JPH06324041A - Indirect immunoagglutination measuring method and precipitation pattern measuring apparatus used in the method - Google Patents
Indirect immunoagglutination measuring method and precipitation pattern measuring apparatus used in the methodInfo
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- JPH06324041A JPH06324041A JP13907693A JP13907693A JPH06324041A JP H06324041 A JPH06324041 A JP H06324041A JP 13907693 A JP13907693 A JP 13907693A JP 13907693 A JP13907693 A JP 13907693A JP H06324041 A JPH06324041 A JP H06324041A
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】この発明は、マイクロプレートの
各ウエルの底部に免疫測定用試薬の粒子を強制沈降させ
たのち、マイクロプレートを所定の角度に傾斜させてウ
エル底部に粒子の流れ出しによる沈降パターンを形成さ
せて測定する間接凝集免疫測定法と、この間接凝集免疫
測定法に用いる沈降パターン測定装置に関するものであ
る。BACKGROUND OF THE INVENTION The present invention relates to a method in which particles of an immunoassay reagent are forcibly settled at the bottom of each well of a microplate, and then the microplate is tilted at a predetermined angle to allow the particles to flow out to the bottom of the well. The present invention relates to an indirect agglutination immunoassay for forming and measuring a pattern and a sedimentation pattern measuring device used in the indirect agglutination immunoassay.
【０００２】[0002]
【従来の技術】この発明の発明者は、ウエル底部をＵ字
状またはＶ字状に形成したマイクロプレートのウエル内
に所定の希釈検体溶液に所定の試薬粒子液を添加混合
し、反応後に粒子を含む成分を各ウエル底部に磁力によ
って強制沈降させたのち、マイクロプレートを傾斜さ
せ、沈降した粒子のウエルからの剥離状況から免疫反応
の有無を判断する間接凝集免疫測定方法とその装置を特
開平３−１４４３６７号として提案した。この間接凝集
免疫測定法におけるマイクロプレート中の粒子の流れ出
しによる沈降パターンを大別すると、免疫反応によって
粒子・粒子間の結合が生じてマイクロプレートを傾けて
も粒子が動かずウエルの底に点状になる反応陽性の沈降
パターンと、免疫反応が起こらなかったために粒子・粒
子間の結合がなく、マイクロプレートを傾けることによ
って粒子が流れ出しウエルの側壁にまで達する反応陰性
の沈降パターンおよび両者の中間にあたる沈降パターン
の３通りがある。しかして、これらマイクロプレートの
ウエルの底に形成された粒子の流れ出しによる沈降パタ
ーンを読み取る手段としては、たとえばテレビカメラで
マイクロプレートを上方から写し取る方法や、ラインセ
ンサーを使用し、かつ画像処理技術を用いて写し取り、
各々の沈降パターンの流れ出した長さを計測して免疫反
応の有無と関連付ける方法などが存在する。2. Description of the Related Art The inventor of the present invention adds a predetermined reagent particle solution to a predetermined diluted specimen solution and mixes it in a well of a microplate having a U-shaped or V-shaped bottom portion, and after reaction, particles are added. An indirect agglutination immunoassay method and apparatus for determining the presence or absence of an immune reaction from the state of separation of the sedimented particles from the well after tilting the microplate by force to force the components containing No. 3-14367. In this indirect agglutination immunoassay, the sedimentation patterns caused by the flow of particles in a microplate can be roughly classified. The immune reaction causes binding between the particles, and the particles do not move even when the microplate is tilted. The reaction-precipitation pattern is that there is no binding between particles due to no immune reaction, and the reaction negative sedimentation pattern in which particles flow out by tilting the microplate and reach the side wall of the well There are three types of sedimentation patterns. As means for reading the sedimentation pattern due to the flow of particles formed on the bottoms of the wells of these microplates, for example, a method in which the microplate is photographed from above with a television camera, a line sensor is used, and image processing technology is used. Copy using
There is a method in which the flow-out length of each sedimentation pattern is measured and correlated with the presence or absence of an immune reaction.
【０００３】[0003]
【発明が解決しようとする課題】前記特開平３−１４４
３６７号公報に開示した間接凝集免疫測定法は、マイク
ロプレートのウエル内に粒子を自然沈降させ、粒子の沈
降パターンから抗原抗体反応の有無を調べる静置法など
に比べて短時間に精度よく免疫反応の有無を判定できる
点で優れたものであるが、粒子の流れ出しによる沈降パ
ターンをテレビカメラやラインセンサーを使用して読み
取ることが不可欠である。しかしながら、これらテレビ
カメラやラインセンサーによる画像取込み方法において
は、テレビカメラやラインセンサーとマイクロプレート
の間の距離を要するため沈降パターン判定のための装置
が大型にならざるを得ず、両者間の距離が短い場合には
Ｕ字状またはＶ字状のマイクロプレートにあっては、底
部中央と周辺部では距離が一定ではないためピントにズ
レが生じて画像に歪みが生ずるなどの不都合があった。
また、間接凝集免疫測定法に使用するガラス製またはポ
リスチレン等の合成樹脂製のマイクロプレートは、一般
的にウエルの底部がＵ字状またはＶ字状で、一つのマイ
クロプレートに９６ケ（縦１２列×横８列）設けたもの
であるが、マイクロプレートの成形に際してウエルは底
部をＵ字状もしくはＶ字状に形成するためウエル底周辺
のエッジ部に成形時の歪みが生ずるので、各ウエルの縦
もしくは横方向における整列位置が必ずしも同一線上に
なく、沈降パターンの形成後にセンサーを縦または横方
向にウエル底部の中心部に沿って移動させても、前記整
列性のズレによって沈降パターン長さの計測が不正確と
なる。このようなマイクロプレート成形上におけるウエ
ルの整列性のズレは、免疫反応の基準となる沈降パター
ンの測定精度を不確実とし、免疫反応の有無の正確な判
定の障害となると共に、データーの再現性を大きく変動
させるものである。DISCLOSURE OF THE INVENTION Problems to be Solved by the Invention
The indirect agglutination immunoassay method disclosed in Japanese Patent No. 367 discloses a method in which particles are allowed to spontaneously settle in the wells of a microplate, and immunization is performed accurately in a shorter time than a static method in which the presence or absence of an antigen-antibody reaction is checked from the settling pattern of particles. It is excellent in that it can judge the presence or absence of reaction, but it is essential to read the sedimentation pattern due to the outflow of particles using a television camera or line sensor. However, in these image capturing methods using a television camera or line sensor, the distance between the television camera or line sensor and the microplate is required, so the device for determining the sedimentation pattern must be large, and the distance between the two is inevitable. In the case of a short length, in the U-shaped or V-shaped microplate, the distance between the center of the bottom part and the peripheral part is not constant, so that there is a problem that the focus is deviated and the image is distorted.
Further, the microplate made of glass or synthetic resin such as polystyrene used for the indirect agglutination immunoassay generally has U-shaped or V-shaped bottoms of the wells, and 96 microplates (12 vertical 12 However, since the wells are formed in a U-shape or V-shape at the bottom during molding of the microplate, distortion occurs during molding at the edge around the bottom of the wells. The alignment positions in the vertical or horizontal direction are not always on the same line, and even if the sensor is moved in the vertical or horizontal direction along the center of the bottom of the well after the formation of the sedimentation pattern, the sedimentation pattern length is caused by the misalignment. Will be inaccurate. Such misalignment of wells on the microplate molding makes the measurement accuracy of the sedimentation pattern, which is the basis of the immune reaction, uncertain, which hinders accurate determination of the presence or absence of the immune reaction, and reproducibility of the data. Is to be changed greatly.
【０００４】この発明はかゝる現状に鑑み、間接凝集法
に使用するマイクロプレートに設けられる多数のウエル
の整列性に成形上の誤差があっても、粒子の流れ出しに
よる沈降パターンの長さを精度よく測定することができ
る間接凝集免疫測定法と、この間接凝集免疫測定法に用
いる沈降パターン測定装置を提供せんとするものであ
る。In view of the present situation, the present invention can reduce the length of the sedimentation pattern due to the flow-out of particles even if there is a molding error in the alignment of many wells provided in the microplate used in the indirect agglutination method. It is intended to provide an indirect agglutination immunoassay that can be accurately measured and a sedimentation pattern measuring device used in the indirect agglutination immunoassay.
【０００５】[0005]
【課題を解決するための手段】前記目的を達成するた
め、この発明の間接凝集免疫測定法は、基本的には、ウ
エルの底部に免疫測定用試薬の粒子を沈降させたのち、
ウエルを所定角度に傾斜させてウエル底部に粒子の流れ
出しによる沈降パターンを形成させて免疫反応の有無を
判定するに際し、ウエルを傾斜させてウエル底部に沈降
パターンを形成させ、形成された沈降パターンを流れ出
し方向に直交する状態でマイクロプレートまたは光セン
サーを移動させて沈降パターンの長さを複数地点におい
て測定し、得られた長さを沈降パターンの長さとして免
疫反応の有無を判定することを特徴とするものである。In order to achieve the above object, the indirect agglutination immunoassay method of the present invention basically comprises the steps of precipitating particles of an immunoassay reagent at the bottom of a well,
When determining the presence or absence of an immune reaction by inclining the well at a predetermined angle to form a sedimentation pattern due to the outflow of particles at the bottom of the well, inclining the well to form a sedimentation pattern at the bottom of the well The feature is that the microplate or the optical sensor is moved in a state orthogonal to the flow-out direction to measure the length of the sedimentation pattern at multiple points, and the obtained length is used as the length of the sedimentation pattern to determine the presence or absence of an immune reaction. It is what
【０００６】具体的には、この発明の間接凝集免疫測定
法は、マイクロプレートの各ウエルの底部に免疫測定用
試薬の粒子を沈降させたのち、マイクロプレートを所定
角度に傾斜させてウエル底部に粒子の流れ出しによる沈
降パターンを形成させて免疫反応の有無を判定するに際
し、各ウエルの粒子の流れ出し方向における沈降パター
ンの長さのサーチすべき区間を光センサーをによって測
定したのち、マイクロプレートを傾斜させてウエル底部
に沈降パターンを形成させ、形成された沈降パターンを
流れ出し方向に直交する状態でマイクロプレートまたは
光センサーを移動させて沈降パターンの長さを複数地点
において測定し、得た沈降パターン計測値と前記沈降パ
ターンの長さのサーチすべき区間の測定値と比較して最
も長い沈降パターンを沈降パターンとして免疫反応の有
無を判定することを特徴とするものである。Specifically, in the indirect agglutination immunoassay method of the present invention, after particles of the immunoassay reagent are settled on the bottom of each well of the microplate, the microplate is tilted at a predetermined angle to the bottom of the well. When determining the presence or absence of an immune reaction by forming a sedimentation pattern due to the outflow of particles, measure the section to be searched for the length of the sedimentation pattern in the outflow direction of the particles in each well with an optical sensor, and then tilt the microplate. Then, the sedimentation pattern is formed at the bottom of the well, and the sedimentation pattern is measured at multiple points by moving the microplate or the optical sensor in a state where the sedimentation pattern formed is orthogonal to the flow-out direction. Value and the longest sedimentation pattern compared with the measured value of the section to be searched for the length of the sedimentation pattern It is characterized in determining the presence or absence of immune response as precipitation pattern.
【０００７】より具体的には、この発明の間接凝集免疫
測定法は、マイクロプレートの各ウエルの底部に免疫測
定用試薬の磁性体粒子または磁性体を含む粒子を含有し
た成分を磁力によって強制沈降させたのち、マイクロプ
レートを所定角度に傾斜させてウエル底部に粒子の流れ
出しによる沈降パターンを形成させて免疫反応の有無を
判定するに際し、沈降パターンの形成前に各ウエルの粒
子の流れ出し方向における沈降パターンの長さのサーチ
すべき区間をあらかじめ光センサーによって測定し、該
沈降パターンの長さのサーチすべき区間の測定後にマイ
クロプレートを傾斜させてウエル底部に沈降パターンを
形成させ、形成された沈降パターンを流れ出し方向に直
交する状態でマイクロプレートまたは光センサーを微小
移動させて沈降パターンの長さを複数地点において測定
し、得た沈降パターン計測値とあらかじめ測定した沈降
パターンの長さのサーチすべき区間の測定値を比較して
最も長い長さを沈降パターンとして免疫反応の有無を判
定することを特徴とするものである。More specifically, in the indirect agglutination immunoassay method of the present invention, a magnetic particle or a component containing a particle containing a magnetic material of an immunoassay reagent is forcibly settled by magnetic force at the bottom of each well of a microplate. After determining the presence or absence of an immune reaction by inclining the microplate at a predetermined angle to form a sedimentation pattern due to the outflow of particles at the bottom of the well, settling in the outflow direction of the particles in each well before forming the sedimentation pattern The section to be searched for the length of the pattern is measured by an optical sensor in advance, and after measuring the section to be searched for the length of the sedimentation pattern, the microplate is tilted to form a sedimentation pattern at the bottom of the well, and the sedimentation formed Move the microplate or the optical sensor slightly in a state that the pattern is perpendicular to the flow-out direction, and The length of the sediment is measured at multiple points, and the obtained sedimentation pattern measurement value is compared with the measurement value of the section to be searched for the length of the sedimentation pattern measured in advance, and the longest length is used as the sedimentation pattern of the immune reaction. It is characterized by determining the presence or absence.
【０００８】さらに具体的には、この発明の間接凝集免
疫測定法は、所定角度で傾斜するベース本体上にマイク
ロプレート載置台を傾斜方向に沿って移動可能に設け、
該マイクロプレート載置台の移動方向における前方位置
にマイクロプレートの縦列もしくは横列に形成されたウ
エルと同数の光センサーを同一線上に設けたセンサーブ
ロックをマイクロプレート載置台の移動方向と直交させ
て設けた沈降パターン測定装置を使用し、沈降パターン
の形成前に各ウエルの粒子の流れ出し方向における沈降
パターンの長さのサーチすべき区間をマイクロプレート
または光センサーを微小づつ移動させながら各ウエルに
ついて測定し、該沈降パターンの長さのサーチすべき区
間の測定後にベース本体を傾斜させてマイクロプレート
の各ウエル底部に沈降パターンを形成させ、形成された
沈降パターンを流れ出し方向に直交する状態でマイクロ
プレートまたは光センサーを微小移動させて沈降パター
ンの長さを複数地点において測定し、得た沈降パターン
計測値とあらかじめ測定した沈降パターンの長さのサー
チすべき区間の測定値を比較して最も長い長さを沈降パ
ターンとして免疫反応の有無を判定することを特徴とす
るものである。More specifically, in the indirect agglutination immunoassay method of the present invention, a microplate mounting table is provided on a base body inclined at a predetermined angle so as to be movable in the inclination direction,
At the front position in the moving direction of the microplate mounting table, a sensor block having the same number of optical sensors as the wells formed in columns or rows of the microplate on the same line was provided orthogonal to the moving direction of the microplate mounting table. Using a sedimentation pattern measuring device, the section to be searched for the length of the sedimentation pattern in the outflow direction of the particles in each well before the formation of the sedimentation pattern is measured for each well while moving the microplate or the optical sensor minutely. After measuring the section to be searched for the length of the sedimentation pattern, the base body is tilted to form a sedimentation pattern on the bottom of each well of the microplate, and the formed sedimentation pattern is orthogonal to the flow-out direction. The sensor can be moved slightly to adjust the sedimentation pattern length to multiple locations. It is characterized in that the presence or absence of an immune reaction is determined by comparing the obtained sedimentation pattern measurement value with the measurement value of the section to be searched for the length of the sedimentation pattern measured in advance and using the longest length as the sedimentation pattern. To do.
【０００９】一方、前記の間接凝集免疫測定法に使用す
る沈降パターン測定装置は、所定角度で傾斜するベース
本体上にマイクロプレートを載置するマイクロプレート
載置台を傾斜方向に沿って移動可能に設け、該マイクロ
プレート載置台の移動方向における前方位置にマイクロ
プレートの縦列もしくは横列に形成されたウエルと同数
の光センサーを同一線上に設けたセンサーブロックをマ
イクロプレート載置台の移動方向と直交する状態で設
け、該センサーブロックまたはマイクロプレート載置台
のいずれか一方を微小移動できるよう構成したことを特
徴とするものである。On the other hand, in the sedimentation pattern measuring apparatus used in the above-mentioned indirect agglutination immunoassay method, a microplate mounting table for mounting a microplate on a base body inclined at a predetermined angle is provided so as to be movable along the inclination direction. In a state in which a sensor block having the same number of optical sensors as the wells formed in columns or rows of the microplates on the same line at the front position in the moving direction of the microplate mounting table is orthogonal to the moving direction of the microplate mounting table, It is characterized in that it is provided so that either one of the sensor block and the microplate mounting table can be minutely moved.
【００１０】この発明において、免疫測定用試薬の粒子
とは、磁性体粒子、強磁性体を含んだゼラチン粒子、磁
性体を血清アルブミンで被覆した粒子、磁性体を合成ポ
リマーで被覆した粒子、合成ポリマー中磁性体を含んだ
粒子、特公昭６３−２９２２３号公報に記載されたゼラ
チン粒子、ウサギや羊またはヤギなどの各種動物赤血
球、シリカ、カリオン等の無機粒子などである。また、
マイクロプレートの各ウエルの底部への粒子の強制沈降
は、磁力によるものであっても、遠心力による強制沈降
であってもよいが、免疫測定方法の自動化の点からは前
記した各種磁性粒子を用いて磁力による強制沈降が望ま
しい。In the present invention, the particles of the immunoassay reagent are magnetic particles, gelatin particles containing a ferromagnetic material, particles of a magnetic material coated with serum albumin, particles of a magnetic material coated with a synthetic polymer, and synthetic particles. Examples include particles containing a magnetic substance in a polymer, gelatin particles described in JP-B-63-29223, various animal red blood cells such as rabbit, sheep or goat, and inorganic particles such as silica and carion. Also,
Forced sedimentation of particles to the bottom of each well of the microplate may be magnetic force or centrifugal force, but from the viewpoint of automation of the immunoassay method, the above-mentioned various magnetic particles are used. Forced sedimentation by magnetic force is desirable.
【００１１】また、マイクロプレートの各ウエルの粒子
の流れ出し方向における沈降パターンの長さのサーチす
べき区間とは、粒子の流れ出し方向におけるウエルの前
方の円周上における一点と該一点に対応する後方の円周
上の一点間の距離を流れ出し方向に直交する状態でマイ
クロプレートまたは光センサーを微小移動させて複数地
点において測定したものである。Further, the section to be searched for the length of the sedimentation pattern in the particle flow-out direction of each well of the microplate means one point on the circumference of the front of the well in the particle flow-out direction and the rear point corresponding to the one point. Is measured at a plurality of points by slightly moving the microplate or the optical sensor in a state where the distance between the points on the circumference of the circle is orthogonal to the flow-out direction.
【００１２】ウエル底部に沈降パターンを形成するに際
しては、遠心力による方法とマイクロプレートを適宜手
段によって傾斜させて行う方法があるが、マイクロプレ
ートを傾斜させて行う場合には、マイクロプレートを粒
子の流れ出し方向に５０°〜７０°の角度で傾斜させて
行う。その際、マイクロプレートがＶ字状の底面を有す
る場合には、沈降パターンを形成する面が水平方向に対
して２０°〜４０°の角度で傾斜させることによって沈
降パターンを効率よく形成させることができる。When forming a sedimentation pattern at the bottom of a well, there are a method using centrifugal force and a method in which the microplate is tilted by an appropriate means. When tilting the microplate, the microplate is used to It is performed by inclining at an angle of 50 ° to 70 ° in the outflow direction. At this time, when the microplate has a V-shaped bottom surface, the sedimentation pattern can be efficiently formed by inclining the surface forming the sedimentation pattern at an angle of 20 ° to 40 ° with respect to the horizontal direction. it can.
【００１３】沈降パターンの長さの測定および粒子の流
れ出し方向における沈降パターンの長さのサーチすべき
区間の測定は、マイクロプレートもしくは光センサーの
いずれか一方を他方に対して直交状態で微小移動させて
行うものであるが、具体的には、所定角度で傾斜するベ
ース本体上にマイクロプレートを載置するためのマイク
ロプレート載置台を傾斜方向に移動自在に取付け、該マ
イクロプレート載置台の移動方向の前方に光センサーを
同一線上に多数設けたセンサーブロックを、その上方も
しくは下方をマイクロプレート載置台が通過することが
できる沈降パターン測定装置を構成し、センサーブロッ
クをマイクロプレート載置台に対して直交する状態で微
小移動させて行うものである。To measure the length of the sedimentation pattern and the section to be searched for the length of the sedimentation pattern in the direction in which the particles flow out, either one of the microplate or the optical sensor is slightly moved in a state orthogonal to the other. Specifically, specifically, a microplate mounting table for mounting a microplate on a base body that is inclined at a predetermined angle is movably attached in the inclination direction, and the moving direction of the microplate mounting table is set. A settling pattern measuring device that allows a microplate mounting table to pass through a sensor block with multiple optical sensors on the same line in front of the microplate mounting table, and the sensor block is orthogonal to the microplate mounting table. It is carried out by slightly moving in the state of being.
【００１４】前記沈降パターン測定装置において、セン
サーブロックは、マイクロプレートの縦列もしくは横列
に形成されたウエルと同数の光センサーを同一線上に設
けて構成したもので、この光センサーは透過型光センサ
ーや反射型光センサー等であって、透過型光センサーの
場合には、マイクロプレートを挟んで光センサーの反対
側に光源を設け、反射型光センサーの場合には、前記光
源の代わりに反射板を用いるものである。また、このセ
ンサーブロックは、ベース本体の下方に設けたセンサー
ブロック移動用モータの回転軸に直結して外周縁に複数
の円弧部と同数の直線部を交互に形成したカム部材の外
周縁とスプリングの付勢力によって常時当接するよう設
けられた回転子の軸部材と連動し、カム部材の回動によ
ってセンサーブロックをマイクロプレートの移動方向と
直交する方向に微小移動させるよう構成したものであ
る。In the sedimentation pattern measuring apparatus, the sensor block is constructed by providing the same number of photosensors as wells formed in the vertical or horizontal rows of the microplate on the same line. In the case of a reflective photosensor or the like, in the case of a transmissive photosensor, a light source is provided on the opposite side of the photosensor with a microplate in between, and in the case of a reflective photosensor, a reflector is used instead of the light source. It is used. In addition, the sensor block is directly connected to the rotation shaft of a sensor block moving motor provided below the base body, and the outer peripheral edge of a cam member in which a plurality of arc portions and the same number of linear portions are alternately formed on the outer peripheral edge and a spring are formed. It is configured to interlock with the shaft member of the rotor provided so as to be constantly in contact with the urging force of the sensor block, and to finely move the sensor block in the direction orthogonal to the moving direction of the microplate by the rotation of the cam member.
【００１５】[0015]
【作用】この発明の間接凝集免疫測定法は、マイクロプ
レートの各ウエルの底部に免疫測定用試薬の粒子を強制
沈降させたのち、マイクロプレートを所定角度に傾斜さ
せてウエル底部に粒子の流れ出しによる沈降パターンを
形成させ、形成された沈降パターンを流れ出し方向に直
交する状態でマイクロプレートまたは光センサーを微小
移動させて沈降パターンの長さを複数地点において測定
し、得られた最も長い長さを沈降パターンとすることが
できるので、沈降パターンの測定を簡単かつ正確に求め
ることができる。In the indirect agglutination immunoassay method of the present invention, particles of the immunoassay reagent are forcibly settled on the bottom of each well of the microplate, and then the microplate is tilted at a predetermined angle to flow out the particles to the bottom of the well. A sedimentation pattern is formed, and the length of the sedimentation pattern is measured at multiple points by micromoving the microplate or optical sensor in a state where the sedimentation pattern formed is orthogonal to the outflow direction, and the longest length obtained is sedimented. Since the pattern can be used, the sedimentation pattern can be easily and accurately determined.
【００１６】特に、沈降パターンの長さの測定に際し、
成分を含む粒子の流れ出しによる沈降パターンの形成前
に、各ウエルについて沈降パターンの長さのサーチすべ
き区間をあらかじめ測定することによって、マイクロプ
レートの移動方向におけるウエル間のピッチ誤差を補正
できる。また、マイクロプレートを傾斜させてウエル底
部に沈降パターンを形成させ、形成された沈降パターン
を流れ出し方向に直交する状態でマイクロプレートもし
くは光センサーを微小移動させて沈降パターンの長さを
複数地点において測定するので、マイクロプレートの移
動方向に直交するウエル間のピッチ誤差を補正できる。In particular, when measuring the length of the sedimentation pattern,
The pitch error between the wells in the moving direction of the microplate can be corrected by measuring the section to be searched for the length of the sedimentation pattern for each well in advance before the sedimentation pattern is formed by flowing out the particles containing the components. In addition, the microplate is tilted to form a sedimentation pattern at the bottom of the well, and the microplate or the optical sensor is slightly moved in a state where the formed sedimentation pattern is orthogonal to the outflow direction, and the length of the sedimentation pattern is measured at multiple points. Therefore, the pitch error between the wells orthogonal to the moving direction of the microplate can be corrected.
【００１７】この発明の沈降パターン測定装置は、傾斜
可能なベース本体上にマイクロプレートを載置するマイ
クロプレート載置台を傾斜方向に沿って移動可能に設
け、該マイクロプレート載置台の移動方向における前方
位置にマイクロプレートの縦列もしくは横列に形成され
たウエルと同数の光センサーを同一線上に設けたセンサ
ーブロックをその上方もしくは下方をマイクロプレート
載置台が通過でき、かつ移動方向と直交する状態で微小
移動できるよう設けたので、ウエル底部への沈降パター
ン形成前においては、各ウエルについて沈降パターンの
測長のサーチすべき区間をあらかじめ測定でき、沈降パ
ターン形成後は沈降パターンの長さを複数地点において
測定することができる。In the sedimentation pattern measuring apparatus of the present invention, a microplate mounting table for mounting a microplate on a tiltable base body is provided so as to be movable along the tilting direction, and the microplate mounting table is forward in the moving direction. A microblock mounting table can pass through a sensor block that has the same number of optical sensors as the wells formed in a row or row of microplates on the same line on the same line, and can move slightly in a state orthogonal to the moving direction. Since it is provided so that it is possible to measure the section to be searched for the measurement of the sedimentation pattern for each well before the sedimentation pattern is formed on the bottom of the well, the sedimentation pattern length can be measured at multiple points after the sedimentation pattern is formed. can do.
【００１８】[0018]
【実施例】以下、この発明の間接凝集免疫測定法と、こ
れに使用する沈降パターン測定装置の一実施例を添付の
図面を引用して具体的に説明する。この発明の沈降パタ
ーン測定装置１０は、図１に示すように所定方向に最大
７０°の角度で傾斜するベース本体１１と、該ベース本
体１１上に傾斜方向に沿って進退するマイクロプレート
載置台１４と、該マイクロプレート載置台１４をベース
本体１１上で移動させるための駆動機構と、前記マイク
ロプレート載置台１４に着脱自在に載置されるマイクロ
プレート１５の縦列におけるウエルと同数の１２個の反
射型光センサー２１ａ，２１ｂ・・・・２１ｌを同一線
上に取り付けたセンサーブロック２０と、該センサーブ
ロック２０をマイクロプレート載置台１４の移動方向と
直交する方向に微小範囲で移動させる移動機構とから構
成されるものである。DETAILED DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS An embodiment of the indirect agglutination immunoassay of the present invention and a sedimentation pattern measuring apparatus used therefor will be specifically described below with reference to the accompanying drawings. As shown in FIG. 1, the sedimentation pattern measuring apparatus 10 of the present invention includes a base body 11 that is inclined at a maximum angle of 70 ° in a predetermined direction, and a microplate mounting table 14 that moves forward and backward along the inclination direction on the base body 11. And a driving mechanism for moving the microplate mounting base 14 on the base body 11, and twelve reflections of the same number as the wells in the column of the microplate 15 removably mounted on the microplate mounting base 14. 21l is attached on the same line, and a moving mechanism for moving the sensor block 20 in a minute range in a direction orthogonal to the moving direction of the microplate mounting table 14. It is what is done.
【００１９】ベース本体１１は全体を矩形状に形成した
もので、短手方向の両端縁に沿ってガイド取付板１２
ａ，１２ｂを対向させて設けると共に、該ガイド板１２
ａ，１２ｂに所定の間隔を存して一対のガイドロッド１
３，１３を架設したもので、該ベース本体１１は、その
裏面に設けられた傾斜機構（図示せず）によって前記ガ
イド取付板１２ｂの内側近傍を基端として最大７０°の
角度でガイド取付板１２ａ側が持ち上がり傾斜するよう
構成されている。The base body 11 is formed in a rectangular shape as a whole, and the guide mounting plate 12 is provided along both edges in the lateral direction.
a and 12b are provided facing each other, and the guide plate 12
a pair of guide rods 1 with a predetermined distance between a and 12b
The base main body 11 includes a guide mounting plate 3b and a base plate 11a and a base plate 11b. The 12a side is configured to be lifted and inclined.
【００２０】マイクロプレート載置台１４は、その上面
にウエルのＵ字状またはＶ字状の底部の中心部に免疫測
定用試薬の磁性体粒子又は磁性体を含む粒子を含有した
成分を磁力によって強制沈降させたマイクロプレート１
５を着脱自在に取付け、測定のためマイクロプレート１
５を載置した状態で前記一対のガイドロッド１３，１３
にガイドされてベース本体１１上を矢印Ｘ方向に前後動
するものである。前記マイクロプレート１５は、合成樹
脂またはガラス製の市販品で、長辺（縦方向）に沿って
１２個のウエルを一列として短辺（横方向）方向に８列
の計９６個のウエルが一体的に形成されている。このマ
イクロプレート載置台１４の移動は、ベース本体１１の
長手方向における一側縁に沿って設けられたタイミング
ベルト１６によって行うもので、該タイミングベルト１
６はステッピングモータ１７と連動し、該ステッピング
モータ１７は前記マイクロプレート載置台１４の移動方
向における一方の側面部にマイクロプレート１５の短辺
側のウエルの数（実施例においては８つ）に対応して突
設した測定位置検出用の各センサー１８ａ，１８ｂ・・
・・１８ｈが移動方向の前方に設けた測定位置センサー
１９とそれぞれ接触することによって駆動し、マイクロ
プレート載置台１４が横に一列づつ前進するよう構成さ
れている。On the upper surface of the microplate mounting table 14, a magnetic particle or a component containing a particle containing a magnetic material of an immunoassay reagent is forced by magnetic force at the center of the U-shaped or V-shaped bottom of the well. Settled microplate 1
5 is detachably attached, and the microplate 1 for measurement
5, the pair of guide rods 13 and 13 is placed.
It is guided by and moves back and forth on the base body 11 in the direction of arrow X. The microplate 15 is a commercially available product made of synthetic resin or glass, and 12 wells are arranged in a row along the long side (longitudinal direction) and 8 wells in the short side (horizontal direction) are integrated into a total of 96 wells. Has been formed. The movement of the microplate mounting table 14 is performed by a timing belt 16 provided along one side edge of the base body 11 in the longitudinal direction.
Reference numeral 6 is interlocked with a stepping motor 17, and the stepping motor 17 corresponds to the number of wells on the short side of the microplate 15 (eight in the embodiment) on one side surface in the moving direction of the microplate mounting table 14. Each of the sensors 18a, 18b for detecting the measurement position that are projected
··················································································· And ························, And, the microplate mounting table 14 is configured to move forward laterally, one row at a time.
【００２１】各ウエルについて、沈降パターンの長さの
サーチすべき区間と粒子の流れ出しによる沈降パターン
の長さを測定するセンサーブロック２０は、その上面に
マイクロプレート１５の縦方向に設けた１２個のウエル
と対応して反射板（図示せず）から得られる回帰光を測
定する１２個の反射型の光センサー２１ａ，２１ｂ・・
・・２１ｌを横一列となるよう取付けて構成したもの
で、図１に示すようにマイクロプレート載置台１４の前
方にその上方をマイクロプレート載置台１４が通過で
き、かつマイクロプレート載置台１４の移動方向と直交
する方向に微小距離づつ移動できるようベース本体１１
上に設けたものである。すなわち、図２および図３に示
すようにベース本体１１の下方に設けたセンサーブロッ
ク移動用のモータ２２の回転軸２２ａに直結して外周縁
に３つの円弧部２３ａ，２３ｂおよび２３ｃと３つの直
線部２３ｄ，２３ｅ，２３ｆを交互に形成したカム部材
２３を設け、該カム部材２３の外周縁上にカム部材２３
の外周縁と常時当接する回転子２４を設け、該回転子２
４内に設けたベアリングと係合する軸部材２５の基端部
をベース本体１１上に突設して前記センサーブロック２
０の底面部と係合させると共に、該回転子２４の軸部材
２５をスプリング２６によって付勢し、回転子２４とカ
ム部材２３の外周縁部とを常時当接させたもので、モー
タ２２の回転によってカム部材２３が回動し、該カム部
材２３の外周縁に形成された円弧部２３ａ〜２３ｃが回
転子２５と当接した時に前記センサーブロック２０をマ
イクロプレート載置台１４の移動方向と直交する方向に
約０．１ｍｍ程度の微小距離分移動させるよう構成した
ものである。なお、前記カム部材２３の裏面に突設され
た円柱部２７の外周部には、３つの光センサー２８ａ，
２８ｂ，２８ｃがそれぞれ１２０°づつずらした位置に
配設され、前記円柱部２７の外周部に設けられた円板状
の検出板２９の外周縁上に形成された切欠部３０が光セ
ンサー２８ａ，２８ｂ，２８ｃと対応する位置に回動し
てくると、光センサーが作動し、センサーブロック２０
の微小移動の開始や停止を制御するものである。For each well, the section to be searched for the length of the sedimentation pattern and the sensor block 20 for measuring the length of the sedimentation pattern due to the outflow of particles are provided with 12 sensor blocks 20 provided on the upper surface in the longitudinal direction of the microplate 15. Twelve reflective photosensors 21a, 21b ... Measuring the return light obtained from a reflector (not shown) corresponding to the wells.
················· 21 21l is installed in a horizontal row, as shown in FIG. 1, the microplate mounting table 14 can pass therethrough in front of the microplate mounting table 14 and the microplate mounting table 14 can move The base body 11 so that it can be moved by a minute distance in a direction orthogonal to the direction.
It is provided above. That is, as shown in FIG. 2 and FIG. 3, three arc portions 23a, 23b and 23c and three straight lines are formed on the outer peripheral edge of the base 22 so as to be directly connected to the rotating shaft 22a of the sensor block moving motor 22 provided below the base body 11. A cam member 23 in which the portions 23d, 23e, and 23f are alternately formed is provided, and the cam member 23 is provided on the outer peripheral edge of the cam member 23.
Is provided with a rotor 24 that is always in contact with the outer peripheral edge of the rotor 2.
The base end of a shaft member 25 that engages with a bearing provided in the base 4 is provided on the base body 11 so as to project.
The shaft member 25 of the rotor 24 is urged by a spring 26 so that the rotor 24 and the outer peripheral edge of the cam member 23 are always in contact with each other. The rotation causes the cam member 23 to rotate, and when the arc portions 23a to 23c formed on the outer peripheral edge of the cam member 23 come into contact with the rotor 25, the sensor block 20 is orthogonal to the moving direction of the microplate mounting table 14. It is configured to be moved by a minute distance of about 0.1 mm in the moving direction. In addition, the three optical sensors 28a, 28a are provided on the outer peripheral portion of the columnar portion 27 provided on the back surface of the cam member 23.
28b and 28c are arranged at positions shifted by 120 ° from each other, and the notch 30 formed on the outer peripheral edge of the disc-shaped detection plate 29 provided on the outer peripheral portion of the columnar portion 27 includes the optical sensor 28a, When it comes to a position corresponding to 28b and 28c, the optical sensor is activated and the sensor block 20
It controls the start and stop of the minute movement of.
【００２２】以下、かゝる沈降パターン測定装置１０を
使用してこの発明の間接凝集免疫測定法について説明す
る。この沈降パターン測定装置１０のマイクロプレート
載置台１４に載置されるマイクロプレート１５は、各ウ
エル内のＵ字状またはＶ字状の底部の中心部に免疫測定
用試薬の磁性体粒子又は磁性体を含む粒子を含有した成
分を磁力等によって強制沈降させたものであるが、使用
するマイクロプレート１５はマイクロプレートの成形に
際してウエルは底部をＵ字状もしくはＶ字状に形成する
ためウエル底部周辺のエッジ部に成形時の歪みが生ずる
ので、各ウエルの縦もしくは横方向における整列位置が
必ずしも同一線上にない。したがって、図４に示すよう
にマイクロプレート１５をＸ軸方向に移動させながら沈
降パターンの長さを測定する場合、マイクロプレートの
移動方向における最先端位置にあるウエルの底部の中心
を通るよう光センサーをセットして測定すると、光セン
サーは最先端のウエルＷ1 の沈降パターンＡ1 は光セン
サーの描く軌跡Ｘ線上を通るｘ1 −ｘ2 の２点で正確に
測定することができる。しかしながら、ウエルの整列性
にズレがあって、たとえばウエルＷ2 の中心が軌跡Ｘ線
に対して右寄りに位置していた場合あるいはウエルＷ3
の中心が軌跡Ｘ線に対して左寄りに位置していた場合
は、それぞれ計測される沈降パターンＡ2あるいはＡ3
は短く測定されるため計測が不正確となる。The indirect agglutination immunoassay method of the present invention will be described below using the sedimentation pattern measuring apparatus 10. The microplate 15 mounted on the microplate mounting table 14 of the sedimentation pattern measuring apparatus 10 has magnetic particles or magnetic particles of an immunoassay reagent at the center of the U-shaped or V-shaped bottom in each well. The component containing particles containing is forcibly settled by magnetic force or the like. The microplate 15 used has a U-shaped or V-shaped bottom at the time of molding of the microplate. Since the edge portion is distorted at the time of molding, the alignment positions of the wells in the vertical or horizontal directions are not always on the same line. Therefore, when the length of the sedimentation pattern is measured while moving the microplate 15 in the X-axis direction as shown in FIG. 4, the optical sensor passes through the center of the bottom of the well at the most distal position in the moving direction of the microplate. When the optical sensor is set and measured, the sedimentation pattern A 1 of the most advanced well W 1 can be accurately measured at two points of x 1 -x 2 passing on the trajectory X-ray drawn by the optical sensor. However, if the wells are misaligned and, for example, the center of the well W 2 is located to the right of the trajectory X-ray, or if the well W 3
When the center of is located to the left of the trajectory X-ray, the measured sedimentation pattern A 2 or A 3 respectively
Is inaccurate because it is measured short.
【００２３】そこで、この発明の間接凝集免疫測定法
は、光センサーを使用してウエル底部に流れ出した沈降
パターンの計測に際し、ウエル底部周辺のエッジ部の成
形時の歪みによる整列性のズレによって生ずる誤差を補
正して計測を正確にするため、粒子の流れ出しによる沈
降パターンの成形前に、各ウエルごとに沈降パターンの
長さのサーチすべき区間をあらかじめ求めて座標として
コンピュータに記憶させたのち、沈降パターン形成後に
おいて、沈降パターンの長さを複数の地点において測定
し、両方の測定結果を比較して計測上最も長い沈降パタ
ーンを基準に免疫反応の有無を判定しようとするもので
ある。すなわち、図１に示すように粒子を強制沈降させ
たマイクロプレート１５を縦列のウエルがマイクロプレ
ート載置台１４がベース本体１１上を移動する方向と直
交するようマイクロプレート載置台１４に載せ、ベース
本体１１を所定の角度に傾斜させてウエル内に沈降パタ
ーンを形成させる前にマイクロプレート載置台１４をガ
イドロッド１３，１３に沿ってベース本体１１上をＸ方
向に移動させ、マイクロプレート１５の縦列のウエルと
同数の光センサー２１ａ・・・・２１ｌを設けたセンサ
ーブロック２０上に位置させる。ついで、図５に示すよ
うにマイクロプレート１５の移動方向における最前列に
位置するウエルＷ1 ，ウエルＷ9 , ウエルＷ1 7 ・・・
・ウエルＷｎ（ｎは１２）の底部周辺のエッジの円周上
に位置するＡ1 −Ｂ1 ，Ａ2 −Ｂ2 およびＡ3 −Ｂ3 間
の長さを合計９６個のウエルすべてについて測定する。
この測定に際しては、前記沈降パターン測定装置１０に
おけるセンサーブロック２０をマイクロプレート１５の
移動方向と直交する方向、すなわちＹ方向にカム部材等
を駆動させて微小の間隔（約０．１ｍｍ）づつ移動させ
て３回に渡って計測するものである。Therefore, in the indirect agglutination immunoassay method of the present invention, when the sedimentation pattern flowing out to the bottom of the well is measured using an optical sensor, the alignment around the bottom of the well is misaligned due to strain during molding. In order to correct the error and make the measurement accurate, before the formation of the sedimentation pattern by the outflow of particles, after obtaining the section to be searched for the length of the sedimentation pattern for each well in advance and storing it in the computer as coordinates, After the formation of the sedimentation pattern, the length of the sedimentation pattern is measured at a plurality of points, both measurement results are compared, and the presence or absence of an immune reaction is determined based on the longest sedimentation pattern in the measurement. That is, as shown in FIG. 1, the microplate 15 on which particles are forcibly settled is mounted on the microplate mounting base 14 such that the wells in the column are orthogonal to the direction in which the microplate mounting base 14 moves on the base main body 11. Before inclining 11 at a predetermined angle to form a sedimentation pattern in the well, the microplate mounting table 14 is moved along the guide rods 13 and 13 in the X direction on the base body 11 so that the microplates 15 are arranged in series. 21l are placed on the sensor block 20 provided with the same number of optical sensors 21a. Then, as shown in FIG. 5, the well W 1 , the well W 9, the well W 17 ... Which are located in the front row in the moving direction of the microplate 15 ...
Measuring the length between A 1 -B 1 , A 2 -B 2 and A 3 -B 3 located on the circumference of the edge around the bottom of the well Wn (n is 12) for all 96 wells in total To do.
At the time of this measurement, the sensor block 20 in the sedimentation pattern measuring apparatus 10 is moved in minute directions (about 0.1 mm) by driving a cam member or the like in a direction orthogonal to the moving direction of the microplate 15, that is, in the Y direction. The measurement is performed three times.
【００２４】ついで、前記各ウエルの沈降パターンの測
長のサーチすべき区間の計測が終了すると、マイクロプ
レート載置台１４をもとの位置に戻したのち、ベース本
体１１を約６０°の傾斜角となるよう傾斜させてウエル
底部に粒子の流れ出しによる沈降パターンを形成させ
る。この沈降パターンの形成が終わると、ベース本体１
１をもとの水平状態に復帰させたのち、マイクロプレー
ト載置台１４をマイクロプレート１５の最前列のウエル
Ｗ1 がセンサーブロック２０上に位置するよう移動さ
せ、図６に示すようにまずラインＸ1 上においてＰ1 −
Ｑ1 間を、ラインＸ2 上においてＰ2 −Ｑ2 間を、ライ
ンＸ3 上においてＰ3 −Ｑ3 間のパターンの長さを測定
する。しかして、ラインＸ2 は基本的には各ウエルの中
心線上を意味し、ラインＸ2及びＸ3 は中心線を挟む前
後の円周上の地点である。これら各ウエルにおける３か
所における沈降パターンの長さの測定は、センサーブロ
ック２０をＹ方向に微小の間隔（約０．１ｍｍ間隔）づ
つ移動させて実施するもので、検体溶液が注入されたウ
エルの全てについて実施するもので、通常は９６個のウ
エル全てについて行う。その際、マイクロプレート載置
台１４のＸ方向への移動は、マイクロプレート載置台１
４の側方に突出させた各センサー１８ａ，１８ｂ・・・
・１８ｈが移動方向の前方に設けた測定位置センサー１
９とそれぞれ接触することによってマイクロプレート載
置台１４が横に一列づつ前進するものである。かくして
マイクロプレート１５に設けられた９６個のウエル全て
について位置をずらしての沈降パターンの長さの計測が
終わると、この計測値と沈降パターン形成前に実施した
計測値をコンピュータによって比較し、各ウエルとも一
番長い計測値の長さをもって免疫反応の有無を判定する
ものである。Then, when the measurement of the section to be searched for the measurement of the sedimentation pattern of each well is completed, the microplate mounting table 14 is returned to its original position, and then the base body 11 is tilted at an angle of about 60 °. To form a sedimentation pattern due to the outflow of particles at the bottom of the well. When the formation of this sedimentation pattern ends, the base body 1
After returning 1 to the original horizontal state, the microplate mounting table 14 is moved so that the well W 1 in the front row of the microplate 15 is located on the sensor block 20, and as shown in FIG. P 1 on 1 -
Between Q 1, between P 2 -Q 2 on line X 2, measuring the length of the pattern between P 3 -Q 3 on line X 3. Then, the line X 2 basically means on the center line of each well, and the lines X 2 and X 3 are points on the circumference before and after the center line is sandwiched. The length of the sedimentation pattern at three points in each well is measured by moving the sensor block 20 in the Y direction at minute intervals (about 0.1 mm intervals). Is performed for all 96 wells, usually for all 96 wells. At that time, the movement of the microplate mounting table 14 in the X direction is performed by the microplate mounting table 1
The sensors 18a, 18b ...
・ Measurement position sensor 1 with 18h in front of the moving direction
The microplate mounting bases 14 are moved laterally one by one by making contact with each of them 9. Thus, when the measurement of the length of the sedimentation pattern by shifting the positions of all 96 wells provided in the microplate 15 is completed, this measurement value and the measurement value performed before the sedimentation pattern formation are compared by a computer, In each well, the presence or absence of an immune reaction is determined by the length of the longest measured value.
【００２５】[0025]
【発明の効果】この発明の間接凝集免疫測定法は、使用
するマイクロプレートにウエル底部周辺にエッジ部の成
形時に歪みが生ずることによってウエル間のピッチに誤
差があったとしても成分を含む粒子の流れ出しによる沈
降パターンの長さを精度良く測定することができ、かつ
データの再現性も向上させることができる。INDUSTRIAL APPLICABILITY The indirect agglutination immunoassay method of the present invention can analyze the particles containing a component even if there is an error in the pitch between the wells due to distortion occurring at the time of molding the edge portion around the bottom of the well in the microplate used. It is possible to accurately measure the length of the sedimentation pattern caused by flowing out and improve the data reproducibility.
【００２０】この発明の間接凝集免疫測定法に使用する
沈降パターン測定装置は、マイクロプレートの成形に際
して生ずるウエルのピッチに誤差があっても、光センサ
ーをマイクロプレートの移動方向に直交する方向に微小
づつ移動させて各ウエルごとに沈降パターンの測長のサ
ーチすべき区間と、形成された沈降パターンの長さを複
数地点において正確に測定することができるものであ
る。In the sedimentation pattern measuring apparatus used in the indirect agglutination immunoassay of the present invention, even if there is an error in the pitch of wells that occurs during the formation of the microplate, the optical sensor is minutely moved in the direction orthogonal to the moving direction of the microplate. It is possible to accurately measure the section to be searched for the measurement of the sedimentation pattern for each well and the length of the formed sedimentation pattern at a plurality of points by moving each well.
【図１】この発明の沈降パターン測定装置の一例を示す
斜視図である。FIG. 1 is a perspective view showing an example of a sedimentation pattern measuring device of the present invention.
【図２】図１に示す沈降パターン測定装置の要部を示す
一部切欠き側面図である。FIG. 2 is a partially cutaway side view showing a main part of the sedimentation pattern measuring device shown in FIG.
【図３】図１に示す沈降パターン測定装置の要部を示す
一部切欠き平面図である。FIG. 3 is a partially cutaway plan view showing a main part of the sedimentation pattern measuring device shown in FIG.
【図４】マイクロプレートにおけるウエルのピッチ間の
ズレによる沈降パターン測定長さが異なることを示す平
面図である。FIG. 4 is a plan view showing that sedimentation pattern measurement lengths are different due to a gap between well pitches in a microplate.
【図５】各ウエルの沈降パターン形成方向における沈降
パターンの測長のサーチすべき区間を示す平面図であ
る。FIG. 5 is a plan view showing a section to be searched for length measurement of a sedimentation pattern in a sedimentation pattern forming direction of each well.
【図６】沈降パターンの長さの測定状態を示す平面図で
ある。FIG. 6 is a plan view showing a measurement state of the length of a sedimentation pattern.
１０ 沈降パターン測定装置 １１ ベース本体 １３ ガイドロッド １４ マイクロプレート載置台 １５ マイクロプレート ２０ センサーブロック ２１ａ 光センサー ２３ カム部材 ２４ 回転子 ２５ 軸部材 ２６ スプリング 10 Sedimentation Pattern Measuring Device 11 Base Body 13 Guide Rod 14 Micro Plate Mounting Table 15 Micro Plate 20 Sensor Block 21a Optical Sensor 23 Cam Member 24 Rotor 25 Shaft Member 26 Spring
Claims (8)
を沈降させたのち、ウエルを所定角度に傾斜させてウエ
ル底部に粒子の流れ出しによる沈降パターンを形成させ
て免疫反応の有無を判定するに際し、ウエルを傾斜させ
てウエル底部に沈降パターンを形成させ、形成された沈
降パターンを流れ出し方向に直交する状態でウエルまた
は光センサーを移動させて沈降パターンの長さを複数地
点において測定し、得られた長さを沈降パターンの長さ
として免疫反応の有無を判定することを特徴とする間接
凝集免疫測定法。1. The presence or absence of an immune reaction is determined by precipitating immunoassay reagent particles at the bottom of each well and then tilting the well at a predetermined angle to form a sedimentation pattern by the flow of particles at the bottom of the well. At this time, the well is tilted to form a sedimentation pattern at the bottom of the well, and the well or the optical sensor is moved in a state in which the formed sedimentation pattern is orthogonal to the outflow direction, and the length of the sedimentation pattern is measured at multiple points. An indirect agglutination immunoassay method characterized by determining the presence or absence of an immune reaction by using the obtained length as the length of a sedimentation pattern.
疫測定用試薬の粒子を沈降させたのち、マイクロプレー
トを所定角度に傾斜させてウエル底部に粒子の流れ出し
による沈降パターンを形成させて免疫反応の有無を判定
するに際し、各ウエルの粒子の流れ出し方向における沈
降パターンの長さのサーチすべき区間を光センサーをに
よって測定したのち、マイクロプレートを傾斜させてウ
エル底部に沈降パターンを形成させ、形成された沈降パ
ターンを流れ出し方向に直交する状態でマイクロプレー
トまたは光センサーを移動させて沈降パターンの長さを
複数地点において測定し、得た沈降パターン計測値と前
記沈降パターンの長さのサーチすべき区間の測定値と比
較して最も長い沈降パターンを沈降パターンとして免疫
反応の有無を判定することを特徴とする間接凝集免疫測
定法。2. After the particles of the immunoassay reagent are settled on the bottom of each well of the microplate, the microplate is tilted at a predetermined angle to form a sedimentation pattern due to the flow of the particles on the bottom of the well to prevent immunoreactivity. When determining the presence or absence, after measuring the section to be searched for the length of the sedimentation pattern in the direction in which the particles flow out in each well with an optical sensor, the microplate is tilted to form the sedimentation pattern at the bottom of the well. By moving the microplate or the optical sensor in a state where the sedimentation pattern is orthogonal to the outflow direction, the sedimentation pattern length is measured at a plurality of points, and the obtained sedimentation pattern measurement value and the section to be searched for the sedimentation pattern length The longest sedimentation pattern is compared with the measured value of An indirect agglutination immunoassay characterized by:
疫測定用試薬の磁性体粒子または磁性体を含む粒子を含
有した成分を磁力によって強制沈降させたのち、マイク
ロプレートを所定角度に傾斜させてウエル底部に粒子の
流れ出しによる沈降パターンを形成させて免疫反応の有
無を判定するに際し、沈降パターンの形成前に各ウエル
の粒子の流れ出し方向における沈降パターンの長さのサ
ーチすべき区間をあらかじめ光センサーによって測定
し、該沈降パターンの長さのサーチすべき区間の測定後
にマイクロプレートを傾斜させてウエル底部に沈降パタ
ーンを形成させ、形成された沈降パターンを流れ出し方
向に直交する状態でマイクロプレートまたは光センサー
を微小移動させて沈降パターンの長さを複数地点におい
て測定し、得た沈降パターン計測値とあらかじめ測定し
た沈降パターンの長さのサーチすべき区間の測定値を比
較して最も長い長さを沈降パターンとして免疫反応の有
無を判定することを特徴とする間接凝集免疫測定法。3. A microplate is magnetically forcibly settled on the bottom of each well of the microplate, and a component containing magnetic particles or particles containing magnetic particles is forced to settle, and then the microplate is tilted at a predetermined angle. When determining the presence or absence of an immune reaction by forming a sedimentation pattern due to the outflow of particles at the bottom, the section to be searched for the length of the sedimentation pattern in the outflow direction of the particles in each well is preliminarily measured by an optical sensor before the formation of the sedimentation pattern. After the measurement and measurement of the section to be searched for the length of the sedimentation pattern, the microplate is tilted to form a sedimentation pattern at the bottom of the well, and the formed sedimentation pattern is orthogonal to the flow-out direction. The length of the sedimentation pattern is measured at multiple points by moving the An indirect agglutination immunoassay method characterized in that the turn measurement value is compared with the measurement value of the section of the sedimentation pattern to be searched, which has been measured in advance, and the presence or absence of an immune reaction is determined using the longest length as the sedimentation pattern.
クロプレート載置台を傾斜方向に沿って移動可能に設
け、該マイクロプレート載置台の移動方向における前方
位置にマイクロプレートの縦列もしくは横列に形成され
たウエルと同数の光センサーを同一線上に設けたセンサ
ーブロックをマイクロプレート載置台の移動方向と直交
させて設けた沈降パターン測定装置を使用し、沈降パタ
ーンの形成前に各ウエルの粒子の流れ出し方向における
沈降パターンの長さのサーチすべき区間をマイクロプレ
ートまたは光センサーを微小づつ移動させながら各ウエ
ルについて測定し、該沈降パターンの長さのサーチすべ
き区間の測定後にベース本体を傾斜させてマイクロプレ
ートの各ウエル底部に沈降パターンを形成させ、形成さ
れた沈降パターンを流れ出し方向に直交する状態でマイ
クロプレートまたは光センサーを微小移動させて沈降パ
ターンの長さを複数地点において測定し、得た沈降パタ
ーン計測値とあらかじめ測定した沈降パターンの長さの
サーチすべき区間の測定値を比較して最も長い長さを沈
降パターンとして免疫反応の有無を判定することを特徴
とする間接凝集免疫測定法。4. A microplate mounting table is provided on a base body tilting at a predetermined angle so as to be movable in the tilting direction, and the microplate mounting table is formed in a vertical or horizontal row at a front position in the moving direction of the microplate mounting table. Use the settling pattern measuring device in which the sensor blocks with the same number of optical sensors as the wells are provided in the same line as the sensor block orthogonal to the moving direction of the microplate mounting table. The length of the sedimentation pattern to be searched for is measured for each well while moving the microplate or the optical sensor in small increments, and after the measurement of the length of the sedimentation pattern to be searched, the base body is tilted and the micro Form a sedimentation pattern at the bottom of each well of the plate and run the sedimentation pattern formed. The microplate or the optical sensor is moved slightly in a state orthogonal to the direction of protrusion to measure the length of the sedimentation pattern at multiple points, and the section where the obtained sedimentation pattern measurement value and the length of the sedimentation pattern measured in advance should be searched The indirect agglutination immunoassay method is characterized in that the presence or absence of an immune reaction is determined by comparing the measurement values of the above with the sedimentation pattern having the longest length.
れ出し方向における沈降パターンの長さのサーチすべき
区間は、粒子の流れ出し方向におけるウエルの前方の円
周上における一点と該一点に対応する後方の円周上の一
点間の距離を流れ出し方向に直交する状態でマイクロプ
レートまたは光センサーを微小移動させて複数地点にお
いて測定したものであることを特徴とする請求項２，請
求項３又は請求項４記載の間接凝集免疫測定法。5. The section to be searched for the length of the sedimentation pattern in the particle flow-out direction of each well of the microplate is a point on the circumference in front of the well in the particle flow-out direction and a rear point corresponding to the point. The microplate or the optical sensor is finely moved in a state in which the distance between the points on the circumference is orthogonal to the flow-out direction, and the measurement is performed at a plurality of points. The indirect agglutination immunoassay described.
クロプレートを載置するマイクロプレート載置台を傾斜
方向に沿って移動可能に設け、該マイクロプレート載置
台の移動方向における前方位置にマイクロプレートの縦
列もしくは横列に形成されたウエルと同数の光センサー
を同一線上に設けたセンサーブロックをマイクロプレー
ト載置台の移動方向と直交する状態で設け、該センサー
ブロックまたはマイクロプレート載置台のいずれか一方
を移動できるよう構成したことを特徴とする沈降パター
ン測定装置。6. A microplate mounting base for mounting a microplate on a base body tilting at a predetermined angle so as to be movable along the tilt direction, and the microplate mounting base is provided at a front position in the moving direction of the microplate mounting base. Provide a sensor block in which the same number of photosensors as columns or rows are provided on the same line in a state orthogonal to the moving direction of the microplate mounting table, and move either the sensor block or the microplate mounting table. An apparatus for measuring a sedimentation pattern, which is configured so as to be capable.
くは下方をマイクロプレート載置台が通過でき、かつマ
イクロプレート載置台の移動方向に対して直交状態で微
小移動できるよう構成したことを特徴とする請求項６記
載の沈降パターン測定装置。7. The sensor block is configured such that a microplate mounting table can pass above or below the sensor block and can be minutely moved in a state orthogonal to a moving direction of the microplate mounting table. 6. The sedimentation pattern measuring device according to 6.
下方に設けたセンサーブロック移動用モータの回転軸に
直結して外周縁に複数の円弧部と同数の直線部を交互に
形成したカム部材の外周縁とスプリングの付勢力によっ
て常時当接するよう設けられた回転子の軸部材と連動
し、カム部材の回動によってセンサーブロックをマイク
ロプレートの移動方向と直交する方向に微小移動させる
よう構成したことを特徴とする請求項６又は請求項７記
載の沈降パターン測定装置。8. The outside of a cam member, wherein the sensor block is directly connected to a rotation shaft of a sensor block moving motor provided below the base body, and has a plurality of arc portions and the same number of linear portions alternately formed on an outer peripheral edge thereof. It is configured to interlock with the shaft member of the rotor provided so as to always contact with the peripheral edge and the biasing force of the spring, and to finely move the sensor block in the direction orthogonal to the moving direction of the microplate by the rotation of the cam member. 8. The sedimentation pattern measuring device according to claim 6 or 7.
Priority Applications (9)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5139076A JP2809047B2 (en) | 1993-05-17 | 1993-05-17 | Indirect agglutination immunoassay and sedimentation pattern measuring device used for the method |
| TW083104397A TW351766B (en) | 1993-05-17 | 1994-05-16 | Method and apparatus for indirect agglutination immunoassay |
| KR1019940010606A KR0166111B1 (en) | 1993-05-17 | 1994-05-16 | Method and apparatus for indirect agglutination immunoassay |
| CA002123644A CA2123644C (en) | 1993-05-17 | 1994-05-16 | Method and apparatus for indirect agglutination immunoassay |
| AU63107/94A AU686604B2 (en) | 1993-05-17 | 1994-05-16 | Method and apparatus for performing an indirect agglutination immunoassay |
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000121511A (en) * | 1998-10-13 | 2000-04-28 | Hitachi Koki Co Ltd | Automatic separation and extraction device and its control method |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5811835A (en) * | 1981-07-16 | 1983-01-22 | Olympus Optical Co Ltd | Apparatus and vessel for deciding particle flocculation |
| JPH03108638A (en) * | 1989-09-22 | 1991-05-08 | Toray Ind Inc | Method of identifying particle aggregation pattern |
| JPH03144367A (en) * | 1989-10-31 | 1991-06-19 | Fujirebio Inc | Indirect agglutination immune measuring method and apparatus |
| JPH03191864A (en) * | 1989-12-21 | 1991-08-21 | Fujirebio Inc | Method and apparatus for measuring indirect agglutination immunity |
-
1993
- 1993-05-17 JP JP5139076A patent/JP2809047B2/en not_active Expired - Fee Related
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Also Published As
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