FI106225B - Menetelmä ja magneettilaite kiinteällä faasilla tapahtuvaa immunologista analyysiä varten - Google Patents
Menetelmä ja magneettilaite kiinteällä faasilla tapahtuvaa immunologista analyysiä varten Download PDFInfo
- Publication number
- FI106225B FI106225B FI923327A FI923327A FI106225B FI 106225 B FI106225 B FI 106225B FI 923327 A FI923327 A FI 923327A FI 923327 A FI923327 A FI 923327A FI 106225 B FI106225 B FI 106225B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- particles
- substance
- walls
- affinity
- magnetic
- Prior art date
Links
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 title claims abstract description 63
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 53
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 title claims abstract description 22
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title claims description 5
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 title description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 77
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 54
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 claims abstract description 36
- 230000008021 deposition Effects 0.000 claims abstract description 3
- 230000003068 static effect Effects 0.000 claims description 17
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 claims description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 6
- 238000005497 microtitration Methods 0.000 claims description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 5
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 claims description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 claims 2
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 claims 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 claims 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 claims 1
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000010936 titanium Substances 0.000 claims 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 31
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 16
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 16
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 16
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 14
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 14
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 14
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 13
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 12
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 7
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 7
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 5
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 5
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 4
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 3
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 3
- 229910000859 α-Fe Inorganic materials 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 230000005674 electromagnetic induction Effects 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 2
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 101150110188 30 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150116295 CAT2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100326920 Caenorhabditis elegans ctl-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- GCKMFJBGXUYNAG-HLXURNFRSA-N Methyltestosterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@](C)(O)[C@@]1(C)CC2 GCKMFJBGXUYNAG-HLXURNFRSA-N 0.000 description 1
- 101100126846 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) katG gene Proteins 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 229910045601 alloy Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000956 alloy Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000026058 directional locomotion Effects 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000005672 electromagnetic field Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920000193 polymethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000004180 red 2G Substances 0.000 description 1
- -1 red blood cells Proteins 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000001119 stannous chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 229940085503 testred Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B03—SEPARATION OF SOLID MATERIALS USING LIQUIDS OR USING PNEUMATIC TABLES OR JIGS; MAGNETIC OR ELECTROSTATIC SEPARATION OF SOLID MATERIALS FROM SOLID MATERIALS OR FLUIDS; SEPARATION BY HIGH-VOLTAGE ELECTRIC FIELDS
- B03C—MAGNETIC OR ELECTROSTATIC SEPARATION OF SOLID MATERIALS FROM SOLID MATERIALS OR FLUIDS; SEPARATION BY HIGH-VOLTAGE ELECTRIC FIELDS
- B03C1/00—Magnetic separation
- B03C1/02—Magnetic separation acting directly on the substance being separated
- B03C1/28—Magnetic plugs and dipsticks
- B03C1/288—Magnetic plugs and dipsticks disposed at the outer circumference of a recipient
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
- G01N33/54326—Magnetic particles
- G01N33/54333—Modification of conditions of immunological binding reaction, e.g. use of more than one type of particle, use of chemical agents to improve binding, choice of incubation time or application of magnetic field during binding reaction
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B03—SEPARATION OF SOLID MATERIALS USING LIQUIDS OR USING PNEUMATIC TABLES OR JIGS; MAGNETIC OR ELECTROSTATIC SEPARATION OF SOLID MATERIALS FROM SOLID MATERIALS OR FLUIDS; SEPARATION BY HIGH-VOLTAGE ELECTRIC FIELDS
- B03C—MAGNETIC OR ELECTROSTATIC SEPARATION OF SOLID MATERIALS FROM SOLID MATERIALS OR FLUIDS; SEPARATION BY HIGH-VOLTAGE ELECTRIC FIELDS
- B03C2201/00—Details of magnetic or electrostatic separation
- B03C2201/26—Details of magnetic or electrostatic separation for use in medical or biological applications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/806—Electrical property or magnetic property
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/824—Immunological separation techniques
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analyzing Materials By The Use Of Magnetic Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Description
106225
Menetelmä ja magneettilaite kiinteällä faasilla tapahtuvaa immunologista analyysiä varten
Kyseessä oleva keksintö liittyy menetelmään biolo-5 gisten aineiden, erityisesti antigeenien ja vasta-aineiden immunologiseksi määrittelemiseksi tai selville saamiseksi, ja tämän menetelmän täytäntöön paneviin laitteisiin. Tarkemmin keksintö koskee menetelmää biologisen aineen määrittelemiseksi tai löytämiseksi näytteestä immunoadheesion 10 avulla. Keksintö koskee myös laitteita menetelmän täytäntöön panemiseksi mikrotitrauslevyllä sekä näitä laitteita sisältävää biologista analyysilaitetta.
Lukuisat, herkkyydeltään ja ominaisuuksiltaan vaih-televat menettelytavat mahdollistavat antigeenien tai vas-15 ta-aineiden läsnäolon huomaamisen biologisessa aineessa muodostamalla immunologistyyppisiä sidoksia määriteltävän aineen ja yhden tai useamman tunnetun aineen välille.
Jotkut käyttävät immuuniadheesioilmiötä, jota selvittää erityisesti Amer. J. of Clinical Pathology 82 (6) -20 719 - 721 (1984). Tässä menetelmässä tutkittava näyte tuo daan astiaan, tavallisesti mikrotitrauslevyn kuppiin, jonka seinillä on molekyylejä tai soluja, joilla on selvä yhty-mistaipumus (affiniteetti) määriteltävään aineeseen; herkistettyjen partikkelien seos (suspensio), toisin sanoen 25 partikkeleita, joiden päällä on ainetta, joka pystyy sitoutumaan affiniteetillaan määriteltävään aineeseen, tuodaan myös astiaan ja näiden partikkelien jakautumista tutkitaan dynaamisen sakkautumisvaiheen (sedimentaatio) jälkeen; testattavan aineen läsnäollessa, partikkelit reunustavat ta-30 saisesti seiniä, joihin ne ovat sidottu immunologistyyppi-sin sidoksin, joita esiintyy seinään kiinnitetyn aineen, määriteltävän aineen ja partikkelin päällä olevan aineen välillä: tasainen kalvo on havaittavissa kupin pohjalla; tutkittavan aineen poissa ollessa partikkelit kerääntyvät· 35 pohjalle, seinien konvergenssipisteen ympärille, muodostamalla sameamman keskikohdan. On ilmeistä, että partikkelei- 2 106225 hin kohdistetun ulkoisen voiman puuttuessa niiden sedimentaatio olisi liian hidas otettavaksi käyttöön jokapäiväisessä nopeassa biologisessa analyysissä, ja tiedetään, että sopiva sentrifugointi mahdollistaa tämän tyyppisen sedimen-5 taation kiihdyttämisen, mutta se vaatii ison, hienosäätöä . vaativan erityisen tarkkuuslaitteen käyttöä, itse asiassa käytetyn keskipakovoiman täytyy toisaalta olla täsmälleen yhdensuuntainen astioiden symmetrisen akselin kanssa, jotta vältetään saamasta erilaisia jakautumisprofiileja astian 10 asennon mukaan suhteessa kiertoakseliin, ja toisaalta, sentrifugointiolosuhteet täytyy hyvän herkkyyden saavuttamiseksi ja virheellisten tulosten välttämiseksi määrätä määriteltävän aineen kutakin tyyppiä ja lähtöainetta varten, aika ja keskipakovoima ovat riippuvaisia niistä, edel-15 leen nämä sentrifugointia käyttävät menetelmät, vaikkakin niitä käytetään jokapäiväisiin analyyseihin, eivät itsessään johda lujaan, yksinkertaiseen ja halpaan automatisointiin .
WO-patenttihakemuksessa 90/09 590 on äskettäin eh-20 dotettu, että herkistettyjen partikkelien sedimentaatiota kiihdytetään magneettisen voiman vaikutuksesta keskipakovoiman sijaan käyttämällä magneettisen ytimen sisältäviä herkistettyjä partikkeleita -menetelmää, jossa päästään sentrifugin käytöstä johtuvista haitoista.
25 Kuitenkin patentin hakija on huomannut, kuten myö hemmin tullaan näkemään, että tämä tekniikka, jota erityisesti on selitetty WO-patenttihakemuksessa 90/09 590, ei pysty selvästi erottamaan heikosti positiivisia reaktioita negatiivisista reaktioista, joten se ei ole tarpeeksi herk-30 kä testattaessa epäsäännöllisten punaisten verisolujen vasta-aineita eikä antigeenejä verensiirtoa edeltävän testauksen aikana, tai imusolujen antigeenejä ennen kudoksensiir-toa.
Kyseessä oleva keksintö tarjoaa menetelmän, joka on 35 selvästi herkempi, tarkempi ja nopeampi ja se voidaan osittain tai kokonaan automatisoida, koska partikkelien tarkas- 3 106225 telu astioiden pohjalla, olivatpa ne läpinäkyviä tai sameita, voidaan toteuttaa käyttäen valomittaria, kun taas reak-tioastioiden täyttö-, inkubointi- ja pesuoperaatiot voidaan toteuttaa tavanomaisilla, ammattitaitoisen henkilön tunte-5 millä laitteilla.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle biologisen aineen määrittelemiseksi tai löytämiseksi näytteestä immunoadhee-sion avulla on tunnusomaista se mitä patenttivaatimuksessa 1 esitetään.
10 Keksinnön mukainen menetelmä käsittää näytteen tuo misen astiaan, jonka seinillä on komponentti, jolla on spesifinen immunologinen affiniteetti testattavaan aineeseen, magneettisten partikkelien lisäämisen, joissa on ainetta, jolla on spesifinen immunologinen affiniteetti testattavaan 15 aineeseen, niiden alistamisen usealle peräkkäiselle magneettiselle vaikutukselle mainittujen partikkelien kerrostumisen kiihdyttämiseksi seinille ja niiden partikkelien paikaltaan siirtämiseksi, jotka eivät ole muodostaneet spesifisiä sidoksia tutkittavaan aineeseen, joka on tarttunut 20 seiniin komponentin, johon on kiinnitetty affiniteetti, välityksellä, ja kerrostuneiden partikkelien tarkastelun.
Ensimmäisessä suoritusmuodossa keksinnön mukainen menetelmä käsittää: a) mainitun näytteen tuomisen astiaan, jonka sei- ** 25 nillä on komponentti, jolla on spesifinen immunologinen af finiteetti testattavaan aineeseen, b) magneettisten partikkelien lisäämisen, joilla on ainetta, jolla on spesifinen immunologinen affiniteetti testattavaan aineeseen, 30 c) partikkelien saattamisen staattisten magneetti- · kenttien vaikutuksen alaisiksi, jotta partikkelit saadaan leviämään seinille ja täten mahdollistetaan immunologinen reaktio, d) sitten astian saattamisen vaihtelevan suuntaisen 35 magneettikentän vaikutuksen alaiseksi, jotta pohjalta saadaan siirretyksi ja kerätyksi ne partikkelit, jotka eivät 4 106225 ole kiinnittyneet spesifisellä sidoksella seiniin testattavan aineen ja seinään lujasti kiinnittyneen, affiniteettia omaavan komponentin välityksellä, ja lopuksi e) kerrostuneiden partikkelien tarkastelun.
5 Tämän ensimmäisen suoritusmuodon toisen näkökulman mukaisesti partikkelit alistetaan edelleen ennen lopullista tarkastelua staattisen magneettikentän vaikutukselle, jotta astiasta saadaan siirretyksi ne partikkelit, jotka eivät tartu siihen immunologisin sidoksin. Esimerkiksi on mahdol-10 lista tuoda astiaan sopivasti magnetisoitu sauva, joka peittyy vain niillä partikkeleilla, jotka eivät spesifisesti tartu astian seiniin.
Toisessa suoritusmuodossa keksinnön mukainen menetelmä käsittää: 15 a) mainitun näytteen tuomisen esiastiaan, jonka seinillä on komponentti, jolla on spesifinen immunologinen affiniteetti testattavaan aineeseen, b) magneettisten partikkelien lisäämisen, joilla on mainittuun testattavaan aineeseen immunologinen affiniteet- 20 ti mainittuun testattavaan aineeseen, c) partikkelien alistamisen staattisen magneettikentän vaikutukselle, jotta partikkelit saadaan seinille ja täten mahdollistetaan tunnusomainen immunologinen reaktio, d) sitten astian saattamisen staattisen magneetti-25 kentän vaikutukselle, esimerkiksi käyttäen sopivasti magne- tisoitua sauvaa, jotta astiasta siirtyvät ne partikkelit, jotka eivät tartu sen seiniin immunologistyyppisin sidoksin, e) ja lopuksi kerrostuneiden partikkelien tarkaste- .. 30 lun.
· Tunnetulla tavalla, mainittu tutkittava näyte jäte tään yleensä inkuboitumaan herkistettyyn astiaan tietyksi ajaksi, esimerkiksi 30 minuuttiin asti, suunnilleen 20 °C -45 °C:n lämpötilaan ennen magneettisten partikkelien lisää-35 mistä.
5 106225
Lisäksi keksinnöllisen menetelmän kahden ensimmäisen vaiheen välillä suoritetaan yleensä pesu, erityisesti silloin, kun magneettiset partikkelit on herkistetty aineella, jolla ei olisi affiniteettia pelkästään testatta-5 vaan aineeseen.
Yleensä jokapäiväiset immunologiset määrittelyt suoritetaan välittömästi mikrotitrauslevyillä, jotka käsittävät joskus jopa noin sadan kappaleen sarjan lokeroita, joita kutsutaan myös kupeiksi tai syvennyksiksi, joiden ka- 10 pasiteetti on noin 350 mikrolitraa, jotka on järjestetty yhdensuuntaisiin riveihin, tai tukitelineille riviin asetetuissa lokeroissa, mutta mitä hyvänsä muuta tilavuudeltaan sopivaa astiaa voitaisiin käyttää.
Kyseessä olevan keksinnön toinen aihe ovat laitteet 15 keksinnön mukaisen menetelmän täytäntöön panemiseksi. Laitteille on tunnusomaista se, mitä patenttivaatimuksessa 11, 12 tai 15 esitetään. Keksinnön mukaiselle biologiselle ana-lyysilaitteelle on tunnusomaista se, mitä patenttivaatimuksessa 16 esitetään.
20 Seuraavassa keksinnön mukaisia laitteita kuvataan viittaamalla mikrotitrauslevyihin, mutta on ymmärrettävää, ettei keksintö rajoitu tämän tyyppiseen astiaan eikä laitteeseen, joka käsittää yhden ainoan levyn. Näissä levyissä kupit voivat olla litteäpohjaisia, kartion, katkaistun kar-?* 25 tion tai puolipallon muotoisia.
Menetelmän ensimmäisen suoritusmuodon täytäntöön panemiseen sovelias keksinnön mukainen laite käsittää: - tuen, joka pitää mikrotitrauslevyn vaakatasossa, ja pystyy kääntämään koko lautasta vaakatasossa kiertokään- 30 nösliikkeellä, jonka säteen amplitudi on 1 - 15 mm, kuppien tilavuuksien funktiona; - alapuolella, magneettien sarja, joiden yläpäät ovat yhdensuuntaiset lautasen kanssa ja jotka on sijoitettu joko kunkin kupin alle ruutumalliin, mahdollisesti vuoro- 35 telien pohjoinen ja etelä, niiden välisen tilan ollessa esimerkiksi ainakin 2 mm, tai jotka edullisesti nauhaan 6 106225 kunkin kuppirivin alle, kahden vierekkäisen nauhan päiden ollessa vuorotellen pohjoinen ja etelä, ja kahden nauhan välisen tilan ollessa hyvin pieni, esimerkiksi 1/10 mm tai vähemmän, nauhojen ollessa mahdollisesti jopa vierekkäin.
5 Sirkulaarisella käännöksellä ymmärretään liikettä, jonka aikana astian keskus muodostaa ympyränmuotoisen radan mutta ei suorita pyörimisliikettä akselinsa ympäri.
Vaihtoehtoisen suoritusmuodon mukaan laite voi käsittää kiinteän levytuen ja magneettisarjän, joka pystyy 10 suorittamaan vaakatasossa kiertokäännösliikkeen.
Toinen keksinnön mukainen laite, joka soveltuu ensimmäisen suoritusmuodon muunnoksen tai toisen suoritusmuodon täytäntöön panemiseen, käsittää edelleen sarjan magne-toituja sylinterimäisiä sauvoja, joiden läpimitta on pie-15 nempi kuin kuppien läpimitta, ja laitteet niiden saamiseksi samanaikaisesti kaikkiin kuppeihin, niiden akselia pitkin pienelle etäisyydelle, esimerkiksi 0,1 - 1,5 mm päähän pohjasta, ja laitteet niiden siirtämiseksi sieltä.
Nämä sauvat voidaan tehdä pehmeästä raudasta tai 20 teräksestä, ja ne käsitellään kestämään reaktioaineen hyökkäys; ne ovat silloin käyttönsä aikana magneettisessa kontaktissa kestomagneettiin, joka magnetisoi ne. On mahdollista käyttää yhtä ainoaa magneettia kaikille sauvoille tai pientä magneettia kullekin sauvalle. Edelleen kukin sauva 25 voi itse olla kestomagneetti. Sauvojen alapään muoto sovi tetaan mielellään sen astian muotoon, johon ne tuodaan puolipallon, kartion tai vastaavasti litteään muotoon, mutta on myös mahdollista käyttää nimenomaan kartion muotoista päätä puolipallon muotoisessa kupissa.
30 Sauvoja, joiden pituus voi olla suurempi kuin kup- « • pien syvyys ja jotka voivat päältä olla leveämpiä, tukee ritilä tai levy, kuten on valinnaisena kestomagneettien tapauksessa .
Menetelmän toisen suoritusmuodon täytäntöön panemi-35 seksi ensimmäisen laitteen vuorottaismagneettisarja voidaan korvata millä hyvänsä välineellä, joka mahdollistaa sille 7 106225 vyöhykkeelle, jossa astiat ovat, magneettikentän luomisen, joka attrahoi partikkelit seiniä kohti, esimerkiksi sellaisella kuin tasaisesti magnetisoitunut levy; edelleen tässä - tapauksessa mikrotitrauslevyn tuki ja magneetit kiinnite- 5 tään toinen toisensa huomioon ottaen.
Astiat voidaan täyttää ja pestä manuaalisesti tai käyttäen tunnettuja mekaanisia laitteita tarkoituksenmukaisissa työasemissa ja keksinnön mukaisiin magneettikäsitte-lylaitteisiin on mahdollista yhdistää tavalliset laitteet 10 mikrotitrauslaitteiden täyttämistä ja pesemistä varten.
Edelleen partikkelien jakaantumisprofiilien tarkastelu voidaan suorittaa paljaalla silmällä, käyttäen mieluummin suurennuslaitetta, sellaista kuten kaksiokulaarinen suurennuslaite, ja hyvin suuria herkkyyksiä varten sopival-15 la, tallennusjärjestelmään kytketyllä valomittarilla; jälkimmäisessä tapauksessa, kuten tunnettua käytetään läpinäkyvää mikrotitrauslevyä.
Keksinnön mukaisessa menetelmässä testattava aine voi olla antigeeni, joka on vapaa tai sidottu sellaisen so-20 lun pintaan kuten virus, lymfosyytti, verihiutale, eryt-rosyytti tai vasta-aine, jotka on suunnattu seerumissa tai muussa biologisessa aineessa läsnäolevaa solu- tai kudosan-tigeenia tai allergeenia vastaan.
Aineet, joilla on yhtymistaipumus testattavaan ai-25 neeseen, toisin sanoen jotka pystyvät muodostamaan immuno-logistyyppisiä sidoksia sen kanssa, ovat silloin vastaavasti vasta-aineita tai antigeenejä. Kiinni tarttuvan aineen, joka tehdään liikkumattomaksi titrausastian seinille, täytyy sitoa spefisisesti tutkittava aine, kun taas paljastava 30 aine, joka on magneettisten partikkelien päällä, voisi olla .·< ei-spesifinen. Lukuisia sopivan affiniteetin omaavia, ylei sesti immunologisissa analyyseissä käytettyjä aineita tunnetaan, sellaisia kuin polyklooniset tai monoklooniset vasta-aineet, antiglobuliinit, lektiinit, punaiset verisolut 35 ja virusproteiinit, ja ammattitaitoinen henkilö valitsee haluttua määritystä varten sopivan aineen vaikeuksitta.
106225 8
Seinille kiinnittynyt komponentti voi olla vasta-aine tai antigeeni, joka on vapaa tai sisältyy koskemattoman solun tai peruskudoksen kalvolle tai joka tulee solun lysaatista.
5 Tarttuva komponentti kiinnittyy kuppien seinille spesialistien hyvin tunteman tekniikan avulla, joko absorptiolla, silloin kun kupit on tehty polystyreenistä, po-lyvinyylikloridista tai polymetakrylaatista, kemiallisella kovalenssisidoksella levyn materiaaliin sisällytettyyn yh-10 disteeseen tai kuppien seinille takertuvaksi kalvoksi muodostuneeseen yhdisteeseen, tai millä hyvänsä muulla spesialistin tuntemalla keinolla, sellaisella kuin on mainittu EP-A-0 350 233:ssa, jonka mukaan punaiset verisolut sidotaan ionivärien välityksellä.
15 Markkinoilla on suuri määrä herkistetyiksi mainit tuja mikrotitrauslevyjä, joiden kupeissa on tarttuva komponentti tai jotka ovat valmiita herkistettäviksi tunnetuilla mentelmillä. Asiantuntija tietää, etteivät kaikki levyt sovi keksinnön tyyppisiin, immuuniadheesion avulla suoritet-20 taviin määrittelyihin: on ilmeisen toivottavaa väärien positiivisten tulosten tai negatiivisten tulosten välttämiseksi, että sidospaikkojen tiheys on tasainen ja sellainen, että paljastavat partikkelit sijoitetaan seinille yhteen ainoaan, mieluummin olennaisen yhtenäiseen kerrokseen.
25 Magneettiset partikkelit ovat pienikokoisia, esi merkiksi 0,5-5 mikrometriä ja mieluummin arvojen 0,8 - 1,7 mikrometriä välillä, ja melko homogeenisia kooltaan koostuen yleensä luonnon tai synteettisestä polymeeristä, joka ei välittömästi tartu voimakkaasti lokeroiden materi-30 aaliin; polymeeri voi peittää magneettisydämen tai sellai-• set magneettiset komponentit kuin rauta, ferriitit ja le- jeeringit, joita on dispergoitu polymeerimassaan. Sopivia partikkeleita ovat kaupallisesti saatavissa olevat, ja ne Dynal-nimisen yhtiön tavaramerkillä Dynabeads® tai Rhone-35 Poulenc-nimisen yhtiön tavaramerkillä Estapor® varustetut, polystyreenilateksista koostuvat partikkelit, jotka sisäl- 9 106225 tävät jopa 40 % painosta ferriittiä, voidaan mainita esimerkkeinä. Värillisiä partikkeleita voidaan myös käyttää.
Aineella, joka on magneettisten partikkelien päällä, täytyy olla affiniteetti määritettävään aineeseen; tä-5 ten lajille luonteenomainen anti-immunoglobuliini sopii vasta-aineen määrittämiseen, tai monoklooninen vasta-aine sopii antigeenin määrittämiseen. Ne kiinnitetään partikkeliin jollakin alan ammattilaisen tuntemista menetelmistä, jotka ovat samanlaisia kuin menetelmät, joita käytetään 10 partikkelien kiinnittämiseksi kupin seinään; useita molekyylejä kiinnittyy yleensä samanaikaisesti samaan partikkeliin, mikä mahdollistaa partikkelin erinomaisen adheesion, mikäli määritettävien, seinille liikkumattomaksi tehtyjen aineiden paikallistiheys on sopiva.
15 Ensimmäisessä magneettikäsittelyfaasissa titrausku- pit ovat paikkoja staattisissa magneettikentissä, joiden jakaantuminen ja voimakkuus ovat identtisiä kaikille kupeille, ja jotka ohjataan siten, että partikkelit tuodaan alaspäin niin, että ne kerrostuvat seinien pinnalle. Mag-20 neetin voimakkuuden täytyy olla riittävän tehokas, jotta sedimentaatio olisi nopea mutta ei yletön, jotta kaikki partikkelit eivät keräänny alimpaan kohtaan, mikä johtuu niiden vetämisestä seiniltä, joille ne olivat aikaisemmin sijoitettuina.
25 Tässä faasissa, kun partikkelit saapuvat lähelle herkistettyjä seiniä, affiniteettisidoksia voi syntyä partikkelin pinnalla olevan paljastavan aineen ja määriteltävän aineen välillä, joka on liikkumattomana seinällä spesifisen kaappaustarttumiskomponentin välityksellä.
. . 30 Niissä menetelmän suoritusmuodoissa, joissa partik- • kelit saatetaan vaihtelevan suuntaisen magneettikentän vai kutuksen alaiseksi, tämän vaiheen aikana ne partikkelit, jotka ovat heikosti tai eivät ollenkaan sitoutuneet, vedetään pois ja annetaan liukua seiniä pitkin niin, että ne 35 kerääntyvät kuppien alimpaan vyöhykkeeseen.
10 106225
Keksinnön mukaiset ensisijaiset välineet tämän suunnan vaihtamiseksi, kuten aikaisemmin on mainittu, sisältävät mikrotitrauslevyn saattamisen läpimitaltaan pieniin, kiertokäännösliikkeisiin magneettisarjan yläpuolella 5 niin, että kupin akseli kuvaa ympyrää, jonka keskus sijaitsee sen linjan leikkauspisteessä, jonka akseli liittyy viereisen kupin akseliin, joka sijoitetaan vastakkaispolaroin-timagneetin yläpuolelle akselille, jonka alapuolelle kuppi sijoitetaan, näiden kahden magneetin välissä olevan ilmara-10 on linjan kanssa; mainitun ympyrän säteen ollessa vähemmän kuin puolet magneetin leveydestä, mieluummin 10 - 40 % tämän leveydestä.
Näissä olosuhteissa kunkin astian pohjan kaikki pisteet ovat eräällä hetkellä ilmaraon siinä kohdassa, jos-15 sa magneettikentän voimakkuus on suurinta tai sen läheisyydessä niin, että kaikki partikkelit, jotka ovat heikosti sitoutuneet, vedetään irti seiniltä hyvin lyhyessä ajassa, vähemmässä kuin viidessä minuutissa ja mikä parempi, useimmissa tapauksissa noin kahdessa minuutissa.
20 Käytettävien magneettikenttien voimakkuus riippuu erityisesti partikkelien koosta ja tiheydestä ja niiden konsentraatiosta, reaktioaineen viskositeetista, affini-teettisidosvoiman intensiteetistä ja kuppien geometriasta, ja asiantuntija päättää esitestauksella niiden arvon ja so-“ - 25 pivat kestot eri magneettikäsittelyvaiheille, jotka riippu vat niistä, jotta saavutetaan optimaalinen teho ja väärien positiivisten ja negatiivisten tulosten poissaolo kohtuulliseksi käsittelyajaksi.
Kuppien pohjat sijoitetaan mielellään pienelle 30 etäisyydelle magneettisarjan yläpuolelle, mikä mahdollista > matalavirtaisten magneettien käytön, erityisesti markki noilla olevien, magneettisia partikkeleita sisältävien po-lymeerinauhoista koostuvien magneettien käytön; tämä etäisyys on yleensä esimerkiksi 0,1-5 mm, sähkömagneettisille 35 induktioille, jotka ovat pienempiä kuin 0,5 teslaa.
11 106225
Antigeenien tai vasta-aineiden analysoimiseksi yleisesti käytetyissä mikrotitrauslautasissa, jotka ovat kooltaan 12,8 cm x 8,6 cm ja jotka käsittävät 96 kuppia, jotka on järjestetty 12 x 8 yhdensuuntaisiin riveihin, 5 0,5-5 mikrometriä läpimittaisten ja tiheydeltään noin 2 tai sen alle olevien magneettipartikkelien tapauksessa sähkömagneettisen induktion keskimääräiset tehot kuppien pohjien alla ovat 0,2 - 0,4 teslaa, kun taas mittatikkujen läpimitta on 3 mm, pituus ainakin 10 mm, ja ne aiheuttavat 10 napansa läheisyydessä sähkömagneettisen induktion, joka on 0,10 - 0,20 teslaa. Partikkelien kerrostumisen ensimmäisen vaiheen kesto muuttumattomissa kentissä on muutamasta sekunnista viiteen minuuttiin, kun taas siirtovaihe sähkömag-neettikentissä kestää vähemmän kuin 5 minuuttia, yleensä 15 noin 2 minuuttia, pyörimisnopeuden ollessa 0,5-4 kierrosta sekunnissa; lopuksi magnetisoituneiden sauvojen toiminta kestää yleensä viidestä sekunnista useaan minuuttiin, mahdollisesti useina peräkkäisinä kastamisina.
Keksinnön mukainen menetelmä voidaan eri aspekteis-20 saan toteuttaa manuaalisesti yksinkertaistetuilla magneet-tikäsittelylaitteilla, mutta se voidaan suorittaa automaattisessa biologisessa analyysilaitteessa, joka käsittää tämän tyyppisessä automaattisessa immuunianalyysilaitteessa tavallisesti mukana olevien komponenttien lisäksi ainakin « ·· 25 yhdean kyseessä olevan keksinnön mukaisen magneettisen kä sittelylaitteen.
Täten automatisoitu yksikkö antigeenien tai vasta-aineiden testaamiseksi keksinnön immuuniadheesiomenetelmäl-lä käsittää näytteen lastauslaitteen, työaseman mikrotit-30 rauslevyn kuppien täyttämiseksi näytteillä ja lähtöaineil-. la, käsittäen suspensiossa olevat magneettiset partikkelit, inkubointiaseman, pesuaseman kuin myös työaseman keksinnön mukaisten magneettikäsittelyjen suorittamiseksi ja työaseman fotometristä lukemista varten, jossa suoritetaan kup-35 peihin kerrostuneiden partikkelien tarkastelu, olipa se kvantitatiivista tai ei, eri työasemien ollessa analyysin 12 106225 eri vaiheista vastuussa olevan mikrotietokoneen valvonnassa, ja sen tulkinnan.
Jotta keksintöä pystyy paremmin ymmärtämään, erityisiä suoritusmuotoja kuvataan viittaamalla mukaan liitet-5 tyihin kuvioihin, joissa: kuvio 1 esittää keksinnön mukaisen laitteen pohja-kuvan osittain katkaistuna, kuvio 2 esittää läpileikkauksena linjalla 2 - 2 ja suurennettuna kuvana osan laitteesta, joka näyttää mikro-10 titrauslevyn ja magneetit staattisen magneettikäsittelyn alkuvaiheen aikana, kuvio 3 esittää poikkileikkauksena linjalla 3-3 kuvion 1 mukaisen laitteen, kuvio 4 esittää poikkileikkauksena ja suurennoksena 15 osan laitteesta, jota käytetään yhden variantin täytäntöön panemiseen.
Kuviot 1-3 esittävät keksinnön ensimmäisen suoritusmuodon mukaista menetelmää toteuttavaa laitetta, joka käsittää magneettikäsittelylaitteet mikrotitrauslevyjä 20 käyttävää immuuniadheesiolla suoritettavaa määrittelyä varten.
Kuvioissa 1-3 esitetty laite käsittää kuppisar-jasta 2 koostuvan mikrotitrauslevyn 1. Tämä lautanen on kiinnitetty vaakatasossa tuen 3 molempiin osiin, joka itse * 25 on kiinnitetty vaakatasoon asetettuun levyyn 4, jota kuva taan yksityiskohtaisemmin tuonnempana viittaamalla kuvioon 3.
Kuten kuviossa 2 on esitetty, mikrotitrauslevyn 1 alla, pienellä etäisyydellä tästä levystä ja sen suuntaise-30 na on magneettien 6 sarja 5, jotka ovat nauhojen muodossa .1. sijoitettu kunkin kuppirivin 2 alle ja joiden yläpäät ovat vaihdellen pohjoinen 6a ja etelä 6b, hyvin pienen tilan 7 (ilmaraon) ollessa jätettynä kahden nauhan väliin.
Magneettien 6 yläpuolella vallitsevaa staattista 35 magneettikenttää kuvataan symboolisesti kohdassa 8.
13 106225
Magneettien 6 sarja 5 on kiinnitetty rinnakkaisepi-pedaaliseen runkoon 9, jonka alle kiinnitetään moottori 11.
Moottori 11 käyttää keskushammaspyörää 12 akselin 13 välityksellä. Moottorin hammaspyörä kytkee sivuhammas-5 pyörät 14, 15, joissa kummassakin on pieni epäkesko akseli 16, 17, jotka toimivat kuulalaakereiden 18, 19 napoina.
Nämä laakerit asennetaan levyn 4, joka sen tähden joutuu kiertokäännösliikkeeseen, kun pieniä epäkeskoakse-leita 16, 17 kuljettavat hammaspyörät pyörivät.
10 Hammaspyörät 12, 14, 15 asennetaan rungon 9 alem malle levylle 21.
Staattisen magneettikentän aikaansaamiseksi käytetään kuviossa 1 esitettyä magneettijärjestelyä. Staattinen magneettikenttä mahdollistaa käytöön otettujen partikkelien 15 tuomisen seinillä oleviin kuppeihin 2.
Vaihtelevan suuntaisen magneettikentän aikaan saamiseksi moottori 11 alkaa pyöriä ja levyyn 4 kiinnitetty titrauslevy 1 saatetaan kiertokäännösliikkeisiin.
Nämä magneettikenttien yläpuolella tapahtuvat kup-20 pien 2 kiertokäännösliikkeet mahdollistavat saavutettavaksi, ei ainoastaan vaihtelevan suuntaisen magneettikentän kuppeihin, vaan myös kuppien 2 sisällön hienoisen liikkeen, mikä edistää sitoutumattomien tai hiekosti sitoutuneiden partikkelien erottamista.
* 25 Ennen kiertokäännösliikkeen suorittamista mikrotit- rauslevy 1 sijoitetaan mielellään ottaen huomioon magneetti järjestelmä, kuppirivin kanssa yhdensuuntaiseksi, magneettien 6a ja 6b navat vuorotteleviin suuntiin, pituudelle, joka on suunnilleen kuppien akselien välin etäisyys tai 30 puolet siitä; näillä keinoilla kunkin astian akseli on pyörähdysten aikana lähempänä ilmarakojen 7 sitä vyöhykettä, jossa magneettikenttä on maksimaalinen. Tuki varustetaan ilmeisesti laitteella, joka tekee tästä lyhyestä käännöksestä mahdollisen.· 35 Erityisessä ensisijaisessa suoritusmuodossa kunkin astian akseli sijoitetaan alussa ilmaraon 7 yläpuolelle.
14 106225
Kuviossa 4 esitetään laite, joka sopii menetelmän ensimmäisen suoritusmuodon variantin tai menetelmän toisen suoritusmuodon toteuttamiseen.
Kuviossa 4 esitetty laite käsittää magneettisten 5 sauvojen 22 sarjan, jotka on sijoitettu samoin kuin kupit 2. Kukin sauva 22 on tehty pehmeästä raudasta tai teräksestä; se on sylinterin muotoinen; sillä on puolipallon muotoinen alapää 23 ja yläpäällä 24 on kytkentä kestomagneettiin 25.
10 Tämä laite on tarkoitettu tuotavaksi mikrotitraus- levyn kuppeihin 2 sen jälkeen, kun tämä levy on saatettu staattisen ja/tai kiertomagneettikentän vaikutuksen alaiseksi, ja kun kukin kuppi on vielä täynnä reaktioainetta. Magnetisoidut sauvat 22 lasketaan käyttämällä laitteita, 15 jotka eivät näy kuvassa, ja tuodaan kuppeihin 2 kunnes sauvojen alapäät 23 ovat lyhyellä etäisyydellä kuppien pohjasta. Etäisyyden säätö ja sauvojen 22 tuki varmistetaan tavanomaisilla laitteilla, jotka eivät nyt ole näkyvissä.
Magnetisoidut sauvat saavat aikaan vetovoiman suun-20 taan, joka on täysin vastakkainen kerrostuneiden partikkelien päällä olevan ensimmäisen (staattisen) magneettikentän suunnalle, mutta vain ne partikkelit siirtyvät, jotka eivät ole kiinnittyneet tai ovat heikosti kiinnittyneet immunologisin sidoksin kuppien 2 seiniin.
25 Seuraavassa kuvataan keksinnön mukaista menetelmää toteuttavia esimerkkejä käyttäen mikrotitrauslevyn magneet-tikäsittelyyn aiemmin kuvattuja laitteita, punaisten verisolujen epäsäännöllisten vasta-aineiden selvittämiseen seerumista, sekä niiden tulosten vertailuun, joita on saavu-30 tettu magnettisen sedimentaation aikana muuttumattoman ken--·· tän vaikutuksen alaisena, kuten aiemmin siteeratussa WO- patenttihakemuksessa 9 009 590 on selitetty, tai Immucor Inc. - Norcross - U.S.A. -nimisen yhtiön Capture R® tavaramerkillä markkinoimassa testissä, joka sisältää sentrifu-35 goinnin.
is 106225 Tämä jälkimmäinen testi epäsäännöllisten vasta-aineiden löytämiseksi toteutetaan immuuniadheesiotekniikalla, levyillä, joihin on kiinnitettu "testi" (viittaus) punasoluja, joiden tiedetään kantavan tutkittavia vasta-5 aineita vastaavia antigeenejä. Tämä menetelmä sisältää: - testattavien näytteiden ja kontrollien jaon her-kistettyihin lokeroihin, - melko pitkän, noin 20 minuutin inkuboinnin, - 6 peräkkäistä pesua isotonisella liuoksella kaik-10 kien ei-toivottujen aineiden eliminoimiseksi, - paljastavien punaisten verisolujen lisäämisen, toisin sanoen joihin anti-ihmis immunoglobuliinivasta-aineita on kiinnitetty, sellaisessa sentrifugissa tapahtuvan sentrifu-15 goinnin, joka on tarkoitettu lokeroilla varustetulle mikro-titrauslevylle, kestäen yhden minuutin 1 000 g:11a, sen jälkeen kuppien pohjalla olevien punaisten verisolujen ja-kaantumisprofiilein tarkastelun: koko levyn kaikkien ope raatioiden manuaalisen toteuttamisen viedessä noin yhden 20 tunnin.
Keksinnön mukainen menetelmä on selvästi herkempi kuin nämä kaksi tunnettua menetelmää.
Esimerkki 1
Epäsäännöllisten punaisten verisolujen vasta-aineen m • - 25 määrittely a) Anti-ihmis globuliinilla peitettyjen magneettisten partikkelien valmistelu
Ruskeat, Rhone-Poulencin markkinoimat Estapor® merkkiset, lateksiset magneettiset partikkelit (partikkelin 30 koko 0,8 mikrometriä) pestään KOH-vesiliuoksessa (pH 9 -10) ja suspendoidaan sen jälkeen 1,2 % (W/V) konsentraati- ossa GBS-puskuriliuoksessa, joka koostuu 0,1 M glysiinistä ja 0,14 M NaCl:sta ja säädetään pH-arvoon 8,2 lisäämällä NaOH:a. - 15 106225 16
Edelleen samassa puskuriliuoksessa sekoitetaan an-ti-ihmis IgG-vasta-aineliuos, jonka konsentraatio on 0,2 mg/ml.
Sama tilavuus liuosta ja suspensiota sekoitetaan ja 5 pidetään 45 minuuttia liikkeessä 37 °C:n lämpötilassa.
Sitten herkistetyt partikkelit erotetaan ja pestään runsaalla GBS-puskuriliuoksella, joka sisältää 0,1 % naudan seerumialbumiinia.
b) Tutkittavien vasta-aineliuosten sekoittaminen 10 Laimennoksia valmistetaan yleisen suhdeluvun 2 geometrisessa sarjassa varastoliuoksesta, joka sisältää 1 % (w/V) anti-D vasta-ainetta, naudan seerumialbumiinia (6 % -w/V) sisältävässä vesiliuoksessa NaCl (0,9 % - w/V).
c) Vasta-aineiden määrittely 15 Seuraavissa kokeissa käytetään polystyreenimikro- titrauslevyä 12,8 cm x 8,6 cm, jonka 96 kuppia ovat U-muotoisia kiinnittämiseksi; tätä levyä markkinoi Immucor Inc. tavaramerkillä Capture®0.
Kuppeihin jaetaan pestyjen, konsentraatioltaan 20 0,5 % (w/V) olevien reagenssiverisolujen suspensio, joka kantaa määriteltävää vasta-ainetta vastaavaa antigeeniä; levy sentrifugoidaan ja kupit pestään suolaliuoksella, sitten siihen lisätään 50 mikrolitraa vasta-aineliuoksen kutakin laimennosta, jossa on 100 mikrolitraa vastaavaa ioni-25 vahvuudeltaan matalaa vesiliuosta. Joihinkin kuppeihin lisätään negatiivinen kontrolli, joka on reagoimatonta ihmisen AB-ryhmän seerumia.
Levyä inkuboidaan 20 minuuttia 37 °C:ssa ja sen jälkeen kupit pestään toistuvasti vesiliuoksella NaCl 30 (0,9 % - w/V) . Sitten siihen tuodaan 50 mikrolitraa aikai- « · semmin valmistettua magneettipartikkelisuspensiota, joka on tuotu 0,02 % konsentraatioon pH-arvoltaan 8,2 olevaan GBS-puskuriliuokseen, johon lisätään 0,1 % naudan seerumialbumiinia.
35 Sitten levy asetetaan kuvioissa 1-3 esitetylle magneettikäsittelylaitteelle, jonka tyyppitiedot ovat seu- 17 106225 raavat: magneettisarja, joka muodostuu Fer- riflex°-merkkisistä, ranskalaisen DIC nimisen yhtiön markkinoimista nauhoista ( magneettisilla partikkeleilla täytetty kumi), ja jonka paksuus on 5 mm, leveys 9 mm ja pi-5 tuus 70 mm, ja joka sijoitetaan vähemmän kuin 0,8 mm kuppien pohjan alapuolella, jotka on järjestetty yhdensuuntaisiin riveihin ja niin, että kuppien akselit asettuvat suoraan riviin nauhojen keskelle tai mikä parempi ilmarakoihin.
10 Levy jätetään kahdeksi sekunniksi tukensa varaan, sitten levyn tuki saatetaan kahdeksi minuutiksi pyörimnis-liikkeeseen, jonka säde on 3 mm nopeudella, joka on noin 50 kierrosta minuutissa.
Partikkelien jakautumista kuppien pohjalle tarkas-15 teilaan sitten paljaalla silmällä: negatiivisen reaktion kyseessä ollessa havaitaan kupin pohjan keskellä suuri ruskea pallo, kun taas positiivisen reaktion kyseessä ollessa havaitaan ruskea, koko pohjan peittävä kalvo.
Negatiivinen koetulos on edelleen selvästi nähtä-20 vissä kupeista, jotka sisältävät anti-D:tä 1/128 laimennoksena, joka oli aikaisemmin valmistettu 1 % varastoliuokses-ta.
Vertailun vuoksi koe suoritetaan herkistetyllä mik-rolevyllä samalla tavalla ja samoilla laimennoksilla, mutta : - 25 käyttäen herkistettyjen magneettipartikkelien sijasta Cap- ture-R°-testin vuoksi Immucor-yhtiön markkinoimia herkistettyjä punaisia verisoluja; magneettikäsittelyfaasi korvataan yhden minuutin kestävällä sentrifugoinnilla 1 000 g:11a, kuten tämä yhtiö suosittelee; silloin oli mah- - 30 dollista erottaa silmällä kuppien postiiviset ja negatiivi- • 1 set tulokset vain varastoliuoksen 1/32 laimennokseen asti.
Herkistetyt levyt valmistettiin myös kuten aiemmin, niin kuin myös 4,5 mikrometrin Dynabeads°-magneettipartik-kelit, joita markkinoi Dynal viitteellä M 450, peitettynä 35 anti-ihmis immunoglobuliinilla, käyttäen WO-patenttihake- 18 106225 muksen 9 009 590 esimerkissä 1 kuvaamaa menetelmää, ja 25 mikrolitraa näitä partikkeleita tuotiin kuppeihin, jotka sisälsivät anti-D-laimennoksia. Levyä käsiteltiin sitten mainitun hakemuksen esimerkin 1 kuvaamalla tavalla 5 (homogenisointi mikroagitaattorilla, sen jälkeen staattisen magneettikentän vaikutus). Viimeinen positiivisen tulosja-kautuman antava laimennos, jonka saattoi erottaa paljaalla silmällä oli 1/16 laimennos, kun taas samojen partikkelien ollessa alistettu kyseessä olevassa esimerkissä kuvatulle 10 magneettikäsittelylle selvä jakautuminen on havaittavissa laimennokseen 1/32 asti erolla, joka tekee tulkinnasta hyvin helpon.
Lopuksi käytettiin 0,8 mikrometrin herkistettyjä Estapor°-magneettipartikkeleita, ja ne alistettiin 15 WO 9 009 590:ssa kuvatulle magneettikäsittelylle; saavutetut kuviot eivät olleet tulkittavissa, koska negatiivinen koetulos ei itse anna odotettua palloa kupin pohjaan, vaikka magneettikentän vaikutuksen kesto ulotetaan 30 minuuttiin asti, kun taas samat partikkelit keksinnön mukaiselle 20 magneettikentälle altistettuina erottelevat 1/128:aan asti.
Esimerkki 2
Mikrolevyt valmistetaan kuten esimerkissä 1, mutta magneettikäsittely suoritetaan kolmessa vaiheessa kahden ensimmäisen vaiheen ollessa täysin identtisiä edellisen • · 25 kappaleen vastaavien kanssa; kolmannen aikana aikaisemmin kuvatun kaltaisia, läpimitaltaan 3 mm olevia magnetisoitu-neita sauvoja tuodaan kahden minuutin ajan kuhunkin kuppiin. Sauvojen poisvetämisen jälkeen erottuu positiivinen tulosjakautuma kaksiokulaarisella kiikarilla 1 % varasto- 30 liuoksen 1/1024 laimennokseen asti.
Esimerkki 3
Valmisteltujen levyjen magneettikäsittely kuten esimerkissä 1, joka suorittaa vain esimerkissä 2 kuvatun käsittelyn ensimmäisen ja kolmannen vaiheen.
19 106225
Tarkastelu sopivalla valomittarilla sallii positiivisen tulosjakautuman esiintymisen havaitsemisen 1 % varas-toliuoksen 1/256 laimennokseen asti.
Esimerkki 4 5 Vastakkainen ANO-ryhmittely, niin kustsuttu Simonin testi. Valmistetaan suspensio, jossa on 0,8 mikrometrin 0,02 % (w(V) Estapor-merkkisiä, anti-ihmis globuliineilla peitettyjä magneettisia partikkeleita, yhtä hyvin kuin mik-rotitrauslevyt, jotka on peitetty tarttuvilla punaisilla 10 verisoluilla kuten esimerkissä 1 mutta ryhmistä AI, A2 ja B. 50 mikrolitraa tutkittavaa plasmaa ja 10 mikrolitraa io-nivahvuudeltaan matalaa liuosta tuodaan kuhunkin kuppiin ja inkubointia suoritetaan 20 minuuttia 37 °C:ssa. Kupit pestään sitten ja 50 mikrolitraa magneettipartikkelisuspensio-15 ta tuodaan niihin, ennen kuin levy alistetaan esimerkin 2 kaltaiseen kaksivaiheiseen magneettikäsittelyyn. Saavutettujen jakautumien tarkastelu salli ryhmien A, B, AB tai O virheettömän määrittelyn tutkitusta plasmasta.
Esimerkki 5 20 Eteenpäin suunnattu ABO -ryhmittely, niin kutsuttu
Beth Vincent -testi Tässä kokeessa käytetään polystyreenistä mikrotit-rauslevyä, jonka U-muotoiset kupit on esikäsitelty, jotta ne pystyvät kiinnittämään punaisia verisoluja, menetelmäl-: · 25 lä, joka on selitetty teoksessa Methods of Enzymology. voi 73, CH Heusser, JW Stocke, RH Gisler, Academical Press Inc. (1981).
Valmistetaan suspensio kuten esimerkissä 1, 0,02 % (w/V) Estapor-magneettipartikkeista, jotka ovat läpimital-30 taan 0,8 % mikrometriä, mutta ne peitetään anti-hiiri- globuliineilla.
50 mikrolitraa 1 % (w/V) suspensiota tutkittavista punaisista verisoluista, jotka on aiemmin pesty, jaetaan kolmeen kuppiin per näyte ja levy jätetään viideksi minuu-35 tiksi huoneenlämpötilaan ennen kuin ne pestään suolaliuoksella. Yhteen kutakin näytettä sisältävästä kolmesta kupis- 20 106225 ta tuodaan 50 mikrolitraa hiiren anti-A-testiseerumia ja 100 mikrolitraa ionivoimakkuudeltaan matalaa liuosta, toiseen tuodaan 50 mikrolitraa hiiren anti-B-testiseerumia ja sama määrä matalaionista liuosta, ja kolmanteen kuppiin 5 tuodaan anti-A + B-testiseerumia samoin kuin matalaionista liuosta. 20 minuutin inkuboinnin jälkeen, joka on tapahtunut 37 °C:ssa, kupit pestään ja 50 mikrolitraa magneetti-partikkeliseosta tuodaan kuhunkin kuppiin, ennen kuin lautanen alistetaan esimerkin 2 mukaiselle kolmivaiheiselle io magneettikäsittelylle.
Magneettipartikkelien jakautumisen tarkastelu mahdollisti ryhmien A, B, AB tai O virheettömän määrittelyn kustakin 70 näytteestä, joista joillakin oli heikko anti-geenisuus, ryhmien ollessa A3, A3B, Ax, B3 tai Bh.
15 Esimerkki 6
IgG-tyyppi s ten ixmnunoglobuliinien määrittely Esimerkin 1 mukaisesti valmistetaan anti-ihmis IgG-vasta-aineella herkistetty magneettipartikkelien suspensio.
Lisäksi jäykkä, 96 kuppia käsittävä polystyreeninen 20 mikrotitrauslevy, jota markkinoi ranskalainen Polylabo niminen yhtiö viitteellä M 24 A, peitetään vuohen anti-ihmis IgG vasta-aineella seuraavasti: 100 mikrolitraa vesiliuos ta, jossa on 2,2 mg/ml anti-IgG:a tuodaan astiaan ja jätetään inkuboitumaan yhdeksi tunniksi 37 °C:seen ja yhdeksi ? 25 yöksi 4 °C:seen. Nesteen poistamisen jälkeen lokerot täyte tään GBS-puskuriliuoksella, joka sisältää 0,1% naudan see-rumialbumiinia, ja sen annetaan olla kontaktissa yhden yön 4 °C:ssa, sen jälkeen se pestään toistuvasti vesiliuoksella, jossa on 0,9% (w/V) NaCl:a. Tutkittavat näytteet, joi-• - 30 den konsentraatio on 1 mikrogramma/millilitra, valmistetaan liuottamalla Sigman viitteellä I 4506 markkinoimaa immu-noglobuliinia IgG vesiliuokseen, jossa on NaCl:a (0,9 %) sisältäen 2 % seerumialbumiinia; negatiiviset koetulokset sisältävät vain ohennetta. Levyn kuhunkin kuppiin tuodaan-35 on 100 mikrolitraa näytettä ja jätetään inkuboitumaan 45 minuutiksi 37 °C:seen ennen suolaliuospesua.
106225 21
Jokaiseen kuppiin tuodaan 50 mikrolitraa magneetti-partikkelisuspensiota, joka on konsentroitu 0,02 %:ksi GBS-puskuriaineessa, jonka pH on 8,2, johon on lisätty 0,1 % naudan seerumialbumiinia, ja levy alistetaan esimer-5 kissa 2 selitetylle magneettikäsittelylle. Positiivisen tu-. loksen antavat kupit erottaa täydellisesti paljaalla silmällä negatiivisen tuloksen antavista kupeista.
Esimerkki 7
Epäsäännöllisten punaisten verisolujen vasta lo aineiden löytäminen
Magneettipartikkeliliuokset ja ne tutkittavien seerumien tai plasmojen liuokset, jotka sisältävät epäsäännöllisiä vasta-aineita (laimennukset aina 1/2048 osaan asti), valmistetaan kuten esimerkissä 1.
15 Toisaalta tutkitaan 26 seerumia tai plasmaa, jotka sisältävät epäsäännöllisiä allovasta-aineita, jotka ovat ominaisuuksiltaan kuten C, c, E, D, K, Kpb, Fya, Fyb, Jka, Jkb, S tai Lub, ja toisaalta 170 niin kutsuttua negatiivista plasmaa, joiden ei tiedetä sisältävän yhtään epäsäännöl-20 listä vasta-ainetta.
Kupit esikäsitellään kuten esimerkissä 5, sitten 50 mikrolitraa 1 % (w/V) reagenssipunasolujen suspensiota, jonka ominaisuudet suhteessa vasta-aineeseen ovat tunnettuja, tuodaan kuppeihin, jotka pestään sen jälkeen, kun ne 25 ovat seisseet 5 minuuttia huoneenlämmössä.
Epäsäännöllisiä vasta-aineita sisältävien plasmojen tutkimista varten valmistetaan kutakin esimerkkiä varten kuppi, jossa on reagenssipunasoluja, joilla on testattavaa vasta-ainetta vastaavaa antigeeni, ja kuppi, jossa on rea- . 30 genssipunasoluja, jotka eivät sisällä tätä antigeeniä.
• «
Laimentamattomien negatiivisten plasmojen tutkimista varten yksi kuppi sisältää reagenssipunasoluja, joilla on koko asteikko veriryhmäantigeeneja.
Pestyihin kuppeihin tuodaan 50 mikrolitraa tutkit-35 tavaa liuosta ja 100 mikrolitraa ionivahvuudeltaan alhaista liuosta, ja ne jätetään inkuboitumaan 20 minuutiksi 106225 22 37 °C:seen. Kupit pestään sitten, ennen kuin 50 mikrolitraa magneettipartikkelisuspensiota tuodaan niihin ja lautanen alistetaan kolmivaiheiselle käsittelylle, jota on selitetty esimerkissä 2, ennen kuin partikkelien jakautumista tark-5 käillään joko paljaalla silmällä tai valomittarilla.
Negatiivisista plasmoista ei löydetty yhtään väärää positiivista reaktiota, mikä osoittaa menetelmän hyvää spe-sifiteettiä.
Tiitterit, toisin sanoen viimeinen laimennos, josta 10 havaittiin positiivinen reaktio, tutkituille vasta-ainenäytteille, annetaan taulukossa 1.
Tiitterin määrittely seerumista, joka sisältää an-ti-D-vasta-ainetta, toistettiin 10 kertaa useissa tilanteissa; yhtään merkittävää eroa 1/128 tiitterille ei ha-15 vaittu.
Vertailun vuoksi 26 epäsäännöllisen vasta-ainenäytteen määrittely suoritettiin välineillä, joita markkinoi Immucor tavaramerkillä Capture®. Huomattiin, että keksinnön mukainen menetelmä antoi 56 %:lle näytteistä net-20 tokasvun herkkyydessä, joka vastaa tiitterierotusta yhdestä kolmeen.
·· « 106225 23
Taulukko 1 Näyte nro Spesifiteetti Titteri 1 anti-c 4 2 anti-c + E 2048 5 3 anti-D + C (D:lle 128 (E:lie 32 4 anti-E 128 5 anti-Fya 64 6 anti-Jkb 256 10 7 anti-Kell 64 8 anti-D >2048 9 anti-Kpb 128 10 anti-Lub 32 11 anti-D 128 15 12 anti-S 16 13 anti-c + E 512 14 anti-E 256 15 anti-E 64 16 anti-c + Keli (K:lie 64 20 (c:lle 64 17 anti-Fya 4 18 anti-E + Cw (E:lie 32 19 anti-Fyb 16 20 anti-JKa 32 25 21 anti-E 8 22 anti-Kell 256 23 anti-Fya 256 24 anti-c 128 25 anti-D + Fya (D:lle 64 30 26 anti-E + Keli (K:lie 64 ” (E: lie 1024
Claims (16)
1. Menetelmä biologisen aineen määrittelemiseksi tai löytämiseksi näytteestä immuuniadheesion avulla, 5 tunnettu siitä, että se käsittää näytteen tuomisen astiaan, jonka seinillä on komponentti, jolla on spesifinen immunologinen affiniteetti tutkittavaan aineeseen, magneettisten partikkelien lisäämisen, joilla on ainetta, jolla on spesifinen immunologinen affiniteetti testatta-10 vaan aineeseen, niiden alistamisen usealle peräkkäiselle magneettiselle vaikutukselle, jotta mainittujen partikkelien kerrostuminen seinille kiihtyy ja jotta ne partikkelit siirtyvät paikaltaan, jotka eivät ole muodostaneet spesifisiä sidoksia testattavaan aineeseen, joka tarttuu 15 seiniin sinne kiinnittyneen affiniteettia omaavan komponentin avulla, ja kerrostuneiden partikkelien tarkastelun.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että se käsittää: a) mainitun näytteen tuomisen astiaan, jonka sei-20 nillä on komponentti, jolla on spesifinen immunologinen affiniteetti testattavaan aineeseen, b) magneettisten partikkelien lisäämisen, joilla on ainetta, jolla on spesifinen immunologinen affiniteetti testattavaan aineeseen, * * 25 c) partikkelien alistamisen staattisen magneetti kentän vaikutukselle, jotta partikkelit peittyvät seinille ja täten mahdollistavat immunologisen reaktion, d) sen jälkeen partikkelien alistamisen vaihtele-van suuntaisen magneettikentän vaikutukselle niiden par- , 30 tikkelien siirtämiseksi ja keräämiseksi pohjalle, jotka eivät ole kiinnittyneet spesifisellä sidoksella seiniin testattavan aineen eikä seinään kiinnittyneen, affiniteetin omaavan komponentin välityksellä, ja lopuksi, e) kerrostuneiden-partikkelien tarkastelun.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että se sisältää: 106225 a) mainitun näytteen tuomisen astiaan, jossa on seinillä komponentti, jolla on spesifinen immunologinen affiniteetti testattavaan aineeseen, b) magneettisten partikkelien lisäämisen, joissa 5 on ainetta, jolla on spesifinen immunologinen affiniteetti testattavaan aineeseen, c) partikkelien alistamisen staattisen magneettikentän vaikutukselle, jotta ne kerrostuvat seinille ja täten mahdollistavat immunologisen reaktion, 10 d) sitten partikkelien alistamisen vaihtelevan suuntaisen magneettikentän vaikutukselle niiden partikkelien poisvetämiseksi ja keräämiseksi pohjalle, jotka eivät ole kiinnittyneet spesifisellä sidoksella seiniin testattavan aineen eikä seiniin kiinnittyneen, affiniteettia 15 omaavan komponentin välityksellä, e) partikkelien alistamisen staattisen magneettikentän vaikutukselle niiden partikkelien siirtämiseksi astiasta, jotka eivät tartu siihen immunologisten sidosten välityksellä, 20 f) ja kerrostuneiden partikkelien tarkastelun.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että se sisältää: a) mainitun näytteen tuomisen astiaan, jossa on seinillä komponentti, jolla on spesifinen immunologinen « : 25 affiniteetti testattavaan aineeseen, b) magneettisten partikkelien lisäämisen, joissa on ainetta, jolla on spesifinen immunologinen affiniteetti testattavaan aineeseen, c) partikkelien alistamisen staattisen magneetti- 30 kentän vaikutukselle niiden tuomiseksi seinille ja täten mahdollistaen luonteenomaisen immunologisen reaktion, d) sitten astian alistamisen staattisen magneettikentän vaikutukselle niiden partikkelien siirtämiseksi astiasta, jotka eivät tartu sen seiniin immunologistyyppi- 35 sellä sidoksella, e) ja kerrostuneiden partikkelien tarkastelun. 106225
5. Jonkin patenttivaatimuksen 1-4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että siinä lisäksi suoritetaan inkubointitoimenpide ja sitten pesutoimenpide vaiheiden a ja b välillä.
6. Jonkin patenttivaatimuksen 1-3 mukainen mene telmä, tunnettu siitä, että siinä vaihtelevan suuntainen kenttä on seurausta astian kierron muuttamisesta staattisessa magneettikentässä.
7. Patenttivaatimuksen 3 tai 4 mukainen menetelmä, 10 tunnettu siitä, että niiden partikkelien poistamiseksi, jotka eivät tartu, astiaan tuodaan sopivasti magne-tisoitunut sauva, johon vain nämä partikkelit kiinnittyvät .
8. Jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukainen mene-15 telmä, tunnettu siitä, että se suoritetaan samanaikaisesti useassa mikrotitrauslevyn kupissa.
9. Patenttivaatimuksen 8 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että magneettisten partikkelien läpimitta on 0,5 - 5 mikrometriä.
10. Patenttivaatimuksen 9 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että magneettisten partikkelien läpimitta on 0,8 - 1,7 mikrometriä.
11. Laite patenttivaatimuksen 2 mukaisen menetelmän täytäntöön panemiseksi mikrotitrauslevyllä, V « • 25 tunnettu siitä, että se sisältää: - mikrotitrauslevyn (1) vaakasuorassa pitävän tuen (3), joka pystyy saamaan levyn horisontaaliseen kierto-käännösliikkeeseen, - magneettien (6) sarja (5), joiden yläpäät ovat . 30 yhdensuuntaiset levyn (1) kanssa ja ovat kukin kupin (2) alla, magneettien ollessa järjestetty ruutukuvioon vuorotellen pohjois- ja etelänsuuntaan (6a, 6b), tai järjestetty nauhoihin, joissa päiden suunnat vuorottelevat.
12. Laite patenttivaatimuksen 2 mukaisen menetel-35 män täytäntöön panemiseksi mikrotitrauslevylle, tunnettu siitä, että se sisältää: 27 106225 - kiinteän, mikrotitrauslevyn vaakasuorassa pitävän tuen, - magneettien sarjan, joiden yläpäät ovat yhdensuuntaiset levyn kanssa ja ovat kukin kupin alapuolella, 5 magneettien ollessa joko järjestty ruutukuvioon, jossa pohjois/eteläsuunnat ovat vuorotellen, tai järjestetty nauhoihin, joissa päiden suunnat vuorottelevat, tämän sarjan ollessa varustettu välineellä, joka saattaa sen horisontaalisen kiertokäännösliikkeeseen.
13. Patenttivaatimuksen 11 tai 12 mukainen laite, tunnettu siitä, että siinä magneettisarja koostuu magnetisoiduista polymeerinauhoista tai -neliöistä.
14. Patenttivaatimuksen 11 tai 12 mukainen laite patenttivaatimuksen 3 tai patenttivaatimuksen 4 mukaisen 15 menetelmän täytäntöön panemiseksi mikrotitrauslevyllä, tunnettu siitä, että se lisäksi sisältää sarjan magnetisoituja sauvoja (22) ja välineet niiden tuomiseksi samanaikaisesti kaikkiin kuppeihin (2) ja niiden poistamiseksi .
15. Laite patenttivaatimuksen 4 mukaisen menetel män täytäntöön panemiseksi mikrotitrauslevyllä, tunnettu siitä, että se sisältää: mikrotitrauslevyn vaakasuorassa pitävän tuen, ja välineet, jotka mahdollistavat sille vyöhykkeelle, jossa astiat • · • 25 ovat, magneettikentän luomisen, joka attrahoi partikkelit seiniä kohti, jolloin mikrotitrauslevyn tuki ja magneetit sijaitsevat kiinteästi toisiinsa nähden, ja sarjan magnetisoituja sauvoja (22) ja välineet niiden tuomiseksi samanaikaisesti kaikkiin kuppeihin (2) ja niiden poistami- . 30 seksi. a
16. Biologinen analyysilaite, tunnettu siitä, että se käsittää minkä hyvänsä patenttivaatimuksen 11 - 14 ja/tai patenttivaatimuksen 15 mukaisen laitteen. 105225
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR9109242A FR2679660B1 (fr) | 1991-07-22 | 1991-07-22 | Procede et dispositif magnetique d'analyse immunologique sur phase solide. |
| FR9109242 | 1991-07-22 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI923327A0 FI923327A0 (fi) | 1992-07-21 |
| FI923327A FI923327A (fi) | 1993-01-23 |
| FI106225B true FI106225B (fi) | 2000-12-15 |
Family
ID=9415389
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI923327A FI106225B (fi) | 1991-07-22 | 1992-07-21 | Menetelmä ja magneettilaite kiinteällä faasilla tapahtuvaa immunologista analyysiä varten |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5318914A (fi) |
| EP (1) | EP0528708B1 (fi) |
| JP (1) | JP2510932B2 (fi) |
| AT (1) | ATE137024T1 (fi) |
| AU (1) | AU648680B2 (fi) |
| CA (1) | CA2074278C (fi) |
| DE (1) | DE69209935T2 (fi) |
| DK (1) | DK0528708T3 (fi) |
| ES (1) | ES2086688T3 (fi) |
| FI (1) | FI106225B (fi) |
| FR (1) | FR2679660B1 (fi) |
| GR (1) | GR3019891T3 (fi) |
Families Citing this family (87)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5403745A (en) * | 1990-04-27 | 1995-04-04 | Genzyme Corporation | Determination of analytes in biological fluids in the presence of substances interfering with assays therefor |
| IE76732B1 (en) * | 1990-08-07 | 1997-11-05 | Becton Dickinson Co | One step test for absolute counts |
| DE1130397T1 (de) * | 1993-02-01 | 2002-04-04 | Thermo Labsystems Oy, Helsinki | Ausrüstung zur Bestimmung eines Analyten in einer Probe |
| FI930440A0 (fi) | 1993-02-01 | 1993-02-01 | Labsystems Oy | Bestaemningsfoerfarande |
| JP3607320B2 (ja) * | 1994-09-02 | 2005-01-05 | 株式会社日立製作所 | 微粒子を用いた分析における固相の回収方法及び装置 |
| FI944940A0 (fi) * | 1994-10-20 | 1994-10-20 | Labsystems Oy | Tvaofasigt separeringsfoerfarande |
| FI944937A0 (fi) | 1994-10-20 | 1994-10-20 | Labsystems Oy | Separeringsanordning |
| FI944938A0 (fi) * | 1994-10-20 | 1994-10-20 | Labsystems Oy | Foerflyttningsanordning |
| FI944939A0 (fi) * | 1994-10-20 | 1994-10-20 | Labsystems Oy | Foerfarande foer separering av partiklar |
| US5571481A (en) * | 1995-02-17 | 1996-11-05 | Vicam, L.P. | Magnetic capture rack with slidable magnetic member |
| US6919175B1 (en) | 1995-04-01 | 2005-07-19 | Roche Diagnostics Gmbh | System for releasing and isolating nucleic acids |
| DE19512368A1 (de) * | 1995-04-01 | 1996-10-02 | Boehringer Mannheim Gmbh | System zur Freisetzung und Isolierung von Nukleinsäuren |
| US5835329A (en) * | 1995-06-05 | 1998-11-10 | Solid Phase Sciences Corporation | Apparatus for agitation separation of magnetic particles |
| US5639669A (en) * | 1995-06-07 | 1997-06-17 | Ledley; Robert | Separation of fetal cells from maternal blood |
| US5660990A (en) * | 1995-08-18 | 1997-08-26 | Immunivest Corporation | Surface immobilization of magnetically collected materials |
| US5776784A (en) * | 1996-01-11 | 1998-07-07 | Dade International Inc. | Apparatus and method for reagent separation in a chemical analyzer |
| US5856194A (en) | 1996-09-19 | 1999-01-05 | Abbott Laboratories | Method for determination of item of interest in a sample |
| US5795784A (en) | 1996-09-19 | 1998-08-18 | Abbott Laboratories | Method of performing a process for determining an item of interest in a sample |
| CH688987A5 (de) * | 1996-11-13 | 1998-07-15 | Doebelin Werner | Reaktionskammer fuer die chemische Synthese oder verwandte Anwendungen. |
| EP0963554B1 (de) * | 1997-01-30 | 2002-10-23 | MERCK PATENT GmbH | Verfahren zur immunologischen bestimmung eines analyten |
| FR2758884B1 (fr) * | 1997-01-30 | 1999-04-02 | Bio Merieux | Procede pour isoler, notamment detecter ou quantifier un analyte dans un milieu |
| JPH10246725A (ja) * | 1997-03-03 | 1998-09-14 | Mikio Nakayama | 抗体又は抗原の検出方法 |
| WO1998043067A1 (en) * | 1997-03-25 | 1998-10-01 | Immunivest Corporation | Apparatus and methods for capture and analysis of particulate entities |
| GB9719774D0 (en) * | 1997-09-18 | 1997-11-19 | Glaxo Group Ltd | Device |
| US6046585A (en) * | 1997-11-21 | 2000-04-04 | Quantum Design, Inc. | Method and apparatus for making quantitative measurements of localized accumulations of target particles having magnetic particles bound thereto |
| US6180418B1 (en) | 1998-01-20 | 2001-01-30 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Force discrimination assay |
| US6036857A (en) * | 1998-02-20 | 2000-03-14 | Florida State University Research Foundation, Inc. | Apparatus for continuous magnetic separation of components from a mixture |
| US8337753B2 (en) | 1998-05-01 | 2012-12-25 | Gen-Probe Incorporated | Temperature-controlled incubator having a receptacle mixing mechanism |
| ATE426456T1 (de) * | 1998-05-01 | 2009-04-15 | Gen Probe Inc | Automatische diagnostische analysevorrichtung |
| US6776174B2 (en) * | 1998-08-21 | 2004-08-17 | Paul E. Nisson | Apparatus for washing magnetic particles |
| US6176609B1 (en) * | 1998-10-13 | 2001-01-23 | V & P Scientific, Inc. | Magnetic tumble stirring method, devices and machines for mixing in vessels |
| JP3863373B2 (ja) * | 1999-03-02 | 2006-12-27 | クオリジエン・インコーポレイテツド | 生物学的流体の分離のための装置を用いる方法 |
| US6193892B1 (en) | 1999-03-03 | 2001-02-27 | Promega Corporation | Magnetic separation assembly and method |
| ATE411110T1 (de) * | 1999-07-19 | 2008-10-15 | Biomerieux Bv | Verfahren zum mengen von magnetteilchen mit einer flüssigkeit |
| JP4171139B2 (ja) * | 1999-07-21 | 2008-10-22 | 住友電気工業株式会社 | 磁性体標識による免疫検査方法とその装置 |
| JP2002001092A (ja) * | 2000-06-22 | 2002-01-08 | Shimadzu Corp | 排液装置 |
| US6645431B2 (en) * | 2001-01-22 | 2003-11-11 | Thomas W. Astle | Apparatus for automated magnetic separation of materials in laboratory trays |
| US6613284B2 (en) * | 2001-02-01 | 2003-09-02 | V&P Scientific, Inc. | Microarrayer |
| US6518747B2 (en) | 2001-02-16 | 2003-02-11 | Quantum Design, Inc. | Method and apparatus for quantitative determination of accumulations of magnetic particles |
| US20030040129A1 (en) * | 2001-08-20 | 2003-02-27 | Shah Haresh P. | Binding assays using magnetically immobilized arrays |
| DK2311934T3 (da) | 2001-09-06 | 2013-09-08 | Rapid Micro Biosystems Inc | Hurtig påvisning af replicerende celler |
| GB0124341D0 (en) * | 2001-10-10 | 2001-11-28 | Randox Lab Ltd | Assay |
| US6461034B1 (en) * | 2001-11-14 | 2002-10-08 | V & P Scientific, Inc. | Use of a bubble paddle tumble stirrer to mix the contents of a vessel while the contents are being removed |
| EP1525447A4 (en) * | 2002-05-31 | 2006-12-06 | Univ California | METHOD AND APPARATUS FOR DETECTING SUBSTANCES OF INTEREST |
| US20040065593A1 (en) * | 2002-09-26 | 2004-04-08 | Cell Works Inc. (A Delaware Corporation) | Automated magnetic sorter |
| US20040157219A1 (en) * | 2003-02-06 | 2004-08-12 | Jianrong Lou | Chemical treatment of biological samples for nucleic acid extraction and kits therefor |
| US7601491B2 (en) * | 2003-02-06 | 2009-10-13 | Becton, Dickinson And Company | Pretreatment method for extraction of nucleic acid from biological samples and kits therefor |
| CN100439515C (zh) * | 2003-03-03 | 2008-12-03 | 清华大学 | 一种核酸分析芯片实验室系统与应用 |
| CN1280428C (zh) * | 2003-05-19 | 2006-10-18 | 清华大学 | 一种基于微小颗粒的生物芯片系统及其应用 |
| FI20031635A0 (fi) * | 2003-11-11 | 2003-11-11 | Thermo Electron Oy | Partikkelien erotusväline |
| US20050239091A1 (en) * | 2004-04-23 | 2005-10-27 | Collis Matthew P | Extraction of nucleic acids using small diameter magnetically-responsive particles |
| FR2869996B1 (fr) * | 2004-05-05 | 2006-12-15 | Diagast Soc Par Actions Simpli | Utilisation de ferrofluides pour le phenotypage sanguin et applications derivees |
| DE102004033811A1 (de) * | 2004-07-12 | 2006-02-02 | Salama, Abdulgabar, Prof. Dr. | Verfahren zum einfachen und schnellen Nachweis von Zellen und Biomolekülen mit Hilfe paramagnetischer Partikel |
| WO2006017427A1 (en) * | 2004-08-03 | 2006-02-16 | Becton, Dickinson And Company | Use of magnetic material to fractionate samples |
| EP2322940B1 (en) | 2005-03-10 | 2014-10-29 | Gen-Probe Incorporated | Systems amd methods to perform assays for detecting or quantifing analytes within samples |
| JP5144493B2 (ja) * | 2005-03-28 | 2013-02-13 | ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー | 液体培地中の懸濁物質を撹拌するための改善されたシステムおよび方法 |
| JP4587903B2 (ja) * | 2005-07-29 | 2010-11-24 | シチズンホールディングス株式会社 | 測定器具及びこれを用いた測定用キット、測定方法並びに測定装置 |
| EP1923131A4 (en) * | 2005-08-12 | 2010-10-27 | Toyo University Educational Fo | PROCESS FOR HANDLING BY A ROTARY MAGNETIC FIELD |
| CN1325518C (zh) * | 2005-09-09 | 2007-07-11 | 李勇 | 人细胞膜抗原的保存方法及磁性粒子包被人细胞膜抗原 |
| US9057046B2 (en) * | 2005-09-26 | 2015-06-16 | Rapid Micro Biosystems, Inc. | Cassette containing growth medium |
| FR2892820B1 (fr) * | 2005-11-03 | 2008-02-01 | Diagast Soc Par Actions Simpli | Procede magnetique d'immunodiagnostic pour la mise en evidence de complexe anticorps/antigene, en particulier de groupe sanguin |
| DE102006030056B3 (de) * | 2006-06-29 | 2007-06-21 | Ika - Werke Gmbh & Co. Kg | Mikrotiterplatte mit Rührelementen |
| EP2030689B1 (de) | 2007-08-31 | 2013-02-13 | Tecan Trading AG | Mikroplatten-Träger mit Magneten |
| CN101952725B (zh) * | 2007-12-03 | 2014-12-10 | 多摩川精机株式会社 | 使用了包覆磁性微粒的生物传感方法以及用于该方法的生物传感装置 |
| WO2009125971A2 (ko) * | 2008-04-09 | 2009-10-15 | (주)바이오니아 | 자동정제장치, 멀티 웰 플레이트 키트 및 생물학적 시료로부터 핵산을 추출하는 방법 |
| WO2010036829A1 (en) | 2008-09-24 | 2010-04-01 | Straus Holdings Inc. | Imaging analyzer for testing analytes |
| DE102009048918A1 (de) * | 2009-10-10 | 2011-04-14 | Siemens Healthcare Diagnostics Products Gmbh | Vorrichtung zum Mischen einer Flüssigkeitsprobe |
| US8512558B2 (en) * | 2010-02-19 | 2013-08-20 | Roche Molecular Systems, Inc. | Magnetic separation system comprising flexible magnetic pins |
| SE535918C2 (sv) * | 2010-06-10 | 2013-02-19 | Hemocue Ab | Detektion av magnetiskt inmärkta biologiska komponenter |
| FR2963108B1 (fr) | 2010-07-21 | 2017-06-23 | Diagast | Procede magnetique d'immunodiagnostic et kit pour la mise en evidence de complexe anticorps/antigene de groupe/phenotype sanguin |
| FR2963107B1 (fr) | 2010-07-21 | 2019-06-28 | Diagast | Complexe immuno-magnetique et son utilisation pour le groupage/phenotypage erythrocytaire |
| US9046507B2 (en) | 2010-07-29 | 2015-06-02 | Gen-Probe Incorporated | Method, system and apparatus for incorporating capacitive proximity sensing in an automated fluid transfer procedure |
| WO2012116308A1 (en) | 2011-02-24 | 2012-08-30 | Gen-Probe Incorporated | Systems and methods for distinguishing optical signals of different modulation frequencies in an optical signal detector |
| WO2013009654A1 (en) * | 2011-07-08 | 2013-01-17 | Life Technologies Corporation | Method and apparatus for automated sample manipulation |
| US9745546B2 (en) | 2011-11-07 | 2017-08-29 | Rapid Micro Biosystems, Inc. | Cassette for sterility testing |
| MX2014012439A (es) | 2012-04-16 | 2015-01-16 | Rapid Micro Biosystems Inc | Dispositivo para cultivar celulas. |
| JP6351703B2 (ja) | 2013-03-15 | 2018-07-04 | アボット・ラボラトリーズＡｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ | 垂直配置カルーセルを有する自動診断分析装置および関連方法 |
| WO2014144627A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Abbott Laboratories | Automated diagnostic analyzers having rear accessible track systems and related methods |
| WO2014149118A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-25 | Abbott Laboratories | Diagnostic analyzers with pretreatment carousels and related methods |
| CN103323586A (zh) * | 2013-06-14 | 2013-09-25 | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 | 一种血小板磁化免疫标记分析方法 |
| US10739236B1 (en) | 2015-07-08 | 2020-08-11 | BioSpec Products, Inc. | Apparatus and method for vortex mixing and cell disruption of a laboratory sample |
| CN105543089A (zh) * | 2016-03-08 | 2016-05-04 | 湖南圣湘生物科技有限公司 | 一种磁珠法核酸提取装置及方法 |
| RU2643385C1 (ru) * | 2016-11-11 | 2018-02-01 | Общество с ограниченной ответственностью "ДРД" | Устройство для разделения магнитных частиц из реакционных жидкостей |
| CN112740017A (zh) | 2018-04-19 | 2021-04-30 | 曙光诊断学公司 | 靶标检测 |
| KR102256776B1 (ko) | 2018-07-26 | 2021-05-27 | (주)바이오니아 | 자석봉 블록의 교체가 가능한 표적물질 추출장치 |
| CN110372071B (zh) * | 2019-08-02 | 2021-09-17 | 江苏天鑫中冶环保设备有限公司 | 一种煤矿井下用矿井水磁分离水体净化工艺及设备 |
| KR102478198B1 (ko) | 2022-02-03 | 2022-12-19 | 주식회사 에이블랩스 | 타겟물질의 자동 분리 장치, 이를 구비한 액체 핸들링 시스템 및 분리 방법 |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3693941A (en) * | 1971-08-23 | 1972-09-26 | Jan S Suchy | Electromagnetically propelled stirrer and shaker |
| US4085037A (en) * | 1975-12-29 | 1978-04-18 | Union Carbide Corporation | Process for separation of non-magnetic particles with ferromagnetic media |
| SE397637B (sv) * | 1976-03-09 | 1977-11-14 | Wik G | Magnetomrorare |
| US4272510A (en) * | 1976-04-26 | 1981-06-09 | Smith Kendall O | Magnetic attraction transfer process for use in solid phase radioimmunoassays and in other assay methods |
| EP0052324B1 (de) * | 1980-11-17 | 1986-03-05 | Helmut Dipl.-Ing. Herz | Magnet-Rühreinrichtung |
| SE8601143L (sv) * | 1986-03-12 | 1987-09-13 | Carbematrix Ab | Sett och anordning for samling och spridning av ferromagnetiska partiklar i ett fluidformigt medium |
| JPH0737989B2 (ja) * | 1986-07-04 | 1995-04-26 | 東ソー株式会社 | 免疫反応の測定方法および装置 |
| US4988618A (en) * | 1987-11-16 | 1991-01-29 | Gene-Trak Systems | Magnetic separation device and methods for use in heterogeneous assays |
| EP0351857B1 (en) * | 1988-07-20 | 1994-11-30 | Olympus Optical Co., Ltd. | Immunoassay method using magnetic marker particles |
| JP2647931B2 (ja) * | 1988-10-31 | 1997-08-27 | オリンパス光学工業株式会社 | 免疫学的測定方法 |
| JPH02210262A (ja) * | 1989-02-10 | 1990-08-21 | Shinotesuto Kenkyusho:Kk | 間接凝集反応測定法 |
| US4911555A (en) * | 1989-05-04 | 1990-03-27 | The Jackson Laboratory | Magnetic stirrer for multiple samples |
-
1991
- 1991-07-22 FR FR9109242A patent/FR2679660B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
1992
- 1992-07-21 FI FI923327A patent/FI106225B/fi not_active IP Right Cessation
- 1992-07-21 DE DE69209935T patent/DE69209935T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-07-21 DK DK92402101.7T patent/DK0528708T3/da active
- 1992-07-21 ES ES92402101T patent/ES2086688T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-07-21 EP EP92402101A patent/EP0528708B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1992-07-21 AT AT92402101T patent/ATE137024T1/de active
- 1992-07-21 US US07/916,494 patent/US5318914A/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-07-21 CA CA002074278A patent/CA2074278C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-07-21 AU AU20456/92A patent/AU648680B2/en not_active Expired
- 1992-07-22 JP JP4216480A patent/JP2510932B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1994
- 1994-03-14 US US08/209,274 patent/US5558839A/en not_active Expired - Fee Related
-
1996
- 1996-05-13 GR GR960401271T patent/GR3019891T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI923327A0 (fi) | 1992-07-21 |
| AU648680B2 (en) | 1994-04-28 |
| GR3019891T3 (en) | 1996-08-31 |
| EP0528708B1 (fr) | 1996-04-17 |
| JPH05203651A (ja) | 1993-08-10 |
| DE69209935T2 (de) | 1996-10-02 |
| ES2086688T3 (es) | 1996-07-01 |
| FR2679660A1 (fr) | 1993-01-29 |
| US5558839A (en) | 1996-09-24 |
| CA2074278C (en) | 2004-06-08 |
| EP0528708A1 (fr) | 1993-02-24 |
| FR2679660B1 (fr) | 1993-11-12 |
| JP2510932B2 (ja) | 1996-06-26 |
| DK0528708T3 (da) | 1996-08-12 |
| CA2074278A1 (en) | 1993-01-23 |
| ATE137024T1 (de) | 1996-05-15 |
| DE69209935D1 (de) | 1996-05-23 |
| AU2045692A (en) | 1993-01-28 |
| FI923327A (fi) | 1993-01-23 |
| US5318914A (en) | 1994-06-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI106225B (fi) | Menetelmä ja magneettilaite kiinteällä faasilla tapahtuvaa immunologista analyysiä varten | |
| EP0351857B1 (en) | Immunoassay method using magnetic marker particles | |
| US5338689A (en) | Method and card for detecting antigens and/or antibodies | |
| US5460940A (en) | Method for detecting antigens and/or antibodies | |
| US5340749A (en) | Method for collecting and preparing specimens for immune reactions | |
| JP5223676B2 (ja) | 特に血液型の抗体／抗原複合体の存在の証明のための磁気的免疫診断方法 | |
| WO2012010654A2 (en) | Immmunomagnetic complex and its use in red blood cell grouping/phenotyping | |
| CN110308288B (zh) | 一种新型血小板交叉配型试剂盒 | |
| CA1332148C (en) | Capillary flow device and double capture assay method | |
| JP2532670B2 (ja) | 磁性マ―カ―粒子を用いた免疫学的測定方法 | |
| JPH08201391A (ja) | マ−カ−粒子を用いた免疫学的測定方法 | |
| JP2614997B2 (ja) | 凝集反応のための反応促進装置 | |
| JPH07117541B2 (ja) | 磁性粒子を用いた免疫学的測定方法 | |
| JP3290730B2 (ja) | 反応形態の展開装置および方法 | |
| JP2647931B2 (ja) | 免疫学的測定方法 | |
| JPH02141667A (ja) | 血球粒子 | |
| JPH03191864A (ja) | 間接凝集免疫測定方法及び装置 | |
| JP2716227B2 (ja) | 磁性マーカー粒子を用いた免疫学的測定方法 | |
| JPH06148188A (ja) | 免疫学的再検査方法 | |
| Plapp et al. | The evolution of pretransfusion testing: from agglutination to solid-phase red cell adherence tests | |
| US20050130223A1 (en) | Method, system and kit for detecting an analyte in a sample |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TC | Name/ company changed in patent |
Owner name: BIO-RAD INNOVATIONS Free format text: BIO-RAD INNOVATIONS |
|
| MA | Patent expired |