CN1946718A - 用作丙型肝炎病毒ns3丝氨酸蛋白酶抑制剂的具有环p4′s的新型酮酰胺 - Google Patents

Abstract

本发明公开了具有丙型肝炎蛋白酶抑制活性的新型化合物以及制备这类化合物的方法。在另一个实施方案中，本发明公开了包含这种化合物的药用组合物和用这些抑制剂治疗丙型肝炎及相关病症的方法。

Description

用作丙型肝炎病毒NS3丝氨酸蛋白酶抑制剂的具有环P4′S的新型 酮酰胺

                      发明领域

本发明涉及新型丙型肝炎病毒(“HCV”)蛋白酶抑制剂、包含一种或多种这些抑制剂的药用组合物、制备这些抑制剂的方法和用这些抑制剂治疗丙型肝炎及相关病症的方法。本发明还公开了用作HCVNS3/NS4a丝氨酸蛋白酶抑制剂的新型大环化合物。本申请要求2004年2月27日提交的序列号为60/548,506的美国临时专利申请的优先权。

                       发明背景

丙型肝炎病毒(HCV)为(+)-有义单链RNA病毒，已被认为是非甲、非乙型肝炎中(NANBH)，特别是血液相关性NANBH(BB-NANBH)中主要的致病因子(参见国际专利申请公开号WO 89/04669和欧洲专利申请公开号EP 381 216)。NANBH不同于其它类型的病毒引起的肝病，如甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丁型肝炎病毒(HDV)、巨细胞病毒(CMV)和Epstein-Barr病毒(EBV)引起的肝病，也不同于其它形式的肝病如酒精中毒和原发性胆硬化。

最近，已鉴定、克隆和表达出多肽加工和病毒复制所必需的HCV蛋白酶(参见，如美国专利No.5,712,145)。这种约3000个氨基酸的多肽从氨基端至羧基端含有核壳蛋白(C)、包膜蛋白(E1和E2)和几种非结构性蛋白(NS1、2、3、4a、5a和5b)。NS3为约68kda的蛋白，被HCV基因组的约1893个核苷酸解码，具有两个不同的区域：(a)含有约200个N-端氨基酸的丝氨酸蛋白酶区域；和(b)在蛋白C-端的RNA-依赖性ATP酶区域。因为在蛋白序列、整个三维结构和催化机制的相似性，NS3蛋白酶抑制剂被认为是胰凝乳蛋白酶家族中的成员。其它胰凝乳蛋白酶样酶为弹性酶、Xa因子、凝血酶、胰蛋白酶、纤溶酶、尿激酶、tPA和PSA。HCV NS3丝氨酸蛋白酶负责多肽(多蛋白)在NS3/NS4a、NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接合处的蛋白酶解，因此也负责在病毒复制过程中产生四种病毒蛋白。这使HCV NS3丝氨酸蛋白酶在抗病毒化学疗法中成为一个引人注目的药靶。本发明的化合物可抑制这种蛋白酶。它们还可调节丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工。

经确定，NS4a蛋白作为一种约6kda的多肽，为NS3丝氨酸蛋白酶活性的辅因子。NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶对NS3/NS4a接合处的自动裂解发生在分子内(即顺式)，而其它裂解位点在分子间进行(即反式)。

对HCV蛋白酶自然裂解位点的分析揭示了半胱氨酸存在于P1处，丝氨酸存在于P1′处，且这些残基在NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接合处严格地保守。NS3/NS4a接合处包含P1处苏氨酸的和P1′处的丝氨酸。在NS3/NS4a处的Cys→Thr取代被认为是此接合处需要顺式而不是反式加工的原因。参见Pizzi  et al.(1994)Proc.Natl. Acad.Sci.(USA)91：888-892，Failla  et al.(1996) Folding & Design  1：35-42。NS3/NS4a裂解位点还比其它位点更耐突变。参见，如Kollykhalov et al.(1994) J.Virol.68：7525-7533。还发现在裂解位点上游区域中的酸性残基为有效裂解所必需的。参见Komoda  et al.(1994) J. Virol.68：7351-7357。

据报道，HCV蛋白酶抑制剂包括抗氧化剂(参见国际专利申请公开No.WO 98/14181)、某些肽和肽类似物(参见国际专利申请公开No.WO 98/17679，Landro et al.(1997)Biochem.36：9340-9348，Ingallinella etal.(1998)Biochem.37：8906-8914，Lainas-Brunet et al.(1998)Bioorg.Med.Chem.Lett.8：1713-1718)、以70-氨基酸多肽为基础的抑制剂水蛭蛋白酶抑制剂c(Martin et al.(1998)Biochem.37：11459-11468，inhibitors affinity selected from human pancreatic secretory trypsininhibitor(hPSTI-C3)and minibody repertoires(MBip)(Dimasi et al.(1997)J.Virol.71：7461-7469)、cV_HE2(a“camelized”variable domainantibody fragment)(Martin et al.(1997)Protein Enq.10：607-614)和α1-抗胰凝乳蛋白酶(ACT)(Elzouki et al.)(1997)J.Hepat.27：42-28)。最近公开了经设计用来选择性破坏丙型肝炎病毒RNA的核酶(参见BioWorld Today 9(217)：4(November10，1998))。

也参考1998年4月30日公开的PCT公开No.WO 98/17679(VertexPharmaceuticals Incorporated)；1998年5月28日公开的WO 98/22496(F.Hoffmann-La Roche AG)和1999年2月18日公开的WO99/07734(Boehringer Ingelheim Canada Ltd.).

HCV与肝硬化和肝细胞癌的诱导有关。患HCV感染的患者目前预后不良。由于缺乏HCV感染相关的免疫或缓和(remission)，HCV感染较其它形式的肝炎更难治疗。目前的数据显示诊断出肝硬化四年后的存活率不超过50％。诊断出局部可切除肝细胞癌的患者的五年存活率为10-30％，其中患局部不可切除肝细胞癌的患者的五年存活率为不超过1％。

参考WO 00/59929(US 6,608,027，受让人：Boehringer Ingelheim(Canada)Ltd.；公开于October 12，2000)，其中公开了下式的肽衍生物：

参考A.Marchetti et al，Synlett，S1，1000-1002(1999)，其中描述了HCV NS3蛋白酶抑制剂双环类似物的合成。所公开的化合物具下式：

还参考W.Han et al，Bioorganic & Medicinal Chem.Lett，(2000)10，711-713，其中描述了某些含有烯丙基和乙基官能团的α-酮酰胺、α-酮酯和α-二酮的制备。

还参考WO 00/09558(受让人：Boehringer Ingelheim Limited；公开于February 24，2000)，其中公开了下式的肽衍生物：

其中各部分在其中定义。该系列的示例性的化合物为：

还参考WO 00/09543(受让人：Boehringer Ingelheim Limited；公开于February 24，2000)，其中公开了下式的肽衍生物：

其中各部分在其中定义。该系列的示例性的化合物为：

还参考U.S.6,608,027(Boehringer Ingelheim，Canada)，其中公开了下面类型的NS3蛋白酶抑制剂：

其中各个部分在其中定义。

目前对丙型肝炎的疗法包括α-干扰素(INFα)和利巴韦林和干扰素联合疗法。参见，如Beremguer et al.(1998)Proc.Assoc.Am.Physicians110(2)：98-112。这些疗法持续应答率较低并且副作用频发。参见，如Hoofnagle et al.(1997)N.Engl.J.Med.336：347。目前，尚无可用于HCV感染的疫苗。

进一步参考WO 01/74768(受让人：Vertex Pharmaceuticals Inc)公开于October 11，2001，其中公开了某些具下述通式的化合物(R在其中定义)作为丙型肝炎病毒的NS3-丝氨酸蛋白酶抑制剂：

在上述WO 01/74768中公开的特定化合物具下式：

PCT公开WO 01/77113；WO 01/081325；WO 02/08198；WO02/08256；WO 02/08187；WO 02/08244；WO 02/48172；WO 02/08251；和2002年1月18日提交的序列号为10/052,386的临时美国专利申请中公开了各种类型的肽类和/或其它化合物作为丙型肝炎病毒的NS-3丝氨酸蛋白酶抑制剂。这些申请的公开内容通过引用结合到本文中。

仍需要治疗HCV感染的新型疗法。仍需要有效治疗或预防或改善一种或多种丙型肝炎症状的化合物。

仍需要治疗或预防或改善一种或多种丙型肝炎症状的方法。

仍需要用本文提供的化合物调节丝氨酸蛋白酶活性，特别是HCVNS3/NS4a丝氨酸蛋白酶的方法。

仍需要用本文提供的化合物调节HCV多肽加工的方法。

                      发明简述

在许多实施方案中，本发明提供了新型的HCV蛋白酶抑制剂、包含一种或多种所述化合物的药用组合物、制备包含一种或多种这些化合物的药物制剂的方法以及用一种或多种这些化合物或一种或多种这些制剂治疗或预防HCV或改善一种或多种丙型肝炎症状的方法。还提供了调节HCV多肽与HCV蛋白酶相互作用的方法。在本文提供的化合物中，优选抑制HCV NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶活性的化合物。本发明公开了具式1结构所示的通式的化合物：

                    式1

其中：

R¹为H、OR⁸、NR⁹R¹⁰或CHR⁹R¹⁰，其中R⁸、R⁹和R¹⁰可相同或不同，各自独立选自H、烷基-、烯基-、炔基-、芳基-、杂烷基-、杂芳基-、环烷基-、杂环基-、芳烷基-和杂芳烷基；

A和M可相同或不同，各自独立选自R、OR、NHR、NRR′、SR、SO₂R和卤素；或A和M相互连接(换句话说，A-E-L-M连在一起)以使上述式I中所示下面的部分：

形成三、四、六、七或八-元环烷基，四至八-元杂环基，六至十-元芳基或五至十-元杂芳基；

E为C(H)或C(R)；

L为C(H)、C(R)、CH₂C(R)或C(R)CH₂；

R、R′、R²和R³可相同或不同，各自独立选自H、烷基-、烯基-、炔基-、环烷基-、杂烷基-、杂环基-、芳基-、杂芳基-、(环烷基)烷基-、(杂环基)烷基-、芳基-烷基-和杂芳基-烷基-；或者在NRR′中的R和R′相互连接以使NRR′形成四至八-元杂环基；

且Y选自下面的部分：

其中G为NH或O，且R¹⁵、R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸、R¹⁹和R²⁰可相同或不同，各自独立选自H、C₁-C₁₀烷基、C₁-C₁₀杂烷基、C₂-C₁₀烯基、C₂-C₁₀杂烯基、C₂-C₁₀炔基、C₂-C₁₀杂炔基、C₃-C₈环烷基、C₃-C₈杂环基、芳基、杂芳基或者：(i)R¹⁵和R¹⁶可相互连接形成四至八-元环烷基或杂环基，或R¹⁵和R¹⁹相互连接形成五至八-元环烷基或杂环基，或R¹⁵和R²⁰相互连接形成五至八-元环烷基或杂环基，和(ii)同样，独立地，R¹⁷和R¹⁸相互连接形成三至八-元环烷基或杂环基，其中每个所述烷基、芳基、杂芳基、环烷基或杂环基可未被取代或任选独立被一个或多个选自下述的部分取代：羟基、烷氧基、芳氧基、巯基(thio)、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺酰基芳基磺酰基、磺酰氨基、烷基磺酰氨基、芳基磺酰氨基、酮基、羧基、烷氧羰基(carbalkoxy)、酰胺基(carboxamido)、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰基氧基、烷基脲基、芳基脲基、卤素、氰基和硝基。

上面陈述的“A和M相互连接，以使上面式I中所示的部分：

形成三、四、六、七或八-元环烷基、四至八-元杂环基、六至十-元芳基或五至十-元杂芳基”可如下述以非限制性方式说明。因此。例如，在其中A和M连接以使上面式所示的部分：

形成六-元环烷基(环己基)的情况下，式I可如下表示：

本领域中普通技术人员应了解，当上述部分中的A和M：

(即M-L-E-A连接在一起)连接形成三、四、七或八-元环烷基、四至八-元杂环基、六至十-元芳基或五至十-元杂芳基时，式I可达成相似的描述。

在上述R、R′、R²和R³的定义中，优选的烷基由1-10个碳原子构成，优选的烯基或炔基由2-10个碳原子构成，优选的环烷基由3-8个碳原子构成，优选的杂烷基、杂芳基或杂环烷基具有1-6个氧、氮、硫或磷原子。

式I代表的化合物，其本身或与一种或多种其它本文公开的合适的药物联合，可用于治疗下述疾病，如HCV、HIV、AIDS(获得性免疫缺陷综合征)和相关病症，也可用于调节丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶活性，预防HCV或改善一种或多种丙型肝炎的症状。这种调节、治疗、预防或改善可由本发明化合物和包含该化合物的药用组合物或制剂来完成。不想被理论限制，据信HCV蛋白酶可能为NS3或NS4a蛋白酶。本发明化合物可抑制这样的蛋白酶。它们还可调节丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工。

                       发明详述

在一个实施方案中，本发明公开了由结构式1代表的化合物或其或药学可接受盐、溶剂合物或酯，其中各种部分如上所定义。

在另一个实施方案中，R¹为NR⁹R¹⁰，且R⁹为H，R¹⁰为H、烷基、芳基、杂烷基、杂芳基、环烷基、烷基-芳基、烷基-杂芳基、芳基-烷基、烯基、炔基或杂芳基-烷基。

在另一个实施方案中，R¹⁰选自：

在另一个实施方案中，R²选自下面的部分：

在另一个实施方案中，R³选自：

其中R³¹为OH或O-烷基；且

R³²为H、C(O)CH₃、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。

在另外的实施方案中，R³选自下面的部分：

在另一个实施方案中，Y选自：

其中Y³⁰和Y³¹选自：

Y³²选自：

且Y¹²选自H、COOH、COOMe、CONH₂、OMe、OH、OCF₃、OCH(CH₃)₂、OC(CH₃)₃、F、Cl、Br、NH₂、NHSO₂CH₃、NHC(O)CH₃、NHCO₂CH₃、NO₂、SO₂NH₂、CF₃、Me、Et、异丙基、环丙基、叔丁基、苯基。

在另一个实施方案中，部分：

选自下述结构：

在另外的实施方案中，部分：

选自下述结构：

在又另外的实施方案中，部分：

选自下述结构：

在再另外的实施方案中，R¹为NHR¹⁰，其中R¹⁰选自：

R²选自下面的部分：

R³选自下面的部分：

Y选自：

其中Y³⁰和Y³¹可相同或不同，各自独立选自：

其中Y³²选自：

且Y¹²选自H、COOH、COOMe、CONH₂、OMe、OH、OCF₃、OCH(CH₃)₂、OC(CH₃)₃、F、Cl、Br、NH₂、NHSO₂CH₃、NHC(O)CH₃、NHCO₂CH₃、NO₂、SO₂NH₂、CF₃、Me、Et、异丙基、环丙基、叔丁基或苯基；且部分：

为：

显示出极佳HCV蛋白酶抑制活性的本发明代表性的化合物稍后在本说明书的表1和2中与它们在HCV连续测定的生物活性(以纳摩尔表示的Ki^*值范围，nM)一起列出。

在另外的实施方案中，本发明在表3中公开了下面的化合物：

                            表3

除非另有说明，上面所用的和整个公开中的下述术语应被理解为具有下述意义：

“患者”包括人类和动物。

“哺乳动物”是指人类和其它哺乳动物。

“烷基”是指链中包含约1-20个碳原子的直链或支链的脂肪族烃基。优选的烷基链中包含约1-12个碳原子。更优选的烷基链中包含约1-6个碳原子。支链的烷基是指直链烷基链上连有一个或多个低级烷基如甲基、乙基或丙基。“低级烷基”是指链中具有约1-6个碳原子的基团，可为直链或支链的。术语“取代的烷基”是指所述烷基可被一个或多个取代基取代，所述取代基可可相同或不同，每个取代基独立选自卤素、烷基、芳基、环烷基、氰基、羟基、烷氧基、烷硫基、氨基、-NH(烷基)、-NH(环烷基)、-N(烷基)₂、-N(烷基)₂、羧基和-C(O)O-烷基。合适的烷基的非限制性的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基和叔丁基。

“烯基”是指包含至少一个C-C双键的脂肪族烃基，其可为直链或支链，链中包含约2-15个碳原子。优选的烯基链中具有约2-12个碳原子；更优选的链中有约2-6个碳原子。支链的烯基是指直链烯基链上连有一个或多个低级烷基如甲基、乙基或丙基。“低级烯基”是指链中有约2-6个碳原子，可为直链或支链。术语“取代的烯基”是指所述烯基可被一个或多个取代基取代，所述取代基可相同或不同，每个取代基独立选自卤素、烷基、芳基、环烷基、氰基、烷氧基和-S(烷基)。合适的烯基的非限制性的实例包括乙烯基、丙烯基、正丁烯基、3-甲基丁-2-烯基、正戊烯基、辛烯基和癸烯基。

“炔基”是指包含至少一个C-C三键的脂肪族烃基，其可为直链或支链，链中含有约2-15个碳原子。优选的炔基链中有约2-12个碳原子；更优选的链中有约2-4个碳原子。支链的炔基是指支链炔基链上连有一个或多个低级烷基，如甲基、乙基或丙基。合适的炔基的非限制性的实例包括乙炔基、丙炔基、2-丁炔基和3-甲基丁炔基。术语“取代的炔基”是指所述炔基可被一个或多个取代基取代，所述取代基可相同或不同，每个取代基独立选自烷基、芳基和环烷基。

“芳基”是指含有约6-14个碳原子，优选含有约6-10个碳原子的芳香族单环或多环环系。所述芳基可任选被一个或多个“环系取代基”取代，所述环系取代基可相同或不同，如本文中所定义。合适的芳基的非限制性的实例包括苯基和萘基。

“杂芳基”是指含有约5-14个环原子，优选约5-10个环原子的芳香族单环或多环环系，其中一个或多个环原子为不为碳的元素，如氮、氧或硫，单独的或组合在一起。优选的杂芳基包含约5-6个环原子。所述“杂芳基”可任选被一个或多个“环系取代基”取代，所述环系取代基可相同或不同，如本文中所定义。杂芳基根名前的前缀氮杂、氧杂或硫杂是指至少一个氮、氧或硫原子分别作为环原子。杂芳基的氮原子可任选被氧化为相应的N-氧化物。合适的杂芳基的非限制性的实例包括吡啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基、吡啶酮(包括N-取代的吡啶酮)、异唑基、异噻唑基、唑基、噻唑基、吡唑基、呋咱基、吡咯基、吡唑基、三唑基、1，2，4-噻二唑基、吡嗪基、哒嗪基、喹喔啉基、酞嗪基、羟吲哚基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、苯并呋咱基、吲哚基、氮杂吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喹啉基、咪唑基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、噻吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、异喹啉基、苯并氮杂吲哚基、1，2，4-三嗪基、苯并噻唑基等。术语“杂芳基”还指部分饱和的杂芳基部分，如四氢异喹林基、四氢喹啉基等。

“芳烷基”或“芳基烷基”是指芳基-烷基-基团，其中芳基和烷基如前所述。优选的芳烷基包含低级烷基。合适的芳烷基的非限制性的实例包括苄基、2-苯乙基和萘甲基。与母体部分连接的键通过烷基。

“烷基芳基”是指烷基-芳基-基团，其中烷基和芳基如前述所述。优选的烷基芳基包含低级烷基。合适的烷基芳基的非限制性的实例为甲苯基。与母体部分连接的键通过芳基。

“环烷基”是指包含约3-10个碳原子，优选约5-10个碳原子的非芳香性的单-或多环环系。优选的环烷基环包含约5-7个环原子。所述环烷基可任选被一个或多个“环系取代基”取代，所述环系取代基可相同或不同，如上述所定义。合适的单环环烷基的非限制性的实例包括环丙基、环戊基、环己基、环庚基等。合适的多环环烷基的非限制性的实例包括1-萘烷基(decalinyl)，降冰片基(norbornyl)，金刚烷基(adamantyl)等，以及部分饱和的种类，如茚满基、四氢萘基等。

“卤素”是指氟、氯、溴或碘。

优选为氟、氯和溴。

“环系取代基”是指与芳香性或非芳香性环系连接的取代基，如置换环上的可用氢的取代基。环系取代基可相同或不同，各自独立选自烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳烷基、烷基芳基、杂芳烷基、杂芳基烯基、杂芳基炔基、烷基杂芳基、羟基、羟基烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、酰基、芳酰基、卤素、硝基、氰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、烷硫基、芳硫基、杂芳基硫基、芳烷基硫基、杂芳烷基硫基、环烷基、杂环基、-C(＝N-CN)-NH₂、-C(＝NH)-NH₂、-C(＝NH)-NH(烷基)、Y₁Y₂N-、Y₁Y₂N-烷基-、Y₁Y₂NC(O)-、Y₁Y₂NSO₂-和-SO₂NY₁Y₂，其中Y₁和Y₂可相同或不同，独立选自氢、烷基、芳基、环烷基和芳烷基。“环系取代基”还可指同时置换环系上两个相邻碳原子(每个碳上一个氢)的两个有效氢的单个部分。这样的部分的实例为亚甲二氧基(methylene dioxy)、亚乙二氧基(ethylenedioxy)、-C(CH₃)₂-等，其形成下面的部分，如：

“杂环基”是指包含约3-10个环原子，优选约5-10个环原子的非芳香性饱和单环或多环环系，其中一个或多个环系上的原子为不为碳的元素，例如，氮、氧或硫，单独的或组合的。环系中不存在相邻的氧和/或硫原子。优选的杂环基包含约5-6个环原子。在杂环基根名前的前缀氮杂、氧杂或硫杂是指至少一个氮、氧或硫原子分别作为环原子。杂环基环中的任何-NH可为受保护的，如为-N(Boc)、-N(CBz)、-N(Tos)基团等；这种保护也被认为是本发明的一部分。所述杂环基可任选被一个或多个“环系取代基”取代，所述环系取代基可相同或不同，如本文所定义。所述杂环基的氮或硫原子可任选被氧化为相应的N-氧化物，S-氧化物或S，S-二氧化物。合适的单环杂环基环的非限制性的实例包括哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、噻唑烷基、1，4-二烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基(tetrahydrothiophenyl)、内酰胺、内酯等。

应注意在本发明含有杂原子的环系中，在与N、O或S相邻的碳原子上没有羟基，同样在与其它杂原子相邻的碳原子上也没有N或S基团。因此，例如下述环上：

没有-OH直接连在标记为2和5位碳原子上。

还应注意互变异构形式，如下述部分：

在本发明的某些实施方案中被认为是等同的。

“炔基烷基”是指炔基-烷基-基团，其中炔基和烷基如前所述。优选的炔基烷基包含低级炔基和低级烷基。与母体部分连接的键通过烷基。合适的炔基烷基的非限制性的实例包括炔丙基甲基。

“杂芳烷基”是指杂芳基-烷基-基团，其中杂芳基和烷基如前所述。优选的杂芳烷基包含低级烷基。合适的杂芳烷基的非限制性的实例包括吡啶基甲基和喹啉-3-基甲基。与母体部分连接的键通过烷基。

“羟基烷基”是指HO-烷基-基团，其中烷基如前所述。优选的羟基烷基包含低级烷基。合适的羟基烷基的非限制性的实例包括羟基甲基和2-羟基乙基。

“酰基”是指H-C(O)-、烷基-C(O)-或环烷基-C(O)-基团，其中各种基团如前所述。与母体部分连接的键通过羰基。优选的酰基包括低级烷基。合适的酰基的非限制性的实例包括甲酰基、乙酰基和丙酰基。

“芳酰基”是指芳基-C(O)-基团，其中芳基如前所述。与母体部分连接的键通过羰基。合适的基团的非限制性的实例包括苯甲酰基和1-萘甲酰基。

“烷氧基”是指烷基-O-基团，其中烷基如前所述。合适的烷氧基的非限制性的实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基和正丁氧基。与母体部分连接的键通过醚氧。

“芳氧基”是指芳基-O-基团，其中芳基如前所述。合适的芳氧基的非限制性的实例包括苯氧基和萘氧基。与母体部分连接的键通过醚氧。

“芳烷基氧基”是指芳烷基-O-基团，其中芳烷基如前所述。合适的芳烷基氧基的非限制性的实例包括苄氧基和1-或2-萘甲氧基。与母体部分连接的键通过醚氧。

“烷硫基”是指烷基-S-基团，其中烷基为如前所述。合适的烷硫基的非限制性的实例包括家甲硫基和乙硫基。与母体部分连接的键通过硫。

“芳硫基”是指芳基-S-基团，其中芳基为如前所述。合适的芳硫基的非限制性的实例包括苯硫基和萘硫基。与母体部分连接的键通过硫。

“芳烷基硫基”是指芳烷基-S-基团，其中芳烷基为如前所述。合适的芳烷基硫基的非限制性的实例为苄硫基。与母体部分连接的键通过硫。

“烷氧基羰基”是指烷基-O-CO-基团。合适的烷氧基羰基的非限制性的实例包括甲氧基羰基和乙氧基羰基。与母体部分连接的键通过羰基。

“芳氧基羰基”是指芳基-O-C(O)-基团。合适的芳氧基羰基的非限制性的实例包括苯氧基羰基和萘氧基羰基。与母体部分连接的键通过羰基。

“芳烷氧基羰基”是指芳烷基-O-C(O)-基团。合适的芳烷氧基羰基的非限制性的实例为苄氧基羰基。与母体部分连接的键通过羰基。

“烷基磺酰基”是指烷基-S(O₂)-基团。优选的基团为其中烷基为低级烷基的基团。与母体部分连接的键通过磺酰基。

“芳基磺酰基”是指芳基-S(O₂)-基团。与母体部分连接的键通过磺酰基。

术语“取代的”是指指定原子上的一个或多个氢被选自所指示的基团置换，条件是不超过指定原子存在环境下的正常化合价，且所述取代生成稳定的化合物。只在该组合可产生稳定化合物时才允许取代基和/或变量的组合。至于“稳定的化合物”或“稳定的结构”，是指结构足够坚固可从反应混合物中分离至有用程度的纯度且可制备为有效治疗药物制剂的化合物。

术语“一个或多个”或“至少一个”，当指示取代基、化合物组合剂的数目时，是指根据上下文至少一个，至多为化学上和物理上可允许的存在或加上的取代基、化合物、组合剂等的最大数目。此类技术和知识为相关技术人员技术范围内所熟知的。

术语“任选取代的”是指任选被特定的基团、原子团或部分取代。

术语“分离的”或“分离形式的”化合物是指从所述化合物合成过程或天然原料或其组合物中分离出之后的物理状态。术语“纯化的”或“纯化形式的”化合物是指所述化合物从纯化过程或本文描述的过程或技术人员熟知的过程中得到之后的物理状态，其具有足够的纯度，可被本文描述的或技术人员熟知的标准分析技术鉴定。

还应注意在本文的正文、方案、实施例和表格中任何具有未满足化合价的碳或杂原子被假定具有满足其化合价的氢。

当化合物中的官能团被称为“受保护的”时，是指该基团为修改的形式以防止在该化合物进行反应时受保护位置发生不需要的副反应。本领域中普通技术人员都知道合适的保护基团，在标准的教科书中也有引用，如T.W.Greene et al，Protective Groups in organicSynthesis(1991)，Wiley，New York。

当任何变量(如芳基、杂环、R²等)在任何成分或式1中出现不止一次时，其每次出现时的定义与其它每次出现时的定义无关。

本文所用的术语“组合物”是指包括含有特定量的特定成分的产品以及直接或间接得自特定量的特定成分组合的任何产品。

本文也涉及本发明化合物的前药和溶剂合物。本文所用术语“前药”表示化合物为药物前体，当给予患者后，通过代谢或化学过程进行化学转化产生式1化合物或其盐和/或溶剂合物。在T.Higuchi andV.Stella，Pro-drugs as Novel Delivery Systems(1987)14 of the A.C.S.Symposium Series，and in Bioreversible Carriers in DrugDesign，(1987)Edward B.Roche，ed.，American PharmaceuticalAssociation and Pergamon Press中提供了关于前药的讨论，其都通过引用结合到本文中。

“溶剂合物”是指本发明化合物与一个或多个溶剂分子的物理结合。该物理结合涉及包括氢键在内的各种程度的离子和共价键合。在某些例子中，溶剂合物可被分离，例如当一个或多个溶剂分子结合在晶状固体的晶格中时。“溶剂合物”包含溶液相合可分离的溶剂合物。合适的溶剂合物的非限制性的实例包括乙醇合物、甲醇合物等。“水合物”为其中溶剂分子为H₂O的溶剂合物。

“有效量”或“治疗有效量”是指本发明化合物或组合物有效抑制CDK(s)从而产生所需治疗、改善、抑制或预防效果的量。

式1的化合物可形成盐，其也在本发明的范围内。除非另有说明，本文中提到的式1的化合物应被理解为包括其盐。本文所用术语“盐”表示与无机酸和/或有机酸形成的酸性盐以及与无机碱和/或有机碱形成的碱性盐。另外，当式1的化合物包含碱性部分，如但不限于吡啶或咪唑，和酸性部分，如但不限于羧酸时，可形成两性离子(“内盐”)，其也包括在本发明所用术语“盐”的范围内。尽管其它盐也有效，但优选药学可接受的(即无毒的、生理学可接受的)盐。例如，可通过式1化合物与一定量的如等当量的酸或碱，在介质中反应，如一种在其中盐可沉淀的介质，或在水性介质中反应然后冻干，形成式1化合物的盐。

示例性的酸加成盐包括乙酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、重硫酸盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、草酸盐、磷酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、湖泊酸盐、硫酸盐、酒石酸盐(tartarates)、硫氰酸盐(thiocyanates)、甲苯磺酸盐等。另外，例如在P.Stahl et al，CamilleG.(eds.)Handbook of Pharmaceutical Salts.Properties，Selection andUse.(2002)Zurich：Wiley-VCH；S.Berge et al，Journal of PharmaceuticalSciences(1977)66(1)1-19；P.Gould，Intemational J.ofPharmaceutics(1986)33 201-217；Anderson et al，The Practice ofMedicinal Chemistry(1996)，Academic Press，New York；and in TheOrange Book(Food & Drug Administration，Washington，D.C.on theirwebsite)中讨论了通常认为适合从碱性药用化合物形成药学可用盐的酸。这些公开在此通过引用结合到本文中。

示例性的碱性盐包括铵盐，碱金属盐如钠、锂和钾盐，碱土金属盐如钙和镁盐，与有机碱的盐(如，有机胺)如二环己基胺、叔丁基胺，以及与氨基酸的盐如精氨酸、赖氨酸等。可用下述试剂使碱性含氮基团季铵化(quarternized)，如低级烷基卤化物(如甲基、乙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物)、二烷基硫酸酯类(如二甲基、二乙基和二丁基硫酸酯)、长链卤化物(如癸基、月桂基和硬脂酰基氯化物、溴化物和碘化物)、芳烷基卤化物(如苄基和苯乙基溴化物)和其它。

所有这些酸盐与碱盐为本发明范围内的药学可接受盐，且为了本发明，所有酸和碱盐被认为相当于相应化合物的游离形式。

本发明化合物药学可接受酯包括下述基团：(1)得自羟基酯化作用的羧酸酯类，其中所述酯基团中羧酸部分的非羰基部分选自直链或支链烷基(如，乙酰基、正丙基、叔丁基或正丁基)、烷氧基烷基(如甲氧基甲基)、芳烷基(如苄基)、芳氧基烷基(如苯氧基甲基)、芳基(如任选被如卤素、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基或氨基取代的苯基)；(2)磺酸酯类，如烷基-或芳烷基磺酰基(如甲烷磺酰基)；(3)氨基酸酯类(如L-缬氨酰基或L-异亮氨酰基)；(4)磷酸酯类和(5)单、二-或三磷酸酯类。所述磷酸酯类可被进一步酯化，如被C_1-20醇或其反应性衍生物，或被2，3-二(C_6-24)酰基丙三醇酯化。

式1的化合物及其盐、溶剂合物、酯和前药可以它们的互变异构形式存在(如为酰胺或亚胺基醚)。所有这些互变异构形式也是本发明的一部分。

本发明化合物(包括化合物的盐、溶剂合物、酯和前药以及前药的盐和溶剂合物)的所有立体异构体(如几何异构体、光学异构体等)，如那些由于不同取代基上的不对称碳而存在的，包括对映异构体形式(其甚至在无不对称碳下存在)、旋转异构体形式、阻转异构体和非对映异构体形式都在本发明的范围内，位置异构体(如4-吡啶基和3-吡啶基)同样如此。本发明化合物的单一立体异构体可如基本上无其它异构体，或经混合成为外消旋体，或所有其它或其它选择的立体异构体混合。本发明的手性中心可具有如1974年IUPAC推荐定义的S或R构型。术语“盐”、溶剂合物”、“前药”等的使用，可同样应用于本发明化合物的对映异构体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体、位置异构体、外消旋体或前药的盐、溶剂合物和前药。

式I化合物的多晶型，以及式I化合物的盐、溶剂合物、酯和前药都包含在本发明内。

应了解本文讨论的式1化合物的治疗应用的用途适用于如在下面段落中示例的式1化合物的每个单独的化合物本身或一种或多种化合物的组合。相同的理解也适用于包含这些化合物的药用组合物和涉及这些化合物的治疗方法。

本发明的化合物可具有药理学特征；特别地，式1的化合物可为HCV蛋白酶的抑制剂，式1化合物的每个单独的化合物本身或一种或多种化合物可与一种或多种选自式1范围的化合物组合。所述化合物可用于治疗下述疾病，如HCV、HIV(AIDS，获得性免疫缺陷综合征)及相关病症，也可调节丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶的活性，预防HCV或改善一种或多种丙型肝炎的症状。

式1的化合物可用于生产治疗HCV蛋白酶相关性病症的药物，如所述方法包括使式1的化合物与药学可接受载体紧密接触。

在另一个实施方案中，本发明提供了包含本发明化合物之一或多种作为有效成分的药用组合物。所述药用组合物通常还包含至少一种药学可接受载体稀释剂、赋形剂或载体(在本文中都称为载体材料)。由于其HCV抑制活性，这些药用组合物可有效治疗丙型肝炎及相关病症。

在又另一个实施方案中，本发明公开了制备包含本发明化合物作为有效成分的药用组合物的方法。在本发明的药用组合物和方法中，活性成分通常与合适的载体材料混合给予，选择适当的给药方式，即口服片剂、胶囊剂(固体填充的、半固体填充的或液体填充的)、构建用粉末剂(powders for constitution)、口服凝胶、酏剂、分散颗粒剂(dispersible granules)、糖浆剂、混悬剂等，并与常规制药实践相一致。例如，对于口服给药的片剂或胶囊形式，活性药物组分可与无毒药学可接受惰性载体混合，如乳糖、淀粉、蔗糖、纤维素、硬脂酸镁、磷酸二钙、硫酸钙、滑石粉、甘露醇、乙醇(液体形式)等混合。此外，当需要时，可在混合物中掺入合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂。散剂和片剂可包含约5％-约95％本发明组合物。

合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖类(natural sugars)、玉米甜味剂、天然或合成胶如阿拉伯胶、海藻酸钠、羧基甲基纤维素、聚乙二醇和蜡。在润滑剂中，可用于这些剂型的有硼酸、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括淀粉、甲基纤维素、瓜儿胶等。

在适当时也可加入甜味剂和调味剂和防腐剂。上面提到的一些术语，即崩解剂、稀释剂、润滑剂、粘合剂等，在下面将更详细地讨论。

此外，本发明的组合物可制成缓释形式(sustained release form)以提供任何一种或多种组分或活性成分的可控速率的释放，使治疗效果即HCV抑制活性达到最佳化。缓释的合适的剂型包括含有不同崩解速率层的分层片剂，或制成片剂形式的用活性成分浸透的控制释放多聚体基质，或含有这些浸透的或被包裹的多孔多聚体基质的胶囊。

液体形式的制剂包括溶液剂、混悬剂和乳剂。作为例子可提到水或水-丙二醇溶液剂，用于胃肠外注射剂或加入甜味剂和安慰剂(pacifiers)的口服溶液、混悬剂和乳剂。液体形式的制剂还包括鼻内给药的溶液剂。

适于吸入的气雾剂可包括溶液和固体粉末形式，其可与药学可接受载体如惰性压缩气体如氮混合。

至于制备栓剂，首先使低熔点蜡如脂肪酸甘油酯混合物，如可可脂，然后通过搅拌或类似混合将活性成分均匀分散在其中。然后将熔化的均匀混合物倒入适当大小的模子中，使其冷却并固化。

还包括在用前不久将其转化为供口服或胃肠外给药液体形式制剂的固体形式制剂。该液体制剂包括溶解剂、混悬剂和乳剂。

本发明的化合物还可经皮肤递药。经皮给药组合物可为乳膏、洗剂、气雾剂和/或乳剂，并可包含在基质或贮器型的透皮贴剂中，如本领域中用于此目的的常规方式。

本发明的化合物还可口服、静脉给药、鼻内给药或皮下给药。

本发明的化合物还可包含以单位剂型形式存在的制剂。在该形式中，制剂可被分为包含合适量的活性成分的适当大小的单位剂量，如达到所需目的的有效量。

在单位剂量制剂中的本发明化合物的量可以通常方式在约1.0mg-约1000mg间改变或调整，优选约1.0-约950mg，更优选约1.0-约500mg，通常在约1-约250mg，根据特定应用而定。实际应用剂量可根据患者的年龄、性别、体重和所治疗病症的严重性而改变。本领域中熟练技术人员熟知这些技术。

通常，包含活性成分的人类口服剂型可每日给药1或2次。可根据主治医师的判断而调整给药的量和频率。通常推荐的口服日剂量为约1.0mg-约1,000mg每日，单次或分次服用。

一些有用的术语描述如下：

胶囊-是指由甲基纤维素、聚乙烯醇或变性明胶或淀粉制成的特殊的容器或外壳，用于容纳或包含含有活性成分的组合物。硬壳胶囊通常由凝胶强度相对较高的骨胶或猪皮明胶混合物制成。胶囊本身可包含少量染料、不透光剂(opaquing agents)、增塑剂和防腐剂。

片剂-是指包含活性成分与合适稀释剂的压制或模制的固体剂型。片剂可通过压制混合物或通过湿法制粒或干法制粒得到的颗粒或通过紧压法制得。

口服凝胶-是指分散或溶解在亲水性半固体基质中的活性成分。

构建用粉末是指含有活性成分和合适的稀释剂可悬浮于水或果汁的粉末混合物。

稀释剂-是指通常构成组合物或剂型主要部分的物质。合适的稀释剂包括糖类如乳糖、蔗糖、甘露醇和山梨醇；得自小麦、玉米、大米和土豆的淀粉类；及纤维素类如微晶纤维素。组合物中稀释剂的量可为的约10-约90％总组合物重量，优选为约25-约75％，更优选为约30-约60％重量，甚至更优选为约12-约60％。

崩解剂-是指加入到组合物中帮助其分裂(崩解)并释放出药物的物质。合适的崩解剂包括淀粉类；“冷水可溶的”改良淀粉类如羧甲基淀粉钠；天然和合成胶如刺槐豆、刺梧桐、瓜儿胶、黄蓍胶、和琼脂；纤维素衍生物类如甲基纤维素和羧甲基纤维素钠；微晶纤维素类和交联微晶纤维素类如交联羧甲纤维素钠；海藻酸盐类如海藻酸和海藻酸钠；黏土类如膨润土；及泡腾混合物。组合物中崩解剂的量可为约2-约15％组合物重量，更优选为约4-约10％重量。

粘合剂-是指将粉末结合或“粘合”在一起并通过形成颗粒使其内聚的物质，从而在制剂中作为“黏着剂”。粘合剂增加在稀释剂或填充剂中已经可得到的内聚力。合适的粘合剂包括糖类如蔗糖；得自小麦、玉米、大米和土豆的淀粉类；天然胶如阿拉伯胶、明胶和黄蓍胶；海藻衍生物类如海藻酸、海藻酸钠和海藻酸钙铵；纤维素物质如甲基纤维素和羧甲基纤维素钠和羟基丙基甲基纤维素；聚乙烯吡咯烷酮；及无机物如硅酸镁铝。组合物中粘合剂的量可为约2-约20％组合物重量，更优选为约3-约10％重量，甚至更优选为约3-约6％重量。

润滑剂-是指加入到剂型中使片剂、颗粒等被压制后能购减少摩擦或磨损而从模子或冲头释出的物质。合适的润滑剂包括硬脂酸盐如硬脂酸镁、硬脂酸钙或硬脂酸钾；高熔点蜡类；及水可溶性润滑剂如氯化钠、苯甲酸钠、乙酸钠、油酸钠、聚乙二醇和d′l-亮氨酸。润滑剂通常在压制前的最后步骤加入，因为它们必须存在于颗粒的表面和它们与压片机配件之间。组合物中润滑剂的量可为约0.2-约5％组合物重量，优选为约0.5-约2％，更优选为约0.3-约1.5％重量。

助流剂(Glident)-放止结块并改善颗粒流动性质以使流动平滑而均匀的物质。合适的助流剂包括二氧化硅和滑石粉。组合物中助流剂的量为约0.1％-约5％总组合物重量，更优选为约0.5-约2％重量。

着色剂-给组合物或剂型提供着色的赋形剂。这种赋形剂包括食品等级染料和吸附在合适吸附剂如黏土或氧化铝上的食品等级染料。着色剂的量可在约0.1-5％组合物重量间变化，优选为约0.1-约1％。

生物利用度-是指与标准或对照比较，活性药物成分或治疗部分从给药剂型被吸收到循环系统的速率和程度。

制备片剂的常规方法为已知的。这些方法包括干法如直接压片和由紧压产生的颗粒压片，或湿法或其它特殊程序。制备其它给药剂型如胶囊、栓剂等的方法也是众所周知的。

本发明的另一实施方案公开了上面公开的本发明化合物或药用组合物在治疗如丙型肝炎的疾病中的用途。所述方法包括给予患该疾病或需要这种治疗的疾病的患者治疗有效量的本发明化合物或药用组合物。

在又另一个实施方案中，本发明的化合物可用单一疗法或联合疗法(如二元联合、三元联合等)来治疗人类HCV，所述联合疗法如与抗病毒和/或免疫调节药物联合。此类抗病毒和/或免疫调节药物的实例包括利巴韦林(得自Schering-Plough Corporation，Madison，NewJersey)和Levovirin^TM(得自ICN Pharmaceuticals，Costa Mesa，California)、VP 50406^TM(得自Viropharma，Incorporated，Exton，Pennsylvania)、ISIS 14803^TM(得自ISIS Pharmaceuticals，Carlsbad，California)、Heptazyme^TM(得自Ribozyme Pharmaceuticals，Boulder，Colorado)、VX 497^TM(得自Vertex Pharmaceuticals，Cambridge，Massachusetts)、Thymosin^TM(得自SciClone Pharmaceuticals，San Mateo，California)、Maxamine^TM(Maxim Pharmaceuticals，San Diego，California)、霉酚酸酯(得自Hoffman-LaRoche，Nutley，New Jersey)、干扰素(如干扰素-α、PEG-干扰素α缀合物)等。“PEG-干扰素α缀合物”为干扰素α分子与PEG分子共价连接。示例性的PEG-干扰素α缀合物包括干扰素α-2a(Roferon^TM，得自Hoffman La-Roche，Nutley，New Jersey)，呈聚乙二醇化干扰素形式(pegylated interferon)α-2a(如以商品名Pegasys^TM销售)、干扰素α-2b(intron^TM，得自Schering-PloughCorporation)，呈聚乙二醇化干扰素α-2b形式(如以商品名PEG-intron^TM销售)、干扰素α-2c(Berofor Alpha^TM，得自Boehringer Ingelheim，Ingelheim，Germany)或由天然存在的干扰素α的共有序列(consensussequence)测定而定义的复合干扰素(consensus interferon)(Infergen^TM，得自Amgen，Thousand Oaks，California)。

如前所述，本发明还包括本发明化合物的互变异构体、旋转异构体、对映异构体和其它立体异构体。因此，本领域中熟练技术人员了解一些本发明的化合物可以合适的异构体形式存在。这些变更也在本发明的范围内。

本发明的另一实施方案公开了制备本文公开的化合物的方法。所述化合物可由本领域中已知的几种技术制备。下面的反应方案描述了示例性的程序。这些例子不应被理解为是限制本发明在所附权利要求中定义的范围。可选择的机制途径和类似结构对本领域中熟练技术人员是显而易见的。

应了解当下面的示例性方案描述几种代表性本发明化合物的制备时，以所述取代为基础的任何天然和非天然氨基酸的合适的取代将会导致形成所需化合物。这些变更被认为在本发明的范围内。

在下面描述的程序中，用到了以下缩写：

                     缩写

在方案的说明、制备和实施例中所用的缩写如下：

THF：四氢呋喃

DMF：N，N-二甲基甲酰胺

EtOAc：乙酸乙酯

AcOH：乙酸

HOOBt：3-羟基-1，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮

EDCI：1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐

NMM：N-甲基吗啉

ADDP：1，1′-(偶氮二羰基(Azodicarbobyl))二哌啶

DEAD：偶氮二甲酸二乙基酯

DIAD：偶氮二甲酸二异丙基酯

MeOH：甲醇

EtOH：乙醇

Et₂O：二乙基醚

DMSO：二甲亚砜

HOBt：N-羟基苯并三唑

PyBrOP：溴-三-吡咯烷磷六氟磷酸盐(pyrrolidinophosphoniumhexafluorophosphate)

DCM：二氯甲烷

DCC：1，3-二环己基碳化二亚胺

TEMPO：2，2，6，6-四甲基-1-哌啶基氧基

Phg：苯基甘氨酸

Chg：环己基甘氨酸

Bn：苄基

Bz：苄基

Et：乙基

Ph：苯基

iBoc：异丁氧基羰基

iPr：异丙基

^tBu或Bu^t：叔丁基

Boc：叔丁氧基羰基

Cbz：苄氧基羰基

Cp：环戊二烯基

Ts：对-甲苯磺酰基

Me：甲基

Ms或Mesyl：甲烷磺酰基

HATU：O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸盐

DMAP：4-N，N-二甲基氨基吡啶

Bop：苯并三唑-1-基-氧基-三(二甲基氨基)六氟磷酸盐

PCC：氯铬酸吡啶

DIBAL-H：二异丙基氢化铝

rt或RT：室温

quant.：定量产率

h或hr：小时

min：分钟

TFA：三氟乙酸

              制备目标化合物的通用方案

本发明化合物用下述通用方案(方法A-E)合成。

方法A：

在酸性条件下将1.01的N-Boc官能团脱保护得到盐酸盐1.02，随后用肽偶合法将1.02与N-Boc-叔-亮氨酸偶合得到1.03。N-Boc脱保护后接着用合适的异氰酸酯处理得到脲1.05。甲基酯的水解得到酸1.06。酸1.06与合适的P₁-P′伯酰胺部分进行肽偶合得到羟基酰胺1.07。氧化(Moffatt氧化或相关方法-T.T.Tidwell，Synthesis，1990，857；或Dess-Martin′s高碘酸内酯(Dess-Martin′s periodinane)氧化反应(J.Org.Chem.，1983，48，4155)得到目标化合物1.08。

方法B

酸1.06与合适的P₁-P′仲酰胺部分进行肽偶合得到羟基酰胺1.09。氧化(Moffatt或Dess-Martin′s)得到目标化合物1.10。

方法C

在另一种变通方法中，N-Boc-P₂-P₃-酸1.17与合适的P₁-P′酰胺部分进行肽偶合得到羟基酰胺1.11。氧化(Moffatt或Dess-Martin′s)得到酮酰胺1.12。将N-Boc官能团脱保护得到盐酸盐1.13。用合适的异氰酸酯(或异氰酸酯等价物)处理得到目标化合物1.14。

方法D

在又另一个变通方法中，通过将盐酸盐1.13与4-硝基苯基氯甲酸酯反应转化为4-硝基苯基氨基甲酸酯1.15。然后用选择的胺(或胺盐酸盐)处理得到目标化合物1.14。

方法E

在又另一个变通方法中，将二肽盐酸盐1.03如上所述转化为4-硝基苯基氨基甲酸酯。用选择的胺(或胺盐酸盐)处理得到脲衍生物1.05。水解并如方法A/B所述进一步加工，得到目标化合物1.14。

                     中间体的制备

中间体10.11和10.12的制备：

步骤1：

在N₂下将搅拌的酮亚胺10.01(50g，187.1mmol)的无水THF(400mL)溶液冷至-78℃，用1MK-^tBuO(220mL，1.15当量)的THF溶液处理。将反应混合物升至0℃搅拌1h，然后用溴甲基环丁烷(28mL，249mmol)处理。反应混合物在室温下搅拌48h，真空浓缩。残留物溶于Et₂O(300mL)并用HCl水溶液(2M，300mL)处理。所得溶液在室温下搅拌5h，用Et₂O(1L)萃取。水层用NaOH(50％水溶液)调至碱性pH～12-14，然后用CH₂Cl₂(3×300mL)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO₄)，过滤，浓缩得到无色油状纯胺(10.02，18g)。

步骤2

在0℃将胺10.02(18g，105.2mmol)的CH₂Cl₂(350mL)溶液用二-叔丁基二碳酸酯(butyldicarbonate)(23g，105.4mmol)处理，在室温下搅拌12h。反应完成(TLC)后，将反应混合物真空浓缩，残留物溶于THF/H₂O(200ml，1∶1)，用LiOH·H₂O(6.5g，158.5mmol)处理，在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩，碱性水溶液层用Et₂O萃取。水层用浓HCl酸化至pH～1-2，然后用CH₂Cl₂萃取。将合并的有机层干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩得到无色粘稠油状物10.03，其无需进一步纯化而用于下一步骤。

步骤3

将酸10.03(15.0g，62mmol)CH₂Cl₂(250mL)溶液用BOP试剂(41.1g，93mmol)、N-甲基吗啉(27mL)、N，O-二甲基羟基胺盐酸盐9.07g，93mmol)处理并在室温下搅拌过夜。反应混合物用1NHCl水溶液(250mL)稀释，分离各层，水层用CH₂Cl₂(3×300ml)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩，用色谱法纯化(SiO₂，EtOAc/Hex2∶3)得到无色油状酰胺10.04(15.0g)。

步骤4

在0℃，向酰胺10.04(15g，52.1mmol)的无水THF(200mL)溶液中滴加LiAlH₄(1M，93mL，93mmol)溶液。反应混合物在室温下搅拌1h，然后在0℃用KHSO₄(10％水溶液)小心猝灭并搅拌0.5h。反应混合物用HCl水溶液(1M，150mL)稀释，用CH₂Cl₂(3×200mL)萃取。将合并的有机层用HCl水溶液(1M)、饱和NaHCO₃、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)。过滤混合物，真空浓缩得到粘稠的无色油状物10.05(14g)。

步骤5

将醛10.05(14g，61.6mmol)的CH₂Cl₂(50mL)溶液用Et₃N(10.73mL，74.4mmol)和丙酮合氰化氢(10.86g，127.57mmol)处理并在室温下搅拌24hr。反应混合物真空浓缩用HCl水溶液(1M，200mL)稀释，用萃取CH₂Cl₂(3×200mL)。将合并的有机层用H₂O、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩，用色谱法纯化(SiO₂，EtOAc/Hex 1∶4)得到无色液体10.06(10.3g)。

步骤6

在0℃将HCl气体通入CH₃OH(700ml)制备的HCl饱和的甲醇^*，用羟腈10.06处理并加热回流24h。反应物真空浓缩得到10.07，其无需纯化而用于下一步骤。

^*或者也可用将AcCl加入到无水甲醇制得的6M HCl。

步骤7

在-78℃将胺盐酸盐10.07的CH₂Cl₂(200mL)溶液用Et₃N(45.0mL，315mmol)和Boc₂O(45.7g，209mmol)处理。然后将反应混合物在室温下搅拌过夜，用HCl(2M，200mL)稀释，用CH₂Cl₂萃取。将合并的有机层干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩，用色谱法纯化(EtOAc/Hex 1∶4)得到羟基酯10.08。

步骤8

将甲基酯10.08(3g，10.5mmol)的THF/H₂O(1∶1)溶液用LiOH·H₂O(645mg，15.75mmol)处理，并在室温下搅拌2h。反应混合物用HCl水溶液(1M，15mL)酸化，真空浓缩。残留物真空干燥，得到定量产率的10.09。

步骤9

将酸10.09(上述)的CH₂Cl₂(50mL)和DMF(25mL)溶液用NH₄Cl(2.94g，55.5mmol)、EDCl(3.15g，16.5mmol)、HOOBt(2.69g，16.5mmol)和NMM(4.4g，44mmol)处理。反应混合物在室温下搅拌3天。真空除去溶剂，残留物用HCl水溶液(250mL)稀释，用CH₂Cl₂萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO₃水溶液洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩得到10.10，直接用于下面的步骤。(或者可通过在0℃将10.06(4.5g，17.7mmol)与H₂O₂(10mL)水溶液、LiOH·H₂O(820mg，20.8mmol)的50mL CH₃OH溶液反应0.5h直接制得10.10)。

步骤10

将前面步骤中得到的10.10溶于4N HCl的二烷溶液中，并在室温下搅拌2h。反应混合物真空浓缩得到中间体10.11，为固体，其无需进一步纯化而使用。

步骤11

基本上用上面步骤9，10中描述的程序用适当的试剂从化合物10.09制备所需的中间体10.12。

中间体11.01的制备

步骤1

向4-戊炔-1-醇、11.02(4.15g；Aldrich)中加入Dess-Martin高碘酸内酯(30.25g；Aldrich)，所得混合物搅拌45min，然后加入(叔-丁氧基羰基亚甲基)三苯基正膦(26.75g；Aldrich)。将所得暗反应物搅拌过夜，用EtOAc稀释，用亚硫酸钠水溶液、饱和NaHCO₃水溶液、水、盐水洗涤，干燥。减压除去挥发物，残留物用硅胶柱色谱法纯化，用1％EtOAc的己烷溶液洗脱，得到所需化合物11.03(3.92g)。也得到一些不纯的流分，此时先放在一边。

步骤2

用烯烃11.03(1.9g)的正丙醇(20ml；Aldrich)溶液、苄基氨基甲酸酯(4.95g；Aldrich)的正丙醇(40ml)溶液、NaOH(1.29g)的水溶液(79mol)、次氯酸叔丁酯(3.7ml)、(DHQ)2PHAL(0.423g；Aldrich)的正丙醇(37.5ml)溶液和锇酸钾：脱水物(0.1544g；Aldrich)和Angew.Chem.Int Ed.Engl(1998)，35，(23/24)，pp.2813-7中提到的方法，得到粗产物，用硅胶柱层析提纯，用EtOAc∶己烷(1∶5)，得到所需氨基醇11.04(1.37g，37％)白色固体。

步骤3

向酯11.04(0.700g)中加入4M HCl的二烷(20mol；Aldrich)溶液，所得混合物在室温下静置过夜。减压除去挥发物得到酸11.05(0.621g)白色固体。

步骤4

在室温下将BOP试剂(3.65g；Sigma)接着将三乙基胺(3.45mol)加入到羧酸11.05(2.00g)和烯丙基胺(0.616ml)的二氯甲烷(20ml)溶液中并将所得混合物搅拌过夜。反应混合物在EtOAc和10％HCl水溶液之间分配。分离有机层，用碳酸氢钠水溶液、水洗涤，干燥(硫酸镁)。粗反应产物用硅胶柱色谱法纯化，用(EtOAc∶己烷；70∶30)洗脱得到粘稠的黄色油状所需酰胺11.01(1.73g)。

中间体12.03和12.04的制备

步骤1

基本上用步骤3-8中描述的制备中间体10.11的程序，将化合物12.01转化为所需的物质12.02。

步骤2

基本上用步骤9、10中描述的制备中间体10.11的程序，将化合物12.02转化为所需的中间体12.03。

步骤3

基本上用步骤11中描述的制备中间体10.12的程序，将化合物12.02转化为所需的中间体12.03。

中间体13.01的制备

步骤1

在0℃-5℃向搅拌的1-硝基丁烷13.02(16.5g，0.16mol)和乙醛酸的水(28.1g，0.305mol)和MeOH(122mL)溶液中，经2h滴加三乙基胺(93mL，0.667mol)。将溶液升至室温，搅拌过夜，浓缩至干得到油状物。然后将所述油状物溶于H₂O，并用10％HCl酸化至pH＝1然后用EtOAc萃取。将合并的有机溶液用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩至干得到产物13.03(28.1g，99％产率)。

步骤2

向搅拌的化合物13.03(240g，1.35mol)的乙酸(1.25L)溶液中加入10％Pd/C(37g)。所得溶液在59psi下氢化3hrs，然后在60psi下过夜。然后蒸发乙酸，并与甲苯共沸3次，然后用MeOH和醚研磨。然后过滤所得溶液，并与甲苯共沸两次，得到类白色固体13.04(131g，0.891mol，66％)。

步骤3

在0℃向搅拌的氨基酸13.04(2.0g，13.6mmol)的二烷(10mL)和H₂O(5mL)溶液中加入1N NaOH溶液(4.3mL，14.0mmol)。所得溶液搅拌10分钟，然后加入二-叔丁基二碳酸酯(0.110g，14.0mmol)并在0℃搅拌15分钟。然后将溶液升至室温，搅拌45分钟，在冰箱中放置过夜，浓缩至干得到粗产品。向该粗产品的EtOAc(100mL)和冰溶液中，加入KHSO₄(3.36g)和H₂O(32mL)并搅拌4-6分钟。分离有机层，水层用EtOAc萃取两次，将合并的有机层用水、盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩至干得到透明胶状产物13.05(3.0g，89％产率)。

步骤4

基本上用步骤11中描述的制备中间体10.12的程序，将化合物13.05转化为所需中间体13.01。

中间体14.01的制备

步骤1

基本上用步骤1-3中描述的制备中间体13.01的程序，将化合物14.02转化为所需物质14.03。

步骤2

基本上用步骤11中描述的制备中间体10.12的程序，将化合物14.03转化为所需中间体14.01。

中间体15.01的制备

步骤1

在0℃向亚硝酸银(9g，58.5mmol)的乙醚(25mL)混悬液中通过加液漏斗缓慢加入4-碘-1，1，1-三氟丁烷15.02(10g，42.0mmol)的乙醚(25mL)溶液(约15min)。所得混合物在0℃剧烈搅拌，然后升至室温。50h后，通过硅藻土滤去固体物质。所得乙醚溶液真空浓缩得到无色油状15.03，其无需进一步纯化而使用。

步骤2

基本上用步骤1-3中描述的制备中间体13.01的程序，将化合物15.03转化为所需物质15.04。

步骤3

基本上用步骤11中描述的制备中间体10.12的程序，将化合物15.04转化为所需的中间体15.01。

中间体16.01的制备

将酸16.02(Winkler，D.；Burger，K.，Synthesis，1996，1419)经上述(中间体10.12的制备)过程，得到所需中间体16.01。

中间体20.01的制备

氨基酯20.01按照R.Zhang and J.S.Madalengoitia(J.Org.Chem.1999，64，330)中的方法制备，只不过Boc基团是通过Boc-保护的氨基酸与甲醇性HCl(也可以4M HCl的二烷溶液进行脱保护)的反应而裂解的。在所报道的合成的变通方法中，用相应的磷内盐(phosphonium ylide)置换锍内盐(sulfonium ylide)。

中间体20.04的制备

步骤1

在0℃将市售氨基酸Boc-Chg-OH 20.02(Senn chemicals，6.64g，24.1mmol)和胺盐酸盐20.01(4.5g，22mmol)的CH₂Cl₂(100mL)溶液用BOP试剂处理，并在室温下搅拌15h。反应混合物真空浓缩然后用1MHCl水溶液稀释，用EtOAc(3×200mL)萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO₃(200mL)溶液洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩，色谱法纯化(SiO₂，EtOAc/Hex 3∶7)，得到无色固体20.03(6.0g)。

步骤2

将甲基酯20.03(4.0g，9.79mmol)的THF/H₂O(1∶1)溶液用LiOH·H₂O(401mg，9.79mmol)处理，并在室温下搅拌3h。反应混合物用HCl水溶液酸化，真空浓缩得到所需中间体游离酸20.04。

中间体20.08的制备

步骤1

将Boc-tert-Leu 20.05(Fluka，5.0g 21.6mmol)的无水CH₂Cl₂/DMF(50mL，1∶1)溶液冷至0℃，并用胺盐20.01(5.3g，25.7mmol)、NMM(6.5g，64.8mmol)和BOP试剂(11.6g，25.7mmol)处理。在室温下搅拌反应24h，用HCl水溶液(1M)稀释，用CH₂Cl₂萃取。将合并的有机层用HCl(水溶液，1M)、饱和NaHCO₃溶液、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩，用色谱法纯化(SiO₂，丙酮/己烷1∶5)得到无色固体20.06。

步骤2

将甲基酯20.06(4.0g，10.46mmol)溶于4M HCl的二烷溶液的溶液在室温下搅拌3h。反应混合物真空浓缩，得到胺盐酸盐20.07，其无需纯化而使用。

步骤3

将胺盐20.07(840mg，2.64mmol)的THF(14mL)/乙腈(2mL)溶液冷至0℃。加入4-硝基苯基氯甲酸酯(800mg，3.96mmol)，然后加入吡啶(0.64mL，7.92mmol)。将反应物经3hrs缓慢升至室温，此时TLC显示反应完全。加入乙醚(50mL)，滤除所得沉淀。滤液用饱和氯化铵溶液(1x)、盐水(1x)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，浓缩。残留物用快速色谱法纯化，用20/80 EtOAc/己烷，得到1.15g所需中间体20.08。

中间体21.01的制备

步骤1

在室温下向搅拌的N-Boc-3，4-脱氢脯氨酸21.02(5.0g，23.5mmol)、二叔丁基二碳酸酯(7.5g，34.4mmol)和4-N，N-二甲基氨基吡啶(0.40g，3.33mmol)的乙腈(100mL)溶液中加入三乙基胺(5.0mL，35.6mmol)。所得溶液在该温度下搅拌18h，然后真空浓缩。用快速柱色谱法纯化暗棕色残留物，用10-25％EtOAc/己烷洗脱，得到淡黄色油状产物21.03(5.29g，84％)。

步骤2

在室温下向搅拌的脱氢脯氨酸衍生物21.03(10.1g，37.4mmol)、苄基三乙基氯化铵(1.60g，7.02mmol)的氯仿(120mL)溶液中加入50％氢氧化钠(120g)水溶液。在该温度下搅拌24h后，将暗混合物用CH₂Cl₂(200mL)和乙醚(600mL)稀释。分层后，将水溶液用CH₂Cl₂/Et₂O(1∶2，3×600mL)萃取。有机溶液干燥(MgSO₄)，浓缩。残留物用快速柱色谱法纯化，用5-20％EtOAc/己烷，得到9.34g(71％)类白色固体21.04。

步骤3

将21.04(9.34g，26.5mmol)的CH₂Cl₂(25mL)溶液和CF₃CO₂H(50mL)在室温下搅拌4.5h，然后真空浓缩，得到棕色残留物21.05，其无需进一步纯化而用于步骤4。

步骤4

将浓盐酸(4.5mL)加入到步骤3得到的残留物21.05的甲醇(70mL)溶液中，所得混合物在油浴中升温至65℃。18h后，将混合物真空浓缩，得到棕色油状物21.01，其无需纯化而进一步使用。

中间体22.01的制备

步骤1

将双(三甲基甲硅烷基)氨基钾(Potassiumbis(trimethylsilyl)amide)(158ml 0.5M的甲苯溶液；79mmol)加入到搅拌的环丙基三苯基-溴化磷(33.12g；86.4mmol)的无水四氢呋喃(130ml)混悬液中，所得橙色混合物在氮气下在室温搅拌1h，然后加入醛22.02(9.68g；42.2mmol)的THF(8ml)溶液。然后将反应物在氮气下回流2h。冷却后，加入甲醇、乙醚和四水合酒石酸钾钠(Rochelles salt)。分离有机相，用盐水洗涤，干燥，减压浓缩。所得粗反应产物用硅胶柱色谱法纯化，用EtOAc-己烷(1∶99)至EtOAc-己烷(5∶95)梯度洗脱，得到黄色油状物烯烃22.03(8.47g)。

步骤2

通过向冷甲醇中滴加14.2ml乙酰氯，然后在室温下将所得溶液稀释至200ml制备1M HCl的MeOH/MeOAc溶液。将氨基甲酸酯22.03(9.49g；37.5mmol)溶于甲醇(12ml)，在冰浴冷却下加入到1MHCl的MeOH/MeOAc(150ml)溶液中。所得混合物在该温度下保持1h然后除去冰浴，在室温下持续搅拌过夜。减压除去挥发物得到黄色油状物，其无需纯化而用于下一步骤。

将黄色油状物溶于THF(30ml)和MeOH(20ml)的混合物中，用三乙基胺(15ml；108mmol)处理，直到溶液的pH＝9-10。将混合物置于冰浴中后，用N-Boc-Gly-OSu(11.22g；41mmol)处理。然后除去冰浴在室温下搅拌反应1h。减压除去挥发物，残留物用硅胶柱色谱法纯化，用甲醇(1-3％)in二氯甲烷，得到所需酰胺22.04(9.09g)。

步骤3

将醇22.04(9.09g；33.6mmol)溶于丙酮(118.5ml)，用2，2-二甲氧基丙烷(37.4ml；304mmol)和BF₃∶Et₂O(0.32ml；2.6mmol)处理，所得混合物在室温下搅拌5.5h。然后将反应溶液用几滴三乙基胺处理，减压除去挥发物。残留物用硅胶柱色谱法纯化，用5-25％EtOAc的己烷溶液，得到N，O-缩醛22.05(8.85g)。

步骤4

将氨基甲酸酯22.05(8.81g；28.4mmol)溶于乙腈(45ml)中，所得溶液在氮气下冷至-40℃。加入吡啶(6.9ml；85.3mmol)，然后加入四氟硼酸硝(nitrosium tetrafluoroborate)(6.63g；56.8mmol)，所得混合物保持在0℃以下，直到显示TLC无起始原料存在(2.25h.)。加入吡咯烷(20ml；240mol)，除去冰浴，在室温下继续搅拌1h。然后减压除去挥发物。将残留物快速通过硅胶垫，得到黄色油状物。将黄色油状物溶于无水苯(220ml)，加入乙酸钯(0.317g；1.41mmol)，然后在氮气下将所得混合物加热回流1.5h。冷却后，减压除去挥发物，将暗残留物用硅胶柱色谱法纯化，用EtOAc-己烷(1∶4)，得到i)反式-吡咯烷酮22.06(1.94g)，然后是ii)顺式-吡咯烷酮22.07(1.97g)。

步骤5

将新鲜制备的1M HCl的MeOAc/MeOH(10mol；如上所述)溶液加入到N，O-缩醛22.06中，并在室温下搅拌1h。减压除去溶剂，残留物用硅胶柱色谱法纯化，用0-4％MeOH的二氯甲烷溶液作为洗脱剂，得到所需的醇22.08(1.42g)，为黄色油状物。

步骤6

向内酰胺22.08(1.29g；8.44mmol)的无水四氢呋喃(55ml)溶液中加入氢化铝锂(2.40g；63.2mmol)，将所得混合物回流8h。冷却后，加入水，然后加入15％的NaOH水溶液，所得混合物用硅藻土过滤，所得固体用THF和MeOH充分洗涤。减压除去溶剂，残留物再溶解于二氯甲烷，干燥，减压浓缩，得到吡咯烷，无需纯化而使用。

在氮气下，在-60℃，将Hunigs碱(4.5ml；25.8mmol)加入到N-Boc-L-tert-Leu-OH(1.76g；7.6mmol)、粗品吡咯烷和HATU(2.89g；7.6mmol)的无水二氯甲烷(50ml)溶液中。所得反应物缓慢升至室温，过夜。加入EtOAc，所得黄色溶液用稀HCl水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液、水、盐水洗涤。干燥有机层，减压浓缩。残留物用硅胶柱色谱法纯化，用EtOAc∶己烷(1∶3)，得到所需酰胺22.09(2.00g)。

步骤7

将醇22.09(2.00g；5.67mmol)溶于丙酮(116ml)中，并在冰浴中冷却10min。然后将溶于加入到冷却的Jones试剂(14.2ml；approx2mmol/ml)中，所得混合物在5℃搅拌0.5h，除去冰浴。再在室温下搅拌反应2h。然后加入到硫酸钠(28.54g)、硅藻土(15g)的EtOAc(100ml)溶液中。1min后加入异丙醇(15ml)，然后再搅拌10min，过滤。滤液减压浓缩，得到的棕色油状物溶于EtOAc。所得溶液用水、3％的柠檬酸水溶液、盐水洗涤，干燥，浓缩，得到所需羧酸22.01(1.64g)，为白色固体。

中间体23.01的制备

步骤1

向酯23.02(6.0g)和分子筛(5.2g)的无水二氯甲烷(35mL)混合物中加入吡咯烷(5.7mL，66.36mmoL)。所得棕色浆液在N₂下在室温搅拌24h，过滤，用无水CH₃CN洗涤。将合并的滤液浓缩，得到所需产物23.03。

步骤2

向前一步骤的产物23.03的CH₃CN(35mL)溶液中，加入无水K₂CO₃、甲代烯丙基氯(methallyl chloride)(2.77g，30.5mmoL)、NaI(1.07g，6.7mmoL)。所得浆液在N₂下在室温搅拌24h。加入50mL冰水，然后加入2N KHSO₄溶液直到pH为1。加入EtOAc(100mL)，将混合物搅拌0.75h。收集合并的有机层，用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，蒸发，得到所需产物23.04。

步骤3

将前一步骤得到的产物23.04(2.7g，8.16mmoL)溶于二烷(20mL)中，用新鲜配制的1N LiOH(9mL)处理。反应混合物在N₂下在室温搅拌20h。反应混合物置入EtOAc中，用H₂O洗涤。将合并的水相冷却至0℃，用1N HCl酸化至pH1.65。所得混浊的混合物用EtOAc(2×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，浓缩，得到所需酸23.05(3.40g)。

步骤4

向NaBH(OAc)₃(3.93g，18.5mmoL)的CH₂Cl₂(55mL)混悬液中加入前一步骤的产物23.05的无水CH₂Cl₂(20mL)和乙酸(2mL)溶液。所得浆液在室温下搅拌20h。向浆液中加入冰水(100mL)，搅拌1/2hr。分离有机层，过滤，干燥，蒸发，得到所需产物23.06。

步骤5

将前一步骤的产物23.06(1.9g)的MeOH(40mL)溶液用过量的CH₂N₂/Et₂O溶液处理，冰搅拌过夜。反应混合物浓缩至干，得到粗残留物。残留物用硅胶色谱法纯化，用EtOAc/己烷梯度洗脱，得到1.07g纯的缩23.07。

步骤6

将前一步骤的产物23.07(1.36g)的无水CH₂Cl₂(40mL)溶液用BF₃·Me₂O(0.7mL)处理。反应混合物在室温下搅拌20h，用饱和NaHCO₃(30mL)猝灭反应，搅拌1/2hr。分离有机层，将合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，浓缩，得到粗残留物，将残留物用硅胶色谱法纯化，用EtOAc/己烷梯度洗脱，得到0.88g所需化合物23.08。

步骤7

在室温下向前一步骤的产物23.08(0.92g)的MeOH(30mL)溶液中加入10％的Pd/C(0.16g)，在1atm压力下在室温氢化。反应混合物搅拌4h，浓缩至干得到所需化合物23.01。

中间体50.01的制备

步骤1

向50.02(15g)的MeOH(150mL)溶液中加入浓HCl(3-4mL)，所得混合物回流16h。反应混合物冷至室温，浓缩。残留物置于乙醚(250mL)中，用冷却的饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤。有机层干燥(Na₂SO₄)，浓缩，得到甲基酯50.03(12.98g)，其无需进一步纯化而继续使用。

步骤2

将上面得到的甲基酯50.03溶于二氯甲烷(100mL)中，在氮气下冷至-78℃。将2h滴加DIBAL(1.0M的二氯甲烷溶液，200mL)。反应混合物将16h升至室温。反应混合物冷至0℃，滴加MeOH(5-8mL)。在搅拌下缓慢加入10％酒石酸钠钾(200mL)水溶液。用二氯甲烷(100mL)稀释，分离有机层(伴随着一些白色沉淀)。有机层用1NHCl(250mL)、盐水(200mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，浓缩得到醇50.04(11.00g)，为澄清油状物。

步骤3

将上面得到的醇50.04溶于二氯甲烷(400mL)，在氮气下冷至0℃。分部分加入PCC(22.2g)，将16h将反应混合物缓慢升至室温。反应混合物用乙醚(500mL)稀释，用硅藻土垫过滤。浓缩滤液，残留物置于乙醚(500mL)中。将其通过硅胶垫，过滤，浓缩，得到醛50.05，其无需进一步纯化而继续使用。

步骤4

基本上用Chakraborty et.al(Tetrahedron，1995，51(33)，9179-90)中的方法，将上面得到的醛50.05转化为所需物质50.01。

中间体51.01的制备

所需中间体51.01由醛51.02用文献(T.K.Chakraborty et al.，Tetrahedron，1995，51(33)，9179-90)中描述的方法制得。

化合物5000的制备：

步骤1

在0℃向N-Boc-(S)-缬氨醇(valinol)5000a(10.0g，49.2mmol)、邻苯二甲酰亚胺(7.40g，50.3mmol)和三苯基膦(13.0g，49.6mmol)的无水THF(100mL)溶液中加入二异丙基偶氮二甲基酯(DIAD，9.8mL，49.4mmol)。所得溶液在室温下搅拌18h，然后浓缩至干。残留物溶于CH₂Cl₂，用硅胶快速色谱法纯化(10-40％EtOAc的己烷溶液)，得到产物5000b。

步骤2

在室温下向搅拌的5000b(8.8g，26.5mmol)的甲醇(100mL)溶液加入肼一水合物(1.4mL，28.8mmol)，所得溶液在室温下搅拌18h。再加入肼一水合物(0.5mL，10.3mmol)，混合物加热至回流搅拌4h，然后冷至室温。滤去沉淀，溶液浓缩至干。残留物溶于CH₂Cl₂，再滤去沉淀。浓缩后，得到黄色油状物(8.0g，quant.)。

步骤3

在-30℃向在丙酮浴中的5000c(1.0g，4.94mmol)的CH₂Cl₂(100mL)溶液中加入3-氯丙基磺酰氯(0.60mL，4.93mmol)和三乙基胺(1.10mL，7.89mmol)。所得溶液与浴液一起升至室温反应18h。再加入CH₂Cl₂和1N Na₂CO₃溶液，分离各层。将水溶液用CH₂Cl₂(2×100mL)萃取。合并有机溶液，过滤，干燥(MgSO₄)，浓缩。残留物用快速柱色谱法纯化，用10-40％丙酮/己烷，得到1.0g(59％)5000d。

步骤4

将5000d(1.0g，2.92mmol)和氢化钠(0.32g，60％，8.0mmol)的无水DMF(100mL)混悬液在室温下搅拌8h。冷至0℃后，小心加入5％的磷酸水溶液(110mL)，然后加入EtOAc(150mL)。分离各层，有机溶液用5％的磷酸水溶液(100mL)和饱和碳酸氢钠溶液(2×100mL)洗涤，然后干燥，过滤，浓缩。残留物用硅胶快速色谱法纯化(0-40％丙酮的己烷溶液)，得到0.63g产物5000e(70％)。

步骤5

将5000e(0.62g，2.02mmol)的4N HCl的二烷溶液在室温下搅拌4h。然后真空浓缩至干，得到0.60g产物5000(quant.)。

式5001的化合物的制备

步骤1

化合物5001a由5000c和4-溴丁酰氯按照化合物5000d制备中描述的程序制备。

步骤2

式5002的化合物的制备

步骤1

化合物5002a由5000c和2-溴乙基氯甲酸酯按照化合物5000d的制备中描述的程序制备。

步骤2

化合物5002b由5002a按照化合物5000e的制备中描述的程序制备。

步骤3

化合物5002由5002b按照化合物5000(步骤5)的制备中描述的程序制备。

式5003的化合物的制备

步骤1

化合物5003b由N-Boc-(S)-叔-亮氨醇5003a按照化合物5000b(步骤1)的制备中描述的程序制备。

步骤2

化合物5003由5003b按照化合物5000(步骤5)的制备中描述的程序制备。

式5004的化合物的制备

步骤1

化合物5004a由5003b按照化合物5000c(步骤2)的制备中描述的程序制备。

步骤2

化合物5004b由5004a按照化合物5000d(步骤3)的制备中描述的程序制备。

步骤3

化合物5004c由5004b按照化合物5000e(步骤4)的制备中描述的程序制备。

步骤4

化合物5004由5004c按照化合物5000(步骤5)的制备中描述的程序制备。

式5005的化合物的制备

步骤1

化合物5005a由5004a按照化合物5002a(步骤1)的制备中描述的程序制备。

步骤2

化合物5005b由5005a按照化合物5002b(步骤2)的制备中描述的程序制备。

步骤3

化合物5005由5005b按照化合物5000(步骤5)的制备中描述的程序制备。

式5006的化合物的制备

步骤1

化合物5006a由5004a和4-溴丁酰氯按照化合物5000d的制备中描述的程序制备。

步骤2

化合物5006由5006a按照化合物5000(步骤5)的制备中描述的程序制备。

式5007的化合物的制备

步骤1

化合物5007a由5004a和2-甲氧羰基-3-噻吩磺酰氯按照化合物5000d的制备中描述的程序制备。

步骤2

在-78℃向酯5007a(4.65g，11.1mmol)的无水甲苯(40mL)溶液中加入DIBAL-H的甲苯(23.0mL，34.5mmol)溶液。所得混合物在-78℃搅拌20min，在室温下搅拌2h。加入甲醇(20mL)，然后加入10％的柠檬酸水溶液(100mL)。搅拌5min后，加入EtOAc(200mL)，分离各层。水溶液用EtOAc(2×100mL)萃取，合并有机溶液，干燥(MgSO₄)，过滤，浓缩。残留物用快速柱色谱法纯化，用10-50％丙酮/己烷，得到4.6g(quant.)5007b。

步骤3

在-0℃向5007b(1.04g，2.65mmol)的CH₂Cl₂(50mL)溶液中加入甲磺酰氯(0.23mL，2.97mmol)和三乙基胺(0.80mL，5.74mmol)。所得混合物与冰浴一起升至室温，搅拌18h。加入EtOAc(200mL)和5％的H₃PO₄溶液(100mL)，分离各层。有机溶液用1N碳酸钠溶液(100mL)洗涤，然后干燥(MgSO₄)，过滤，浓缩。残留物用快速柱色谱法纯化，用10-50％丙酮/己烷得到0.80g(73％)5007c。

步骤4

将5007d(1.17g，2.85mmol)和碳酸铯(1.40g，4.30mmol)的无水DMF(100mL)混悬液在室温下搅拌18h。加入水(50mL)、盐水(50mL)和EtOAc(300mL)，分离各层，有机溶液用水(3×150mL)洗涤，然后干燥，过滤，浓缩，得到0.99g所需产物5007d(93％)。

步骤5

化合物5007由5007d按照化合物5000的制备中描述的程序制备。

式5008的化合物的制备

步骤1

化合物5008b由5003a和5008a按照化合物5000b的制备中描述的程序制备。

步骤2

化合物5008由5008b按照化合物5000的制备中描述的程序制备。

式5009的化合物的制备

步骤1

在-18℃向5008b(1.02g，2.93mmol)的CH₂Cl₂(50mL)溶液中加入间氯过氧苯甲酸(3.03g，17.6mmol)，所得溶液在-18℃搅拌1h，然后将其置入冰箱中过夜(16h)。在室温下再搅拌6h后，再加入CH₂Cl₂所得溶液用10％NaHSO₄和1N Na₂CO₃洗涤。有机溶液干燥(MgSO₄)，过滤，浓缩。残留物用快速柱色谱法纯化用5-60％丙酮/己烷，得到0.49g(46％)产物5009a。

步骤2

化合物5009由5009a按照化合物5000的制备中描述的程序制备。

式5010的化合物的制备

步骤1

化合物5010a由5004a和2-(氯磺酰基)苯甲酸甲酯按照化合物5000d的制备中描述的程序制备。

步骤2

化合物5010b由5010a按照化合物5007b的制备中描述的程序制备。

步骤3

化合物5010c由5010b按照化合物5007c的制备中描述的程序制备。

步骤4

化合物5010d由5010c按照化合物5007d的制备中描述的程序制备。

步骤5

化合物5010由5010d按照化合物5000的制备中描述的程序制备。

式5011的化合物的制备

步骤1

将5010a(0.60g，1.45mmol)和碳酸铯(0.707g，2.17mmol)的无水DMF混悬液在40℃搅拌18h。加入水(50mL)、盐水(50mL)和EtOAc(150mL)分离各层。有机溶液用水(3×80mL)洗涤，干燥后，过滤，浓缩，得到0.17g所需产物5011a(31％)。

步骤2

化合物5011由5011a按照化合物5000的制备步骤5中描述的程序制备。

式5012的化合物的制备

步骤1

化合物5012a由5003a和戊二酰亚胺按照化合物5000b的制备中描述的程序制备。

步骤2

化合物5012由5012a按照化合物5000的制备中描述的程序制备。

式5013的化合物的制备

步骤1

将胺5004a(3.0g，13.9mmol)和1，4-丁烷磺内酯(1.8mL，17.7mmol)的无水THF(25mL)溶液回流16h。再加入磺内酯(0.6mL，5.89mmol)，所得混合物再回流4h。加入三氯氧磷(2.6mL，27.9mmol)，所得溶液在室温下搅拌4h。冷至0℃后，缓慢加入50％w/w NaOH溶液和水(30mL)，直到PH大于12。然后加入醚(200mL)，分离各层。水溶液用THF/乙醚(1∶1，150mL)萃取两次。合并有机溶液，干燥(MgSO₄)，过滤，浓缩。残留物用快速柱色谱法纯化，用10-50％丙酮/己烷得到1.49g 5013a(32％)。

步骤2

化合物5013由5013a按照化合物5000的制备中描述的程序制备。

式5014的化合物的制备

步骤1

在室温下向5014a(10.0g，41.1mmol)、HOOBt(8.7g，53.3mmol)、EDCI(10.0g，52.2mmol)和氯化铵(8.90g，166mmol)的无水DMF(400mL)混悬液中加入4-甲基吗啉(22.5mL，204.5mmol)。所得混合物在室温下搅拌70h。加入盐水(150mL)和5％的磷酸水溶液(150mL)，然后加入EtOAc(800mL)。分离各层，有机溶液用5％磷酸水溶液(400mL)和饱和碳酸氢钠溶液(2×400mL)洗涤，然后干燥，过滤，浓缩，得到8.35g产物5014b(84％)。

步骤2

在室温下向酰胺5014b(8.35g，34.5mmol)的无水THF(100mL)溶液中加入硼烷甲基硫化物复合物(borane methyl sulfide complex)的甲苯(43.0mL，86.0mmol)溶液，所得混合物回流4h。再加入THF(100mL)，然后缓慢加入3N HCl溶液直到无气体放出。向所得混合物中缓慢加入50％w/w NaOH直到PH大于12。然后加入醚(200mL)，分离各层。水溶液用THF/乙醚(1∶1，150mL)萃取两次。合并有机溶液，干燥(MgSO₄)，过滤，浓缩，得到6.50g产物5014c(83％)。

步骤3

在室温下向胺5014c(0.80g，3.50mmol)和N-乙氧基羰基邻苯二甲酰亚胺5014d(0.90g，4.11mmol)的无水THF(50mL)溶液中加入三乙基胺(1.0mL，7.17mmol)。所得混合物在室温下搅拌18h。加入EtOAc(100mL)和5％磷酸水溶液(100mL)，分离各层。有机溶液用5％磷酸水溶液(80mL)洗涤，干燥，过滤，浓缩。残留物用硅胶快速色谱法纯化(5-50％EtOAc的己烷溶液)，得到0.82g产物5014e(65％)。

步骤4

化合物5014由5014e按照化合物5000的制备中描述的程序制备。

式5015的化合物的制备

化合物5015由5014c按照化合物5007的制备中描述的步骤1-5中的程序制备。

式5016的化合物的制备

步骤1

化合物5016b由5016a按照化合物5014b的制备中描述的步骤1中的程序制备。

步骤2

化合物5016c由5016b按照化合物5014c的制备中描述的步骤2中的程序制备。

步骤3-7

化合物5016由5016c按照化合物5010的制备中描述的步骤3-7中的程序制备。

式5017的化合物的制备

步骤1-2

化合物5017由5016c和1，4-丁烷磺内酯按照化合物5013的制备中描述的步骤1-2中的程序制备。

式5018的化合物的制备

步骤1-2

化合物5018由5003a和吗啉3，5-二酮按照化合物5012的制备中描述的步骤1-2中的程序制备。

式5019的化合物的制备

步骤1-2

化合物5019由5003a和3，3-二甲基戊二酰亚胺按照化合物5012的制备中描述的步骤1-2中的程序制备。

式5020的化合物的制备

步骤1

在0℃向氯磺酰异氰酸酯(0.80mL，9.25mmol)的无水CH₂Cl₂(20mL)溶液中缓慢加入苄基醇(benzyl alcohol)(0.96mL，9.25mmol)。所得溶液在0℃搅拌30min，然后在0℃将其缓慢加入胺5020a(2.0g，9.25mmol)的无水CH₂Cl₂溶液中。所得混合物在0℃搅拌1h，在室温下再教案1h，然后浓缩至干。残留物溶于EtOAc用1N HCl溶液洗涤两次，用盐水洗涤一次。然后干燥，过滤，浓缩。所得产物用硅胶快速色谱法纯化(20-70％丙酮的己烷溶液)，得到产物5020b(3.11g，78％)。

步骤2

在0℃向5020b(1.60g，3.73mmol)、三苯基膦(1.46g，5.57mmol)和3-溴-1-丙醇(0.36mL，4.12mmol)的无水CH₂Cl₂(40mL)溶液中加入二异丙基偶氮二甲酸酯(DIAD，1.10mL，5.55mmol)。所得溶液在室温下搅拌2h，然后真空浓缩至干。残留物用硅胶快速色谱法纯化(10-40％丙酮的己烷溶液)，得到产物5020c(1.62g，79％)。

步骤3

将5020d(1.61g，2.93mmol)和碳酸铯(1.43g，4.39mmol)的无水DMF(100mL)混悬液在室温下搅拌18h。加入水(50mL)、盐水(50mL)和EtOAc(300mL)，分离各层。有机溶液用水(3×150mL)洗涤，然后干燥，过滤，浓缩，得到所需产物5020d(1.40g，quant.)。

步骤4

将5020d(1.40g，2.98mmol)和10％Pd-C(湿重)的无水乙醇(50mL)和甲醇(50mL)溶液的混合物在室温下剧烈搅拌2.5h用硅藻土垫滤去催化剂，得到产物5020e(1.10g，quant.)。

步骤5

将5020e的4N HCl的二烷溶液在室温下搅拌4h。然后真空浓缩至干，得到产物5020。

式5021的化合物的制备

步骤1-2

化合物5021由5003a和螺[环戊烷-1，5′-戊二酰亚胺](tetramethylene glutarimide)按照化合物5012的制备中描述的步骤1-2中的程序制备。

式5022的化合物的制备

步骤1

将酐5022a和胺5004a的无水甲苯混合物回流搅拌46，然后冷却，真空浓缩。残留物用硅胶快速色谱法纯化(5-40％EtOAc的己烷溶液)得到产物5022b(2.90g，79％)。

步骤2

将化合物5022b在室温用4N HCl处理30min，真空浓缩，得到产物5022。

                      制备实施例

化合物5146的制备

Step 1

在0℃向5020b(2.0g，4.66mmol)、三苯基膦(1.83g，6.99mmol)和2-溴-乙醇(0.31mL，5.12mmol)的无水CH₂Cl₂(30mL)溶液中加入二异丙基偶氮二甲酸酯(DIAD，0.996mL，6.99mmol)。然后将所得溶液在室温下搅拌2h，然后真空浓缩至干。残留物用硅胶快速色谱法纯化(10-40％丙酮的己烷溶液)，得到产物5051a(1.50g，63％)。

步骤2

将5051a(1.5g，2.79mmol)和碳酸铯(1.36g，4.19mmol)的无水DMF(100mL)混悬液在室温下搅拌18h。加入水(50mL)、盐水(50mL)和EtOAc(300mL)，分离各层。有机溶液用水(3×150mL)洗涤，然后干燥，过滤，浓缩，得到1.37g粗产物。用快速柱(10-30％丙酮-己烷)纯化，得到0.98g 5051 b(82％)。

步骤3

在室温下向化合物5051b(0.98g，2.15mmol，1当量)中加入4MHCl的二烷(25mL)溶液。搅拌1hr。TLC显示无起始原料。蒸除溶剂，并与己烷共沸，然后与醚共沸。用醚洗去非极性物质，放置于高真空下过周末，得到淡黄色固体产物(842mg，quant.)。该产物无需纯化而使用。

步骤4

向胺盐酸盐1.04(3g，9.4mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入50ml饱和NaHCO₃。在冰温下剧烈搅拌5min。停止搅拌，向底层注入光气(2当量20％的甲苯溶液，10mL)，立即恢复剧烈搅拌。不时检查TLC，2hrs后显示起始原料完全消耗，然后分离各层。用二氯甲烷(3ml)再次洗涤水层，用无水硫酸钠干燥。过滤，不用热浴用旋转蒸发仪减压蒸除溶剂至一半体积，然后用N₂冲洗15分钟。用二氯甲烷稀释至33.5mL，作为0.28M的溶液，供下一步偶合使用。

步骤5

在冰温向如前述制备的胺5051c(741mg，2.09mmol，1当量)的DCM(10ml)溶液中加入DIPEA(8当量，2.19mL，12.54mmol)。在N₂下加入异氰酸酯5051d(1当量，7.46的0.028M溶液)，在冰温下搅拌30min，在室温下搅拌90min。用10％柠檬酸猝灭反应，用EtOAc萃取，用盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸除溶剂。粗产物用快速柱(10-40％％丙酮-己烷)纯化，得到白色固体800mg 5051e(58％)。¹H NMR(CDCl3，300MHz)，δ，7.4(m，5H)，5.3(bs，2H)，4.4(d，2H，)，4-3.6(m，6H)，3.6(s，3H)，3.25(m，2H)，3(m，2H)，1.02-0.98(m，25H)。

步骤6

将5051e(0.600g，0.904mmol)和10％Pd-C(10％wt.，60mg)的甲醇(10mL)混合物在室温下剧烈搅拌1.5h。反应混合物用硅藻土垫过滤，得到产物5051f(0.45g，94％.)。

步骤7

在氮气下在冰温向磺酰胺5051f(400mg，0.756mmol，1当量)的DMF(10mL)溶液中加入Cs₂CO₃(368mg，1.5equiv，1.134mmol)和MeI(3.78mmol，5当量，0.355mL)。在室温下搅拌过夜。当TLC和LCMS显示无起始原料时，用水猝灭反应，用EtOAC萃取用水和盐水洗涤4次，用无水硫酸钠干燥。过滤，蒸除溶剂，用快速柱(20-40％丙酮-己烷)纯化，得到390mg 5051g(95％)。¹H NMR(CDCl₃，300MHz)4.4(d，1H，)，3.99-4.01(d，1H)，3.8(d，2H)，3.7(s，3H)，3.6(m，2H)，3.25(m，2H)，3.01(m，3H)，2.8(s，3H)，1.4(m，1H).1.2(m，1H)，1.00-0.98(m，24H)。

步骤8

向甲基酯、5051g(300mg，0.607mmol，1当量)的二烷(10ml)溶液中加入LiOH(1.8mL，1N in水，3当量)，搅拌过夜。用1N HCl猝灭反应，用EtOAC萃取。用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤，蒸除溶剂，得到粗产物(290mg，90％)。

步骤9

在0℃向如前述制备的胺10.11(16.51mg，0.079mmol，1.2当量)和5051h(35mg，0.066mmol，1当量)的DMF(10ml)溶液中加入HATU(1.2当量，0.079mmol，30.18mg)，然后加入DIPEA(8当量，92.44pL，0.529mmol)。在冰温下搅拌1h，然后在室温下搅拌2h。用1N HCl猝灭反应，用EtOAC萃取。用饱和碳酸氢钠，然后用盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸除溶剂，得到产物(52mg，100％)。

步骤10

在冰温下向羟基酰胺5051i(60mg，0.087mmol，1当量)的1∶1DMF/甲苯(6mL)混合物的溶液中加入EDCI·HCl(167mg，10当量，0.878mmol)和二氯乙酸(36.29pL，5当量，0.439mmol)并搅拌5min然后下室温下再搅拌3hrs。用盐水猝灭反应，用1N HCl然后用NaHCO₃洗涤，然后在于盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸除溶剂。粗产物和制备TLC(40％丙酮-己烷)纯化，得到25.2mg 5146(43％).LRMS，m/z，682[(M+1)]，375。

式5237的化合物的制备

步骤1

抽真空后，在氮气下向化合物5051b(1.16g，2.5mmol)的甲醇溶液加入Pd/C(5％重量，116mg)。再次抽真空，在H₂下搅拌90min。TLC显示起始原料消耗完全后，过滤，蒸除溶剂，得到5052a(819mg，100％)。

步骤2

在冰温下向氨基化合物(285mg，1当量)的DMF(10mol)溶液中加入2-碘丙烷(5当量)和碳酸铯(1.5当量)并搅拌过夜。将反应混合物的温度缓慢升至室温。用水猝灭反应，用EtOAc萃取，用盐水洗涤合并的有机萃取液。用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸除溶剂。粗产物5052b(310mg，96％)就这样用于下一步骤。¹H NMR(CDCl₃，300MHz)4.5(d，1H，)，3.8-3.6(m，2H)，3.4-3.2(m，2H)，3.01-2.8(m，2H)，1.9(m，1H)，1.4(s，9H)，1.2(dd，6H)，0.98(s，9H).

步骤3

在室温下将化合物5052b溶于4N HCl的二烷溶液中并搅拌1hr。TLC显示无起始原料后，蒸除溶剂，并与己烷共沸，然后与醚共沸。在高真空下放置过夜，得到221mg 5052c(96％)。

步骤4

在冰温下将胺盐(180mg，0.60mmol，1当量)溶于DCM(5ml)中，并加入5mL NaHCO₃(sat′d)。剧烈搅拌2min。停止搅拌向反应混合物中注入光气(2当量)，回复剧烈搅拌。90min后，分离各层，用无水硫酸钠干燥。过滤，在真空下不用热浴蒸除溶剂。用DCM稀释，作为0.02M的储备溶液。

步骤5

在N₂下在冰温向酸1.17(500mg，1.37mmol，1当量)和胺盐酸盐(317.8mg，1.37mmol，1当量)的DMF溶液中加入HATU(1.2当量619mg)和DIPEA(6当量，8.15mmol，1.42mL)并搅拌过夜。将温度缓慢升至室温。用1N HCl猝灭反应，用EtOAc萃取。用NaHCO₃(饱和)，然后用盐水洗涤。用冰水(5×20ml)洗涤，然后再用盐水洗涤。用无水Na₂SO₄干燥。过滤，蒸除溶剂，得到580mg 5052e(77％)。

步骤6

在室温下向粗品羟基酰胺5052e(1.05mmol，580mg，1当量)的DCM(15mL)溶液中加入Dess-Martin高碘酸内酯(897mg，2.11mmol，2当量)。在室温下搅拌5h。用饱和NaHCO₃和亚硫酸氢钠猝灭反应，用EtOAc萃取。用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤，蒸除溶剂粗产物用快速柱(10-40％丙酮-己烷)纯化，得到450mg酮酰胺产物。将该产物溶于4N HCl溶液的二烷溶液中，在室温下搅拌3h，然后真空浓缩至干，得到5052f(0.40g，77％)。

步骤7

在冰温下向胺盐5052f，(20mg，0.041mmol，1当量)的DCM(5ml)溶液中加入DIPEA(6当量)。在N₂下加入异氰酸酯5052d(1.1当量，0.045mmol，2.27mL of 0.02M solun)并在冰温下搅拌30min，在室温下搅拌90min。用柠檬酸猝灭反应，用EtOAc萃取，用盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸除溶剂。粗产物用快速柱纯化(10-40％丙酮-己烷)，得到12mg 5237(40％)。

化合物5250的制备

步骤1

化合物5250a由化合物20.03按照20.08的制备中描述的程序制备。在0℃下向5010(0.817g，2.68mmol)和氨基甲酸酯5250a(0.976g，2.06mmol)的无水DCM(60mL)溶液中加入DIPEA(0.90mL，5.15mmol)。将该溶液浴冰浴一起升至室温，搅拌18h，然后浓缩。残留物溶于EtOAc，用5％H₃PO₄溶液和饱和碳酸氢钠溶液洗涤。所得产物用硅胶快速色谱法纯化，得到产物5250b(1.07g，86％)。

步骤2

将甲基酯5250b(1.06g，1.76mmol)和LiOH(0.105g，4.40mmol)的THF/MeOH/H₂O(1∶1∶1，30mL)溶液在室温下搅拌4h。减压除去甲醇和THF。水溶液用1N HCl水溶液(50mL)酸化至PH-2，用氯化钠饱和，然后用EtOAc(3×150mL)萃取。合并有机溶液，干燥(MgSO₄)，过滤，真空浓缩，得到白色固体5250c(定量的)。

步骤3

在-20℃向5250c(0.052g，0.088mmol)、HOOBt(0.022g，0.132mmol)、EDCI(0.027g，0.141mmol)和胺盐酸盐13.01(0.030g，0.132mmol)的无水DMF(6mL)和DCM(6mL)混悬液中加入4-甲基吗啉(0.030mL，0.273mmol)。所得混合物在-20℃搅拌20min然后在冰箱中放置18h。加入盐水(30mL)和5％磷酸水溶液(30mL)，然后加入EtOAc(100mL)。分离各层，有机溶液用5％磷酸水溶液(50mL)and饱和碳酸氢钠溶液(2×50mL)洗涤，然后干燥，过滤，浓缩，得到产物5250d(定量的)。

步骤4

将羟基酰胺5250d和Dess-Martin高碘酸内酯(g)的CH₂Cl₂溶液搅拌2h，用饱和Na₂S₂O₃溶液和NaHCO₃溶液猝灭反应。分离各层后，有机溶液用DCM洗涤两次，将合并的有机层过滤，浓缩，得到产物5250(0.048g，72％，两步)。

化合物5648的制备

步骤1

向冷却的(0℃)(S)-叔-亮氨醇(5.0g，42.7mmol)的CH₂Cl₂(100.0mL)溶液中加入氯甲酸苄基酯(6.7mL，47.0mmol)，然后加入Hunig′s碱(9.3mL，53.3mmol)。将反应混合物升至室温过夜，用乙酸乙酯(500mL)稀释，用10％KH₂PO₄，然后用NaHCO₃和盐水洗涤。所得有机层用MgSO₄干燥，浓缩，得到5500a(10.7g，100％)。

步骤2

向冷却的(0℃)5500a(10.7g，42.7mmol)的CH₂Cl₂(100.0mL)溶液中加入吡啶(20.0mL)，然后加入甲磺酰氯(3.63mL，47.0mmol)。将反应混合物升至室温过夜，浓缩，重新溶解于乙酸乙酯(500mL)中，用饱和NaHCO₃和盐水洗涤。所得有机层用MgSO₄干燥，浓缩，用SiO₂用快速色谱法纯化，用乙酸乙酯/己烷(1∶4)，得到5500b(14.0g，100％)。

步骤3

向5500b(3.1g，9.9mmol)的PhMe(72mL)含水水(400pL)溶液中加入TBAB(582mg，1.8mmol)、K₂CO₃(2.72g，1.97mmol)、1-羟基吡啶(937mg，9.85mmol)。反应混合物搅拌下回流过夜，过滤，蒸发并浓缩。粗品用SiO₂经快速色谱法纯化，用乙酸乙酯/CH₂Cl₂(1∶9 to 1∶1)，得到5500c(1.15g，35％)。

步骤4

向5500c(1.15g)的MeOH(50mL)溶液中加入Pd/C(10％w/w，450mg)并在氢气(40PSI)下将其置入Parr振荡器。当反应停止1.2h后，定量生成5500d，4h后定量生成5500e。在任一情况下，将反应混合物用硅藻土短垫片过滤，得到相应的胺。

步骤5

将饱和NaHCO₃(7.0mL)加入到冰冷的5500d(194.0mg，1mmol)的CH₂Cl₂(7mL)溶液中。反应混合物剧烈搅拌10min.，在其中加入COCl₂(1.85M的甲苯溶液，1.35mL)，继续在室温下搅拌1h有机层用MgSO₄干燥，过滤，浓缩至一半体积，得到5500f的CH₂Cl₂溶液。将5500f作为0.05M的CH₂Cl₂溶液储存。

步骤6

化合物5500g用5500的制备中的步骤5的程序合成。

步骤7

向冷却的(0℃)酸(1.17，368.5mg)和(10.11，565.3mg)的DMF(10.0mL)溶液中加入HATU(1.03g)，然后加入DIPEA(1.382mL)。反应混合物在0℃搅拌1h，在室温下搅拌2h用乙酸乙酯(20.0mL)稀释，用1N HCl、盐水洗涤，用NaHCO₃干燥，过滤，浓缩。

在0℃向粗品的PhMe/DMSO(10.0mL，1∶1)任一种加入EDCI(5.2g)，然后加入二氯乙酸(447L)除去冰浴，将反应物在室温下搅拌2h。在其中加入EtOAc(75mL)，将反应混合物用H₂O(25.0mL)、NaHCO₃和盐水洗涤，然后用SiO₂用丙酮/己烷(1∶9-9∶1)纯化，得到5500h。

步骤9

将化合物5500h溶于4N HCl的二烷(25mL)溶液爪子。反应物在室温下搅拌30min，浓缩得到白色固体5500i(350.0mg)。

步骤10

向冷却的(0℃)胺盐酸盐5500i(25.0mg，0.051mmol)的CH₂Cl₂(2.0mL)溶液中加入5500f(2.5mL，0.135mmol)，然后加入DIPEA(68uL，0.4mmol)。反应混合物在室温下搅拌1.2h，用乙酸乙酯(20.0mL)稀释，用3％柠檬酸、盐水洗涤，用NaHCO₃干燥，过滤，浓缩，用SiO₂用丙酮-己烷(1∶9)纯化，得到5648(10.0mg)。LCMS 641.2(M+H)。

化合物5644的制备

步骤11.

化合物5644用5648的制备中描述的程序合成。LCMS645.0(M+H).

在表2中描述的许多5644的类似物都是由5500g用5644的制备中描述的程序制备。

化合物5632的制备

步骤1

化合物5632a由(S)-N-boc缬氨醇按照5500g(步骤1-6)的制备中的程序制备。化合物5632按照5648的制备中描述的程序合成。

LCMS：631.1(M+H)

在表2中描述的许多5632的类似物都是由5632a用5632的制备中描述的程序制备。

化合物5665的制备

步骤1

向冷却的(0℃)胺5004a(560.0mg，2.58mmol)的CH₂Cl₂(15.0mL)溶液中加入氯丙基异氰酸酯(Aldrich，531mL，5.16mmol)，将反应混合物在室温下搅拌12h，用饱和NaHCO₃、盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，浓缩，用SiO₂用乙酸乙酯-己烷(1∶1)纯化，得到5520a(660mg，1.91mmol，76％)。

步骤2

向冷却的5520a(660.0mg，1.96mmol)的THF(30mL)溶液中加入NaH.(60％的矿物油分散液，313.0mg，7.84mmol)。反应混合物升至室温反应4hour，小心用冰水猝灭，用CH₂Cl₂萃取。有机层用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，浓缩。粗品用SiO₂用乙酸乙酯-己烷(1∶1)纯化，得到5520b(220.0mg，1.0mmol)。

步骤3

向5520b(660.0mg，1.96mmol)中加入4N HCl的二烷(25mL)溶液。将反应物在室温下搅拌30min，浓缩，得到白色固体，将其溶于CH₂Cl₂(7.0mL)，在其中加入饱和NaHCO₃(7.0mL)。剧烈搅拌10min后，分离各层，向有机层中一次注射加入光气(2.5当量)。立即重新开始剧烈搅拌，除去冰浴，继续搅拌1h，分离各层。有机层用MgSO₄干燥，过滤，浓缩至其一半体积，将5520c作为0.05M的CH₂Cl₂溶液储存。

步骤4

向冷却的(0℃)胺盐酸盐5500i(25.0mg，0.051mmol)的CH₂Cl₂(2.0mL)溶液中加入5520c(2.5mL，0.135mmol)，然后加入DIPEA(68uL，0.4mmol)。反应混合物在室温下搅拌1.2h，用乙酸乙酯(20.0mL)稀释，用3％柠檬酸、盐水洗涤，用NaHCO₃干燥，过滤，浓缩，用SiO₂用丙酮-己烷(1∶9)纯化，得到5665(10.0mg)。LCMS 646.2(M+H).

在表2中描述的许多5665的类似物都是由5520c用5648的制备中描述的程序制备。

化合物5688的制备

步骤1

用5648的制备中的步骤5的程序将胺5004a(998.0mg，4.6mmol)转化为相应的异氰酸酯5030a。

步骤2

向异氰酸酯的CH₂Cl₂(10.0mL)溶液中加入N-甲基氯丙基胺5030b(Aldrich，490.0mg，4.6mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12h，用NaHCO₃、盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，浓缩用SiO₂用乙酸乙酯/己烷纯化，得到5530c(1.6g，4.6mmol)，产率100％。

步骤3

用化合物5665的制备中的步骤2和步骤3中的实验程序将化合物5530c转化为5530d。

步骤4

向冷却的(0℃)胺盐酸盐5500i(25.0mg，0.051mmol)的CH₂Cl₂(2.0mL)溶液中加入5530d(2.5mL，0.135mmol)，然后加入DIPEA(68uL，0.4mmol)。反应混合物在室温下搅拌1.2h，用乙酸乙酯(20.0mL)稀释，用3％柠檬酸、盐水洗涤，用NaHCO₃干燥，过滤，浓缩，用SiO₂用丙酮-己烷(1∶9)纯化，得到5688(17.0mg)。LCMS 660.2(M+H).

表2中的化合物5688的许多类似物都是由5530d用上述程序制备。

化合物5700的制备

步骤1

用5648的制备中的步骤5的程序将化合物3-氯-丙醇(181uL，2.51mmol)转化为相应的氯甲酸酯5540b。

步骤2

向冰冷的氯甲酸酯的THF(10.0mL)溶液中加入胺5004a(543.0mg，2.51mmol)，将反应混合物在室温下搅拌12h，用EtOAc(250.0mL)稀释，用NaHCO₃、盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，浓缩，得到5540c(664mg，1.97mmol)。该粗品直接用于下一步骤。

步骤3

用化合物5665的制备中的步骤2和步骤3的实验程序将化合物5540c转化为5540d。

步骤4

向冷却的(0℃)胺盐酸盐5500i(30.0mg，0.0.6mmol)的CH₂Cl₂(2.0mL)溶液中加入5540d(2.6mL，0.131mmol)，然后加入DIPEA(91μL，0.52mmol)。反应混合物在室温下搅拌1.2h，用乙酸乙酯(20.0mL)稀释，用3％柠檬酸、盐水洗涤，用NaHCO₃干燥，过滤，浓缩，用SiO₂用丙酮-己烷(1∶9)纯化，得到5700(28.0mg)。LCMS 647.2(M+H)。

表2中的许多5700的类似物都是由5540d用上述程序制备。

目标化合物5743的制备

步骤1

在-4℃向5003b(1.0g，2.9mmol)的MeOH溶液中加入NaBH₄(11.52mmol，430.0mg)。搅拌20min后，将反应用CH₂Cl₂/饱和NaHCO₃(1∶1，60mL)猝灭。水层用DCM(3×20mL)萃取。所得有机层用MgSO₄干燥，浓缩，得到白色固体，其直接用于下一步骤。将前面步骤中得到的粗品重新溶于EtOH(50.0mL)中，加入Pd/C(10％重量，200mg)。反应混合物在H₂下搅拌12h，用硅藻土垫过滤，浓缩，得到5550a(0.99g)。

步骤2

用化合物5665的制备中的步骤3的实验程序将化合物5550a转化为5550b。

步骤3

向冷却的(0℃)胺盐酸盐5550d(45.0mg，0.094mmol)的CH₂Cl₂(2.0mL)溶液中加入5550b(2.8mL，2.0mmol)，然后加入DIPEA(100uL，0.52mmol)。反应混合物在室温下搅拌1.2h用乙酸乙酯(0.0mL)稀释，用3％柠檬酸、盐水洗涤，用NaHCO₃干燥，过滤，浓缩，用SiO₂用EtOAc-CH₂Cl₂(1∶9 to 9∶1)纯化，得到产物5743(32.0mg)。LCMS 705.2(M+H).

表2中的许多5743的类似物都是由5550b用上述程序制备。

化合物5754的制备

步骤1

异氰酸酯5754a由胺5019按照由5052c制备5052d中描述的程序制备。

步骤2

产物5754由5754a和5052f按照化合物5237的制备中描述的程序制备。

表2中的许多5754的类似物都是由5754a用上述程序制备。

化合物5812的制备

步骤1

向胺(1.2g，5.5mmol，1当量)的DCM(50mL)溶液中加入50ml饱和NaHCO₃。在冰温下剧烈搅拌5min。停止搅拌，向下层注入光气(2当量，11.09mmol，20％的甲苯溶液，5.96mL)。立即恢复搅拌。1h后分离各层。水层用DCM(3ml)再一次洗涤，用硫酸钠干燥。过滤，在高真空下不用热浴蒸发至一半体积，然后用N₂清洗15min。稀释为100mL的DCM溶液。将其就这样用于进一步反应。

步骤2

向胺5812b(Aldrich，0.5g，4.2mmol，1当量)的甲醇(20mL)溶液中加入异氰酸酯(5.5mmol，1.3当量)和三乙基胺(3.4ml，6当量，25.2mmol)，将反应混合物在90℃回流48h。在100℃再继续搅拌5h。将所得混合物浓缩，用快速柱色谱法纯化，得到产物5812c，产率96.7％。

步骤3

在室温下向化合物5812c(650mg)中加入4M HCl/二烷(25mL)并在室温下搅拌0.5h。蒸除溶剂，并与己烷共沸，然后与醚共沸。在高真空下放置4h，得到定量产率的产物。

步骤4

在0℃向胺盐酸盐(20mg，0.08mmol，1.3当量)的DCM(5ml)溶液中加入DIPEA(6当量)。在N₂下加入异氰酸酯(3mL，0.02M的DCM溶液)。在0℃搅拌30min后，在室温下搅拌90min。用柠檬酸猝灭反应，用EtOAc萃取，用盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥，过滤，蒸除溶剂。粗产物用快速柱色谱法(10-40％丙酮-己烷)纯化，得到化合物5812，产率41％。

下面的表1和2中列出了显示极佳HCV蛋白酶抑制活性的本发明代表性的化合物及它们在HCV连续测定中的生物活性(Ki^*值的范围以毫微摩尔表示，nM)：级别A≤50nM；级别B＞50nM。

                      表1

                               表2

本发明涉及新型HCV蛋白酶抑制剂。该功效可由它们抑制HCVNS3/NS4a丝氨酸蛋白酶的能力证明。下述体外测定说明了对该论证的一般程序。

HCV蛋白酶抑制活性的测定：

分光光度法测定：

HCV丝氨酸蛋白酶的分光光度法测定可按照R.Zhang et al，Analytical Biochemistry，270(1999)268-275中描述的程序在本发明化合物上进行，该公开通过引用结合到本文中。以显色酯底物的蛋白水解作用为基础的测定适于连续监测HCV NS3蛋白酶的活性。该底物得自NS5A-NS5B接合处序列(Ac-DTEDVVX(Nva)，其中X＝A或P)的P侧，其C-端羧基被四个不同的显色醇(3-或4-硝基苯酚、7-羟基-4-甲基-香豆素或4-苯基偶氮苯酚)之一酯化。下面显示的为这些新型分光光度测定的酯底物的合成、鉴定和应用至HCV NS3蛋白酶抑制剂的高通量筛选和详细的动力学评估。

材料和方法：

材料：用于测定相关的缓冲剂的化学试剂得自Sigma化学公司(St.Louis，Missouri)。用于肽合成的试剂来自Aldrich Chemicals，Novabiochem(San Diego，California)、Applied Biosystems(Foster City，California)和Perseptive Biosystems(Framingham，Massachusetts)。肽为人工合成或在自动化ABI431A型合成仪(来自Applied Biosystems)上合成。UVNIS分光光度仪LAMBDA 12型来自Perkin Elmer(Norwalk，Connecticut)，96-孔UV板得自Corning(Corning，New York)。预热板块可得自USA Scientific(Ocala，Florida)，96-孔板涡旋仪来自LablineInstruments(Melrose Park，Illinois)。具有单色计的Spectramax Plus微孔滴定板读数器得自Molecular Devices(Sunnyvale，California)。

酶的制备：

重组异源二聚体HCV NS3/NS4a蛋白酶(菌种1a)用以前公开(D.L.Sali et al，Biochemistry，37(1998)3392-3401)的程序制备。蛋白浓度用先前由氨基酸分析定量的重组HCV蛋白酶标准物用Biorad染色法测定。在测定开始前，用Biorad Bio-Spin P-6预填充柱将酶储存缓冲液(50mM磷酸钠pH8.0，300mM NaCl，10％丙三醇，0.05％月桂基麦芽苷和10mM DTT)换为测定缓冲液(25mM MOPS pH6.5，300mMNaCl，10％丙三醇，0.05％月桂基麦芽苷，5μM EDTA and 5μMDTT)。

底物合成和纯化：底物的合成按照R.Zhang et al，(ibid.)报道的方法进行，以用标准方案(K.Barlos et al，Int.J.Pept.Protein Res.，37(1991)，513-520)，一开始将Fmoc-Nva-OH锚定在2-氯三苯甲基氯树脂上。接着肽用Fmoc化学作用人工或在自动化ABI431型肽合成仪上装配。用10％乙酸(HOAc)和10％三氟乙醇(TFE)的二氯甲烷(DCM)溶液经30min，或用2％三氟乙酸(TFA)的DCM溶液经10min，将N-乙酰化的和完全保护的肽片段从树脂上裂解。合并的滤液和DCM洗液共沸蒸发(或用Na₂CO₃水溶液重复萃取)，以除去裂解中使用的酸。DCM相用Na₂SO₄干燥，蒸发。

酯底物用标准酸-醇偶合程序(K.Holmber et al，Acta Chem.Scand.，B33(1979)410-412)装配。将肽片段溶于无水吡啶(30-60mg/ml)，在其中加入10摩尔当量的生色团和催化量(0.1当量)的对甲苯磺酸(pTSA)。加入二环己基碳化二亚胺(DCC，3当量)以引发偶合反应。产物形成由HPLC监控，可发现在室温下12-72小时反应完全。真空蒸发吡啶溶剂，然后与甲苯共沸蒸发进一步除去。肽酯用95％TFA的DCM溶液脱保护2小时，用无水乙醚萃取三次以除去过量的生色团。脱保护的底物用反相HPLC在C3或C8柱上用30％-60％乙腈梯度洗脱(用6份柱体积)来纯化。HPLC纯化后的总产率可达约20-30％。可用电喷雾离子化质谱确认分子量。底物以干粉形式在干燥下储存。

底物和产物的光谱：底物和相应的生色团产物的光谱在pH6.5的分析缓冲液中获得。消光系数用多重稀释液在1-cm的比色杯中在最佳非高峰波长(off-peak wavelength)(对3-Np和HMC为340nm，对PAP为370nm，对4-Np为400nm)。最佳非高峰波长被定义为在底物和产物间产生最大分数差(fractional difference)的波长(产物OD-底物OD)/底物OD)。

蛋白酶测定：HCV蛋白酶测定在30℃用200μl反应混合物在96-孔微量滴定板上进行。将测定缓冲条件(25mM MOPS pH6.5，300mMNaCI，10％丙三醇，0.05％月桂基麦芽苷，5μM EDTA和5μM DTT)对NS3/NS4A异源二聚体(D.L.Sali et al，同前出处))优化。通常，将150μl缓冲液、底物和抑制剂的混合物置于孔中(DMSO终浓度≤4％v/v)，并在30℃预孵育约3分钟。然后，用50μl测定缓冲液中的预热蛋白酶(12nM，30℃)来引发反应(终体积为200μl)。板用装有单色计的Spectromax Plus微量滴定板读数器在测定期间(60分钟)检测适当波长(对3-Np和HMC为340nm，对PAP为370nm，对4-Np为400nm)下的吸光率变化(可用使用截止滤器(cutoff filters)的板读数器获得可接受的结果)。Nva和生色团之间的酯键的蛋白水解裂解为在适当波长下，以无酶空白作为非酶水解作用的对照进行检测。底物动力学参数的评估在30-倍底物浓度范围(～6-200μM)进行。用线性回归确定初速度，用非线性回归分析通过使数据与Michaelis-Menten方程拟合(Mac Curve Fit 1.1，K.Raner)而获得动力学常数。假定酶为完全活性而计算周转数(Turnover numbers)(kcat)。

抑制剂和灭活剂的评估：竞争性抑制剂Ac-D-(D-Gla)-L-I-(Cha)-C-OH(27)、Ac-DTEDVVA(Nva)-OH和Ac-DTEDVVP(Nva)-OH的抑制常数(Ki)根据试验确定，方法为在固定的酶和底物浓度，根据关于竞争抑制动力学的重排Michaelis-Menten方程式：vo/vi＝1+[I]o/(Ki(1+[S]o/Km)，其中vo为未抑制的初速度，vi为在任何给定抑制剂浓度([I]o)的抑制剂的存在下的初速度，[S]o为所用底物的浓度，通过实验方式将vo/vj对抑制剂浓度([I]o)作图而测得。用线性回归拟合所得数据，并用所得斜率：1/(Ki(1+[S]o/Km)来计算Ki值。下面的表4中列出了一些本发明化合物的Ki^*值(以毫微摩尔表示)。

                      表4

结合上述特定的实施方案，已描述了本发明，本领域中普通技术人员会明白许多可替代物、修饰或其变更。所有这些可替代物、修饰和变更都在本发明的精神和范围内。

Claims (36)

1.一种化合物，或所述化合物的对映异构体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体和外消旋体，或所述化合物的药学可接受盐、溶剂合物或酯，所述化合物具有式I所示的通式结构：

                        式I

其中：

R¹为H、OR⁸、NR⁹R¹⁰或CHR⁹R¹⁰，其中R⁸、R⁹和R¹⁰可相同或不同，各自独立选自H、烷基-、烯基-、炔基-、芳基-、杂烷基-、杂芳基-、环烷基-、杂环基-、芳烷基-和杂芳烷基；

A和M可相同或不同，各自独立选自R、OR、NHR、NRR′、SR、SO₂R和卤素；或A和M相互连接(换句话说，A-E-L-M连接在一起)以使上述式I中所示部分：

形成三、四、六、七或八-元环烷基，四至八-元杂环基，六至十-元芳基，或五至十-元杂芳基；

E为C(H)或C(R)；

L为C(H)、C(R)、CH₂C(R)或C(R)CH₂；

R、R′、R²和R³可相同或不同，各自独立选自H、烷基-、烯基-、炔基-、环烷基-、杂烷基-、杂环基-、芳基-、杂芳基-、(环烷基)烷基-、(杂环基)烷基-、芳基-烷基-和杂芳基-烷基-；或者NRR′中的R和R′相互连接以使NRR′形成四至八-元杂环基；

且Y选自下面的部分：

其中G为NH或O，R¹⁵、R¹⁶、R¹⁷、R¹⁸、R¹⁹和R²⁰可相同或不同，各自独立选自H、C₁-C₁₀烷基、C₁-C₁₀杂烷基、C₂-C₁₀烯基、C₂-C₁₀杂烯基、C₂-C₁₀炔基、C₂-C₁₀杂炔基、C₃-C₈环烷基、C₃-C₈杂环基、芳基、杂芳基，或者：(i)R¹⁵和R¹⁶可相互连接形成四至八-元环烷基或杂环基，或R¹⁵和R¹⁹相互连接形成五至八-元环烷基或杂环基，或R¹⁵和R²⁰相互连接形成五至八-元环烷基或杂环基，和(ii)同样，独立地，R¹⁷和R¹⁸相互连接形成三至八-元环烷基或杂环基，

其中每个所述烷基、芳基、杂芳基、环烷基或杂环基可未被取代或任选被一个或多个选自下述的部分独立取代：羟基、烷氧基、芳氧基、巯基、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、磺酰氨基、烷基磺酰氨基、芳基磺酰氨基、酮、羧基、烷氧羰基、酰胺基、烷氧基羰基氨基、烷氧基羰基氧基、烷基脲基、芳基脲基、卤素、氰基和硝基。

2.权利要求1的化合物，其中R¹为NR⁹R¹⁰，R⁹为H，R¹⁰为H、烷基、芳基、杂烷基、杂芳基、环烷基、烷基-芳基、烷基-杂芳基、芳基-烷基、烯基、炔基或杂芳基-烷基。

3.权利要求2的化合物，其中R¹⁰选自：

4.权利要求1的化合物，其中R²选自下面的部分：

5.权利要求1的化合物，其中R³选自：

其中R³¹为OH或O-烷基；且

R³²为H、C(O)CH₃、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。

6.权利要求5的化合物，其中R³选自下面的部分：

7.权利要求1的化合物，其中G为NH。

8.权利要求1的化合物，其中Y选自：

其中Y³⁰和Y³¹选自：

Y³²选自：

且Y¹²选自H、COOH、COOMe、CONH₂、OMe、OH、OCF₃、OCH(CH₃)₂、OC(CH₃)₃、F、Cl、Br、NH₂、NHSO₂CH₃、NHC(O)CH₃、NHCO₂CH₃、NO₂、SO₂NH₂、CF₃、Me、Et、异丙基、环丙基、叔丁基和苯基。

9.权利要求8的化合物，其中Y选自：

其中Y³⁰和Y³¹选自：

Y³²选自：

和Y¹²选自H、COOH、COOMe、CONH₂、OMe、OH、OCF₃、OCH(CH₃)₂、OC(CH₃)₃、F、Cl、Br、NH₂、NHSO₂CH₃、NHC(O)CH₃、NHCO₂CH₃、NO₂、SO₂NH₂、CF₃、Me、Et、异丙基、环丙基、叔丁基和苯基。

10.权利要求1的化合物，其中下述部分：

选自下述结构：

11.权利要求10的化合物，其中下述部分：

选自下述结构：

12.权利要求11的化合物，其中下述部分：

选自下述结构：

13.权利要求1的化合物，其中R¹为NHR¹⁰，其中R¹⁰选自：

R²选自下面的部分：

R³选自下面的部分：

Y选自：

其中Y³⁰和Y³¹可相同或不同，各自独立选自：

其中Y³²选自：

和Y¹²选自H、COOH、COOMe、CONH₂、OMe、OH、OCF₃、OCH(CH₃)₂、OC(CH₃)₃、F、Cl、Br、NH₂、NHSO₂CH₃、NHC(O)CH₃、NHCO₂CH₃、NO₂、SO₂NH₂、CF₃、Me、Et、异丙基、环丙基、叔丁基或苯基；

且下述部分：

14.一种药用组合物，所述组合物包含至少一种权利要求1的化合物作为活性成分。

15.权利要求14的药用组合物，用于治疗HCV相关性病症。

16.权利要求15的药用组合物，还包含至少一种药学可接受载体。

17.权利要求16的药用组合物，还包含至少一种抗病毒剂。

18.权利要求17的药用组合物，还再包含至少一种干扰素。

19.权利要求18的药用组合物，其中所述至少一种抗病毒剂为利巴韦林，所述至少一种干扰素为α-干扰素或聚乙二醇化干扰素。

20.一种治疗HCV相关性病症的方法，所述方法包括给予需要这种治疗的患者包含治疗有效量的至少一种权利要求1的化合物的药用组合物。

21.权利要求20的方法，其中所述给药为口服或皮下给药。

22.权利要求1的化合物在生产用于治疗HCV相关性病症的药物中的用途。

23.一种制备用于治疗HCV相关性病症的药用组合物的方法，所述方法包括使至少一种权利要求1的化合物与至少一种药学可接受载体进行紧密物理接触。

24.一种显示出HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的对映异构体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体和外消旋体，或所述化合物的药学可接受盐、溶剂合物或酯，所述化合物选自下面所列结构的化合物：

25.一种治疗丙型肝炎病毒(“HCV”)相关性病症的药用组合物，所述组合物包含治疗有效量的一种或多种权利要求24的化合物和药学可接受载体。

26.权利要求25的药用组合物，还包含至少一种抗病毒剂。

27.权利要求26的药用组合物，还包含至少一种干扰素或PEG-干扰素α缀合物(“聚乙二醇化干扰素”)。

28.权利要求27的药用组合物，其中所述至少一种抗病毒剂为利巴韦林且所述至少一种干扰素为α-干扰素或聚乙二醇化干扰素。

29.一种治疗丙型肝炎病毒相关性病症的方法，所述方法包括给予有效量的一种或多种权利要求24的化合物。

30.一种调节丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶活性的方法，所述方法包括使HCV蛋白酶与一种或多种权利要求24的化合物接触。

31.一种治疗、预防或改善一种或多种丙型肝炎症状的方法，所述方法包括给予有效量的一种或多种权利要求24的化合物。

32.权利要求31的方法，其中所述HCV蛋白酶为NS3/NS4a蛋白酶。

33.权利要求32的方法，其中所述化合物抑制HCV NS3/NS4a蛋白酶。

34.一种调节丙型肝炎病毒(HCV)多肽加工的方法，所述方法包括使包含HCV多肽的组合物在所述多肽的加工条件下与一种或多种权利要求24的化合物接触。

35.一种治疗HCV相关性病症的方法，所述方法包括给予需要这种治疗的患者药用组合物，所述药用组合物包含治疗有效量的至少一种化合物或所述化合物的对映异构体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体和外消旋体，或所述化合物的药学可接受盐、溶剂合物或酯，所述化合物选自下列：

36.权利要求1的化合物，所述化合物为纯化形式。