JPH045418B2

JPH045418B2 -

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Publication number: JPH045418B2
Application number: JP21827483A
Authority: JP
Priority date: 1983-11-19
Filing date: 1983-11-19
Publication date: 1992-01-31
Also published as: JPS60110251A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、α−グリコシルペオニフロリンを含
有する飲食物とその製造方法に関する。芍薬（Paeonia albiflora Pallas又はPaeonia
lactiflora Pallas）は、赤芍、白芍などに加工さ
れ、その抽出物は、鎮静、鎮痛、鎮痙、抗菌、冠
状動脈拡張作用などの効を有する健康食品、内服
薬などとして古くから利用されてきた。ペオニフロリン（Paeoniflorin）は、芍薬、牡
丹皮などの主な有効成分として知られ、その作用
は、薬学雑誌第89巻、879〜886頁、887〜892頁、
893〜898頁（1969年）などの記載から明らかなよ
うに、鎮静、鎮痛、鎮痙、抗炎症、ストレス潰瘍
の予防などである。ペオニフロリンは、Tetrahedron Vol.28、
4309〜4317（1972年）にも記載されているように、
かご状ピナン骨核を持つ非常にユニークな天然化
合物で、次のような化学構造を有している。ペオニフロリンは、芍薬の組織、器官などを溶
媒、例えば水、アルコールなどで抽出した抽出物
中に含まれている。通常、この抽出物、又はその
濃縮物が、飲食、服用など経口摂取の方法で利用
されている。しかしながら、芍薬抽出物は、強い苦味を有し
ているだけでなく、強い渋味、収斂味などの嫌味
を有している。本発明者らは、これら苦味、渋味、収斂味など
の嫌味を解消することを目的に鋭意研究した。その結果、ペオニフロリンからα−グリコシル
ペオニフロリンを生成せしめることにより、その
苦味、渋味、収斂味を解消し得ること、さらに
は、α−グリコシルペオニフロリンが生体内のα
−グルコシダーゼなどの作用を受けて容易にペオ
ニフロリンに戻ることなどを見いだしたことによ
り、新たな毒性、薬効を懸念することなく、α−
グリコシルペオニフロリンを製造し、利用し得る
ことに着目し、本発明のα−グリコシルペオニフ
ロリンを含有する飲食物とその製造方法を確立し
た。本発明でいう飲食物とは、単に飲料および食品
だけでなく、酒類、タバコなどの嗜好品類、飼
料、餌料類、うがい薬、歯磨などの化粧品類、口
中香錠、トローチ、内服薬などの医薬品など、そ
の呈味を味わうことのできるすべての物品を意味
する。本発明でいうα−グリコシルペオニフロリンと
は、ペオニフロリン分子にα−グルコシル残基が
等モル以上結合したα−グルコシルペオニフロリ
ンを含有しておればよく、その製法は問わない。 α−グリコシルペオニフロリンの工業的製法と
しては、ペオニフロリンとα−グルコシル糖化合
物とを含有する水溶液にα−グルコシル転移酵素
を反応させることにより生成するα−グリコシル
ペオニフロリンを採取すればよい。本発明に用いるペオニフロリンは、高度に精製
されたペオニフロリンに限る必要はなく、例えば
ペオニフロリンおよびアルビフロリン
（Albiflorin）を含有している芍薬抽出物であつ
ても、また、その部分精製品であつてもよく、α
−グリコシルペオニフロリンを生成し得るもので
あれば、自由に用いることができる。本発明に用いるα−グルコシル糖化合物は、同
時に用いるα−グルコシル転移酵素によつてペオ
ニフロリンからα−グリコシルペオニフロリンを
生成するものであればよい。従つて、α−グリコシルペオニフロリンの生成
を容易にするためには、α−グルコシル転移酵素
に好適な基質、すなわち、澱粉部分分解物や砂糖
などのα−グルコシル糖化合物が用いられる。例
えば、α−アミラーゼ（EC3.2.1.1）を用いる際
には、D.E.1以下の澱粉糊化物からD.E.約30の澱
粉部分加水分解物（デキストリン）までのα−グ
ルコシル糖化合物が、シクロデキストリングルカ
ノトランスフエラーゼ（EC2.4.1.19）を用いる際
には、シクロデキストリン、またはD.E.1以下の
澱粉糊化物からD.E.約60の澱粉部分加水分解物ま
でのα−グルコシル糖化合物が、デキストランシ
ユクラーゼ（EC2.4.1.5）を用いる際には、砂糖
が好適である。本発明に用いられるα−グルコシル糖化合物の
うち、澱粉糊化物または澱粉部分加水分解物を調
製するための澱粉としては、小麦、とうもろこし
などからの地上澱粉や、甘薯、バレイシヨなどか
らの地下澱粉、更には、芍薬、牡丹皮などに含ま
れる澱粉などの何れも自由に利用できる。澱粉糊化物の調製は、澱粉乳液を澱粉の糊化温
度、一般には70〜140℃に加熱して糊化すればよ
い。澱粉部分加水分解物は酸または各種アミラー
ゼで所定のD.E.まで分解させればよい。また、これらのα−グルコシル糖化合物は、１
種類だけでなく、２種類以上を併用することもで
きる。また、芍薬、牡丹皮などの煎じ液の場合には、
ペオニフロリンとともに澱粉糊化物を含有してい
るので、これを冷蔵庫などで貯蔵すると白濁が生
じてくるが、その煎じ液に、または煎じ液に適宜
のα−グルコシル糖化合物を加えた後に、α−グ
ルコシル転移酵素を作用させると、α−グリコシ
ルペオニフロリンが生成するとともに糊化澱粉が
部分加水分解を受け、抽出液の嫌味が解消するだ
けでなく、白濁の発生をも防止できる。本発明に用いるα−グルコシル転移酵素は、そ
の酵素に好適のα−グルコシル糖化合物とペオニ
フロリンとを含有する水溶液に反応させればよ
く、ペオニフロリンを分解せずにα−グリコシル
ペオニフロリンを生成するものであれば、自由に
用いることができる。例えば、豚の肝臓のような動物起源、ソバの種
子のような植物起源、ムコール（Mucor）属、
ペニシリウム（Penicillium）属に属するカビ、
サツカロミセス（Saccharomyces）属に属する
酵母など各種起源から調製されるα−グルコシダ
ーゼ（EC3.2.1.20）、各種微生物、特にバチルス
（Bacillus）属に属する細菌、アスペルギルス
（Aspergillus）属に属するカビなどから調製され
るα−アミラーゼ（EC3.2.1.1）、バチルス属、ク
レブシーラ（Klebsiella）属に属する細菌などか
ら調製されるシクロデキストリングルカノトラン
スフエラーゼ（EC2.4.1.19）、ロイコノストツク
（Leuconostoc）属に属する細菌などから調製さ
れるデキストランシユクラーゼ（EC2.4.1.5）、ア
セトバクター（Acetobacter）属に属する細菌な
どから調製されるデキストリンデキストラナーゼ
（EC2.4.1.2）、ネイセリア（Neisseria）属に属す
る細菌などから調製されるアミロシユクラーゼ
（EC2.4.1.4）などもα−グルコシル転移酵素とし
て有利に用いることができる。これらα−グルコシル転移酵素は、前記の条件
を満足しさえすれば、必ずしも精製して使用する
必要はなく、通常は粗製品を使用することができ
る。例えば、動植物起源の場合は、動植物の組織を
磨砕抽出した溶液を硫安などで塩析するか、また
はアルコール、アセトンなどの有機沈澱剤で沈澱
分離した粗製のα−グルコシル転移酵素を使用す
ることができる。必要ならば、公知の各種方法で
さらに精製して用いればよい。また、微生物から酵素を生産する方法には麹培
養のような固体培養、またはタンク培養のような
液体培養が通常行なわれる。固体培養したものか
らα−グルコシル転移酵素を調製するには動植物
の場合と同様に抽出し、必要に応じて公知の方法
によつて精製して使用すればよい。液体培養した
ものからのα−グルコシル転移酵素を利用するに
は、培養物をそのまま使用することもできるが、
通常は不溶物を除去した上清の酵素を利用する
か、場合によつては菌体の酵素をそのままか、ま
たは抽出して利用すればよい。また、必要に応じ
てさらに精製したα−グルコシル転移酵素を用い
てもよい。さらに、市販されているα−グルコシ
ル転移酵素を利用することもできる。また、固定化されたα−グルコシル転移酵素を
バツチ式で反応に繰り返し利用することも、連続
式で反応に利用することも自由である。さらに、
α−グルコシル糖化合物とペオニフロリンとを含
有する培地で微生物や動物、植物の組織などを培
養してα−グリコシルペオニフロリンを生成させ
ることもできる。本発明の酵素反応条件は、ペオニフロリンとα
−グルコシル糖化合物とを含有する水溶液でα−
グルコシル転移酵素が反応する条件であればよ
い。反応に用いるペオニフロリンは、その濃度を約
0.01〜30w／ｗ％とし、α−グルコシル糖化合物
は約１〜50w／ｗ％とすればよい。この際、ペオニフロリンに対するα−グルコシ
ル糖化合物の比率は、固形物重量当り約0.5〜500
倍の範囲が好ましい。反応時のPHと温度は、α−グルコシル転移酵素
が反応してα−グリコシルペオニフロリンが生成
すればよく、一般にはPH３〜10、温度20〜80℃の
範囲から選ばれる。このようにして、α−グリコシルペオニフロリ
ンを生成せしめた反応溶液は、そのままでも飲食
物として使用できる。必要に応じて、酵素を加熱
失活させ、過し得られる液にマグネシア系吸
着剤、例えば、富士化学工業株式会社製の商品
名、ノイシリン、ノイシリンＡ、カラムライト、
富田製薬株式会社製の商品名、トミツクス顆粒、
トミツクスＳ顆粒、ネオアルミン、ネオアルミン
Ｓ、北海道曹達株式会社製の商品名、Ｍ−511な
どを接触せしめ有色夾雑物を除去し、その非吸着
部分の液体を採取して飲食物として利用するか、
さらに濃縮してシラツプを、或は乾燥、粉砕し粉
末を採取して飲食物として利用する。また、さらに高純度のα−グリコシルペオニフ
ロリンを採取する場合には、多孔性合成吸着剤、
例えば、三菱化成工業株式会社製の商品名、ダイ
ヤイオンHP−10、ダイヤイオンHP−20、ダイ
ヤイオンHP−40、Rohm＆Haas社製の商品名、
アンバーライトXAD−１、アンバーライトXAD
−４、アンバーライトXAD−７、アンバーライ
トXAD−８、IMACTI社製の商品名、Imac
Svn−42、Imac Syn−44、Imac Syn−46などを
用いてα−グリコシルペオニフロリンと夾雑物と
の吸着性の違いを利用して精製すればよい。例えば、反応液中のα−グリコシルペオニフロ
リン、未反応のペオニフロリンなどのペオニフロ
リン化合物と反応に用いた遊離の糖類とを分離す
る必要がある場合には、前記マグネシア系吸着剤
で有色夾雑物を除去した後、多孔性合成吸着剤を
充填したカラムに通液すればペオニフロリン化合
物は吸着させ、遊離の糖類は吸着されずに溶出す
る。次いで、吸着されたα−グリコシルペオニフ
ロリンなどのペオニフロリン化合物は、低級アル
コール液、例えば、40v／ｖ％エタノール水溶液
などを通液することにより容易に溶出させ、この
溶出液を濃縮してシラツプを、さらに乾燥、粉末
化して粉末を採取すればよい。さらに、α−グリコシルペオニフロリンと未反
応のペオニフロリンとを含有する溶液を多孔性合
成吸着剤のカラムに通液し、主としてペオニフロ
リンを吸着させ、その非吸着部分からさらに高純
度のα−グリコシルペオニフロリンを採取するこ
ともできる。さらに、必要ならばこれをイオン交
換樹脂、例えば、Ｈ型強酸性イオン交換樹脂およ
びOH型弱塩基性イオン交換樹脂を用いて脱塩精
製し、採取して利用することも、また、α−グリ
コシルペオニフロリンをクロマトグラフイーなど
の方法によつて特定の画分を採取して利用するこ
とも自由である。以上述べたようにして採取されるα−グリコシ
ルペオニフロリンは、ペオニフロリンとは違つ
て、苦味、渋味、収斂味などの嫌味がほとんどな
く、その精製の程度、純度を問わず、そのまま
で、または他の素材と共に含有せしめて飲食物と
して自由に用いることができる。また、α−グリ
コシルペオニフロリンは、体内のα−グルコシダ
ーゼなどのα−グリコシダーゼ作用により容易に
ペオニフロリンに戻ることから、新たな毒性、薬
効を懸念することなく、ペオニフロリン本来の例
えば、鎮静、鎮痛、鎮痙、抗炎症、ストレス潰瘍
の予防などの効能を利用する各種用途に自由に用
いることができる。従つて、本発明のα−グリコシルペオニフロリ
ンを含有せしめた飲食物は、健康増進飲食物、健
康維持飲食物、健康回復飲食物などとして有利に
利用できる。これらの飲食物としては、例えば、調味料、和
菓子、洋菓子、氷菓、シロツプ類、果実加工品、
野菜加工品、漬物類、畜肉製品、魚肉製品、珍味
類、缶、ビン詰類、酒類、清涼飲料、即席飲食物
などの通常の飲食物だけでなく、家畜、家禽、魚
などの飼育動物のための飼料、餌料をも含み、さ
らには、タバコ、練歯みがき、口紅、リツプクリ
ーム、内服薬、トローチ、肝油ドロツプ、口中清
涼剤、口中香錠、うがい薬など各種固形状、ペー
スト状、液状の嗜好物、化粧品、医薬品などその
呈味を味わうことのできるすべての物品を含むの
である。また、これら飲食物は、α−グリコシル
ペオニフロリンと共に他の物質、例えば、栄養
剤、医薬、生薬などを含有せしめて、α−グリコ
シルペオニフロリンの効果をさらに高めることも
自由である。以上述べたような飲食物に対して、α−グリコ
シルペオニフロリンを含有せしめるには、その製
品が完成するまでの工程で、例えば、混和、混
〓、溶解、浸漬、滲透、散布、塗布、噴霧、注入
等の公知の方法で含有せしめればよい。次に、本発明のα−グリコシルペオニフロリン
を実験に基づいて説明する。実験１ α−グリコシルペオニフロリンの調製１−１グルコシル転移酵素の調製バチルスステアロサーモフイラス
（Bacillus stearothermophilus）FERM−ＰNo.
2222をソリユブルスターチ2w／ｖ％、硝酸ア
ンモニウム1w／ｖ％、リン酸２カリウム
0.1w／ｖ％、硫酸マグネシウム・７水塩
0.25w／ｖ％、コーンステイープリカー0.5w／
ｖ％、炭酸カルシウム1w／ｖ％および水から
なる殺菌した液体培地10に植菌し、50℃で３
日間通気撹拌培養した。得られた培養液を遠心
分離して、その上清を硫安0.7飽和で塩析し、
シクロデキストリングルカノトランスフエラー
ゼ（EC2.4.1.19）の活性約80000単位を有する
粗酵素標品を得た。ここでいう活性１単位と
は、PH5.5、0.02Mの酢酸緩衝液および２×
10^-3Mの塩化カルシウムを含む0.3w／ｗ％のソ
リユブルスターチ溶液５mlに、適当に希釈した
酵素液0.2mlを加え40℃で10分間反応させた後、
その反応液0.5mlをとり、0.02N−硫酸水溶液15
mlに混合して反応を停止させ、さらにこの反応
停止液に0.1Nヨウ素ヨウ化カリウム溶液0.2ml
を加えて発色させ、次いで660nｍにおける吸
光度を測定して、40℃で10分間反応させること
によりソリユブルスターチ15mgのヨウ素の呈色
を完全に消失させる酵素量をいう。１−２ペオニフロリンの調製市販の赤芍を粗砕し、この2.2Kgに水８を
加え、60℃で３時間抽出して過し、得られる
残渣をさらに２回同様に温水で抽出し、その３
回の液を合せ、次いで、減圧濃縮した。得ら
れた濃縮液を過し、液を合成吸着剤（三菱
化成工業株式会社製造、商品名ダイヤイオン
HP−20）５を充填したカラムに通液し、充
分に水洗して不純物を除去した。次いで、この
カラムにメタノール15を通液し、溶出液を減
圧濃縮してメタノールを溜去し、乾燥粉末化
し、ペオニフロリン粉末約18ｇを得た。１−３酵素反応１−２の方法で調製したペオニフロリン10ｇ
とマルトデキストリン（D.E.20）50ｇとを温水
100mlに溶解し、PH6.0に調整し、これに１−１
の方法で調製したシクロデキストリングルカノ
トランスフエラーゼ標品の500単位を加え、PH
6.0、温度60℃に維持しつつ24時間反応させた。
この反応液を95℃に15分間保つて酵素を加熱失
活させた（この標品は第１表の試料No.３に相当
する。）後、過して得た液を60℃以下で減
圧濃縮すると共に、乾燥して粉末品（この標品
は、第１表の試料No.４に相当する。）を得た。
対照品の試料No.１および試料No.２は、同様に溶
解後、反応工程、加熱失活工程までを経たもの
で、その配合組成は第１表に示す。

【表】実験２呈味の比較テスト試料No.４の粉末品を試料No.３と同濃度になるよ
うに水で溶解して試料No.４の水溶液を調製した。次いで、試料No.１〜No.４の水溶液を用いて、そ
の呈味が最も優れているものと最も劣つているも
のを各１つずつ選出させ、かつその味質について
意見を求めた。20名のパネル員で25℃の室温で行
なつた。その結果は、第２表に示す通りであつ
た。

【表】第２表の結果から、試料No.３、No.４の本発明品
の呈味は、試料No.１、No.２の対照品と比較して明
らかに優れている。従つて、本発明のα−グリコ
シル化させたペオニフロリンは、従来のペオニフ
ロリン、またはペオニフロリンと糖類との単なる
混合物などとは違つて、嫌味、残り味が解消され
ることから、そのままでも自由に経口摂取できる
ことになつた。実験３ α−グリコシルペオニフロリンの確認実験１−３の試料No.４と同様に調製した試料50
ｇを採り、これを水100mlに溶解した溶液に、マ
グネシア系吸着剤（北海道曹達株式会社製造、商
品名Ｍ−511）２ｇを加え、徐々に撹拌しつつ
30分間保つた後、過し得られた液を合成吸着
剤（三菱化成工業株式会社製造、商品名ダイヤ
イオンHP−20）200mlのカラムに通液し、さら
に、充分水洗して遊離の糖類を除去した。次い
で、このカラムに50v／ｖ％メタノール２を通
してα−グリコシルペオニフロリンなどのペオニ
フロリン化合物を溶出し、濃縮、乾燥、粉砕して
約10ｇの粉末（試料No.５）を得た。この試料No.５は、淡黄色、無臭の粉末で、水に
極めてよく溶け、苦味、渋味、収斂味がほとんど
ない、ほぼ中性の物質である。また、メタノール、エタノール、ｎ−ブタノー
ルなどの低級アルコールには一部溶け、クロロホ
ルムやエチルエーテルには難溶性の物質である。試料No.５の一部を少量の水に溶解した溶液に市
販の結晶グルコアミラーゼ（EC3.2.1.3）を0.02M
酢酸塩緩衝液（PH5.0）の存在下のもとに50℃で
作用させて経時的にサンプリングし、薄層板（メ
ルク社製造、商品名 Kieselgel60）にスポツト
し、展開溶媒にｎ−ブタノール、酢酸、水（４：
２：１）を用いて上昇法で展開させた。これを乾
燥した後、紫外部吸収のスポツトを観察した。次
いで、発色剤として５％バニリン50％硫酸メタノ
ール溶液を噴霧し、乾熱条件下100℃に10分間保
つて発色させた。また、対照として、実験１−２
の方法で調製したペオニフロリン、試料No.５、試
薬ペオニフロリン（和光純薬工業株式会社）およ
びＤ−グルコースをスポツトして比較した。その結果、実験１−２の方法で調製したペオニ
フロリンおよび試薬ペオニフロリンは、強い紫外
部吸収のスポツトとして観察され、また、発色剤
で紫色に発色し、そのRf値は0.75であつた。試料
No.５では、ペオニフロリンのRf値0.75の比較的小
さいスポツトのほか、Rf値が0.63、0.49、0.36の
紫色小さなスポツトおよびRf値が0.19附近から原
点附近にかけての紫色テーリングが観察された。従つて、試料No.５は、α−グルコシル転移酵素
によつて新たに生じたRf値が0.63、0.49、0.36の
新物質およびRf値が0.19附近から原点附近までの
新物質と少量の未反応のペオニフロリンとの混合
物である。また、試料No.５に、グルコアミラーゼを作用さ
せ、経時的にサンプリングして同様にクロマト分
析した結果、新物質は、反応時間と共に徐々に加
水分解を受け、最終的には原料のペオニフロリン
のスポツトとRf値が約0.42のＤ−グルコースの茶
褐色のスポツトとになることが判明した。また、試料No.５に豚の肝臓から抽出し部分精製
したα−グルコシダーゼを作用させ、クロマト分
析した結果、試料No.５に含まれる新物質は、グル
コアミラーゼを作用させた場合と同様に、ペオニ
フロリンとＤ−グルコースとに容易に加水分解さ
れることが判明した。これらの結果から、α−グルコシル転移酵素に
よつて新たに生じたこれらの物質は、ペオニフロ
リンにＤ−グルコースが等モル以上α−結合した
物質であると判断される。このことは、α−グリコシルペオニフロリンを
人や動物が摂取するときには、体内でペオニフロ
リンとＤ−グルコースとに容易に加水分解される
ことが示唆される。なお、試料No.５と同様にして調製した試料を用
いてｎ−ブタノール、酢酸、水（４：２：１）を
展開剤としてシリカゲルカラムクロマトグラフイ
ーを行つて、前記のRf値が0.63附近から原点附近
の新物質の画分を採取し、乾燥して粉末とした。この新物質の粉末は、水に極めてよく溶け、苦
味、渋味、収斂味がない中性の物質である。ま
た、メタノール、エタノール、ｎ−ブタノールな
どの低級アルコールには一部溶け、クロロホルム
やエチルエーテルには難溶の物質である。また、試料No.５は、ペオニフロリンとは違つ
て、試料No.３、試料No.４と同様に苦味、渋味、収
斂味がほとんどなかつた。従つて、本発明のペオニフロリンの苦味、渋
味、収斂味などの嫌味を解消するという目的は、
ペオニフロリンとα−グルコシル転移酵素を反応
させてα−グリコシルペオニフロリンを生成含有
せしめることによつて達成されるものと判断され
る。次に、本発明の実施例を述べる。実施例１ α−グリコシルペオニフロリン含有シラツプマルトース4w／ｖ％、燐酸１カリウム0.1w／
ｖ％、硝酸アンモニウム0.1w／ｖ％、硝酸ナト
リウム0.1w／ｖ％、硫酸マグネシウム・７水塩
0.05w／ｖ％、塩化カリウム0.05w／ｖ％、ポリ
ペプトン0.2w／ｖ％、水および炭酸カルシウム
1w／ｖ％（別に乾熱滅菌し植菌時に無菌的に添
加した。）からなる培地５にムコールヤバニ
カス（Mucor javanicus）IFO4570を植菌し、30
℃で44時間通気撹拌培養した。この培養液から得
られた湿菌体480ｇにＭ／２酢酸緩衝液（PH5.3）
に溶解した4M尿素液５を加え、30℃で40時間
静置した。この上清を流水中で一夜透析した後、
硫安0.9飽和として４℃で一夜放置し、次いで遠
心分離して沈澱を採取した。この沈澱を酢酸緩衝
液（PH6.0）100mlに懸濁後、遠心分離し、上清を
α−グルコシダーゼ（EC3.2.1.20）液とした。実験１−２の方法で調製したペオニフロリン30
ｇとマルトデキストリン（D.E.40）300ｇとを温
水500mlに溶解し、50℃、PH6.0とした後、前記の
α−グルコシダーゼ液を加え24時間反応させた。反応液の酵素を加熱失活させた後、過した
液をマグネシア系吸着剤（富士化学工業株式会社
製、商品名カラムライト）５ｇを充填したカラ
ムに通して有色夾雑物を除去し、次いで、イオン
交換樹脂アンバーライトIR−120B（Ｈ型）および
アンバーライトIRA−94（OH型）を充填したカ
ラムに通して脱塩し、減圧濃縮して水分20％のα
−グリコシルペオニフロリン含有シラツプを得
た。収率は、固形物換算で約90％であつた。本α−グリコシルペオニフロリン含有シラツプ
は、苦味、渋味、収斂味などの嫌味がほとんど解
消されているだけでなく、上品な甘味をも有して
いる。従つて、そのまま経口摂取してもよく、ま
た、他の飲食物に含有せしめて利用することも自
由である。実施例２ α−グリコシルペオニフロリン含有粉末バチルスメガテリウムFERM−Ｐ No.935を
実験１−１の培地５に植菌し、28℃で３日間通
気撹拌培養した。培養終了後、遠心分離して得た
上清に硫安0.7飽和にし、さらに遠心分離して沈
澱を採取した。この沈澱は、実験１−１に記載する活性の測定
方法でシクロデキストリングルカノトランスフエ
ラーゼ（EC2.4.1.19）を30万単位含んでいた。実験１−２の方法で調製したペオニフロリン60
ｇとβ−シクロデキストリン180ｇを水500mlに加
熱溶解し、50℃に冷却してPH5.5に調整し、これ
に前記のシクロデキストリングルカノトランスフ
エラーゼをβ−シクロデキストリングラム当り15
単位の割合で加え、50℃、PH5.5に24時間保つて
反応させた。反外終了後、酵素を加熱失活させて
過した後、液を、合成吸着剤（Rohm＆
Haas社製、XAD−７）３を充填したカラムに
通液し、このカラムを充分水洗して遊離の糖類を
除去した。次いで、このカラムに50v／ｖ％エタ
ノール10を流し、この流出液を濃縮、乾燥して
約70ｇのα−グリコシルペオニフロリン含有粉末
を得た。このα−グリコシルペオニフロリン含有粉末
は、苦味、渋味、収斂味などの嫌味がほとんど解
消されているので、そのまま経口摂取してもよ
く、必要ならば甘味料、酸味料などの調味料で味
付けして利用してもよい。実施例３ α−グリコシルペオニフロリン含有シラツプ市販の白芍を粗砕し、この５Kgにメタノール25
を加え、50℃で３時間抽出して過し、得られ
る残渣をされに２回同様にメタノールで抽出し、
その３回の液を合せ、次いで、減圧濃縮してメ
タノールを溜去し、濃縮物を乾燥した。得られた
乾物を約10w／ｗ％水溶液とした後過し、液
を合成吸着剤（三菱化成工業株式会社製造、商品
名ダイヤイオンHP−10）８を充填したカラ
ムに通液し、充分に水洗して不純物を除去した。
次いで、このカラムにメタノール20を通液し、
溶出液を減圧濃縮してメタノールを溜去し、乾燥
粉末化してペオニフロリン粉末約85ｇを得た。このペオニフロリン粉末50ｇとマルトデキスト
リン（D.E.30）300ｇとを水300mlに溶解し、PH
5.5、温度60℃に維持しつつ、これに実験１−１
の方法で調製したシクロデキストリングルカノト
ランスフエラーゼをマトルデキストリングラム当
り10単位の割合で加え24時間反応させた。反応液
の酵素を加熱失活させた後、過し、得られる
液を濃縮して水分20％のα−グリコシルペオニフ
ロリン含有シラツプを得た。収率は、固形物換算
で約97％であつた。本α−グリコシルペオニフロリン含有シラツプ
は、苦味、渋味、収斂味などの嫌味が解消されて
いるだけでなく、上品な甘味をも有している。従
つて、そのまま経口摂取してもよく、また、他の
各種飲食物に含有せしめて利用することも自由で
ある。実施例４ α−グリコシルペオニフロリン含有シラツプ実験１−２の方法で調製したペオニフロリン５
ｇ、砂糖50ｇ、酵母エキス２ｇ、リン酸１カリウ
ム８ｇおよびリン酸２カリウム24ｇを加え、100
℃に15分間保つて殺菌し冷却した培地に、ロイコ
ノストツクメセンテロイデス（Leuconostoc
mesenteroides）IAM1151の種培養液１％を植菌
し、25℃で24時間静置培養した。培養終了液を遠
心分離し、得られた上清にマグネシア系吸着剤
（北海道曹達株式会社製造、商品名 M511）５ｇ
を加え、ゆつくり撹拌しつつ15分間保つた後、
過して有色夾雑物を除去し、この液をアンバー
ライトIR−200C（Ｈ型）およびアンバーライト
IRA−93（OH型）を充填したカラムに通液して
脱塩精製し、次いで減圧濃縮して水分30％のα−
グリコシルペオニフロリン含有シラツプを約50ｇ
得た。本シラツプ中に含有されるα−グリコシルペオ
ニフロリンは、イソマルトデキストラナーゼ
（EC3.2.1.94）によつて徐々に加水分解を受け、
ペオニフロリンとイソマルトースとを生じたこと
より、ペオニフロリンにＤ−グルコースがα−
1.6結合で等モル以上結合しているものと判断さ
れる。本α−グリコシルペオニフロリン含有シラツプ
は、苦味、渋味、収斂味などの嫌味がほとんど解
消されているので、そのまま経口摂取してもよ
く、また、他の各種飲食物に含有せしめて利用す
ることも自由である。実施例５ α−グリコシルペオニフロリン粉末水１に、バレイシヨ澱粉300ｇと実施例２の
方法で調製したペオニフロリン含有粉末60ｇを加
えPH6.0とし、これに市販の細菌糖化型α−アミ
ラーゼ（EC3.2.1.1）（生化学工業株式会社製）を
実験１−１の方法で測定した活性で澱粉グラム当
り10単位加え、80℃になるまで撹拌しつつ加熱
し、澱粉の液化が終つたところで、60℃まで冷却
して２日間反応を続けた。この反応液を加熱して
α−アミラーゼを失活させた後、過し、得られ
た液を実施例１と同様にマグネシア系吸着剤お
よびイオン交換樹脂で精製し、減圧濃縮し、さら
に粉末化してα−グリコシルペオニフロリン含有
粉末を得た。収率は固形物換算で約96％であつ
た。本α−グリコシルペオニフロリン含有粉末は、
苦味、渋味、収斂味などの嫌味がほとんど解消さ
れているだけでなく、上品な甘味をも有してい
る。従つて、そのまま経口摂取してもよく、また、
他の飲食物に含有せしめて利用することも自由で
ある。実施例６甘味料結晶性粉末マルチトール（林原商事株式会社販
売、商品名粉末マビツト）１Kgにα−グリコ
シルステビオシド（東洋精糖株式会社製、商品名
α−Ｇスイート）30ｇおよび実施例１の方法で
調製したα−グリコシルペオニフロリン含有シラ
ツプ20ｇを均一に混合した後、成形用型枠に充填
して加圧成形し、次いで型枠からはずし温風乾燥
して、１個が約３ｇの立方形甘味料を製造した。本品は、α−グリコシルペオニフロリンを含有
した甘味料で、ペオニフロリン本来の薬効、例え
ば、鎮静、鎮痛、ストレス潰瘍の予防などの効を
有する甘味料として、コーヒー、紅茶、清涼飲料
水などの甘味付に有利に利用できる。また、本品
は、低カロリー甘味料であるだけでなく、低う蝕
性甘味料としても好適である。実施例７甘味料実施例２の方法で調製したα−グリコシルペオ
ニフロリン含有粉末50ｇを水20mlに溶かし込み、
これに蜂蜜１Kgを均一に混合してα−グリコシル
ペオニフロリン含有甘味料を得た。本品は、このまま経口摂取してもよく、また、
美容飲料、健康食品などへの甘味付、漢方薬など
の矯味剤などとしても好適である。実施例８ハードキヤンデイー砂糖６Kg、結晶性粉末マルトース（林原株式会
社製、商品名サンマルト）３Kgおよび実施例
３の方法で調製したα−グリコシルペオニフロリ
ン含有シラツプ１Kgを水５に加熱溶解させ、
145〜150℃で煮つめ、さらに減圧下で水分２％以
下になるまで加熱濃縮し、これにクエン酸80ｇ、
少量のレモン香料および着色料とを混和し、次い
で、常法に従つて成形することによりハードキヤ
ンデイーを得た。本品は、ペオニフロリン本来の薬効、例えば、
鎮静、鎮痛、抗炎症などの効を有するハードキヤ
ンデイーとして有効に利用できる。実施例９チユーインガムガムベース２Kgを柔らかくなる程度に加熱溶融
し、これに結晶性粉末マルチトール（林原商事株
式会社販売、商品名粉末マビツト）７Kg、α
−グリコシルステビオシド（東洋精糖株式会社
製、商品名 α−Ｇスイート）20ｇ、実施例５の
方法で調製したα−グリコシルペオニフロリン含
有粉末300ｇ、少量のハツカ香料および着色料を
混合した後、常法に従つてロールにより練り合わ
せ、成形することによつてチユーインガムを得
た。本品は、テクスチヤー、甘味とも良好であり、
ペオニフロリン本来の薬効、例えば、鎮静、鎮
痛、鎮痙、抗炎症などの効を有するチユーインガ
ムとして有利に利用される。また、本品は、低カ
ロリー、低う蝕性チユーインガムとしても好適で
ある。実施例 10 チヨコレートカカオペースト40Kg、カカオバター10Kg、砂糖
15Kg、全脂粉乳15Kgおよび実施例２の方法で調製
したα−グリコシルペオニフロリン粉末500ｇを
混合し、レフアイナーを通した。そして粒度を下
げた後、コンチエに入れレシチン500ｇを加え、
50℃で二昼夜練り上げた。次いで、常法に従い成型機に流し込み、成型固
化することにより製品とした。本品はフアツトブルーム、シユガーブルームの
恐れがなく、舌にのせた時の融け具合、風味とも
に良好である。また、本品は、ペオニフロリン本
来の薬効、例えば、鎮静、鎮痛、ストレス潰瘍の
予防などの効を有するチヨコレートとして好適で
ある。実施例 11 乳酸飲料 10Kgの脱脂乳を80℃で20分間加熱殺菌した後、
40℃に冷却し、これにスターター300ｇを加え、
35〜37℃で10時間発酵させた。次いで、これを均質化した後、砂糖9.6Kgおよ
び実施例４の方法で調製したα−グリコシルペオ
ニフロリン含有シラツプ400ｇを加え、80〜85℃
で撹拌混合しつつ殺菌した。これを冷却した後、
少量の香料を加えてビンに詰め製品とした。本品は、ペオニフロリン本来の薬効を有する乳
酸飲料として好適である。実施例 12 炭酸飲料市販の異性化糖液（異性化率55％もの）1.97
Kg、実施例３の方法で調製したα−グリコシルペ
オニフロリン含有シラツプ12.5ｇ、クエン酸23
ｇ、ビタミンB₁−硝酸塩0.2ｇおよびビタミン
B₆0.5ｇを水８に撹拌溶解し、常法に従つてカ
ーボネーターで２倍容の炭酸ガスを封入して炭酸
飲料を製造した。本品は、ペオニフロリン本来の薬効を有する健
康飲料としても好適である。実施例 13 ゼリー菓子プルーンエキス（水分30％）300ｇ、砂糖２Kg、
グルコース３Kg、水飴（水分25％）２Kg、実施例
３の方法で調製したα−グリコシルペオニフロリ
ン含有シラツプ16ｇおよび水2.13を混合した
後、撹拌しつつ加熱沸騰させて水分20％とした。
これに、高メトキシルペクチン（雪印食品株式会
社販売、商品名イエローリボン）350ｇを5w／
ｗ％に溶解した熱水溶液（60℃）を加え、加熱沸
騰を続け水分22〜23％になつたところで加熱を止
め、激しく撹拌しながら50w／ｗ％クエン酸水溶
液200ｇを加え、その後、90℃以上で型に流し込
み、室温に８時間放冷固化させた。次いで、型か
ら取り出し、40℃の温風を送つて乾燥させ、包装
して製品とした。本品は、歯切れのよいゼリー菓子である。ま
た、ペオニフロリン本来の薬効を有するゼリー菓
子として好適である。実施例 14 ゼリー砂糖1.5Kg、クエン酸ナトリウム30ｇ、安定剤
（新田ゼラチン株式会社製、商品名 GF−100）
110ｇ、実施例３の方法で調製したα−グリコシ
ルペオニフロリン含有シラツプ12.5ｇおよび水
7.3を加熱混合し、80℃に10分間保つた後、こ
れに、プルーンエキス（水分30％）１Kgおよびク
エン酸30ｇを少量の水に溶解した水溶液をよく撹
拌しながら均一に混合し、次いで、60〜70℃にて
容器に充填し、さらに90℃で30分間殺菌し、冷却
して製品とした。本品は、甘味と清涼感を有するゼリーである。
また、ペオニフロリン本来の薬効を有する健康ゼ
リーとして好適である。実施例 15 佃煮常法に従つて砂取り、酸処理して角切りした昆
布250ｇに醤油212ml、アミノ酸液318ml、砂糖30
ｇ、水飴20ｇ、プルラン１ｇおよび実験１−３の
方法で調製した試料No.４相当品（α−グリコシル
ペオニフロリン含有シラツプ）10ｇを加えて煮込
みつつ、さらにグルタミン酸ソーダ12ｇ、カラメ
ル８ｇ、味淋21mlを加えて煮き上げて昆布の佃煮
を得た。本品は、味、香りだけでなく、色、艶も充分で
食欲をそそる昆布佃煮である。また、本品は、ペ
オニフロリン本来の薬効を有する佃煮としても有
利に利用できる。実施例 16 ラツキヨウ漬生ラツキヨウ５Kgを、常法に従つて約20％食塩
水2.5に塩漬して３週間の後、水切りして得た
塩漬ラツキヨウを水2.0、氷酢酸80ml、食塩80
ｇからなる酢酸液に２ケ月間酢漬けした。得られた酢漬けラツキヨウを、さらに食酢800
ml、味淋400ml、唐芥子10ｇおよび実施例２の方
法で調製したα−グリコシルペオニフロリン含有
粉末５ｇからなる調味液に10日間漬けて、風味が
豊かで、ペオニフロリン本来の薬効を有するラツ
キヨウの甘酢漬を得た。実施例 17 錠剤結晶性粉末マルトース（林原株式会社製、商品
名、サンマルト）100ｇ、コーンスターチ10ｇ
および実施例５の方法で調製したα−グリコシル
ペオニフロリン含有粉末10ｇを均一に混合した
後、直径12mm、20R杵を用いて１錠680mg、錠剤
の厚さ5.25mm、硬度８Kg±１Kgで打錠した。本品は、ペオニフロリン本来の例えば、鎮静、
鎮痛、鎮痙、抗炎症、ストレス潰瘍の予防などの
薬効を有する飲み易い錠剤である。実施例 18 練歯磨配合第２リン酸カルシウム 45.0％プルラン 2.75％ラウリル硫酸ナトリウム 1.5％グリセリン 18.0％ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート
0.5％防腐剤 0.05％ α−グリコシルステビオシド（東洋精糖株式会社
製、商品名 α−Ｇスイート） 0.2％実施例２の方法で調製したα−グリコシルペオニ
フロリン粉末 2.0％水 30.0％上記の材料を常法に従つて混合し、練歯磨を得
た。本品は、抗炎症、ストレス潰痙の予防などの薬
効を有する練歯磨として好適である。

Claims

【特許請求の範囲】１ α−グリコシルペオニフロリンを含有する飲
食物。２ α−グリコシルペオニフロリンを含有せしめ
ることを特徴とする飲食物の製造方法。３ α−グリコシルペオニフロリンが、ペオニフ
ロリンとα−グルコシル糖化合物とを含有する水
溶液に、α−グルコシル転移酵素を反応させるこ
とにより生成するα−グリコシルペオニフロリン
であることを特徴とする特許請求の範囲第２項記
載の飲食物の製造方法。４ α−グリコシルペオニフロリンが、ペオニフ
ロリンとα−グリコシル糖化合物とを含有する水
溶液に、α−グルコシル転移酵素を反応させα−
グリコシルペオニフロリンを生成せしめ、次いで
マグネシア系吸着剤、多孔性合成吸着剤またはイ
オン交換樹脂により精製したα−グリコシルペオ
ニフロリンであることを特徴とする特許請求の範
囲第２項記載の飲食物の製造方法。５ペオニフロリンが芍薬由来のペオニフロリン
であることを特徴とする特許請求の範囲第３項、
第４項記載の飲食物の製造方法。