JPH04334310A - 過酸化脂質生成抑制剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 【０００１】 【産業上の利用分野】本発明は、過酸化脂質の生成を抑
制する効果があり、その利用分野としては、例えば、医
薬品類、医薬部外品類、化粧品類（人及びその他の動・
植物用に用いられる各種製剤も含む）に用いることが出
来る。 【０００２】 【従来の技術】過酸化脂質とは、脂質の構成成分である
不飽和脂肪酸に過酸化物、主として、ヒドロペルオキシ
ドがついたものである。これらの過酸化脂質は、生体内
で細胞膜に障害を与えたり、各種酵素の不活性化や生体
蛋白の変性などを生じ、生体組織に悪影響を与える。そ
して、これらの原因が老化を促進させたり、癌性変化な
どの疾病へつながると考えられている。 【０００３】この脂質が過酸化する過程においては、多
価脂肪酸又は酸素のラジカル化が必要であり、それには
、光、温度、重金属等の因子によって、ラジカル化が促
進される。よって、これらの因子を取り除き、ラジカル
化を防いだり、又、発生したラジカルを分解、消去する
ことによって過酸化脂質の生成を抑制する物質が開発さ
れている。 【０００４】例えば、ラジカル化された酸素を、分解、
消去するスーパーオキシドディスムターゼ、カタラーゼ
、グルタチオンペルオキシダーゼといった酵素やビタミ
ン剤、或は、抗酸化効果のあるケルセチン、オリザノー
ルといった植物抽出エキスやコエンザイムＱ、又、過酸
化脂質と結合することによって分解するＳＨ化合物やア
ルブミン、脂肪酸のβ酸化を促進することによって過酸
化脂質の生成を抑制するパントテン酸、更に、主要な促
進因子である紫外線を防ぐことによって脂質過酸化を抑
制する二酸化チタン、ウロカニン酸といったサンスクリ
ーン剤やＵＶ吸収剤などが知られている。しかしながら
、ラクトフェリンを過酸化脂質生成抑制剤として応用し
た例は、従来、知られていなかった。 【０００５】 【発明が解決しようとする課題】そこで、本発明者らは
、過酸化脂質生成抑制剤として、従来、用いられてきた
物質よりも副作用（安全）が少なく、且つ、過酸化脂質
生成抑制効果に優れた物質を天然物質の中から探索して
きたのである。その結果、ラクトフェリンがＦｅｎｔｏ
ｎ反応を阻害し、過酸化脂質生成抑制作用を有すること
を発見し、本発明を完成する至った。以下、本発明を具
体的に述べる。 【０００６】脂質の過酸化反応は、上記にも述べた如く
、最初に何らかの因子の反応によってラジカルが生成す
ることにより始まるが、コバルト、マンガン、鉄、銅な
どの遷移金属は、速やかに、ヒドロペルオキシド、過酸
化水素を分解してラジカルが発生する。この内、鉄イオ
ンによる分解はＦｅｎｔｏｎ反応としてよく知られてい
るものであり、生体内でも重要な役割を果たしている。 【０００７】生体内における鉄錯体のうち、強力な脂質
過酸化の開始剤となりうるのは、鉄と弱く結合している
　ＡＤＰ−鉄錯体や有機酸−鉄錯体である。酵素により
還元されて生じたＦｅ２＋−ＡＤＰ　錯体によるＦｅｎ
ｔｏｎ型の反応で、ヒドロペルオキシドが脂質アルコキ
シラジカルへ分解され、更に、無傷の不飽和脂肪酸を攻
撃し、連鎖的に反応が進行していく。このように生体内
での脂質過酸化反応には、鉄錯体もしくは鉄イオンが重
要なのは明らかである。 【０００８】又、ラクトフェリンは乳汁中や体液など細
胞内外液に存在し、１分子の蛋白質あたり２原子の鉄を
取り込むことができ、鉄に対して強い親和性を持つ。ま
た、好中球内でも合成され、鉄イオンを強力に捕捉する
ことから、細菌の発育を阻害し、死を導く物質として知
られており、鉄を飽和していないラクトフェリンは、こ
のような強力な鉄親和性によって、脂質過酸化反応に関
与する鉄を、その蛋白質分子中に強く取り込むため、強
力な抗酸化剤として働いていると考えられている。これ
らの事柄に基ずき、本発明者らはラクトフェリンと過酸
化脂質生成抑制との関係を調べるべく検討した。その結
果、ラクトフェリンが有効かつ安全な過酸化脂質生成抑
制剤であることを確認して、本発明を完成するに至った
。 【０００９】 【課題を解決するための手段】本発明は、ラクトフェリ
ンを有効成分として含有する過酸化脂質生成抑制剤に関
するものである。 【００１０】尚、本発明のラクトフェリンを有効成分と
する過酸化脂質生成抑制剤の配合量としては、０．００
１重量％以上（以下、断わりのない限り、重量％で表わ
す）、好ましくは、０．０１％濃度以上のラクトフェリ
ンを溶液、粉末、ゾル、ゲル、エマルジョン、ワックス
状等様々な形態で、皮膚に塗布、塗擦、スプレー（エア
ロゾール）して使用する。又、ラクトフェリンは公知の
化粧料または外用剤用の基剤等に常法により配合して、
ローション、スキンクリーム、乳液、ヘアートニック、
シャンプー、リンス、その他の化粧料、医薬品、医薬部
外品（人及びその他の動・植物用に用いられる各種製剤
も含む）などの薬液、軟膏等の皮膚外用剤等として用い
ることができ、更に、ラクトフェリンはビタミン類、動
植物エキス、皮膚機能亢進剤、各種界面活性剤、溶剤、
香料、着色料、殺菌剤、防腐剤、抗酸化剤、保湿剤、そ
の他の各種添加剤、各種化粧品基剤に対しても安定であ
り、これらと共に配合し、併用して用いることが出来る
。 【００１１】本発明に使用するラクトフェリンは、鉄を
結合する能力さえあれば、どのような由来のラクトフェ
リンであっても差し支えはなく、組織培養や化学合成で
得られたラクトフェリンを用いることもでき、またラク
トフェリンの製造法は、公知の製造法を採用しても差し
支えない。 【００１２】以下に、本発明について、更に具体的に示
すため、ラクトフェリンを有効成分として含有する過酸
化脂質生成抑制剤の効果（作用）又は副作用（安全性）
及びラクトフェリンの製造例、処方例等に関して開示す
る。 【００１３】 【製造例】 ラクトフェリンの製造法 新鮮な牛ホエーの硫安沈殿物を水に溶解し、セファデッ
クスＧ−２５のカラムに通し脱塩する。脱塩した蛋白を
ｐＨ７．３のリン酸緩衝生理食塩水　（ＰＢＳ）に溶解
し、抗牛ラクトフェリンモノクローナル抗体をアフィニ
ティカラムに通し、更に、ＰＢＳ　にて洗浄した。その
後、０．１５Ｍの食塩を含むｐＨ３．７の０．２５Ｍ酢
酸ナトリウム緩衝液で、カラムより牛ラクトフェリンを
溶出し、ｐＨを中性付近に調整した後、精製水で３日間
透析し、その後、透析物を凍結乾燥し、牛ラクトフェリ
ンを得る。 【００１４】 【試験例１】 ラクトフェリンの脂質過酸化抑制効果の確認試験ラクト
フェリンが紫外線によるリノレン酸の過酸化を抑制する
かどうかを、ＴＢＡ法を用いて、過酸化物量を測定した
。 【００１５】１）検体の調製 製造例又は公知の方法で製造したラクトフェリンを、精
製水にて溶解し、検体とする。又、対照として、ビタミ
ンＥを同様に行なった。 【００１６】２）試験方法 ０．８％ラウリル硫酸ナトリウム水溶液に、０．１％リ
ノレン酸、８μＭ硫酸鉄アンモニウム、３８μＭアスコ
ルビン酸を加え溶解し、この溶液３．９ｍｌを１０ｍｌ
のスクリュー瓶に取る。これに検体溶液０．１ｍｌを加
え、紫外線（東芝製　　ＦＬ−２０ＳＥ　ランプ及びＦ
Ｌ−２０ＳＢＬＢ　ランプをそれぞれ３灯並列して距離
１５ｃｍにて照射。）を１時間照射した後、この液を１
ｍｌ取り、次に、０．８％チオバルビツール酸水溶液１
．５ｍｌと２０％酢酸（ｐＨ３．５　）１．５ｍｌを加
え、９５℃で１時間加熱する。冷却後、精製水１ｍｌ及
びｎ−ブタノール：ピリジン（１５：１）５ｍｌを加え
て、良く振った後、遠心分離し、このｎ−ブタノール層
の５３２ｎｍにおける吸光度を測定し、過酸化脂質量と
した。尚、検体を加えて紫外線を照射した場合の過酸化
脂質量をａ、検体を加えて紫外線を照射しない場合の過
酸化脂質量をｂ、又、検体を加えないで紫外線を照射し
た場合の過酸化脂質量をａ’、検体を加えず紫外線を照
射しない場合の過酸化脂質量をｂ’として、過酸化脂質
抑制率を数１により求めた。 【００１７】 【数１】 【００１８】 【表１】 【００１９】３）試験結果 結果は表１の通り、ラクトフェリンはビタミンＥと比べ
、強い脂質過酸化の抑制効果が見られた。又、表１より
、ラクトフェリンの有効濃度範囲としては、処方中に０
．００１％以上含有していることが良好であることが確
認できた。 【００２０】 【試験例２】 ラクトフェリンの安全性試験 【００２１】１）検体の調製 製造例あるいは公知の方法で製造したラクトフェリンを
用い、以下の処方で柔軟性化粧水を作り検体として用い
た。尚、対照としてラクトフェリンの代わりに精製水を
加えたものを用いて行なった。 【００２２】 （処方） 　　エタノ−ル　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０．
０％　　　　　　　　　　　　モノラウリン酸ポリオキ
シエチレンソルビタン　　　　　　　　　　１．０％　
　　　　　　　　　　　パラオキシ安息香酸メチル　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　０．２％　　　　　　　　　　　　香料　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２％　　　　
　　　　　　　　精製水　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　７７．５％　　　　　　　　　　　　グリセ
リン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　５．０％　　
　　　　　　　　　　１，３−ブチレングリコール　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　６
．０％　　　　　　　　　　　　ラクトフェリン　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　０．１％　　　　　　　　　　【
００２３】２）試験方法 健康成人３０名（男性１１名：２４〜４０歳、女性１９
〜４６歳）を対照にパッチテストを行なった。尚、検体
を皮膚感作テストテープ：フィンチャンバー（輸入発売
元：大正製薬（株））に適量滴下し、上背部に４７時間
貼布した。判定は除去後１時間及び、２４時間後の皮膚
の紅斑を求める方法により行なった。 【００２４】 【表２】 【００２５】３）試験結果 表２に示した如く、ラクトフェリンは、化粧品原料とし
て、副作用もなく、安全に使用できる物質であることが
判定できた。 【００２６】以下に２〜３の実施例を示し、本発明の方
法を、更に詳述するが、本発明の利用分野は、以下の実
施例に限定されることなく、各種の化粧品類、医薬品、
医薬部外品などに配合して用いることができる。尚、各
実施例は各製品の製造における常法により製造し、又、
ラクトフェリンは上記の製造例あるいは公知の方法によ
り製造したものを使用した。 【００２７】 【実施例１】 （ピールオフパックの処方例） 精製水　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　６６．５％グリセリン　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　５．０％プロピレ
ングリコール　　　　　　　　　　　　　　　　４．０
％ポリビニルアルコール　　　　　　　　　　　　　　
１５．０％エタノール　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　８．０％ポリオキシエチレング
リコール　　　　　　　　１．０％パラオキシ安息香酸
メチル　　　　　　　　　　　　０．２％香料　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　０．２％ラクトフェリン　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　０．１％上記の配合のピールオ
フパックを製造した。 【００２８】 【実施例２】 （コールドクリームの処方例） サラシミツロウ　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　１１．０％流動パラフィン　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　２２．０％ラノリン　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１０．０％ア
ーモンド油　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　１５．０％ホウ砂　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　０．５％パラオキシ安
息香酸メチル　　　　　　　　　　　　０．２％精製水
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　４０．９％香料　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　０．３％ラクトフ
ェリン　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
０．１％上記の配合でコールドクリームを製造した。 【００２９】 【実施例３】 　　（シャンプーの処方例） 　　　　ラウリル硫酸トリエアタノールアミン　　　　
　　　　　　　　　　　　　　５．０％　　　　　　　
　　　　　ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナ
トリウム　　１２．０％　　　　　　　　　　　　１，
３−ブチレングリコール　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　４．０％　　　　　　　　　
　　　ラウリン酸ジエタノールアミド　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　２．０％　　　　　
　　　　　　　エデト酸二ナトリウム　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０
．１％　　　　　　　　　　　　パラオキシ安息香酸メ
チル　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　０．２％　　　　　　　　　　　　香料　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．３％
　　　　　　　　　　　　精製水　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　７６．３％　　　　　　　　　　　
　ラクトフェリン　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．１％
　　　　　　　　上記の配合でシャンプーを製造した。 【００３０】 【発明の効果】本発明のラクトフィリンを有効成分とし
て含有する過酸化脂質生成抑制剤の効果を集約すれば、
次の如くである。■著明に過酸化脂質の生成を抑制する
。■副作用がなく、非常に安全である。したがって、利
用分野は、各種の医薬品、医薬品部外品、化粧品類、更
に、各種の食品類（加工食品、機能性食品、健康食品な
ど）に用いることが出来る。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　ラクトフェリンを有効成分として含有
   することを特徴とする過酸化脂質生成抑制剤。