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KR101426275B1 - 지방합성 억제 및 지방산화 촉진에 의한 체지방 감소 효능을 갖는 5종의 유산균 복합균주를 유효성분으로 함유하는 조성물 - Google Patents

지방합성 억제 및 지방산화 촉진에 의한 체지방 감소 효능을 갖는 5종의 유산균 복합균주를 유효성분으로 함유하는 조성물 Download PDF

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KR101426275B1
KR101426275B1 KR1020140040710A KR20140040710A KR101426275B1 KR 101426275 B1 KR101426275 B1 KR 101426275B1 KR 1020140040710 A KR1020140040710 A KR 1020140040710A KR 20140040710 A KR20140040710 A KR 20140040710A KR 101426275 B1 KR101426275 B1 KR 101426275B1
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KR
South Korea
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fat
lactobacillus
kctc
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irt5
Prior art date
Application number
KR1020140040710A
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Inventor
안영태
김성환
최일동
임신혁
심재헌
Original Assignee
주식회사한국야쿠르트
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
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Abstract

본 발명은 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308, 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008, 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208로 이루어진 지방합성 억제 및 지방산화 촉진에 의한 체지방 감소 효능을 갖는 5종의 유산균 복합균주를 유효성분으로 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 본 발명에 따른 5종의 유산균 복합균주는 3T3-L1 지방세포 분화 억제에 의해 지방세포내 지방축적을 억제하고, 지방합성에 관련된 유전자 발현 억제 및 지방산화에 관련된 유전자 발현 촉진에 의해 체내 지방축적을 억제함으로써 체지방 감소 효과가 매우 뛰어나므로 5종의 유산균 복합균주를 이용한 지방 대사에 영향을 미치는 기능성 식품, 약학적 조성물 등으로 이용될 수 있다.

Description

지방합성 억제 및 지방산화 촉진에 의한 체지방 감소 효능을 갖는 5종의 유산균 복합균주를 유효성분으로 함유하는 조성물{The composition containing combination of 5 probiotics which have efficacy preventing fatty acid synthesis and promoting fatty acid oxidation as an effective factor}
본 발명은 체지방 감소 효능을 갖는 5종의 유산균 복합균주를 유효성분으로 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308, 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008, 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208로 이루어진 지방합성 억제 및 지방산화 촉진에 의한 체지방 감소 효능을 갖는 5종의 유산균 복합균주를 유효성분으로 함유하는 조성물에 관한 것이다.
비만의 치료방법은 크게 식이-운동요법, 수술 요법 및 약물 요법이 있다. 식이-운동 요법은 저칼로리-저지방 섭취와 산소를 소비하는 육체의 활동을 통한 치료 방법인데, 이는 인내심을 가지고 반복적· 지속적으로 수행되어야 하기 때문에 대중적인 효과를 보기는 어려운 것으로 인식되고 있다. 수술요법은 외과적 수술을 통해 체지방을 물리적으로 제거하는 방법으로서 단기간에 효과를 볼 수 있는 장점이 있지만, 수술을 해야 하는 점, 효과의 지속성이 없다는 점, 비용이 많이 든다는 점 등 때문에 제한적으로 활용되고 있다. 약물 요법은 식욕 감소를 유발하거나 지방 흡수를 억제하는 약제들을 이용해서 비만을 치료 또는 예방하고자 하는 방법이다. 현재까지 개발된 비만 예방 및 치료를 위한 약제는 다양한 생리학적 메카니즘을 가지고 있다.
지방의 흡수 억제 약물로서는 췌장 지방 분해 효소 방해제(Orlistat)가 알려져 있는데, 췌장 지방분해 효소의 작용을 억제함으로 지방의 흡수를 감소시키는 약제이나 지용성 비타민의 흡수를 방해하며, 유방암 유발의 가능성이 있다.
식욕을 저해하는 약제는 주로 뇌에 존재하는 신경전달물질(catecholamines)에 작용하여 식욕을 저하시킨다. 그러나 덱스펜플루르아민, 펜플루르아민은 신경독성, 판막성 심장질환의 부작용이 있고, 시부트라민은 심박수와 혈압을 상승시키는 부작용이 있다.
체내 섭취열량의 증가와 소모열량 감소에 의해 생기는 대사의 불균형으로 과도한 지방 축적이 유발되는데, 이는 지방세포의 크기 및 수의 증가에 의해 나타난다. 3T3-L1 지방세포는 마우스 배아 섬유아세포(mouse embryonic fibroblast)로서 지방 조직의 생물학적 연구에 많이 사용되는 세포 주(cell line)이다. 3T3-L1 마우스 배아 섬유아세포내 지방합성 신호 경로가 활성화되면서 세포 내 지방량이 증가하고 세포의 모양이 원형으로 변한다. 이처럼 세포 내 신호 경로와 세포의 모양이 변하는 과정을 분화(differentiation)라고 하고 분화가 진행 중인 3T3-L1 세포를 '성숙 중인 3T3-L1 지방전구세포(maturing 3T3-L1 pre-adipocyte)', 분화가 완료된 3T3-L1 세포를 '성숙된 3T3-L1 지방세포(mature 3T3-L1 adipocyte)'라고 한다. 이러한 3T3-L1 세포의 지방분화를 억제하는 물질을 탐색하는 연구가 각국에서 진행되고 있다. 예를 들어, 녹차 폴리페놀 성분인 epigallocatechin gallate(Obesity res. 2005;13:982-90), 적포도주 성분인 resveratrol(Phytother Res. 2008;22:1367-71), 마늘 성분인 ajoene(Phytother Res. 2009;23:513-8) 등이 3T3-L1 세포의 지방분화 억제 효능을 가지고 있다는 연구결과가 보고된 바 있다. 3T3-L1 세포의 지방분화를 억제 즉, 지방세포내 지방합성을 억제하는 물질은 항비만 효능을 가진다고 볼 수 있기 때문에 식품, 의약 등의 분야에서 활용도가 매우 크다.
체내 지방축적을 감소시키는 기전으로 크게 3가지가 있다. 첫 번째는 식이로부터 섭취되는 지방의 흡수를 억제함으로써 체지방의 축적을 억제하는 기전이다. 이러한 지방 흡수 억제는 소장에서 중성지방을 분해하는 지방분해효소의 작용을 저해하든지, 섭취한 지방과 흡착하여 변으로의 지방 배설을 증진시키는 작용을 통해 가능하다. 둘째는 식이로부터 섭취된 지방이나 체내 축적된 체지방의 산화를 촉진시킴으로서 체지방을 조절하는 기전이다. 지방산 산화에 관여하는 효소의 활성을 증가시켜 지방산이 미토콘드리아로 이동하는 것을 증진시키고, 따라서 미토콘드리아 내에서의 β-산화를 촉진시킴으로써 궁극적으로는 지방으로부터의 에너지 생산을 증가시키는 것이다. 세 번째는 지방합성 관련 효소인 Fatty acid synthase 및 Citrate lyase 등의 활성을 저하시킴으로써 acetyl CoA로부터의 지방산 합성을 저해시키는 것이다.
특히, 체내 에너지 소비에 있어서 축적된 지방을 직접 분해하거나 지방을 산화해서 에너지와 열을 생성하는 연소과정이 중요한데, 여기에는 많은 효소 및 유전자들이 관여하고 있다. 호르몬 민감성 지방분해효소(hormone sensitive lipase)는 지방조직에서 중성지방을 분해하는 단계에서 가장 중요한 효소이며, 지방산이 분해되어 에너지로 쓰이기 위해서는 에너지 생성 장소인 미토콘드리아로 이동해야 한다. 세포질에서 활성화된 지방산(acyl CoA)이 미토콘드리아 내부로 이동하기 위해서는 미토콘드리아의 막(외막과 내막)을 통과해야 하는데, 이 과정을 촉매하는 효소가 Carnitine palmitoyltransferase(CPT)로 CPTⅠ와 CPTⅡ가 있다. 그리고 Acyl-CoA oxidase는 퍼옥시좀(peroxisome)에 위치한 효소로서, acyl CoA와 O2로부터 trans-2,3-dehydroacyl-CoA와 H2O2를 생산하는데, 지방산 β-산화의 가장 첫 단계에서 작용하는 속도제한효소(rate-limiting enzyme)이다. 미토콘드리아의 탈공역단백질(uncoupling protein, UCP)은 갈색지방, 백색지방, 그리고 근육세포에서 발견된다. UCP들은 해당세포 내 미토콘드리아에서 산화적 인산화 과정을 탈공역(uncoupling)함으로서 ATP 생성을 감소시키고 열을 발생시킨다. 따라서 UCP 발현 정도가 에너지 소비량에 영향을 미쳐 비만 발생과 연관이 있는 것으로 보고되고 있으며, 실제로 비만한 사람의 경우 UCP 발현이 적은 경향을 보인다는 연구 결과들이 있다.
한편, 최근에 안전한 미생물로 여겨져 온 유산균을 이용하여 비만을 예방 또는 치료하고자 하는 노력 역시 많이 이루어지고 있다. 유산균은 장내 정상균총의 유지, 장내 균총의 개선, 항당뇨 및 항고지혈증 효과, 발암 억제, 대장염 억제, 그리고 숙주의 면역체계의 비특이적 활성 등의 효과를 나타낸다고 보고되고 있다.
한편, 대한민국 특허등록 제0913405호(발명의 명칭: Th2-매개 면역질환의 예방 또는 치료용 조성물) 및 제0913406호(발명의 명칭: Th1-매개 면역질환의 예방 또는 치료용 조성물)에 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum), 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 스트렙토코커스 써모필러스 (Streptococcus thermophilus), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei)의 복합 프로바이오틱스가 Th1-매개 또는 Th2-매개 면역질환의 예방 또는 치료 효능이 있음이 개시되어 있을 뿐으로 본 발명자들은 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308, 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008, 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208로 이루어진 5종의 유산균 복합균주가 3T3-L1 지방세포 내 지방축적을 억제하고 궁극적으로 지방합성에 관련된 유전자 발현 억제 및 지방산화에 관련된 유전자 발현 촉진에 의해 체내 지방축적을 억제함으로써 체지방 감소 효능을 갖는다는 사실을 발견함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
대한민국 특허등록 제0913405호(발명의 명칭: Th2-매개 면역질환의 예방 또는 치료용 조성물, 공고일: 2009년 08월 21일) 대한민국 특허등록 제0913406호(발명의 명칭: Th1-매개 면역질환의 예방 또는 치료용 조성물, 공고일: 2009년 08월 21일)
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 지방합성 억제 및 지방산화 촉진에 의한 체지방 감소 효능을 갖는 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308, 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008, 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208로 이루어진 5종의 유산균 복합균주를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물, 발효유, 음료, 건강기능식품을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 지방합성 억제 및 지방산화 촉진에 의한 체지방 감소 효능을 갖는 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308, 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008, 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208로 이루어진 5종의 유산균 복합균주를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물, 발효유, 음료, 건강기능식품을 제공하는 것을 특징으로 한다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명의 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308(기탁번호:KCTC 12563BP) 및 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038(기탁번호:KCTC 12560BP)은 성인 또는 유아 분변으로부터 분리 및 동정된 신규한 균주로서 생명공학연구원 유전자은행에 각각 단일균주로 기탁하였다.
또한, 본 발명의 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008(기탁번호:KCTC 12564BP)은 유제품에서, 본 발명의 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508(기탁번호:KCTC 12562BP)은 성인 또는 유아 분변, 모유에서 분리 및 동정된 신규한 균주로서 생명공학연구원 유전자은행에 각각 단일균주로 기탁하였다.
또한, 본 발명의 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208(기탁번호:KCTC 12561BP)은 성인 또는 유아 분변, 유제품, 과실, 채소에서 분리 및 동정된 신규한 균주로서 생명공학연구원 유전자은행에 단일균주로 기탁하였다.
또한, 본 발명의 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308, 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008, 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208로 이루어진 5종의 유산균 복합균주를 'IRT5'로 명명하기로 한다.
한편, 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308, 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008, 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208로 이루어진 5종의 유산균 복합균주(IRT5)를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 체지방 감소를 통한 비만 또는 비만 관련 질환 치료 또는 예방용 약학적 조성물은 단독 또는 약제학적으로 사용되는 부형제들과 함께 약제학적으로 통상으로 사용되는 방법에 따라 정제, 캡슐제 등과 같은 제재형태로 제재화하여 사용될 수 있다.
사람의 경우, 통상적인 1일 투여량은 1~30㎎/㎏ 체중의 범위일 수 있고, 1회 또는 수회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 실제 투여량은 투여경로, 환자의 연령, 성별, 체중, 건강상태 및 질환의 중증도 등의 여러 관련 인자에 비추어 결정되어야 한다.
물론, 본 발명의 상기 약학적 조성물은 독성 및 부작용은 거의 없으므로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있는 약제이다.
또한, 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308, 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008, 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208로 이루어진 5종의 유산균 복합균주(IRT5)를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 체지방 감소를 통한 비만 개선 또는 예방용 식품 조성물인 발효유는 상기 IRT5, 유산균 배양액 및 혼합과즙시럽을 일정비율로 조합하여 150bar에서 균질한 후 10℃ 이하로 냉각한 후 용기에 포장하여 제조한다.
또한, 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308, 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008, 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208로 이루어진 5종의 유산균 복합균주(IRT5)를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 체지방 감소를 통한 비만 개선 또는 예방용 식품 조성물인 기능성 음료는 상기 IRT5, 혼합과즙시럽 및 물을 일정한 비율로 조합하여 150bar에서 균질한 후 10℃ 이하로 냉각한 후 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 제조한다.
또한, 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308, 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008, 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208로 이루어진 5종의 유산균 복합균주(IRT5)를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 체지방 감소를 통한 비만 개선 또는 예방용 식품 조성물인 건강기능식품은 상기 IRT5를 포함하는 것 이외에 영양보조성분으로서 비타민 B1, B2, B5, B6, E 및 초산에스테르, 니코틴산 아미드, 올리고당 등이 첨가될 수 있으며 여타의 식품 첨가물이 첨가되어도 무방하다.
이상에서와 같이, 본 발명은 체지방 감소 효능을 갖는 IRT5를 유효성분으로 함유하는 약학 조성물, 식품조성물, 발효유, 음료, 건강기능식품 등 지방 대사에 영향을 미치는 기능성 식품 및 약학 조성물 등으로 이용될 수 있다.
도 1은 IRT5에 의한 3T3-L1 세포내 지방 축적 억제 효과를 AdipoRed assay 방법으로 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 고지방식이에 의해 비만이 유도된 실험동물에서 IRT5 투여에 의한 총지방량 증가 억제를 나타낸 그래프이다.
도 3은 고지방식이에 의해 비만이 유도된 실험동물에서 IRT5 투여에 의한 부고환지방량 증가 억제를 나타낸 그래프이다.
도 4는 고지방식이에 의해 비만이 유도된 실험동물에서 IRT5 투여에 의한 피하지방량 증가 억제를 나타낸 그래프이다.
도 5는 고지방식이에 의해 비만이 유도된 실험동물에서 IRT5 투여에 의한 장간막지방량 증가 억제를 나타낸 그래프이다.
도 6은 고지방식이에 의해 비만이 유도된 실험동물에서 IRT5 투여에 의한 혈중 렙틴 증가 억제를 나타낸 그래프이다.
도 7은 고지방식이에 의해 비만이 유도된 실험동물에서 IRT5 투여에 의한 간조직내 지방합성 및 지방산화 관련 유전자의 변화를 나타낸 그래프이다.
도 8은 고지방식이에 의해 비만이 유도된 실험동물에서 IRT5 투여에 의한 부고환지방 조직내 지방합성 및 지방산화 관련 유전자의 변화를 나타낸 그래프이다.
도 9는 고지방식이에 의해 비만이 유도된 실험동물에서 IRT5 유산균 투여에 의한 견갑골갈색지방 조직내 지방산화 및 열생성 관련 유전자의 변화를 나타낸 그래프이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 다음의 실시예는 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니며, 본 발명의 기술적 사상의 범위 내에서 당업자에 의한 통상적인 변화가 가능하다.
<실시예 1>
IRT5의 분리 및 동정
1-1. 비피도박테리움 비피덤( Bifidobacterium bifidum ) HY8308의 분리 및 동정
본 발명에 따른 신균주를 분리하기 위하여 성인 또는 유아의 분변 0.1g을 혐기 희석액에 십진 희석하여 1.5% 한천(agar)이 포함된 BL 고체배지에 도말하여 37℃의 혐기조건에서 48시간 배양한 후 콜로니(colony)를 백금이(loop)로 취하여 새로운 BL 고체배지에 접종하고 순수 분리하였다. 순수 분리된 콜로니를 BL 액체배지에 접종하여 37℃에서 20시간 배양하였다. 이렇게 분리한 신균주를 Crystal violet 염색을 한 후 현미경을 통해 관찰하였고, DNA를 분리하여 Bifidobacteria 16S rRNA 분석(Im3, Im26)을 통한 Blast search한 결과(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PAGE_TYPE=BlastSearch&BLAST_ SPEC=MicrobialGenomes)를 하기의 표 1에 나타내었다.
Figure 112014032724816-pat00001
상기의 표 1에서 확인할 수 있는 바와 같이, 본 발명의 신균주의 16S rRNA 균주 동정결과 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) LCR9와 가장 높은 상동성을 나타내어 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum)과 가장 높은 분자계통학적 유연관계를 보여 본 발명자들은 이를 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308로 명명하고, 2014년 3월 4일자로 한국생명공연구원 유전자은행(기탁번호: KCTC 12563BP)에 기탁하였다.
본 발명에 따른 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308의 특성은 다음과 같다.
1)균의 형태
비엘(BL) 한천평판배지에서 37℃, 2일간 혐기 조건에서 배양했을 때 균의 특성
①세포의 형태: 부정형의 간상형 균
②운동성: 없음
③포자형성능: 없음
④그람(Gram) 염색: 양성
2)생리적 성질
①생육온도: 생장가능 생육온도 20~45℃
최적 생장온도 37℃
②생육 pH: 생장가능 생육 pH 5.0~8.0
최적 pH 6.0~7.0
③산소에 대한 영향: 혐기성
3)카탈라제: -
4)가스형성여부: -
5)15℃에서 생육: -
6)45℃에서 생육: +
7)인돌생산: -
8)젖산생산: +
9)Biomerieux 사의 혐기성 세균 동정용 API 20 A kit를 이용한 실험
Figure 112014032724816-pat00002

1-2. 락토바실러스 애시도필러스( Lactobacillus acidophilus ) HY7038의 분리 및 동정
본 발명에 따른 신균주를 분리하기 위하여 성인 또는 유아의 분변 0.1g을 호기 희석액에 십진 희석하여 1.5% 한천(agar)이 포함된 엠알에스(MRS) 고체배지에 도말하여 37℃에서 48시간 배양한 후 콜로니(colony)를 백금이(loop)로 취하여 새로운 MRS 고체배지에 접종하고 순수 분리하였다. 순수 분리된 콜로니를 MRS 액체배지에 접종하여 37℃에서 20시간 배양한 후 Crystal violet 염색을 한 후 현미경을 통해 관찰하였고, 이렇게 분리한 신균주를 동정하고자 Biomerieux 사의 API 50 CH kit를 이용하여 당 발효 실험을 하였다.
본 발명의 신균주의 당발효 실험 결과 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus)의 당발효 실험과 일치하는 것으로 확인되어 본 발명자들은 이를 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038로 명명하고, 2014년 3월 4일자로 한국생명공연구원 유전자은행(기탁번호: KCTC 12560BP)에 기탁하였다.
본 발명에 따른 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038의 특성은 다음과 같다.
1)균의 형태
엠알에스(MRS) 한천평판배지에서 37℃, 2일간 배양했을 때 균의 특성
①세포의 형태: 간균
②운동성: 없음
③포자형성능: 없음
④그람(Gram) 염색: 양성
2)균락의 형태
엠알에스(MRS) 한천평판배지에서 37℃, 2일간 배양했을 때 균락의 형태
①형상: 원형
②융기: 볼록
③표면: 매끄러움(Smooth)
3)생리적 성질
①생육온도: 생장가능 생육온도 15~45℃
최적 생장온도 37℃
②생육 pH: 생장가능 생육 pH 4.0~7.5
최적 pH 6.0~6.5
③산소에 대한 영향: 통성혐기성
4)카탈라제: -
5)가스형성여부: -
6)15℃에서 생육: -
7)45℃에서 생육: +
8)인돌생산: -
9)젖산생산: +
10) Biomerieux 사의 유산균 동정용 API 50 CH kit를 이용한 실험
Figure 112014032724816-pat00003

1-3. 스트렙토코커스 써모필러스 ( Streptococcus thermophilus ) HY9008 의 분리 및 동정
본 발명에 따른 균주를 분리하기 위하여 유제품을 호기 희석액에 십진 희석하여 1.5% 한천(agar)이 포함된 M17 고체배지에 도말하여 42℃에서 24시간 배양한 후 콜로니(colony)를 백금이(loop)로 취하여 새로운 M17 고체배지에 접종하고 순수 분리하였다. 순수 분리된 콜로니를 M17 액체배지에 접종하여 42℃에서 16시간 배양한 후 Crystal violet 염색을 한 후 현미경을 통해 관찰하였고, 균주의 DNA를 분리하여 16S rRNA 분석(27F, 1492R)을 통한 Blast search한 결과(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PAGE_TYPE= Blast
Search&BLAST_SPEC=MicrobialGenomes)를 하기의 표 2에 나타내었다.
Figure 112014032724816-pat00004
상기의 표 2에서 확인할 수 있는 바와 같이, 본 발명의 신균주의 16S rRNA 균주 동정결과 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) M4와 가장 높은 상동성을 나타내어 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus)와 가장 높은 분자계통학적 유연관계를 보여 본 발명자들은 이를 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008로 명명하고, 2014년 3월 4일자로 한국생명공연구원 유전자은행(기탁번호: KCTC 12564BP)에 기탁하였다.
본 발명에 따른 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008의 특성은 다음과 같다.
1)균의 형태
엠십칠(M17) 한천평판배지에서 37℃, 2일간 배양했을 때 균의 특성
①세포의 형태: 구균
②운동성: 없음
③포자형성능: 없음
④그람(Gram) 염색: 양성
2)균락의 형태
엠십칠(M17) 한천평판배지에서 37℃, 2일간 배양했을 때 균락의 형태
①형상: 원형
②융기: 볼록
③표면: 거침(Rough)
3)생리적 성질
①생육온도: 생장가능 생육온도 25~45℃
최적 생장온도 37~40℃
②생육 pH: 생장가능 생육 pH 4.0~7.5
최적 pH 6.0~6.5
③산소에 대한 영향: 통성혐기성
4)카탈라제: -
5)가스형성여부: -
6)15℃에서 생육: -
7)45℃에서 생육: +
8)인돌생산: -
9)젖산생산: +
10)Biomerieux 사의 연쇄상구균 동정용 API 20 Step kit를 이용한 실험
Figure 112014032724816-pat00005

1-4. 락토바실러스 루테리( Lactobacillus reuteri ) HY7508의 분리 및 동정
본 발명에 따른 신균주를 분리하기 위하여 성인 또는 유아 분변, 모유를 1.5% 한천(agar)이 포함된 엠알에스(MRS) 고체배지에 도말하고 37℃에서 48시간 동안 배양한 후 콜로니(colony)를 백금이(loop)로 취하여 새로운 MRS 액체배지에 접종하고 37℃에서 20시간 배양한 후 Crystal violet 염색을 한 후 현미경을 통해 관찰하였고, 균주의 DNA를 분리하여 16S rRNA 분석(27F, 1492R)을 통한 Blast search한 결과(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PAGE_TYPE=BlastSearch &BLAST_SPEC=MicrobialGenomes)를 하기의 표 3에 나타내었다.
Figure 112014032724816-pat00006
상기의 표 3에서 확인할 수 있는 바와 같이, 본 발명의 신균주의 16S rRNA 균주 동정결과 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) KLDS와 가장 높은 상동성을 나타내어 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri)와 가장 높은 분자계통학적 유연관계를 보여 본 발명자들은 이를 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508로 명명하고, 2014년 3월 4일자로 한국생명공연구원 유전자은행(기탁번호: KCTC 12562BP)에 기탁하였다.
본 발명에 따른 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508의 특성은 다음과 같다.
1)균의 형태
엠알에스(MRS) 한천평판배지에서 37℃, 2일간 배양했을 때 균의 특성
①세포의 형태: 간균
②운동성: 없음
③포자형성능: 없음
④그람(Gram) 염색: 양성
2)균락의 형태
엠알에스(MRS) 한천평판배지에서 37℃, 2일간 배양했을 때 균락의 형태
①형상: 원형
②융기: 볼록
③표면: 매끄러움(Smooth)
3)생리적 성질
①생육온도: 생장가능 생육온도 20~45℃
최적 생장온도 37℃
②생육 pH: 생장가능 생육 pH 4.0~7.5
최적 pH 6.0~6.5
③산소에 대한 영향: 통성혐기성
4)카탈라제: -
5)가스형성여부: -
6)15℃에서 생육: -
7)45℃에서 생육: +
8)인돌생산: -
9)젖산생산: +
10) Biomerieux 사의 유산균 동정용 API 50 CH kit를 이용한 실험
Figure 112014032724816-pat00007

1-5. 락토바실러스 카제이( Lactobacillus casei ) HY7208의 분리 및 동정
본 발명에 따른 신균주를 분리하기 위하여 성인 또는 유아 분변, 유제품, 과실 채소를 호기 희석액에 십진 희석하여 1.5% 한천(agar)이 포함된 엠알에스(MRS) 고체배지에 도말하여 37℃에서 48시간 배양한 후 콜로니(colony)를 백금이(loop)로 취하여 새로운 MRS 고체배지에 접종하고 순수 분리하였다. 순수 분리된 콜로니를 MRS 액체배지에 접종하여 37℃에서 20시간 배양한 후 Crystal violet 염색을 한 후 현미경을 관찰하였고, 균주의 DNA를 분리하여 16S rRNA 분석(27F, 1492R)을 통한 Blast search한 결과(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PAGE_TYPE=BlastSearch &BLAST_SPEC=MicrobialGenomes)를 하기의 표 4에 나타내었다.
Figure 112014032724816-pat00008
상기의 표 4에서 확인할 수 있는 바와 같이, 본 발명의 신균주의 16S rRNA 균주 동정결과 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) LRSL2와 가장 높은 상동성을 나타내어 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei)와 가장 높은 분자계통학적 유연관계를 보여 본 발명자들은 이를 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208로 명명하고, 2014년 3월 4일자로 한국생명공연구원 유전자은행(기탁번호: KCTC 12561BP)에 기탁하였다.
본 발명에 따른 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208의 특성은 다음과 같다.
1)균의 형태
엠알에스(MRS) 한천평판배지에서 37℃, 2일간 배양했을 때 균의 특성
①세포의 형태: 간균
②운동성: 없음
③포자형성능: 없음
④그람(Gram) 염색: 양성
2)균락의 형태
엠알에스(MRS) 한천평판배지에서 37℃, 2일간 배양했을 때 균락의 형태
①형상: 원형
②융기: 볼록
③표면: 매끄러움(Smooth)
3)생리적 성질
①생육온도: 생장가능 생육온도 15~40℃
최적 생장온도 37℃
②생육 pH: 생장가능 생육 pH 4.0~7.5
최적 pH 6.0~6.5
③산소에 대한 영향: 통성혐기성
4)카탈라제: -
5)가스형성여부: -
6)15℃에서 생육: +
7)45℃에서 생육: -
8)인돌생산: -
9)젖산생산: +
10) Biomerieux 사의 유산균 동정용 API 50 CH kit를 이용한 실험
Figure 112014032724816-pat00009

<실시예 2>
IRT5를 포함한 동결건조 분말제조
2-1. 비피도박테리움 비피덤 ( Bifidobacterium bifidum ) HY8308 을 포함한 동결건조 분말
본 발명의 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308 1 X 109cfu/㎖의 균수를 BL 액체배지에 0.1% 접종하고, 배양기에서 혐기조건 하에서 37℃에서 20시간 동안 정치배양(batch culture)하였다. 이것을 4000rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 제거하고, 인산완충식염수(phosphate buffered saline; PBS)로 균체를 세척한 후 다시 4000rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 제거하였다. 수거한 균체는 보존제인 탈지분유 분말과 1:1의 중량비로 섞어 동결건조하여 분말을 제조하였다.
2-2. 락토바실러스 애시도필러스( Lactobacillus acidophilus ) HY7038을 포함한 동결건조 분말
본 발명의 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038 1 X 109cfu/㎖의 균수를 MRS 액체배지(Difco)에 0.1% 접종하고 배양기에서 37℃에서 20시간 동안 정치배양(batch culture)하였다. 이것을 4000rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 제거하고, 인산완충식염수(phosphate buffered saline; PBS)로 균체를 세척한 후 다시 4000rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 제거하였다. 수거한 균체는 보존제인 탈지분유 분말과 1:1의 중량비로 섞어 동결건조하여 분말을 제조하였다.
2-3. 스트렙토코커스 써모필러스( Streptococcus thermophilus ) HY9008을 포함한 동결건조 분말
본 발명의 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008 1 X 109cfu/㎖의 균수를 M17 액체배지(Difco)에 0.1% 접종하고 배양기에서 42℃에서 16시간 동안 정치배양(batch culture)하였다. 이것을 4000rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 제거하고, 인산완충식염수(phosphate buffered saline; PBS)로 균체를 세척한 후 다시 4000rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 제거하였다. 수거한 균체는 보존제인 탈지분유 분말과 1:1의 중량비로 섞어 동결건조하여 분말을 제조하였다.
2-4. 락토바실러스 루테리 ( Lactobacillus reuteri ) HY7508 을 포함한 동결건조 분말
본 발명의 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508 1 X 109cfu/㎖의 균수를 MRS 액체배지(Difco)에 0.1% 접종하고 배양기에서 37℃에서 20시간 동안 정치배양(batch culture)하였다. 이것을 4000rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 제거하고, 인산완충식염수(phosphate buffered saline; PBS)로 균체를 세척한 후 다시 4000rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 제거하였다. 수거한 균체는 보존제인 탈지분유 분말과 1:1의 중량비로 섞어 동결건조하여 분말을 제조하였다.
2-5. 락토바실러스 카제이 ( Lactobacillus casei ) HY7208 을 포함한 동결건조 분말
본 발명의 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208 1 X 109cfu/㎖의 균수를 MRS 액체배지(Difco)에 0.1% 접종하고 배양기에서 37℃에서 20시간 동안 정치배양(batch culture)하였다. 이것을 4000rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 제거하고, 인산완충식염수(phosphate buffered saline; PBS)로 균체를 세척한 후 다시 4000rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 제거하였다. 수거한 균체는 보존제인 탈지분유 분말과 1:1의 중량비로 섞어 동결건조하여 분말을 제조하였다.
2-6. IRT5를 포함한 동결건조분말의 제조
상기 실시예 2-1 내지 2-5의 각각의 균주를 포함한 동결건조분말을 각각 동일한 중량비(1:1:1:1:1:1:1)로 혼합하여 본 발명의 IRT5를 포함한 총 균수 5 X 109cfu/㎖의 동결건조분말을 제조하였다.
한편, 본 발명의 IRT5는 상기와 같이 동결 건조된 분말 형태 또는 배양물 형태로 제공될 수 있다.
<실시예 3>
IRT5 를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물의 제조
본 발명의 IRT5를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
정제의 제조
상기 실시예 2-6의 IRT5를 포함한 동결건조분말 100㎎, 옥수수전분 100㎎, 유당 100㎎ 및 폴리비닐피롤리돈 97㎎을 균질하게 혼합하여 습식과립법으로 과립화하고 스테아린산 마그네슘 2㎎을 가하여 혼합한 후 1정이 400㎎이 되도록 타정하였다.
캡슐제의 제조
상기 실시예 2-6의 IRT5를 포함한 동결건조분말 100㎎, 옥수수 전분 100㎎, 유당 100㎎, 스테아린산 마그네슘 2㎎을 완전히 혼합한 후 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 경질 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
<실시예 4>
IRT5 를 유효성분으로 함유하는 발효유의 제조
본 발명의 IRT5를 유효성분으로 함유하는 발효유를 제조하는 방법은 다음과 같다.
먼저, 유산균 배양액은 원유 95.36중량%와 탈지분유(또는 혼합분유) 4.6중량%를 교반하여 15℃에서의 비중은 1.0473~1.0475, 적정산도는 0.200~0.220%, pH는 6.65~6.70, 20℃에서의 브릭스(Brixo)는 16.3~16.5% 정도가 되도록 혼합하였다. 혼합 후에 이를 UHT 열처리(135℃에서 2초간 살균)하고 40℃로 냉각한 뒤, 실시예 2-3의 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008과 유당분해효소(Valley laboratory, USA)를 각기 0.02중량%씩 첨가하고 6시간 동안 배양하여 BCP 배지에서의 총 유산균수가 1.0 × 109cfu/㎖ 이상, 적정산도가 0.89~0.91%, pH는 4.55~4.65가 되도록 하여 제조하였다.
그 다음, 혼합과즙시럽은 액상과당 13중량%, 백설탕 5중량%, 혼합과즙농축액 56Brixo 10.9중량%, 펙틴 1.0중량%, 후레쉬 후르츠 믹스 에센스 0.1중량% 및 정제수 70중량%를 30~35℃에서 교반하여 혼합한 후 UHT 열처리(135℃에서 2초간 살균)한 후 냉각하여 제조하였다.
그런 다음, 상기 유산균배양액 69.5중량%와 실시예 2-1, 실시예 2-2, 실시예 2-4 및 실시예 2-5의 4종의 유산균 복합균주(중량비 1:1:1:1)를 포함한 동결건조분말 0.1중량% 및 상기 혼합과즙시럽 30.4중량%를 조합하여 150bar에서 균질한 후 10℃ 이하로 냉각하여 IRT5를 유효성분으로 함유하는 발효유를 제조하였다.
<실시예 5>
IRT5를 유효성분으로 함유하는 기능성 음료의 제조
본 발명의 IRT5를 유효성분으로 함유하는 기능성 음료를 제조하는 방법은 다음과 같다.
먼저, 혼합과즙시럽은 액상과당 13중량%, 백설탕 2.5중량%, 갈색설탕 2.5중량%, 혼합과즙농축액 56Brixo 10.9중량%, 펙틴 1.0중량%, 후레쉬 후르츠 믹스 에센스 0.1중량% 및 정제수 70중량%를 30~35℃에서 교반하여 혼합한 후 UHT 열처리(135℃에서 2초간 살균)한 후 냉각하여 제조하였다.
그리고, 상기의 방법으로 제조된 혼합과즙시럽 30.4중량%와 실시예 2-6의 IRT5를 포함한 동결건조분말 0.1중량% 및 나머지 정제수 69.5중량%를 조합하여 150bar에서 균질한 후 10℃ 이하로 냉각한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 IRT5를 유효성분으로 함유하는 기능성 음료를 제조하였다.
<실시예 6>
IRT5를 유효성분으로 함유하는 건강기능식품의 제조
상기 실시예 2-6의 IRT5를 포함한 동결건조분말 0.1중량%에 영양보조성분(비타민 B1, B2, B5, B6, E 및 초산에스테르, 니코틴산 아미드) 및 올리고당을 상기 실시예 2-6의 IRT5를 포함한 동결건조분말 100중량부에 대하여 10중량부가 되도록 첨가하여 고속회전 혼합기에서 혼합하였다. 상기 혼합물 100중량부에 대하여 멸균 정제수 10중량부를 첨가, 혼합하고 직경 1~2mm의 과립상으로 성형하였다. 상기 성형된 과립은 40~50℃의 진공건조기에서 건조시킨 후 12~14 메쉬(mesh)를 통과시켜 균일하게 과립을 제조하였다. 상기와 같이 제조된 과립은 적당량씩 압출 성형되어 정제 또는 분말로 되거나 경질캡슐에 충전되어 경질캡슐제품으로 제조하였다.
<시험예 1>
IRT5 에 의한 3 T3 - L1 지방세포 분화억제능력 측정
1-1. 3T3-L1 지방세포 분화 유도
American Type Culture Collection(ATCC)에서 구입한 3T3-L1 mouse embryonic fibroblast를 10% fetal bovine serum(FBS)이 포함된 Dulbecco's modified Eagle's medium(DMEM)에서 배양하였다. 3T3-L1 mouse embryonic fibroblast를 지방 세포로 분화시키기 위한 절차를 나열하면 다음과 같다. 3T3-L1 mouse embryonic fibroblast가 confluent하게 자란 시점(day 0)으로부터 2일 후에 배양 배지를 10% FBS, 1㎍/㎖ insulin, 0.5mM isobutylmethylxanthine(IBMX) 및 1μM dexamethasone가 포함된 DMEM 배지(분화 배지)로 교환하여 배양하였다. 이로부터 2일 후(day 2)에 10% FBS와 1㎍/㎖ 인슐린(insulin)이 포함된 DMEM 배지로 교환하여 배양하였다. 이로부터 2일 후(day 4)에 10% FBS만 포함된 배지로 교환하여 배양하였다. 이로부터 4일 후(day 8)에 3T3-L1 세포의 90% 이상이 지방세포로 완전히 분화되었다고 볼 수 있다. 3T3-L1 mouse embryonic fibroblast가 지방세포로 완전히 분화되기 전(day 0 ~ day 8)까지를 성숙 중인 3T3-L1 지방전구세포(maturing 3T3-L1 pre-adipocyte)라고 명명하고, 지방세포로 완전히 분화된 후(day 8 이후)에는 성숙된 3T3-L1 지방세포(mature 3T3-L1 adipocyte)라고 명명한다. 세포 배양 조건은 5% CO2, 37℃이다.
1-2. IRT5의 세포 추출물 확보
①비피도박테리움 비피덤 ( Bifidobacterium bifdum ) HY8308 세포추출물
본 발명의 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308을 BL 액체배지에서 혐기조건 하에 37℃, 20시간 동안 배양하였다. 균체를 원심 분리한 후 PBS로 2~3번 세척한 후 남아있는 배지 성분을 제거하였다. 균체를 동결건조해서 분말화 시킨 후 연속희석법(serial dilution)의 과정을 거쳐 균수를 측정하였다. 균체의 농도가 1010cfu/㎖이 되도록 PBS에 리서스펜션(resuspension)한 후 소니케이션(sonication)하여 균체를 용균(lysis)하였다. 이를 원심분리한 후 상층액을 유산균 세포 추출물로 시험에 사용하였다.
②락토바실러스 애시도필러스 ( Lactobacillus acidophilus ) HY7038 세포추출물
본 발명의 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038을 MRS 액체배지(Difco)에서 37℃, 20시간 동안 배양하였다. 균체를 원심 분리한 후 PBS로 2~3번 세척한 후 남아있는 배지 성분을 제거하였다. 균체를 동결건조해서 분말화 시킨 후 연속희석법(serial dilution)의 과정을 거쳐 균수를 측정하였다. 균체의 농도가 1010cfu/㎖이 되도록 PBS에 리서스펜션(resuspension)한 후 소니케이션(sonication)하여 균체를 용균(lysis)하였다. 이를 원심분리한 후 상층액을 유산균 세포 추출물로 시험에 사용하였다.
③스트렙토코커스 써모필러스 ( Streptococcus thermophilus ) HY9008 세포추출물
본 발명의 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008을 M17 액체배지(Difco)에서 42℃, 16시간 동안 배양하였다. 균체를 원심 분리한 후 PBS로 2~3번 세척한 후 남아있는 배지 성분을 제거하였다. 균체를 동결건조해서 분말화 시킨 후 연속희석법(serial dilution)의 과정을 거쳐 균수를 측정하였다. 균체의 농도가 1010cfu/㎖이 되도록 PBS에 리서스펜션(resuspension)한 후 소니케이션(sonication)하여 균체를 용균(lysis)하였다. 이를 원심분리한 후 상층액을 유산균 세포 추출물로 시험에 사용하였다.
④락토바실러스 루테리 ( Lactobacillus reuteri ) HY7508 세포추출물
본 발명의 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508을 MRS 액체배지(Difco)에서 37℃, 20시간 동안 배양하였다. 균체를 원심 분리한 후 PBS로 2~3번 세척한 후 남아있는 배지 성분을 제거하였다. 균체를 동결건조해서 분말화 시킨 후 연속희석법(serial dilution)의 과정을 거쳐 균수를 측정하였다. 균체의 농도가 1010cfu/㎖이 되도록 PBS에 리서스펜션(resuspension)한 후 소니케이션(sonication)하여 균체를 용균(lysis)하였다. 이를 원심분리한 후 상층액을 유산균 세포 추출물로 시험에 사용하였다.
⑤락토바실러스 카제이 ( Lactobacillus casei ) HY7208 세포추출물
본 발명의 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208을 MRS 액체배지(Difco)에서 37℃, 20시간 동안 배양하였다. 균체를 원심 분리한 후 PBS로 2~3번 세척한 후 남아있는 배지 성분을 제거하였다. 균체를 동결건조해서 분말화 시킨 후 연속희석법(serial dilution)의 과정을 거쳐 균수를 측정하였다. 균체의 농도가 1010cfu/㎖이 되도록 PBS에 리서스펜션(resuspension)한 후 소니케이션(sonication)하여 균체를 용균(lysis)하였다. 이를 원심분리한 후 상층액을 유산균 세포 추출물로 시험에 사용하였다.
⑥IRT5의 세포 추출물
상기 ① 내지 ⑤의 각각의 유산균 세포추출물을 각각 동일한 중량비(1:1:1:1:1:1:1)로 혼합하여 본 발명의 IRT5의 세포추출물로 시험에 사용하였다.
1-3. 3T3-L1 지방세포내 지방축적 억제 능력 측정(AdipoRed assay)
(1)96-well plate에서 배양한 3T3-L1 지방세포에 분화 배지를 처리하는 시점(day 0)에 상기 시험예 1-2의 IRT5 세포 추출물을 1%(v/v)로 함께 처리하였다. 이로부터 6일 후(day 6) 생성된 성숙 중인 3T3-L1 지방전구세포(maturing 3T3-L1 pre-adipocyte)를 PBS로 헹궈서 배지 성분을 제거하고 200㎕ PBS와 5㎕ AdipoRed Assay Reagent(Lonza)를 처리하였다. AdipoRed 시약은 지방 덩어리에 끼어 들어가서 형광을 나타내기 때문에 세포의 지방량을 측정하기에 매우 유용하다. 10분 동안 실온에서 반응시킨 후 형광검출기로 형광을 측정(excitation 485nm, emission 572nm)하였다.
(2)상기 (1)의 IRT5 대신에 상기 시험예 1-2의 각각 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308, 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008, 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208 세포 추출물을 사용한 것을 제외하고는 상기 (1)과 동일한 시험방법으로 시험을 하였다.
그 결과를 도 1에 나타내었다.
'대조군'은 3T3-L1 지방세포에 아무것도 처리하지 않은 군을 나타내며,
'HY8308'은 3T3-L1 지방세포에 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308을 처리한 군을 나타내며,
'HY7038'은 3T3-L1 지방세포에 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038을 처리한 군을 나타내고,
'HY9008'은 3T3-L1 지방세포에 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008을 처리한 군을 나타내며,
'HY7508'은 3T3-L1 지방세포에 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508을 처리한 군을 나타내고,
'HY7208'은 3T3-L1 지방세포에 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208을 처리한 군을 나타내며,
'IRT5군'은 3T3-L1 지방세포에 IRT5를 처리한 군을 나타낸다.
도 1에서 확인할 수 있는 바와 같이, 대조군에 비하여 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308 세포 추출물을 처리한 군(HY8308)은 16%, 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038 세포 추출물을 처리한 군(HY7038)은 25%, 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008 세포 추출물을 처리한 군(HY9008)은 11%, 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508 세포 추출물을 처리한 군(HY7508)은 29%, 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208 세포 추출물을 처리한 군(HY7208)은 16%의 지방축적 정도가 감소하였다. 그러나 5종의 유산균 복합균주 세포 추출물을 처리한 군(IRT5군)은 40%의 지방축적 정도가 감소하여 상기 각각의 유산균주 단독으로 처리를 하였을 때 보다 5종의 유산균를 복합으로 처리를 하였을 때 지방축적 정도 감소효과(지방세포 분화억제능력)가 더 크게 나타남을 알 수 있었다.
<시험예 2>
IRT5 에 의한 체지방 감소능력 측정
2-1. 체지방 감소 능력 측정
실험동물은 5주령의 C57BL/6J 마우스를 SJC(Japan)로부터 구입하여 1주간 순치 후 이용하였다. 8주간 실험소재를 혼합한 식이 및 멸균수를 자유급식 시키며 매주 1회 식이량 및 체중을 측정하였다.
대조군으로는 정상식이를 먹인 정상식이군(정상식이군, n=8), 고지방식이를 먹은 고지방식이군(고지방식이군, n=8)을 이용하였고, 실험군은 고지방식이에 가르시니아 캄보지아를 급여한 군(가르시니아 캄보지아군, n=8), 고지방식이에 5종의 유산균 복합균주를 급여한 군(IRT5군, n=8)으로 구성하였다.
실험동물의 사료는 표 5와 같은 조성으로 제조하였다. 정상식이군을 제외한, 고지방식이군, 가르시니아 캄보지아군, IRT5군에 대해서는 8주간 고지방식이를 급여하여 비만을 유도하였으며, 가르시니아 캄보지아군, IRT5군에 대해서는 각각 가르시니아 캄보지아(100mg/day)와 5종의 유산균 복합균주(5 × 109cfu/day)를 8주간 경구투여 하였다.
체중 및 식이량은 주 1회 측정하였으며 실험 기간이 종료된 후 실험동물은 12시간 절식시키고, zoletil 및 ethyl ether로 과량 마취하여 희생시켰다. 실험동물을 개복하여 간문맥에서 전혈을 채취하고 혈장을 분리하였으며, 지방조직을 적출하여 무게를 측정하였다. 혈장 및 조직 샘플은 사용시까지 영하 80℃에서 보관하였다.
그 결과를 도 2(총지방량), 도 3(부고환지방량), 도 4(피하지방량) 및 도 5(장간만지방량)에 나타내었다.
성분 정상식이(g) 고지방식이(g)
Casein 200 200
D,L-methionine 3 3
Corn starch 150 111
Sucrose 500 370
Cellulose powder 50 50
Corn oil 50 30
Lard - 170
Mineral mixturea 35 42
Vitamin mixtureb 10 12
Choline bitartrate 2 2
Cholesterol - 10
Tert-Buthylhydroquinone 0.01 0.04
'a': AIN-76 mineral mixture, 'b': AIN-76 vitamin mixture
도 2에서 확인 할 수 있는 바와 같이, 총지방량은 고지방 식이군에서 16.37g이었으나, IRT5군에서는 13.55g으로 유의적으로 감소하였으며(p<0.01), 특히 가르시니아 캄보지아군의 14.68g의 지방량 보다 더 크게 감소하였다.
도 3에서 확인 할 수 있는 바와 같이, 부고환지방량은 고지방 식이군에서 10.37g이었으나, IRT5군에서는 7.98g으로 유의적으로 감소하였다(p<0.01).
도 4에서 확인 할 수 있는 바와 같이, 피하지방량은 고지방 식이군에서 3.91g이었으나, IRT5군에서는 2.84g으로 유의적으로 감소하였다(p<0.05).
도 5에서 확인 할 수 있는 바와 같이, 장간막지방량은 고지방 식이군에서 2.24g이었으나, IRT5군에서는 1.70g으로 유의적으로 감소하였다(p<0.05).
2-2. 혈중 렙틴 측정
렙틴은 비만유전자로 알려져 있으며, 주로 지방세포에서 발현된다. 지방조직에 중성지방이 축적되어 지방세포의 크기가 증가하면 렙틴 합성이 촉진된다. 따라서, IRT5에 의한 체지방 감소능력을 측정하기 위하여 혈중 렙틴 농도를 측정하였다. 렙틴 농도는 Mouse leptin ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay) kit(Biovendor, Czech)을 이용하여 측정하였다.
그 결과를 도 6에 나타내었다.
도 6에서 확인할 수 있는 바와 같이, 혈중 렙틴의 양은 고지방 식이군에서 15.88ng/㎖이었으나, IRT5군에서는 12.10ng/㎖으로 유의적으로 감소하였다(p<0.01).
2-3. 마우스 간 조직 및 지방 조직에서 5종의 유산균 복합균주에 의한 마커 유전자 유의적 발현 차이 측정
상기 시험예 2-1의 마우스로부터 적출한 간조직의 지방합성 관련 유전자 FASN과 SCD1, 지방분해효소 관련 유전자 HSL, 지방산화관련 유전자 CPT2, 그리고 GAPDH(실험결과를 보정하기 위한 house-keeping 유전자) 유전자들의 발현 차이를 리얼타임(Real time) PCR을 통해 측정하였다.
우선, RNA queous kit(Ambion, AM1912)를 이용하여 간조직으로부터 RNA를 추출하고, High Capacity RNA-to-cDNA kit(Applied Biosystems, 4387406)를 이용하여 RNA에 대한 상보적인 DNA(complimentary DNA, 이하 'cDNA'라 함)를 확보하였다. 하기의 표 6과 같이 구입한 택맨프로브(Taqman probes, Applied Biosystems 사에서 구입)와 상기 cDNA를 이용하여 리얼타임 RCR(Applied Biosystems, 7500 Real time PCR)로 RNA 발현양을 정량하였다. 부고환지방 조직에서는 지방합성 관련 유전자 FASN, 지방분해효소 관련 유전자 HSL, 지방산화 관련 유전자 CPT2, 열생성 관련 유전자 UCP1에 대해, 그리고 견갑골 갈색지방 조직에서는 지방산화 관련 유전자 PPARα, CPT1, CPT2 및 ACOX1, 열생성관련 유전자 UCP1 및 UCP2에 대해 간조직의 지방대사 관련 유전자 분석과 동일한 방법으로 리얼타임 PCR을 통해 측정하였다.
그 결과를 도 7(간 조직내 mRNA 발현), 도 8(부고환지방 조직내 mRNA 발현) 및 도 9(견갑골 갈색지방 조직내 mRNA 발현)에 나타내었다.
Figure 112014032724816-pat00010
도 7에서 확인할 수 있는 바와 같이, 고지방식이군과 비교하여 IRT5군에서는 지방합성 관련된 FASN과 SCD1 유전자의 발현이 유의적으로 감소하였으며(p<0.05), 반대로 지방분해와 관련된 HSL 유전자와 지방산 산화와 관련된 CPT2 유전자의 발현은 유의적으로 증가하였다(p<0.05).
도 8에서 확인할 수 있는 바와 같이, 고지방식이군과 비교하여 IRT5군에서는 지방합성 관련된 FASN 유전자의 발현이 유의적으로 감소하였으며(p<0.05), 반대로 지방분해와 관련된 HSL 유전자와 지방산 산화와 관련된 CPT2 유전자의 발현은 유의적으로 증가하였다(p<0.05). 또한 지방산 산화에 의한 열 발생과 관련된 UCP1 유전자의 발현이 유의적으로 증가하였다(p<0.05).
도 9에서 확인할 수 있는 바와 같이, 고지방식이군과 비교하여 IRT5군에서는 견갑골 갈색지방 조직내 지방산화에 관련된 CPT1, CPT2 및 ACOX1 유전자의 발현이 증가하였으며(p<0.01), 지방산 산화에 의한 열발생과 관련된 UCP1과 UCP2 유전자의 발현이 유의적으로 증가하였다(p<0.05).
이상의 시험예 2-3의 시험결과를 종합하여 보면, 5종의 유산균 복합균주를 섭취한 군(IRT5군)에서 고지방식이만을 섭취한 군(고지방식이군)과 비교하여 체내 지방합성과 관련된 유전자들(FASN과 SCD1 유전자)의 발현이 감소되고, 섭취된 지방의 분해 또는 산화와 관련된 유전자들(HSL, ACOX1, CPT1, CPT2 유전자)의 발현이 증가되어 체내 지방축적을 감소시키는 효과를 나타냄을 알 수 있었다. 또한 지방분해 및 산화 이외에도 체내 지방을 연소시켜 에너지 및 열을 발생시키는데 관여하는 유전자들(UCP1과 UCP2 유전자)의 발현을 증가시켜 체내 지방축적을 감소시키는 효과도 있는 것으로 확인되었다.
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Claims (5)

  1. 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308(기탁번호:KCTC 12563BP), 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038(기탁번호:KCTC 12560BP), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008(기탁번호:KCTC 12564BP), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508(기탁번호:KCTC 12562BP) 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208(기탁번호:KCTC 12561BP)로 이루어진 5종의 유산균 복합균주를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 체지방 감소를 통한 비만 치료 또는 예방용 약학적 조성물.
  2. 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308(기탁번호:KCTC 12563BP), 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038(기탁번호:KCTC 12560BP), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008(기탁번호:KCTC 12564BP), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508(기탁번호:KCTC 12562BP) 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208(기탁번호:KCTC 12561BP)로 이루어진 5종의 유산균 복합균주를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 체지방 감소를 통한 비만 개선 또는 예방용 식품 조성물.
  3. 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308(기탁번호:KCTC 12563BP), 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038(기탁번호:KCTC 12560BP), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008(기탁번호:KCTC 12564BP), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508(기탁번호:KCTC 12562BP) 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208(기탁번호:KCTC 12561BP)로 이루어진 5종의 유산균 복합균주를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 체지방 감소를 통한 비만 개선 또는 예방용 발효유.
  4. 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308(기탁번호:KCTC 12563BP), 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038(기탁번호:KCTC 12560BP), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008(기탁번호:KCTC 12564BP), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508(기탁번호:KCTC 12562BP) 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208(기탁번호:KCTC 12561BP)로 이루어진 5종의 유산균 복합균주를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 체지방 감소를 통한 비만 개선 또는 예방용 기능성 음료.
  5. 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum) HY8308(기탁번호:KCTC 12563BP), 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) HY7038(기탁번호:KCTC 12560BP), 스트렙토코커스 써모필러스(Streptococcus thermophilus) HY9008(기탁번호:KCTC 12564BP), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri) HY7508(기탁번호:KCTC 12562BP) 및 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei) HY7208(기탁번호:KCTC 12561BP)로 이루어진 5종의 유산균 복합균주를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 체지방 감소를 통한 비만 개선 또는 예방용 건강기능식품.
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Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20160098955A (ko) * 2015-02-10 2016-08-19 주식회사 지니스 비만 억제능을 갖는 균주 및 이를 함유하는 약학 조성물
KR101754233B1 (ko) * 2015-06-30 2017-07-06 주식회사 엔유씨전자 요거트 제조용 조성물, 상기 조성물로부터 제조된 요거트 및 상기 요거트의 제조 방법
KR20180060928A (ko) 2016-11-29 2018-06-07 (주) 위디어 신규 유산균을 이용한 퇴행성 뇌질환 예방 및 치료용 조성물
KR101920219B1 (ko) * 2017-03-08 2018-11-20 서울대학교산학협력단 비피더스균을 포함하는 비만 예방 또는 개선용 조성물
US10590496B2 (en) 2016-11-29 2020-03-17 Wedea Inc. Composition for preventing and treating degenerative brain disease using novel lactic acid bacteria
KR20200084817A (ko) * 2018-04-11 2020-07-13 한국생명공학연구원 비만의 예방 또는 치료 효과를 가지는 신규 락토바실러스 람노서스 균주 및 이의 용도
WO2021066586A1 (ko) * 2019-10-02 2021-04-08 한국생명공학연구원 비만의 예방, 치료 또는 개선용 조성물
CN117562930A (zh) * 2024-01-15 2024-02-20 山东中科嘉亿生物工程有限公司 预防幽门螺杆菌感染的复合菌剂及其制备方法、应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100404236B1 (ko) 2000-05-17 2003-11-01 (주)바이오니아 비만 또는 당뇨병 치료용 미생물 및 상기 미생물을포함하는 의약 조성물
EP1456351B1 (en) 2001-12-21 2006-08-09 ACTIAL Farmaceutica Lda. New strain of lactic acid bacterium and edible compositions, drugs and veterinary products containing it
KR100913406B1 (ko) 2008-03-25 2009-08-21 광주과학기술원 Ｔｈ１－매개 면역 질환의 예방 또는 치료용 조성물

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100404236B1 (ko) 2000-05-17 2003-11-01 (주)바이오니아 비만 또는 당뇨병 치료용 미생물 및 상기 미생물을포함하는 의약 조성물
EP1456351B1 (en) 2001-12-21 2006-08-09 ACTIAL Farmaceutica Lda. New strain of lactic acid bacterium and edible compositions, drugs and veterinary products containing it
KR100913406B1 (ko) 2008-03-25 2009-08-21 광주과학기술원 Ｔｈ１－매개 면역 질환의 예방 또는 치료용 조성물

Cited By (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102125548B1 (ko) 2015-02-10 2020-06-24 주식회사 지니스 비만 억제능을 갖는 균주 및 이를 함유하는 약학 조성물
WO2017082611A1 (ko) * 2015-02-10 2017-05-18 주식회사 지니스 비만 억제능을 갖는 균주 및 이를 함유하는 약학 조성물
KR20160098955A (ko) * 2015-02-10 2016-08-19 주식회사 지니스 비만 억제능을 갖는 균주 및 이를 함유하는 약학 조성물
US11273188B2 (en) 2015-02-10 2022-03-15 Microbiotica Gmbh Strain having ability to inhibit obesity and pharmaceutical composition containing same
KR101754233B1 (ko) * 2015-06-30 2017-07-06 주식회사 엔유씨전자 요거트 제조용 조성물, 상기 조성물로부터 제조된 요거트 및 상기 요거트의 제조 방법
KR20180060928A (ko) 2016-11-29 2018-06-07 (주) 위디어 신규 유산균을 이용한 퇴행성 뇌질환 예방 및 치료용 조성물
US10590496B2 (en) 2016-11-29 2020-03-17 Wedea Inc. Composition for preventing and treating degenerative brain disease using novel lactic acid bacteria
KR101920219B1 (ko) * 2017-03-08 2018-11-20 서울대학교산학협력단 비피더스균을 포함하는 비만 예방 또는 개선용 조성물
KR20200084817A (ko) * 2018-04-11 2020-07-13 한국생명공학연구원 비만의 예방 또는 치료 효과를 가지는 신규 락토바실러스 람노서스 균주 및 이의 용도
KR102206628B1 (ko) 2018-04-11 2021-01-22 한국생명공학연구원 비만의 예방 또는 치료 효과를 가지는 신규 락토바실러스 람노서스 균주 및 이의 용도
WO2021066586A1 (ko) * 2019-10-02 2021-04-08 한국생명공학연구원 비만의 예방, 치료 또는 개선용 조성물
KR20210039970A (ko) * 2019-10-02 2021-04-12 한국생명공학연구원 비만의 예방, 치료 또는 개선용 조성물
KR102335928B1 (ko) * 2019-10-02 2021-12-08 한국생명공학연구원 비만의 예방, 치료 또는 개선용 조성물
CN117562930A (zh) * 2024-01-15 2024-02-20 山东中科嘉亿生物工程有限公司 预防幽门螺杆菌感染的复合菌剂及其制备方法、应用
CN117562930B (zh) * 2024-01-15 2024-04-16 山东中科嘉亿生物工程有限公司 预防幽门螺杆菌感染的复合菌剂及其制备方法、应用

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