JPH0489481A

JPH0489481A - 新規な抗ウイルス性物質シアスタチンｂ誘導体およびそれらの製造法

Info

Publication number: JPH0489481A
Application number: JP2201437A
Authority: JP
Inventors: Tomio Takeuchi; 富雄竹内; Shinichi Kondo; 信一近藤; Yoshio Nishimura; 吉男西村; Toshiaki Kudo; 利秋工藤; Hiroaki Hoshino; 洪郎星野
Original assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Current assignee: Microbial Chemistry Research Foundation
Priority date: 1990-07-31
Filing date: 1990-07-31
Publication date: 1992-03-23

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明は新しい抗ウイルス性物質、シアスタチンＢ誘導
体、詳しくは４−デオキシ−４−エンシアスタチンＢお
よびその誘導体、およびそれらの塩類、ならびにそれら
の製造法に関する。

〔従来の技術および発明が解決しようとする課題〕従来
、シアスタチンＢは微生物、ウィルス、動物細胞などの
つくるシアリダーゼを阻害する物質として発見され、放
線菌ストレプトミセス・バーチシラス・バリエタス・フ
ィンツム（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｖｅｒｔｉｃｉｌ
ｌｕｓ　ｖａｒ、　ｑｕｉｎｔｕｍ）（微工研菌寄第５
０７号）を培養して、その培養液から採取されることが
知られている（特公昭５５−４６７１４号）。本発明者
らは、シアスタチンＢの全合成の研究においてシアスタ
チンＢおよびシアスタチンＢエナンチオマーが、ヒト後
天性免疫不全症候群ウィルス（ＨＩＶ）のヒトＴ細胞へ
の感染阻止作用を有することを見出した（特開平１−２
９６４８７号、平成元年１１月２８日公開）。

ＨＩＶの感染によるヒト後天性免疫不全症候群（エイズ
）に対する治療薬は未だ満足するものがなく、毒性が低
く且つ水溶性を有してしかも抗旧■作用の強い化合物で
あってエイズの治療ならびに予防に有効な新しい化合物
を提供することが強く要望されている。そこで、本発明
者らはシアスタチンＢの新規誘導体の研究を行ない、シ
アスタチンＢより優れた抗ＨＩＶ作用を有する４−デオ
キシ−４−エンシアスタチンＢまたはその誘導体、およ
びそれらの塩類を合成することに成功し、本発明を完成
した。

本発明の目的は、低毒性で水溶性の高い新規な抗ウイル
ス性物質、４−デオキシ−４−エンシアスタチンＢおよ
びその誘導体、またはそれらの塩類、ならびにそれらの
製造法を提供することにある。

〔課題を解決するための手段〕

第一の本発明は、一般式（１）〔式中、Ｒは水酸基、アルキルオキシ基、アラルキルオ
キシ基、アミノ基、またはアルキル基の１個又は２個で
置換されたアミノ基を表わす〕で示される抗ウイルス性
物質、シアスタチンＢ誘導体およびそれらの塩類に関す
る。

一般式（１）の化合物において、Ｒがアルキルオキシ基
である場合に、それは（Ｃ□〜ＣＧ）アルキルオキシ基
１例えばメトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、ブト
キシ基１等であることができる。また、Ｒがアラルキル
オキシ基である場合には、これはフェニル−（Ｃ□〜Ｃ
４）アルキルオキシ基、例えばベンジルオキシ基又はフ
ェネチルオキシ基であることができる。アミノ基上の置
換しているアルキル基は（Ｃ工〜Ｃ４）アルキル基、例
えばメチル基、エチル基、等であり得る。

更に、一般式（１）のシアスタチンＢ誘導体の塩には、
一般式（１）におけるＲが水酸基である場合のカルボン
酸基におけるアルカリ金属塩、例えばナトリウム塩、あ
るいはアルカリ土類金属塩、例えばカルシウム塩があり
、またシアスタチンＢ誘導体（１）のイミノ基における
酸付加塩、特に製薬学的に許容できる鉱酸、例えば塩酸
、硫酸、あるいは有機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、
等との付加塩がある。

本発明における一般式（１）のシアスタチンＢ誘導体は
次の特性を有する。

１、理化学的特性（イ）一般式（１）においてＲが水酸基である４−デオ
キシ−４−エンシアスタチンＢ塩酸塩（化合物１）：色および形状：無色結晶分子式：Ｃ，Ｈ□２　Ｎ２　ｏ４・ＨＣＩマススペクト
ル（ＦＡＢ）　：　ｍ／ｚ　２０１（Ｍ”ｌ）融点：１
６５〜１６６℃（分解）比旋光度：〔α）２１＋１１６．１’（ｃ　Ｏ，１８，
Ｈ２Ｏ）１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ、０２
０．δｐｐｍ）　：２．１１（３）１．　ｓ、　ＮＨＣ
ＯＣＨ，）。

３．９８（ＬＨ，ｄｔ、　Ｊ＝−２，１７Ｈｚ、　Ｈ−
６）。

４．０９（１）１．　ｄｔ、　Ｊ＝２．１７Ｈｚ、　Ｈ
−６’）。

４．６６（ＬＨ，ｄｄｔ、　Ｊ＝〜２．４．６Ｈｚ、　
Ｈ−３）。

５．１７（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝６Ｈｚ、　Ｈ−２）。

７．０１（ＬＨ，ｄｔ、　Ｊ：〜２．４Ｈｚ、　Ｈ−４
）溶解性二本によく溶ける。

（ロ）一般式（Ｉ）においてＲがメトキシ基である４−
デオキシ−４−エンシアスタチンＢメチルエステル塩酸
塩（化合物２）ニー色および形状：無色結晶分子式：Ｃ，Ｈ工４Ｎ２０４・１（Ｃｌマススペクトル
（ＦＡＢ）　：　ｍ／ｚ　２１４（Ｍ”＋１）融点＝１
５５〜１５６℃（分解）比旋光度：〔α）”＋１３２．７°（ｃ　Ｏ，９４，Ｎ
２０）１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ、　Ｃ２
０，δｐｐｍ）　：２．１１（３Ｈ，ｓ、　ＮＨＣＯＣ
Ｈ，）。

３．８５（３Ｈ，Ｓ、　Ｃｏ２ＣＨ５）１３．９９（Ｉ
Ｈ，ｄｔ、　Ｊ＝〜２．１７）１ｚ、　Ｈ−６）。

４．１０（ＬＨ，ｄｔ、　Ｊ＝２．１７Ｈｚ、　Ｈ−６
’）。

４．６６（ＬＨ，ｄａｔ、　Ｊ＝〜２．４．６Ｈｚ、　
Ｈ−３）。

５．１４（ＬＨ，ｄ、　Ｊ＝６Ｈｚ、　Ｈ−２）。

７．０６（ＬＨ，ｄｔ、　Ｊ＝〜２．４Ｈｚ、　Ｈ−４
）溶解性：水によく溶ける。

（ハ）一般式（１）においてＲがベンジルオキシ基であ
る４−デオキシ−４−エンシアスタチンＢペンシルエス
テル塩酸塩（化合物３）ニー色および形状：無色結晶分子式：Ｃ１５Ｈ工、　Ｎ２０．・ＨＣＩＣｌマススペ
クトルＡＢ）　：　ｒａ／ｚ　２９１（阿１＋１）融点
：１６２〜１６３℃（分解）比旋光度：〔α〕２１＋１０１．７°（ｃ　Ｏ，５９，
Ｎ２０）１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ、　Ｃ
２０，δｐｐｍ）　：２．１０（３Ｈ９ｓ、Ｎ１（ＣＯ
ＣＨｉ）。

３．９７（ＩＨ，ｄｔ、　Ｊ＝　〜２．１７Ｈｚ、　Ｈ
−６）。

４．０７（ＩＨ，ｄｔ、　Ｊ＝〜２．１７）１ｚ、　）
ｌ−６’）。

４．６１（ＩＨ，ｄｄｔ、　Ｊ＝〜２．４．６Ｈｚ、　
Ｈ−３）。

５．０９（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝６．４Ｈｚ、　Ｈ−２）。

５．３２（２Ｈ，ｓ、　ＣＨ２Ｐｈ）。

７．０８（ＬＨ，ｄｔ、　Ｊ＝〜２．４Ｈｚ、　Ｈ−４
）。

７．４−７．５５（５Ｈ，ｍ、　Ｐｈ）溶解性：水によ
く溶ける。

（ニ）一般式（１）においてＲがアミノ基である４−デ
オキシ−４−エンシアスタチンＢアミド（化合物４）ニ
ー色および形状：無色粉末分子式：Ｃ，８□３Ｎ３０３マススペクトル（ＦＡＢ）　：　ｍ／ｚ　２００（Ｍ”
＋１）融点＝１５８〜１５９℃（分解）比旋光度：〔α〕２１÷１０９．１°（ｃ　Ｏ，４３，
Ｎ２０）’Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ、　Ｃ
２０，δｐｐｍ）　：２．０６（３）１．　　ｓ、　　
ＮＨＣＯＣＨ，）。

３．５３（ＬＨ，ｄｔ、Ｊ＝〜２．　１６．８）１ｚ、
　　Ｈ−６）。

３．６４（ＩＨ，ｄｔ、Ｊ＝２．１６．８Ｈｚ、Ｈ−６
’）。

４．２５（ＤＩ、ｄｑ、　　Ｊ：〜２，７．２Ｈｚ、Ｈ
−３）。

４．５２（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、Ｈ−２）。

６．５４（ＬＨ，ｄｔ、Ｊ：〜２．２Ｈｚ、）ｌ−４）
溶解性：水によく溶ける。

２、抗ウィルス活性本発明による一般式（Ｉ）の化合物の抗ＨＩＶ活性を、
上記の具体例の化合物１〜４について、ｒＰｒｏｃ、　
Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ａｓｃｉ、　ＩＪＳＡＪ　８
０巻、６０６１〜６０６５頁（１９８３）　；　ｒＪ、
　Ａｎｔｉｂｉｏｔ、Ｊ４０巻、１０７７−１０７８頁
（１９８７）、及び同誌４２巻、３４４〜３４６頁（１
９８９）に記載される試験法に準する下記の試験法によ
り評価した。

試験法：２４穴トレーのそれぞれにヒトのＴ細胞の一種
であるＭＴ−４細胞の約５万個／ｒｎＱを入れ、さらに
各々の穴の中に種々の濃度で被験化合物を含む溶液１０
０μＱを加え、３７℃で５％（ｖ／ｖ）炭酸ガス卿卵器
中でＭＴ−４細胞を２時間培養した後、旧■の１０’〜
１０４感染単位を加え４日間培養した。その細胞培養液
の一部をスライドグラスに塗抹し細胞をアセトンで固定
した後１間接蛍光抗体法（８沼ら；ｒＰｒｏｃ、　Ｎａ
ｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＬＩＳＡＪ７８巻、６
４７６−６４８０頁（１９８１）参照）でＨＩＶウィル
ス抗原陽性の細胞を調べてそれの発現率を算出した。こ
の間接蛍光抗体法に用いる一次抗体には、エイズ患者の
血清を使用し、二次抗体にはフルオレソセインインチオ
シアネート（ＦＩＴＣ）をラベルした抗ヒトＩｇＧを使
用した。

得られた試験結果を次の第１表に示す。

４↓漬第１表に示すとおり、本発明化合物はいずれもシアスタ
チンＢより優れた抗ＨＩＶ活性を示した。

第二の本発明の要旨は、シアスタチンＢを化学的に変換
することにより、新規な抗ウイルス性物質として上記の
一般式（１）のシアスタチンＢ誘導体およびそれらの塩
類を生成する製造法にある。

原料のシアスタチンＢの製造は、放線菌ストレプトミセ
ス・バーチシラス・パリエタス・フィンツム（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｓ　ｖａｒ、
　ｑｕｉｎｔｕｍ）（微工研菌寄第５０７号）を培養し
て、その培養液から採取する方法（特公昭５５−４６７
１４号）および全合成によるシアスタチンＢの製造方法
（特開平１−２９６４８７号）によって行なわれる。

シアスタチンＢを化学的に変換して本発明における一般
式（１）の新規なシアスタチンＢ誘導体としての化合物
１〜４を生成する反応は、例えば、次の反応チャートに
示すごとき種々の反応経路によって実施できる。

但しＢｏｃは第３級ブトキシカルボニル基（ＣＨ３Ｌ　
−ｃｏ−ｃｏ−を示し、ｐｈはフェニル基を示す。

すなわち、上記の反応チャートについて説明するに、先
づ、式（Ｉｌ）で示されるシアスタチンＢをＮ、Ｎ−ジ
メチルホルムアミドなどの有機溶媒に溶解し、その溶液
にトリエチルアミンや、ジイソプロピルエチルアミンな
どの有機アミンの存在下にアシル化剤であるＢｏｃ化試
薬としてジー第３級プチルジカルボネート、２−第３級
ブチルオキシカルボニルオキシイミノ−２−フェニル−
アセトニトリル、またはＳ−第３級ブチルオキシカルボ
ニル−４，６−シメチルー２−メルカプトピリジンを加
え、５０〜１００℃に加温してシアスタチンＢに２〜５
時間反応させることにより、本発明における鍵の中間体
化合物である新規な式（Ｉ［［）の二ノ化化合物を得る
。式（ＩＩＩ）の化合物を、メタノール又はエタノール
中炭酸カリウムを加えて室温で１時間撹拌することによ
りアルコリシスすると、式（ＩＶ）の化合物が得られる
。

式（ＩＶ）の化合物を用い、そのカルボキシル基をＮ。

Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの有機溶媒中で、常法に
よりメタノール又はその均等な反応性誘導体でエステル
化することにより式（Ｖ）の化合物を得る。

式（ＩＶ）の化合物のカルボキシル基をベンジルアルコ
ール又はその均等的な反応性誘導体でエステル化すると
、式（ＶＩ）で示される化合物を得る。また、式（■）
の化合物をメタノール中アンモニアと反応せしめアミド
化すると式（■）で示される化合物を得る。なお、上記
の反応に用いられたメタノール又はベンジルアルコール
に代えて、一般に（Ｃ工〜Ｃ６）アルカノール又はアラ
ルキルアルコールを用いると、夫々に対応のエステル体
が得られる。

また、上記のアンモニアに代えてアルキルアミンを用い
ると、アルキル置換アミド体が得られる。

上記の式（ｍ）、（Ｖ）、（ＩＶ）および（■）の化合
物を、それぞれ、１−４Ｎ塩酸−ジオキサンなどの塩酸
を含む有機溶媒に溶解し、室温に１〜４時間放置してア
ミノ保護基Ｂｏｃを除去すると、本発明の化合物１．２
．３および４を、それぞれ塩酸塩として生成する。

本発明の方法で得られた化合物が上記のごとき塩酸塩な
どの酸付加塩の形である場合には、その酸付加塩の水溶
液を常法により陽イオン交換樹脂。

例えばダウエックスＳＯＷ　（米国ダウケミカル社製）
Ｈ型で処理することにより、またはアンモニアを含有す
る溶媒系によるクロマトグラフィーで精製することによ
り遊離塩基の形の化合物１．２．３および４が夫々に得
られる。

以下に本発明の実施例を示すが、これらは単に例示であ
って本発明を限定するものではない。本発明を逸脱しな
い範囲で種々の変形および修正が可能であることは言う
までもない。

失亀椴よ４−デオキシ−４−エン−１−ターシャリ−ブチルオキ
シカルボニルアミノ−３−０−ターシャリ−ブチルオキ
シカルボニルシアスタチンＢ（ｎｕ）の製造シアスタチ
ンＢ１ｇをＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド３８ｍｆｌに
溶解し、その溶液にジイソプロピルエチルアミン１．２
ｍＱを加えた後、ジ−ターシャリ−ブチル−ジ−カルボ
ネート１４　、５ｍＱを加え、７０℃で５時間攪拌して
反応を行った。反応液を減圧濃縮してシロップを得た。

これを展開溶媒系クロロホルム−メタノール−濃アンモ
ニア水（２：　１　：　０．３）を用いるシリカゲルカ
ラムクロマトグラフィーで分離精製して、無色粉体とし
て標題化合物７８０ｍｇを得た。

融点　１９２〜１９３℃（分解）比旋光度　（α）２１＋１４５．ｌ’　（ｃ　Ｏ，１９
，メタノ−ル）実施例２４−デオキシ−４−エンシアスタチンＢ（化合物１）の
製造実施例１で得られた化合物（ｍ）３００ｇを４規定の塩
酸ガスを含むジオキサン９ｍｌ１に溶解し、室温で１時
間放置して反応を行うと、反応液から結晶が析出する。

この結晶をジオキサンで洗浄し、乾燥して無色結晶とし
て標題化合物の塩酸塩１７０ｍｇを得た。

融点　１６５〜１６６℃（分解）比旋光度　〔α）２１＋１１６．１°（ｃ　Ｏ，１８，
水）ヌＵ４−デオキシ−４−エン−１−ターシャリ−ブチルオキ
シカルボニルアミノシアスタチンＢ　（ｒＶ）の製造実
施例１で得られた化合物（ｍ　）　３００ｍｇを１％炭
酸カリウム含有メタノール溶液３ｍＱに溶解し、室温で
１時間攪拌して反応を行った。反応液を減圧濃縮して固
体を得た。これを展開溶媒系クロロホルム−メタノール
（１０：１）を用いるシリカゲル分取薄層クロマトグラ
フィーで分離精製して、無色固体を得た。これをメタノ
ール−酢酸エチル（１：５）の混液より再結晶して、無
色結晶として標題の化合物２２０ｍｇを得た。

融点　〉１７５℃（分解）比旋光度　〔α）２１＋１２３．６’　　（ｃ　Ｏ，２
，メタノ−ル）実施例４４−デオキシ−４−エン−１−ターシャリ−ブチルオキ
シカルボニルアミノシアスタチンＢメチルエステル（Ｖ
）の製造実施例３で得られた化合物（ＴＶ）１３０ｍｇをＮ、Ｎ
−ジメチルホルムアミド１　、３ｙａＱに溶解し、その
溶液にジイソプロピルエチルアミン０．７５ｍＱを加え
た後、ヨウ化メチル０．１３５ｍＱを加え、室温で一晩
攪拌して反応を行った。反応液を減圧濃縮して固体のま
じったシロップを得た。これをクロロホルムに溶解し、
水洗し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮してシロップを
得た。これを展開溶媒系クロロホルムメタノール（３０
：１）を用いるシリカゲル分取薄層クロマトグラフィー
で分離精製して、無色泡末状固体として標題の化合物１
３０ｍｇを得た。

比旋光度　（ａ　）”　＋　１０３．４°（ｃ　Ｏ，７
１，クロロホルム）ス」１１ジ４−デオキシ−４−エンシアスタチンＢメチルエステル
（化合物２）の製造実施例４で得られた化合物（Ｖ　）６０＋ｎｇを４規定
の塩化水素を含むジオキサン２＋＋＋ｆｌに溶解し、実
施例２と同様に反応を行い、さらに実施例２と同様に後
処理をして、無色結晶として標題化合物の塩酸塩４２ｍ
ｇを得た。

融点　１５５〜１５６℃（分解）比旋光度　〔α）２１＋　１３２．７°（ｃ　Ｏ，９４
，水）実施例６４−デオキシ−４−エン−１−ターシャリ−ブチルオキ
シカルボニルアミノシアスタチンＢベンジルエステル（
ＶＩ）の製造実施例３で得られた化合物（ｒＶ）　１００ｍｇをＮ、
Ｎ−ジメチルホルムアミド７−に溶解し、その溶液にジ
イソプロピルエチルアミン０．５８＋ａｆｌを加えた後
、塩化ベンジル０．１９ｔＱを加え、室温で一晩攪拌し
て反応を行った。反応液を減圧濃縮してシロップを得た
。これをクロロホルムに溶解し、水洗し、Ｍｇ５Ｏ，で
乾燥し、減圧濃縮してシロップを得た。

これを展開溶媒系クロロホルム−メタノール（３０：１
）を用いるシリカゲル分取薄層クロマトグラフィーで分
離精製して、無色泡末状固体として標題の化合物１１０
ｍｇを得た。

比旋光度　［ＣＥ）”＋７６．４’　　（ＣＯ，７８，
クロロホルム）ス１１例３〜４−デオキシ−４−エンシアスタチンＢベンジルエステ
ル（化合物３）の製造実施例６で得られた化合物（ＶＩ）３０ｍｇを４規定の
塩酸ガスを含むジオキサン１ｍ１２に溶解し、実施例２
と同様に反応を行い、さらに実施例２と同様に後処理を
して、無色結晶として標題の化合物の塩酸塩２０ｍｇを
得た。

融点　１６２〜１６３℃（分解）比旋光度　［α］２１＋　１０１．７°（ｃ　Ｏ，５９
，１（２０）実施例８４−デオキシ−４−エン−１−ターシャリ−ブチルオキ
シカルボニルアミノシアスタチンＢアミド（■）の製造実施例４で得られた化合物（Ｖ）　１５２ｍｇを乾燥メ
タノール３０ｍＱに溶解し、その溶液に室温でアンモニ
アガスを１時間吹き込む。反応液を室温で１８時間攪拌
した後、溶媒を減圧濃縮して無色固体を得た。これを展
開溶媒系クロロホルム−メタノール−濃アンモニア水（
２：　１　：０．３）を用いるシリカゲル分取薄層クロ
マトグラフィーで分離精製して、無色泡末状固体として
標題化合物１２０ｍｇを得た。

融点　１３７〜１３８℃（分解）比旋光度　（α）”＋１２３°（ｃ　Ｏ，５，メタノー
ル）実施例９４−デオキシ−４−エンシアスタチンＢアミド（化合物
４）の製造実施例８で得られた化合物（■）　１００ｍｇを４規定
の塩化水素を含むジオキサン３ｍＭに溶解し、実施例２
と同様に反応を行った。反応液を減圧濃縮して無色固体
を得た。これを展開溶媒系クロロボルム−メタノール−
濃アンモニア水（２：　１　：　０．３）を用いるシリ
カゲル分取薄層クロマトグラフィーで分離精製して、無
色粉末として標題の化合物（遊離塩基）　４３ｍｇを得
た。

融点　１５８〜１５９℃（分解）比旋光度　［α］”　＋　１０９．１°（ｃ　Ｏ，４３
，水）１゜３゜手続補正書（自発）平成３年１月２３日

Claims

【特許請求の範囲】１、一般式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）〔式中、Ｒは水酸基、アルキルオキシ基、アラルキルオ
キシ基、アミノ基、またはアルキル基の１個又は２個で
置換されたアミノ基を表わす〕で示される抗ウィルス性
物質、シアスタチンＢ誘導体およびそれらの塩類。２、一般式（ I ）においてＲが水酸基である請求項１
記載の４−デオキシ−４−エンシアスタチンＢおよびそ
の塩類。３、一般式（ I ）においてＲがメトキシ基である請求
項１記載の４−デオキシ−４−エンシアスタチンＢメチ
ルエテチルおよびその塩類。４、一般式（ I ）においてＲがベンジルオキシ基であ
る請求項１記載の４−デオキシ−４−エンシアスタチン
Ｂベンジルエステルおよびその塩類。５、一般式（ I ）においてＲがアミノ基である請求項
１記載の４−デオキシ−４−エンシアスタチンＢアミド
およびその塩類。６、次式（II） ▲数式、化学式、表等があります▼（II）で示されるシアスタチンＢを化学的に変換することによ
り、請求項１記載の一般式（ I ）のシアスタチンＢ誘
導体およびそれらの塩類を生成することを特徴とする請
求項１記載の一般式（ I ）で示される抗ウィルス性物
質、シアスタチンＢ誘導体およびそれらの塩類の製造法
。