KR102029546B1 - Anti-aging and anti-allergic cosmetic compositon comprising the extract of the flower, root, callus and seed of Hibiscus syriacus L. as an active ingredient and preparation method of the same - Google Patents
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Abstract
본 출원은 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 각 추출물의 각 동량비(w/w) 혼합물을 유효성분으로 하는 것이 특징인 항노화 또는 항알러지용 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.The present application relates to an anti-aging or anti-allergic cosmetic composition and a method for producing the same, characterized in that each of the same ratio (w / w) mixture of each extract of the flowers, roots, callus and seeds of the green light plant as an active ingredient.
Description
본 출원은 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨 등 각 부위의 추출물의 각 동량비 혼합물을 유효성분으로 함유하는 항노화 및 항알러지용 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.The present application relates to an anti-aging and anti-allergic cosmetic composition and a method for producing the same, containing each of the same ratio mixture of the extract of each site, such as flowers, roots, callus and seeds of the rose of sharon.
무궁화(Hibiscus syriacus L.)는 중국과 인디아(인도) 원산으로 전국에 심어 기르는 떨기나무로 세계적으로는 동아시아, 유럽 등지에 분포한다. 줄기는 곧추서며, 가지가 갈라지고, 높이는 2-3m다. 잎은 어긋나며, 난형, 넓은 난형, 3갈래로 얕게 갈라지고, 가장자리에 거친 톱니가 있다. 잎 양면에 털이 나며 꽃은 8-10월에 가지 위쪽의 잎겨드랑이에서 한 개씩 피며, 붉은 보라색 또는 흰색을 띤다. 꽃받침은 통 모양, 5갈래로 갈라진다. 꽃잎은 5장, 아래쪽이 서로 붙어 있다. 수술은 많고, 수술대가 붙어서 한 뭉치로 된다. 열매는 삭과이며, 둥근 난형, 익으면 5갈래로 갈라진다. 식용, 관상용, 약용으로 쓰인다는 기록이 있다. 무궁화 꽃은 화려하고, 다섯 개의 꽃잎이 기부에서 서로 붙어 있다. 흔히 흰색과 붉은 보라색인데 안쪽(꽃잎 윗면 기부)에 진한 붉은 자주색의 무늬가 있다. 황근(H. hamabo Siebold et Zucc.)에 비해서 자생식물이 아니라 심어 기르는 나무이며, 잎은 가장자리가 얕게 갈라지고, 꽃은 붉은색 또는 흰색으로서 노란색이 아니므로 구분된다. Rose of Sharon ( Hibiscus syriacus L.) Native to China and India (India), it is a plant that grows throughout the country and is distributed in East Asia and Europe. The stem is straight, the branches are split, and the height is 2-3m. The leaves are alternately ovate, broad ovate, triangularly shallowly divided, and have coarse teeth on the edge. Hairs on both sides of the leaves. Flowers bloom one by one on the upper side of the branch in August-October, reddish purple or white. Calyx is tubular, divided into 5 branches. 5 petals, attached to the bottom. Surgery is a lot, the operating table is attached to a bunch. Fruits are capsules, round, ovate, and split into five when ripe. There are records that it is used for edible, ornamental and medicinal purposes. The Rose of Sharon is colorful and five petals are attached to each other at the base. It is often white and reddish purple with dark reddish purple inside. Compared to H. hamabo Siebold et Zucc., It is not a native plant but a planting tree, and its leaves are divided with shallow edges, and the flowers are red or white and not yellow.
피부는 외부 환경에 직접적으로 노출되는 신체 부위로서, 과도한 자외선이나 오염물질 등에 노출되면 홍반, 부종, 가려움 등의 피부자극 및 염증반응이 유발된다. 이러한 피부 트러블은 미관상 문제가 될 뿐만 아니라, 염증 반응과정에서 생성되는 물질들이 부수적으로 색소 침착을 일으키고, 피부 탄력섬유의 붕괴를 촉진시켜 피부 노화를 증가시키며 이러한 피부 손상은 활성산소(Reactive oxygen species,ROS)와 관련이 있다.Skin is a part of the body that is directly exposed to the external environment, and when exposed to excessive ultraviolet rays or contaminants, skin irritation and inflammatory reactions such as erythema, edema, and itching are induced. This skin trouble is not only an aesthetic problem, but also an ancillary pigmentation of the substances produced during the inflammatory process, and an increase in skin aging by promoting the breakdown of skin elastic fibers, and such skin damage is caused by reactive oxygen species, ROS).
활성산소는 우리가 호흡하는 산소와는 완전히 다르게 불안정한 상태에 있는 산소로 세포를 파괴하거나 피부 진피층의 결합조직을 절단하거나 교차결합을 일으키므로 주름형성, 피부암, 세포 살상, 아토피성 피부염, 여드름 등 여러 가지 문제를 일으킨다. 인체에는 항산화 물질인 슈퍼옥사이드 디스뮤타제(SOD), 카탈라아제, 비타민 E, 비타민 C, 유비퀴놀 등이 상기 활성산소를 제거하지만 나이와 자외선 및 스트레스에 의해 항산화 체계가 무력화되고 활성산소가 점차 증가해 피부노화를 일으킨다.Free radicals are oxygen that is in an unstable state completely different from the oxygen we breathe, destroying cells, cutting connective tissue in the dermis, or causing cross-linking, resulting in wrinkles, skin cancer, cell killing, atopic dermatitis, acne, etc. Cause problems. Antioxidants such as superoxide dismutase (SOD), catalase, vitamin E, vitamin C, and ubiquinol remove the free radicals in the human body, but the antioxidant system is inactivated by age, UV, and stress, and the free radicals gradually increase. Causes skin aging.
염증은 해로운 주위 환경, 즉 세균과 같은 외부 이물질의 침입과 기계적 손상으로부터 생체를 보호하는 생리적인 반응이다. 이 염증반응은 여러 종류의 다핵형 백혈구(PMNs)의 증식을 유도하고 이 염증성 세포는 다양한 종류의 단백질 분해효소와 사이토카인을 분비함으로써 인체를 방어한다. 하지만, 과다 염증반응으로 인한 피부의 과도한 단백질분해효소의 생성은 세포 미결합조직의 손상을 입히고, 결합 조직의 손상은 피부의 탄력을 감소시켜 주름의 원인이 될 뿐 아니라, 세포의 재생 및 증식에도 나쁜 영향을 미친다.Inflammation is a physiological response that protects the body from harmful environmental conditions, such as invasion and mechanical damage of foreign objects such as bacteria. The inflammatory response induces the proliferation of several types of multinucleated leukocytes (PMNs), and these inflammatory cells defend the body by releasing various types of proteases and cytokines. However, excessive proteolytic enzyme production of the skin due to excessive inflammatory reactions causes damage to non-cellular connective tissue, and damage to connective tissue reduces skin elasticity and causes wrinkles, as well as regeneration and proliferation of cells. Bad influence
알러지는 면역 불균형에 의한 과민반응의 일종으로 항원(allergen)이라는 특정한 항원에 대하여 나타나는 반응으로 그 항원에 대해 특이적인 IgE 항체가 비만세포(mast cell)나 호염구(basophil)에 결합되어 유도되는 반응이다. 상기 IgE 항체에 의해 활성화된 비만세포나 호염구는 염증성 사이토카인과 프로스타글란딘 및 히스타민 등을 분비하여 혈관확장 및 염증반을을 일으켜 알러지성 아토피, 천식, 피부알러지 등을 일으킨다. 이러한 알러지 질환은 발병률이 크게 증가되어 그에 따른 질환 완화 및 예방에 대한 중요성이 부각되고 있다.Allergy is a type of hypersensitivity reaction caused by immune imbalance, which occurs when a specific antigen, called allergen, is bound to mast cells or basophils. . The mast cells or basophils activated by the IgE antibody secrete inflammatory cytokines, prostaglandins and histamine, causing vasodilation and inflammatory lesions, causing allergic atopy, asthma, and skin allergies. These allergic diseases are significantly increased incidence and thus the importance of the alleviation and prevention of the disease is highlighted.
피부의 주름은 콜라겐이 고령화나 자외선 조사에 의한 광노화로 인하여 감소하고 피부의 두께가 얇아져 생성된다고 한다. 최근 피부 노화에 대한 연구가 진전되어 콜라겐의 피부에 대한 기능이 밝혀지고 있고,특히 콜라겐 합성 혹은 감소의 방지에 관한 연구 및 이에 기한 피부 강화용 화장료 조성물로 사용한 제품들이 출시되고 있다. Wrinkles of the skin are said to be reduced due to the aging of collagen or photoaging by ultraviolet irradiation and thinning of the skin thickness. Recently, research on skin aging has been progressed to reveal the function of collagen on the skin, and in particular, studies on the prevention of collagen synthesis or reduction, and products using the cosmetic composition for strengthening the skin have been released.
무궁화는 인삼에 다량 함유된 것으로 알려진 사포나린, 말발산, 스테르쿨산, 탄닌산, 디하이드로스테로쿨산, 점액질 등이 포함되어 있고 특히 인체의 생리활성을 도울 수 있는 성분이 다량 함유된 것으로 보고되어 항노화 또는 다양한 기능성화장료 성분으로 활용하기 위한 연구가 진행되고 있다. 이러한 배경 하에 본 발명자들은 무궁화에서 채취한 다양한 부위, 즉 그의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨를 각 분리, 정선하여 추출하고 이들의 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화 및 항알러지 기능성 화장료 조성물을 개발하기 위하여 예의 연구 노력한 결과 본 출원을 완성하였다. Rose of Sharon contains saponariin, malvalic acid, terculic acid, tannic acid, dihydrosteric acid, mucus, etc., which are known to be contained in ginseng in a large amount. Research is being conducted to utilize them as anti-aging or various functional cosmetic ingredients. Against this background, the present inventors have developed various anti-aging and anti-allergic functional cosmetic compositions which extract, extract, and extract various parts of flowers, roots, callus and seeds thereof, which are collected from Mugunghwa, as their active ingredients. As a result of intensive research efforts, the present application was completed.
본 발명 관련 선행기술로서 대한민국 등록특허 제10-1564430호와 등록특허 제10-1762750호가 있으나 이는 무궁화 자체의 추출물을 포함하는 화장료에 관한 것으로 그의 용도나 다른 부위의 혼합 조성물에 대한 개시가 없어 본 발명과는 이질적이다. 또한 대한민국 등록특허 10-1701476호가 있으나 이는 무궁화 추출물의 제조방법 및 그 추출물을 함유하는 식품에 관한 것으로, 본원 발명의 무궁화 식물의 각 부위의 추출물의 동량 배합비로 이루어진 혼합 추출물을 이용한 기능성 화장료 조성물의 용도는 상기 인용문헌 어디에도 개시되거나 암시된 바 없다.There are Republic of Korea Patent No. 10-1564430 and Patent No. 10-1762750 as prior art related to the present invention, but this relates to a cosmetic comprising the extract of Mugunghwa itself, there is no disclosure of its use or mixture composition of other parts of the present invention And is heterogeneous. In addition, there is a Republic of Korea Patent No. 10-1701476, but this relates to a method of preparing the extract and the food containing the extract, the use of the functional cosmetic composition using a mixed extract consisting of the same amount of the extract of each part of the plant of the present invention Is not disclosed or implied in any of the above references.
본 출원의 목적은 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물의 제조방법을 제공하는 데에 있다.An object of the present application is to provide a method for producing a mixed extract of the flowers, roots, callus and seeds of Rose of Sharon.
본 출원의 다른 목적은 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물을 제공하는 데에 있다.Another object of the present application is to provide a mixed extract of the flowers, roots, callus and seeds of Rose of Sharon.
본 출원의 또 다른 목적은 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물의 용도 즉 상기 혼합물을 유효성분으로 함유하는 항노화 및 항알러지 기능성 화장료 조성물을 제공하는 데에 있다.Another object of the present application is to provide an anti-aging and anti-allergic functional cosmetic composition containing a mixed extract of flowers, roots, callus and seeds of rose of sharon, as an active ingredient.
본 출원의 다른 목적 및 이점은 첨부한 청구범위 및 도면과 함께 하기의 상세한 설명에 의해 보다 명확해질 것이다. 본 명세서에 기재되지 않은 내용은 본 출원의 기술 분야 또는 유사 분야에서 숙련된 자이면 충분히 인식하고 유추할 수 있는 것이므로 그 설명을 생략한다.Other objects and advantages of the present application will become more apparent from the following detailed description taken in conjunction with the appended claims and drawings. Content not described herein is omitted because it can be sufficiently recognized and inferred by those skilled in the art or similar fields of the present application.
이하, 본 출원 내용에 대하여 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 출원에서 개시한 일 실시 양태의 설명 및 실시 형태는 공통된 사항에 대하여 다른 양태의 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 또한, 본 출원에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 출원의 범주에 속한다. 더불어, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 출원의 범주가 제한된다고 볼 수 없다. Hereinafter, the content of the present application will be described in detail. In addition, description and embodiment of one embodiment disclosed by this application can be applied also to description and embodiment of other aspect about common matter. In addition, all combinations of the various elements disclosed in the present application are within the scope of the present application. In addition, the scope of the present application is not to be limited by the specific description described below.
본 출원의 목적을 달성하기 위하여 일 양태로서 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물을 수득하는 것이 특징인 무궁화 혼합 추출물의 제조방법을 제공한다. 상기 제조방법은 무궁화 식물 각 부위, 즉, 꽃, 뿌리, 씨를 물, 에탄올, 메탄올, 부틸렌글리콜, 프로판디올 또는 이들의 혼합용매를 이용하여 고온서 추출하여 추출물을 수득하는 단계와, 상기 각 부위별 추출물과 무궁화 캘러스 추출물을 동량의 배합비로 혼합하여 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물을 수득하는 단계를 포함하는 것이 특징인 무궁화 혼합 추출물의 제조방법이다. 무궁화 식물의 각 부위별 추출물과 무궁화 캘러스 추출물의 혼합은 상기 용매의 다양한 비율(W/W)을 이용하여 가능하나 바람직하게는 동량(W/W)으로 혼합할 수 있다. 또한, 상기 추출 온도는 50 내지 90℃의 범위가 사용될 수 있고 1 내지 4일간, 바람직하게는 60℃에서 1 내지 4일간 추출할 수 있다. 상기 혼합용매는 1:10 내지 1:100의 비율이 사용될 수 있으나 사용가능한 비율은 이에 제한되지 않는다.In order to achieve the object of the present application, in one aspect, there is provided a method for preparing a mixed extract of Rose of Sharon, characterized by obtaining a mixed extract of flowers, roots, callus and seeds of the Rose of Sharon. The manufacturing method is a step of extracting each part of the green plant, that is, flowers, roots, seeds at high temperature using water, ethanol, methanol, butylene glycol, propanediol or a mixed solvent thereof to obtain an extract, and each of the parts Mixing the star extract and the Rose of Sharon callus extract in the same amount of compounding ratio to obtain a mixed extract of the flowers, roots, callus and seeds of Rose of Sharon. It is possible to mix the extract of each plant of the greenery plant and the extract of the green leaf callus extract using various ratios (W / W) of the solvent, but it may be preferably mixed in the same amount (W / W). In addition, the extraction temperature may be used in the range of 50 to 90 ℃ and can be extracted for 1 to 4 days, preferably at 60
항노화는 피부에 있어서 항염, 항주름, 항산화를 포함하는 개념으로 각 NO 생산의 감소량, 콜라겐 생성량, ROS 생성의 감소량으로 측정할 수 있으나 사용하는 바이오 마커 및 측정 방법은 이에 제한되지 않는다. Anti-aging is a concept that includes anti-inflammatory, anti-wrinkle, antioxidant in the skin can be measured by the amount of reduction of each NO production, the amount of collagen production, the amount of ROS production, but the biomarkers and measuring methods used are not limited thereto.
본 출원은 다른 양태로서 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물을 유효성분으로 하는 항노화 또는 항알러지용 화장료 조성물의 제조방법을 제공한다. 본 출원 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 에센스,샴푸, 계면활성제 함유 클렌징, 토닉, 스케일링 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 구체적으로는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 유액, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징 폼, 클렌징워터, 팩, 헤어 에센스, 린스 등의 제형으로 제조될 수 있다. In another aspect, the present application provides a method for preparing an anti-aging or anti-allergic cosmetic composition using a mixed extract of flowers, roots, callus and seeds of rose of sharon as an active ingredient. The cosmetic composition of the present application may be formulated as a solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, essence, shampoo, surfactant-containing cleansing, tonic, scaling, and the like, but is not limited thereto. More specifically, it may be prepared in a formulation such as softening lotion, nourishing lotion, nutrient latex, nourishing cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, hair essence, rinse.
본 출원은 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물을 유효성분으로 하는 항노화 또는 항알러지 기능이 현저히 증대된 화장료 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 뛰어난 효과가 있다.The present application has an excellent effect of providing a cosmetic composition and a method for producing the same, which have significantly increased anti-aging or anti-allergic function as an active ingredient of a mixed extract of flowers, roots, callus and seeds of Rose of Sharon.
도 1은 무궁화 씨 추출물의 항염 효능을 나타내는 그래프이다.
도 2는 무궁화 꽃 추출물의 항염 효능을 나타내는 그래프이다.
도 3은 무궁화 캘러스 추출물의 항염 효능을 나타내는 그래프이다.
도 4는 무궁화 뿌리 추출물의 항염 효능을 나타내는 그래프이다.
도 5는 무궁화 캘러스 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능을 나타내는 그래프이다.
도 6은 무궁화 꽃 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능을 나타내는 그래프이다.
도 7은 무궁화 뿌리 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능을 나타내는 그래프이다.
도 8은 무궁화 씨 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능을 나타내는 그래프이다.
도 9는 무궁화 꽃 추출물의 항산화 효능을 나타내는 그래프이다.
도 10은 도 9는 무궁화 캘러스 추출물의 항산화 효능을 나타내는 그래프이다.
도 11은 무궁화 씨 추출물의 항산화 효능을 나타내는 그래프이다.
도 12는 무궁화 뿌리 추출물의 항산화 효능을 나타내는 그래프이다.
도 13은 무궁화 뿌리 추출물의 항알러지 효능을 나타내는 그래프이다.
도 14는 무궁화 꽃 추출물의 항알러지 효능을 나타내는 그래프이다.
도 15는 무궁화 씨 추출물의 항알러지 효능을 나타내는 그래프이다.
도 16은 무궁화 캘러스 추출물의 항알러지 효능을 나타내는 그래프이다.
도 17은 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 각 동량비(w/w) 혼합 추출물의 항산화 효능을 나타내는 그래프이다.
도 18은 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 각 동량비(w/w) 혼합 추출물의 항알러지 효능을 나타내는 그래프이다.
도 19는 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 각 동량비(w/w) 혼합 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능을 나타내는 그래프이다.
도 20은 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 각 동량비(w/w) 혼합 추출물의 항염 효능을 나타내는 그래프이다.1 is a graph showing the anti-inflammatory efficacy of the extract of Rose of Sharon.
Figure 2 is a graph showing the anti-inflammatory efficacy of the rose of sharon flowers.
Figure 3 is a graph showing the anti-inflammatory efficacy of the green light callus extract.
Figure 4 is a graph showing the anti-inflammatory efficacy of the Rose of Sharon root extract.
5 is a graph showing the collagen production proliferation efficacy of the green light callus extract.
Figure 6 is a graph showing the collagen production proliferation efficacy of Rose of Sharon flower extract.
Figure 7 is a graph showing the collagen production proliferation efficacy of Rose of Sharon root extract.
8 is a graph showing the collagen production proliferation efficacy of the Rose of Sharon seed extract.
9 is a graph showing the antioxidant efficacy of the rose of sharon flower extract.
10 is a graph showing the antioxidant efficacy of the green light callus extract.
11 is a graph showing the antioxidant efficacy of the Rose of Sharon seed extract.
12 is a graph showing the antioxidant efficacy of the Rose of Sharon root extract.
Figure 13 is a graph showing the anti-allergic effect of Rose of Sharon root extract.
Figure 14 is a graph showing the anti-allergic effect of Rose of Sharon flower extract.
Figure 15 is a graph showing the anti-allergic effect of Rose of Sharon seed extract.
Figure 16 is a graph showing the anti-allergic efficacy of Rose of Sharon callus extract.
17 is a graph showing the antioxidant efficacy of each extract of the same ratio (w / w) of the flowers, roots, callus and seeds of Rose of Sharon.
Figure 18 is a graph showing the anti-allergic efficacy of each extract of the same ratio (w / w) of the flowers, roots, callus and seeds of Rose of Sharon.
Figure 19 is a graph showing the collagen production proliferation efficacy of each of the same ratio (w / w) mixed extract of the flowers, roots, callus and seeds of Rose of Sharon.
20 is a graph showing the anti-inflammatory effect of each equivalent ratio (w / w) mixed extract of flowers, roots, callus and seeds of Rose of Sharon.
이하, 본 출원에 따른 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 다만 본 출원의 하기 실시예는 본 출원의 일 예시에 불과하다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 첨부된 청구항에 제시된 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 명백할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples according to the present application. However, the following examples of the present application are merely examples of the present application. These examples are intended to illustrate the present invention in more detail, and it is obvious to those skilled in the art that the scope of the present invention as set forth in the appended claims is not limited by these examples. something to do.
실시예1. 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨 그리고 캘러스 추출물 및 이들의 각 동량비 혼합 추출물의 제조Example 1 Preparation of Flowers, Roots, Seeds and Callus Extracts of the Rose of Sharon
본 발명 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨의 추출물은 각 무궁화의 꽃, 뿌리, 씨를 물, 에탄올, 메탄올, 부틸렌글리콜, 프로판디올 또는 이들의 혼합용매에 1:10(W/W) 내지 1:100(W/W)의 비율로 1일 내지 4일 동안 60℃에서 추출하여 수득하였다. The extract of the flowers, roots, and seeds of the green light plants of the present invention is 1:10 (W / W) to 1: in the water, ethanol, methanol, butylene glycol, propanediol or a mixed solvent thereof. Obtained by extraction at 60 ° C. for 1 to 4 days at a rate of 100 (W / W).
본 발명 무궁화 캘러스 추출물은 다음의 방법으로 수득하였다. 우선 무궁화 식물 종자를 배지에 치상하여 20~27℃(바람직하게는 22℃)의 온도 및 65~75%(바람직하게는 55~60%) 습도의 조건에서 암실 배양하여 발아를 유도하고, 발아된 무궁화 식물의 잎을 절단하여 IBA(indole-3-butyric acid), 수크로오스(Sucrose) 및 한천(Agar)을 함유한 MS 기본배지에 접종한 후 23~27℃에서 배양하여 캘러스를 유도하였다. 그 다음 배양된 무궁화 캘러스를 계대 배양을 통해 증식시키고, 증식된 무궁화 식물의 캘러스 배양물을 수확하여 수분을 제거한 후 45~55℃의 온도 조건에서 건조시켰다. 상기 건조된 무궁화 캘러스 배양물에 정제수(또는 용매)를 가하여 열수(또는 용매)추출하여 무궁화 캘러스 추출물을 수득하였다.The green light callus extract of the present invention was obtained by the following method. First, the leaves of Rose of Sharon are seeded on a medium and incubated under dark conditions at a temperature of 20-27 ° C. (preferably 22 ° C.) and 65-75% (preferably 55-60%) humidity to induce germination. The leaves of Rose of Sharon were cut and inoculated into MS basal medium containing IBA (indole-3-butyric acid), sucrose (Sucrose) and agar (Agar), and then cultured at 23-27 ° C to induce callus. Then, the cultured green light callus was propagated through subculture, and the callus culture of the grown green light plant was harvested to remove moisture, and then dried at a temperature condition of 45-55 ° C. Purified water (or solvent) was added to the dried green light calli culture, and hot water (or solvent) was extracted to obtain a light green callus extract.
상기 각 단계에서 수득한 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨의 각 부위의 추출물과 캘러스 추출물을 각 동량으로(W/W) 배합하여 이들의 혼합 추출물을 수득하였다.Extracts and callus extracts of each part of the flowers, roots, and seeds of the rose of sharon obtained in each step were combined in equal amounts (W / W) to obtain a mixed extract thereof.
실험예 1. 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨 그리고 캘러스 추출물의 항염 효능 측정Experimental Example 1. Determination of anti-inflammatory effect of flowers, roots, seeds and callus extracts
본 발명 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨 그리고 캘러스 추출물의 항염 효과를 측정하기 위하여 RAW 264.7 cell에 염증 유발 물질인 LPS를 처리한 후 염증 억제효과가 있는지를 평가하였다. 96-well plate에 well 당 2 x 105 cell이 되도록 분주한 다음 24시간 동안 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양하였다. 하루밤 배양한 다음 새로운 배지로 교환해주고 LPS(1ug/ml)와 추출물을 농도별로 투여하여 24시간 동안 배양하였다. 배양 후, 배지 상층액을 취해 13,000 rpm에서 3분 동안 원심 분리하여 상등액만 모은 후, Griess 시약과 1:1로 반응시키고 570nm에서 흡광도를 측정하였다.In order to measure the anti-inflammatory effect of the flowers, roots, seeds and callus extract of the plant of the present invention, it was evaluated whether the RAW 264.7 cells were treated with LPS, an inflammation-inducing substance, to have an anti-inflammatory effect. Into a 96-well plate to 2 x 10 5 cells per well was incubated for 24 hours at 37 ℃, 5% CO2 incubator. After overnight culture, the cells were replaced with fresh medium, and LPS (1ug / ml) and extracts were administered at different concentrations. After incubation, the culture medium was collected, centrifuged at 13,000 rpm for 3 minutes to collect only the supernatant, reacted with Griess reagent 1: 1, and absorbance was measured at 570 nm.
측정결과, 2%의 LPS 농도에서 각 무궁화 식물의 각 부위별 추출물의 항염 효능을 측정할 수 있었고 (도 1 내지 도 4), 구체적으로 무궁화 씨, 꽃, 캘러스, 뿌리의 추출물은 각 23%, 19%, 16%, 11%의 일산화질소(NO) 생성 억제의 항염 효능을 확인할 수 있었다. 본 발명에 따르는 무궁화 식물 각 부위 추출물 중 무궁화 씨 추출물의 항염 효능이 가장 우수한 것을 확인하였다. As a result, at the LPS concentration of 2%, the anti-inflammatory effect of the extract of each part of the green light plants could be measured (Figs. 1 to 4), and specifically, the extracts of the green light seeds, flowers, callus, and roots were 23%, respectively. The anti-inflammatory effect of inhibition of nitric oxide (NO) production of 19%, 16% and 11% was confirmed. It was confirmed that the anti-inflammatory effect of the Rose of Sharon seed extract of each part of the extract of Rose of Sharon plant according to the present invention is the most excellent.
실험예Experimental Example 2. 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨 그리고 2. the flowers, roots, seeds, and 캘러스Callus 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능 측정 Determination of Collagen Production Proliferation Effect of Extracts
피부 섬유아세포(HDFn)를 48 well 플레이트에 5ㅧ104 cells/well의 농도로 배양 배지 0.3 mL로 접종하여 37℃, 5% CO2의 조건에서 배양하였다. 24시간 이후 무궁화 부위별 추출물을 농도별로 포함한 새로운 배지로 24시간 동안 배양하였다. 24시간 배양 이후 배양액을 모아서 enzymes-linked immunoassay kit (Takara사)를 이용하여 콜라겐 전구체의 C-말단의 양을 측정하였다. 또한, 콜라겐 용액 640 ng/mL을 이용하여 콜라겐 농도 0 ng-640 ng 사이의 standard curve를 얻어 배지에 있는 콜라겐 양을 계산하였다.Skin fibroblasts (HDFn) were inoculated in 0.3 mL of culture medium at a concentration of 5 × 10 4 cells / well in 48 well plates and cultured at 37 ° C. and 5% CO 2 . After 24 hours, the extract of each rose of sharon was incubated for 24 hours with fresh medium containing the concentration. After 24 hours of incubation, the culture solution was collected and the amount of C-terminus of the collagen precursor was measured using an enzymes-linked immunoassay kit (Takara). In addition, using a collagen solution 640 ng / mL to obtain a standard curve between the
계산 결과, 2%의 추출물 농도에서 각 무궁화 식물 기관 부위별 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능을 확인할 수 있었고(각 도 5 내지 도 8), 특히 무궁화 캘러스, 꽃, 씨의 각 추출물은 각 20%, 11%, 5%의 콜라겐 생성 증식 효능을 확인할 수 있었다. 즉, 무궁화 식물 각 부위 추출물 중 무궁화 캘러스 추출물의 콜라겐 생성 증식 효능이 가장 우수한 것을 확인하였다. As a result of the calculation, it was possible to confirm the collagen production and proliferation efficacy of each extract of the plant of the plant of the green plant at the concentration of 2% (Figs. 5 to 8), and in particular, each extract of the green leaf callus, flower, and seed was 20% and 11, respectively. Collagen production proliferation efficacy of 5% and 5% was confirmed. That is, it was confirmed that the most effective collagen production proliferation effect of the green leaf callus extract of each region extract of the green plant.
실험예Experimental Example 3. 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨 그리고 3. the flowers, roots, seeds, and 캘러스Callus 추출물의 항산화 효능 측정 Antioxidant Activity of Extracts
본 발명 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨 그리고 캘러스 추출물의 항산화 활성을 검정하기 위해 DCFH-DA(2'7'-dichloro flurescin0diacetate)를 이용하였다. 이를 위해 피부 섬유아세포(HDFn)를 DMEM(10% 혈청 및 1% 항생제 첨가) 배지에 현탁하여 37℃, 5% CO2 배양기에서 well당 1x105 세포 수가 되도록 24시간 동안 배양하였다. 상기 단계에서 수득한 피부 섬유아세포에 무궁화 식물 각 부위별 추출물을 농도별로 처리하여 37℃, 5% CO2 배양기에서 1시간 배양한 후 산화 스트레스 유발 물질인 H2O2 1mM 및 DCFH-DA 20M을 첨가한 후 excitation은 485nm, emission은 535nm 조건으로 DCFH-DA (2'7'-dichloro flurescin0diacetate) was used to assay the antioxidant activity of the flowers, roots, seeds and callus extract of the plant of the present invention. To this end, skin fibroblasts (HDFn) were suspended in DMEM (10% serum and 1% antibiotics) medium and incubated for 24 hours at 37 ° C., 5% CO 2 incubator at 1 × 10 5 cells per well. A skin fibroblast Hibiscus plants 37 ℃ to handle each part extracts at different concentrations to, 5
spectrofluorophotomer를 이용하여 측정하였다. 시료를 넣지 않고 항산화 활성을 측정한 처리군은 대조군으로 이용하였고 항산화 활성은 하기 수학식1의 방법으로 계산하였다. 모든 실험은 3번 반복하여 실험하였다.Measurement was performed using a spectrofluorophotomer. The treatment group was measured as the control group without the addition of the antioxidant activity was used as a control and the antioxidant activity was calculated by the method of the following equation (1). All experiments were repeated three times.
[수학식 1][Equation 1]
활성산소종 저해율(%)= 대조군 OD-시료처치군 OD / 대조군 OD X 100Reactive Oxygen Species Inhibition Rate (%) = Control Group OD-Sample Treatment Group OD / Control
실험결과, 2%의 추출물 농도에서 각 무궁화 각 부위별 추출물의 항산화 효능을 확인하였고(각 도 9 내지 12), 그 중 무궁화 꽃, 캘러스의 추출물은 각 20%, 15%의 항산화 효능을 확인할 수 있었다. 본 발명에 따르면 무궁화 식물 각 부위별 추출물 중 무궁화 꽃 추출물의 항산화 효능이 가장 우수한 것을 확인하였다. As a result of the experiment, at the concentration of 2% extract, the antioxidant effects of the extracts of each part of the rose of sharon were confirmed (Figs. 9 to 12). Among them, the extracts of the rose of sharon and the callus were 20% and 15%, respectively. there was. According to the present invention, it was confirmed that the antioxidant effect of the rose of sharon flower extract was the best among the extracts of each part of the rose of sharon plant.
실험예 4. 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 씨 그리고 캘러스 추출물의 항알러지 효능 측정Experimental Example 4. Determination of anti-allergic efficacy of flowers, roots, seeds and callus extracts of Rose of Sharon
본 발명 무궁화 식물의 각 부위, 꽃, 뿌리, 씨 그리고 캘러스 추출물의 항알러지 효능을 검정하기 위해 RBL-2H3 cell을 10% FBS를 함유한 DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’s medium)에 현탁시킨 후 24-well plate에 각 well당 2 x 105 cell이 들어가도록 처리하였다. 각 well당 100 ng/mL의 mouse monoclonal IgE로 감작시킨 후 5% CO2 incubator에서 24시간 동안 배양하였다. 세포를 well당 Tyrode buffer 500㎕를 사용하여 헹구어내고 농도별로 혼합 추출물을 처리한 후 37℃, 5% CO2 incubator에서 15분간 배양하고 1시간 동안 DNP-BSA 100ng/ml을 처리하였다. 상층액에 substrate (1mM p-nitrophenyl-N-acetyl-ㅯ-D-glucosaminide) 50㎕를 처리한 후 37℃, 5% CO2 incubator에서 1시간 동안 배양하고 ELISA reader를 사용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다.24-well plate after suspending RBL-2H3 cells in DMEM (Dulbecco's modified Eagle's medium) containing 10% FBS to assay the anti-allergic effect of each part, flower, root, seed and callus extract of the plant Each well was treated to enter 2 x 10 5 cells. Each well was sensitized with 100 ng / mL mouse monoclonal IgE and incubated in a 5% CO 2 incubator for 24 hours. The cells were rinsed using 500 μl of Tyrode buffer per well and treated with mixed extracts according to concentrations. The cells were then incubated in 37 ° C., 5% CO 2 incubator for 15 minutes, and treated with DNP-BSA 100ng / ml for 1 hour. 50 μl of substrate (1 mM p-nitrophenyl-N-acetyl- ㅯ -D-glucosaminide) was treated in the supernatant, and then incubated for 1 hour at 37 ° C. in a 5
측정결과, 2%의 추출물 농도에서 각 무궁화 부위별 추출물의 항알러지 효능을 확인할 수 있었고(각 도 13 내지 16), 그 중 무궁화 뿌리의 추출물은 27%의 항알러지 효과를 보여 항알러지 효능이 가장 우수한 것을 확인하였다. As a result, the anti-allergic effect of the extract of each rose of sharon was confirmed at 2% of the extract concentration (Figs. 13 to 16). Among them, the extract of the root of rose root showed 27% of the anti-allergic effect, and the anti-allergic effect was the most. It confirmed that it was excellent.
실험예 5. 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 각 동량비 혼합 추출물(complex)의 항염, 콜라겐 생성 증식, 항산화 및 항알러지 효능의 측정Experimental Example 5. Determination of anti-inflammatory, collagen-producing proliferation, antioxidant and anti-allergic efficacy of each equivalent ratio complex of flowers, roots, callus and seeds of Rose of Sharon plant
상기 실시예 1에서 수득한 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물을 실험예 1 내지 4에 기재된 항염, 콜라겐 증식, 항산화 및 항알러지 효능 측정방법을 이용하여 각 기능을 평가하였다. 실험결과, 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물은 대조군에 비하여 25%의 항산화 효능(도 17), 20%의 항알러지 효능(도 18), 16%의 콜라겐 증식 효능(도 19), 21%의 항염 효능(도 20)을 각각 확인하였다. The mixed extracts of the flowers, roots, callus and seeds of rose of sharon obtained in Example 1 were evaluated for each function using the anti-inflammatory, collagen proliferation, antioxidant and anti-allergic efficacy measurement methods described in Experimental Examples 1 to 4. Experimental results, the mixed extract of the flowers, roots, callus and seeds of Rose of Sharon has 25% antioxidant activity (Fig. 17), 20% anti-allergic effect (Fig. 18), 16% collagen growth efficiency (Fig. 19) compared to the control group , Anti-inflammatory efficacy of 21% (Fig. 20) was confirmed, respectively.
이하, 본 발명을 사용하기에 바람직하고 다양한 화장품 제형을 개시하지만 본 발명의 권리범위는 개시된 제형에 제한되지 않음은 물론이다.Hereinafter, various cosmetic formulations are preferred for use in the present invention, but the scope of the present invention is not limited to the disclosed formulations.
제조예1. 화장수Preparation Example 1. toilet water
본 발명 상기 실시예1에서 얻은 본 발명 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물(이하, 혼합 추출물)이 함유된 화장수를 하기 표1과 같이 제조하였다.The present invention, a lotion containing a mixed extract (hereinafter, a mixed extract) of the flowers, roots, callus, and seeds of the rose of sharon obtained in Example 1 was prepared as shown in Table 1 below.
제조예2. 로션Preparation Example 2. Lotion
본 발명 상기 실시예1에서 얻은 본 발명 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물(이하, 혼합 추출물)이 함유된 로션을 하기 표2와 같이 제조하였다.The present invention obtained a lotion containing a mixed extract (hereinafter, a mixed extract) of the flowers, roots, callus and seeds of the present rose of sharon obtained in Example 1 was prepared as shown in Table 2.
제조예3. 크림Preparation Example 3. cream
본 발명 상기 실시예1에서 얻은 본 발명 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물(이하, 혼합 추출물)이 함유된 크림을 하기 표3과 같이 제조하였다.The present invention, a cream containing a mixed extract of the flower, root, callus, and seed of the present invention obtained from Example 1 (hereinafter, referred to as a mixed extract) was prepared as shown in Table 3 below.
제조예4. 에센스 제조Preparation Example 4. Essence manufacturer
본 발명 상기 실시예1에서 얻은 본 발명 무궁화의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 혼합 추출물(이하, 혼합 추출물)이 함유된 에센스를 하기 표4와 같이 제조하였다.The essence containing the mixed extract of the flower, root, callus and seed of the present invention obtained in Example 1 (hereinafter, mixed extract) was prepared as shown in Table 4 below.
이상의 설명으로부터, 본 출원이 속하는 기술분야의 당업자는 본 출원이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 출원의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 출원의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.From the above description, those skilled in the art will appreciate that the present application can be implemented in other specific forms without changing the technical spirit or essential features. In this regard, it should be understood that the embodiments described above are exemplary in all respects and not limiting. The scope of the present application should be construed that all changes or modifications derived from the meaning and scope of the following claims and equivalent concepts rather than the detailed description are included in the scope of the present application.
본 발명은 무궁화 식물의 꽃, 뿌리, 캘러스 및 씨의 각 추출물의 혼합 추출물을 유효성분으로 하는 항노화 또는 항알러지용 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로 특히 크림이나 로션, 연고 등 다양한 제형의 화장품을 사용할 수 있는 뛰어난 효과가 있어 천연 화장품 산업상 매우 유용한 발명인 것이다.The present invention relates to an anti-aging or anti-allergic cosmetic composition comprising a mixed extract of each extract of the flowers, roots, callus and seeds of the rose of sharon as an active ingredient and a method for producing the same, in particular cosmetics of various formulations such as creams, lotions, ointments There is an excellent effect that can be used is a very useful invention in the natural cosmetics industry.
Claims (6)
상기 단계에서 얻은 각 부위별 추출물과 무궁화 캘러스 추출물을 각 동량비(w/w)로 혼합하여 무궁화의 꽃, 뿌리, 씨 및 캘러스의 혼합 추출물(complex)을 수득하는 단계를 포함하여 제조된 무궁화 혼합 추출물
Extracting the flowers, roots, and seeds of each part of rose of sharon from water, ethanol, methanol, butylene glycol, propanediol, or a mixed solvent thereof at 60 ° C. to obtain an extract for each site;
The green light mixture prepared by mixing each part of the extract obtained in the step and the green light callus extract in each equivalent ratio (w / w) to obtain a mixed extract (complex) of the flowers, roots, seeds and callus of the green light extract
A cosmetic composition for improving wrinkles, comprising the mixed extract of claim 1 as an active ingredient
A cosmetic composition for improving allergy containing the extract of Mugunghwa as an active ingredient
The cosmetic composition for improving wrinkles and allergy according to claim 4 or 5, wherein the cosmetic composition is any one selected from a lotion, lotion, cream and essence.
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