KR100420018B1 - 항종양제로서유용한테르페노이딕유도체(사르코딕타인) - Google Patents

Abstract

본 발명은 치료제로 사용되는 사르코딕타인으로서, 당분야에 공지된 테르페노이딕 유도체, 및 이들을 함유하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.

특히, 사르코딕타인은 인간 또는 동물의 암 치료에서 치료적 항신생물제로서 유용하게 사용될 수 있다.

Description

항종양제로서 유용한 테르페노이딕 유도체 (사르코딕타인)

본 발명은 사르코딕타인으로서 당분야에 공지된 테르페노이딕 유도체(Helvetica Chimica Acta Vol. 70, 1987, 2019 - 2027 및 Helvetica Chimica Acta, Vol. 71, 1988, 964 - 976) 에 관한 것이며, 이것은 치료제로서 유용하게 사용할 수 있다.

본 출원에서 언급한 사르코딕타인의 가능한 치료적 적용은 아직 보고되지 않았다.

특히, 본 발명에 따라 세포독성 활성의 관점에서, 사르코딕타인은 인간 또는 동물의 암 치료에서 치료적 항신생물제 (抗新生物劑, antineoplastic agent)제로서 사용될 수 있다.

따라서, 본 발명은 치료제로 사용하기 위한 하기로 이루어진 군으로 부터 선택된 화합물에 관한 것이다:

(-) - (4R, 4aR, 7R, 10S, 11S, 12aR, 1Z, 5E, 8Z) - 7, 10 - 에폭시 - 3, 4, 4a, 7, 10, 11, 12, 12a - 옥타히드로 - 7 - 히드록시 - 6 - (메톡시카르보닐) - 1, 10 - 디메틸 - 4 - (1 - 메틸에틸) 벤조시클로데센 - 11 - 일 (E) - 3 - (1 - 메틸 - 1H - 이미다졸 - 4 - 일) 아크릴레이트 (사르코딕타인 A);

(-) - (4R, 4aR, 7R, 10S, 11S, 12aR, 1Z, 5E, 8Z) - 7, 10 - 에폭시 - 6 -(에톡시카르보닐) - 3, 4, 4a, 7, 10, 11, 12, 12a - 옥타히드로 - 7 - 히드록시 - 1, 10 - 디메틸 - 4 - (1 - 메틸에틸) 벤조시클로데센 - 11 - 일 (E) - 3 - (1 - 메틸 - 1H - 이미다졸 - 4 - 일) 아크릴레이트 (사르코딕타인 B);

(-) - (3R, 4S, 4aS, 7S, 10R, 11R, 12aS, 1Z, 5E, 8Z) - 7, 10 - 에폭시 - 3, 4, 4a, 7, 10, 11, 12, 12a - 옥타히드로 - 3, 7 - 디히드록시 - 6 - (메톡시카르보닐) - 1, 10 - 디메틸 - 4 - (1 - 메틸에틸) 벤조시클로데센 - 11 - 일 (E) - 3 - (1 - 메틸 - 1H - 이미다졸 - 4 - 일) 아크릴레이트 (사르코딕타인 C);

(-) - (3R, 4S, 4aS, 7S, 10R, 11R, 12aS, 1Z, 5E, 8Z) - 3 - 아세톡시 - 7, 10 - 에폭시 - 3, 4, 4a, 7, 10, 11, 12, 12a - 옥타히드로 - 7 - 히드록시 - 6 - (메톡시카르보닐) - 1, 10 - 디메틸 - 4 - (1 - 메틸에틸) 벤조시클로데센 - 11 - 일 (E) - 3 - (1 - 메틸 - 1H - 이미다졸 - 4 - 일) 아크릴레이트 (사르코딕타인 D);

(+) - (3R, 4S, 4aS, 7S, 10R, 11R, 12aS, 1Z, 5E, 8Z) - 7, 10 - 에폭시 - 3, 4, 4a, 7, 10, 11, 12, 12a - 옥타히드로 - 3, 7 - 디히드록시 - 6 - (메톡시카르보닐) - 1, 10 - 디메틸 - 4 - (1 - 메틸에틸) 벤조시클로데센 - 11 - 일 (Z) - 3 - (1 - 메틸 - 1H - 이미다졸 - 4 - 일) 아크릴레이트 (사르코딕타인 E); 및

(+) - (1R, 4R, 4aR, 7R, 10S, 11S, 12aR, 2Z, 5E, 8Z) - 7, 10 - 에폭시 - 1, 4, 4a, 7, 10, 11, 12, 12a - 옥타히드로 - 1, 7 - 디히드록시 - 6 - (메톡시카르보닐) - 1, 10 - 디메틸 - 4 - (1 - 메틸에틸) 벤조시클로데센 - 11 - 일 (E) - 3 - (1 - 메틸 - 1H - 이미다졸 - 4 - 일) 아크릴레이트 (사르코딕타인 F).

상기 명시된 화합물의 구조식은 하기 화학식을 참고로 하여 하기 표 1 에 기재한다:

상기 화학식중, 부호 ＊ 는 키랄 중심을 나타낸다.

상기 표 1 에서:

부호 Me 는 메틸을 의미하고;

부호 Et 는 에틸을 의미하며;

부호 OAc 는 OCOCH₃를 의미한다.

부호 (E)u 및 (Z)u 는 각기 하기 식의 (E) 및 (Z) 우로카노일 부분을 나타낸다:

특히, 상기 기재된 사르코딕타인 A 내지 F 는 이들의 세포독성 활성, 항종양 활성으로 인하여 인간 또는 동물의 암을 치료하기 위한 치료제로서 유용할 수 있다. 암은 육종 (sarcomas), 암종 (carcinomas), 림프종 (lymphomas), 신경아세포종 (neuroblastomas), 흑색종 (melanomas), 골수종 (myelomas), 빌름스 종양 (Wilms tumor), 백혈병 (leukemias) 및 선암 (adenocarcinomas) 에서 선택될 수 있다.

본 발명의 사르코딕타인은 문헌 [Helvetica Chimica Acta Vol. 70, 1987, 2025 쪽] 에 보고된 방법에 따라 지중해 스톨로니페란 산호 (Mediterranean Stoloniferan Coral) "사르코딕타이온 로세움 (Sarcodictyon Roseum)" (롤란디아 로세아, Rolandia rosea) (Forbes 1847) 으로부터 단리하여 수득될 수 있다.

본 발명의 사르코딕타인에 대한 생물학적 활성은 튜불린 조립의 증강에서의그들의 활성을 평가하기 위한 시험관내 시험 (a) 및 독소루비신 내성인 L 1210 세포 (L 1210/Dx) 및 L 1210 세포 양자의 세포독성 활성을 평가하기 위한 "시험관내" 시험 (b) 에 의하여 입증된다.

예로서, 사르코딕타인 A (국제 코드 FCE 29123) 및 사르코딕타인 C (국제 코드 FCE 29119) 의 활성은 시험 (a) 및 (b) 에서 기술된 방법에 따라 평가되었다.

(a) 튜불린 조립 시험

송아지 뇌 튜불린을 조립 - 분해의 두 사이클로 제조하고 (Shelanski M. L., Gaskin F. 및 Cantor C. R., Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 70, 765 - 768, 1973) 액체 질소 중에서 MAB (0.1 M MES, 2.5 mM EGTA, 0.5 mM MgSO₄, 0.1 mM EDTA, 0.1 mM DTT, pH 6.4) 에 보존하였다.

모든 실험은 4 주 미만 동안 보존된 단백질에서 수행하였다.

각각의 실험전에, 튜불린을 4 ℃ 에서 30 분간 유지하였다. 조립을 가스킨 (Gaskin) 등의 방법으로 모니터하였다 (Gaskin F., Cantor C. R. 및 Shelanski M.L., J. Molec. Biol. 89, 737 - 758, 1974).

튜불린 (1 mg/ml) 및 1 mM GTP 를 함유하는 큐베트 (1 cm 통로) 를 37 ℃ 로 이동시키고 연속 혼탁도 측정을 자동 기록계 및 항온 조절 시료 챔버가 설치된 이중 빔 분광광도계인 퍼킨 - 엘머 557 이중 파장으로 340 ㎚ 에서 측정하였다.

30 분후, 4 mM CaCl₂를 가하고 혼탁도가 감소할 때 10 분간 해중합반응을 측정한다.

15 분의 규칙적인 간격으로 시험 화합물의 투여량을 가하고 혼탁도의 변화를 모니터하였다.

자료는 시험 화합물에 의해 유도되는 재중합 반응의 백분율로서 표시된다.

수득한 결과를 표 2 에 기재한다.

상기 표에 기재된 자료는 심지어는 일반적으로 튜불린 조립을 억제하는 CaCl₂의 존재하에서도, 시험한 사르코딕타인이 튜불린 재중합 반응을 증진시킬 수 있다는 것을 명백히 입증한다.

당해 기술에서 잘 알려진 바와 같이, 미소관은 항암 화학 치료제의 가장 전략적인 세포내 표적이다 (Rowinsky 등, Review, Vol. 82, No. 15, 1990 년 8 월 1 일).

미소관의 해중합을 유도하는 콜치신 및 빈카 알칼로이드와 같은 전통적인 항미소관제와는 달리, 사르코딕타인은 튜불린 중합을 유도하고 극단적으로 안정하고 비관능성인 미소관을 형성하므로서, 천연 생성물의 스크리닝으로부터 나타나는 가장 흥미있는 항암제중의 하나인 탁솔과 유사한 활성의 메카니즘을 갖는 것으로 추정된다.

그러므로, 사르코딕타인은 종양 세포내에서 세포 분열을 중지시키게 하는, 빠른 미소관 형성 및 안정화를 촉진하는 능력 때문에, 인간 또는 동물의 암 치료에서의 치료적 항신생물제로서 유용할 수 있다.

(b) 세포 배양 및 약물 민감성 검정

L1210 및 L1210/DX (독소루비신 내성) 쥐 백혈병 세포계를 10 % 태내 송아지 혈청 (Flow, Irwine, UK), 2 mM L - 글루타민 (Gibco Europe, Glasgow, UK), 10 μM β - 메르캅토에탄올, 100 단위/ml 페니실린 및 100 μg/ml 스트렙토마이신이 추가된 RPMI 1640 배지 (GIBCO, Grand island, NY) 에서 정체 현탁 배양액으로서 시험관내 증식시킨다.

지수적으로 증식한 세포를 12 - 웰/플레이트 (Costar, Cambridge, MA) 에 접종 (1 ×10⁵세포/ml) 하고 여러 농도의 시험 화합물을 접종후 즉시 가하였다.

플레이트를 가습된 5 % CO₂대기중 48 시간 동안 37 ℃ 에서 항온배양하였다.

세포 증식 억제는 ZBI 코울터 카운터 (Coulter Counter) (Hialeah, FL) 에서 생존 세포를 계산하여 평가하였다. 50 % 억제 농도 (IC₅₀) 는 유도된 농도 - 대응 곡선에 따라 계산되었다. 각 시험 화합물의 농도에 대하여는, 중복 배양액이 사용되었다.

수득한 결과를 하기 표 3 에 기재한다.

상기 표에 기재된 자료에서 명백히 알 수 있는 바와 같이, 사르코딕타인은 L1210 및 독소루비신 내성의 L1210 세포 (L1210/Dx) 양자에 대해 훌륭한 "시험관내" 세포 독성 활성이 양호한 것으로 나타낸다.

L 1210/DX 세포에 대한 그들의 유효성의 관점에서, 사르코딕타인은 화학 치료제, 예컨대 안트라사이클린 글리코시드, 특히 독소루비신에 내성인 종양의 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

사르코딕타인 A, 사르코딕타인 B, 사르코딕타인 C, 사르코딕타인 D, 사르코딕타인 E 및 사르코딕타인 F 에서 선택된 화합물의 약제학적 유효량을 투여하는 것을 포함하는 방법에 의하여 인간 또는 동물이 치료될 수 있다. 인간 또는 동물의 상태는 이렇게 하므로서 개선될 수 있다.

본 발명의 사르코딕타인은 여러 가지 투여 형태, 예컨대 정제, 캡슐, 당 또는 막 피복정, 액체 용액 또는 현탁액 형태의 경구 투여; 좌약 형태의 직장투여; 예컨대 근육내, 또는 정맥내 주사 또는 주입에 의한 비경구 투여로 투여될 수 있다.

투여량은 연령, 체중, 환자의 상태 및 투여 경로에 의존하며; 예를들어, 본 발명의 대표 화합물 FCE 29213 (사르코딕타인 A) 을 성인에게 경구 투여할때의 복용량은 하루에 약 0.01 g 내지 약 1 g 인 범위일 수 있다.

본 발명에는 약제학적으로 허용가능한 부형제 (이것은 담체 또는 희석제일 수 있다) 와 혼합하여, 본 발명의 사르코딕타인을 활성원으로서 함유하는 약제학적 조성물도 또한 포함된다.

본 발명의 화합물을 함유하는 약제학적 조성물은 일반적으로 하기의 통상적인 방법에 따라 제조되며 이것은 약제학적으로 적당한 형태로 투여된다.

예를들어, 고체 경구 형태는 활성 화합물과 함께, 희석제, 예컨대, 락토스, 데스트로스, 사카로스, 셀룰로스, 옥수수 전분 또는 감자 전분; 윤활제, 예컨대 실리카, 탈크, 스테아르산, 스테아르산 마그네슘 또는 스테아르산 칼슘, 및/또는 폴리에틸렌 글리콜; 결합제, 예컨대 전분, 아라비아 고무, 젤라틴, 메틸셀룰로스, 카르복시메틸셀룰로스 또는 폴리비닐 피롤리돈; 분리제, 예컨대 전분, 아르긴산, 아르기네이트 또는 나트륨 전분 글리콜레이트; 기포성 혼합물; 색소; 감미료; 습윤제 예컨대, 레시틴, 폴리소르베이트, 라우릴술페이트; 및 일반적으로 약제에 사용되는 비독성 및 약리학적 비활성 물질을 함유할 수 있다.

상기 약제는 공지 방법, 예컨대 혼합, 과립화, 정제화, 당 코팅, 또는 막 코팅 방법으로 제조될 수 있다.

경구 투여용 액제 분산액은 예컨대, 시럽, 에멀션 및 현탁액일 수 있다.

시럽은 담체로서, 예를들어 사카로스, 또는 글리세린 및/또는 만니톨 및/또는 소르비톨과의 사카로스를 함유할 수 있다.

현탁액 및 에멀션은 담체로서 예컨대, 천연 검, 한천, 알긴산 나트륨, 펙틴, 메틸셀룰로스, 카르복시메틸 셀룰로스, 또는 폴리비닐 알콜을 함유할 수 있다.

근육내 주사용의 현탁액 또는 용액은 예를들어 활성 화합물과 함께, 약제학적으로 허용가능한 담체, 예컨대, 살균수, 올리브유, 올레산 에틸, 글리콜, 예컨대 폴리에틸렌 글리콜, 및 필요하다면 적당량의 리도카인 히드로클로라이드를 함유할 수 있다.

정맥내 주사 또는 주입용 용액은 담체로서, 예컨대, 살균수를 함유하거나, 또는 바람직하게는 이들은 살균, 수성의 등장성 염수 용액의 형태일 수 있다.

좌약은 활성 화합물과 함께 약제학적으로 허용가능한 담체, 예컨대, 코코아 버터, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르 계면활성제 또는 레시틴을 함유할 수 있다.

Claims (6)

1. 유효 성분으로서 하기로 이루어지는 군에서 선택되는 화합물, 및 약제학적으로 허용가능한 담체 및/또는 희석제를 함유하는 것을 특징으로 하는 항종양 치료용 약제학적 조성물:

   (-) - (4R, 4aR, 7R, 10S, 11S, 12aR, 1Z, 5E, 8Z) - 7, 10 - 에폭시 - 3, 4, 4a, 7, 10, 11, 12, 12a - 옥타히드로 - 7 - 히드록시 - 6 - (메톡시카르보닐) - 1, 10 - 디메틸 - 4 - (1 - 메틸에틸) 벤조시클로데센 - 11 - 일 (E) - 3 - (1 - 메틸 - 1H - 이미다졸 - 4 - 일) 아크릴레이트 (사르코딕타인 A);

   (-) - (4R, 4aR, 7R, 10S, 11S, 12aR, 1Z, 5E, 8Z) - 7, 10 - 에폭시 - 6 - (에톡시카르보닐) - 3, 4, 4a, 7, 10, 11, 12, 12a - 옥타히드로 - 7 - 히드록시 - 1, 10 - 디메틸 - 4 - (1 - 메틸에틸) 벤조시클로데센 - 11 - 일 (E) - 3 - (1 - 메틸 - 1H - 이미다졸 - 4 - 일) 아크릴레이트 (사르코딕타인 B);

   (1) - (3R, 4S, 4aS, 7S, 10R, 11R, 12aS, 1Z, 5E, 8Z) - 7, 10 - 에폭시 - 3, 4, 4a, 7, 10, 11, 12, 12a - 옥타히드로 - 3, 7 - 디히드록시 - 6 -(메톡시카르보닐) - 1, 10 - 디메틸 - 4 - (1 - 메틸에틸) 벤조시클로데센 - 11 - 일 (E) - 3 - (1 - 메틸 - 1H - 이미다졸 - 4 - 일) 아크릴레이트 (사르코딕타인 C);

   (-) - (3R, 4S, 4aS, 7S, 10R, 11R, 12aR, 1Z, 5E, 8Z) - 3 - 아세톡시 - 7, 10 - 에폭시 - 3, 4, 4a, 7, 10, 11, 12, 12a - 옥타히드로 - 7 - 히드록시 - 6 - (메톡시카르보닐) - 1, 10 - 디메틸 - 4 - (1 - 메틸에틸) 벤조시클로데센 - 11 -일 (E) - 3 - (1 - 메틸 - 1H - 이미다졸 - 4 - 일) 아크릴레이트 (사르코딕타인 D);

   (+) - (3R, 4S, 4aS, 7S, 10R, 11R, 12aS, 1Z, 5E, 8Z) - 7, 10 - 에폭시 - 3, 4, 4a, 7, 10, 11, 12, 12a - 옥타히드로 - 3, 7 - 디히드록시 - 6 - (메톡시카르보닐) - 1, 10 - 디메틸 - 4 - (1 - 메틸에틸) 벤조시클로데센 - 11 - 일 (Z) - 3 - (1 - 메틸 - 1H - 이미다졸 - 4 - 일) 아크릴레이트 (사르코딕타인 E); 및

   (+) - (1R, 4R, 4aR, 7R, 10S, 11S, 12aR, 2Z, 5E, 8Z) - 7, 10 - 에폭시 - 1, 4, 4a, 7, 10, 11, 12, 12a - 옥타히드로 - 1, 7 - 디히드록시 - 6 - (메톡시카르보닐) - 1, 10 - 디메틸 - 4 - (1 - 메틸에틸) 벤조시클로데센 - 11 - 일 (E) - 3 - (1 - 메틸 - 1H - 이미다졸 - 4 - 일) 아크릴레이트(사르코딕타인 F).
2. 유효 성분으로서 제 1 항에 기재된 바와 같은 화합물, 및 약제학적으로 허용가능한 담체 및/또는 희석제를 함유하는 것을 특징으로 하는, 종양세포중 세포 분열을 중지시키게 하는 튜불린 조립의 증강제용 약제학적 조성물.
3. 유효 성분으로서 제 1 항에 기재된 바와 같은 화합물, 및 약제학적으로 허용가능한 담체 및/또는 희석제를 함유하는 것을 특징으로 하는, 인간 또는 동물의 암치료에서의 치료적 항신생물제용인 약제한적 조성물.
4. 제 1 항에 있어서, 화학 치료제에 대하여 내성인 종양의 치료에 사용되는 약제학적 조성물.
5. 제 4 항에 있어서, 화학 치료제가 안트라사이클린 글리코시드인 약제학적 조성물.
6. 제 5 항에 있어서, 안트라사이클린 글리코시드가 독소루비신인 약제학적 조성물.