KR100440190B1 - 아카비오신-글루코실 아스코르베이트 및 그의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 당전이성 아밀라제를 이용하여 탄수화물 분해성 아밀라제 저해 효과 및 항산화 효과를 가짐과 동시에 안정성이 높은 아스코르브산 유도체 및 그의 제조방법에 관한 것이다.

Description

아카비오신-글루코실 아스코르베이트 및 그의 제조방법{ACAVIOSINE-GLUCOSYL ASCORBATE AND PREPARATION METHOD FOR THE SAME}

본 발명은 안정성이 높고, 탄수화물 분해효소 저해활성 및 항산화 활성이 있는 아스코르베이트 유도체, 더욱 자세하게는 아카비오신-글루코실 아스코르베이트 및 그 제조방법에 관한 것이다.

아스코르브산은 천연 항산화제로서, 매우 높은 항산화력을 가지고 있으며, 토코페롤의 산화를 방지하는 2차 항산화제 기능 또한 가지고 있다. 아스코르브산은 또한 치아, 잇몸, 뼈의 필요성분이며, 감염에 대한 저항성과 면역성이 있고, 괴혈병과 감기를 예방하며, 철분 흡수에 도움을 주어 빈혈을 예방한다고 보고되고 있다. 그러나 아스코르브산은 안정성이 매우 낮아 이를 증가시키기 위한 여러 방법들이 고안되어 오고 있다.

아스코르브산의 안정성을 증가시키는 방법중 하나로 당을 아스코르브산에 전이시켜 안정성을 증가시키는 방법들이 있는데, 아스코르브산과 글루코스의 1,6 결합과 1,2 결합 물질인 α-1,6-글루코실 아스코르베이트와 α-1,2-글루코실 아스코르베이트가 있으며, 아스코르브산과 갈락토오스의 1,6결합인 α-1,6-갈락토실 아스코르베이트가 있다. 안정성면에서는, α-1,6 결합은 아스코르브산보다 다소의 안정성을 보이며, α-1,2 결합은 매우 높은 안정성이 있다. 또한, 항산화력면에서는, α-1,6 결합이 항산화력이 있는 반면, α-1,2 결합의 경우는 아스코르브산의 항산화력을 가지는 사이클로펜틸링에 결합하여 항산화력이 없어지는 문제점이 있다.

항산화력, 탄수화물 분해효소 저해효과 뿐만아니라, 안정성을 갖는 아스코르브산 유도체의 개발이 필요하다.

상기와 같은 종래의 문제점을 해결하고자, 본 발명은 높은 항산화력 및 탄수화물 분해효소 저해효과를 동시에 갖는 물질을 제공하고자, 아카비오신-글루코실 아스코르베이트를 제공한다.

본 발명의 또다른 목적은 당전이를 통해 안정성이 높은 아스코르브산 유도체인 아카비오신-글루코실 아스코르베이트를 제공함에 있다.

본 발명의 또다른 목적은 아카보스 분해성 아밀라제를 이용한 당전이 반응을 통해 상기 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의 제조방법을 제공하고자 한다.

도 1은 아카비오신-글루코실 아스코르베이트 생산액의 박막크로마토그라피 사진이며, 첫 번째 줄은 아스코르브산, 두 번째 줄은 아카보스 유도체(위에서부터 아카비오신-글루코스(PTS), 아카보스(Ac), 이소아카보스(IAc)), 세 번째 줄은 실시예 1에서 얻은 반응생성물, 네 번째 줄은 실시예 1에서 얻은 반응생성물을 이온교환수지와 겔 투과 크로마토그래피로 정제하여 얻은 화합물중 α-1,6-아카비오신-글루코실 아스코르베이트이며, 다섯 번째줄은 정제된 α-1,2-아카비오신-글루코실 아스코르베이트이다.

도 2는 아카비오신-글루코실 아스코르베이트 생산액의 고성능 액체크로마토그램이며, 피크 1은 아스코르브산, 피크 2는 α-1,6-아카비오신-글루코실 아스코르베이트, 피크 3은 α-1,2-아카비오신-글루코실 아스코르베이트를 나타낸다.

도 3은 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의 FAB-MASS 스펙트럼이다.

도 4는 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의¹³C 핵자기공명분석 스펙트럼이다.

도 5는 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의 최대흡수파장 스펙트럼이다.

도 6는 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의 구리이온에 대한 안정성을 나타내는 그래프이다.

도 7은 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의 아스코르브산 산화효소에 대한 안정성을 나타내는 그래프이다.

본 발명은 하기 화학식 1을 갖는 아카비오신-글루코실 아스코르베이트에 관한 것이다:

또한, 본 발명은 하기 화학식 2을 갖는 아카비오신-글루코실 아스코르베이트에 관한 것이다:

또한, 본 발명의 화합물은 탄수화물 분해효소 활성 억제제로 사용될 수 있으며, 상기 탄수화물 분해효소로는 알파-아밀라제 및 글루코시다제등이 포함될 수 있다. 또한 본 발명의 화합물은 종래의 아스코르브산 유도체에 비해 우수한 안정성을 갖는 항산화제로 사용될 수 있다.

본 발명은 아스코르브산의 존재하에서 당전이성 아밀라제로 아카보스를 반응시켜 아카비오신-글리코실 아스코르베이트를 제조하는 방법을 제공하고자 한다. 자세하게는, 본 발명의 방법에서, 아스코르브산 존재하에서 아카보스에 아카보스 분해성 아밀라제를 반응시키면 아카보스가 분해되어 생성된 아카비오신-글루코스에 아스코르브산이 전이되어 아카비오신-글루코실 아스코르베이트를 효과적으로 생산할 수 있다.

탄수화물 분해효소를 저해하는 대표적인 화합물인 아카보스(acarbose)는 불포화 사이클리톨(cyclitol) 분자, 아미노당, 그리고 두 분자의 포도당으로 구성되는 유사 사탄당(pseudotetrasaccharide)으로, 탄수화물 분해효소에 의해 더 이상 분해되지 않는다고 보고되고 있다. 또한, 아카보스는 α-글루코시다제, 글루코아밀라제, α-아밀라제 그리고 사이클로덱스트린 글루코트랜스퍼레이즈(이하 CGTase)와 같은 탄수화물 분해효소의 저해제로 이용되고 있다. 따라서 소장에서 분비하는 효소인 α-글루코시다제를 효과적으로 저해하여 포도당의 섭취를 억제하는 효과가 있어 현재 당뇨병 치료제로 널리 이용되고 있다.

아카보스 및 그 유도체의 구조에서 불포화 사이클리톨과 아미노당은 탄수화물 분해효소 저해효과에 필수적인 요소이고 그 외에 결합된 포도당의 개수에 의해 그 특이성이 결정된다고 알려져 있다. 일반적으로 2개의 포도당이 결합되어 있는 아카보스가 α-글루코시다제에 대한 저해 효과가 가장 크고, 결합된 포도당 개수가 많아질수록 α-아밀라제에 대한 저해 효과가 커진다고 알려져 있으나, 쥐를 이용한 실험에서는 한개 포도당 분자만이 결합된 아카비오신-글루코스(acarviosine-glucose)가 수크레이즈 및 아밀라제에 대한 저해효과가 가장 뛰어난 것으로 보고되어 있다(D. D.Schmidt, W. Frommer, B. Junge, L. Mller, W. Wingender and E. Truscheit (1980) in First International Symposium on Acarbose (Creutzfeldt, W., Ed.)pp5-15, Excerpta Medica, Amsterdam).

아카비오신-글루코스는 아카보스의 환원성 말단의 포도당 한 분자가 가수분해되어 제거된 유사 삼탄당으로 아카보스와 같이 탄수화물 분해효소에 대한 저해효과를 나타낸다. 아카비오신-글루코스는 아카보스를 묽은 황산으로 100℃에서 1시간 정도 가열하여 포도당 분자를 제거하여 생산된다고 보고되었다(B. Junge, H. Bshagen, J. Stoltefuβ, L. Mller (1980) in Enzyme inhibitors(Brodbeck, U., Ed.) pp.123-137, Verlag Chemie, Weinheim).

본 명세서에서 당전이성 아밀라제는 전분을 가수분해하여 주로 말토오스를 생산하고, 풀루란을 분해하여 주로 판노스를 생성하며, 사이클로덱스트린을 분해하여 주로 말토스를 생성하며, 아카보스를 분해하며 아카비오신-글루코스를 단당류 또는 이당류 이상의 올리고당에 전이하는 효소를 의미한다. 이와 같은 아카비오신-글루코스 전이 특성은 종래에 알려진 아밀라제에서는 보고된 바가 없다. 본 발명자들은 이와 같은 효소에 대하여 한국특허 공개공보 제 2000-25033호에서 밝힌 바 있으며, 이 특허출원의 기재 내용은 본 명세서에 포함된다.

한 예로, 한국특허공고공보 99-186716에 기재된, 바실러스 스테아로써머필러스(KFCC-10896)부터 생산되는 아밀라제(이하 BSMA라 함)를 사용하여 탄수화물분해효소를 저해시키는 화합물을 제조할 수 있다. 또다른 예로, 미국특허 5,583,039에 기재된 바실리스 리케니포미스 (Bacillus licheniformis,ATCC 27811), 한국특허 공개공보 제 2000-47164호에 기재된Thermussp. (IM6501 KCTC 0527BP)에서 분리된 아밀라제(이하 ThMA라 함) 등이 아카보스 분해성 아밀라제에 속하며, 본 발명의 화합물을 제조하기 위하여 사용될 수 있다.

본 발명의 아카비오신-글루코실 아스코르베이트는 박막크로마토그래피, 핵자기공명분석 스펙트럼, 분자량 측정 및 고성능 액체 크로마토그래피로 확인할 수 있다. 본 발명의 화합물을 확인하기 위해서, 박막크로마토그래피를 수행한 결과, 도 1에서 첫 번째 줄은 아스코르브산, 두 번째 줄은 아카보스 유도체(위에서부터 아카비오신-글루코스(PTS), 아카보스(Ac), 아이소아카보스(IAc)), 세 번째 줄은 실시예 1 에서 얻은 반응생성물, 네 번째 줄은 실시예 1에서 얻은 반응생성물을 이온교환수지와 겔 투과 크로마토그래피로 정제하여 얻은 화합물중 α-1,6-아카비오신-글루코실 아스코르베이트이며, 다섯 번째줄은 정제된 α-1,2-아카비오신-글루코실 아스코르베이트이다. 세 번째 줄에서 알 수 있듯이, U.V.에서 아스코르브산이 전이된 두 가지 새로운 물질이 생성된 것이 확인되었다. 분자량 분석결과를 나타내는 도 3에서는 α-1,6과 α-1,2결합의 아카비오신-글루코실 아스코르베이트는 m/z 642 ([M+H]⁺)와 664 ([M+Na]⁺)에 나타나는 이온 피크로부터 시료의 분자량이 663으로 측정되며, 이것은 각각 아카비오신-글루코실 아스코르브산 수소와 소디움 아카비오신-글루코실 아스코르브산의 분자량과 일치한다. 따라서, 이로부터 실시예 1에 의한 주요 화합물이 아카비오신-글루코실 아스코르브산임을 확인하였다.α-1,6 결합과 α-1,2 결합은 핵자기공명분석 스펙트럼을 이용하여 확인하였다.

본 발명의 아카비오신-글루코실 아스코르브산은 α-글루코시다제 및 α-아밀라제와 같은 탄수화물 분해효소의 활성을 저해함과 동시에, 항산화력을 가지고 있는 물질이다. 구리이온에 대한 안정성과 아스코르브산 산화제에 대한 본 발명에 따른 화합물의 안정성을 나타내는 도 6에서 보는 바와 같이 α-1,6-아카비오신-글루코실 아스코르베이트는 아스코르브산보다 다소의 안정성을 보이나, α-1,2-아카비오신-글루코실 아스코르베이트는 아스코르브산보다 매우 높은 안정성을 보임을 알 수 있다. 또한, DPPH(1,1-Dipheny-1-picrylhydrazyl radical)의 수소와 화합하는 활성을 이용하여 본 발명에 따른 화합물의 항산화력을 측정한 결과, α-1,2-아카비오신-글루코실 아스코르베이트는 아스코르브산보다 매우 우수함을 알 수 있다(표 3).

아래에서 실시예를 통하여 본 발명을 설명하고자 하나, 이들 실시예에 의하여 본 발명의 범위가 한정되지는 않는다.

[실시예]

아스코르브산은 Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA)로부터 구입하였다. 아카보스는 GlucoBay^TM(Bayer, Leverkusen, Germany)로부터 물로 추출하여 제조하였다.

실시예 1. 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의 제조 및 정제

대한민국 서울특별시 서대문구 신촌동 134번지에 위치하는 사단법인 한국종균협회에 수탁번호 KFCC-10896으로 기탁된,Bacillus stearothermophilus균주를 LB 배지 (0.5 % 효모 추출물, 1 % 박토 트립톤, 그리고 0.5 % NaCl)에 접종하여 37℃에서 전배양한 후 같은 배지에서 10시간 배양하고 원심분리하여 균체를 얻었다. 회수한 균체를 pH 7.5의 50 mM Tris-HCl 완충용액으로 현탁시킨 다음 초음파로 파괴한 뒤 원심분리하여 상등액을 취하였다. 상등액을 컬럼크로마토그래피로 Ni-NTA컬럼을 통과시켜 정제된 아밀라제를 얻었다.

50 mM 시트레이트 완충용액(pH 6.0)에 아카보스와 아스코르브산을 각각 10%(w/v)로 용해시켜 기질로 사용하였다. 기질 용액을 미리 55 ℃ 수조에 10분간 방치한 후 아카보스 1 mg 당 1 U의 BSMA를 첨가하여 48시간 동안 반응시켰다. 반응 후 반응액을 pH 2.0으로 적정하여 냉장보관하였다. 아스코르브산의 음전하를 이용하여 반응액을 이온 교환수지를 통과시켜 두가지 생성물과 아스코르브산을 다른 부산물과 분리하고, BioGel P-2 컬럼(1.6×90cm)을 통과시켜 반응생성물을 분리정제하였다.

실시예 2. 박막크로마토그라피를 이용한 반응생성물의 분석

실시예 1에서 얻어진 반응생성물을 분석하기 위해서, 박막크로마토그래피를 수행하였다. 반응 종결 후, 각 시료를 Whatman K5F TLC 플레이트(20cm×20cm)에 1μL씩 로딩하여 n-부탄올: 아세트산: 증류수 3:1:1 전개액에서 전개시켰다. 전개 후에 플레이트를 잘 건조시켜 먼저 254nm U.V.에서 확인하고, 메탄올에 0.3%(w/v) N-(1-나프틸)-에틸렌디아민과 5%(v/v) 황산을 용해시킨 발색액에 담갔다 꺼낸 후 110℃ 오븐에서 10분동안 발색시켰다. 분석 결과를 도 1에 나타냈다. 첫 번째 줄은 아스코르브산, 두 번째 줄은 아카보스 유도체(위에서부터 아카비오신-글루코스(PTS), 아카보스(Ac), 아이소아카보스(IAc)), 세 번째 줄은 실시예 1에서 얻은 반응생성물, 네 번째 줄은 실시예 1에서 얻은 반응생성물을 이온교환수지와 겔 투과 크로마토그래피로 정제하여 얻은 화합물중 α-1,6-아카비오신-글루코실 아스코르베이트이며, 다섯 번째줄은 정제된 α-1,2-아카비오신-글루코실아스코르베이트이다. 아카비오신-글루코스는 한국특허 공개공보 제 2000-25032호에 기재된 방법에 따라 제조하였으며, 이소아카보스는 한국특허 제 291597호에 기재된 방법에 따라 제조하였다.

세 번째 줄에서 알 수 있듯이, U.V.에서 아스코르브산이 전이된 두 가지 새로운 물질이 생성된 것이 확인되었다.

실시예 3. 고성능액체크로마토그라피를 이용한 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의 분석

실시예 1에서 얻은 생성물을 고성능액체크로마토그라피(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)를 이용하여 분석하였다. 시료는 실시예 1에서 얻은 반응생성물을 이온교환수지와 젤 투과 크로마토그래피로 정제하여 얻은 분리된 화합물을 초순수로 희석하여 0.45μm 박막여과지로 여과하여 20 μL를 주입하였고 유속은 0.7 mL/분으로 하여 분석하였다. HPLC 분석은 삼성사(한국)의 SLC-100 그래디언트 펌프와 자외선 검출기 및 C18 컬럼을 이용하여 시행하였으며, 용매는 100 mM(pH 2.0) 칼륨인산 완충용액을 사용하였다. 결과를 도 2에 나타냈으며, 피크 1은 아스코르브산, 피크 2는 α-1,6-아카비오신-글루코실 아스코르베이트, 피크 3은 α-1,2-아카비오신-글루코실 아스코르베이트를 나타낸다.

실시예 4: FAB-MASS(Xe-gas)를 이용한 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의 분자량 측정

FAB-MASS(Xe-gas)를 이용하여, 도 1의 래인 4와 5에 나타난 화합물의 분자량을 측정하였다. 시스템은 JMS-LCmate(일본 JEOL사)를 사용하였으며, glycerol를 메트릭스로 사용하였다. 결과를 도 3에 나타낸다. 이로부터 실시예 1에 의한 주요 화합물이 아카비오신-글루코실 아스코르브산임을 확인하였다.

실시예 5: ¹³ C NMR을 이용한 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의 구조 분석

발명의 주요 전이물인 α-1,6과 α-1,2결합의 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의 구조를 확인하기 위하여¹³C 핵자기공명분석 (NMR; JNM LA-400 FT-NMR 스펙트로미터(Jeol, 일본))을 수행하였다. 시료는 실시예 1에서 순수 정제한, α-1,6로 결합된 아카비오신-글루코실 아스코르베이트 20mg을 D₂O에 용해시킨 것을 사용하였다. 결과를 표 1 및 도 4에 나타낸다.

α-1,6-아카비오신-글루코실 아스코르베이트는 DEPT를 통해서 아스코르브산의 6번 탄소가 이동하였음을 알 수 있었고, α-1,2-아카비오신-글루코실 아스코르베이트는 α-1,2결합 아스코르브산 유도체처럼 아스코르산의 모이어티가 동일하였고, 최대흡수파장 또한 일치함을 확인하였다.

실시예 6: 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의 효소저해특성 실험

아카비오신-글루코스의 탄수화물 가수분해효소에 대한 저해 특성을 알아보기 위하여 아래 효소들에 대한 Ki 값을 구하였다. 사용한 효소는 쥐에서 분리한 α-글루코시다제, 돼지 췌장에서 분리한 α-아밀라제이었고 각각 다음과 같은 방법으로 반응속도를 측정하였다.

1) α-글루코오시다제

말토스를 기질로 사용하였고 효소에 의해 가수분해된 글루코스는 글루코스 옥시다제-퍼옥시다제 효소법으로 스펙트로포토미터에서 정량하였다. 즉, 큐벳에 기질 0.6mL, 발색시약 (4-아미노안티피린) 50 μL, 발색효소(글루토오스 옥시다제, 퍼옥시다제) 50 μL, 효소저해제(아카보스 혹은 아카비오신-글루코실 아스코르베이트) 50 μL 그리고 α-글루코시다제 50 μL를 넣고 500 nm에서 흡광도를 연속적으로 측정했으며 반응온도는 37℃로 유지하였다. 이 때 넣어준 α-글루코시다제는 반응 전에 해당 효소저해제 용액에서 5분간 방치하였다. 반응 속도는 10분간 흡광도 변화의 평균 기울기로 구하였다.

2) α-아밀라제

가용성 전분을 기질로 사용하여, 6 mM의 NaCl이 첨가된 pH 7.0인 50 mM 인산완충용액을 사용하여 37℃ 항온수조에서 반응시켰다. 기질의 농도를 각각 0.0214, 0.0285, 0.428, 0.857mg/ml로 사용하였다. 600 μL 기질에 75 μL의 효소저해제(아카보스, 혹은 아카비오신-글루코실 아스코르베이트)와 25 μL의 α-아밀라제를 첨가하여 반응을 시켰다. 시간별로 반응액 100 ㎕를 취하여 발색시약이 들어있는 마이크로플레이트 리더(microplate reader)에 넣어서 반응을 정지하였다. 85℃에서 35분간 발색을 시킨 후 540 nm에서 흡광도를 측정하여 초기 반응 속도를 구하였다.

발색방법으로 구리-바이신코니네이트 환원법(copper-bicinchoninate reducing value method)를 사용하였다. 97.1 g의 다이소디움 2,2'-바이신코니네이트, 3.2 g의 소디움 카르보하이드레이트 모노하이드레이트, 1.2 g의 소디움 바이카르보네이트를 증류수에 녹여 50 ml로 맞춘 용액 A와, 62 mg의 2가 황산구리, 63 mg의 L-세린을 증류수에 녹여 50 ml로 맞춘 용액 B를 1: 1로 섞어서 사용하였다. 각각의 효소에 대한 Ki 값을 표 2에 나타낸다.

실시예 7: 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의 최대흡수파장 측정

각 시료는 pH 6.0 아세트산 완충액에 녹이고, 파장 스캔닝 범위는 200-320nm에서 실시하였다. 그 결과를 도 5에 나타냈으며, α-1,6-아카비오신-글루코실 아스코르베이트는 265nm에서 최대흡광도를 보였고, α-1,2-아카비오신-글루코실 아스코르베이트는 260nm에서 최대흡광도를 나타내었다. 아스코르브산은 265nm에서 최대흡광도를 나타냈다.

실시예 8: 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의 안정성 측정

안정성 측정은 구리이온에 대한 안정성과 아스코르브산 산화제에 대한 안정성을 측정하였다. 구리이온에 대한 안정성 측정시 구리이온의 농도는 10 μM을 사용하였고, 아스코르브산 산화효소에 대한 안정성 측정시는 아스코르브산 산화효소 200mU를 사용하였으며, 각 시료는 pH 5.6 아세트산 완충액에 용해시켜 측정하였다. 실험결과를 도 6에 표시하였다. 도 6에서 보는 바와 같이 α-1,6-아카비오신-글루코실 아스코르베이트는 아스코르브산보다 다소의 안정성을 보이나, α-1,2-아카비오신-글루코실 아스코르베이트는 아스코르브산보다 매우 높은 안정성을 보임을 알 수 있다.

실시예 9: 아카비오신-글루코실 아스코르베이트의 항산화력 측정

항산화력 측정은 DPPH(1,1-Dipheny-1-picrylhydrazyl radical)의 수소와 화합하는 활성을 이용하여 측정하였다. DPPH를 99 %에탄올에 1.0x10^-4M로 만들고, 시료농도는 20 mM이 되도록 하였다. 암실에서 30분간 반응시킨 후 517nm에서 흡광도 차이를 측정하였고, 각 측정값은 3번 반복치의 평균이며, SD는 표준편차를 나타낸다. 측정결과를 표 3에 나타냈다.

본 발명은 아카보스 분해성 아밀라제의 당전이 반응에 의해 아카비오신-글로코스를 아스코르브산으로 전이시켜 제조되는 아카비오신-글루코실 아스코르베이트에 관한 것으로서, 탄수화물 분해효소를 효과적으로 억제하면서 항산화 작용을 가지며, 동시에 안정성이 높은 아카비오신-글루코실 아스코르베이트를 제공할 수 있다.

Claims (6)

1. 하기 화학식 1을 갖는 아카비오신-글루코실 아스코르베이트를 유효성분으로 포함하는 항산화능과 알파-아밀라제 또는 글루코시다제의 활성 억제능을 갖는 조성물.

   [화학식 1]
2. 하기 화학식 2를 갖는 아카비오신-글루코실 아스코르베이트를 유효성분으로 포함하는 항산화능과 알파-아밀라제 또는 글루코시다제의 활성 억제능을 갖는 조성물.

   [화학식 2]
3. 삭제
4. 삭제
5. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,

   상기 아카비오신-글루코실 아스코르베이트는 아스코르브산의 존재하에, 당전이성 아밀라제로 아카보스를 반응시켜 제조되는 것인 항산화능과 알파-아밀라제 또는 글루코시다제의 활성 억제능을 갖는 조성물.
6. 제 5 항에 있어서,

   상기 당전이성 아밀라제가 바실러스 스테아로써머필러스의 아밀라제(BSMA), 바실리스 리케니포미스의 아밀라제, 및 써머스속균의 아밀라제(ThMA)로 이루어지는 군에서 선택되는 항산화능과 알파-아밀라제 또는 글루코시다제의 활성 억제능을 갖는 조성물.