성 화합물을 적합한 용매에 도입하고 이어서 여과 멸균에 의해 제조된다. 일반적으로, 분산액은 다양한 멸균된 활성 성분을 염기성 분산 매질 및 상기에 열거된 것들로부터 요구되는 기타 성분들을 함유하는 멸균 비히클 내로 도입함으로써 제조된다. 멸균 주사 용액의 제조를 위한 멸균 분말의 경우에, 바람직한 제조 방법은 사전에 멸균-여과된 이의 용액으로부터 활성 성분과 임의의 부가적인 바람직한 성분의 분말을 양산하는 진공-건조 및 동결-건조 기술이다.
본원에 사용된 바와 같이, "약학적으로 허용가능한 담체"에는 임의의 모든 용매, 분산 매질, 코팅, 항균제 및 항진균제, 등장화제 및 흡수 지연제 등이 포함된다. 약학적 활성 성분을 위한 이러한 매질 및 제제의 사용은 당해 분야에 잘 알려져 있다. 임의의 통상적인 매질 또는 제제가 활성 성분과 양립할 수 없는 경우를 제외하고는, 치료학적 조성물에서 이들의 사용이 고려된다. 보조적 활성 성분이 또한 본 조성물에 포함될 수 있다.
경구 투여를 위해 본 발명의 운시알라마이신 유도체는 부형제와 함께 혼입되어 비-섭취가능한 구강세정제 및 치약의 형태로 사용될 수 있다. 구강세정제는 붕산나트륨 용액 [도벨 용액 (Dobell's Solution)]과 같은 적합한 용매에 요구되는 양으로 활성 성분을 도입함으로써 제조될 수 있다. 대안적으로, 활성 성분은 붕산나트륨, 글리세린 및 중탄산칼륨을 함유하는 소독 세정제 내로 도입될 수 있다. 활성 성분은 또한 젤, 페이스트, 분말 및 슬러리를 비롯한, 치약 내에 분산될 수 있다. 활성 성분은 물, 결합제, 연마제, 향미제, 발포제, 및 습윤제를 함유할 수 있는 페이스트 치약에 치료학적 유효량으로 첨가될 수 있다.
본 발명의 조성물은 중성 또는 염 형태로 제형화될 수 있다. 약학적으로-허용가능한 염에는 산부가염 (단백질의 유리 아미노기로 형성됨)이 포함되고 이는 예를 들어, 염산 또는 인산과 같은 무기산, 또는 아세트산, 옥살산, 타르타르산, 만델산 등과 같은 유기산으로 형성된다. 유리 카르복실기로 형성된 염이 또한, 예를 들어, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화암모늄, 수산화칼슘, 또는 수산화제2철과 같은 무기 염기, 및 이소프로필아민, 트리메틸아민, 히스티딘, 프로카인 등과 같은 유기 염기로부터 유래될 수 있다.
제형화 시, 용액은 투약 제형과 호환되는 방식 및 치료학적으로 유효한 그러한 양으로 투여될 것이다. 제형은 주사 용액, 약물 방출 캡슐 등과 같은 다양한 투약 형태로 용이하게 투여된다. 수성 용액으로 비경구 투여를 위해, 예를 들어, 이 용액은 필요하다면 적절하게 완충되어야 하고 액체 희석제가 먼저 충분한 식염수 또는 글루코스로 등장이 되게 하여야 한다. 이들 특정한 수성 용액은 정맥내, 근육내, 피하 및 복강내 투여에 특히 적합하다. 이와 관련하여, 사용될 수 있는 멸균 수성 매질은 본 발명에 비추어 통상의 기술자에게 자명할 것이다. 예를 들어, 1회 투여량은 1 ml의 NaCl 등장 용액에 용해되어 1000 ml의 피하주입 수액에 첨가되거나 또는 제안된 주입 부위에 주사될 수 있다 (예를 들어, "Remington's Pharmaceutical Sciences," 15th Edition, pages 1035-1038 및 1570-1580 참고). 처치되는 대상의 상태에 따라서 투여량에 있어 약간의 변화가 필연적으로 발생할 수 있다. 차치하고, 투여 책임자가 개별 대상에 적합한 용량을 결정할 것이다. 더욱이, 인간 투여의 경우, 제조물은 FDA 사무국의 생물제제 표준에 의해 요구되는 바와 같은 무균, 발열원성, 일반적인 안전성 및 순도 표준을 충족하여야 한다.
C. 치료 방법
의학적으로 악성 신생물로 알려진 암은 통제되지 않는 세포 성장을 포함하는 광범위한 그룹의 질환이다. 암에서, 세포는 통제 불가능하게 분열하고 성장하여, 악성 종양을 형성하고, 근처의 신체 부위를 침입한다. 암은 또한 림프계 또는 혈류를 통해서 신체의 더 먼 부위로 확산할 수 있다. 모든 종양이 암성은 아니며; 양성 종양은 이웃하는 조직을 침입하지 않고 신체 전체에 확산되지 않는다. 인간에 영향을 미치는 200개가 넘는 다양한 공지된 암이 존재한다.
암의 원인은 다양하고, 복잡하며, 단지 부분적으로 이해된다. 흡연, 특정 감염, 방사선 노출, 신체 활동의 결여, 비만, 및 환경적 오염원을 비롯한 많은 것들이 암의 위험성을 증가시키는 것으로 알려져 있다. 이들 요인은 직접적으로 유전자를 손상시키거나 암 돌연변이를 유발하도록 세포 내에 존재하는 유전적 결함과 조합될 수 있다. 대략 5 내지 10%의 암이 유전된 유전적 결함에서 직접적으로 유래될 수 있다. 다수의 암은 금연을 하고, 야채, 과일 및 전곡류를 더 섭취하고, 육류 및 정제된 탄수화물을 덜 섭취하며, 건강한 체중을 유지하고, 운동을 하며, 일광 노출을 최소화하고, 일부 감염 질환에 대해 백신 접종을 함으로써 예방될 수 있다.
본 발명의 치료 방법 (예방적 치료를 포함함)은 일반적으로 포유동물, 특히 인간을 포함하는, 이를 필요로 하는 대상에게 본원에 기술된 조성물의 치료학적 유효량의 투여를 포함한다. 이러한 치료는 질환, 장애, 또는 이의 증상을 앓고 있거나, 이에 걸렸거나, 이에 걸리기 쉽거나, 또는 이에 걸릴 위험에 처한 대상, 특히 인간에게 적절히 투여될 것이다. "위험에 처한" 그러한 대상의 결정은 진단 검사에 의한 임의의 객관적 또는 주관적 결정, 또는 대상 또는 의료인의 의견 (예컨대, 유전검사, 효소 또는 단백질 마커, 마커 (본원에 정의된 바와 같다), 가족력 등)에 의해 이루어질 수 있다.
본 발명의 일부 측면에서, 본 발명은 변형 없이 투여되거나 전구-약물로서 투여되는 화합물을 제공한다. 일부 실시양태에서, 화합물은 각 제제가 독립적으로 투여되거나 약물들이 화학적 변형 및 링커 그룹을 통해 조합되는, 또 다른 치료제와 함께 투여된다. 일부 실시양태에서, 약물은 세포 표적화 모이어티와의 접합체로서 투여된다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 항체와의 접합체로서 투여된다.
i. 항체-약물 접합체 ( ADCs )
일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 강력한 세포독소이고 항체-약물 접합체 (ADCs)에 치료학적으로 사용된다. 이론에 구속됨이 없이, 항체에 대한 본 발명의 화합물의 접합은 암세포와 같은 의도된 작용 부위에 화합물의 표적 전달을 가능케 하여 전신 독성의 위험성을 감소시킨다.
화합물에 대한 항체의 접합은 항체가 본 발명의 화합물로부터 효소적으로 절단되도록 링커와 함께 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 ADCs는 카텝신 절단가능한 링커를 함유한다. 이론에 구속됨이 없이, 카텝신 절단가능한 링커는 하기 작용 기전을 갖는다:
Figure pct00111
표적 암성 세포 상에서 그의 항원에 대한 항체의 결합 후, ADC는 암성 세포 내로 내재화되고, 결국에는 효소 카텝신 B가 존재하는 리소좀 내로 들어가게 된다. 시트룰린-발린 (Cit-Val) 디펩티드는 카텝신 B의 기질 모티프 (다른 기질 모티프가 공지되어 있고 대신 사용될 수 있음)이고 점선으로 표시된 위치에서 카텝신 B에 의해 절단된다. 이 절단으로부터 수득된 분자는 p-아미노벤질옥시카보닐 (PABC) 기를 함유하고 있는데, 이는 불안정하고 1,6-제거 (자기-희생) 및 탈카르복실화를 거쳐 48aa를 방출한다. 이론에 구속됨이 없이, 링커에서, PABC 기는 48aa가 카텝신 B의 작용을 입체적으로 방해하는 것을 방지하기 위하여, 48aa 모이어티와 Cit-Val 디펩티드 사이에서 스페이서로 제공된다. 48aa는 에네딘 (enediyne) 세포독소에 특징적인 기작을 통해 DNA를 손상시키고 세포사를 초래한다. 이 방식에서, 48aa는 표적 세포 내부로만 방출되지만 ADC는 대순환 내에 존재하여 전신 독성을 회피한다.
통상의 기술자는 상기에 기술된 조건 및 방법론이 예시이고 비-제한적이며 접합을 위한 다른 접근법이 당해 분야에 공지되어 있고 본 발명의 세포독소의 가용 ADCs가 그러한 접근법을 이용하여 제조될 수 있음을 이해할 것이다.
이용될 수 있는 대안적인 접합 기술에는 시클로옥틴의 긴장된 (strained) 알킨 결합을 가로질러 아지드 기를 부가하여 1,2,3-트리아졸 고리를 형성하는, 구리-무함유 "클릭 화학반응 (click chemistry)"이 포함된다. 예컨대, 문헌 [Agard et al., J. Amer . Chem . Soc . 2004, 126, 15046-15047; Best, Biochemistry 2009, 48, 6571-6584]을 참고하라. 일부 실시양태에서, 아지드는 항체의 표면에 위치하고 시클로옥틴은 약물 모이어티의 표면에 위치하거나, 또는 그 반대이다. 일부 실시양태에서, 시클로옥틴 기는 DIBO 시약 [인비트로젠/몰레큘라 프로브사 (Invitrogen/Molecular Probes, Eugene, Oregon)로부터 입수가능함]에 의해 제공된다.
이용될 수 있는 또 다른 접합 기술에는 비-천연 아미노산을 항체에 도입하는 것이 포함되는데, 비-천연 아미노산은 약물 모이어티 내 반응성 관능기와의 접합을 위한 관능기를 제공한다. 예를 들어, 비-천연 아미노산 p-아세틸페닐알라닌은 문헌 [Tian et al., WO 2008/030612 A2 (2008)]에 교시된 바와 같이, 항체 또는 다른 폴리펩티드 내로 도입될 수 있다. p-아세틸페닐알라닌의 케톤 기는 약물 모이어티 표면에서 히드록실아미노 기와의 옥심 형성에 의한 접합 부위일 수 있다. 대안적으로, 비-천연 아미노산 p-아지도페닐알라닌은 항체 내로 도입되어 클릭 화학반응을 통한 접합을 위해 아지드 관능기를 제공할 수 있다. 비-천연 아미노산은 또한 문헌 [Goerke et al., US 2010/0093024 A1 (2010) 및 Goerke et al., Biotechnol . Bioeng. 2009, 102 (2), 400-416]에 교시된 바와 같이, 무세포 방법을 이용하여 항체 EH는 다른 폴리펩티드 내로 도입될 수 있다.
이용될 수 있는 또 다른 접합 기술은, 문헌 [Jeger et al., Angew . Chem . Int. Ed. 2010, 49, 9995 9997]에 교시된 바와 같이, 효소 트랜스글루타미나제를 사용하여 접합에 사용될 수 있는 아민 (NH2) 기에 의존한다.
나아가, 이용될 수 있는 또 다른 접합 기술은, 문헌 [Levary et al., PLoS One 2011, 6 (4), e18342; Proft, Biotechnol . Lett . 2010, 32, 1-10; Ploegh et al., WO 2010/087994 A2 (2010); 및 Mao et al., WO 2005/051976 A2 (2005)]에 교시된 바와 같이, 효소 소르타제 A (Sortase A)를 사용한다. 소르타제 A 인식 모티프 (전형적으로 LPXTG, 여기서 X는 임의의 천연 아미노산임)는 항체에 부착될 수 있고 친핵성 수용체 모티프 (전형적으로 GGG)는 약물 모이어티 표면에 위치할 수 있거나, 또는 그 반대이다.
추가적인 접합 기술이, 예를 들어 참조로서 본원에 포함되는, US 2013/0209494에 교시되어 있다.
통상의 기술자는 다수의 티올 기가 티올화 반응을 통해 도입될 수 있기 때문에, 하나보다 많은 약물 모이어티 (즉, 116)가 항체에 부착될 수 있음을 인식할 것이다. 이 비율은 치환 비 (substitution ratio, SR) 또는, 대안적으로, 약물-항체 비 (DAR)로서 지칭된다. 일부 실시양태에서, DAR은 약 1과 약 4 사이이다. 다른 실시양태에서, DAR은 약 1.2와 약 1.9 사이이다. 통상의 기술자는 각각의 개별적인 항체가 정수 개수의 약물 모이어티에 접합되지만, 전체적으로, DAR이 그 조성 내 개별적 분자의 통계적 평균을 반영하기 때문에 특정 조성의 ADC가 비-정수 DAR을 가질 수 있음을 또한 인식할 것이다.
일부 측면에서, ADCs는 임의의 암 항원에 특이적으로 결합하도록 개발된 항체를 함유한다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 ADCs에 사용될 수 있는 항체에는 하기 항원에 특이적으로 결합하는 것들이 포함된다: 메소텔린, 전립샘 특이적 막 항원 (PSMA), CD19, CD22, CD30, CD70, B7H4 (O8E로도 알려짐), 단백질 티로신 키나제 7 (PTK7), 글리피칸-3, RG1, CTLA4, 및 CD44. 항체는 동물 (예컨대, 쥐과), 키메릭, 인간화된, 또는 인간 항체일 수 있다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간 항체이다. 일부 측면에서, 항체는 단일클론이다. 일부 실시양태에서, 항체는 단일클론 인간 항체이다. 전술한 항원의 일부에 대한 인간 단일클론 항체의 제조가 문헌 [Korman et al., US 2009/0074660 A1 (B7H4); Rao-Naik et al., 8,097,703 B2 (CD19); King et al., US 2010/0143368 A1 (CD22); Keler et al., US 7,387,776 B2 (2008) (CD30); Terrett et al., US 8,124,738 B2 및 Coccia et al., US 2010/0150950 (2010) (CD70); Korman et al., US 6,984,720 B1 (2006) (CTLA-4); Korman et al., US 8,008,449 B2 (2011) (PD-1); Huang et al., US 2009/0297438 A1 및 Cardarelli et al., US 7,875,278 B2 (PSMA); Terrett et al., US 2010/0034826 A1 (PTK7); Terrett et al., US 2010/0209432 (A1) 및 Terrett et al., US 8,680,247 (2014) (글리피칸-3); Harkins et al., US 7,335,748 B2 (2008) (RG1); Terrett et al., US 8,268,970 B2 (2012) 및 Terrett et al., US 8,268,970 B2 (2012) (메소텔린); 및 Xu et al., US 2010/0092484 A1 (CD44)]에 기술되어 있고; 이들 각각은 참조로서 본원에 포함된다.
D. 조합 요법
암 요법 분야에서 치료 양태를 조합하는 것은 매우 일반적이다. 하기는 본 발명의 요법과 함께 사용될 수 있는 요법에 대한 일반적인 논의이다.
본 발명의 방법 및 조성물을 이용하여 암을 치료하기 위해서, 당업자는 일반적으로 종양 세포 또는 대상을 운시알라마이신 유사체 또는 운시알라마이신 유사체의 항체 약물 접합체와 적어도 하나의 다른 요법과 접촉시킬 것이다. 이들 요법은 하나 이상의 질환 매개변수에서의 감소를 달성하기에 효과적인 조합된 양으로 제공될 것이다. 이 과정은 세포/대상을 동시에, 예컨대 두 제제 모두를 포함하는 단일 조성물 또는 약학적 제형을 사용하여 제제/요법 모두와 접촉시키거나, 또는 세포/대상을, 하나의 조성물은 운시알라마이신 유사체 또는 운시알라마이신 유사체의 항체 약물 접합체를 포함하고 다른 조성물은 다른 제제를 포함하는, 2개의 별개의 조성물 또는 제형과 동시에 접촉시키는 것을 포함할 수 있다.
대안적으로, 운시알라마이신 유사체 또는 운시알라마이신 유사체의 항체 약물 접합체는 수분 내지 수주 범위의 간격으로 다른 치료에 선행되거나 후속될 수 있다. 당업자는 상당한 기간이 각 전달의 시기 사이에서 만료되지 않았고, 그로써 요법이 세포/대상에 유리한 병용 효과를 여전히 발휘할 수 있음을 일반적으로 확신할 것이다. 이러한 경우에, 당업자가 두 양태의 약 12-24시간 이내에, 두 양태의 약 6-12시간 이내에, 또는 단지 12시간의 지연 시간으로 세포를 두 양태 모두와 접촉시킬 수 있음이 고려된다. 그러나, 일부 상황에서는, 치료를 위한 기간을 상당히 연장하는 것이 바람직할 수 있고, 이 경우에 수일 (2, 3, 4, 5, 6 또는 7) 내지 수주 (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8)가 각각의 투여 사이에 경과한다.
펩티드 또는 다른 요법 중 어느 하나의 단일 투여가 바람직할 것임이 또한 생각될 수 있다. 다양한 조합이 이용될 수 있는데, 본 발명의 화합물이 "A"이고 다른 요법이 "B"라고 하면 하기와 같이 예시된다:
A/B/A B/A/B B/B/A A/A/B B/A/A A/B/B B/B/B/A B/B/A/B
A/A/B/B A/B/A/B A/B/B/A B/B/A/A B/A/B/A B/A/A/B B/B/B/A
A/A/A/B B/A/A/A A/B/A/A A/A/B/A A/B/B/B B/A/B/B B/B/A/B
기타 조합이 고려된다. 하기는 본 발명의 펩티드와 함께 사용될 수 있는 암 요법의 일반적인 논의이다.
1. 화학요법
용어 "화학요법"은 암을 치료하기 위한 약물의 사용을 지칭한다. "화학요법제"는 암의 치료에 있어 투여되는 화합물 또는 조성물을 의미하기 위해 사용된다. 이들 제제 또는 약물은 세포 내에서 이들의 활성 방식, 예를 들어, 이들이 세포 주기에 영향을 미치는지, 그리고 어느 단계에서 영향을 미치는지에 의해 분류된다. 대안적으로, 제제는 직접적으로 DNA를 교차-결합하고, DNA 내로 개재되고 (intercalate), 또는 핵산 합성에 영향을 미침으로써 염색체 및 유사분열 이상을 유도하는 이들의 능력을 기준으로 분류될 수 있다. 대부분의 화학요법제는 하기 부류에 속한다: 알킬화제, 대사억제제 (antimetabolites), 항종양 항생제, 유사분열 억제제, 및 니트로소우레아.
화학요법제의 예시에는, 티오테파 및 시클로포스파미드와 같은 알킬화제; 부설판, 임프로설판 및 피포설판과 같은 알킬 설포네이트; 벤조도파, 카르보쿠오네 (carboquone), 메투레도파, 및 우레도파와 같은 아지리딘; 알트레타민, 트리에틸렌멜라민, 트리에틸렌포스포르아미드, 트리에틸렌티오포스포르아미드 및 트리메틸올로멜라민을 포함하는 에틸렌이민 및 메틸아멜라민; 아세토제닌 (특히 불라타신 및 불라타시논); 캄토테신 (합성 유사체 토포테칸을 포함함); 브리오스타틴; 칼리스타틴; CC-1065 (그의 아도젤레신, 카르젤레신 및 비젤레신 합성 유사체를 포함함); 크립토파이신 (특히 크립토파이신 1 및 크립토파이신 8); 돌라스타틴; 듀오카르마이신 (합성 유사체, KW-2189 및 CB1-TM1을 포함함); 엘레우쎄로빈 (eleutherobin); 판크라티스타틴; 사르코딕틴; 스폰지스타틴; 클로르암부칠, 클로르나파진, 클로로포스파미드, 에스트라머스틴, 이포스파미드, 메클로레타민, 메클로레타민 옥사이드 염산염, 멜팔란, 노벰비킨, 펜에스테린, 프레드니머스틴, 트로포스파아미드, 우라실 머스타드와 같은 질소 머스타드; 카르머스틴, 클로로조토신, 포테머스틴, 로무스틴, 니무스틴, 및 라님누스틴과 같은 니트로스우레아; 에네딘 항생제 (예컨대, 칼리케아미신, 특히 칼리케아미신 감마lI 및 칼리케아미신 오메가I1)과 같은 항생제; 디네미신 A를 비롯한 디네미신; 클로드로네이트와 같은 비스포스포네이트; 에스페라미신; 또한 네오카르지노스타틴 발색단 및 관련 색소단백질 에네딘 항생 발색단, 아클라시노마이신, 악티노마이신, 아우트라르니신 (authrarnycin), 아자세린, 블레오마이신, 칵티노마이신, 카라비신, 카르미노마이신, 카르지노필린, 크로모마이신, 닥티노마이신, 다우노루비신, 데토루비신, 6-디아조-5-옥소-L-노르류신, 독소루비신 (모르폴리노-독소루비신, 시아노모르폴리노-독소루비신, 2-피롤리노-독소루비신 및 데옥시독소루비신을 포함함), 에피루비신, 에소루비신, 이다루비신, 마르셀로마이신, 미토마이신 C와 같은 미토마이신, 마이코페놀산, 노갈라르니신, 올리보마이신, 페플로마이신, 포트피로마이신, 퓨로마이신, 쿠엘라마이신, 로도루비신, 스트렙토니그린, 스트렙토조토신, 투베르시딘, 우베니맥스, 지노스타틴, 조루비신; 메토트렉세이트 및 5-플루오로우라실 (5-FU)과 같은 항-대사물; 데노프테린, 메토트렉세이트, 프테로프테린, 트리메트렉세이트와 같은 폴산 유사체; 플루다라빈, 6-머캅토퓨린, 티아미프린, 티오구아닌과 같은 퓨린 유사체; 시타빈, 아자시티딘, 6-아자우리딘, 카르모푸르, 시트라빈, 디데옥시우리딘, 독시플루리딘, 에노시타빈, 플록스우리딘과 같은 피리미딘 유사체; 칼루스테론, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 에피티오스타놀, 메피티오스탄, 테스토락톤과 같은 안드로겐; 아미노글루테쓰이미드, 미토탄, 트릴로스탄과 같은 항-아드레날; 프롤린산과 같은 폴산 보충제; 아세글라톤; 알도포스파미드 글리코시드; 아미노레브울린산; 에닐우라실; 암사크린; 브레스트라부실; 비스안트레네; 에다트렉세이트; 데포파민; 데메콜신; 디아지쿠오네; 엘포르미씬; 엘리프티늄 아세테이트; 에포틸론; 에토글루시드; 갈륨 니트레이트; 히드록시우레아; 렌티난; 로니다이닌; 메이탄신 및 안사미토신과 같은 메이탄시노이드; 미토구아존; 미톡산트론; 모피단몰; 니트라에린; 펜토스타틴; 펜아멧; 피라루비신; 로속산트론; 포도필린산; 2-에틸히드라지드; 프로카르바진; PSK 다당류 복합체); 라족산; 리족신; 시조피란; 스피로게르마늄; 테누아존산; 트리아지쿠오네; 2,2',2"-트리클로로트리에틸아민; 트리쵸테센 (특히 T-2 독소, 베르라쿠린 A, 로리딘 A 및 안구이딘); 우레탄; 빈데신; 다카르바진; 만노무스틴; 미토브로니톨; 미토락톨; 피포브로만; 가시토신; 아라비노시드 ("Ara-C"); 시클로포스파미드; 티오테파; 톡소이드, 예컨대, 파클리탁셀 및 도세탁셀; 클로르암부칠; 겜시타빈; 6-티오구아닌; 머캅토퓨린; 메토트렉세이트; 시스플라틴, 옥살리플라틴 및 카르보플라틴과 같은 백금 배위 착물; 빈블라스틴; 백금; 에토포시드 (VP-16); 이포스파미드; 미톡산트론; 빈크리스틴; 비노렐빈; 노반트론; 테니포시드; 에다스렉세이트; 다우노마이신; 아미노프테린; 젤로다; 이반드로네이트; 이리노테칸 (예컨대, CPT-11); 토포이소머라제 억제제 RFS 2000; 디플루오로메틸오르니틴 (DMFO); 레티노산과 같은 레티노이드; 카페시타빈; 시스플라틴 (CDDP), 카르보플라틴, 프로카르바진, 메클로레싸민, 시클로포스파미드, 캄토테신, 이포스파미드, 멜팔란, 클로르암부칠, 부설판, 니트로스우레아, 닥티노마이신, 다우노루비신, 독소루비신, 블레오마이신, 플리코마이신, 미토마이신, 에토포시드 (VP16), 타목시펜, 랄록시펜, 에스트로겐 수용체 결합제, 탁솔, 파클리탁셀, 도세탁셀, 젬시타빈, 나벨빈, 파르네실-단백질 트랜스퍼라제 억제제, 트랜스플라티늄, 5-플루오로우라실, 빈크리스틴, 빈블라스틴 및 메토트렉세이트, 및 상기 임의의 것의 약학적으로 허용가능한 염, 산 또는 유도체가 포함된다.
2. 방사선요법
방사선 치료로도 불리는, 방사선요법은 전리 방사선을 이용한 암 및 기타 질환의 치료이다. 전리 방사선은 세포의 유전 물질을 손상시켜 이들 세포가 성장을 지속하는 것을 불가능하게 함으로써 처치되는 부위의 세포를 손상시키거나 파괴하는 에너지를 증착한다. 방사선은 암세포 및 정상 세포 모두에 손상을 야기하지만, 후자는 그들 스스로 복구하여 적절히 기능할 수 있다.
본 발명에 따라 사용되는 방사선 치료에는, 이로 제한되는 것은 아니지만, γ-선, X-선의 사용, 및/또는 종양 세포에의 방사성 동위원소의 지시된 전달이 포함될 수 있다. 마이크로파 및 UV-조사와 같은 DNA를 손상시키는 요인의 다른 형태가 또한 고려된다. 모든 이들 요인은 DNA에, DNA의 전구체에, DNA의 복제 및 복구에, 염색체의 조립 및 유지에 광범위한 손상을 유도할 가능성이 매우 높다. X-선의 선량 범위는 연장된 기간 동안 (3 내지 4주)에 50 내지 200 뢴트겐의 일일 선량 내지 2000 내지 6000 뢴트겐의 단일 선량의 범위이다. 방사성 동위원소의 선량 범위는 폭넓게 달라지고, 동위원소의 반감기, 방출되는 방사선의 강도 및 유형, 및 신생물 세포에 의한 섭취에 의존한다.
방사선요법은 암 부위에 직접적으로 방사선의 선량을 전달하기 위해 방사성 표지된 항체의 사용을 포함할 수 있다 (방사선면역요법). 항체는 항원 (면역체계에 의해 이물로 인식되는 성분)의 존재에 반응하여 신체 내에서 만들어지는 매우 특이적인 단백질이다. 일부 종양 세포는 종양-특이적 항체의 생산을 유발하는 특이적 항원을 함유한다. 대량의 이들 항체가 실험실에서 제조될 수 있고 방사능 물질에 부착될 수 있다 (방사선표지로 알려진 방법). 일단 체내로 주사되면, 항체는 암세포를 활발하게 찾아내고, 암세포는 방사선의 세포-사멸 (세포독성) 작용에 의해 파괴된다. 이 접근법은 건강한 세포에 대한 방사선 손상의 위험성을 최소화할 수 있다.
입체 방사선요법은 통상의 방사선요법 처리로서 동일한 방사선요법 기계인, 선형 가속기를 사용하지만, 금속 블록이 x-선 광선의 모양을 암의 모양에 맞추기 위하여 x-선 광선의 경로에 놓일 수 있다. 이는 더 높은 방사선 선량이 종양에 제공되는 것을 보증한다. 건강한 주변 세포 및 근처의 구조는 더 낮은 선량의 방사선을 받게 되고, 그로써 부작용의 가능성이 감소한다. 다엽 콜리메이터 (multi-leaf collimator)로 불리는 장치가 개발되었고 이는 금속 블록의 대안으로 사용될 수 있다. 다엽 콜리메이터는 선형 가속기에 장착되는 다수의 금속 시트로 이루어진다. 각 층은 방사선요법 광선이 금속 블록을 요구하지 않으면서 치료 부위에 성형될 수 있도록 조절될 수 있다. 방사선요법 기계의 정확한 위치결정은 입체 방사선요법 치료에 매우 중요하고 특별한 스캐닝 기계가 각 치료의 초반에 내부 장기의 위치를 확인하기 위해 사용될 수 있다.
고-성능 세기 변조 (High-resolution intensity modulated) 방사선요법이 또한 다엽 콜리메이터를 사용한다. 이 처리 동안에, 다엽 콜리메이터의 층이 이동하면서 치료가 제공된다. 이 방법은 치료 광선의 훨씬 더 정확한 성형을 달성하고 전체 치료 부위에 걸쳐 방사선요법의 선량을 일정하게 할 가능성이 높다.
조사 연구가 입체 방사선요법 및 세기 변조 방사선요법이 방사선요법 치료의 부작용을 감소시킬 수 있음을 나타내기는 하지만, 그렇게 정확하게 치료 부위를 성형하는 것은 치료 부위 외부의 현미경적 암세포가 파괴되는 것을 중단할 수 있다. 이는 미래에 되돌아오는 암의 위험성이 이들 전문적인 방사선요법 기술로 더 높아질 수 있음을 의미한다.
과학자들은 또한 방사선 치료의 효율을 증가시키는 방식을 찾고 있다. 2가지 유형의 치료시험약 (investigational drugs)이 방사선을 받는 세포에 대한 이들의 효과에 대해 연구되고 있다. 방사선민감제는 종양 세포가 더 쉽게 손상되게 만들고, 방사선보호제는 정상 조직을 방사선의 효과로부터 보호한다. 온열요법 (Hyperthermia), 즉 열의 사용이 또한 방사선에 대한 조직의 민감화에 있어 이들의 효율에 대해 연구되고 있다.
3. 면역요법
암 치료의 측면에서, 면역요법은, 일반적으로 암세포를 표적하여 파괴하기 위해 면역 효과기 세포 및 분자의 사용에 의존한다. 트라스트주맙 (허셉틴™)은 이러한 예시이다. 면역 효과기는, 예를 들어, 종양 세포의 표면에서 일부 마커에 특이적인 항체일 수 있다. 항체 단독이 요법의 효과기로서 제공될 수 있거나 세포 사멸에 실제로 영향을 미치기 위해 다른 세포를 동원할 수 있다. 항체는 또한 약물 또는 독소 (화학요법, 빙사선핵종, 리신 A 쇄, 콜레라 독소, 백일해 독소 등)에 접합되어 단순히 표적화 제제로서 제공될 수 있다. 대안적으로, 효과기는 종양 세포 표적과 직접적 또는 간접적으로 상호작용하는 표면 분자를 수반하는 림프구일 수 있다. 다양한 효과기 세포에 세포독성 T 세포 및 NK 세포가 포함된다. 치료적 양태의 조합, 즉 직접 세포독성 활성 및 ErbB2의 억제 또는 감소는 ErbB2 과발현 암의 치료에 치료적 이익을 제공할 것이다.
면역요법의 일 측면에서, 종양 세포는 표적하기 쉬운, 즉 대부분의 다른 세포에는 존재하지 않는 어떤 마커를 보유해야만 한다. 다수의 종양 마커가 존재하고 이들 중 임의의 것들은 본 발명의 문맥에서 표적하기에 적합하다. 통상적인 종양 마커에는 암배아 항원, 전립샘 특이적 항원, 방광 종양 관련 항원, 태아 항원, 티로시나제 (p97), gp68, TAG-72, HMFG, 시알일 루이스 (Sialyl Lewis) 항원, MucA, MucB, PLAP, 에스트로겐 수용체, 라미닌 수용체, erb B 및 p155가 포함된다. 면역요법의 대안적인 측면은 항암 효과와 면역 자극 효과를 조합하는 것이다. IL-2, IL-4, IL-12, GM-CSF, γ-IFN과 같은 사이토카인, MIP-1, MCP-1, IL-8와 같은 케모카인, 및 FLT3 리간드와 같은 성장인자를 포함하는 면역 자극 분자가 또한 존재한다. 단백질로서 또는 종양 억제제와 함께 유전자 전달을 이용하여 면역 자극 분자를 조합하는 것은 항-종양 효과를 증강시키는 것으로 나타났다 (Ju et al., 2000). 더욱이, 이들 화합물 중 어느 하나에 대한 항체는 본원에 논의된 항암제를 표적하기 위해 사용될 수 있다.
현재 연구 중이거나 사용되고 있는 면역요법의 예시는 면역 보강제, 예컨대 마이코박테리움 보비스 (Mycobacterium bovis), 플라스모디움 팔시파룸 (Plasmodium falciparum), 디니트로클로로벤젠 및 방향족 화합물 (미국특허 제5,801,005호 및 제5,739,169호; Hui and Hashimoto, 1998; Christodoulides et al., 1998), 사이토카인 요법, 예컨대 인터페론 α, β, 및 γ; IL-1, GM-CSF 및 TNF (Bukowski et al., 1998; Davidson et al., 1998; Hellstrand et al., 1998), 유전자 요법, 예컨대 TNF, IL-1, IL-2, p53 (Qin et al., 1998; Austin-Ward and Villaseca, 1998; 미국특허 제5,830,880호 및 제5,846,945호) 및 단일클론 항체, 예컨대, 항-강글리오시드 GM2, 항-HER-2, 항-p185 (Pietras et al., 1998; Hanibuchi et al., 1998; 미국특허 제5,824,311호)이다. 하나 이상의 항암 요법이 본원에 기술된 유전자 침묵 (gene silencing) 요법과 함께 사용될 수 있음이 고려된다.
활성 면역요법에서, 항원성 펩티드, 폴리펩티드 또는 단백질, 또는 자가 또는 동종이형 종양 세포 조성물 또는 "백신"은, 일반적으로 별개의 세균성 보강제와 함께 투여된다 (Ravindranath and Morton, 1991; Morton et al., 1992; Mitchell et al., 1990; Mitchell et al., 1993).
적응 면역요법에서, 환자의 혈중 (circulating) 림프구, 또는 종양 침윤 림프구가 시험관 내에서 분리되고, IL-2와 같은 림포카인에 의해 활성화되거나 종양 괴사를 위한 유전자로 형질도입되고, 재투여된다 (Rosenberg et al., 1988; 1989).
4. 수술
대략 암 환자의 60%는 어떤 유형의 수술을 받게 될 것이고, 이에는 예방, 진단 또는 병기, 치유, 및 완화 수술이 포함된다. 치유 수술은 본 발명의 치료, 화학요법, 방사선요법, 호르몬요법, 유전자요법, 면역요법 및/또는 대체 요법과 같은 다른 요법과 함께 사용될 수 있는 암 치료이다.
치유 수술은 암성 조직의 전부 또는 일부를 물리적으로 제거하고, 절개하고/하거나 파괴하는 절제를 포함한다. 종양 절제는 종양의 적어도 일부분의 물리적 제거를 지칭한다. 종양 절제에 더하여, 수술에 의한 치료에는 레이저 수술, 냉동수술 (cryosurgery), 전기수술, 및 현미경적 제어 수술 [모스 수술 (Mohs' surgery)]이 포함된다. 본 발명이 표재성 (superficial) 암, 전암, 또는 부수적 양의 정상 조직의 제거와 함께 사용될 수 있음이 추가로 고려된다.
암성 세포, 조직 또는 종양의 일부 또는 전체의 절제 시, 공동 (cavity)이 체내에 형성될 수 있다. 치료는 추가적인 항암 요법으로 관류, 직접 주사 또는 국소 부위 적용에 의해 달성될 수 있다. 이러한 치료는, 예를 들어 매 1, 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7일마다, 또는 매 1, 2, 3, 4, 및 5주마다 또는 매 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12개월마다 반복될 수 있다. 이들 치료는 또한 용량을 달리하여 이루어질 수 있다.
5. 기타 제제
기타 제제가 본 발명과 함께 사용될 수 있음이 고려된다. 이들 부가적인 제제에는 면역조절제, 세포 표면 수용체 및 갭 결합 (GAP junctions)의 상향조절에 영향을 미치는 제제, 세포증식 억제제 및 분화제, 세포부착 억제제, 과증식성 세포의 세포자멸 유도제에 대한 민감성을 증가시키는 제제, 또는 기타 생물학적 제제가 포함된다. 면역조절제에는 종양괴사인자; 인터페론 알파, 베타, 및 감마; IL-2 및 기타 사이토카인; F42K 및 기타 사이토카인 유사체; 또는 MIP-1, MIP-1β, MCP-1, RANTES, 및 기타 케모카인이 포함된다. 세포 표면 수용체 또는 이들의 리간드, 예컨대 Fas/Fas 리간드, DR4 또는 DR5/TRAIL (Apo-2 리간드)의 상향조절이 과증식성 세포에 대한 자가분비 또는 주위분비 효과의 확립에 의해 본 발명의 세포자멸 유도능을 증강시킬 수 있음이 추가로 고려된다. 갭 결합의 수를 증가시킴으로써 세포간 신호전달을 증가시키는 것은 이웃하는 과증식성 세포 집단에 대한 항-과증식성 효과를 증가시킬 것이다. 다른 실시양태에서, 세포증식 억제제 또는 분화제는 치료의 항-과증식성 효능을 향상시키기 위해 본 발명과 조합하여 사용될 수 있다. 세포부착 억제제는 본 발명의 효능을 향상시키는 것으로 고려된다. 세포부착 억제제의 예시는 국소 부착 키나아제 (FAKs) 억제제 및 로바스타틴이다. 항체 c225와 같은, 세포자멸에 대한 과증식성 세포의 민감성을 증가시키는 기타 제제가 치료 효능을 향상시키기 위하여 본 발명과 조합하여 사용될 수 있음이 추가로 고려된다.
세포독성 화학요법 약물의 도입을 수반하는 암 요법에 상당한 진보가 있었다. 그러나 화학요법의 한가지 결말은 약물-내성 표현형의 발생/획득 및 다약제 내성의 발생이다. 약물 내성의 발생은 이러한 종양의 치료에 있어 주된 장애물로 남게 되고, 따라서 유전자 요법과 같은 대안적인 접근법에 대한 명백한 요구가 존재한다.
화학요법, 방사선 치료 또는 생물학적 요법과 함께 사용하기 위한 또 다른 형태의 요법에는, 환자의 조직이 고온 (최대 106℉)에 노출되는 과정인 온열요법이 포함된다. 외부 또는 내부 가열 장치가 국소 (local), 부위 (regional), 또는 전신 온열요법의 적용에 포함될 수 있다. 국소 온열요법은 종양과 같은 작은 부위에의 적용을 포함한다. 열은 신체 외부의 장치로부터 종양을 표적하는 고주파를 이용하여 외면적으로 생성될 수 있다. 내부 열은 얇은, 가열된 전선 또는 온수가 채워진 중공 튜브를 포함하는 멸균 프로브, 이식된 마이크로파 안테나, 또는 무선주파 전극을 포함할 수 있다.
부위 요법을 위해 환자의 장기 또는 사지가 가열되는데, 이는 자석과 같이, 고에너지를 생산하는 장치를 사용하여 이루어진다. 대안적으로, 환자 혈액의 일부가 제거되어 내면적으로 가열될 부위로 관류되기 전에 가열된다. 암이 신체 도처에 확산된 경우에 전신 가열이 또한 실행될 수 있다. 온수 블랭킷, 핫 왁스 (hot wax), 유도 코일, 및 열 챔버가 이 목적을 위해 사용될 수 있다.
통상의 기술자는 문헌 ["Remington's Pharmaceutical Sciences" 15th Edition, chapter 33, 특히 pages 624-652]으로 유도된다. 투여량에 있어 약간의 변화가 처치되는 대상의 상태에 따라서 필연적으로 발생할 것이다. 투여 책임자는, 여하튼 개별 대상에 적합한 투여량을 결정할 것이다. 나아가, 인간 투여의 경우, 제조물은 FDA 사무국의 생물제제 표준에 의해 요구되는 바와 같은 무균, 발열원성, 일반적인 안전성 및 순도 표준을 충족하여야 한다.
전술한 요법들 중 어느 하나가 암을 치료하는데 유용함을 스스로 입증할 수 있음이 또한 지시되어야 한다.
6. 항생제
용어 "항생제"는 세균의 성장을 억제하거나 또는 세균을 사멸하는 것을 통해 세균 감염을 치료하는데 사용될 수 있는 약물이다. 이론에 구속됨이 없이, 항생제는 2개의 주된 종류로 분류될 수 있는 것으로 생각된다: 세균을 사멸하는 살균제 또는 세균의 성장을 둔화시키거나 방지하는 정균제.
일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 하나 이상의 부가적인 항생제와 조합하여 투여된다. 일부 실시양태에서, 항생제는 광범위한 종류에 속할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 또 다른 항생제와 함께 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 화합물은 특정 세균 유형을 표적하는 좁은 스펙트럼의 항생제와 함께 사용될 수 있다. 살균성 항생제의 일부 비제한적인 예시에는 페니실린, 세팔로스포린, 폴리믹신, 리파마이신, 리피라마이신, 퀴놀론, 및 설폰아미드가 포함된다. 정균성 항생제의 비-제한적인 예시에는 마크로라이드, 린코사마이드, 또는 테트라사이클린이 포함된다. 일부 실시양태에서, 항생제는 카나마이신 및 스트렙토마이신과 같은 아미노글리코시드, 리팍시민 및 겔다나마이신과 같은 안사마이신, 로라카르베프와 같은 카르바세펨, 에르타페넴, 이미페넴과 같은 카르바페넴, 세팔렉신, 세픽심, 세페핌, 및 세프토비프롤과 같은 세팔로스포린, 반코마이신 또는 테이코플라닌과 같은 글리코펩티드, 린코마이신 및 클린다마이신과 같은 린코사마이드, 답토마이신과 같은 리포펩티드, 클라리쓰로마이신, 스피라마이신, 아지쓰로마이신, 및 텔리쓰로마이신과 같은 마크로리드, 아즈트레오남과 같은 모노박탐, 퓨라졸리돈 및 니트로퓨란토인과 같은 니트로퓨란, 리네졸리드와 같은 옥사졸리돈, 아목시실린, 아즐로실린, 플루클록사실린, 및 페니실린 G와 같은 페니실린, 바시트라신, 폴리믹신 B, 및 콜리스틴과 같은 항생제 폴리펩티드, 시프로플록사신, 레보플록사신, 및 가티플록사신과 같은 퀴놀론, 실버 설파디아진, 메페니드, 설파디메톡신, 또는 설파살라진과 같은 설폰아미드, 또는 데메클로사이클린, 독시사이클린, 미노사이클린, 옥시테트라사이클린, 또는 테트라사이클린과 같은 테트라사이클린이다. 일부 실시양태에서, 본 화합물은 시클로세린, 카프레오마이신, 에티온아미드, 리팜피신, 리파부틴, 리파펜틴, 및 스트렙토마이신과 같이 미코박테리아에 작용하는 약물과 조합될 수 있다. 조합 요법을 위해 고려되는 기타 항생제에는 아르스펜아민, 클로람페니콜, 포스포마이신, 푸시딘산, 메트로니다졸, 무피로신, 플라텐시마이신, 퀴누프리스틴, 달포프리스틴, 티암페니콜, 티게사이클린, 티니다졸, 또는 트리메토프림이 포함될 수 있다.
IV. 합성 방법
일부 측면에서, 본 발명의 화합물은 본 출원에 기술된 바와 같은 유기 화학의 방법을 이용하여 합성될 수 있다. 이들 방법은 통상의 기술자에 의해 적용되는 바와 같은 유기 화학의 원리 및 기술을 이용하여 추가로 변형되고 최적화될 수 있다. 이러한 원리 및 기술은, 예를 들어 본원에 참조로서 포함되는, 문헌 [March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure (2007)]에 교시된다.
1. 공정 스케일업
본원에 기술된 합성 방법은 통상의 기술자에 의해 적용되는 바와 같은 공정 화학의 원리 및 기술을 이용하여, 배치 또는 연속의 어느 하나로, 제조-규모, 파일럿-규모 또는 대규모 생산을 위해 추가로 변형되고 최적화될 수 있다. 이러한 원리 및 기술은, 예를 들어 본원에 참조로서 포함되는, 문헌 [Practical Process Research & Development (2000)]에 교시된다. 본원에 기술된 합성 방법은 운시알라마이신 및 그의 유도체의 제조 규모 양을 생산하기 위해 사용될 수 있다.
2. 화학적 정의
화학적 기의 문맥에서 사용되는 경우: "수소"는 -H를 의미하고; "히드록시"는 -OH를 의미하고; "옥소"는 =O를 의미하고; "카보닐"은 -C(=O)-를 의미하고; "카르복시"는 -C(=O)OH (-COOH 또는 -CO2H로도 기재됨)를 의미하고; "할로"는 독립적으로 -F, -Cl, -Br 또는 -I를 의미하고; "아미노"는 -NH2를 의미하고; "히드록시아미노"는 -NHOH를 의미하고; "니트로"는 -NO2를 의미하고; "이미노"는 =NH를 의미하고; "시아노"는 -CN을 의미하고; "이소시아네이트"는 -N=C=O를 의미하고; "아지도"는 -N3을 의미하고; 1가의 문맥에서 "포스페이트"는 -OP(O)(OH)O 또는 이의 탈양자화 형태를 의미하고; "머캅토"는 -SH를 의미하고; "티오"는 =S를 의미하고; "설포닐"은 -S(O)2를 의미하고; "설피닐"은 -S(O)를 의미한다.
화학식의 문맥에서, 기호 "-"는 단일 결합을 의미하고, "="는 이중 결합을 의미하고, "≡"은 삼중 결합을 의미한다. 기호 "
Figure pct00112
"는 선택적 결합을 나타내고, 이는 존재하는 경우 단일 또는 이중 결합 중 어느 하나이다. 기호 "
Figure pct00113
"는 단일 결합 또는 이중 결합을 나타낸다. 따라서, 예를 들어, 화학식
Figure pct00114
에는
Figure pct00115
,
Figure pct00116
,
Figure pct00117
,
Figure pct00118
및
Figure pct00119
가 포함된다. 또한 이러한 고리 원자의 어느 것도 1개 초과의 이중 결합의 일부를 형성하지 않는 것으로 이해된다. 나아가, 공유 결합 기호 "-"는, 하나 또는 두 개의 입체성 (stereogenic) 원자를 연결할 때, 임의의 바람직한 입체화학을 나타내지 않는 것으로 지시된다. 대신에, 이는 이들의 혼합물뿐만 아니라 모든 입체이성체를 포함한다. 기호 "
Figure pct00120
"는, 결합을 수직으로 그리는 경우 (예컨대, 메틸의 경우
Figure pct00121
), 상기 기의 부착 지점을 나타낸다. 부착 지점은 판독기가 부착 지점을 명백하게 식별하는 것을 보조하기 위해 더 큰 기들에 대해서 단지 이러한 방식으로만 전형적으로 식별되는 것이 주목된다. 기호 "
Figure pct00122
"는 상기 웨지 (wedge)의 두꺼운 말단에 부착된 기가 "그 페이지로부터 벗어나 있는 (out of the page)" 단일 결합을 의미한다. 기호 "
Figure pct00123
"는 상기 웨지의 두꺼운 말단에 부착된 기가 "그 페이지에 속해 있는 (into the page)" 단일 결합을 의미한다. 기호 "
Figure pct00124
"는 이중 결합 주변의 기하학 (예컨대, E 또는 Z 중 어느 하나)이 정의되지 않은 단일 결합을 의미한다. 따라서, 이들의 조합뿐만 아니라 두 경우 모두가 의도된다. 본 출원에 나타낸 구조의 원자에 대한 정의되지 않은 원자가는 절대적으로 그 원자에 결합된 수소 원자를 나타낸다. 탄소 원자 상의 굵은 점은 그 탄소에 부착된 수소가 종이 평면의 외부로 배향되는 것을 나타낸다.
기 "R"이 고리 시스템, 예를 들어 하기 화학식에서 "부유 기 (floating group)"로 묘사되는 경우:
Figure pct00125
,
그러면 R은, 안정한 구조가 형성되는 한, 묘사되고, 암시되거나 명백하게 정의된 수소를 포함하는 임의의 고리 원자에 부착된 임의의 수소 원자를 대체할 수 있다. 기 "R"이 융합된 고리 시스템, 예를 들어 하기 화학식에서 "부유 기"로 묘사되는 경우:
Figure pct00126
,
그러면 R은 달리 특정되지 않는 한 융합된 고리들 중 하나의 임의의 고리 원자에 부착된 임의의 수소를 대체할 수 있다. 대체가능한 수소에는, 안정한 구조가 형성되는 한, 묘사된 수소 (예컨대, 상기 화학식에서 질소에 부착된 수소), 암시된 수소 (예컨대, 보이지는 않지만 존재하는 것으로 이해되는 상기 화학식의 수소), 명백히 정의된 수소, 및 그의 존재가 고리 원자의 정체에 의존하는 선택적 수소 (예컨대, -X가 -CH와 같은 경우 기 X에 부착된 수소)가 포함된다. 묘사된 예시에서, R은 융합된 고리 시스템의 5-원 또는 6-원 고리 중 하나 위에 존재할 수 있다. 상기 화학식에서, 괄호 안에 기재된 기 "R"에 바로 이어지는 아래 첨자 "y"는 변수를 나타낸다. 달리 특정되지 않는 한, 이 변수는 0, 1, 2, 또는 2를 초과하는 임의의 정수일 수 있고, 이는 고리 또는 고리 시스템의 대체가능한 수소 원자의 최대 개수에 의해서만 제한된다.
하기의 기 및 종류의 경우, 이어지는 괄호의 아래 첨자는 하기와 같이 그 기/종류를 추가로 정의한다: "(Cn)"은 기/종류에서 탄소 원자의 정확한 개수 (n)을 정의한다. "(C≤n)"은 당해 기에 대해 가능한 적은 최소 개수를 갖는, 기/종류에 존재할 수 있는 탄소 원자의 최대 개수 (n)을 정의하고, 예컨대, 기 "알케닐(C≤8)" 또는 종류 "알켄 (C≤8)"에서 탄소 원자의 최소 개수는 2개인 것으로 이해된다. 예를 들어, "알콕시(C≤10)"는 1 내지 10개 탄소 원자를 갖는 그러한 알콕시 기를 지정한다. (Cn-n')은 그 기에서 최소 (n) 및 최대 (n') 개수 둘 모두의 탄소 원자를 정의한다. 유사하게, "알킬(C2-10)"은 2 내지 10개 탄소 원자를 갖는 그러한 알킬 기를 지정한다. 나아가, 탄소 한정은 또한 이 변수 앞에 범위로서 표현될 수 있다. 예를 들어, C6-C12 아릴은 최소 6개의 탄소 원자 및 최대 12개의 탄소 원자를 갖는 아릴 기를 나타낸다. 통상의 기술자는 탄소 한정의 이러한 표현 모두가 동일하거나 호환적으로 사용될 수 있음을 인식할 것이다.
본원에 사용된 바와 같이 용어 "포화된"은, 하기에 지시된 경우를 제외하고는, 탄소-탄소 이중 결합 및 탄소-탄소 삼중 결합을 갖지 않는 그렇게 변형된 화합물 또는 기를 의미한다. 포화된 기의 치환된 버전의 경우에, 하나 이상의 탄소 산소 이중 결합 또는 탄소 질소 이중 결합이 존재할 수 있다. 이러한 결합이 존재하는 경우, 그러면 케토-에놀 호변이성 또는 이민/엔아민 호변이성의 일부로서 일어날 수 있는 탄소-탄소 이중 결합이 배제되지 않는다.
"치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "지방족"은 그렇게 변형된 화합물/기가 비-시클릭 (acyclic) 또는 시클릭이지만, 비-방향족 탄화수소 화합물 또는 기인 것을 의미한다. 지방족 화합물/기에서, 탄소 원자는 직쇄, 분지쇄, 또는 비-방향족 고리 (알리시클릭, alicyclic)로 함께 연결될 수 있다. 지방족 화합물/기는 단일 결합 (알칸/알킬)에 의해 연결되어 포화될 수 있는 있거나, 또는 하나 이상의 이중 결합 (알켄/알케닐) 또는 하나 이상의 삼중 결합 (알킨/알키닐)으로, 불포화될 수 있다.
"치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "알킬"은 부착 지점으로서 탄소 원자를 갖고, 선형 또는 분지된, 시클로, 시클릭 또는 비-시클릭 구조를 가지며, 탄소 및 수소 이외의 다른 원자는 갖지 않는 1가 포화된 지방족 기를 지칭한다. 따라서, 본원에 사용된 바와 같이 시클로알킬은, 부착 지점을 형성하는 탄소 원자를 가지며, 또한 시클로알킬 기가 탄소 및 수소 이외의 다른 원자로 이루어지지 않은 하나 이상의 비-방향족 고리 구조의 일원인 알킬의 아집단이다. 본원에 사용된 바와 같이, 이 용어는 고리 또는 고리 시스템에 부착된 하나 이상의 알킬 기 (탄소 수 한정 허용)의 존재를 배제하지 않는다. 기 -CH3 (Me), -CH2CH3 (Et), -CH2CH2CH3 (n-Pr 또는 프로필), -CH(CH3)2 (iPr, i Pr 또는 이소프로필), -CH(CH2)2 (시클로프로필), -CH2CH2CH2CH3 (n-Bu), -CH(CH3)CH2CH3 (sec-부틸), -CH2CH(CH3)2 (이소부틸), -C(CH3)3 (tert-부틸, t-부틸, tBu 또는 t Bu), -CH2C(CH3)3 (neo-펜틸), 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 및 시클로헥실메틸이 알킬 기의 비-제한적인 예시이다. "치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "알칸디일"은, 부착 지점(들)로서 하나 또는 두 개의 포화된 탄소 원자(들)를 갖고, 선형 또는 분지된, 시클로, 시클릭 또는 비-시클릭 구조를 가지며, 탄소-탄소 이중 결합 또는 삼중 결합을 갖지 않고, 탄소 및 수소 이외의 다른 원자는 갖지 않는, 2가 포화된 지방족 기를 지칭한다. 기, -CH2- (메틸렌), -CH2CH2-, -CH2C(CH3)2CH2-, -CH2CH2CH2-, 및
Figure pct00127
가 알칸디일 기의 비-제한적인 예시이다. "치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "알킬리덴"은, R 및 R'이 독립적으로 수소, 알킬이거나, 또는 R 및 R'이 함께 취해지는 2가 기 =CRR'을 지칭한다. 알킬리덴 기의 비-제한적인 예시에는: =CH2, =CH(CH2CH3), 및 =C(CH3)2이 포함된다. "알칸"은, R이 상기에 정의된 바와 같은 알킬인, 화합물 H-R을 지칭한다. 이들 용어 중 어느 하나가 "치환된" 수식어와 함께 사용되는 경우, 하나 이상의 수소 원자는 독립적으로 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2로 대체되어 있다. 하기 기들은 치환된 알킬 기의 비-제한적인 예시이다: -CH2OH, -CH2Cl, -CF3, -CH2N, -CH2C(O)OH, -CH2C(O)OCH3, -CH2C(O)NH2, -CH2C(O)CH3, -CH2OCH3, -CH2OC(O)CH3, -CH2NH2, -CH2N(CH3)2, 및 CH2CH2Cl. 용어 "할로알킬"은, 하나 이상의 수소 원자가 할로 기로 치환되어 있고 탄소, 수소 및 할로겐을 제외한 다른 원자가 존재하지 않는, 치환된 알킬의 아집단이다. 기, -CH2Cl은 할로알킬의 비-제한적인 예시이다. 용어 "플루오로알킬"은, 하나 이상의 수소가 플루오로 기로 치환되어 있고 탄소, 수소 및 플루오르를 제외한 다른 원자가 존재하지 않는, 치환된 알킬의 아집단이다. 기, -CH2F, -CF3, 및 -CH2CF3은 플루오로알킬 기의 비-제한적인 예시이다.
"치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "알케닐"은 부착 지점으로서 탄소 원자를 갖고, 선형 또는 분지된, 시클로, 시클릭 또는 비-시클릭 구조를 가지며, 적어도 하나의 비-방향족 탄소-탄소 이중 결합을 갖고, 탄소-탄소 삼중 결합을 갖지 않으며, 탄소 및 수소 이외의 원자를 갖지 않는, 1가 불포화 지방족 기를 지칭한다. 알케닐 기의 비-제한적인 예시에는: -CH=CH2 (비닐), -CH=CHCH3, -CH=CHCH2CH3, -CH2CH=CH2 (알릴), -CH2CH=CHCH3, 및 -CH=CHCH=CH2가 포함된다. "치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "알켄디일"은, 부착 지점으로서 2개의 탄소 원자를 갖고, 선형 또는 분지된, 시클로, 시클릭 또는 비-시클릭 구조를 가지며, 적어도 하나의 비-방향족 탄소-탄소 이중 결합을 갖고, 탄소-탄소 삼중 결합을 갖지 않으며, 탄소 및 수소 이외의 원자를 갖지 않는, 2가 불포화 지방족 기를 지칭한다. 기, -CH=CH-, -CH=C(CH3)CH2-, -CH=CHCH2-, 및
Figure pct00128
는 알켄디일 기의 비-제한적인 예시이다. 알켄디일 기는 지방족이지만, 일단 양 말단이 연결되면, 이 기는 방향족 구조의 일부를 형성하는 것이 배제되지 않는 것으로 지시된다. 용어 "알켄" 또는 "올레핀"은 동의어이고, R이 상기에 정의된 바와 같은 알케닐인, 화학식 H-R을 갖는 화합물을 지칭한다. "말단 알켄"은 단 하나의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 알켄을 지칭하는데, 이 결합은 상기 분자의 일 말단에 비닐 기를 형성한다. 이 용어들 중 어느 하나가 "치환된" 수식어와 함께 사용되는 경우, 하나 이상의 수소 원자는 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2로 독립적으로 대체되어 있다. 기, -CH=CHF, -CH=CHCl 및 -CH=CHBr은 치환된 알케닐 기의 비-제한적인 예시이다.
"치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "알키닐"은, 부착 지점으로서 탄소 원자를 갖고, 선형 또는 분지된, 시클로, 시클릭 또는 비-시클릭 구조를 가지며, 적어도 하나의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖고, 탄소 및 수소가 아닌 원자는 갖지 않는, 1가 불포화 지방족 기를 지칭한다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 알키닐은 하나 이상의 비-방향족 탄소-탄소 이중 결합의 존재를 배제하지 않는다. 기, -C≡CH, -C≡CCH3, 및 -CH2C≡CCH3은 알키닐 기의 비-제한적인 예시이다. "알킨"은 R이 알키닐인 화합물 H-R을 지칭한다. 이 용어들 중 어느 하나가 "치환된" 수식어와 함께 사용되는 경우, 하나 이상의 수소 원자는 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2로 독립적으로 대체되어 있다.
"치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "아릴"은, 부착 지점으로서 방향족 탄소 원자를 갖고, 상기 탄소 원자가 하나 이상의 6-원 방향족 고리 구조의 일부를 형성하는 1가 불포화 방향족 기를 지칭하고, 여기서 상기 고리 원자는 모두 탄소이고, 이 기는 탄소 및 수소가 아닌 원자로 이루어지지 않는다. 1개 초과의 고리가 존재하는 경우, 이들 고리는 융합되거나 비-융합될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, 이 용어는 존재하는 제1 방향족 고리 또는 임의의 부가적인 방향족 고리에 부착된 하나 이상의 알킬 또는 아르알킬 기 (탄소 수 한정 허용)의 존재를 배제하지 않는다. 아릴 기의 비-제한적인 예시에는 페닐 (Ph), 메틸페닐, (디메틸)페닐, -C6H4CH2CH3 (에틸페닐), 나프틸, 및 비페닐로부터 유래된 1가 기가 포함된다. "치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "아렌디일 (arenediyl)"은, 부착 지점으로서 2개의 방향족 탄소 원자을 갖고, 상기 탄소 원자가 하나 이상의 6-원 방향족 고리 구조(들)의 일부를 형성하는 2가 방향족 기를 지칭하며, 여기서 상기 고리 원자는 모두 탄소이고, 1가 기는 탄소 및 수소가 아닌 원자로 이루어지지 않는다. 본원에 사용된 바와 같이, 이 용어는 존재하는 제1 방향족 고리 또는 임의의 부가적인 방향족 고리에 부착된 하나 이상의 알킬, 아릴 또는 아르알킬 기 (탄소 수 한정 허용)의 존재를 배제하지 않는다. 1개 초과의 고리가 존재하는 경우, 이들 고리는 융합되거나 비-융합될 수 있다. 비-융합된 고리는 하기의 하나 이상을 통해 연결될 수 있다: 공유 결합, 알칸디일, 또는 알켄디일 기 (탄소 수 한정 허용). 아렌디일 기의 비-제한적인 예시에는 하기가 포함된다:
Figure pct00129
,
Figure pct00130
,
Figure pct00131
,
Figure pct00132
Figure pct00133
,
Figure pct00134
, 및
Figure pct00135
.
"아렌"은 R이 상기에 정의된 바와 같은 아릴인 화합물 H-R을 지칭한다. 벤젠 및 톨루엔은 아렌의 비-제한적인 예시이다. 이들 용어 중 어느 하나가 "치환된" 수식어와 함께 사용되는 경우, 하나 이상의 수소 원자는 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2로 독립적으로 대체되어 있다.
"치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "아르알킬"은, 용어 알칸디일 및 아릴이 각각 상기에 제공된 정의와 일치하는 방식으로 사용되는 1가 기 -알칸디일-아릴을 지칭한다. 아르알킬의 비-제한적인 예시는: 페닐메틸 (벤질, Bn) 및 2-페닐-에틸이다. 용어 아르알킬이 "치환된" 수식어와 함께 사용되는 경우, 알칸디일 및/또는 아릴 기로부터의 하나 이상의 수소 원자는 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2로 대체되어 있다. 치환된 아르알킬의 비-제한적인 예시는: (3-클로로페닐)-메틸, 및 2-클로로-2-페닐-에티-1-일.
"치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "헤테로아릴"은, 부착 지점으로서 방향족 탄소 원자 또는 질소 원자를 갖고, 상기 탄소 원자 또는 질소 원자가 하나 이상의 방향족 고리 구조의 일부를 형성하는 1가 방향족 기를 지칭하는데, 여기서 고리 원자의 적어도 하나는 질소, 산소 또는 황이고, 헤테로아릴 기는 탄소, 수소, 방향족 질소, 방향족 산소 및 방향족 황이 아닌 다른 원자로 이루어지지 않는다. 1개 초과의 고리가 존재하는 경우, 이들 고리는 융합되거나 비-융합될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, 이 용어는 방향족 고리 또는 방향족 고리 시스템에 부착된 하나 이상의 알킬, 아릴, 및/또는 아르알킬 기 (탄소 수 한정 허용)의 존재를 배제하지 않는다 헤테로아릴 기의 비-제한적인 예시에는 푸라닐, 이미다졸일, 인돌일, 인다졸일 (Im), 이속사졸일, 메틸피리디닐, 옥사졸일, 페닐피리디닐, 피리디닐, 피롤릴, 피리디미닐, 피라지닐, 퀴놀일, 퀴나졸일, 퀴녹살리닐, 트리아지닐, 테트라졸일, 티아졸일, 티에닐, 및 트리아졸일이 포함된다. 용어 "N-헤테로아릴"은 부착 지점으로서 질소 원자를 갖는 헤테로아릴 기를 지칭한다. "치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "헤테로아렌디일"은, 2개의 부착 지점으로서 2개의 방향족 탄소 원자, 2개의 방향족 질소 원자, 또는 1개의 방향족 탄소 원자 및 1개의 방향족 질소 원자를 갖고, 상기 원자가 하나 이상의 방향족 고리 구조(들)를 형성하는 2가 방향족 기를 지칭하는데, 여기서 고리 원자의 적어도 하나는 질소, 산소 또는 황이고, 2가 기는 탄소, 수소, 방향족 질소, 방향족 산소 및 방향족 황 이외의 다른 원자로 이루어지지 않는다. 1개 초과의 고리가 존재하는 경우, 이들 고리는 융합되거나 비-융합될 수 있다. 비-융합된 고리는 하기의 하나 이상을 통해 연결될 수 있다: 공유 결합, 알칸디일, 또는 알켄디일 기 (탄소 수 한정 허용). 본원에 사용된 바와 같이, 이 용어는 방향족 고리 또는 방향족 고리 시스템에 부착된 하나 이상의 알킬, 아릴, 및/또는 아르알킬 기 (탄소 수 한정 허용)의 존재를 배제하지 않는다. 헤테로아렌디일 기의 비-제한적인 예시에는 하기가 포함된다:
Figure pct00136
,
Figure pct00137
및
Figure pct00138
.
"헤테로아렌"은 R이 헤테로아릴인 화합물 H-R을 지칭한다. 피리딘 및 퀴놀린이 헤테로아렌의 비-제한적인 예시이다. 이들 용어가 "치환된" 수식어와 함께 사용되는 경우, 하나 이상의 수소 원자는 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2로 독립적으로 대체되어 있다. 이들 용어가 "치환된" 수식어와 함께 사용되는 경우, 헤테로원자 상의 하나 이상의 수소 원자는 적합한 보호기로 대체되어 있고, 예를 들어 아민에 결합된 수소 원자는 이 기가 정의된 바와 같은 아민 보호기로 대체될 수 있다.
"치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "헤테로시클로알킬"은 부착 지점으로서 탄소 원자 또는 질소 원자를 갖고, 상기 탄소 원자 또는 질소 원자는 하나 이상의 비-방향족 고리 구조의 일부를 형성하는 1가 비-방향족 기를 지칭하는데, 여기서 고리 원자의 적어도 하나는 질소, 산소 또는 황이고, 헤테로시클로알킬 기는 탄소, 수소, 질소, 산소 및 황 이외의 다른 원자로 이루어지지 않는다. 1개 초과의 고리가 존재하는 경우, 이들 고리는 융합되거나 비-융합될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, 이 용어는 고리 또는 고리 시스템에 부착된 하나 이상의 알킬 기 (탄소 수 한정 허용)의 존재를 배제하지 않는다. 또한, 그 결과 기가 비-방향족으로 남는다는 전제하에서, 이 용어는 고리 또는 고리 시스템 내 하나 이상의 이중 결합의 존재를 배제하지 않는다. 해테로시클로알킬 기의 비-제한적인 예시에는 아지리디닐, 아제티디닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 테트라히드로퓨라닐, 테트라히드로티오푸라닐, 테트라히드로피라닐, 피라닐, 옥시라닐, 및 옥세타닐이 포함된다. 용어 "N-헤테로시클로알킬"은 부착 지점으로서 질소 원자를 갖는 헤테로시클로알킬을 지칭한다. "치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "헤테로시클로알칸디일"은, 2개의 부착 지점으로서 2개의 탄소 원자, 2개의 질소 원자, 또는 1개의 탄소 원자 및 1개의 질소 원자를 갖고, 상기 원자가 하나 이상의 고리 구조(들)를 형성하는 2가 시클릭 기를 지칭하는데, 여기서 고리 원자의 적어도 하나는 질소, 산소 또는 황이고, 2가 기는 탄소, 수소, 질소, 산소 및 황 이외의 다른 원자로 이루어지지 않는다. 1개 초과의 고리가 존재하는 경우, 이들 고리는 융합되거나 비-융합될 수 있다. 비-융합된 고리는 하기의 하나 이상을 통해 연결될 수 있다: 공유 결합, 알칸디일, 또는 알켄디일 기 (탄소 수 한정 허용). 본원에 사용된 바와 같이, 이 용어는 고리 또는 고리 시스템에 부착된 하나 이상의 알킬 기 (탄소 수 한정 허용)의 존재를 배제하지 않는다. 또한, 그 결과 기가 비-방향족으로 남는다는 전제하에서, 이 용어는 고리 또는 고리 시스템 내 하나 이상의 이중 결합의 존재를 배제하지 않는다. 헤테로시클로알칸디일 기의 비-제한적인 예시에는 하기가 포함된다:
Figure pct00139
,
Figure pct00140
, 및
Figure pct00141
.
이들 용어가 "치환된" 수식어와 함께 사용되는 경우, 하나 이상의 수소 원자는 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, -S(O)2NH2, 또는 -C(O)OC(CH3)3 (tert-부틸옥시카보닐, BOC)로 독립적으로 대체되어 있다. 이들 용어가 "치환된" 수식어와 함께 사용되는 경우, 헤테로원자 상의 하나 이상의 수소 원자는 적합한 보호기로 대체되어 있고, 예를 들어 아민에 결합된 수소 원자는 그 기가 정의된 바와 같은 아민 보호기로 대체될 수 있다.
"치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "아실"은, R이 상기에 정의된 바와 같은 수소, 알킬, 아릴, 아르알킬 또는 헤테로아릴인, 기 -C(O)R을 지칭한다. 기, -CHO, -C(O)CH3 (아세틸, Ac), -C(O)CH2CH3, -C(O)CH2CH2CH3, -C(O)CH(CH3)2, -C(O)CH(CH2)2, -C(O)C6H5, -C(O)C6H4CH3, -C(O)CH2C6H5, -C(O)(이미다졸일)이 아실 기의 비-제한적인 예시이다. "티오아실"은 기 -C(O)R의 산소 원자가 황 원자, -C(S)R로 대체되어 있는 것을 제외하고는 유사한 방식으로 정의된다. 용어 "알데히드"는 상기에 정의된 바와 같은, 알칸에 상응하는데, 여기서 수소 원자의 적어도 하나는 -CHO 기로 대체되어 있다. 이들 용어가 "치환된" 수식어와 함께 사용되는 경우, 하나 이상의 수소 원자 (만약에 존재하는 경우, 카보닐 또는 티오카보닐 기에 직접적으로 부착된 수소 원자를 포함함)는 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2로 독립적으로 대체되어 있다. 기, -C(O)CH2CF3, -CO2H (카르복실), -CO2CH3 (메틸카르복실), -CO2CH2CH3, -C(O)NH2 (카르바모일), 및 -CON(CH3)2이 치환된 아실 기의 비-제한적인 예시이다.
"치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "알콕시"는 R이 상기에 정의된 바와 같은 알킬인, 기 -OR을 지칭한다. 알콕시 기의 비-제한적인 예시에는: -OCH3 (메톡시), -OCH2CH3 (에톡시), -OCH2CH2CH3, -OCH(CH3)2 (이소프로폭시), -OC(CH3)3 (tert-부톡시), -OCH(CH2)2, -O-시클로펜틸, 및 -O-시클로헥실이 포함된다. "치환된" 수식어 없이 사용되는 경우, 용어 "알케닐옥시", "알키닐옥시", "아릴옥시", "아르알콕시", "헤테로아릴옥시", "헤테로시클로알콕시", 및 "아실옥시"는 R이 각각 알케닐, 알키닐, 아릴, 아르알킬, 헤테로아릴, 헤테로시클로알킬, 및 아실인, -OR로서 정의되는, 기를 지칭한다. 용어 "알콕시디일"은 2가 기 -O-알칸디일-, -O-알칸디일-O-, 또는 -알칸디일-O-알칸디일-을 지칭한다. "치환된" 수식어 없이 사용되는 경우, 용어 "알킬티오" 및 "아실티오"는 R이 각각 알킬 및 아실인, 기 -SR을 지칭한다. 용어 "알코올"은 상기에 정의된 바와 같은, 알칸에 상응하는데, 여기서 수소 원자의 적어도 하나는 히드록시 기로 대체되어 있다. 용어 "에테르"는 상기에 정의된 바와 같은, 알칸에 상응하는데, 여기서 수소 원자의 적어도 하나는 알콕시 기로 대체되어 있다. 이들 용어 중 어느 하나가 "치환된" 수식어와 함께 사용되는 경우, 하나 이상의 수소 원자는 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2로 독립적으로 대체되어 있다.
"치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "알킬아미노"는 R이 상기에 정의된 바와 같은 알킬인, 기 -NHR을 지칭한다. 알킬아미노 기의 비-제한적인 예시에는: -NHCH3 및 -NHCH2CH3이 포함된다. "치환된" 수식어 없이 사용되는 경우, 용어 "디알킬아미노"는, R 및 R'이 같거나 상이한 알킬 기이거나, 또는 R 및 R'이 함께 취해져 알칸디일을 나타내는, 기 -NRR'을 지칭한다. 디알킬아미노 기의 비-제한적인 예시에는: -N(CH3)2, -N(CH3)(CH2CH3), 및 N-피롤리디닐이 포함된다. "치환된" 수식어 없이 사용되는 경우, 용어 "알콕시아미노", "알케닐아미노", "알키닐아미노", "아릴아미노", "아르알킬아미노", "헤테로아릴아미노", "헤테로시클로알킬아미노" 및 "알킬설포닐아미노"는, R이 각각 알콕시, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아르알킬, 헤테로아릴, 헤테로시클로알킬, 및 알킬설포닐인, -NHR로 정의되는 기를 지칭한다. 아릴아미노 기의 비-제한적인 예시는 -NHC6H5이다. "치환된" 수식어 없이 사용되는 경우, 용어 "아미도" (아실아미노)는, R이 상기에 정의된 바와 같은 아실인, 기 -NHR을 지칭한다. 아미도 기의 비-제한적인 예시는 -NHC(O)CH3이다. "치환된" 수식어 없이 사용되는 경우, 용어 "알킬이미노"는 R이 상기에 정의된 바와 같은 알킬인, 2가 기 =NR을 지칭한다. 용어 "알킬아미노디일"은 2가 기 -NH-알칸디일-, -NH-알칸디일-NH-, 또는 -알칸디일-NH-알칸디일-을 지칭한다. 이들 용어 중 어느 하나가 "치환된" 수식어와 함께 사용되는 경우, 하나 이상의 수소 원자는 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, -S(O)2NH2로 독립적으로 대체되어 있거나 또는 질소 원자에 직접적으로 부착된 수소 원자의 하나 이상은 아민 보호기이다. 기 -NHC(O)OCH3 및 -NHC(O)NHCH3은 치환된 아미도 기의 비-제한적인 예시이다. 용어 알킬아민, 디알킬아미노 또는 트리알킬아민은 기가 각각 NH2R, NHRR', 또는 NRR'R'' (여기서 R, R', 및 R''은 상기에 정의된 바와 같은 알킬임)인 화합물을 나타낸다.
"치환된" 수식어 없이 사용되는 경우, 용어 "알킬설포닐" 및 "알킬설피닐"은 R이 상기에 정의된 바와 같은 알킬인, 기 -S(O)2R 및 -S(O)R을 각각 지칭한다. 용어 "알케닐설포닐", "알키닐설포닐", "아릴설포닐", "아르알킬설포닐", "헤테로아릴설포닐", 및 "헤테로시클로알킬설포닐"은 그러한 용어들이 상기에 정의된 바와 유사한 방식으로 정의된다. 이들 용어 중 어느 하나가 "치환된" 수식어와 함께 사용되는 경우, 하나 이상의 수소 원자는 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, 또는 -S(O)2NH2로 독립적으로 대체되어 있다.
"치환된" 수식어 없이 사용되는 경우 용어 "알킬실릴"은, R, R' 및 R''이 같거나 상이한 알킬 기일 수 있거나, 또는 R, R' 및 R''의 2개의 임의의 조합이 함께 취해져 알칸디일을 나타낼 수 있는, -SiH2R, -SiHRR', 또는 -SiRR'R''으로 정의되는, 1가 기를 지칭한다. 기, -SiH2CH3, -SiH(CH3)2, -Si(CH3)3 및 -Si(CH3)2C(CH3)3,은 비-치환된 알킬실릴 기의 비-제한적인 예시이다. 용어 "치환된 알킬실릴"은, R, R' 및 R''의 적어도 하나가 치환된 알킬이거나 또는 R, R' 및 R''의 2개가 함께 취해져 치환된 알칸디일을 나타내는, -SiH2R, -SiHRR', 또는 -SiRR'R''을 지칭한다. R, R' 및 R''의 1개 초과가 치환된 알킬인 경우, 이들은 같거나 상이할 수 있다. 치환된 알킬 또는 치환된 알칸디일의 어느 것도 아닌 R, R' 및 R''의 임의의 하나는 같거나 상이한 알킬이거나, 또는 이들은 함께 취해져 2개 이상의 포화된 탄소 원자를 갖고, 이들 중 적어도 2개가 실리콘 원자에 부착된 알칼디일을 나타낼 수 있다. 용어 "아릴실릴" 또는 "아르알킬실릴"은 R, R', 또는 R''의 적어도 하나가 이들 기가 상기에 정의된 바와 같은 아릴 또는 아르알킬인 상기에 정의된 바와 같은 기를 지칭한다.
"아미노산"은 동일한 선형 탄소 골격 상에 -CO2H 및 -NH2 기를 함유하는 관능기이다. 이의 바람직한 실시양태에서, 용어 "아미노산"은 자연적으로 발생하거나 상업적으로 이용가능한 아미노산뿐만 아니라 이들의 에난티오머 및 부분입체이성체의 하나를 지칭한다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "아미노산 잔기"는 아민 기 및 카르복실레이트 기 둘 모두를 통해 연결된 2가 아미노산을 지칭하는데, 상기 기들은 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, -NHC(O)NH2, -NHC(NH)NH2, 또는 -S(O)2NH2로 선택적으로 치환되어 있는 알칸디일(C≤6), 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 또는 화학적 기 상의 하나 이상의 수소 원자가 -OH, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3, -NHC(O)NH2, -NHC(NH)NH2, 또는 -S(O)2NH2로 치환되어 있는, 임의의 이들 기의 치환된 버전, 예컨대
Figure pct00142
에 의해 연결된다. 일부 실시양태에서, 아미노산 잔기는 카보닐 및 아민이 단일 탄소에 의해 결합되도록 알칸디일이 메틸렌인 α-아미노산이다. 나아가,
"링커"는 2개의 분자가 함께 연결되도록 상이한 상대성에 의해서든 보호기의 사용에 의해서든 어느 하나에 의해 다른 하나와 독립적으로 그 분자의 각 말단의 반응을 허용하는 이관능성 화학적 기이다. 링커의 비-제한적인 예시에는 폴리펩티드, 고분자, 올리고뉴클레오티드, 아미노산, 폴리에틸렌 글리콜, 에틸렌디아민, 또는 에탄올아민이 포함된다.
본 출원의 문맥 내에서 "염기"는 단 한 쌍의 전자를 갖는 화합물이다. 염기의 비-제한적인 예시에는 트리에틸아민, 금속 수산화물, 금속 수소화물, 또는 금속 알칸이 포함될 수 있다. 알킬리튬은 화학식 알킬(C≤12)-Li의 화합물이다. 질소성 염기는 알킬아민, 디알킬아민, 트리알킬아민, 헤테로시클로알칸 함유 질소, 또는 염기가 양성자를 수용하여 양으로 하전된 종을 형성할 수 있는 헤테로아렌이다. 일부 비-제한적인 예시에는 4,4-디메틸피리딘, 피리딘, 피페리딘, 1,8-디아자비시클로 [5.4.0]운데스-7-엔, 디이소프로필에틸아민, 또는 트리에틸아민일 수 있는 질소성 염기가 포함된다.
본 출원의 문맥 내에서 "불소 공급원"은 불화물 이온을 생성하거나 함유하는 시약이다. 일부 비-제한적인 예시에는 불화수소산, 금속 불화물, 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드, 또는 테트라부틸암모늄 플루오라이드가 포함된다.
본 출원의 문맥 내에서 사용된 바와 같이 "활성화제"는 카르복실산 기와 반응하여 친핵체와 반응하는 이의 능력을 증강시키는 화합물이다. 이러한 시약은 당해 분야에 폭넓게 알려져 있다. 이 시약은 아민 기 및 카르복실산으로부터 아미드 결합의 생산에 통상적으로 사용된다. 일부 통상적인 기에는 N-히드록시석시니미드, 4-니트로페놀, 카르보디이미드 시약, 및 트리아졸 시약이 포함된다. 이러한 시약은, 예를 들어, 참조로서 본원에 포함되는, 문헌 [Montalbetti and Falque, 2005]에 교시되어 있다.
본 출원의 문맥 내에서 "금속"은 전이금속 또는 I 족 또는 II 족 금속이다.
"자기 희생기"는 생리적 조건에서 분해되는 기이다. 이러한 기는 당해 분야에서 잘 이해된다. 이러한 기는, 본원에 참조로서 포함되는, 문헌 [Kratz et al., 2011 in "Chapter 19: Site-Specific Prodrug Activation and the Concept of Self-Immolation" in Drug delivery in Oncology: From Basic Research to Cancer Therapy]에 교시되어 있다.
"티올 반응기"는, 예컨대 아미노산의 측쇄 상에서 -SH 기와 반응을 거쳐 상기 기에 황 원자를 연결하는 공유 결합을 형성하는 화학적 관능기이다. 이러한 기는 당해 분야에 잘 알려져 있으며, 이에 제한되는 것은 아니지만, 공액 부가반응 (conjugate addition)을 거칠 수 있는 제제를 포함한다. 일부 비-제한적인 예시에는 말레이미드 또는 할로아세트아미드, 예컨대 이오도아세트아미드가 포함된다.
"아민 보호기"는 당해 분야에서 잘 이해된다. 아민 보호기는 분자의 일부 다른 부분을 변형하는 반응 동안에 아민 기의 반응성을 방지하고 목적하는 아민을 생성하기 위해 용이하게 제거될 수 있는 기이다. 아민 보호기는 적어도 본원에 참조로서 포함되는 문헌 [Greene and Wuts, 1999]에서 확인할 수 있다. 아미노 보호기의 일부 비-제한적인 예시에는 포르밀, 아세틸, 프로피오닐 피발로일, t-부틸아세틸, 2-클로로아세틸, 2-브로모아세틸, 트리플루오로아세틸, 트리클로로아세틸, o-니트로페녹시아세틸, α-클로로부티릴, 벤조일, 4-클로로벤조일, 4-브로모벤조일, 4-니트로벤조일 등; 벤젠설포닐, p-톨루엔설포닐 등과 같은 설포닐 기; 벤질옥시카보닐 (Cbz), p-클로로벤질옥시카보닐, p-메톡시벤질옥시카보닐, p-니트로벤질옥시카보닐, 2-니트로벤질옥시카보닐, p-브로모벤질옥시카보닐, 3,4-디메톡시벤질옥시카보닐, 3,5-디메톡시벤질옥시카보닐, 2,4-디메톡시벤질옥시카보닐, 4-메톡시벤질옥시카보닐, 2-니트로-4,5-디메톡시벤질옥시카보닐, 3,4,5-트리메톡시벤질옥시카보닐, 1-(p-비페닐일)-1-메틸에톡시카보닐, α,α-디메틸-3,5-디메톡시벤질옥시카보닐, 벤즈히드릴옥시카보닐, t-부틸옥시카보닐 (Boc), 디이소프로필메톡시카보닐, 이소프로필옥시카보닐, 에톡시카보닐, 메톡시카보닐, 알릴옥시카보닐 (Alloc), 2,2,2-트리클로로에톡시카보닐, 2-트리메틸실릴에틸옥시카보닐 (Teoc), 페녹시카보닐, 4-니트로페녹시카보닐, 플루오레닐-9-메톡시카보닐 (Fmoc), 시클로펜틸옥시카보닐, 아다만틸옥시카보닐, 시클로헥실옥시카보닐, 페닐티오카보닐 등과 같은 알콕시- 또는 아릴옥시카보닐 기 (보호된 아민으로 우레탄을 형성함); 벤질, 트리페닐메틸, 벤질옥시메틸 등과 같은 아르알킬 기; 및 트리메틸실릴 등과 같은 실릴 기가 포함된다. 부가적으로, "아민 보호기"는 일차 아민 상의 둘 모두의 수소 원자가 단일 보호기로 대체되도록 2가 보호기일 수 있다. 이러한 상황에서, 아민 보호기는 프탈리미드 (phth) 또는 이의 치환된 유도체일 수 있고 여기서 용어 "치환된"은 상기에서 정의된 바와 같다. 일부 실시양태에서, 할로겐화 프탈리미드 유도체는 테트라클로로프탈리미드 (TCphth)일 수 있다.
"히드록실 보호기"는 당해 분야에서 잘 이해된다. 히드록실 보호기는 분자의 일부 다른 부분을 변형하는 반응 동안에 히드록실 기의 반응성을 방지하고 목적하는 히드록실을 생성하기 위해 용이하게 제거될 수 있는 기이다. 히드록실 보호기는 적어도 본원에 참조로서 포함되는 문헌 [Greene and Wuts, 1999]에서 확인될 수 있다. 히드록실 보호기의 일부 비-제한적인 예시에는 포르밀, 아세틸, 프로피오닐 피발로일, t-부틸아세틸, 2-클로로아세틸, 2-브로모아세틸, 트리플루오로아세틸, 트리클로로아세틸, o-니트로페녹시아세틸, α-클로로부티릴, 벤조일, 4-클로로벤조일, 4-브로모벤조일, 4-니트로벤조일 등과 같은 아실 기; 벤젠설포닐, p-톨루엔설포닐 등과 같은 설포닐 기; 벤질옥시카보닐 (Cbz), p-클로로벤질옥시카보닐, p-메톡시벤질옥시카보닐, p-니트로벤질옥시카보닐, 2-니트로벤질옥시카보닐, p-브로모벤질옥시카보닐, 3,4-디메톡시벤질옥시카보닐, 3,5-디메톡시벤질옥시카보닐, 2,4-디메톡시벤질옥시카보닐, 4-메톡시벤질옥시카보닐, 2-니트로-4,5-디메톡시벤질옥시카보닐, 3,4,5-트리메톡시벤질옥시카보닐, 1-(p-비페닐일)-1-메틸에톡시카보닐, α,α-디메틸-3,5-디메톡시벤질옥시카보닐, 벤즈히드릴옥시카보닐, t-부틸옥시카보닐 (Boc), 디이소프로필메톡시카보닐, 이소프로필옥시카보닐, 에톡시카보닐, 메톡시카보닐, 알릴옥시카보닐 (Alloc), 2,2,2-트리클로로에톡시카보닐, 2-트리메틸실릴에틸옥시카보닐 (Teoc), 페녹시카보닐, 4-니트로페녹시카보닐, 플루오레닐-9-메톡시카보닐 (Fmoc), 시클로펜틸옥시카보닐, 아다만틸옥시카보닐, 시클로헥실옥시카보닐, 페닐티오카보닐 등과 같은 아실옥시 기; 벤질, 트리페닐메틸, 벤질옥시메틸 등과 같은 아르알킬 기; 및 트리메틸실릴 등과 같은 실릴 기가 포함된다.
"티올 보호기"는 당해 분야에서 잘 이해된다. 티올 보호기는 분자의 일부 다른 부분을 변형하는 반응 동안에 머캅토 기의 반응성을 방지하고 목적하는 머탑토 기를 생성하기 위해 용이하게 제거될 수 있는 기이다. 티올 보호기는 적어도 본원에 참조로서 포함되는 문헌 [Greene and Wuts, 1999]에서 확인될 수 있다. 티올 보호기의 일부 비-제한적인 예시에는 포르밀, 아세틸, 프로피오닐 피발로일, t-부틸아세틸, 2-클로로아세틸, 2-브로모아세틸, 트리플루오로아세틸, 트리클로로아세틸, o-니트로페녹시아세틸, α-클로로부티릴, 벤조일, 4-클로로벤조일, 4-브로모벤조일, 4-니트로벤조일 등과 같은 아실 기; 벤젠설포닐, p-톨루엔설포닐 등과 같은 설포닐 기; 벤질옥시카보닐 (Cbz), p-클로로벤질옥시카보닐, p-메톡시벤질옥시카보닐, p-니트로벤질옥시카보닐, 2-니트로벤질옥시카보닐, p-브로모벤질옥시카보닐, 3,4-디메톡시벤질옥시카보닐, 3,5-디메톡시벤질옥시카보닐, 2,4-디메톡시벤질옥시카보닐, 4-메톡시벤질옥시카보닐, 2-니트로-4,5-디메톡시벤질옥시카보닐, 3,4,5-트리메톡시벤질옥시카보닐, 1-(p-비페닐일)-1-메틸에톡시카보닐, α,α-디메틸-3,5-디메톡시벤질옥시카보닐, 벤즈히드릴옥시카보닐, t-부틸옥시카보닐 (Boc), 디이소프로필메톡시카보닐, 이소프로필옥시카보닐, 에톡시카보닐, 메톡시카보닐, 알릴옥시카보닐 (Alloc), 2,2,2-트리클로로에톡시카보닐, 2-트리메틸실릴에틸옥시카보닐 (Teoc), 페녹시카보닐, 4-니트로페녹시카보닐, 플루오레닐-9-메톡시카보닐 (Fmoc), 시클로펜틸옥시카보닐, 아다만틸옥시카보닐, 시클로헥실옥시카보닐, 페닐티오카보닐 등과 같은 아실옥시 기; 벤질, 트리페닐메틸, 벤질옥시메틸 등과 같은 아르알킬 기; 및 트리메틸실릴 등과 같은 실릴 기가 포함된다.
"입체이성체" 또는 "광학 이성체"는 동일한 원자가 동일한 다른 원자에 결합되지만, 3차원에서 그러한 원자의 배열이 상이한, 주어진 화합물의 이성체이다. "에난티오머"는 좌측 및 우측과 같이, 서로의 거울상 이미지인 주어진 화합물의 입체이성체이다. "부분입체이성체"는 에난티오머가 아닌 주어진 화합물의 입체이성체이다. 키랄 분자는 입체중심 또는 입체성 중심으로도 언급되고, 임의의 2개의 기의 교환이 입체이성체를 초래하도록 기를 함유하는 분자에서, 반드시 원자가 아니더라도, 임의의 지점인, 키랄 중심을 포함한다. 유기 화합물에서, 키랄 중심은, 다른 원자가 유기 및 무기 화합물에서 입체중심이 될 가능성이 있지만, 전형적으로 탄소, 인 또는 황 원자이다. 분자는 다중 입체중심을 가질 수 있고, 이는 다수의 입체이성체를 제공한다. 그의 입체이성질이 사면체 입체성 중심 (예컨대, 사면체 탄소)에 기인한 화합물에서, 이론적으로 가능한 입체이성체의 총 개수는 2n을 초과하지 않을 것이며, 여기서 n은 사면체 입체중심의 개수이다. 대칭을 갖는 분자는 종종 입체이성체의 최대 가능한 개수보다 더 적게 갖는다. 에난티오머의 50:50 혼합물은 라세미체 혼합물로 지칭된다. 대안적으로, 에난티오머의 혼합물은 하나의 에난티오머가 50%를 초과하는 양으로 존재하도록 광학이성적으로 증폭될 수 있다. 전형적으로, 에난티오머 및/또는 부분입체이성체는 당해 분야에 공지된 기술을 이용하여 분해되거나 분리될 수 있다. 그의 입체화학이 정의되어 있지 않은 임의의 입체중심 또는 키랄성 (chirality)의 축의 경우에, 입체중심 또는 키랄성의 축이 그의 R 형태, S 형태, 또는 라세미체 및 비-라세미체 혼합물을 포함하는, R 및 S 형태의 혼합물로서 존재할 수 있음이 고려된다. 본원에 사용된 바와 같이, 어구 "실질적으로 다른 입체이성체가 존재하지 않는"은 그 조성물이 또 다른 입체이성체(들)의 ≤15%, 더욱 바람직하게는 ≤10%, 더욱 더 바람직하게는 ≤5%, 또는 가장 바람직하게는 1%를 함유하는 것을 의미한다.
하기 도면은 본 명세서의 일부를 형성하고 본 발명의 특정 측면을 추가로 입증하기 위해 포함된다. 본 기재는 상세한 설명과 함께 이들 도면의 하나 이상을 참조하여 더 잘 이해될 수 있다.
도 1 운시알라마이신 유사체의 합성
도 2 운시알라마이신, 및 아미노메틸 운시알라마이신과 운시알라마이신 유사체를 함유하는 기타 아민의 일부 예시
이하 실시예는 본 발명의 바람직한 실시양태를 설명하기 위하여 포함된다. 통상의 기술자는 이어지는 실시예에 개시된 기술들이 본 발명의 실시에 있어 잘 작용하도록 본 발명자에 의해 발견된 기술을 나타내며, 따라서 이의 실시를 위한 바람직한 형태를 구성하는 것으로 간주될 수 있음을 이해해야 한다. 그러나, 통상의 기술자는 본 발명을 고려하여, 많은 변경이 개시된 구체적인 실시양태에서 이루어질 수 있으며 본 발명의 요지 및 범주를 벗어나지 않고 여전히 동등하거나 또는 유사한 결과를 얻을 수 있음을 이해해야 한다.
실시예 1 - 재료 및 방법
모든 반응는 달리 지적되지 않는 한 무수 조건 하에 건조 용매를 사용하여 아르곤 대기 하에 수행되었다. 건조 테트라하이드로퓨란 (THF), 톨루엔, 벤젠, 메탄올 (MeOH), 디에틸 에테르 (Et2O), N,N-디메틸포름아미드 (DMF), 및 메틸렌 클로라이드 (CH2Cl2)는 활성화 알루미나 컬럼을 통해 상업적으로 이용가능한 예비-건조된 무산소(oxygen-free) 제형을 통과시킴으로써 얻었다. 수율은 달리 기재되지 않은 한, 크로마토그래피적으로 그리고 분광학적으로 (1H NMR) 균질한 물질을 언급한다. 시약들은 최고 상용 품질로 구매하였고 달리 기재되지 않는 한 추가 정제 없이 사용하였다. 반응들은 시각화 작용물(visualizing agent)로서 UV 광선, 및 전개 작용물(developing agent)로서 포스포몰리브딕산 및 세륨 설페이트의 에탄올성 용액 및 열을 사용하여 0.25 mm 이. 머크(E. Merck) 실리카 겔 플레이트(60F-254) 상에서 수행된 박막 크로마토그래피(TLC)로 모니터하였다. 이. 머크 실리카 겔(60, 입자 크기 0.040 - 0.063 mm)을 플래시 컬럼 크로마토그래피를 위해 사용하였으며, 크로마토그래피 전에 12시간 동안 5% 첨가된 H2O를 갖는 용리액 중에서 현탁시킴으로써 비활성화시켰다. NMR 스펙트럼을 브루커 DRX-500 또는 DRX-600 기기 상에서 기록하였고 내부 기준물질로서 잔여 비중수소화된 용매(CDCl3: δH = 7.26 ppm, δC = 77.0 ppm; 또는 CD3CN: δH = 1.94 ppm, δC = 118.26 ppm)를 사용하여 보정하였다. 다음의 약어들을 다수를 지정하기 위하여 사용하였다: s = 단일항, d = 이중항, t = 삼중항, q= 사중항, m = 다중항, br = 브로드(broad). 적외선 (IR) 스펙트럼은 퍼킨-엘머(Perkin-Elmer) 100 FT-IR 분광기 상에서 기록하였다. 고분해능 질량 스펙트럼 (HRMS)을 MALDI (matrix-assisted laser desorption ionisation) 또는 ESI (electrospray ionization)를 사용하는 앨리언트(Agilent) ESI-TOF (비행 시간) 질량 분광기 상에서 기록하였다. 광학 회전은 589 nm에서 퍼킨-엘머 모델 343 편광계 상에서 기록하였고 10-1　(deg　cm2　g- 1)의 단위로 기록한다.
실시예 - 2 운시알라마이신 및 이의 유사체의 제조를 위한 합성 방법의 설명
운시알라마이신 및 이의 유사체의 합성을 위한 합성 전략은 상기 상세한 실험 부분에서 강조되며 합성 계략도(scheme)(개략도 1-21)가 이하에서 강조되고 논의된다. 트리이소프로필실릴아세틸렌을 사용하는 소노가시라(Sonogashira) 조건 하에서 디클로로에탄을 촉매적 팔라듐 및 구리와 반응시켜 27을 형성하였다. 화합물 27을 소노가시라 조건 하에서 트리메틸실릴아세틸렌과 반응시켜 28을 제조하였다. 28의 트리메틸실릴기를 포타슘 카보네이트 하에 분할(cleave)하여 11을 얻었다. 11의 제조는 개략도 1에 도시된다.
Figure pct00143
개략도 1. 에네딘(enediyne) 빌딩 블록 11의 합성
개략도 2에 도시된 바와 같이, 출발 물질 1을 보론 트리브로마이드와 반응시켜 탈보호화된 이사틴 2를 얻었다. 이사틴 2를 염기의 존재 하에 트랜스-4-메톡시-3-부텐-2-온과 반응시킨 후 산성화시켰다. 결과적인 혼합물을 포타슘 카보네이트와 열로 처리한 다음 산성화하여 4를 얻었다. 케토애시드 4를 디메톡시벤질 브로마이드로 보호화하여 중간체 6을 얻었으며 이를 노요리(Noyori) 촉매와 반응시켜 락톤 8을 얻었다. 락톤 8을 환원시켜 헤미아세탈 중간체를 얻었고 이를 그 다음 TES 클로라이드로 보호화하여 10을 얻었다. TES 락톨 10을 11과 반응시켜 에네딘 12를 얻었다. 12의 TES 기를 아세트산을 이용하여 분할하여 13을 얻었다. 락톨 13을 환원제로 처리한 다음 mCPBA로 에폭시화하여 에폭시드 14를 얻었다.
Figure pct00144
개략도 2. 운시알라마이신 (26a)의 개선된 합성. 핵심 중간체 14의 구축
14의 제조 후에, 일차 알코올을 아실화하여 15를 얻었다. 아세테이트 15를 데스-마틴 페리오디난(Dess-Martin periodinane)으로 산화하여 케톤 16을 얻었다. TBAF를 사용하여, 에네딘을 탈보호화하고 케톤을 환원시켜 이차 알코올 17을 얻었다. 이차 알코올 17을 TES 클로라이드로 보호화한 다음 아세테이트를 포타슘 카보네이트로 탈보호화하여 일차 알코올 18을 얻었다. 일차 알코올 18을 데스-마틴 페리오디난을 사용하여 산화하여 알데히드 19를 얻었다. DDQ를 사용하여, 디메톡시벤질기를 제거하여 유리 페놀 20을 얻었다. 강한 친핵성 염기, KHMDS, 및 CeCl3의 존재 하에, 20을 고리화하여 시클릭 에네딘 21a를 얻었다. 시클릭 에네딘 21a를 메탄올 및 PhI (OAc)2로 메톡실화하여 퀴논 아미날 22a를 얻었다. 출발 물질 23을 하우서(Hauser) 축합 조건 하에서 22a와 반응시켜 보호화된 운시알라마이신 유도체 24a를 얻었으며 이를 Pd (PPh3)4 및 모르폴린으로 탈보호화하여 25a를 얻었다. TES 보호화된 운시알라마이신 유사체 25a를 HF와 반응시켜 운시알라마이신 26a를 얻었다.
Figure pct00145
개략도 3. 운시알라마이신 (26a)의 개선된 합성. 핵심 중간체 22a의 구축 및 합성의 완료
개략도 4에서, 23의 유사체가 제조되어 8-아미노운시알라마이신 유사체로의 접근이 허용된다. 6-아미노프탈리드를 Boc 안하이드라이드와 반응시켜 Boc 보호화된 프탈리드 29를 얻었다. 보호 프탈리드 29를 NBS 및 AIBN과 반응시켜 브롬화된 유도체 30을 얻고 이를 수화하여 히드록시 화합물 31을 얻은 다음 SOCl2를 사용한 활성화 후 디에틸아민을 사용한 친핵 치환을 수행하여 포밀벤자미드 32를 얻었다. 시아노기를 TMSCN 및 KCN을 사용하여 32에 도입하고 산성 조건 하에서 고리화하여 시아노프탈리드 33을 얻었다. 이전에 운시알라마이신에 대한 개략도 3에서 기재한 바와 같이, 시아노프탈리드 33을 시클릭 에네딘 22a와 반응시켜 운시알라마이신 유사체 34a를 얻었다. 개략도 5에 도시된 바와 같이, 운시알라마이신 유사체 34a를 모르폴린 및 Pd (PPh3)4로 탈보호화하여 TES 보호화된 8-아미노운시알라마이신 35a를 얻었다. HF를 사용하여, TES 기를 제거하여 8-아미노운시알라마이신 36a를 얻었다.
Figure pct00146
개략도 4. 시아노프탈이미드 (33)의 합성
Figure pct00147
개략도 5. 8-아미노-운시알라마이신 (36a)의 합성
개략도 4 및 5에 도시된 반응과 유사하게, 운시알라마이신의 아미노메틸 유도체를 제조하였다. 2,5-디메틸벤조산을 MeI를 이용하여 메틸 에스테르 37a로 전환시킨 후 브롬화, 고리화 다음 염기 조건 하에 프탈리미드와 반응시켜 프탈리드 40a를 얻었다. 프탈리드를 NBS 및 AIBN으로 브롬화한 후 히드록실화, 활성화 및 디에틸아민의 친핵성 부가로 43a를 얻었다. 그 다음 포밀벤자미드 43a를 TMSCN 및 KCN과 반응시킨 후 아세트산과 반응시켜 시아노프탈리드 44a를 얻었다. 유사하게, 이성질체 44b, 44c, 및 44d를 제조하였다. 개략도 7에 도시된 바와 같이, 시아노프탈리드 44a 또는 이의 이성질체 중 하나를 하우서 축합 조건 하에 강한 비친핵성 염기로 22a 또는 이의 부분입체이성체 22b와 반응시켜 보호화된 아미노메틸운시알라마이신 유사체 45aa를 얻었으며 이를 Pd (PPh3)4 및 모르폴린으로 탈보호화하여 46aa를 얻은 다음 HF를 사용하여 47aa를 얻었다. 프탈리미드기를 메틸아민으로 제거하여 아미노메틸운시알라마이신 48aa를 얻은 다음 이를 복 안하이드라이드를 사용하여 Boc 보호화하여 49aa를 얻었다. 유사한 방법을 사용하여 비슷한 수율로, 48ba, 48ca, 48da, 및 48ba를 포함하는 다른 아미노메틸운시알라마이신 유사체를 제조하였다.
Figure pct00148
개략도 6. 시아노프탈리드 44a, 44b, 44c, 및 44d의 합성
Figure pct00149
개략도 7. 아미노메틸-운시알라마이신 (48aa, 48ba, 48ca, 및 48da)의 합성
개략도 3 및 개략도 5에 기재된 바와 같이, 유사한 방법을 사용하여 메틸 2,4-디히드록시-3-메틸벤조에이트로부터 출발하여 시아노프탈리드 55를 얻었으며 이를 개략도 9에 나타낸다. 시아노프탈리드 55의 제조 후에, 상기 화합물의 하우서 축합으로 운시알라마이신 58b의 유사체를 얻었으며, 이를 개략도 10에 나타내었다.
Figure pct00150
개략도 9. 시아노프탈리드 55의 합성
Figure pct00151
개략도 10. 8-프탈이미도메틸-운시알라마이신 58a, 및 58b의 합성
상기 기재된 다른 운시알라마이신 유도체와 유사하게, 나프탈렌 코어 시아노프탈리드 63a 및 63b를 사용하여 확장된 운시알라마이신을 제조하였다. 제조는 개략도 11에 나타낸다. 유사하게, 적합한 운시알라마이신 유사체를 형성하기 위한 축합을 개략도 12에 기재한다.
Figure pct00152
개략도 11. 시아노프탈리드 63a, 및 63b의 합성
Figure pct00153
개략도 12. 8-프탈이미도메틸-운시알라마이신 66a/66b의 합성
부가적으로, 개략도 13-16이 또한 잠재적인 합성 경로로서 계획되며 이는 운시알라마이신 및 이의 유사체의 제조를 허용할 수 있다. 이들 개략도는 본원에 개시된 운시알라마이신의 유사체에 접근하기 위하여 사용될 수 있는 추가적인 합성 방법을 보여주었다.
Figure pct00154
개략도 13. 시아노프탈리드 76의 합성
Figure pct00155
개략도 14. 프탈이미도메틸-벤조-운시알라마이신 79a의 합성
Figure pct00156
개략도 15. 시아노프탈리드 84의 합성
Figure pct00157
개략도 16. 8-아미노메틸-운시알라마이신 48aa 및 49aa의 합성
이소인돌린 고리계를 갖는 운시알라마이신의 유사체를 2,4,5-트리메틸벤조산으로부터 출발하여 제조하였으며 이를 메틸 에스테르로서 보호화한 다음 브롬화하고 고리화하여 88을 얻었다. 그 다음 88을 휘니그 염기(Hunig's base)의 존재 하에 트리틸아민과 반응시켜 89를 얻었다. 트리틸기를 산으로 제거하고 아민을 Teoc기로 보호화하여 90을 얻었다. 락톤 90을 하이드록사이드로 개환한 다음 PCC로 산화하여 히드록실화 화합물 92를 얻었다. 개략도 17에 도시된 바와 같이 히드록실화 화합물 92를 시아노프탈리드 93으로 전환한다. 이전에 개시되고 개략도 18 및 19에 구체적으로 도시된 바와 같이, 시아노프탈리드 93을 22a와 반응시켜 운시알라마이신의 원하는 유사체 또는 이의 유도체화 형태를 얻었다.
Figure pct00158
개략도 17. 시아노프탈리드 93의 합성
Figure pct00159
개략도 18. 이소인돌린-운시알라마이신 (96, 97, 및 98)의 합성
Figure pct00160
개략도 19. 설파이드 99 및 설폰 100의 합성
개략도 17에서 사용된 것과 유사한 방법을 이용하여, 8-아미노메틸운시알라마이신의 메틸아민 형태를 제조한다. 개략도 20에 도시된 바와 같이, 시아노프탈리드를 브로모메틸프탈리드로 출발하여 제조하였으며 이를 염기 조건 하에 TeocNHMe와 반응시켜 프탈리드 101을 얻었다. 시클릭 에스테르의 개환으로 102를 얻은 후, 화합물을 산화하여 103을 얻고 시아노기를 도입하여 시아노프탈리드 104를 얻었다. 시아노프탈리드를 그 다음 강한 염기성 조건 하에 22a와 반응시켜 메틸아미노메틸운시알라마이신 유사체 및 이의 유도체를 얻었으며 이는 개략도 21에 개시한다.
Figure pct00161
개략도 20. 시아노프탈리드 104의 합성
Figure pct00162
개략도 21. 8-N-메틸아미노메틸-운시알라마이신 (107, 108, 109, 및 110)의 합성
실시예 3 - 합성 방법 및 특징 분석
Figure pct00163
5-히드록시 이사틴 (2). 0℃의 CH2Cl2 (40 mL) 중의 5-메톡시 이사틴 (1) (10.0 g, 56.5 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에, BBr3 (36.8 g, 147 mmol, 2.6 당량)을 0℃에서 격렬한 교반 하에 2시간 동안 적가하였다. 첨가를 완료하고, 아이스 배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 상온에서 추가 1시간 동안 교반한 후 CH2Cl2 (500 mL)로 희석시키고, 0℃로 냉각시킨 뒤, 고체 NaHCO3 (37 g), 및 차가운 (0-5℃) H2O (60 mL)를 조심스럽게 순차적으로 첨가하여 퀀칭시켰다 (주의, HBr 가스). 결과적인 혼합물을 식염수(50 mL)로 세척하고, 화합된 수상을 CH2Cl2 (50 mL)로 추출하였다. 화합된 유기상을 농축시키고 잔류물을 빙초산으로 재결정화하여 어두운 적색 고체로서 이사틴 2를 얻었다 (8.8 g, 54 mmol, 95% 수율). R f = 0.31 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 1:1); IR (필름) νmax = 3278, 1720, 1614, 1477, 1291, 1194, 881, 822, 800 cm-1; 1H NMR (500 MHz, DMSO): δ = 10.73 (s, 1 H), 9.52 (br, 1 H), 7.00 (dd, J = 8.5, 2.6 Hz, 1 H), 6.83 (d, J = 2.6 Hz, 1 H), 6.74 (d, J = 8.3 Hz, 1 H) ppm; 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ = 184.9, 159.5, 153.2, 143.1, 125.1, 118.2, 113.1, 110.5, 105.1 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C8H6NO3 + [M+H+]: 164.0342, 실측치 164.0344.
Figure pct00164
케토애시드 4. 이사틴 (6.7 g, 47 mmol, 1.0 당량)을 상온에서 2N NaOH 수용액 (47 mL, 94 mmol, 2.0 당량) 중에 용해시키고, 트랜스-4-메톡시-3-부텐-2-온 (90% 순도, 9.1 g, 94 mmol, 2.0 당량)을 격렬하게 교반 하에 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 15분 동안 교반하고, 0℃로 냉각한 후 농축 HCl로 pH 1까지 산성화시켰다. 결과적인 녹색 고체를 여과하여 수집하고 얼음 물로 세척하였다 (각각의 세척 후 여과액의 pH를 테스트하고, pH 5~6까지 세척을 계속하였다). 습한 고체를 포화 NaHCO3 수용액 (60 mL) 중에 용해시키고 이후 미량의 어두운 불용성 물질을 여과해 버리고, 포화 K2CO3 수용액 (20 mL)을 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 30분 동안 80℃에서 교반한 다음, 동일한 온도에서 농축 HCl로 pH 1까지 조심스럽게 산성화하였다 (주의, CO 2 가스). 결과적인 현탁액을 80℃에서 추가 10분 동안 교반한 다음, 대기 온도로 냉각되도록 방치하고, 12시간 동안 0℃에서 보관하였다. 결과적인 고체를 여과하여 수집하고, 얼음 물로 세척한 후 (각각의 세척 후 여과액의 pH를 테스트하고, pH 5~6까지 소량의 얼음 물로 세척을 계속함), 진공 건조하여 갈색 고체로서 케토애시드 2를 얻었다 (7.7 g, 33 mmol, 81% 수율). 미정제 물질을 추가 정제 없이 곧 바로 다음 단계를 위해 사용하였다.
Figure pct00165
락톤 8. 상온에서 DMF (50 mL) 중의 캐토애시드 4 (7.7 g, 33 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에, 고체 Cs2CO3 (10.8 g, 167 mmol, 5.0 당량), n-Bu4NI (1.8 g, 5.0 mmol, 0.15 당량), 이후 3,4-디메톡시벤질 브로마이드 (5)의 용액 [DMBBr, 30.7 g, 133 mmol, DMF (15 mL) 중의 4.0 당량]을 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 5시간 동안 동일한 온도에서 교반한 다음, EtOAC(300 mL) 및 H2O (300 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(3 × 150 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 H2O (3 × 150 mL) 및 식염수 (150 mL)로 세척한 후, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축시켰다. 잔류물을 셀라이트®(Celite®)의 쇼트 패드를 통과시키고 헥산/EtOAC(v/v = 1/2)로 용리시킨 후, 농축시키고 톨루엔 (3 × 25)로 공증발시켜 어두운 오일로서 미정제 비스-DMB 케토에스테르 6을 얻었으며, 이를 CH2Cl2 (150 mL) 중에 용해시키고 0℃로 냉각시켰다. 이러한 용액에, (S,S)-노요리 촉매 7 (1.0 g, 1.7 mmol, 0.05 당량) 및 미리혼합된 차가운 (0-5℃) Et3N/HCO2H 혼합물 (Et3N: 8.4g, 83 mmol, 2.5 당량; HCO2H: 6.6g, 143 mmol, 4.3 당량)를 순차적으로 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 24시간 동안 0℃에서 교반한 다음, 포화 NaHCO3 수용액 (150 mL)으로 퀀칭시키고, 수성 층을 분리하고 CH2Cl2 (3 × 150 mL)로 추출한 후, 화합된 유기 층을 포화 NaHCO3 (150 mL) 및 식염수 (150 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 15:1 내지 10:1)로 어두운 갈색 고체를 얻고, 이를 EtOAc로 재결정화하여 오프-화이트색 고체로서 락톤 (+)-8을 얻었다 (6.1 g, 17 mmol, 82% 수율, DIBAL-H 환원 및 TES 보호화로부터 유도된 비스-TES 에테르 유도체 9의 HPLC 분석에 의한 >99% ee; 키랄 OD-H 5 μ 컬럼, 4.6 × 250 mm, 헥산:i-PrOH 98:2, 1 mL min-1; 주요 에난티오머 머무름 시간 = 14.37 분, 소수 에난티오머 머무름 시간 = 16.88 분). 8: [α]D 25 = +19 (c = 1.00, CH2Cl2), R f = 0.21 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 7:3); IR (필름) νmax = 2935, 2836, 2254, 1756, 1605, 1509, 1460, 1263, 1213 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CDCl3): δ = 8.88 (s, 1 H), 8.20 (d, J = 2.8 Hz, 1 H), 8.08 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.49 (dd, J = 9.2, 2.8 Hz, 1 H), 7.05 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 7.04 (s, 1 H), 6.87 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 5.70 (q, J = 6.8 Hz, 1 H), 5.16 (s, 2 H), 3.91 (s, 3 H), 3.86 (s, 3 H), 1.73 (d, J = 6.8 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CDCl3): δ = 169.5, 159.2, 149.0, 145.0, 144.4, 140.8, 131.1, 128.2, 126.4, 124.2, 123.9, 120.7, 111.3, 111.0, 101.8, 76.4, 70.5, 55.8, 20.0 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C21H20NO5 + [M+H+]: 366.1336, 실측치 366.1338.
Figure pct00166
TES 락톨 10. -78℃의 CH2Cl2 (75 mL) 중의 락톤 8 (3.80 g, 10.4 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 2시간에 걸쳐 DIBAL-H (CH2Cl2 중의 1.0 M, 25 mL, 25 mmol, 2.4 당량)를 서서히 첨가하였다. 반응 혼합물을 TLC가 8 (헥산:EtOAc 1:1)의 완전한 소비를 나타낼 때까지, 추가 1시간 동안 -78℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 CH2Cl2 (400 mL)로 희석시킨 다음, 포화 소듐 포타슘 타르트레이트 수용액 (200 mL)에 서서히 부었다. 결과적인 혼합물을 2개의 층이 형성될 때까지 6시간 동안 대기 온도에서 격렬하게 교반하고, 유기 층을 분리한 후, 수성 층을 CH2Cl2 (5 × 150 mL)으로 추출한 다음, EtOAC(3 × 50 mL)으로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조시키고 농축시켰다. 결과적인 엷은 노란색 잔류물을 DMF (120 mL) 중에 넣었다. 이러한 혼합물에 0℃에서 이미다졸 (1.84 g, 27.0 mmol, 2.6 당량), 그 다음 TESCl (2.26 mL, 2.04 g, 13.5 mmol, 1.3 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 20분 동안 대기 온도에서 교반한 다음, Et2O (150 mL) 및 포화된 NaHCO3 수용액 (150 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 Et2O (2 × 150 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 H2O (3 × 150 mL) 및 식염수 (150 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 후 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1 내지 3:2)로 엷은 노란색 오일로서 TES 락톨 10 (4.55 g, 9.46 mmol, 2단계에 걸친 수율 91%, 부분입체이성체들의 대략 1:1 소소한 혼합물)을 얻었다. 10: R f = 0.31 (신 이성체) 및 0.25 (안티 이성체) (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); IR (필름) vmax = 2953, 2875, 1625, 1604, 1515, 1461, 1211 cm-1; 신 이성체의 1H NMR (600 MHz, CDCl3): δ = 8.69 (s, 1 H), 8.10 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.44 (dd, J = 9.2, 2.7 Hz, 1 H), 7.27 (d, J = 2.8 Hz, 1 H), 7.02 (d, J = 6.9 Hz, 1 H), 7.01 (s, 1 H), 6.90 (d, J = 6.8 Hz, 1 H), 6.90 (s, 1 H), 5.68 (dq, J = 6.5, 2.3 Hz, 1 H), 5.09 (dd, J = 17.1, 10.9 Hz, 1 H), 3.92 (s, 3 H), 3.91 (s, 3 H), 1.59 (d, J = 6.5 Hz, 3 H), 1.02 (t, J = 7.9 Hz, 9 H), 0.74 (q, J = 7.8 Hz, 6 H) ppm; 안티 이성체: δ = 8.69 (s, 1 H), 8.11 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 7.43 (dd, J = 9.2, 2.6 Hz, 1 H), 7.32 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 7.01 (d, J = 6.1 Hz, 1 H), 7.00 (s, 1 H), 6.91 (d, J = 8.6 Hz, 1 H), 6.84 (s, 1 H), 5.46 (q, J = 6.5 Hz, 1 H), 5.09 (dd, J = 18.3, 10.8 Hz, 1 H), 3.92 (s, 3 H), 3.91 (s, 3 H), 1.67 (d, J = 6.5 Hz, 3 H), 1.06 (t, J = 8.0 Hz, 9 H), 0.79 (q, J = 7.7 Hz, 6 H) ppm; 신 이성체의 13C NMR (150 MHz, CDCl3): δ = 157.6, 149.2, 149.1, 144.0, 143.6, 141.5, 136.7, 131.1, 128.6, 124.1, 122.5, 120.4, 111.0, 111.0, 102.6, 100.0, 78.5, 70.3, 55.9, 55.9, 21.4, 6.8, 5.1 ppm; 안티 이성체: δ = 157.6, 149.2, 149.1, 143.9, 143.1, 141.5, 136.8, 131.0, 128.6, 124.3, 122.6, 120.4, 111.1, 111.0, 102.5, 100.5, 79.5, 70.3, 56.0, 55.9, 23.6, 6.9, 5.1 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C27H36NO5Si+ [M+H+]: 482.2357, 실측치 482.2367.
Figure pct00167
에네인 27. 상온에서 50 mL의 Et2O 중의 Pd (PPh3)4 (380 mg, 0.3 mmol, 3 mol%) 및 CuI (60 mg, 0.3 mmol, 3 mol%)의 교반된 현탁액에 n-BuNH2 (1.61 g, 2.20 mL, 22.0 mmol, 2.0 당량), (Z)-1,2-디클로로에틸렌 (2.03 g, 1.74 mL, 21.0 mmol, 1.9 당량), 및 트리이소프로필실릴아세틸렌 (2.00 g, 2.55 mL, 11.0 mmol, 1.0 당량)을 순차적으로 첨가하고, 반응 혼합물을 10시간 동안 대기 온도에서 교반하였다 (휘발성 물질, 밀봉된 플라스크 내에 가능한한 적은 가스상을 남김). 용매의 증발 후에, 잔류물을 헥산에 넣고 셀라이트®의 쇼트 패드를 통해 여과시키고, 헥산으로 용리시키고, 여과액을 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산)로 무색 오일을 얻었다 (2.48 g, 10.2 mmol, 93% 수율). R f (헥산) = 0.77; IR (필름) νmax = 2945, 2154, 1463, 882, 671 cm-1; 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ = 6.39 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.89 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 1.09 (s, 18 H), 1.07 (s, 3 H); 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ = 129.2, 112.4, 100.5, 100.1, 18.6, 11.3 ppm; HRMS(EI): 계산치 C13H23SiCl: 242.1257, 실측치 242.1285.
Figure pct00168
에네딘 28. 상온에서 25 mL의 Et2O 중의 Pd (PPh3)4 (140 mg, 0.12 mmol, 2.5 mol%) 및 CuI (25 mg, 0.13 mmol, 2.5 mol%)의 교반된 현탁액에 n-BuNH2 (731 mg, 1.0 mL, 10.0 mmol, 2.0 당량), 에네인 27 (1.19 g, 4.9 mmol, 1.0 당량), 및 트리메틸실릴아세틸렌 (972 mg, 1.40 mL, 9.9 mmol, 2.0 당량)을 순차적으로 첨가하고, 반응 혼합물을 12시간 동안 대기 온도에서 교반하였다 (휘발성 물질, 밀봉된 플라스크 내에 가능한한 적은 가스상을 남김). 용매의 증발 후에, 잔류물을 헥산에 넣고 셀라이트®의 쇼트 패드를 통해 여과시키고, 헥산으로 용리시키고, 여과액을 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산)로 무색 오일을 얻었다 (1.44 g, 4.7 mmol, 96% 수율). R f (헥산) = 0.48; IR (필름) νmax = 2948, 2153, 2121, 1250, 1069, 848 cm-1; 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ = 5.84 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 5.82 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 1.09 (s, 18 H), 1.07 (s, 3 H), 0.18 (s, 9 H); 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ = 120.5, 120.0, 103.7, 103.0, 102.0, 100.0, 18.7, 11.2, -0.3 ppm; HRMS(EI): 계산치 C18H32Si2: 304.2042, 실측치 304.2032.
Figure pct00169
에네딘 11. 상온에서 70 mL의 벤젠/메탄올 (1:1) 중의 에네딘 28 (1.38 g, 4.5 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 K2CO3 (0.69 g, 5.0 mmol, 1.1 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 대기 온도에서 교반하였다. 물 (50 mL)을 첨가하고 수성 상을 헥산 (3 × 50 mL)으로 추출하였다. 유기 상을 식염수 (50 mL)로 세척하고, 무수 MgSO4 상에서 건조시킨 후 증발시켜 노르스름한 오일을 남겼다 (1.01 g, 4.3 mmol, 96%) (주의: 11 은 보관 중에 서서히 검은색으로 변하며, 이는 다음 단계에 대한 감소된 수율을 초래함, 최상의 수율을 위해 새로운 것을 사용). R f (헥산) = 0.66; IR (필름) νmax = 3303, 2945, 2149, 1463, 1049, 882 cm-1; 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ = 5.91 (dd, J = 11.0, 0.7 Hz, 1H), 5.81 (dd, J = 11.0, 1.2 Hz, 1H), 3.30 (dd, J = 1.2, 0.7 Hz, 1H), 1.08 (s, 18 H), 1.07 (s, 3 H); 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ = 119.3, 103.4, 100.3, 84.8, 80.9, 18.7, 11.2 ppm; HRMS(EI): 계산치 C15H24Si: 189.1099, 실측치 189.1100.
Figure pct00170
에네딘 12. 0℃의 THF (116 mL) 중의 새롭게 제조된 에네딘 11 (11.56 g, 49.76 mmol, 2.0 당량)의 교반된 용액에 이소프로필마그네슘 클로라이드 (THF중의 2.0 M, 24.9 mL, 49.76 mmol, 2.0 당량)를 적가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 25℃에서 교반한 다음, 잠시동안 히트 건(heat gun)으로 가열하여 환류시켰다. 또 다시, 반응 혼합물을 1시간 동안 25℃에서 교반한 다음, 잠시동안 히트 건으로 가열하여 환류시켰다. 마지막으로, 반응 혼합물을 45분 동안 25℃에서 교반한 다음, 0℃로 냉각시킨 후, 캐뉼라를 통해 THF (54 mL) 중의 TES 락톨 10 (12.0 g, 24.88 mmol, 1.0 당량)의 용액을 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 1시간 동안 0℃에서 교반한 후, 0℃에서 30분에 걸쳐 알릴 클로로포르메이트 (5.29 mL, 49.76 mmol, 2.0 당량)를 적가하였다. 반응 혼합물을 TLC가 10 (헥산:EtOAc 3:2)의 완전한 소비를 나타낼 때까지 30분 동안 25℃에서 교반하였다. 그 다음 반응 혼합물을 EtOAC(150 mL) 및 H2O (150 mL) 간에 분배시켰다. 수성 상을 EtOAC(3 × 150 mL)으로 추출하고, 화합된 유기 층을 포화된 NH4Cl 수용액 (150 mL), 포화된 NaHCO3 수용액 (150 mL), 및 식염수 (150 mL)로 세척한 다음, MgSO4 상에서 건조시킨 후 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 10:1 내지 4:1)로 엷은 노란색 고체로서 에네딘 12 (17.87 g, 22.38 mmol, 90% 수율)를 얻었다. 12: R f = 0.43 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 4:1); IR (필름) νmax = 2957, 2877, 2261, 1705, 1517, 1498, 1381, 1261, 1238 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 7.58 (br, 1 H), 7.16.8 (m, 5 H), 6.456.40 (m, 1 H), 6.36.2 (m, 1 H), 5.99 (m, 1 H), 6.96.8 (m, 2 H), 5.354.95 (m, 5 H), 4.70 (m, 2 H), 3.80 (s, 3 H), 3.79 (s, 3 H), [1.46 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) 및 1.37 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) 부분입체 쌍] , 1.11 (m, 21 H), 0.99 (m, 9 H), 0.70 (m, 6 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C46H64NO7Si2 + [M+H+]: 798.4216, 실측치 798.4217.
Figure pct00171
락톨 13. 대기 온도에서 CH3CN (84 mL) 및 H2O (21 mL) 중의 에네딘 12 (16.68 g, 20.89 mmol)의 교반된 용액에 AcOH (42 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 25℃에서 교반하고, EtOAC(100 mL)로 희석시킨 후, 포화된 NaHCO3 수용액 (100 mL)으로 퀀칭시켰다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAC(2 × 150 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 포화된 NaHCO3 수용액 (150 mL) 및 식염수 (150 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 후, 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 4:1 내지 2:1)로 노란색 고체로서 락톨 13 (12.86 g, 18.79 mmol, 91% 수율)을 얻었다. 13: R f = 0.28 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); IR (필름) νmax = 3443, 2960, 2261, 2144, 1702, 1516, 1498, 1380, 1260 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 7.56 (br, 1 H), 7.16.9 (m, 5 H), 6.36.2 (m, 2 H), 6.00 (m, 1 H), 5.95.8 (m, 2 H), 5.45.3 (m, 1 H), 5.25 (m, 1 H), 5.254.9 (m, 3 H), 4.84.5 (m, 3 H), 3.80 (s, 3 H), 3.79 (s, 3 H), [1.44 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) 및 1.35 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) 부분입체 쌍], 1.11 (m, 21 H), [0.19 (s, 9 H) 부분입체 쌍] ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C40H50NO7Si+ [M+H+]: 684.3351, 실측치 684.3348.
Figure pct00172
에폭시드 14. 0℃의 MeOH (117 mL) 중의 락톨 13 (12.00 g, 17.5 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 NaBH4 (863 mg, 22.8 mmol, 1.3 당량)를 분할하여 첨가하였다 (주의: 가스 발생). 반응 혼합물을 TLC가 13 (헥산:EtOAc 1:1)의 완전한 소비를 나타낼 때까지 20분 동안 0℃에서 교반한 다음, 식염수 (200 mL)로 희석시킨 후, CH2Cl2 (3 × 200 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조시키고, 농축시킨 후 CH2Cl2 (100 mL)에 넣었다. 0℃에서 이러한 용액에 분말 NaHCO3 (2.94 g, 35.0 mmol, 2.0 당량)를 첨가하고, 캐뉼라를 통해 CH2Cl2 (17 mL) 중의 m-CPBA (90% 순도, 3.47 g, 24.5 mmol, 1.4 당량)의 차가운 (0℃) 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 0℃에서 교반한 다음 (주의: 만일 반응 온도가 0℃를 초과하면, 알릴 카바메이트가 에폭시화될 것임), 포화된 NaHCO3 수용액 (50 mL) 및 포화된 Na2S2O3 수용액 (50 mL)으로 퀀칭시켰다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 CH2Cl2 (2 × 200 mL)으로 추출하였다. 화합된 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2 내지 1:1)로 노란색 고체로서 에폭시드 14 (10.01 g, 14.23 mmol, 2단계에 걸친 수율 81%)를 얻었다. 14: R f = 0.47 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:7); [α]D 25 = +200.0° (c = 1.00, CH2Cl2); IR (필름) νmax = 3475, 2940, 1703, 1505, 1261 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 7.37 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 7.25 (br, 1 H), 7.06 (d, J = 1.9 Hz, 1 H), 7.00 (dd, J = 8.2, 1.9 Hz, 1 H), 6.96 (dd, J = 8.7, 2.6 Hz, 1 H), 6.93 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 6.03 (br, 1 H), 5.89 (br, 1 H), 5.88 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 5.73 (dd, J = 11.0, 1.3 Hz, 1 H), 5.455.10 (br, 2 H), 5.02 (AB 시스템, 2 H), 4.754.45 (br, 2 H), 4.22 (qd, J = 6.8, 4.5 Hz, 1 H), 4.19 (dd, J = 13.0, 4.9 Hz, 1 H), 4.04 (dd, J = 11.9, 5.1 Hz, 1 H), 3.80 (s, 3 H), 3.80 (s, 3 H), 3.64 (d, J = 3.5 Hz, 1 H), 3.35 (t, J = 5.1 Hz, 1 H), 1.43 (d, J = 6.9 Hz, 3 H), 1.10 (s, 21 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 157.1, 155.4, 149.9, 149.9, 133.4, 130.2, 130.0, 129.6, 129.1, 121.5, 121.4, 120.2, 117.8, 115.7, 114.9, 112.6, 112.2, 104.4, 100.6, 94.1, 82.8, 77.8, 70.8, 68.1, 67.4, 62.2, 60.3, 56.1, 45.0, 21.3, 18.9, 11.8 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C40H52NO8Si+ [M+H+]: 702.3457, 실측치 702.3460.
Figure pct00173
아세테이트 15. -78℃의 CH2Cl2 (261 mL) 중의 에폭시드 14 (11.0 g, 15.67 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민 (5.45 mL, 31.32 mmol, 2.0 당량) 및 AcCl (1.12 mL, 15.67 mmol, 1.0 당량)을 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 16시간 동안 -78℃에서 교반하였다. 반응을 포화된 NaHCO3 수용액 (150 mL)으로 퀀칭시키고 CH2Cl2 (2 × 200 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2 내지 1:1)로 노란색 폼으로서 아세테이트 15 (9.45 g, 13.45 mmol, 81% 수율)를 얻었다. 15: R f = 0.17 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); [α]D 25 = -60.4° (c = 1.00, CH2Cl2); IR (필름) νmax = 3485, 2941, 2136, 1708, 1504, 1382, 1236 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 7.23 (br, 1 H), 7.10 (d, J = 2.8 Hz, 1 H), 7.04 (d, J = 1.9 Hz, 1 H), 7.00 (dd, J = 8.8, 2.7 Hz, 1 H), 6.98 (dd, J = 8.2, 1.9 Hz, 1 H), 6.92 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 6.09 (s, 1 H), 5.90 (br, 1 H), 5.88 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 5.73 (dd, J = 11.3, 1.9 Hz, 1 H), 5.35.1 (br, 2 H), 5.02 (s, 2 H), 4.74.5 (br, 4 H), 4.18 (qd, J = 6.8, 4.4 Hz, 1 H), 3.80 (s, 3 H), 3.80 (s, 3 H), 3.65 (d, J = 3.5 Hz, 1 H), 2.04 (s, 3 H), 1.43 (d, J = 7.0 Hz, 3 H), 1.11 (s, 21 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 171.1, 158.2, 157.4, 155.4, 150.2, 150.0, 133.5, 130.3, 130.0, 129.6, 128.7, 121.4, 120.2, 115.8, 115.0, 112.6, 112.5, 104.5, 100.8, 93.7, 83.3, 78.4, 71.0, 68.1, 67.6, 62.2, 60.7, 56.3, 56.3, 44.8, 21.4, 20.9, 19.0, 11.9 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C42H54NO9Si+ [M+H+]: 744.3562, 실측치 744.3556.
Figure pct00174
케톤 16. CH2Cl2 (128 mL) 중의 아세테이트 15 (9.0 g, 12.09 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 0℃에서 분말 NaHCO3 (4.06 g, 48.36 mmol, 4.0 당량), 및 데스마틴 페리오디난 (10.26 g, 24.18 mmol, 2.0 당량)을 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 2시간 동안 25℃에서 교반한 다음, 포화된 Na2S2O3 수용액 (150 mL)으로 퀀칭시켰다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 CH2Cl2 (2 × 200 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 포화된 NaHCO3 수용액 (150 mL) 및 식염수 (150 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 후 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전에 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과하였다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 대략 5 mL 부피로 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1)로 노란색 오일로서 케톤 16 (8.35 g, 11.25 mmol, 93% 수율)을 얻었다. 16: R f = 0.30 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); [α]D 25 = +41.8° (c = 1.00, CH2Cl2); IR (필름) νmax = 2958, 2142, 1747, 1712, 1505, 1384, 1308, 1222 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 7.33 (br d, J = 7.3 Hz, 1 H), 7.16 (d, J = 2.7 Hz, 1 H), 7.07 (dd, J = 8.8, 2.8 Hz, 1 H), 7.05 (d, J = 1.9 Hz, 1 H), 6.99 (dd, J = 8.1, 1.9 Hz, 1 H), 6.93 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 6.05 (br s, 1 H), 5.89 (br, 1 H), 5.89 (d, J = 11.3 Hz, 1 H), 5.76 (dd, J = 11.2, 1.9 Hz, 1 H), 5.255.15 (br, 2 H), 5.04 (s, 2 H), 4.73 (d, J = 12.8 Hz, 1 H), 4.74.5 (br, 2 H), 4.55 (d, J = 12.8 Hz, 1 H), 3.80 (s, 3 H), 3.80 (s, 3 H), 2.49 (s, 3 H), 2.01 (s, 3 H), 1.11 (s, 21 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 200.1, 170.6, 157.6, 155.6, 150.1, 150.0, 133.2, 130.1, 129.9, 129.4, 126.7, 121.9, 121.4, 119.8, 116.6, 114.8, 112.6, 112.4, 104.5, 102.3, 91.5, 83.9, 76.6, 71.0, 67.8, 61.3, 61.1, 56.3, 46.2, 29.9, 20.7, 19.0, 11.9 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C42H52NO9Si+ [M+H+]: 742.3406, 실측치 742.3400.
Figure pct00175
이차 알코올 17. THF (20 mL) 중의 케톤 16 (1.94 g, 2.62 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 0℃의 THF 중의 HOAc/TBAF의 미리 혼합된 용액 (HOAc: 394 mg, 6.55 mmol, 2.5 당량; TBAF: 6.55 mL, THF 중의 1.0 M, 6.55 mmol, 2.5 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 1시간 동안 15℃에서 교반한 다음, MeOH (25 mL)을 0℃에서 첨가한 후 NaBH4 (200 mg, 5.25 mmol, 2.0 당량)를 분할하여 첨가하였다 (주의: 가스 발생, 만일 너무 빠르게 첨가되면, d. r.이 감소될 것임). 결과적인 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반한 다음, H2O (10 mL)로 퀀칭시켰다. 반응 혼합물을 대략 20 mL 부피까지 조심스럽게 증발시킨 다음, EtOAC(100 mL) 및 H2O (60 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(3 × 100 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고 농축시켜 노란색 고체로서 이차 알코올 17 (1.43 g, 2.44 mmol, 93% 수율, > 25:1 dr)을 얻었다 (주의: 17 은 보관 중에 서서히 검은색으로 변하며, 이는 다음 단계에 대한 감소된 수율을 초래함, 최상의 수율을 위해 새로운 것을 사용). 17: R f = 0.19 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); [α]D 25 = +158.9° (c = 1.00, CH2Cl2); IR (필름) νmax = 3508, 3283, 2931, 1740, 1706, 1507, 1263, 1239, 1027 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 7.27 (br d, J = 8.6 Hz, 1 H), 7.14 (d, J = 2.8 Hz, 1 H), 7.05 (d, J = 1.6 Hz, 1 H), 7.01 (dd, J = 8.8, 2.8 Hz, 1 H), 6.99 (dd, J = 8.1, 1.6 Hz, 1 H), 6.93 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 6.055.83 (br, 2 H), 5.81 (AB 시스템, 2 H), 5.405.12 (br, 2 H), 5.03 (AB 시스템, 2 H), 4.76 (dd, J = 18.1, 13.0 Hz, 2 H), 4.704.50 (br, 2 H), 4.23 (qd, J = 6.2, 4.6 Hz, 1 H), 3.80 (s, 3 H), 3.80 (s, 3 H), 3.47 (s, 1 H), 3.15 (d, J = 4.7 Hz, 1 H), 2.04 (s, 3 H), 1.43 (d, J = 6.4 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 171.2, 157.4, 155.7, 150.2, 150.0, 133.4, 130.4, 129.8, 128.8, 121.3, 121.3, 120.7, 118.0, 115.9, 115.1, 112.6, 112.5, 93.3, 86.9, 82.7, 81.0, 77.2, 71.0, 67.6, 67.1, 62.0, 61.2, 60.9, 56.3, 45.8, 21.0, 20.1 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C33H34NO9 + [M+H+]: 588.2228, 실측치 588.2224.
Figure pct00176
일차 알코올 18. 0℃의 DMF (15 mL) 중의 아세테이트 17 (1.43 g, 2.44 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 이미다졸 (332 mg, 4.88 mmol, 2.0 당량) 및 TESCl (551 mg, 3.66 mmol, 1.5 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 15분 동안 0℃에서 교반하고, 5분 동안 25℃에서 교반한 다음, 포화된 NaHCO3 수용액 (50 mL)으로 퀀칭시키고, Et2O (3 × 50 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 H2O (3 × 50 mL) 및 식염수 (50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조한 후 농축시켰다. 결과적인 잔류물을 THF (20 mL)에 넣고 0℃로 냉각시켰다. 이러한 용액에 MeOH (2.5 mL) 중의 K2CO3의 차가운 (0-5℃) 포화된 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 20분 동안 -10℃에서 교반하였다 (주의: 18 은 이러한 온도에서 TES의 탈보호가 서서히 일어나므로 반응은 2분 간격으로 조심스럽게 모니터되어야 함). 그 다음 결과적인 혼합물을 EtOAC(50 mL) 및 pH 6.8 버퍼 (50 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(2 × 50 mL)로 추출한 다음, 화합된 유기 층을 식염수 (50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고 대략 5 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:1 내지 2:1)로 노란색 고체로서 일차 알코올 18 (1.36 g, 2.07 mmol, 2단계에 걸친 수율 85%)을 얻었다 (주의: 18 은 보관 중에 서서히 검은색으로 변하며, 이는 다음 단계에 대한 감소된 수율을 초래함, 최상의 수율을 위해 새로운 것을 사용). 18: R f = 0.42 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); [α]D 25 = +47.2° (c = 1.00, CH2Cl2); IR (필름) νmax = 3493, 3286, 2955, 2876, 1701, 1504, 1387, 1261, 1237 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 7.39 (d, J = 2.8 Hz, 1 H), 7.22 (br d, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.06 (d, J = 1.6 Hz, 1 H), 7.01 (dd, J = 8.2, 1.9 Hz, 1 H), 6.96 (dd, J = 8.8, 2.8 Hz, 1 H), 6.93 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 6.205.80 (br, 2 H), 5.76 (AB 시스템, 2 H), 5.475.05 (br, 2 H), 5.03 (AB 시스템, 2 H), 4.804.45 (br, 2 H), 4.38 (q, J = 6.3 Hz, 1 H), 4.24 (dd, J = 12.5, 5.7 Hz, 1 H), 4.17 (dd, J = 12.5, 5.0 Hz, 1 H), 3.81 (s, 3 H), 3.80 (s, 3 H), 3.40 (d, J = 1.3 Hz, 1 H), 3.15 (t, J = 5.5 Hz, 1 H), 1.43 (d, J = 6.3 Hz, 3 H), 0.95 (t, J = 7.9 Hz, 9 H), 0.63 (q, J = 7.9 Hz, 6 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 157.2, 155.8, 150.1, 150.0, 133.7, 133.5, 130.5, 130.3, 129.8, 129.5, 129.0, 121.6, 121.6, 120.3, 117.9, 116.0, 115.1, 112.8, 112.5, 94.4, 86.6, 81.6, 81.0, 76.8, 70.9, 67.9, 67.5, 63.4, 60.1, 56.3, 45.9, 21.5, 7.2, 5.5 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C37H46NO8Si+ [M+H+]: 660.2987, 실측치 660.2989.
Figure pct00177
알데히드 19. 0℃의 CH2Cl2 (20 mL) 중의 일차 알코올 18 (1.25 g, 1.90 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 분말 NaHCO3 (639 mg, 7.60 mmol, 4.0 당량), 및 데스마틴 페리오디난 (3.22 g, 3.80 mmol, 2.0 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 25℃에서 교반한 다음, CH2Cl2 (30 mL) 및 포화된 Na2S2O3 수용액 (30 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 CH2Cl2 (2 × 30 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 식염수 (30 mL)로 세척한 후, MgSO4 상에서 건조시키고, 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전에 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과시켰다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 대략 5 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 4:1)로 노란색 오일로서 알데히드 19 (1.12 g, 1.71 mmol, 90% 수율)를 얻었다 (주의: 19 는 보관 중에 서서히 검은색으로 변하며, 이는 다음 단계에 대한 감소된 수율을 초래함, 최상의 수율을 위해 새로운 것을 사용). 19: R f = 0.47 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); [α]D 25 = +86.9° (c = 1.00, CH2Cl2); IR (필름) νmax = 3282, 2956, 2877, 2261, 1708, 1502, 1385, 1263, 1239 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 9.83 (s, 1 H), 7.31 (br d, J = 7.4 Hz, 1 H), 7.21 (d, J = 2.8 Hz, 1 H), 7.04 (d, J = 1.9 Hz, 1 H), 7.02 (dd, J = 8.8, 2.8 Hz, 1 H), 6.98 (dd, J = 8.2, 1.9 Hz, 1 H), 6.92 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 6.05.8 (br, 2 H), 5.80 (m, 2 H), 5.35.1 (br, 2 H), 5.00 (AB 이중항, 2 H), 4.74.5 (br, 2 H), 4.38 (q, J = 6.3 Hz, 1 H), 3.80 (s, 3 H), 3.80 (s, 3 H), 3.44 (d, J = 1.8 Hz, 1 H), 1.43 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.96 (t, J = 8.0 Hz, 9 H), 0.63 (q, J = 8.0 Hz, 6 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 196.3, 157.0, 155.6, 150.1, 150.0, 133.3, 130.2, 129.9, 125.2, 121.5, 121.1, 121.0, 118.0, 116.2, 115.0, 112.7, 112.4, 92.7, 87.0, 83.1, 80.9, 80.5, 70.9, 67.7, 67.5, 64.6, 56.2, 46.2, 22.2, 7.0, 5.4 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C37H44NO8Si+ [M+H+]: 658.2831, 실측치 658.2846.
Figure pct00178
페놀 20. 대기 온도에서 CH2Cl2 (50 mL) 중의 알데히드 19 (1.12 g, 1.71 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 pH 6.8 버퍼 (5.0 mL) 및 DDQ (1.16 g, 5.13 mmol, 3.0 당량)를 첨가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고 결과적인 혼합물을 TLC가 19 (CH2Cl2 중의 4% EtOAc)의 완전한 소비를 나타낼 때까지 12시간 동안 대기 온도에서 교반하였다. 그 다음 반응 혼합물을 CH2Cl2 (100 mL) 및 pH 6.8 버퍼 (100 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 CH2Cl2 (2 × 100 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 pH 6.8 버퍼 (50 mL), H2O (50 mL), 및 식염수 (50 mL)로 세척한 후, MgSO4 상에서 건조시키고 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전에 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과시켰다. 고체를 CH2Cl2 중의 5% EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 대략 5 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (CH2Cl2:EtOAc 1:0 내지 30:1, 그 다음 헥산:EtOAc 4:1 그 후 3,4-디메톡시-벤즈알데히드가 완전히 용리됨)로 노란색 오일로서 페놀 20 (주의: 20 은 CH 2 Cl 2 중의 미량의 HCl에 민감함, 대략 20 mL까지 분획의 농축, 그 다음 20 mL 톨루엔으로 희석됨; 동일한 작업을 3회 반복한 다음 농축 건조) (810 mg, 1.59 mmol, 93% 수율)을 얻었다 (주의: 20 은 보관 중에 서서히 검은색으로 변하며, 이는 다음 단계에 대한 감소된 수율을 초래함, 최상의 수율을 위해 새로운 것을 사용). 20: R f = 0.44 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); [α]D 25 = +121.2° (c = 1.00, CH2Cl2); IR (필름) νmax = 3296, 2956, 1680, 1505, 1392, 1315 cm-1; 1H NMR (500 MHz, CD3CN): δ = 9.79 (s, 1 H), 7.22 (br d, J = 8.4 Hz, 1 H), 7.15 (br s, 1 H), 7.06 (d, J = 2.8 Hz, 1 H), 6.84 (dd, J = 8.6, 2.6 Hz, 1 H), 5.90 (br s, 1 H), 5.81 (s, 2 H), 5.3-5.1 (br, 2 H), 4.74.5 (br, 2 H), 4.38 (q, J = 6.4 Hz, 1 H), 3.49 (s, 1 H), 1.42 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.96 (t, J = 8.0 Hz, 9 H), 0.63 (q, J = 8.0 Hz, 6 H) ppm; 13C NMR (125 MHz, CD3CN): δ = 196.4, 155.3, 133.4, 130.1, 125.2, 121.1, 121.0, 117.9, 116.7, 115.1, 92.8, 86.9, 83.1, 68.2, 67.6, 67.5, 64.6, 46.3, 22.2, 7.0, 5.4 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C28H34NO6Si+ [M+H+]: 508.2150, 실측치 508.2140.
Figure pct00179
시클릭 에네딘 21a. 상업적으로 이용가능한 무수 CeCl3 (비드, -10 메시, 1.57 g, 6.36 mmol, 4.0 당량)을 함유하는 250 mL 둥근 바닥 플라스크를 16시간 동안 격렬하게 교반하면서 고 진공 하에 110℃ (오일 배쓰 온도)로 가열하여 흰색 분말을 얻었다. 플라스크를 Ar으로 플러시시키고, THF (50 mL)를 첨가하여 흐린 현탁액을 형성시켰으며, 이를 2시간 동안 초음파처리하여 우유빛의 현탁액을 얻었다. THF (50 mL) 중의 페놀 20 (810 mg, 1.59 mmol, 1.0 당량)의 용액을 대기 온도에서 20분에 걸쳐 초음파 처리 하에 캐뉼라를 통해 미리 형성된 CeCl3 현탁액에 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 30분 동안 대기 온도에서 교반한 다음, -78℃로 냉각시킨 후, KHMDS(THF 중의 1.0 M, 9.60 mL, 9.60 mmol, 6.0 당량)를 적가하였으며, 이때 반응 혼합물의 색이 밝은 노란색으로부터 갈색으로 변한 다음, 어두운 갈색으로 변하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 -78℃에서 교반한 다음, 2시간에 걸쳐 -40℃까지 서서히 승온시키고, 동일한 온도에서 AcOH (THF 중의 1.0 M, 19.1 mL, 19.1 mmol, 12.0 당량)를 첨가하여 퀀칭시켰다. 첨가를 완료한 후, 반응 혼합물을 대기 온도로 따뜻해지게 하고, 조심스럽게 대략 40 mL 부피까지 농축시킨 다음 EtOAC(100 mL) 및 pH 6.8 버퍼 (100 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(2 × 100 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 H2O (50 mL) 및 식염수 (50 mL)로 세척한 후, MgSO4 상에서 건조시키고 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전에 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과시켰다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 대략 5 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 4:1 내지 3:1)로 오프-화이트색 고체로서 시클릭 에네딘 21a (601 mg, 1.18 mmol, 74% 수율) 및 노르스름한 고체로서 21a 및 이의 C 17 -에피머 21b의 혼합물 (154 mg, 21a:21b 1:3, 19% 수율)을 얻었다. 21a: R f = 0.36 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); [α]D 25 = +477.8° (c = 0.50, CH2Cl2); IR (필름) νmax = 3395, 2955, 2877, 1682, 1504, 1395, 1281 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 7.94 (d, J = 2.8 Hz, 1 H), 7.14 (br, 1 H), 6.95 (s, 1 H), 6.73 (dd, J = 8.7, 2.8 Hz, 1 H), 5.91 (br, 1 H), 5.90 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.83 (s, 1 H), 5.75 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.355.15 (br, 2 H), 5.05 (d, J = 4.7 Hz, 1 H), 4.754.55 (br, 2 H), 4.54 (q, J = 6.3 Hz, 1 H), 4.24 (d, J = 4.7 Hz), 1.38 (d, J = 6.2 Hz, 3 H), 0.98 (t, J = 8.0 Hz, 9 H), 0.65 (m, 6 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 154.3, 133.5, 130.2, 128.3, 124.5, 123.9, 118.3, 117.7, 115.4, 100.3, 97.1, 91.3, 77.2, 67.3, 66.8, 66.0, 64.9, 60.9, 47.4, 22.3, 7.2, 5.6 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C28H34NO6Si+ [M+H+]: 508.2150, 실측치 508.2140.
Figure pct00180
퀴논 아미날 22a. 0℃의 MeOH (40 mL) 중의 시클릭 에네딘 21a (601 mg, 1.18 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 캐뉼라를 통해 MeOH (20 mL) 중의 PhI (OAc)2 (420 mg, 1.30 mmol, 1.1 당량)의 용액을 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 10분 동안 0℃에서 교반하고 5분 동안 25℃에서 교반한 다음, EtOAC(100 mL) 및 반(half) 포화된 NaHCO3 수용액 (100 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(2 × 50 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 식염수 (50 mL)로 세척한 후, MgSO4 상에서 건조시키고, 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전에 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과시켰다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 대략 3 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 4:1 내지 3:1)로 흰색 고체로서 퀴논 아미날 22a (529 mg, 0.983 mmol, 83% 수율)를 얻었다. 22a: R f = 0.30 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); [α]D 25 = +592.2° (c = 0.50, CH2Cl2); IR (필름) νmax = 3448, 2954, 2877, 1707, 1666, 1390, 1282 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 7.54 (br, 1 H), 7.04 (d, J = 1.9 Hz, 1 H), 6.27 (dd, J = 10.4, 2.0 Hz, 1 H), 6.055.95 (m, 3 H), 5.86 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.36 (d, J = 17.0 Hz, 1 H), 5.25 (d, J = 10.5 Hz, 1 H), 4.83 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 4.84.6 (br, 2 H), 4.54 (q, J = 6.3 Hz, 1 H), 4.25 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 3.03 (s, 3 H), 1.34 (d, J = 6.3 Hz, 3 H), 0.96 (t, J = 8.0 Hz, 9 H), 0.63 (m, 6 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 184.8, 138.6, 133.4, 128.7, 124.8, 124.6, 99.7, 98.1, 92.3, 89.0, 70.0, 66.5, 63.8, 51.3, 46.8, 22.4, 7.2, 5.6 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C29H36NO7Si+ [M+H+]: 538.2255, 실측치 538.2247.
Figure pct00181
안트라퀴논 25a. -78℃의 THF (1.0 mL) 중의 3-시아노-1(3H)-이소벤조퓨라논 (23, 34 mg, 0.22 mmol, 3.0 당량)의 용액에 LiHMDS(THF 중의 1.0 M, 0.29 mL, 0.29 mmol, 4.0 당량)를 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 20분 동안 -78℃에서 교반하고, -78℃에서 THF (1.0 mL) 중의 퀴논 아미날 22a (39 mg, 72 μmol, 1.0 당량)의 미리 냉각시킨 용액을 캐뉼라로 첨가하였다. -78℃에서 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 대기 온도로 승온시키고 추가 50분 동안 교반하였으며 이때 반응 혼합물은 어두운 적색으로 변하였고 TLC가 22a (CH2Cl2 중의 8% EtOAc)의 완전한 소비를 나타내었다. 그 다음 반응 혼합물에 pH 6.8 버퍼 (20 mL)를 첨가하여 퀀칭시키고 EtOAC(3 × 20 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 식염수 (20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 후 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전에 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과시켰다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 농축시켜 어두운 적색 고체로서 미정제 알록-안트라퀴논 24를 얻었으며, 이를 Ar 하에서 탈기된 THF (1.5 mL) 중에 용해시키고 0℃로 냉각하였다. 이러한 용액에 Pd (PPh3)4 (6 mg, 5.2 μmol, 0.08 당량)를 첨가하고 모르폴린 (16 mg, 0.17 mmol, 2.4 당량)을 적가한 후, 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싼 뒤, 반응 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반하에 두었으며, 이때 반응 혼합물이 어두운 보라색으로 변하였다. 냉각 배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 20분 동안 대기 온도에서 교반한 다음, pH 6.8 버퍼 (20 mL)를 첨가하여 퀀칭시키고 EtOAC(3 × 20 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 포화된 NaHCO3 수용액 (20 mL) 및 식염수 (20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 후, 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전에 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과하였다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 대략 1 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 2:1 내지 1:1]로 보라색 고체로서 안트라퀴논 25a (29 mg, 52 μmol, 73% 수율)를 얻었다. 25: R f = 0.58 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); [α]D 25 = +2600° (c = 0.002, EtOAc); IR (필름) νmax = 3429, 2955, 2876, 1788, 1620, 1587, 1487, 1277, 1234 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.17 (s, 1 H), 9.98 (d, J = 4.0 Hz, 1 H), 8.48 (s, 1 H), 8.29 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 8.27 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.86 (t, J = 7.7 Hz, 1 H), 7.81 (t, J = 7.0 Hz, 1 H), 5.95 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.88 (d, J = 10.1 Hz, 1 H), 5.12 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.99 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 4.56 (q, J = 6.3 Hz, 1 H), 4.43 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 1.39 (d, J = 6.4 Hz, 3 H), 0.99 (t, J = 8.0 Hz, 9 H), 0.67 (q, J = 7.7 Hz, 6 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.5, 184.2, 156.6, 144.7, 136.2, 135.8, 135.5, 134.3, 133.6, 130.9, 127.7, 127.0, 124.8, 123.8, 114.2, 112.3, 100.2, 99.8, 91.3, 88.4, 77.3, 66.8, 64.8, 44.3, 22.6, 7.2, 5.6 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C32H32NO6Si+ [M+H+]: 554.1993, 실측치 554.1992.
Figure pct00182
운시알라마이신 (26a). 상온에서 탈기된 THF (9.0 mL) 중의 안트라퀴논 25a (29 mg, 52 μmol, 1.0 당량)의 용액에 1:1 3HF·Et3N:THF (3.0 mL) 용액을 첨가하였다. 밀봉된 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 1.5시간 동안 상온에서 교반한 다음, EtOAC(30 mL) 및 포화된 NaHCO3 수용액 (30 mL) 간에 분배시켰다. 유기 층을 식염수 (30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시킨 뒤 대략 1 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:2]로 보라색 고체로서 운시알라마이신 (26a) (23 mg, 52 μmol, 99% 수율)을 얻었다. 26: m.p. = 175℃ (분해(decomp.), EtOAc); R f = 0.14 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); [α]D 25 = +2300° (c = 0.002, EtOAc); IR (필름) νmax = 3429, 2926, 1715, 1620, 1587, 1484, 1355, 1234 cm-1; 1H NMR (600 MHz, DMSO-d 6 ): δ = 13.19 (s, 1 H), 10.01 (d, J = 4.5 Hz, 1 H), 8.53 (s, 1 H), 8.24 (오버랩핑 이중항, 2 H), 7.94 (td, J = 7.4, 1.1 Hz, 1 H), 7.89 (td, J = 7.4, 1.1 Hz, 1 H), 6.68 (d, J = 5.1 Hz, 1 H), 6.06 (d, J = 9.8 Hz, 1 H), 5.98 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.39 (d, J = 5.7 Hz, 1 H), 5.16 (d, J = 5.1 Hz, 1 H), 5.07 (d, J = 4.6 Hz, 1 H), 4.33 (quint, J = 6.2 Hz, 1 H), 1.31 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, DMSO-d 6 ): δ = 186.8, 182.1, 154.7, 143.5, 135.5, 134.8, 134.3, 133.5, 132,1, 129.8, 126.5, 126.0, 123.9, 123.2, 112.6, 110.3, 100.3, 98.8, 89.6, 87.3, 75.9, 63.5, 62.9, 59.7, 43.1, 21.9 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C26H18NO6 + [M+H+]: 440.1129, 실측치 440.1123.
Figure pct00183
프탈리드 29. 0℃의 THF (40 mL) 중의 6-아미노프탈리드 (10.0 g, 67.0 mmol, 1.0 당량), DMAP(164 mg, 1.34 mmol, 0.02 당량), 및 Et3N (13.6 g, 18.7 mL, 134 mmol, 2.0 당량)의 교반된 용액에 Boc2O (17.6 g, 80.4 mmol, 1.2 당량)을 0℃에서 격렬하게 교반 하에 10분에 걸쳐 분할하여 첨가하였다 (주의: 가스 발생). 첨가가 완료되면, 아이스 배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 40℃에서 3시간 동안 교반한 후 EtOAC(50 mL)로 희석시키고 0℃로 냉각시킨 뒤 포화된 NH4Cl 수용액 (40 mL)을 조심스럽게 첨가하여 퀀칭시켰다. 결과적인 혼합물을 EtOAC(3 × 50 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 물 (50 mL) 및 식염수 (50 mL)로 세척한 뒤, MgSO4 상에서 건조시키고 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1 내지 1:1)로 노르스름한 고체로서 프탈리드 29를 얻었다 (13.4 g, 53.6 mmol, 80% 수율). 29: R f = 0.31 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1); IR (필름) νmax = 3341, 2979, 2931, 2851, 1741, 1719, 1604, 1538, 1497, 1450, 1423, 1390, 1365, 1316, 1299, 1234, 1126, 1063, 1002 cm-1; 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ = 7.83 (d, J = 2.0, 1 H), 7.76 (d, J = 7.8, 1 H), 7.36 (d, J = 8.3, 1 H), 6.92 (br, 1 H), 5.23 (s, 2 H), 1.47 (s, 9 H) ppm; 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ = 170.9, 152.5, 140.5, 139.6, 126.4, 124.8, 122.5, 114.6, 81.1, 69.5, 28.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C13H16NO4 + [M+H+]: 250.1074, 실측치 250.1076.
Figure pct00184
포밀벤즈아미드 32. 상온에서 CCl4/벤젠 (200 mL, 1:1) 중의 프탈리드 29 (13.4 g, 53.6 mmol, 1.0 당량)의 교반된 현탁액에 N-브로모숙신이미드 (11.4 g, 64.3 mmol, 1.2 당량)를 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 가열 환류시킨 다음, 아조비스이소부티로니트릴 (1.76 g, 10.7 mmol, 0.2 당량)을 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가 2시간 동안 환류 하에 격렬하게 교반한 다음 대기 온도로 냉각시키고, 8시간 동안 0℃에서 보관하였다. 반응 혼합물을 여과시키고 침전물을 CCl4 (0-5℃)로 세척하였다. 화합된 여과액을 농축시켜 노란색 폼으로서 미정제 30을 얻었으며, 이를 H2O/THF (200 mL, 1:1) 중에 현탁시켰다. 현탁액을 5시간 동안 85℃에서 교반하고 대기 온도로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 EtOAC(5 × 50 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축하여 노란색 흡습성 고체로서 미정제 31을 얻었으며, 이를 추가 8시간 동안 P2O5 상에서 건조시켰다. 미정제 산 31을 SOCl2 (60 mL) 중에 현탁시키고 반응 혼합물을 2시간 동안 가열 환류시켰다. 그 다음 반응 혼합물을 대기 온도로 냉각시키고 N2 하에 농축시킨 뒤 잔류물을 톨루엔 (2 × 25 mL)과 공증발시켜 모든 미량의 SOCl2를 제거하였다. 미정제 생성물을 CH2Cl2 (50 mL) 중에 용해시키고 반응 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. CH2Cl2 (10 mL) 중의 디에틸아민 (7.1 g, 10 mL, 96.7 mmol, 1.8 당량)의 용액을 적가하였다. 첨가를 완료하면, 아이스 배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 2시간 동안 대기 온도에서 교반하였다. 반응을 1N HCl (100 mL)로 퀀칭시키고, 수성 층을 CH2Cl2 (2 × 50 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 식염수 (50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:1 내지 2:1)로 노르스름한 고체로서 포밀벤즈아미드 32를 얻었다 (10.3 g, 32.2 mmol, 60% 수율). 32: R f = 0.31 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1); 1H NMR (600 MHz, CDCl3): δ = 9.89 (s, 1 H), 7.82 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 7.52 (dd, J = 8.4, 1.4 Hz, 1 H), 7.33 (d, J = 1.6 Hz, 1 H), 7.33 (br, 1 H), 3.60 (br, 2 H), 3.12 (q, J = 7.1 Hz, 2 H), 1.51 (s, 9 H), 1.30 (t, J = 7.1 Hz, 3 H), 1.04 (t, J = 7.1 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CDCl3): δ = 189.1, 168.5, 151.9, 144.1, 140.6, 131.6, 126.9, 117.8, 115.7, 81.5, 60.4, 43.0, 39.2, 28.2, 13.8, 12.6 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C17H25N2O4 + [M+H+]: 321.1809, 실측치 321.1810.
Figure pct00185
시아노프탈리드 33. 0℃의 CH2Cl2 (6 mL) 중의 포밀벤즈아미드 32 (1.03 g, 3.22 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 TMSCN (640 mg, 0.81 mL, 6.44 mmol, 2.0 당량), 및 THF (0.6 mL) 중의 KCN (5.2 mg, 0.08 mmol, 0.025 당량) 및 18-크라운-6 (16 mg, 0.06 mmol, 0.02 당량)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밀봉된 플라스크 내에서 1.5시간 동안 동일한 온도에서 교반하고, 대기 온도에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음 반응 혼합물을 N2 하에 농축시키고 잔류물을 톨루엔 (2 × 25 mL)과 공증발시켜 모든 미량의 TMSCN을 제거하였다. 결과적인 갈색 오일을 AcOH (3 mL) 중에 용해시키고 상온에서 36시간 동안 교반하였다. 반응을 1N NaOH (10 mL)을 조심스럽게 첨가하여 퀀칭시키고, 결과적인 혼합물을 EtOAC(20 mL) 및 1N NaOH (10 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(3 × 20 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 H2O (20 mL) 및 식염수 (20 mL)로 세척한 뒤, MgSO4 상에서 건조시키고 농축시켜 결정성 고체로서 미정제 생성물을 얻었다. 미정제 생성물을 CH3CN (20 mL) 중에 용해시키고 HF 수용액 (48% 내지 51%, 4 mL)을 상온에서 한번에 첨가하였다. 상온에서 16시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 포화된 NaHCO3 수용액 (150 mL)에 조심스럽게 부었다. 수성 층을 EtOAC(3 × 50 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 H2O (25 mL) 및 식염수 (25 mL)로 세척한 후, MgSO4 상에서 건조시키고 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 4:1)로 흰색 고체로서 시아노프탈리드 33을 얻었다 (393 mg, 2.25 mmol, 70% 수율). 33: R f = 0.31 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 4:1); 1H NMR (400 MHz, CD3CN): δ = 7.46 (d, J = 8.3, 1 H), 7.09 (dd, J = 8.3, 1.7 Hz, 1 H), 7.02 (d, J = 1.7 Hz, 1 H), 6.15 (s, 1 H), 4.76 (br, 2 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 169.5, 151.9, 131.2, 126.4, 124.5, 122.9, 116.3, 109.2, 67.1 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C9H7N2O2 + [M+H+]: 175.0502, 실측치 175.0503.
Figure pct00186
안트라퀴논 35a. -78℃의 THF (1.0 mL) 중의 시아노프탈리드 33 (38 mg, 0.22 mmol, 3.0 당량)의 용액에 LiHMDS(THF 중의 1.0 M, 0.29 mL, 0.29 mmol, 4.0 당량)를 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 20분 동안 -78℃에서 교반하고, -78℃에서 THF (1.0 mL) 중의 퀴논 아미날 22a (39 mg, 73 μmol, 1.0 당량)의 미리 냉각시킨 용액을 캐뉼라를 통해 첨가하였다. -78℃에서 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 대기 온도로 승온시키고 추가 1시간 동안 교반하였으며 이때 반응 혼합물은 어두운 적색으로 변하였고 TLC가 22a (CH2Cl2 중의 8% EtOAc)의 완전한 소비를 나타내었다. 그 다음 반응 혼합물을 pH 6.8 버퍼 (20 mL)를 첨가하여 퀀칭시키고 EtOAC(3 × 20 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 식염수 (20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전에 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과하였다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 농축시켜 어두운 적색 고체로서 미정제 알록-안트라퀴논 34a를 얻었으며, 이를 Ar 하에 탈기된 THF (1.5 mL) 중에 용해시키고 0℃로 냉각시켰다. 이러한 용액에 Pd (PPh3)4 (8 mg, 3.5 μmol, 0.1 당량)를 첨가하고, 모르폴린 (16 mg, 16 μL, 0.17 mmol, 2.4 당량)을 적가한 뒤, 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 결과적인 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반하도록 두었으며 이때 반응 혼합물이 어두운 보라색으로 변하였다. 냉각 배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 20분 동안 대기 온도에서 교반한 다음, pH 6.8 버퍼 (20 mL)를 첨가하여 퀀칭시키고 EtOAC(3 × 20 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 포화된 NaHCO3 수용액 (20 mL) 및 식염수 (20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전에 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과하였다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 대략 1 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 2:1 내지 1:1]로 보라색 고체로서 안트라퀴논 35a (28 mg, 50 μmol, 69% 수율)를 얻었다. 35a: R f = 0.58 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); [α]D 25 = +2600° (c = 0.002, EtOAc); IR (필름) νmax = 3376, 3240, 2955, 2876, 1625, 1580, 1481, 1353, 1322, 1258, 1232 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.11 (s, 1 H), 9.94 (d, J = 3.8 Hz, 1 H), 8.39 (s, 1 H), 8.01 (d, J = 8.6 Hz, 1 H), 7.35 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 6.99 (dd, J = 8.6, 2.0 Hz, 1 H), 5.93 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.86 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.16 (br, 2 H), 5.10 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 4.92 (d, J = 4.0 Hz, 1 H), 4.54 (q, J = 6.3 Hz, 1 H), 4.40 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 1.38 (d, J = 6.3 Hz, 3 H), 0.98 (t, J = 8.0 Hz, 9 H), 0.66 (q, J = 7.9 Hz, 6 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 189.3, 183.8, 156.4, 154.1, 144.0, 136.1, 135.4, 130.2, 129.7, 125.4, 124.9, 123.7, 120.3, 114.8, 112.6, 109.9, 100.3, 100.1, 91.3, 88.3, 77.3, 66.8, 65.0, 64.8, 44.3, 22.6, 7.3, 5.6 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C32H33N2O6Si+ [M+H+]: 569.2102, 실측치 569.2104.
Figure pct00187
8-아미노- 운시알라마이신 (36a). 상온에서 탈기된 THF (7.5 mL) 중의 안트라퀴논 35a (28 mg, 50 μmol, 1.0 당량)의 용액에 1:1 3HF·Et3N:THF (2.5 mL) 용액을 첨가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 1.5시간 동안 상온에서 교반한 다음, EtOAC(25 mL) 및 포화된 NaHCO3 수용액 (25 mL) 간에 분배시켰다. 유기층을 식염수 (25 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시킨 뒤, 대략 1 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:3]로 보라색 고체로서 8-아미노-운시알라마이신 (36a) (22 mg, 48 μmol, 98% 수율)을 얻었다. 36a: R f = 0.24 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); [α]D 25 = +870° (c = 0.02, EtOAc); IR (필름) νmax = 3375, 3239, 2934, 1626, 1581, 1480, 1357, 1326, 1258, 1233 cm-1; 1H NMR (400 MHz, CD3CN): δ = 13.10 (s, 1 H), 9.96 (d, J = 4.0 Hz, 1 H), 8.41 (s, 1 H), 8.00 (d, J = 8.6 Hz, 1 H), 7.34 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 6.98 (dd, J = 8.6, 2.4 Hz, 1 H), 5.95 (dd, J = 10.0, 0.6 Hz, 1 H), 5.88 (dt, J = 10.0, 1.2 Hz, 1 H), 5.24 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 5.17 (br, 2 H), 4.86 (dd, J = 4.3, 1.6 Hz, 1 H), 4.50 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 4.37 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.26 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 189.3, 183.9, 156.4, 154.1, 143.8, 136.0, 135.4, 130.2, 129.7, 125.3, 124.5, 123.9, 120.3, 114.8, 112.7, 109.9, 100.4, 99.5, 91.2, 88.8, 76.9, 66.0, 65.5, 64.8, 44.2, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C26H19N2O6 + [M+H+]: 455.1238, 실측치 455.1239.
Figure pct00188
프탈리드 40a. DMF (50 mL) 중의 디메틸벤조산 (7.5 g, 49.9 mmol, 1.0 당량), 및 무수 K2CO3 (10.3 g, 74.8 mmol, 1.5 당량, 사용 전에 16시간 동안 110℃의 고 진공 하에 건조됨)의 현탁액에, MeI (7.79 g, 3.42 mL, 54.9 mmol, 1.1 당량)를 상온에서 격렬하게 교반 하에 10분에 걸쳐 적가하였다. 첨가를 완료하면, 반응 혼합물을 상온에서 추가 5시간 동안 교반한 다음, H2O (100 mL)에 붓고 EtOAC(3 × 100 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 물 (3 × 50 mL) 및 식염수 (2 × 50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축시켜 무색 오일로서 미정제 생성물 37a를 얻었다. 에스테르 37a 및 N-브로모숙신이미드 (19.1 g, 100 mmol, 2.1 당량)를 CCl4 (50 mL) 중에 용해시키고, 반응 혼합물을 80℃로 가열한 후 벤조일 페록시드 (121 mg, 0.5 mmol, 0.01 당량)를 한번에 첨가하였다. 8시간 동안 가열을 계속하고 반응 혼합물을 대기 온도로 냉각시킨 다음, 12시간 동안 0℃에서 보관하였다. 그 다음 반응 혼합물을 여과하고, 침전물을 CCl4 (0-5℃)로 헹구었다. 그 다음 화합된 여과액을 포화된 NaHCO3 수용액 (25 mL) 및 식염수 (25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 후, 농축하여 노르스름한 고체로서 미정제 생성물 38a를 얻었다. 정미의(neat) 디브로모에스터 38a를 10시간 동안 약한 진공 하에서 150℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 대기 온도로 냉각시키고 밝은 갈색 고체를 미정제 생성물 39a로서 얻었다. 브로모프탈리드 39a를 DMF (50 mL) 중에 용해시키고, 무수 K2CO3 (10.3 g, 74.8 mmol, 1.5 당량, 사용 전에 16시간 동안 110℃의 고 진공 하에 건조됨) 및 n-Bu4NI (1.8 g, 5.0 mmol, 0.1 당량)를 순차적으로 첨가한 후, 프탈리미드 (8.0 g, 54.9 mmol, 1.1 당량)를 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 40℃에서 교반한 다음, H2O (100 mL)로 붓고 EtOAC(3 × 100 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 물 (3 × 50 mL) 및 식염수 (2 × 50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 후 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 10:1 내지 8:1)로 노르스름한 고체로서 프탈리드 40a를 얻었다 (10.8 g, 36.9 mmol, 74% 수율). 40a: R f = 0.31 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 8:1); 1H NMR (600 MHz, CDCl3): δ = 7.93 (s, 1 H), 7.87 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.76 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.75 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.47 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 5.29 (s, 2 H), 4.96 (s, 2 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C17H12NO4 + [M+H+]: 294.0761, 실측치 294.0765.
Figure pct00189
프탈리드 40b. 40a의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 2,4-디메틸벤조산 (1.52 g, 10.1 mmol, 1.0 당량)으로부터 노르스름한 고체로서 프탈리드 40b를 얻었다 (2.08 g, 7.09 mmol, 70% 수율). 40b: R f = 0.31 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 8:1); 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.86 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.85 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.74 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.57 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 7.51 (s, 1 H), 5.44 (s, 2 H), 4.87 (s, 2 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C17H12NO4 + [M+H+]: 294.0761, 실측치 294.0760.
Figure pct00190
프탈리드 40c. 40a의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 2,3-디메틸벤조산 (2.00 g, 13.3 mmol, 1.0 당량)으로부터 노르스름한 고체로서 프탈리드 40c를 얻었다 (2.15 g, 7.33 mmol, 55% 수율). 40c: R f = 0.31 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 8:1); 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.86 (d, J = 7.6, 1 H), 7.85 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.80 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 7.75 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.51 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 5.54 (s, 2 H), 4.85 (s, 2 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C17H12NO4 + [M+H+]: 294.0761, 실측치 294.0763.
Figure pct00191
프탈리드 40d. 40a의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 2,6-디메틸벤조산 (2.02 g, 13.5 mmol, 1.0 당량)으로부터 노르스름한 고체로서 프탈리드 40d를 얻었다 (2.53 g, 8.63 mmol, 64% 수율). 40d: R f = 0.31 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 8:1); 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ = 7.91 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.77 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.56 (t, J = 7.7 Hz, 1 H), 7.37 (dd, J = 7.7, 0.8 Hz, 1 H), 7.18 (dd, J = 7.7, 0.8 Hz, 1 H), 5.48 (s, 2 H), 5.33 (s, 2 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C17H12NO4 + [M+H+]: 294.0761, 실측치 294.0765.
Figure pct00192
포밀벤즈아미드 43a. 대기 온도에서 CCl4/벤젠 (140 mL, 1:1) 중의 프탈리드 40a (10.8 g, 36.9 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 N-브로모숙신이미드 (7.85 g, 44.3 mmol, 1.2 당량)를 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 가열 환류시킨 다음, 아조비스이소부티로니트릴 (1.21 g, 7.37 mmol, 0.2 당량)을 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가 2시간 동안 환류 하에 격렬하게 교반한 다음, 대기 온도로 냉각시키고, 8시간 동안 0℃에서 보관하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 침전물을 CCl4 (05℃)로 헹구었다. 그 다음 화합된 여과액을 포화된 NaHCO3 수용액 (25 mL) 및 식염수 (25 mL)로 세척하고, Mg2SO4 상에서 건조시킨 뒤, 농축하여 노란색 폼으로서 미정제 41a를 얻었으며, 이를 H2O/THF (140 mL, 1:1) 중에 현탁시켰다. 현탁액을 5시간 동안 85℃에서 교반하고 대기 온도로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 EtOAC(5 × 50 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 농축시켜 노란색 흡습성 고체로서 미정제 42a를 얻었으며, 이를 추가 8시간 동안 P2O5 상에서 건조시켰다. 미정제 산 42a를 SOCl2 (40 mL) 중에 현탁시키고 반응 혼합물을 2시간 동안 환류 가열하였다. 반응 혼합물을 N2 하에 농축시키고 잔류물을 톨루엔 (2 × 25 mL)과 공증발시켜 모든 미량의 SOCl2를 제거하였다. 미정제 생성물을 CH2Cl2 (35 mL) 중에 용해시키고 반응 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. CH2Cl2 (7 mL) 중의 디에틸아민 (5.0 g, 7 mL, 67.7 mmol, 1.8 당량)의 용액을 적가하고, 아이스 배쓰를 제거한 뒤 반응 혼합물을 2시간 동안 대기 온도에서 교반하였다. 반응을 1N HCl (70 mL)로 퀀칭시키고, 반응 혼합물을 CH2Cl2 (2 × 50 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 식염수 (50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:1 내지 2:1)로 노르스름한 고체로서 포밀벤즈아미드 43a를 얻었다 (6.05 g, 16.6 mmol, 45% 수율). 43a: R f = 0.31 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1); 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 9.99 (s, 1 H), 7.88 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.85 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.73 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.57 (dd, J = 8.0, 1.4 Hz, 1 H), 7.38 (d, J = 1.4 Hz, 1 H), 4.89 (s, 2 H), 3.58 (q, J = 7.1 Hz, 2 H), 3.07 (q, J = 7.1 Hz, 2 H), 1.28 (t, J = 7.1 Hz, 3 H), 1.00 (t, J = 7.1 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ = 189.9, 168.2, 167.7, 142.6, 140.0, 134.2, 132.0, 131.8, 130.3, 129.1, 126.7, 123.5, 43.0, 41.0, 39.1, 13.7, 12.6 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C21H21N2O4 + [M+H+]: 365.1496, 실측치 365.1496.
Figure pct00193
포밀벤즈아미드 43c. 43a의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 프탈리드 40c (2.11 g, 7.21 mmol, 1.0 당량)로부터 노르스름한 고체로서 포밀벤즈아미드 43c를 얻었다 (1.05 g, 2.88 mmol, 40% 수율). 43c: R f = 0.31 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1); 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 10.36 (s, 1 H), 7.91 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.76 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.51 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 7.27 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 7.25 (dd, J = 7.6, 1.0 Hz, 1 H), 5.32 (s, 2 H), 3.61 (q, J = 7.2 Hz, 2 H), 3.14 (q, J = 7.2, 2 H), 1.30 (t, J = 7.2 Hz, 3 H), 1.06 (t, J = 7.2 Hz, 3 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C21H21N2O4 + [M+H+]: 365.1496, 실측치 365.1496.
Figure pct00194
포밀벤즈아미드 43d. 43a의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 프탈리드 40d (2.49 g, 8.49 mmol, 1.0 당량)로부터 노르스름한 고체로서 포밀벤즈아미드 43d를 얻었다 (1.30 g, 3.57 mmol, 42% 수율). 43d: R f = 0.31 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1); 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ = 10.04 (s, 1 H), 7.89 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.86 (dd, J = 7.5, 1.4 Hz, 1 H), 7.76 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.49 (dt, J = 7.7, 1.4 Hz, 1 H), 7.46 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 5.09 (d, J = 16 Hz, 1 H), 4.68 (d, J = 16 Hz, 1 H), 3.58 (q, J = 7.1 Hz, 2 H), 3.07 (q, J = 7.1 Hz, 2 H), 1.28 (t, J = 7.1 Hz, 3 H), 1.00 (t, J = 7.1 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ = 189.9, 168.2, 167.7, 142.6, 140.0, 134.2, 132.0, 131.8, 130.3, 129.1, 126.7, 123.5, 43.0, 41.0, 39.1, 13.7, 12.6 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C21H21N2O4 + [M+H+]: 365.1496, 실측치 365.1496.
Figure pct00195
시아노프탈리드 44a. 0℃의 CH2Cl2 (6 mL) 중의 포밀벤즈아미드 43a (1.17 g, 3.22 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 TMSCN (640 mg, 0.81 mL, 6.44 mmol, 2.0 당량), 및 THF (0.6 mL) 중의 KCN (5.2 mg, 0.08 mmol, 0.025 당량) 및 18-크라운-6 (16 mg, 0.06 mmol, 0.02 당량)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 밀봉된 플라스크 내 동일한 온도에서 교반하고, 대기 온도에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음 반응 혼합물을 N2 하에서 농축시키고 잔류물을 톨루엔 (2 × 25 mL)과 공증발시켜 모든 미량의 TMSCN을 제거하였다. 결과적인 갈색 오일을 AcOH (3 mL) 중에 용해시키고 TLC가 완전한 전환 (헥사메스(hexames):EtOAc 3:2)를 나타낼 때까지 상온에서 48시간 동안 교반하였다. 반응을 1N NaOH (10 mL)의 조심스러운 첨가로 퀀칭시키고 결과적인 혼합물을 EtOAC(20 mL) 및 1N NaOH (10 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(3 × 20 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 H2O (20 mL) 및 식염수 (20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1 내지 3:2)로 노르스름한 고체를 얻었으며, 이를 EtOAc로 재결정하여 흰색 고체로서 시아노프탈리드 44a를 얻었다 (902 mg, 2.83 mmol, 88% 수율). 44a: R f = 0.31 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.99 (s, 1 H), 7.91 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.86 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.74 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.67 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 6.06 (s, 1 H), 4.98 (s, 2 H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ = 167.7, 167.0, 141.2, 140.6, 136.0, 134.4, 131.7, 126.2, 125.0, 123.6, 123.1, 113.6, 65.5, 40.7 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C18H11N2O4 + [M+H+]: 319.0713, 실측치 319.0715.
Figure pct00196
시아노프탈리드 44b. 44a의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 포밀벤즈아미드 43b (605 mg, 1.66 mmol, 1.0 당량)로부터 흰색 고체로서 시아노프탈리드 44b를 얻었다 (450 mg, 1.41 mmol, 85% 수율). 44b: R f = 0.31 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); 1H NMR (600 MHz, CDCl3): δ = 7.94 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.89 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.77 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.76 (dd, J = 5.5, 3.1 Hz, 2 H), 7.75 (s, 1 H), 6.04 (s, 1 H), 4.99 (dd, J = 15.0, 25.4 Hz, 2 H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ = 167.7, 166.9, 144.8, 142.4, 134.5, 132.0, 131.8, 127.0, 124.0, 123.7, 122.8, 113.6, 65.5, 41.1 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C18H11N2O4 + [M+H+]: 319.0713, 실측치 319.0715.
Figure pct00197
시아노프탈리드 44c. 44a의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 포밀벤즈아미드 43c (992 mg, 2.72 mmol, 1.0 당량)로부터 흰색 고체로서 시아노프탈리드 44c를 얻었다 (650 mg, 2.04 mmol, 75% 수율). 44a: R f = 0.30 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); 1H NMR (500 MHz, CD3CN): δ = 7.88 (d, J = 7.7, 1 H), 7.87 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.86 (d, J = 7.7 Hz, 1 H), 7.81 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.70 (t, J = 7.7 Hz, 1 H), 6.48 (s, 1 H), 4.98 (dd, J = 15.6, 27.8 Hz, 2 H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ = 169.0, 168.7, 141.4, 137.1, 135.4, 133.1, 132.9, 132.7, 126.5, 126.0, 124.2, 115.1, 66.7, 38.0 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C18H11N2O4 + [M+H+]: 319.0713, 실측치 319.0715.
Figure pct00198
시아노프탈리드 44d. 44a의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 포밀벤즈아미드 43d (1.24 g, 3.41 mmol, 1.0 당량)로부터 흰색 고체로서 시아노프탈리드 44d를 얻었다 (902 mg, 2.83 mmol, 83% 수율). 44d: R f = 0.30 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); 1H NMR (600 MHz, CDCl3): δ = 7.91 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.78 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.72 (t, J = 7.7 Hz, 1 H), 7.60 (d, J = 7.7 Hz, 1 H), 7.39 (d, J = 7.7 Hz, 1 H), 6.10 (s, 1 H), 5.43 (dd, J = 18.1, 25.7 Hz, 2 H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ = 167.8, 167.0, 142.4, 138.4, 135.8, 134.4, 131.9, 129.1, 123.7, 123.6, 121.7, 113.7, 65.5, 36.5 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C18H11N2O4 + [M+H+]: 319.0713, 실측치 319.0715.
Figure pct00199
안트라퀴논 46aa . -78℃의 THF (1.2 mL) 중의 시아노프탈리드 44a (91 mg, 0.27 mmol, 2.0 당량)의 용액에 LiHMDS(THF 중의 1.0 M, 0.43 mL, 0.43 mmol, 3.0 당량)를 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 20분 동안 -78℃에서 교반하고, -78℃에서 THF (1.4 mL) 중의 퀴논 아미날 22a (78 mg, 0.14 mmol, 1.0 당량)의 미리 냉각시킨 용액을 캐뉼라를 통해 첨가하였다. -78℃에서 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 대기 온도로 승온시키고 추가 1.5시간 동안 교반하였으며 이때 반응 혼합물이 어두운 적색으로 변하였고 TLC가 22a (CH2Cl2 중의 8% EtOAc)의 완전한 소비를 나타내었다. 그 다음 반응 혼합물에 pH 6.8 버퍼 (30 mL)를 첨가하여 퀀칭시키고 EtOAC(3 × 30 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 식염수 (30 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전 EtOAc로 세척됨)을 통해 여과시켰다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 농축시켜 어두운 적색 고체로서 미정제 알록-안트라퀴논 45aa를 얻었으며, 이를 Ar 하에서 탈기된 THF (2.0 mL) 중에 용해시키고 0℃로 냉각시켰다. 이러한 용액에 Pd (PPh3)4 (32 mg, 10.4 μmol, 0.16 당량)를 첨가한 후, 모르폴린 (32 mg, 32 μL, 0.34 mmol, 2.4 당량)을 적가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 결과적인 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반하도록 두었으며 이때 반응 혼합물이 어두운 보라색으로 변하였다. 냉각 배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 20분 동안 대기 온도에서 교반한 다음, pH 6.8 버퍼 (30 mL)의 첨가로 퀀칭시키고 EtOAC(3 × 30 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 H2O (30 mL) 및 식염수 (30 mL)로 세처거하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전 EtOAc로 세척됨)을 통해 여과시켰다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 대략 1 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 2:1 내지 1:1]로 보라색 고체로서 안트라퀴논 46aa를 얻었다 (92 mg, 0.13 mmol, 90% 수율). 46aa: R f = 0.58 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); [α]D 25 = +2600° (c = 0.002, EtOAc); 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.11 (s, 1 H), 9.97 (d, J = 4.0 Hz, 1 H), 8.46 (s, 1 H), 8.23 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 7.87 (d, J = 1.9 Hz, 2 H), 7.81 (d, J = 2.2 Hz, 1 H), 7.80 (d, J = 1.9 Hz, 2 H), 5.94 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.87 (d, J = 9.8 Hz, 1 H), 5.10 (s, 1 H), 4.97 (s, 2 H), 4.97 (s, 1H), 4.55 (q, J = 5.8 Hz, 1 H), 4.45 (d, J = 3.7 Hz, 1 H), 1.38 (d, J = 5.8 Hz, 3 H), 0.98 (t, J = 7.6 Hz, 9 H), 0.66 (q, J = 7.6 Hz, 6 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.2, 183.8, 169.0, 156.7, 144.8, 143.5, 136.3, 135.4, 135.1, 134.8, 133.8, 133.0, 130.9, 128.3, 126.1, 124.9, 124.1, 123.8, 114.2, 112.2, 100.2, 99.7, 91.3, 88.4, 77.4, 66.7, 64.9, 64.7, 44.3, 41.8, 22.6, 7.3, 5.6 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C41H36N2O8Si+ [M+H+]: 712.2241, 실측치 712.2243.
Figure pct00200
8- 프탈이미도메틸 - 운시알라마이신 ( 47aa ). 상온에서 탈기된 THF (15 mL) 중의 안트라퀴논 46aa (92 mg, 0.13 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 1:1 3HF·Et3N:THF (5.0 mL) 용액을 첨가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 1.5시간 동안 상온에서 교반한 다음, EtOAC(50 mL) 및 포화된 NaHCO3 수용액 (50 mL) 중에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(2 × 25 mL)로 추출하고, 화합된 유기 추출물을 식염수 (25 mL)로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조시키고, 대략 1 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (비활성화된 실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:2)로 보라색 고체로서 프탈이미도메틸-운시알라마이신 (47aa)를 얻었다 (76 mg, 0.13 mmol, 98% 수율). 47aa: R f = 0.24 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1]; [α]D 25 = +26000° (c = 0.005, EtOAc) [이 값(아마도 너무 높음)은 희석시 얻어졌으며, 이때 편광계가 회전 판독(rotation read-out)을 나타내었음; 더욱 높은 농도에서 기기는 화합물의 불용성로 인해 판독을 제공하지 않았음]; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.10 (s, 1 H), 9.99 (d, J = 4.1 Hz, 1 H), 8.48 (s, 1 H), 8.23 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 7.87 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.82 (d, J = 2.2 Hz, 1 H), 7.81 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 5.96 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.88 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.24 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 5.49 (s, 2 H), 4.91 (dd, J = 4.4, 1.4 Hz, 1 H), 4.44 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 4.38 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.27 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.2, 183.9, 169.0, 156.7, 144.7, 143.6, 136.2, 135.4, 135.1, 134.8, 133.8, 133.0, 130.9, 128.4, 126.1, 124.5, 124.1, 124.1, 114.3, 112.3, 100.3, 99.1, 91.3, 88.8, 77.0, 65.8, 65.3, 64.7, 44.2, 41.8, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C35H23N2O8 + [M+H+]: 599.1449, 실측치 599.1447.
Figure pct00201
7- 프탈이미도메틸 - 운시알라마이신 ( 47ba ). 47aa의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 시아노프탈리드 44b (23 mg, 73 μmol, 3.0 당량) 및 퀴논 아미날 22a (13 mg, 24 μmol, 1.0 당량)로부터 중간체 46ba를 거쳐 보라색 고체로서 7-프탈이미도메틸-운시알라마이신 (47ba) (11 mg, 18 μmol, 76% 수율)를 얻었다. 47ba: R f = 0.24 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); [α]D 25 = +28000° (c = 0.005, EtOAc) [이 값(아마도 너무 높음)은 희석시 얻어졌으며, 이때 편광계가 회전 판독(rotation read-out)을 나타내었음; 더욱 높은 농도에서 기기는 화합물의 불용성로 인해 판독을 제공하지 않았음]; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.13 (s, 1 H), 9.96 (d, J = 4.1 Hz, 1 H), 8.49 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 8.19 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 7.87 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.81 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.77 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 5.96 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.87 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.24 (d, J = 4.5 Hz, 1 H), 4.98 (s, 2 H), 4.90 (dd, J = 4.4, 1.5 Hz, 1 H), 4.56 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 4.38 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.32 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.1, 183.8, 169.0, 156.7, 144.8, 144.7, 136.1, 136.0, 135.4, 133.5, 133.0, 132.9, 131.0, 127.7, 126.8, 124.5, 124.1, 124.1, 114.2, 112.4, 100.4, 99.1, 91.3, 88.8, 77.0, 65.9, 65.3, 64.7, 44.3, 41.9, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C35H23N2O8 + [M+H+]: 599.1449, 실측치 599.1449.
Figure pct00202
6- 프탈이미도메틸 - 운시알라마이신 ( 47ca ). 47aa의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 시아노프탈리드 44c (59 mg, 0.18 mmol, 3.0 당량) 및 퀴논 아미날 22a (33 mg, 61 μmol, 1.0 당량)로부터 중간체 46ca를 거쳐 보라색 고체로서 6-프탈이미도-메틸-운시알라마이신 (47ca) (1 mg, 2 μmol, 3% 수율)를 얻었다. 47ca: R f = 0.23 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); [α]D 25 = +28000° (c = 0.005, EtOAc) [이 값(아마도 너무 높음)은 희석시 얻어졌으며, 이때 편광계가 회전 판독(rotation read-out)을 나타내었음; 더욱 높은 농도에서 기기는 화합물의 불용성로 인해 판독을 제공하지 않았음]; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.07 (s, 1 H), 9.92 (d, J = 4.1 Hz, 1 H), 8.52 (s, 1 H), 8.31 (d, J = 7.7 Hz, 1 H), 7.92 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.85 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.69 (t, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.57 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 5.98 (d, J = 9.5 Hz, 1 H), 5.91 (d, J = 9.7 Hz, 1 H), 5.51 (d, J = 2.9 Hz, 2 H), 5.26 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 4.93 (dd, J = 4.2, 1.5 Hz, 1 H), 4.58 (d, J = 5.1 Hz, 1 H), 4.39 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.33 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 1.40 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C35H23N2O8 + [M+H+]: 599.1449, 실측치 599.1444.
Figure pct00203
9- 프탈이미도메틸 - 운시알라마이신 ( 47da ). 47aa의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 시아노프탈리드 44d (59 mg, 0.18 mmol, 3.0 당량) 및 퀴논 아미날 22a (33 mg, 61 μmol, 1.0 당량)로부터 중간체 46da를 거쳐 보라색 고체로서 9-프탈이미도-메틸-운시알라마이신 (47da) (26 mg, 43 μmol, 71% 수율)을 얻었다. 47da: R f = 0.25 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); [α]D 25 = +30000° (c = 0.005, EtOAc) [이 값(아마도 너무 높음)은 희석시 얻어졌으며, 이때 편광계가 회전 판독(rotation read-out)을 나타내었음; 더욱 높은 농도에서 기기는 화합물의 불용성로 인해 판독을 제공하지 않았음]; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.19 (s, 1 H), 9.95 (d, J = 4.0 Hz, 1 H), 8.53 (s, 1 H), 8.32 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.92 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.86 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.73 (t, J = 7.8 Hz, 1 H), 7.52 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 5.98 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.90 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.49 (s, 2 H), 5.24 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.93 (dd, J = 4.4, 1.4 Hz, 1 H), 4.58 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.39 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.33 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 1.39 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 190.9, 184.0, 169.4, 156.6, 144.3, 140.2, 137.7, 135.7, 135.4, 135.1, 133.2, 131.6, 131.2, 130.7, 127.5, 124.5, 124.1, 124.1, 115.1, 112.1, 100.4, 99.1, 91.2, 88.8, 77.1, 65.9, 65.3, 64.7, 44.3, 42.1, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C35H23N2O8 + [M+H+]: 599.1449, 실측치 599.1445.
Figure pct00204
8- 프탈이미도메틸 -17- 에피 - 운시알라마이신 ( 47ab ). 47aa의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 시아노프탈리드 44a (47 mg, 0.15 mmol, 3.0 당량) 및 퀴논 아미날 22b (26 mg, 48 μmol, 1.0 당량)로부터 중간체 46ab를 거쳐 보라색 고체로서 8-프탈이미도메틸-17-에피-운시알라마이신 (47ab) (21 mg, 35 μmol, 73% 수율)을 얻었다. 47ab: R f = 0.30 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); [α]D 25 = +26000° (c = 0.005, EtOAc) [이 값(아마도 너무 높음)은 희석시 얻어졌으며, 이때 편광계가 회전 판독(rotation read-out)을 나타내었음; 더욱 높은 농도에서 기기는 화합물의 불용성로 인해 판독을 제공하지 않았음]; IR (필름) νmax = 3424, 2918, 1770, 1716, 1625, 1597, 1493, 1394, 1329, 1248, 1207 cm-1; 1H NMR (400 MHz, CD3CN): δ = 13.13 (s, 1 H), 10.04 (d, J = 3.9 Hz, 1 H), 8.25 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 8.21 (d, J = 1.2 Hz, 1 H), 7.88 (dd, J = 5.4, 3.2 Hz, 2 H), 7.83 (d, J = 1.0 Hz, 1 H), 7.81 (dd, J = 5.4, 3.2 Hz, 2 H), 7.62 (s, 1 H), 5.93 (AB 시스템, 2 H), 5.86 (d, J = 4.2 Hz, 1 H), 5.11 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 4.98 (s, 2 H), 4.87 (d, J = 4.2 Hz, 1 H), 4.11 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 3.13 (d, J = 4.6 Hz, 1 H), 1.34 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.2, 184.0, 169.0, 156.9, 143.8, 143.7, 137.0, 135.4, 135.1, 134.8, 133.8, 133.0, 128.4, 126.6, 126.6, 126.1, 124.1, 123.9, 114.6, 112.2, 100.5, 99.9, 90.4, 88.8, 76.7, 65.6, 65.3, 60.4, 43.8, 41.7, 20.3 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C35H23N2O8 + [M+H+]: 599.1449, 실측치 599.1444.
Figure pct00205
9- 프탈이미도메틸 -17- 에피 - 운시알라마이신 ( 47db ). 47aa의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 시아노프탈리드 44d (23 mg, 73 μmol, 3.0 당량) 및 퀴논 아미날 22b (13 mg, 24 μmol, 1.0 당량)로부터 중간체 46db를 거쳐 보라색 고체로서 9-프탈이미도메틸-17-에피-운시알라마이신 (47db) (10 mg, 17 μmol, 70% 수율)을 얻었다. 47db: R f = 0.30 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); 1H NMR (500 MHz, CD3CN): δ = 13.22 (s, 1 H), 10.00 (d, J = 4.0 Hz, 1 H), 8.32 (dd, J = 7.9, 1.2 Hz, 1 H), 7.92 (dd, J = 5.4, 3.2 Hz, 2 H), 7.85 (dd, J = 5.4, 3.2 Hz, 2 H), 7.72 (t, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.65 (s, 1 H), 7.52 (dd, J = 7.9, 1.2 Hz, 1 H), 5.95 (AB 시스템, 2 H), 5.88 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 5.48 (s, 2 H), 5.12 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 4.89 (dd, J = 4.5, 1.3 Hz, 1 H), 4.28 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 3.21 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 1.35 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C35H23N2O8 + [M+H+]: 599.1449, 실측치 599.1444.
Figure pct00206
8- 아미노메틸 - 운시알라마이신 ( 48aa ). 0℃의 탈기된 THF (1.0 mL) 중의 8-프탈이미도메틸-운시알라마이신 (47aa) (3.6 mg, 5 μmol, 1.0 당량)의 용액에 MeNH2 (40%, 1.0 mL) 수용액을 적가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 18시간 동안 10℃에서 교반한 다음, 0℃로 냉각시키고 탈기된 THF (10 mL)로 희석시킨 뒤 N2 하에서 5℃로 대략 1 mL 부피까지 농축시키고, 차가운 탈기된 THF (0℃, 10 mL)로 희석시켰다. 동일한 작업을 5회 반복하여 보라색 고체로서 미정제 8-아미노메틸-운시알라마이신 (48aa)을 얻었으며, 이를 즉시 다음 단계에 사용하였다 (주의: 48aa 는 매우 불안정하고, 산 및 염기 모두에 민감하며, -78℃에서 서서히 분해됨, 최상의 수율을 위해 새로운 것을 사용). 48aa: R f = 0.10 (실리카 겔, MeOH:EtOAc 1:1); HRMS(ESI-TOF): 계산치 C27H21N2O6 + [M+H+]: 469.1394, 실측치 469.1397.
Figure pct00207
7- 아미노메틸 - 운시알라마이신 ( 48ba ). 48aa의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 7-프탈이미도메틸-운시알라마이신 (47ba) (1.5 mg, 2 μmol, 1.0 당량)로부터 보라색 고체로서 미정제 7-아미노메틸-운시알라마이신 (48ba)을 얻었으며, 이를 즉시 다음 단계에 사용하였다 (주의: 48ba 는 매우 불안정하고, 산 및 염기 모두에 민감하며, -78℃에서 서서히 분해됨, 최상의 수율을 위해 새로운 것을 사용). 48ba: R f = 0.10 (실리카 겔, MeOH:EtOAc 1:1); HRMS(ESI-TOF): 계산치 C27H21N2O6 + [M+H+]: 469.1394, 실측치 469.1396.
Figure pct00208
6- 아미노메틸 - 운시알라마이신 ( 48ca ). 48aa의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 6-프탈이미도메틸-운시알라마이신 (47ca) (1.0 mg, 1 μmol, 1.0 당량)로부터 보라색 고체로서 미정제 6-아미노메틸-운시알라마이신 (48ca)을 얻었으며, 이를 즉시 다음 단계에 사용하였다 (주의: 48ca 는 매우 불안정하고, 산 및 염기 모두에 민감하며, -78℃에서 서서히 분해됨, 최상의 수율을 위해 새로운 것을 사용). 48ca: R f = 0.10 (실리카 겔, MeOH:EtOAc 1:1); HRMS(ESI-TOF): 계산치 C27H21N2O6 + [M+H+]: 469.1394, 실측치 469.1390.
Figure pct00209
9- 아미노메틸 - 운시알라마이신 ( 48da ). 48aa의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 9-프탈이미도메틸-운시알라마이신 (47da) (3.0 mg, 4 μmol, 1.0 당량)으로부터 보라색 고체로서 미정제 9-아미노메틸-운시알라마이신 (48da)을 얻었으며, 이를 즉시 다음 단계에 사용하였다 (주의: 48da 는 매우 불안정하고, 산 및 염기 모두에 민감하며, -78℃에서 서서히 분해됨, 최상의 수율을 위해 새로운 것을 사용). 48da: R f = 0.10 (실리카 겔, MeOH:EtOAc 1:1); HRMS(ESI-TOF): 계산치 C27H21N2O6 + [M+H+]: 469.1394, 실측치 469.1399
Figure pct00210
8- 터트 - 부틸카르바모일메틸 - 운시알라마이신 ( 49aa ). 미정제 8-아미노메틸-운시알라마이신 (48aa) [8-프탈이미도메틸-운시알라마이신 (47aa) (3.6 mg, 5 μmol, 1.0 당량)로부터 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조됨]을 0℃에서 탈기된 THF (1.0 mL) 중에 현탁시키고, 포화된 NaHCO3 수용액 (1.0 mL)을 한번에 첨가한 후, Boc2O (1.3 mg, 6 μmol, 1.2 당량)을 첨가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 1.5시간 동안 0℃에서 교반한 다음, EtOAC(5 mL) 및 pH 6.8 버퍼 (5 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(2 × 25 mL)로 추출하고, 화합된 유기 추출물을 식염수 (5 mL)로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조시키고, 대략 1 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:2]로 보라색 고체로서 8-터트-부틸카르바모일메틸-운시알라마이신 (49aa) (2.7 mg, 4.5 μmol, 95% 수율)을 얻었다. 49aa: R f = 0.27 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); [α]D 25 = +2300° (c = 0.002, EtOAc); 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.17 (s, 1 H), 10.00 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 8.50 (s, 1 H), 8.25 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 8.15 (s, 1 H), 7.75 (dd, J = 8.0, 1.8 Hz, 1 H), 6.03 (br, 1 H), 5.97 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.89 (dt, J = 9.9, 1.3 Hz, 1 H), 5.24 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 4.92 (dd, J = 4.4, 1.7 Hz, 2 H), 4.65 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.39 (d, J = 5.7, 1 H), 4.38 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.37 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 1.43 (s, 9 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.5, 184.1, 156.6, 147.3, 144.6, 136.1, 134.6, 134.0, 133.7, 128.1, 125.0, 124.5, 124.1, 114.4, 112.4, 100.4, 99.1, 91.2, 88.8, 79.8, 77.0, 65.8, 65.3, 64.7, 44.3, 44.2, 28.5, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C32H29N2O8 + [M+H+]: 569.1918, 실측치 569.1918.
Figure pct00211
설파이드 49ea . 미정제 8-아미노메틸-운시알라마이신 (48aa) [8-프탈이미도메틸-운시알라마이신 (47aa, 16 mg, 27 μmol, 1.0 당량)으로부터 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조됨]을 0℃에서 탈기된 THF (1.0 mL) 중에 현탁시키고, 포화된 NaHCO3 수용액 (1.0 mL)을 한번에 첨가한 후, 탈기된 THF (0.5 mL) 중의 2-(페닐티오)에틸 클로로포르메이트 (14 mg, 66 μmol, 2.5 당량) 용액을 적가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 5시간 동안 0℃에서 교반한 다음, EtOAC(5 mL) 및 pH 6.8 버퍼 (5 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(2 × 25 mL)로 추출하고, 화합된 유기 추출물을 식염수 (5 mL)로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조시키고, 대략 1 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:2]로 보라색 고체로서 설파이드 49ea (9.5 mg, 14 μmol, 55% 수율)를 얻었다. 49ea: R f = 0.23 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.20 (s, 1 H), 10.01 (d, J = 4.1 Hz, 1 H), 8.50 (s, 1 H), 8.23 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 7.73 (dd, J = 8.0, 1.8 Hz, 1 H), 6.00 (br, 1 H), 5.98 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.89 (dt, J = 10.0, 1.3 Hz, 1 H), 5.24 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 4.94 (dd, J = 4.4, 1.7 Hz, 2 H), 4.65 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.4-4.2 (m, 2 H), 4.39 (d, J = 5.0, 1 H), 4.38 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.35 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 3.2-3.0 (m, 2 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.6, 184.2, 154.4, 147.3, 144.6, 136.1, 135.1, 134.6, 134.0, 133.8, 129.1, 128.6, 128.1, 125.3 125.1, 124.5, 124.1, 114.3, 112.4, 100.3, 99.1, 91.2, 88.8, 77.1, 65.8, 65.3, 64.7, 64.6, 44.3, 44.2, 32.4, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C36H29N2O8S+ [M+H+]: 649.1639 실측치 649.1638.
Figure pct00212
설폰 49fa . CH2Cl2 (0.5 mL) 중의 설파이드 49ea (6.5 mg, 10 μmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 -78℃에서 새롭게 제조된 디메틸디-옥시란 (2.0 mL, 아세톤 중의 ~0.1 M, 0.2 mmol, 20 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 알루미늄 포일로 싼 뒤, 0℃로 승온되도록 두었다. 20분 동안 0℃에서 교반한 후, Me2S(84 mg, 0.1 mL, 1.4 mmol, 135 당량)을 한번에 첨가하고, 동일한 온도에서 20분 동안 교반을 계속하였다. 그 다음 반응 혼합물을 EtOAC(25 mL)로 희석시키고, H2O (5 mL) 및 식염수 (5 mL)로 세척한 뒤, Na2SO4 상에서 건조시키고, 대략 1 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:3]로 보라색 고체로서 설폰 49fa (2.7 mg, 4.5 μmol, 55% 수율)을 얻었다. 49fa: R f = 0.23 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:3 그 다음 EtOAc:MeOH 50:1]; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.19 (s, 1 H), 9.99 (d, J = 4.1 Hz, 1 H), 8.51 (s, 1 H), 8.24 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 8.18 (s, 1 H), 7.73 (dd, J = 8.0, 1.8 Hz, 1 H), 6.05 (br, 1 H), 5.97 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.88 (dt, J = 10.0, 1.3 Hz, 1 H), 5.26 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 4.97 (dd, J = 4.4, 1.7 Hz, 2 H), 4.66 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.6-4.3 (m, 2 H), 4.39 (d, J = 5.1, 1 H), 4.38 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.50 (br, 2 H), 3.35 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.5, 184.1, 153.7, 147.3, 144.6, 139.1, 136.1, 134.6, 134.1, 134.0, 133.7, 129.5, 128.1, 128.0, 125.0, 124.5, 124.1, 114.4, 112.4, 100.4, 99.1, 91.2, 88.8, 77.0, 65.8, 65.3, 64.7, 59.4, 55.2, 44.3, 44.2, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C36H29N2O10S+ [M+H+]: 681.1537, 실측치 681.1532.
Figure pct00213
포밀벤즈아미드 52. DMF (10 mL) 중의 메틸 2,4-디히드록시-3-메틸벤조에이트 (0.93 g, 5.10 mmol)의 교반된 용액에 N2 하에 대기 온도에서 무수 K2CO3 (5.64 g, 40.8 mmol, 8.0 당량, 사용 전에 16시간 동안 110℃에서 고 진공 하에 건조됨) 및 메틸 아이오다이드 (925 μL, 2.90 g, 20.4 mmol, 4.0 당량)를 첨가하였다. 9시간 동안 50℃에서 교반한 후, 반응 혼합물을 셀라이트®의 쇼트 패드를 통해 여과하였다. 여과액을 EtOAC(25 mL)으로 희석시키고 3N HCl (20 mL)로 산성화하였다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAC(3 × 25 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 포화된 NaHCO3 수용액 (25 mL), 및 식염수 (3 × 25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 농축하여 무색 오일로서 메틸 에테르 50 (1.05 g, 5.01 mmol, 98% 수율)을 얻었다. 트리메틸알루미늄 (헥산 중의 2.0 M 용액, 5.0 mL, 10.0 mmol, 2.0 당량)을 벤젠 (3.0 mL) 중의 디에틸아민 (2.0 mL, 1.46 g, 20.0 mmol, 4.0 당량)의 얼음-냉각된 용액에 첨가하였다. 10분 후, 냉각 배쓰를 제거하고 반응 플라스크를 대기 온도로 승온되도록 두었다. 2.0 mL 벤젠 중의 메틸 에테르 50 (상기 참조) 용액을 5분에 걸쳐 반응 혼합물에 적가하였다. 그 다음 반응 혼합물을 120℃로 오일 배쓰 중에서 환류 가열하였다 (주의: 가스 발생). 7시간 후, 가열 배쓰를 제거하고 반응 플라스크를 대기 온도로 냉각되도록 두었다. 반응 혼합물을 얼음 물 (25 mL) 및 농축 HCl (0.5 mL)의 혼합물에 조심스럽게 부었다. 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAC(3 × 25 L)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 H2O (25 mL), 및 식염수 (25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:1 내지 1:1)로 노르스름한 오일로서 벤즈아미드 51을 얻었다 (2.14 g, 8.5 mmol, 85% 수율). -78℃의 THF (60 mL) 중의 벤즈아미드 51의 교반된 용액에 N,N,N,N-테트라메틸에틸렌디아민 (2.54 mL, 1.98 g, 17.0 mmol, 2.0 당량)을 첨가한 후, -78℃에서 터트-BuLi (펜탄 중 1.7 M 용액, 10.0 mL, 17.0 mmol, 2.0 당량)을 적가하였다. 50분 후, DMF (7.85 mL, 102 mmol, 12 당량)를 첨가하고, 추가 50분 후, 냉각 배쓰를 제거하고 혼합물을 2시간에 걸쳐 대기 온도로 승온되도록 두었다. 반응 혼합물을 H2O (25 mL)로 희석시키고, 20분의 교반 후에, 희석된 용액을 부분적으로 농축시켜 휘발성 유기 용매를 제거하였다. 수성 잔류물에 EtOAC(50 mL)를 첨가하고, 2개의 층을 분리하였다. 수성 층을 EtOAC(50 mL)로 추출하였다. 화합된 유기층을 H2O (25 mL) 및 식염수 (3 × 25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1 내지 1:1)로 엷은 노란색 고체로서 포밀벤즈아미드 52를 얻었다 (2.37 g, 8.5 mmol, 99% 수율). 52: R f = 0.31 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ = 9.93 (s, 1 H), 7.20 (s, 1 H), 3.90 (s, 3 H), 3.80 (s, 3 H), 3.73 (dq, J = 7.1, 13.7 Hz, 1 H), 3.52 (dq, J = 7.1, 13.7 Hz, 1 H), 3.03 (ddq, J = 7.2, 14.4, 14.4, Hz, 2 H), 2.21 (s, 3 H), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3 H), 1.00 (t, J = 7.2 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ = 189.9, 166.2, 159.0, 155.1, 131.3, 128.1, 120.2, 104.3, 112.3, 62.0, 55.9, 43.2, 39.2, 13.8, 12.7, 9.7 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C15H22NO4 + [M+H+]: 280.1543, 실측치 280.1540.
Figure pct00214
시아노프탈리드 55. CCl4 (8 mL) 중의 포밀벤즈아미드 52 (2.37 g, 8.5 mmol, 1.0 당량.)의 교반된 용액에 N2 하에 대기 온도에서 N-브로모숙신이미드 (1.95 g, 10.2 mmol, 1.2 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃로 가열한 뒤, 벤조일 페록시드 (121 mg, 0.5 mmol, 0.06 당량)를 한번에 첨가하였다. 2시간 동안 가열을 계속하고 반응 혼합물을 대기 온도로 냉각되도록 둔 뒤, 포화된 NaHCO3 수용액 (25 mL) 및 식염수 (25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 농축하여 밝은 갈색 고체로서 미정제 벤질브로마이드 53을 얻었다. 그 다음 벤질브로마이드 53을 DMF (7.5 mL) 중에 용해시키고, K2CO3 (1.75 g, 12.8 mmol, 1.5 당량) 및 n-Bu4NI (0.31 g, 0.85 mmol, 0.1 당량)을 순차적으로 첨가한 후, 프탈리미드 (1.4 g, 9.4 mmol, 1.1 당량)를 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 40℃에서 교반한 다음, H2O (25 mL)에 붓고 EtOAC(3 × 25 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 물 (3 × 25 mL) 및 식염수 (2 × 25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1 내지 1:2)로 노르스름한 고체로서 프탈리미드 54를 얻었다 (2.16 g, 5.1 mmol, 2단계에 대한 수율 60%). 0℃의 CH2Cl2 (10 mL) 중의 프탈리미드 54의 교반된 용액에 TMSCN (1.01 g, 1.28 mL, 10.2 mmol, 2.0 당량), 및 THF (1.0 mL) 중의 KCN (8.2 mg, 0.13 mmol, 0.025 당량) 및 18-크라운-6 (25 mg, 0.09 mmol, 0.02 당량)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 밀봉된 플라스크 내에서 동일한 온도로 교반하고, 대기 온도에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음 반응 혼합물을 N2 하에 농축시키고 잔류물을 톨루엔 (2 × 25 mL)과 공증발시켜 모든 미량의 TMSCN을 제거하였다. 결과적인 갈색 오일을 AcOH (5 mL) 중에 용해시키고 TLC가 완전한 전환 (헥사메스:EtOAc 1:1)를 나타낼 때까지 상온에서 80시간 동안 교반하였다. 반응을 1N NaOH (15 mL)의 조심스러운 첨가로 퀀칭시키고, 결과적인 혼합물을 EtOAC(30 mL) 및 1N NaOH (15 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(3 × 30 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 H2O (30 mL) 및 식염수 (30 mL)로 세척한 뒤, MgSO4 상에서 건조시키고 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2 내지 1:1)로 노르스름한 고체를 얻었으며, 이를 EtOAc로 재결정화하여 노르스름한 고체로서 시아노프탈리드 55를 얻었다. (1.36 g, 3.6 mmol, 70% 수율). 52: R f = 0.35 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ = 7.81 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.71 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 6.81 (s, 1 H), 5.93 (s, 1 H), 4.97 (s, 2 H), 4.23 (s, 3 H), 3.94 (s, 3 H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ = 167.7, 165.3, 165.0, 159.4, 145.4, 134.0, 131.9, 123.2, 119.7, 114.0, 107.7, 99.4, 64.9, 63.2, 56.8, 31.4 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C20H15N2O6 + [M+H+]: 379.0925, 실측치 379.0926.
Figure pct00215
8- 프탈이미도메틸 -7,9- 디메톡시 - 운시알라마이신 (58a). -78℃의 THF (0.8 mL) 중의 시아노프탈리드 55 (72 mg, 0.19 mmol, 3.0 당량)의 교반된 용액에 LiHMDS(THF 중의 1.0 M, 0.25 mL, 0.25 mmol, 4.0 당량)를 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 20분 동안 -78℃에서 교반하고, -78℃에서 THF (0.8 mL) 중의 퀴논 아미날 22a (34 mg, 63 μmol, 1.0 당량)의 미리 냉각시킨 용액을 캐뉼라를 통해 첨가하였다. -78℃에서 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 대기 온도로 승온되도록 둔 뒤 추가 90분 동안 교반하였으며 이때 반응 혼합물이 어두운 적색으로 변하였다. 그 다음 반응 혼합물을 pH 6.8 버퍼 (30 mL)로 퀀칭하고 EtOAC(3 × 30 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 식염수 (30 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전에 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과시켰다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 농축시켜 어두운 적색 고체로서 미정제 알록-안트라퀴논 56a를 얻었으며, 이를 Ar 하에 탈기된 THF (1.5 mL) 중에 용해시키고 0℃로 냉각시켰다. 이러한 용액에 Pd (PPh3)4 (4 mg, 1.3 μmol, 0.2 당량)를 첨가한 후, 모르폴린 (7 mg, 7 μL, 76 μmol, 1.2 당량)을 적가하고, 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싼 뒤, 반응 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반되도록 두었으며 이때 이것이 보라색으로 변하였다. 냉각 배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 20분 동안 대기 온도에서 교반한 다음, pH 6.8 버퍼 (10 mL)의 첨가로 퀀칭시키고 EtOAC(3 × 10 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 H2O (10 mL) 및 식염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전에 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과시켰다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 대략 1 mL 부피로 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:2]로 보라색 고체로서 미정제 안트라퀴논 57a를 얻었다. 상온에서 탈기된 THF (1.5 mL) 중의 안트라퀴논 57a의 용액에 1:1 3HF·Et3N:THF (0.5 mL) 용액을 첨가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 1.5시간 동안 상온에서 교반한 다음, EtOAC(10 mL) 및 포화된 NaHCO3 수용액 (10 mL) 간에 분배시켰다. 유기 층을 식염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시킨 뒤 대략 1 mL의 부피로 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:3]로 보라색 고체로서 8-프탈이미도메틸-7,9-디메톡시-운시알라마이신 (58a) (5 mg, 7.6 μmol, 12% 수율)을 얻었다. 58a: R f = 0.42 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:2); 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.58 (s, 1 H), 9.88 (d, J = 4.2 Hz, 1 H), 8.47 (s, 1 H), 7.80 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.77 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.67 (s, 1 H), 5.96 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.88 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.23 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 4.97 (s, 2 H), 4.91 (dd, J = 4.3, 1.4 Hz, 1 H), 4.54 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.37 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 3.92 (s, 3 H), 3.30 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 1.38 (d, J = 6.3 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 187.1, 183.4, 168.7, 164.3, 162.2, 156.3, 144.3, 139.0, 135.1, 134.6, 133.0, 131.5, 130.7, 125.2, 124.5, 124.1, 123.8, 119.6, 114.9, 112.3, 100.4, 99.1, 91.2, 88.8, 77.0, 65.9, 65.3, 64.8, 62.7, 57.2, 56.0, 44.3, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C37H27N2O10 + [M+H+]: 659.1660, 실측치 659.1664.
Figure pct00216
8- 프탈이미도메틸 -7,9- 디메톡시 -17- 에피 - 운시알라마이신 (58b). 58a의 제조를 위한 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조하여, 시아노프탈리드 55 (30 mg, 78 μmol, 3.0 당량) 및 퀴논 아미날 22b (14 mg, 26 μmol, 1.0 당량)로부터 중간체 57b를 거쳐 보라색 고체로서 8-프탈이미도메틸-7,9-디메톡시-17-에피-운시알라마이신 (58b) (2 mg, 44 μmol, 12% 수율)을 얻었다. 58b: R f = 0.52 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:2); 1H NMR (500 MHz, CD3CN): δ = 13.63 (s, 1 H), 9.93 (d, J = 4.0 Hz, 1 H), 7.80 (m, 2 H), 7.77 (m, 2 H), 7.67 (s, 1 H), 7.59 (s, 1 H), 5.93 (AB 시스템, 2 H), 5.85 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 5.10 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 4.97 (s, 2 H), 4.87 (dd, J = 4.6, 1.4 Hz, 1 H), 4.27 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 3.19 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 1.34 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C37H27N2O10 + [M+H+]: 659.1660, 실측치 659.1663.
Figure pct00217
포밀벤즈아미드 60. 6,7-디메틸-2-나프토산 (2.46 g, 12.3 mmol)의 교반된 용액을 SOCl2 (15 mL) 중에 현탁시키고 반응 혼합물을 2시간 동안 환류 가열시켰다. 그 다음 반응 혼합물을 대기 온도로 냉각시키고 N2 하에 농축시킨 뒤 잔류물을 톨루엔 (2 × 25 mL)과 공증발시켜 모든 미량의 SOCl2를 제거하였다. 미정제 생성물을 CH2Cl2 (2 mL) 중에 용해시키고 반응 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. CH2Cl2 (2 mL) 중의 디에틸아민 (1.62 g, 2.29 mL, 22.1 mmol, 1.8 당량)의 용액을 적가하였다. 첨가를 완료하면, 얼음 배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 2시간 동안 대기 온도에서 교반하였다. 반응을 1N HCl (25 mL)로 퀀칭시키고, 수성 층을 CH2Cl2 (2 × 20 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 식염수 (20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축하여 노란색 고체로서 벤즈아미드 59 (3.11 g, 12.2 mmol, 99% 수율)를 얻었다. -78℃의 THF (75 mL) 중의 벤즈아미드 59의 교반된 용액에 N,N,N,N-테트라메틸에틸렌디아민 (3.64 mL, 2.83 g, 24.4 mmol, 2.0 당량)을 첨가한 후, -78℃에서 터트-BuLi (펜탄 중의 1.7 M 용액, 14.3 mL, 24.4 mmol, 2.0 당량)을 적가하였다. 50분 후, DMF (11.24 mL, 146 mmol, 12 당량)를 첨가하고, 추가 50분의 교반 후, 냉각 배쓰를 제거하고 반응 플라스크를 대기 온도로 승온되도록 두었다. 2시간 후, 반응 혼합물을 H2O (25 mL)로 희석시켰다. 20분의 추가 교반 후, 희석된 용액을 부분적으로 농축시켜 휘발성 유기 용매를 제거하였다. 결과적인 수성 잔류물에 EtOAC(50 mL)를 첨가하고, 2개의 층을 분리하였다. 수성 층을 EtOAC(50 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 H2O (25 mL) 및 식염수 (3 × 25 mL)로 세척한 뒤, MgSO4 상에서 건조시키고, 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1 내지 1:1)로 엷은 노란색 고체로서 포밀벤즈아미드 60을 얻었다 (1.07 g, 3.78 mmol, 31% 수율). 52: R f = 0.31 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ = 10.13 (s, 1 H), 8.65 (s, 1 H), 8.56 (s, 1 H), 7.41 (s, 1 H), 7.20 (s, 1 H), 3.83 (dq, J = 7.1, 13.7 Hz, 1 H), 3.55 (dq, J = 7.1, 13.7 Hz, 1 H), 3.03 (ddq, J = 7.2, 14.4, 14.4, Hz, 2 H), 2.21 (s, 3 H), 2.20 (s, 3 H), 1.25 (t, J = 7.1 Hz, 3 H), 0.98 (t, J = 7.2 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (125 MHz, CDCl3): δ = 190.0, 160.2, 138.8, 138.4, 133.1, 132.9, 132.3, 132.1, 132.0, 128.9, 128.6, 128.5, 120.2, 43.2, 39.2, 13.8, 12.7, 9.7 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C18H22NO2 + [M+H+]: 284.1645, 실측치 284.1640.
Figure pct00218
시아노프탈리드 63a/63b. CCl4 (4 mL) 중의 포밀벤즈아미드 60 (1.07 g, 3.78 mmol, 1.0 당량.)의 교반된 용액에 N2 하에 대기 온도에서 N-브로모숙신이미드 (866 mg, 4.53 mmol, 1.2 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃로 가열한 후 벤조일 페록시드 (54 mg, 0.222 mmol, 0.06 당량)를 한번에 첨가하였다. 2시간 동안 가열을 계속하고 반응 혼합물을 대기 온도로 냉각시킨 후, 포화된 NaHCO3 수용액 (10 mL) 및 식염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축시켜 밝은 갈색 고체로서 벤질브로마이드 61a/61b (1H NMR에 의해 대략 1:1)의 미정제 혼합물을 얻었다. 그 다음 벤질브로마이드 61a/ 61b (1H NMR에 의해 대략 1:1)를 DMF (3.5 mL) 중에 용해시키고, K2CO3 (777 mg, 5.69 mmol, 1.5 당량) 및 n-Bu4NI (138 mg, 0.378 mmol, 0.1 당량)를 순차적으로 첨가한 후, 프탈리미드 (622 mg, 4.18 mmol, 1.1 당량)를 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 40℃에서 교반한 다음, H2O (10 mL)에 붓고 EtOAC(3 × 10 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 물 (3 × 10 mL) 및 식염수 (2 × 10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1 내지 1:2)로 노르스름한 고체로서 프탈리미드 62a/62b의 혼합물을 얻었다 (1H NMR에 의해 대략 1:1, 599 mg, 1.40 mmol, 2단계에 대한 수율 37%). 0℃의 CH2Cl2 (3 mL) 중의 프탈리미드 62a/62b의 교반된 용액에 TMSCN (277 mg, 0.35 mL, 2.80 mmol, 2.0 당량), 및 THF (0.3 mL) 중의 KCN (2.2 mg, 35 μmol, 0.025 당량) 및 18-크라운-6 (6.8 mg, 25 μmol, 0.02 당량)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 밀봉된 플라스크 내에서 동일한 온도로 교반하고, 대기 온도로 30분 동안 교반하였다. 그 다음 반응 혼합물을 N2 하에 농축시키고 잔류물을 톨루엔 (2 × 10 mL)과 공증발시켜 모든 미량의 TMSCN을 제거하였다. 결과적인 갈색 오일을 AcOH (1.5 mL) 중에 용해시키고 TLC가 완전한 전환 (헥사메스:EtOAc 1:1)를 나타낼 때까지 상온에서 80시간 동안 교반하였다. 반응을 1N NaOH (5 mL)의 조심스러운 첨가로 퀀칭시키고, 결과적인 혼합물을 EtOAC(10 mL) 및 1N NaOH (5 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(3 × 10 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 H2O (10 mL) 및 식염수 (10 mL)로 세척한 후, MgSO4 상에서 건조시키고 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 30:1 내지 20:1)로 노르스름한 고체로서 시아노프탈리드 63a/63b의 혼합물을 얻었다. (1H NMR에 의해 대략 1:1, 375 mg, 0.98 mmol, 70% 수율). 63a: R f = 0.35 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); 63b: R f = 0.33 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ = 8.41 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.81 (m, 4 H), 7.71 (m, 4 H), 7.61 (s, 1 H), 7.59 (s, 1 H), 7.56 (s, 1 H), 7.55 (s, 1 H), 7.49 (s, 1 H), 7.47 (s, 1 H), 6.04 (b, 2 H), 5.17 (s, 2 H), 5.15 (s, 2 H), 2.27 (s, 3 H), 2.24 (s, 3 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C23H15N2O4 + [M+H+]: 383.1026, 실측치 383.1026.
Figure pct00219
프탈이미도메틸벤조 - 운시알라마이신 66aa / 66ba . -78℃의 THF (0.8 mL) 중의 시아노프탈리드 63a/63b (1H NMR에 의한 대략 1:1, 73 mg, 0.19 mmol, 3.0 당량)의 용액에 LiHMDS(THF 중의 1.0 M, 0.25 mL, 0.25 mmol, 4.0 당량)를 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 20분 동안 -78℃에서 교반하고, -78℃에서 THF (0.8 mL) 중의 퀴논 아미날 22a (34 mg, 63 μmol, 1.0 당량)의 미리 냉각시킨 용액을 캐뉼라를 통해 첨가하였다. -78℃에서 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 대기 온도로 승온시키고 추가 90분 동안 교반하였으며 이때 반응 혼합물이 어두운 적색으로 변하였다. 그 다음 반응 혼합물에 pH 6.8 버퍼 (30 mL)를 첨가하여 퀀칭시키고 EtOAC(3 × 30 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 식염수 (30 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전 EtOAc으로 세척됨)를 통해 여과하였다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 농축시켜 어두운 적색 고체로서 알록-안트라퀴논 64aa / 64ba (1H NMR에 의한 대략 1:1)의 미정제 혼합물을 얻었으며, 이를 Ar 하에서 탈기된 THF (1.5 mL) 중에 용해시키고 0℃로 냉각시켰다. 이러한 용액에 Pd (PPh3)4 (4 mg, 1.3 μmol, 0.2 당량)를 첨가하고, 모르폴린 (7 mg, 7 μL, 76 μmol, 1.2 당량)을 적가한 후, 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 결과적인 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반되도록 두었으며 이때 이것이 보라색으로 변하였다. 냉각 배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 20분 동안 대기 온도에서 교반한 다음, pH 6.8 버퍼 (10 mL)를 첨가하여 퀀칭시키고, EtOAC(3 × 10 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 H2O (10 mL) 및 식염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전 EtOAc으로 세척됨)를 통해 여과하였다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 대략 1 mL 부피까지 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:2]로 보라색 고체로서 안트라퀴논 65aa / 66ba (1H NMR에 의한 대략 1:1)의 미정제 혼합물을 얻었다. 상온에서 탈기된 THF (1.5 mL) 중의 안트라퀴논 65aa / 66ba 용액에 1:1 3HF·Et3N:THF (0.5 mL) 용액을 첨가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 1.5시간 동안 상온에서 교반한 다음, EtOAC(10 mL) 및 포화된 NaHCO3 수용액 (10 mL) 간에 분배시켰다. 유기 층을 식염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시킨 뒤 대략 1 mL 부피로 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:3]로 보라색 고체로서 프탈이미도-메틸벤조-운시알라마이신 66aa/66ba (1H NMR에 의한 대략 1:1, 12 mg, 17.7 μmol, 28% 수율)의 1:1 혼합물을 얻었다. 66aa / 66ba: R f = 0.42 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:2); 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.49 (s, 2 H), 9.91 (d, J = 4.1 Hz, 1 H), 9.88 (d, J = 4.2 Hz, 1 H), 8.47 (s, 1 H), 8.31 (s, 1 H), 7.80 (m, 4 H), 7.76 (m, 4 H), 7.67 (s, 1 H), 7.65 (s, 1 H), 7.43 (s, 1 H), 7.41 (s, 1 H), 5.96 (d, J = 10.0 Hz, 2 H), 5.89 (d, J = 9.9 Hz, 2 H), 5.25 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 5.23 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 5.11 (s, 2 H), 5.07 (s, 2 H), 4.91 (dd, J = 4.4, 1.4 Hz, 1 H), 4.89 (dd, J = 4.5, 1.4 Hz, 1 H), 4.53 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.51 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.37 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 4.35 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.30 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 2.11 (s, 3 H), 2.09 (s, 3 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C40H27N2O8 + [M+H+]: 663.1762, 실측치 663.1764.
Figure pct00220
프탈리드 72. MeOH (50 mL) 중의 2,7-디히드록실-2-나프토산 (7.50 g, 36.7 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 농축 H2SO4 (1.0 mL)를 상온에서 한번에 첨가하고, 반응 혼합물을 12시간 동안 가열 환류시켰다. 냉각하고, 니들로서 분리되는, 에스테르 67을 필터 상에 수집하였다. 여과액을 농축시켜 제2 수확물의 결정을 얻었다. 두 수확물을 합하고, 에테르 중에 용해시킨 뒤 5% NaHCO3 수용액 및 H2O로 세척하였다. 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 농축 건조시킨 뒤 미정제 생성물을 메탄올로 재결정하여 흰색 고체로서 에스테르 67을 얻었다 (7.85 g, 36.0 mmol, 98% 수율). CH2Cl2 (125 mL) 중의 N-페닐트리플루오로메탄-설폰이미드 (39.8 g, 111 mmol, 3.0 당량)의 용액을 0℃의 CH2Cl2 (100 mL) 중의 에스테르 67 (7.85 g, 36.0 mmol, 1.0 당량), N-디이소프로필에틸아민 (25.9 mL, 148 mmol, 4.1 당량), 및 DMAP(452 mg, 3.7 mmol, 0.10 당량)의 용액에 적가하였다. 첨가를 완료하면, 얼음-배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 상온에서 추가 1.5시간 동안 교반한 다음, 포화된 NaHCO3 수용액 (10 mL)으로 퀀칭시키고, H2O (40 mL)로 희석시켰다. 수성 층을 CH2Cl2 (3 × 30 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 10:1]로 흰색 고체로서 비스-트리플레이트 68을 얻었다 (14.72 g, 30.5 mmol, 85% 수율). 트리메틸보록신 (11.26 g, 89.8 mmol, 3.0 당량)을 탈기된 디옥산 (150 mL) 중의 트리플레이트 68 (14.72 g, 30.5 mmol, 1.0 당량), Pd (PPh3)4 (3.46 g, 3.0 mmol, 0.1 당량) 및 K2CO3 (24.80 g, 179.4 mmol, 6.0 당량)의 혼합물에 첨가하고, 반응 혼합물을 1시간 동안 95℃에서 교반하였다. H2O (25 mL)를 첨가하고, 혼합물을 95℃에서 추가 4시간 동안 교반하였다. 냉각된 반응 혼합물을 셀라이트®의 쇼트 플러그를 통해 여과하고, 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 10:1 내지 5:1)로 흰색 고체로서 메틸 2-나프토에이트 69를 얻었다 (5.29 g, 24.7 mmol, 81% 수율). 에스테르 69 (5.29 g, 24.7 mmol, 1.0 당량) 및 N-브로모숙신이미드 (19.1 g, 100 mmol, 4.0 당량)를 CCl4 (50 mL) 중에 용해시키고, 반응 혼합물을 80℃로 가열한 뒤 벤조일 페록시드 (121 mg, 0.5 mmol, 0.02 당량)를 한번에 첨가하였다. 8시간 동안 가열을 계속하고 반응 혼합물을 대기 온도로 냉각시킨 다음, 12시간 동안 0℃로 보관하였다. 그 다음 반응 혼합물을 여과하고, 침전물을 CCl4 (0-5 ℃)로 헹구었다. 그 다음 화합된 여과액을 포화된 NaHCO3 수용액 (25 mL) 및 식염수 (25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 농축하여 노르스름한 고체로서 미정제 생성물 70을 얻었다. 정미의(neat) 디브로모에스테르 70을 10시간 동안 약한 진공에서 150℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 대기 온도로 냉각하여 밝은 갈색 고체로서 미정제 생성물 71을 얻었다. 미정제 브로모프탈리드 71을 DMF (50 mL) 중에 용해시키고, 무수 K2CO3 (10.3 g, 74.8 mmol, 3.0 당량, 사용 전에 16시간 동안 110℃에서 고 진공 하에 건조됨) 및 n-Bu4NI (1.8 g, 5.0 mmol, 0.2 당량)를 순차적으로 첨가한 후, 프탈리미드 (8.0 g, 54.9 mmol, 2.2 당량)를 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 40℃에서 교반한 다음, H2O (100 mL)에 붓고 EtOAC(3 × 100 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 물 (3 × 50 mL) 및 식염수 (2 × 50 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 10:1 내지 8:1)로 노르스름한 고체로서 프탈리드 72를 얻었다 (4.94 g, 14.4 mmol, 39% 수율). 72: R f = 0.31 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 8:1); 1H NMR (600 MHz, CDCl3): δ = 8.48 (s, 1 H), 8.03 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.88 (s, 1 H), 7.87 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.75 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.64 (s, 1 H), 7.47 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 5.45 (s, 2 H), 4.99 (s, 2 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C21H14NO4 + [M+H+]: 344.0917, 실측치 344.0915.
Figure pct00221
포밀벤즈아미드 75. 대기 온도에서 CCl4/벤젠 (50 mL, 1:1) 중의 프탈리드 72 (4.94 g, 14.4 mmol, 1.0 당량)의 교반된 현탁액에 N-브로모숙신이미드 (3.06 g, 17.3 mmol, 1.2 당량)를 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 가열 환류시킨 다음, 아조비스이소부티로니트릴 (0.47 g, 2.87 mmol, 0.2 당량)을 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가 2시간 동안 환류 하에 격렬하게 교반한 다음, 대기 온도로 냉각시키고, 8시간 동안 0℃에서 보관하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 침전물을 CCl4 (0-5℃)로 헹구었다. 그 다음 화합된 여과액을 포화된 NaHCO3 수용액 (10 mL) 및 식염수 (10 mL)로 세척하고, Mg2SO4 상에서 건조시킨 뒤, 농축하여 노란색 폼으로서 미정제 73을 얻었으며, 이를 H2O/THF (50 mL, 1:1) 중에 현탁시켰다. 현탁액을 5시간 동안 85℃에서 교반한 다음 대기 온도로 냉각되도록 두었다. 반응 혼합물을 EtOAC(5 × 20 mL)로 추출하고 화합된 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축하여 노란색 흡습성 고체로서 미정제 74를 얻었으며, 이를 8시간 동안 P2O5 상에서 건조시켰다. 미정제 산 74를 SOCl2 (15 mL) 중에 현탁시키고 반응 혼합물을 2시간 동안 가열 환류시켰다. 반응 혼합물을 N2 하에 농축시키고 마지막 미량의 휘발성 물질(예컨대 SOCl2)을 톨루엔 (2 × 10 mL)으로 공비적으로 제거하였다. 미정제 생성물을 CH2Cl2 (15 mL) 중에 용해시키고 용액을 0℃로 냉각시켰다. CH2Cl2 (3.0 mL) 중의 디에틸아민 (1.91 g, 2.68 mL, 26.0 mmol, 1.8 당량)의 용액을 적가하고, 얼음 배쓰를 제거한 뒤 반응 혼합물을 2시간 동안 대기 온도에서 교반하였다. 반응을 1N HCl 수용액 (27 mL)으로 퀀칭시키고, 결과적인 반응 혼합물을 CH2Cl2 (2 × 20 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 식염수 (20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:1 내지 2:1)로 노르스름한 고체로서 포밀벤즈아미드 75를 얻었다 (2.57 g, 6.19 mmol, 43% 수율). 75: R f = 0.31 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1); 1H NMR (600 MHz, CDCl3): δ = 10.13 (s, 1 H), 8.61 (s, 1 H), 8.50 (s, 1 H), 8.00 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.81 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.71 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.64 (s, 1 H), 7.21 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 3.81 (dq, J = 7.1, 13.7 Hz, 1 H), 3.51 (dq, J = 7.1, 13.7 Hz, 1 H), 3.01 (ddq, J = 7.2, 14.4, 14.4, Hz, 2 H), 1.21 (t, J = 7.1 Hz, 3 H), 0.99 (t, J = 7.2 Hz, 3 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C25H23N2O4 + [M+H+]: 415.1652, 실측치 415.1658.
Figure pct00222
시아노프탈리드 76. 0℃의 CH2Cl2 (6 mL) 중의 포밀-벤즈아미드 75 (1.33 g, 3.20 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 TMSCN (640 mg, 0.81 mL, 6.44 mmol, 2.0 당량), 및 THF (0.6 mL) 중의 KCN (5.2 mg, 0.08 mmol, 0.025 당량) 및 18-크라운-6 (16 mg, 0.06 mmol, 0.02 당량)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 밀봉된 플라스크 내에서 동일한 온도로 교반하고, 추가 30분 동안 대기 온도로 교반하였다. 반응 혼합물을 N2 하에 농축시킨 다음 잔류물을 톨루엔 (2 × 25 mL)으로 공비적으로 건조시켜 모든 미량의 TMSCN을 제거하였다. 결과적인 갈색 오일을 AcOH (3 mL) 중에 용해시키고 TLC가 완전한 전환 (헥사메스:EtOAc 3:2)를 나타낼 때까지 상온에서 48시간 동안 교반하였다. 반응을 1N NaOH 수용액 (10 mL)의 조심스러운 첨가로 퀀칭시키고 결과적인 혼합물을 EtOAC(20 mL)로 추출하였다. 수성 층을 EtOAC(3 × 20 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 H2O (20 mL) 및 식염수 (20 mL)로 세척한 후, MgSO4 상에서 건조시키고 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1 내지 3:2)로 노르스름한 고체를 얻었으며, 이를 EtOAc로 재결정화하여 시아노프탈리드 76을 얻었다 (825 mg, 2.24 mmol, 70% 수율). 76: R f = 0.33 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.53 (s, 1 H), 7.99 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.86 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.74 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.64 (s, 1 H), 7.53 (s, 1 H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 6.01 (s, 1 H), 4.99 (s, 2 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C22H13N2O4 + [M+H+]: 369.0870, 실측치 369.0872.
Figure pct00223
프탈이미도메틸 - 벤조 - 운시알라마이신 79a. -78℃의 THF (0.8 mL) 중의 시아노프탈리드 76 (70 mg, 0.19 mmol, 3.0 당량)의 용액에 LiHMDS(THF 중의 1.0 M, 0.25 mL, 0.25 mmol, 4.0 당량)를 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 20분 동안 -78℃에서 교반하고, -78℃의 THF (0.8 mL) 중의 퀴논 아미날 22a (마지막 개시 참조, 34 mg, 63 μmol, 1.0 당량)의 미리 냉각시킨 용액을 캐뉼라를 통해 첨가하였다. -78℃에서 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 대기 온도로 승온되도록 둔 뒤 추가 110분 동안 교반하였으며 이때 반응 혼합물이 어두운 적색으로 변하였다. 결과적인 혼합물을 pH 6.8 포스페이트 버퍼 (30 mL)의 첨가로 퀀칭시키고 EtOAC(3 × 30 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 식염수 (30 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과하였다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 농축시켜 어두운 적색 고체로서 알록-나프타세네퀴논 77a의 미정제 혼합물을 얻었다. 정제 없이, 이러한 생성물 (77a)을 Ar 하에 탈기된 THF (1.5 mL) 중에 용해시키고 0℃로 냉각시켰다. 이러한 교반된 용액에 Pd (PPh3)4 (4 mg, 1.3 μmol, 0.2 당량)를 첨가한 후 모르폴린 (7 mg, 7 μL, 76 μmol, 1.2 당량)을 적가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 결과적인 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반되도록 두었으며 이때 이것이 어두운 청색으로 변하였다. 냉각 배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 20분 동안 대기 온도에서 교반한 후, pH 6.8 포스페이트 버퍼 (10 mL)를 첨가하여 퀀칭시키고, EtOAC(3 × 10 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 H2O (10 mL) 및 식염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과하였다. 얻어진 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 대략 1 mL 부피로 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:2]로 어두운 보라색 고체로서 나프타세네퀴논 78a의 미정제 혼합물을 얻었다. 상온에서 탈기된 THF (1.5 mL) 중의 나프타세네퀴논 78a의 용액에 1:1 3HF·Et3N:THF (0.5 mL) 용액을 첨가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 2시간 동안 상온에서 교반한 다음, EtOAC(10 mL) 및 포화된 NaHCO3 수용액 (10 mL) 간에 분배시켰다. 유기 층을 식염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시킨 뒤, 대략 1 mL 부피로 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:3]로 어두운 보라색 고체로서 프탈이미도메틸-벤조-운시알라마이신 79a (27 mg, 42.2 μmol, 67% 수율)의 1:1 혼합물을 얻었다. 79a: R f = 0.42 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:2); 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.49 (s, 1 H), 9.89 (d, J = 4.2 Hz, 1 H), 8.47 (s, 1 H), 8.31 (s, 1 H), 7.91 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.80 (m, 2 H), 7.76 (m, 2 H), 7.44 (s, 1 H), 7.21 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 5.96 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.89 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.24 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 5.10 (s, 2 H), 4.90 (dd, J = 4.4, 1.4 Hz, 1 H), 4.52 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.37 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.30 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C39H25N2O8 + [M+H+]: 649.1605, 실측치 649.1604.
Figure pct00224
포밀벤즈아미드 81. SOCl2 (5 mL) 중의 2-브로모-5-메틸벤조산 (156 mg, 0.73 mmol, 1.0 당량)의 용액을 2시간 동안 환류 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 N2 하에 농축시키고 잔류물을 톨루엔 (2 ×5 mL)과 공증발시켜 모든 미량의 SOCl2를 제거하였다. 미정제 생성물을 CH2Cl2 (5 mL) 중에 용해시키고 반응 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. CH2Cl2 (0.2 mL) 중의 디에틸아민 (97 mg, 0.14 mL, 1.31 mmol, 1.8 당량)의 용액을 적가하고, 얼음 배쓰를 제거한 뒤 반응 혼합물을 2시간 동안 대기 온도에서 교반하였다. 반응을 1N HCl 수용액 (1.5 mL)로 퀀칭시키고, 결과적인 혼합물을 CH2Cl2 (2 × 5 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 식염수 (5 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:1 내지 2:1)로 노르스름한 고체로서 벤즈아미드 80을 얻었다 (194 mg, 0.72 mmol, 98% 수율). 0℃의 THF (1.0 mL) 중의 i-PrMgBr (0.85 mL, THF 중의 1.0 M, 0.85 mmol, 1.2 당량)의 교반된 용액에 n-BuLi (0.68 mL, 헥산 중의 2.50 M, 1.70 mmol, 2.4 당량)을 첨가하였다. 결과적인 노란색 용액을 -78℃로 냉각시키고 THF (1.0 mL) 중의 브로마이드 80 (234 mg, 0.72 mmol, 1.0 당량)의 용액을 적가하였다. -78℃에서 1시간 동안 교반한 후, DMF (0.23 mL, 2.88 mmol, 4.0 당량)을 첨가하였다. -78℃에서 3시간 동안 교반한 후, 포화된 NH4Cl 수용액 (5 mL)을 첨가하고 결과적인 혼합물을 대기 온도에 이르도록 두었다. 혼합물을 EtOAC(10 mL)로 추출하고, 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 농축하고, 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc = 1:1)로 정제하여 흰색 분말로서 알데히드 81 (156 mg, 0.71 mmol, 99% 수율)을 얻었다. 81: R f = 0.42 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:2); 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ = 10.01 (s, 1 H), 7.77 (s, 1 H), 7.45 (d, J = 7.7 Hz, 1 H), 7.28 (d, J = 7.7 Hz, 1 H), 3.42 (m, 2 H), 3.13 (m, 2 H), 2.46 (s, 3 H), 1.32 (t, J = 7.1 Hz, 3 H), 1.08 (t, J = 7.2 Hz, 3 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C15H22NO4 + [M+H+]: 280.1543, 실측치 280.1540.
Figure pct00225
시아노프탈리드 84. CCl4 (0.7 mL) 중의 포밀벤즈아미드 81 (156 mg, 0.71 mmol, 1.0 당량.)의 교반된 용액에 N2 하에 대기 온도에서 N-브로모숙신이미드 (163 mg, 0.85 mmol, 1.2 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃로 가열한 후 벤조일 페록시드 (10 mg, 0.04 mmol, 0.06 당량)를 한번에 첨가하였다. 가열을 동일한 온도에서 2시간 동안 계속한 다음 반응 혼합물을 대기 온도로 냉각되도록 둔 후, 포화된 NaHCO3 수용액 (2 mL) 및 식염수 (2 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축하여 밝은 갈색 고체로서 미정제 벤질-브로마이드 82를 얻었다. 벤질-브로마이드 82를 DMF (0.6 mL) 중에 용해시키고, 교반된 용액에 K2CO3 (146 mg, 1.07 mmol, 1.5 당량), n-Bu4NI (26 mg, 0.07 mmol, 0.1 당량), 및 2,3,4,5-테트라클로로프탈리미드 (224 mg, 0.79 mmol, 1.1 당량, 한번에)를 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃로 가열하고, 2시간 동안 상기 온도에서 교반한 다음, H2O (2 mL)로 붓고 EtOAC(3 × 2 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 물 (3 × 2 mL) 및 식염수 (2 × 2 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1 내지 1:2)로 노르스름한 고체로서 테트라클로로프탈리미드 83을 얻었다 (214 mg, 0.43 mmol, 2단계에 대한 수율 60%). 0℃의 CH2Cl2 (0.8 mL) 중의 테트라클로로-프탈리미드 83의 교반된 용액에 TMSCN (84 mg, 0.11 mL, 0.85 mmol, 2.0 당량), 및 THF (0.1 mL) 중의 KCN (1 mg, 0.02 mmol, 0.025 당량) 및 18-크라운-6 (2 mg, 0.01 mmol, 0.02 당량)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 밀봉된 플라스크 내에서 동일한 온도로 교반하고, 대기 온도로 30분 동안 교반하였다. 결과적인 혼합물을 N2 하에서 농축시키고, 톨루엔 (2 × 2 mL)을 사용하여 모든 미량의 TMSCN을 공비적으로 제거하여 잔류물을 건조시켰다. 결과적인 갈색 오일을 AcOH (0.5 mL) 중에 용해시키고 TLC가 완전한 전환 (헥사메스:EtOAc 1:1)을 나타낼 때까지 상온에서 48시간 동안 교반하였다. 반응을 1N NaOH 수용액 (1.5 mL)의 조심스러운 첨가로 퀀칭시키고, 결과적인 혼합물을 EtOAC(3 mL) 및 H2O (1.5 mL) 사이에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(3 × 3 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 H2O (3 mL) 및 식염수 (3 mL)로 세척한 뒤, MgSO4 상에서 건조시키고 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2 내지 1:1)로 노르스름한 고체를 얻고, 이를 EtOAc로 재결정하여 노르스름한 고체로서 시아노프탈리드 84를 얻었다 (136 mg, 0.30 mmol, 70% 수율). 84: R f = 0.35 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); 1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ = 6.81 (s, 1 H), 5.93 (s, 1 H), 4.97 (s, 2 H), 4.23 (s, 3 H), 3.94 (s, 3 H) ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C18H7Cl4N2O4 + [M+H+]: 454.9154, 실측치 454.9156.
Figure pct00226
8- 터트 - 부틸카르바모일메틸 - 운시알라마이신 ( 49aa ). -78℃의 THF (0.35 mL) 중의 시아노프탈리드 84 (36 mg, 80 μmol, 3.0 당량)의 교반된 용액에 LiHMDS(THF 중의 1.0 M, 0.11 mL, 0.11 mmol, 4.0 당량)를 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 20분 동안 -78℃에서 교반하고, -78℃에서 THF (0.35 mL) 중의 퀴논 아미날 22a (이전 개시 참조, 15 mg, 28 μmol, 1.0 당량)의 미리 냉각시킨 용액을 캐뉼라를 통해 첨가하였다. -78℃에서 5분 동안 교반 후, 반응 혼합물을 대기 온도로 승온되도록 둔 후 추가 90분 동안 교반하였으며, 이때 반응 혼합물이 어두운 적색으로 변하였다. 그 다음 결과적인 혼합물을 pH 6.8 버퍼 (15 mL)로 퀀칭시키고 EtOAC(3 × 15 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 식염수 (15 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과하였다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 농축하여 어두운 적색 고체로서 미정제 알록-운시알라마이신 유도체 85a를 얻었으며, 이를 Ar 하에서 탈기된 THF (1.0 mL) 중에 용해시키고 0℃로 냉각시켰다. 이러한 용액에 Pd (PPh3)4 (2 mg, 0.7 μmol, 0.2 당량)를 첨가한 후 에틸렌디아민 (5 mg, 6 μL, 84 μmol, 3.0 당량)을 적가하고, 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싼 뒤, 결과적인 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반되도록 두었으며, 이때 이것이 보라색으로 변하였다. 그 다음 H2O (0.5 mL)를 첨가하고 결과적인 혼합물을 2시간 동안 50℃에서 교반한 후, pH 7.2 포스페이트 버퍼 (10 mL)로 희석시키고 EtOAC(5 × 10 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 H2O (10 mL) 및 식염수 (10 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 여과하였다. 여과액을 대략 1 mL 부피까지 농축시켜 8-아미노메틸-운시알라마이신 (48aa)의 미정제 용액을 얻었으며, 여기에 0℃에서 교반하면서 탈기된 THF (1.0 mL), 포화된 NaHCO3 수용액 (1.0 mL, 한번에), 및 Boc2O (7 mg, 34 μmol, 1.2 당량)를 순차적으로 첨가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 1.5시간 동안 0℃에서 교반한 다음, EtOAC(5 mL) 및 pH 6.8 포스페이트 버퍼 (5 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(2 × 25 mL)로 추출하고, 화합된 유기 추출물을 식염수 (5 mL)로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조시키고, 대략 1 mL 부피로 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:2]로 보라색 고체로서 8-터트-부틸카르바모일메틸-운시알라마이신 (49aa) (5.0 mg, 8.3 μmol, 3단계에 대한 수율 30%)을 얻었다. 49aa: R f = 0.27 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); [α]D 25 = +2300° (c = 0.002, EtOAc); 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.17 (s, 1 H), 10.00 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 8.50 (s, 1 H), 8.25 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 8.15 (s, 1 H), 7.75 (dd, J = 8.0, 1.8 Hz, 1 H), 6.03 (br, 1 H), 5.97 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.89 (dt, J = 9.9, 1.3 Hz, 1 H), 5.24 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 4.92 (dd, J = 4.4, 1.7 Hz, 2 H), 4.65 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.39 (d, J = 5.7, 1 H), 4.38 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.37 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 1.43 (s, 9 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.5, 184.1, 156.6, 147.3, 144.6, 136.1, 134.6, 134.0, 133.7, 128.1, 125.0, 124.5, 124.1, 114.4, 112.4, 100.4, 99.1, 91.2, 88.8, 79.8, 77.0, 65.8, 65.3, 64.7, 44.3, 44.2, 28.5, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C32H29N2O8 + [M+H+]: 569.1918, 실측치 569.1918.
Figure pct00227
이소인돌린 89. DMF (100 mL) 중의 트리메틸벤조산 (15.0 g, 91.4 mmol, 1.0 당량), 및 무수 K2CO3 (18.8 g, 137 mmol, 1.5 당량)의 현탁액에 MeI (14.3 g, 6.27 mL, 100 mmol, 1.1 당량)를 상온에서 격렬하게 교반하에 3분에 걸쳐 적가하였다. 첨가를 완료하면, 반응 혼합물을 상온에서 추가 5시간 동안 교반한 다음, H2O (200 mL)에 붓고 Et2O (3 × 200 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 물 (3 × 100 mL) 및 식염수 (2 × 100 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 농축하여 무색 오일로서 미정제 생성물 86을 얻었다. 에스테르 86 및 N-브로모숙신이미드 (52.0 g, 292 mmol, 3.2 당량)를 CCl4 (200 mL) 중에 용해시키고, 반응 혼합물을 80℃로 가열한 후 벤조일 페록시드 (242 mg, 1.0 mmol, 0.02 당량)를 한번에 첨가하였다. 가열을 8시간 동안 계속하고 반응 혼합물을 대기 온도로 냉각시킨 다음, 3시간 동안 0℃에서 보관하였다. 그 다음 반응 혼합물을 셀라이트®의 쇼트 플러그를 통해 여과시키고, 침전물을 CCl4 (0-5℃)로 헹구었다. 그 다음 화합된 여과액을 포화된 NaHCO3 수용액 (25 mL) 및 식염수 (25 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 농축하여 흰색 고체로서 미정제 생성물 87을 얻었다. 정미의(neat) 트리브로모에스테르 87을 10시간 동안 약한 진공에서 150℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 대기 온도로 냉각시키고 어두운 갈색 고체를 미정제 생성물 88로서 얻었다. 디브로모프탈리드 88을 DMF (100 mL) 중에 용해시키고, i-Pr2NEt (29.5 g, 39.7 mL, 228 mmol, 2.5 당량)를 한번에 첨가한 후, 트리틸아민 (23.7 g, 91.4 mmol, 1.0 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 60℃에서 교반한 다음, H2O (300 mL)로 붓고 15분 동안 격렬하게 교반하였다. 침전물을 여과하고 H2O로 헹군 후, 진공 건조하여 흰색 고체로서 이소인돌린 89를 얻었다. 화합된 여과액을 EtOAC(3 × 100 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 물 (3 × 50 mL) 및 식염수 (2 × 50 mL)로 세척한 후, MgSO4 상에서 건조시키고 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 50:1 내지 20:1)로 흰색 고체로서 이소인돌린 89의 두번째 부분을 얻었다 (20.6 g, 49.3 mmol, 54% 수율). 89: R f = 0.47 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 20:1); IR (필름) νmax = 3708, 3681, 2973, 2939, 2923, 2866, 2844, 2826, 1762, 1709, 1614, 1428, 1394, 1350, 1301, 1150, 1126, 1053, 1032, 1008 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CDCl3): δ = 7.59 (m, 6 H), 7.30 (m, 11 H), 5.21 (s, 2 H), 3.99 (d, J = 7.6 Hz, 4 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CDCl3): δ = 171.0, 145.7, 142.1, 130.1, 129.4, 128.5, 128.0, 127.7, 126.5, 126.4, 119.0, 115.6, 75.1, 69.4, 52.2, 51.6 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C29H24NO2 + [M+H+]: 418.1802, 실측치 418.1807.
Figure pct00228
이소인돌린 90. 대기 온도에서 CH2Cl2 (50 mL) 중의 이소인돌린 89 (15.4 g, 36.9 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에, 0℃에서 TFA (50.5 g, 33.9 mL, 443 mmol, 12 당량)를 적가하였다. 반응 혼합물을 45분 동안 대기 온도에서 교반되도록 둔 다음, N2 하에서 농축시키고 잔류물을 톨루엔 (2 × 25 mL)과 공증발시켜 모든 미량의 TFA를 제거하였다. 결과적인 갈색 오일을 THF (50 mL) 중에 용해시키고, 포화된 NaHCO3 수용액 (20 mL)을 한번에 첨가한 후, 0℃의 THF 중의 TeocCl의 용액 (1.0 M, 50 mL, 50 mmol, 1.4 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가 12시간 동안 대기 온도에서 격렬하게 교반한 다음, 대략 25 mL로 농축시키고, CH2Cl2 (50 mL)로 희석시킨 후 포화된 NaHCO3 수용액 (20 mL)으로 퀀칭시켰다. 수성 상을 CH2Cl2 (2 × 50 mL)로 추출한 다음, 화합된 유기 상을 H2O (25 mL) 및 식염수 (25 mL)로 세척하고, Mg2SO4 상에서 건조시키고, 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:1 내지 2:1)로 노르스름한 고체로서 이소인돌린 90을 얻었다 (10.0 g, 31.3 mmol, 85% 수율). 90: R f = 0.31 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1); 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 9.99 (s, 1 H), 7.88 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.85 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.73 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.57 (dd, J = 8.0, 1.4 Hz, 1 H), 7.38 (d, J = 1.4 Hz, 1 H), 4.89 (s, 2 H), 3.58 (q, J = 7.1 Hz, 2 H), 3.07 (q, J = 7.1 Hz, 2 H), 1.28 (t, J = 7.1 Hz, 3 H), 1.00 (t, J = 7.1 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ = 189.9, 168.2, 167.7, 142.6, 140.0, 134.2, 132.0, 131.8, 130.3, 129.1, 126.7, 123.5, 43.0, 41.0, 39.1, 13.7, 12.6 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C16H22NO4Si+ [M+H+]: 320.1313, 실측치 320.1318.
Figure pct00229
시아노프탈리드 93. MeOH 수용액 (85%, 20 mL) 중의 이소인돌린 90 (1.60 g, 5.0 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 분말 KOH (420 mg, 7.5 mmol, 1.5 당량)를 한번에 첨가하고, 혼합물을 12시간 동안 대기 온도에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 농축시켜 MeOH를 제거하고, 잔류물을 H2O (10 mL)로 희석시켰다. 그 다음 혼합물에 KHSO4 수용액 (1.0 M)을 첨가하여 중화(pH = 4)시켰다. 이에 따라 형성된 침전물을 여과하여 수집하고 H2O (3 × 5 mL)로 헹구어 갈색을 띤 고체로서 히드록시산 91을 얻었다. 히드록시산 91을 대기 온도에서 CH2Cl2 (20 mL) 중의 PCC(1.61 g, 7.5 mmol, 1.5 당량)의 교반된 현탁액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 대기 온도에서 3시간 동안 교반하고, Et2O (50 mL)로 희석시킨 후, 셀라이트®의 쇼트 플러그를 통해 통과시켰다. 잔류 고체를 Et2O (3 × 15 mL)로 세척하고, 화합된 여과액을 농축시켜 어두운 적색 고체로서 미정제 히드록시프탈리드 92를 얻었다. 히드록시프탈리드 92를 아세톤 시아노히드린 (0.7 mL, 7.5 mmol, 1.5 당량) 중에 현탁시키고, i-Pr2NEt (13 μL, 75 μmol, 0.015 당량)를 0℃에서 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 밀봉된 플라스크 내에서 동일한 온도로 교반하고, 대기 온도로 30분 동안 교반하였다. 그 다음 반응 혼합물을 N2 하에서 농축시키고 잔류물을 톨루엔 (2 × 25 mL)과 공증발시켜 모든 미량의 아세톤 시아노히드린을 제거하였다. 결과적인 갈색 오일을 CH2Cl2 (25 mL) 중에 용해시키고 DCC(1.20 g, 6.0 mmol, 1.2 당량)를 0℃에서 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 TLC가 완전한 전환 (헥사메스:EtOAc 3:2)를 나타낼 때까지 상온에서 8시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하여 우레아 부생성물을 제거하고 여과액을 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1 내지 3:2)로 노르스름한 고체를 얻고, 이를 EtOAc로 재결정하여 흰색 고체로서 시아노프탈리드 93을 얻었다 (826 mg, 2.4 mmol, 48% 수율). 93: R f = 0.31 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.99 (s, 1 H), 7.91 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.86 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.74 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.67 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 6.06 (s, 1 H), 4.98 (s, 2 H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ = 167.7, 167.0, 141.2, 140.6, 136.0, 134.4, 131.7, 126.2, 125.0, 123.6, 123.1, 113.6, 65.5, 40.7 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C17H21N2O4Si+ [M+H+]: 345.1265, 실측치 345.1271.
Figure pct00230
안트라퀴논 94a. -78℃의 THF (1.2 mL) 중의 시아노프탈리드 93 (93 mg, 0.27 mmol, 2.0 당량)의 용액에 LiHMDS(THF 중의 1.0 M, 0.43 mL, 0.43 mmol, 3.0 당량)를 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 20분 동안 -78℃에서 교반하고, -78℃의 THF (1.4 mL) 중의 퀴논 아미날 22a (78 mg, 0.14 mmol, 1.0 당량)의 미리 냉각시킨 용액을 캐뉼라를 통해 첨가하였다. -78℃에서 5분 동안 교반 후, 반응 혼합물을 대기 온도로 승온시키고 추가 1.5시간 동안 교반하였으며 이때 반응 혼합물일 어두운 적색으로 변하고 TLC가 22a (CH2Cl2 중의 8% EtOAc)의 완전한 소비를 나타내었다. 그 다음 반응 혼합물에 pH 6.8 버퍼 (30 mL)를 첨가하여 퀀칭시키고 EtOAC(3 × 30 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 식염수 (30 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전 EtOAc로 세척됨)로 여과시켰다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 농축시켜 어두운 적색 고체로서 미정제 알록-안트라퀴논 94a를 얻었으며, 이를 Ar 하에 탈기된 THF (2.0 mL) 중에 용해시키고 0℃로 냉각시켰다. 이러한 용액에 Pd (PPh3)4 (32 mg, 10.4 μmol, 0.16 당량)를 첨가한 후 모르폴린 (32 mg, 32 μL, 0.34 mmol, 2.4 당량)을 적가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 결과적인 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반되도록 두었으며 이때 반응 혼합물이 어두운 보라색으로 변하였다. 냉각 배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 20분 동안 대기 온도에서 교반한 다음, pH 6.8 버퍼 (30 mL)를 첨가하여 퀀칭시키고 EtOAC(3 × 30 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 H2O (30 mL) 및 식염수 (30 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과하였다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 대략 1 mL 부피로 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 2:1 내지 1:1]로 보라색 고체로서 안트라퀴논 95a를 얻었다 (93 mg, 0.13 mmol, 90% 수율). 95a: R f = 0.58 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); [α]D 25 = +2600° (c = 0.002, EtOAc); 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.11 (s, 1 H), 9.97 (d, J = 4.0 Hz, 1 H), 8.46 (s, 1 H), 8.23 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 7.87 (d, J = 1.9 Hz, 2 H), 7.81 (d, J = 2.2 Hz, 1 H), 7.80 (d, J = 1.9 Hz, 2 H), 5.94 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.87 (d, J = 9.8 Hz, 1 H), 5.10 (s, 1 H), 4.97 (s, 2 H), 4.97 (s, 1H), 4.55 (q, J = 5.8 Hz, 1 H), 4.45 (d, J = 3.7 Hz, 1 H), 1.38 (d, J = 5.8 Hz, 3 H), 0.98 (t, J = 7.6 Hz, 9 H), 0.66 (q, J = 7.6 Hz, 6 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.2, 183.8, 169.0, 156.7, 144.8, 143.5, 136.3, 135.4, 135.1, 134.8, 133.8, 133.0, 130.9, 128.3, 126.1, 124.9, 124.1, 123.8, 114.2, 112.2, 100.2, 99.7, 91.3, 88.4, 77.4, 66.7, 64.9, 64.7, 44.3, 41.8, 22.6, 7.3, 5.6 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C40H47N2O8Si2 + [M+H+]: 739.2865, 실측치 739.2871.
Figure pct00231
이소인돌린 - 운시알라마이신 96. 상온의 탈기된 THF (15 mL) 중의 안트라퀴논 95a (93 mg, 0.13 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 1:1 3HF·Et3N:THF (5.0 mL) 용액을 첨가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 1.5시간 동안 상온에서 교반한 다음, EtOAC(50 mL) 및 포화된 NaHCO3 수용액 (50 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(2 × 25 mL)으로 추출하고, 화합된 유기 추출물을 식염수 (25 mL)로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조시키고 대략 1 mL 부피로 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (비활성화된 실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:2)로 보라색 고체로서 이소인돌린-운시알라마이신 96을 얻었다 (76 mg, 0.13 mmol, 98% 수율). 96: R f = 0.24 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1]; [α]D 25 = +1600° (c = 0.005, EtOAc); 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.10 (s, 1 H), 9.99 (d, J = 4.1 Hz, 1 H), 8.48 (s, 1 H), 8.23 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 7.87 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.82 (d, J = 2.2 Hz, 1 H), 7.81 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 5.96 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.88 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.24 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 5.49 (s, 2 H), 4.91 (dd, J = 4.4, 1.4 Hz, 1 H), 4.44 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 4.38 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.27 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.2, 183.9, 169.0, 156.7, 144.7, 143.6, 136.2, 135.4, 135.1, 134.8, 133.8, 133.0, 130.9, 128.4, 126.1, 124.5, 124.1, 124.1, 114.3, 112.3, 100.3, 99.1, 91.3, 88.8, 77.0, 65.8, 65.3, 64.7, 44.2, 41.8, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C34H33N2O8Si+ [M+H+]: 625.2001, 실측치 625.2006.
Figure pct00232
이소인돌린 - 운시알라마이신 97. 0℃의 탈기된 THF (1.0 mL) 중의 이소인돌린-운시알라마이신 96 (3.6 mg, 5 μmol, 1.0 당량)의 용액에 TBAF/HOAC(1/1, 1.0 M, 0.1 mL)를 적가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 6시간 동안 대기 온도에서 교반한 다음, H2O (1.0 mL)로 퀀칭시키고, 0℃로 냉각시킨 뒤 탈기된 THF (10 mL)로 희석시키고, 유기 상을 분리한 후 N2 하에서 5℃로 대략 1 mL 부피까지 농축시키고, 차가운 탈기된 THF (0℃, 10 mL)로 희석시켰다. 동일한 작업을 5회 반복하여 보라색 고체로서 미정제 이소인돌린-운시알라마이신 97을 얻었으며, 이를 즉시 다음 단계를 위해 사용하였다(주의: 97 은 매우 불안정하고, 산 및 염기 모두에 민감하며, -78℃에서 서서히 분해됨, 최상의 수율을 위해 새로운 것을 사용). 97: R f = 0.10 (실리카 겔, MeOH:EtOAc 1:1); HRMS(ESI-TOF): 계산치 C28H21N2O6 + [M+H+]: 481.1394, 실측치 481.1397.
Figure pct00233
터트 - 부틸카르바모일 - 이소인돌린 - 운시알라마이신 98. 미정제 이소인돌린-운시알라마이신 97 [8-프탈이미도메틸-운시알라마이신 47aa (3.6 mg, 5 μmol, 1.0 당량)로부터 상기 기재된 과정에 따라 제조됨]을 0℃에서 탈기된 THF (1.0 mL) 중에 현탁시키고, 포화된 NaHCO3 수용액 (1.0 mL)을 한번에 첨가한 후, Boc2O (1.3 mg, 6 μmol, 1.2 당량)를 첨가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 1.5시간 동안 0℃에서 교반한 다음, EtOAC(5 mL) 및 pH 6.8 버퍼 (5 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(2 × 25 mL)로 추출하고, 화합된 유기 추출물을 식염수 (5 mL)로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조시키고, 대략 1 mL 부피로 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:2]로 보라색 고체로서 8-터트-부틸카르바모일메틸-이소인돌린-운시알라마이신 98 (2.7 mg, 4.5 μmol, 95% 수율)을 얻었다. 98: R f = 0.27 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); [α]D 25 = +2300° (c = 0.002, EtOAc); 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.17 (s, 1 H), 10.00 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 8.50 (s, 1 H), 8.25 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 8.15 (s, 1 H), 7.75 (dd, J = 8.0, 1.8 Hz, 1 H), 6.03 (br, 1 H), 5.97 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.89 (dt, J = 9.9, 1.3 Hz, 1 H), 5.24 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 4.92 (dd, J = 4.4, 1.7 Hz, 2 H), 4.65 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.39 (d, J = 5.7, 1 H), 4.38 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.37 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 1.43 (s, 9 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.5, 184.1, 156.6, 147.3, 144.6, 136.1, 134.6, 134.0, 133.7, 128.1, 125.0, 124.5, 124.1, 114.4, 112.4, 100.4, 99.1, 91.2, 88.8, 79.8, 77.0, 65.8, 65.3, 64.7, 44.3, 44.2, 28.5, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C33H29N2O8 + [M+H+]: 581.1918, 실측치 581.1918.
Figure pct00234
설파이드 99. 미정제 8-아미노메틸-운시알라마이신 97 [8-프탈이미도메틸-운시알라마이신 (96, 16 mg, 27 μmol, 1.0 당량)으로부터 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조됨]을 0℃에서 탈기된 THF (1.0 mL) 중에 현탁시키고, 포화된 NaHCO3 수용액 (1.0 mL)을 한번에 첨가한 후, 탈기된 THF (0.5 mL) 중의 2- (페닐티오)에틸 클로로포르메이트 (14 mg, 66 μmol, 2.5 당량) 용액을 적가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 5시간 동안 0℃에서 교반한 다음, EtOAC(5 mL) 및 pH 6.8 버퍼 (5 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(2 × 25 mL)로 추출하고, 화합된 유기 추출물을 식염수 (5 mL)로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조시키고, 대략 1 mL 부피로 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:2]로 보라색 고체로서 설파이드 99 (9.5 mg, 14 μmol, 55% 수율)를 얻었다. 99: R f = 0.23 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.20 (s, 1 H), 10.01 (d, J = 4.1 Hz, 1 H), 8.50 (s, 1 H), 8.23 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 7.73 (dd, J = 8.0, 1.8 Hz, 1 H), 6.00 (br, 1 H), 5.98 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.89 (dt, J = 10.0, 1.3 Hz, 1 H), 5.24 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 4.94 (dd, J = 4.4, 1.7 Hz, 2 H), 4.65 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.4-4.2 (m, 2 H), 4.39 (d, J = 5.0, 1 H), 4.38 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.35 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 3.2-3.0 (m, 2 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.6, 184.2, 154.4, 147.3, 144.6, 136.1, 135.1, 134.6, 134.0, 133.8, 129.1, 128.6, 128.1, 125.3 125.1, 124.5, 124.1, 114.3, 112.4, 100.3, 99.1, 91.2, 88.8, 77.1, 65.8, 65.3, 64.7, 64.6, 44.3, 44.2, 32.4, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C37H29N2O8S+ [M+H+]: 661.1639 실측치 661.1638.
Figure pct00235
설폰 100. CH2Cl2 (0.5 mL) 중의 설파이드 99 (6.5 mg, 10 μmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 -78℃에서 새롭게 제조된 디메틸디옥시란 (2.0 mL, 아세톤 중의 ~0.1 M, 0.2 mmol, 20 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 알루미늄 포일로 싼 뒤, 0℃로 승온되도록 두었다. 20분 동안 0℃에서 교반 후, Me2S(84 mg, 0.1 mL, 1.4 mmol, 135 당량)를 한번에 첨가하고, 교반을 동일한 온도에서 20분 동안 계속하였다. 그 다음 반응 혼합물을 EtOAC(25 mL)로 희석시키고, H2O (5 mL) 및 식염수 (5 mL)로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조시키고, 대략 1 mL 부피로 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:3]로 보라색 고체로서 설폰 100 (2.7 mg, 4.5 μmol, 55% 수율)을 얻었다. 100: R f = 0.23 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:3 그 다음 EtOAc:MeOH 50:1]; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.19 (s, 1 H), 9.99 (d, J = 4.1 Hz, 1 H), 8.51 (s, 1 H), 8.24 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 8.18 (s, 1 H), 7.73 (dd, J = 8.0, 1.8 Hz, 1 H), 6.05 (br, 1 H), 5.97 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.88 (dt, J = 10.0, 1.3 Hz, 1 H), 5.26 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 4.97 (dd, J = 4.4, 1.7 Hz, 2 H), 4.66 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.6-4.3 (m, 2 H), 4.39 (d, J = 5.1, 1 H), 4.38 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.50 (br, 2 H), 3.35 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.5, 184.1, 153.7, 147.3, 144.6, 139.1, 136.1, 134.6, 134.1, 134.0, 133.7, 129.5, 128.1, 128.0, 125.0, 124.5, 124.1, 114.4, 112.4, 100.4, 99.1, 91.2, 88.8, 77.0, 65.8, 65.3, 64.7, 59.4, 55.2, 44.3, 44.2, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C37H29N2O10S+ [M+H+]: 693.1537, 실측치 693.1532.
Figure pct00236
프탈리드 101. DMF (50 mL) 중의 6-브로모메틸프탈리드 (11.3 g, 49.9 mmol, 1.0 당량)의 용액에 무수 Cs2CO3 (24.3 g, 74.8 mmol, 1.5 당량) 및 n-Bu4NI (1.8 g, 5.0 mmol, 0.1 당량)를 순차적으로 첨가한 후, N-메틸-2-(트리메틸실릴)에틸카바메이트 (9.6 g, 54.9 mmol, 1.1 당량)를 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 60℃에서 교반한 다음, H2O (300 mL)에 붓고 15분 동안 격렬하게 교반하였다. 침전물을 여과하고 H2O로 헹군 후, 진공 건조하여 흰색 고체로서 프탈리드 101을 얻었다. 화합된 여과액을 EtOAC(3 × 100 mL)로 추출하고, 화합된 유기 층을 물 (3 × 50 mL) 및 식염수 (2 × 50 mL)로 세척한 후, MgSO4 상에서 건조시키고 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 10:1 내지 8:1)로 흰색 고체로서 프탈리드 101의 두번째 부분을 얻었다 (13.0 g, 40.4 mmol, 81% 수율). 101: R f = 0.31 (실리카 겔, CH2Cl2:EtOAc 8:1); IR (필름) νmax = 3708, 3681, 2973, 2939, 2923, 2866, 2844, 2826, 1762, 1709, 1614, 1428, 1394, 1350, 1301, 1150, 1126, 1053, 1032, 1008 cm-1; 1H NMR (600 MHz, CDCl3): δ = 7.93 (s, 1 H), 7.87 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.76 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.75 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.47 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 5.29 (s, 2 H), 4.96 (s, 2 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CDCl3): δ = 170.6, 167.8, 146.0, 137.9, 134.4, 134.2, 131.9, 126.4, 125.3, 123.6, 122.5, 69.5, 40.9 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C16H24NO4Si+ [M+H+]:322.1469, 실측치 322.1465.
Figure pct00237
시아노프탈리드 104. MeOH 수용액 (85%, 20 mL) 중의 프탈리드 101 (1.61 g, 5.0 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 분말 KOH (420 mg, 7.5 mmol, 1.5 당량)를 한번에 첨가하고, 혼합물을 12시간 동안 대기 온도에서 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축하여 MeOH를 제거하고, 잔류물을 H2O (10 mL)로 희석하였다. 그 다음 혼합물에 KHSO4 (1.0 M) 수용액을 첨가하여 중화(pH = 4)시켰다. 이에 따라 형성된 침전물을 여과하여 수집하고 H2O (3 × 5 mL)로 헹구어 갈색을 띤 고체로서 히드록시산 102를 얻었다. 히드록시산 102를 대기 온도에서 CH2Cl2 (20 mL) 중의 PCC(1.61 g, 7.5 mmol, 1.5 당량)의 교반된 현탁액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 대기 온도에서 3시간 동안 교반하고, Et2O (50 mL)로 희석시킨 후, 셀라이트®의 쇼트 플러그를 통해 통과시켰다. 잔류 고체를 Et2O (3 × 15 mL)로 세척하고, 화합된 여과액을 농축하여 어두운 적색 고체로서 미정제 히드록시프탈리드 103을 얻었다. 히드록시프탈리드 103을 아세톤 시아노히드린 (0.7 mL, 7.5 mmol, 1.5 당량) 중에 현탁시키고, i-Pr2NEt (13 μL, 75 μmol, 0.015 당량)를 0℃에서 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 밀봉된 플라스크 내에서 동일한 온도로 교반하고, 대기 온도로 30분 동안 교반하였다. 그 다음 반응 혼합물을 N2 하에 농축시키고 잔류물을 톨루엔 (2 × 25 mL)과 공증발시켜 모든 미량의 아세톤 시아노히드린을 제거하였다. 결과적인 갈색 오일을 CH2Cl2 (25 mL) 중에 용해시키고 DCC(1.20 g, 6.0 mmol, 1.2 당량)를 0℃에서 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 TLC가 완전한 전환 (헥사메스:EtOAc 3:2)을 나타낼 때까지 상온에서 8시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하여 우레아 부생성물을 제거하고 여과액을 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 2:1 내지 3:2)로 노르스름한 고체를 얻고, 이를 EtOAc로 재결정하여 흰색 고체로서 시아노프탈리드 104를 얻었다 (917 mg, 2.65 mmol, 53% 수율). 104: R f = 0.31 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 3:2); 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.99 (s, 1 H), 7.91 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.86 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.74 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 7.67 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 6.06 (s, 1 H), 4.98 (s, 2 H) ppm; 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ = 167.7, 167.0, 141.2, 140.6, 136.0, 134.4, 131.7, 126.2, 125.0, 123.6, 123.1, 113.6, 65.5, 40.7 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C17H23N2O4Si+ [M+H+]: 347.1422, 실측치 347.1425.
Figure pct00238
안트라퀴논 106a. -78℃의 THF (0.12 mL) 중의 시아노프탈리드 104 (10 mg, 29 μmol, 2.0 당량)의 용액에 LiHMDS(THF 중의 1.0 M, 43 μL, 43 μmol, 3.0 당량)를 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 20분 동안 -78℃에서 교반하고, -78℃의 THF (0.14 mL) 중의 퀴논 아미날 22a (8 mg, 14 μmol, 1.0 당량)의 미리 냉각시킨 용액을 캐뉼라를 통해 첨가하였다. -78℃에서 5분 동안 교반 후, 반응 혼합물을 대기 온도로 승온시키고 추가 1.5시간 동안 교반하였으며 이때 반응 혼합물이 어두운 적색으로 변하였고 TLC가 22a (CH2Cl2 중의 8% EtOAc)의 완전한 소비를 나타내었다. 그 다음 반응 혼합물에 pH 6.8 버퍼 (3 mL)를 첨가하여 퀀칭시키고 EtOAC(3 × 3 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 식염수 (3 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과하였다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 농축하여 어두운 적색 고체로서 미정제 알록-안트라퀴논 28a를 얻었으며, 이를 Ar 하에 탈기된 THF (0.2 mL) 중에 용해시키고 0℃로 냉각하였다. 이러한 용액에 Pd (PPh3)4 (3 mg, 1.0 μmol, 0.16 당량)를 첨가한 후 모르폴린 (3 mg, 3 μL, 30 μmol, 2.4 당량)을 적가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 결과적인 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반되도록 두었으며 이때 반응 혼합물이 어두운 보라색으로 변하였다. 냉각 배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 20분 동안 대기 온도로 교반한 다음, pH 6.8 버퍼 (3 mL)를 첨가하여 퀀칭시키고 EtOAC(3 × 3 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 추출물을 H2O (3 mL) 및 식염수 (3 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시킨 뒤 셀라이트®의 쇼트 플러그(사용 전 EtOAc로 세척됨)를 통해 여과하였다. 고체를 EtOAc로 헹구고, 화합된 여과액을 대략 1 mL 부피로 농축하였다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 2:1 내지 1:1]로 보라색 고체로서 안트라퀴논 106a를 얻었다 (8 mg, 11 μmol, 80% 수율). 106a: R f = 0.58 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); [α]D 25 = +2600° (c = 0.002, EtOAc); 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.11 (s, 1 H), 9.97 (d, J = 4.0 Hz, 1 H), 8.46 (s, 1 H), 8.23 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 7.87 (d, J = 1.9 Hz, 2 H), 7.81 (d, J = 2.2 Hz, 1 H), 7.80 (d, J = 1.9 Hz, 2 H), 5.94 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.87 (d, J = 9.8 Hz, 1 H), 5.10 (s, 1 H), 4.97 (s, 2 H), 4.97 (s, 1H), 4.55 (q, J = 5.8 Hz, 1 H), 4.45 (d, J = 3.7 Hz, 1 H), 1.38 (d, J = 5.8 Hz, 3 H), 0.98 (t, J = 7.6 Hz, 9 H), 0.66 (q, J = 7.6 Hz, 6 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.2, 183.8, 169.0, 156.7, 144.8, 143.5, 136.3, 135.4, 135.1, 134.8, 133.8, 133.0, 130.9, 128.3, 126.1, 124.9, 124.1, 123.8, 114.2, 112.2, 100.2, 99.7, 91.3, 88.4, 77.4, 66.7, 64.9, 64.7, 44.3, 41.8, 22.6, 7.3, 5.6 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C40H49N2O8Si2 + [M+H+]: 741.3022, 실측치 741.3023.
Figure pct00239
N - 메틸 -8-[2-( 트리메틸실릴 )에틸] 카르바모일메틸 - 운시알라마이신 107. 상온의 탈기된 THF (1.5 mL) 중의 안트라퀴논 106a (7 mg, 10 μmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 1:1 3HF·Et3N:THF (0.5 mL) 용액을 첨가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 1.5시간 동안 상온에서 교반한 다음, EtOAC(5.0 mL) 및 포화된 NaHCO3 수용액 (5.0 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(2 × 2.5 mL)로 추출하고, 화합된 유기 추출물을 식염수 (2.5 mL)로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조시키고 대략 1 mL 부피로 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 (비활성화된 실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:2)로 보라색 고체로서 운시알라마이신 유사체 107을 얻었다 (7 mg, 10 μmol, 99% 수율). 107: R f = 0.24 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1]; [α]D 25 = +1600° (c = 0.005, EtOAc); 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.10 (s, 1 H), 9.99 (d, J = 4.1 Hz, 1 H), 8.48 (s, 1 H), 8.23 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 8.21 (s, 1 H), 7.87 (dd, J = 5.4, 3.1 Hz, 2 H), 7.82 (d, J = 2.2 Hz, 1 H), 7.81 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 5.96 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.88 (d, J = 9.9 Hz, 1 H), 5.24 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 5.49 (s, 2 H), 4.91 (dd, J = 4.4, 1.4 Hz, 1 H), 4.44 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 4.38 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.27 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.2, 183.9, 169.0, 156.7, 144.7, 143.6, 136.2, 135.4, 135.1, 134.8, 133.8, 133.0, 130.9, 128.4, 126.1, 124.5, 124.1, 124.1, 114.3, 112.3, 100.3, 99.1, 91.3, 88.8, 77.0, 65.8, 65.3, 64.7, 44.2, 41.8, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C34H35N2O8Si+ [M+H+]: 627.2157, 실측치 627.2157.
Figure pct00240
N - 메틸 -8- 아미노메틸 - 운시알라마이신 108. 0℃의 탈기된 THF (1.0 mL) 중의 운시알라마이신 유사체 107 (3.6 mg, 5 μmol, 1.0 당량)의 용액에 TBAF/HOAC(1/1, 1.0 M, 0.1 mL)를 적가하였다. 반응 혼합물을 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 6시간 동안 대기 온도에서 교반한 다음, H2O (1.0 mL)로 퀀칭시키고, 0℃로 냉각시킨 후 탈기된 THF (10 mL)로 희석시키고, 유기 상을 분리한 뒤 N2 하에서 5℃로 대략 1 mL 부피까지 농축시킨 후, 차가운 탈기된 THF (0℃, 10 mL)로 희석시켰다. 동일한 작업을 5회 반복하여 보라색 고체로서 미정제 N-메틸-8-아미노메틸-운시알라마이신 108을 얻었으며, 이를 즉시 다음 단계를 위해 사용하였다(주의: 108 은 매우 불안정하고, 산 및 염기 모두에 민감하며, -78℃에서 서서히 분해됨, 최상의 수율을 위해 새로운 것을 사용). 108: R f = 0.10 (실리카 겔, MeOH:EtOAc 1:1); HRMS(ESI-TOF): 계산치 C28H23N2O6 + [M+H+]: 483.1551, 실측치 483.1557.
Figure pct00241
설파이드 109. 미정제 N-메틸-8-아미노메틸-운시알라마이신 108 [운시알라마이신 유사체 107 (6 mg, 9 μmol, 1.0 당량)로부터 상기 기재된 일반적인 과정에 따라 제조됨]을 0℃에서 탈기된 THF (0.3 mL) 중에 현탁시키고, 포화된 NaHCO3 수용액 (0.3 mL)을 한번에 첨가한 후, 탈기된 THF (0.2 mL) 중의 2-(페닐티오)에틸 클로로포르메이트 (5 mg, 22 μmol, 2.5 당량)의 용액을 적가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고, 반응 혼합물을 5시간 동안 0℃에서 교반한 다음, EtOAC(2 mL) 및 pH 6.8 버퍼 (2 mL) 간에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAC(2 × 8 mL)로 추출하고, 화합된 유기 추출물을 식염수 (2 mL)로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조시키고, 대략 1 mL 부피로 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:2]로 보라색 고체로서 설파이드 109 (4 mg, 5.5 μmol, 61% 수율)를 얻었다. 109: R f = 0.23 (실리카 겔, 헥산:EtOAc 1:1); 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.20 (s, 1 H), 10.01 (d, J = 4.1 Hz, 1 H), 8.50 (s, 1 H), 8.23 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 8.16 (s, 1 H), 7.73 (dd, J = 8.0, 1.8 Hz, 1 H), 6.00 (br, 1 H), 5.98 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.89 (dt, J = 10.0, 1.3 Hz, 1 H), 5.24 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 4.94 (dd, J = 4.4, 1.7 Hz, 2 H), 4.65 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.4-4.2 (m, 2 H), 4.39 (d, J = 5.0, 1 H), 4.38 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.35 (d, J = 4.8 Hz, 1 H), 3.2-3.0 (m, 2 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.6, 184.2, 154.4, 147.3, 144.6, 136.1, 135.1, 134.6, 134.0, 133.8, 129.1, 128.6, 128.1, 125.3 125.1, 124.5, 124.1, 114.3, 112.4, 100.3, 99.1, 91.2, 88.8, 77.1, 65.8, 65.3, 64.7, 64.6, 44.3, 44.2, 32.4, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C37H31N2O8S+ [M+H+]: 663.1796 실측치 663.1798.
Figure pct00242
설폰 110. CH2Cl2 (0.3 mL) 중의 설파이드 109 (4 mg, 5.5 μmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 -78℃에서 새롭게 제조된 디메틸디옥시란 (1.0 mL, 아세톤 중의 ~0.1 M, 0.1 mmol, 18 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 알루미늄 포일로 싼 후, 0℃로 승온되도록 두었다. 20분 동안 0℃에서 교반 후, Me2S(42 mg, 50 μL, 0.7 mmol, 135 당량)를 한번에 첨가하고, 교반을 동일한 온도에서 20분 동안 계속하였다. 그 다음 반응 혼합물을 EtOAC(12 mL)로 희석하고, H2O (3 mL) 및 식염수 (3 mL)로 세척한 후, Na2SO4 상에서 건조시키고, 대략 1 mL 부피로 농축시켰다. 플래시 컬럼 크로마토그래피 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:1 내지 1:3]로 보라색 고체로서 설폰 110 (20 mg, 3.4 μmol, 62% 수율)을 얻었다. 110: R f = 0.23 [비활성화된 실리카 겔 (일반적인 방법 참조), 헥산:EtOAc 1:3 그 다음 EtOAc:MeOH 50:1]; 1H NMR (600 MHz, CD3CN): δ = 13.19 (s, 1 H), 9.99 (d, J = 4.1 Hz, 1 H), 8.51 (s, 1 H), 8.24 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 8.18 (s, 1 H), 7.73 (dd, J = 8.0, 1.8 Hz, 1 H), 6.05 (br, 1 H), 5.97 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 5.88 (dt, J = 10.0, 1.3 Hz, 1 H), 5.26 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 4.97 (dd, J = 4.4, 1.7 Hz, 2 H), 4.66 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 4.6-4.3 (m, 2 H), 4.39 (d, J = 5.1, 1 H), 4.38 (dq, J = 5.0, 6.5 Hz, 1 H), 3.50 (br, 2 H), 3.35 (d, J = 4.9 Hz, 1 H), 1.38 (d, J = 6.5 Hz, 3 H) ppm; 13C NMR (150 MHz, CD3CN): δ = 188.5, 184.1, 153.7, 147.3, 144.6, 139.1, 136.1, 134.6, 134.1, 134.0, 133.7, 129.5, 128.1, 128.0, 125.0, 124.5, 124.1, 114.4, 112.4, 100.4, 99.1, 91.2, 88.8, 77.0, 65.8, 65.3, 64.7, 59.4, 55.2, 44.3, 44.2, 21.2 ppm; HRMS(ESI-TOF): 계산치 C37H31N2O10S+ [M+H+]: 695.1694, 실측치 695.1692.
실시예 4 - 운시알라마이신 유도체의 생물학적 활성
본 발명의 화합물은 다양한 상이한 암 세포주에서 세포독성인 것으로 나타났다. 상기 세포독성은 화합물이 항체에 접합(conjugation) 되었을 때(즉, ADC로서)의 화합물의 세포독성과 비슷하며 이는 화합물이 항체에 독립적인 세포독소임을 입증한다. 이러한 관찰은 화합물의 세포독성이 항체-관련 작동체 기능, 예컨대 항체-의존적인 세포-매개 세포독성(ADCC)에서 기인하지 않는다는 개념을 지지한다.
ATP 발광 분석을 사용하였으며, 그 과정은 다음과 같았다: 세포를 각각 ATP 셀티터Glo™(CellTiterGlo™) 분석을 위하여 3시간 동안 96-웰 플레이트에 1 × 103 세포/웰로 접종하였다. 화합물의 일련의 희석물(1:3)을 웰에 첨가하였다. 플레이트를 72시간 동안 인큐베이션시켰다. 프로메가의 셀티터Glo ™ 세포 생존력 키트를 사용하여 제조사의 지시에 따라 화합물로 처리된 세포의 ATP 함량을 측정하였다. ATP 함량의 감소는 세포 생존력의 감소의 척도이다. EC50 값 - 최대 효과의 50%까지 세포 생존력을 감소시키는 제제(agent)의 농도-은 PRISM™ 소프트웨어, 버전 5.0 (그래프패드 소프트웨어(GraphPad Software), 미국 캘리포니아 라호이아)을 사용하여 결정하였다.
분석 결과를 표 1에 나타내었다. 화합물을 다약제 내성 유방암 세포주인 ADR 뿐만 아니라 H226, N87, 및 OVCAR3 세포주에 대해 테스트하였다.
암 세포주에 대한 본 발명의 화합물의 생물학적 활성
화합물 세포주 및 EC 50 (nM)
Compound ADR* H226 N87 OVCAR3
116 3.3 4.2 8.7 16
Figure pct00243

26a ( 비교예 ) 		0.39 1.8 1.8 4.7
Figure pct00244

36a ( 비교예 **) 		0.67 2.4 2.7 7.4
Figure pct00245

48aa 		0.020 0.028 0.011 0.320
Figure pct00246

48ab 		0.054 0.051 0.023 0.280
Figure pct00247
 0.340 0.077 0.15 0.40
Figure pct00248

48ba 		0.029 0.012 0.010 0.066
* 다약제 내성 유방암 세포주
** 미국특허 제8,709,431호
특정한 조건 하에서, 본 발명의 화합물의 일부는 불안정하였으나, (실시예 5에 개시된 바와 같이) 메탄아민을 사용하여 프탈이미드-보호된 전구체로부터 프탈이미드기를 제거하고 이의 포르메이트 염으로서 상기 화합물을 분리함으로써 생물학적 분석을 수행하기에 충분한 양을 얻었다.
실시예 5 - 항체에 대한 부착을 위한 링커에 대한 운시알라마이신의 접합
ADC를 제조하기 위하여, 항체와 운시알라마이신의 세포독성 유사체를 공유적으로 연결하는 링커를 제공할 필요가 있다. 일단 ADC가 의도된 작용 부위에 도달하면, 링커는 바람직하게는 세포독소를 방출하도록 절단가능하다.
본 발명의 화합물 중 하나인 8-아미노메틸운시알라마이신 (48aa)은 잠재적인 세포독소이나 불안정하고 항체-약물 접합체를 제조하는데 필요한 링커와의 유도체화가 어렵다.
Figure pct00249
따라서, 하기 개략도 22의 116과 같은, 접합에 적합한 48aa의 유도체를 제조하기 위하여, 대안적인 접근법을 이용하였다. 이러한 접근법에서, 48aa 그 자체의 유도체화 대신에, N1 상에 알록 및 TES 보호기 및 C17의 히드록실기를 갖는 보호된 전구체 화합물 77a를 이용하였다. 화합물 77a의 프탈이미드 보호기가 제거되면, 결과적인 111이 48aa보다 훨씬 더욱 안정하고 이에 링커가 부착하기 위한 화학에 잘 따른다. 이론에 구속됨이 없이, 48aa의 불안정성은 이의 유리 메틸아미노기로 인한 것이나 111에서, 알록 및 TES 기는 메틸아미노기의 불안정하게 하는 효과를 상쇄한다. 링커의 접합이 48aa를 사용하여 도시되지만, 본 발명의 임의의 화합물이 유사하게 유도체화될 수 있는 것으로 고려된다.
개략도 22
Figure pct00250
화합물 77a (48.3 mg, 0.061 mmol)를 MeOH (5 mL) 중에 용해시키고 THF (1 mL)를 첨가하여 이를 용해시켰다. 용액을 0℃로 냉각시키고 40% 메탄아민 수용액 (500 μL, 6.06 mmol)을 플라스크의 측면을 따라 아래로 서서히 첨가하였으며 이때 색이 더욱 어두워졌다. 혼합물을 0℃ 냉장고 내부에 하룻밤 동안 두었다. LCMS가 화합물 111 ([M+H]: 667.3)로의 대략 75% 전환을 나타내었다. 반응 혼합물을 상온(RT)으로 승온시키고 4시간 동안 교반하였으며, 이후 전환이 94% 이상이었다. 반응물을 EtOAC(10 mL)로 희석시키고 포화된 NaHCO3 수용액 (10 mL) 및 식염수로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과한 뒤 농축하고, 30분 동안 고 진공을 가한 다음 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
DMF (1 mL) 중의 화합물 111 (0.041 g, 0.061 mmol)의 용액에 휘니그 염기(Hunig's base) (0.032 mL, 0.183 mmol) 및 (9H-플루오렌-9-일)메틸((S)-3-메틸-1-(((S)-1-((4-((((4-니트로페녹시)카보닐)옥시)메틸)페닐)아미노)-1-옥소-5-우레이도-펜탄-2-일)아미노)-1-옥소부탄-2-일)카바메이트(0.056 g, 0.073 mmol)를 상온에서 첨가하였다. 3시간 후, LCMS 분석이 화합물 112 ([M+H]: 1295.6)로의 85% 전환을 나타내었다. 미정제 반응 혼합물을 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
화합물 112를 THF (1 mL) 중에 용해시키고 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 이러한 용액에 Pd (PPh3)4 (7.05 mg, 6.10 μmol)를 첨가한 후 모르폴린 (0.013 mL, 0.146 mmol)을 첨가하였다. 색이 5초 이내에 갈색으로부터 보라색으로 변하였다. 반응물을 2시간 동안 0℃에서 교반하였으며, 이후 LCMS가 출발 물질의 소실과 원하는 생성물 113 ([M+H]: 1210.5)의 생성을 나타내었다. 반응 혼합물을 EtOAC(10 mL)로 희석시키고 pH 6.8 포스페이트 버퍼 (10 mL)로 세척하였다. 수성 층을 EtOAC(3 × 10 mL)로 추출하고 화합된 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 농축하였다. 미정제 생성물을 CH2Cl2 중 0-20% MeOH 구배로 콤비플래시®(COMBIFLASH®) 액체 크로마토그래피 시스템 (40 g 실리카 겔)을 이용하여 정제하여 보라색 고체로서 화합물 4를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.17 (s, 1H), 10.07 (s, 1H), 10.00 (d, J=4.4 Hz, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.21 (d, J=8 Hz, 1H), 8.13-8.10 (m, 2H), 8.01 (t, J=5.6 Hz, 1H), 7.89 (d, J=7.2 Hz, 2H), 7.81 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.74 (t, J=7.6 Hz, 2H, 7.60 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.44-7.39 (m, 3H), 7.32 (t, J=7.2 Hz, 3H), 6.71 (d, J=5.2 Hz, 1H), 6.10-5.96 (m, 3H), 5.40 (s, 2H), 5.11 (dd, J=4.8, 1.2 Hz, 1H), 5.05-5.01 (m, 2H), 4.51 (dd, J=12.8, 6.4 Hz, 1H), 4.41-4.40 (m, 3H), 4.31-4.23 (m, 3H), 3.93 (t, J=8.8 Hz, 1H), 3.03-2.93 (m, 2H), 2.00-1.99 (m, 1H), 1.69-1.58 (m, 2H), 1.35 (d, J=6.4 Hz, 6H), 0.97-0.85 (m, 15H), 0.62 (q, J=8.0 Hz, 6H).
DMF (3 mL) 중의 화합물 113 (0.074 g, 0.061 mmol)의 용액에 피페리딘 (50 μL, 0.506 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반하였다. LCMS가 화합물 114 ([M+H]: 988.4)의 형성을 나타내었다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고 트리에틸아민 (85 μL, 0.610 mmol)을 첨가한 후 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (99 μL, 0.610 mmol)를 첨가하였다. 5분 후, 냉각 배쓰를 제거하고 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. LCMS가 화합물 115 ([M+H]: 874.4)의 형성을 나타내었다. 반응 혼합물을 EtOAC(50 mL)로 희석시키고 식염수 (50 mL)로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과한 후 농축하였다.
미정제 화합물 115를 NMP(3 mL) 중에 용해시키고 휘니그 염기 (0.032 mL, 0.183 mmol)를 첨가한 후, 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 6-(2,5-디옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-일)헥사노에이트 (22.57 mg, 0.073 mmol)를 첨가하였다. 2시간 후, LCMS가 생성물 116 ([M+H]: 1067.5)의 형성을 나타내었다. 추가 1.2 당량의 6-말레이미도카프로산 N-히드록시숙신이미드 에스테르 (MC-OSu) 및 3 당량의 휘니그 염기 (0.032 mL, 0.183 mmol)를 첨가하였다. 반응 플라스크를 알루미늄 포일로 싸고 하룻밤 동안 0℃에서 유지하였다. LCMS가 반응의 완료를 나타내었다. 반응물을 2 mL DMSO로 희석시키고 40분에 걸쳐 5-95% 물/아세토니트릴 (0.05% 포름산) 구배를 사용하여 엑스 브릿지 프레프(X Bridge prep) C18 컬럼 (30 × 250 mm, 5 mm OBD)을 구비한 워터스 델타 프레프(Waters Delta Prep) 4000™ 장치 상에서 정제하였다. 20.2분에 수집된 분획물이 원하는 생성물을 함유하는 것으로 확인되었다. 이를 동결건조하여 보라색 고체로서 6.3 mg (8.42% 77a로부터 전체 수율)의 116을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 13.11 (s, 1H), 9.93 (s, 2H), 8.45 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.22-8.13 (m, 2H), 8.08 (d, J=7.6 Hz, 1H), 8.00 (t, J=6.0 Hz, 1H), 7.80 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.60 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.30 (d, J=8.4 Hz, 2H), 6.99 (s, 2H), 6.67 (d, J=4.4 Hz, 2H), 6.07-5.96 (m, 3H), 5.40 (bs, 3H), 5.14 (d, J=3.6 Hz, 1H), 5.06 (dd, J=4.8, 1.6 Hz, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.40-4.31 (m, 4H), 4.17 (dd, J=8.4, 6.8 Hz, 1H), 3.07-2.91 (m, 2H), 2.20-2.09 (m, 2H), 1.99-193 (m, 2H), 1.70-1.45 (m, 5H), 1.31-1.14 (m, 7H), 0.85 (d, J=6.8 Hz, 3H), 0.77 (d, J=6.8 Hz, 3H).
실시예 6 - 항체에 대한 화합물의 접합
하기 일반적인 과정을 사용하여 하기 도시된 바와 같은 구조를 갖는 116의 항체-약물 접합체 (ADCs)를 제조하였으며, 여기서 Ab는 항체를 나타내고 반복 단위 m은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10으로 반복된다. 일부 특정 비제한적인 예에서, m은 1, 2, 3, 또는 4이다.
Figure pct00251
항체 Ab를 갖는 116 ADC
이러한 과정은 라이신 ε-아미노 기와 2-이미노티올란의 반응 후 말레이미드-함유 약물-링커 모이어티, 예컨대 이에 제한되는 것은 아니나 116과의 반응에 의한 유리 티올 기의 항체로의 도입에 기초한다. 처음에, 항체는 50 mM NaCl 및 2 mM 디에틸렌 트리아민 펜타아세트산 (DTPA)을 함유하는 0.1 M 포스페이트 버퍼 (pH 8.0) 내로 버퍼 교환하고 5-10 mg/mL로 농축시킨다. 티올화는 항체에 2-이미노티올란을 첨가하여 달성한다. 첨가되는 2-이미노티올란의 양은 예비 실험으로 결정할 수 있으며 항체마다 다양하다. 예비 실험에서, 2-이미노티올란의 증가하는 양의 적정을 항체에 첨가하며, 이후 RT(상온, 약 25℃)에서 1시간 동안 항체와 인큐베이션시키고, 항체를 SEPHADEX™ G-25 컬럼을 사용하여 50 mM HEPES, 5 mM 글리신, 2 mM DTPA, pH 5.5로 탈염시키고 도입된 티올 기의 수를 디티오디피리딘 (DTDP)과의 반응으로 빠르게 결정한다. DTDP와 티올 기의 반응은 티오피리딘의 유리를 초래하고, 이는 324 nm에서 분광학적으로 모니터될 수 있다. 0.5-1.0 mg/mL의 단백질 농도의 샘플을 전형적으로 사용한다. 280 nm에서의 흡광도를 사용하여 샘플 중 단백질의 농도를 정확하게 결정할 수 있으며, 그 다음 각 샘플의 분취량 (0.9 mL)을 상온에서 10분 동안 0.1 mL DTDP(에탄올 중 5 mM 스톡 용액)과 함께 인큐베이션시킨다. 버퍼 단독에 DTDP를 더한 블랭크 샘플을 또한 함께 인큐베이션시킨다. 10분 후, 324 nm에서의 흡광도를 측정하고 티올 기의 수를 19,800 M-1의 티오피리딘에 대한 흡광계수를 사용하여 정량화한다.
일부 실시양태에서, 항체 당 2 내지 3개 티올기의 티올화 수준이 바람직하다. 예를 들어, 일부 항체를 사용하여 이는 15-배 과량의 몰의 2-이미노티올란의 첨가 후 1시간 동안 상온에서의 인큐베이션으로 달성될 수 있다. 그 다음 항체를 원하는 몰비로 2-이미노티올란과 인큐베이션시킨 다음 접합 버퍼 (50 mM HEPES, 5 mM 글리신, 2 mM DTPA, pH 5.5))로 탈염시킨다. 티올화 물질을 얼음 상에 유지하면서 도입된 티올의 수를 상기 기재된 바와 같이 정량화한다.
도입된 티올의 수의 확인 후, 약물(세포독소)-링커 모이어티를 티올 당 2.5-배 과량의 몰로 첨가한다. 최종 농도 25% 프로필렌 글리콜 및 5% 트레할로스를 함유하는 접합 버퍼 내에서 접합 반응이 진행되도록 둔다. 보통, 약물-링커 스톡 용액은 100% DMSO 중에 용해시킨다. 스톡 용액을 티올화 항체에 직접 첨가한다.
접합 반응 혼합물을 부드럽게 교반하면서 2시간 동안 상온에서 인큐베이션시킨다. 그 다음 10-배 과량의 몰의 N-에틸 말레이미드 (DMSO 중의 100 mM 스톡)를 접합 혼합물에 첨가하고 추가 한시간 동안 교반하여 임의의 미반응 티올을 블로킹한다.
그 다음 샘플을 0.2 μ 필터를 통해 여과한다. 상기 물질을 TFF 비바플로우(VivaFlow) 50 사르토리우스(Sartorius) 30 MWCO PES 막을 통해 10 mg/mL 글리신, 20 mg/mL 소르비톨, 5% 아세토니트릴 pH 5.0 (5X TFF 버퍼 교환 부피)로 버퍼 교환하여 임의의 미반응 약물을 제거한다. 최종 제형화는 TFF에 의해 20 mg/mL 소르비톨, 10 mg/mL 글리신, pH 5.0으로 수행한다.
상기 일반적인 기법을 사용하여, 표 2에 나타낸 바와 같이 116의 3가지 ADC를 제조하였다.
본 발명의 항체-약물 접합체의 비제한적인 예
ADC 항체 DAR
I 항-메소텔린 (6A4) 2
II 항-글리피칸 3 (4A6) 1.4
III 항-CD70 (2H5) 1.8
ADC I의 항-메소텔린 항체는 6A4였으며, 이의 상보성 결정 부위(complimentary determining regions, CDRs) 및 다른 특징들이 문헌 [Terrett et al., US 8,268,970 B2 (2012)]에 개시되어 있고, 이의 개시 내용은 참조로서 본원에 포함된다. ADC II의 항-글리피칸 3 항체는 4A6였으며, 이의 CDRs 및 다른 특징들이 문헌 [Terrett et al., US 8,680,247 (2014)]에 개시되어 있고, 이의 개시 내용은 참조로서 본원에 포함된다. ADC III의 항-CD70 항체는 2H5였으며, 이의 CDRs 및 다른 특징들이 문헌 [Terret et al., US 8,124,738 (2012)]에 개시되어 있고, 이의 개시 내용은 참조로서 본원에 포함된다.
실시예 7 - 항체-약물 접합체의 생물학적 활성
다양한 암 세포주에 대한 제조된 ADCs의 시험관내 활성을 측정하기 위한 3H-티미딘 혼합 증식 분석(3H-thymidine incorporation proliferation assay)을 위해 하기 과정을 사용하였다.
세포를 각각 3H 티미딘 분석을 위해 3시간 동안 96-웰 플레이트 내에 1.25 x 104 세포/웰로 접종하였다. 접합체의 일련의 희석물(1:3)을 웰에 첨가하였다. 플레이트를 72시간 동안 인큐베이션되도록 두었다. 플레이트를 전체 인큐베이션 기간의 마지막 24시간 동안 웰 당 1.0 μCi의 3H-티미딘으로 펄스시키고, 수확한 후 탑 카운트 신틸레이션 카운터(Top Count Scintillation Counter) (팩커드 인스트러먼츠, 코네티컷, 메리던) 상에서 기록하였다. 3H-티미딘 혼합의 정도의 감소가 세포 증식의 감소의 척도이다. EC50 값 - 제제가 최대 억제의 50%까지 세포 증식을 억제 또는 감소시키는 농도 - 을 PRISM™ 소프트웨어, 버젼 5.0 (그래프패드 소프트웨어, 미국, 캘리포니아, 라 호이아)을 사용하여 결정하였다.
항-메소텔린 항체의 접합체인 ADC I의 활성을 H226 (폐), N87 (위), 및 OVCAR3 (난소) 암 세포에 대해 테스트하였으며, 이들 모두 비교예 ADC 역할을 하는 ADC II에서 메소텔린을 발현시킨다. 결과를 표 3에 나타낸다. 이들 세포주에 대한 비교예 ADC II의 활성이 두드러지게 더욱 낮았다.
메소텔린을 발현시키는 암 세포에 대한 ADC 활성
암 세포 ADC EC 50 (nM)
H226 I 0.011
H226 III 0.47
N87 I 0.10
N87 II 1.3
OVCAR3 I 0.51
OVCAR3 II 2.1
항-글리피칸 3 항체의 ADC인 ADC II의 활성을, 글리피칸-3을 발현시키는 Hep3B 및 HepG2 간암 세포에 대해 테스트하였다. 또한 ADC I을 비교 목적으로 테스트하였다. 결과를 표 4에 제공한다. ADC II의 효능이 이들 세포주에 대해 비교예 ADC I보다 두드러지게 더욱 컸다.
글리피칸-3을 발현시키는 암 세포에 대한 ADC 활성
암 세포 ADC EC 50 (nM)
Hep3B II 0.0080
Hep3B I 0.50
HepG2 II 0.041
HepG2 I 0.97
항-CD70 항체의 ADC인 ADC III의 활성을, CD70을 발현하는 신장암 세포인 786-O 세포에 대해 테스트하였다. 또한 ADC I을 비교 목적으로 테스트하였다. 결과를 표 5에 제공한다. 또 다시, 비교예 ADC가 특이적인 세포주를 표적하기 위해 설계된 ADC보다 훨씬 더 덜 효과적이었다.
CD70을 발현시키는 암 세포에 대한 ADC 활성
암 세포 ADC EC 50 (nM)
786-O III 0.011
786-O I 0.60
본원에 개시되고 청구된 모든 조성물 및/또는 방법은 본 발명을 고려하여 지나친 실험 없이 만들어지고 실시될 수 있다. 본 발명의 조성물 및 방법이 바람직한 실시양태 면에서 개시되었지만, 본 발명의 개념, 요지 및 범주를 벗어나지 않고 본원에 개시된 조성물 및/또는 방법 및 상기 방법의 단계 또는 단계의 순서에 변형이 적용될 수 있다는 점은 통상의 기술자에게 명백할 것이다. 더욱 구체적으로, 화학적으로 그리고 생리적으로 모두 관련이 있는 특정한 제제는 동일 또는 유사한 결과가 달성되는 한 본원에 개시된 제제를 대체할 수 있다는 점이 명백할 것이다. 통상의 기술자에게 명백한 모든 이러한 유사한 치환 및 변경이 첨부되는 특허청구범위에 의해 정의되는 바와 같은 본 발명의 요지, 범주 및 개념 내에 있는 것으로 간주된다.
[참고문헌]
하기 참고문헌들이, 이들이 본원에 제시된 것들에 대한 예시적 과정 또는 다른 상세 보충을 제공하는 한에는, 참고로서 본원에 특히 포함된다:
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미국특허 제5,801,005호
미국특허 제5,824,311호
미국특허 제5,830,880호
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미국특허 제6,528,481호
미국특허 제6,984,720호
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미국특허 제7,387,776호
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미국특허 제7,671,010호
미국특허 제7,781,565호
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미국특허 제8,507,445호
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미국특허 공개 제2006/0223114호
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미국특허 공개 제2006/0088908호
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미국특허 공개 제2009/0297438호
미국특허 공개 제2010/0034826호
미국특허 공개 제2010/0143368호
미국특허 공개 제2010/0150950호
미국특허 공개 제2010/0092484호
미국특허 공개 제2010/0209432호
미국특허 공개 제2010/0285564호
미국특허 공개 제2010/0317547호
미국특허 공개 제2010/0093024호
미국특허 공개 제2013/0209494호
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Claims (115)

  1. 하기 화학식의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00252
    (I) 또는
    Figure pct00253
    (II)
    상기 식에서:
    Y1는 -O(CH2)mY', -NH(CH2)mY', -S(CH2)mY', 또는 -(CH2)mNR1R2이거나, 하기에 정의된 Z1과 함께 취해지고;
    여기서:
    Y'은 히드록시, 할로, 머캅토, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C≤12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 또는 치환된 알킬아미노(C1-12)이고;
    m은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고;
    R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12); 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-A1, -C(O)O(CH2)nS(O)-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택되고,
    여기서:
    A1은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
    Figure pct00254
    이고,
    여기서:
    A2는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고; 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3가 아니고;
    n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이거나; 또는
    R1 및 R2는 함께 취해져 2가 아민 보호기, 알칸디일(C1-12), 알킬아미노디일(C1-8); 알콕시디일(C1-8); 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이거나; 또는
    Y1은 Z1과 취해지고 알킬아미노디일(C1-8) 치환된 알킬아미노디일(C1-8); -알칸디일(C1-6)-NZ2-알칸디일(C1-6), 또는 -치환된 알칸디일(C1-6)-NZ2-치환된 알칸디일(C1-6),이고,
    여기서:
    Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C6-12), 치환된 아실(C6-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고,
    여기서:
    A3은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
    Figure pct00255
    이고,
    여기서:
    A4는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A4는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고;
    Z1는 부재하거나 수소이거나 상기에 정의된 바와 같은 Y1과 함께 취해지고;
    R3 및 Z2는 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전로부터 각각 독립적으로 선택되고;
    o는 1, 2, 또는 3이고;
    R4는 수소, 알킬(C1-12), 1가 아민 보호기, 또는 치환된 알킬(C1-12)이고;
    R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는
    알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    여기서:
    X1은 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 티올 보호기이고;
    R8은 히드록시, 아미노, 또는 머캅토; 또는 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    R9, R10, R11, 및 R12는 각각 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는
    알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R13으로부터 독립적으로 선택되고;
    여기서:
    X1은 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 티올 보호기이고;
    Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고;
    R13은 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는
    헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    p 및 q는 각각 독립적으로 1 또는 2이고;
    Z3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    단, Y1은 -NHMe 또는 -NHCH2CH2NH2가 아니다.
  2. 제1항에 있어서, 추가로 하기와 같이 정의되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00256
    (III) 또는
    Figure pct00257
    (IV)
    상기 식에서:
    Y1은 -O(CH2)mY', -NH(CH2)mY', -S(CH2)mY' 또는 -CH2NR1R2이고,
    여기서:
    Y'은 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C≤12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 또는 치환된 알킬아미노(C1-12)이고;
    m은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고;
    R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 알케닐(C≤12), 알키닐(C≤12), 아릴(C≤12), 아르알킬(C≤12), 헤테로아릴(C≤12), 헤테로시클로알킬(C≤12), 아실(C≤12), 알콕시(C≤12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전로부터 독립적으로 선택되고;
    R1 및 R2는 함께 취해져 2가 보호기, 알칸디일(1-12), 알콕시디일(C1-8); 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 및 -C(O)O(CH2)nS-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1이고,
    여기서:
    A1은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
    Figure pct00258
    이고, 여기서:
    A2는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고; 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고;
    n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이고;
    R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    R4는 수소, 알킬(C1-12), 1가 아민 보호기, 또는 치환된 알킬(C1-12)이고;
    R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는
    알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고,
    여기서:
    X1은 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 티올 보호기이고;
    R8은 히드록시, 아미노, 또는 머캅토; 또는
    알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    R9, R10, 및 R11은 각각 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는
    알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R12로부터 독립적으로 선택되고;
    여기서:
    X1은 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 티올 보호기이고;
    Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고;
    R12는 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는
    헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    단 Y1은 -NHMe, -NHC(O)C6H4NH2, -NHC(O)CH2NH2, -NHC(O)CH(CH2OH)NH2, -NHC(O)CH(NH2)CH2CH2CH2CH2NH2, 또는 -NHCH2CH2NH2가 아니다.
  3. 제1항에 있어서, 화학식이 하기와 같이 추가로 정되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00259
    (V)
    상기 식에서:
    Y1은 -O(CH2)mY', -NH(CH2)mY', -S(CH2)mY', 또는 -(CH2)mNR1R2이거나, 하기에 기술된 바와 같은 Z1과 함께 취해지고;
    여기서:
    Y'은 히드록시, 할로, 머캅토, 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C≤12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 또는 치환된 알킬아미노(C1-12)이고;
    m은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고;
    R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12); 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-A1, -C(O)O(CH2)nS(O)-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1로부터 독립적으로 선택되고,
    여기서:
    A1은 아릴(C6-12) 또는 치환된 아릴(C6-12)이고;
    n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이고;
    R1 및 R2는 함께 취해져 2가 보호기, 알칸디일(C≤12), 알킬아미노디일(C≤8); 알콕시디일(C≤8); 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이거나; 또는
    Y1은 Z1과 취해지고 알킬아미노디일(C1-8) 치환된 알킬아미노디일(C1-8); 또는 -알칸디일(C1-6)-NZ2-알칸디일(C1-6)이고,
    여기서:
    Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C6-12), 치환된 아실(C6-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고,
    여기서:
    A3은 아릴(C6-12) 또는 치환된 아릴(C6-12)이고;
    Z1은 부재하거나 수소이거나 상기에 정의된 바와 같은 Y1과 함께 취해지고;
    R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    o는 1, 2, 또는 3이고;
    R4는 수소, 알킬(C1-12), 1가 아민 보호기, 또는 치횐된 알킬(C1-12)이고;
    R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는
    알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    여기서:
    X1은 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 티올 보호기이고;
    R8은 히드록시, 아미노, 또는 머캅토; 또는 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이다.
  4. 제1항에 있어서, 화학식이 하기와 같이 추가로 정의되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00260
    (VI)
    상기 식에서:
    R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12); 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-A1, -C(O)O(CH2)nS(O)-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1로부터 독립적으로 선택되고,
    여기서:
    A1은 아릴(C6-12) 또는 치환된 아릴(C6-12)이고;
    n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이고;
    R3은 수소, 히드록시, 할로, 또는 알콕시(C1-12) 또는 치환된 알콕시(C1-12)이고;
    o는 1, 2, 또는 3이고;
    R4는 수소, 1가 아민 보호기, 알킬(C1-12), 또는 치환된 알킬(C1-12)이고;
    R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는
    알킬(C1-12) 또는 치환된 알킬(C1-12)이고;
    여기서:
    X1은 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 티올 보호기이고;
    R8은 히드록시, 아미노, 또는 머캅토이다.
  5. 제1항에 있어서, 화학식이 하기와 같이 추가로 정의되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00261
    (VII)
    상기 식에서:
    R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 아릴(6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-C6H5, -C(O)O(CH2)nS(O)-C6H5, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2C6H5, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 R1 및 R2 가 함께 취해져 2가 아민 보호기를 형성하고, 또는
    알킬(C1-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 아실(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    R3은 수소, 히드록시, 할로, 또는 알콕시(C1-12) 또는 치환된 알콕시(C1-12)이고;
    o는 1, 2, 또는 3이다.
  6. 제1항에 있어서, 화학식이 하기와 같이 추가로 정의되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00262
    (VIII)
    상기 식에서:
    R4는 수소, 알킬(C1-12), 1가 아민 보호기, 또는 치환된 알킬(C1-12)이고;
    R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는
    알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    여기서:
    X1은 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 티올 보호기이고;
    R8은 히드록시, 아미노, 또는 머캅토; 또는
    알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    R9, R10, R11, 및 R12는 각각 수소, 히드록시, 아미노, -NX2X3, 또는
    헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C2-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R13으로부터 독립적으로 선택되고;
    여기서:
    X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이거나; 또는
    R13은 히드록시, 아미노, 또는 -NX2X3, 또는 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    p 및 q는 각각 독립적으로 1 또는 2이다.
  7. 제1항에 있어서, 화학식이 하기와 같이 추가로 정의되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00263
    (IX)
    상기 식에서:
    R9, R10, R11, 및 R12는 각각 수소, 히드록시, 아미노, -NX2X3, 또는
    알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R13로부터 독립적으로 선택되고;
    여기서:
    X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고;
    R13은 히드록시, 아미노, 또는 -NX2X3, 또는
    알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    p 및 q는 각각 독립적으로 1 또는 2이다.
  8. 제1항에 있어서, 화합물이 하기와 같이 추가로 정의되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00264
    (X)
    상기 식에서:
    Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, -C(O)O(CH2)nS(O)-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고,
    여기서:
    A3은 아릴(C6-12) 또는 치환된 아릴(C6-12)이고;
    R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는
    알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    o는 1 또는 2이고;
    R4는 수소, 1가 아민 보호기, 알킬(C1-12), 또는 치환된 알킬(C1-12)이고;
    R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는
    알킬(C1-12) 또는 치환된 알킬(C1-12)이고;
    여기서:
    X1은 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 티올 보호기이고;
    R8은 히드록시, 아미노, 또는 머캅토이다.
  9. 제1항에 있어서, 화합물이 하기와 같이 추가로 정의되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00265
    (XI)
    상기 식에서:
    Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C6-12), 치환된 아실(C6-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, -C(O)O(CH2)nS(O)-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고,
    여기서:
    A3은 아릴(C6-12) 또는 치환된 아릴(C6-12)이고;
    R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    o는 1 또는 2이다.
  10. 제1항에 있어서, 화학식이 하기와 같이 추가로 정의되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00266
    (VII)
    상기 식에서:
    X1은 히드록시 보호기이고;
    R1 및 R2는 각각 수소, 알킬(C1-12), 또는 치환된 알킬(C1-12)로부터 독립적으로 선택되고;
    R3은 수소, 알콕시(C1-12), 또는 치환된 알콕시(C1-12)이고;
    o는 2이다.
  11. 제1항에 있어서, 화학식이 화학식 I인 화합물.
  12. 제1항에 있어서, 화학식이 화학식 II인 화합물.
  13. 제1항에 있어서, Y1이 Z1과 함께 취해져 -CH2CH2-NZ2-CH2CH2-인 화합물.
  14. 제13항에 있어서, Z2가 수소인 화합물.
  15. 제13항에 있어서, Z2가 2-(트리메틸실릴)에톡시카르보닐 또는 t-부톡시카르보닐인 화합물.
  16. 제13항에 있어서, Z2가 -C(O)O(CH2)nS-C6H5인 화합물.
  17. 제13항에 있어서, Z2가 -C(O)O(CH2)nS(O)2-C6H5인 화합물.
  18. 제1항에 있어서, Z1이 수소인 화합물.
  19. 제1항에 있어서, Y1이 -O(CH2)mY', -S(CH2)mY', 또는 -(CH2)mNR1R2인 화합물.
  20. 제1항에 있어서, Y1이 -(CH2)mNR1R2인 화합물.
  21. 제1항에 있어서, m이 1, 2, 또는 3인 화합물.
  22. 제1항에 있어서, R1 또는 R2가 수소인 화합물.
  23. 제1항에 있어서, R1 또는 R2가 알킬(C1-12) 또는 치환된 알킬(C1-12)인 화합물.
  24. 제1항에 있어서, R1 또는 R2가 1가 아민 보호기인 화합물.
  25. 제1항에 있어서, R1 또는 R2가 -C(O)O(CH2)2SC6H5 또는 -C(O)O(CH2)2S(O)2C6H5인 화합물.
  26. 제1항에 있어서, R1이 R2와 함께 취해져 2가 아민 보호기인 화합물.
  27. 제1항에 있어서, R3이 수소인 화합물.
  28. 제1항에 있어서, R3이 알콕시(C1-12)인 화합물.
  29. 제1항에 있어서, R4가 수소인 화합물.
  30. 제1항에 있어서, R4가 1가 아민 보호기인 화합물.
  31. 제1항에 있어서, R5가 알킬(C1-12)인 화합물.
  32. 제1항에 있어서, R6, R7, 또는 R8이 히드록시인 화합물.
  33. 제1항에 있어서, R9 또는 R10이 아미노인 화합물.
  34. 제1항에 있어서, R9 또는 R10이 알킬(C1-12)인 화합물.
  35. 제1항에 있어서, R9 또는 R10이 Y2-R12인 화합물.
  36. 제35항에 있어서, Y2가 알칸디일(C1-6)인 화합물.
  37. 제35항에 있어서, R12가 아미노인 화합물.
  38. 제35항에 있어서, R12가 -NX2X3인 화합물.
  39. 제38항에 있어서, X2 및 X3이 함께 취해져 2가 아민 보호기를 형성하는 화합물.
  40. 제38항에 있어서, X2가 수소인 화합물.
  41. 제38항에 있어서, X3이 1가 아민 보호기인 화합물.
  42. 제1항에 있어서, R11이 수소인 화합물.
  43. 제1항에 있어서, 탄소 원자 17이 R 배열인 화합물.
  44. 제1항에 있어서, 탄소 원자 17이 S 배열인 화합물.
  45. 제1항에 있어서, 화합물이 하기와 같이 추가로 정의되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00267
  46. 제1항에 있어서, 화합물이 하기와 같이 추가로 정의되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00268
    ,
    Figure pct00269
    ,
    Figure pct00270
    ,
    Figure pct00271
    ,
    Figure pct00272
    ,
    Figure pct00273
    ,
    Figure pct00274
    ,
    Figure pct00275
    ,
    Figure pct00276
    ,
    Figure pct00277
    ,
    Figure pct00278
    ,
    Figure pct00279
    ,
    Figure pct00280
    ,
    Figure pct00281
    ,
    Figure pct00282
    ,
    Figure pct00283
    ,
    Figure pct00284
    ,
    Figure pct00285
    ,
    Figure pct00286
    ,
    Figure pct00287
    .
  47. 제1항에 있어서, 하기와 같이 추가로 정의되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    Figure pct00288
    ,
    Figure pct00289
    ,
    Figure pct00290
    ,
    Figure pct00291
    ,
    Figure pct00292
    ,
    Figure pct00293
    ,
    Figure pct00294
    ,
    Figure pct00295
    ,
    Figure pct00296
    ,
    Figure pct00297
    ,
    Figure pct00298
    ,
    Figure pct00299
    ,
    Figure pct00300
    ,
    Figure pct00301
    ,
    Figure pct00302
    ,
    Figure pct00303
    ,
    Figure pct00304
    ,
    Figure pct00305
    ,
    Figure pct00306
    ,
    Figure pct00307
    ,
    Figure pct00308
    ,
    Figure pct00309
    ,
    Figure pct00310
    ,
    Figure pct00311
    ,
    Figure pct00312
    ,
    Figure pct00313
    ,
    Figure pct00314
    ,
    Figure pct00315
    ,
    Figure pct00316
    ,
    Figure pct00317
    ,
    Figure pct00318
    ,
    Figure pct00319
    ,
    Figure pct00320
    , 및
    Figure pct00321
  48. 제1항 내지 제47항의 화합물 및 부형제를 포함하는 약학적 조성물.
  49. 제48항에 있어서, 조성물이 경구, 지방내, 동맥내, 관절내, 두개내, 진피내, 병변내, 근육내, 비내, 안구내, 심막내, 복강내, 흉강내, 전립샘내, 직장내, 경막내, 기관내, 종양내, 제대내, 질내, 정맥내, 폐포내, 유리체내, 리포좀, 국소 (local), 점막, 비경구, 직장, 결막하, 피하, 설하, 국부 (topical), 협측 (transbuccal), 경피, 질, 카테터에 의한, 세척에 의한, 연속 주입에 의한, 주입에 의한, 흡입에 의한, 주사에 의한, 국소 전달에 의한, 또는 국소화 관류에 의한 투여를 위해 제형화되는 약학적 조성물.
  50. 하기 화학식의 화합물을 제조하는 방법으로서:
    Figure pct00322
    (V) 또는
    Figure pct00323
    (VIII)
    (상기 식에서:
    Y1은 -O(CH2)mY', -NH(CH2)mY', -S(CH2)mY', 또는 -(CH2)mNR1R2이거나, 하기에 기술된 바와 같은 Z1과 함께 취해지고;
    여기서:
    Y'은 히드록시, 할로, 머캅토, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 또는 치환된 알킬아미노(C1-12)이고;
    m은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고;
    R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12); 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-A1, -C(O)O(CH2)nS(O)-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1로부터 독립적으로 선택되고,
    여기서:
    A1은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
    Figure pct00324
    이고,
    여기서:
    A2는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고;
    n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이거나; 또는
    R1 및 R2는 함께 취해져 2가 아민 보호기, 알칸디일(C1-12), 알킬아미노디일(C1-8); 알콕시디일(C1-8); 또는 이들 기의 어느 하나의 치환된 버전이거나; 또는
    Y1는 Z1과 취해져 알킬아미노디일(C1-8) 치환된 알킬아미노디일(C1-8); -알칸디일(C1-6)-NZ2-알칸디일(C1-6), 또는 -치환된 알칸디일(C1-6)-NZ2-치환된 알칸디일(C1-6)이고,
    여기서:
    Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C6-12), 치환된 아실(C6-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고,
    여기서:
    A3은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
    Figure pct00325
    이고,
    여기서:
    A4는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A4는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고;
    Z1은 부재하거나 수소이거나 상기에 정의된 바와 같은 Y1과 함께 취해지고;
    R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    o는 1, 2, 또는 3이고;
    R4는 수소, 알킬(C1-12), 1가 아민 보호기, 또는 치환된 알킬(C1-12)이고;
    R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는
    알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    여기서:
    X1은 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 티올 보호기이고;
    R8은 히드록시, 아미노, 또는 머캅토; 또는
    알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    R9, R10, 및 R11은 각각 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는
    알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R13으로부터 독립적으로 선택되고;
    여기서:
    X1은 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 티올 보호기이고;
    Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고;
    R13은 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는
    헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    p 및 q는 각각 독립적으로 1 또는 2이다)
    상기 방법은 반응을 야기하기에 충분한 조건에서 용매 중의 비-친핵성 강염기의 존재하에서
    하기 화학식의 화합물과:
    Figure pct00326
    (XII)
    (상기 식에서:
    R4는 수소, 알킬(C1-12), 1가 아민 보호기, 또는 치환된 알킬(C1-12)이고;
    R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는
    알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    여기서:
    X1은 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 티올 보호기이고;
    R14는 -O-, -S-, 또는 -NR15-이고;
    여기서:
    R15는 수소, 알킬(C1-6), 또는 치환된 알킬(C1-6)이고;
    R15는 시아노, 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬티오(C1-12), 치환된 알킬티오(C1-12), 알킬설포닐(C1-12), 치환된 알킬설포닐(C1-12), 아릴설포닐(C1-12), 치환된 아릴설포닐(C1-12) 알킬설포닐옥시(C1-12), 치환된 알킬설포닐옥시(C1-12), 아릴설포닐옥시(C1-12), 또는 치환된 아릴설포닐옥시(C1-12)이다)
    하기 화학식의 화합물을 혼합하는 것을 포함하는 반응을 수행함에 의한 것인 방법:
    Figure pct00327
    (XIII) 또는
    Figure pct00328
    (XIV)
    (상기 식에서:
    Y1은 -O(CH2)mY', -NH(CH2)mY', -S(CH2)mY', 또는 -(CH2)mNR1R2이거나, 하기에 기술된 바와 같은 Z1과 취해지고;
    여기서:
    Y'은 히드록시, 할로, 머캅토, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 또는 치환된 알킬아미노(C1-12)이고;
    m은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고;
    R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12); 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-A1, -C(O)O(CH2)nS(O)-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1로부터 독립적으로 선택되고,
    여기서:
    A1은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
    Figure pct00329
    이고,
    여기서:
    A2는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고;
    n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이거나; 또는
    R1 및 R2는 함께 취해져 2가 아민 보호기, 알칸디일(C1-12), 알킬아미노디일(C1-8); 알콕시디일(C1-8); 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이거나; 또는
    Y1은 Z1과 취해져 알킬아미노디일(C1-8) 치환된 알킬아미노디일(C1-8); -알칸디일(C1-6)-NZ2-알칸디일(C1-6), 또는 -치환된 알칸디일(C1-6)-NZ2-치환된 알칸디일(C1-6)이고,
    여기서:
    Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고,
    여기서:
    A3은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
    Figure pct00330
    이고,
    여기서:
    A4는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A4는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고;
    Z1은 부재하거나 수소이거나 상기에 정의된 바와 같은 Y1과 취해지고;
    R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    o는 1 또는 2이고;
    R9, R10, R11, 및 R12는 각각 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는
    알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R13으로부터 독립적으로 선택되고;
    여기서:
    X1은 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해져 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 티올 보호기이고;
    Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고;
    R13은 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는
    헤테로아릴(C6-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    p 및 q는 각각 독립적으로 1 또는 2이다).
  51. 제50항에 있어서, Y1이 -NH2, -NHMe, 또는 -NHCH2CH2NH2이 아닌 방법.
  52. 제50항에 있어서, 염기가 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드, 소듐 비스(트리메틸실릴)아미드, 포타슘 비스(트리메틸실릴)아미드, 리튬 디이소프로필 아미드, 소듐 디이소프로필 아미드, 포타슘 디이소프로필 아미드, 리튬 테트라메틸피페리딘, 리튬 t-부톡사이드, 소듐 t-부톡사이드, 또는 포타슘 t-부톡사이드, 수소화리튬, 수소화나트륨, 또는 수소화칼륨인 방법.
  53. 제52항에 있어서, 염기가 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드인 방법.
  54. 제50항에 있어서, 용매가 테트라히드로퓨란인 방법.
  55. 제50항에 있어서, 화학식 III의 화합물을 화학식 IV 또는 화학식 V의 화합물과 접촉시키기 전에 화학식 IV 또는 화학식 V의 화합물을 염기와 혼합하는 것을 추가로 포함하는 방법.
  56. 제50항에 있어서, 화학식 III의 화합물이 THF 중에 용해되고 캐뉼라를 통해 첨가되는 방법.
  57. 제50항에 있어서, 화학식 I 또는 화학식 II의 화합물을 유기용매에 용해시키고 하기 화학식의 화합물과:
    Figure pct00331
    (V) 또는
    Figure pct00332
    (VIII)
    (상기 식에서:
    Y1은 -O(CH2)mY', -NH(CH2)mY', -S(CH2)mY', 또는 -(CH2)mNR1R2이거나, 하기에 기술된 바와 같은 Z1과 취해지고;
    여기서:
    Y'은 히드록시, 할로, 머캅토, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 또는 치환된 알킬아미노(C1-12)이고;
    m은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고;
    R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12); 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-A1, -C(O)O(CH2)nS(O)-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1,로부터 독립적으로 선택되고,
    여기서:
    A1은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
    Figure pct00333
    이고,
    여기서:
    A2는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고;
    n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이거나; 또는
    R1 및 R2는 함께 취해져 2가 아민 보호기, 알칸디일(C1-12), 알킬아미노디일(C1-8); 알콕시디일(C1-8); 또는 이들 기의 어느 하나의 치환된 버전이거나; 또는
    Y1은 Z1과 취해져 알킬아미노디일(C1-8) 치환된 알킬아미노디일(C1-8); -알칸디일(C1-6)-NZ2-알칸디일(C1-6), 또는 -치환된 알칸디일(C1-6)-NZ2-치환된 알칸디일(C1-6)이고,
    여기서:
    Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고,
    여기서:
    A3은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
    Figure pct00334
    이고,
    여기서:
    A4는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고;
    Z1은 부재하거나 수소이거나 상기에 정의된 바와 같은 Y1과 함께 취해지고;
    R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는
    알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    o는 1 또는 2이고;
    R4는 수소, 알킬(C1-12), 1가 아민 보호기, 또는 치환된 알킬(C1-12)이고;
    R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는
    알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    여기서:
    X1은 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 티올 보호기이고;
    R8는 히드록시, 아미노, 또는 머캅토; 또는
    알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    R9, R10, R11, 및 R12는 각각 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는
    알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2-R13으로부터 독립적으로 선택되고;
    여기서:
    X1은 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해져 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 티올 보호기이고;
    Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고;
    R13은 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는
    헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    p 및 q는 각각 독립적으로 1 또는 2이다)
    하기 화학식의 화합물을 형성하기 위한 반응을 야기하는데 충분한 조건에서 염기의 존재하에서 팔라듐 염과 반응시키는 것을 추가로 포함하는 방법:
    Figure pct00335
    (XV) 또는
    Figure pct00336
    (XVI)
    (상기 식에서:
    Y1은 -O(CH2)mY', -NH(CH2)mY', -S(CH2)mY', 또는 -(CH2)mNR1R2이거나, 하기에 기술된 바와 같은 Z1과 함께 취해지고;
    여기서:
    Y'은 히드록시, 할로, 머캅토, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 또는 치환된 알킬아미노(C1-12)이고;
    m은 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6이고;
    R1 및 R2는 각각 수소, 히드록시, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12); 1가 아민 보호기, -C(O)O(CH2)nS-A1, -C(O)O(CH2)nS(O)-A1, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A1로부터 독립적으로 선택되고,
    여기서:
    A1은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
    Figure pct00337
    이고,
    여기서:
    A2는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고;
    n은 1, 2, 3, 4, 또는 5이거나; 또는
    R1 및 R2는 함께 취해져 2가 아민 보호기, 알칸디일(C1-12), 알킬아미노디일(C1-8); 알콕시디일(C1-8); 또는 이들 기의 어느 하나의 치환된 버전이거나; 또는
    Y1는 Z1과 취해져 알킬아미노디일(C1-8) 치환된 알킬아미노디일(C1-8); -알칸디일(C1-6)-NZ2-알칸디일(C1-6), 또는 -치환된 알칸디일(C1-6)-NZ2-치환된 알칸디일(C1-6)이고,
    여기서:
    Z2는 수소, 아민 보호기, 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), -C(O)O(CH2)nS-A3, 또는 -C(O)O(CH2)nS(O)2-A3이고,
    여기서:
    A3은 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 또는
    Figure pct00338
    이고,
    여기서:
    A4는 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 아실옥시(C1-12), 치환된 아실옥시(C1-12), 알콕시(C1-12), 치환된 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 치환된 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 치환된 디알킬아미노(C2-12)이고, 여기서 A2는 -CO2H, -CO2CH3, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, 및 -OC(O)CH3이 아니고;
    Z1은 부재하거나 수소이거나 상기에 정의된 바와 같은 Y1과 함께 취해지고;
    R3은 수소, 히드록시, 할로, 아미노, 시아노, 니트로, 포스페이트, 또는 머캅토, 또는
    알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    o는 1 또는 2이고;
    R5, R6, 및 R7은 각각 독립적으로 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4; 또는
    알킬(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    여기서:
    X1은 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 티올 보호기이고;
    R8은 히드록시, 아미노, 또는 머캅토; 또는
    알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    R9, R10, R11, 및 R12는 각각 수소, 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는
    알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는 Y2R13으로부터 독립적으로 선택되고;
    여기서:
    X1은 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 히드록시 보호기이고;
    X2 및 X3은 수소, 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 1가 아민 보호기로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 X2 및 X3이 함께 취해지는 경우 2가 아민 보호기를 형성하고;
    X4는 알킬(C1-12), 치환된 알킬(C1-12), 알케닐(C2-12), 치환된 알케닐(C2-12), 알키닐(C2-12), 치환된 알키닐(C2-12), 아릴(C6-12), 치환된 아릴(C6-12), 아르알킬(C7-12), 치환된 아르알킬(C7-12), 헤테로아릴(C1-12), 치환된 헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 치환된 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 치환된 아실(C1-12), 또는 티올 보호기이고;
    Y2는 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고;
    R13은 히드록시, 아미노, 머캅토, -OX1, -NX2X3, 또는 -SX4, 또는
    헤테로아릴(C1-12), 헤테로시클로알킬(C2-12), 아실(C1-12), 알콕시(C1-12), 아실옥시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 알킬티오(C1-12), 아미도(C1-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전이고;
    p 및 q는 각각 독립적으로 1 또는 2이다).
  58. 제57항에 있어서, 팔라듐 염이 리간드 또는 기타 금속 착체 또는 염의 존재하에서 팔라듐 포스핀 착체 또는 팔라듐 염을 추가로 포함하는 방법.
  59. 제57항에 있어서, 팔라듐 염이 Pd(PPh3)4인 방법.
  60. 제57항에 있어, 염기가 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, 에틸렌디아민, 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데스-7-엔, 또는 모르폴린인 방법.
  61. 제60항에 있어서, 염기가 모르폴린인 방법.
  62. 제57항에 있어서, 용매가 테트라히드로퓨란인 방법.
  63. 제50항에 있어서, 하나 이상의 보호기를 제거하는 것을 추가로 포함하는 방법.
  64. 하기 화학식의 접합체:
    (A5-L)r-A6 (XVII)
    상기 식에서:
    A5는 제1항의 화합물이고;
    L은 링커이고;
    r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12이고;
    A6은 세포 표적화 모이어티이다.
  65. 제64항에 있어서, L이 세포내 효소에 의해 절단가능한 폴리펩티드를 포함하는 접합체.
  66. 제65항에 있어서, 효소가 카텝신 B인 접합체.
  67. 제64항에 있어서, L이 자기-희생기(self-immolating group)를 포함하는 접합체.
  68. 제64항에 있어서, L이 하기인 접합체:
    Figure pct00339
    .
  69. 제64항에 있어서, A6이 종양 관련 항원에 대한 항체인 접합체.
  70. 제69항에 있어서, 항원이 메소텔린, 글리피칸-3, 또는 CD70인 접합체.
  71. 제64항에 있어서, A5가 화학식 I에 따르는 화합물인 접합체.
  72. 제64항에 있어서, 하기 화학식의 구조물을 추가로 포함하는 접합체:
    Figure pct00340

    상기 식에서:
    A6은 항체이고 r은 1, 2, 3, 또는 4이다.
  73. 제72항에 있어서, 항체가 항-메소텔린, 항-글리피칸-3, 또는 항-CD70 항체인 접합체.
  74. 제64항 내지 제73항 중 어느 한 항에 따른 접합체 및 부형제를 포함하는 약학적 조성물.
  75. 제74항에 있어서, 화합물이 경구, 지방내, 동맥내, 관절내, 두개내, 진피내, 병변내, 근육내, 비내, 안구내, 심막내, 복강내, 흉강내, 전립샘내, 직장내, 경막내, 기관내, 종양내, 제대내, 질내, 정맥내, 폐포내, 유리체내, 리포좀, 국소(local), 점막, 비경구, 직장, 결막하, 피하, 설하, 국부 (topical), 협측(transbuccal), 경피, 질, 카테터에 의한, 세척에 의한, 연속 주입에 의한, 주입에 의한, 흡입에 의한, 주사에 의한, 국소 전달에 의한, 또는 국소화 관류에 의한 투여를 위해 제형화되는 약학적 조성물.
  76. 제1항 내지 제49항중 어느 한 항의 화합물 또는 제64항 내지 제75항중 어느 한 항의 조성물의 약학적 유효량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
  77. 제76항에 있어서, 질환 또는 장애가 암인 방법.
  78. 제77항에 있어서, 암이 폐암, 위암, 난소암, 간암, 신장암, 또는 유방암인 방법.
  79. 제77항에 있어서, 암이 하나 이상의 종양 마커를 나타내는 방법.
  80. 제79항에 있어서, 종양 마커가 메소텔린, 글리피칸-3, 또는 CD70인 방법.
  81. 제76항에 있어서, 제1항 내지 제49항중 어느 한 항의 화합물을 투여하는 것을 포함하는 방법.
  82. 제76항에 있어서, 방법이 제64항 내지 제75항중 어느 한 항의 화합물을 투여하는 것을 포함하는 방법.
  83. 제76항에 있어서, 제2 치료제를 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
  84. 제83항에 있어서, 제2 치료제가 제2 화학요법제, 수술, 방사선요법, 유전자요법, 또는 면역요법인 방법.
  85. 제76항에 있어서, 질환 또는 장애가 세균 감염인 방법.
  86. 제85항에 있어서, 세균 감염이 스타필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 대장균(Escherichia coli), 또는 버크홀데리아 세파시아(Burkholderia cepacia)의 감염인 방법.
  87. 하기 화학식의 화합물을 제조하는 방법으로서:
    Figure pct00341
    (XVIII)
    (상기 식에서:
    X1, X2, X3은 수소 또는 히드록시 보호기이고;
    X4 는 수소 또는 아미노 보호기이고;
    R1 및 R2는 각각 독립적으로 부재하거나 수소이거나
    R1 및 R2는 함께 취해져 알킬아미노디일(C1-12), 치환된 알킬아미노디일(C1-12); 알켄디일(C2-12), 또는 치환된 알켄디일(C2-12)이고;
    R3은 수소, 아미노, 카르복시, 시아노, 할로, 히드록시, 또는
    알킬(C1-12), 아실(C1-12), 아미도(C1-12), 알콕시(C1-12), 알킬아미노(C1-12), 디알킬아미노(C2-12), 또는 이들 기 중 어느 하나의 치환된 버전; 또는
    -Y1-A1이고;
    여기서:
    Y1은 알칸디일(C1-8) 또는 치환된 알칸디일(C1-8)이고;
    A1은 링커이고, 여기서 링커는 하기 화학식을 가지며:
    Figure pct00342

    상기 식에서:
    R5는 수소, 알킬(C1-6), 또는 치환된 알킬(C1-6)이고;
    R6은 -C(O)-Y3-A3이고, 여기서:
    Y3은 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고;
    A3은 티올 반응기이고;
    Y2는 -C(O), -C(O)-알칸디일(C1-12); 치환된 -C(O)-알칸디일(C1-12), 또는 자기 희생기이고;
    A2는 공유 결합, 아미노산 잔기, 또는 폴리펩티드이고;
    o는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8이고;
    n은 1, 2, 3, 또는 4이고;
    R4는 알킬(C1-12) 또는 치환된 알킬(C1-12)이다);
    하기 단계를 포함하는 방법:
    a) 하기 화학식의 화합물을:
    Figure pct00343
    (XIX)
    (상기 식에서:
    R1, R2, R3, R4, X1, X2, X3, 및 X4는 상기에 정의된 바와 같고;
    n은 0, 1, 2, 또는 3이고;
    R3'은 -Y1-A1이고; 여기서:
    Y1은 알칸디일(C1-8) 또는 치환된 알칸디일(C1-8)이고;
    A1은 -NPhth이다);
    하기 화학식의 화합물을 형성하기 위한 반응을 야기하기에 충분한 조건으로 용매 중의 물과 함께 알킬아민(C1-12), 디알킬아민(C1-18), 또는 이들 기의 어느 하나의 치환된 버전과 반응시키는 단계:
    Figure pct00344
    (XX)
    (상기 식에서:
    R1, R2, R3, R4, n, X1, X2, X3, 및 X4는 상기에 정의된 바와 같고;
    R3'은 -Y1-NH2이고; 여기서:
    Y1은 알칸디일(C1-8) 또는 치환된 알칸디일(C1-8)이다);
    b) 화학식 XX의 화합물을 하기 화학식의 링커와:
    Figure pct00345
    (XXI)
    (상기 식에서:
    R5 및 R6은 수소, 알킬(C1-6), 치환된 알킬(C1-6), 또는 아민 보호기이고;
    Y2는 -C(O)OH, HOC(O)-알칸디일(C1-12); 치환된 HOC(O)-알칸디일(C1-12), 자기 희생기, 또는 활성화된 자기 희생기이고;
    A2는 공유 결합, 아미노산 잔기, 또는 폴리펩티드이고;
    o는 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8이다.);
    하기 화학식의 화합물을 형성하기 위한 반응을 야기하기에 충분한 조건으로 용매 중의 염기와 반응시키는 단계:
    Figure pct00346
    (XXII)
    (상기 식에서:
    R1, R2, R3, R4, X1, X2, X3, X4, n, o, Y1, Y2, A1, A2, 및 R5은 상기에 정의된 바와 같다);
    c) 화학식 XXII의 화합물 상의 하나 이상의 관능기를 탈보호하는 단계로, 하기 화학식의 화합물을 형성하기 위한 반응을 야기하기에 충분한 조건으로 보호기를 제거하는 시약과 상기 화합물을 반응시키는 것을 포함하는 단계:
    Figure pct00347
    (XXIII)
    (상기 식에서:
    R1, R2, R3, R4, X1, X2, X3, X4, n, o, Y1, Y2, A1, 및 A2는 상기에 정의된 바와 같다);
    d) 화학식 XVIII의 화합물을 형성하기 위한 반응을 야기하기에 충분한 조건으로 용매 중의 염기 존재하에서 화학식 XXIII의 화합물을 하기 화학식의 화합물과 반응시키는 단계:
    Figure pct00348
    (XXIV)
    (상기 식에서:
    X5은 수소 또는 활성화제이고;
    Y3은 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고;
    A3은 티올 반응기이다).
  88. 제87항에 있어서, 화학식의 화합물이 하기와 같이 추가로 정의되는 방법:
    Figure pct00349
    (XXV)
    상기 식에서:
    X2 및 X3은 수소 또는 히드록시 보호기이고;
    X4는 수소 또는 아미노 보호기이고;
    R1 및 R2는 각가 독립적으로 부재하거나 수소이거나
    R1 및 R2는 함께 취해져 알킬아미노디일(C1-8); 치환된 알킬아미노디일(C1-8); 알켄디일(C2-8), 또는 치환된 알켄디일(C2-8)이고;
    R3은 수소, 아미노, 카르복시, 시아노, 할로, 히드록시, 또는 알콕시(C1-12) 또는 치환된 알콕시(C1-12)이거나; 또는
    Y2는 -C(O), -C(O)-알칸디일(C1-12), 치환된 -C(O)-알칸디일(C≤12), 또는 자기 희생기이고;
    A2는 공유 결합, 아미노산 잔기, 또는 폴리펩티드이고;
    o는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8이고;
    n은 1, 2, 또는 3이고;
    Y3은 공유 결합, 알칸디일(C1-12), 또는 치환된 알칸디일(C1-12)임.
  89. 제88항에 있어서, 화학식 XXV의 화합물이 하기와 같이 추가로 정의되는 방법:
    Figure pct00350
    (XXVI)
    상기 식에서:
    X2 및 X3은 수소 또는 히드록시 보호기이고;
    X4는 수소 또는 아미노 보호기이고;
    R1 및 R2는 각각 독립적으로 부재하거나 수소이거나
    R1 및 R2는 함께 취해져 알킬아미노디일(C1-8); 치환된 알킬아미노디일(C1-8); 알켄디일(C2-8), 또는 치환된 알켄디일(C2-8)이고;
    R3은 수소, 아미노, 카르복시, 시아노, 할로, 히드록시, 또는 알콕시(C1-12) 또는 치환된 알콕시(C1-12)이고;
    n은 1, 2, 또는 3이다.
  90. 제87항에 있어서, 화학식 XIX의 화합물이 하기와 같이 추가로 정의되는 방법:
    Figure pct00351
    (XXVII)
    상기 식에서:
    R1, R2, R3, n, X2, X3, 및 X4는 상기에 정의된 바와 같다.
  91. 제87항에 있어서, 화학식 XXI의 화합물이 하기와 같이 추가로 정의되는 방법:
    Figure pct00352
    (XXVIII)
    상기 식에서:
    R5는 아민 보호기이고;
    A2는 공유 결합, 아미노산 잔기, 또는 폴리펩티드이고;
    o는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8이다.
  92. 제87항에 있어서, 화학식 XXIV의 화합물이 하기와 같이 추가로 정의되는 방법:
    Figure pct00353
    (XXIX)
    상기 식에서:
    X5는 수소 또는 활성화제이고;
    Y3은 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이다.
  93. 제87항에 있어서, 화학식 XXIV의 화합물이 하기와 같이 추가로 정의되는 방법:
    Figure pct00354
    (XXX)
    상기 식에서:
    Y3은 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이다.
  94. 제87항에 있어서, R1이 수소인 방법.
  95. 제87항에 있어서, R1이 알콕시(C1-12)인 방법.
  96. 제96항에 있어서, R1이 메톡시인 방법.
  97. 제87항에 있어서, R1 및 R2가 함께 취해져 알켄디일(C2-12) 또는 치환된 알켄디일(C2-12)인 방법.
  98. 제97항에 있어서, 화학식이 하기와 같이 추가로 정의되는 방법:
    Figure pct00355
    (XXXI)
    상기 식에서: R3, R4, n, X1, X2, X3, 및 X4는 상기에 정의된 바와 같다.
  99. 제87항에 있어서, R1 및 R2가 함께 취해져 알킬아미노디일(C1-12) 또는 치환된 알킬아미노디일(C1-12)인 방법.
  100. 제99항에 있어서, 화학식이 하기와 같이 추가로 정의되는 방법:
    Figure pct00356
    (XXXII)
    상기 식에서: R3, R4, n, X1, X2, X3, 및 X4는 상기에 정의된 바와 같고;
    R7은 수소 또는 아미노 보호기이다.
  101. 제87항에 있어서, R3이 -Y1-A1이고; 여기서:
    Y1이 알칸디일(C1-8) 또는 치환된 알칸디일(C1-8)이고;
    A1이 링커이고 여기서 링커가 하기 화학식을 가지며:
    Figure pct00357

    상기 식에서:
    R5는 수소, 알킬(C1-6), 또는 치환된 알킬(C1-6)이고;
    R6은 -C(O)-Y3-A3이고, 여기서:
    Y3은 알칸디일(C1-12) 또는 치환된 알칸디일(C1-12)이고;
    A3은 티올 반응기이고;
    Y2는 -C(O), -C(O)-알칸디일(C1-12), 치환된 -C(O)-알칸디일(C1-12), 또는 자기 희생기이고;
    A2는 공유 결합, 아미노산 잔기, 또는 폴리펩티드이고;
    o는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8이다.
  102. 제87항에 있어서, R3이 하기인 방법:
    Figure pct00358
    (XXXIII)
    상기 식에서: Y2, A2, 및 Y3은 상기에 정의된 바와 같다.
  103. 제102항에 있어서, A2가 -HN-Val-Cit-C(O)O-인 방법.
  104. 제102항 내지 제103항 중 어느 한 항에 있어서, Y2가 자기-희생기인 방법.
  105. 제104항에 있어서, Y2가 하기인 방법:
    Figure pct00359
    .
  106. 제87항에 있어서, R4가 메틸인 방법.
  107. 제87항에 있어서, X1, X2, 또는 X3이 수소인 방법.
  108. 제87항에 있어서, X3이 히드록시 보호기인 방법.
  109. 제87항에 있어서, X4가 수소인 방법.
  110. 제87항에 있어서, X4가 아민 보호기인 방법.
  111. 제87항에 있어서, 단계 a)의 알킬아민(C1-12) 또는 치환된 알킬아민(C1-12)이 메틸아민인 방법.
  112. 제87항에 있어서, 단계 b)의 염기가 질소성 염기이고 상기 염기가 디이소프로필에틸아민인 방법.
  113. 제87항에 있어서, 단계 c)의 보호기를 제거하는 시약이 염기이고 상기 염기가 피페리딘인 방법.
  114. 제87항에 있어서, 단계 d)의 염기가 질소성 염기이고 상기 염기가 디이소프로필에틸아민인 방법.
  115. 제87항에 있어서, 하나 이상의 탈보호 단계를 추가로 포함하는 방법.
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