JP3154285B2 - コラゲナーゼ活性阻害剤 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、生薬成分である荊芥エ
キス、あるいは薄荷エキスを歯周病の予防剤および治療
剤として含有するコラゲナーゼ活性阻害剤であり更に詳
しくは、飴類、飲料等の食品やガム、洗口液、歯磨等の
口腔用組成物に好適なコラゲナーゼ活性阻害剤に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】歯周病は、歯周組織における種々の病態
を含む炎症性疾患の総称であるが、一般に炎症が歯肉部
分に限定される歯肉炎と、歯槽骨に達して慢性化する歯
周炎とに大別される。歯周炎は歯槽膿漏とよばれていた
が、慢性化に伴い歯肉及び歯槽骨の破壊をきたし歯の脱
落にいたる。歯を失う原因の５０％が歯周病であり、中
高年にかけては約８０％の人が罹患している。

【０００３】歯周病の原因として、歯周ポケットのプラ
ーク中の特定の細菌群、中でも黒色色素産生性のバクテ
ロイデス（Bacteroides)菌群病原説が有力視されている
（例えば、Journal of Clinical Periodontology、13
巻、912 頁、1986年参照）。その歯周組織破壊作用とし
ては、細菌由来の直接作用因子（酵素やエンドトキシン
等）や間接作用因子（宿主の免疫応答を介するもの）が
関与していると考えられているが、何れにせよ結果的に
歯肉および歯槽骨のコラーゲンが分解・吸収される点は
共通である（American Journal of Pathology 、92巻、
509 頁、1978年参照）。

【０００４】歯周病に関わるコラーゲン分解酵素（コラ
ゲナーゼ）としては、バクテロイデス由来のものと歯肉
の線維芽細胞由来のものが注目されている。前者は最近
部分精製された、金属とチオールを同時に要求する珍し
い酵素であるが、まだ不明な点が多い（Journal of Per
iodontal Research 、23巻、258 頁、1988年参照）。

【０００５】一方、線維芽細胞由来の間質型コラゲナー
ゼ（以下断りの無い限りコラゲナーゼと呼ぶ）は詳細に
解明され、１次構造も明らかにされている（The Journa
l ofBiological Chemistry、261 巻、6600頁、1986年参
照) 。

【０００６】コラゲナーゼは、結合組織中の間質型コラ
ーゲン（Ｉ型、ＩＩ型、およびＩＩＩ型コラーゲン）を
分解する際の律速酵素であり、コラーゲンの代謝に重要
な役割を果たしている。炎症の存在する歯肉ではコラゲ
ナーゼ活性が上昇すること(Journal of Periodontal Re
search、16巻、417 頁、1981年参照）、またコラーゲン
が歯肉炎の初期の段階から減少していること(Archieves
of Oral Biology、18巻、899 頁、1973年参照) を考慮
すると、歯肉のコラゲナーゼが歯周病の進行に深く関わ
っていると考えられる。

【０００７】従来、歯周病の予防や治療には、スケーリ
ングやルートプレーニングによる歯周ポケット内のプラ
ークや歯石の除去、歯周ポケットの除去（歯肉切除）等
が用いられていた。

【０００８】また、最近薬物療法として抗菌剤ミノサイ
クリンを配合した治療剤が開発された。ミノサイクリン
には、抗菌活性のみならずバクテロイデスおよび好中球
由来コラゲナーゼをイン・ビトロで阻害する活性を有す
ることが報告されている（Journal of the Japanese As
sociation of Periodontology 、30巻、182 頁、1988年
参照）。

【０００９】上記公知の方法は、医師の指示に従った物
理的、外科的、あるいは薬剤による治療に基づくもので
ある。しかし、歯周病は日常的で罹患率の高い疾病であ
り、また、医師による治療に至るまでに病状が悪化し易
いことを考慮すると、ガム、飴、飲料のような食品や、
歯磨剤、洗口剤のような口腔用組成物として、前記の病
因を除去し歯周病の予防や治療に役立つ安全性の高い物
質を利用することが望まれる。

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】従って本発明の目的と
するところは、歯周病の予防・治療効果が期待でき、し
かも安全性の高い、生薬由来のコラゲナーゼ活性阻害剤
を提供するにある。

【００１１】

【課題を解決するための手段】上述の目的は、生薬成分
である荊芥エキス、あるいは薄荷エキスを有効成分とし
て含有することを特徴とするコラゲナーゼ活性阻害剤に
よって、達成される。

【００１２】本発明において用いられるエキスは、茎に
対生した葉および花穂からなる荊芥、あるいは薄荷の地
上部等から、下記の通り製造することが出来る。

【００１３】各生薬の刻み、あるいは粉末に対し重量比
で５〜３０倍の抽出溶剤を加え、通常６０〜１００℃で
３０分〜２時間加熱して各生薬の抽出液を得る。

【００１４】抽出溶剤には水、水溶性有機溶剤あるいは
これらの混合溶剤を使用する。

【００１５】次に抽出液をろ過あるいは遠心分離して不
溶物を除去し、次いで通常の濃縮手段、例えば減圧濃縮
し、濃縮エキスとするか、あるいは通常の乾燥手段、例
えば減圧乾燥、噴霧乾燥あるいは凍結乾燥により乾燥エ
キス末とする。

【００１６】本発明のコラゲナーゼ活性阻害剤には、上
記の濃縮エキスあるいは乾燥エキス末にその種類に応じ
て通常使用される公知の成分を任意に配合することがで
きる。

【００１７】本発明のコラゲナーゼ活性阻害剤を適用す
る対象物としては、液剤，固形剤，半固形剤のいずれで
あってもよく、好ましい組成物としてチューインガム，
飴類，飲料等の食品，あるいは、歯磨剤，洗口剤，トロ
ーチ剤，塗布液剤等の口腔用組成物が挙げられる。

【００１８】これらの組成物を製造するのに使用される
賦形剤または補助剤は、通常同目的に使用されるものか
ら剤形に応じて適宜選択すればよく、特に限定されるも
のではないが、例えば乳糖、ステアリン酸マグネシウ
ム、ソルビット、マンニット、カルボキシメチルセルロ
ース、ハイドロキシプロピルセルロース、ハイドロキシ
プロピルメチルセルロース、サッカリン、ラウリル硫酸
ナトリウム、ラウロイルサルコシンナトリウム、グリセ
リン、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコー
ル、カラギナン、アラビアゴム、エタノール、メントー
ル、脂肪酸、クエン酸、無水ケイ酸、第二リン酸カルシ
ウム、ハイドロキシアパタイト、炭酸カルシウム、二酸
化チタン等が使用される。

【００１９】更に、通常食品に用いられる甘味料、着色
料、香料、保存料などを適宜使用することもできるし、
クロルヘキシジンなどの殺菌剤、アンピシリンなどの抗
生物質を配合し、歯周病の予防や改善効果を高めること
もできる。

【００２０】この様にして製造される組成物中に占める
荊芥エキス、あるいは薄荷エキスの割合は、適用対象物
により異なり、一概には規定出来ないが、適用対象物全
体を１００重量％としたとき、それぞれ乾燥エキス末と
して0.002 〜10.0重量％程度が好ましく、更に好ましく
は0.02〜6.０重量％である。

【００２１】

【発明の効果】本発明のコラゲナーゼ活性阻害剤は荊芥
エキス、あるいは薄荷エキスを含有している為に、歯周
病における歯肉および歯槽骨のコラーゲン吸収の原因で
あるコラゲナーゼに対し優れた阻害活性を有し、歯周病
の予防および治療に有用で、且つ配合量の多少に関わら
ず使用上の安全性も極めて高いものである。

【００２２】

【実施例】以下、試験例及び実施例によって、本発明を
更に詳細に説明する。

【００２３】（試験例−１）荊芥エキス、あるいは薄荷
エキスのコラゲナーゼ阻害作用

【００２４】１. 試験薬 荊芥エキス（下記実施例１の乾燥エキス末） 薄荷エキス（下記実施例２の乾燥エキス末）

【００２５】２. コラゲナーゼ コラゲナーゼとしては、ヒト線維肉腫細胞由来の足場非
依存性細胞に、無血清無蛋白質培地中で産生させたヒト
プロコラゲナーゼを、ＣＭセファロース^TM（ファルマシ
ア社製）および亜鉛キレーティングセファロース^TM（フ
ァルマシア社製）により精製して緩衝液に溶解し、これ
に活性化剤としてトリプシン（シグマ社製，Ｔｙｐｅ１
２）を添加して、３５℃にて５分間インキュベートした
後、ダイズトリプシン インヒビター（メルク社製）を
添加してトリプシンを失活させたものを用いた（特開平
3-103178号参照）。

【００２６】３. コラゲナーゼ阻害活性の測定 コラゲナーゼに対する荊芥エキス、あるいは薄荷エキス
の阻害活性の測定は、以下の通り行った。先ず、試験薬
を測定用緩衝液〔0.2M食塩、5mM 塩化カルシウム、0.05
容量％Brij-35(ＩＣＩ社製ポリオキシエチレン(23)ラウ
リルエーテル）、および0.02容量％アジ化ナトリウムを
含有する50mMトリス塩酸緩衝液、pH7.5〕にて溶解して
０．１重量％溶液を得、さらに測定用緩衝液にて３〜３
００倍希釈した。

【００２７】各希釈液と、既知量（0.7 単位; なお１単
位は、３５℃で１分間に１μｇのＩ型コラーゲンを分解
する酵素量を示す）の上記コラゲナーゼ溶液とを等量混
合し、フルオレッセインイソチオシアネートで標識され
たＩ型コラーゲン（コスモバイオ社製）を基質として、
永井らの方法（Japanese Journal of Inflamation、4
巻、123 頁、1984年参照）に準じコラゲナーゼ活性を測
定することにより、阻害曲線を求め、それより５０％阻
害するに必要な試験薬量をＩＣ₅₀値として読み取った。

【００２８】４. 試験結果 表１および表２に結果を示す。荊芥エキスあるいは薄荷
エキスに、用量依存的なコラゲナーゼ阻害活性がみら
れ、ＩＣ₅₀値はそれぞれ１１８μｇ／ml、６０μｇ／ml
であった。

【００２９】

【表１】

【００３０】

【表２】

【００３１】実施例１ （荊芥乾燥エキスの製造） 荊芥の刻み１Kgに水１５ｌを加えて加熱し、１００℃で
１時間還流抽出した。抽出液をろ過し、約１ｌまで減圧
濃縮後、凍結乾燥して荊芥乾燥エキス末１６０ｇを得
た。

【００３２】実施例２ （薄荷乾燥エキスの製造） 薄荷の刻み１kgを用いて実施例１と同様に操作し、薄荷
乾燥エキス末１８０ｇを得た。

【００３３】

【００３４】常法に従って上記処方の荊芥エキスを１重
量％含む練歯磨剤を製造した。即ち、水、グリセリン、
カラギナン、サッカリン、パラオキシ安息香酸ブチル、
クロルヘキシジンジグルコネート、香料、および荊芥エ
キスの処方量を計量し、混合して粘結剤を膨潤させたの
ち、第２リン酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウムを
加え、更によく混合し脱泡したのち、チューブに充填し
て練歯磨剤を得た。

【００３５】実施例４（練歯磨） 荊芥エキスの代わりに薄荷エキス（実施例２の乾燥エキ
ス末）を用い、その添加量を０. ５重量％とする以外は
実施例３と同様にして練歯磨剤を得た。

【００３６】

【００３７】常法に従い上記処方の荊芥エキスを０．１
重量％含むトローチ剤を製造した。

【００３８】実施例６（トローチ剤） 荊芥エキスの代わりに薄荷エキス（実施例２の乾燥エキ
ス末）を用い、その添加量を０. ５重量％とする以外
は、実施例５と同様にしてトローチ剤を得た。

【００３９】

【００４０】常法に従い上記処方の薄荷エキスを０．５
重量％含む洗口剤を製造した。

【００４１】実施例８（洗口液） 薄荷エキスの代わりに荊芥エキス（実施例１の乾燥エキ
ス末）を用い、その添加量を１. ０重量％とする以外は
実施例７と同様にして洗口液を得た。

【００４２】

【００４３】常法に従って上記処方の荊芥エキスを０．
１重量％、薄荷エキスを０．０５重量％含むチューイン
ガムを製造した。

【００４４】即ち、40℃に保温した全量のチューインガ
ムベースおよび全量の水飴を、ニーダーに投入して10分
間混練し、粉糖の1/3 量および全量のブドウ糖を投入し
て５分間、次いで粉糖の1/3 量を投入して５分間混練し
た。次に、荊芥エキス、薄荷エキスと香料を残りの1/3
量の粉糖に混合したものを投入し、５分間混練してガム
ミックスを得た。

【００４５】

【００４６】常法に従って荊芥エキスを０．２重量％含
むヌガーを製造した。

【００４７】即ち、。まずを混合し泡立て、は１３
０℃まで煮詰めた。にを少しづつ加え、更に泡立て
る、これに、を加え混合しながら冷却盤上に広げ成型
してヌガーを得た。

【００４８】実施例１１（ヌガー） 荊芥エキスの代わりに薄荷エキス（実施例２の乾燥エキ
ス末）を用い、その添加量を０. １重量％とする以外は
実施例１０と同様にしてヌガーを得た。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｐ 43/00 Ａ６１Ｐ 43/00 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 35/78 A61K 7/16 A61K 9/20 A61K 9/68 A61P 1/02 A61P 43/00 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＣＡ（ＳＴＮ) ＭＥＤＬＩＮＥ（ＳＴＮ)

Claims (1)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 荊芥（Schizonepeta Herb ）エキス、あ
   るいは薄荷（MenthaHerb ）エキスを有効成分として含
   有することを特徴とするコラゲナーゼ活性阻害剤