JP4855924B2 - 生物活性ベクターの放射性フッ素化法 - Google Patents

Description

本発明は、陽電子放出核種で標識した生物活性ベクターを含む診断薬及び放射線診断薬に関する。本発明はさらに、ベクターの［^１８Ｆ］フッ素化法及び試薬に関するが、ベクターとは生物学的標的に特異的な親和性を示す分子であると定義され、好ましくはペプチドである。得られた^１８Ｆ標識コンジュゲートは放射性医薬品、特に陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ）用の放射線医薬品として有用である。

画像診断用放射標識生物活性ペプチドの応用は核医学において重要性を増しつつある。特定の細胞型と選択的に相互作用する生物活性分子は、放射能を標的組織に送達するのに有用である。例えば、放射標識ペプチドは、画像診断及び放射線治療のための腫瘍、梗塞及び感染組織への放射性核種の送達に多大な可能性をもつ。^１８Ｆは半減期が約１１０分であり、多くの受容体イメージング検査に格好の陽電子放出核種である。したがって、^１８Ｆ標識生物活性ペプチドは、ＰＥＴで多種多様な疾患の定量的検出及び性質決定に有用性を保つので、多大な臨床的将来性がある。
国際公開第０１／７７４１５号パンフレット 国際公開第０３／００６４９１号パンフレット Ｗａｈｌ他、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｓ． ３７， ６８６１（１９９６） Ａｔｈｅｒｔｏｎ，Ｅ．及びＳｈｅｐｐａｒｄ，Ｒ．Ｃ．；"Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ"； ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ： Ｏｘｆｏｒｄ， １９８９ Ｂｒａｓｋ他、Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ． １１（２００１） ６９７−７００ Ｈａｋａ他、Ｊ．Ｌａｂｅｌｌｅｄ Ｃｐｄｓ． ＆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍｓ １９８９ ２７（７）８２３ Ｂｏｒｄｅｎ他、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．， １９８５， ５０， ５３１−５３４

^１８Ｆ標識ペプチドの問題の一つは、既存の^１８Ｆ標識剤は調製に時間がかかることである。ペプチド及びタンパク質の^１８Ｆでの効率的な標識は、好適な補欠分子族を用いたときにしか達成されない。かかる補欠分子族としては、Ｎ−スクシニミジル−４−［^１８Ｆ］フルオロベンゾエート、ｍ−マレイミド−Ｎ−（ｐ−［^１８Ｆ］フルオロベンジル）−ベンズアミド、Ｎ−（ｐ−［^１８Ｆ］フルオロフェニル）マレイミド、及び４−［^１８Ｆ］フルオロフェナシルブロミドを始めとして幾つか文献に記載されている。現在ペプチド及びタンパク質の^１８Ｆ標識に用いられている方法はほとんどすべてフッ素標識シントンの活性エステルを利用する。ペプチド及びタンパク質は、活性エステルと反応し得る官能基を複数含んでいる可能性があるので、こうした現行法は部位特異的ではない。例えば、リジン残基を３個含有するペプチドは、標識シントンに対して反応性がすべて等しいアミン官能基を３個有する。したがって、穏和な条件下で^１８Ｆを特にペプチドに迅速かつ化学選択的に導入して^１８Ｆ標識生成物を高い放射化学的収率及び純度で得ることができる^１８Ｆ標識補欠分子族及び方法に対するニーズが依然として存在する。さらに、臨床の場での放射性医薬品の合成を容易にする自動化に適した方法に対するニーズも存在する。

本発明は、式（Ｉ）の化合物と式（ＩＩ）の化合物との反応又は式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）化合物との反応によってそれぞれ式（Ｖ）又は（ＶＩ）のコンジュゲートを得ることを含んでなる放射性フッ素化法を提供する。

式中、Ｒ１は、アルデヒド基、ケトン基、アセタールのような保護アルデヒド、ケタールのような保護ケトン、又はジオールもしくはＮ末端セリン残基のような官能基であって、酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化することができるものである。

Ｒ２は、水性緩衝液のような穏和な条件下で、Ｒ１と部位特異的に反応して安定なコンジュゲートを与える官能基である。Ｒ２としては、第１級アミン、第２級アミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、ヒドラジド、アミノキシ、フェニルヒドラジン、セミカルバジド又はチオセミカルバジドのようなアンモニア誘導体があり、好ましくはヒドラジン、ヒドラジド又はアミノキシ基である。

Ｒ３は、Ｒ４と部位特異的に反応する官能基である。Ｒ３としては、第１級アミン、第２級アミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、ヒドラジド、アミノキシ、フェニルヒドラジン、セミカルバジド又はチオセミカルバジドのようなアンモニア誘導体があり、好ましくはヒドラジン、ヒドラジド又はアミノキシ基である。

Ｒ４は、アルデヒド基、ケトン基、アセタールのような保護アルデヒド、ケタールのような保護ケトン、又はジオールもしくはＮ末端セリン残基のような官能基であって、酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化することができるものである。

式中、Ｘは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＮＨＣＯＮＨ−又は−ＮＨＣＳＮＨ−、好ましくは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基である。

式（ＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）及び（ＶＩ）の化合物におけるリンカー基は以下の群から選択される。

式中、ｎは０〜２０の整数であり、
ｍは１〜１０の整数であり、
ｐは０又は１の整数であり、
ＺはＯ又はＳである。

式（ＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）及び（ＶＩ）の化合物におけるリンカー基は、得られる式（Ｖ）又は（ＶＩ）のコンジュゲートにおける好ましい排出特性など、良好なインビボ薬物動態が得られるように選択される。親油性及び／又は電荷の異なるリンカー基を使用することによって、診断の必要性に応じてペプチドのインビボ薬物動態を大きく変化させることができる。例えば、式（Ｖ）又は（ＶＩ）のコンジュゲートを腎排泄によって身体から除去することが望まれる場合には親水性リンカーを使用し、肝胆道排泄による除去が望ましい場合には疎水性リンカーを使用する。ポリエチレングリコール部分を含むリンカーは血液クリアランスが遅いことが判明しており、状況によっては望ましい。

好適には、Ｒ１アルデヒドは、１，２−ジオール又は１，２アミノアルコール基を含有する前駆体官能化ベクターのインサイツ酸化によって生成させる。例えば、後者は、Ｗａｈｌ他のＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｓ． ３７， ６８６１（１９９６）に記載のアミノ酸Ｆｍｏｃ−Ｄｐｒ（Ｂｏｃ−Ｓｅｒ）−ＯＨを用いた合成でペプチド配列に直接挿入することができる。同様に、式（ＩＶ）の化合物のＲ４アルデヒドは、前駆体の酸化によって生成し得る。

式（Ｉ）及び（ＩＶ）の化合物においてそれぞれＲ１又はＲ４部分の生成に使用し得る好適な酸化剤としては、過ヨウ素酸塩、過ヨウ素酸、パラ過ヨウ素酸、メタ過ヨウ素酸ナトリウム及びメタ過ヨウ素酸カリウムが挙げられる。

式（Ｉ）及び（ＩＶ）の化合物並びに本発明の関連する態様におけるＲ１及びＲ４は、好ましくは−ＣＨＯ、＞Ｃ＝Ｏ、−ＣＨ（−ＯＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ−）のような−ＣＨ（−Ｏ−Ｃ_１〜４アルキル−Ｏ−）、及び−ＣＨ（ＯＣＨ_３）_２のような−ＣＨ（ＯＣ_１〜４アルキル）_２から選択され、好ましい態様では、Ｒ１及びＲ４は−ＣＨＯである。

式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の化合物並びに本発明の関連する態様におけるＲ２及びＲ３は、好ましくは−ＮＨＮＨ_２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ_２、及び−ＯＮＨ_２から選択され、好ましくは−ＯＮＨ_２である。

式（Ｖ）及び（ＶＩ）の化合物並びに本発明の関連する態様におけるＹは、好ましくはＨ、Ｃ_１〜６アルキル（メチルなど）又はフェニルである。

この反応は、適当な溶媒、例えばｐＨ域２〜１１、好適には３〜１１、さらに好適には３〜６の水性緩衝液中、５〜７０℃の適度な温度、好ましくは室温で実施し得る。

本発明は、化学選択性の高い放射標識法を提供し、ペプチド又はベクター前駆体の合成時に標識の正確な導入部位を予め選択できる。ライゲーション反応はベクターの予め選定した所定の部位で起こり、生成する可能性のある生成物は１種類である。この方法は化学選択的であり、多種多様なペプチド、生体分子及び低分子量薬剤全般に応用できると考えられる。

別の態様では、本発明は、式（Ｉａ）の化合物と式（ＩＩａ）の化合物との反応又は式（ＩＩＩａ）の化合物と式（ＩＶａ）化合物との反応によってそれぞれ式（Ｖａ）又は（ＶＩａ）のコンジュゲートを得ることを含んでなる放射性フッ素化法を提供する。

式中、Ｒ１及びＲ４は、それぞれ式（Ｉ）及び（ＩＶ）の化合物に関して上記で定義した通りであり、
式（ＩＩａ）及び（ＩＶａ）の化合物におけるリンカー基は各々Ｃ_１〜６０ヒドロカルビル基、好適にはＣ_１〜３０ヒドロカルビル基であって、適宜酸素又は窒素のような１〜３０個のヘテロ原子、好適には１〜１０個のヘテロ原子を含むものである。好適なリンカー基としては、アルキル、アルケニル、アルキニル鎖、芳香族、ポリ芳香族及びヘテロ芳香族環、さらにエチレングリコール、アミノ酸又は炭水化物サブユニットを含むポリマーが挙げられる。

式中、ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基であり、リンカー基は、式（ＩＩａ）又は（ＩＶａ）の化合物に関して定義した通りである。

「ヒドロカルビル基」という用語は、炭素と水素からなる有機置換基をいい、かかる基は、飽和、不飽和又は芳香族部分を含んでいてもよい。

好ましい態様では、本発明は、式（ＶＩＩ）の化合物と式（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）又は（ＸＩ）の化合物との反応によってそれぞれ式（ＸＩＩ）〜（ＸＶ）の化合物を得ることを含む放射性フッ素化法を提供する。

式中、ｎは０〜２０の整数であり、
ｍは１〜１０の整数であり、
Ｘは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−、好ましくは−Ｏ−であり、
ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基である。

式中、Ｘは、式（ＶＩＩ）の化合物に関して定義した通りであり、ｍ及びｎは、式（ＶＩＩＩ〜ＸＩ）の化合物に関して定義した通りである。

反応は、適当な溶媒、例えばｐＨ域２〜１１、好適には３〜１１、さらに好適には３〜６の水性緩衝液中、５〜７０℃の適度な温度、好ましくは室温で実施し得る。

式（Ｉ）もしくは（ＩＩＩ）のベクター化合物又は式（ＩＩ）もしくは（ＩＶ）のシントンのアミン部分を官能基として使用する場合、また本発明のさらに具体的に記載した態様においても、得られたシッフ塩基を安定化させるための還元段階を含んでいると有用である考えられる。この段階での好適な還元剤は、当業者に周知であり、水素化ホウ素ナトリウム及びシアノ水素化ホウ素ナトリウムが挙げられる。

別の好ましい態様では、本発明は、式（ＸＶＩ）の化合物と式（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）又は（ＸＸ）の化合物との反応によってそれぞれ式（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）又は（ＸＸＩＶ）の化合物を得ることを含んでなる放射性フッ素化法を提供する。

式中、ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基である。

式中、ｍ及びｎは、前述の化合物に関して定義した通りであり、Ｗは−ＣＯＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−である。

式中、Ｗは−ＣＯＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、
ｍ、ｎは、式（ＸＩＩＩ〜ＸＩ）の化合物に関して定義した通りであり、ＹはＨ、アルキル又はアリール部分である。

この反応は、適当な溶媒、例えばｐＨ域２〜１１、好適には３〜１１、さらに好適には３〜６の水性緩衝液中、５〜７０℃の適度な温度、好ましくは室温で実施し得る。

式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）並びに本発明のその他の態様では、特記しない限り、標識に適したベクターはペプチドであり、ソマトスタチンアナログ、例えばオクトレオチド、ボンベシン、血管作用性小腸ペプチド、走化性ペプチドアナログ、αメラニン細胞刺激刺激ホルモン、ニューロテンシン、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチドとそのアナログ、ヒトプロインスリン連結ペプチド、エンドセリン、アンジオテンシン、ホルミル−ノルロイシル−ロイシル−フェニルアラニル−ノルロイシル−チロシル−リジンが挙げられる。標識に好ましいペプチドはＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチドとそのアナログ、例えば国際公開第０１／７７４１５号及び同第０３／００６４９１号に記載されたものである。好ましいペプチドは以下のフラグメントを含む。

ある具体的態様では、式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）のペプチドは式（Ａ）のものである。

式中、Ｘ^７は、−ＮＨ_２又は次式式のものである。

式中、ａは１〜１０の整数、好ましくは１である。

当業者には自明であろうが、本発明の方法は、その他の生体分子、例えばタンパク質、ホルモン、オリゴヌクレオチド、抗体フラグメントなど、並びに薬剤様低分子の放射性フッ素化に使用して様々なＰＥＴトレーサーを得ることができる。

式（ＩＩａ）及び（ＩＶａ）並びに本発明のその他の態様では、特記しない限り、リンカーはＣ_１〜６０ヒドロカルビル基、好適にはＣ_１〜３０ヒドロカルビル基であり、適宜、酸素又は窒素のような１〜３０個のヘテロ原子、好適には１〜１０個のヘテロ原子を含んでいてもよく、良好なインビボ薬物動態が得られるように選択される。好適なリンカー基としては、アルキル、アルケニル、アルキニル鎖、芳香族、ポリ芳香族及びヘテロ芳香族環、並びにエチレングリコール、アミノ酸又は炭水化物サブユニットを含むポリマーが挙げられる。式（ＩＩａ）及び（ＩＶａ）並びに本発明のその他の態様における好ましいリンカー基としては、以下の群から選択されるものが挙げられる。

式中、ｎは０〜２０の整数であり、
ｍは１〜１０の整数であり、
ｐは０又は１の整数であり、ＺはＯ又はＳである。

式（ＩＩａ）及び（ＩＶａ）並びに本発明のその他の態様における特に好ましいリンカー基は、以下の群から選択し得る。

式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）の化合物は、ペプチド合成の常法、例えばＡｔｈｅｒｔｏｎ，Ｅ．及びＳｈｅｐｐａｒｄ，Ｒ．Ｃ．，”Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”， ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ： Ｏｘｆｏｒｄ， １９８９に記載の固相ペプチド合成で調製し得る。式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の化合物への基Ｒ１及びＲ３の導入は、ペプチドのＮ末端又はＣ末端の反応、或いはペプチド配列中の他の官能基でその修飾によってベクターの結合特性が影響されないものとの反応で達成できる。好ましい例では、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社から市販のアミノ酸Ｆｍｏｃ−Ａｍｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ又はＦｍｏｃ−Ｄｐｒ（Ｂｏｃ−Ａｏａ）−ＯＨを使用して、アミノキシ基、ＮＨ_２−Ｏ−をペプチド配列に直接導入することができる。官能基Ｒ１及びＲ３は、好ましくは、ペプチドアミノ官能基と活性化酸との反応によって形成された安定なアミド結合の形成によって導入され、ペプチドの合成中又は合成後に導入される。前駆体が酸である場合、Ｒ１及びＲ３は、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）やＮ−［（ジメチルアミノ）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド（ＨＡＴＵ）のような活性化剤をその場で使用して導入することができる。

別の態様では、本発明は、例えば上述の方法によるペプチド及びタンパク質の標識に有用な新規な^１８Ｆ−補欠分子族を提供する。

そこで、式（ＩＩ）又は式（ＩＶ）の化合物、或いは式（ＩＩａ）、（ＩＶａ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）、（ＸＩ）、（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）又は（ＸＸ）の化合物が提供されるが、これらはすべて上記で定義した通りであり、以下の事項を条件とする。
（ｉ）式（ＩＩ）の化合物においてリンカーがフェニルであるときは、Ｒ２はアミノキシ（好適には−ＯＮＨ_２）である。
（ｉｉ）式（ＩＶ）の化合物ではリンカーはフェニルではない。
（ｉｉｉ）式（ＩＶａ）の化合物では、リンカーはフェニルでも、ハロ、ヒドロキシ又はベンジルオキシで置換されたフェニルでもない。
（ｉｖ）式（Ｘ）の化合物では、ｎは０ではない。

本明細書に記載の方法で用いられる式（ＩＶ）の好ましい化合物であって、それ自体特許請求の範囲に記載される化合物には、以下のものがある。

別の態様では、本発明は、式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）の化合物、並びに式（Ｉａ）、（ＩＩＩａ）、（ＶＩＩ）、（ＸＶＩ）の化合物を提供するが、これらはすべて上記で定義した通りである。式（Ｉ）、（ＩＩＩ）、（Ｉａ）、（ＩＩＩａ）、（ＶＩＩ）及び（ＸＶＩ）の好ましい化合物は、ベクターがＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド又はその上述のアナログであるものであり、特にベクターが式（Ａ）であるものである。

式中、Ｘ^７は−ＮＨ_２又は次式のものである。

式中、ａは１〜１０の整数、好ましくは１である。

別の態様では、本発明は、式（Ｖ）及び（ＶＩ）の放射標識コンジュゲート、並びに式（Ｖａ）、（ＶＩａ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）、（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）、（ＸＸＩＶ）の化合物を提供するが、これらはすべて上記で定義した通りである。式（Ｖ）、（ＶＩ）、（Ｖａ）、（ＶＩａ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）、（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）及び（ＸＸＩＶ）の好ましい化合物は、ベクターがＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド又はその上述のアナログであるものであり、特にベクターが式（Ａ）のものである

式中、Ｘ^７は−ＮＨ_２又は次式の式のものである。

式中、ａは１〜１０の整数、好ましくは１である。

式（ＩＩ）の化合物は、対応する式（ＸＸＶ）の前駆体から、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシドのような適当な溶媒中、通常室温又は昇温（例えば最高１５０℃、好適には６０〜１２０℃）で、或いはマイクロ波加熱によって、サイクロトロン生成水性［^１８Ｆ］フッ化物（好適には、塩基（例えば、テトラブチルアンモニウム又はＫ_２ＣＯ_３／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ−２２２）からの蒸発によって予め活性化しておいたもの）と反応させた後、酸分解処理のような常法でＮ−保護基を除去することによって調製し得る。

式中、Ｌは脱離基、好ましくはｐ−トルエンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネートもしくはメタンスルホネート又はハロゲン化物であり、リンカーは上記で定義した通りであり、Ｘは、好ましくは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、Ｒ５及びＲ６は、Ｈ、又はｔ−ブチルオキシカルボニルなどの好適な保護基である。

式（ＩＶ）の化合物は、対応する式（ＸＸＶＩ）の前駆体又はその保護誘導体から、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシドのような適当な溶媒中、通常室温又は昇温（例えば最高１２０℃）で、サイクロトロン生成水性［^１８Ｆ］フッ化物（好適には、塩基（例えば、テトラブチルアンモニウム又はＫ_２ＣＯ_３／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ−２２２）からの蒸発によって予め活性化しておいたもの）と反応させることによって調製し得る。式（ＸＸＶＩ）の化合物のアルデヒド又はケトン官能基は、フッ素化後の単なる酸処理によって、アセタールやケタールのような保護前駆体から迅速に生成させることもできる。

式中、Ｌは脱離基、好ましくはｐ−トルエンスルホネート、トリフルオロメタンスルホネート、又はメタンスルホネート、或いはハロゲン化物であり、リンカーは、前に定義した通りであり、Ｙは、好ましくはＨ、アルキル又はアリール置換基である。好ましい例では、式（ＩＶ）の化合物は式（ＸＸＶＩＩ）の化合物から調製される。

式中、Ｌは、ｐ−トルエンスルホネートやトリフルオロメタンスルホネート、メタンスルホネート、ハロゲン化物などの脱離基であり、リンカーは、上記で定義した通りであり、アミド結合を介して保護セリン誘導体に連結している。この場合、Ｏ−保護基Ｒ６は好ましくはｔ−ブチルであり、Ｒ５は上記で定義した通りである。アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド又はジメチルスルホキシドのような適当な溶媒中、通常室温又は昇温（例えば最高１５０℃、好適には６０〜１２０℃）で、或いはマイクロ波加熱によって、サイクロトロン生成水性［^１８Ｆ］フッ化物（好適には、塩基（例えば、テトラブチルアンモニウム又はＫ_２ＣＯ_３／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ−２２２）からの蒸発によって予め活性化しておいたもの）と反応させた後、Ｏ及びＮ−保護基を除去し、過ヨウ素酸塩のような酸化剤でアルデヒドに酸化させる。

ある好ましい態様では、式（ＩＶ）の化合物は、Ｂｒａｓｋ他のＢｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ． １１（２００１） ６９７−７００に記載のＢＡＬ法を用いて、ポリマービーズ、コーティング、マイクロデバイスのような固体担体上、例えば樹脂上で調製し得る。ペプチドアルデヒドは、ＰＥＧ−ＡＭＰＳ樹脂上でのアミノアセトアルデヒドジメチルアセタールによるＯ−ＰＡＬアルデヒドの還元的アミノ化から開始し、リンカー成分でのアシル化によって合成される。この態様では、ポリマー結合生成物から過剰の試薬及び放射性フッ素化反応の副生物を洗浄によって分離し得る。酸処理によって、以下に示す通り、固体担体から式（ＩＶ）の化合物が直接得られる。

式中、Ｌ及びリンカーは、上述の通りである。

この方法は、式（ＩＶ）の化合物の自動合成に特に適している。

本発明は、有効量（例えば、インビボＰＥＴイメージング用に有効な量）の一般式（Ｖ）又は（ＶＩ）の化合物或いは式（Ｖａ）、（ＶＩａ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）、（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）又は（ＸＸＩＶ）の化合物であって、すべて上記で定義した化合物を、薬学的に許容される１種以上の補助薬、賦形剤又は希釈剤と共に含む放射性医薬品組成物も提供する。

本発明の好ましい実施形態は、医療用、特に腫瘍イメージング（好適にはＰＥＴ）用の一般式（Ｖ）又は（ＶＩ）の化合物、或いは式（Ｖａ）、（ＶＩａ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）、（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）又は（ＸＸＩＶ）の化合物に関する。これらの化合物はすべて上記で定義したものであり、ベクターはＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド又はそのアナログであって、例えば国際公開第０１／７７４１５号及び同第０３／００６４９１号に記載のようなもの、好ましくは、以下のフラグメントを含むペプチドである。

さらに好ましくは、ベクターは式（Ａ）のペプチドである

式中、Ｘ^７は、−ＮＨ_２又は次式のものである。

式中、ａは１〜１０の整数、好ましくは１である。

本発明の放射標識コンジュゲートは、ＰＥＴイメージングのため、所望の信号が得られる十分な量で患者に投与すればよく、典型的な放射性核種投与量は体重７０ｋｇ当たり０．０１〜１００ｍＣｉ、好ましくは０．１〜５０ｍＣｉで通常十分である。

したがって、本発明による放射性標識コンジュゲートは、当業者の技術常識に属する方法で、生理学的に許容される担体又は賦形剤を用いて投与用に処方すればよい。例えば上述の化合物は、適宜薬学的に許容される賦形剤を添加して、水性媒体に懸濁又は溶解し、次いで得られた溶液又は懸濁液を滅菌すればよい。別の態様では、本発明は、インビボイメージング法、好適にはＰＥＴ、好ましくは腫瘍のイメージング法で使用される放射性医薬品を製造するための本発明の放射性標識コンジュゲートの使用を提供し、放射性医薬品をヒト又は動物の身体に投与し、身体の少なくとも一部の画像を生成することを含む。

さらに別の態様では、本発明は、ヒト又は動物の身体の画像を生成する方法を提供するが、当該方法は、身体、例えば血管系に本発明に係る放射標識コンジュゲートを含む放射性医薬品を投与し、ＰＥＴを用いて放射性医薬品を分布させた身体の少なくとも一部の画像を生成することを含む。

別の態様では、本発明は、癌に付随する症状に作用する薬剤、好ましくは血管形成を抑制する薬剤（例えば細胞障害性薬剤）によるヒト又は動物の身体の治療効果をモニターする方法を提供するが、当該方法は、本発明に係る放射標識コンジュゲートを身体に投与し、細胞受容体、好ましくは内皮細胞受容体、特にαｖβ３受容体によるコンジュゲートの取込みを検出することを含み、投与及び検出を、適宜、しかし好ましくは、上記薬剤による治療前、治療中及び治療後に繰返し実施する。

本発明のさらに別の実施形態では、式（ＩＩ）又は（ＩＶ）の補欠分子族と式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の化合物を含む、放射性フッ素化トレーサー調製用キットを提供する。

本発明の別の態様では、式（ＸＸＶ）の補欠分子族と式（Ｉ）の化合物を含む、放射性フッ素化トレーサー調製用キットを提供する。本発明の別の態様では、式（ＸＸＶＩ）又は（ＸＸＶＩＩ）の補欠分子族と式（ＩＩＩ）の化合物を含む、放射性フッ素化トレーサー調製用キットを提供する。

キットの使用に際して、上述の方法を用いて、式（ＸＸＶ）の化合物を対応する式（ＩＩ）の化合物に、式（ＸＸＶＩ）又は（ＸＸＶＩＩ）の化合物を対応する式（ＩＶ）の化合物にそれぞれ変換する。好ましくは、式（ＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物は、反応混合物を固相抽出（ＳＰＥ）カートリッジに流して、不要な反応体から分離し得る。ＳＰＥカートリッジには、グラファイトパッド、Ｃ_１８固定相又はイオン交換樹脂を含むものがある。次いで式（ＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物を、式（Ｉ）及び（ＩＩＩ）の化合物にそれぞれ添加するが、これは水性緩衝液（ｐＨ３〜１１）に好適に溶解し得る。適度な温度で１〜７０分間反応させた後、標識ペプチドを例えばＳＰＥで精製し、回収すればよい。

以下の実施例によって本発明を例証するが、実施例では以下の略語を用いる。

ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＮＭＲ：核磁気共鳴
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ｈｒ（ｓ）：時間
ｍｉｎ（ｓ）：分
ＤＭＡＰ：４−（ジメチルアミノ）ピリジン
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＴＢＡＦ：フッ化テトラブチルアンモニウム
ＭｅＯＨ：メタノール
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー
ＴＩＳ：トリイソプロピルシラン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＰｙＡＯＰ：［７−アザベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウム−ヘキサフルオロホスフェート］
Ｂｏｃ：ｔ−ブトキシカルボニル。

実施例１： ４−トリメチルアンモニウムベンズアルデヒドトリフレート（化合物１）の合成

本化合物は、Ｈａｋａ他（Ｊ．Ｌａｂｅｌｌｅｄ Ｃｐｄｓ． ＆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍｓ １９８９ ２７（７）８２３）に記載の方法で合成した。

実施例２： ２−（２−｛２−［２−（２−フルオロ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−１，１−ジメトキシ−エタン（化合物７）の合成

ａ）酢酸２−（２−｛２−［２−（２，２−ジメトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルエステル（化合物４）の合成
ＴＨＦ（５ｍｌ）中に懸濁した水素化ナトリウム（２４８ｍｇ、鉱油中５．１５ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、２−｛２−［２−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エタノール（化合物２）（１．０ｇ、５．１５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍｌ）溶液をシリンジを介して室温で添加した。気体発生が止まった後、混合物を室温で４５分間撹拌したところ、その時点までに若干黄色がかった透明溶液が得られた。ブロモアセトアルデヒド（８．７１ｇ、５１．５ｍｍｏｌ）をシリンジで添加し、混合物を２４時間撹拌した。次いで酢酸エチル（３ｍｌ）を添加し、混合物を室温でさらに２時間撹拌した。この混合物をエーテル（１００ｍｌ）に注入し、１０％Ｋ_２ＣＯ_３水溶液（３０ｍｌ）及び塩水（３０ｍｌ）で１回ずつ抽出した。有機相を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、蒸発させた。残留油を蒸留して、過剰ブロモアセトアルデヒドを除去し、残留粗生成物を、１００％酢酸エチルを用いたフラッシュクロマトグラフィーで精製して、生成物（３５５ｍｇ、２１％）を無色オイルとして得た。

ｂ）２−（２−｛２−［２−（２，２−ジメトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エタノール（化合物５）
メタノール（３ｍｌ）中の酢酸２−（２−｛２−［２−（２，２−ジメトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルエステル（化合物４）（１１０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に１Ｎ ＮａＯＨ／メタノール（１ｍｌ）を室温で添加した。反応をＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ、９：１）でモニターし、３０分以内で完了した。溶媒を蒸発させ、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ、９：１）で精製して、生成物（７３ｍｇ、７６％）を無色オイルとして得た。

ｃ）メタンスルホン酸２−（２−｛２−［２−（２，２−ジメトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−エチルエステル（化合物６）
ＴＨＦ（１ｍｌ）中のアルコール（化合物５）（６０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（５９μｌ、０．４２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、塩化メタンスルホニル（２４：１、０．３０ｍｍｏｌ）を添加した。反応をＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ、９：１）でモニターした。２時間後、沈殿したトリエチルアミン塩酸塩を濾別した。溶媒を蒸発させ、クロロホルム／メタノール（９：１）を用いたフラッシュクロマトグラフィーの後に、生成物（７５ｍｇ、９９％）をオイルとして得た。

ｄ）２−（２−｛２−［２−（２−フルオロ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）−１，１−ジメトキシ−エタン（化合物７）
アセトニトリル（８ｍｌ）中のスルホネート（化合物６）（７５ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）とＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１．１Ｍ、５７３μｌ、０．６３ｍｍｏｌ）の混合物を９０℃で３０分間加熱した。ＴＬＣ（酢酸エチル）でモニターして反応が完了したことを確認した。室温に冷却し、溶媒を蒸発させた後、残留物をフラッシュ乾燥（酢酸エチル）して、生成物（５６ｍｇ、９３％）を無色オイルとして得た。

実施例３： ４−（３−フルオロプロポキシ）ベンズアルデヒドの合成（化合物１０）

ａ）４−（３−ヒドロキシエトキシ）ベンズアルデヒド（化合物８）
ＤＭＦ（３０ｍｌ）中の４−ヒドロキシベンズアルデヒド（Ｆｌｕｋａ、４．９ｇ、０．０４０ｍｏｌ）と炭酸ナトリウム（４．７ｇ、０．０４４ｍｏｌ）と３−ブロモ−１−プロパノール（６．１ｇ、０．０４４ｍｏｌ）の溶液を１４０℃で８時間加熱した。反応混合物を冷却し、濃縮し、残留物をエーテルに取り、水洗し、乾燥させた（Ｎａ_２ＳＯ_４）。濾過及び濃縮で黄色シロップ４．６ｇ（６４％）が得られたが、これはそれ以上精製せずに次の段階で使用した。構造はＮＭＲ分析で確認した。

ｂ）メタンスルホン酸３−（４−ホルミルフェノキシ）エチルエステル（化合物９）
ジクロロメタン（１０ｍｌ）中のアルコール１２（１．４ｇ、８．０ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（１．２ｍｌ、８．５ｍｍｏｌ）及び塩化メシル（０．６２ｍｌ、８．０ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１．５時間撹拌した後、反応混合物を水洗し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）して、粗製物（黄色オイル）１．８ｇを得た。２９０ｍｇのアリコートを逆相クロマトグラフィー（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８（２）５μｍ ２１．２×２５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：６０分間で２０〜４０％、流量１０．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２５４ｎｍ）で精製し、凍結乾燥後２４４ｍｇの白色固形物を得た。構造はＮＭＲ分析で確認した。

ｃ）４−（３−フルオロプロポキシ）ベンズアルデヒド（化合物１０）
フッ化カリウム（Ｆｌｕｋａ、７．２ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）及びＫｒｙｐｔｏｆｉｘ ２２２（Ｆｌｕｋａ、４６．７ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）を乾燥アセトニトリル（２．５ｍｌ）に溶解した。１０分後、混合物を、メタンスルホン酸３−（４−ホルミルフェノキシ）プロピルエステル１３（１６．０ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）の乾燥アセトニトリル（１．５ｍｌ）撹拌溶液に添加した。反応混合物を６０℃で３０分間加熱した。生成物を、分析用ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８（２）３μｍ ４．６×５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で１０〜８０％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、ＵＶ検出波長２１４及び２５４ｎｍ）で、市販標準物質（Ｆｌｕｏｒｏｃｈｅｍ）と同時に５．０分で溶出したことから確認した。

実施例４： １，１ジメトキシ−４−フルオロメチルシクロヘキサンの合成（化合物１４）

ａ）４−ヒドロキシメチルシクロヘキサノン（化合物１１）
本化合物はＢｏｒｄｅｎ他（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．， １９８５， ５０， ５３１−５３４）に記載の方法で合成した。生成物は１Ｈ及び１３Ｃ ＮＭＲで特性決定した。

ｂ）１，１−ジメトキシ−４−ヒドロキシメチルシクロヘキサン（化合物１２）
乾燥メタノール（３０ｍｌ）中のケトン１１（２．５４ｇ、１９．８ｍｍｏｌ）、オルトギ酸トリメチル（９．７５ｍｌ、８９．１ｍｍｏｌ）とｐ−トルエンスルホン酸（１５０ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）の溶液を窒素中室温で２４時間撹拌した。反応混合物を、固形炭酸カリウム（４ｇ）で中和し、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗製物をＤＣＭ（３０ｍｌ）に溶解し、水（４０ｍｌ）で洗浄した。有機相を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、蒸発させた。黄色の粗製オイル（３．０ｇ）を８５Ｃで蒸留（０．２ｍｍＨｇ）して、生成物（１．６９ｇ、４９％）を無色オイルとして得た。生成物は１Ｈ及び１３Ｃ ＮＭＲで特性決定した。

ｃ）メタンスルホン酸４，４−ジメトキシ−シクロヘキシルメチルエステル（化合物１３）
乾燥ＤＣＭ（５ｍｌ）中のアルコール１２（２７５ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（３．３ｍｌ、２３．７ｍｍｏｌ）の冷却（０Ｃ）溶液に、窒素中で、塩化メタンスルホニル（２４６ｕｌ、３．１６ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。沈殿したトリエチルアミン塩酸塩を濾別し、溶媒を蒸発させた。粗製物をＤＣＭ（３０ｍｌ）に溶解し、水洗し（２×２０ｍｌ）、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、蒸発させた。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ミネラルスピリット：ＮＨ_３（５０：５０：４））で精製して、生成物（２１４ｍｇ、５４％）を薄黄色オイルとして得た。生成物は１Ｈ及び１３Ｃ ＮＭＲで特性決定した。

実施例５： ペプチド前駆体の合成（化合物１５）
ペプチド化合物１４を標準的ペプチド合成法を用いて合成した。化合物１４（１５０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液を、Ｂｏｃ−アミノキシ酢酸（３４．４ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、ＰｙＡＯＰ（９３．９ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（４０μｌ、０．３６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液に添加した。ＤＭＦを、１２時間後に真空蒸発させ、粗生成物を調製用逆相クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５３−Ｖ０、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：６０分間で１０〜５０％Ｂ、流量５０ｍｌ／分、検出波長２５４ｎｍ）で精製して純粋な化合物９７．１ｍｇ（５７％）を得た（分析用ＨＰＬＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０、溶媒Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１９．４分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。質量分析法でさらに特性決定したところ、ｍ／ｚ値１４３１．２［Ｍ−Ｈ^＋］であった。

実施例６： 化合物１と化合物１５との化学選択的ライゲーションによる化合物１６の合成

ペプチド１５の脱保護を、水分量５％のＴＦＡをペプチド１０ｍｇに添加して実施した。１ｍｌ水中のＢｏｃ脱保護ペプチド（５．９ｍｇ、０．００４４ｍｍｏｌ）を、１ｍｌアセトニトリル中の４−フルオロベンズアルデヒド（化合物１）（１．１ｍｇ、０．９４μｌ、０．００８９ｍｍｏｌ）に添加した。混合物のｐＨは３．５であった。４５分後、７０度で、混合物を調製用逆相クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５３−Ｎ０、溶媒Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜４０％Ｂ、流量５．０ｍｌ／分、２１４ｎｍで検出）で２回精製して、純粋な化合物２．０ｍｇ（３２％）を得た（分析用ＨＰＬＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０、溶媒Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１６．３分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。質量分析法でさらに特性決定したところ、ｍ／ｚ値１４３７．２［Ｍ−Ｈ^＋］であった。

実施例７： 化合物７と化合物１５との化学選択的ライゲーションによる化合物１７の合成

２−（２−｛２−［２−（２−フルオロ−エトキシ）−エトキシ］−エトキシ｝−エトキシ）１，１−ジメトキシエタン６（３．９ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）の保護基を、濃ＨＣｌのアセトニトリル溶液（１：１）（０．５ｍｌ）を用いて除去した。混合物を１５分間放置し、次いで、化合物９（１０ｍｇ、０．００７ｍｍｏｌ）を水分量５％のＴＦＡで処理してから２０分後にＴＦＡを真空蒸発させて得たＢｏｃ脱保護ペプチドに添加した。アンモニアで混合物のｐＨを４に調節し、次いで７０度で２０分間加熱した。分析用ＨＰＬＣ及びＬＣ−ＭＳを用いて反応をモニターし、調製用逆相クロマトグラフィー（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５３−Ｎ０、溶媒Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ、勾配：３０分間で１０〜５０％Ｂ、流量５．０ｍｌ／分、２１４ｎｍで検出）で精製して、純粋な化合物を５．５ｍｇ（５１％）得た（分析用ＨＰＬＣ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８カラム，００Ｇ−４２５２−Ｅ０、溶媒Ａ＝水＋０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ＋０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１４．３及び１４．７分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。質量分析法でさらに特性決定したところ、ｍ／ｚ値１５５１．１［Ｍ−Ｈ^＋］であった。

実施例８： ^１８ Ｆ−化合物１６の放射標識合成
ａ） ^１８ Ｆ−化合物１の放射標識合成
^１８Ｆ−フッ化物（最大３７０ＭＢｑ）をＫｒｙｐｔｏｆｉｘ ２２２（０．５ｍｌのＭｅＣＮ中１２〜１４ｍｇ）及び炭酸カリウム（０．１Ｍ水溶液１００μｌ）の存在下、Ｎ_２中で１２５℃に１５分間加熱して共沸乾燥した。この間、２×１ｍｌのＭｅＣＮを添加し、蒸発させた。＜４０℃に冷却した後、トリメチルアンモニウムベンズアルデヒドトリフレート溶液（０．７ｍｌのＤＭＳＯ中３〜７ｍｇ）を添加した。反応容器を密閉し、１２０℃で１５分間加熱して標識させた。粗製反応混合物を室温に冷却し、１０ｍｌの水に添加して希釈した。混合物を、Ｓｅｐ−ｐａｋ ＣＭ−ｐｌｕｓカートリッジ（１０ｍｌの水でコンディショニング）及びＳｅｐＰａｋ Ｃ１８−ｐｌｕｓカートリッジ（２０ｍｌのＥｔＯＨ及び２０ｍｌのＨ_２Ｏでコンディショニング）に連続して流した。これらのカートリッジに水（１０ｍｌ）をフラッシュし、生成物の^１８Ｆ−フルオロベンズアルデヒドを、ＳｅｐＰａｋ Ｃ１８−ｐｌｕｓカートリッジからＭｅＯＨ（１ｍｌ）で溶出した。

ｂ）化合物１５と４− ^１８ Ｆ−フルオロベンズアルデヒドとの結合
化合物１５（４〜５ｍｇ）を水分量５％のＴＦＡで室温で５分間処理した。次いで溶媒を真空蒸発によって除去した。ペプチドを、０．５Ｍ ＮＨ_４ＯＡｃ緩衝液、ｐＨ４（０．５ｍｌ）に再び溶解し、反応容器内で４−^１８Ｆ−フルオロベンズアルデヒドと一緒にした。反応容器を密閉し、７０℃に１５分間加熱して結合させた。室温に冷却した後、調製用放射標識ＨＰＬＣ（カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｐｒｏｄｉｇｙ ＯＤＳ−Ｐｒｅｐ、２５０×１０ｍｍ、１０μ、４ｍｌ／分、溶媒Ａ：Ｈ_２Ｏ（０．５％ＴＦＡ）、溶媒Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ（０．５％ＴＦＡ）、勾配：５分間で１０％Ｂ、１５分間で１０〜４０％Ｂ）で生成物を得た。

実施例９： ^１８ Ｆ−化合物１７の放射標識合成
ａ） ^１８ Ｆ化合物７の放射標識合成
Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ ２２２（１０ｍｇ）、炭酸カリウム（５０μｌ水中１ｍｇ）及びアセトニトリル（０．８ｍｌ）を仕込んだＷｈｅａｔｏｎバイアル（２ｍｌ）に、フッ素−１８を含有する水（１０ｍＣｉ、１ｍｌ）を添加した。窒素気流下１１０℃で３０分間加熱して溶媒を除去した。無水アセトニトリル（０．５ｍｌ）を添加し、同様に蒸発させた。この段階を２回繰り返した。無水ＤＭＳＯ（０．２ｍｌ）中の化合物６（１ｍｌ）の溶液を添加した。マイクロ波（５分、１６０℃、１５０→５０Ｗ）で加熱した後、反応混合物を室温に冷却し、ＭｅＣＮ（５ｍｌ）及びＨ_２Ｏ（２０ｍｌ）でコンディショニングしたＳｅｐＰａｋ ^ｔＣ１８−ｐｌｕｓカートリッジに流した。カートリッジに水（１０ｍｌ）をフラッシュし、生成物をＭｅＣＮ（０．５ｍｌ）で溶出した。８０℃の窒素気流を用いて溶媒を蒸発させた。ＨＣｌ（３４μｌ、１２Ｍ）とＭｅＣＮ（３４μｌ）の混合物を添加し、バイアルを室温で５分間放置した。

ｂ）化合物１５と ^１８ Ｆ−化合物７との結合
化合物１５（３ｍｇ）をＴＦＡ／５％Ｈ_２Ｏ（０．２ｍｌ）と反応させた。室温で１分間静置した後、窒素気流で溶媒を除去した。脱保護した^１８Ｆ−化合物７の入ったバイアルに水酸化アンモニウム（３８μｌ、２８％）を添加した。中和混合物を、酢酸アンモニウム緩衝液（５０μｌ、ｐＨ４．０、０．５Ｍ）中の脱保護化合物１５の入ったバイアルに移した。バイアルを７０℃で７分間インキュベートした。室温に冷却し、ＨＰＬＣ移動相（１００μｌ、２０％ＭｅＣＮ、８０％Ｈ_２Ｏ、０．５％ＴＦＡ）を添加した後、調製用放射標識ＨＰＬＣ［カラム：Ｌｕｎａ Ｃ１８（２）、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、１００×１０ｍｍ、５μ、４ｍｌ／分、溶媒Ａ：Ｈ_２Ｏ（０．５％ＴＦＡ）、溶媒Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ（０．５％ＴＦＡ）、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ］で生成物を得た。

実施例１０： ４−（フルオロメチル）ベンゾイル］ヒドラジドの合成−化合物２３

アルデヒド又はケトン修飾ペプチドとの結合用のトリ−ｔ−ブチル２−［４−（フルオロメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレートの合成
ａ）ｔ−ブチル２−［４−（ヒドロキシメチル）ベンゾイル］−ヒドラジノ−１−カルボキシレートの合成−化合物１８

ジクロロメタン（２０ｍｌ）中の４−ヒドロキシメチル安息香酸ペンタフルオロフェニルエステル（Ｍｉｌｌｉｇｅｎ、０．６０ｇ、１．９ｍｍｏｌ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．２９ｇ、１．９ｍｍｏｌ）、カルバジン酸ｔ−ブチル（Ｆｌｕｋａ、０．２９ｇ、２．２ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（０．６８ｍｌ、４．０ｍｍｏｌ）の溶液を３時間還流した。反応混合物を真空濃縮し、生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／ヘキサン ９：１）で精製した。収量は０．５０ｇ（９０％）。分析用ＨＰＬＣ：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８（２） ３μｍ ４．６×５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で１０〜８０％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間２．３８分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ。ＮＭＲ分析は上記構造と一致した。

ｂ）ｔ−ブチル２−［４−（ｔ−ブチルジフェニルシロキシメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１−カルボキシレートの合成−化合物１９

ジクロロメタン（６０ｍｌ）中のｔ−ブチルジフェニルクロロシラン（０．５７ｍｌ、２．２ｍｍｏｌ）、ｔ−ブチル２−［４−（ヒドロキシメチル）ベンゾイル］−ヒドラジノ−１−カルボキシレート（０．４８ｇ、１．８ｍｍｏｌ）及びイミダゾール（０．３７ｇ、５．４ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１時間１５分撹拌した。この溶液を、硫酸水素カリウム水溶液で抽出し（ｐＨ３、３×２０ｍｌ）、乾燥した（Ｎａ_２ＳＯ_４）。生成物を、ＨＰＬＣ（カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８（２） ３μｍ ４．６×５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で６０〜１００％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間３．３７分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）で分析した。溶液を濃縮し、生成物をそれ以上精製せずに次の段階で使用した。

ｃ）トリ−ｔ−ブチル２−［４−（ｔ−ブチルジフェニルシロキシメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレートの合成−化合物２０

ジクロロメタン（１５ｍｌ）中のｔ−ブチル２−［４−（ｔ−ブチルジフェニルシロキシメチル）ベンゾイル］−ヒドラジノ−１−カルボキシレート（６９ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＡＰ（２０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．１３ｍｌ、０．９６ｍｍｏｌ）及びジ−ｔ−ブチル−ジカーボネート（９０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を添加した。２時間後、減圧下で溶媒を蒸発させ、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン／酢酸エチル、４：１）で精製した（分析用ＨＰＬＣ：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８（２） ３μｍ ４．６×５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で６０〜１００％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間７．８５分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。構造はＮＭＲ分析で確認した。

ｄ）トリ−ｔ−ブチル２−［４−（ヒドロキシメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレートの合成−化合物２１

ＴＨＦ（２５ｍｌ）中のトリ−ｔ−ブチル２−［４−（ｔ−ブチルジフェニルシロキシメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレート（０．３７ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）の溶液に、フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＨＦ中１．１Ｍ、０．５０ｍｌ、０．５５ｍｍｏｌ）を添加した。５０分後、塩化アンモニウム水溶液（１０％、１０ｍｌ）を添加した。１０分後、この混合物をジクロロメタンで抽出し（３×１５ｍｌ）、有機相を乾燥した（Ｎａ_２ＳＯ_４）。溶液を濃縮し、残留物を、カラムクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン／酢酸エチル １：１）で精製して、生成物０．２１ｇ（８４％）を得た（分析用ＨＰＬＣ：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８（２）３μｍ ４．６×５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で６０〜１００％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間１．３８分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。構造はＮＭＲ分析で確認した。

ｅ）トリ−ｔ−ブチル２−［４−（メタンスルホネートメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレートの合成−化合物２１

ジクロロメタン（４０ｍｌ）中のトリ−ｔ−ブチル２−［４−（ヒドロキシメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレート（０．２２ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．０８０ｍｌ、０．５７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、塩化メタンスルホニル（０．０４０ｍｌ、０．５２ｍｍｏｌ）を添加した。２時間後、２回目として塩化メタンスルホニル及びトリエチルアミン（同量）を添加した。１２時間後、分析用ＨＰＬＣ（カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８（２）３μｍ ４．６×５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で１０〜８０％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間８．２５分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）で、反応が完了したことを確認した。混合物を、シリカに通して濾過し、真空濃縮した。生成物を、カラムクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン／酢酸エチル １：１）で精製し、０．２１ｇ（８１％）を得た。ＮＭＲ分析は上記構造と一致した。

ｆ）トリ−ｔ−ブチル２−［４−（フルオロメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレートの合成−化合物２２

フッ化カリウム（３．０ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）及びＫｒｙｐｔｏｆｉｘ ２２２（Ｆｌｕｋａ、２０ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）を、乾燥アセトニトリル（０．６ｍｌ）に溶解した。１５分後、混合物を、乾燥アセトニトリル（０．４ｍｌ）中のトリ−ｔ−ブチル２−［４−（メタンスルホネートメチル）ベンゾイル］ヒドラジノ−１，１，２−トリカルボキシレート（１４ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。反応混合物を６０℃で１５分間加熱した。生成物を調製用ＨＰＬＣ（カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８（２）５μｍ ２１．２×２５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：６０分間で６０〜１００％Ｂ、流量１０．０ｍｌ／分、保持時間３３分、２１４ｎｍで検出）で精製した。収量は３．２ｍｇ（２６％）。分析用ＨＰＬＣ：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８（２）３μｍ ４．６×５０ｍｍ、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で１０〜８０％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間８．７８分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ。構造はＮＭＲ分析で確認した。化合物２３を得るための化合物２２の脱保護を５０％ＴＦＡ／ＤＣＭで１５分間行った。

実施例１１： アミノキシ、ヒドラジン又はヒドラジド修飾ペプチドとの結合用の２−［２−（２−フルオロメチル−フェニルスルファニル）−エチル］−［１，３］−ジオキソランの合成−化合物２７

ａ）［２−（２−［１，３］ジオキソラン−２−イルエチルスルファニル）フェニル］メタノールの合成−化合物２４

２−（２−ブロモエチル）−１，３−ジオキソラン（２２３μｌ、１．８６ｍｍｏｌ）を、２−メルカプトベンジルアルコール（５２．３ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１０２．３、０．７４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液に添加した。混合物を室温で一晩撹拌した後、減圧下でＤＭＦを蒸発させ、粗生成物を、調製用逆相クロマトグラフィー（Ｖｙｄａｃ ２１８ＴＰ１０２２カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：４０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１０ｍｌ／分、２１４ｎｍで検出）で精製した。６５．１ｍｇの収量で精製物を得た（分析用ＨＰＬＣ：Ｖｙｄａｃ ２１８ＴＰ５４カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１５．０１７分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。

ｂ）２−［２−（２−クロロメチル−フェニルスルファニル）−エチル］−［１，３］ジオキソランの合成−化合物２５

塩化メシル（６５μｌ、０．８３ｍｍｏｌ）を、［２−（２−［１，３］ジオキソラン−２−イル−エチルスルファニル）フェニル］−メタノール（４０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（１１６μｌ、０．８３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液に添加した。５日後、沈殿物を濾別し、ＴＨＦを減圧下で蒸発させ、粗生成物を、調製用逆相クロマトグラフィー（Ｖｙｄａｃ ２１８ＴＰ１０２２カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：４０分間で４０〜８０％Ｂ、流量１０ｍｌ／分、検出波長２５４ｎｍ）で精製した。画分を冷蔵庫内に一晩放置し、アセトニトリル相にジエチルエーテルを添加し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下で蒸発させた。２４．５ｍｇの収量で精製物を得た（分析用ＨＰＬＣ：Ｖｙｄａｃ ２１８ＴＰ５４カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で４０〜８０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１０．４分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。構造はＮＭＲで確認した。

ｃ）２−［２−（２−フルオロメチル−フェニルスルファニル）−エチル］−［１，３］ジオキソランの合成−化合物２６

フッ化カリウム（３．５ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）及びＫｒｙｐｔｏｆｉｘ ２２２（２２．５ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１ｍｌ）に溶解し、２−［２−（２−クロロメチル−フェニルスルファニル）−エチル］−［１，３］ジオキソラン（７．７ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１ｍｌ）溶液に添加した。反応混合物を７０度で３０分間加熱した。粗生成物を、調製用逆相クロマトグラフィー（Ｖｙｄａｃ ２１８ＴＰ１０２２カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：４０分間で４０〜８０％Ｂ、流量１０ｍｌ／分、検出波長２５４ｎｍ）で精製した。画分を冷蔵庫内に一晩放置し、アセトニトリル相にジエチルエーテルを添加し、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下で蒸発させた（分析用ＨＰＬＣ：Ｖｙｄａｃ ２１８ＴＰ５４カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で４０〜８０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間９．２００分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。構造はＮＭＲで確認した。

実施例１２： ４−フルオロメチルベンズアルデヒドの合成−化合物２９

ａ）（４−ホルミルフェニル）メチルメタンスルホネートの合成−化合物２８

塩化メシル（１２．８μｌ、０．１６ｍｍｏｌ）を、４−（ヒドロキシメチル）ベンズアルデヒドジメチルアセテート（３０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（２２．９μｌ、０．１６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液に添加した。１時間後、さらに同量の塩化メシル及びトリエチルアミンを添加した。１時間後、沈殿物を濾別し、ＴＨＦを減圧下で蒸発させた。粗生成物をシリカ短カラム及びＤＣＭを用いて精製し、純粋な生成物４２．０ｍｇ（９８％）を得た（分析用ＨＰＬＣ：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ００Ｂ−４２５１−Ｅ０、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で５〜５０％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間４．９００分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。構造はＮＭＲで確認した。

ｂ）４−フルオロメチルベンズアルデヒドの合成−化合物２９

ＫＦ（２．７ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）及びｋｒｙｐｔｏｆｉｘ ２２２（１７．６ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１ｍｌ）に溶解して、（４−ホルミルフェニル）メチルメタンスルホネート（１０ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１ｍｌ）溶液に添加した。反応混合物を６５度で１０分間加熱した。粗生成物を、シリカ短カラム及びジエチルエーテルを用いて精製した（分析用ＨＰＬＣ：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ００Ｂ−４２５１−Ｅ０、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で５〜５０％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間５．１分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。

実施例１３： 官能化オキシトシン（ジスルフィドＣｙｓ ^１−６ ）アナログ；［ＢｏｃＮＨＯＣＨ _２ ＣＯ−Ａｈｘ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＮＨ _２ ］の合成−化合物３０

保護Ａｈｘ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２：完全自動合成（ＡＢＩ ４３３Ａ）を用いたアミノ酸配列の構築。樹脂を手動式バブラー装置に入れ、５％の水及び５％のＴＩＳを含むＴＦＡで切断した。１時間後、ＴＦＡを減圧下で蒸発させた。得られた沈殿物をエーテルで洗浄し、自然乾燥した。ＴＦＡ及びＤＭＳＯ（９５：５）をペプチドに添加した。２時間後、ＴＦＡを減圧下で蒸発させ、残留物にジエチルエーテルを添加した。得られた沈殿物をエーテルで洗浄し、自然乾燥した。ペプチド（７０．６ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）溶液を、Ｂｏｃ−アミノキシ酢酸（２３．９ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、ＰｙＡＯＰ（６５．２ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（２７．５μｌ、０．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍｌ）溶液に添加した。ＤＭＦを、１２時間後に減圧下で蒸発させた。粗生成物を、調製用逆相クロマトグラフィー（Ｖｙｄａｃ ２１８ＴＰ１０２２カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：４０分間で１０〜６０％Ｂ、流量１０ｍｌ／分、２３０ｎｍで検出）で精製した（分析用ＨＰＬＣ：Ｖｙｄａｃ ２１８ＴＰ５４カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１６．５分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。質量分析法でさらに特性決定したところ、ｍ／ｚ値１２９３．０［ＭＨ^＋］であった。

実施例１４： ４−フルオロメチル−ベンズアルデヒドとオキシトシン（ジスルフィドＣｙｓ ^１−６ ）；［ＮＨ _２ ＯＣＨ _２ ＣＯ−Ａｈｘ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＮＨ _２ ］との結合−化合物３１

ＴＦＡ及び５％の水を使用して、オキシトシン（ジスルフィドＣｙｓ^１−６）；［Ｂｏｃ−ＮＨＯＣＨ_２ＣＯ−Ａｈｘ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２］（３．０ｍｇ、０．００２３ｍｍｏｌ）からＢｏｃ保護基を切断した。ＴＦＡを３０分後に減圧下で蒸発させ、水（０．５ｍｌ）中の４−フルオロメチル−ベンズアルデヒド（１．５ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）を添加し、ｐＨを希釈アンモニアで４に調節した。混合物を７０度で５０分間加熱した（分析用ＨＰＬＣ：カラムＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ００Ｂ−４２５１−Ｅ０、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：１０分間で１０〜６０％Ｂ、流量２．０ｍｌ／分、保持時間６．３分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。質量分析法でさらに特性決定したところ、ｍ／ｚ値１３１３．１［ＭＨ^＋］であった。

実施例１４： ３−（２−フルオロメチル−フェニルスルファニル）−プロピオンアルデヒドとオキシトシン（ジスルフィドＣｙｓ ^１−６ ）；［ＮＨ _２ ＯＣＨ _２ ＣＯ−Ａｈｘ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＮＨ _２ ］）との結合−化合物３２

結合に先だって、実施例６に記載の通りペプチド部分からＢｏｃ基を除去した。アセトニトリル０．１ｍｌ中の１Ｎ ＨＣｌ（１：１）を使用して、３−（２−フルオロメチル−フェニルスルファニル）−プロピオンアルデヒド（０．８１ｍｇ、０．００３４ｍｍｏｌ）の保護基を除去した。混合物を３０分間放置し、その後、０．４ｍｌ水中のペプチド（２．０ｍｇ、０．００１７ｍｍｏｌ）に添加し、ｐＨを希釈アンモニアで４に調節した。混合物を７０度で５０分間加熱した（分析用ＨＰＬＣ：Ｖｙｄａｃ ２１８ＴＰ５４カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１９．８分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。質量分析法でさらに特性決定したところ、ｍ／ｚ値１３７３．５［ＭＨ^＋］であった。

実施例１５： 化合物７とオキシトシン（ジスルフィドＣｙｓ ^１−６ ）；［ＮＨ _２ ＯＣＨ _２ ＣＯ−Ａｈｘ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＮＨ _２ ］）との結合−化合物３３

ＴＦＡ及び５％の水を使用して、Ｂｏｃ保護基を、オキシトシン（ジスルフィドＣｙｓ^１−６）；［Ｂｏｃ−ＮＨＯＣＨ_２ＣＯ−Ａｈｘ−Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＮＨ_２］（２．５ｍｇ、０．００１９ｍｍｏｌ）から切断した。ＴＦＡを、３０分後に減圧下で蒸発させた。アセトニトリル０．５ｍｌ中の１Ｎ ＨＣｌ（１：１）を使用して、化合物７（１．０ｍｇ、０．００４１ｍｍｏｌ）の保護基を除去した。混合物を３０分間放置し、その後ペプチドに添加し、ｐＨを希釈アンモニアで４に調節した。混合物を７０度で１５分間加熱した（分析用ＨＰＬＣ：カラムＶｙｄａｃ ２１８ＴＰ５４カラム、溶媒Ａ＝水／０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ、勾配：２０分間で１０〜５０％Ｂ、流量１．０ｍｌ／分、保持時間１５．１及び１５．４分、検出波長２１４及び２５４ｎｍ）。質量分析法でさらに特性決定したところ、ｍ／ｚ値１４１３．５［ＭＨ^＋］であった。

これらの実施形態は本発明の幾つかの態様を例示するためのものであり、本明細書及び請求項に記載された発明の技術的範囲は本明細書に開示した特定の実施形態によって限定されるものではない。いかなる均等な実施形態も本発明の技術的範囲に属する。実際、本明細書に記載したもの以外の本発明の様々な変形例は、本明細書の記載から当業者には明らかであろう。かかる変形例も、特許請求の範囲に包含される。

Claims (28)

1. 式（Ｉ）の化合物と式（ＩＩ）の化合物との反応又は式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）化合物との反応によってそれぞれ式（Ｖ）又は（ＶＩ）のコンジュゲートを得ることを含んでなる放射性フッ素化方法。
   式中、Ｒ１は、アルデヒド基、ケトン基、保護アルデヒド、保護ケトン又は官能基であって、酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化することができるものであり、
   Ｒ２は、第１級アミン、第２級アミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、ヒドラジド、アミノキシ、フェニルヒドラジン、セミカルバジド及びチオセミカルバジドから選択される基であり、
   Ｒ３は、第１級アミン、第２級アミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、ヒドラジド、アミノキシ、フェニルヒドラジン、セミカルバジド又はチオセミカルバジドから選択される基であり、
   Ｒ４は、アルデヒド基、ケトン基、保護アルデヒド、保護ケトン又は官能基であって、酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化することができるものである。
   式中、Ｘは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＮＨＣＯＮＨ−又は−ＮＨＣＳＮＨ−であり、ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基であり、
   式（ＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）及び（ＶＩ）の化合物におけるリンカー基は以下の群から選択される。
   式中、ｎは０〜２０の整数であり、
   ｍは１〜１０の整数であり、
   ｐは０又は１の整数であり、
   ＺはＯ又はＳである。
2. Ｒ２がヒドラジン、ヒドラジド又はアミノキシ基であり、Ｒ３がヒドラジン、ヒドラジド又はアミノキシ基であり、Ｘが−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−である、請求項１記載の方法。
3. 式（Ｉａ）の化合物と式（ＩＩａ）の化合物との反応又は式（ＩＩＩａ）の化合物と式（ＩＶａ）化合物との反応によってそれぞれ式（Ｖａ）又は（ＶＩａ）のコンジュゲートを得ることを含んでなる放射性フッ素化方法。
   式中、Ｒ１及びＲ４は、アルデヒド基、ケトン基、保護アルデヒド、保護ケトン又は官能基であって、酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化することができるものであり、
   式（ＩＩａ）及び（ＩＶａ）の化合物におけるリンカー基は各々Ｃ₁〜₆₀ヒドロカルビル基又は１〜３０個のヘテロ原子含むＣ ₁ 〜 ₆₀ ヒドロカルビル基である。
   式中、ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基であり、リンカー基は式（ＩＩａ）又は（ＩＶａ）の化合物に関して定義した通りである。
4. 式（ＶＩＩ）の化合物と式（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）又は（ＸＩ）の化合物との反応によってそれぞれ式（ＸＩＩ）〜（ＸＶ）の化合物を得ることを含んでなる放射性フッ素化方法。
   式中、ｎは０〜２０の整数であり、
   ｍは１〜１０の整数であり、
   Ｘは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、
   ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基である。
   式中、Ｘは、式（ＶＩＩ）の化合物に関して定義した通りであり、ｍ及びｎは式（ＶＩＩＩ乃至ＸＩ）の化合物に関して定義した通りである。
5. 式（ＸＶＩ）の化合物と式（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）又は（ＸＸ）の化合物との反応によってそれぞれ式（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）又は（ＸＸＩＶ）の化合物を得ることを含んでなる放射性フッ素化方法。
   式中、ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基である。
   式中、ｍは１〜１０の整数であり、ｎは１〜２０の整数であり、Ｗは−ＣＯＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−である。
   式中、Ｗは−ＣＯＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、
   ｍ、ｎは、式（ＸＩＩＩ）〜（ＸＩ）の化合物に関して定義した通りであり、ＹはＨ、アルキル又はアリール部分である。
6. 前記ベクターがＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド又はそのアナログである、請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の方法。
7. 前記ベクターが以下のフラグメントを含む、請求項６記載の方法。
   
8. 前記ベクターが式（Ａ）のものである、請求項６又は請求項７記載の方法。
   式中、Ｘ₇は−ＮＨ₂又は以下の式のものであり、
   式中、ａは１〜１０の整数である。
9. 請求項１で定義した式（ＩＩ）の化合物、又は請求項３で定義した式（ＩＩａ）の化合物であって、式（ＩＩ）の化合物においてリンカーがフェニルであるときはＲ２がアミノキシであることを条件とする化合物。
10. 式（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）又は（ＸＸ）の化合物。
    式中、ｍは１〜１０の整数であり、ｎは１〜２０の整数であり、Ｗは−ＣＯＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−である。
11. 請求項１で定義した式（ＩＶ）の化合物又は請求項３で定義した式（ＩＶａ）の化合物であって、
    （ｉ）式（ＩＶ）の化合物においてリンカーがフェニルではなく、
    （ｉｉ）式（ＩＶａ）の化合物においてリンカーがフェニルでも、ハロ、ヒドロキシ又はベンジルオキシで置換されたフェニルでもないことを条件とする化合物。
12. 式（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）又は（ＸＩ）の化合物。
    式中、ｎは０〜２０の整数であり、
    ｍは１〜１０の整数であり、
    Ｘは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、
    ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基であり、式（Ｘ）の化合物ではｎが０ではないことを条件とする。
13. 請求項１で定義した式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の化合物、或いは請求項３で定義した式（Ｉａ）又は（ＩＩＩａ）の化合物。
14. 前記ベクターがＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド又はそのアナログである、請求項１３記載の化合物。
15. 前記ベクターが式（Ａ）のものである、請求項１３又は請求項１４記載の化合物。
    式中、Ｘ⁷は、−ＮＨ₂又は以下の式のものであり、
    式中、ａは１〜１０の整数である。
16. 請求項１で定義した式（Ｖ）又は（ＶＩ）の化合物。
17. 請求項３で定義した式（Ｖａ）又は（ＶＩａ）の化合物。
18. 請求項４で定義した式（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）の化合物。
19. 請求項５で定義した式（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）、（ＸＸＩＶ）の化合物。
20. 前記ベクターがＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐペプチド又はそのアナログである、請求項１６乃至請求項１９のいずれか１項記載の化合物。
21. 前記ベクターが以下のフラグメントを含む、請求項２０記載の化合物。
    
22. 前記ベクターが、式（Ａ）のものである、請求項２０記載の化合物。
    式中、Ｘ⁷は−ＮＨ₂又は以下の式のものであり、
    式中、ａは１〜１０の整数である。
23. 次式の化合物。
    
24. 請求項１６乃至請求項２３のいずれか１項記載の化合物の有効量を、薬学的に許容される１種以上の補助薬、賦形剤又は希釈剤と共に含む、放射性医薬品組成物。
25. 医療用の、請求項１６乃至請求項２３のいずれか１項記載の化合物。
26. インビボイメージング法で使用される放射性医薬品を製造するための、請求項１６乃至請求項２３のいずれか１項記載の化合物の使用。
27. ヒト又は動物の身体の画像を生成する方法であって、ＰＥＴを用いて、請求項１６乃至請求項２３のいずれか１項記載の化合物が分布した身体の少なくとも一部の画像を生成することを含む方法。
28. 癌に付随する症状に作用する薬剤によるヒト又は動物の身体の治療の効果をモニターする方法であって、請求項２０乃至請求項２３のいずれか１項記載の化合物の取込みを検出することを含む方法。