JP2809047B2 - Indirect agglutination immunoassay and sedimentation pattern measuring device used for the method - Google Patents
Indirect agglutination immunoassay and sedimentation pattern measuring device used for the methodInfo
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Description
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】この発明は、マイクロプレートの
各ウエルの底部に免疫測定用試薬の粒子を強制沈降させ
たのち、マイクロプレートを所定の角度に傾斜させてウ
エル底部に粒子の流れ出しによる沈降パターンを形成さ
せて測定する間接凝集免疫測定法と、この間接凝集免疫
測定法に用いる沈降パターン測定装置に関するものであ
る。BACKGROUND OF THE INVENTION The present invention relates to a method in which particles of an immunoassay reagent are forcibly settled at the bottom of each well of a microplate, and then the microplate is inclined at a predetermined angle to cause sedimentation of the particles at the bottom of the well. The present invention relates to an indirect agglutination immunoassay method for forming and measuring a pattern, and a sedimentation pattern measuring apparatus used for the indirect agglutination immunoassay method.
【０００２】[0002]
【従来の技術】この発明の発明者は、ウエル底部をＵ字
状またはＶ字状に形成したマイクロプレートのウエル内
に所定の希釈検体溶液に所定の試薬粒子液を添加混合
し、反応後に粒子を含む成分を各ウエル底部に磁力によ
って強制沈降させたのち、マイクロプレートを傾斜さ
せ、沈降した粒子のウエルからの剥離状況から免疫反応
の有無を判断する間接凝集免疫測定方法とその装置を特
開平３−１４４３６７号として提案した。この間接凝集
免疫測定法におけるマイクロプレート中の粒子の流れ出
しによる沈降パターンを大別すると、免疫反応によって
粒子・粒子間の結合が生じてマイクロプレートを傾けて
も粒子が動かずウエルの底に点状になる反応陽性の沈降
パターンと、免疫反応が起こらなかったために粒子・粒
子間の結合がなく、マイクロプレートを傾けることによ
って粒子が流れ出しウエルの側壁にまで達する反応陰性
の沈降パターンおよび両者の中間にあたる沈降パターン
の３通りがある。しかして、これらマイクロプレートの
ウエルの底に形成された粒子の流れ出しによる沈降パタ
ーンを読み取る手段としては、たとえばテレビカメラで
マイクロプレートを上方から写し取る方法や、ラインセ
ンサーを使用し、かつ画像処理技術を用いて写し取り、
各々の沈降パターンの流れ出した長さを計測して免疫反
応の有無と関連付ける方法などが存在する。2. Description of the Related Art The inventor of the present invention adds a predetermined reagent particle liquid to a predetermined diluted sample solution in a well of a microplate having a well bottom formed in a U-shape or a V-shape, and mixes the particles after the reaction. The indirect agglutination immunoassay method and apparatus for judging the presence or absence of an immune reaction based on the state of separation of sedimented particles from the wells after magnetically forcing the components containing No. 3-144367. In this indirect agglutination immunoassay, the sedimentation pattern due to the outflow of particles from the microplate can be roughly classified into particles. Between the reaction-positive sedimentation pattern and the reaction-negative sedimentation pattern, in which no particle-particle binding occurs due to the absence of an immune reaction, and the particles flow out by tilting the microplate and reach the side wall of the well. There are three types of sedimentation patterns. Means for reading the sedimentation pattern due to the flow of particles formed at the bottom of the wells of these microplates are, for example, a method of capturing the microplate from above with a television camera, a line sensor, and image processing technology. Copy using
There is a method of measuring the length of each settling pattern that has flowed out and correlating the length with the presence or absence of an immune reaction.
【０００３】[0003]
【発明が解決しようとする課題】前記特開平３−１４４
３６７号公報に開示した間接凝集免疫測定法は、マイク
ロプレートのウエル内に粒子を自然沈降させ、粒子の沈
降パターンから抗原抗体反応の有無を調べる静置法など
に比べて短時間に精度よく免疫反応の有無を判定できる
点で優れたものであるが、粒子の流れ出しによる沈降パ
ターンをテレビカメラやラインセンサーを使用して読み
取ることが不可欠である。しかしながら、これらテレビ
カメラやラインセンサーによる画像取込み方法において
は、テレビカメラやラインセンサーとマイクロプレート
の間の距離を要するため沈降パターン判定のための装置
が大型にならざるを得ず、両者間の距離が短い場合には
Ｕ字状またはＶ字状のマイクロプレートにあっては、底
部中央と周辺部では距離が一定ではないためピントにズ
レが生じて画像に歪みが生ずるなどの不都合があった。
また、間接凝集免疫測定法に使用するガラス製またはポ
リスチレン等の合成樹脂製のマイクロプレートは、一般
的にウエルの底部がＵ字状またはＶ字状で、一つのマイ
クロプレートに９６ケ（縦１２列×横８列）設けたもの
であるが、マイクロプレートの成形に際してウエルは底
部をＵ字状もしくはＶ字状に形成するためウエル底周辺
のエッジ部に成形時の歪みが生ずるので、各ウエルの縦
もしくは横方向における整列位置が必ずしも同一線上に
なく、沈降パターンの形成後にセンサーを縦または横方
向にウエル底部の中心部に沿って移動させても、前記整
列性のズレによって沈降パターン長さの計測が不正確と
なる。このようなマイクロプレート成形上におけるウエ
ルの整列性のズレは、免疫反応の基準となる沈降パター
ンの測定精度を不確実とし、免疫反応の有無の正確な判
定の障害となると共に、データーの再現性を大きく変動
させるものである。SUMMARY OF THE INVENTION The above-mentioned Japanese Patent Application Laid-Open No. 3-144 is disclosed.
The indirect agglutination immunoassay disclosed in Japanese Patent No. 367 is a method in which the particles are spontaneously sedimented in the wells of a microplate, and the immunity is more accurately measured in a shorter time than a static method in which the presence or absence of an antigen-antibody reaction is examined based on the sedimentation pattern of the particles. Although it is excellent in that the presence or absence of a reaction can be determined, it is essential to read the sedimentation pattern due to the outflow of particles using a television camera or a line sensor. However, in these image capturing methods using a television camera or a line sensor, a distance between the television camera or the line sensor and the microplate is required, so that the apparatus for determining the sedimentation pattern must be large, and the distance between the two is inevitable. When the length is short, the U-shaped or V-shaped microplate has a disadvantage that the distance is not constant between the center and the bottom of the bottom portion and the image is distorted due to a focus shift.
In addition, the microplate made of glass or synthetic resin such as polystyrene used for the indirect agglutination immunoassay generally has a U-shaped or V-shaped bottom, and 96 microplates (12 vertical) in one microplate. However, when forming the microplate, the bottom of the well is formed in a U-shape or a V-shape, so that an edge around the bottom of the well is distorted during the formation. The alignment position in the vertical or horizontal direction is not necessarily on the same line, and even if the sensor is moved in the vertical or horizontal direction along the center of the bottom of the well after the formation of the sedimentation pattern, the length of the sedimentation pattern is affected by the misalignment of the alignment. Measurement becomes inaccurate. This misalignment of the wells on the microplate molding makes the measurement accuracy of the sedimentation pattern, which is the standard of the immune response, uncertain, hinders the accurate determination of the presence or absence of the immune response, and the reproducibility of the data Greatly fluctuate.
【０００４】この発明はかゝる現状に鑑み、間接凝集法
に使用するマイクロプレートに設けられる多数のウエル
の整列性に成形上の誤差があっても、粒子の流れ出しに
よる沈降パターンの長さを精度よく測定することができ
る間接凝集免疫測定法と、この間接凝集免疫測定法に用
いる沈降パターン測定装置を提供せんとするものであ
る。In view of the above situation, the present invention reduces the length of the sedimentation pattern caused by the outflow of particles even if there is a molding error in the alignment of a large number of wells provided in a microplate used for the indirect aggregation method. It is an object of the present invention to provide an indirect agglutination immunoassay capable of performing accurate measurement and a sedimentation pattern measuring device used in the indirect agglutination immunoassay.
【０００５】[0005]
【課題を解決するための手段】前記目的を達成するた
め、この発明の間接凝集免疫測定法は、基本的には、ウ
エルの底部に免疫測定用試薬の粒子を沈降させたのち、
ウエルを所定角度に傾斜させてウエル底部に粒子の流れ
出しによる沈降パターンを形成させて免疫反応の有無を
判定するに際し、ウエルを傾斜させてウエル底部に沈降
パターンを形成させ、形成された沈降パターンを流れ出
し方向に直交する状態でマイクロプレートまたは光セン
サーを移動させて沈降パターンの長さを複数地点におい
て測定し、得られた長さを沈降パターンの長さとして免
疫反応の有無を判定することを特徴とするものである。Means for Solving the Problems To achieve the above object, the indirect agglutination immunoassay of the present invention basically comprises the steps of precipitating immunoassay reagent particles at the bottom of a well,
When the well is inclined at a predetermined angle to form a sedimentation pattern due to the outflow of particles at the bottom of the well to determine the presence or absence of an immune reaction, the well is inclined to form a sedimentation pattern at the bottom of the well, and the formed sedimentation pattern is The length of the sedimentation pattern is measured at multiple points by moving the microplate or the optical sensor in a state perpendicular to the flow direction, and the obtained length is used as the length of the sedimentation pattern to determine the presence or absence of an immune reaction. It is assumed that.
【０００６】具体的には、この発明の間接凝集免疫測定
法は、マイクロプレートの各ウエルの底部に免疫測定用
試薬の粒子を沈降させたのち、マイクロプレートを所定
角度に傾斜させてウエル底部に粒子の流れ出しによる沈
降パターンを形成させて免疫反応の有無を判定するに際
し、各ウエルの粒子の流れ出し方向における沈降パター
ンの長さのサーチすべき区間を光センサーをによって測
定したのち、マイクロプレートを傾斜させてウエル底部
に沈降パターンを形成させ、形成された沈降パターンを
流れ出し方向に直交する状態でマイクロプレートまたは
光センサーを移動させて沈降パターンの長さを複数地点
において測定し、得た沈降パターン計測値と前記沈降パ
ターンの長さのサーチすべき区間の測定値と比較して最
も長い沈降パターンを沈降パターンとして免疫反応の有
無を判定することを特徴とするものである。Specifically, in the indirect agglutination immunoassay according to the present invention, the particles of the immunoassay reagent are settled at the bottom of each well of the microplate, and then the microplate is inclined at a predetermined angle to form the bottom of the well at the bottom of the well. When determining the presence or absence of an immune reaction by forming a sedimentation pattern due to the outflow of particles, the section to be searched for the length of the sedimentation pattern in the outflow direction of the particles in each well is measured by an optical sensor, and then the microplate is tilted. The sedimentation pattern is formed at the bottom of the well, and the length of the sedimentation pattern is measured at multiple points by moving the microplate or the optical sensor in a state where the sedimentation pattern is perpendicular to the outflow direction, and the sedimentation pattern measurement obtained The longest sedimentation pattern compared to the measured value of the section to be searched for the length of the sedimentation pattern It is characterized in determining the presence or absence of immune response as precipitation pattern.
【０００７】より具体的には、この発明の間接凝集免疫
測定法は、マイクロプレートの各ウエルの底部に免疫測
定用試薬の磁性体粒子または磁性体を含む粒子を含有し
た成分を磁力によって強制沈降させたのち、マイクロプ
レートを所定角度に傾斜させてウエル底部に粒子の流れ
出しによる沈降パターンを形成させて免疫反応の有無を
判定するに際し、沈降パターンの形成前に各ウエルの粒
子の流れ出し方向における沈降パターンの長さのサーチ
すべき区間をあらかじめ光センサーによって測定し、該
沈降パターンの長さのサーチすべき区間の測定後にマイ
クロプレートを傾斜させてウエル底部に沈降パターンを
形成させ、形成された沈降パターンを流れ出し方向に直
交する状態でマイクロプレートまたは光センサーを微小
移動させて沈降パターンの長さを複数地点において測定
し、得た沈降パターン計測値とあらかじめ測定した沈降
パターンの長さのサーチすべき区間の測定値を比較して
最も長い長さを沈降パターンとして免疫反応の有無を判
定することを特徴とするものである。More specifically, according to the indirect agglutination immunoassay of the present invention, a magnetic particle or a component containing a magnetic substance of an immunoassay reagent is forcibly precipitated by magnetic force at the bottom of each well of a microplate. After that, the microplate is inclined at a predetermined angle to form a sedimentation pattern due to the outflow of particles at the bottom of the well, and when judging the presence or absence of an immune reaction, the sedimentation in the outflow direction of the particles in each well before forming the sedimentation pattern. The section to be searched for the length of the pattern is measured by an optical sensor in advance, and after measuring the section to be searched for the length of the settling pattern, the microplate is inclined to form a settling pattern at the bottom of the well, and the formed settling is formed. Move the microplate or optical sensor slightly in a state where the pattern is perpendicular to The measured length of the sedimentation pattern is measured at multiple points, and the measured sedimentation pattern is compared with the measured value of the pre-measured sedimentation pattern length to be searched. It is characterized by determining the presence or absence.
【０００８】さらに具体的には、この発明の間接凝集免
疫測定法は、所定角度で傾斜するベース本体上にマイク
ロプレート載置台を傾斜方向に沿って移動可能に設け、
該マイクロプレート載置台の移動方向における前方位置
にマイクロプレートの縦列もしくは横列に形成されたウ
エルと同数の光センサーを同一線上に設けたセンサーブ
ロックをマイクロプレート載置台の移動方向と直交させ
て設けた沈降パターン測定装置を使用し、沈降パターン
の形成前に各ウエルの粒子の流れ出し方向における沈降
パターンの長さのサーチすべき区間をマイクロプレート
または光センサーを微小づつ移動させながら各ウエルに
ついて測定し、該沈降パターンの長さのサーチすべき区
間の測定後にベース本体を傾斜させてマイクロプレート
の各ウエル底部に沈降パターンを形成させ、形成された
沈降パターンを流れ出し方向に直交する状態でマイクロ
プレートまたは光センサーを微小移動させて沈降パター
ンの長さを複数地点において測定し、得た沈降パターン
計測値とあらかじめ測定した沈降パターンの長さのサー
チすべき区間の測定値を比較して最も長い長さを沈降パ
ターンとして免疫反応の有無を判定することを特徴とす
るものである。More specifically, according to the indirect agglutination immunoassay of the present invention, a microplate mounting table is provided on a base body inclined at a predetermined angle so as to be movable along the inclination direction,
At the front position in the moving direction of the microplate mounting table, a sensor block in which the same number of optical sensors as wells formed in columns or rows of microplates were provided on the same line was provided perpendicular to the moving direction of the microplate mounting table. Using a sedimentation pattern measuring device, before forming the sedimentation pattern, the section to be searched for the length of the sedimentation pattern in the flow direction of the particles in each well is measured for each well while moving the microplate or the optical sensor minutely, After measuring the section to be searched for the length of the settling pattern, the base body is tilted to form a settling pattern at the bottom of each well of the microplate, and the formed settling pattern is perpendicular to the flowing-out direction. Move the sensor minutely to set the length of the sedimentation pattern And measuring the sedimentation pattern measurement value obtained and the measured value of the section to be searched for the length of the sedimentation pattern measured in advance to determine the presence or absence of an immune reaction as the sedimentation pattern with the longest length. Is what you do.
【０００９】一方、前記の間接凝集免疫測定法に使用す
る沈降パターン測定装置は、所定角度で傾斜するベース
本体上にマイクロプレートを載置するマイクロプレート
載置台を傾斜方向に沿って移動可能に設け、該マイクロ
プレート載置台の移動方向における前方位置にマイクロ
プレートの縦列もしくは横列に形成されたウエルと同数
の光センサーを同一線上に設けたセンサーブロックをマ
イクロプレート載置台の移動方向と直交する状態で設
け、該センサーブロックまたはマイクロプレート載置台
のいずれか一方を微小移動できるよう構成したことを特
徴とするものである。On the other hand, the sedimentation pattern measuring device used in the indirect agglutination immunoassay method is provided with a microplate mounting table on which a microplate is mounted on a base body inclined at a predetermined angle so as to be movable in the inclined direction. At the front position in the moving direction of the microplate mounting table, a sensor block provided with the same number of optical sensors as wells formed in columns or rows of microplates on the same line in a state orthogonal to the moving direction of the microplate mounting table. And one of the sensor block and the microplate mounting table can be minutely moved.
【００１０】この発明において、免疫測定用試薬の粒子
とは、磁性体粒子、強磁性体を含んだゼラチン粒子、磁
性体を血清アルブミンで被覆した粒子、磁性体を合成ポ
リマーで被覆した粒子、合成ポリマー中磁性体を含んだ
粒子、特公昭６３−２９２２３号公報に記載されたゼラ
チン粒子、ウサギや羊またはヤギなどの各種動物赤血
球、シリカ、カリオン等の無機粒子などである。また、
マイクロプレートの各ウエルの底部への粒子の強制沈降
は、磁力によるものであっても、遠心力による強制沈降
であってもよいが、免疫測定方法の自動化の点からは前
記した各種磁性粒子を用いて磁力による強制沈降が望ま
しい。In the present invention, the particles of the immunoassay reagent include magnetic particles, gelatin particles containing a ferromagnetic material, particles in which the magnetic material is coated with serum albumin, particles in which the magnetic material is coated with a synthetic polymer, and synthetic particles. Examples include particles containing a magnetic substance in a polymer, gelatin particles described in JP-B-63-29223, various animal red blood cells such as rabbits, sheep and goats, and inorganic particles such as silica and carion. Also,
Forced sedimentation of particles to the bottom of each well of the microplate may be due to magnetic force or force sedimentation due to centrifugal force, but from the viewpoint of automation of the immunoassay method, the various magnetic particles described above are used. Forcing sedimentation by magnetic force is desirable.
【００１１】また、マイクロプレートの各ウエルの粒子
の流れ出し方向における沈降パターンの長さのサーチす
べき区間とは、粒子の流れ出し方向におけるウエルの前
方の円周上における一点と該一点に対応する後方の円周
上の一点間の距離を流れ出し方向に直交する状態でマイ
クロプレートまたは光センサーを微小移動させて複数地
点において測定したものである。The section to be searched for the length of the sedimentation pattern in the flow direction of the particles in each well of the microplate is a point on the circumference in front of the well in the flow direction of the particles and the rear corresponding to the one point. Are measured at a plurality of points by slightly moving the microplate or the optical sensor in a state in which the distance between one point on the circumference of the circle is perpendicular to the flowing direction.
【００１２】ウエル底部に沈降パターンを形成するに際
しては、遠心力による方法とマイクロプレートを適宜手
段によって傾斜させて行う方法があるが、マイクロプレ
ートを傾斜させて行う場合には、マイクロプレートを粒
子の流れ出し方向に５０°〜７０°の角度で傾斜させて
行う。その際、マイクロプレートがＶ字状の底面を有す
る場合には、沈降パターンを形成する面が水平方向に対
して２０°〜４０°の角度で傾斜させることによって沈
降パターンを効率よく形成させることができる。In order to form a sedimentation pattern on the bottom of the well, there are a centrifugal force method and a method in which the microplate is inclined by appropriate means. It is performed by inclining at an angle of 50 ° to 70 ° in the flowing direction. At this time, when the microplate has a V-shaped bottom surface, the surface on which the sedimentation pattern is formed is inclined at an angle of 20 ° to 40 ° with respect to the horizontal direction so that the sedimentation pattern can be efficiently formed. it can.
【００１３】沈降パターンの長さの測定および粒子の流
れ出し方向における沈降パターンの長さのサーチすべき
区間の測定は、マイクロプレートもしくは光センサーの
いずれか一方を他方に対して直交状態で微小移動させて
行うものであるが、具体的には、所定角度で傾斜するベ
ース本体上にマイクロプレートを載置するためのマイク
ロプレート載置台を傾斜方向に移動自在に取付け、該マ
イクロプレート載置台の移動方向の前方に光センサーを
同一線上に多数設けたセンサーブロックを、その上方も
しくは下方をマイクロプレート載置台が通過することが
できる沈降パターン測定装置を構成し、センサーブロッ
クをマイクロプレート載置台に対して直交する状態で微
小移動させて行うものである。The measurement of the length of the sedimentation pattern and the measurement of the section to be searched for the length of the sedimentation pattern in the flow direction of the particles are performed by slightly moving either the microplate or the optical sensor in a state perpendicular to the other. Specifically, a microplate mounting table for mounting a microplate on a base body inclined at a predetermined angle is movably mounted in the tilt direction, and the moving direction of the microplate mounting table is The sensor block, which has a number of optical sensors on the same line in front of it, constitutes a sedimentation pattern measuring device that allows the microplate mounting table to pass above or below it, and the sensor block is orthogonal to the microplate mounting table. This is performed by slightly moving it in a state where it moves.
【００１４】前記沈降パターン測定装置において、セン
サーブロックは、マイクロプレートの縦列もしくは横列
に形成されたウエルと同数の光センサーを同一線上に設
けて構成したもので、この光センサーは透過型光センサ
ーや反射型光センサー等であって、透過型光センサーの
場合には、マイクロプレートを挟んで光センサーの反対
側に光源を設け、反射型光センサーの場合には、前記光
源の代わりに反射板を用いるものである。また、このセ
ンサーブロックは、ベース本体の下方に設けたセンサー
ブロック移動用モータの回転軸に直結して外周縁に複数
の円弧部と同数の直線部を交互に形成したカム部材の外
周縁とスプリングの付勢力によって常時当接するよう設
けられた回転子の軸部材と連動し、カム部材の回動によ
ってセンサーブロックをマイクロプレートの移動方向と
直交する方向に微小移動させるよう構成したものであ
る。In the above sedimentation pattern measuring device, the sensor block is constituted by providing the same number of optical sensors as wells formed in columns or rows of microplates on the same line. In the case of a reflection type optical sensor or the like, in the case of a transmission type optical sensor, a light source is provided on the opposite side of the optical sensor across the microplate, and in the case of a reflection type optical sensor, a reflection plate is provided instead of the light source. It is used. The sensor block is connected directly to the rotation axis of a sensor block moving motor provided below the base body, and has a plurality of arc portions and the same number of linear portions alternately formed on the outer periphery. With the urging force described above, the sensor block is minutely moved in a direction orthogonal to the moving direction of the microplate by the rotation of the cam member in conjunction with the shaft member of the rotor provided so as to be always in contact with the rotor plate.
【００１５】[0015]
【作用】この発明の間接凝集免疫測定法は、マイクロプ
レートの各ウエルの底部に免疫測定用試薬の粒子を強制
沈降させたのち、マイクロプレートを所定角度に傾斜さ
せてウエル底部に粒子の流れ出しによる沈降パターンを
形成させ、形成された沈降パターンを流れ出し方向に直
交する状態でマイクロプレートまたは光センサーを微小
移動させて沈降パターンの長さを複数地点において測定
し、得られた最も長い長さを沈降パターンとすることが
できるので、沈降パターンの測定を簡単かつ正確に求め
ることができる。According to the indirect agglutination immunoassay of the present invention, after the particles of the immunoassay reagent are forcibly settled at the bottom of each well of the microplate, the microplate is inclined at a predetermined angle and the particles flow out to the bottom of the well. A sedimentation pattern is formed, and the length of the sedimentation pattern is measured at multiple points by micro-moving the microplate or optical sensor in a state where the sedimentation pattern is perpendicular to the flowing direction, and the longest obtained length is settled. Since a pattern can be obtained, the measurement of the sedimentation pattern can be easily and accurately obtained.
【００１６】特に、沈降パターンの長さの測定に際し、
成分を含む粒子の流れ出しによる沈降パターンの形成前
に、各ウエルについて沈降パターンの長さのサーチすべ
き区間をあらかじめ測定することによって、マイクロプ
レートの移動方向におけるウエル間のピッチ誤差を補正
できる。また、マイクロプレートを傾斜させてウエル底
部に沈降パターンを形成させ、形成された沈降パターン
を流れ出し方向に直交する状態でマイクロプレートもし
くは光センサーを微小移動させて沈降パターンの長さを
複数地点において測定するので、マイクロプレートの移
動方向に直交するウエル間のピッチ誤差を補正できる。In particular, when measuring the length of the sedimentation pattern,
Before the formation of the sedimentation pattern due to the outflow of the particles containing the components, the pitch error between the wells in the moving direction of the microplate can be corrected by previously measuring the section to be searched for the length of the sedimentation pattern for each well. In addition, the microplate is inclined to form a sedimentation pattern at the bottom of the well, and the length of the sedimentation pattern is measured at multiple points by slightly moving the microplate or optical sensor in a state where the formed sedimentation pattern is perpendicular to the flowing direction Therefore, the pitch error between wells orthogonal to the moving direction of the microplate can be corrected.
【００１７】この発明の沈降パターン測定装置は、傾斜
可能なベース本体上にマイクロプレートを載置するマイ
クロプレート載置台を傾斜方向に沿って移動可能に設
け、該マイクロプレート載置台の移動方向における前方
位置にマイクロプレートの縦列もしくは横列に形成され
たウエルと同数の光センサーを同一線上に設けたセンサ
ーブロックをその上方もしくは下方をマイクロプレート
載置台が通過でき、かつ移動方向と直交する状態で微小
移動できるよう設けたので、ウエル底部への沈降パター
ン形成前においては、各ウエルについて沈降パターンの
測長のサーチすべき区間をあらかじめ測定でき、沈降パ
ターン形成後は沈降パターンの長さを複数地点において
測定することができる。According to the sedimentation pattern measuring apparatus of the present invention, a microplate mounting table for mounting a microplate on a tiltable base main body is provided so as to be movable along an inclined direction, and the microplate mounting table is disposed forward in the moving direction of the microplate mounting table. The microplate mounting table can pass above or below the sensor block provided with the same number of optical sensors as wells formed in columns or rows of microplates on the same line, and micro-movement in a state perpendicular to the direction of movement Before the formation of the sedimentation pattern on the bottom of the well, the section to be searched for the length of the sedimentation pattern can be measured in advance for each well. After the formation of the sedimentation pattern, the length of the sedimentation pattern can be measured at multiple points. can do.
【００１８】[0018]
【実施例】以下、この発明の間接凝集免疫測定法と、こ
れに使用する沈降パターン測定装置の一実施例を添付の
図面を引用して具体的に説明する。この発明の沈降パタ
ーン測定装置１０は、図１に示すように所定方向に最大
７０°の角度で傾斜するベース本体１１と、該ベース本
体１１上に傾斜方向に沿って進退するマイクロプレート
載置台１４と、該マイクロプレート載置台１４をベース
本体１１上で移動させるための駆動機構と、前記マイク
ロプレート載置台１４に着脱自在に載置されるマイクロ
プレート１５の縦列におけるウエルと同数の１２個の反
射型光センサー２１ａ，２１ｂ・・・・２１ｌを同一線
上に取り付けたセンサーブロック２０と、該センサーブ
ロック２０をマイクロプレート載置台１４の移動方向と
直交する方向に微小範囲で移動させる移動機構とから構
成されるものである。DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS Hereinafter, an embodiment of the indirect agglutination immunoassay according to the present invention and an apparatus for measuring a sedimentation pattern used therein will be described in detail with reference to the accompanying drawings. As shown in FIG. 1, a sedimentation pattern measuring apparatus 10 according to the present invention includes a base body 11 inclined at a maximum angle of 70 ° in a predetermined direction, and a microplate mounting table 14 moving on the base body 11 along the inclined direction. A drive mechanism for moving the microplate mounting table 14 on the base body 11; and twelve reflections of the same number as wells in a column of microplates 15 removably mounted on the microplate mounting table 14. .. 21l are mounted on the same line, and a moving mechanism for moving the sensor block 20 in a minute range in a direction orthogonal to the moving direction of the microplate mounting table 14. Is what is done.
【００１９】ベース本体１１は全体を矩形状に形成した
もので、短手方向の両端縁に沿ってガイド取付板１２
ａ，１２ｂを対向させて設けると共に、該ガイド板１２
ａ，１２ｂに所定の間隔を存して一対のガイドロッド１
３，１３を架設したもので、該ベース本体１１は、その
裏面に設けられた傾斜機構（図示せず）によって前記ガ
イド取付板１２ｂの内側近傍を基端として最大７０°の
角度でガイド取付板１２ａ側が持ち上がり傾斜するよう
構成されている。The base body 11 is formed in a rectangular shape as a whole.
a and 12b are provided facing each other, and the guide plate 12
a and a pair of guide rods 1 with a predetermined interval between them.
The base body 11 is provided with an inclination mechanism (not shown) provided on the back surface of the base body 11 at an angle of up to 70 ° with the base end near the inside of the guide attachment plate 12b as a base end. The side 12a is configured to be lifted and inclined.
【００２０】マイクロプレート載置台１４は、その上面
にウエルのＵ字状またはＶ字状の底部の中心部に免疫測
定用試薬の磁性体粒子又は磁性体を含む粒子を含有した
成分を磁力によって強制沈降させたマイクロプレート１
５を着脱自在に取付け、測定のためマイクロプレート１
５を載置した状態で前記一対のガイドロッド１３，１３
にガイドされてベース本体１１上を矢印Ｘ方向に前後動
するものである。前記マイクロプレート１５は、合成樹
脂またはガラス製の市販品で、長辺（縦方向）に沿って
１２個のウエルを一列として短辺（横方向）方向に８列
の計９６個のウエルが一体的に形成されている。このマ
イクロプレート載置台１４の移動は、ベース本体１１の
長手方向における一側縁に沿って設けられたタイミング
ベルト１６によって行うもので、該タイミングベルト１
６はステッピングモータ１７と連動し、該ステッピング
モータ１７は前記マイクロプレート載置台１４の移動方
向における一方の側面部にマイクロプレート１５の短辺
側のウエルの数（実施例においては８つ）に対応して突
設した測定位置検出用の各センサー１８ａ，１８ｂ・・
・・１８ｈが移動方向の前方に設けた測定位置センサー
１９とそれぞれ接触することによって駆動し、マイクロ
プレート載置台１４が横に一列づつ前進するよう構成さ
れている。On the upper surface of the microplate mounting table 14, a component containing a magnetic substance particle or a particle containing a magnetic substance of an immunoassay reagent is forcibly applied by a magnetic force at the center of the U-shaped or V-shaped bottom of the well. Microplate 1 settled
5 is detachably mounted, and microplate 1 for measurement
5 with the pair of guide rods 13, 13
, And moves back and forth on the base body 11 in the direction of arrow X. The microplate 15 is a commercially available product made of a synthetic resin or glass, and a total of 96 wells of 8 rows in the short side (horizontal direction) with 12 wells in one row along the long side (vertical direction) are integrated. Is formed. The movement of the microplate mounting table 14 is performed by a timing belt 16 provided along one side edge of the base body 11 in the longitudinal direction.
Reference numeral 6 is interlocked with the stepping motor 17, which corresponds to the number of wells (eight in the embodiment) on the short side of the microplate 15 on one side in the moving direction of the microplate mounting table 14. The sensors 18a, 18b for detecting the measurement positions projected
.. 18h are driven by coming into contact with the measurement position sensors 19 provided in front of the movement direction, respectively, and the microplate mounting table 14 is configured to advance forward by one row.
【００２１】各ウエルについて、沈降パターンの長さの
サーチすべき区間と粒子の流れ出しによる沈降パターン
の長さを測定するセンサーブロック２０は、その上面に
マイクロプレート１５の縦方向に設けた１２個のウエル
と対応して反射板（図示せず）から得られる回帰光を測
定する１２個の反射型の光センサー２１ａ，２１ｂ・・
・・２１ｌを横一列となるよう取付けて構成したもの
で、図１に示すようにマイクロプレート載置台１４の前
方にその上方をマイクロプレート載置台１４が通過で
き、かつマイクロプレート載置台１４の移動方向と直交
する方向に微小距離づつ移動できるようベース本体１１
上に設けたものである。すなわち、図２および図３に示
すようにベース本体１１の下方に設けたセンサーブロッ
ク移動用のモータ２２の回転軸２２ａに直結して外周縁
に３つの円弧部２３ａ，２３ｂおよび２３ｃと３つの直
線部２３ｄ，２３ｅ，２３ｆを交互に形成したカム部材
２３を設け、該カム部材２３の外周縁上にカム部材２３
の外周縁と常時当接する回転子２４を設け、該回転子２
４内に設けたベアリングと係合する軸部材２５の基端部
をベース本体１１上に突設して前記センサーブロック２
０の底面部と係合させると共に、該回転子２４の軸部材
２５をスプリング２６によって付勢し、回転子２４とカ
ム部材２３の外周縁部とを常時当接させたもので、モー
タ２２の回転によってカム部材２３が回動し、該カム部
材２３の外周縁に形成された円弧部２３ａ〜２３ｃが回
転子２５と当接した時に前記センサーブロック２０をマ
イクロプレート載置台１４の移動方向と直交する方向に
約０．１ｍｍ程度の微小距離分移動させるよう構成した
ものである。なお、前記カム部材２３の裏面に突設され
た円柱部２７の外周部には、３つの光センサー２８ａ，
２８ｂ，２８ｃがそれぞれ１２０°づつずらした位置に
配設され、前記円柱部２７の外周部に設けられた円板状
の検出板２９の外周縁上に形成された切欠部３０が光セ
ンサー２８ａ，２８ｂ，２８ｃと対応する位置に回動し
てくると、光センサーが作動し、センサーブロック２０
の微小移動の開始や停止を制御するものである。For each well, a sensor block 20 for measuring the length of the sedimentation pattern due to the flowing out of particles and a section to be searched for the length of the sedimentation pattern is provided with twelve twelve vertically arranged microplates 15 on the upper surface thereof. Twelve reflection-type optical sensors 21a, 21b,... Measuring return light obtained from a reflection plate (not shown) corresponding to the wells.
··· Mounting the microplate mounting table 14 in front of and above the microplate mounting table 14 as shown in FIG. 1 and moving the microplate mounting table 14 Base body 11 so that it can be moved by a small distance in a direction perpendicular to the direction.
It is provided above. That is, as shown in FIGS. 2 and 3, three arc portions 23a, 23b and 23c and three straight lines are directly connected to the rotation shaft 22a of the motor 22 for moving the sensor block provided below the base body 11 and formed on the outer peripheral edge. A cam member 23 having alternately formed portions 23d, 23e and 23f is provided, and a cam member 23 is provided on an outer peripheral edge of the cam member 23.
The rotor 24 is always in contact with the outer peripheral edge of the
The base end of the shaft member 25 that engages with the bearing provided in the sensor body 4 is projected from the base body 11 to form the sensor block 2.
0, and the shaft member 25 of the rotor 24 is urged by a spring 26 so that the rotor 24 and the outer peripheral edge of the cam member 23 are always in contact with each other. The rotation of the cam member 23 causes the sensor block 20 to be orthogonal to the moving direction of the microplate mounting table 14 when the arc portions 23 a to 23 c formed on the outer peripheral edge of the cam member 23 come into contact with the rotor 25. In such a direction as to move by a minute distance of about 0.1 mm. In addition, three optical sensors 28a and 3b are provided on the outer peripheral portion of the cylindrical portion 27 protruding from the back surface of the cam member 23.
The cutouts 30 formed on the outer peripheral edge of the disc-shaped detection plate 29 provided on the outer peripheral portion of the cylindrical portion 27 are provided with the optical sensors 28a and 28c, respectively. When the optical sensor is turned to the position corresponding to 28b, 28c, the optical sensor is activated, and the sensor block 20 is turned on.
This controls the start and stop of the minute movement.
【００２２】以下、かゝる沈降パターン測定装置１０を
使用してこの発明の間接凝集免疫測定法について説明す
る。この沈降パターン測定装置１０のマイクロプレート
載置台１４に載置されるマイクロプレート１５は、各ウ
エル内のＵ字状またはＶ字状の底部の中心部に免疫測定
用試薬の磁性体粒子又は磁性体を含む粒子を含有した成
分を磁力等によって強制沈降させたものであるが、使用
するマイクロプレート１５はマイクロプレートの成形に
際してウエルは底部をＵ字状もしくはＶ字状に形成する
ためウエル底部周辺のエッジ部に成形時の歪みが生ずる
ので、各ウエルの縦もしくは横方向における整列位置が
必ずしも同一線上にない。したがって、図４に示すよう
にマイクロプレート１５をＸ軸方向に移動させながら沈
降パターンの長さを測定する場合、マイクロプレートの
移動方向における最先端位置にあるウエルの底部の中心
を通るよう光センサーをセットして測定すると、光セン
サーは最先端のウエルＷ1 の沈降パターンＡ1 は光セン
サーの描く軌跡Ｘ線上を通るｘ1 −ｘ2 の２点で正確に
測定することができる。しかしながら、ウエルの整列性
にズレがあって、たとえばウエルＷ2 の中心が軌跡Ｘ線
に対して右寄りに位置していた場合あるいはウエルＷ3
の中心が軌跡Ｘ線に対して左寄りに位置していた場合
は、それぞれ計測される沈降パターンＡ2あるいはＡ3
は短く測定されるため計測が不正確となる。Hereinafter, the indirect agglutination immunoassay of the present invention using such a sedimentation pattern measuring apparatus 10 will be described. The microplate 15 mounted on the microplate mounting table 14 of the sedimentation pattern measuring device 10 is provided with a magnetic particle or a magnetic material of the immunoassay reagent at the center of the U-shaped or V-shaped bottom in each well. The microplate 15 used is formed by forming a bottom into a U-shape or a V-shape when forming the microplate. Since distortion occurs at the edge portion during molding, the wells are not always aligned on the same line in the vertical or horizontal direction. Therefore, when measuring the length of the sedimentation pattern while moving the microplate 15 in the X-axis direction as shown in FIG. 4, the optical sensor passes through the center of the bottom of the well at the foremost position in the moving direction of the microplate. when measured by setting the optical sensor sedimentation pattern a 1-of-the-art well W 1 can be accurately measured in two points x 1 -x 2 through a trajectory X line drawn by the light sensor. However, there is a deviation in the alignment of the well, for example if the center of the well W 2 is located to the right relative to locus X-ray or the well W 3
Is located to the left with respect to the trajectory X-ray, the measured sedimentation pattern A 2 or A 3
Measurement is inaccurate because it is measured short.
【００２３】そこで、この発明の間接凝集免疫測定法
は、光センサーを使用してウエル底部に流れ出した沈降
パターンの計測に際し、ウエル底部周辺のエッジ部の成
形時の歪みによる整列性のズレによって生ずる誤差を補
正して計測を正確にするため、粒子の流れ出しによる沈
降パターンの成形前に、各ウエルごとに沈降パターンの
長さのサーチすべき区間をあらかじめ求めて座標として
コンピュータに記憶させたのち、沈降パターン形成後に
おいて、沈降パターンの長さを複数の地点において測定
し、両方の測定結果を比較して計測上最も長い沈降パタ
ーンを基準に免疫反応の有無を判定しようとするもので
ある。すなわち、図１に示すように粒子を強制沈降させ
たマイクロプレート１５を縦列のウエルがマイクロプレ
ート載置台１４がベース本体１１上を移動する方向と直
交するようマイクロプレート載置台１４に載せ、ベース
本体１１を所定の角度に傾斜させてウエル内に沈降パタ
ーンを形成させる前にマイクロプレート載置台１４をガ
イドロッド１３，１３に沿ってベース本体１１上をＸ方
向に移動させ、マイクロプレート１５の縦列のウエルと
同数の光センサー２１ａ・・・・２１１を設けたセンサ
ーブロック２０上に位置させる。ついで、図５に示すよ
うにマイクロプレート１５の移動方向における最前列に
位置するウエルＷ１，ウエルＷ９，ウエルＷ１７・・・
・ウエルＷｎ（ｎは８９）の底部周辺のエッジの円周上
に位置するＡ１−Ｂ１，Ａ２−Ｂ２およびＡ３−Ｂ３の
間の長さを合計９６個のウエルすべてについて測定す
る。この測定に際しては、前記沈降パターン測定装置１
０におけるセンサーブロック２０をマイクロプレート１
５の移動方向と直交する方向、すなわちＹ方向にカム部
材等を駆動させて微小の間隔（約０．１ｍｍ）づつ移動
させて３回に渡って計測するものである。The indirect agglutination immunoassay according to the present invention, when measuring the sedimentation pattern that has flowed to the bottom of the well using an optical sensor, is caused by misalignment due to distortion during molding of the edge around the bottom of the well. In order to correct the error and correct the measurement, before forming the sedimentation pattern due to the outflow of particles, the section to be searched for the length of the sedimentation pattern for each well was obtained in advance and stored in the computer as coordinates, After the sedimentation pattern is formed, the length of the sedimentation pattern is measured at a plurality of points, and both measurement results are compared to determine the presence or absence of an immune reaction based on the longest sedimentation pattern in measurement. That is, as shown in FIG. 1, the microplate 15 on which the particles are forcibly settled is placed on the microplate mounting table 14 so that the wells in a row are orthogonal to the direction in which the microplate mounting table 14 moves on the base body 11. Before tilting the microplate 11 at a predetermined angle to form a sedimentation pattern in the well, the microplate mounting table 14 is moved in the X direction on the base body 11 along the guide rods 13 and 13 so that It is positioned on the sensor block 20 provided with the same number of optical sensors 21a... Then, the well W 1, the well W 9 located in the front row in the moving direction of the micro plate 15 as shown in FIG. 5, the well W 17 · · ·
The length between A 1 -B 1 , A 2 -B 2 and A 3 -B 3 located on the circumference of the edge around the bottom of the well Wn ( where n is 89 ) for all 96 wells in total Measure. At the time of this measurement, the sedimentation pattern measuring device 1
0 to the microplate 1
The cam member or the like is driven in a direction orthogonal to the movement direction of 5, ie, the Y direction, and is moved by a small interval (about 0.1 mm) to measure three times.
【００２４】ついで、前記各ウエルの沈降パターンの測
長のサーチすべき区間の計測が終了すると、マイクロプ
レート載置台１４をもとの位置に戻したのち、ベース本
体１１を約６０°の傾斜角となるよう傾斜させてウエル
底部に粒子の流れ出しによる沈降パターンを形成させ
る。この沈降パターンの形成が終わると、ベース本体１
１をもとの水平状態に復帰させたのち、マイクロプレー
ト載置台１４をマイクロプレート１５の最前列のウエル
Ｗ1 がセンサーブロック２０上に位置するよう移動さ
せ、図６に示すようにまずラインＸ1 上においてＰ1 −
Ｑ1 間を、ラインＸ2 上においてＰ2 −Ｑ2 間を、ライ
ンＸ3 上においてＰ3 −Ｑ3 間のパターンの長さを測定
する。しかして、ラインＸ2 は基本的には各ウエルの中
心線上を意味し、ラインＸ2及びＸ3 は中心線を挟む前
後の円周上の地点である。これら各ウエルにおける３か
所における沈降パターンの長さの測定は、センサーブロ
ック２０をＹ方向に微小の間隔（約０．１ｍｍ間隔）づ
つ移動させて実施するもので、検体溶液が注入されたウ
エルの全てについて実施するもので、通常は９６個のウ
エル全てについて行う。その際、マイクロプレート載置
台１４のＸ方向への移動は、マイクロプレート載置台１
４の側方に突出させた各センサー１８ａ，１８ｂ・・・
・１８ｈが移動方向の前方に設けた測定位置センサー１
９とそれぞれ接触することによってマイクロプレート載
置台１４が横に一列づつ前進するものである。かくして
マイクロプレート１５に設けられた９６個のウエル全て
について位置をずらしての沈降パターンの長さの計測が
終わると、この計測値と沈降パターン形成前に実施した
計測値をコンピュータによって比較し、各ウエルとも一
番長い計測値の長さをもって免疫反応の有無を判定する
ものである。Then, when the measurement of the section to be searched for the length measurement of the sedimentation pattern of each well is completed, the microplate mounting table 14 is returned to the original position, and the base body 11 is tilted by about 60 °. The sedimentation pattern is formed at the bottom of the well by flowing out particles. When the formation of the settling pattern is completed, the base body 1
After 1 is returned to the original horizontal state, it is moved to the microplate mounting table 14 wells W 1 of the front row of the microplate 15 is located on the sensor block 20, as shown in FIG. 6 first line X P 1 on 1 -
Between Q 1, between P 2 -Q 2 on line X 2, measuring the length of the pattern between P 3 -Q 3 on line X 3. Thus, the line X 2 basically means the center line of each well, the line X 2 and X 3 are a point on the circumference before and after sandwiching the center line. The measurement of the length of the sedimentation pattern at three locations in each of these wells is performed by moving the sensor block 20 at minute intervals (about 0.1 mm intervals) in the Y direction. , And is usually performed for all 96 wells. At this time, the movement of the microplate mounting table 14 in the X direction is performed by the microplate mounting table 1.
Each of the sensors 18a, 18b,.
・ Measurement position sensor 1 with 18h provided in front of the movement direction
The microplate mounting table 14 is advanced side by side in a row by contacting the microplates 9 respectively. When the measurement of the length of the sedimentation pattern at all the 96 wells provided on the microplate 15 is completed, the measured value is compared with the measured value obtained before the formation of the sedimentation pattern by a computer. Both wells determine the presence or absence of an immune reaction based on the length of the longest measured value.
【００２５】[0025]
【発明の効果】この発明の間接凝集免疫測定法は、使用
するマイクロプレートにウエル底部周辺にエッジ部の成
形時に歪みが生ずることによってウエル間のピッチに誤
差があったとしても成分を含む粒子の流れ出しによる沈
降パターンの長さを精度良く測定することができ、かつ
データの再現性も向上させることができる。According to the indirect agglutination immunoassay of the present invention, even if there is an error in the pitch between wells due to distortion of the microplate to be used at the time of forming the edge around the bottom of the well, the particle containing the component is not affected. The length of the sedimentation pattern caused by the run-off can be measured with high accuracy, and the reproducibility of data can be improved.
【００２０】この発明の間接凝集免疫測定法に使用する
沈降パターン測定装置は、マイクロプレートの成形に際
して生ずるウエルのピッチに誤差があっても、光センサ
ーをマイクロプレートの移動方向に直交する方向に微小
づつ移動させて各ウエルごとに沈降パターンの測長のサ
ーチすべき区間と、形成された沈降パターンの長さを複
数地点において正確に測定することができるものであ
る。The apparatus for measuring the sedimentation pattern used in the indirect agglutination immunoassay of the present invention is characterized in that even if there is an error in the pitch of the wells generated during the formation of the microplate, the optical sensor is moved in the direction perpendicular to the moving direction of the microplate. It is possible to accurately measure the section to be searched for the length measurement of the sedimentation pattern for each well and the length of the formed sedimentation pattern at a plurality of points.
【図１】この発明の沈降パターン測定装置の一例を示す
斜視図である。FIG. 1 is a perspective view showing an example of a sedimentation pattern measuring device according to the present invention.
【図２】図１に示す沈降パターン測定装置の要部を示す
一部切欠き側面図である。FIG. 2 is a partially cutaway side view showing a main part of the sedimentation pattern measuring device shown in FIG.
【図３】図１に示す沈降パターン測定装置の要部を示す
一部切欠き平面図である。FIG. 3 is a partially cutaway plan view showing a main part of the sedimentation pattern measuring device shown in FIG.
【図４】マイクロプレートにおけるウエルのピッチ間の
ズレによる沈降パターン測定長さが異なることを示す平
面図である。FIG. 4 is a plan view showing that a settling pattern measurement length is different due to a shift between well pitches in a microplate.
【図５】各ウエルの沈降パターン形成方向における沈降
パターンの測長のサーチすべき区間を示す平面図であ
る。FIG. 5 is a plan view showing a section to be searched for length measurement of a sedimentation pattern in a sedimentation pattern forming direction of each well.
【図６】沈降パターンの長さの測定状態を示す平面図で
ある。FIG. 6 is a plan view showing a measurement state of a length of a sedimentation pattern.
１０ 沈降パターン測定装置 １１ ベース本体 １３ ガイドロッド １４ マイクロプレート載置台 １５ マイクロプレート ２０ センサーブロック ２１ａ 光センサー ２３ カム部材 ２４ 回転子 ２５ 軸部材 ２６ スプリング DESCRIPTION OF SYMBOLS 10 Sedimentation pattern measuring apparatus 11 Base main body 13 Guide rod 14 Microplate mounting table 15 Microplate 20 Sensor block 21a Optical sensor 23 Cam member 24 Rotor 25 Shaft member 26 Spring
Claims (8)
を沈降させたのち、ウエルを所定角度に傾斜させてウエ
ル底部に粒子の流れ出しによる沈降パターンを形成させ
て免疫反応の有無を判定するに際し、ウエルを傾斜させ
てウエル底部に沈降パターンを形成させ、形成された沈
降パターンを流れ出し方向に直交する状態でウエルまた
は光センサーを移動させて沈降パターンの長さを複数地
点において測定し、得られた長さを沈降パターンの長さ
として免疫反応の有無を判定することを特徴とする間接
凝集免疫測定法。After the particles of the reagent for immunoassay are settled at the bottom of each well, the well is inclined at a predetermined angle to form a settling pattern due to the flow of the particles at the bottom of the well to determine the presence or absence of an immune reaction. At this time, the well is inclined to form a sedimentation pattern at the bottom of the well, and the length of the sedimentation pattern is measured at a plurality of points by moving the well or the optical sensor in a state in which the formed sedimentation pattern is perpendicular to the flow-out direction. An indirect agglutination immunoassay, wherein the presence or absence of an immune reaction is determined using the determined length as the length of a sedimentation pattern.
疫測定用試薬の粒子を沈降させたのち、マイクロプレー
トを所定角度に傾斜させてウエル底部に粒子の流れ出し
による沈降パターンを形成させて免疫反応の有無を判定
するに際し、各ウエルの粒子の流れ出し方向における沈
降パターンの長さのサーチすべき区間を光センサーによ
って測定したのち、マイクロプレートを傾斜させてウエ
ル底部に沈降パターンを形成させ、形成された沈降パタ
ーンを流れ出し方向に直交する状態でマイクロプレート
または光センサーを移動させて沈降パターンの長さを複
数地点において測定し、得た沈降パターン計測値と前記
沈降パターンの長さのサーチすべき区間の測定値と比較
して最も長い沈降パターンを沈降パターンとして免疫反
応の有無を判定することを特徴とする間接凝集免疫測定
法。2. After the particles of the reagent for immunoassay are sedimented at the bottom of each well of the microplate, the microplate is inclined at a predetermined angle to form a sedimentation pattern by flowing out the particles at the bottom of the well, thereby performing an immunoreaction. When determining the presence or absence, the length of the sedimentation pattern in the flow direction of the particles in each well is measured by an optical sensor, and then the microplate is inclined to settle the sedimentation pattern on the bottom of the well. Is formed, and the length of the sedimentation pattern is measured at a plurality of points by moving the microplate or the optical sensor in a state where the formed sedimentation pattern is perpendicular to the flowing direction, and the measured sedimentation pattern measurement value and the length of the sedimentation pattern are obtained. The longest sedimentation pattern is used as the sedimentation pattern to determine the presence or absence of an immune reaction by comparing with the measured value of the section to be searched for Indirect agglutination immunoassay according to claim Rukoto.
疫測定用試薬の磁性体粒子または磁性体を含む粒子を含
有した成分を磁力によって強制沈降させたのち、マイク
ロプレートを所定角度に傾斜させてウエル底部に粒子の
流れ出しによる沈降パターンを形成させて免疫反応の有
無を判定するに際し、沈降パターンの形成前に各ウエル
の粒子の流れ出し方向における沈降パターンの長さのサ
ーチすべき区間をあらかじめ光センサーによって測定
し、該沈降パターンの長さのサーチすべき区間の測定後
にマイクロプレートを傾斜させてウエル底部に沈降パタ
ーンを形成させ、形成された沈降パターンを流れ出し方
向に直交する状態でマイクロプレートまたは光センサー
を微小移動させて沈降パターンの長さを複数地点におい
て測定し、得た沈降パターン計測値とあらかじめ測定し
た沈降パターンの長さのサーチすべき区間の測定値を比
較して最も長い長さを沈降パターンとして免疫反応の有
無を判定することを特徴とする間接凝集免疫測定法。3. After the magnetic particles or the components containing the magnetic particles of the reagent for immunoassay are forcibly settled by magnetic force at the bottom of each well of the microplate, the microplate is inclined at a predetermined angle to form a well. When determining the presence or absence of an immune reaction by forming a sedimentation pattern due to the outflow of particles at the bottom, the section to be searched for the length of the sedimentation pattern in the outflow direction of the particles in each well before forming the sedimentation pattern is determined in advance by an optical sensor. After measuring the length of the settling pattern to be searched for the section to be searched, the microplate is tilted to form a settling pattern at the bottom of the well, and the formed settling pattern is perpendicular to the flowing direction of the microplate or optical sensor. The length of the sedimentation pattern was measured at multiple points by slightly moving An indirect agglutination immunoassay method comprising comparing a turn measurement value with a measurement value of a section to be searched for a length of a sedimentation pattern measured in advance to determine the presence or absence of an immune reaction using the longest length as a sedimentation pattern.
クロプレート載置台を傾斜方向に沿って移動可能に設
け、該マイクロプレート載置台の移動方向における前方
位置にマイクロプレートの縦列もしくは横列に形成され
たウエルと同数の光センサーを同一線上に設けたセンサ
ーブロックをマイクロプレート載置台の移動方向と直交
させて設けた沈降パターン測定装置を使用し、沈降パタ
ーンの形成前に各ウエルの粒子の流れ出し方向における
沈降パターンの長さのサーチすべき区間をマイクロプレ
ートまたは光センサーを微小づつ移動させながら各ウエ
ルについて測定し、該沈降パターンの長さのサーチすべ
き区間の測定後にベース本体を傾斜させてマイクロプレ
ートの各ウエル底部に沈降パターンを形成させ、形成さ
れた沈降パターンを流れ出し方向に直交する状態でマイ
クロプレートまたは光センサーを微小移動させて沈降パ
ターンの長さを複数地点において測定し、得た沈降パタ
ーン計測値とあらかじめ測定した沈降パターンの長さの
サーチすべき区間の測定値を比較して最も長い長さを沈
降パターンとして免疫反応の有無を判定することを特徴
とする間接凝集免疫測定法。4. A microplate mounting table is provided on a base body that is inclined at a predetermined angle so as to be movable in the direction of inclination, and is formed in a vertical or horizontal row of microplates at a front position in the moving direction of the microplate mounting table. Using a sedimentation pattern measuring device that has the same number of optical sensors as the number of wells on the same line as the sensor block and is orthogonal to the direction of movement of the microplate mounting table, the flow direction of particles in each well before the formation of a sedimentation pattern The section to be searched for the length of the sedimentation pattern is measured for each well while moving the microplate or the optical sensor minutely, and after measuring the section to be searched for the length of the sedimentation pattern, the base body is tilted to measure the length. A settling pattern is formed at the bottom of each well of the plate, and the formed settling pattern is flowed. The length of the sedimentation pattern is measured at multiple points by micro-moving the microplate or optical sensor in a state perpendicular to the ejection direction, and the sedimentation pattern measurement value obtained and the length of the sedimentation pattern length measured in advance should be searched. An indirect agglutination immunoassay, characterized in that the measured value is compared to determine the presence or absence of an immune reaction using the longest length as a sedimentation pattern.
れ出し方向における沈降パターンの長さのサーチすべき
区間は、粒子の流れ出し方向におけるウエルの前方の円
周上における一点と該一点に対応する後方の円周上の一
点間の距離を流れ出し方向に直交する状態でマイクロプ
レートまたは光センサーを微小移動させて複数地点にお
いて測定したものであることを特徴とする請求項２，請
求項３又は請求項４記載の間接凝集免疫測定法。5. The section to be searched for the length of the sedimentation pattern in the flow direction of the particles in each well of the microplate is a point on the circumference in front of the well in the flow direction of the particles and a rear portion corresponding to the one point. The microplate or the optical sensor is minutely moved in a state in which the distance between one point on the circumference is orthogonal to the flow-out direction and is measured at a plurality of points. Indirect agglutination immunoassay as described.
クロプレートを載置するマイクロプレート載置台を傾斜
方向に沿って移動可能に設け、該マイクロプレート載置
台の移動方向における前方位置にマイクロプレートの縦
列もしくは横列に形成されたウエルと同数の光センサー
を同一線上に設けたセンサーブロックをマイクロプレー
ト載置台の移動方向と直交する状態で設け、該センサー
ブロックまたはマイクロプレート載置台のいずれか一方
を移動できるよう構成したことを特徴とする沈降パター
ン測定装置。6. A microplate mounting table on which a microplate is mounted on a base body inclined at a predetermined angle so as to be movable along an inclined direction, and the microplate mounting table is located at a front position in the moving direction of the microplate mounting table. A sensor block in which the same number of optical sensors as the wells formed in columns or rows are provided on the same line is provided in a state orthogonal to the moving direction of the microplate mounting table, and either the sensor block or the microplate mounting table is moved. A sedimentation pattern measuring device, characterized in that it is configured to be able to do so.
くは下方をマイクロプレート載置台が通過でき、かつマ
イクロプレート載置台の移動方向に対して直交状態で微
小移動できるよう構成したことを特徴とする請求項６記
載の沈降パターン測定装置。7. The sensor block, wherein a microplate mounting table can pass above or below the sensor block, and can be minutely moved in a state orthogonal to a moving direction of the microplate mounting table. 6. The settling pattern measuring device according to 6.
下方に設けたセンサーブロック移動用モータの回転軸に
直結して外周縁に複数の円弧部と同数の直線部を交互に
形成したカム部材の外周縁とスプリングの付勢力によっ
て常時当接するよう設けられた回転子の軸部材と連動
し、カム部材の回動によってセンサーブロックをマイク
ロプレートの移動方向と直交する方向に微小移動させる
よう構成したことを特徴とする請求項６又は請求項７記
載の沈降パターン測定装置。8. The sensor block is provided outside a cam member directly connected to a rotation shaft of a sensor block moving motor provided below the base body and having a plurality of arc portions and the same number of linear portions alternately formed on an outer peripheral edge thereof. It is configured that the sensor block is minutely moved in a direction orthogonal to the moving direction of the microplate by rotating the cam member in conjunction with the shaft member of the rotor provided so as to always contact with the peripheral edge by the biasing force of the spring. The sedimentation pattern measuring device according to claim 6 or 7, wherein
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