FI86433C - Ett kemiskt foerfarande foer framstaellning av antibiotikum l 17054. - Google Patents

Description

1 86433

KEMIALLINEN MENETELMÄ ANTIBIOOTIN L 17054 VALMISTAMISEKSI

Tämä keksintö koskee kemiallista menetelmää antibioottisen aineen valmistamiseksi, jota merkitään mielivaltaisesti antibiootti L 17054. Tämä aine voidaan esittää seuraa-5 vassa annetulla kaavalla (I), jossa A tarkoittaa vetyä, B on N-asetyyl iyil-D-glukoosiaminyyl i ja Z on «X-D-manno-syyl i

OA V

\ rxYXTX

, . Yvj' T « Υϊ: X 1 ; J- 1 1Λ 0 1Λ

ηΓ~-~-Γ ΐι X« JJ

Ησ/Χ^οζ Y HO ol

OH

Tämä antibiootti omaa antimikrobisen aktiivisuuden pääasiassa gram-positiivi s ia bakteereita vastaan (Staphylococci ja Streptococci) ja on esitetty tätä vastaavassa EP-hakemuk-10 sessa No 84102666.

Keksinnön mukainen, kemiallinen muutosmenetelmä käsittää teikoplani iniksi kutsutun antibiootin tai sen tekijöiden tai komponenttien saattamisen kontrolloidun happohydrolyy-s i n alaiseksi.

15 Teikoplaniini on aikaisemmin teikomysiiniksi nimitetyn antibiootin kansainvälinen ei-rekisteröity (INN) nimitys, 2 86433 sitä saadaan viljelemällä kantaa Actinoplanes teicomyce-ticus nov. sp. ATCC 31121 vi1jelyväliaineessa , joka sisältää assimiloituvat hiili- ja typpi lähteet ja epäorgaanisia suoloja (kts. US-patentti No 4,239,751). Edellä vii-5 tatussa patentissa esitetyn menetelmän mukaisesti antibiootti kömpi eks i , joka sisältää teikomysiinin A^ , A^ ja Aj, otetaan talteen erotetusta käymisliemestä uuttamalla sopivalla, veteen liukenemattomalla, orgaanisella liuottimena ja seostamalla uuttoliuottimesta yleisten menetel-10 mien mukaan. Sen jälkeen teikomysiini k^ , joka on eristetyn antibioottikompieksin päätekijä, erotetaan tekijöistä A^ ja Α^, pyi väskromatograf i sesti, käyttäen Sephadex®-pylvästä.

GB-patenttihakemusjulkaisussa No 2121401 esitetään, että 15 antibioottinen teikomysiini A^ itse asiassa on viiden, läheistä sukua olevan yhdessä muodostuneiden pää komponenttien seos.

Viimeaikaisten rakennetutkimusten perusteella on mahdollista esittää teikoplaniinin (aikaisemmin teikomysiini 20 A2) pääkomponentit 1, 2, 3, 4 ja 5 edellä esitetyllä kaa valla (I), jossa A on n|j(C^q-C^ )al ifaattinen asyylij-/?--D-gl ukoos i ami nyyl i ryhmä , B on N-asetyyl i-^/3-D-gl ukoosi -aminyyliryhmä ja Z on σ^-D-mannosyyliryhmä. Kaikki nämä sokeriosat esiintyessään sitoutuvat teikoplaniiniytimeen 25 O-glykosidi si 1 la sidoksilla.

Edustavia ja edullisia esimerkkejä (C^Q-C^1)aiifaattisista asyyliryhmistä ovat n-dekanoyyli-, 8-metyy1inonanoyyli-, Z-4-dekenoyyli-, 8-metyylidekanoyy1i- ja 9-metyy1idekano-yyllryhmät.

30 Kuten jo edellä esitettiin antibiootti L 17054 esitetään edellä olevalla kaavalla (I), jossa A tarkoittaa vetyä, B on N-asetyyli-/6-D-glukoosiaminyyli ja Z on o^-D-manno-syyli ja nämä sokeriosat sitoutuvat peptidiytimeen 0-gly-kosidisilla sidoksilla.

3 86433

Keksinnön mukaisessa menetelmässä raaka tai puhdistettu teikoplaniini tai sen eristetty tekijä tai komponentti tai minkä tahansa näiden tekijöiden tai komponenttien seos, missä tahansa suhteessa saatetaan reagoimaan vahvan, vesi-5 pitoisen orgaanisen hapon kanssa huoneen lämpötilassa, antibiootin L 17054 saamiseksi.

Esityksen helpottamiseksi tässä selityksessä jokaisella edellä esitetyllä lähtöaineella, t.s. teikoplaniini-komp-leksilla, joka saadaan US-patentin No 4,239,751 mukaises-10 ti, millä tahansa raakavalmisteel 1 a tai millä tahansa sen edelleen puhdistetuilla muodoilla tai tekijöillä, edellä esitetyn kaavan (I) mukaisella yhdisteellä, jossa A tarkoittaa \\ C i g-C ii) ai i f aa tt i nen asyyl {]-/3-D-gl ukoosiami -nyyliä, B tarkoittaa N-asetyy1i-/3-D-glukoosiaminyyliä ja 15 Z tarkoittaa ©(-D-mannosyyliä, tai sen millä tahansa seoksella missä tahansa suhteessa, tarkoitetaan yleensä "lähtöainetta".

Kuten kaavasta (I) voidaan nähdä, lähtöaineen muuttaminen antibiootiksi L 17054 käsittää pääasiallisesti O-glykosi-20 disen sidoksen poislohkaisemi sen, t.s. N-asyyli-D-glukoosiamiiniryhmän poistamisen, joka on esitetty A:11 a edellä olevassa kaavassa (I).

Alan ammattimiehelle on selvää, että 0 - g 1ykosidi sen sidoksen selektiiviseen poislohkaisuun kahden muun 0-glykosidisen sidoksen läsnäollessa ja substraatissa, jossa on usei-25 ta kiraalisia keskuksia, sisältyy huomattavia vaikeuksia.

Monissa tapauksissa ei ole mahdollista löytää reaktio-olosuhteita, joista mikään johtaisi tarpeeksi selektiivisesti toivotun tuotteen valmistamiseen ja samalla vältyttäisiin sivutuotteilta, jotka muodostuvat kiinnostuksen koh-30 teenä olevan glykosidisen sidoksen epätäydellisestä hydro-lyysistä tai jotka johtuvat molekyylin muiden sidosten osittaisesta hydrolyysistä tai jopa muutoksista kiraalis-ten keskusten stereokemiai 1isessa konfiguraatiossa .

4 86433 Tästä johtuen keksinnön kohteena on selektiivinen ja edullinen menetelmä antibiootin L 17054 valmistamiseksi - pääasiallisesti vapaana kontaminoituneista sivutuotteista, jotka muodostuvat samanaikaisesti reaktiomenetelmän aika-5 na - saattamalla yksi tai useampi edellä yksilöidyistä lähtöaineista alttiiksi selektiiviselle hydro 1yysi11 e konsentroidun, vahvan vesipitoisen orgaanisen hapon läsnäollessa suurin piirtein huoneen lämpötilassa.

Erityisesti keksinnön mukaiseen menetelmään valitaan vah-10 vaksi, vesipitoiseksi hapoksi konsentroitu tri f 1uorietikka-happo, vaikkakin muitakin konsentroituja samanlaisia orgaanisia happoja voidaan käyttää.

Erittäin hyviä tuloksia saadaan käyttämällä vesipitoista trifluorietikkahappoa noin 90-prosentin konsentraatiossa, 15 kun taas hyviä tuloksia saadaan myös käyttämällä vesipitoista trifluorietikkahappoa konsentraation ollessa välillä 75-% ja 95-%.

Reaktioiämpöti1 a on mieluimmin huoneen lämpötila. Se voi yleensä olla 10°C:sta - 50°C:seen ja mieluimmin se on vä-20 Iillä 15°C ja 35°C, kun taas kaikkein edullisin lämpötila-alue on 20°C - 30°C.

Kuten on tunnettua reaktioaika vaihtelee huomattavasti riippuen käytetyistä, spesifisistä reaktio-olosuhteista, mutta yleensä se on 30 minuutin ja 4 tunnin välillä. Joka 25 tapauksessa, koska reaktion etenemistä voidaan helposti seurata ohutkerroskromatografi sesti (TLC) tai nestekroma-tografisesti (HPLC), käyttäen havaintosysteemissä UV-va-loa tai biotestiä herkillä mikro-organismeilla, alan ammattimies pystyy määrittämään reaktioajan ja voi todeta 30 koska reaktio on tapahtunut täydellisesti.

Menetelmän saannot ovat yleensä hyvin korkeat ja tavallisesti ne ovat korkeammat kuin 80 % ja tavallisesti 90 % -95 % tai enemmän laskettuna lähtöaineiden molaarisen määrän perusteella.

5 86433

Riippuen lähtöaineen puhtaudesta, keksinnön mukaisella menetelmällä saatu antibiootti L 17054 voi olla tarpeeksi puhdas tai sen edelleen puhdistaminen voi olla tarpeen.

Voidaan käyttää tavanomaisia puhdistusmenetelmiä, kuten 5 saostamista lisäämällä ei-1 luottavia aineita, esim. al-kyylieettereitä, saostamista, joka tapahtuu säätämällä pH vesipitoisella liuoksella isoelektriseen pisteeseen, uuttamista liuottimilla ja kromatografiamenetelmiä.

Edullisessa puhdistusmenetelmässä käytetään käänteisfaa-10 sipylväskromatografiaa. Tässä tapauksessa edullinen ad-sorbentti on silanoitu piihappogeeli , jonka hiukkaskoon jakaantuminen on 0,06 - 0,2 mm.

Eluentti voi olla jokin hydrofii1inen seos, jota voidaan käyttää tässä puhdistusmenetelmässä. Edullisia esimerk-15 kejä näistä hydrofiilisistä eluenteista ovat orgaanisten happojen ammoniumsuolojen laimean vesipitoisen liuoksen asetonitriilin tai veteen liukenevien alempialkanolien seokset. Edullisia esimerkkejä orgaanisten happojen ammoni umsuol ojen laimeista vesipitoisista liuoksista ovat 20 0 , 1 - 6-prosenttiset ammoniumformiaattivesi1iuokset, kun taas esimerkiksi sopivia alkanoleja ovat metanoli, etanoli, propanoli ja vastaavat. Edullisia eluentteja ovat vesipitoisen ammoniumformiaatin ja asetonitriilin seokset, pH: n ollessa välillä 6-8, tai vesipitoisen ammo-25 niumformiaatin ja metanolin seokset.

Erityisen edullinen raa'an antibiootin L 17054 puhdistus-menetelmä on sellainen, jossa ensin käytetään käänteis-faasikromatografiaa silanoidulla piihappogeeli11ä (0,06 - 0,2 mm) ja kehittäminen suoritetaan lineaarisella vai-30 hegradienti11 a, jossa on 5-prosenttista - 21-prosenttista asetoni trii 1 iä 0,2-prosenttisessa vesipitoisessa ammoni-umformnaatissa ja toiseksi suoritetaan pylväskromatogra-fointi silanoidulla piihappogee1i11ä (0,06 - 0,2 mm), 6 86433 jossa käytetään eluenttina asetonitriili/vesi-seosta, suhteessa 1:1.

Termi "pääasiallisesti puhtaana", tämän selityksen antibioottisen aineen kohdalla, tarkoittaa aineita, joilla on 5 HPLC-ti i tteri suurempi kuin 95 % (prosenttiset piikkialueet, etukäteen määrätyllä aallonpituudella 254 nm UV), suurin vesi- ja liuotinpitoisuus 10 prosentista 15 prosenttiin (painosta) ja epäorgaaninen jäännös alhaisempi kuin 0,5 % (painosta).

10 ANTIBIOOTIN L 1 7054 FYSIKOKEMI ALL I SET TUNNUSMERKIT

a) spesifinen kierto -34° (c = 1%, DMF) b) hyvin liukeneva veteen pH:ssa > 8,0, dimetyyliform-amidiin, dimetyy1isu 1 foksidiin , propy 1eenig 1ykoiiin ja me-tyylisellosolveen; huonosti liukeneva metanoli i n ; melkein 15 liukenematon etyy1ieetteriin ja asetoniin; c) u11ravio 1 e11iabsorptiospektri, joka on esitetty kuviossa 1, siinä esiintyy seuraavat absorptioma k s imit: 0,1 N kloorivetyhapossa \aks 278 "m (ElL 60’6> 20 - 0,1 N natriumhydroksidissa

Kaks 297 ™ «!'„ - 118’8> fosfaattipuskurissa pH 7,4 \.ks 277 "m <EU. 7°’3) ; d) infrapuna-absorptiospektri, joka on esitetty ku-25 viossa 2, nujolissa seuraavat absorptiomaksimit (cm"'): 3700-2000, 2970-2850 (nujoli), 1655, 1610, 1595, 1515, 1490, 1460 (nujoli), 1375 (nujoli), 1300, 1230, 1145, 1060, 1020, 970, 890, 850, 820, 720 (nujoli) ; 7 86433 e) alkuaineanalyysi, sen jälkeen kun yhdistettä on ensin kuivattu noin 140°C:ssa inerttikaasuatmosfäärissä (painon menetys = 7,8 %), josta saadaan seuraava likimääräinen prosenttinen koostumus (keskiarvo): hiiltä 55,46 l; vetyä 5 4,50 %; typpeä 7,20 %; klooria 4,67 %; tuhkaa 0,2 %; f) yhdisteellä on seuraavat R^.-arvot TLC-systeemei ssä , jotka esitetään seuraavassa: eluointi systeemi (til./til.) R^-arvo I asetonitriili/vesi 75:25 0,32 10 (piihappogeeli , Merck 60 F25^) II asetonitriili/5 % vesipitoinen natriumsulfaatti 30:70 0,61 (piihappogeeli, Merck silanoitu 60 F254) 15 Näkyväksi tekeminen: UV-valo aallonpituudella 254 nm; 3 % etanolipitoinen ninhydriini; 1 % metanolipi-toinen f1uoreseiiniamiini; g) retentioaika (tR) 8,3 minuuttia, analysoitaessa HPLC: 11 ä käyttäen 150 x 4,0 mm Zorbax^ODS (5-6 Jim) ko-20 lonnia (Zorbax on Dupont Co:n tavaramerkki oktadekyylisi-1 aani-piihappogeelimatriisi11 e) ja eluointi suoritetaan lineaarisella gradienti11 a, jossa on liuosta B 0 prosentista 50 prosenttiin liuoksessa A, 40 minuutin kuluessa (liuos A: 25 mM NaH^PO^/asetonitrii1i, 9:1, puskuroitu 25 pH-arvoon 6,0 0,1 N NaOH:lla; liuos B: 25 mM NaH^PO^/ asetoni tr i i 1 i , 3:7, puskuroitu pH-arvoon 6,0 0,1 NaOH:lla), virtausnopeus on 2 ml/mi n; (sisäinen standardi: 3,5-dihyd-roksitoiueeni, tR 5,60 minuuttia); h) H-NMR-spektri, esitetty kuviossa 3, rekisteröi- 30 dään 270 MHz:11ä DMSO-dg:ssa, 60°C:ssa ja näytekonsentraa-tio on 20 mg/ml (sisäinen standardi TMS, δ = 0,00 ppm).

8 86433

Joitakin H-NMR-arvoja, jotka on saatu D^O-vaihdon ja selektiivisten dekoplau skokeiden jälkeen, on esitetty seu-vassa: ( cS ppm, multiplisiteetti): 1,88, s; 2,85, d; rJ3,5, dd; 3-4; 4,20, d; 4,48, d; 4,50, d; 4,62, s; 4,96, ddd; 5,18, 5 d; 5,31, s; 5,35, d; 5,39, s; 5,68, d; 5,71, s; 6,20, d; 6.41, s; 6,51, s; 6,56, s; 6,74, d; 6,77, s; 6,80, s; 6,80, d; 6,98, d; 7,08, s; 7,15, d; 7,21, d; 7,28, d; 7,35, d; 7,50, d; 7,56, d; 7,64, d; 7,73, d; 7,86, s; 8.42, d; 10 i) potentiometrinen titrausprofii1i , jossa on kolme titrauskulmakerrointa pH-1/2-arvoilla 5,0 (yksi ekvivalentti), 7,0 (yksi ekvivalentti) ja 11 (viisi ekvivalenttia) metyylisei 1osolve/vesi-seoksessa , 4:1, titrattaessa testattavan yhdisteen liuos, joka sisältää ylimäärin 0,01 15 N kloorivetyhappoa metyyliseilosolve/vesi-seoksessa , 4:1, 0,01 N Na0H:lla samassa 1iuotinseoksessa ; l) hapan funktio, yhdiste kykenee muodostaan suoloja; m) emäksinen funktio, yhdiste kykenee muodostamaan suoloja; 20 n) kaksi sokeri tähdettä , jotka ovat o<-D-mannoosi ja N-asetyyl i-^/3-D-glukoosiamiini .

Fysikokemia 11iSten arvojen perusteella ja vertaamalla rakenteisiin, jotka tunnetaan muilla glykopeptidisilla antibiooteilla, kuten vankomysiini ja ristosetiini , voidaan antibiootilla L 17054 katsoa olevan seuraava rakenne: 9 86433

CH2OH

H/JrM

\0H H/ \ OH C,1

HON) ' H \ I n I

CH^CONH \ I || I l|

-•Α^/Άΐ CH

η H ίΗ n H I n H I 2 0 ^

Go A/N\,An.V/-N\/n Ν/·!\/Ν·^ A N/k/NHjö / ί A » i J “ A Γ rV-^f 1 \ ii Γ ii

HO/X/X R' V H(r N/ V

OH 0H

CH2OH

jossa R1 tarkoittaa ryhmää, V/h ^\ V jonka kaava on HO^^p-

H H

Seuraavat esimerkit kuvaavat edelleen keksintöä ja sellaisenaan niiden tarkoitus ei ole rajoittaa keksinnön piiriä.

H) 86433 ESIMERKKI 1

Antibiootin L 17054 valmistaminen teikoplaniinista Pääasiallisesti puhdas teikopl ani i ni (11 g) lisätään 90-prosenttiseen vesipitoiseen trif 1uorietikkahappoon (100 5 ml) ja seosta hämmennetään noin 2 tuntia huoneen lämpötilassa. Sen jälkeen se kaadetaan 400 ml:aan jääkylmää etyylieetteriä. Saatu sakka otetaan talteen suodattamalla, pestään etyy1ieetteri 11ä ja kuivataan ilmassa, saadaan jauhe, joka on antibiootin L 17054 trifluorietikkahapon 10 additiosuola (10,5 g).

Annos edellä saatua tuotetta (3 g) suspendoidaan 150 ml:aan seosta, jossa on 0,2 % vesipitoista ammoniumformiaattia ja asetonitriiliä suhteessa 95:5, ja pH säädetään arvoon noin 7,5 IN natriumhydroksidi 11 a.

15 Saatu liuos kaadetaan silanoituun piihappogeelikromatogra -fiapylvääseen (0,06 - 0,2 mm, Merck), joka sisältää 150 g adsorbenttia valmistettuna samaan 1iuotinseokseen. Pylväs kehitetään lineaarisella gradient!11 a , jossa on aseto-nitriiliä 5-21 % 0,2-prosenttisessa vesipitoisessa ammonium-20 formiaatissa , kerätään 20 ml:n fraktiot, jotka testataan HPLC:llä. Antibiootin L 17054 sisältävät fraktiot (70-96) yhdistetään ja asetoni trii1i poistetaan. Jäännöksenä saatu vesipitoinen liuos kaadetaan pylvääseen, jossa on s i1 a -noitua piihappogeeliä (10 g; Merck 0,06 - 0,2 mm) tisla-25 tussa vedessä. Pestään vedellä, kunnes suolat ovat täysin poistettu, jonka jälkeen tuote eluoidaan seoksella asetoni trii1i/vesi, 1:1. Kerätty liuos konsentroidaan pieneen tilavuuteen ja kiinteä aine saostetaan lisäämällä asetonia. Kuivaamalla huoneen lämpötilassa, saadaan 2,4 g pää-30 asiallisesti puhdasta antibioottia L 17054.

" 86433

Suorittaen pääasiallisesti edellä esitetty menetelmä, mutta käyttäen lähtöaineena teikoplaniinin tekijöiden ja Ag seosta, teikoplaniinin tekijän komponenttia 1, tei-koplaniinin tekijän A^ komponenttia 2, teikop 1 a niinin te-5 kijän A^ komponenttia 3, tei koplani inin tekijän A^ komponenttia 4 ja teikoplaniinin tekijän A2 komponenttia 5, saadaan sama lopputuote pääasiallisesti samoin saannoin.

Claims (3)

12 86433

1. Menetelmä antibiootin L 17054 ja sen farmaseuttisesti hyväksyttävien additiosuolojen valmistamiseksi, joilla 5 ei-suolan muodossa on seuraava kaava Cl OA . \ γύΥυυι 10. r VV f V 9 Ya Av. h-oVyVy^^Y ^ ' J T s « J ° « A " A, rv......νΊ „.0l A1 15 Ά/ 0 ' " 0 " ' HOT 07 | OH OH jossa A tarkoittaa vetyä, B on N-asetyyli-/3-D-glu-koosiaminyyli ja Z on α-D-mannosyyli, 20 ja jolle ei-suolan muodossa on tunnusomaista a) spesifinen kierto [a]20D -34° (c = 1%; DMF) ; b) hyvin liukeneva veteen pH:ssa > 8,0, dimetyyliformami-25 diin, dimetyylisulfoksidiin, propyleeniglykoliin ja me- tyylisellosolveen; huonosti liukeneva metanoliin; melkein liukenematon etyylieetteriin ja asetoniin; c) ultraviolettiabsorptiospektri, jossa seuraavat absorp-30 tiomaksimit: - 0,1 N kloorivetyhapossa: Xm>x 278 nm (E1%lem = 60,6) - 0,1 N natriumhydroksidissa: 297 nm (E1 *,cm = 118,8) - fosfaattipuskurissa pH 7,4: Xmax 277 nm (E1%,cm = 70,3) 35 d) infrapuna-absorptiospektri nujolissa, seuraavat ab-sorptiomaksimit (cm1): 3700-2000, 2970-2850 (nujol), i3 86433 1655, 1610, 1595, 1515, 1490, 1460 (nujol), 1375 (nujol), 1300, 1230, 1146, 1060, 1020, 970, 890, 850, 820, 720 (nujol); 5 e) alkuaineanalyysi, sen jälkeen kun näytettä on ensin kuivattu noin 140 °C:ssa inerttikaasuatmosfäärissä (painonmenetys = 7,8 %), josta saadaan seuraava likimääräinen prosenttinen koostumus (keskiarvo): hiiltä 55,46 %; vetyä 4,5 %; typpeä 7,20 %; klooria 4,67 %; tuhkaa 0,2 %; 10 f) seuraavat Rf-arvot TLC-systeemeissä, jotka esitetty seuraavassa: eluointisysteemi (til./til.) Rf-arvo 15. asetonitriili/vesi 75:25 0,32 (piihappogeeli, Merck 60 F254) II asetonitriili/5 % vesipitoinen natriumsulfaatti 30:70 0,61 (piihappogeeli, Merck silanoitu 60 F2S4) 20 näkyväksi tekeminen: UV-valo aallonpituudella 254 nm; 3 % etanolipitoinen ninhydriini; 1 % metanolipitoinen fluo-reseiiniamiini; 25 g) retentioaika (tR) 8,3 minuuttia analysoitaessa HPLC:llä käyttäen 150 x 4,0 mm Zorbax® ODS (5-6 μιη) kolonnia (Zorbax on Dupont Co:n tavaramerkki oktadekyyli-silääni-piihappogeelimatriisille) ja eluointi suoritetaan lineaarisella gradientilla, jossa on liuosta B 0-prosentista 30 50-prosenttiin liuoksessa A, 40 minuutin kuluessa (liuos A: 25 mM NaH2P04/asetonitriili, 9:1, puskuroitu pH-arvoon 6,0 0,1 N NaOH:lla; liuos B: 25 mM NAH2P04/asetonitriili 3:7, puskuroitu pH-arvoon 6,0 0,1 N NaOHrlla), virtausnopeus on 2 ml/min; (sisäinen standardi: 3,5-dihydroksito-35 lueeni, tR 5,6 minuuttia); h) 'H-NMR-spektri rekisteröity 270 MHz:llä DMSO-d6:ssa, 60 14 86433 °C:ssa ja näytekonsentraatio on 20 mg/ml (sisäinen standardi TMS 5 = 0,00 ppm); joitakin 'H-NMR-arvoja, jotka on saatu D20-vaihdon ja selektiivisten dekoplauskokeiden jälkeen, on esitetty seuraavassa: 5 (6 ppm, multiplisiteetti): 1,88, s; 2,85, d; -3,5, dd; 3- 4, 4,20, d; 4,48, d; 4,50, d; 4,62, s; 4,96, ddd; 5,18, d; 5,31, s; 5,35, d; 5,39, s; 5,68, d; 5,71, s; 6,20, d; 6.41, s; 6,51, s; 6,56, s; 6,74, d; 6,77, s; 6,80, s; 6,80, d; 6,98, d; 7,08, s; 7,15, d; 7,21, d; 7,28, d; 10 7,35, d; 7,50, d; 7,56, d; 7,64, d; 7,73, d; 7,86, s; 8.42, d; i) potentiometrinen titrausprofiili, jossa on kolme tit-rauskulmakerrointa pH-l/2-arvoilla 5,0 (yksi ekvivalent-15 ti), 7,0 (yksi ekvivalentti) ja 11 (viisi ekvivalenttia) metyylisellosolve/vesi-seoksessa, 4:1, titrattaessa testattavan yhdisteen liuos, joka sisältää ylimäärin 0,01 N kloorivetyhappoa metyylisellosolve/vesi-seoksessa, 4:1, 0,01 N NaOH:lla samassa liuotinseoksessa; 20 l) hapan funktio, yhdiste kykenee muodostamaan suoloja; m) emäksinen funktio, yhdiste kykenee muodostamaan suoloja; 25 n) kaksi sokeritähdettä, jotka ovat a-D-mannoosi ja N-asetyyli-jS-D-glukoosiamiini, tunnettu siitä, että raaka tai olennaisesti puh-30 das antibioottinen teikoplaniinivalmiste, sen tekijä tai komponentti tai mainittujen tekijöiden tai komponenttien seos, missä tahansa suhteessa saatetaan happohydrolyysin alaiseksi vesipitoisessa trifluorietikkahapossa, jonka konsentraatio on 75 % - 95 %, lämpötilassa, joka on 10 °C 35 - 50 °C.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n - 15 86433 n e t t u siitä, että vesipitoisen trifluorietikkahapon konsentraatio on noin 90 %.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n -5 n e t t u siitä, että reaktiolämpötila on 20 °C - 30 °C. 10 1. Förfarande för framställning av antibiotikum L 17054 och farmaceutiskt godtagbara additionssalter därav, som i icke-saltformen har den följande formeln n. Cl 15 i „„ /vvs/0s-A \ T T Ί I

0. I ? Ϊ I 2 I. V ,,,,Α ' N , ' N '; - N Χ,/'-Ν -'N\ " | ' ,n ] 11 I II 0 1