JP2016509599A

JP2016509599A - 抗癌剤として有用なマクロライド類

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Publication number: JP2016509599A
Application number: JP2015554147A
Authority: JP
Inventors: イザベル、カルレッティ; ジョルジュ、マシオ
Original assignee: INSTITUT DE RECHERCHE POUR LE DEVELOPPEMENT IRD; Institut de Recherche pour le Developpement IRD
Current assignee: INSTITUT DE RECHERCHE POUR LE DEVELOPPEMENT IRD; Institut de Recherche pour le Developpement IRD
Priority date: 2013-01-24
Filing date: 2014-01-24
Publication date: 2016-03-31
Anticipated expiration: 2034-01-24
Also published as: EP2951189A1; JP6275747B2; US20150376222A1; EP2951189B1; US9873715B2; FR3001218B1; FR3001218A1; WO2014114729A1

Abstract

本発明は、下式（Ｉ）の化合物またはその塩、水和物、もしくは薬学的に許容可能な溶媒和物に関する（式中、Ｒは単糖類または二糖類の残基である）。その単糖類または二糖類の残基のヒドロキシル官能基は、独立に、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基で所望により置換されている。本発明はまた、その化合物を製造するための方法、それを含有する医薬組成物、および特に、癌の治療のための、薬物としてのその使用に関する。

Description

本発明は、海綿動物から抽出されたマクロライド系分子およびそれらの類似体、抽出および半合成の方法、ならびに薬剤としての、特に、癌の治療における、前記化合物の使用に関する。

海綿動物は、生物活性二次代謝産物、特に、アルカロイド類の生産について開示されてから、数十年来ずっと多くの研究の焦点となっていた。

こうして、本発明者らは、ニューカレドニア産の、スベレア属種（Ｓｕｂｅｒｅａｓｐ．）海綿動物、例えば、スベレアクレバ（Ｓｕｂｅｒｅａｃｒｅｂａ）などの、ベロンギダエ（Ｖｅｒｏｎｇｉｄａｅ）科の海綿動物から、抗癌活性を有する新規分子群を単離することができた

よって、本発明の対象は、下式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物：

（式中、Ｒは単糖類または二糖類の残基であり、前記単糖類または二糖類の残基のヒドロキシル官能基は、互いに独立に、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、メチル基、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＭｅ基で所望により置換されている）
である。

発明の具体的説明

本発明において、「薬学的に許容可能な」とは、一般的に安全であり、毒性がなく、生物学的にも他の点でも望ましくないものではなく、かつ動物用およびヒト用両方の医薬品用途に許容される、医薬組成物の製造において有用であることを意味する。

化合物の「薬学的に許容可能な塩、水和物または溶媒和物」とは、本明細書に定義するように、薬学的に許容可能であり、かつ親化合物の所望の薬理学的活性を有する塩、水和物または溶媒和物を意味する。

薬学的に許容可能な塩は、特に：
（１）薬学的に許容可能な無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などとともに形成されるか；または薬学的に許容可能な有機酸、例えば、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプタン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシナフトエ酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムコン酸、２−ナフタ薬剤レンスルホン酸、プロピオン酸、サリチル酸、コハク酸、ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリメチル酢酸、トリフルオロ酢酸などとともに形成される、薬学的に許容可能な酸付加塩、および
（２）親化合物中に存在する酸性プロトンが金属イオン、例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオンもしくはアルミニウムイオンで置き換えられるか；または薬学的に許容可能な有機塩基、例えば、ジエタノールアミン、エタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミン、トリエタノールアミン、トロメタミンなどと；もしくは薬学的に許容可能な無機塩基、例えば、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウムなどと配位結合する場合に形成される薬学的に許容可能な塩基付加塩
を含んでなる。

「（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル」基とは、本発明の文脈において、１〜６個の炭素原子、好ましくは、１〜４個の炭素原子を含んでなる飽和直鎖または分岐鎖一価炭化水素鎖を意味する。例えば、以下の群：メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルまたはヘキシルを挙げることができる。好ましくは、それはメチル基である。

「単糖類」とは、本発明の文脈において、アルドース（末端に、すなわち、１位の炭素原子にアルデヒド官能基を有する糖）、より詳細には、アルドヘキソース（６個の炭素原子を有する糖）またはアルドペントース（５個の炭素原子を有する糖）、好ましくは、アルドヘキソースを意味する。よって、それは、特に、Ｄ型またはＬ型の、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロース、イドース、ガラクトース、タロース、リボース、アラビノース、キシロースまたはリキソースである。単糖類は、好ましくは、環状形態、特に、ピラン体（６員環）である。この場合、糖が有するアルデヒド官能基は、擬似アルデヒド(pseudoaldehyde)官能基とも呼ばれるヘミアセタール体である。

「二糖類」とは、本発明の文脈において、上に定義した単糖類２個の縮合の結果として得られる分子を意味し、そのような縮合は水分子の喪失を伴う。この縮合反応は、本発明に関連しては、一方の単糖類のアルデヒド（または擬似アルデヒド）官能基ともう一方の単糖類のヒドロキシ（ＯＨ）官能基との間で行われる。従って、得られる二糖類は１個のアルデヒド（または擬似アルデヒド）官能基だけを有する。好ましくは、二糖類は、あるアルドペントースのアルデヒド（または擬似アルデヒド）官能基と、あるアルドヘキソースのヒドロキシ（ＯＨ）官能基との縮合の結果として得られる。

「単糖類または二糖類の残基」とは、本発明の文脈において、上に定義したように、単糖類または二糖類のアルデヒド（または擬似アルデヒド）官能基と、ヒドロキシ（ＯＨ）官能基との間での縮合反応後にその１位の炭素原子を介して分子の残りの部分と連結されている、単糖類または二糖類の部分を意味する。

従って、ピラン体のアルドヘキソース型単糖類の残基の場合、それは以下の基となる。

好ましくは、Ｒ基は以下の基：

［式中、Ｒ_１〜Ｒ_４基は、互いに独立に、水素原子、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、メチル基、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＭｅ基、または下式の単糖類の残基：

（式中、Ｒ_５〜Ｒ_７基は、互いに独立に、水素原子、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、メチル基、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＭｅ基である）
である］
であり、
１個のＲ_１〜Ｒ_４基だけは単糖類の残基であってよい。

有利には、Ｒ_１＝Ｒ_４＝Ｍｅ、Ｒ_２＝ＨおよびＲ_３＝Ｈまたは下式の単糖類の残基：

である。

Ｒ基は、特に、基：

（式中、
・Ｒ_１〜Ｒ_４は、互いに独立に、水素原子、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、メチル基、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＭｅ基；特に、水素原子または（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基；特に、ＨまたはＭｅであり、かつ
・Ｒ_５〜Ｒ_７は、互いに独立に、水素原子、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、メチル基、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＭｅ基；特に、Ｈ、Ｍｅまたは−Ｃ（Ｏ）ＮＨＭｅ基である）
であってよい。

Ｒ基は、より詳細には、

から選択される基であってよい。

式（Ｉ）の前記化合物に存在する不斉炭素原子の数を考えると、後者は様々な立体配置をとり得る。本発明による化合物は、特に、その製造方法によって定義される立体化学を有する、特に、以下の連続工程を含む方法によって得られる、化合物であり得る：
（ｉ）スベレア属種（Ｓｕｂｅｒｅａｓｐ．）海綿動物、例えば、スベレアクレバ（Ｓｕｂｅｒｅａｃｒｅｂａ）などの、ベロンギダエ（Ｖｅｒｏｎｇｉｄａｅ）科の海綿動物の凍結乾燥物を、水／エタノール溶液（特に、１０／９０水／エタノール、ｖ／ｖ）で１回または複数回浸軟処理し；続いて、濾過を行って濾液を得；その後、前記濾液を濃縮して水性シロップを得ること、
（ｉｉ）前の工程（ｉ）で得られた水性シロップに水を添加し、酢酸エチルで１回または複数回抽出し、得られた水相および有機相を分離し；それに従って得られた有機相または合わせた有機相を濃縮して乾燥抽出物を得ること、
（ｉｉｉ）Ｒが：

である式（Ｉ）の化合物を、前の工程（ｉｉ）で得られた乾燥抽出物から単離すること、
（ｉｖ）所望により、前の工程で得られた式（Ｉ）の化合物を加水分解して下式（ＩＩ）の化合物：

を得、かつ、式（ＩＩ）の化合物のＯＨ官能基を置換して、上に定義した式（Ｉ）の化合物を得ること、および
（ｖ）所望により、前の工程（ｉｉｉ）または（ｉｖ）で得られた式（Ｉ）の化合物を塩化、水和または溶媒和してその薬学的に許容可能な塩、水和物または溶媒和物を得ること。

この方法に関連して、使用される、ベロンギダエ（Ｖｅｒｏｎｇｉｄａｅ）科の海綿動物、スベレア属種（Ｓｕｂｅｒｅａｓｐ．）海綿動物、例えば、例えば、スベレアクレバ（Ｓｕｂｅｒｅａｃｒｅｂａ）などは、ニューカレドニア起源のものであり得る。

式（Ｉ）の化合物は、より詳細には、

から選択され得る。

本発明の別の対象は、薬剤として、特に、癌の治療において、使用するための、上に定義した式（Ｉ）の化合物である。

本発明はまた、薬剤の製造のための、特に、癌の治療における、上に開示した式（Ｉ）の化合物の使用に関する。

本発明はまた、癌を治療するための方法に関し、その方法は、それを必要とする人に、上に定義した式（Ｉ）の化合物の有効量を投与することを含む。

前記癌は、特に、固形腫瘍または非固形腫瘍であってよく、例えば、黒色腫、結腸直腸癌、肺癌、前立腺癌、肝臓癌、乳癌、子宮癌、胃癌、膵臓癌、膀胱癌、卵巣癌、頭頸部癌、脳腫瘍、白血病、リンパ腫（バーキットリンパ腫を含む）および骨髄腫であってよい。

本発明の別の対象は、上に定義した式（Ｉ）の少なくとも１種の化合物および薬学的に許容可能な賦形剤を含んでなる医薬組成物である。

本発明の医薬組成物は、例えば、静脈内投与または経口投与のために処方することができる。

有効成分としての本発明の化合物は、１日当たり０．０１ｍｇ〜１０００ｍｇの間の用量で、例えば、単回投与で使用することができる。

本発明の特定の実施態様では、上記医薬組成物は、薬剤として、例えば、癌の治療において、使用される。

本発明の別の対象は、上に定義した化合物の製造のための方法であって、以下の連続工程：
（ｉ）スベレア属種（Ｓｕｂｅｒｅａｓｐ．）海綿動物、例えば、スベレアクレバ（Ｓｕｂｅｒｅａｃｒｅｂａ）などの、ベロンギダエ（Ｖｅｒｏｎｇｉｄａｅ）科の海綿動物の凍結乾燥物を、水／エタノール溶液（特に、１０／９０水／エタノール、ｖ／ｖ）で１回または複数回浸軟処理し；続いて、濾過を行って濾液を得；その後、前記濾液を濃縮して水性シロップを得ること、
（ｉｉ）前の工程（ｉ）で得られた水性シロップに水を添加し、酢酸エチルで１回または複数回抽出し、得られた水相および有機相を分離し；それに従って得られた有機相または合わせた有機相を濃縮して乾燥抽出物を得ること、
（ｉｉｉ）Ｒが：

である式（Ｉ）の化合物を、前の工程（ｉｉ）で得られた乾燥抽出物から単離すること
（ｉｖ）所望により、前の工程で得られた式（Ｉ）の化合物を加水分解して下式（ＩＩ）の化合物：

を得、かつ、式（ＩＩ）の化合物のＯＨ官能基を置換して、上に定義した式（Ｉ）の化合物を得ること、および
（ｖ）所望により、前の工程（ｉｉｉ）または（ｉｖ）で得られた式（Ｉ）の化合物を塩化、水和または溶媒和してその薬学的に許容可能な塩、水和物または溶媒和物を得ること
を含む方法である。

この方法に関連して、使用されるベロンギダエ（Ｖｅｒｏｎｇｉｄａｅ）科の海綿動物、スベレア属種（Ｓｕｂｅｒｅａｓｐ．）海綿動物、例えば、スベレアクレバ（Ｓｕｂｅｒｅａｃｒｅｂａ）などは、ニューカレドニア起源のものであり得る。

前記浸軟処理工程（ｉ）は、１〜５回、特に、４回行うことができる。

前記抽出工程（ｉｉ）は、１〜５回、特に、３回行うことができる。

工程（ｉｉｉ）における本発明による化合物の単離は、特に、シリカゲルでのクロマトグラフィーによって行うことができる。得られた生成物は、次いで、当業者に周知の技術によって、特に、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって、精製することができる。

工程（ｉｖ）の加水分解工程および置換工程ならびに工程（ｖ）の塩化工程、水和工程および溶媒和工程は、当業者に周知の技術によって行うことができる。

それに従って得られた化合物は、当業者に周知の方法によって（例えば、抽出、溶媒の蒸発によってまたは沈澱および濾過によってなど）、反応媒体から分離することができる。

前記化合物は、さらに、必要に応じて、当業者に周知の技術によって（例えば、前記化合物が結晶性である場合には再結晶によって、蒸留によって、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによってまたは高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によってなど）、精製することができる。

以下の実施例において、本発明を、限定されない方法でより具体的に開示する。

下の実施例では、以下の略語を使用した：

１．式（Ｉ）の化合物の調製
２０００年にニューカレドニアでＳｕｂｅｒｅａ種海綿動物、例えば、Ｓｕｂｅｒｅａｃｒｅｂａ、のサンプルを採取し、次いで、凍結乾燥させ、凍結乾燥物１５０ｇを得た。この凍結乾燥物を、１０：９０水／アルコール溶液（１０容量％の水および９０容量％のエタノールを意味する）で振盪しながら連続して４回、１時間浸軟処理した。得られた濾液（合計４ｌ）を合わせ、濾過し、ロータリーエバポレーターを使用して水性シロップが得られるまで濃縮した。上記水性シロップを、酢酸エチルで連続して３回分配した。有機相を合わせ、乾燥粗有機抽出物が得られるまで乾燥させた（２．５５ｇ）。

有機抽出物は、ＷＭ２６６−４ヒト転移性黒色腫細胞株に対して、１０μｇ／ｍｌおよび１μｇ／ｍｌの両方の濃度において細胞増殖を約４５％だけ阻害し（得られた結果はそれぞれ４３．４％および４６．７％であった）、その結果として、細胞増殖抑制作用を示した。

粗有機抽出物について、シクロヘキサンおよび酢酸エチル、次いで、酢酸エチルおよびメタノールでの極性漸増溶出(increasing polarity elution)による標準シリカカラムでの「フラッシュ」（または「ステップワイズ」）クロマトグラフィーを行って、１３画分を得た。画分総てをＷＭ−２６６−４株について試験した。１０μｇ／ｍｌでは、画分番号６および８だけが阻害率それぞれ５３％および４７％を示した。

最終精製を、水／アセトニトリル勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣ（ＲＰＣ１８）によって行って、以下の３つの活性分子を得た：

分子（Ｉ−１）：

分子式：Ｃ_４８Ｈ_６８Ｎ_２Ｏ_１０−正確な質量：832.49
ESIMS m/z: 833.7 (M+H)⁺
¹H NMR (500 MHz, メタノール-d₄) δ = 6.50 (1H, d, J = 16.4 Hz, H-6), 6.36 (1H, d, J = 15.4 Hz, H-25), 6.17 (1H, dd, J = 15.4 Hz, J = 8.2 Hz, H-24), 6.03 (1H, t, J = 10.4 Hz, H-20), 5.98 (1H, t, J = 10.4 Hz, H-19), 5.75 (1H, dd, J = 14.2 Hz, J = 9.8 Hz, H-18), 5.56 (1H, d, J = 16.4 Hz, H-7), 5.25 (2H, dd, J = 14.2 Hz, J = 9.8 Hz, H-21), 5.23 (1H, m, H-16), 5.17 (1H, dd, J = 9.0 Hz, J = 4.9 Hz, H-4), 5.11 (1H, dd, J = 10.1 Hz, J = 8.5 Hz, H-23), 3.67 (1H, dd, J = 10.7 Hz, J = 2.2 Hz, H-6′), 3.60 (3H, s, H-7′), 3.56 (1H, dd, J = 10.7 Hz, J = 5.0 Hz, H-6′), 3.48 (1H, m, H-4′), 3.48 (1H, m, H-2″), 3.42 (1H, t, J = 9.3 Hz, H-3′), 3.38 (1H, m, H-11), 3.35 (3H, s, H-8′), 3.33 (1H, m, H-5′), 3.31 (3H, s, H-36), 3.09 (1H, dd, J = 9.1 Hz, J = 7.9 Hz, H-2′), 2.92 (1H, m, H-29), 2.80 (1H, m, H-17), 2.67 (1H, s, H-14), 2.45 (1H, m, H-3), 2.33 (2H, td, J = 7.3 Hz, J = 3.8 Hz, H-32), 2.28 (1H, m, H-2), 2.28 (1H, m, H-22), 2.27 (3H, s, H-39), 2.20 (1H, d, J = 12.9 Hz, H-12), 2.14 (1H, m, H-3), 2.08 (1H, td, J = 13.6 Hz, J = 3.2 Hz, H-2), 1.87 (1H, m, H-9), 1.87 (1H, m, H-10), 1.87 (1H, m, H-30), 1.75 (3H, s, H-34), 1.72 (1H, m, H-30), 1.64 (2H, m, H-31), 1.63 (3H, s, H-37), 1.33 (1H, t, J = 12.0 Hz, H-10), 1.30 (3H, d, J = 6.9 Hz, H-40), 1.06 (1H, m, H-12), 0.98 (3H, d, J = 6.6 Hz, H-38).
¹³C NMR (126 MHz, CDCl₃) δ = 172.6 (C-1), 165.3 (C-28), 145.1 (C-27), 139.1 (C-7), 136.3 (C-18), 133.8 (C-21), 133.3 (C-5), 132.4 (C-20), 132.0 (C-26), 129.8 (C-19), 128.4 (C-15), 127.5 (C-16), 127.1 (C-6), 126.4 (C-4), 126.3 (C-24), 122.5 (C-25), 119.4 (C-33), 104.7 (C-1′), 82 (C-2′), 77.5 (C-23), 77.1 (C-13), 75.5 (C-11), 74.8 (C-5′), 71.7 (C-6′), 68.9 (C-4′), 61.1 (C-7′), 59.4 (C-8′), 55.8(C-36), 48.5 (C-17), 44.0 (C-22), 40.8 (C-8), 40.7 (C-9), 40.3 (C-14), 35.2 (C-2), 33.8 (C-30), 33.2 (C-29), 32.6 (C-12), 32.0 (C-10), 30.9 (C-35), 24.1 (C-3), 23.2 (C-31), 20.8 (C-37), 20.2 (C-34), 18.6 (C-40), 17.1 (C-32).

分子（Ｉ−２）：

分子式：Ｃ_５４Ｈ_７８Ｎ_２Ｏ_１４−正確な質量：978.55
ESIMS m/z: 979.7 (M+H)⁺
HRESITOFMS m/z: 1001.53519 (M+Na)⁺、Ｃ_５４Ｈ_７８Ｎ_２Ｏ_１４Ｎａ_１についての計算値 m/z 1001.53453
¹H NMR (500 MHz, メタノール-d₄) δ = 6.50 (1H, d, J = 16.4 Hz, H-6), 6.36 (1H, d, J = 15.4 Hz, H-25), 6.17 (1H, dd, J = 15.4 Hz, J = 8.2 Hz, H-24), 6.03 (1H, t, J = 10.4 Hz, H-20), 5.98 (1H, t, J = 10.4 Hz, H-19), 5.75 (1H, dd, J = 14.2 Hz, J = 9.8 Hz, H-18), 5.56 (1H, d, J = 16.4 Hz, H-7), 5.25 (2H, dd, J = 14.2 Hz, J = 9.8 Hz, H-21), 5.23 (1H, m, H-16), 5.17 (1H, dd, J = 9.0 Hz, J = 4.9 Hz, H-4), 5.11 (1H, dd, J = 10.1 Hz, J = 8.5 Hz, H-23), 4.82 (1H, s, H-8″), 4.81 (1H, t, J = 8.8 Hz, H-3″), 4.44 (1H, d, J = 7.6 Hz, H-1″), 4.40 (1H, q, J = 2.8 Hz, H-13), 4.36 (1H, d, J = 7.9 Hz, H-1′), 4.08 (1H, dd, J = 11.2 Hz, J = 4.6 Hz, H-5″), 3.67 (1H, dd, J = 10.7 Hz, J = 2.2 Hz, H-6′), 3.60 (3H, s, H-7′), 3.56 (1H, dd, J = 10.7 Hz, J = 5.0 Hz, H-6′), 3.48 (1H, m, H-4′), 3.48 (1H, m, H-2″), 3.42 (1H, t, J = 9.3 Hz, H-3′), 3.38 (1H, m, H-11), 3.38 (1H, m, H-4″), 3.35 (3H, s, H-8′), 3.33 (1H, m, H-5′), 3.33 (1H, m, H-5″), 3.31 (3H, s, H-36), 3.09 (1H, dd, J = 9.1 Hz, J = 7.9 Hz, H-2′), 2.92 (1H, m, H-29), 2.80 (1H, m, H-17), 2.67 (1H, s, H-14), 2.45 (1H, m, H-3), 2.33 (2H, td, J = 7.3 Hz, J = 3.8 Hz, H-32), 2.28 (1H, m, H-2), 2.28 (1H, m, H-22), 2.27 (3H, s, H-39), 2.20 (1H, d, J = 12.9 Hz, H-12), 2.14 (1H, m, H-3), 2.08 (1H, td, J = 13.6 Hz, J = 3.2 Hz, H-2), 1.87 (1H, m, H-9), 1.87 (1H, m, H-10), 1.87 (1H, m, H-30), 1.75 (3H, s, H-34), 1.72 (1H, m, H-30), 1.64 (2H, m, H-31), 1.63 (3H, s, H-37), 1.33 (1H, t, J = 12.0 Hz, H-10), 1.30 (3H, d, J = 6.9 Hz, H-40), 1.06 (1H, m, H-12), 0.98 (3H, d, J = 6.6 Hz, H-38).
¹³C NMR (126 MHz, CDCl₃) δ = 172.6 (C-1), 165.3 (C-28), 145.1 (C-27), 139.1 (C-7), 136.3 (C-18), 133.8 (C-21), 133.3 (C-5), 132.4 (C-20), 132.0 (C-26), 129.8 (C-19), 128.4 (C-15), 127.5 (C-16), 127.1 (C-6), 126.4 (C-4), 126.3 (C-24), 122.5 (C-25), 119.4 (C-33), 104.7 (C-1′), 102.6 (C-1″), 86.9 (C-3″), 82 (C-2′), 77.5 (C-23), 77.1 (C-13), 76.7 (C-3″), 76.6 (C-4″), 75.5 (C-11), 74.8 (C-5′), 72.5 (C-2″), 71.7 (C-6′), 68.9 (C-4′), 63.3 (C-5″), 61.1 (C-7′), 59.4 (C-8′), 58.8 (C-6″), 55.8(C-36), 48.5 (C-17), 44.0 (C-22), 40.8 (C-8), 40.7 (C-9), 40.3 (C-14), 35.2 (C-2), 33.8 (C-30), 33.2 (C-29), 32.6 (C-12), 32.0 (C-10), 30.9 (C-35), 24.1 (C-3), 23.2 (C-31), 20.8 (C-37), 20.2 (C-34), 18.6 (C-40), 17.1 (C-32).

分子（Ｉ−３）：

分子式：Ｃ_５６Ｈ_８１Ｎ_３Ｏ_１５−正確な質量：1035.57
ESIMS m/z: 1038.8 (M+H)⁺
¹H NMR (500 MHz, メタノール-d₄) δ = 6.50 (1H, d, J = 16.4 Hz, H-6), 6.36 (1H, d, J = 15.4 Hz, H-25), 6.17 (1H, dd, J = 15.4 Hz, J = 8.2 Hz, H-24), 6.03 (1H, t, J = 10.4 Hz, H-20), 5.98 (1H, t, J = 10.4 Hz, H-19), 5.75 (1H, dd, J = 14.2 Hz, J = 9.8 Hz, H-18), 5.56 (1H, d, J = 16.4 Hz, H-7), 5.25 (2H, dd, J = 14.2 Hz, J = 9.8 Hz, H-21), 5.23 (1H, m, H-16), 5.17 (1H, dd, J = 9.0 Hz, J = 4.9 Hz, H-4), 5.11 (1H, dd, J = 10.1 Hz, J = 8.5 Hz, H-23), 4.82 (1H, s, H-8″), 4.81 (1H, t, J = 8.8 Hz, H-3″), 4.44 (1H, d, J = 7.6 Hz, H-1″), 4.40 (1H, q, J = 2.8 Hz, H-13), 4.36 (1H, d, J = 7.9 Hz, H-1′), 4.08 (1H, dd, J = 11.2 Hz, J = 4.6 Hz, H-5″), 3.67 (1H, dd, J = 10.7 Hz, J = 2.2 Hz, H-6′), 3.60 (3H, s, H-7′), 3.56 (1H, dd, J = 10.7 Hz, J = 5.0 Hz, H-6′), 3.48 (1H, m, H-4′), 3.48 (1H, m, H-2″), 3.42 (1H, t, J = 9.3 Hz, H-3′), 3.41 (3H, s, H-6″), 3.38 (1H, m, H-11), 3.38 (1H, m, H-4″), 3.35 (3H, s, H-8′), 3.33 (1H, m, H-5′), 3.33 (1H, m, H-5″), 3.31 (3H, s, H-36), 3.09 (1H, dd, J = 9.1 Hz, J = 7.9 Hz, H-2′), 2.92 (1H, m, H-29), 2.82 (3H, d, J = 5.0 Hz, H-9″), 2.80 (1H, m, H-17), 2.67 (1H, s, H-14), 2.45 (1H, m, H-3), 2.33 (2H, td, J = 7.3 Hz, J = 3.8 Hz, H-32), 2.28 (1H, m, H-2), 2.28 (1H, m, H-22), 2.27 (3H, s, H-39), 2.20 (1H, d, J = 12.9 Hz, H-12), 2.14 (1H, m, H-3), 2.08 (1H, td, J = 13.6 Hz, J = 3.2 Hz, H-2), 1.87 (1H, m, H-9), 1.87 (1H, m, H-10), 1.87 (1H, m, H-30), 1.75 (3H, s, H-34), 1.72 (1H, m, H-30), 1.64 (2H, m, H-31), 1.63 (3H, s, H-37), 1.33 (1H, t, J = 12.0 Hz, H-10), 1.30 (3H, d, J = 6.9 Hz, H-40), 1.06 (1H, m, H-12), 0.98 (3H, d, J = 6.6 Hz, H-38).
¹³C NMR (126 MHz, CDCl₃) δ = 172.6 (C-1), 165.3 (C-28), 157.1 (C-6″), 145.1 (C-27), 139.1 (C-7), 136.3 (C-18), 133.8 (C-21), 133.3 (C-5), 132.4 (C-20), 132.0 (C-26), 129.8 (C-19), 128.4 (C-15), 127.5 (C-16), 127.1 (C-6), 126.4 (C-4), 126.3 (C-24), 122.5 (C-25), 119.4 (C-33), 104.7 (C-1′), 102.6 (C-1″), 86.9 (C-3″), 82 (C-2′), 77.5 (C-23), 77.1 (C-13), 76.7 (C-3″), 76.6 (C-4″), 75.5 (C-11), 74.8 (C-5′), 72.5 (C-2″), 71.7 (C-6′), 68.9 (C-4′), 63.3 (C-5″), 61.1 (C-7′), 59.4 (C-8′), 58.8 (C-8″), 55.8(C-36), 48.5 (C-17), 44.0 (C-22), 40.8 (C-8), 40.7 (C-9), 40.3 (C-14), 35.2 (C-2), 33.8 (C-30), 33.2 (C-29), 32.6 (C-12), 32.0 (C-10), 30.9 (C-35), 27.7 (C-7″), 24.1 (C-3), 23.2 (C-31), 20.8 (C-37), 20.2 (C-34), 18.6 (C-40), 17.1 (C-32).

２．式（Ｉ）の化合物の生物学的活性
分子（Ｉ−１）、（Ｉ−２）および（Ｉ−３）は、転移性黒色腫細胞株、ＷＭ２６６−４に対する抗増殖活性の試験中に同定された。それらの分子は、一連の７種の他の腫瘍株（Ａ５４９：ヒト肺腺癌細胞株；ＢｘＰＣ３：ヒト膵臓腺癌細胞株；ＫＢ：ヒト口腔癌細胞株；ＫＢ−Ｖ１：ビンブラスチン耐性ヒト子宮頸癌細胞株；ＬｏＶｏ：ヒト結腸腺癌細胞株；Ｎａｍａｌｗａ：バーキットリンパ腫細胞株；およびＳｋｏＶ３：ヒト卵巣腺癌細胞株）に対して非常に細胞毒性があった。

前記細胞を、１０％ウシ胎児血清（１００μｌ／ウェル、調べる株に応じて１・１０^４〜３・１０^４細胞／ｍｌ）を添加した、フェノールレッドフリーのＲＰＭＩ１６４０培地（Ｓｅｒｏｍｅｄ）が入った９６ウェルプレートに播種する。インキュベーター（５％ＣＯ_２）内で３７℃で２４時間インキュベートした後、培地を、試験する化合物（様々な濃度を用いる）をさらに含有する同じ培地と交換し、その後、プレートをさらに４８時間インキュベートする。ＡＴＰ−ｌｉｔｅ−Ｍ（商標）キットに封入されている細胞溶解液、ルシフェラーゼおよびルシフェリンを、製造業者（Ｐａｃｋａｒｄ、ランジス、フランス）によって推奨されるとおりに用い、培地中へのＡＴＰ放出後の発光を測定することによって細胞生存を評価する。各実験条件を６反復で少なくとも３回試験した。

得られた結果を以下の表に示す。

Claims

下式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物：

（式中、Ｒは単糖類または二糖類の残基であり、前記単糖類または二糖類の残基のヒドロキシル官能基は、互いに独立に、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、メチル基、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＭｅ基で所望により置換されている）。
Ｒが以下の基：

［式中、Ｒ_１〜Ｒ_４基は、互いに独立に、水素原子、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、メチル基、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＭｅ基、または下式の単糖類の残基：

（式中、Ｒ_５〜Ｒ_７基は、互いに独立に、水素原子、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、メチル基、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＭｅ基である）
である］
であり、
ここで、１個のＲ_１〜Ｒ_４基だけが単糖類の残基であってよい、請求項１に記載の化合物。
Ｒ_１＝Ｒ_４＝Ｍｅ、Ｒ_２＝ＨおよびＲ_３＝Ｈまたは下式の単糖類の残基：

（式中、Ｒ_５〜Ｒ_７は請求項２に記載の通りである）
である、請求項２に記載の化合物。
Ｒが、基：

（式中、
・Ｒ_１〜Ｒ_４は、互いに独立に、水素原子、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、メチル基、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＭｅ基であり、かつ
・Ｒ_５〜Ｒ_７は、互いに独立に、水素原子、（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、メチル基、または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル基、好ましくは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＭｅ基である）
である、請求項２に記載の化合物。
Ｒが：

から選択される基である、請求項４に記載の化合物。
以下の連続工程：
（ｉ）スベレア属種（Ｓｕｂｅｒｅａｓｐ．）海綿動物、例えば、スベレアクレバ（Ｓｕｂｅｒｅａｃｒｅｂａ）などの、ベロンギダエ（Ｖｅｒｏｎｇｉｄａｅ）科の海綿動物の凍結乾燥物を、水／エタノール溶液（特に、１０／９０水／エタノール、ｖ／ｖ）で１回または複数回浸軟処理し；続いて、濾過を行って濾液を得；その後、前記濾液を濃縮して水性シロップを得ること、
（ｉｉ）前の工程（ｉ）で得られた水性シロップに水を添加し、酢酸エチルで１回または複数回抽出し、得られた水相および有機相を分離し；それにより得られた有機相または合わせた有機相を濃縮して乾燥抽出物を得ること、
（ｉｉｉ）Ｒが：

である、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物を、前の工程（ｉｉ）で得られた乾燥抽出物から単離すること、
（ｉｖ）所望により、前の工程で得られた式（Ｉ）の化合物を加水分解して下式（ＩＩ）の化合物：

を得、かつ、
式（ＩＩ）の化合物のＯＨ官能基を置換して、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物を得ること、および
（ｖ）所望により、前の工程（ｉｉｉ）または（ｉｖ）で得られた式（Ｉ）の化合物を塩化、水和または溶媒和して、その薬学的に許容可能な塩、水和物または溶媒和物を得ること
を含む方法によって得られる、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
薬剤として使用するための、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
癌の治療において使用するための、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
請求項１〜７のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の少なくとも１種の化合物および薬学的に許容可能な賦形剤を含んでなる、医薬組成物。
癌の治療において使用するための、請求項１０に記載の医薬組成物。
以下の連続工程：
（ｉ）スベレア属種（Ｓｕｂｅｒｅａｓｐ．）海綿動物、例えば、スベレアクレバ（Ｓｕｂｅｒｅａｃｒｅｂａ）などの、ベロンギデ（Ｖｅｒｏｎｇｉｄａｅ）科の海綿動物の凍結乾燥物を、水／エタノール溶液（特に、１０／９０水／エタノール、ｖ／ｖ）で１回または複数回浸軟処理し；続いて、濾過を行って濾液を得；その後、前記濾液を濃縮して水性シロップを得ること、
（ｉｉ）前の工程（ｉ）で得られた水性シロップに水を添加し、酢酸エチルで１回または複数回抽出し、得られた水相および有機相を分離し；それにより得られた有機相または合わせた有機相を濃縮して乾燥抽出物を得ること、
（ｉｉｉ）Ｒが：

である、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物を、前の工程（ｉｉ）で得られた乾燥抽出物から単離すること、
（ｉｖ）所望により、前の工程で得られた式（Ｉ）の化合物を加水分解して下式（ＩＩ）の化合物：

を得、かつ、
式（ＩＩ）の化合物のＯＨ官能基を置換して、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物を得ること、および
（ｖ）所望により、前の工程（ｉｉｉ）または（ｉｖ）で得られた式（Ｉ）の化合物を塩化、水和または溶媒和して、その薬学的に許容可能な塩、水和物または溶媒和物を得ること
を含んでなる、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物を製造する方法。