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KR100749160B1 - 포스포네이트 뉴클레오티드 유사체의 전구 약물의 제조방법 - Google Patents

포스포네이트 뉴클레오티드 유사체의 전구 약물의 제조방법 Download PDF

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KR100749160B1
KR100749160B1 KR1020067020061A KR20067020061A KR100749160B1 KR 100749160 B1 KR100749160 B1 KR 100749160B1 KR 1020067020061 A KR1020067020061 A KR 1020067020061A KR 20067020061 A KR20067020061 A KR 20067020061A KR 100749160 B1 KR100749160 B1 KR 100749160B1
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prodrug
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마크 더블유. 벡커
할란 에이치 채프만
토마스 키흘라
유진 제이. 에이센베르그
공신 헤
마이클 알. 케르난
윌리엄 에이. 리
어니스트 제이. 프리스베
존 씨. 로흐로프
마크 엘. 스파라씨노
Original Assignee
길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
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Publication date
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Abstract

신규 방법은 항바이러스 또는 항종양 활성을 갖는 목적하는 조직을 선택적으로 표적시키는 전구 약물을 확인할 수 있도록, 메톡시포스포네이트 뉴클레오티드 유사체의 전구 약물을 스크리닝을 위하여 제공된다. 본 방법에 의하여 레트로바이러스 또는 헤파드나바이러스를 치료할 수 있는, PMPA의 신규 혼합된 에스테르-아미데이트, 예컨대 본원에서 정의된 바와 같은 치환기기를 갖는 구조식 (5a)의 화합물을 확인할 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 부형제와 이러한 신규화합물의 조성물 및 치료와 예방에 있어서 그들의 용도가 제공된다. 또한 본원에서 사용하고자 하는 화합물과 출발 물질을 제조하는 마그네슘 알콕사이드의 사용을 위한 개선된 방법이 제공된다.

Description

포스포네이트 뉴클레오티드 유사체의 전구 약물의 제조 방법 {METHODS FOR MAKING PRODRUGS OF PHOSPHONATE NUCLEOTIDE ANALOGUES}
도 1은 PBMC에서 TDF, GS-7340 및 PMPA에 대한 HPLC 크로마토그램을 나타낸다.
도 2는 PMPA 전구 약물의 순수 부분 입체 이성질체를 경구 투여한 후 혈장과 PBMC 노출의 GS7340-2 대사 개요의 시간에 따른 진행을 보여준다.
도 3은 개에게 PMPA s.c., TDF와 아미데이트 에스테르 전구 약물을 투여한 후 PBMC 및 혈장 내 테노포비르에 대한 AUC(0-24시간)를 보여준다.
본 출원은 메톡시포스포네이트 뉴클레오티드 유사체(methoxyphosphonate nucleotide analogue)의 전구 약물(prodrug)에 관한 것이다. 특히, 본 출원은 상기 전구 약물을 제조하고 확인하는 개선된 방법에 관한 것이다.
다수의 메톡시포스포네이트 뉴클레오티드 유사체가 공지되어 있다. 일반적으로, 그러한 화합물은 A가 뉴클레오시드 유사체의 잔기이고 R이 독립적으로 수소 또 는 다양한 보호 또는 전구 약물 작용군인 A-OCH2P(O)(OR)2 구조를 갖는다. 미국특허 제5,663,159호, 제5,977,061호 및 제5,798,340호, Oliyai 외, "Pharmaceutical Research"16 (11): 1687-1693 (1999), Stella 외,"J. Med. Chem."23 (12): 1275-1282 (1980), Aarons, L., Boddy, A. and Petrak, K. (1989) Novel Drug Delivery and Its Therapeutic Application (Prescott, L. F. and Nimmo, W. S., ed.), pp. 121-126; Bundgaard, H. (1985) Design of Prodrugs (Bundgaard, H., ed.) pp. 7074 and 79-92; Banerjee, P. K. and Amidon, G. L. (1985) Design of Prodrugs (Bundgaard, H., ed.) pp. 118-121; Notari, R. E. (1985) Design of Prodrugs (Bundgaard, H., ed.) pp. 135-156; Stella, V. J. and Himmelstein, K. J. (1985) Design of Prodrugs (Bundgaard, H., ed.) pp. 177-198 ; Jones, G. (1985) Design of Prodrugs (Bundgaard, H., ed.) pp. 199-241; Connors, T. A. (1985) Design of Prodrugs (Bundgaard, H., ed.) pp. 291-316를 참조한다. 모든 문헌과 특허 인용 문헌은 참고자료로서 명백히 본원의 내용으로 포함되어 있다.
발명의 요약
알려져 온 동안, 항바이러스 또는 항종양 요법을 위한 메톡시포스포네이트 뉴클레오티드 유사체의 전구 약물은 전통적으로 그 전신 효과 면에서 선택되어 왔다. 예를 들어, 그러한 전구 약물은 증강된 생체 이용률(bioavailability), 즉 위장관으로부터 흡수되어 모약물(parent drug)이 모든 조직에 이용 가능할 것을 보장 하기 위하여 재빨리 모약물로 전환되는 능력 면에서 선택되어 왔다. 그러나, 이제 본원인은, 유사체가 HIV 감염의 편재화된 국소 부위에서 강화된다는 본원에 기재된 연구가 설명하는 바와 같이, 치료 부위에서 강화되는 전구 약물을 선택하는 것이 가능하다는 것을 밝혀 내었다. 본 발명의 목적은, 다른 이점 중에서도, 방관자(bystander) 조직에 대한 낮은 독성을 제공하고, 모(母) 메톡시포스포네이트 뉴클레오티드 유사체를 사용하는 치료의 표적인 조직에서의 모약물의 우수한 효능을 제공하는 데에 있다.
따라서, 이러한 관찰에 의거하여,
(a) 적어도 하나의 전구 약물을 제공하는 단계,
(b) 적어도 하나의 치료 표적 조직과 적어도 하나의 비표적 조직을 선택하는 단계,
(c) 전구 약물을 상기 표적 조직과 상기 적어도 하나의 비표적 조직에 투여하는 단계,
(d) 단계 (c)에서 조직에 투여된 전구 약물에 의하여 부여된 상대적 항바이러스 활성을 측정하는 단계를 포함하는, 표적 조직에서 증강된 활성을 부여하는 메톡시포스포네이트 뉴클레오티드 유사체 전구 약물을 확인하기 위한 스크리닝 방법이 제공된다.
바람직한 구체예에서, 표적 조직은 HIV가 활발하게 복제되는 부위 및/또는 HIV 병원소(reservoir)로 작용하는 부위이며, 비표적 조직은 무손상(intact) 동물이다. 출원인은 HIV에 이러한 방법을 실행하기 위하여 표적 조직으로서 림프 조직 을 선택한 것이 결국 그러한 조직에 활성 약물의 전달을 증강시키는 전구 약물을 확인할 수 있게 한다는 것을 예기치 않게 알게 되었다.
이러한 방법에 의하여 확인된, 본 발명의 바람직한 구체예는 하기 구조식 (1)을 갖는 화합물과, 키랄적으로 강화된(chirally enriched) 이들의 조성물, 염, 유리 염기 및 용매 화합물을 제공한다.
Figure 112006070532142-pat00001
식 중에서, Ra는 H 또는 메틸이다.
본 발명의 바람직한 구체예는 하기 구조식 (2)를 갖는 화합물과, 이들의 강화된 부분 입체 이성질체(diastereomer), 염, 유리 염기(free base) 및 용매 화합물을 제공한다.
Figure 112006070532142-pat00002
또한, 출원인은 아미데이트 치환기 및/또는 인(phosphorous) 원자 상의 치환기의 키랄성(chirality)이 본 발명의 실행시 관찰되는 강화(enrichment)에 영향을 미친다는 것을 예기치 않게 알게 되었다. 따라서, 본 발명의 또다른 구체예에서, 출원인은 실질적으로 하기 부분 입체 이성질체 (4)가 없는,
Figure 112006070532142-pat00003
본 발명의 부분 입체 이성질체적으로 강화된 (diastereomerically enriched) 하기 구조식 (3)을 갖는 화합물과, 이들의 염, 유리 염기 및 용매 화합물을 제공한다.
Figure 112006070532142-pat00004
식 중에서,
R1은 생체내(in vivo)에서 가수분해될 수 있는 옥시에스테르, 또는 히드록실이고;
B는 헤테로고리 염기이며;
R2는 히드록실, 또는 아미노산의 아미노기를 통해 P 원자에 결합된 아미노산의 잔기로서 선택적으로 에스테르화되는 아미노산의 각 카르복시 치환기를 갖는 것이지만, R1과 R2 모두가 히드록실은 아닌 것이고;
E는 -CH2O(CH2)2-, -CH2OCH(CH3)CH2-, -CH2OCH(CH2F)CH2-, -CH2OCH(CH20H)CH2-, -CH2OCH(CH
Figure 112006070532142-pat00005
CH2)CH2-, -CH2OCH(C≡CH)CH2-, -CH2OCH(CH2N3)CH2-,
Figure 112006070532142-pat00006
-CH2OCH(R6)OCH(R6')-, -CH2OCH(R9)CH2O- 또는 -CH2OCH(R8)O-로서, 우측 결합이 헤테로고리 염기와 연결되어 있는 것이고;
점선은 선택적 이중 결합을 나타내는 것이며;
R4와 R5는 독립적으로 수소, 히드록시, 할로, 아미노 또는 아실옥시, 알킬옥시, 알킬티오, 알킬아미노 및 디알킬아미노 중에서 선택되는 1-5개의 탄소 원자를 갖는 치환기이고;
R6와 R6'은 독립적으로 H, C1-C6 알킬, C1-C6 히드록시알킬 또는 C2-C7 알카노일이고;
R7은 독립적으로 H, C1-C6 알킬이거나, 또는 함께 -O- 또는 -CH2-를 형성하는 것이고,
R8은 H, C1-C6 알킬, C1-C6 히드록시알킬 또는 C1-C6 할로알킬이고;
R9는 H, 히드록시메틸 또는 아실옥시메틸이다.
구조식 (3)의 부분 입체 이성질체는 인 키랄 중심(chiral center)에서 (S) 이성질체인 것을 나타낸다.
본 발명의 바람직한 구체예는 실질적으로 하기 부분 입체 이성질체 (5b)가 없는,
Figure 112006070532142-pat00007
하기 구조식 (5a)를 갖는 부분 입체 이성질체적으로 강화된 화합물과, 이들의 염, 호변체(tautomer), 유리 염기 및 용매 화합물이다.
Figure 112006070532142-pat00008
식 중에서,
R5는 메틸 또는 수소이고;
R6은 독립적으로 H, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴 또는 아릴알킬이거나, 또는 R6은 독립적으로 알킬아미노, 알킬아미노알킬, 디알킬아미노알킬, 디알킬아미노, 히드록실, 옥소, 할로, 아미노, 알킬티오, 알콕시, 알콕시알킬, 아릴옥시, 아릴옥시알킬, 아릴알콕시, 아릴알콕시알킬, 할로알킬, 니트로, 니트로알킬, 아지도, 아지도알킬, 알킬아실, 알킬아실알킬, 카르복실, 또는 알킬아실아미노 중에서 선택되는 1 내지 3개의 치환기로 치환된 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴 또는 아릴알킬이고;
R7은 천연 또는 약제학적으로 허용 가능한 아미노산의 측쇄로서, 상기 측쇄가 카르복실을 포함하는 경우에 그 카르복실기는 선택적으로 알킬 또는 아릴기로 에스테르화된 것이고;
R11은 아미노, 알킬아미노, 옥소 또는 디알킬아미노이고;
R12는 아미노 또는 H이다.
본 발명의 바람직한 구체예는 하기 구조식 (6)의 화합물인 9-[(R)-2-[[(S)-[[(S)-1-(이소프로폭시카르보닐)에틸]아미노]페녹시포스피닐]메톡시]프로필]아데닌으로서, 본원에서 GS-7340라 한다.
Figure 112006070532142-pat00009
본 발명의 또다른 바람직한 구체예는 구조식 (5) (하기 구조식 (7))의 푸마레이트염, 9-[(R)-2-[[(S)-[[(S)-1-(이소프로폭시카르보닐)에틸]아미노]페녹시포스피닐]메톡시]프로필]아데닌 푸마레이트 (1:1)로, 본원에서 GS-7340-2라 한다.
Figure 112006070532142-pat00010
구조식 (1)-(7)의 화합물은 선택적으로 약제학적으로 허용 가능한 부형제를 함유하는 조성물로 배합된다. 그러한 조성물은 바이러스 (특히 HIV 또는 헤파드나바이러스) 감염의 치료 또는 예방에 유효 투여량으로 사용된다.
부가적인 구체예에 있어서, 9-(2-히드록시프로필)아데닌 또는 9-(2-히드록시에틸)아데닌, 보호된 ρ-톨루엔설포닐옥시메틸포스포네이트 및 마그네슘 알콕사이드를 혼합한 다음, 9-[2-(포스포노메톡시)프로필]아데닌 (이하 "PMPA"라 한다) 또는 9-[2-(포스포노메톡시)에틸]아데닌 (이하 "PMEA"라 한다)을 각각 회수하는 것을 포함하는, 마그네슘 알콕사이드를 이용하는, PMPA 또는 PMEA의 손쉬운 제조 방법이 제공된다.
스크리닝 방법에 사용하기 위한 메톡시포스포네이트 뉴클레오티드 유사체 모약물은 구조식 A-OCH2P(O)(OH)2를 갖는 화합물이며, 여기서 A는 뉴클레오시드 유사체의 잔기이다. 이러한 화합물은 그 자체로 공지되어 있고 본 발명의 일부가 아니다. 보다 구체적으로, 모화합물은 헤테로고리 염기 B와 아글리콘(aglycon) E를 포 함하며, 일반적으로 하기 구조식을 갖는다.
Figure 112006070532142-pat00011
식 중에서, B기는 이하에 정의되어 있고, E기는 앞에 정의되어 있다. 예는 미국특허 제4,659,825호, 제4,808,716호, 제4,724,233호, 제5,142,051호, 제5,130,427호, 제5,650,510호,제5,663,159호, 제5,302,585호, 제5,476,938호, 제5,696,263호, 제5,744,600호, 제5,688,778호, 제5,386,030호, 제5,733,896호, 제5,352,786호, 및 제5,798,340호 유럽특허 제821,690호 및 제654,037호에 기재되어 있다.
본 발명의 스크리닝 방법에 사용하기 위한 전구 약물은 선행 문단에 기재한 모(母) 메톡시포스포네이트 뉴클레오티드 유사체의 공유 개조(covalently modified) 유사체이다. 일반적으로, 모약물의 인 원자가 전구 약물 개조를 위한 바람직한 부위이지만, 그 외의 부위가 헤테로고리 염기 B 또는 아글리콘 E 상에서 발견된다. 다수의 이와 같은 전구 약물은 이미 공지되어 있다. 기본적으로, 그러한 전구 약물은 인 원자의 에스테르 또는 아미데이트이지만, 또한 염기와 아글리콘에 대한 치환을 포함한다. 어떠한 개조도 그 자체로 본 발명의 일부는 아니며, 어떠한 것도 본 발명의 범위를 한정하는 것으로 고려되지 않는다.
메톡시포스포네이트 뉴클레오티드 유사체의 인 원자는 아미데이트화 또는 에스테르화와 같은 공유 개조를 위한 2개의 원자가를 함유한다 (하나의 포스포릴 히 드록실이 아글리콘 E 히드록실 치환기로 에스테르화되지 않는 한, 단지 하나의 인 원자가가 치환에 대하여 자유롭다). 통상 에스테르는 아릴옥시이다. 아미데이트는 보통 알킬기 또는 아릴기, 대개 페닐, 시클로알킬, 또는 t-, n- 또는 s-알킬기를 사용하여 에스테르화된 유리 카르복실기(들)을 갖는 천연 모노아미노산이다. 본 발명의 스크리닝 방법에 사용하기에 적합한 전구 약물은 예컨대 미국특허 제5,798,340호에 개시되어 있다. 그러나, 생체내(in vivo) 표적 조직세포에서 유리 메톡시포스포네이트 뉴클레오티드 유사체 모약물로, 예컨대 가수분해, 산화, 또는 생체조직에 대한 노출로 인한 그밖의 공유 변환(covalent transformation)에 의하여, 전환될 수 있는 것으로 잠재적으로 간주되는 임의의 전구 약물이 본 발명에 따른 방법에 사용하기에 적합하다. 그러한 전구 약물은 이 시점에서 공지될 수 있는 것이 아니라 장래에 확인될 수 있는 것이고, 따라서 본 발명의 방법을 시험하는 데에 이용 가능한 적합한 후보가 된다. 궁극적으로 전구 약물의 구조는 당해 전구 약물이 분석에서 선택적인 것으로 나타날 것인지를 결정하지만, 이들 전구 약물은 본 발명의 방법에 있어서 스크리닝을 위한 후보에 불과하므로, 이들의 구조는 스크리닝 방법을 실행하거나 또는 가능하게 하는 데에 적절한 것은 아니다.
모약물에 결합된 전-부분(pro-moieties)은 동일하거나 또는 상이할 수 있다. 그러나, 스크리닝 분석에 사용될 각 전구 약물은 시험되는 다른 전구 약물과는 구조적으로 상이할 것이다. 구별되는(distinct), 즉, 구조적으로 상이한, 전구 약물은 일반적으로 그 전구 약물의 입체 화학 또는 그 공유 구조를 토대로 선택되거나, 또는 이러한 특징의 조합에 의하여 달라지게 된다. 그러나 시험된 각 전구 약물은 구조적으로 또는 입체 화학적으로 실질적으로 순수한 것이 바람직하며, 그렇지 않다면 스크리닝 분석의 결과(output)가 덜 유용할 것이다. 혹자가 그밖의 전구 약물을 사용한 이전 연구의 결과들과 통상적으로 대비한다 하더라도, 본 발명의 방법의 개별 구체예에서 단 하나의 전구 약물을 시험하는 것도 물론 본 발명의 범위 내이다.
본 발명자들은 전구 약물의 입체 화학이 표적 조직에서의 강화에 영향을 미칠 수 있다는 것을 발견하였다. 키랄 부위(chiral sites)는 인 원자에 있고 또한 그 치환기에서도 발견된다. 예를 들어, 아미데이트 제조에 사용된 아미노산은 D 또는 L 형일 수 있고, 그 포스포네이트 에스테르 또는 아미노산 에스테르 역시 키랄 중심을 가질 수 있다. 또한 키랄 부위는 분자의 뉴클레오시드 유사체 부분에서도 발견되지만, 이는 통상 모약물의 입체 화학에 의하여 이미 지시된 것이고, 스크린의 일부로서 달라지지는 않을 것이다. 예를 들어, PMPA의 R 이성질체는 대응하는 S 이성질체에 비하여 활성이 더 크기 때문에 바람직하다. 각 부위에서 순수하지 않은 경우, 이들 부분 입체 이성질체 또는 거울상 이성질체(enantiomer)는 통상 키랄적으로 강화될 것이고, 그 결과 스크린 결과를 보다 의미 있도록 할 것이다. 주목하는 바와 같이, 입체 이성질체의 구별성 (distinctiveness)은 해당 키랄 중심에서 다른 입체 이성질체로부터 유리된 입체 이성질체 (대부분의 메톡시포스포네이트 뉴클레오티드 유사체의 경우 거울상 이성질체보다는 대개 부분 입체 이성질체일 것이다)를 강화하거나 또는 정제하는 것에 의하여 부여되어, 각 시험 화합물은 실질적으로 동종(homogeneous)이다. 실질적으로 동종이거나 또는 키랄적으로 강화된다는 것은, 목적하는 입체 이성질체가 화합물의 약 60 중량% 이상, 보통 약 80 중량% 이상, 바람직하게는 95 중량% 이상을 차지한다는 것을 의미하는 것이다.
신규 스크리닝 방법
일단 적어도 하나의 후보 전구 약물이 선택되면, 본 발명의 스크리닝 방법의 나머지 단계가 표적 조직에 필요한 선택성(selectivity)을 갖는 전구 약물의 확인에 사용된다. 추후에 조직 또는 세포에서 검출을 용이하게 하기 위하여, 전구 약물을 검출가능기(detectable group)로 표지, 예컨대 방사능 표지(radiolabeled)하는 것이 가장 편리하다. 그러나, 전구 약물 또는 그 대사 산물 (모약물을 포함하여)을 분석하기 위한 다른 적합한 분석 또한 사용될 수 있기 때문에, 표지가 필수적인 것은 아니다. 이러한 분석에는 예를 들면 질량 분석법(mass spectrometry), HPLC, 바이오 분석법 (bioassay) 또는 면역 분석법(immunoassay) 등이 포함될 수 있다. 상기 분석은 전구 약물과 이들의 하나 이상의 대사 산물을 검출할 수도 있지만, 이러한 분석는 그 모약물의 생성만을 검출토록 하는 것이 바람직하다. 이는 전구 약물의 항바이러스 활성 모(母) 디포스페이트(parent diphosphate)로의 전환 정도와 속도는 시험된 모든 조직에서 동일하다는 가정(모든 경우에 보장되지는 않을 수 있다)에 기초한 것이다. 그렇지 않다면, 디포스페이트에 대하여 시험할 수 있다.
HIV 감염 치료에 유용한 전구 약물을 스크리닝할 때 바람직한 표적 조직은 림프 조직일 것이다. 림프 조직은 당업자에게 알려져 있을 것이며, CD4 세포, 림프구, 림프절, 매크로파이지(macrophage)와, 아교세포(glial cell) 및 말초혈액 단핵세포 (peripheral blood monocytic cells, PBMCs)와 같은 단구(monocyte)를 포함하 는 대식구-유사 세포 등을 포함한다. 또한 림프 조직은 림프 조직 또는 세포, 예컨대 폐, 피부 및 비장에서 강화된 비-림프 조직을 포함한다. 물론 다른 항바이러스 약물의 다른 표적은 예컨대 간염에 있어서의 간과 HSV에 있어서의 말초신경과 같이, 당해 특정 바이러스에 있어서의 일차적인 복제 또는 잠복 부위가 될 것이다. 유사하게, 종양의 표적 조직은 사실상 종양 그 자체가 될 것이다. 이러한 조직 모두는 당업자 사이에 널리 알려져 있으며 선택을 위하여 과도한 실험을 필요로 하지는 않는다. 항바이러스 화합물을 스크리닝할 때, 표적 조직은 바이러스에 의하여 감염될 수 있다.
비표적 조직 또는 세포 역시 본 발명의 방법의 일부로서 스크린된다. 이와 관련하여, 이와 같은 조직 또는 세포는 어떠한 수 또는 정체를 갖는 것이라도 사용될 수 있다. 일반적으로, 모약물이 독성일 것으로 예상되는 조직은 비표적 조직으로 사용될 것이다. 비표적 조직의 선택은 전적으로 전구 약물의 본질 및 그 모약물의 활성에 따라 달라진다. 예를 들어, 간 이외의 조직(non-hepatic tissues)이 간염에 대한 전구 약물을 위하여 선택될 것이고, 종양과 동일한 조직의 비변형(untransformed) 세포가 항종양 선택성 전구 약물 스크린에 충분할 것이다.
본 발명의 방법은 전구 약물의 경구 생체 이용률을 측정하기 위하여 통상 수행되는 연구들과는 다르다는 것이 주목되어야 한다. 경구 생체 이용률 연구에서, 그 목적은 실질적으로 모약물로 전환되는 체순환으로 들어가는 전구 약물을 확인하는 것이다. 본 발명에 있어서, 그 목적은 위장관 또는 순환에서 대사되지 않는 전구 약물을 발견하는 것이다. 따라서, 본 발명의 방법에서 평가될 표적 조직은 일반 적으로 소장을 포함하지 않거나, 또는 장이 포함되는 경우에 그 조직은 소장 이외의 추가적인 조직 역시 포함한다.
전형적으로 본 발명의 스크리닝 방법에 사용되는 표적 조직과 비표적 조직은 무손상의 살아있는 동물의 조직일 것이다. 에스테르를 갖는 전구 약물은 개, 원숭이, 또는 설치류를 제외한 다른 동물에서 시험되는 것이 바람직하다. 마우스와 래트 혈장은 목적하는 치료 환자가 사람이거나 고등 포유 동물인 경우에 그르치기 쉬운 결과를 낳을 수 있는 에스테라제를 고혈중 농도로 함유한다.
무손상 동물로 본 방법을 실행할 필요는 없다. 또한 관류 기관(perfused organ), 다양한 형태의 세포 배양, 예컨대 롤러병(roller bottle)이나 무중력 현탁액 체계(zero gravity suspension system)에서 유지되는 기관 또는 세포주의 생체외(in vitro) 배양을 이용하는 것 역시 본 발명의 범위 내이다. 예를 들어, MT-2 세포는 HIV 전구 약물을 선택하는 표적 조직으로 사용될 수 있다. 따라서, "조직"이라는 용어는, 조직된 세포 구조 또는 자연에서 발견될 수 있는 조직 구조인 것이 바람직하기는 하지만, 이것이 필수적인 것으로 해석되어서는 아니된다. 오히려, "조직"이라는 용어는 특정 근원, 기원 또는 분화 단계의 세포와 같은 것으로 해석되어야 한다.
표적 및 비표적 조직은 사실상 동일 조직이지만, 그 조직은 상이한 생물학적 상태에 있을 것이다. 예를 들어, 본원의 방법은 바이러스 감염 조직(표적 조직)에서 활성을 부여하는 전구 약물을 선택하는 데에 사용되지만, 이 방법은 바이러스에 감염되지 않은 세포(대응되는 비표적 조직)에서 실질적으로 비활성인 채로 남아있 다. 동일한 전략이 예방적 전구 약물, 예컨대 바이러스 감염 시에는 항바이러스성 활성 형태로 대사되지만, 비감염 세포에서는 실질적으로 대사되지 않은 채 남아있는 전구 약물을 선택하는 데에 사용될 수 있다. 유사하게, 전구 약물은 변형 세포와 비변형 대응 조직에서 스크린될 수 있다. 이는 혈액학적 질병, 예컨대 백혈병을 치료하는 전구 약물을 선택하기 위한 대조 실험에 특히 유용하다.
어떠한 특정 작용 이론에 의하여 제한됨이 없이, 조직 선택적인 전구 약물은, 다른 조직이나 세포와 대비되는 바와 같이, 표적 세포에 의하여 선택적으로 흡수되거나 또는 세포 내에서 선택적으로 대사되는 것으로 여겨진다. 본 발명에 있어서 메톡시포스포네이트 전구 약물의 독특한 잇점은, 생리학적 pH에서 이들의 2가 음이온(dianion)으로의 대사가 이러한 전구 약물이 세포의 역행(back out)을 확산시키지 못할 것이라는 점을 보장한다는 데에 있다. 따라서 이러한 전구 약물은 오랜 시간 동안 유효하게 남아 있고, 높은 세포내 농도로 유지됨으로써, 향상된 효능을 나타낸다. 표적 조직내 증강된 활성 메카니즘은 표적 세포에 의한 증강된 흡수, 증강된 세포내 보유 또는 이들 양 메커니즘의 동시 작용을 포함한다. 그러나, 선택성 또는 증강된 전달이 표적 조직에서 발생하는 방법은 중요치 않다. 또한 모약물에 대한 전구 약물의 모든 대사 전환이 표적 조직 내에서 발생한다는 것은 중요하지 않다. 단지 최종 약물 활성-부여 전환이 표적 조직 내에서 일어는 것이 필요하다; 다른 조직 내 대사는 표적 조직내에서 항바이러스 형태로 최종 전환되는 중간물질을 생성할 수 있다.
바람직한 선택성 또는 증강된 전달의 정도는 모화합물과 측정 방법(% 투여량 분포 또는 모약물 농도)에 따라 다양할 것이다. 일반적으로, 모약물이 이미 폭넓은 치료 한계 범위(therapeutic window)를 가지고 있다면, 낮은 정도의 선택성으로도 목적하는 전구 약물에 충분할 수 있다. 반면, 독성 화합물은 선택적인 전구 약물을 확인하기 위하여 더욱 광범위한 스크리닝을 요구할 수 있다. 표적 조직과, 예컨대, 고용량에서 신독성 (nephrotoxic)이 있는 PMEA의 경우에 일차적인 초점이 신장과 림프 조직이 되는 것과 같이, 모화합물이 상대적으로 독성인 것으로 알려진 조직에 대해서만 스크리닝함으로써, 본 발명의 방법에 따른 상대적인 비용을 줄일 수 있다.
보통 선택된 조직 내 전구 약물의 상대적 항바이러스 활성을 측정하는 단계는 표적 및 비표적 조직에서의 전구 약물의 대사 산물의 상대적인 존재 또는 활성을 분석함으로써 달성되는데, 상기 대사 산물은 항바이러스 또는 항종양 활성을 갖는 것이거나 또는 그러한 대사 산물로 전환되는 것으로 알려진 것이다. 따라서, 표적 조직 내에서 항바이러스 또는 항종양 활성 대사 산물, 또는 궁극적으로 표적 조직 내에서 활성 대사 산물을 생성하는 그들의 전구체로 우선적으로 대사되는 전구 약물을 확인하기 위하여, 통상 실질적으로 동일한 시간 동안 조직 내 모약물의 상대량을 측정한다. 항바이러스 화합물의 경우에는, 활성 대사 산물이 포스포네이트 모화합물의 디포스페이트이다. 바이러스 핵산 내로 혼입되어, 연장되는 핵산 가닥의 끝을 잘라서(truncate) 바이러스 복제를 정지시키는 것이 바로 이 대사 산물이다. 전구 약물의 대사 산물은 동화(anabolic) 대사 산물, 이화(catabolic) 대사 산물, 또는 동화작용과 이화작용 양쪽 모두의 산물일 수 있다. 대사 산물이 생성되는 방법은 본 발명의 방법의 실행에서 중요한 것이 아니다.
본 발명의 방법은 항바이러스 또는 항종양 활성을 그 자체로 가지는 대사 산물을 분석하는 것으로 제한되지 않는다. 대신, 활성 대사 산물의 비활성 전구체를 분석할 수 있다. 항바이러스 활성 디포스페이트 대사 산물의 전구체는 모약물의 모노포스페이트, 모약물의 다른 대사 산물의 모노포스페이트(예컨대, 헤테로고리 염기 상의 치환기의 중간 개조 물질), 모약물 그 자체와 포스포릴화 (phosphorylation) 이전에 전구 약물의 모약물로의 전환시 세포에 의해 생겨나는 대사 산물을 포함한다. 전구체는 세포 대사의 결과물이기 때문에 그 구조는 상당히 다양할 수 있다. 그러나, 이러한 정보는 이미 당업자들에게 알려져 있거나 또는 그들에 의해 쉽게 결정될 수 있다.
분석되는 전구 약물이 그 자체로 항종양 또는 항바이러스 활성을 나타내지 않는다면, 원분석(raw assay) 결과에 대한 조정이 요구될 수 있다. 예를 들어, 활성 대사 산물에 대한 비활성 대사 산물의 세포내 프로세싱(intracellular processing)이 시험되는 조직 사이에서 서로 다른 속도로 일어난다면, 비활성 대사 산물을 이용한 원분석 결과는 세포 형태 간의 차이를 고려하도록 조절될 필요가 있으며, 이는 그 관련 매개변수가 비활성 대사 산물의 축적이 아니라, 표적 조직 내 활성의 생성이기 때문이다. 그러나, 적당한 조정을 결정하는 것은 통상적인 기술의 범위 내이다. 따라서, 본원에 따른 방법의 단계 (d)가 그 활성의 측정을 필요로 하는 경우, 활성은 직접 측정되거나 또는 외삽될(extrapolate) 수 있다. 본원에 따른 방법이 그 자체로 활성이 있는 중간 물질을 분석하는 것에만 제한되는 것을 의미하 지는 않는다. 예를 들어, 시험 조직 내의 전구 약물의 부재 또는 감소 역시 분석될 수 있다. 단계 (d)는 전구 약물이 관련 조직과 상호 작용함에 따라 그 전구 약물에 의하여 부여되는 활성의 평가만을 필요로 하며, 이는 외삽법 또는 다른 간접적인 측정법을 토대로 할 수 있다.
본 발명의 방법의 단계 (d)는 전구 약물의 "상대적" 활성을 측정하기 위한 것이다. 이는 각 분석과 모든 분석 또는 일련의 분석이 선택된 비표적 조직을 갖는 런(runs) 역시 필수적으로 함유하여야 할 필요는 없는 것으로 이해될 것이다. 대조적으로, 벤치 마크 비표적 활성을 제공하기 위하여, 비표적 조직 또는 조직, 또는 상기 비표적 조직으로부터 예상되는 결과를 나타내는 연산(algorithm)의 역사적인 제어(historical control)를 이용하는 것은 본 발명의 범위 내이다.
단계 (d)에서 얻은 결과는 그 후 비표적 조직보다 표적 조직 내에서 항바이러스 활성이 더욱 높은 전구 약물을 최적으로 선택 또는 확인하는 데에 사용된다. 추가적인 개발을 위하여 선택되는 것이 바로 이러한 전구 약물이다.
전구 약물 후보의 몇몇 예비 심사는 본 발명의 방법을 실행하기 전에 착수될 수 있는 것으로 이해될 것이다. 예를 들어, 전구 약물은 위장관을 통해 그다지 많이 대사되지 않은 채 통과할 수 있는 것이 필요할 것이고, 혈액에서 실질적으로 안정할 필요가 있을 것이며, 적어도 어느 정도 세포를 투과할 수 있어야 한다. 또한 대부분의 경우에 실질적인 대사 없이 간순환의 초회 통과(first pass)를 마칠 필요가 있을 것이다. 그러한 예비 연구는 선택적인 것으로서, 당업자들에게 널리 알려져 있다.
항바이러스 활성에 대해 상기 기술한 바와 같은 추론이 메톡시포스포네이트 뉴클레오티드 유사체의 항종양 전구 약물에도 또한 동일하게 적용될 수 있다. 이는 예를 들어, PMEA의 구아닐 유사체, PMEG의 전구 약물을 포함한다. 이런 경우에, PMEG와 같은 세포 독성이 있는 포스포네이트는 그 세포 독성이 사실상 항종양 활성을 부여하기 때문에 추구할만한 후보이다.
그 다음으로, 본 발명의 신규한 스크리닝 방법에 의하여 확인된 화합물은 통상적인 전임상 또는 임상 프로그램에 도입되어 원하는 목적이 충족되는지 여부를 확인할 수 있다. 전형적으로, 표적 조직 내 모약물의 활성 또는 농도(% 투여량 분포)가 비표적 조직 내 모화합물보다 2×, 바람직하게는 5× 이상 큰 경우에 전구 약물은 선택적인 것으로 간주된다. 다른 방편으로, 전구 약물 후보는 벤치마크(benchmark) 전구 약물과 비교될 수 있다. 이러한 경우, 선택성은 절대적이라기보다는 상대적이다. 선택성의 정도는 자유재량(discretion)의 문제이기는 하지만, 선택적 전구 약물은 그 원형 (prototype)에 비하여, 표적 조직 내에서 약 10× 농도 또는 활성보다 더 높은 결과를 가져올 것이다.
출발 물질 또는 중간체의 신규한 제조 방법
또한 본원은 본 발명의 바람직한 출발 물질(모약물), PMEA 및 (R)-PMPA의 개선된 제조방법을 포함한다. 전형적으로, 본 방법은 9-(2-히드록시프로필)아데닌 (HPA) 또는 9-(2-히드록시에틸)아데닌 (HEA)을 마그네슘 알콕사이드와 반응시키고, 이어서 보호된 아글리콘 합성 단위체(synthon) ρ-톨루엔-설포닐옥시메틸포스포네이트(토실레이트)를 그 반응 혼합물에 첨가하여, PMPA 또는 PMEA를 각각 회수하는 것을 포함한다.
바람직하게는, HPA는 강화된 또는 분리된 R 거울상 이성질체이다. 키랄성 HPA 혼합물이 사용되는 경우에는, 합성이 완료된 후 R-PMPA가 키랄성 PMPA 혼합물로부터 분리될 수 있다.
통상 토실레이트는 저급 알킬기에 의하여 보호되지만, 다른 적합한 기는 당업자에게 명백할 것이다. 토실화 반응에서 보호기로 작용할 수 있는 전구 약물 포스포네이트 치환기로 사전 치환된(presubstituted) 토실레이트를 사용함으로써, 탈보호 단계를 피하고 전구 약물 또는 중간체를 직접 회수할 수 있도록 하는 것이 편리할 수 있다.
마그네슘 알콕사이드의 알킬기는 중요하지 않으며 임의의 C1-C6 가지형 (branched) 또는 노르말(normal) 알킬이면 되지만, t-부틸 (PMPA의 경우) 또는 이소프로필 (PMEA의 경우)이 바람직하다. 반응 조건 또한 중요하지 않으나, 반응 혼합물을 교반 또는 다른 적당한 휘저음과 함께 약 70-75℃에서 가열하는 것이 바람직하다.
포스포네이트 치환기를 보유하지 않을 경우, 그 생성물은 (대개 토실레이트 보호기가 알킬인 브로모트리메틸실란으로) 탈보호되고, 그런 다음 그 생성물은 결정화 또는 당업자에게 명백한 다른 통상적인 방법으로 회수된다.
헤테로고리 염기
구조식 (3) 및 (4)에 기술된 본 발명의 화합물에서, 헤테로고리 염기 B는 하 기 구조식 중에서 선택된다.
Figure 112006070532142-pat00012
식 중에서,
R15는 H, OH, F, Cl, Br, I, OR16, SH, SR16, NH2, 또는 NHR17이고;
R16은 CH3, CH2CH3, CH2CCH, CH2CHCH2 및 C3H7을 포함하는 C1-C6 알킬 또는 C2-C6 알케닐이고;
R17은 CH3, CH2CH3, CH2CCH, CH2CHCH2 및 C3H7을 포함하는 C1-C6 알킬 또는 C2-C6 알케닐이고;
R18은 N, CF, CCl, CBr, CI, CR19, CSR19, 또는 COR19이고;
R19는 H이거나, 또는 OH, F, Cl, Br 또는 I로 치환되거나 또는 치환되지 않은 Cl-C9 알킬, C2-C9 알케닐, C2-C9 알키닐, Cl-C9 알킬-C1-C9 알콕시 또는 C7-C9 아릴-알킬이고, 따라서 R19는 -CH3, -CH2CH3, -CHCH2, -CHCHBr, -CH2CH2Cl, -CH2CH2F, -CH2CCH, -CH2CHCH2, -C3H7, -CH20H, -CH20CH3, -CH20C2H5, -CH20CCH, -CH20CH2CHCH2, -CH2C3H7, -CH2CH20H, -CH2CH20CH3, -CH2CH2OC2H5, -CH2CH2OCCH, -CH2CH2OCH2CHCH2 및 -CH2CH20C3H7을 포함하고;
R20은 N 또는 CH이고;
R21은 N, CH, CCN, CCF3, CC≡CH 또는 CC(O)NH2이고;
R22는 H, OH, NH2, SH, SCH3, SCH2CH3, SCH2CCH, SCH2CHCH2, SC3H7,
NH(CH3), N(CH3)2, NH(CH2CH3), N(CH2CH3)2, NH(CH2CCH), NH(CH2CHCH2), NH(C3H7), 할로겐 (F, Cl, Br 또는 I) 또는 X이고, 여기서 X는 -(CH2)m(O)n(CH2)mN(R10)2이고, 여기서 각각의 m은 독립적으로 0-2, n은 0-1이고,
R10은 독립적으로
H이거나,
Cl-Cl5 알킬, C2-C15 알케닐, C6-Cl5 아릴알케닐, C6-C15 아릴알키닐, C2-C15 알키닐, C1-C6-알킬아미노-C1-C6 알킬, C5-Cl5 아르알킬, C6-C15 헤테로아르알킬, C5-C6 아릴, C2-C6 헤테로시클로알킬이거나,
C2-C15 알킬, C3-C15 알케닐, C6-C15 아릴알케닐, C3-C15 알키닐, C7-C15 아릴알키닐, C1-C6-알킬아미노-C1-C6 알킬, C5-C15 아르알킬, C6-C15 헤테로알킬 또는 C3-C6 헤테로시클로알킬로서, N6에 이웃하지 않은 알킬 부분의 메틸렌이 -O-로 대체된 것,
선택적으로 2개의 R10이 N과 함께 결합하여 1 또는 2개의 N 헤테로 원자 및 선택적으로 부가적인 O 또는 S 헤테로 원자를 함유하는 포화 또는 불포화 C2-C5 헤테로고리를 형성하는 것,
또는 1 내지 3개의 할로, CN 또는 N3로 치환된 전술한 R10기 중의 하나이지만, 선택적으로 적어도 하나의 R10기는 H가 아닌 것이며;
R23은 H, OH, F, Cl, Br, I, SCH3, SCH2CH3, SCH2CCH, SCH2CHCH2, SC3H7, OR16, NH2, NHR17 또는 R22이고;
R24는 O, S 또는 Se이다.
B 또한 보호 및 비보호 헤테로고리 염기 양쪽 모두를, 특히 퓨린 및 피리딘 염기를 포함한다. 엑소고리(exocyclic) 아민 및 다른 불안정기(labile group)를 위한 보호기는 공지되어 있으며 (Greene et al. "Protective Groups in Organic Synthesis"), 이들은 N-벤조일, 이소부티릴, 4,4'-디메톡시트리틸(DMT) 등을 포함한다. 보호기를 선택하는 문제는 보통 당업자에게 명백할 것이며, 불안정기의 본질 및 그 보호기가 만날 것으로 기대되는 화학 작용, 예컨대 산성, 염기성, 산화, 환원 또는 기타 조건에 따라 달라질 것이다. 보호 종의 예로는 N4-벤조일시토신, N6- 벤조일아데닌, N2-이소부티릴구아닌 등을 들 수 있다.
보호된 염기는 구조식 Xa.1, XIa.1, XIb.1, XIIa.1 또는 XIIIa.1을 갖는다.
Figure 112006070532142-pat00013
식 중에서, R18, R20, R21, R24는 앞서 정의한 바와 같으며; R22가 NH2가 아닌 것을 조건으로 R22A는 R39 또는 R22이고, R23이 NH2가 아닌 것을 조건으로 R23A는 R39 또는 R23이고; R39는 NHR40, NHC(O)R36, 또는 CR41N(R38)2이고, 여기서 R36은 할로겐, 메틸, 에틸, 메톡시, 에톡시, 히드록시 및 시아노 중에서 선택되는 1 또는 2개의 원자 또는 기로 치환된 C1-C19 알킬, C1-C19 알케닐, C3-C10 아릴, 아다만토일, 알킬아닐, 또는 C3-C10 아릴이고; R38은 C1-C10 알킬이거나, 또는 2개의 R38이 함께 1-모르포리노, 1-피페리딘 또는 1-피롤리딘이고; R40은 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, t-부틸, 펜틸, 헥실, 옥틸 및 데카닐을 포함하는 C1-C1a 알킬이고; 및 R41은 수소 또는 CH3이다.
구조식 XIa.1 및 XIb.1의 염기에서, R39가 R22A 또는 R23A에 존재하면, 동일 염기 상에 있는 R39기 둘다는 일반적으로 같아지게 동일할 것이다. R36의 예로는 페닐, 전술한 R36 아릴 치환기 중의 하나로 치환된 페닐, -C10H15 (C10H15가 2-아다만토일), -CH2-C6H5, -C6H5, -CH(CH3)2, -CH2CH3, 메틸, 부틸, t-부틸, 헵타닐, 노나닐, 운데카닐 또는 운데세닐을 들 수 있다.
구체적인 염기는 히포크산틴, 구아닌, 아데닌, 시토신, 이노신, 티민, 우라실, 크산틴, 2-아미노퓨린, 2,6-디아미노퓨린, 2-아미노-6-클로로퓨린, 히포크산틴, 이노신 및 크산틴의 8-아자 유도체; 아데닌, 구아닌, 2-아미노퓨린, 2,6-디아미노퓨린, 2-아미노-6-클로로퓨린, 히포크산틴, 이노신 및 크산틴의 7-데아자(deaza)-8-아자 유도체; 2-아미노퓨린, 2,6-디아미노퓨린, 2-아미노-6-클로로퓨린, 히포크산틴, 이노신 및 크산틴의 1-데아자 유도체; 2-아미노퓨린, 2,6-디아미노퓨린, 2-아미노-6-클로로퓨린, 히포크산틴, 이노신 및 크산틴의 7-데아자 유도체; 2-아미노퓨린, 2,6-디아미노퓨린, 2-아미노-6-클로로퓨린, 히포크산틴, 이노신 및 크산틴의 3-데아자 유도체; 6-아자시토신; 5-플루오로시토신; 5-클로로시토신; 5-요오도시토신; 5-브로모시토신; 5-메틸시토신; 5-브로모비닐우라실; 5-플루오로우라실; 5-클로로우라실; 5-요오도우라실; 5-브로모우라실; 5-트리플루오로메틸우라실; 5-메톡시메틸우라실; 5-에티닐우라실 및 5-프로피닐우라실을 포함한다.
바람직하게는, B는 구아닐, 3-데아자구아닐, 1-데아자구아닐, 8-아자구아닐, 7-데아자구아닐, 아데닐, 3-데아자아데닐, 1-데아자아데닐, 8-아자아데닐, 7-데아자아데닐, 2,6-디아미노퓨리닐, 2-아미노퓨리닐, 6-클로로-2-아미노퓨리닐 및 6-티오-2-아미노퓨리닐 중에서 선택되는 9-퓨리닐 잔기이거나, 또는 B'은 시토시닐, 5-할로시토시닐, 및 5-(C1-C3-알킬)시토시닐 중에서 선택되는 1-피리미디닐 잔기이다.
바람직한 B기는 하기 구조식을 갖는다.
Figure 112006070532142-pat00014
식 중에서,
R22는 독립적으로 할로, 산소, NH2, X 또는 H이나, 선택적으로 적어도 하나의 R22는 X이고;
X는 (CH2)m(O)n(CH2)mN(R1O)2이고 여기서 m은 0-2, n은 0-1이고,
R10은 독립적으로
H이거나,
Cl-Cl5 알킬, C2-C15 알케닐, C6-Cl5 아릴알케닐, C6-C15 아릴알키닐, C2-C15 알키닐, C1-C6-알킬아미노-C1-C6 알킬, C5-Cl5 아르알킬, C6-C15 헤테로아르알킬, C5-C6 아릴, C2-C6 헤테로시클로알킬이거나,
C2-C15 알킬, C3-C15 알케닐, C6-C15 아릴알케닐, C3-C15 알키닐, C7-C15 아릴알키닐, C1-C6-알킬아미노-C1-C6 알킬, C5-C15 아르알킬, C6-C15 헤테로알킬 또는 C3-C6 헤테로시클로알킬인 것으로서, N6에 이웃하지 않은 알킬 부분의 메틸렌이 -O-로 대체된 것,
선택적으로 2개의 R10이 N과 함께 결합되어 1 또는 2개의 N 헤테로 원자 및 선택적으로 부가적인 O 또는 S 헤테로 원자를 함유하는 포화 또는 불포화 C2-C5 헤테로고리를 형성하는 것이거나,
또는 전술한 R10기 중의 하나는 1 내지 3개의 할로, CN 또는 N3로 치환된 것이지만, 선택적으로 적어도 하나의 R10기는 H가 아닌 것이고;
헤테로고리 핵이 퓨린에서 하나 이하의 Z로 변하는 것을 조건으로, Z는 N 또는 CH이고;
E기는 메톡시포스포네이트 뉴클레오티드 유사체에 사용되는 아글리콘을 나타낸다. 바람직하게는, E기는 -CH2OCH(CH3)CH2- 또는 -CH2OCH2CH2-이다. 또한, 아글리콘의 키랄 중심의 측기는 실질적으로 오로지 (R) 구조인 것 (강화된 (S) 거울상 이성질체인 히드록시메틸의 경우는 제외)이 바람직하다 .
R1은 구조 -OR35 또는 -OR6을 갖는 생체내에서 가수분해될 수 있는 옥시에스테르이며, 여기서 R35는 참고문헌으로 본원의 내용에 포함되는 미국특허 제5,798,340호의 칼럼 64, 49줄에 정의되어 있는 것이며, R6은 앞에 정의되어 있다. 바람직하게는, R1은 아릴옥시, 보통 (R6에서 정의된 것과 같은) 파라-치환 또는 비치환 페녹시이다.
선택적으로 약 5개 미만의 원자에 의하여 아미데이트 N에 연결된 임의의 카르복시기가 에스테르화되는 것을 조건으로 R2는 아미노산 잔기이다. R2는 대개 하기 구조식을 갖는다.
Figure 112006070532142-pat00015
식 중에서,
n은 1 또는 2이고;
R11은 R6 또는 H이고; 바람직하게는 R6
Figure 112006070532142-pat00016
C3-C9 알킬; OH, 할로겐, O 또는 N으로 독립적으로 치환된 C3-C9 알킬; C3-C6 아릴; OH, 할로겐, O 또는 N으로 독립적으 로 치환된 C3-C6 아릴; 또는 OH, 할로겐, O 또는 N으로 독립적으로 치환된 C3-C6 아릴알킬이고;
R12는 독립적으로 H이거나, 또는 OH, O, N, COOR11 및 할로겐으로 구성된 군 중에서 독립적으로 선택되는 치환기로 치환되거나 또는 치환되지 않은 C1-C9 알킬; OH, O, N, COOR11 및 할로겐으로 구성된 군 중에서 독립적으로 선택되는 치환기로 치환되거나 또는 치환되지 않은 C3-C6 아릴; 또는 OH, O, N, COOR11 및 할로겐으로 구성된 군 중에서 독립적으로 선택되는 치환기로 치환되거나 또는 치환되지 않은 C3-C9 아릴-알킬이고;
R13은 독립적으로 C(O)-OR11; 아미노; 아미드; 구아니디닐; 이미다졸릴; 인돌릴; 설폭사이드; 포스포릴; Cl-C3 알킬아미노; Cl-C3 알킬디아미노; Cl-C6 알케닐아미노; 히드록시; 티올; Cl-C3 알콕시; Cl-C3 알크티올; (CH2)nCOOR11 ; OH, 할로겐, SH, NH2, 페닐, 히드록시페닐 또는 C7-C10 알콕시페닐로 치환된 또는 비치환된 Cl-C6 알킬; OH, 할로겐, SH, NH2, 페닐, 히드록시페닐 또는 C7-C10 알콕시페닐로 치환된 또는 비치환된 C2-C6 알케닐; 및 OH, 할로겐, SH, NH2, 페닐, 히드록시페닐 또는 C7-C10 알콕시페닐로 치환된 또는 비치환된 C6-C12 아릴이고; 및
R14는 H 또는 C1-C9 알킬, 또는 OH, 할로겐, COOR11, O 또는 N으로 독립적으로 치환된 Cl-C9 알킬; C3-C6 아릴; OH, 할로겐, COOR11, O 또는 N으로 독립적으로 치환된 C3-C6 아릴; 또는 OH, 할로겐, COOR11, O 또는 N으로 독립적으로 치환된 C3-C6 아릴알킬이다.
바람직하게는, R11은 C1-C6 알킬, 가장 바람직하게는 이소프로필이고, R13은 천연 아미노산 측쇄, n=1, R12는 H이고, R14는 H이다. 구조식 (2)의 화합물에 있어서, 본 발명은 페녹시 에스테르와 이소필 에스테르가 -OH로 가수분해되어 있는 대사 산물을 포함한다. 유사하게, 화합물 (5a), (5b) 및 (6)의 탈에스테르화 강화 포스포노아미데이트 대사 산물이 본 발명의 범위에 포함된다.
아릴과 "O" 또는 "N" 치환은 미국특허 제5,798,340호의 칼럼 16, 42 내지 58줄에 정의되어 있다.
전형적으로, 아미노산은 천연 아미노산 또는 l 아미노산이다. 적합한 특정예들이 미국특허 제5,798,340호, 예컨대 표 4와 칼럼 8 내지 10에 기재되어 있다.
반대로 명시되지 않는 한, 본원에서 사용되는 알킬은 노르말, 2차, 3차 또는 고리(cyclic) 탄화수소이다. 반대로 명시되지 않는 한, 알킬은 C1-C12이다. 예로는 -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH2CH2CH3), -CH2CH(CH3)2, -CH(CH3)CH2CH3, -C(CH3)3, -CH2CH2CH2CH2CH3, -CH(CH3)CH2CH2CH3, -CH(CH2CH3)2, -C(CH3)2CH2CH3), -CH(CH3)CH(CH3)2, -CH2CH2CH(CH3)2), -CH2CH(CH3)CH2CH3, -CH2CH2CH2CH2CH2CH3, -CH(CH3)CH2CH2CH2CH3, -CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3),-C(CH3)2CH2CH2CH3, -CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3, -CH(CH3)CH2CH(CH3)2, -C(CH3)(CH2CH3)2, -CH(CH2CH3)CH(CH3)2, -C(CH3)2CH(CH3)2, 및 -CH(CH3)C(CH3)3을 들 수 있다. 알케닐과 알키닐은 동일한 양상으로 정의되지만, 각각 적어도 하나의 이중 결합 또는 삼중 결합을 함유한다.
에놀기 또는 케토기가 개시되는 경우, 대응하는 호변체 역시 교시되는 것으로 해석된다.
본 발명의 전구 약물 화합물은 유리 염기 또는 미국특허 제5,798,340호에 열거되어 있는 다양한 염의 형태로 제공되며, 미국특허 제5,798,340호에 기술된 것과 같은 약제학적 제품으로서 사용하기 위하여 약제학적으로 허용 가능한 부형제 또는 용매화 희석제와 배합된다. 이들 전구 약물은 모약물에 대하여 이미 확립된 활용도와 항바이러스성을 갖는다 (미국특허 제5,798,340호와 메톡시포스포네이트 뉴클레오티드 유사체에 관한 다른 인용문헌 참조). 구조식 (4)의 부분 입체 이성질체는 적어도, 본원의 연구에서 밝혀진 바와 같은 상대적으로 비선택적인 특성에 무관하게, 생체내에서의 가수분해에 의한 모약물의 화학적 생산의 중간체로서 유용하다.
본 발명은 다음의 실시예를 참고로 하여 더욱 완전하게 이해될 것이다.
실시예 1a
Figure 112006070532142-pat00017
마그네슘 이소프로폭사이드를 이용하여 아데닌에서 PMEA로. DMF(41.9ml) 중 아데닌(16.8g, 0.124mol)의 현탁액에 에틸렌 카보네이트(12.1g, 0.137mol)와 수산화나트륨(.100g, 0.0025mol)을 첨가하였다. 혼합물을 130℃에서 밤새도록 가열하였다. 반응물을 50℃ 이하로 냉각시키고 톨루엔(62.1ml)을 첨가하였다. 슬러리를 2시간 동안 5℃로 추가 냉각시키고, 여과, 및 톨루엔(2x)으로 세척하였다. 습윤 고체를 진공으로 65℃에서 건조시켜 회색이 도는 흰색 고체로서 20.0g(90%)의 9-(2-히드록시에틸)아데닌을 얻었다. Mp: 238-240℃.
Figure 112006070532142-pat00018
9-(2-히드록시에틸)아데닌(HEA)(20.0g, 0.112mol)을 DMF(125ml)중에 현탁시켜 80℃까지 가열하였다. 마그네슘 이소프로폭사이드(11.2g, 0.0784mol), 또는 선택적으로 마그네슘 t-부톡사이드를 혼합물에 첨가하고 이어서 한시간에 걸쳐 디에틸 p-톨루엔설포닐옥시메틸포스포네이트(66.0g, 0.162mol)를 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 7시간 동안 교반하였다. 30ml의 휘발성 물질을 진공 증류를 통해 제거하고, 반응물에 30ml의 새로운 DMF를 더 넣었다. 실온까지 냉각시킨 후, 브로모트리 메틸실란(69.6g, 0.450mol)을 첨가하고 혼합물을 6시간 동안 80℃로 가열하였다. 반응물을 농축시켜 진한 검(gum)을 얻었다. 이 검을 360ml 물에 용해시키고, 120ml의 디클로로메탄을 이용하여 추출하였으며, 수산화나트륨으로 pH 3.2로 조절한 다음, 생성된 슬러리를 실온에서 밤새도록 교반하였다. 슬러리를 한시간 동안 4℃로 냉각시켰다. 여과하여 고체를 분리하고, 물(2x)로 세척한 다음 56℃에서 진공으로 건조시켜 20g(65.4%)의 9-[2-(포스포노메톡시)에틸]아데닌(PMEA)을 백색 고체로서 얻었다. Mp:>200℃dec. 1H NMR(D2O)·3.49(t,2H); 3.94(t,2H); 4.39(t,2H); 8.13(s,1H); 8.22(s,1H).
실시예 1b
Figure 112006070532142-pat00019
마그네슘 t-부톡사이드를 이용하여 아데닌에서 PMPA로. DMF(41.9ml) 중 아데닌(40g, 0.296mol)의 현탁액에 (R)-프로필렌 카보네이트(34.5g, 0.338mol)와 수산화나트륨(.480g, 0.012mol)을 첨가하였다. 혼합물을 130℃에서 밤새도록 가열하였다. 반응물을 100℃까지 냉각시키고 톨루엔(138ml)을 첨가한 다음 반응 온도를 100-110℃로 유지하면서 메탄설폰산(4.7g, 0.049mol)을 첨가하였다. 균질한 용액을 얻기 위하여 추가로 톨루엔(114ml)을 첨가하였다. 용액을 7시간에 걸쳐 3℃까지 냉 각시킨 다음 3℃에서 한시간 동안 유지시켰다. 생성된 고체를 여과하여 분리하고 아세톤(2x)으로 세척하였다. 습윤 고체를 진공으로 80℃에서 건조시켜 회색이 도는 흰색 고체로서 42.6g(75%)의 (R)-9-[2-(히드록시)프로필]아데닌(HPA)을 얻었다. Mp: 188-190℃.
Figure 112006070532142-pat00020
(R)-9-[2-(히드록시)프로필]아데닌(HPA)(20.0g, 0.104mol)을 DMF(44.5ml)중에 현탁시켜 65℃까지 가열하였다. 마그네슘 t-부톡사이드(14.2g, 0.083mol), 또는 선택적으로 마그네슘 이소프로폭사이드를 한시간 동안 혼합물에 첨가하고 이어서 온도를 78℃에서 유지시키며 두시간에 걸쳐 디에틸 p-톨루엔설포닐옥시메틸포스포네이트(66.0g, 0.205mol)를 첨가하였다. 혼합물을 75℃에서 4시간 동안 교반하였다. 50℃ 이하로 냉각시킨 후, 브로모트리메틸실란(73.9g, 0.478mol)을 첨가하고 혼합물을 3시간 동안 77℃로 가열하였다. 종료시, 반응물을 80℃까지 가열하고 대기압 증류를 통해 휘발성 물질을 제거시켰다. 50℃에서 잔사를 물(120ml)에 용해시킨 다음, 에틸 아세테이트(101ml)로 추출하였다. 수산화나트륨을 이용하여 수성상의 pH를 pH 1.1까지 조절하고, 인증 (R)-PAPA로 시드(seed)하며, 수성층의 pH를 수산화나트륨으로 pH 2.1까지 조절하였다. 생성된 슬러리를 실온에서 밤새도록 교반하였다. 슬러리를 세시간 동안 4℃로 냉각시켰다. 여과하여 고체를 분리하고, 물(60ml)로 세척한 다음 56℃에서 진공으로 건조시켜 18.9g(63.5%)의 조 (R)-9-[2-(포스포노메톡시)프로필]아데닌(PMPA)을 회색이 도는 백색 고체로서 얻었다.
모든 고체가 물(255ml) 중에 용해될 때까지 조 (R)-9-[2-(포스포노메톡시)프로필]아데닌(PMPA)을 환류에서 가열하였다. 용액을 4시간에 걸쳐 실온까지 냉각시켰다. 생성된 슬러리를 세시간 동안 4℃에서 냉각시켰다. 여과하여 고체를 분리하고, 물(56ml)로 세척한 다음 50℃에서 진공으로 건조시켜 15.0g(50.4%)의 (R)-9-[2-(포스포노메톡시)프로필]아데닌(PMPA)을 백색 고체로서 얻었다. Mp: 278-280℃.
실시예 2
GS-7171(III)의 제조
Figure 112006070532142-pat00021
유리속 입힌 반응기에 무수 PMPA, (I)(14.6kg, 50.8mol), 페놀(9.6kg, 102mol) 및 1-메틸-2-피롤리디논(39kg)을 담았다. 혼합물을 85℃까지 가열하고 트리에틸아민(6.3kg, 62.3mol)을 첨가하였다. 그 다음 1-메틸-2-피롤리디논(1.6kg) 중 1,3-디시클로헥실카르보디이미드(17.1kg, 82.9mol)의 용액을 100℃에서 6시간에 걸쳐 첨가하였다. 16시간 동안 가열을 지속하였다. 반응물을 45℃까지 냉각하고, 물(29kg)을 첨가한 다음 25℃까지 냉각시켰다. 여과에 의해 반응물로부터 고체를 제거하고 물(15.3kg)로 세척하였다. 혼합 여과물 및 세척물을 감압하에 황갈색 슬러리로 농축시키고, 물(24.6kg)을 첨가시켰으며 NaOH(물 중 25%)를 이용하여 pH=11까지 조절하였다. 규조토(2kg)를 통한 여과에 의해 미세물질을 제거하고 물(4.4kg)로 세척하였다. 에틸 아세테이트(28kg)를 이용하여 혼합 여과물 및 세척물을 추출하였다. 수성 용액의 pH를 HCl(물 중 37%)(4kg)로써 3.1까지 조절하였다. 여과에 의해 조 II를 분리하고 메탄올(12.7kg)로 세척하였다. 조 II 습윤 케이크를 메탄올(58kg) 중에 슬러리화하였다. 여과하여 고체를 분리하고, 메탄올(8.5kg)로 세척한 다음 감압하에 건조시켜 9.33kg의 II를 백색 분말로서 얻었다: 1H NMR(D2O) δ1.2 (d,3H), 3.45(q,2H), 3.7(q,2H), 4(m,2H), 4.2(q,2H), 4.35(dd,2H), 6.6(d,2H), 7(t,1H), 7.15(t,2H), 8.15(s,1H), 8.2(s,1H); 31P NMR(D2O) δ15.0(분리됨).
GS-7171(III). (반응식 1) 유리속 입힌 반응기에 모노페닐 PMPA, (II)(9.12kg, 25.1mol) 및 아세토니트릴(30.7kg)을 담았다. 티오닐 클로라이드(6.57kg, 56.7mol)를 50℃ 미만으로 첨가하였다. 고체가 용해될 때까지 혼합물을 75℃에서 가열하였다. 반응 온도를 80℃까지 올리고 질소하에 대기압 증류에 의해 휘발성 물질(11.4kg)을 수집하였다. 포트 잔사를 25℃까지 냉각시키고, 디클로로메탄(41kg)을 첨가한 다음 -29℃까지 냉각시켰다. 디클로로메탄(36kg) 중 (L)-알라닌 이소프로필 에스테르(7.1kg, 54.4mol) 용액을 -18℃에서 60분에 걸쳐 첨가시킨데 이어, -18 내지 -11℃에서 30분에 걸쳐 트리에틸아민(7.66kg, 75.7mol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온까지 가온시키고 소듐 디하이드로겐포스페이트 용액(물 중 10%, 각 세척당 15.7kg)을 이용하여 5회 세척하였다. 유기 용액을 무수 황산나트륨(18.2kg)으로 건조시키고, 여과한 다음 디클로로메탄(28kg)으로 세척하고 감압하에 오일로 농축시켰다. 오일에 아세톤(20kg)을 채우고 감압하에 혼합물을 농축시켰다. 생성된 오일에 아세톤(18.8kg)을 채웠다. 생성 용액의 절반을, 22kg 실리카겔 60, 230 내지 400 메시의 38x38cm 베드를 통하여 크로마토그래피로 정제하였다. 480kg 아세톤으로 칼럼을 용출시켰다. 새로운 실리카겔 및 아세톤을 이용하여 오일의 절반에 대한 두번째 정제를 반복하였다. 분획을 포함하는 깨끗한 생성물을 감압하에 오일로 농축시켰다. 오일에 아세토니트릴(19.6kg)을 채우고 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 아세토니트릴(66.4kg)을 채우고 용액을 0 내지 -5℃에서 16시간 동안 냉장하였다. 여과하여 고체를 제거하고 감압하에 여과물을 농축시켜 진한 오일로서 5.6kg의 III을 얻었다: 1H NMR(CDCl3) δ1.1(m,12H), 3.7(m,1H), 4.0(m,5H), 4.2(m,1H), 5.0(m,1H), 6.2(s,2H), 7.05(m,5H), 8.0(s,1H), 8.25(d,1H); 31P NMR(CDCl3) δ21.0, 22.5(분리됨).
GS-7171(III)을 얻는 대안적인 방법
Figure 112006070532142-pat00022
모노페닐 PMPA(II). 환류 응축기와 질소 주입구가 있는 둥근 바닥 플라스크를 70℃ 오일 전해조에 놓았다. 플라스크에 무수 PMPA(I)(19.2g, 67mmol), N,N-디메틸포름아미드(0.29g, 3.3mmol) 및 테트라메틸렌 설폰(40ml)을 채웠다. 티오닐 클로라이드(14.2g, 119mmol)를 4시간에 걸쳐 첨가하였다. 동일한 시간에 걸쳐 100℃까지 가열을 증가시켰다. 균질한 용액이 생성되었다. 페녹시트리메틸실란(11.7g, 70mmol)을 5분 동안 용액에 첨가하였다. 100℃ 오일 전해조에서의 가열을 2시간 동안 더 지속시켰다. 반응물을 0℃에서 냉각시키며 빠르게 교반중인 아세톤(400ml)에 부었다. 여과하여 고체를 분리하고, 감압하에 건조시켰으며 메탄올(75ml) 중에 용해시켰다. 포타슘 히드록사이드 용액(45% aq.)을 이용하여 얼음/물 중에 냉각시키며 용액의 pH를 3.0까지 조절하였다. 생성된 고체를 여과하여 분리하고, 메탄올로 세척한 다음 감압하에 건조시켜 백색 분말로서 20.4g의 II를 얻었다(반응식 2).
GS-7171(III). 모노페닐 PMPA(II)(3g, 8.3mmol), 테트라메틸렌 설폰(5ml) 및 N,N-디메틸포름아미드(한방울)를 40℃ 오일 전해조에 위치한 둥근 바닥 플라스크에서 혼합시켰다. 티오닐 클로라이드(1.96g, 16.5mmol)를 첨가하였다. 20분 후, 투명한 용액을 열로부터 이동시키고, 디클로로메탄(10ml)으로 희석시킨 다음 -10℃에서 디클로로메탄(20ml) 중 (L)-알라닌 이소프로필 에스테르(5g, 33mmol)와 디이소프로필에틸아민(5.33g, 41mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온까지 가온시키고 소듐 디하이드로겐포스페이트 용액(10% aq., 각 세척 당 10ml)으로 3회 세척하였다. 무수 황산나트륨를 통해 유기 용액을 건조시키고 감압하에 오일로 농축시켰다. 오일을 푸마르산(0.77g, 6.6mmol) 및 아세토니트릴(40ml)과 혼합시켜 환류로 가열시킴으로써 균질한 용액을 얻었다. 용액을 얼음 전해조에서 냉각시키고 여과하여 고체를 분리하였다. 고체 GS-7171 푸마레이트 염을 감압하에 3.7g으로 건조시켰다. 이 염(3.16g, 5.3mmol)을 디클로로메탄(30ml) 중에 현탁시키고 고체가 용해될 때까지 탄산칼륨 용액(5ml, 2.5M 수용액)과 함께 교반하였다. 유기층을 분리한 다음, 물(5ml)로 세척하고, 무수 황산나트륨를 통해 건조시켰으며, 감압하에 농축시켜 황갈색 포말로서 2.4g의 III을 얻었다.
실시예 3
A. 회분 용출 크로마토그래피에 의한 부분 입체 이성질체 분리
GS-7171(III)의 부분 입체 이성질체들을, Chiralpak AS, 20㎛, 21x50mm 가드(guard) 칼럼을 갖는 시판 Chiralpak AS, 20㎛, 21x50mm 세미-프랩(semi-preparative) HPLC 칼럼을 사용하여, 회분 용출 크로마토그래피로 분리하였다. Chiralpak
Figure 112006070532142-pat00023
AS는 Diacel사에서 제조되는 독점적인 충전 물질로서, Chiral Technologies, Inc.에 의하여 북미에서 판매된다(미국 특허 5,202,433, RE 35,919, 5,434,298, 5,434,299 및 5,498,752호). Chiralpak AS는 실리카겔 지지체상에 코팅된 아밀로세트리스[(S)-α-메틸벤질 카바메이트]로 구성된 키랄 고정상(CSP)이다.
GS-7171 부분 입체 이성질체 혼합물을 이동상에 용해시키고, 약 1g 분취량의 GS-7171을 크로마토그래피 시스템상에 펌핑하였다. GS-7339로 표시된, 소망하지 않는 부분 입체 이성질체가 칼럼으로부터 용출되는 첫번째 주요 넓은(약 15분 지속) 피크를 이룬다. GS-7339 피크의 용출이 완료되면, 이동상을 즉시 100% 메틸 알코올로 바꾸어, 이는 GS-7340(IV)로 표시된, 소망하는 부분 입체 이성질체가 메틸 알코올 용매 전면과 함께 칼럼으로부터 뾰족한 피크로 용출되도록 하였다. 총체적인 순환 시간을 단축시키기 위하여 메틸 알코올을 사용하였다. 첫번째 쌍을 주입한 후에, 부분 입체 이성질체 양자 모두는 정제된 부분 입체 이성질체 중 하나를 함유하는 큰 단일 분획으로서 수집되었다(>99.0% 단일 부분 입체 이성질체). 진공으로 이동상 용매를 제거하여, 무른 포말 형태로 정제된 부분 입체 이성질체를 얻었다.
출발 GS-7172 질량의 약 95%가 2종의 부분 입체 이성질체 분획으로 회수되었다. GS-7340 분획이 회수된 총 질량의 약 50%를 구성한다.
크로마토그래피 조건은 다음과 같았다:
이동상 (초기) : GS-7171-아세토니트릴:이소프로필 알코올(90:10)
(최종) : 100% 메틸 알코올
유출량 : 10ml/분
실행시간 : 약 45분
검출 : 275nm에서 UV
온도 : 주위 온도
용출 프로파일 : GS-7339 (부분 입체 이성질체 B)
: GS-7340 (부분 입체 이성질체 A; (IV))
B. SMB 크로마토그래피에 의한 GS-7171의 부분 입체 이성질체 분리
모의 동작 베드(SMB) 크로마토그래피에 대한 일반적인 설명은 Strube 등, "Organic Process Research and Development" 2:305-319(1998)을 참고한다.
GS-7340(IV). 10cm x 5cm 베드 패킹(Chiral Technologies Inc., 실리카겔 위에 코팅된 20 미크론 Chiralpak AS)(1.2kg) 위에서 모의 동작 베드 크로마토그래피로 GS-7171(III) 2.8kg을 정제하였다. 생성물 함유 분획을 IV의 아세토니트릴(2.48kg) 용액으로 농축시켰다. 상기 용액을 방치하여, 아세토니트릴로 젖은 결정성 덩어리로 응고시켰다. 결정성 덩어리를 감압하에 건조시켜 황갈색 결정성 분말, 1.301kg IV, 98.7% 부분 입체 이성질체 순도를 얻었다: mp 117-120℃; 1H NMR(CHCl3) δ1.15(m,12H), 3.7(t,1H), 4.0(m,5H), 4.2(dd,1H), 5.0(m,1H), 6.05(s,2H), 7.1(m,5H), 8.0(s,1H), 8.2(s,1H); 31P NMR(CDCl3) δ21.0(분리됨).
C. C18 RP-HPLC에 의한 부분 입체 이성질체 분리
GS-7171(III)을 다음의 약식 프로토콜에 따라 역상 HPLC로 크로마토그래피하여, 부분 입체 이성질체들을 분리하였다.
크로마토그래피 칼럼: Phenomenex Luna™C18(2), 5㎛, 포어 크기 100Å, (Phenomenex, Torrance, CA) 또는 등가물
가드 칼럼: Pellicular C18 (Alltech, Deerfield, IL) 또는 등가물
이동상: A-0.02%(85%) H3PO4 수용액 : 아세토니트릴 (95:5)
B-0.02%(85%) H3PO4 수용액 : 아세토니트릴 (50:50)
이동상 구배
Figure 112006070532142-pat00024
실행시간 50분
평형 지연시간 100% 이동상 A에서 10분
유속 1.2ml/분
온도 주위 온도
검출 260nm에서 UV
시료 용액 20mM 소듐 포스페이트 완충액, pH 6
보류 시간 GS-7339, 약 25분
GS-7340, 약 27분
D. 결정화에 의한 부분 입체 이성질체 분리
GS-7340(IV). GS-7171의 아세토니트릴 용액을 감압하에 호박색 포말(14.9g)로 농축시켰다. 포말을 아세토니트릴(20ml)에 용해시키고 IV 결정으로 시드(seed)하였다. 혼합물을 밤새도록 교반하고, 5℃까지 냉각시킨 다음 여과하여 고체를 분리시켰다. 고체를 건조시켜, 백색 결정으로서 2.3g IV, 98% 부분 입체 이성질체 순도(31P NMR)로 얻었다: 1H NMR(CDCl3) δ1.15(m,12H), 3.7(t,1H), 3.95(m,2H), 4.05(m,2H), 4.2(m,2H), 5.0(m,1H), 6.4(s,2H), 7.1(m,5H), 8.0(s,1H), 8.2(s,1H),; 31P NMR(CHCl3) δ19.5(분리됨). 이 생성물로부터 선택된 단결정의 X-선 결정 분석으로 다음과 같은 데이터를 얻었다:
결정 색, 습성(Habit) 무색, 칼럼
결정 크기 0.25 x 0.12 x 0.08mm
결정계 사방정계
격자형 원시형
격자 매개변수 a = 8.352(1)Å
b = 15.574(2)Å
c = 18.253(2)Å
d = 2374.2(5)
Figure 112006070532142-pat00025
공간군 P212121(#19)
Z 수치 4
Dcalc 1.333g/cm3
F000 1008.00
μ(MoKα) 1.60cm-1
실시예 4
GS-7340 푸마레이트 염의 제조
GS-7340-02(V). (반응식 1) 유리속 입힌 반응기에 GS-7340(IV)(1.294kg, 2.71mol), 푸마르산(284g, 2.44mol) 및 아세토니트릴(24.6kg)을 담았다. 고체가 용해되도록 혼합물을 환류로 가열하고, 뜨거운 동안 여과한 다음 16시간 동안 5℃까지 냉각시켰다. 생성물을 여과하여 분리하고, 아세토니트릴(9.2kg)을 이용하여 세척하였으며 백색 고체로서 1329g (V)로 건조시켰다: mp 119.7-121.1℃; [α]D 20-41.7°(c 1.0, 아세트산).
실시예 5
GS-7120(VI)의 제조
Figure 112006070532142-pat00026
5L 둥근 바닥 플라스크에 모노페닐 PMPA, (II)(200g, 0.55mol) 및 아세토니트릴(0.629kg)을 담았다. 티오닐 클로라이드(0.144kg, 1.21mol)를 27℃ 이하로 첨가하였다. 고체가 용해될 때까지 70℃에서 혼합물을 가열하였다. 질소하 대기압 증류에 의해 휘발성 물질(0.45L)을 제거하였다. 포트 잔사를 25℃까지 냉각시키고, 디클로로메탄(1.6kg)을 첨가한 다음 혼합물을 -20℃까지 냉각시켰다. 디클로로메탄(1.33kg) 중 (L)-α아미노부티르산 에틸 에스테르(0.144kg, 1.1mol) 용액을 -20 내지 -10℃에서 18분에 걸쳐 첨가시킨데 이어 트리에틸아민(0.17kg, 1.65mol)을 -8 내지 -15℃에서 15분에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온까지 가온시키고 소듐 디하이드로겐포스페이트 용액(10% aq., 각 세척 당 0.31L)을 이용하여 4회 세척하였다. 무수 황산나트륨(0.5kg)로써 유기 용액을 건조 및 여과시켰다. 디클로로메탄(0.6kg)으로 고체를 세척하고 혼합 여과물 및 세척물을 감압하에 오일로 농축시켰다. 1.2kg 실리카겔 60, 230 내지 400 메시의 15 x 13cm 베드위에서 크로마토그 래피에 의해 오일을 정제하였다. 디클로로메탄 및 메탄올 구배로 칼럼을 용출시켰다. 분획을 포함하는 생성물을 감압하에 농축시켜 황갈색 포말로서 211g VI(반응식 3)을 얻었다.
실시예 5a
회분 용출 크로마토그래피에 의한 GS-7120의 부분 입체 이성질체 분리
실시예 3A에서, 다음을 제외하고, GS-7171에 대하여 기술한 조건을 이용하여 부분 입체 이성질체 혼합물을 정제하였다.
이동상 (초기): GS-7120-아세토니트릴 : 이소프로필 알코올(98:2)
(최종): 100% 메틸 알코올
용출 프로파일 : GS-7341 (부분 입체 이성질체 B)
: GS-7342 (부분 입체 이성질체 A)
실시예 6
결정화에 의한 GS-7120의 부분 입체 이성질체 분리
1L 둥근 바닥 플라스크에 모노페닐 PMPA, (II)(50g, 0.137mol) 및 아세토니트릴(0.2L)을 담았다. 고체가 용해될 때까지 혼합물을 가열 환류하였다. 질소하 대기압 증류에 의해 휘발성 물질(0.1L)을 제거하였다. 포트 잔사를 25℃까지 냉각하고, 디클로로메탄(0.2kg)을 첨가한 다음 혼합물을 -20℃까지 냉각시켰다. 디클로로메탄(0.67kg) 중 (L)-α아미노부티르산 에틸 에스테르(0.036kg, 0.275mol) 용액을 -20 내지 -8℃에서 30분에 걸쳐 첨가하고, 이어서 트리에틸아민(0.042kg, 0.41mol)을 -6℃ 미만에서 10분에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온까지 가온시키고 소 듐 디하이드로겐포스페이트 용액(10% 수용액, 각 세척 당 0.075L)으로 4회 세척하였다. 유기 용액을 무수 황산나트륨(0.1kg)으로 건조시키고 여과하였다. 에틸 아세테이트(0.25L)를 이용하여 고체를 세척하고 혼합 여과물 및 세척물을 감압하에 오일로 농축시켰다. 오일을 에틸 아세테이트(0.25L)로 희석시키고, 시드(seed), 밤새도록 교반 및 -15℃까지 냉각을 수행하였다. 여과하여 고체를 분리하고 감압하에 건조시켜 황갈색 분말로서 17.7g의 GS-7342(표 5)를 얻었다: 1H NMR(CDCl3) δ0.95(t,3H), 1.3(m,6H), 1.7(m,2H), 3.7(m,2H), 4.1(m,6H), 4.4(dd,1H), 5.8(s,2H), 7.1(m,5H), 8.0(s,1H), 8.4(s,1H); 31P NMR(CDCl3) δ21(분리됨).
실시예 7
GS-7097의 부분 입체 이성질체 분리
다음을 제외하고, GS-7171에 대하여 기술한 조건(실시예 3A)을 이용하여 부분 입체 이성질체 혼합물을 정제하였다:
이동상 (초기): GS-7120-아세토니트릴 : 이소프로필 알코올 (95:5)
(최종): 100% 메틸 알코올
용출 프로파일 : GS-7115 (부분 입체 이성질체 B)
: GS-7114 (부분 입체 이성질체 A)
실시예 8
GS-7097의 선택적인 제조 방법
GS-7097: 페닐 PMPA, 에틸 L-알라닐 아미데이트. 페닐 PMPA(15.0g, 41.3mmol), L-알라닌 에틸 에스테르 하이드로클로라이드(12.6g, 83mmol) 및 트리에틸아민(11.5ml, 83mmol)을 건조 N2 하에 500ml 피리딘 중에 함께 현탁시켰다. 이 현탁액을 트리페닐포스핀(37.9g, 145mmol), 알드리티올2 (2,2'-디피리딜 디설파이드)(31.8g, 145mmol) 및 120ml 피리딘의 용액과 혼합시켰다. 혼합물을 내부 온도 57℃에서 15시간 동안 가열하였다. 완전한 반응물을 진공하에 황색 페이스트, 100g으로 농축시켰다. 페이스트를 1.1kg 실리카겔 60, 230 내지 400 메시의 25x11cm 베드 위에서 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다. 칼럼을 2% 메탄올 디클로로메탄 용액 8 리터로 용출시키고, 이어서 26 리터의 용출이 진행되는 동안 메탄올의 최종 조성이 13%가 될 때까지 선형 구배로 용출시켰다. 깨끗한 생성물을 함유하는 분획을 농축시켜 12.4g의 조 생성물 (5), 65% 이론치를 얻었다. 1H NMR에 의하면 이 물질은 약 15(중량)%의 트리에틸아민 하이드로클로라이드로 오염되어 있었다. 생성물을 350ml 에틸 아세테이트에 용해시키고 20ml의 물로 추출하고, 무수 황산나트륨를 통해 유기 용액을 건조 및 농축시켜 오염물을 제거하였으며, 백색 고체로서 순수한 GS-7097 11.1g을 58% 수율로 얻었다. GS-7003a와 GS-7003b(페닐알라닐 아미데이트)의 부분 입체 이성질체 혼합물 및 GS-7119와 GS-7335(글리실 아미데이트)의 혼합물을 합성하기 위하여 또한 이 방법을 적용한다. 실시예 3A, 6 및 7에서 기술한 회분 용출 방법을 이용하여 이들 부분 입체 이성질체를 분리한다.
실시예 9
전구 약물 부분 입체 이성질체의 생체외 연구
MT-2 세포에서 생체외 항-HIV-1 활성 및 세포 독성과, GS-7340(프리베이스) 및 테노포비르 디소프록실 푸마레이트(TDF)의 MT-2 세포 추출물 및 사람의 혈장에서의 안정성을 표 1에 표시한다. GS-7340은 TDF와 비교하여 항바이러스 활성에서 10배 증가를, 혈장 안정성에서 200배 증가를 나타낸다. 이와 같이 더 큰 혈장 안정성으로 인하여 경구 투여 후 TDF에 비하여 GS-7340의 혈중 농도(circulating level)가 보다 높을 것으로 예상된다.
Figure 112006070532142-pat00027
TDF의 세포내 대사에서 초래된 상대적인 세포내 PMPA를 GS-7340으로부터의 것과 비교 측정하기 위하여, 양쪽 전구 약물과 PMPA를 방사 표지화하고, 동일한 몰 농도로 사람의 완전한 전체 혈액내에 스파이크시켰다. 1시간 후에 혈장, 적혈구(RBC) 및 말초혈 단핵 세포(PBMC)를 분리하고, 방사 분석 검출을 이용하는 HPLC로 분석하였다. 그 결과를 표 2에 표시한다.
1시간 후, GS-7340은 TDF 및 PMPA와 비교하여 PBMC에서 각각 10x 및 30x의 총 세포내 PMPA 농도를 야기시켰다. 1시간 후에 혈장에서는 84%의 방사능이 완전한 GS-7340에 기인하는 것인 반면에, 1시간 시점에서 TDF는 검출되지 않았다. 혈장에서 완전한 TDF가 검출되지 않았으므로, 1시간 시점에서 TDF와 GS-7340간 10x 차이는 생체내에서 예상되는 최소한의 차이가 된다. PBMC에서 세개의 모든 화합물에 대한 HPLC 크로마토그램을 도 1에 표시한다.
Figure 112006070532142-pat00028
Met.X 및 Met.Y(대사 산물 X와 Y)를 표 5에 표시한다. 아래 첨자 "p"는 인산화를 나타낸다. 1시간 후 사람의 혈장으로부터 이 결과를 얻었다. 84%의 GS-7340이 한시간 후에도 혈장에서 여전히 완전하므로, 시간을 증가시키면 생체외 차이가 증가할 것으로 예상된다. 완전한 GS-7340이 경구 투여 후 혈장에 존재하기 때문에 상대적인 임상 효능은 생체외에서 관찰된 IC50 수치와 관련이 있다.
이하 표 3에는 테노포비르, TDF, GS-7340, 여러 가지 뉴클레오사이드 및 프로테아제 억제제 넬피나비르의 IC50 수치를 정리하였다. 제시된 바와 같이, 넬피나비르와 GS-7340은 모든 그밖의 뉴클레오타이드 또는 뉴클레오사이드보다 2-3등급 더 유효하다.
Figure 112006070532142-pat00029
추가로 본 발명에 따라 분리된 부분 입체 이성질체의 생체외 세포 배양 항-HIV-1 활성 및 CC50에 대한 연구가 수행되었고, 그 결과를 이하에 도표화하였다.
Figure 112006070532142-pat00030
"Phe-메틸에스테르"는 메틸페닐알라니닐 모노아미데이트, 테노포비르의 페닐 모노에스테르이고; "gly-메틸에스테르"는 메틸글리실 모노아미데이트, 테노포비르의 페닐 모노에스테르이다.
상기 각 실례에서, 이성질체 A는 GS-7340(S)과 동일한 절대 입체 화학을 갖는 것으로, 이성질체 B는 GS-7339와 동일한 절대 입체 화학을 갖는 것으로 믿어진다.
분리된 부분 입체 이성질체의 생체외 대사 및 안정성을 PLCE, MT-2 추출물 및 사람의 혈장에서 측정하였다. 후술하는 생물 시료 80㎕를 스크류-캡 원심분리 튜브로 옮기고 37℃에서 5분간 배양하였다. 실험 화합물 0.2mg/ml를 함유하는 적절한 완충액 20㎕를 생물 시료에 첨가하고 혼합시켰다. 상기 반응 혼합물 20㎕를 즉시 시료로 하여, HPLC 분석의 내부 기준 물질로서 0.015mg/ml의 2-히드록시메틸나프탈렌을 함유하는 60㎕의 메탄올과 혼합하였다. 이 시료를 0-시간 시료로서 취하였다. 그 다음, 특정 시점에서 반응 혼합물 20㎕를 시료로 만들고, 내부 기준물을 함유하는 60㎕의 메탄올과 혼합하였다. 이와 같이 얻어진 혼합물을 15,000G에서 5분간 원심분리하고, 상등액을 후술하는 조건하에 HPLC로 분석하였다.
평가된 생물 시료는 다음과 같다.
(1) PBS(인산완충 식염수)로 20배 희석시킨 PLCE (Sigma 사의 돼지간 카르복시에스테라제, 160u/mg 단백질, 21mg 단백질/ml)
(2) 배지로서 후술하는 HEPES를 이용한 것 이외에는 공개 방법 [A.Pompon, I. Lefebvre, J.-L. Imbach, S. Kahn 및 D. Farquhar, "Antiviral Chemistry & Chemotherapy", 5:91-98(1994)]에 따라, MT-2 세포 추출물을 MT-2 세포로부터 제조하였다.
(3) 사람의 혈장 (George King Biomedical Systems, Inc.의 혼주된 정상 사람의 혈장)
연구에 이용된 완충계는 다음과 같다.
PLCE 연구에서, 실험 화합물을 PBS에 용해시켰다. PBS(인산완충 식염수, Sigma)는 0.01M 포스페이트, 0.0027M 염화칼륨 및 0.137M 염화나트륨을 포함한다. 37℃에서 pH 7.4.
MT-2 세포 추출물 연구에서, 실험 화합물을 HEPES 완충액에 용해시켰다. HEPES 완충액은 0.010M HEPES, 0.05M 염화칼륨, 0.005M 마그네슘 클로라이드 및 0.005M dl-디티오트레이톨을 포함한다. 37℃에서 pH 7.4.
사람의 혈장 연구에서, 실험 화합물을 TBS에 용해시켰다. TBS(트리스-완충 식염수, Sigma)는 0.05M 트리스, 0.0027M 염화칼륨 및 0.138M 염화나트륨을 포함한다. 37℃에서 pH 7.5.
다음 조건하에 HPLC 분석을 수행하였다.
칼럼: Zorbax Rx-C8, 4.6 x 250mm, 5μ
(MAC-MOD Analytical, Inc. Chadds Ford, PA)
검출: 260nm에서 UV
유속: 1.0ml/분
실행시간: 30분
주입 용적: 20㎕
칼럼온도: 상온
이동상 A: 50mM 인산칼륨(pH 6.0)/(CH3CN = 95/5(v/v)
이동상 B: 50mM 인산칼륨(pH 6.0)/(CH3CN = 50/50(v/v)
구배 흐름: 0분 100% 이동상 A
25분 100% 이동상 B
30분 100% 이동상 B
이 결과를 하기 표 5에 표시한다 (또한 표 4에서 선택된 IC50 수치 포함).
Figure 112006070532142-pat00031
실시예 10
전구 약물 부분 입체 이성질체를 비글개(beagle dog)에 경구 투여한 후의 혈장 및 PBMC 노출
10 mg-eq/kg 투여량을 경구 투여한 후의 개를 대상으로 GS7340의 약동학을 연구하였다.
제제화. 전구 약물을 투여 전 0.5 시간 이내에 50mM 시트르산 용액으로서 제제화하였다. 연구에 사용된 모든 화합물은 길리애드 사이언스사에서 합성되었다. 하기 롯트가 사용되었다:
Figure 112006070532142-pat00032
투여 및 시료 수집. 본 연구의 생체 임상(in-life phase)은 "실험실 동물의 관리 및 사용 안내" (National Institutes of Health publication 86-23)의 권고에 따라 수행되었으며, 동물 관리 사용 위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)의 승인을 받았다. 절식시킨 수컷 비글개(10 ±2kg)를 연구에 사용하였다. 각각의 약물을 1회 투여량으로서 경구 섭식(oral gavage)에 의하여 투여하였다(1.5-2ml/kg). 투여량은 10mg-당량/kg의 PMPA이었다. PBMC 분석용으로, 0(투여전), 2, 8, 및 24시간 투여 경과 시에 혈액 시료를 수집하였다. 혈장 분석용으로, 0(투여전), 5, 15, 및 30분과, 1, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 및 24시간 투여 경과 시에 혈액 시료를 수집하였다. 혈장 분석용의 혈액(1.0ml)을 즉시 2,000rpm에서 10분간 원심분리시켰다. 혈장 시료를 동결시켜 분석 때까지 70℃에서 유지하였다.
말초혈액 단핵세포(PBMC) 제조. 특정 시점에 채취한 전혈(8ml)를 같은 비율의 인산 완충 식염수(PBS)와 혼합하고, 15ml의 피콜-파크 용액(Pharmacia Biotech) 상에 층상화한 다음, 40분간 400 ×g로 원심분리시켰다. PBMC 층을 분리하여 PBS로 1회 세척하였다. 형성된 PMBC 펠렛(pellet)을 PBS 0.5ml 용액으로 재구성하고, 세포를 재현탁시켜 혈구 계수기(hemocytometer)를 사용하여 계수한 다음, 분석 때까지 70℃로 유지하였다. 평균 단일 세포 용적과 곱한 세포의 수를 세포내 농도의 계산에 이용하였다. 보고치(reported value) 200펨토리터/세포를 휴지(resting) PBMC 용적으로 사용하였다 (B.L.Robins, R.V.Srinivas, C.Kim, N.Bischofberger, and A.Fridland, Antimicrob. Agent Chemother. 42, 612(1998).
혈장과 PBMC 내 PMPA와 전구 약물의 측정. PMPA를 클로로아세트알데히드로 유도체화하여 고형광의 N1,N6-에테노아데닌 유도체를 얻는 것에 의하여, 개의 혈장 시료 내 PMPA 농도를 결정하였다 (L.Naesens, J.Balzarini, and E.De Clercq, Clin. Chem. 38, 480(1992). 요약하면, 혈장(100μl)을 아세토니트릴 200μl와 혼합하여 단백질을 침전시켰다. 그 다음, 시료를 실온, 감압 하에서 증발시켜 건조하였다. 건조 시료를 200μl 유도체화 반응 혼합액 (0.34% 클로로아세트알데히드의 100mM의 소듐 아세테이트 용액, pH 4.5)에 다시 용해시키고, 와류시키고, 원심분리하였다. 그 다음, 상등액을 깨끗한 스크류-캡 튜브(screw-cap tube)로 옮겨 95℃에서 40분간 배양하엿다. 그 다음, 유도체화된 시료를 증발시켜 건조하고, HPLC 분석을 위하여 100μl의 물에 다시 용해시켰다.
세포내 PMPA를 HPLC로 측정하기 전에, PBMC 추출물에 존재하는 다량의 아데닌 관련 리보뉴클레오티드를 선택적 산화에 의하여 제거해야 하였다. 본 발명자들은 Tanaka 등이 사용한 방법을 변형하여 사용하였다 (K. Tanaka, A. Yoshioka, S. Tanaka, and Y. Wataya, Anal. Biochem., 139, 35(1984). 요약하면, PBMC 시료를 메탄올과 1:2로 혼합하고, 감압 하에서 증발시켜 건조하였다. 건조 시료를 혈장 분석에 기재된 방법으로 유도체화하였다. 유도체화된 시료를 20μl의 1M 람노스 및 30μl의 0.1M 소듐 퍼요오데이트와 혼합하고, 5분간 37℃에서 배양시켰다. 배양에 이어, 4M 메틸아민 40μl와 0.5M 이노신 20μl를 첨가하였다. 30분간 37℃에서 배양하고, 시료를 감압 하에 증발시켜 건조한 다음, HPLC 분석을 위하여 물에 다시 용해시켰다.
무손상 전구 약물은 어떠한 PBMC 시료에서도 검출되지 않았다. 무손상 전구 약물을 잠재적으로 함유하는 혈장 시료에 대하여, 실험을 수행하여, 유도체화 중에 PMPA로의 추가적인 전환이 일어나지 않았다는 것을 확인하였다. 전구 약물 표준 물질을 약물이 없는 혈장에 첨가하여, 기술한 바와 같이 유도체화하였다. 어떠한 혈장 시료에서도 검출 가능한 수준의 PMPA가 존재하지 않았고, 예측된 전환 %는 1% 미만이었다.
HPLC 체계는 AS3000 자동 주입기와 F2000 형광 검출기를 갖는 P4000 용매 전달 체계로 구성되었다 (Thermo Separation, San Jose, CA). 칼럼은 Inertsil ODS-2 칼럼이었다 (4.6 ×150 mm). 사용된 이동상은 다음과 같았다: A, 5mM 테트라부틸 암모늄 브로마이드(TBABr)를 함유하는 25mM 인산칼륨 완충액에 용해된 5% 아세토니트릴, pH 6.0; B, 5mM TBABr을 함유하는 25mM 인산칼륨 완충액에 용해된 60% 아세토니트릴, pH 6.0. 유속은 2ml/분이었고, 칼럼 온도는 칼럼 오븐에 의해 35℃로 유지하였다. 구배 프로파일은 PMPA의 경우 10분간 90% A/10% B이었고, 전구 약물의 경우 10분간 65% A/35% B이었다. 236nm에서의 여기(excitation)와 420nm에서의 방출(emission)을 갖는 형광에 의하여 검출하였고, 주입 용적은 10μl이었다. 데이터를 얻고, 실험 데이타 획득 체계(laboratory data acquisition system)으로 저장하였다 (PeakPro, Beckman, Allendale, NJ).
약동학 계산. PMPA와 전구 약물 노출을 0 내지 24시간에 걸쳐 혈장 또는 PBMC 내 농도 곡선 아래의 면적으로서 표현하였다(AUC). AUC 값은 사다리꼴 법칙을 사용하여 계산하였다.
혈장과 PBMC 농도. 도 2와 도 3에 본 연구의 결과를 도시하였다. 도 2는 PMPA 전구 약물의 순수 부분 입체 이성질체를 경구 투여한 후 혈장과 PBMC 노출의 GS7340-2 대사 개요의 시간에 따른 진행을 보여준다.
도 2의 막대 그래프는 PMPA s.c., TDF와 아미데이트 에스테르 전구 약물의 투여 후 개의 PBMC와 혈장 내 테노포비르의 AUC(0-24 시간)를 보여준다. 모든 아미데이트 전구 약물이 PBMC 노출에서 증가를 나타내었다. 예를 들어, GS 7340은 PMPA s.c.와 TDF와 대비하여 PBMC 노출이 ~ 21배 증가하였고; 혈장 노출은 각각 6.25배와 1.29배 감소하였다.
이러한 데이타는 GS7340이 경구로 전달되어, PMPA에 대한 전신 노출(systemic exposure)을 최소화하고, HIV 복제에 일차적으로 책임이 있는 세포 내에서 PMPA의 세포내 농도를 크게 증가시킬 수 있다는 것을 생체내(in vivo)에서 확립하는 것이다.
Figure 112006070532142-pat00033
실시예 11
GS-7340의 체내 분포(biodistribution)
GS-7340의 전임상(preclinical) 특성의 일부로서, 개의 체내 분포를 측정하였다. GS-7340 (이소프로필 알라니닐 모노아미데이트, 테노포비르의 페닐 모노에스테르)의 조직 분포를 비글개에게 경구 투여하여 조사하였다. 수컷 2마리에게 14C=GS-7340 (8.85mg-당량의 PMPA/kg, 33.2μCi/kg; 아데닌의 8-탄소를 표지화) 수용액(50 mM 시트르산, pH 2.2)을 경구 투여하였다. 혈장과 말초혈액 단핵세포 (PBMC)를 24 시간에 걸쳐 얻었다. 뇨와 분변을 24 시간 동안 케이지 수집(cage collected)하였다. 투여 후 24 시간 경과 시에, 동물을 치사시켜 분석을 위하여 조직을 떼어냈다. 조직 내 총 방사능 활성을 산화 및 액체 섬광 계수기(liquid scintillation counting)로 측정하였다.
방사능 표지된 GS7340을 1회 경구 투여하고 24 시간 경과 후의 PMPA의 체내 분포를, TDF (GS-4331)로 수행한 이전 연구 데이터와 함께 표 4에 제시하였다. TDF의 경우에는, 혈장 내 전구 약물의 농도가 분석 검출의 수준 이하이며, 혈장 내에서 관찰된 주요 종은 모약물이다. 림프 조직, 골수, 및 골격근 내의 PMPA 수준은 GS-7340 투여 후 10 배 증가된다.
림프 조직은 기본적으로 림프구로 구성되므로, 림프 조직 내의 축적은 PBMC 분석에서 관찰된 데이타와 일치한다. 마찬가지로, 골수 내의 축적은 아마도 이 조직 내 림프구의 높은 퍼센트(70%)에서 비롯된다.
Figure 112006070532142-pat00034
* 통상 회수율 15 ×106 총세포 및 평균 PMBC 용적 0.2 피코리더/세포를 사용하여 계산
n.s.= 무시료, n.a.= 적용불가, n.d.= 측정불가.
본 발명에 따라 마그네슘 알콕사이드를 이용하는, PMPA 또는 PMEA의 손쉬운 제조 방법이 제공되었다.

Claims (5)

  1. 9-(2-히드록시프로필)아데닌 또는 9-(2-히드록시에틸)아데닌을, 마그네슘 C1-C6 알콕사이드 및 보호된 ρ-톨루엔설포닐옥시메틸포스포네이트와 반응시키는 것을 포함하는, 보호된 9-[2-(포스포노메톡시)프로필]아데닌 또는 보호된 9-[2-(포스포노메톡시)에틸]아데닌의 제조 방법.
  2. (a) 9-(2-히드록시프로필)아데닌 또는 9-(2-히드록시에틸)아데닌을, 마그네슘 C1-C6 알콕사이드 및 보호된 ρ-톨루엔설포닐옥시메틸포스포네이트와 반응시켜, 보호된 9-[2-(포스포노메톡시)프로필]아데닌 또는 보호된 9-[2-(포스포노메톡시)에틸]아데닌을 얻는 단계와,
    (b) 상기 단계 (a)에서 얻어지는 생성물을 탈보호하는 단계를 포함하는,
    9-[2-(포스포노메톡시)프로필]아데닌 또는 9-[2-(포스포노메톡시)에틸]아데닌의 제조 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 ρ-톨루엔설포닐옥시메틸포스포네이트의 보호기는 C1-C6 알킬기인 제조 방법.
  4. 삭제
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 알콕사이드는 t-부톡사이드 또는 이소프로필 옥사이드인 것인 제조 방법.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20200108330A (ko) * 2018-01-10 2020-09-17 누코리온 파마슈티컬스, 인코포레이티드. 포스포르(포스포론)아미다타세탈 및 포스프(온)아탈세탈 화합물

Families Citing this family (223)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1301519B2 (en) * 2000-07-21 2021-11-10 Gilead Sciences, Inc. Prodrugs of phosphonate nucleotide analogues and methods for selecting and making same
US7388002B2 (en) * 2001-11-14 2008-06-17 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Nucleosides, preparation thereof and use as inhibitors of RNA viral polymerases
EA200400690A1 (ru) * 2001-11-14 2005-06-30 Байокрист Фармасьютикалз, Инк. Нуклеозиды, их препараты и их применение в качестве ингибиторов вирусных рнк-полимераз
DE60315023T2 (de) * 2002-04-26 2008-04-03 Gilead Sciences, Inc., Foster City Anreicherung in der zelle an phosphonat analoga von hiv protease inhibitor verbindungen und die verbindungen selbst
US20050239054A1 (en) * 2002-04-26 2005-10-27 Arimilli Murty N Method and compositions for identifying anti-HIV therapeutic compounds
EP2223927B1 (en) 2002-05-13 2014-10-15 Metabasis Therapeutics, Inc. Salts of a phosphonic acid based prodrug of PMEA
AP2089A (en) 2003-01-14 2010-01-11 Gilead Sciences Inc Compositions and methods for combination antiviraltherapy
WO2005002626A2 (en) 2003-04-25 2005-01-13 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic phosphonate compounds
US20050261237A1 (en) * 2003-04-25 2005-11-24 Boojamra Constantine G Nucleoside phosphonate analogs
US7300924B2 (en) * 2003-04-25 2007-11-27 Gilead Sciences, Inc. Anti-infective phosphonate analogs
CN101410120A (zh) * 2003-04-25 2009-04-15 吉里德科学公司 抗炎的膦酸酯化合物
US7432261B2 (en) * 2003-04-25 2008-10-07 Gilead Sciences, Inc. Anti-inflammatory phosphonate compounds
US7470724B2 (en) * 2003-04-25 2008-12-30 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate compounds having immuno-modulatory activity
US20090247488A1 (en) * 2003-04-25 2009-10-01 Carina Cannizzaro Anti-inflammatory phosphonate compounds
US7407965B2 (en) * 2003-04-25 2008-08-05 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate analogs for treating metabolic diseases
US7452901B2 (en) 2003-04-25 2008-11-18 Gilead Sciences, Inc. Anti-cancer phosphonate analogs
JP5069463B2 (ja) 2003-04-25 2012-11-07 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド 抗ウイルス性ホスホネート類似物
WO2004096287A2 (en) 2003-04-25 2004-11-11 Gilead Sciences, Inc. Inosine monophosphate dehydrogenase inhibitory phosphonate compounds
CA2522845A1 (en) * 2003-04-25 2004-11-11 Gilead Sciences, Inc. Kinase inhibitor phosphonate conjugates
EP1680512A1 (en) 2003-10-24 2006-07-19 Gilead Sciences, Inc. Methods and compositions for identifying therapeutic compounds
US7432273B2 (en) * 2003-10-24 2008-10-07 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate analogs of antimetabolites
US7427624B2 (en) 2003-10-24 2008-09-23 Gilead Sciences, Inc. Purine nucleoside phosphorylase inhibitory phosphonate compounds
CN1906196A (zh) * 2003-12-22 2007-01-31 吉里德科学公司 具有hiv和hcv抗病毒活性的4＇－取代的卡波韦－和阿巴卡韦－衍生物以及相关化合物
US20050153990A1 (en) * 2003-12-22 2005-07-14 Watkins William J. Phosphonate substituted kinase inhibitors
US20070281907A1 (en) * 2003-12-22 2007-12-06 Watkins William J Kinase Inhibitor Phosphonate Conjugates
BRPI0418251C1 (pt) * 2003-12-30 2021-05-25 Gilead Sciences Inc fosfonatos, monofosfonamidatos, bisfosfonamidatos, e, composição farmacêutica os compreendendo
EP1732569B1 (en) * 2004-01-21 2009-10-14 Gilead Sciences, Inc. Use of adefovir or tenofovir for inhibiting mmtv-like viruses involved in breast cancer and primary biliary cirrhosis
US8411105B1 (en) 2004-05-14 2013-04-02 Nvidia Corporation Method and system for computing pixel parameters
US8432394B1 (en) 2004-05-14 2013-04-30 Nvidia Corporation Method and system for implementing clamped z value interpolation in a raster stage of a graphics pipeline
US7079156B1 (en) 2004-05-14 2006-07-18 Nvidia Corporation Method and system for implementing multiple high precision and low precision interpolators for a graphics pipeline
US8416242B1 (en) 2004-05-14 2013-04-09 Nvidia Corporation Method and system for interpolating level-of-detail in graphics processors
EP1753762B1 (en) 2004-06-08 2014-03-19 Metabasis Therapeutics, Inc. Lewis acid mediated synthesis of cyclic esters
PL1778251T3 (pl) 2004-07-27 2011-09-30 Gilead Sciences Inc Koniugaty fosfonianowo-nukleozydowe jako środki przeciw wirusowi HIV
EP1865967A4 (en) * 2005-04-08 2011-02-09 Chimerix Inc COMPOUNDS, COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING VIRAL INFECTIONS AND OTHER DISEASES
US8642577B2 (en) 2005-04-08 2014-02-04 Chimerix, Inc. Compounds, compositions and methods for the treatment of poxvirus infections
CN100359315C (zh) * 2005-05-26 2008-01-02 林维宣 兽药残留能力验证样品及制备方法
TWI471145B (zh) 2005-06-13 2015-02-01 Bristol Myers Squibb & Gilead Sciences Llc 單一式藥學劑量型
TWI375560B (en) 2005-06-13 2012-11-01 Gilead Sciences Inc Composition comprising dry granulated emtricitabine and tenofovir df and method for making the same
US8076303B2 (en) 2005-12-13 2011-12-13 Spring Bank Pharmaceuticals, Inc. Nucleotide and oligonucleotide prodrugs
CN100396689C (zh) * 2006-03-07 2008-06-25 中国医学科学院医药生物技术研究所 一组具有抑制hiv-1/hbv病毒复制活性的替诺福韦单酯化合物
WO2007136650A2 (en) 2006-05-16 2007-11-29 Gilead Sciences, Inc. Method and compositions for treating hematological malignancies
ES2532502T3 (es) * 2006-07-12 2015-03-27 Mylan Laboratories Limited Proceso para la preparación de tenofovir
US20080261913A1 (en) 2006-12-28 2008-10-23 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of liver disorders
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
CA2693176C (en) * 2007-06-26 2015-02-03 Song Jin Treatment and prevention systems for acid mine drainage and halogenated contaminants
US8441497B1 (en) * 2007-08-07 2013-05-14 Nvidia Corporation Interpolation of vertex attributes in a graphics processor
MX2010008148A (es) * 2008-01-25 2010-10-20 Chimerix Inc Métodos de tratamiento de infecciones virales.
TWI444384B (zh) 2008-02-20 2014-07-11 Gilead Sciences Inc 核苷酸類似物及其在治療惡性腫瘤上的用途
JP5757860B2 (ja) * 2008-04-25 2015-08-05 シプラ・リミテッド 結晶形態のテノホビルジソプロキシル及びその製造方法
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
US20100003217A1 (en) * 2008-07-02 2010-01-07 Erika Cretton-Scott Compounds and Pharmaceutical Compositions for the Treatment of Viral Infections
BRPI0915878A2 (pt) 2008-07-08 2015-11-03 Gilead Sciences Inc sais ou hidratos de compostos inibidores de hiv, seu uso e composição farmacêutica que os compreende
SG172359A1 (en) 2008-12-23 2011-07-28 Pharmasset Inc Nucleoside phosphoramidates
CN102325783A (zh) * 2008-12-23 2012-01-18 法莫赛特股份有限公司 嘌呤核苷的合成
SG172361A1 (en) 2008-12-23 2011-07-28 Pharmasset Inc Nucleoside analogs
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
TWI583692B (zh) 2009-05-20 2017-05-21 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
US8614200B2 (en) 2009-07-21 2013-12-24 Chimerix, Inc. Compounds, compositions and methods for treating ocular conditions
NZ599404A (en) 2009-09-21 2014-02-28 Gilead Sciences Inc Processes and intermediates for the preparation of 1’-substituted carba-nucleoside analogs
WO2011100698A2 (en) 2010-02-12 2011-08-18 Chimerix, Inc. Methods of treating viral infection
PL3290428T3 (pl) 2010-03-31 2022-02-07 Gilead Pharmasset Llc Tabletka zawierająca krystaliczny (S)-2-(((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-diokso-3,4-dihydropirymidyn-1(2H)-ylo)-4-fluoro-3-hydroksy-4-metylotetrahydrofuran-2-ylo)metoksy)(fenoksy)fosforylo)amino)propanian izopropylu
MX2012011171A (es) 2010-03-31 2013-02-01 Gilead Pharmasset Llc Fosforamidatos de nucleosido.
AR094621A1 (es) 2010-04-01 2015-08-19 Idenix Pharmaceuticals Inc Compuestos y composiciones farmacéuticas para el tratamiento de infecciones virales
CA2797601A1 (en) 2010-04-26 2011-11-10 Chimerix, Inc. Methods of treating retroviral infections and related dosage regimes
SG186831A1 (en) 2010-07-19 2013-02-28 Gilead Sciences Inc Methods for the preparation of diasteromerically pure phosphoramidate prodrugs
EP2595980B1 (en) 2010-07-22 2014-09-03 Gilead Sciences, Inc. Methods and compounds for treating paramyxoviridae virus infections
CA2818853A1 (en) 2010-11-30 2012-06-07 Gilead Pharmasset Llc 2'-spirocyclo-nucleosides for use in therapy of hcv or dengue virus
CA2819548C (en) 2010-12-10 2019-04-09 Sigmapharm Laboratories, Llc Highly stable compositions of orally active nucleotide analogues or orally active nucleotide analogue prodrugs
ZA201103820B (en) 2010-12-13 2012-01-25 Laurus Labs Private Ltd Process for the preparation of tenofovir
WO2012154321A1 (en) 2011-03-31 2012-11-15 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of viral infections
WO2012154698A2 (en) * 2011-05-06 2012-11-15 Mckenna Charles E Method to improve antiviral activity of nucleotide analogue drugs
WO2012159047A1 (en) 2011-05-19 2012-11-22 Gilead Sciences, Inc. Processes and intermediates for preparing anti-hiv agents
AU2014271320B2 (en) * 2011-08-16 2017-02-23 Gilead Sciences, Inc. Tenofovir alafenamide hemifumarate
MX336627B (es) * 2011-08-16 2016-01-26 Gilead Sciences Inc Hemifumarato de tenofovir alafenamida.
ES2659216T5 (es) 2011-09-16 2021-06-09 Gilead Pharmasset Llc Métodos para el tratamiento del VHC
BR112014011340A2 (pt) * 2011-10-07 2017-06-13 Gilead Sciences Inc métodos para a preparação de análogos de nucleotídeos antivirais
AU2016228317B2 (en) * 2011-10-07 2018-07-19 Gilead Sciences, Inc. Methods for preparing anti-viral nucleotide analogs
AU2014215976B2 (en) * 2011-10-07 2016-06-30 Gilead Sciences, Inc. Methods for preparing anti-viral nucleotide analogs
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
US9593137B2 (en) 2011-12-22 2017-03-14 Geron Corporation Guanine analogs as telomerase substrates and telomere length affectors
WO2013115916A1 (en) 2012-02-03 2013-08-08 Gilead Sciences, Inc. Combination therapy comprising gs-7340 and cobicistat for use in the treatment of viral infections
US20150105350A1 (en) 2012-02-03 2015-04-16 Gilead Sciences, Inc. Combination therapy comprising tenofovir alafenamide hemifumarate and cobicistat for use in the treatment of viral infections
CN103665043B (zh) * 2012-08-30 2017-11-10 江苏豪森药业集团有限公司 一种替诺福韦前药及其在医药上的应用
GB201215696D0 (en) * 2012-09-03 2012-10-17 Ithemba Pharmaceuticals Pty Ltd A process for the preparation of (R)-9-[2-(Phosphonometh-Oxy)propyl]adenine (PMPA)
EP2912047B1 (en) 2012-10-29 2016-08-24 Cipla Limited Antiviral phosphonate analogues and process for preparation thereof
CN102899327B (zh) * 2012-11-06 2014-06-11 清华大学深圳研究生院 一种抗病毒的小核酸及其温度敏感型凝胶制剂与应用
BR112015011148A8 (pt) * 2012-11-16 2019-10-01 Merck Sharp & Dohme composto, composição farmacêutica, e combinação
CN103848868B (zh) * 2012-12-04 2017-04-12 蚌埠丰原涂山制药有限公司 制备替诺福韦的方法
CN103848869B (zh) * 2012-12-04 2016-12-21 上海医药工业研究院 制备替诺福韦的方法
CN105748499B (zh) 2013-01-31 2018-12-28 吉利德制药有限责任公司 两个抗病毒化合物的联用制剂
CN104072539B (zh) * 2013-03-25 2017-03-29 安徽贝克联合制药有限公司 替诺福韦双(4‑乙酰氨基苯酚氧基)酯及其制备方法和其应用
JP6262848B2 (ja) * 2013-05-21 2018-01-17 成都先導薬物開発有限公司 薬物標的の捕獲方法
US9676803B2 (en) 2013-06-07 2017-06-13 Cipla Limited Efficient process for separation of diastereomers of 9-[(R)-2-[[(R,S)-[[(S)-1-(isopropoxycarbonyl)ethyl]amino]-phenoxyphosphinyl]methoxy]propyl]adenine
KR102239196B1 (ko) 2013-08-27 2021-04-12 길리애드 파마셋 엘엘씨 2종의 항바이러스 화합물의 조합 제제
WO2015040640A2 (en) * 2013-09-20 2015-03-26 Laurus Labs Private Limited An improved process for the preparation of tenofovir alafenamide or pharmaceutically acceptable salts thereof
EP2860185A1 (en) 2013-10-09 2015-04-15 Zentiva, k.s. An improved process for the preparation of Tenofovir disoproxil and pharmaceutically acceptable salts thereof
IN2013CH05455A (ko) * 2013-11-27 2015-08-07 Laurus Labs Private Ltd
WO2015107451A2 (en) 2014-01-14 2015-07-23 Mylan Laboratories Ltd. Purification of tenofovir alafenamide and its intermediates
TWI660965B (zh) * 2014-01-15 2019-06-01 美商基利科學股份有限公司 泰諾福韋之固體形式
CN104804042B (zh) * 2014-01-24 2018-01-19 齐鲁制药有限公司 核苷酸膦酸酯类化合物、其药物组合物、制备方法及用途
US9463194B2 (en) 2014-02-05 2016-10-11 Gilead Sciences, Inc. Methods of treating patients co-infected with HIV and tuberculosis
CA2937548C (en) 2014-02-13 2022-10-25 Ligand Pharmaceuticals, Inc. Prodrug compounds and their uses
CN105814068B (zh) * 2014-02-27 2017-08-04 四川海思科制药有限公司 一种取代的氨基磷酸酯类衍生物、其制备方法及其应用
CN105001262B (zh) * 2014-04-18 2017-09-01 四川海思科制药有限公司 芳基取代的磷酰胺类衍生物及其在医学上的应用
CN105518011B (zh) * 2014-04-21 2018-07-27 四川海思科制药有限公司 氨基磷酸酯类衍生物制备方法及其中间体和中间体的制备方法
CN105085571A (zh) * 2014-05-20 2015-11-25 四川海思科制药有限公司 替诺福韦艾拉酚胺复合物及其制备方法和用途
WO2015197006A1 (zh) * 2014-06-25 2015-12-30 四川海思科制药有限公司 一种取代的氨基酸硫酯类化合物、其组合物及应用
JP2017520545A (ja) 2014-07-02 2017-07-27 リガンド・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド プロドラッグ化合物およびそれらの使用
KR101703258B1 (ko) 2014-12-30 2017-02-06 한미정밀화학주식회사 고순도의 (r)-9-[2-(포스포노메톡시)프로필]아데닌의 제조방법
KR101703257B1 (ko) 2014-09-30 2017-02-06 한미정밀화학주식회사 고순도의 (r)-9-[2-(포스포노메톡시)프로필]아데닌의 제조방법
JP2017535520A (ja) * 2014-09-30 2017-11-30 ハンミ・ファイン・ケミカル・カンパニー・リミテッドＨａｎｍｉ Ｆｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．， Ｌｔｄ． 高純度の（ｒ）−９−［２−（ホスホノメトキシ）プロピル］アデニンの製造方法
EP3203995A4 (en) 2014-10-09 2019-05-15 Board of Regents of the University of Nebraska COMPOSITIONS AND METHODS FOR DELIVERY OF THERAPEUTIC AGENTS
TWI698444B (zh) 2014-10-29 2020-07-11 美商基利科學股份有限公司 製備核糖苷的方法
CN105646584B (zh) * 2014-11-12 2018-09-28 四川海思科制药有限公司 替诺福韦艾拉酚胺富马酸盐晶型及其制备方法和用途
CN104558036A (zh) * 2014-12-11 2015-04-29 杭州和泽医药科技有限公司 一种替诺福韦艾拉酚胺半反丁烯二酸盐晶型及其制备方法
BR112017014085A2 (pt) 2015-01-03 2018-01-09 Mylan Laboratories Ltd processos para a preparação de hemifumarato de tenofovir alafenamida amorfo e uma pré-mistura do mesmo
US20180148774A1 (en) * 2015-05-16 2018-05-31 Godx, Inc Point of need testing device and methods of use thereof
CN106188139B (zh) * 2015-05-29 2020-02-18 江苏天士力帝益药业有限公司 替诺福韦单苄酯磷酸酰胺前药、其制备方法及应用
CZ2015384A3 (cs) 2015-06-05 2016-12-14 Zentiva, K.S. Pevné formy Tenofovir alafenamidu
EP4092037A1 (en) * 2015-06-17 2022-11-23 Gilead Sciences, Inc. Co-crystals, salts and solid forms of tenofovir alafenamide
PE20180411A1 (es) 2015-06-30 2018-03-01 Gilead Sciences Inc Formulaciones farmaceuticas que comprenden tenofovir y emtricitabina
EP3334743B1 (en) 2015-08-10 2023-11-29 Merck Sharp & Dohme LLC Antiviral beta-amino acid ester phosphodiamide compounds
TWI620754B (zh) * 2015-08-26 2018-04-11 Method for preparing amino phosphate derivative and preparation method thereof
TWI616452B (zh) * 2015-08-26 2018-03-01 Preparation method of nucleoside analog and intermediate thereof
TWI616453B (zh) * 2015-08-27 2018-03-01 Substituted amino acid thioester compounds, compositions and uses thereof
WO2017037608A1 (en) * 2015-08-28 2017-03-09 Laurus Labs Private Limited Solid forms of tenofovir alafenamide and salts thereof, processes for its preparation and pharmaceutical compositions thereof
CN115887465A (zh) 2015-09-16 2023-04-04 吉利德科学公司 治疗沙粒病毒科和冠状病毒科病毒感染的方法
EP3346995B1 (en) 2015-11-09 2019-08-28 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic compositions for treatment of human immunodeficiency virus
CN106800573B (zh) * 2015-11-25 2020-03-10 四川海思科制药有限公司 一种核苷酸膦酸酯一水合物及其制备方法和在医药上的应用
EP3386512B1 (en) 2015-12-10 2023-11-22 Merck Sharp & Dohme LLC Antiviral phosphodiamide prodrugs of tenofovir
CN106866737B (zh) * 2015-12-11 2020-11-20 南京圣和药物研发有限公司 膦酸衍生物及其应用
US10450335B2 (en) 2015-12-15 2019-10-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Antiviral oxime phosphoramide compounds
WO2017118928A1 (en) 2016-01-06 2017-07-13 Lupin Limited Process for the separation of diastereomers of tenofovir alafenamide
WO2017134089A1 (en) 2016-02-02 2017-08-10 Sandoz Ag Crystalline forms of tenofovir alafenamide monofumarate
CN107709288A (zh) * 2016-02-03 2018-02-16 四川海思科制药有限公司 一种磷酰胺衍生物及制备方法和用途
WO2017148290A1 (zh) * 2016-03-01 2017-09-08 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 一种取代的腺嘌呤化合物及其药物组合物
CN107179355B (zh) * 2016-03-11 2021-08-10 广东东阳光药业有限公司 一种分离检测替诺福韦艾拉酚胺及其有关物质的方法
CZ2016156A3 (cs) 2016-03-17 2017-09-27 Zentiva, K.S. Způsob přípravy diastereomerně čistého Tenofoviru Alafenamidu nebo jeho solí
CN107226826A (zh) * 2016-03-25 2017-10-03 江苏奥赛康药业股份有限公司 替诺福韦艾拉酚胺富马酸盐化合物及其药物组合物
CN109476689B (zh) * 2016-06-05 2021-09-03 上海诚妙医药科技有限公司 富马酸替诺福韦艾拉酚胺盐的新晶型、制备方法及其用途
CN107698621A (zh) * 2016-06-20 2018-02-16 杭州和泽医药科技有限公司 一种腺嘌呤衍生物的膦酸酯前药及其在医药上的应用
WO2017221189A1 (en) * 2016-06-22 2017-12-28 Laurus Labs Limited An improved process for the preparation of tenofovir alafenamide or pharmaceutically acceptable salts thereof
UA121630C2 (ko) 2016-08-19 2020-06-25
CN106317116A (zh) * 2016-08-19 2017-01-11 张红利 磷酰胺核苷类化合物及其药学上可接受的盐与应用、药物组合物
EP3503895B1 (en) 2016-08-25 2021-09-15 Merck Sharp & Dohme Corp. Antiviral prodrugs of tenofovir
CN106380484A (zh) * 2016-08-29 2017-02-08 杭州百诚医药科技股份有限公司 一种替诺福韦艾拉酚胺的新晶型及其制备方法
WO2018042331A1 (en) 2016-08-31 2018-03-08 Glaxosmithkline Intellectual Property (No.2) Limited Combinations and uses and treatments thereof
WO2018051250A1 (en) 2016-09-14 2018-03-22 Viiv Healthcare Company Combination comprising tenofovir alafenamide, bictegravir and 3tc
WO2018080903A1 (en) 2016-10-26 2018-05-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Antiviral aryl-amide phosphodiamide compounds
CN106565785B (zh) * 2016-11-09 2019-11-12 周雨恬 一种具有抗hbv/hiv活性的核苷氨基磷酸酯类化合物及其盐和用途
CN108129514A (zh) * 2016-12-01 2018-06-08 北京美倍他药物研究有限公司 磷酸/膦酸衍生物的单一异构体及其医药用途
KR20190100249A (ko) 2016-12-22 2019-08-28 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 항바이러스 벤질-아민 포스포디아미드 화합물
US10519159B2 (en) 2016-12-22 2019-12-31 Merck Sharp & Dohme Corp. Antiviral aliphatic ester prodrugs of tenofovir
WO2018115046A1 (en) 2016-12-23 2018-06-28 Sandoz Ag Crystalline solid forms of tenofovir alafenamide
AR110768A1 (es) 2017-01-31 2019-05-02 Gilead Sciences Inc Formas cristalinas de tenofovir alafenamida
WO2018153977A1 (en) 2017-02-24 2018-08-30 Hexal Ag Stable composition of tenofovir alafenamide
RU2659388C1 (ru) 2017-02-28 2018-07-02 Васильевич Иващенко Александр Нуклеотиды, включающие N-[(S)-1-циклобутоксикарбонил]фосфорамидатный фрагмент, их аналоги и их применение
RU2647576C1 (ru) * 2017-02-28 2018-03-16 Васильевич Иващенко Александр Циклобутил (S)-2-[[[(R)-2-(6-аминопурин-9-ил)-1-метил-этокси]метил-фенокси-фосфорил]амино]-пропаноаты, способ их получения и применения
CN106866739B (zh) * 2017-03-10 2018-11-02 华东师范大学 一种(r)-1-(6-氨基-9h-嘌呤-9-基)2-苯酯的制备方法
AU2018235754B2 (en) 2017-03-14 2021-04-08 Gilead Sciences, Inc. Methods of treating feline coronavirus infections
US11191763B2 (en) 2017-03-20 2021-12-07 The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services HIV post-exposure prophylaxis
CN108794530A (zh) * 2017-04-26 2018-11-13 上海医药工业研究院 一种替诺福韦丙酚酰胺盐晶型及其制备方法和用途
ES2938859T3 (es) 2017-05-01 2023-04-17 Gilead Sciences Inc Una forma cristalina de (S)-2-etilbutilo 2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-5-ciano-3,4-dihidroxitetrahidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino)propanoato
KR102379965B1 (ko) * 2017-05-19 2022-03-29 주식회사 종근당 테노포비르의 효율적인 제조방법
CN107266499B (zh) * 2017-06-05 2019-07-02 珠海优润医药科技有限公司 一种抗病毒化合物及其制备方法
CN111587107B (zh) 2017-06-30 2023-03-31 希普拉有限公司 药物组合物
CN111093627B (zh) 2017-07-11 2024-03-08 吉利德科学公司 用于治疗病毒感染的包含rna聚合酶抑制剂和环糊精的组合物
WO2019021319A1 (en) 2017-07-27 2019-01-31 Cipla Limited PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS
ES2892402T3 (es) 2017-08-01 2022-02-04 Gilead Sciences Inc Formas cristalinas de ((S)-((((2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il)oxi)metil)(fenoxi)fosforil)-L-alaninato de etilo para tratar infecciones virales
AR112412A1 (es) 2017-08-17 2019-10-23 Gilead Sciences Inc Formas de sal de colina de un inhibidor de la cápside del vih
CN107655987B (zh) * 2017-09-08 2020-11-03 厦门蔚扬药业有限公司 一种替诺福韦艾拉酚胺及其异构体的hplc检测方法
CN107522743A (zh) * 2017-09-30 2017-12-29 深圳科兴生物工程有限公司 一种半富马酸替诺福韦艾拉酚胺工业化连续生产方法
EP3700573A1 (en) 2017-10-24 2020-09-02 Gilead Sciences, Inc. Methods of treating patients co-infected with a virus and tuberculosis
CN109942632B (zh) * 2017-12-20 2021-08-31 上海博志研新药物研究有限公司 替诺福韦艾拉酚胺中间体的制备方法
CN109942633B (zh) * 2017-12-20 2021-08-31 上海新礼泰药业有限公司 替诺福韦艾拉酚胺中间体的制备方法
WO2019130354A1 (en) 2017-12-30 2019-07-04 Cipla Limited Polymorphic forms of (9-[(r)-2-[[(s)-[[(s)-1- (isopropoxycarbonyl)ethyl]amino]phenoxy phosphinyl]methoxy]propyl] adenine and pharmaceutically acceptable salts thereof
CN111788196A (zh) 2018-01-09 2020-10-16 配体药物公司 缩醛化合物及其治疗用途
WO2019140365A1 (en) * 2018-01-12 2019-07-18 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Antiviral prodrugs and formulations thereof
CA3089590C (en) 2018-02-15 2022-12-06 Gilead Sciences, Inc. Pyridine derivatives and their use for treating hiv infection
ES2956288T3 (es) 2018-02-16 2023-12-18 Gilead Sciences Inc Métodos y productos intermedios para preparar un compuesto terapéutico útil en el tratamiento de infección vírica por Retroviridae
CN108101943B (zh) * 2018-02-28 2020-11-24 顾世海 一种替诺福韦前药或可药用盐及其在医药上的应用
CA3132832A1 (en) 2018-04-09 2019-10-17 Howard E. Gendelman Antiviral prodrugs and formulations thereof
CN112423750A (zh) 2018-07-16 2021-02-26 吉利德科学公司 用于治疗hiv的衣壳抑制剂
EP3823629A4 (en) 2018-07-19 2022-05-04 Merck Sharp & Dohme Corp. PHOSPHINAMIDE PRODRUGS OF TENOFOVIR
CN112996517A (zh) 2018-09-19 2021-06-18 吉利德科学公司 预防hiv的整合酶抑制剂
CN114206896A (zh) 2019-07-17 2022-03-18 纽科利制药公司 环状脱氧核糖核苷酸化合物
WO2021011891A1 (en) 2019-07-18 2021-01-21 Gilead Sciences, Inc. Long-acting formulations of tenofovir alafenamide
AU2020318808A1 (en) 2019-07-19 2022-02-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services HIV pre-exposure prophylaxis
WO2021034804A1 (en) 2019-08-19 2021-02-25 Gilead Sciences, Inc. Pharmaceutical formulations of tenofovir alafenamide
AU2020334152A1 (en) * 2019-08-22 2022-03-24 Emory University Nucleoside prodrugs and uses related thereto
WO2021055808A1 (en) * 2019-09-20 2021-03-25 Abbott Rapid Diagnostics International Unlimited Company Antibodies directed against tenofovir and derivatives thereof
CN114727999A (zh) 2019-11-26 2022-07-08 吉利德科学公司 用于预防hiv的衣壳抑制剂
TW202313067A (zh) 2020-01-27 2023-04-01 美商基利科學股份有限公司 治療sars cov-2感染之方法
EP4085062A1 (en) 2020-02-20 2022-11-09 Cipla Limited Novel salts and/or co-crystals of tenofovir alafenamide
EP4118085A2 (en) 2020-03-12 2023-01-18 Gilead Sciences, Inc. Methods of preparing 1'-cyano nucleosides
AR121620A1 (es) 2020-03-20 2022-06-22 Gilead Sciences Inc Profármacos de nucleósidos 4’-c-sustituidos-2-halo-2’-deoxiadenosina y métodos de preparación y uso de los mismos
WO2021202669A2 (en) 2020-04-01 2021-10-07 Reyoung Corporation Nucleoside and nucleotide conjugate compounds and uses thereof
WO2021207049A1 (en) 2020-04-06 2021-10-14 Gilead Sciences, Inc. Inhalation formulations of 1'-cyano substituted carbanucleoside analogs
KR20210125298A (ko) 2020-04-08 2021-10-18 주식회사 파마코스텍 테노포비어 알라펜아미드 헤미타르트레이트의 신규한 제조방법
EP4143199A4 (en) 2020-04-21 2024-07-03 Ligand Pharm Inc NUCLEOTIDE PRODRUG COMPOUNDS
KR20230018473A (ko) 2020-05-29 2023-02-07 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 렘데시비르 치료 방법
CN115996928A (zh) 2020-06-24 2023-04-21 吉利德科学公司 1’-氰基核苷类似物及其用途
EP4172157A1 (en) 2020-06-25 2023-05-03 Gilead Sciences, Inc. Capsid inhibitors for the treatment of hiv
CN113970612B (zh) * 2020-07-22 2023-08-01 北京四环制药有限公司 一种高效液相色谱法测定丙酚替诺福韦有关物质的方法
AU2021331214B2 (en) 2020-08-27 2024-01-04 Gilead Sciences, Inc. Compounds and methods for treatment of viral infections
CN112336695B (zh) * 2020-09-28 2023-01-03 华北制药华坤河北生物技术有限公司 一种富马酸丙酚替诺福韦片剂及其制备方法和有关物质的检测方法
EP4244396A1 (en) 2020-11-11 2023-09-20 Gilead Sciences, Inc. Methods of identifying hiv patients sensitive to therapy with gp120 cd4 binding site-directed antibodies
US11667656B2 (en) 2021-01-27 2023-06-06 Apotex Inc. Crystalline forms of Tenofovir alafenamide
CN113075307A (zh) * 2021-03-08 2021-07-06 瑞阳制药股份有限公司 富马酸丙酚替诺福韦异构体的检测方法
CN113214322B (zh) * 2021-04-30 2022-10-25 山东立新制药有限公司 替诺福韦绿色环保的制备方法
WO2022251594A1 (en) * 2021-05-27 2022-12-01 Antios Therapeutics, Inc. Pharmacokinetics and dose-related improvments in subjects treated with phosphoramidate clevudine prodrugs
TW202337439A (zh) 2021-12-03 2023-10-01 美商基利科學股份有限公司 用於ｈｉｖ病毒感染之治療性化合物
AU2022399845A1 (en) 2021-12-03 2024-05-23 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic compounds for hiv virus infection
TW202342447A (zh) 2021-12-03 2023-11-01 美商基利科學股份有限公司 用於ｈｉｖ病毒感染之治療性化合物
CN114369120A (zh) * 2022-01-28 2022-04-19 石家庄龙泽制药股份有限公司 一种丙酚替诺福韦关键中间体的制备方法
TW202400185A (zh) 2022-03-02 2024-01-01 美商基利科學股份有限公司 用於治療病毒感染的化合物及方法
TWI843506B (zh) 2022-04-06 2024-05-21 美商基利科學股份有限公司 橋聯三環胺甲醯基吡啶酮化合物及其用途
TW202402280A (zh) 2022-07-01 2024-01-16 美商基利科學股份有限公司 可用於ｈｉｖ病毒感染之疾病預防性或治療性治療的治療性化合物
US20240083984A1 (en) 2022-08-26 2024-03-14 Gilead Sciences, Inc. Dosing and scheduling regimen for broadly neutralizing antibodies
US20240226130A1 (en) 2022-10-04 2024-07-11 Gilead Sciences, Inc. 4'-thionucleoside analogues and their pharmaceutical use
WO2024196814A1 (en) 2023-03-17 2024-09-26 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Methods for treatment of age-related macular degeneration
WO2024220624A1 (en) 2023-04-19 2024-10-24 Gilead Sciences, Inc. Dosing regimen of capsid inhibitor
CN118652277A (zh) * 2024-08-19 2024-09-17 成都工业学院 一种用于治疗癌症疾病的化合物的制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0481214A1 (en) * 1990-09-14 1992-04-22 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Prodrugs of phosphonates
WO1996037503A1 (en) * 1995-05-26 1996-11-28 Genta Incorporated Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives
US5977089A (en) * 1996-07-26 1999-11-02 Gilead Sciences, Inc. Antiviral phosphonomethoxy nucleotide analogs having increased oral bioavailability

Family Cites Families (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CS233665B1 (en) 1983-01-06 1985-03-14 Antonin Holy Processing of isomere o-phosphonylmethylderivative of anantiomere racemic vicinal diene
CS263951B1 (en) 1985-04-25 1989-05-12 Antonin Holy 9-(phosponylmethoxyalkyl)adenines and method of their preparation
CS263952B1 (en) 1985-04-25 1989-05-12 Holy Antonin Remedy with antiviral effect
CS264222B1 (en) 1986-07-18 1989-06-13 Holy Antonin N-phosphonylmethoxyalkylderivatives of bases of pytimidine and purine and method of use them
US5650510A (en) 1986-11-18 1997-07-22 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Antiviral phosphonomethoxyalkylene purine and pyrimidine derivatives
US5057301A (en) 1988-04-06 1991-10-15 Neorx Corporation Modified cellular substrates used as linkers for increased cell retention of diagnostic and therapeutic agents
US5053215A (en) * 1988-05-26 1991-10-01 University Of Florida NMR-assayable ligand-labelled trifluorothymidine containing composition and method for diagnosis of HSV infection
US5744600A (en) 1988-11-14 1998-04-28 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Phosphonomethoxy carbocyclic nucleosides and nucleotides
US5688778A (en) 1989-05-15 1997-11-18 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Nucleoside analogs
JP2648516B2 (ja) 1989-07-27 1997-09-03 ダイセル化学工業株式会社 立体異性体の分離法
US5624898A (en) * 1989-12-05 1997-04-29 Ramsey Foundation Method for administering neurologic agents to the brain
JP2925753B2 (ja) 1990-02-23 1999-07-28 ダイセル化学工業株式会社 光学異性体の分離方法
ATE124050T1 (de) * 1990-04-20 1995-07-15 Acad Of Science Czech Republic Chirale 2-(phosphonomethoxy)propyl-guanine als antivirale agentien.
US5302585A (en) 1990-04-20 1994-04-12 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Use of chiral 2-(phosphonomethoxy)propyl guanines as antiviral agents
SK280313B6 (sk) 1990-04-24 1999-11-08 �Stav Organick� Chemie A Biochemie Av �R N-(3-fluór-2-fosfonylmetoxypropyl)deriváty purínov
US5627165A (en) * 1990-06-13 1997-05-06 Drug Innovation & Design, Inc. Phosphorous prodrugs and therapeutic delivery systems using same
US5177064A (en) 1990-07-13 1993-01-05 University Of Florida Targeted drug delivery via phosphonate derivatives
CS387190A3 (en) 1990-08-06 1992-03-18 Ustav Organicke Chemie A Bioch (2r)-2-/di(2-propyl)phosphonylmethoxy/-3-p-toluenesulfonyloxy -1- trimethylacetoxypropane and process for preparing thereof
JP3116079B2 (ja) 1990-08-10 2000-12-11 インスティチュート オブ オーガニック ケミストリ アンド バイオケミストリ アカデミー オブ サイエンス オブ ザ チェコ リパブリック ヌクレオチドの新規な製法
US5827819A (en) * 1990-11-01 1998-10-27 Oregon Health Sciences University Covalent polar lipid conjugates with neurologically active compounds for targeting
US5208221A (en) * 1990-11-29 1993-05-04 Bristol-Myers Squibb Company Antiviral (phosphonomethoxy) methoxy purine/pyrimidine derivatives
CZ284678B6 (cs) 1991-05-20 1999-01-13 Ústav Organické Chemie A Biochemie Avčr Di(2-propyl)estery 1-fluor-2-fosfonomethoxy-3-p -toluensulfonyloxypropanů, způsob jejich přípravy a použití
JP3010816B2 (ja) 1991-08-22 2000-02-21 ダイセル化学工業株式会社 光学分割における光学異性体と溶媒との回収方法、溶媒の循環使用方法、および光学異性体の再利用方法
US5498752A (en) 1991-08-22 1996-03-12 Daicel Chemical Industries, Ltd. Process for recovering optical isomers and solvent, process for using solvent by circulation and process for reusing optical isomers in optical resolution
DE69218968T2 (de) 1991-10-11 1997-10-09 Inst Of Organic Chemistry And Antivirale acyclische phosphonomethoxyalkyl substituierte, alkenyl und alkynyl purin und pyrimidin-derivate
US6057305A (en) 1992-08-05 2000-05-02 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Antiretroviral enantiomeric nucleotide analogs
IL106998A0 (en) * 1992-09-17 1993-12-28 Univ Florida Brain-enhanced delivery of neuroactive peptides by sequential metabolism
US6413949B1 (en) * 1995-06-07 2002-07-02 D-Pharm, Ltd. Prodrugs with enhanced penetration into cells
BR9407510A (pt) 1993-09-17 1997-01-07 Gilead Sciences Inc Análogos de nucleotideo
US5656745A (en) * 1993-09-17 1997-08-12 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analogs
US5798340A (en) * 1993-09-17 1998-08-25 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analogs
CA2171868A1 (en) * 1993-09-17 1995-03-23 Petr Alexander Method for dosing therapeutic compounds
GB9505025D0 (en) 1995-03-13 1995-05-03 Medical Res Council Chemical compounds
US5977061A (en) 1995-04-21 1999-11-02 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic N6 - substituted nucleotide analagues and their use
AU1427097A (en) 1995-12-29 1997-07-28 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analogs
US5717095A (en) * 1995-12-29 1998-02-10 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analogs
US5874577A (en) * 1996-04-03 1999-02-23 Medichem Research, Inc. Method for the preparing 9-12-(Diethoxyphosphonomethoxy)ethyl!adenine and analogues thereof
CA2261619C (en) * 1996-07-26 2006-05-23 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analogs
US5739314A (en) 1997-04-25 1998-04-14 Hybridon, Inc. Method for synthesizing 2'-O-substituted pyrimidine nucleosides
DE69831694T2 (de) * 1997-07-25 2006-07-13 Gilead Sciences, Inc., Foster City Nukleotid-Analog Zusamensetzung und Synthese Verfahren
US5935946A (en) 1997-07-25 1999-08-10 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analog composition and synthesis method
CA2596497C (en) 1997-07-25 2008-12-23 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analog compositions
JP4465109B2 (ja) * 1997-12-17 2010-05-19 エンゾン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド アミノ及びヒドロキシル含有生物活性剤のポリマープロドラッグ
TWI244924B (en) * 1998-01-23 2005-12-11 Newbiotics Inc Enzyme catalyzed therapeutic agents
US6169078B1 (en) * 1998-05-12 2001-01-02 University Of Florida Materials and methods for the intracellular delivery of substances
EP1090032A2 (en) * 1998-06-20 2001-04-11 Washington University Membrane-permeant peptide complexes for medical imaging, diagnostics, and pharmaceutical therapy
US6169879B1 (en) * 1998-09-16 2001-01-02 Webtv Networks, Inc. System and method of interconnecting and using components of home entertainment system
GB9821058D0 (en) † 1998-09-28 1998-11-18 Univ Cardiff Chemical compound
TWI230618B (en) * 1998-12-15 2005-04-11 Gilead Sciences Inc Pharmaceutical compositions of 9-[2-[[bis[(pivaloyloxy)methyl]phosphono]methoxy]ethyl]adenine and tablets or capsules containing the same
AR031975A1 (es) † 1999-02-12 2003-10-22 Glaxo Group Ltd Compuestos analogos de (1r,cis)-4-(6-amino-9h-purin-9-il) -2-ciclopenteno-1-metanol, proceso para su preparacion, su uso en el tratamiento de infecciones virales, y envase que los contiene
EP1301519B2 (en) * 2000-07-21 2021-11-10 Gilead Sciences, Inc. Prodrugs of phosphonate nucleotide analogues and methods for selecting and making same
US7034109B2 (en) * 2000-10-13 2006-04-25 Christophe Bonny Intracellular delivery of biological effectors
US20020119433A1 (en) * 2000-12-15 2002-08-29 Callender Thomas J. Process and system for creating and administering interview or test

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0481214A1 (en) * 1990-09-14 1992-04-22 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Prodrugs of phosphonates
WO1996037503A1 (en) * 1995-05-26 1996-11-28 Genta Incorporated Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives
US5977089A (en) * 1996-07-26 1999-11-02 Gilead Sciences, Inc. Antiviral phosphonomethoxy nucleotide analogs having increased oral bioavailability

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
J. Med. Chem. 42(20), 4122-8 (1999) *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20200108330A (ko) * 2018-01-10 2020-09-17 누코리온 파마슈티컬스, 인코포레이티드. 포스포르(포스포론)아미다타세탈 및 포스프(온)아탈세탈 화합물
KR102708995B1 (ko) 2018-01-10 2024-09-23 누코리온 파마슈티컬스, 인코포레이티드. 포스포르(포스포론)아미다타세탈 및 포스프(온)아탈세탈 화합물

Also Published As

Publication number Publication date
KR100767432B1 (ko) 2007-10-17
IS2985B (is) 2017-09-15
LTC1301519I2 (lt) 2023-02-27
WO2002008241A2 (en) 2002-01-31
EE200300029A (et) 2004-10-15
PL360490A1 (en) 2004-09-06
HU230960B1 (hu) 2019-06-28
LT2682397T (lt) 2017-06-12
AU8294101A (en) 2002-02-05
BRPI0112646B8 (pt) 2021-05-25
US20040018150A1 (en) 2004-01-29
NO20030270D0 (no) 2003-01-20
ES2627903T3 (es) 2017-08-01
BG107572A (bg) 2003-11-28
PT2682397T (pt) 2017-05-31
NO2016006I1 (no) 2016-04-19
US20050124584A1 (en) 2005-06-09
CA2416757A1 (en) 2002-01-31
US7803788B2 (en) 2010-09-28
US20030219727A1 (en) 2003-11-27
BG66037B1 (bg) 2010-11-30
US20080227754A1 (en) 2008-09-18
US20060024659A1 (en) 2006-02-02
NL300803I2 (ko) 2016-06-30
AP1466A (en) 2005-09-22
CA2725819C (en) 2015-09-22
JP2004504402A (ja) 2004-02-12
EA200300188A1 (ru) 2003-06-26
HUP0301307A3 (en) 2005-12-28
US20050124583A1 (en) 2005-06-09
CY2016008I2 (el) 2016-12-14
NZ535408A (en) 2006-09-29
NO20030270L (no) 2003-03-20
NO20150909L (no) 2003-03-20
LU93029I2 (fr) 2016-06-14
JP5063554B2 (ja) 2012-10-31
PL213214B1 (pl) 2013-01-31
CZ304734B6 (cs) 2014-09-10
JP4651264B2 (ja) 2011-03-16
FR16C0013I2 (fr) 2016-09-09
AU2005225039A1 (en) 2005-11-10
EA004926B1 (ru) 2004-10-28
EP2682397B1 (en) 2017-04-19
CN1291994C (zh) 2006-12-27
HRP20160074A8 (hr) 2016-07-29
EP1301519A2 (en) 2003-04-16
NO2023006I1 (no) 2023-02-03
CN1443189A (zh) 2003-09-17
ES2536972T5 (es) 2022-04-06
CA2416757C (en) 2011-02-15
CZ304886B6 (cs) 2015-01-07
NZ523438A (en) 2005-02-25
HK1243711A1 (zh) 2018-07-20
KR20060105807A (ko) 2006-10-11
HUP0301307A2 (hu) 2003-09-29
HUS1900027I1 (hu) 2021-03-29
HRP20160074A2 (hr) 2016-03-11
ES2536972T3 (es) 2015-06-01
LTPA2016009I1 (lt) 2016-04-25
EP1301519B1 (en) 2015-02-25
NO20120466L (no) 2003-03-20
EP3235823A1 (en) 2017-10-25
JP2010174033A (ja) 2010-08-12
MXPA03000587A (es) 2004-04-05
EP1301519B2 (en) 2021-11-10
HRP20030047B1 (hr) 2016-02-26
US20050124585A1 (en) 2005-06-09
OA12393A (en) 2006-04-18
SI2682397T1 (sl) 2017-08-31
BE2016C018I2 (ko) 2020-08-20
EP2682397A1 (en) 2014-01-08
JP2011140506A (ja) 2011-07-21
US20050159392A1 (en) 2005-07-21
JP5111551B2 (ja) 2013-01-09
SI1301519T1 (sl) 2015-07-31
DK1301519T4 (da) 2021-12-20
DK2682397T3 (da) 2017-06-19
DK1301519T3 (en) 2015-05-26
HRP20030047A2 (en) 2007-08-31
NZ536942A (en) 2006-03-31
ZA200210271B (en) 2003-12-31
US20050009043A1 (en) 2005-01-13
CY2016008I1 (el) 2016-12-14
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