JP5070596B2 - キトサン誘導体及びその製造方法 - Google Patents

Description

本発明は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）用の充填剤として適したキトサン誘導体及びその製造方法、前記キトサン誘導体を用いた光学異性体用分離剤に関する。

近年、光学活性化合物の重要性は、ますます大きくなってきており、医薬品のみならず、機能材料の研究、開発の面からも、純粋な光学活性キラル分子を、選択的及び効率的に創製する手段が必要不可欠となっている。
ＨＰＬＣによる光学分割は、分取及び微量分析の両方に利用可能な方法として発展しており、これまで様々なキラル充填剤の開発が進められてきた。その中でも、セルロースやアミロース等の天然に豊富に存在する多糖をフェニルカルバメート誘導体に変換したものは、ＨＰＬＣ用キラル固定相として医薬品を含む広範囲のラセミ体に対して優れた光学分割能を有していることから、汎用されている。
セルロースやアミロース以外の多糖についての研究も行われているが、これらと同等以上の光学分割能を有するものは得られていない。
ＪＰ−Ａ ５−１６３１６４とＪＰ−Ａ ２００５−１７１７４には、キトサン誘導体を用いた光学異性体用の分離剤が開示されている。

ＪＰ−Ａ ５−１６３１６４とＪＰ−Ａ ２００５−１７１７４には光学分割能の点で改善の余地がある。
本発明は、高い光学分割能を有するキトサン誘導体及びその製造方法と、前記キトサン誘導体を用いた光学異性体用分離剤を提供する。
本発明は、下記一般式（Ｉ）で示されるキトサン誘導体を提供する。

（式中、Ｒ_１は、置換基を有していてもよい炭素数１〜３０の脂肪族基又は芳香族基、好ましくは、置換基を有していてもよい炭素数１〜１５の脂肪族基又は芳香族基を示し、Ｒ_２は、イソシアン酸誘導体、カルボン酸、エステル、酸ハロゲン化物、酸アミド化合物、ハロゲン化合物、アルデヒドまたはアルコールに由来する置換基を示し、ｎは５以上の整数を示す。）
更に本発明は、上記のキトサン誘導体の製造方法であって、キトサンの２位のアミノ基をイミド化した後、キトサンの３位と６位の水酸基と、イソシアン酸誘導体、カルボン酸、エステル化合物、酸ハロゲン化物、酸アミド化合物、ハロゲン化合物、アルデヒドおよびアルコールから選ばれる化合物を反応させる、キトサン誘導体の製造方法を提供する。
更に本発明は、上記のキトサン誘導体を含む光学異性体用の分離剤、分離剤用途、分離方法を提供する。
本発明のキトサン誘導体は、高い光学分割能を有してる。
発明の詳細な説明
本発明のキトサン誘導体は、上記した一般式（Ｉ）で示されるものであり、以下の製造方法により得ることができる。
出発原料となるキトサンは特に制限されるものではなく、キチンを脱アセチル化したものを用いてもよいし、市販のキトサンを用いてもよい。市販のキトサンとしては、例えば、ｗａｋｏ社、ＳＩＧＭＡ社、東京化成社から販売されているものが挙げられる。
まず、キトサンの２位のアミノ基をイミド化する。イミド化反応は特に制限されず、公知のイミド化反応を適用できる。
イミド化反応は、２位のアミノ基に、Ｒ_１を導くことができる公知の酸無水物を作用させる方法を適用できる。例えば、アシル化剤（無水フタル酸）を作用させて、２位のアミノ基をＮ−アシル化した後、加熱脱水する方法（方法１）、又はＤＭＦ／水＝９５／５（容量比）の混合溶媒中、キトサンの２位のアミノ基にアシル化剤（無水フタル酸）を作用させた後、乾燥する方法（方法２）である。
次に、キトサンの３位と６位の水酸基と、イソシアン酸誘導体、カルボン酸、エステル化合物、酸ハロゲン化物、酸アミド化合物、ハロゲン化合物、アルデヒドおよびアルコールから選ばれる化合物を反応させるが、これらの中でもカルボン酸又はイソシアン酸誘導体を反応させることが好ましい。
カルボン酸としては、例えば安息香酸、４−メチル安息香酸、ケイ皮酸等を使用することができる。
イソシアン酸誘導体は、Ｒ−ＮＨ−Ｃ＝Ｏ（式中、Ｒは水素原子又は炭素原子数１〜３０、好ましくは１〜１４の脂肪族基、芳香族基等の基である。）で表されるものであり、具体的には、Ｒが水素原子、イソプロピル基、フェニル基、メチルフェニル基、３，５−ジメチルフェニル基、クロロフェニル基、ジクロロフェニル基、（Ｓ）−α−メチルベンジル基等であるものを使用することができる。
本発明のキトサン誘導体は、一般式（Ｉ）で示されるものであり、Ｒ_１及びＲ_２は下記のいずれかであるものが好ましい。重合度を示すｎは５以上であり、好ましくは５〜１０００の範囲である。
Ｒ_１は次のいずれかであることが好ましい。

一般式（Ｉ）中、Ｒ_２がカルバメート誘導体またはエステル誘導体であることは好ましい。 さらに、Ｒ_２が芳香族カルバメート誘導体または芳香族エステル誘導体であることがより好ましい。
Ｒ_２は次のカルバメート誘導体であることがさらにより好ましい。

本発明のキトサン誘導体は、そのままでもよいし、必要に応じて公知の方法により、担体に物理的に又は化学的に担持させたものを、例えば、ＨＰＬＣ用等の光学異性体用分離剤として使用することができる。
担体としては、公知の多孔質有機担体又は多孔質無機担体を用いることができ、好ましくは多孔質無機担体である。多孔質有機担体として適当なものは、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、ポリアクリレート等からなる高分子物質であり、多孔質無機担体として適当なものは、シリカ、アルミナ、マグネシア、ガラス、カオリン、酸化チタン、ケイ酸塩、ヒドロキシアパタイト等であるが、特に好ましいものはシリカゲルである。
なお、シリカゲルを使用する場合は、シリカゲル表面における残存シラノールの影響を排除し、光学活性な高分子化合物との親和性を向上させるため、シリカゲルをシラン化処理（アミノアルキルシランを用いたシラン化処理）、プラズマ処理等により表面処理することが望ましいが、全く表面処理が施されていなくても問題ない。
多孔質担体、特にシリカゲルの粒径は、好ましくは１〜３００μｍ、より好ましくは１〜１００μｍ、さらに好ましくは１〜５０μｍであり、平均細孔径は、好ましくは２００〜８０００Å、より好ましくは２００〜４０００Å、さらに好ましくは３００〜２０００Åである。なお、多孔質担体の粒径が、実質的に分離剤の粒径になる。

次の実施例は本発明の実施について述べる。 実施例は本発明の例示について述べるものであり、 本発明を限定するためではない。
実施例で用いた試薬等の詳細は、下記のとおりである。
（１）試薬
・Ｃｈｉｔｏｓａｎ…ｗａｋｏ−１００（ｗａｋｏ製）を、５０％ＮａＯＨ水溶液中にて、１２０℃で２時間の条件の脱アセチル化処理を３回繰り返したもの
・Ｐｈｔｈａｌｉｃ Ａｎｈｙｄｒｉｄｅ…ｗａｋｏ製
・ｃｉｓ−１，２−Ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅｄｉｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ Ａｎｈｙｄｒｉｄｅ…東京化成製
Ｓｕｃｃｉｎｉｃ Ａｎｈｙｄｒｉｄｅ…東京化成製
Ｍａｌｅｉｃ Ａｎｈｙｄｒｉｄｅ…東京化成製
４−Ｍｅｔｈｙｌｐｈｔｈａｌｉｃ Ａｎｈｙｄｒｉｄｅ…東京化成製
・Ｎ，Ｎ−Ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ（ＤＭＦ）…東京化成製
・３，５−Ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ Ｉｓｏｃｙａｎａｔｅ…アルドリッチ社製
・Ｉｓｏｃｙａｎｉｃ Ａｃｉｄ ３，５−Ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌ Ｅｓｔｅｒ…東京化成製
・Ｌｉｔｈｉｕｎ ｃｈｌｏｒｉｄｅ（ＬｉＣｌ）…ｗａｋｏ製
・ｄｒｙ Ｎ，Ｎ−Ｄｉｍｅｔｈｙｌａｃｅｔａｍｉｄｅ（ＤＭＡ）…関東化学製
・ｄｒｙ ｐｙｒｉｄｉｎｅ…関東化学製
・Ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ…Ｄａｉｓｏ ｇｅｌ ＳＰ−１０００（粒径７μｍ、孔径１００ｎｍ）を（３−Ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ）ｔｒｉｅｔｈｏｘｙｓｉｌａｎｅ（東京化成）で表面処理したもの
・Ｒａｃｅｍａｔｅｓ…合成品又は市販品
（２）測定機器
ＨＰＬＣ…ＪＡＳＣＯ ＰＵ−９８０，ＪＡＳＣＯ ９７０−ＵＶ，ＪＡＳＣＯ ９９０−ＯＲ，ＪＡＳＣＯ ＭＤ−２０１０
ＮＭＲ…Ｖａｒｉａｎ Ｇｅｍｉｎｉ−２０００（４００ＭＨｚ）
ＩＲ…ＪＡＳＣＯ ＦＴ／ＩＲ−６２０
ＴＧ…ＳＥＩＫＯ ＳＳＣ／５２００
ＣＤ…ＪＡＳＣＯ Ｊ−７２０−Ｌ
［実施例１］〔Ｎ−ｐｈｔｈａｌｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ３，６−ｂｉｓ（３，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）〕

上記反応式にしたがって、キトサン誘導体を製造した。まず、酢酸２％のメタノール溶液（ｐＨ４）中で、キトサン０．３１ｇに対し、無水フタル酸０．８５ｇを添加して、３５℃で１２時間反応させた。
続いて、前記反応物を２％炭酸水素ナトリウム水溶液（ｐＨ８）中に入れ、更に無水フタル酸０．７６ｇを添加して、３５℃で１２時間反応させ、キトサンの２−位のアシル化反応を完了させて、塩酸酸性にして回収した（収量０．６０ｇ）。
続いて、２−位をアシル化したキトサンを、２００℃で５時間、減圧下で加熱乾燥することで、脱水反応により環化を行い、２−位をイミド化させた。反応はＩＲで確認した。その後、得られた２−位イミド化キトサン０．２０ｇとり、脱水ピリジン６ｍｌと３，５−ジメチルフェニルイソシアナートを０．２９ｇ加え、８０℃で２１時間加熱した。２１時間後、ＩＲにより反応の進行を確認した上で、３，５−ジメチルフェニルイソシアナートを０．１１ｇ加え、更に８０℃で５時間加熱して、反応を終了させた。生成物は、ＭｅＯＨ／水＝４／１（容量比）不溶部として回収した。ＩＲにより尿素が含まれていることを確認したため、ＴＨＦ可溶部を２回沈殿させて尿素を取り除き、０．２４ｇ（６２％）の収量を得た。得られたキトサン誘導体は、アセトン、ＤＭＳＯ、ＴＨＦ、ＤＭＦ、ＤＭＡ、クロロホルム、ピリジンに可溶であった。
［実施例２］〔Ｎ−ｐｈｔｈａｌｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ３，６−ｂｉｓ（３，５−ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）〕

上記反応式にしたがって、キトサン誘導体を製造した。ＤＭＦ／水＝９５／５（容量比）混合溶媒２０ｍｌに、無水フタル酸１．０ｇを溶解させ、キトサン０．４０ｇを加えて１２０℃で８時間撹拌した後、冷水にあけて０．６４ｇ（８９％）の収量を得た。
完全にイミド化させるため、０．６０ｇを、２００℃で２時間、減圧下で加熱乾燥させた後、脱水ピリジン８ｍｌと３，５−ジクロロフェニルイソシアナートを０．９９ｇ加え、８０℃で加熱し反応させた。ＩＲで反応の進行を確認後、２７時間でメタノール／水＝４／１不溶部として回収し、ＴＨＦ可溶部を再沈殿させ収量０．８１ｇ（６７％）を得た。得られたキトサン誘導体は、ＴＨＦ、ＤＭＦ、ＤＭＡ、ピリジンに可溶であった。
［実施例３］〔Ｎ−（４−ｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｔｈａｌｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ３．６−ｂｉｓ（３．５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）〕

上記反応式にしたがって、キトサン誘導体を製造した。４−ｍｅｔｈｙｌｐｈｔｈａｌｉｃ ａｎｈｙｄｒｉｄｅ １．６ｇをＤＭＦ／水＝９５／５の３０ｍｌに溶解させ、キトサン０．５１ｇを加えて１２０℃で８時間撹拌し、冷水にあけ、メタノールで洗浄して回収したところ、０．８９ｇ（９０％）の収量を得た。
このうち０．８０ｇを２００℃で２時間減圧乾燥させた後、ピリジン１２ｍｌ、３，５−ジメチルフェニルイソシアナートを１．２ｇ加えて８０℃で２４時間撹拌したところ完全に溶解し、１Ｒで反応の進行を確認後、メタノール不溶部として回収して、１．３ｇ（８２％）の収量を得た。得られたキトサン誘導体は、アセトン、ＴＨＦ、ＤＭＦ、ＤＭＡ、クロロホルム、ピリジンに可溶であった。
［実施例４］〔Ｎ−（４−ｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｔｈａｌｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ３，６−ｂｉｓ（３，５−ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）〕

上記反応式にしたがって、キトサン誘導体を製造した。４−ｍｅｔｈｙｌｐｈｔｈａｌｉｃａｎｈｙｄｒｉｄｅ １．１ｇをＤＭＦ／水：９５／５ １６ｍｌに溶解させ、キトサン４．１ｇを加えて１２０℃で８時間撹拌し、冷水にあけ、メタノールで洗浄して回収したところ、０．７５ｇ（９８％）の収量を得た。
このうち０．６０ｇを２００℃で２時間減圧乾燥させた後、ピリジン１２ｍｌ、３，５−ジクロロフェニルイソシアナートを１．１ｇ加えて８０℃で２４時間撹拌したところ完全に溶解し、ＩＲで反応の進行を確認後、メタノール不溶部として回収して、１．１ｇ（８４％）の収量を得た。得られたキトサン誘導体は、ＴＨＦ、ＤＭＡ、ピリジンに可溶であった。
［実施例５］（光学異性体用分離剤の調製）
実施例１〜４で得たキトサン誘導体をＴＨＦに溶解させた後、表面処理したシリカゲルに担持させ、光学異性体用分離剤とした。これらを、Ｈｅｘａｎｅ−２−ｐｒｏｐａｎｏｌ（９：１）で粒径分別し、長さ２５ｃｍ、内径０．４６ｃｍのステンレススチール製のカラムに、Ｈｅｘａｎｅ−２−ｐｒｏｐａｎｏｌ（９：１）を用い、スラリー法により充填した。
カラム１（内径０．４６ｃｍ）：実施例１のキトサン誘導体
カラム２（内径０．４６ｃｍ）：実施例２のキトサン誘導体
カラム３（内径０．４６ｃｍ）：実施例３のキトサン誘導体
カラム４（内径０．４６ｃｍ）：実施例４のキトサン誘導体
応用例１（ＨＰＬＣによる測定）
実施例５の各光学異性体用分離剤を用い、ＨＰＬＣによるラセミ体の光学分割を行った。測定には、ポンプ（ＪＡＳＣＯ ＰＵ−９８０）を使用し、検出にはＪＡＳＣＯ ＵＶ−９７０と旋光検出器ＪＡＳＣＯ ＯＲ−９９０を用いた。分割能を評価するために用いたラセミ体（２−１９）は、下記のとおりである。
溶離液は、主にＨｅｘａｎｅ−２−ｐｒｏｐａｎｏｌ（９：１）を用い、内径０．４６ｃｍのカラ厶では流速０．５ｍｌ／ｍｉｎとし、室温で測定を行った。理論段数は、ｂｅｎｚｅｎｅ−ｅｌｕｅｎｔ（１：１０）により、また、ｔ_０は１，３，５−ｔｒｉ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｈｙｌｂｅｎｚｅｎｅにより決定した。
容量比ｋ_１’，ｋ_２’：溶離液がカラムを素通りしてくる時間をｔ_０、各エナンチオマーの溶出時間をｔ_１，ｔ_２とするとき、ｋ_１’，ｋ_２’はエナンチオマーの充填剤に対する吸着力を示し、次式：
ｋ_１’＝（ｔ_１−ｔ_０）／ｔ_０で求められる。
分割係数α＝ｋ_２’／ｋ_１’

カラム１〜４について評価した結果を以前合成された、２，３，６−位ともにｉｓｏｃｙａｎａｔｅを反応させた誘導体（比較例１、２）の光学分割能とともに表１に示す。

［実施例６］
Ｎ−（１，２−ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅｄｉｃａｒｂｏｎｙｌ）ｃｈｉｔｏｓａｎ ３，６−ｂｉｓ（３，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）

上記反応式にしたがって、キトサン誘導体を製造した。まずキトサン（ｗａｋｏ−１００（ｗａｋｏ製）を、５０％ＮａＯＨ水溶液中にて、１２０℃で２時間の条件の脱アセチル化処理を３回繰り返したもの）０．２０ｇをＮ−アシル化するため、酸性条件で０．５４ｇのｃｉｓ−１，２−ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅｄｉｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｎｈｙｄｒｉｄｅを加えて１１時間、塩基性にしてさらに０．５１ｇの無水物を加えて１２時間反応させて酸性条件で回収し、０．２６ｇ（６８％）の収率を得た（ＭＦ２ａ−１）。これを減圧下２２０℃で５時間加熱したところＩＲでイミド化が進行した様子が観察された（ＭＦ２ｂ−１）。これを８６ｍｇとり、脱水ピリジン８０℃中で３，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ ｉｓｏｃｙａｎａｔｅ ０．２４ｇと反応させ、２１時間後さらにｉｓｏｃｙａｎａｔｅを０．２３ｇ加えた。２７時間でＩＲで反応の進行を確認してメタノール不溶部を回収したが、反応は最後まで不均一で進んだ。ＤＭＳＯ中で撹拌、洗浄し不溶部のみの収量６２ｍｇ（３７％）を得た（ＭＦ２ｃ−１）。
反応が完全に進行していない可能性があるので、新たに乾燥したＮ−（１，２−ｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅｄｉｃａｒｂｏｎｙｌ）ｃｈｉｔｏｓａｎ ０．２４ｍｇに、ＤＭＡ ０．７５ｍｌに膨潤させた後、ＬｉＣｌを６５ｍｇとピリジン０．４ｍｌ、ｉｓｏｃｙａｎａｔｅを０．２１ｇ加えて２０時間反応させた後、新たにｉｓｏｃｙａｎａｔｅを０．２２ｇ加えたが不均一のまま４時間後メタノール不溶部として回収し、２１ｍｇ（４０％）の生成物を得た（ＭＦ２ｃ−２）。
［実施例７］ Ｎ−ｍａｌｅｎｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ３，６−ｂｉｓ（３，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）

上記反応式にしたがって、キトサン誘導体を製造した。まず、次の方法１のスキームのように行った。キトサン０．２１ｇに、まず酸性条件で０．３６ｇのｍａｌｅｉｃ ａｎｈｙｄｒｉｄｅを加えて１２時間、塩基性でさらに０．３５ｇの無水物を加えたが、析出した白色の沈殿が１２時間後も不溶のままであった。不溶部と可溶部を分離し、可溶部のみ酸性にすると、反応が進んだと思われるＩＲスペクトルが確認でき、２７ｍｇ（８％）の収率を得た（ＭＦ４ａ−１）。一方不溶部は全く反応が進んでおらず、さらに再反応を行ったが可溶部からは同程度の収率しか得られず、不溶部は未反応のままであった。次に１７ｍｇを２００℃減圧下で５時間加熱し、環化化合物１５ｍｇ（９５％）を得た（ＭＦ４ｂ−１）。
［実施例８］ Ｎ−ｍａｌｅｎｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ３，６−ｂｉｓ（３，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）

上記反応式にしたがって、キトサン誘導体を製造した。ＤＭＦ／水混合溶媒１０ｍｌにｍａｌｅｉｃ ａｎｈｙｄｒｉｄｅを０．３４ｇ溶解させ、キトサン０．２０ｇを加えて１２０℃で８時間半反応させ、冷水にあけて回収したところ、０．２３ｇ（７７％）の収量を得た（ＭＦ４ｂ−２）。
こちらでは反応の進行が確認されたため、この誘導体９８ｍｇを２００℃で乾燥させた後、ピリジン４ｍｌと３，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ ｉｓｏｃｙａｎａｔｅを２４０ｍｇ加えて反応させた。２１時間後、不溶部が多かったため９６ｍｇのｉｓｏｃｙａｎａｔｅを追加してさらに６時間反応させたが完全には溶解せず、メタノール／水＝５／１不溶部として回収した。収量は１７２ｍｇ（８０％）であった（ＭＦ４ｃ−１）。
［実施例９］
Ｎ−（４−ｃｈｌｏｒｏ）ｐｈｔｈａｌｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ｔｒｉｓ（３，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）
４−ｃｈｌｏｒｏｌｐｈｔｈａｌｉｃ ａｎｈｙｄｒｉｄｅ ３．６ｇをＤＭＦ／水＝９５／５ ３０ｍｌに溶解させ、キトサン１．０ｇを加えて１２０℃で８時間撹拌したところゲル化した。冷水２００ｍＬにあけ、遠心分離で回収し、２００℃オーブンで１．５時間加熱乾燥したところ、２．５ｇ（９５％）の収量を得た（ＭＦ９ｂ−２）。
このうち１．０ｇを乾燥させた後、ピリジン１５ｍｌ、３，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ ｉｓｏｃｙａｎａｔｅを１．３ｇ加えて撹拌し、２時間後に粘度が増大したためｐｙｒｉｄｉｎｅ７ｍＬを追加した。その４時間後に再びｉｓｏｃｙａｎａｔｅを１．０ｇ追加してさらに１６時間撹拌した。ＩＲで反応の進行を確認後、メタノールに再沈殿させて回収したところ、１．７ｇ（９２％）の収量を得た（ＭＦ９ｃ−２）。

［実施例１０］
Ｎ−（４−ｃｈｌｏｒｏ）ｐｈｔｈａｌｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ｔｒｉｓ（３，５−ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）
実施例９と同様にＭＦ９ｂ−２のうち１．０ｇを乾燥させた後、ピリジン１５ｍｌ、３，５−ｄｉｃｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌ ｉｓｏｃｙａｎａｔｅを１．６ｇ加えて撹拌し６時間後に再びｉｓｏｃｙａｎａｔｅを０．８ｇ追加してさらに１６時間撹拌した。ＩＲで反応の進行を確認後、メタノールに再沈殿させて回収したところ、２．３ｇ（９９％）の収量を得た（ＭＦ９ｄ−２）。

［実施例１１］
Ｎ−（４−ｃｈｌｏｒｏ）ｐｈｔｈａｌｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ｔｒｉｓ（３，４−ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）
実施例９と同様にＭＦ９ｂ−２のうち０．４ｇを乾燥させた後、ピリジン８ｍｌ、３，４−ｄｉｃｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌ ｉｓｏｃｙａｎａｔｅを１．２ｇ加えて８０℃で撹拌、１１時間後に再びｉｓｏｃｙａｎａｔｅを０．８ｇ追加してさらに１０時間撹拌した。ＩＲで反応の進行を確認後、メタノールに再沈殿させて回収したところ、０．８０ｇ（９５％）の収量を得た（ＭＦ９ｑ−１）。

［実施例１２］
Ｎ−ｐｈｔｈａｌｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ｔｒｉｓ（３，４−ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）
ｐｈｔｈａｌｉｃ ａｎｈｙｄｒｉｄｅ ５．７ｇをＤＭＦ／水−９５／５ １２０ｍｌに溶解させ、キトサン２．０ｇを加えて１２０℃で２０時間撹拌したところゲルが析出した。冷水２００ｍＬにあけ、遠心分離で回収したところ、３．３ｇ（９０％）の収量を得た（ＭＦ１ｂ−９）。
このうち１．０ｇを乾燥させた後、ピリジン２０ｍｌ、３，４−ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ ｉｓｏｃｙａｎａｔｅを１．７ｇ加えて撹拌し、時間後に再びｉｓｏｃｙａｎａｔｅを１．２ｇ追加してさらに１２時間撹拌した。ＩＲで反応の進行を確認後、メタノールに再沈殿させて回収したところ、２．４ｇ（９９％）の収量を得た（ＭＦ１ｑ−１）。

［実施例１３］
Ｎ−（４−ｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｔｈａｌｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ｔｒｉｓ（３，４−ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）
（４−ｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｔｈａｌｉｃ ａｎｈｙｄｒｉｄｅ ６．０ｇをＤＭＦ／水＝９５／５ １２０ｍｌに溶解させ、キトサン２．０ｇを加えて１２０℃で１１時間撹拌したところゲルが析出した。上澄みをのぞいて冷水２００ｍＬにあけ、遠心分離で回収したところ、３．３ｇ（８６％）の収量を得た（ＭＦ５ｂ−５）。
このうち１．０ｇを乾燥させた後、ピリジン２０ｍｌ、３，４−ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ ｉｓｏｃｙａｎａｔｅを１．７ｇ加えて８０℃で撹拌したところ、１４時間後粘度が高くなって来たのでｐｙｒｉｄｉｎｅ１０ｍＬとｉｓｏｃｙａｎａｔｅ０．５ｇを追加してさらに８時間撹拌した。ＩＲで反応の進行を確認後、メタノールに再沈殿させて回収したところ、２．３ｇを得た。ＤＭＳＯ不溶部を除いて再びメタノールに再沈殿させ、乾燥させて１．６ｇ（７２％）の収量を得た（ＭＦ５ｑ−１−ｒｅ）。

［実施例１４］ （光学異性体用分離剤の調製）
実施例９〜１３で得たキトサン誘導体を 実施例５と同様にシリカゲルにコーテイングし、カラム（内径０．４６ｃｍ）に充填した。 以下のようにカラム名を付けた。
Ｎ−（４−ｃｈｌｏｒｏ）ｐｈｔｈａｌｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ｔｒｉｓ（３，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）（ＭＦ９ｃ−２） → ＭＦｐ−２５
Ｎ−（４−ｃｈｌｏｒｏ）ｐｈｔｈａｌｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ｔｒｉｓ（３，５−ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）（ＭＦ９ｄ−２） → ＭＦｐ−２６
Ｎ−（４−ｃｈｌｏｒｏ）ｐｈｔｈａｌｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ｔｒｉｓ（３，４−ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）（ＭＦ９ｑ−１）→ ＭＦｐ−２７
Ｎ−ｐｈｔｈａｌｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ｔｒｉｓ（３，４−ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）（ＭＦ１ｑ−１） → ＭＦｐ−１８
Ｎ−（４−ｍｅｔｈｙｌ）ｐｈｔｈａｌｏｙｌ ｃｈｉｔｏｓａｎ ｔｒｉｓ（３，４−ｄｉｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）（ＭＦ５ｑ−１−ｒｅ） → ＭＦｐ−１９
応用例２（ＨＰＬＣによる測定）
実施例１４の各カラムを応用例１と同様にキラル固定相の光学分割能の評価結果を行った。 結果を次ぎに示す。

Claims (5)

1. 下記一般式（Ｉ）で示されるキトサン誘導体。
   

   

   （式中、
   Ｒ₁は、下記より選ばれたいずれかであり、
   

   

   Ｒ₂は、下記のものであり、
   

   

   ｎは５以上の整数を示す。Ｘは3,5−ジメチル、3,5−ジクロロまたは3,4−ジクロロである。）
2. 請求項１に記載のキトサン誘導体の製造方法であって、キトサンの２位のアミノ基をイミド化した後、キトサンの３位と６位の水酸基と、下記一般式のイソシアン酸誘導体を反応させる、キトサン誘導体の製造方法。
   

   

   （Ｘは3,5−ジメチル、3,5−ジクロロまたは3,4−ジクロロである。）
3. 請求項１に記載のキトサン誘導体を含む光学異性体用分離剤。
4. 請求項１に記載のキトサン誘導体の光学異性体用分離剤としての使用。
5. 請求項１に記載のキトサン誘導体を用いて光学異性体を分離する方法。