KR20070026394A - Ｃ형 간염 바이러스의 ｎｓ3 세린 프로테아제 억제제로서사이클릭 ｐ4'ｓ를 지닌 신규한 케토아미드 - Google Patents

Abstract

본 발명은 HCV 프로테아제 억제 활성을 갖는 신규 화합물, 및 이러한 화합물의 제조 방법을 기술하고 있다. 다른 양태에서, 본 발명은 상기 화합물을 포함하는 약제학적 조성물, 및 이들을 사용하여 HCV 프로테아제와 관련된 질환을 치료하는 방법을 기술하고 있다.

케토아미드, NS3 세린 프로테아제 억제제, C형 간염 바이러스

Description

Ｃ형 간염 바이러스의 ＮＳ3 세린 프로테아제 억제제로서 사이클릭 Ｐ4'Ｓ를 지닌 신규한 케토아미드{Novel ketoamides with cyclic P4'S as inhibitors of NS3 serine protease of hepatitis C virus}

본 발명은 신규한 C형 간염 바이러스("HCV") 프로테아제 억제제, 하나 이상의 이러한 억제제를 함유하는 약제학적 조성물, 이러한 억제제를 제조하는 방법 및 이러한 억제제를 사용하여 C형 간염 및 관련 질환을 치료하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 HCV NS3/NS4a 세린 프로테아제의 억제제로서 신규한 마크로사이클릭 화합물(macrocyclic compound)을 기술한다. 본 출원은 2004년 2월 27일자로 출원된 미국 가특허원 제60/548,506호의 우선권을 청구한다.

C형 간염 바이러스(HCV)는 비-A형(non-A), 비-B형 간염(NANBH), 특히 혈액-관련 NANBH(BB-NANBH)의 주요 유발제로서 관련시켜 온 (+)-센스 일본-쇄(single-stranded) RNA 바이러스이다[참조: 국제특허공개공보 WO 89/04669 및 유럽특허공개공보(EP) 제381 216호]. NANBH는 기타 형태의 간 질환, 예를 들면, 알코올 중독증 및 1차적인 담즙성 간경변증 뿐만 아니라, 기타 유형의 바이러스-유도된 간 질환, 예를 들면, A형 간염 바이러스(HAV), B형 간염 바이러스(HBV), 델타 간염 바이러스(HDV), 사이토메갈로바이러스(CMV) 및 엡슈타인-바르(Epstein-Barr) 바이러스(EBV)와도 구별되어야 한다.

최근에, 폴리펩티드 프로세싱(processing)과 바이러스 복제에 필요한 HCV 프로테아제를 동정, 클로닝 및 발현하였다[예를 들면, 미국 특허 제5,712,145호 참조]. 이러한 대략 3000개 아미노산의 폴리단백질은 아미노 말단에서부터 카복시 말단까지, 뉴클레오캡시드 단백질(nucleocapsid protein)(C), 엔벨로프 단백질(envelope protein)(E1 및 E2) 및 수개의 비-구조 단백질(NS1, 2, 3, 4a, 5a 및 5b)을 함유한다. NS3은 대략 68kda 단백질이고, HCV 게놈의 대략 1893개 뉴클레오티드에 의해 암호화되며, 다음 2가지의 분명한 도메인을 갖는다: (a) 대략 200개의 N-말단 아미노산으로 이루어진 세린 프로테아제 도메인; 및 (b) 상기 단백질의 C-말단에서의 RNA-의존적 ATPase 도메인. NS3 프로테아제는 키모트립신 계열의 구성원으로 간주되는데, 이는 단백질 서열, 전반적인 3차원 구조 및 촉매 작용 기전이 유사하기 때문이다. 기타 키모트립신-유사 효소는 엘라스타제, 인자 Xa, 트롬빈, 트립신, 플라스민, 유로키나제, tPA 및 PSA이다. HCV NS3 세린 프로테아제는 NS3/NS4a, NS4a/NS4b, NS4b/NS5a 및 NS5a/NS5b 연결부에서의 상기 폴리펩티드(폴리단백질)의 단백질 가수분해에 관여하기 때문에, 바이러스 복제 동안 4가지 바이러스성 단백질을 생성시키는 것과 관계가 있다. 이로써, HCV NS3 세린 프로테아제가 항바이러스 화학요법시 관심을 끄는 표적이 되었다. 본 발명의 화합물은 이러한 프로테아제를 억제할 수 있다. 이들은 또한 C형 간염 바이러스(HCV) 폴리펩타이드 의 프로세싱을 조절할 수 있다.

대략 6kda 폴리펩티드인 NS4a 단백질이, NS3의 세린 프로테아제 활성에 대한 보조인자인 것으로 밝혀졌다. NS3/NS4a 세린 프로테아제에 의한 NS3/NS4a 연결부의 자가절단은 분자내에서(즉, 시스) 일어나는 반면, 기타 절단 부위는 분자간으로(즉, 트랜스) 프로세싱된다.

HCV 프로테아제에 대한 천연 절단 부위를 분석한 결과, P1에서는 시스테인이 존재하고 P1'에서는 세린이 존재하며, 이들 잔기는 NS4a/NS4b, NS4b/NS5a 및 NS5a/NS5b 연결부 내에 엄격하게 보존되어 있는 것으로 밝혀졌다. NS3/NS4a 연결부는 P1에서의 트레오닌 및 P1'에서의 세린을 함유한다. NS3/NS4a에서 Cys→Thr 치환은 상기 연결부에서 트랜스 프로세싱 보다는 시스 프로세싱을 필요로 하기 때문에 고려된 것이다[참조: 예를 들면, Pizzi et al.(1994) Proc. Natl. Acad. Sci.(USA) 91:888-892, Failla et al.(1996) Folding & Design 1:35-42]. NS3/NS4a 절단 부위는 또한, 다른 부위 보다 돌연변이 발생을 보다 잘 허용한다[참조: Kollykhalov et al.(1994) J. Virol. 68:7525-7533]. 상기 절단 부위의 영역 상단부 내의 산성 잔기가 효율적인 절단에 필요한 것으로 또한 밝혀졌다[참조: Komoda et al.(1994) J. Virol. 68:7351-7357].

보고된 바 있는 HCV 프로테아제의 억제제로는 산화방지제[참조: 국제공개공보 WO 98/14181], 특정 펩티드 및 펩티드 동족체[참조: 국제공개공보 WO 98/17679; Landro et al.(1997) Biochem . 36:9340-9348, Ingallinella et al.(1998) Biochem . 37:8906-8914, Llinas-Brunet et al.(1998) Bioorg. Med. Chem. Lett. 8:1713- 1718], 70개 아미노산 폴리펩티드 에글린 c계 억제제[참조: Martin et al.(1998) Biochem. 37:11459-11468], 사람 췌장 분비성 트립신 억제제(hPSTI-C3) 및 미니바디 레퍼토리(minibody repertoires)(MBip) 중에서 선택된 억제제 친화물[참조: Dimasi et al.(1997) J. Virol. 71:7461-7469], cV_HE2["낙타 적응화(camelized)" 가변 도메인 항체 단편][참조: Martin et al.(1997) Protein Eng. 10:607-614] 및 α1-안티키모트립신(ACT)[참조: Elzouki et al.(1997) J. Hepat. 27:42-28]이 있다. C형 간염 바이러스 RNA를 선택적으로 파괴시키도록 고안된 리보자임이 최근에 보고되었다[참조: BioWorld Today 9(217): 4(November 10, 1998)].

또한, PCT 공개공보 WO 98/17679(1998. 4. 30자로 공개됨)(Vertex Pharmaceuticals Incorporated); WO 98/22496(1998. 5. 28자로 공개됨)(F. Hoffmann-La Roche AG); 및 WO 99/07734(1999. 2. 18자로 공개됨)(Boehringer Ingelheim Canada Ltd.)를 참조할 수 있다.

HCV는 간경변증과, 간세포 암종의 유발에 밀접한 영향을 끼친다. 현재에는, HCV에 감염된 환자를 예측하기가 매우 어렵다. HCV 감염은 기타 형태의 간염 보다 치료하기가 더욱 어려운데, 이는 HCV 감염와 연관된 면역성 또는 병의 차도가 없기 때문이다. 현재의 데이터는, 간경변증으로 진단받은 지 4년 후의 생존율은 50% 미만임을 나타내고 있다. 절제 가능한 국재된 간세포 암종이 있는 것으로 진단된 환자의 5년 후 생존율은 10 내지 30%인 반면, 절제 가능하지 않은 국재된 간세포 암종이 있는 것으로 진단된 환자의 5년 후 생존율은 1% 미만이다.

하기 화학식의 펩타이드 유도체를 기술하고 있는, WO 제00/59929호[미국 특허 제6,608,027호; 양수인: 베링거 인겔하임(캐나다) 리미티드(Boehringer Ingelheim(Canada) Ltd.); 2000년 10월 12일 공개]에 대해 참조한다.

HCV NS3 프로테아제의 억제제의 비사이클릭 유사체의 합성을 기술하고 있는 문헌[참조: A. Marchetti et al, Synlett, S1, 1000-1002(1999)]을 참조한다. 당해 문헌에 기술된 화합물은 하기 화학식을 갖는다:

알릴 및 에틸 작용기(functionality)를 함유하는 특정의 α-케토아미드, α-케토에스테르 및 α-디케톤의 제조를 기술하고 있는 문헌[참조: W. Han et al, Bioorganic & Medicinal Chem. Lett,(2000) 10, 711-713]을 참조한다.

하기 화학식의 펩타이드 유도체를 기술하고 있는 WO 00/09558[양수인: 베링 거 인겔하임 리미티드(Boehringer Ingelheim Limited); 2000년 2월 24일 공개]을 참조한다:

상기식에서,

각종 성분들은 상기 문헌에 정의되어 있다. 이러한 시리즈의 예시적인 화합물은 하기 화학식의 화합물이다:

하기 화학식의 펩타이드 유도체를 기술하고 있는 WO 제00/09543호[양수인: 베링거 인겔하임 리미티드; 2000년 2월 24일 공개]를 참조한다:

상기식에서,

다양한 성분들은 상기 문헌에 정의되어 있다. 이러한 시리즈의 예시적인 화합물은 하기 화학식의 화합물이 있다:

하기 화학식의 유형의 NS3 프로테아제 억제제를 기술하는 미국 특허 제6,608,027호(베링거 인겔하임, 캐나다)을 참조한다:

상기식에서,

각종의 잔기는 상기 문헌에 정의되어 있다.

C형 간염에 대한 현재의 치료법으로는 인터페론-α(INF_α), 및 리바비린(ribavirin)과 인터페론(interferon)의 배합 치료법이 있다[참조: 예를 들면, Beremguer et al.(1998) Proc. Assoc. Am. Physicians 110(2):98-112]. 이들 치료법은 반응 지속율이 낮고 부작용을 자주 일으킨다[참조: Hoofnagle et al.(1997) N. Engl. J. Med. 336:347]. 현재, HCV 감염에 이용될 수 있는 백신은 전혀 없다.

C형 간염 바이러스의 NS3-세린 프로테아제 억제제로서 하기 화학식(여기서, R은 하기 문헌에 정의된 바와 같다)의 특정 화합물을 기술하고 있는, 2001년 10월 11일자로 공개된 WO 제01/74768호[양수인: 버텍스 파마슈티칼스 인크(Vertex Pharmaceuticals Inc)]를 또한 참조한다:

상기 언급한 WO 01/74768에 기재된 특정 화합물은 하기 화학식을 갖는다:

PCT 공개공보 WO 01/77113; WO 01/081325; WO 02/08198; WO 02/08256; WO 02/08187; WO 02/08244; WO 02/48172; WO 02/08251; 및 2002년 1월 18일자로 출원되어 계류중인 미국 특허원 제10/052,386호는 C형 간염 바이러스의 NS-3 세린 프로테아제 억제제로서 각종 유형의 펩타이드 및/또는 기타 화합물을 기술하고 있다. 이들 특허원의 기술내용은 본원에 참조로 인용된다.

HCV 감염에 대한 신규 치료 및 치료요법이 요구되고 있다. C형 간염의 하나 이상의 증상의 치료 또는 예방시 유용한 화합물도 요구되고 있다.

C형 간염의 하나 이상의 증상의 치료, 예방 또는 완화 방법이 요구되고 있 다.

본원에 제공된 화합물을 사용하여 세린 프로테아제, 특히 HCV NS3/NS4a 세린 프로테아제의 활성을 조절하는 방법도 요구되고 있다.

본원에 기술된 화합물을 사용하여 HCV 펩타이드의 프로세싱을 조절하는 방법도 요구되고 있다.

발명의 요약

이의 많은 양태에서, 본 발명은 신규한 부류의 HCV 프로테아제의 억제제, 하나 이상의 이러한 화합물을 함유하는 약제학적 조성물, 하나 이상의 이러한 화합물을 포함하는 약제학적 제형의 제조방법, 및 하나 이상의 이러한 화합물 또는 하나 이상의 이러한 제형을 사용한 HCV의 치료 또는 예방 방법, 또는 하나 이상의 C형 간염의 증상의 완화 방법을 제공한다. 또한, HCV 폴리펩타이드와 HCV 프로테아제의 상호작용을 조절하는 방법을 제공한다. 본원에 제공된 화합물중에서, HCV NS3/NS4a 세린 프로테아제 활성을 억제하는 화합물이 바람직하다. 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물을 기술한다:

상기 화학식 I에서,

R¹은 H, OR⁸, NR⁹R¹⁰ 또는 CHR⁹R¹⁰이고, 여기서 R⁸, R⁹ 및 R¹⁰은 동일하거나 상이할 수 있으며, 각각 H, 알킬-, 알케닐-, 알키닐-, 아릴-, 헤테로알킬-, 헤테로아릴-, 사이클로알킬-, 헤테로사이클릴-, 아릴알킬-, 및 헤테로아릴알킬로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되고;

A 및 M은 동일하거나 상이할 수 있으며, 각각 R, OR, NHR, NRR', SR, SO₂R 및 할로 중에서 독립적으로 선택되거나, 또는 A 및 M은 서로 연결되어(다시 말해서, A-E-L-M은 함께 취해져서) 화학식 I에서 윗부분에 나타낸 잔기

이 3-, 4-, 6-, 7- 또는 8-원 사이클로알킬, 4- 내지 8-원 헤테로사이클릴, 6- 내지 10-원 아릴, 또는 5- 내지 10-원 헤테로아릴을 형성하며;

E는 C(H) 또는 C(R)이고;

L은 C(H), C(R), CH₂C(R) 또는 C(R)CH₂이며;

R, R', R² 및 R³은 동일하거나 상이할 수 있고, 각각 H, 알킬-, 알케닐-, 알키닐-, 사이클로알킬-, 헤테로알킬-, 헤테로사이클릴-, 아릴-, 헤테로아릴-, (사이클로알킬)알킬-, (헤테로사이클릴)알킬-, 아릴-알킬- 및 헤테로아릴-알킬-로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되거나; 또는 NRR'중 R 및 R'는 서로 연결되어 NRR'가 4- 내지 8-원 헤테로사이클릴을 형성하고;

Y는 하기 잔기 중에서 선택되며:

여기서, G는 NH 또는 O이고;

R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹ 및 R²⁰은 동일하거나 상이할 수 있고, 각각 H, C₁-C₁₀ 알킬, C₁-C₁₀ 헤테로알킬, C₂-C₁₀ 알케닐, C₂-C₁₀ 헤테로알케닐, C₂-C₁₀ 알키닐, C₂-C₁₀ 헤테로알키닐, C₃-C₈ 사이클로알킬, C₃-C₈ 헤테로사이클릴, 아릴 및 헤테로아릴로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되거나, 또는 (i) R¹⁵ 및 R¹⁶은 서로 연결되어 4- 내지 8-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴을 형성하거나, 또는 R¹⁵ 및 R¹⁹는 서로 연결되어 5- 내지 8-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴을 형성하거나, 또는 R¹⁵ 및 R²⁰은 서로 연결되어 5- 내지 8-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴을 형성하고, (ii) 유사하게, 독립적으로, R¹⁷ 및 R¹⁸은 서로 연결되어 3- 내지 8-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴을 형성하며;

여기서, 각각의 상기 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴은 치환되지 않거나, 또는 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 티오, 알킬티오, 아릴티오, 아미노, 아미도, 알킬아미노, 아릴아미노, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 설폰아미도, 알킬설폰아미도, 아릴설폰아미도, 케토, 카복시, 카브알콕시, 카복스아미도, 알콕시카보닐아미노, 알콕시카보닐옥시, 알킬우레이도, 아릴우레이도, 할로, 시아노 및 니트로로 이루어진 그룹 중에서 선택된 하나 이상의 잔기에 의해 임의로 독립적으로 치환될 수 있다.

상기 나타낸 기술, "A 및 M은 서로 연결되어 화학식 I에서 윗부분에 나타낸 잔기:

이 3-, 4-, 6-, 7- 또는 8-원 사이클로알킬, 4 내지 8-원 헤테로사이클릴, 6- 내지 10-원 아릴, 또는 5- 내지 10-원 헤테로아릴을 형성한다"는 다음과 같은 비-제한적 예로 나열할 수 있다. 따라서, 예를 들어, A 및 M이 서로 연결되어 화학식 I에 나타낸 상기 잔기:

이 6-원 사이클로알킬(사이클로헥실)을 형성하는 경우, 화학식 I의 화합물은 다음 식과 같이 표시될 수 있다:

당해 분야의 숙련가는, 화학식 I에 대한 유사한 묘사를, 잔기:

에서 윗부분에 나타낸 A 및 M(즉, M-L-E-A가 함께)이 서로 연결되어 3-, 4-, 7- 또는 8-원 사이클로알킬, 4- 내지 8-원 헤테로사이클릴, 6- 내지 10-원 아릴, 또는 5- 내지 10-원 헤테로아릴을 형성하는 경우에 도달할 수 있다.

상기 나타낸 R, R', R² 및 R³의 정의에서, 바람직한 알킬은 1 내지 10개의 탄소 원자로 이루어지고, 바람직한 알케닐 또는 알키닐은 2 내지 10개의 탄소 원자로 이루어지며, 바람직한 사이클로알킬은 3 내지 8개의 탄소 원자로 이루어지고, 바람직한 헤테로알킬, 헤테로아릴 또는 헤테로사이클로알킬은 1 내지 6개의 산소, 질소, 황 또는 인 원자를 지닌다.

화학식 I의 화합물은, 자체로 또는 본원에 기술된 하나 이상의 다른 적합한 제제와 함께, 예를 들면, HCV, HIV, AIDS(후천성 면역결핍증), 및 관련 질환과 같은 질병을 치료할 뿐만 아니라, C형 바이러스(HCV) 프로테아제의 활성을 조절하고, HCV를 예방하거나, C형 간염의 하나 이상의 증상을 완화 또는 경감시키는데 유용할 수 있다. 이러한 조절, 치료, 예방 또는 완화는 본 발명의 화합물, 및 이러한 화합물을 포함하는 약제학적 조성물 또는 제형을 사용하여 달성할 수 있다. 이론에 얽매임 없이, HCV 프로테아제는 NS3 또는 NS4a 프로테아제일 수 있는 것으로 여겨진다. 본 발명의 화합물은 이러한 프로테아제를 억제할 수 있다. 이들은 또한 C형 간염 바이러스(HCV) 폴리펩타이드의 프로세싱을 조절할 수 있다.

하나의 양태에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 또는 에스테르를 기술하며, 여기서, 각종 잔기는 위에서 정의한 바와 같다.

다른 양태에서, R¹은 NR⁹R¹⁰이고, R⁹는 H이며, R^l0은 H, 알킬, 아릴, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 사이클로알킬, 알킬-아릴, 알킬-헤테로아릴, 아릴- 알킬, 알케닐, 알키닐 또는 헤테로아릴-알킬이다.

다른 양태에서, R¹⁰는 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택된다:

다른 양태에서, R²는 하기 잔기로 이루어진 그룹 중에서 선택된다:

다른 양태에서, R³는 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택된다:

상기식에서,

R³¹은 OH 또는 0-알킬이고;

R³²는 H, C(O)CH₃, C(O)OtBu 또는 C(O)N(H)tBu이다.

추가의 양태에서, R³은 하기 잔기로 이루어진 그룹 중에서 선택된다:

다른 양태에서, Y는 하기 잔기로 이루어진 그룹 중에서 선택된다:

상기 식에서,

Y³⁰ 및 Y³¹은 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고;

Y³²는 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되며;

Y¹²는 H, COOH, COOMe, CONH₂, OMe, OH, OCF₃, OCH(CH₃)₂, OC(CH₃)₃, F, Cl, Br, NH₂, NHSO₂CH₃, NHC(O)CH₃, NHCO₂CH₃, NO₂, SO₂NH₂, CF₃, Me, Et, 이소프로필, 사이클로프로필, t-부틸 및 페닐 중에서 선택된다.

다른 양태에서, 잔기:

는 다음 식 중에서 선택된다:

추가의 양태에서, 잔기:

는 다음 식 중에서 선택된다:

여전히 추가의 양태에서, 잔기:

는 다음 식 중에서 선택된다:

추가의 양태에서, R¹은 NHR¹⁰이고, 여기서, R¹⁰은 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고:

R²는 하기 잔기로 이루어진 그룹 중에서 선택되며:

R³는 하기 잔기로 이루어진 그룹 중에서 선택되고:

Y는 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되며:

여기서,

Y³⁰ 및 Y³¹은 동일하거나 상이할 수 있고, 각각 다음 식으로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되며:

Y³²는 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고;

Y¹²는 H, COOH, COOMe, CONH₂, OMe, OH, OCF₃, OCH(CH₃)₂, OC(CH₃)₃, F, Cl, Br, NH₂, NHSO₂CH₃, NHC(O)CH₃, NHCO₂CH₃, NO₂, SO₂NH₂, CF₃, Me, Et, 이소프로필, 사이클로프로필, t-부틸 및 페닐 중에서 선택되며;

잔기:

는

이다.

탁월한 HCV 프로테아제 억제 활성을 나타내는 본 발명의 대표적인 화합물은 HCV 연속 검정에서 이들의 생물학적 활성[나노 몰(nM)로서 Ki^* 값의 범위)과 함께 표 1 및 2에서 본 상세한 설명 이후에 나열한다.

추가의 양태에서, 본 발명은 표 3에서 다음 화합물을 기술한다:

위에서 사용된 것으로서, 및 본 기술내용 전반에 걸쳐서, 하기 용어들은, 달리 제시하지 않는 한, 다음 의미를 지니는 것으로 이해될 것이다:

"환자"는 사람 및 동물 둘 다를 포함한다.

"포유동물"은 사람 및 기타 포유동물을 의미한다.

"알킬"은 쇄내 탄소수가 약 1 내지 약 20개이고 직쇄 또는 측쇄일 수 있는 지방족 탄화수소 그룹을 의미한다. 바람직한 알킬 그룹은 쇄내 탄소수가 약 1 내지 약 12개이다. 더욱 바람직한 알킬 그룹은 쇄내 탄소수가 약 1 내지 약 6개이다. 측쇄는, 하나 이상의 저급 알킬 그룹, 예를 들면, 메틸, 에틸 또는 프로필이 직쇄 알킬 쇄에 부착됨을 의미한다. "저급 알킬"은, 직쇄 또는 측쇄일 수 있는 쇄내 탄소수가 약 1 내지 약 6개인 그룹을 의미한다. 용어 "치환된 알킬"은, 알킬 그룹이 동일하거나 상이할 수 있는 하나 이상의 치환체로 치환될 수 있으며, 각각의 치환체는 할로, 알킬, 아릴, 사이클로알킬, 시아노, 하이드록시, 알콕시, 알킬티오, 아미노, -NH(알킬)-, NH(사이클로알킬), -N(알킬)₂, 카복시 및 -C(O)O-알킬로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 적합한 알킬 그룹의 비-제한적 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필 및 t-부틸을 포함한다.

"알케닐"은 직쇄 또는 측쇄일 수 있고 쇄내 탄소수가 약 2 내지 약 15인 하나 이상의 탄소-탄소 이중 결합을 함유하는 지방족 탄화수소 그룹을 의미한다. 바람직한 알케닐 그룹은, 쇄내 탄소수가 약 2 내지 약 12이고; 더욱 바람직하게는 쇄내 탄소수가 약 2 내지 약 6이다. 측쇄는, 메틸, 에틸 또는 프로필과 같은 하나 이상의 저급 알킬 그룹이 직쇄 알케닐 쇄에 부착됨을 의미한다. "저급 알케닐"은 직쇄 또는 측쇄일 수 있는 쇄내 탄소수가 약 2 내지 약 6임을 의미한다. 용어 "치환된 알케닐"은, 알케닐 그룹이 동일하거나 상이할 수 있고 할로, 알킬, 아릴, 사이클로알킬, 시아노, 알콕시 및 -S(알킬)로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되는 하나 이상의 치환체로 치환될 수 있음을 의미한다. 적합한 알케닐 그룹의 비-제한적 예는 에테닐, 프로페닐, n-부테닐, 3-메틸부트-2-에닐, n-펜테닐, 옥테닐 및 데세닐을 포함한다.

"알키닐"은 하나 이상의 탄소-탄소 삼중 결합을 함유하고 직쇄 또는 측쇄일 수 있으며 쇄내 탄소수가 약 2 내지 약 15개인 지방족 탄화수소 그룹을 의미한다. 바람직한 알키닐 그룹은 쇄내 탄소수가 약 2 내지 약 12이며; 더욱 바람직하게는 쇄내 탄소수가 약 2 내지 약 4이다. 측쇄는, 하나 이상의 저급 알킬 그룹, 예를 들면, 메틸, 에틸 또는 프로필이 직쇄 알키닐 쇄에 부착된 것을 의미한다. "저급 알키닐"은, 직쇄 또는 측쇄일 수 있는 쇄내 탄소수가 약 2 내지 약 6임을 의미한다. 적합한 알키닐 그룹의 비-제한적 예는 에티닐, 프로피닐, 2-부티닐 및 3-메틸부티닐을 포함한다. 용어 "치환된 알키닐"은, 알키닐 그룹이 동일하거나 상이할 수 있는 하나 이상의 치환체에 의해 치환될 수 있음을 의미하며, 각각의 치환체는 알킬, 아릴 및 사이클로알킬로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택된다.

"아릴"은 탄소수가 약 6 내지 약 14, 바람직하게는 탄소수가 약 6 내지 약 10인 방향족의 모노사이클릭 또는 다사이클릭 환 시스템을 의미한다. 아릴 그룹은 동일하거나 상이할 수 있고 본원에 정의한 바와 같은 하나 이상의 "환 시스템 치환체"로 임의 치환될 수 있다. 적합한 아릴 그룹의 비-제한적 예는 페닐 및 나프틸을 포함한다.

"헤테로아릴"은 약 5 내지 약 14개의 환 원자, 바람직하게는 약 5 내지 약 10개의 환 원자를 포함하는 방향족의 모노사이클릭 또는 다사이클릭 환 시스템을 의미하며, 여기서, 하나 이상의 환 원자는 탄소 이외의 성분, 예를 들면, 질소, 산소 또는 황 단독 또는 이들의 조합이다. 바람직한 헤테로아릴은 약 5 내지 약 6개의 환 원자를 함유한다. "헤테로아릴"은 동일하거나 상이할 수 있고 본원에 정의한 바와 같은 하나 이상의 "환 시스템 치환체"로 임의 치환될 수 있다. 헤테로아릴 근명앞의 접두사 아자, 옥사 또는 티아는, 적어도 질소, 산소 또는 황 원자 각각이 환 원자로 존재함을 의미한다. 헤테로아릴의 질소 원자는 상응하는 N-산화물로 임의 산화될 수 있다. 적합한 헤테로아릴의 비-제한적 예는 피리딜, 피라지닐, 푸라닐, 티에닐, 피리미디닐, 피리돈(N-치환된 피리돈 포함), 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 피라졸릴, 푸라자닐, 피롤릴, 피라졸릴, 티아졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴, 피라지닐, 피리다지닐, 퀴녹살리닐, 프탈라지닐, 옥스인돌릴, 이미다조[1,2-a]피리디닐, 이미다조[2,1-b]티아졸릴, 벤조푸라자닐, 인돌릴, 아자인돌릴, 벤즈이미다졸릴, 벤조티에닐, 퀴놀리닐, 이미다졸릴, 티에노피리딜, 퀴나졸리닐, 티에노피리미딜, 피롤로피리딜, 이미다조피리딜, 이소퀴놀리닐, 벤조아자인돌릴, 1,2,4-트리아지닐, 벤조티아졸릴 등을 포함한다. 용어 "헤테로아릴"은 또한 예를 들면, 테트라하이드로이소퀴놀릴, 테트라하이드로퀴놀릴 등과 같은 부분 포화된 헤테로아릴 잔기를 말한다.

"아르알킬" 또는 "아릴알킬"은, 아릴 및 알킬이 앞서 기술한 바와 같은 아릴-알킬 그룹을 의미한다. 바람직한 아르알킬은 저급 알킬 그룹을 포함한다. 적합한 아르알킬 그룹의 비-제한적 예는 벤질, 2-펜에틸 및 나프탈레닐메틸을 포함한다. 모 잔기에 대한 결합은 알킬을 통한다.

"알킬아릴"은, 알킬 및 아릴이 앞서 기술한 바와 같은 알킬-아릴-그룹을 의미한다. 바람직한 알킬아릴은 저급 알킬 그룹을 포함한다. 적합한 알킬아릴 그룹의 비-제한적 예는 톨릴이다. 모 잔기에 대한 결합은 아릴을 통한다.

"사이클로알킬"은, 탄소수가 약 3 내지 약 10개, 바람직하게는 약 5 내지 약 10개인 비-방향족 모노- 또는 다사이클릭 환 시스템을 의미한다. 바람직한 사이클로알킬 환은 약 5 내지 약 7개의 환 원자를 함유한다. 사이클로알킬은 동일하거나 상이할 수 있고 상기 정의한 바와 같은 하나 이상의 "환 시스템 치환체"로 임의 치환될 수 있다. 적합한 모노사이클릭 사이클로알킬의 비-제한적 예는 사이클로프로필, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸 등을 포함한다. 적합한 다사이클릭 사이클로알킬의 비-제한적 예는 1-데칼리닐, 노르보르닐, 아다만틸 등, 및 예를 들면, 인다닐, 테트라하이드로나프틸 등과 같은 부분 포화된 종(species)을 포함한다.

"할로겐" 또는 "할로"는 불소, 염소, 브롬 또는 요오드를 의미한다. 불소, 염소 및 브롬이 바람직하다.

"환 시스템 치환체"는, 예를 들면, 환 시스템상에서 유용한 수소를 대체하는 방향족 또는 비-방향족 환 시스템에 부착된 치환체를 의미한다. 환 시스템 치환체는 동일하거나 상이할 수 있으며, 각각 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬, 알킬아릴, 헤테로아르알킬, 헤테로아릴알케닐, 헤테로아릴알키닐, 알킬헤테로아릴, 하이드록시, 하이드록시알킬, 알콕시, 아릴옥시, 아르알콕시, 아실, 아로일, 할로, 니트로, 시아노, 카복시, 알콕시카보닐, 아릴옥시카보닐, 아르알콕시카보닐, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 헤테로아릴설포닐, 알킬티오, 아릴티오, 헤테로아릴티오, 아르알킬티오, 헤테로아르알킬티오, 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, -C(=N-CN)-NH₂, -C(=NH)-NH₂, -C(=NH)-NH(알킬), Y₁Y₂N-, Y₁Y₂N-알킬-, Y₁Y₂NC(O)-, Y₁Y₂NSO₂- 및 -SO₂NY₁Y₂(여기서, Y₁ 및 Y₂는 동일하거나 상이할 수 있고 수소, 알킬, 아릴, 사이클로알킬 및 아르알킬로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택된다)로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택된다. "환 시스템 치환체"는 또한 환 시스템상에서 2개의 인접한 탄소 원자상의 2개의 유용한 수소(각각의 탄소상의 하나의 H)를 동시에 대체하는 하나의 잔기를 의미할 수 있다. 이러한 잔기의 예는 예를 들면,

와 같은 잔기를 형성하는 메틸렌디옥시, 에틸렌디옥시, -C(CH₃)₂- 등이다.

"헤테로사이클릴"은, 환 원자수가 약 3 내지 약 10개, 바람직하게는 약 5 내지 약 10개인 비-방향족의 포화된 모노사이클릭 또는 다사이클릭 환 시스템을 의미하며, 여기서, 환 시스템내 하나 이상의 원자는 탄소 이외의 성분, 예를 들면, 질소, 산소 또는 황, 단독 또는 이들의 조합이다. 환 시스템에 존재하는 인접한 산소 및/또는 황 원자는 없다. 바람직한 헤테로사이클릴은 환 원자가 약 5 내지 약 6개이다. 헤테로사이클릴 근명의 앞의 접두사 아자, 옥사 또는 티아는, 하나 이상의 질소, 산소 또는 황 원자 각각이 환 원자로 존재함을 의미한다. 헤테로사이클릴 환내 어떠한 -NH도 예를 들면, -N(Boc), -N(CBz), -N(Tos) 그룹 등으로서 보호되어 존재할 수 있으며, 이러한 보호는 또한 본 발명의 일부인 것으로 고려된다. 헤테로사이클릴은 동일하거나 상이할 수 있으며 본원에 정의한 바와 같은 하나 이상의 "환 시스템 치환체"에 의해 임의 치환될 수 있다. 헤테로사이클의 질소 또는 황 원자는 상응하는 N-산화물, S-산화물 또는 S,S-이산화물로 임의 산화될 수 있다. 적합한 모노사이클릭 헤테로사이클릴 환의 비-제한적 예는 피페리딜, 피롤리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 티아졸리디닐, 1,4-디옥사닐, 테트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로티오페닐, 락탐, 락톤 등을 포함한다.

본 발명의 헤테로-원자 함유 환 시스템에서, N, O 또는 S에 인접한 탄소 원자상에 하이드록실 그룹이 없으며, 다른 헤테로원자에 인접한 탄소상에 N 또는 S 그룹이 없음을 인지하여야 한다. 따라서, 예를 들면, 환

에서 2 및 5로 표시된 탄소에 직접 부착된 -OH는 없다.

또한 예를 들면, 잔기

와 같은 토우토머 형은 본 발명의 특정 양태에서 동일한 것으로 고려됨에 주목하여야 한다.

"알키닐알킬"은, 알키닐 및 알킬이 앞서 기술한 바와 같은 알키닐-알킬- 그룹을 의미한다. 바람직한 알키닐알킬은 저급 알키닐 및 저급 알킬 그룹을 함유한다. 모 잔기에 대한 결합은 알킬을 통한다. 적합한 알키닐알킬 그룹의 비-제한적 예는 프로파르길메틸을 포함한다.

"헤테로아르알킬"은, 헤테로아릴 및 알킬이 앞서 기술한 바와 같은 헤테로아릴-알킬- 그룹을 의미한다. 바람직한 헤테로아르알킬은 저급 알킬 그룹을 함유한다. 적합한 아르알킬 그룹의 비-제한적 예는 피리딜메틸 및 퀴놀린-3-일메틸을 포함한다. 모 잔기에 대한 결합은 알킬을 통한다.

"하이드록시알킬"은, 알킬이 앞서 정의한 바와 같은 HO-알킬- 그룹을 의미한다. 바람직한 하이드록시알킬은 저급 알킬을 함유한다. 적합한 하이드록시알킬 그룹의 비-제한적 예는 하이드록시메틸 및 2-하이드록시에틸을 포함한다.

"아실"은, 각종 그룹이 앞서 기술한 바와 같은 H-C(O)-, 알킬-C(O)- 또는 사이클로알킬-C(O)- 그룹을 의미한다. 모 잔기에 대한 결합은 카보닐을 통한다. 바람직한 아실은 저급 알킬을 함유한다. 적합한 아실 그룹의 비-제한적 예는 포르밀, 아세틸 및 프로파노일을 포함한다.

"아로일"은, 아릴 그룹이 앞서 기술한 바와 같은 아릴-C(O)- 그룹을 의미한다. 모 잔기에 대한 결합은 카보닐을 통한다. 적합한 그룹의 비-제한적 예는 벤조일 및 1-나프토일을 포함한다.

"알콕시"는, 알킬 그룹이 앞서 기술한 바와 같은 알킬-O- 그룹을 의미한다. 적합한 알콕시 그룹의 비-제한적 예는 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시 및 n-부톡시를 포함한다. 모 잔기에 대한 결합은 에테르 산소를 통한다.

"아릴옥시"는, 아릴 그룹이 앞서 기술한 바와 같은 아릴-O- 그룹을 의미한다. 적합한 아릴옥시 그룹의 비-제한적 예는 페녹시 및 나프톡시를 포함한다. 모 잔기에 대한 결합은 에테르 산소를 통한다.

"아르알킬옥시"는, 아르알킬 그룹이 앞서 기술한 바와 같은 아르알킬-O- 그룹을 의미한다. 적합한 아르알킬옥시 그룹의 비-제한적 예는 벤질옥시 및 1- 또는 2-나프탈렌메톡시을 포함한다. 모 잔기에 대한 결합은 에테르 산소를 통한다.

"알킬티오"는, 알킬 그룹이 앞서 기술한 바와 같은 알킬-S- 그룹을 의미한다. 적합한 알킬티오 그룹의 비-제한적 예는 메틸티오 및 에틸티오를 포함한다. 모 잔기에 대한 결합은 황을 통한다.

"아릴티오"는, 아릴 그룹이 앞서 기술한 바와 같은 아릴-S- 그룹을 의미한다. 적합한 아릴티오 그룹의 비-제한적 예는 페틸티오 및 나프틸티오를 포함한다. 모 잔기에 대한 결합은 황을 통한다.

"아르알킬티오"는, 아르알킬 그룹이 앞서 기술한 바와 같은 아르알킬-S- 그룹을 의미한다. 적합한 아르알킬티오 그룹의 비-제한적 예는 벤질티오이다. 모 잔기에 대한 결합은 황을 통한다.

"알콕시카보닐"은 알킬-O-CO- 그룹을 의미한다. 적합한 알콕시카보닐 그룹의 비-제한적 예는 메톡시카보닐 및 에톡시카보닐을 포함한다. 모 잔기에 대한 결합은 카보닐을 통한다.

"아릴옥시카보닐"은 아릴-O-C(O)- 그룹을 의미한다. 적합한 아릴옥시카보닐 그룹의 비-제한적 예는 페녹시카보닐 및 나프톡시카보닐을 포함한다. 모 잔기에 대한 결합은 카보닐을 통한다.

"아르알콕시카보닐"은 아르알킬-O-C(O)- 그룹을 의미한다. 적합한 아르알콕시카보닐 그룹의 비-제한적 예는 벤질옥시카보닐이다. 모 잔기에 대한 결합은 카보닐을 통한다.

"알킬설포닐"은 알킬-S(O₂)-그룹을 의미한다. 바람직한 그룹은, 알킬 그룹이 저급 알킬인 것들이다. 모 잔기에 대한 결합은 설포닐을 통한다.

"아릴설포닐"은 아릴-S(O₂)- 그룹을 의미한다. 모 잔기에 대한 결합은 설포닐을 통한다.

용어 "치환된"은, 지정된 원자상의 하나 이상의 수소가 나타낸 그룹으로부터 선택된 것으로 치환됨을 의미하며, 단 존재하는 상황에서 지정된 원자의 원자가는 초과하지 않으며, 치환은 안정한 화합물을 생성한다. 치환체 및/또는 변이체의 조합은, 이러한 조합이 안정한 화합물을 생성하는 경우에만 허용가능하다. "안정한 화합물" 또는 "안정한 구조"는, 충분히 강하여 반은 혼합물로부터 유용한 순도로 분리되고 제형이 유효한 치료제로 되는 화합물을 의미한다.

용어 "하나 이상" 또는 "적어도 하나"는, 치환체, 화합물, 배합제 등의 수를 나타내는 경우, 내용에 따라 존재하거나 가할 수 있는 화학적으로 및 물리학적으로 허용되는, 치환체, 화합물, 배합제 등의 적어도 하나, 및 최대 수 이하를 말한다. 이러한 기술 및 지식은 관련 분야의 숙련가의 기술내에 잘 공지되어 있다.

용어 "임의 치환된"은 명시된 그룹, 라디칼 또는 잔기에 의한 임의의 치환을 의미한다.

화합물에 대한 용어 "분리된" 또는 "분리된 형태"는 합성 공정으로부터 분리된 후 상기 화합물 또는 천연 공급원 또는 이들의 조합물의 물리적 상태를 말한다. 화합물에 대한 용어 "정제된" 또는 "정제된 형태"는 본원에 기술되거나 당해 분야의 숙련가에게 익히 공지된 정제 과정 또는 과정들로부터 수득된 후, 본원에 기술된 표준 분석 기술 또는 당해 분야의 숙련가에게 익히 공지된 표준 분석 기술에 의해 특성화될 수 있는 상기 화합물의 물리적 상태를 말한다.

본원의 내용, 반응식, 실시예 및 표에서 충족되지 않은 원자가를 갖는 어떠한 탄소 및 헤테로원자도 원자가를 충족시키기 위한 충분한 수의 수소 원자(들)을 지니는 것으로 추정됨에 주목하여야 한다.

화합물내 작용 그룹이 "보호된"으로 명명되는 경우, 이는, 당해 화합물이 반응에 적용되는 경우 그룹이 보호된 부위에서 목적하지 않은 부 반응이 제외되도록 개질된 형태임을 의미한다. 적합한 보호 그룹은 당해 분야의 숙련가에 의해 및 예를 들면, 문헌[참조: T. W. Greene et al, Protective Groups in organic Synthesis(1991), Wiley, New York]과 같은 표준 교서를 참조함으로써 인지될 것이다.

어떠한 변수(예: 아릴, 헤테로사이클, R² 등)이 어떠한 치환체 또는 화학식 I의 화합물에 1회 이상 존재하는 경우, 각각의 존재시 이의 정의는 모든 다른 존재시 이의 정의와 독립적이다.

본원에 사용된 것으로서, 용어 "조성물"은 명시된 양의 특정 성분의 조합으로부터 직접적으로 또는 간접적으로 생성되는 어떠한 생성물, 및 특정 양의 특정 성분을 포함하는 생성물을 포함하는 것으로 의도된다.

본 발명의 화합물의 전구약물 및 용매화물이 또한 본원에서 고려된다. 본원에 사용된 것으로서, 용어 "전구약물"은 환자에 투여시 대사 과정 또는 화학 과정에 의해 화학적으로 전환되어 화학식 I의 화합물 또는 이의 염 및/또는 용매화물을 생성하는 약물 전구체인 화합물을 나타낸다. 전구약물의 논의는 둘다 본원에 참조로 인용된 문헌[참조: T. Higuchi and V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems(1987) 14 of the A. C. S. Symposium Series, 및 in Bioreversible Carriers in Drug Design,(1987) Edward B. Roche, ed. , American Pharmaceutical Association and Pergamon Press]에서 제공된다.

"용매화물"은 하나 이상의 용매 분자와 본 발명의 화합물의 물리적 연합을 의미한다. 이러한 물리적 연합은 수소 결합을 포함하여 다양한 정도의 이온결합 및 공유결합을 포함한다. 특정 예에서, 용매화물은, 예를 들어 하나 이상의 용매 분자가 결정성 고체의 결정 격자내에 혼입되는 경우 분리될 것이다. "용매화물"은 용액-상 및 분리가능한 용매화물 둘 다를 포함한다. 적합한 용매화물의 비-제한적 예는 에탄올레이트, 메탄올레이트 등을 포함한다. "수화물"은, 용매 분자가 H₂O인 용매화물이다.

"유효량" 또는 치료학적 유효량"은 CDK(s)를 억제함으로써 목적한 치료, 완화, 억제 또는 예방 효과를 생성하는데 효과적인 본 발명의 화합물 또는 조성물의 양을 기술하는 것을 의미한다.

화학식 I의 화합물은 역시 본 발명의 영역내에 있는 염을 형성할 수 있다. 본원의 화학식 I의 화합물에 대한 참조는, 달리 제시하지 않는 한, 이의 염에 대한 언급을 포함하는 것으로 이해된다. 본원에 사용된 것으로서, 용어 "염(들)"은 무기 및/또는 유기산과 함께 형성된 산성 염, 및 무기 및/또는 유기 염기와 함께 형성된 염기성 염을 나타낸다. 또한, 화학식 I의 화합물이 이에 한정되지 않으나, 피리딘 또는 이미다졸과 같은 염기성 잔기 및, 이에 한정되지 않으나 카복실산과 같은 산성 잔기 둘다를 함유하는 경우, 양쪽성 이온("내부 염")이 형성될 수 있으며 본원에 사용된 것으로서 용어 "염(들)"내에 포함된다. 다른 염도 또한 유용하나, 약제학적으로 허용되는(즉, 비-독성의 생리학적으로 허용되는) 염이 바람직하다. 화학식 I의 화합물의 염은, 예를 들면, 화학식 I의 화합물을 염이 침전되는 것과 같은 매질 또는 수성 매질속에서 등량과 같은 양의 산 또는 염기와 반응시킨 후 동결건조시켜 형성시킬 수 있다.

예시적인 산 부가 염은 아세테이트, 아스코르베이트, 벤조에이트, 벤젠설포네이트, 비설페이트, 보레이트, 부티레이트, 시트레이트, 캄포레이트, 캄포르설포네이트, 푸마레이트, 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 하이드로요오다이드, 락테이트, 말레에이트, 메탄설포네이트, 나프탈렌설포네이트, 니트레이트, 옥살레이트, 포스페이트, 프로피오네이트, 살리실레이트, 석시네이트, 설페이트, 타르타레이트, 티오시아네이트, 톨루엔설포네이트(또한 토실레이트로서 공지됨) 등을 포함한다. 또한, 염기성 약제학적 화합물로부터 약제학적으로 유용한 염을 형성하는데 적합한 것으로 일반적으로 고려되는 산이 문헌[참조: P. Stahl et al, Camille G.(eds.) Handbook of Pharmaceutical Salts. Properties, Selection and Use.(2002) Zurich: Wiley-VCH; S. Berge et al, Journal of Pharmaceutical Sciences(1977) 66(1) 1-19; P. Gould, International J. of Pharmaceutics(1986) 33 201-217; Anderson et al, The Practice of Medicinal Chemistry(1996), Academic Press, New York; and in The Orange Book(Food & Drug Administration, Washington, D. C., 이들의 웹사이트 상]에 논의되어 있다. 이러한 기술은 본원에 참조로 인용된다.

예시적인 염기 염은 암모늄 염, 나트륨, 리튬 및 칼륨 염과 같은 알칼리 금속 염, 칼슘 및 마그네슘 염과 같은 알칼리 토금속 염, 디사이클로헥실아민, t-부틸 아민과 같은 유기 염기(예를 들면, 유기 아민)와의 염, 및 아르기닌, 라이신 등과 같은 아미노산과의 염을 포함한다. 염기성 질소-함유 그룹은 저급 알킬 할라이드(예: 메틸, 에틸 및 부틸 클로라이드, 브로마이드 및 요오다이드), 디알킬 설페이트(예: 디메틸, 디에틸 및 디부틸 설페이트), 장쇄 할라이드(예: 데실, 라우릴 및 스테아릴 클로라이드, 브로마이드 및 요오다이드), 아르알킬 할라이드(예: 벤질 및 펜에틸 브로마이드) 및 기타와 같은 제제로 4급화될 수 있다.

모든 이러한 산 염 및 염기 염은 본 발명의 영역내에 약제학적으로 허용되는 염인 것으로 의도되며 모든 산 및 염기 염은 본 발명의 목적을 위해 상응하는 화합물의 유리 형태와 동일한 것으로 고려된다.

본 발명의 약제학적으로 허용되는 에스테르는 다음 그룹을 포함한다: (1) 하이드록시 그룹의 에스테르화에 의해 수득된 카복실산 에스테르, 여기서, 에스테르 그룹화의 카복실산 부위의 비-카보닐 잔기는 직쇄 또는 측쇄 알킬(예: 아세틸 n-프로필, t-부틸 또는 n-부틸), 알콕시알킬(예: 메톡시메틸), 아르알킬(예: 벤질), 아릴옥시알킬(예: 페녹시메틸), 아릴(예: 예를 들면, 할로겐 C_l-4알킬 또는 C_l-4알콕시 또는 아미노로 임의 치환된 페닐) 중에서 선택된다; (2) 알킬- 또는 아르알킬설포닐과 같은 설포네이트 에스테르(예: 메탄설포닐); (3) 아미노산 에스테르(예: L-발릴 또는 L-이소루이실); (4) 포스포네이트 에스테르 및 (5) 모노-, 디- 또는 트리포스페이트 에스테르. 포스페이트 에스테르는 예를 들면, C_1-20 알콜 또는 이의 반응성 유도체에 의해, 또는 2,3-디(C_6-24)아실 글리세롤에 의해 에스테르화될 수 있다.

화학식 I의 화합물, 및 이의 염, 용매화물, 에스테르 및 전구약물은 이들의 토우토머 형(예를 들면, 아미드 또는 이미노 에테르)으로 존재할 수 있다. 모든 이러한 토우토머 형은 본 발명의 일부로 본원에서 고려된다.

거울상이성체형(이는 심지어 비대칭 탄소의 부재하에서도 존재할 수 있다), 회전이성체 형, 아트로프이성체 형 및 부분입체이성체 형을 포함하는, 각종 치환체상의 비대칭 탄소에 기인하여 존재할 수 있는 것들과 같은, 본 발명의 화합물의 모든 입체이성체(본 화합물의 염, 용매화물 및 전구약물, 및 전구약물의 염 및 용매화물 포함)(예를 들면, 기하 이성체, 광학 이성체 등)는 위치 이성체(예: 4-피리딜 및 3-피리딜)에서와 같이, 본 발명의 영역내에 있는 것으로 고려된다. 본 발명의 화합물의 개개의 입체이성체는 예를 들면 다른 이성체와 실질적으로 유리될 수 있거나, 또는 예를 들면 라세메이트로서 또는 모든 다른, 또는 다른 선택된 입체이성체와 혼합될 수 있다. 본 발명의 키랄 중심은 IUPAC 1974 추천(Recommendation)에 의해 정의되는 바와 같은 S 또는 R 배위를 지닐 수 있다. 용어 "염", "용매화물", "전구약물" 등의 사용은 본 발명의 화합물의 거울상이성체, 입체이성체, 회전이성체, 토우토머, 위치 이성체, 라세메이트 또는 전구약물의 염, 용매화물 및 전구약물에 동등하게 적용되는 것으로 의도된다.

화학식 I의 화합물, 및 화학식 I의 화합물의 염, 용매화물 및 전구약물의 다형체(polymorph) 형은 본 발명에 포함되는 것으로 의도된다.

본원에 논의된 치료학적 적용을 위한 화학식 I의 화합물의 유용성은 각각의 화합물 자체에, 또는 예를 들면 다음 문맥에 나열한 바와 같은 하나 이상의 화학식 I의 화합물의 배합 또는 배합물에 적용가능함을 이해하여야 한다. 동일한 이해가 또한 이러한 화합물 또는 화합물들을 포함하는 약제학적 조성물(들) 및 이러한 화합물 또는 화합물들을 포함하는 치료 방법(들)에 적용된다.

본 발명에 따른 화합물은 약리학적 특성을 지닐 수 있으며, 특히, 화학식 I의 화합물은 HCV 프로테아제의 억제제일 수 있고, 각각의 화합물 자체 또는 하나 이상의 화학식 I의 화합물은 화학식 I의 화합물내로부터 선택된 하나 이상의 화합물과 결합시킬 수 있다. 화합물(들)은 예를 들면, HCV, HIV, (AIDS, 후천성 면역결핍 증후군) 및 관련 질환을 치료하고, C형 간염 바이러스(HCV) 프로테아제의 활성을 조절하거나, HCV를 예방하거나, 또는 C형 간염의 하나 이상의 증상을 완화시키는데 유용할 수 있다.

화학식 I의 화합물은 HCV 프로테아제와 관련된 질환을 치료하기 위한 의약의 제조, 예를 들면, 화학식 I의 화합물을 약제학적으로 허용되는 담체와 친밀하게 접촉시킴을 포함하는 방법에 사용할 수 있다.

다른 양태에서, 본 발명은 활성 성분으로서 본 발명의 화합물 또는 화합물들을 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 약제학적 조성물은 일반적으로 또한 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체 희석제, 부형제 또는 담체(총칭하여 본원에서 담체 물질로 언급함)를 포함한다. 이들의 HCV 억제 활성으로 인하여, 이러한 약제학적 조성물은 C형 간염 및 관련 질환을 치료하는데 있어서의 용도를 지닌다.

여전히 다른 양태에서, 본 발명은 활성 성분으로서 본 발명의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물을 제조하는 방법을 기술한다. 본 발명의 약제학적 조성물 및 방법에서, 활성 성분은 통상적으로 의도된 투여형, 즉, 경구 정제, 캅셀제(고체-충전되거나, 반-고체 충전되거나, 또는 액체 충전됨), 구성용 산제, 경구 겔, 엘릭서제, 분산성 입제, 시럽제, 현탁제 등과 관련하여 적절하게 선택된 적합한 담체 물질과 함께 투여될 것이다. 예를 들어, 정제 또는 캅셀제 형태의 경구 투여를 위해, 활성 약물 성분을 락토즈, 전분, 슈크로즈, 셀룰로즈, 마그네슘 스테아레이트, 인산이칼슘, 황산칼슘, 활석, 만니톨, 에틸 알콜(액체형) 등과 같은 어떠한 경구용 비-독성의 약제학적으로 허용되는 불활성 담체와 배합될 수 있다. 또한, 바람직하거나 필요할 경우, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 착색제가 또한 혼합물내에 혼입될 수 있다. 산제 및 정제는 약 5 내지 약 95%의 본 발명의 조성물을 포함할 수 있다.

적합한 결합제는 전분, 젤라틴, 천연 당, 옥수수 감미제, 천연 및 합성 검(예: 아카시아), 알긴산나트륨, 카복시메틸셀룰로즈, 폴리에틸렌 글리콜 및 왁스를 포함한다. 윤활제 중에서, 이들 투여형, 붕산, 나트륨 벤조에이트, 나트륨 아세테이트, 염화나트륨 등에서 사용하기 위해 언급될 수 있다. 붕해제는 전분, 메틸셀룰로즈, 구아 검 등을 포함한다.

감미제, 풍미제 및 방부제가 또한 경우에 따라 포함될 수 있다. 상기 나타낸 용어의 일부, 즉, 붕해제, 희석제, 윤활제, 결합제 등은 하기에 더욱 상세힌 논의한다.

또한, 본 발명의 조성물은 치료학적 효과, 즉, HCV 억제 활성 등을 최적화시키기 위한 성분들 또는 활성 성분들 하나 이상의 속도 조절된 방출을 제공하기 위해 서방형(sustained release form)으로 제형화될 수 있다. 서방용으로 적합한 용량 형은 활성 성분과 함께 함침되고 이러한 함침되거나 봉입된 다공성 중합체 매트릭스를 함유하는 정제형 또는 캅셀로 성형된 다양한 붕해 속도 또는 조절된 방출의 중합체성 매트릭스의 층을 함유하는 적층된 정제를 포함한다.

액체형 제제는 액제, 현탁제 및 유제를 포함한다. 예로서 비경구 주사용 물 또는 물-프로필렌 글리콜 용액, 또는 경구 용액, 현탁액 및 유액용 감미제 및 유백제의 첨가가 언급될 수 있다. 액체형 제제는 또한 비강 투여용 액제를 포함할 수 있다.

흡입용으로 적합한 에어로졸 제제는 불활성 압착 가스, 예를 들면, 질소와 같은 약제학적으로 허용되는 담체와 함께 존재할 수 있는 불말 형태의 고체 및 액체를 포함할 수 있다.

좌제를 제조하기 위해, 코코아 버터와 같은 지방산 글리세라이드의 혼합물과 같은 저 융점 왁스를 우선 용융시키고, 활성 성분을 교반 또는 유사한 혼합에 의해 균질하게 분산시킨다. 이후에 용융된 균질 혼합물을 편리한 크기의 주형에 부어, 냉각되도록 함으로써 고화시킨다.

또한 사용 직전에 경구 또는 비경구 투여용의 액체형 제제로 전환될 의도의 고체형 제제가 포함된다. 이러한 액체형은 액제, 현탁제 및 유제를 포함한다.

본 발명의 화합물은 또한 경피적으로 전달가능할 수 있다. 경피 조성물은 크림제, 로션제, 에어로졸제 및/또는 유제의 형태를 취할 수 있으며 당해 목적을 위해 당해 분야에서 통상적인 매트릭스 또는 저장기(reservoir) 유형의 경피 패취 속에 포함될 수 있다.

본 발명의 화합물은 또한 경구적으로, 정맥내, 비강내 또는 피하내 투여될 수 있다.

본 발명의 화합물은 또한 단위 용량형인 제제를 포함할 수 있다. 이러한 형태에서, 제제는 예를 들면, 바람직한 목적을 달성하기에 효과적인 적절한 양의 활성 성분을 함유하는 적합한 크기의 단위 투여량으로 아분(subdividing)된다.

단위 투여량의 제제중의 본 발명의 활성 조성물의 양은 일반적으로 특정 적용에 따라 약 1.0 밀리그람(mg) 내지 약 1,000 밀리그람, 바람직하게는 약 1.0 내지 약 950 밀리그람, 더욱 바람직하게는 약 1.0 내지 약 500 밀리그람, 및 통상적으로 약 1 내지 약 250 밀리그람으로 변하거나 조절될 수 있다. 사용된 실제 용량은 환자의 연령, 성별, 체중 및 치료하는 상태의 중증도에 따라 변할 수 있다. 이러한 기술은 당해 분야의 숙련가에게 잘 알려져 있다.

일반적으로, 활성 성분을 함유하는 사람 경구 용량형은 1일당 1 또는 2회 투여될 수 있다. 투여량 및 투여 횟수는 주치의의 판단에 따라 조절될 것이다. 일반적으로 추천되는 경구 투여용의 1일 용량 섭생(regimen)은 단일 또는 분할 투여량으로 1일에 약 1.0 밀리그람 내지 약 1,000 밀리그람의 범위일 수 있다.

일부 유용한 용어는 하기 기술된다:

캅셀제-는 활성 성분을 포함하는 조성물을 보유하거나 함유하기 위한 메틸 셀룰로즈, 폴리비닐 알콜 또는 변성된 젤라틴 또는 전분으로 제조된 특정 용기 또는 봉입물을 말한다. 경질 쉘 캅셀제(hard shell capsule)는 통상적으로 비교적 높은 겔 강도의 뼈와 돼지 피부 젤라틴의 배합물로 제조된다. 캅셀제 자체는 소량의 염료, 불투명제, 가소제 및 방부제를 함유할 수 있다.

정제-는 적합한 희석제와 활성 성분을 함유하는 압착되거나 성형된 고체 용량형을 말한다. 정제는 습윤 과립화, 무수 과립화 또는 압착에 의해 수득된 혼합물 또는 과립화물을 압착시켜 제조할 수 있다.

경구 겔-은 친수성 반-고체 매트릭스내에 분산되거나 가용화된 활성 성분을 말한다.

구성용 산제는 활성 성분과 물 또는 쥬스에 현탁될 수 있는 적합한 희석제를 함유하는 분말 배합물을 말한다.

희석제-는 조성물 또는 용량형의 주요 부분을 일반적으로 구성하는 물질을 말한다. 적합한 희석제는 락토즈, 슈크로즈, 만티톨 및 소르비톨과 같은 당; 밀, 옥수수, 벼 및 감자로부터 기원한 전분; 및 미정질(미세결정성) 셀룰로즈와 같은 셀룰로즈를 포함한다. 조성물중 희석제의 양은 총 조성물의 약 10중량% 내지 약 90 중량%, 바람직하게는 약 25 내지 약 75 중량%, 더욱 바람직하게는 약 30 내지 약 60 중량%, 심지어 더욱 바람직하게는 약 12 내지 약 60 중량%의 범위일 수 있다.

붕해제-는 의약을 분해(붕해)시켜 의약을 방출시키는 것을 돕는 조성물에 첨가된 물질을 말한다. 적합한 붕해제는 전분; "냉수 가용성" 개질된 전분, 예를 들면, 나트륨 카복시메틸 전분; 천연 및 합성 검, 예를 들면, 로쿠스트 콩, 카라야, 구아, 트라가칸트 및 아가(agar); 셀룰로즈 유도체, 예를 들면, 메틸셀룰로즈 및 나트륨 카복시메틸셀룰로즈; 미정질 셀룰로즈 및 가교-결합된 미정질 셀룰로즈, 예를 들면, 나트륨 크로스카멜로즈; 알기네이트, 예를 들면 알긴산 및 알긴산나트륨; 점토, 예를 들면, 벤토나이트; 및 기포제 혼합물을 포함한다. 당해 조성물중 붕해제의 양은, 조성물을 기준으로 하여, 약 2 내지 약 15 중량%, 더욱 바람직하게는 약 4 내지 약 10 중량%의 범위일 수 있다.

결합제-는 결합하는 물질 또는, 과립을 형성하여 제형속에서 "접착제" 로서 작용됨으로써 함께 및 이들을 접착성이 되도록 하는 "아교" 분말을 말한다. 결합제는 희석제 또는 용적화제(bulking agent) 속에서 이미 유용한 접착 강도를 가한다. 적합한 결합제는 슈크로즈와 같은 당; 밀, 옥수수, 벼 및 감자로부터 기원한 전분; 아카시아, 젤라틴 및 트라가칸트와 같은 천연 검; 알긴산, 알긴산나트륨 및 암모늄 칼슘 알기네이트와 같은 해조류의 유도체; 메틸셀룰로즈 및 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및 하이드록시프로필메틸셀룰로즈와 같은 셀룰로즈계 물질; 폴리비닐피롤리돈; 및 마그네슘 알루미늄 실리케이트와 같은 무기물을 포함한다. 조성물중 결합제의 양은 조성물의 약 2 내지 약 20 중량%, 더욱 바람직하게는 약 3 내지 약 10 중량%, 보다 더 바람직하게는 약 3 내지 약 6 중량%의 범위일 수 있다.

윤활제-는 압착된 후 마찰 또는 마모를 감소시킴으로써 정제, 입제 등이 주형(mold) 또는 다이(die)로부터 방출될 수 있도록 용량형에 가해진 물질을 말한다. 적합한 윤활제는 마그네슘 스테아레이트, 칼슘 스테아레이트 또는 칼륨 스테아레이트와 같은 금속성 스테아레이트; 스테아르산; 고 융점 왁스; 및 염화나트륨, 나트륨 벤조에이트, 나트륨 아세테이트, 나트륨 올레이트, 폴리에틸렌 글리콜 및 d'l-루이신과 같은 수용성 윤활제를 포함한다. 윤활제는 일반적으로 압착전 최종 마지막 단계에 가해지는데, 이는, 이들이 입제의 표면 및 이들과 정제 프레스의 부품 사이에 존재하여야 하기 때문이다. 조성물중 윤활제의 양은 조성물의 약 0.2 내지 약 5 중량%, 바람직하게는 약 0.5 내지 약 2 중량%, 더욱 바람직하게는 약 0.3 내지 약 1.5 중량%의 범위일 수 있다.

활주제-는 과립화의 유동 특성을 증진시키고 케이킹(caking)을 방지함으로써 유동이 부드럽고 균일하도록 하는 물질이다. 적합한 활주제는 이산화규소 및 활석을 포함한다. 조성물중 활주제의 양은 총 조성물의 약 0.1 중량% 내지 약 5 중량%, 바람직하게는 약 0.5 내지 약 2 중량%의 범위일 수 있다.

착색제-는 조성물 또는 용량 형에 대한 착색을 제공하는 부형제이다. 이러한 부형제는 점토 또는 산화알루미늄과 같은 적합한 흡착제 위에 흡착된 식품 등급 염료 및 식품 등급 염료들을 포함할 수 있다. 착색제의 양은 조성물의 약 0.1 중량% 내지 약 5 중량%, 바람직하게는 약 0.1 내지 약 1 중량%로 변할 수 있다.

생이용성-은 표준물 또는 대조물과 비교하여 활성 약물 성분 또는 치료학적 잔기가 투여된 용량형으로부터 전신계 순환내로 흡착된 비율 및 정도를 말한다.

정제를 제조하기 위한 통상의 방법은 알려져 있다. 이러한 방법은 압착에 의해 제조된 과립화의 압착 및 직접적인 압착과 같은 무수 방법, 또는 습윤 방법, 또는 기타 특정 과정을 포함한다. 예를 들어, 캅셀제, 좌제 등과 같은 투여용의 기타 형을 제조하기 위한 통상의 방법은 또한 잘 공지되어 있다.

본 발명의 다른 양태는 예를 들면, C형 간염 등과 같은 질병의 치료를 위한 위에서 기술한 약제학적 조성물의 용도를 기술한다. 당해 방법은 치료학적 유효량의 본 발명의 약제학적 조성물을 이러한 치료가 요구되거나 이러한 질병을 가진 환자에게 투여함을 포함한다.

다른 양태에서, 본 발명의 조성물은 예를 들면 항바이러스제 및/또는 면역조절제와 함께와 같은 배합 치료요법(예: 이중 배합, 삼중 배합 등) 유형 또는 단독치료요법 유형으로 사람에서 HCV의 치료에 사용될 수 있다. 이러한 항바이러스제 및/또는 면역조절제의 예는 리바비린(제조원: 쉐링-플로우 코포레이션, 미국 뉴저지주 매디슨 소재) 및 Levovirin^TM(제조원: ICN 파마슈티칼스, 미국 캘리포니아주 코스타 메사 소재), VP 50406^TM(제조원:리로파마, 인코포레이티드, 미국 펜실바니아 엑스톤 소재), ISIS 14803^TM(제조원: ISIS 파마슈티칼스, 미국 캘리포니아주 칼스바드 소재), Heptazyme^TM(제조원: 리보자임 파마슈티칼스, 미국 콜로라도주 보울더 소재), VX 497^TM(제조원: 버텍스 파마슈티칼스, 미국 매사츄세츠주 캠브리지 소재), Thymosin^TM(제조원: 사이클론 파마슈티칼, 미국 캘리포니아주 산 마테오 소재), Maxamine^TM(제조원: 막심 파마슈티칼스, 미국 캘리포니아주 샌 디에고 소재), 마이코페놀레이트 모페틸(제조원: 호프만-라로슈, 미국 뉴저지 주 뉴클리 소재), 인터페론(예를 들면, 인터페론-알파, PEG-인터페론 알파 접합체(cojugate)) 등을 포함한다. "PEG-인터페론 알파 접합체"는 PEG 분자에 공유 부착된 인터페론 알파 분자이다. 설명적인 PEG-인터페론 알파 접합체는 페길화된 인터페론 알파-2a(예: 상표명 Pegasys^TM하에 시판)의 형태의 인터페론 알파-2a(Roferon^TM, 제조원: 호프만 라-로슈, 미국 뉴 저지주 뉴틀리 소재), 페길화된 인터페론 알파-2b(상표명 PEG-Intron^TM하에 시판) 형태의 인터페론 알파-2b(Intron^TM, 쉐링-플라우 코포레이션에서 시판), 인터페론 알파-2c(Berofor Alpha^TM, 제조원: 베링거 인겔하임, 독일 인겔하임 소재) 또는 천연적으로 존재하는 인터페론 알파의 콘센서스 서열의 측정으로 정의된 것으로서 콘센서스 인터페론(Infergen^TM, 제조원: 암젠, 미국 캘리포니아주 타운잰드 옥크스 소재)을 포함한다.

앞서 기술한 바와 같이, 본 발명은 본 발명의 화합물의 토우토머, 회전이성체, 거울상이성체 및 기타 입체이성체를 또한 포함한다. 따라서, 당해 분야의 숙련가가 인지하는 바와 같이, 본 발명의 화합물중 일부는 적합한 이성체 형으로 존재할 수 있다. 이러한 변형은 본 발명의 영역내에 있는 것으로 고려된다.

본 발명의 다른 양태는 본원에 기술된 화합물을 제조하는 방법을 기술한다. 당해 화합물은 당해 분야에 공지된 몇개의 기술로 제조할 수 있다. 대표적인 예시적 과정은 다음 반응식에 요약되어 있다. 본원에 기술된 발명은 또한 첨부된 청구의 범위에 정의된 본 발명의 영역을 제한하는 것으로 해석되지 않는 제조 실시에 및 실시예 화합물에 의해 추가로 예시된다. 대안적인 메카니즘적 경로 및 유사 구조도 당해 분야의 숙련가에게 명백할 것이다.

하기 나열한 반응식이 몇 가지 대표적인 본 발명의 화합물의 제조를 기술하지만, 천연 및 비천연 아미노산 둘다중의 어느 것의 적합한 치환도 이러한 치환을 기준으로 한 목적 화합물을 형성시킬 것이다. 이러한 변형은 본 발명의 영역내에 있는 것으로 고려된다.

하기 기술된 과정에 있어서, 다음 약어들이 사용된다:

THF: 테트라하이드로푸란

DMF: N,N-디메틸포름아미드

EtOAc: 에틸 아세테이트

AcOH : 아세트산;

HOOBt: 3-하이드록시-1,2,3-벤조트리아진-4(3H)-온

EDCl: 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카보디이미드 하이드로클로라이드

NMM: N-메틸모르폴린

ADDP: 1,1'-(아조디카복실)디피페리딘;

DEAD: 디에틸아조디카복실레이트

DIAD: 디이소프로필아조디카복실레이트

MeOH: 메탄올

EtOH: 에탄올

Et₂O: 디에틸 에테르

DMSO: 디메틸설폭사이드

HOBt: N-하이드록시벤조트리아졸

PyBrOP: 브로모-트리스-피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트

DCM: 디클로로메탄

DCC: 1,3-디사이클로헥실카보디이미드

TEMPO: 2,2,6,6-테트라메틸-1-피페리디닐옥시

Phg: 페닐글리신

Chg: 사이클로헥실글리신

Bn: 벤질

Bz: 벤질

Et: 에틸

Ph: 페닐

iBoc: 이소부톡시카보닐

iPr: 이소프로필

^tBu 또는 Bu^t: 3급-부틸

Boc: 3급-부틸옥시카보닐

Cbz: 벤질옥시카보닐

Cp: 사이클로펜틸디에닐

Ts: p-톨루엔설포닐

Me: 메틸

MS 또는 메실: 메탄 설포닐

HATU: O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트

DMAP: 4-N,N-디메틸아미노피리딘;

Bop: 벤조트리아졸-1-일-옥시-트리스(디메틸아미노)헥사플루오로포스페이트

PCC: 피리디늄클로로크로메이트

DIBAL-H: 디이소프로필 알루미늄 하이드라이드

rt 또는 RT: 실온

quant.: 정량적 수율

h 또는 hr: 시간

min: 분

TFA: 트리플루오로아세트산

표적 화합물의 제조를 위한 일반적인 반응식

본 발명의 화합물은 하기 기술한 일반적인 반응식(방법 A 내지 E)을 사용하여 합성하였다.

방법 A

산성 조건하에 화합물 1.01의 N-Boc 작용기를 탈보호시켜 하이드로클로라이드 염 1.02를 제공하고 이를 후속적으로 N-Boc-3급-루이신과 펩타이드 커플링 방법하에 커플링시켜 화합물 1.03을 수득한다. N-Boc 탈보호 후 적절한 이소시아네이트로 처리하여 우레아 1.05를 수득한다. 메틸 에스테르를 가수분해하여 산 1.06을 수득한다. 산 1.06을 적절한 P₁-P' 1급 아미드 잔기로 펩타이드 커플링시켜 하이드록실 아미드 1.07을 수득한다. 산화[참조: 모파트(Moffatt) 산화 또는 관련 과정 - 참조; T. T. Tidwell,. Synthesis, 1990, 857), 또는 데쓰-마틴 퍼요오디난(또는 데스-마틴 페리오디난; Dess-Martin Periodinane)[참조: J. Org.. Chem., 1983 48, 4155]시켜 표적 화합물 1.08을 수득하였다.

방법 B

산 1.06을 적절한 P₁-P' 2급 아미드 잔기와 펩타이드 커플링시켜 하이드록실 아미드 1.09를 수득하였다. 산화[참조: 모파트 또는 데쓰-마틴 산화]시켜 표적 화합물 1.10을 수득하였다.

방법 C

다른 변형법으로, N-Boc-P₂-P₃-산 1.17을 적절한 P₁-P' 아미드 잔기와 펩타이드 커플링시켜 하이드록실 아미드 1.11을 수득하였다. 산화(모파트 또는 데쓰-마틴 퍼요오디난)시켜 케토 아미드 1.12를 수득하였다. N-Boc 작용기를 탈보호시켜 하이드로클로라이드 염 1.13을 수득하였다. 적합한 이소시아네이트(또는 이소시아네이트 등량체)로 처리하여 표적 화합물 1.14를 수득하였다.

방법 D

다른 변형법으로, 하이드로클로라이드 염 1.13을 4-니트로페닐 클로로포르메이트와 반응시켜 4-니트로페닐 카르바메이트 1.15로 전환시켰다. 후속적으로 아민(또는 아민 하이드로클로라이드 염)으로 처리하여 표적 화합물 1.14를 제공하였다.

방법 E

다른 변형법으로, 디펩타이드 하이드로클로라이드 염 1.03을 상기 기술한 바와 같이 4-니트로페닐 카르바메이트로 전환시켰다. 선택한 아민(또는 아민 하이드로클로라이드 염)으로 처리하여 우레아 유도체 1.05를 제공하였다. 가수분해 및 추가로 방법 A/B에 기술한 바와 같이 후처리하여 표적 화합물 1.14를 제공하였다.

중간체의 제조

중간체 10.11 및 10.12의 제조

단계 1

N₂하에 무수 THF(400 mL)중 케트이민 10.01(50 g, 187.1 mmol)의 교반 용액을 -78℃로 냉각시키고 THF중 K-^tBuO(220 mL, 1.15 당량)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 0℃로 가온시키고 1시간 동안 교반하며 브로모메틸 사이클로부탄(28 mL,. 249 mmol)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하고 진공하에 농축시켰다. 잔사를 Et₂0(300 mL)에 용해하고 수성 HCl(2M, 300mL)로 처리하였다. 수득되는 용액을 실온에서 5시간 동안 교반하고 Et₂O(1 L)로 추출하였다. 수성 층을 NaOH(50 % 수성)를 사용하여 pH 약 12 내지 14로 염기성화하고 CH₂Cl₂ (3x300 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 건조(MgS0₄)시키고, 여과하며 농축시켜 무색 오일로서의 순수한 아민(10.02, 18g)을 수득하였다.

단계 2

0℃에서 CH₂Cl₂(350 mL)중 아민 10.02 (18g, 105.2mmol)의 용액을 디-3급-부틸디카보네이트(23 g, 105.4 mmol)로 처리하고 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 반응이 완료(TLC)된 후, 반응 혼합물을 진공하에 농축시키고 잔사를 THF/H₂O(200 ml, 1.1)속에 용해시키고, LiOH·H₂0(6.5 g, 158.5 mmol)로 처리하고 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고 염기성 수성 층을 Et₂O로 추출하였다. 수성 층을 농 HCl을 사용하여 pH 약 1 내지 2로 산성화하고 CH₂Cl₂로 추출하였다. 합한 유기 층을 건조(MgS0₄)시키고, 여과하며, 진공하에 농축시켜 무색 점성 오일로서 화합물 10.03을 수득하고 이를 다음 단계에서 어떠한 추가의 정제없이 사용하였다.

단계 3

CH₂Cl₂(250 mL) 중의 산 10.03 (15.0 g, 62 mmol)의 용액을 BOP 시약(41.1 g, 93mmol), N-메틸 모르폴린(27 mL), N,O-디메틸 하이드록실아민 하이드로클로라이드(9.07 g, 93 mmol)로 처리하고 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 1N 수성 HCl(250 mL)로 희석하고, 층들을 분리시키고 수성 층을 CH₂Cl₂(3 x 300 ml)로 추출하였다. 합한 유기 층을 건조(MgS0₄)시키고, 여과하며 진공하에 농축시키고 크로마토그래피(SiO₂, EtOAc/Hex 2:3)로 정제하여 무색 고체로서의 아미드 10.04 (15.0 g)를 수득하였다.

단계 4

무수 THF(200mL)중 아미드 10.04(15 g, 52.1 mmol)의 용액을 0℃에서 LiAlH₄ (1M, 93 mL, 93 mmol)의 용액으로 적가처리하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고 0℃에서 KHSO₄(10% 수성)의 용액으로 조심스럽게 퀀칭(quenching)시키고 0.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 HCl(1M, 150 mL)로 희석시키고 CH₂Cl₂(3x200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 수성 HCl(1 M), 포화된 NaHCO₃, 및 염수로 세척하고 건조(MgS0₄)시켰다. 혼합물을 여과하고 진공하에 농축시켜 점성 무색 오일(14 g)로서의 화합물 10.05를 수득하였다.

단계 5

CH₂Cl₂(50 mL)중 알데하이드 10.05 (14 g, 61.6 mmol)의 용액을 Et₃N(10.73 mL, 74.4 mmol) 및 아세톤 시아노하이드린(10.86 g, 127.57 mmol)으로 처리하고 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시키고 수성 HCl(1 M, 200 mL)로 희석시키고 CH₂Cl₂(3x200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 H₂0 및 염수로 세척하고, 건조(MgS0₄)시키고, 여과하고, 진공하에 농축시키고, 크로마토그래피(SiO₂, EtOAc/Hex 1:4)하여 무색 액체로서의 화합물 10.06(10.3 g)을 수득하였다.

단계 6

0℃에서 CH₃0H(700 ml)를 통해 HCl 가스를 버블링시켜 제조한 HCl^*로 포화시킨 메탄올을 시아노하이드린 10.06으로 처리하고 24시간 동안 가열하여 환류시켰다. 반응물을 진공하에 농축시켜 화합물 10.07을 수득하고 이를 정제없이 다음 단계에서 사용하였다.

^* 또는 AcCl을 무수 메탄올에 첨가하여 제조한 6M HCl을 또한 사용할 수 있다.

단계 7

CH₂Cl₂(200 mL)중 아민 하이드로클로라이드 10.07의 용액을 Et₃N(45.0 mL, 315 mmol) 및 Boc₂O(45.7g, 209 mmol)로 -78℃에서 처리하였다. 이후에 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반시키고 HCl(2M, 200 mL)로 희석시키고 CH₂Cl₂ 내로 추출하였다. 합한 유기 층을 건조(MgSO₄)시키고, 여과하며, 진공하에 농축시키고 크로마토그래피(EtOAc/Hex 1:4)로 정제하여 하이드록시 에스테르 10.08을 수득하였다.

단계 8

THF/H₂0(1:1)중 메틸 에스테르 10.08(3g, 10.5 mmol)의 용액을 LiOH·H₂O (645 mg, 15.75 mmol)로 처리하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 HCl(1 M, 15 mL)로 산성화하고 진공하에 농축시켰다. 반응물을 진공하에 건조시켜 정량적 양의 화합물 10.09을 수득하였다.

단계 9

CH₂Cl₂(50 mL) 및 DMF(25 mL)중 산 10.09(상기로부터 수득)의 용액을 NH₄Cl(2.94 g, 55.5 mmol), EDCl(3.15 g, 16.5 mmol), HOOBt(2.69 g, 16.5 mmol), 및 NMM(4.4 g, 44 mmol)으로 처리하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 제거하고 잔사를 수성 HCl(250 mL)로 희석시키고 CH₂Cl₂로 추출하였다. 합한 유기 층을 수성의 포화된 NaHCO₃로 세척하고, 건조(MgS0₄)시키고, 여과하며, 진공하에 농축시켜 화합물 10.10을 수득하고, 이를 다음 단계에서 그대로 사용하였다[또는, 화합물 10.10을 0℃에서 50 mL의 CH₃0H중 화합물 10.06(4.5 g, 17.7 mmol)과 수성 H₂0₂(10 mL), LiOH·H₂O(820 mg, 20.8 mmol)을 0.5시간 동안 반응시켜 직접 수득할 수 있다].

단계 10

앞서의 단계에서 수득한 화합물 10.10의 용액을 디옥산중 4N HCl속에 용해하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시키고 고체로서의 중간체 10.11을 수득하고, 이를 추가의 정제없이 사용하였다.

단계 11

요구되는 중간체 10.12는 필수적으로 단계 9 및 10에서 상기 기술된 과정과 적절한 시약을 사용하여 화합물 10.09로부터 수득하였다.

중간체 11.01의 제조

단계 1

4-펜틴-1-올, 11.02(4.15g; 알드리히(Aldrich) 제조원)의 용액에 데스-마틴 퍼요오디난(Dess-Martin Periodinane)(30.25g; 알드리히 제조원)을 가하고 수득되는 혼합물을 45분 동안 교반한 후 (3급-부톡시카보닐메틸렌)트리페닐포스포란(26.75g; 알드리히 제조원)을 첨가하였다. 수득되는 암색 반응물을 밤새 교반하고, EtOAc로 희석시키고, 수성 아황산나트륨, 포화된 NaHC0₃, 물 및 염수로 세척하고 건조시켰다. 휘발물을 감압하에 제거하고 잔사를 용출제로서 헥산중 1% EtOAc를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 목적 화합물, 11.03(3.92g)을 수득하였다. 일부 불순물 분획을 또한 수득하였으나 이 단계에서 제거하였다.

단계 2

n-프로판올(20ml; 알드리히 제조원)중 알켄 11.03(1.9g), n-프로판올(40mol ; 알드리히 제조원)중 벤질 카바메이트(4.95g; 알드리히 제조원), 물(79ml)중 NaOH(1.29g), 3급-부틸 하이포클로라이트(3.7ml), n-프로판올(37.5mol)중 (DHQ)₂PHAL(0.423g; 알드리히 제조원) 및 칼륨 오스메이트:탈수화물(0.1544g; 알드리히 제조원), 및 문헌[참조: Angew. Chem. Int. Ed. Engl (1998), 35, (23/24), pp. 2813-7]에 설정된 과정을 사용하여 조 생성물을 수득하고 이를 EtOAc:헥산(1:5)으로 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 백색 고체로서의 목적한 아미노 알콜 11.04(1.37g, 37%)을 수득하였다.

단계 3

에스테르 11.04(0.700g)에 디옥산(20ml; 알드리히 제조원)중 4M HCl을 가하고 수득되는 혼합물을 실온에서 밤새 정치시켰다. 휘발물을 감압하에 제거하고 백색 고체로서의 산 11.05(0.621g)을 수득하였다.

단계 4

BOP 시약(3.65g; 시그마(Sigma) 제조원)에 이어 트리에틸아민(3.45ml)을 카복실산 11.05(2.00g) 및 알릴 아민(0.616ml)의 디클로로메탄(20ml) 용액에 실온에서 가하고 수득되는 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc 및 10% 수성 HCl사이에 분배하였다. 유기상을 분리하고, 포화된 수성 중탄산나트륨 및 물로 세척하고, 건조(황산마그네슘)시켰다. 조 반응 생성물을 용출제로서 (EtOAc:헥산; 70:30)을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 점성 황색 오일로서의 목적한 아미드 11.01(1.73g)를 수득하였다.

중간체 12.03 및 12.04의 제조

단계 1

화합물 12.01을 필수적으로 중간체 10.11에 대해, 단계 3 내지 8에서 기술된 과정을 사용하여 요구되는 물질 12.02로 전환시켰다.

단계 2

화합물 12.02를 필수적으로 중간체 10.11에 대해, 단계 9 및 10에서 기술된 과정을 사용하여 요구되는 중간체 12.03으로 전환시켰다.

단계 3

화합물 12.02를 필수적으로 중간체 10.12에 대해, 단계 11에서 기술된 과정을 사용하여 요구되는 중간체 12.03으로 전환시켰다.

중간체 13.01의 제조

단계 1

0 내지 5℃에서 H₂O(28.1 g, 0.305 mol) 및 및 MeOH(122 mL) 중의 1-니트로부탄, 화합물 13.02(16.5g, 0.16mol) 및 글리옥실산의 용액에 트리에틸아민(93 mL, 0.667 mol)을 2시간에 걸쳐 적가하였다. 당해 용액을 실온으로 가온시키고, 밤새 교반하고 농축 건조시켜 오일을 수득하였다. 당해 오일을 H₂0속에 용해시키고 10% HCl을 사용하여 pH=1로 산성화한 후 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 용액을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 위에서 건조시키고, 여과하며 농축 건조시켜 생성물 13.03(28.1 g, 99% 수율)을 수득하였다.

단계 2

아세트산(1.25L)중 화합물 13.03(240 g, 1.35 mol)의 교반 용액에 10% Pd/C (37 g)을 가하였다. 수득되는 용액을 59 psi에서 3시간 동안 가수소반응시킨 후 60 psi에서 밤새 가수소반응시켰다. 이후에, 아세트산을 증발시키고 톨루엔으로 3회 공비증발한 후 MeOH 및 에테르로 연마하였다. 이후에 용액을 여과하고 톨루엔으로 2회 공비증발시켜 회백색 고체로서의 화합물 13.04(131 g, 0.891 mol, 66%)을 수득하였다.

단계 3

0℃에서 디옥산(10mL) 및 H₂O(5mL)중 아미노산 13.04(2.0 g, 13.6 mmol)의 교반 용액에 1N NaOH 용액(4.3 mL, 14.0 mmol)을 가하였다. 수득되는 용액을 10분 동안 교반한 후, 디-t-부틸디카보네이트(0.110 g, 14.0 mmol)를 첨가하고 0℃에서 15분 동안 교반하였다. 이후에 용액을 실온으로 가온하고, 45분 동안 교반하고 냉장고에 밤새 유지시키며 농축 건조시켜 조 물질을 수득하였다. EtOAc(100mL)중 당해 조 물질 및 얼음의 용액에 KHSO₄(3.36 g) 및 H₂0(32 mL)를 가하고 4 내지 6분 동안 교반하였다. 이후에 유기 층을 분리하고 수성 층을 EtOAc로 2회 추출하고 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, Na₂SO₄위에서 건조시키고, 여과하고 농축 건조시켜 선명한 검(gum)으로서 생성물 13.05(3.0 g, 89% 수율)을 수득하였다.

단계 4:

화합물 13.05를 필수적으로 중간체 10.12에 대해, 단계 11에서 기술된 과정을 사용하여 요구되는 중간체 13.01로 전환시켰다.

중간체 14.01의 제조

단계 1

화합물 14.02를 필수적으로 중간체 13.01에 대해, 단계 1 내지 3에서 기술된 과정을 사용하여 요구되는 물질 14.03으로 전환시켰다.

단계 2

화합물 14.03을 필수적으로 중간체 10.12에 대해, 단계 11에서 기술된 과정을 사용하여 요구되는 중간체 14.01로 전환시켰다.

중간체 15.01의 제조

단계 1

0℃에서 디에틸 에테르(25mL)중 아질산은(9 g, 58.5 mmol)의 현탁액에 디에틸 에테르(25mL)중 4-요오도-1,1,1-트리플루오로부탄, 화합물 15.02(10g, 42.0 mmol)의 용액을 첨가 깔대기를 통해 서서히 가하였다(대략 15분). 수득되는 혼합물을 0℃에서 격렬하게 교반하고 실온으로 가온시켰다. 50 시간 후, 고체 물질을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 수득되는 디에틸 에테르 용액을 진공하에 농축시켜 무색 오일로서 화합물 15.03을 수득하고 이를 추가의 정제없이 사용하였다.

단계 2

화합물 15.03을 필수적으로 중간체 13.01에 대해, 단계 1 내지 3에서 기술된 과정을 사용하여 요구되는 물질 15.04로 전환시켰다.

단계 3

화합물 15.04를 필수적으로 중간체 10.12에 대해, 단계 11에서 기술된 과정을 사용하여 요구되는 중간체 15.01로 전환시켰다.

중간체 16.01의 제조

산 16.02(참조: Winkler, D.; Burger, K., Synthesis, 1996, 1419)를 상기 기술한 바와 같이(중간체 10.12의 제조) 가공하여 예측되는 중간체 16.01을 수득하였다.

중간체 20.01의 제조

Boc-보호된 아미노산을 메탄올성 HCl과 반응시켜 Boc 그룹을 제거하는 것을 제외하고는, 아미노 에스테르 20.01을 문헌[참조: R. Zhang and. J. S. Madalengoitia (J. Org. Chem. 1999, 64, 330)]의 방법으로 제조하였다(디옥산중 4M HCl을 탈보호에 또한 사용할 수 있다). 보고된 합성의 변형에서, 설포늄 일라이드(ylide)는 상응하는 포스포늄 일라이드로 교체하였다.

중간체 20.04의 제조

단계 1

0℃에서 CH₂Cl₂(100 mL)중 시판되는 아미노산 Boc-Chg-OH, 20.02(센 케미칼스(Senn chemicals) 제조원, 6.64 g, 24.1 mmol) 및 아민 하이드로클로라이드 20.01(4.5 g, 22 mmol)의 용액을 BOP 시약으로 처리하고 실온에서 15시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공속에서 농축시킨 후, 이를 수성 1M HCl로 희석시키고 EtOAc(3 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 포화된 NaHCO₃(200 mL)로 세척하고, 건조(MgS0₄)시키며, 여과하고 진공하에 농축시키고 크로마토그래피((Si0₂, EtOAc/Hex 3:7)하여 무색 고체로서의 화합물 20.03 (6.0 g)을 수득하였다.

단계 2

THF/H₂0(1:1)중 메틸 에스테르 20.03 (4.0 g, 9.79 mmol)의 용액을 LiOH·H₂0 (401 mg, 9.79 mmol)로 처리하고 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 HCl로 산성화하고 진공하에 농축시켜 요구되는 중간체, 유리 산 20.04를 수득하였다.

중간체 20.08의 제조

단계 1

무수 CH₂Cl₂/DMF (50 mL, 1:1)중 Boc-3급-Leu 20.05[플루카(Fluka) 제조원, 5.0 g 21.6 mmol]의 용액을 0℃로 냉각시키고 아민 염 20.01(5.3 g, 25.7 mmol), NMM (6.5 g, 64.8 mmol) 및 BOP 시약(11.6 g, 25.7 mmol)으로 처리하였다. 반응물을 실온에서 24시간 동안 교반하고, 수성 HCl(1 M)로 희석시키고 CH₂Cl₂로 추출하였다. 합한 유기 층을 HCl(수성, 1 M), 포화된 NaHCO₃, 및 염수로 세척하고, 건조(MgS0₄)시키며, 여과하고 진공하에 농축시키고 크로마토그래피(Si0₂, 아세톤/헥산 1:5)로 정제하여 무색 고체로서의 생성물 20.06을 수득하였다.

단계 2

메틸 에스테르 20.06(4.0 g, 10.46 mmol)의 용액을 디옥산중 4M HCl속에 용해시키고 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공하에 농축시켜 아민 하이드로클로라이드 염, 20.07을 수득하고 이를 정제없이 사용하였다.

단계 3

THF(14mL)/아세토니트릴(2mL)중 아민 염 20.07(840mg, 2.64mmol)의 용액을 0℃로 냉각시켰다. 4-니트로페닐클로로포르메이트(800mg, 3.96mmol)에 이어 피리딘(0.64mL, 7.92mmol)을 가하였다. 반응물을 실온으로 3시간에 걸쳐 서서히 가온하면 TLC가, 반응이 완료냄을 나타내었다. 디에틸 에테르(50mL)를 가하고 수득되는 침전물을 여과 제거하였다. 여액을 염화암모늄 포화 용액(1x) 및 염수(1x)로 세척하고, 건조(Na₂SO₄)시키고 농축시켰다. 잔사를 20/80 EtOAc/헥산을 사용하는 섬광 크로마토그래피에 의해 정제하여 1.15g의 요구되는 중간체 20.08을 수득하였다.

중간체 21.01의 제조:

단계 1:

실온에서 아세토니트릴(100mL)중 N-Boc-3,4-데하이드로프롤린 21.02(5.0 g, 23.5 mmol), 디-3급-부틸디카보네이트(7.5 g, 34.4 mmol), 및 4-N,N-디메틸아미노피리딘(0.40 g, 3. 33 mmol)의 교반 용액에 트리에틸아민(5.0 mL, 35.6 mmol)을 가하였다. 수득되는 용액을 당해 온도에서 18시간 동안 교반한 후 이를 진공속에서 농축시켰다. 암갈색 잔사를 10 내지 25% EtOAc/헥산으로 용출시키는 섬광 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 담황색 오일로서의 생성물 21.03(5.29 g, 84%)을 수득하였다.

단계 2:

실온에서 클로로포름(120mL)중 데하이드로프롤린 유도체 21.03(10.1 g, 37.4 mmol), 벤질트리에틸암모늄 클로라이드(1.60 g, 7.02 mmol)의 교반 용액에 50% 수성 수산화나트륨(120 g)을 가하였다. 당해 온도에서 24시간 동안 격렬하게 교반한 후, 암색 혼합물을 CH₂Cl₂(200 mL) 및 디에틸 에테르(600 mL)로 희석시켰다. 층을 분리한 후, 수용액을 CH₂Cl₂/Et₂0(1:2, 3x600 mL)로 추출하였다. 유기 용액을 건조(MgSO₄)시키고 농축하였다. 잔사를 5 내지 20% EtOAc/헥산을 사용하는 섬광 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 회백색 고체로서의 화합물 21.04, 9.34 g (71 %)을 수득하였다.

단계 3:

CH₂Cl₂(25 mL) 및 CF₃CO₂H(50 mL)중 화합물 21.04(9.34 g, 26.5 mmol)의 용액을 실온에서 4.5시간 동안 교반한 후 이를 진공하에 농축시켜 갈색 잔사, 21.05를 수득한 후 이를 추가의 정제없이 단계 4에서 사용하였다.

단계 4:

농 염산(4.5 mL)을 메탄올(70mL)중 단계 3으로부터의 잔사 21.05의 용액에 가하고 수득되는 혼합물을 오일 욕 속에서 65℃로 가온시켰다. 18시간 후, 혼합물을 진공하에 농축시켜 갈색 오일 21.01을 수득하고, 이를 추가의 정제없이 사용하였다.

중간체 22.01의 제조

단계 1

칼륨 비스(트리메틸실릴)아미드(158ml의 톨루엔중 0.5M 용액; 79mmol)를 무수 테트라하이드로푸란(130ml)중 사이클로프로필트리페닐포스포늄 브로마이드(33.12g; 86.4mmol)의 교반 현탁액에 가하고 수득되는 오렌지색 혼합물을 실온에서 질소 대기하에 1시간의 기간 동안 교반한 후, THF(8ml)중 알데하이드 22.02(9.68g; 42.2mmol)를 첨가하였다. 이후에 반응물을 질소 대기하에 2시간의 기간 동안 환류시켰다. 냉각시킨 후, 메탄올, 디에틸 에테르 및 로첼스 염(Rocelles salt)을 가하였다. 유기 상을 분리하고, 염수로 세척하고, 건조시키며 감압하에 농축시켰다. 조 반응 생성물을 EtOAc-헥산(1:99) 내지 EtOAc-헥산(5:95)을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 황색 오일로서의 알켄 22.03(8.47 g)을 수득하였다.

단계 2

MeOH/MeOAc중 1M HCl의 용액을, 14.2m1의 아세틸 클로라이드를 냉 메탄올에 적가하고 수득되는 용액을 실온에서 200ml로 희석시켜 제조하였다. 카바메이트 22.03(9.49g; 37.5mmol)를 메탄올(12ml)속에 용해하고 빙욕속에서 냉각시키면서 MeOH/MeOAc(150ml)중 1M HCl을 가하였다. 수득되는 혼합물을 당해 온도에서 1시간 동안 유지시킨 후, 빙욕을 제거하고 실온에서 밤새 계속 교반하였다. 휘발물을 감압하에 제거하여 황색 오일을 수득하고 이를 다음 단계에서 정제없이 사용하였다.

황색 오일을 THF(30ml) 및 MeOH(20ml)의 혼합물속에 용해시키고 용액이 pH = 9 내지 10이 될 때까지 트리에틸아민(15ml; 108mmol)으로 처리하였다. 빙욕 속에 둔 후, 혼합물을 N-Boc-Gly-OSu(11.22g; 41mmol)로 처리하였다. 빙욕을 제거하고 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 휘발물을 감압하에 제거하고 잔사를 디클로로메탄중 메탄올(1 내지 3%)을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 목적 아미드 22.04(9.09g)를 수득하였다.

단계 3

알콜 22.04(9.09g; 33.6mmol)을 아세톤(118.5ml)속에 용해시키고 2,2-디메톡시프로판(37.4ml; 304 mmol) 및 BF₃:Et₂O(0.32ml; 2.6mmol)로 처리하고 수득되는 혼합물을 실온에서 5.5시간의 기간 동안 교반하였다. 반응 용액을 트리에틸아민 몇 방울로 처리하고 휘발물을 감압하에 제거하였다. 잔사를 헥산중 5 내지 25% EtOAc를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 N,O-아세탈 22.05(8.85g)을 수득하였다.

단계 4

카바메이트 22.05(8.81g; 28.4mmol)를 아세토니트릴(45ml) 속에 용해하고 당해 용액을 질소 대기하에 -40℃로 냉각시켰다. 피리딘(6.9m1; 85.3mmol)에 이어 니트로슘 테트라플루오로보레이트(6.63g; 56.8mmol)를 가하고 수득되는 반응 혼합물을 TLC가, 출발 물질이 잔류하지 않음을 나타낼 때까지(대략 2.25시간) 0℃이하에서 유지시켰다. 피롤리딘(20mol; 240mol)을 가하고 냉각욕을 제거하고 실온에서 1시간 동안 계속 교반한 다음, 휘발물을 감압하에 제거하였다. 잔사를 실리카 겔의 패드를 통해 신속하게 통과시켜 황색 오일을 수득하였다.

황색 오일을 무수 벤젠(220ml)속에 용해하고 팔라듐 아세테이트(0.317g; 1. 41mmol)를 가한 후 수득되는 혼합물을 질소 대기하에 1.5시간의 기간동안 가열하여 환류시켰다. 냉각시킨 후, 휘발물을 감압하에 제거하고 암색 잔사를 EtOAc-헥산(1:4)을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 i) 트랜스-피롤리디논 22.06(1.94g)에 이어 ii) 시스-피롤리디논 22.07 (1.97g)을 수득하였다.

단계 5

새로이 제조한 MeOAc/MeOH(10ml; 상기 기술한 바와 같음) 중 1M HCl을 N,O-아세탈 22.06에 가하고 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 감압하에 제거하고 잔사를 용출제로서 디클로로메탄중 0 내지 4% MeOH를 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 황색 오일로서의 목적 알콜 22.08(1.42g)을 수득하였다.

단계 6

무수 테트라하이드로푸란(55ml)중 락탐 22.08(1.29g; 8.44mmol)의 용액에 리륨 알루미늄 하이드라이드(2.40g; 63.2mmol)를 가하고 수득되는 혼합물을 8시간 동안 환류시켰다. 냉각시킨 후, 물에 이어 15% 수성 NaOH를 가하고 수득되는 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 고체를 THF 및 MeOH로 완전히 세척하였다. 용매를 감압하에 제거하고 잔사를 디클로로메탄 속에 재용해하고, 건조시키며, 감압하에 농축시켜 피롤리딘을 수득하고, 이를 정제없이 사용하였다.

휴니그 염기(Hunigs base)(4.5ml; 25.8mmol)을 -60℃에서 무수 디클로로메탄(50ml)중 N-Boc-L-3급-Leu-OH(1.76g; 7.6mmol), 조 피롤리딘 및 HATU(2.89g; 7. 6mmol)의 혼합물에 질소 대기하에 가하였다. 수득되는 반응물을 밤새 서서히 실온으로 되도록 하였다. EtOAc를 가하고 황색 용액을 희석된 수성 HCl, 포화된 수성 중탄산나트륨, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 잔사를 EtOAc:헥산(1:3)을 사용하는 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 목적 아미드 22.09(2.00g)를 수득하였다.

단계 7

알콜 22.09(2.00g; 5.67mmol)을 아세톤(116ml)속에 용해하고 빙욕 속에서 10분 동안 냉각시켰다. 이후에 당해 용액을 냉각시킨 존슨 시약(Jones reagent)(14. 2ml; 약 2mmol/ml)에 가하고 수득되는 혼합물을 5℃에서 0.5시간 동안 교반하고 냉각욕을 제거하였다. 반응물을 추가로 2시간 동안 실온에서 교반한 후 EtOAc(100ml)중 셀라이트(15g) 및 황산나트륨(28.54g)에 가하였다. 이소프로판올(15ml)을 1분 후에 가한 후 추가로 10분 동안 교반하고 여과하였다. 여액을 감압하에 농축시켜 갈색 오일을 수득하고, 이를 EtOAc 속에 용해하였다. 당해 용액을 물, 3% 수성 시트르산 및 염수로 세척하고, 건조 및 농축시켜 백색 고체로서의 목적 카복실산 22.01(1.64g)을 수득하였다.

중간체 23.01의 제조

단계 1:

무수 메틸렌 클로라이드(35mL)중 에스테르 23.02(6.0g) 및 분자 체(molecular sieve)(5.2g)의 혼합물에 피롤리딘(5.7 mL, 66.36 mmoL)을 가하였다. 수득되는 갈색 슬러리를 실온에서 N₂하에 24시간 동안 교반하고, 여과하며, 무수 CH₃CN으로 세척하였다. 합한 여액을 농축시켜 목적 생성물, 23.03을 수득하였다.

단계 2:

CH₃CN(35mL)중 앞서의 단계로부터의 생성물 23.03의 용액에 무수 K₂CO₃, 메트알릴 클로라이드(2.77g, 30.5 mmoL) 및 NaI(1.07g, 6.7 mmoL)를 가하였다. 수득되는 슬러리를 주위 온도에서 N₂하에 24시간 동안 교반하였다. 50 mL의 빙냉수를 가한 후 2N KHS0₄ 용액을 pH 1이 될 때까지 가하였다. EtOAc(100 mL)를 가하고 혼합물을 0.75시간 동안 교반하였다. 합한 유기 층을 수집하고 염수로 세척하며, MgS0₄위에서 건조시키고, 증발시켜 목적 생성물, 23.04을 수득하였다.

단계 3:

앞서의 단계로부터의 생성물 23.04(2.7 g, 8.16 mmoL)를 디옥산(20mL)속에 용해하고 새로이 제조한 1N LiOH(9 mL)로 처리하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 N₂하에 20시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc속에 용해시키고 H₂0로 세척하였다. 합한 수성 상을 0℃로 냉각시키고 1N HCl을 사용하여 pH 1.65로 산성화하였다. 혼탁한 혼합물을 EtOAc(2 x 100 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, MgS0₄ 위에서 건조시키고 농축시켜 목적하는 산, 23.05(3.40 g)을 수득하였다.

단계 4:

CH₂Cl₂(55mL)중 NaBH(OAc)₃(3.93g, 18.5 mmoL)의 현탁액에 무수 CH₂Cl₂(20 mL) 및 아세트산(2 mL)중 앞서의 단계로부터의 생성물 23.05의 용액에 가하였다. 당해 슬러리를 주위 온도에서 20시간 동안 교반하였다. 빙 냉수(100mL)를 당해 슬러리에 가하고 1/2시간 동안 교반하였다. 유기 층을 분리하고, 여과하고, 건조시키고 증발시켜 목적 생성물, 23.06을 수득하였다.

단계 5:

MeOH(40mL)중 앞서의 단계로부터의 생성물 23.06(1.9g)의 용액에 과량의 CH₂N₂/Et₂O 용액으로 처리하고 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시켜 조 잔사를 수득하였다. 잔사를 EtOAc/헥산의 구배로 용출시키는 실리카 겔상에서 크로마토그래피하여 순수한 목적 생성물, 23.07을 수득하였다.

단계 6:

무수 CH₂Cl₂(40mL)중 앞서의 단계로부터의 생성물 23.07(1.36 g)의 용액에 BF₃·Me₂0(0.7 mL)를 처리하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 20시간 동안 교반하고 포화된 NaHCO₃(30 mL)로 퀀칭시키고 1/2 시간 동안 교반하였다. 유기 층을 분리하고 합한 유기 층을 염수로 세척하고, MgS0₄위에서 건조시키고, 농축시켜 조 잔사를 수득하였다. 잔사를 EtOAc/헥산의 구배로 용출시키는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 0.88g의 목적 화합물, 23.08을 수득하였다.

단계 7:

MeOH(30mL)중 앞서의 단계로부터의 생성물 23.08(0.92 g)의 용액에 실온에서 10% Pd/C(0.16g)을 가하고 주위 온도에서 1atm하에 가수소반응시켰다. 반응 혼합물을 4시간 동안 교반하고 농축 건조시켜 목적 화합물, 23.01을 수득하였다.

중간체 50.01의 제조

단계 1

MeOH(150mL)중 화합물 50.02(15 g)의 용액에 농 HCl(3 내지 4 mL)을 가하고 당해 혼합물을 16시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축시켰다. 잔사를 디에틸 에테르(250 mL) 속에 용해하고 냉각된 중탄산나트륨 포화 용액 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 건조(Na₂SO₄)시키고 농축시켜 메틸 에스테르50.03(12.98 g)를 수득하고 이를 추가의 정제없이 사용하였다.

단계 2:

상기로부터의 메틸 에스테르 50.03을 메틸렌 클로라이드(100 mL)속에 용해하고 -78℃로 질소 대기하에 냉각시켰다. DIBAL(메틸렌 클로라이드중 1.0M 용액, 200 mL)을 2시간의 기간에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 16시간에 걸쳐 가온시켰다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고 MeOH(5 내지 8 mL)를 적가하였다. 수성 10% 나트륨 칼륨 타르타레이트(200 mL)의 용액을 교반하면서 서서히 가하였다. 메틸렌 클로라이드(100mL)로 희석시키고 유기 층을 (일부 백색 침전물과 함께) 분리하였다. 유기 층을 1N HCl(250 mL) 및 염수(200 mL)로 세척하고, 건조(Na₂SO₄)시키고 농축시켜 선명한 오일로서의 알콜 50.04(11.00 g)을 수득하였다.

단계 3:

상기로부터 알콜 50.04를 메틸렌 클로라이드(400 mL)속에 용해시키고 질소 대기하에 0℃로 냉각시켰다. PCC(22.2 g)를 일부씩 가하고 반응 혼합물을 16시간에 걸쳐 실온으로 서서히 가온시켰다. 반응 혼합물을 디에틸 에테르(500 mL)로 희석시키고 셀라이트의 패드를 통해 여과하였다. 여액을 농축시키고 잔사를 디에틸 에테르(500 mL) 속에 용해시켰다. 이를 실리카 겔의 패드를 통과시키고 여액을 농축시켜 알데하이드 50.05를 수득하고 이를 추가의 정제없이 사용하였다.

단계 4:

상기로부터의 알데하이드 50.05를 필수적으로 문헌[참조: Chakraborty et. al., Tetrahedron, 1995, 51(33), 9179-90]의 방법을 사용하여 목적 물질 50.01로 전환시켰다.

중간체 51.01의 제조

목적 중간체 51.01을, 알데하이드 51.02로부터 문헌[참조: T. K. Chakraborty et al., Tetrahedron, 1995, 51(33), 9179-90]에 기술된 과정을 사용하여 수득하였다.

화합물 5000의 제조

단계 1

0℃에서 무수 THF(100mL)중 N-Boc-(S)-발리놀 5000a(10.0 g, 49.2 mmol), 프탈이미드(7.40 g, 50.3 mmol) 및 트리페닐포스핀(13.0 g, 49.6 mmol)의 교반 용액에 디이소프로필아조디카복실레이트(DIAD, 9.8 mL, 49.4 mmol)을 가하였다. 이후에, 수득되는 용액을 실온에서 18시간 교반한 후 이를 농축 건조시켰다. 잔사를 CH₂Cl₂ 속에 용해하고 실리카 겔 섬광 크로마토그래피(헥산중 10 내지 40% EtOAc)로 정제하여 생성물 5000b을 수득하였다.

단계 2

실온에서 메탄올(100mL)중 화합물 5000b(8.8 g, 26.5 mmol)의 교반 용액에 하이드라진 일수화물(1.4 mL, 28.8 mmol)을 가하고 수득되는 용액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 추가의 하이드라진 일수화물(0.5 mL, 10.3 mmol)을 가하고 당해 혼합물을 환류시키고 4시간 동안 교반한 후 이를 실온으로 냉각시켰다. 침전물을 여과 제거하고 용액을 농축 건조시켰다. 잔사를 CH₂Cl₂ 속에 용해하고 침전물을 다시 여과 제거하였다. 농축시킨 후, 황색 오일을 수득하였다(8.0 g, 정량적 수율).

단계 3

아세톤 욕중 -30℃에서 CH₂Cl₂I(100 mL)중 화합물 5000c (1.0 g, 4.94 mmol)의 용액에 3-클로로프로필 설포닐 클로라이드(0.60 mL, 4.93 mmol) 및 트리에틸아민(1.10 mL, 7.89 mmol)을 가하였다. 수득되는 용액을 실온으로 욕과 함께 가온시키고 18시간 동안 교반하였다. 추가의 CH₂Cl₂ 및 1N Na₂CO₃ 용액을 가하고 층을 분리하였다. 수용액을 CH₂Cl₂(2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기 용액을 합하고, 여과하고, 건조(MgS0₄)시키며 농축시켰다. 잔사를 10 내지 40% 아세톤/헥산을 사용하는 섬광 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 1.0g(59%)의 화합물 5000d를 수득하였다.

단계 4

무수 DMF(100mL)중 화합물 5000d (1.0 g, 2.92 mmol) 및 수소화나트륨(0.32 g, 60%, 8.0 mmol)을 실온에서 8시간 동안 교반하였다. 0℃로 냉각시킨 후, 5% 인산 수용액(110 mL)에 이어 EtOAc(150 mL)를 조심스럽게 가하였다. 층을 분리하고 유기 용액을 5% 인산 수용액(100 mL) 및 중탄산나트륨 포화 용액(2 x 100 mL)으로 세척한 후 이를 건조시키고, 여과하며 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 섬광 크로마토그래피(헥산 중 0 내지 40% 아세톤)로 정제하여 0.63 g의 생성물 5000e(70%)를 수득하였다.

단계 5

디옥산중 4N HCl중 화합물 5000e(0.62 g, 2.02 mmol)의 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 이후에, 이를 진공하에 농축 건조시켜 0.60 g의 생성물 5000 (정량적 수율)을 수득하였다.

식 5001의 화합물의 제조

단계 1

화합물 5001a를 화합물 5000c 및 4-브로모부티릴 클로라이드로부터 화합물 5000d의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

단계 2

식 5002의 화합물의 제조

단계 1

화합물 5002a를 화합물 5000c 및 2-브로모에틸 클로로포르메이트로부터 화합물 5000d의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

단계 2

화합물 5002b를 화합물 5002a로 부터 화합물 5000e의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

단계 3

화합물 5002를 화합물 5002b로 부터 화합물 5000의 제조에 기술된 과정(단계 5)에 따라 제조하였다.

식 5003의 화합물의 제조

단계 1

화합물 5003b를 N-Boc-(S)-3급-류시놀 5003a로 부터 화합물 5000b의 제조에 대해 기술된 과정(단계 1)에 따라 제조하였다.

단계 2

화합물 5003을 화합물 5003b로 부터 화합물 5000의 제조에 대해 기술된 과정(단계 5)에 따라 제조하였다.

식 5004의 화합물의 제조

단계 1

화합물 5004a를 화합물 5003b로 부터 화합물 5000c의 제조에 대해 기술된 과정(단계 2)에 따라 제조하였다.

단계 2

화합물 5004b를 화합물 5004a로 부터 화합물 5000d의 제조에 대해 기술된 과정(단계 3)에 따라 제조하였다.

단계 3

화합물 5004c를 화합물 5004b로 부터 화합물 5000e의 제조에 대해 기술된 과정(단계 4)에 따라 제조하였다.

단계 4

화합물 5004를 화합물 5004c로 부터 화합물 5000의 제조에 대해 기술된 과정(단계 5)에 따라 제조하였다.

식 5005의 화합물의 제조

단계 1

화합물 5005a를 화합물 5004a로 부터 화합물 5002a의 제조에 대해 기술된 과정(단계 1)에 따라 제조하였다.

단계 2

화합물 5005b를 화합물 5005a로 부터 화합물 5002b의 제조에 대해 기술된 과정(단계 2)에 따라 제조하였다.

단계 3

화합물 5005를 화합물 5005b로 부터 화합물 5000의 제조에 대해 기술된 과정(단계 5)에 따라 제조하였다.

식 5006의 화합물의 제조

단계 1

화합물 5006a를 화합물 5004a 및 4-브로모부티릴 클로라이드로 부터 화합물 5000d의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

단계 2

화합물 5006을 화합물 5006a로 부터 화합물 5000의 제조에 대해 기술된 과정(단계 5)에 따라 제조하였다.

식 5007의 화합물의 제조

단계 1

화합물 5007a를 화합물 5004a 및 2-카보메톡시-3-티오펜설포닐 클로라이드로 부터 화합물 5000d의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

단계 2

-78℃에서 무수 톨루엔(40mL)중 에스테르 5007a(4.65 g, 11.1 mmol)의 용액에 톨루엔(23.0 mL, 34.5 mmol)중 DIBAL-H의 용액을 가하였다. 당해 혼합물을 -78℃에서 20분 동안 교반하고 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 메탄올(20 mL)을 가한 후 10% 시트르산 수용액(100 mL)을 가하였다. 5분 동안 교반한 후, EtOAc(200 mL)를 가하고 층을 분리하였다. 수용액을 EtOAc(2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기 용액을 합하고, 건조(MgS0₄)시키고, 여과하며 농축시켰다. 잔사를 10 내지 50% 아세톤/헥산을 사용하는 섬광 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 4.6 g(정량적 수율)의 화합물 5007b를 수득하였다.

단계 3

0℃에서 CH₂Cl₂I(50 mL)중 화합물 5007b(1.04 g, 2.65 mmol)의 용액에 메탄설포닐 클로라이드(0.23 mL, 2.97 mmol) 및 트리에틸아민(0.80 mL, 5.74 mmol)을 가하였다. 당해 혼합물을 실온으로 빙욕과 함께 가온시키고 18시간 동안 교반하였다. EtOAc(200 mL) 및 5% H₃PO₄ 용액(100 mL)을 가하고 층을 분리하였다. 유기 용액을 1N 중탄산나트륨 용액(100 mL)으로 세척한 후 건조(MgS0₄)시키고, 여과하며 농축시켰다. 잔사를 10 내지 50% 아세톤/헥산을 사용하는 섬광 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 0.80 g(73%)의 화합물 5007c를 수득하였다.

단계 4

무수 DMF(100mL)중 화합물 5007d(1.17 g, 2.85 mmol) 및 탄산세슘(1.40 g, 4.30 mmol)의 현탁액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 물(50 mL), 염수(50 mL) 및 EtOAc(300 mL)를 가하고 층을 분리하였다. 유기 용액을 물(3 x 150 mL)로 세척한 후 건조시키고, 여과하며 농축시켜 0.99g의 목적 생성물 5007d(93%)를 수득하였다.

단계 5

화합물 5007을 화합물 5007d로 부터 화합물 5000의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

식 5008의 화합물의 제조

단계 1

화합물 5008b을 화합물 5003a 및 5008a로 부터 화합물 5000b의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

단계 2

화합물 5008을 화합물 5008b로 부터 화합물 5000의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

식 5009의 화합물의 제조

단계 1

-18℃에서 CH₂Cl₂(50 mL)중 화합물 5008b(1.02 g, 2.93 mmol)의 용액에 m-클로로퍼벤조산(3.03 g, 17.6 mmol)을 가하고 수득되는 용액을 -18℃에서 1시간 동안 교반한 후 이를 냉장실에 밤새(16 시간) 두었다. 실온에서 추가로 6시간 동안 교반한 후, 추가의 CH₂Cl₂를 가하고 용액을 10% NaHS0₄ 및 1N Na₂CO₃로 세척하였다. 유기 용액을 건조(MgS0₄)시키고, 여과하며 농축시켰다. 잔사를 5 내지 60% 아세톤/헥산을 사용하는 섬광 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 0.49g(46%)의 생성물 5009a를 수득하였다.

단계 2

화합물 5009를 화합물 5009a로 부터 화합물 5000의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

식 5010의 화합물의 제조

단계 1

화합물 5010a를 화합물 5004a 및 메틸 2-(클로로설포닐)벤조에이트로 부터 화합물 5000d의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

단계 2

화합물 501Ob를 화합물 5010a로 부터 화합물 5007b의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

단계 3

화합물 5010c를 화합물 5010b로 부터 화합물 5007c의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

단계 4

화합물 5010d를 화합물 5010c로 부터 화합물 5007d의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

단계 5

화합물 5010을 화합물 5010d로 부터 화합물 5000의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

식 5011의 화합물의 제조

단계 1

무수 DMF중 화합물 5010a(0.60 g, 1.45 mmol) 및 탄산세슘 (0.707 g, 2.17 mmol)의 현탁액을 40℃에서 18시간 동안 교반하였다. 물(50 mL), 염수(50 mL) 및 EtOAc(150 mL)를 가하고 층을 분리하였다. 유기 용액을 물(3 x 80 mL)로 세척한 후, 이를 건조시키고, 여과하며 농축시켜 0.17 g의 목적 생성물 5011a(31%)을 수득하였다.

단계 2

화합물 5011를 화합물 5011a로 부터 화합물 5000의 제조의 단계 5에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

식 5012의 화합물의 제조

단계 1

화합물 5012a를 화합물 5003a 및 글루타르이미드로부터 화합물 5000b의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

단계 2

화합물 5012를 화합물 5012a로 부터 화합물 5000의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

식 5013의 화합물의 제조

단계 1

무수 THF(25mL)중 아민 5004a(3.0 g, 13.9 mmol) 및 1,4-부탄 설톤(1.8 mL, 17.7 mmol)의 용액을 16시간 동안 환류시켰다. 추가의 설톤(0.6 mL, 5.89 mmol)을 가하고 혼합물을 다른 4시간 동안 환류시켰다. 옥시염화인(2.6 mL, 27.9 mmol)을 가하고 당해 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 0℃로 냉각시킨 후, 50% w/w NaOH 용액을 물(30 mL)과 함께 pH가 12를 초과할 때까지 서서히 가하였다. 이후에, 에테르(200 mL)를 가하고 층을 분리하였다. 수용액을 THF/디에틸 에테르(1:1, 150 mL)로 2회 추출하였다. 유기 용액을 합하고, 건조(MgS0₄)시키고, 여과하며 농축시켰다. 잔사를 10 내지 50% 아세톤/헥산을 사용하는 섬광 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 1.49 g의 화합물 5013a(32%)를 수득하였다.

단계 2

화합물 5013을 화합물 5013a로 부터 화합물 5000의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

식 5014의 화합물의 제조

단계 1

실온에서 무수 DMF(400mL)중 화합물 5014a(10.0 g, 41.1 mmol), HOOBt(8.7 g, 53.3 mmol), EDCl(10.0 g, 52.2 mmol) 및 염화암모늄(8.90 g, 166 mmol)의 현탁액에 4-메틸모르폴린(22.5 mL, 204.5 mmol)을 가하였다. 당해 혼합물을 실온에서 70시간 동안 교반하였다. 염수(150 mL) 및 5% 인산 수용액(150 mL)에 이어 EtOAc(800 mL)를 가하였다. 층을 분리하고 유기 용액을 5% 인산 수용액(400 mL) 및 중탄산나트륨 포화 용액(2 x 400 mL)으로 세척한 후, 이를 건조시키고, 여과하며 농축시켜 8.35 g의 생성물 5014b(84%)를 수득하였다.

단계 2

실온에서 무수 THF(100mL)중 아미드 5014b(8.35 g, 34.5 mmol)의 용액을 톨루엔(43.0 mL, 86.0 mmol)중 보란 메틸 설파이드 착물의 용액에 가하고 당해 혼합물을 4시간 동안 환류시켰다. 추가의 THF(100 mL)를 가하고 3N HCl 용액을 가스 방출이 관측되지 않을 때까지 서서히 가하였다. 당해 혼합물에 50% w/w NaOH 용액을 pH가 12를 초과할 때까지 서서히 가하였다. 이후에, 에테르(200 mL)를 가하고 층을 분리하였다. 수용액을 THF/디에틸 에테르(1:1, 150 mL)로 2회 추출하였다. 유기 용액을 합하고, 건조(MgS0₄)시키고, 여과하며 농축시켜 6.50 g의 생성물 5014c (83%)를 수득하였다.

단계 3

실온에서 무수 THF(50mL)중 아민 5014c(0.80 g, 3.50 mmol) 및 N-카복시 프탈이미드 5014d (0.90 g, 4.11 mmol)의 용액에 트리에틸아민(1.0 mL, 7.17 mmol)을 가하였다. 당해 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. EtOAc(100 mL) 및 5% 인산 수용액(100 mL)을 가하고 층을 분리하였다. 유기 용액을 5% 인산 수용액(80 mL)으로 세척하고, 건조시키고, 여과하며 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 섬광 크로마토그래피(헥산 중 5 내지 50% EtOAc)로 정제하여 0.82g의 생성물 5014e (65%)를 수득하였다.

단계 4

화합물 5014를 화합물 5014e로 부터 화합물 5000의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

식 5015의 화합물의 제조

화합물 5015를 화합물 5014c로 부터 화합물 5007의 제조에 대해 기술된 단계 1 내지 5의 과정에 따라 제조하였다.

식 5016의 화합물의 제조

단계 1

화합물 5016b를 화합물 5016a로 부터 화합물 5014b의 제조에 대해 기술된 단계 1의 과정에 따라 제조하였다.

단계 2

화합물 5016c를 화합물 5016b로 부터 화합물 5014c의 제조에 대해 기술된 단계 2의 과정에 따라 제조하였다.

단계 3 내지 7

화합물 5016을 화합물 5016c로 부터 화합물 5010의 제조에 대해 기술된 단계 3 내지 7의 과정에 따라 제조하였다.

식 5017의 화합물의 제조

단계 1 및 2

화합물 5017을 화합물 5016c 및 1,4-부탄 설톤으로 부터 화합물 5013의 제조에 대해 기술된 단계 1 및 2의 과정에 따라 제조하였다.

식 5018의 화합물의 제조

단계 1 및 2

화합물 5018을 화합물 5003a 및 모르폴린 3,5-디온으로 부터 화합물 5012의 제조에 대해 기술된 단계 1 및 2의 과정에 따라 제조하였다.

식 5019의 화합물의 제조

단계 1 및 2

화합물 5019를 화합물 5003a 및 3,3-디메틸 글루타르이미드로 부터 화합물 5012의 제조에 대해 기술된 단계 1 및 2의 과정에 따라 제조하였다.

식 5020의 화합물의 제조

단계 1

0℃에서 무수 CH₂Cl₂(20 mL)중 클로로설포닐 이소시아네이트(0.80 mL, 9.25 mmol)의 용액에 벤질 알콜(0.96 mL, 9.25 mmol)을 서서히 가하였다. 수득되는 용액을 0℃에서 30분 동안 교반한 후, 이를 0℃에서 무수 CH₂Cl₂중 아민 5020a(2.0 g, 9.25 mmol)의 용액에 서서히 가하였다. 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 및 실온에서 다른 1시간 동안 교반한 후 이를 농축 건조시켰다. 잔사를 EtOAc 속에 용해시키고 1N HCl 용액으로 2회 및 염수로 1회 세척하였다. 이후에, 이를 건조시키고, 여과하며 농축시켰다. 생성물을 실리카 겔 섬광 크로마토그래피(헥산중 20 내지 70% 아세톤)로 정제하여 생성물 5020b(3.11g, 78%)를 수득하였다.

단계 2

0℃에서 무수 CH₂Cl₂(40mL)중 화합물 5020b(1.60 g, 3.73 mmol), 트리페닐포스핀(1.46 g, 5.57 mmol) 및 3-브로모-1-프로판올(0.36 mL, 4.12 mmol)의 용액에 디이소프로필아조디카복실레이트(DIAD, 1.10 mL, 5.55 mmol)를 가하였다. 이후에, 수득되는 용액을 실온에서 2시간 동안 교반한 후 이를 진공하에 농축 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔 섬광 크로마토그래피(헥산중 10 내지 40% 아세톤)로 정제하여 생성물 5020c(1.62 g, 79%)를 수득하였다.

단계 3

무수 DMF(100mL)중 화합물 5020d(1.61 g, 2.93 mmol) 및 탄산세슘(1.43 g, 4.39 mmol)의 현탁액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 물(50 mL), 염수(50 mL) 및 EtOAc(300 mL)를 가하고 층을 분리하였다. 유기 용액을 물(3 x 150 mL)로 세척한 후 이를 건조시키고, 여과하며 농축시켜 목적 생성물 5020d(1.40 g, 정량적 수율)를 수득하였다.

단계 4

무수 에탄올(50mL)중 화합물 5020d(1.40 g, 2.98 mmol) 및 10% Pd-C(습윤 기준) 및 메탄올(50 mL)을 실온에서 2.5시간 동안 격렬하게 교반하였다. 촉매를 셀라이트 패드를 통해 여과 제거하여 생성물 5020e(1.10 g, 정량적 수율)를 수득하였다.

단계 5

디옥산 중 4N HCl 중 화합물 5020e의 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 이후에, 이를 진공하에 농축 건조시켜 생성물 5020를 수득하였다.

식 5021의 화합물의 제조

단계 1 및 2

화합물 5021를 화합물 5003a 및 테트라메틸렌 글루타르이미드로 부터 화합물 5012의 제조에 대해 기술된 단계 1 및 2의 과정에 따라 제조하였다.

식 5022의 화합물의 제조

단계 1

무수 톨루엔 중 알데하이드 5022a 및 아민 5004a의 혼합물을 환류시키고 46시간 동안 교반한 후 이를 냉각시키고 진공하에 농축시켰다. 잔사를 실리카 겔 섬광 크로마토그래피(헥산중 5 내지 40% EtOAc)로 정제하여 생성물 5022b(2.90 g, 79%)를 수득하였다.

단계 2

화합물 5022b를 4N HCl로 30분 동안 실온에서 처리하고 진공중 농축시켜 생성물 5022를 수득하였다.

실시예들의 제조

식 5146의 화합물의 제조

단계 1

0℃에서 무수 CH₂Cl₂(30mL)중 화합물 5020b(2.0g, 4.66 mmol), 트리페닐포스핀(1.83g, 6.99 mmol) 및 2-브로모-에탄올(0.31 mL, 5.12mmol)의 용액에 디이소프로필아조디카복실레이트(DIAD, 0.996 mL, 6.99 mmol)를 가하였다. 이후에, 수득되는 용액을 실온에서 2시간 교반한 후 이를 진공하에 농축 건조시켰다. 잔사를 실리카 겔 섬광 크로마토그래피(헥산중 10 내지 40% 아세톤)로 정제하여 생성물 5051 a(1.50 g, 63%)를 수득하였다.

단계 2

무수 DMF(100mL)중 화합물 5051a(1.5 g, 2.79 mmol) 및 탄산세슘(1.36 g, 4.19 mmol)의 현탁액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 물(50 mL), 염수(50 mL) 및 EtOAc(300 mL)를 가하고 층을 분리하였다. 유기 용액을 물(3 x 150 mL)로 세척한 후 이를 건조시키고, 여과하며 농축시켜 1.37g의 조 생성물을 수득하였다.

섬광 컬럼(10 내지 30% 아세톤-헥산)을 통해 정제하여 0.98g의 화합물 5051b (82 %)를 수득하였다.

단계 3

화합물 5051b(0.98 g, 2.15 mmol, 1 당량)에 실온에서 디옥산(25mL)중 4M HCl을 가하였다. 1시간 동안 교반하였다. TLC는, 출발 물질이 없음을 나타내었다. 용매를 증발 제거하고 헥산에 이어 에테르로 공비증발시켰다. 비-극성 물질을 에테르로 세척 제거하고 고 압력하에 주말에 걸쳐 유지시켜 생성물을 담황색 고체(842 mg, 정량적 수율)로서 수득하였다. 생성물을 정제없이 사용하였다.

단계 4

디클로로메탄(50ml)중 아민 하이드로클로라이드 1.04(3g, 9.4 mmol)에 50 ml의 NaHC0₃ 포화 용액을 가하였다. 빙온에서 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 교반을 중지하고 포스겐(2 당량, 헥산 중 20 %, 10 mL)을 하부 층으로 주사하고 즉시 격렬히 교반하면서 재저장하였다. 이때 및 2시간 후 TLC를 체크하면, 이는 출발 물질의 완전한 소모를 나타내었으며, 이후 층을 분리하였다. 수성 층을 디클로로메탄(3 ml)으로 1회 이상 세척하고 무수 황산나트륨 위에서 건조시켰다. 여과하고 용매를 회전 증발기를 사용하여 감압하에 뜨거운 욕없이 이의 용적의 1/2로 증발시킨 후 N₂로 15분 동안 플러싱하였다. 디클로로메탄으로 33.5mL로 희석시키고 추가의 커플링을 위해 0.28M 용액으로서 사용하였다.

단계 5

DCM(10ml)중 앞서 기술된 바와 같이 제조한 아민 5051c에 DIPEA(8 당량, 2.19 mL, 12.54 mmol)을 빙 온도에서 가하였다. 이소시아네이트 5051d(1 당량, 7.46의 0.028M 용액)을 N₂ atm하에 가하고 30분 동안 빙온에서 및 90분 동안 실온에 서 교반하였다. 10% 시트르산으로 퀀칭시키고 EtOAc로 추출하고 염수로 세척하였다. 무수 황산나트륨위에서 건조시키고 여과하며 용매를 증발 제거하였다. 조 생성물을 섬광 컬럼(10 내지 40 % wt 아세톤-헥산)을 통해 정제하여 800 mg의 화합물 5051e을 백색 고체(58 %)로서 수득하였다. ¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz), δ, 7.4 (m, 5H), 5.3 (bs, 2H), 4.4 (d, 2H,), 4-3.6 (m, 6H), 3.6 (s, 3H), 3.25 (m, 2H), 3 (m, 2H), 1.02- 0.98 (m, 25H).

단계 6

메탄올(10mL)중 화합물 5051e(0.600g, 0.904 mmol) 및 10% Pd-C(10 % wt, 60 mg)의 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 격렬하게 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하여 생성물 5051f(0.45 g, 94 %)를 수득하였다.

단계 7

빙온에서 DMF(10mL)중 설프아미드 5051f(400 mg, 0.756 mmol, 1 당량)에 Cs₂CO₃(368 mg, 1.5 당량, 1.134 mmol) 및 MeI(3.78mmol, 5 당량, 0.355 mL)를 질소 대기하에 가하였다. 실온에서 밤새 교반하였다. TLC 및 LCMS는, 출발 물질이 존재하지 않음을 나타내었으며, 물로 퀀칭시키고 EtOAC로 추출하였다. 물 및 염수로 4회 세척하고 무수 황산나트륨 위에서 건조시켰다. 여과하고 용매를 증발 제거하고 섬광 컬럼(20 내지 40 % 아세톤-헥산)을 통해 정제하여 390 mg의 화합물 5051g(95%)를 수득하였다. ¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) 4.4 (d, 1H), 3.99-4.01 (d, 1H), 3.8 (d, 2H), 3.7 (s, 3H), 3.6 (m, 2H), 3.25 (m, 2H), 3.01 (m, 3H), 2.8 (s, 3H), 1.4 (m, 1H). 1.2 (m, 1H), 1.00- 0.98 (m, 24H).

단계 8

디옥산(10ml)중 메틸 에스테르, 5051g(300 mg, 0.607mmol, 1 당량)에 LiOH(1.8 mL, 수중 1N, 3 당량)을 가하고 밤새 교반하였다. 1N HCl로 퀀칭시키고 EtOAC로 추출하였다. 염수로 세척하고 무수 황산나트륨 위에서 건조시켰다. 여과하고 용매를 증발 제거하여 조 생성물(290 mg, 90 %)을 수득하였다.

단계 9

0℃에서 DMF(10ml)중 앞서 기술한 바와 같이 제조한 아민 10.11(16.51 mg, 0.079mmol, 1.2 당량), 및 화합물 5051h(35 mg, 0.066 mmol, 1 당량)의 용액에 HATU(1.2 당량, 0.079 mmol, 30.18 mg)에 이어 DIPEA(8 당량, 92.44 μL, 0.529 mmol)를 가하였다. 빙온에서 1시간에 이어 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 1N HCl로 퀀칭시키고 EtOAc로 추출하였다. 포화된 중탄산나트륨에 이어 염수로 세척하였다. 무수 황산나트륨위에서 건조시키고, 여과하며 용매를 증발 제거하여 생성물(52mg, 100 %)을 수득하였다.

단계 10

빙온에서 DMF/톨루엔의 1:1 혼합물(6 mL)중 하이드록시 아미드 5051i(60 mg, 0.087mmol, 1 당량)에 EDCl·HCl(167 mg, 10 당량, 0.878 mmol) 및 디클로로아세트산(36.29 μL, 5 당량, 0.439 mmol)을 가하고 5분 동안 교반하였다. 이후에, 실온에서 추가로 3시간 교반하였다. 염수로 퀀칭시키고 1N HCl에 이어 포화된 NaHC0₃ 및 다시 염수로 세척하였다. 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하며 용매를 증발시켰다. 조 생성물을 제조 TLC(40 % 아세톤-헥산)로 정제하여 25.2 mg의 화합물 5146(43 %)를 수득하였다. LRMS, m/z, 682 [(M+1)], 375.

식 5237의 화합물의 제조

단계 1

메탄올중 화합물 5051b(1.16 g, 2.5 mmol)에 N₂ 대기하에 배기후 Pd/C(5 중량%, 116 mg)를 가하였다. 다시 배기시키고 H₂하에 90분 동안 교반하였다. TLC는 출발 물질의 완전한 소모를 나타내었다. 여과하고 용매를 증발시켜 화합물 5052a (819 mg, 100%)를 수득하였다.

단계 2

DMF(10ml) 중 아미노 화합물(285 mg, 1 당량)에 2-요오도 프로판(5 당량) 및 탄산세슘(1.5 당량)을 빙 온에서 가하고 밤새 교반하였다. 반응 혼합물의 온도를 실온으로 서서히 가온시켰다. 물로 퀀칭시키고 EtOAc로 추출하고 합한 유기 추출물을 염수로 세척하였다. 무수 황산나트륨 위에서 건조시키고, 여과하며, 용매를 증발 제거하였다. 조 생성물 5052b를 다음 단계에서 그대로 사용하였다(310 mg, 96 %). ¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) 4.5 (d, 1H), 3.8-3.6 (m, 2H), 3.4-3.2 (m, 2H), 3.01-2.8 (m, 2H), 1.9 (m, 1H), 1.4 (s, 9H), 1.2 (dd, 6H), 0.98 (s, 9H).

단계 3

화합물 5052b를 실온에서 디옥산중 4N HCl 속에 용해시키고 당해 용액을 1시간 동안 교반하였다. TLC는 출발 물질이 존재하지 않음을 나타내었다. 용매를 증발 제거하고 헥산에 이어 에테르와 함께 공비증발시켰다. 고 진공하에 밤새 유시시켜 221 mg의 화합물 5052c(96 %)를 수득하였다.

단계 4

DCM(5ml)중 아민 염(180mg, 0.60mmol, 1 당량)을 용해하고 5 mL의 NaHCO₃ (포화됨)을 빙온에서 가하였다. 2분 동안 격렬하게 교반하였다. 교반을 중지하고 포스겐(2 당량)을 반응 혼합물에 주사하고 격렬하게 교반하면서 재저장하였다. 90분 후, 층을 분리하고 무수 황산나트륨위에서 건조시켰다. 여과하고 용매를 뜨거운 욕의 부재하에 진공하에서 증발시켰다. DCM으로 희석시키고 0.02 M 스톡 용액으로서 유지시켰다.

단계 5

빙온에서 DMF중 산 1.17(500mg, 1.37 mmol, 1 당량) 및 아민 하이드로클로라이드(317.8 mg, 1.37 mmol, 1 당량)의 혼합물에 HATU(1.2 당량, 619 mg) 및 DIPEA (6 당량, 8.15mmol, 1.42 mL)를 N₂하에 가하고 밤새 교반하였다. 온도를 실온으로 서서히 가온되도록 하였다. 1N HCl로 퀀칭시키고 EtOAc로 추출하였다. NaHC0₃ (포화된)에 이어 염수로 세척하였다. 빙-냉수(5 x 20 ml)에 이어 다시 염수로 세척하였다. 무수 Na₂SO₄ 위에서 건조시키고 여과하며 용매를 증발 제거하여 580 mg의 화합물 5052e(77 %)를 수득하였다.

단계 6

실온에서 DCM(15mL)중 조 하이드록시 아미드 5052e(1.05mmol, 580mg, 1 당 량)에 데쓰-마틴 퍼요오디난(897mg, 2.11 mmol, 2 당량)을 가하였다. 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 포화된 NaHC0₃ 및 나트륨 비스설파이트로 퀀칭시키고, EtOAc로 추출하였다. 염수로 세척하고 무수 황산나트륨 위에서 건조시켰다. 용매를 여과 및 증발시켰다. 조 생성물을 섬광 컬럼(10 내지 40 % 아세톤-헥산)에 의해 정제하여 450 mg의 케토아미드 생성물을 수득하였다. 당해 생성물을 디옥산중 4N HCl 용액속에 용해하고 실온에서 3시간 교반한 후 이를 진공하에 농축 건조시켜 생성물 5052f(0.40 g, 77 %)를 수득하였다.

단계 7

DCM(5ml)중 아민 염, 5052f(20mg, 0.041 mmol, 1 당량)에 DIPEA (6 당량)을 빙온에서 가하였다. 이소시아네이트, 5052d(1.1 당량, 0.045 mmol, 2.27mL의 0.02M 용액)를 N₂ atm하에 가하고 빙온에서 30분 및 실온에서 90분 교반하였다. 시트르산으로 퀀칭시키고 EtOAc로 추출하고 염수로 세척하였다. 무수 황산나트륨 위 에서 건조시키고 여과하며 용매를 증발 제거하였다. 조 생성물을 섬광 컬럼(10 내지 40 % 아세톤-헥산)을 통해 정제하여 12 mg의 화합물 5237(40 %)을 수득하였다.

화합물 5250의 제조

단계 1

화합물 5250a를 화합물 20.03으로 부터 화합물 20.08의 제조에 대해 기술한 과정에 따라 제조하였다. 0℃에서 무수 DCM(60mL)중 아민 5010(0.817 g, 2.68 mmol) 및 카바메이트 5250a(0.976 g, 2.06 mmol)의 용액에 DIPEA(0.90 mL, 5.15 mmol)를 가하였다. 당해 용액을 실온으로 빙욕과 함께 가온되도록 하고 18시간 동 안 교반한 후 이를 농축시켰다. 잔사를 EtOAc 속에 용해시키고 5% H₃PO₄ 용액 및 중탄산나트륨 포화 용액으로 세척하였다. 생성물을 실리카 겔 섬광 크로마토그래피로 정제하여 생성물 5250b(1.07g, 86%)를 수득하였다.

단계 2

THF/MeOH/H₂O(1:1:1, 30 mL)중 메틸 에스테르 5250b(1.06g, 1.76mmol) 및 LiOH(0.105g, 4.40mmol)의 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 메탄올 및 THF를 감압하에 제거하였다. 수용액을 1N HCl 수용액(50mL)을 사용하여 pH 약 2로 산성화한 후 고체 염화나트륨으로 포화시킨 후 이를 EtOAc(3x150 mL)로 추출하였다. 유기 용액을 합하고, 건조(MgS0₄)시키고, 여과하고 진공하에 농축시켜 백색 고체 5250c(정량적 수율)를 수득하였다.

단계 3

-20℃에서 무수 DMF(6mL) 및 DCM(6mL)중 화합물 5250c(0.052 g, 0.088 mmol), HOOBt(0.022 g, 0.132 mmol), EDCl(0.027 g, 0.141 mmol) 및 아민 하이드로클로라이드 13.01(0.030 g, 0.132 mmol)의 현탁액에 4-메틸모르폴린(0.030 mL, 0.273 mmol)을 가하였다. 혼합물을 -20℃에서 20분 동안 교반한 후 냉장실에서 18시간 동안 교반하였다. 염수(30 mL) 및 5% 인산 수용액(30 mL)에 이어 EtOAc(100 mL)를 가하였다. 층을 분리하고 유기 용액을 5% 인산 수용액(50 mL) 및 중탄산나트륨 포화 용액(2 x 50 mL)으로 세척한 후, 이를 건조시키고, 여과하며 농축시켜 생성물 5250d(정량적 수율)를 수득하였다

단계 4

CH₂Cl₂중 하이드록시아미드 5250d 및 데쓰-마틴 퍼요오디난(g)의 혼합물을 2시간 동안 교반하고, Na₂S₂0₃ 용액 및 NaHCO₃ 포화 용액으로 퀀칭시켰다. 층을 분리한 후, 유기 용액을 DCM으로 2회 추출하고 합한 유기 용액을 건조시키고, 여과하며, 농축시켜 생성물 5250(0.048 g, 72 %, 2개 단계)을 수득하였다.

화합물 5648의 제조

단계 1

CH₂Cl₂(100.0mL)중 (S)-3급-류시놀 (5.0 g, 42.7 mmol)의 냉각 용액(0℃)에 벤질 클로로포르메이트(6.7 mL, 47.0 mmol)에 이어서 휴니그 염기(Hunig's base)(9.3 mL, 53.3 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 밤새 가온되도록 하고, 에틸 아세테이트(500 mL)로 희석시키고, 10% KH₂PO₄에 이어 포화된 NaHC0₃ 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 MgS0₄ 위에서 건조시키고 농축시켜 화합물 5500a (10.7 g, 100%)를 수득하였다.

단계 2

CH₂Cl₂(100.0mL)중 화합물 5500a(10.7 g, 42.7 mmol)의 냉각된 용액에 피리딘(20.0 mL)에 이어, 메탄설포닐 클로라이드(3.63 mL, 47.0 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 밤새 가온되도록 하고, 농축시키고, 에틸 아세테이트(500 mL) 속에 재용해하고, 포화된 NaHC0₃ 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 MgS0₄ 위에서 건조시키고, 농축시키며 에틸 아세테이트/헥산(1:4)을 사용하여 Si0₂ 위에서 섬광 크로마토그래피에 의해 정제하여 화합물 5500b(14.0 g, 100 %)를 수득하였다.

단계 3

물(400μL)을 함유하는 PhMe(72mL)중 화합물 5500b(3.1g, 9.9 mmol)의 용액에 TBAB(582 mg, 1.8 mmol), K₂CO₃(2.72 g, 1.97 mmol) 및 1-하이드록시피리딘(937 mg, 9.85 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 교반하연서 밤새 환류시키고, 여과하고, 증발시키며 농축시켰다. 조 물질을 에틸 아세테이트/CH₂Cl₂(1:9 내지 1:1)를 사용하는 Si0₂ 위에서 섬광 크로마토그래피에 의해 정제하여 화합물 5500c(1.15 g, 35 %)를 수득하였다.

단계 4

MeOH(50mL) 중 화합물 5500c(1.15 g)의 용액에 Pd/C(10% w/w, 450 mg)를 가하고 수소 대기(40 PSI)하에 파르 진탕기 속에 두었다. 반응이 1.2시간 후에 정지되면 화합물 5500d가 정량적으로 형성되며 화합물 5500e가 4시간 후 정량적으로 형성되었다. 어떤 한 경우의 반응 혼합물을 셀라이트의 짧은 패드 위에서 여과하여 상응하는 아민을 수득하였다.

단계 5

포화된 NaHC0₃(7.0 mL)를 CH₂Cl₂(7 mL)중 화합물 5500d(194.0 mg, 1 mmol)의 빙냉 용액에 가하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 격렬하게 교반하고 COCl₂(톨루엔중 1.85 M 용액, 1.35 mL)를 이에 가하고 실온에서 1시간 동안 계속 교반하였다. 유기 층을 MgS0₄ 위에서 건조시키고, 여과하며 이의 용적의 1/2로 농축시켜 화합물 5500f를 CH₂Cl₂중 용액으로서 수득하였다. 화합물 5500f를 CH₂Cl₂중 0.05M 용액으로서 저장하였다.

단계 6

화합물 5500g를 화합물 5500의 제조시 단계 5의 과정을 사용하여 합성하였다.

단계 7

DMF(10.0mL)중 산(1.17, 368.5 mg) 및 (10.11, 565.3mg)의 냉 용액(0℃)에 HATU (1.03 g)에 이어, DIPEA(1.382 mL)를 가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 및 실온에서 2시간 동안 교반하고, 에틸 아세테이트(20.0 mL)로 희석시키고, 1N HCl 및 염수로 세척하고, NaHC0₃ 위에서 건조시키고, 여과하며, 농축시켰다.

0℃에서 PhMe/DMSO(10.0 mL, 1:1) 중 조 물질에 EDCl(5.2 g)에 이어 디클로로아세트산(447 μL)을 가하였다. 빙욕을 제거하고 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이에 EtOAc(75 mL)를 가하고 반응 혼합물을 H₂0(25.0 mL), 포화된 NaHC0₃ 및 염수로 세척한 후 아세톤/헥산(1:9 내지 9:1)을 사용하는 Si0₂ 위에서 정제하여 화합물 5500h를 수득하였다.

단계 9

화합물 5500h를 디옥산(25mL)중 4N HCl 속에 용해하였다. 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하고 농축시켜 백색 고체, 5500i(350.0 mg)를 수득하였다.

단계 10

CH₂Cl₂(2.0mL)중 아민 하이드로클로라이드 5500i(25.0 mg, 0.051 mmol)의 냉각된 용액(0℃)에 화합물 5500f(2.5 mL, 0.135 mmol)에 이어, DIPEA(68 μL, 0.4 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1.2시간 동안 교반하고, 에틸 아세테이트(20.0 mL)로 희석시키고, 3% 시트르산 및 염수로 세척하고, NaHC0₃ 위에서 건조시키고, 여과하며, 농축시키고 아세톤-헥산(1:9)을 사용하는 Si0₂ 위에서 정제하여 화합물 5648(10.0 mg)을 수득하였다. LCMS 641.2(M+H).

화합물 5644의 제조

단계 11

화합물 5644를 화합물 5648의 제조에 대해 기술된 과정을 사용하여 합성하였다. LCMS 645.0 (M+H).

표 2에 기술된 화합물 5644의 다수의 유사체를 화합물 5500g로 부터 화합물 5644의 제조시 기술된 과정을 사용하여 제조하였다.

화합물 5632의 제조

단계 1

화합물 5632a를 (S)-N-boc 발리놀로부터 화합물 5500g의 제조시 과정(단계 1 내지 6)에 따라 제조하였다. 화합물 5632를 화합물 5648의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 합성하였다. LCMS: 631.1 (M+H)

표 2에서 화합물 5632의 다수의 유사체를 화합물 5632a로 부터 화합물 5632의 제조에서와 동일한 과정을 사용하여 제조하였다.

화합물 5665의 제조

단계 1

CH₂Cl₂(15.0mL)중 아민 5004a(560.0 mg, 2.58 mmol)의 냉각된(0℃) 용액에 클로로프로필 이소시아네이트(알드리히 제조원, 531 mL, 5.16 mmol)를 가하고 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하고, 포화된 NaHC0₃ 및 염수로 세척하고, MgS0₄ 위에서 건조시키고, 여과하고 농축시키며 에틸-아세테이트-헥산(1:1)을 사용하는 SiO₂ 위에서 정제하여 화합물 5520a(660 mg, 1.91 mmol, 76%)를 수득하였다.

단계 2

THF(30mL)중 화합물 5520a(660.0 mg, 1.96 mmol)의 냉각된 용액에 NaH(광 오 일중 60% 분산액, 313.0 mg, 7.84 mmol)을 가하였다. 반응 혼합물을 4시간에 걸쳐 실온으로 가온되도록 하고, 빙 냉수로 조심스럽게 퀀칭시키고, CH₂Cl₂로 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, MgS0₄ 위에서 건조시키고, 여과하며 농축시켰다. 조 물질을 에틸 아세테이트-헥산(1:1)을 사용하는 Si0₂ 위에서 정제하여 화합물 5520b(220.0 mg, 1.0 mmol)를 수득하였다.

단계 3

화합물 5520b(660.0 mg, 1.96 mmol)에 디옥산(25mL)중 4N HCl을 가하였다. 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하고 농축시켜 백색 고체를 수득하고 이를 CH₂Cl₂ (7.0 mL) 속에 용해시키고 포화된 NaHC0₃(7.0 mL)를 여기에 가하였다. 10분 동안 격렬하게 교반한 후, 층이 분리되도록 하고 포스겐(2.5 당량)을 유기 층에 한번에 가하였다. 격렬하게 교반하는 것을 즉시 재개하고, 빙욕을 제거하고 1시간 동안 계속 교반하고, 층을 분리하였다. 유기 층을 MgS0₄ 위에서 건조시키고, 여과하며 이의 용적의 1/2로 농축시키고 화합물 5520c을 CH₂Cl₂중 0.05 M 용액으로서 저장하였다.

단계 4

CH₂Cl₂(2.0mL)중 아민 하이드로클로라이드 5500i(25.0 mg, 0.051 mmol)의 냉각된 용액(0℃)에 화합물 5520c(2.5 mL, 0.135 mmol)에 이어, DIPEA(68 μL, 0.4 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1.2시간 동안 교반하고, 에틸 아세테이트(20.0 mL)로 희석시키고, 3% 시트르산 및 염수로 세척하고, NaHC0₃ 위에서 건조시키고, 여과하며, 농축시키고 아세톤-헥산(1:9)을 사용하는 Si0₂ 위에서 정제하여 화합물 5665(10.0 mg)을 수득하였다. LCMS 646.2 (M+H).

표 2에 기술된 화합물 5665의 다수의 유사체를 화합물 5520c를 사용하여 화합물 5648의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

화합물 5688의 제조

단계 1

아민 5004a(998.0 mg, 4.6 mmol)을 상응하는 이소시아네이트 5030a로 화합물 5648의 제조시 단계 5의 과정을 사용하여 전환시켰다.

단계 2

CH₂Cl₂(10.0 mL)중 이소시아네이트에 N-메틸 클로로프로필 아민 5030b (알드리히 제조원, 490.0 mg, 4.6 mmol)을 가하고 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하고, 포화된 NaHC0₃ 및 염수로 세척하고, MgS0₄ 위에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키며 에틸 아세테이트/헥산을 사용하는 Si0₂ 위에서 정제하여 화합물 5530c (1.6 g, 4.6 mmol)를 100% 수율로 수득하였다.

단계 3

화합물 5530c을 화합물 5530d로 화합물 5665의 제조시 단계 2 및 단계 3의 시험 과정을 사용하여 전환시켰다.

단계 4

CH₂Cl₂(2.0 mL)중 아민 하이드로클로라이드 5500i(25.0 mg, 0.051 mmol)의 냉각된 용액(0℃)에 화합물 5530d(2.5 mL, 0.135 mmol)에 이어, DIPEA(68 μL, 0.4 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1.2시간 동안 교반하고, 에틸 아세테이트(20.0 mL)로 희석시키고, 3% 시트르산 및 염수로 세척하고, NaHCO₃ 위에서 건조시키며, 여과하고 농축시키며, 아세톤-헥산(1:9)을 사용하는 Si0₂ 위에서 정제하여 화합물 5688(17.0 mg)을 수득하였다. LCMS 660.2 (M+H).

표 2에서 화합물 5688의 다수의 유사체를 상기 기술한 과정을 사용하여 화합물 5530d로 부터 제조하였다.

화합물 5700의 제조

단계 1

화합물 3-클로로-프로판올(181 μL, 2.51 mmol)을 상응하는 클로로포르메이트 5540b로 화합물 5648의 제조시 단계 5의 과정을 사용하여 전환시켰다.

단계 2

THF(10.0mL)중 빙-냉 클로로포르메이트에 아민 5004a(543.0 mg, 2.51 mmol)를 가하고 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하고, EtOAc(250.0 mL)로 희석 시키고, 포화된 NaHC0₃ 및 염수로 세척하고, MgS0₄ 위에서 건조시키고, 여과하며, 농축시켜 화합물 5540c(664 mg, 1.97 mmol)를 수득하였다. 조 생성물을 다음 단계에서 직접 사용하였다.

단계 3

화합물 5540c를 화합물 5540d로 화합물 5665의 제조시 단계 2 및 단계 3으로부터의 시험 과정을 사용하여 전환시켰다.

단계 4

CH₂Cl₂(2.0 mL)중 아민 하이드로클로라이드 5500i(30.0 mg, 0.06 mmol)의 냉각된 용액(0℃)에 화합물 5540d(2.6 mL, 0.131 mmol)에 이어, DIPEA(91 μL, 0.52 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1.2시간 동안 교반하고, 에틸 아세테 이트(20.0 mL)로 희석시키고, 3% 시트르산 및 염수로 세척하고, NaHC0₃ 위에서 건조시키며, 여과하고, 농축시키고 아세톤-헥산(1:9)을 사용하는 Si0₂ 위에서 정제하여 화합물 5700(28.0 mg)을 수득하였다. LCMS 647.2 (M+H).

표 2에서 화합물 5700의 다수의 유사체를 상기 기술한 과정을 사용하여 화합물 5540d로 부터 제조하였다.

표적 화합물 5743의 제조

단계 1

-4℃에서 MeOH중 화합물 5003b(1.0 g, 2.9 mmol)의 용액에 NaBH₄(11.52 mmol, 430.0 mg)를 가하였다. 20분 동안 교반한 후, 반응물을 CH₂Cl₂/포화된 NaHCO₃(1:1, 60 mL)로 퀀칭시켰다. 수성 층을 DCM(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 유기 층을 MgS0₄ 위에서 건조시키고 농축시켜 백색 고체를 수득하고 이를 다음 단계에 서 직접 사용하였다. 앞서의 단계로 부터의 조 물질을 EtOH(50.0 mL) 속에 재용해하고 Pd/C(10 중량%, 200 mg)를 가하였다. 반응 혼합물을 H₂ 대기하에 12시간 동안 교반하고, 셀라이트의 패드 위에서 여과하고 농축시켜 화합물 5550a(0.99g)를 수득하였다.

단계 2

화합물 5550a를 화합물 5665의 제조시 단계 3으로부터의 시험 과정을 사용하여 화합물 5550b로 전환시켰다..

단계 3

CH₂Cl₂(2.0 mL)중 아민 하이드로클로라이드 5550d(45.0 mg, 0.094 mmol)의 냉각 용액(0℃)에 화합물 5550b(2.8 mL, 2.0 mmol)에 이어, DIPEA (100 μL, 0.52 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1.2시간 동안 교반하고, 에틸 아세테이트(0.0 mL)로 희석시키고, 3% 시트르산 및 염수로 세척하고, NaHC0₃ 위에서 건조시키며, 여과하고, 농축시키고 EtOAc-CH₂Cl₂(1:9 내지 9:1)를 사용하는 Si0₂ 위에서 정제하여 생성물 5743(32.0 mg)을 수득하였다. LCMS 705.2 (M+H).

표 2에서 화합물 5743의 다수의 유사체를, 위에 기술된 과정을 사용하여 화합물 5550b로 부터 제조하였다.

화합물 5754의 제조

단계 1

이소시아네이트 5754a를 화합물 5052c로 부터 화합물 5052d의 제조를 위해 기술된 과정에 따라 아민 5019로 부터 제조하였다.

단계 2

생성물 5754를 화합물 5754a 및 화합물 5052f로 부터 화합물 5237의 제조에 대해 기술된 과정에 따라 제조하였다.

표 2에서 화합물 5754의 다수의 유사체를 위에서 기술된 과정을 사용하여 화합물 5754a로 부터 제조하였다.

화합물 5812의 제조

단계 1

DCM(50mL)중 아민(1.2 g, 5.5 mmol, 1 당량)에 50 ml의 포화된 NaHCO₃를 가하였다. 빙온에서 5분 동안 격렬하게 교반하였다. 교반을 중지하고 포스겐(2 당량, 11.09 mmol, 톨루엔중 20 %, 5.96 mL)을 하부 층에 주사하고 즉시 격렬하게 교반하면서 재저장하였다. 층을 1시간 후 분리하였다. 수 층을 DCM(3 ml)으로 1회 이상 세척하고 황산나트륨 위에서 건조시켰다. 여과하고 고 진공에서 뜨거운 욕의 부재하에 이의 1/2 용적으로 증발시킨 후 N₂를 15분 동안 퍼징하였다. DCM속에서 100mL로 희석시켰다. 추가의 반응에 그 자체로 사용하였다.

단계 2

메탄올(20mL)중 아민 5812b(알드리히 제조원, 0.5 g, 4.2 mmol, 1 당량)에 이소시아네이트(5.5 mmol, 1.3 당량) 및 트리에틸 아민(3.4 ml, 6 당량, 25.2 mmol)을 가하고 반응 혼합물을 90℃에서 48시간 동안 환류시켰다. 100℃에서 다른 5시간 동안 계속 교반하였다. 당해 혼합물을 농축시키고 섬광 컬럼 크로마토그래피를 통해 정제하여 생성물 5812c를 96.7 % 수율로 수득하였다.

단계 3

화합물 5812c(650 mg)에 4M HCl/디옥산(25 mL)을 가하고 실온에서 0.5 시간 동안 교반하였다. 용매를 증발 제거하고 헥산으로 공비증발시킨 후 에테르로 공비증발시켰다. 고 진공하에 4시간 동안 유지시켜 생성물을 정량적 수율로 수득하였다.

단계 4

DCM(5ml)중 아민 하이드로클로라이드(20 mg, 0.08 mmol, 1.3 당량)에 DIPEA(6 당량)을 0℃에서 가하였다. 이소시아네이트(3 mL, DCM중 0.02M)을 N₂ 대기하에 가하였다. 0℃에서 30분 및 실온에서 90분 동안 교반하였다. 시트르산으로 퀀칭시키고 EtOAc로 추출하고 염수로 세척하였다. 무수 황산나트륨 위에서 건조시 키고 여과하며 용매를 증발시켰다. 조 생성물을 섬광 컬럼 크로마토그래피(10 내지 40 % 아세톤-헥산)로 정제하여 화합물 5812를 41% 수율로 수득하였다.

탁월한 HCV 프로테아제 억제 활성을 나타내는 본 발명의 대표적인 화합물ㄹ을 HCV 연속 검정에서 이들의 생물학적 활성(나노 몰(nM)의 Ki^* 값의 범위)을 표 1 및 2에서 하기 나열한다: 카테고리 A ≤ 50 nM; 카테고리 B > 50 nM.

본 발명은 신규 HCV 프로테아제 억제제에 관한 것이다. 당해 유용성은 HCV NS2/NS4a 세린 프로테아제를 억제하는 이들의 능력에서 명백할 수 있다. 이러한 입증에 대한 일반 과정은 하기 시험관내 검정으로 나타낸다.

HCV 프로테아제 억제 활성에 대한 검정:

분광광도계 검정: HCV 세린 프로테아제에 대한 분광광도계 검정을, 기술 내용이 본원에 참조로 인용된 문헌[참조: R. Zhang et al, Analytical Biochemistry, 270(1999) 268-275]의 과정에 의해 본 발명의 화합물에서 수행하였다. 색원체성 에스테르 기질의 단백질분해를 기초로 하는 검증은 HCV NS3 프로테아제 활성을 연속적으로 모니터링하는데 적합하다. 기질은 NS5A-NS5B 연결 서열(Ac-DTEDVVX(Nva)(여기서, X = A 또는 P이다)의 P 부위로부터 유도되었으며, 이의 C-말단 카복실 그룹은 4개의 상이한 색원체성 알콜중 하나(3- 또는 4-니트로페놀, 7-하이드록시-4-메틸-쿠마린 또는 4-페닐아조페놀)로 에스테르화되었다. 하기에는 고 처리 스크리닝(high throughput screening)에 대한 이들 신규한 분광광도계적 에스테르 기질의 합성, 특성화 및 적용, 및 HCV NS3 프로테아제 억제제의 상세한 역학적 평가를 나타낸다.

물질 및 방법:

물질: 검정 관련 완충액에 대한 화학 시약은 시그마 케미칼 캄파니(미국 미조리주 세인트 루이스 소재)로부터 입수하였다. 펩타이드 합성용 시약은 알드리히 케미칼스, 노바바이오켐(미국 캘리포니아주 샌 디에고 소재), 어플라이드 바이오시스템스(미국 캘리포니아주 포스터 시티 소재) 및 퍼셉티브 바이오시스템스(미국 매사츄세츠주 프라밍햄 소재)로부터 입수하였다. 펩타이드를 수동으로 또는 자동화된 ABI 모델 431A 합성기(제조원: 어플라이드 바이오시스템스)상에서 합성하였다. UV/VIS 분광계 모델 LAMBDA 12는 퍼킨 엘머(미국 커넥티컷 노르웍 소재)로부터 입수하였으며 96-웰 UV 플레이트는 코닝(미국 뉴욕 코닝 소재)으로부터 입수하였다. 예비 가온 블럭은 USA 사이언티픽(미국 플로리다 오칼라 소재)에서 입수하였으며, 96-웰 플레이트 와동기(96-well plate vertex)는 라블린 인스트루먼츠(미국 일리노이주 멜로세 파크 소재)로부터 입수하였다. 단색광기(monochrometer)가 장착된 스펙트라막스 플러스 미세역가 플레이트 판독기(Spectramax Plus microtiter plate reader)는 몰레큘러 디바이스(미국 캘리포니아주 서니베일 소재)로 부터 입수하였다.

효소 제조: 재조합 이종이량체성 HCV NS3/NS4A 프로테아제(제 1a종; Strain 1a)는 이미 공지된 과정[참조: D. L. Sali et al, Biochemistry, 37(1998) 3392-3401]을 사용하여 제조하였다. 단백질 농도는 아미노산 분석기로 이미 정량화시킨 재조합 HCV 프로테아제 표준물을 사용하는 바이오래드 염색법(Biorad dye method)으로 측정하였다. 검정 개시 전에, 효소 저장 완충액(50 mM 인산나트륨 pH 8.0, 300 mM NaCl, 10% 글리세롤, 0.05% 라우릴 말토사이드 및 10 mM DTT)을 검정 완충액(25 mM MOPS pH 6.5, 300 mM NaCl, 10% 글리세롤, 0.05% 라우릴 말토사이드, 5 μM EDTA 및 5 μM DTT)으로 Biorad Bio-Spin P-6 예비충전 컬럼(prepacked column)을 이용하여 교환하였다.

기질 합성 및 정제: 기질의 합성은 알. 장(R. Zhang) 등(상기 참조)에 의해 보고된 바와 같이 수행하였고 표준 프로토콜[참조: K. Barlos et al, Int. J. Pept. Protein Res., 37(1991), 513-520]을 사용하여 2-클로로트리틸 클로라이드 수지에 Fmoc-Nva-OH를 고정시켜 개시하였다. 펩타이드를 Fmoc 화학을 사용하여 수동으로 또는 자동화된 ABI 모델 431 펩타이드 합성기상에서 후속적으로 조립하였다. N-아세틸화되고 완전히 보호된 펩타이드 단편을 수지로부터 디클로로메탄(DCM)중 10% 아세트산(HOAc) 및 10% 트리플루오로에탄올(TFE)에 의해 30분 동안 분해하거나 DCM 중 2% 트리플루오로아세트산(TFA)에 의해 10분 동안 분해하였다. 합한 여액 및 DCM 세척물을 공비증발(또는 Na₂CO₃ 수용액으로 반복 추출)하여 분해시 사용된 산을 제거하였다. DCM 상을 Na₂SO₄ 위에서 건조시키고 증발시켰다.

에스테르 기질을 표준 산-알콜 커플링 과정[참조: K. Holmber et al, Acta Chem. Scand., B33(1979) 410-412]을 사용하여 조립(assembling)하였다. 펩타이드 단편을 10 몰 당량의 발색단 및 촉매량(0.1 당량)의 파라-톨루엔설폰산(pTSA)이 가해진 무수 피리딘(30-60 mg/ml)에 용해시켰다. 디사이클로헥실카보디이미드(DCC, 3 당량)을 가하여 커플링 반응을 개시하였다. 생성물 형성을 HPLC로 모니터링하며 실온에서 12 내지 72 시간 반응후 완결됨이 밝혀졌다. 피리딘 용매를 진공하에 증발시키고 톨루엔과 함께 공비증발시켜 제거하였다. 펩타이드 에스테르를 DCM중 95% TFA로 탈보호시키고 무수 에틸 에테르로 3회 추출하여 과량의 발색단을 제거하였다. 탈보호된 기질을 30% 내지 60% 아세토니트릴 구배(6개 컬럼 용적을 사용)를 사용하는 역상 C3 또는 C8 컬럼상에서 역상 HPLC로 정제하였다. HPLC 정제에 따른 총 수율은 대략 20 내지 30%이었다. 분자량은 전기분무 이온화 질량 분광학으로 확인하였다. 기질을 건조하에 무수 분말형으로 저장하였다.

기질 및 생성물의 스펙트럼:

기질 및 상응하는 발색단 생성물의 스펙트럼을 pH 6.5 검정 완충액에서 수득하였다. 흡광 계수는 다수의 희석물을 사용하여 1-cm 큐베트(cuvette)내 최적 오프-피크 파장(3-Np 및 HMC의 경우 340nm, PAP의 경우 370 nm 및 4-Np의 경우 400 nm)에서 측정하였다. 최적 오프-피크 파장은, 기질 및 생성물 간의 흡광도에 있어서의 최대 분수 차이(maximum fractional difference)를 생성하는 파장으로서 정의한다(생성물 OD-기질 OD)/기질 OD).

프로테아제 검정: HCV 프로테아제 검정을 96-웰 미세역가 플레이트에서 200㎕의 반응 혼합물을 사용하여 30℃에서 수행한다. 검정 완충액 조건(25 mM MOPS pH 6.5, 300 mM NaCl, 10% 글리세롤, 0.05% 라우릴 말토사이드, 5 μM EDTA 및 5 μM DTT)을 NS3/NS4A 이종이량체(참조: D. L. Sali et al, 상기 참조)를 사용하여 최적화한다. 통상적으로, 완충액, 기질 및 억제제의 150 ㎕의 혼합물을 웰 속에 두고(DMSO ≤ 4% v/v의 최종 농도) 대략 3분 동안 30℃에서 예비항온처리하였다. 이후에, 검정 완충액중 50㎕의 예비가온시킨 프로테아제(12nM, 30℃)를 사용하여 반응을 개시하였다(최종 용적 200㎕). 플레이트를 단색광기가 장착된 스펙트로막스 플러스 미세역가 플레이트 판독기를 사용하여 적절한 파장(3-Np 및 HMC의 경우 340 nm, PAP의 경우 370 nm, 및 4-Np의 경우 400 nm)에서 흡광도에 있어서의 변화에 대한 검정 길이(60분)에 걸쳐 모니터링하였다(허용되는 결과는 컷오프 여과기를 사용하는 플레이트 판독기를 사용하여 수득할 수 있다). Nva 및 발색단 간의 에스테르 결합의 단백질분해적 절단을 비-효소 가수분해에 대한 대조군으로서 효소 블랭크(enzyme blank) 부재에 대하여 적절한 파장에서 모니터링하였다. 기질 역학 매개변수의 평가를 30배 기질 농도 범위(~6 내지 200μM)에 걸쳐 수행하였다. 초기 속도를 선형 회귀법(linear regression)을 사용하여 측정하고, 데이타를 비-선형 회귀 분석(Mac Curve Fit 1.1, K. Raner)을 사용하는 미카엘리스-멘텐 방정식(Michaelis-Menten equation)에 적용시켜 수득하였다. 효소가 완전히 활성인 것으로 추정하여 턴오버 수(turnover number; k_cat)를 계산한다.

억제제 및 불활성화제의 평가: 경쟁적 억제제 Ac-D-(D-Gla)-L-I-(Cha)-C-OH(27), Ac-DTEDVVA(Nva)-OH 및 Ac-DTEDVVP(Nva)-OH에 대한 억제 상수(Ki)를 고정 농도의 효소 및 기질에서 경쟁적 억제 역학: v_o/v_i = 1 + [l]_o/(K_i(1 + [S]_o/K_m))(여기서, v_o는 억제되지 않은 초기 속도이고, v_i는 제공된 특정한 억제제 농도([I]_o에서 억제제의 존재하의 초기 속도이고 [S]_o는 사용된 기질 농도이다)에 대한 재배열된 미카엘리스-멘텐 방정식에 따른 v_o/v_i 대 억제제 농도([I]_o를 도시함으로써 고정된 농도의 효소 및 기질에서 실험적으로 측정하였다. 수득되는 데이타를 선형 회귀법을 사용하여 적용시키고, 수득되는 기울기, 1/(K_i(1+ [S]_o/K_m)를 사용하여 K_i 값을 계산하였다. 본 발명의 일부 화합물의 Ki^* 값을 하기 표 4에 나타낸다.

본 발명은 상기한 구체적인 양태와 관련지어 기술하였지만, 당해 기술 분야의 숙련가들에게는 본 발명에 수많은 대안, 수정 및 기타 변형을 가할 수 있음이 명백할 것이다. 이러한 모든 대안, 수정 및 변형은 본 발명의 정신 및 영역내에 포함시키고자 한다.

Claims (36)

1. 하기 화학식 I의 화합물, 또는 이러한 화합물의 거울상이성체, 입체이성체, 회전이성체, 토우토머(tautomer) 또는 라세메이트, 또는 이러한 화합물의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 또는 에스테르:

   [화학식 I]

   

   상기 화학식 I에서,

   R¹은 H, OR⁸, NR⁹R¹⁰ 또는 CHR⁹R¹⁰이고, 여기서 R⁸, R⁹ 및 R¹⁰은 동일하거나 상이할 수 있으며, 각각 H, 알킬-, 알케닐-, 알키닐-, 아릴-, 헤테로알킬-, 헤테로아릴-, 사이클로알킬-, 헤테로사이클릴-, 아릴알킬-, 및 헤테로아릴알킬로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되고;

   A 및 M은 동일하거나 상이할 수 있으며, 각각 R, OR, NHR, NRR', SR, SO₂R 및 할로 중에서 독립적으로 선택되거나, 또는 A 및 M은 서로 연결되어(다시 말해서, A-E-L-M은 함께 취해져서) 화학식 I에서 윗부분에 나타낸 잔기

   

   이 3-, 4-, 6-, 7- 또는 8-원 사이클로알킬, 4 내지 8-원 헤테로사이클릴, 6- 내지 10-원 아릴, 또는 5- 내지 10-원 헤테로아릴을 형성하며;

   E는 C(H) 또는 C(R)이고;

   L은 C(H), C(R), CH₂C(R) 또는 C(R)CH₂이며;

   R, R', R² 및 R³은 동일하거나 상이할 수 있고, 각각 H, 알킬-, 알케닐-, 알키닐-, 사이클로알킬-, 헤테로알킬-, 헤테로사이클릴-, 아릴-, 헤테로아릴-, (사이클로알킬)알킬-, (헤테로사이클릴)알킬-, 아릴-알킬-, 및 헤테로아릴-알킬-로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되거나; 또는, NRR'중 R 및 R'는 서로 연결되어 NRR'가 4- 내지 8-원 헤테로사이클릴을 형성하고;

   Y는 하기 잔기 중에서 선택되며:

   

   여기서, G는 NH 또는 O이고;

   R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹ 및 R²⁰은 동일하거나 상이할 수 있고, 각각 H, C₁-C₁₀ 알킬, C₁-C₁₀ 헤테로알킬, C₂-C₁₀ 알케닐, C₂-C₁₀ 헤테로알케닐, C₂-C₁₀ 알키닐, C₂-C₁₀ 헤테로알키닐, C₃-C₈ 사이클로알킬, C₃-C₈ 헤테로사이클릴, 아릴 및 헤테로아릴로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되거나, 또는 (i) R¹⁵ 및 R¹⁶은 서로 연결되어 4- 내지 8-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴을 형성하거나, 또는 R¹⁵ 및 R¹⁹는 서로 연결되어 5- 내지 8-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴을 형성하거나, 또는 R¹⁵ 및 R²⁰은 서로 연결되어 5- 내지 8-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴을 형성하고, (ii) 유사하게, 독립적으로, R¹⁷ 및 R¹⁸은 서로 연결되어 3- 내지 8-원 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴을 형성하며;

   여기서, 각각의 상기 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 또는 헤테로사이클릴은 치환되지 않거나, 또는 하이드록시, 알콕시, 아릴옥시, 티오, 알킬티오, 아릴티오, 아미노, 아미도, 알킬아미노, 아릴아미노, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 설폰아미도, 알킬설폰아미도, 아릴설폰아미도, 케토, 카복시, 카브알콕시, 카복스아미도, 알콕시카보닐아미노, 알콕시카보닐옥시, 알킬우레이도, 아릴우레이도, 할로, 시아노 및 니트로로 이루어진 그룹 중에서 선택된 하나 이상의 잔기에 의해 임의로 독립적으로 치환될 수 있다.
2. 제1항에 있어서, R¹이 NR⁹R¹⁰이고, R⁹가 H이며, R^l0이 H, 알킬, 아릴, 헤테로알킬, 헤테로아릴, 사이클로알킬, 알킬-아릴, 알킬-헤테로아릴, 아릴-알킬, 알케닐, 알키닐 또는 헤테로아릴-알킬인 화합물.
3. 제2항에 있어서, R¹⁰이 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 화합물:

   
4. 제1항에 있어서, R²가 하기 잔기로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 화합물:

   

   
5. 제1항에 있어서, R³이 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 화합물:

   

   

   상기식에서,

   R³¹은 OH 또는 0-알킬이고;

   R³²는 H, C(O)CH₃, C(O)OtBu 또는 C(O)N(H)tBu이다.
6. 제5항에 있어서, R³이 하기 잔기로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 화합물:

   

   
7. 제1항에 있어서, G가 NH인 화합물.
8. 제1항에 있어서, Y가 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 화합물:

   

   

   상기 식에서,

   Y³⁰ 및 Y³¹은 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고:

   

   

   

   

   ;

   Y³²는 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되며;

   

   Y¹²는 H, COOH, COOMe, CONH₂, OMe, OH, OCF₃, OCH(CH₃)₂, OC(CH₃)₃, F, Cl, Br, NH₂, NHSO₂CH₃, NHC(O)CH₃, NHCO₂CH₃, NO₂, SO₂NH₂, CF₃, Me, Et, 이소프로필, 사이클로프로필, t-부틸 및 페닐 중에서 선택된다.
9. 제8항에 있어서, Y가 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 화합물:

   

   상기 식에서,

   Y³⁰ 및 Y³¹은 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고:

   

   

   ;

   Y³²는 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되며;

   

   Y¹²는 H, COOH, COOMe, CONH₂, OMe, OH, OCF₃, OCH(CH₃)₂, OC(CH₃)₃, F, Cl, Br, NH₂, NHSO₂CH₃, NHC(O)CH₃, NHCO₂CH₃, NO₂, SO₂NH₂, CF₃, Me, Et, 이소프로필, 사이클로프로필, t-부틸 및 페닐 중에서 선택된다.
10. 제1항에 있어서, 잔기:

    

    이 하기 식 중에서 선택되는 화합물:

    

    
11. 제10항에 있어서, 잔기:

    

    이 하기 식 중에서 선택되는 화합물:

    
12. 제11항에 있어서, 잔기:

    

    이 하기 식 중에서 선택되는 화합물:

    
13. 제1항에 있어서, R¹이 NHR¹⁰이고, 여기서, R¹⁰이 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고:

    

    

    R²가 하기 잔기로 이루어진 그룹 중에서 선택되며:

    

    

    R³이 하기 잔기로 이루어진 그룹 중에서 선택되고:

    

    Y가 하기 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되며:

    

    여기서,

    Y³⁰ 및 Y³¹은 동일하거나 상이할 수 있고, 각각 다음 식으로 이루어진 그룹 중에서 독립적으로 선택되며:

    

    

    

    여기서, Y³²는 다음 식으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고;

    

    Y¹²는 H, COOH, COOMe, CONH₂, OMe, OH, OCF₃, OCH(CH₃)₂, OC(CH₃)₃, F, Cl, Br, NH₂, NHSO₂CH₃, NHC(O)CH₃, NHCO₂CH₃, NO₂, SO₂NH₂, CF₃, Me, Et, 이소프로필, 사이클로프로필, t-부틸 및 페닐 중에서 선택되며;

    잔기

    

    는

    

    인 화합물:
14. 활성 성분으로서 하나 이상의 제1항에 따른 화합물을 포함하는 약제학적 조성물.
15. 제14항에 있어서, HCV와 관련된 질환을 치료하는데 사용하기 위한 약제학적 조성물.
16. 제15항에 있어서, 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체를 추가로 포함하는 약제학적 조성물.
17. 제16항에 있어서, 하나 이상의 항바이러스제를 추가로 함유하는 약제학적 조성물.
18. 제17항에 있어서, 하나 이상의 인터페론을 추가로 함유하는 약제학적 조성물.
19. 제18항에 있어서, 하나 이상의 항바이러스제가 리바비린이고 하나 이상의 인터페론이 α-인터페론 또는 페길화된 인터페론인 약제학적 조성물.
20. 치료학적 유효량의 하나 이상의 제1항에 따른 화합물을 포함하는 약제학적 조성물을 HCV와 관련된 질환의 치료가 요구되는 환자에게 투여함을 포함하여, HCV와 관련된 질환을 치료하는 방법.
21. 제20항에 있어서, 투여가 경구 또는 피하 투여인 방법.
22. HCV와 관련된 질환 치료용 의약을 제조하기 위한 제1항에 따른 화합물의 용도.
23. 하나 이상의 제1항에 따른 화합물을 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체와 친밀하게 물리적으로 접촉시킴을 포함하여, HCV와 관련된 질환 치료용 약제학적 조성물을 제조하는 방법.
24. 하기 나열된 구조식의 화합물들 중에서 선택된, HCV 프로테아제 억제 활성을 나타내는 화합물, 또는 당해 화합물의 거울상 이성체, 입체이성체, 회전이성체, 토우토머 및 라세메이트, 또는 당해 화합물의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 또는 에스테르:

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    

    
25. 치료학적 유효량의 하나 이상의 제24항에 따른 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는, C형 간염 바이러스("HCV")와 관련된 질환 치료용 약제학적 조성물.
26. 제25항에 있어서, 하나 이상의 항바이러스제를 추가로 함유하는 약제학적 조성물.
27. 제26항에 있어서, 하나 이상의 인터페론 또는 PEG-인터페론 알파 접합체(conjugate)("페길화된 인터페론")를 추가로 함유하는 약제학적 조성물.
28. 제27항에 있어서, 하나 이상의 항바이러스제가 리바비린이고 하나 이상의 인터페론이 α-인터페론 또는 페길화된 인터페론인 약제학적 조성물.
29. 유효량의 하나 이상의 제24항에 따른 화합물을 투여함을 포함하여, C형 간염 바이러스 관련 질환을 치료하는 방법.
30. 하나 이상의 제24항에 따른 화합물을 HCV 프로테아제와 접촉시킴을 포함하여, C형 간염 바이러스(HCV) 프로테아제의 활성을 조절하는 방법.
31. 치료학적 유효량의 하나 이상의 제24항에 따른 화합물을 투여함을 포함하여, C형 간염의 하나 이상의 증상을 치료하거나, 예방하거나, 또는 완화시키는 방법.
32. 제31항에 있어서, HCV 프로테아제가 NS3/NS4a 프로테아제인 방법.
33. 제32항에 있어서, 화합물 또는 화합물들이 HCV NS3/NS4a 프로테아제를 억제하는 방법.
34. C형 간염 바이러스(HCV) 폴리펩타이드가 하나 이상의 제24항에 따른 화합물과 함께 프로세싱되는 조건하에, HCV 폴리펩타이드를 함유하는 조성물을 접촉시킴을 포함하여, C형 간염 바이러스(HCV) 폴리펩타이드의 프로세싱을 조절하는 방법.
35. 치료학적 유효량의, 하기 구조식의 화합물들 중에서 선택된 하나 이상의 화합물, 당해 화합물의 거울상이성체, 입체이성체, 회전이성체, 토우토머 및 라세메이트, 또는 당해 화합물의 약제학적으로 허용되는 염, 용매화물 또는 에스테르를 포함하는 약제학적 조성물을 HCV와 관련된 질환의 치료가 요구되는 환자에게 투여함을 포함하여, HCV와 관련된 질환을 치료하는 방법:

    

    

    
36. 제1항에 있어서, 정제된 형태의 화합물.