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ES2980464T3 - Productos intermedios sintéticos útiles para preparar compuestos de aminopurina sustituidos - Google Patents

Productos intermedios sintéticos útiles para preparar compuestos de aminopurina sustituidos Download PDF

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ES2980464T3
ES2980464T3 ES20214685T ES20214685T ES2980464T3 ES 2980464 T3 ES2980464 T3 ES 2980464T3 ES 20214685 T ES20214685 T ES 20214685T ES 20214685 T ES20214685 T ES 20214685T ES 2980464 T3 ES2980464 T3 ES 2980464T3
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ES
Spain
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amino
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unsubstituted
pyran
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ES20214685T
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English (en)
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Matthew Alexander
Sogole Bahmanyar
John Frederick Boylan
Joshua Hansen
Dehua Huang
Robert Hubbard
Brandon David Jeffy
Jim Leisten
Mehran Moghaddam
Raj Kumar Raheja
Heather Raymon
Kimberly Schwarz
Marianne Sloss
Eduardo Torres
Tam Minh Tran
Shuichan Xu
Jingjing Zhao
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Signal Pharmaceuticals LLC
Original Assignee
Signal Pharmaceuticals LLC
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Abstract

Se proporciona aquí un compuesto de fórmula (I): y sales, tautómeros, estereoisómeros, enantiómeros e isotólogos farmacéuticamente aceptables del mismo, donde R 1 , R 2 y R 3 son como se definen aquí. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Productos intermedios sintéticos útiles para preparar compuestos de aminopurina sustituidos
CAMPO
Se desvelan en el presente documento ciertos compuestos de aminopurina, composiciones que comprenden una cantidad eficaz de dichos compuestos, y métodos de prevención o tratamiento de un cáncer, por ejemplo, melanoma, que comprenden administrar una cantidad eficaz de dichos compuestos de aminopurina a un sujeto que lo necesita.
ANTECEDENTES
El melanoma es un cáncer caracterizado por el crecimiento incontrolado de células productoras de pigmento (melanocitos). El melanoma maligno se desarrolla a partir de una transformación neoplásica de melanocitos, que se encuentran predominantemente en la capa basal de la epidermis y el ojo (Spagnolo F et al., Archives of Dermatology Research, 2012, 304: 177-184; Hurst E A et al., Archives of Dermatology Research, 2003, 139: 1067-1073). El melanoma maligno es la forma más agresiva de cáncer de piel. En 2014, se estima que habrá 76.100 nuevos casos de melanoma de piel y se estima que 9.710 personas morirán de esta enfermedad (SEER Stat Fact Sheets: Melanoma of the Skin, Surveillance Epidemiology and End Results Program, - acceso el 2 de junio de 2014 a
http://seer.cancer.gov/statfacts/html/melan.html).
Aunque la extirpación quirúrgica de lesiones tempranas del melanoma conduce a una tasa de curación del 90 %, el melanoma avanzado resiste a la quimioterapia y tiende a metastatizar rápidamente (Spagnolo F et al., Archives of Dermatology Research, 2012, 304: 177-184); por estos motivos, el pronóstico del melanoma avanzado es malo, con tasas de supervivencia a 5 años del 78 % para pacientes con estadio IIIA, 59 % para pacientes con estadio IIIB y 40 % para pacientes con estadio IIIC, respectivamente (Balch C M et al., Journal of Clinical Oncology, 2009, 27(36): 6199-6206). Para pacientes con metástasis distantes, el pronóstico empeora significativamente, con tasas de supervivencia a 1 año del 62 % para el estadio M1a, 53 % para el estadio M1b y solo del 33 % para el estadio M1c (Balch C M et al., Journal of Clinical Oncology, 2009, 27(36): 6199-6206).
Las opciones de tratamiento para el melanoma metastásico son limitadas. Antes de 2011, la FDA solo había autorizado dos terapias para el melanoma metastásico: dacarbazina e interleucina 2 de alta dosis ("IL-2 AD"), ninguna de ellas aumentó la mediana de la supervivencia global (Hill G et al., Cancer, 1984, 53:1299-1305; Atkins M et al., Journal of Clinical Oncology, 1999, 17(7): 2105-2116; Phan G et al., Journal of Clinical Oncology, 2001, 19(15): 3477-3482). Además, la dacarbazina está limitada por una baja tasa de respuesta del 10 % al 15 %, mientras que IL-2 AD tiene una tasa de respuesta incluso más baja del 6 % al 10 % (Finn L et al., BMC Medicine, 2012, 10:23). Durante 2011, la FDA autorizó dos terapias más para el melanoma avanzado, vemurafenib (Zelboraf™) e ipilimumab (Finn L et al., BMC Medicine, 2012, 10:23). Mientras que vemurafenib ha demostrado buena actividad clínica con una alta tasa de respuesta y baja toxicidad, su aplicabilidad está limitada al 40 %-60 % de pacientes con melanoma que llevan una mutación activante en el gen BRAF que conduce a activación constitutiva de la vía de la proteína cinasa activada por mitógeno ("MAPK"), que provoca un aumento de la proliferación celular, así como un aumento de la actividad oncogénica (Finn L et al., BMC Medicine, 2012, 10:23). Además, la mayoría de los pacientes que responden inicialmente al tratamiento con inhibidores de BRAF recaen, lo que indica el desarrollo de resistencia al fármaco y que demuestra las limitaciones de dirigirse a solo una vía para erradicar el melanoma (Villanueva J et al., Cancer Cell, 2010, 18(6): 683-695; Spagnolo F et al., Archives of Dermatology Research, 2012, 304: 177-184). Ipilmumab pueden inducir respuestas a largo plazo en un subconjunto de pacientes, pero su utilidad está limitada por su baja tasa de respuesta del 10 % al 15 % y por el hecho que mejora la mediana del tiempo de supervivencia en solo dos meses (Finn L et al., BMC Medicine, 2012, 10:23). El documento de patente US2008/0021048 se refiere a compuestos de aminopurina, a composiciones que comprenden dichos compuestos y a su uso en métodos de prevención o tratamiento de diversas enfermedades. Por lo tanto, sigue existiendo una gran necesidad o terapias adicionales para las que exista una gran necesidad de terapias adicionales para el tratamiento de melanoma.
La cita o identificación de cualquier referencia en la Sección 2 de la presente solicitud no se debe interpretar como una admisión de que la referencia sea estado de la técnica para la presente solicitud.
SUMARIO
La presente invención proporciona compuestos como se define en las reivindicaciones.
Se desvelan en el presente documento como referencia compuestos que tienen la siguiente fórmula (I):
y sales, tautómeros, isotopólogos y estereoisómeros farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde R1, R2 y R3 son como se define en el presente documento.
Un compuesto de la fórmula (I) o una sal, tautómero, isotopólogo o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo (denominándose cada uno en el presente documento un "compuesto de aminopurina") se puede usar en los métodos proporcionados en el presente documento. El compuesto de la fórmula (I) o una sal, tautómero, isotopólogo o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo es útil para tratar o prevenir un cáncer, por ejemplo, melanoma.
En un aspecto, se desvelan en el presente documento como referencia compuestos de aminopurina como se describe en la presente divulgación, tales como, por ejemplo, en la Tabla 1.
En un aspecto, se desvelan en el presente documento como referencia productos farmacéuticos que comprenden una cantidad eficaz de un compuesto de aminopurina como se describe en el presente documento, y un portador, excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable. La composición farmacéutica puede ser adecuada para administración oral, parenteral, mucosa, transdérmica o tópica.
En un aspecto, se desvelan en el presente documento como referencia métodos de prevención o tratamiento de melanoma, que comprenden administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad eficaz de un compuesto de aminopurina como se describe en el presente documento; y un portador, excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable. En otro aspecto, se desvelan en el presente documento como referencia métodos de prevención o tratamiento de melanoma, que comprenden administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad eficaz de un compuesto de aminopurina. El compuesto de aminopurina es para su uso en métodos de prevención o tratamiento de melanoma, que comprende administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad eficaz del compuesto de aminopurina. El compuesto de aminopurina es para su uso en métodos de prevención o tratamiento de melanoma, que comprende administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad eficaz del compuesto de aminopurina; y un portador, excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable.
En un aspecto adicional, en el presente documento se desvela como referencia un método de inhibición de una cinasa en una célula que expresa dicha cinasa, que comprende poner en contacto dicha célula con una cantidad eficaz del compuesto de aminopurina como se describe en el presente documento. El método es un métodoin vitrooex vivo.También se desvela como referencia el compuesto de aminopurina para su uso en dichos métodos.
En otro aspecto, en el presente documento se proporcionan métodos de preparación de compuestos de aminopurina como se describe en el presente documento.
Las presentes realizaciones se pueden entender más completamente como referencia a la descripción detallada y ejemplos, que pretenden ejemplificar realizaciones no limitantes.
DESCRIPCIÓN DETALLADA
DEFINICIONES
Un grupo "alquilo" es una hidrocarburo saturado, parcialmente saturado o insaturado no cíclico, de cadena lineal o ramificado, que tiene desde 1 hasta 10 átomos de carbono, normalmente desde 1 hasta 8 carbonos, o, en algunas realizaciones, desde 1 hasta 6, 1 hasta 4, o 2 hasta 6 átomos de carbono. Grupos alquilo representativos incluyen -metilo, -etilo, -n-propilo, -n-butilo, -n-pentilo y -n-hexilo; mientras que alquilos ramificados saturados incluyen -isopropilo,-sec-butilo, -isobutilo, -terc-butilo, -isopentilo, -neopentilo, terc-pentilo, -2-metilpentilo, -3-metilpentilo, -4-metilpentilo, -2,3-dimetilbutilo y similares. Los ejemplos de grupos alquilo insaturado incluyen, pero no se limitan a, vinilo, alilo, -CH=CH(CH3), -CH=C(CH3)2, -C(CH3)=CH2, -C(CH3)=CH(CH3), -C(CH2CH3)=CH2, -C=CH, -C<e>C(CH3), -C<e>C(CH2CH3), -CH2CECH, -CH2C<e>C(CH3) y -CH2C<e>C(CH2CH3), entre otros. Un grupo alquilo puede estar sustituido o sin sustituir. Cuando se dice que los grupos alquilo descritos en el presente documento están "sustituidos", se pueden sustituir con cualquier sustituyente o sustituyentes como los encontrados en los compuestos a modo de ejemplo y realizaciones desveladas en el presente documento, así como halógeno (cloro, yodo, bromo o fluoro); alquilo; hidroxilo; alcoxi; alcoxialquilo; amino; alquilamino; carboxi; nitro; ciano; tiol; tioéter; imina; imida; amidina; guanidina; enamina; aminocarbonilo; acilamino; fosfonato; fosfina; tiocarbonilo; sulfinilo; sulfona; sulfonamida; cetona; aldehido; éster; urea; uretano; oxima; hidroxilamina; alcoxiamina; ariloxiamina, aralcoxiamina; N-óxido; hidracina; hidrazida; hidrazona; azida; isocianato; isotiocianato; cianato; tiocianato; B(OH)2 u O(alquil)aminocarbonilo.
Un grupo "cicloalquilo" es un grupo alquilo cíclico saturado o parcialmente saturado de 3 hasta 10 átomos de carbono que tiene un único anillo cíclico o múltiples anillos condensados o puenteados que se pueden sustituir opcionalmente con desde 1 hasta 3 grupos alquilo. En algunas realizaciones, el grupo cicloalquilo tiene 3 a 8 miembros de anillo, mientras que en otras realizaciones el número de átomos de carbono del anillo varía desde 3 hasta 5, 3 hasta 6, o 3 hasta 7. Dichos grupos cicloalquilo incluyen, a modo de ejemplo, estructuras de un solo anillo, tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, 1 -metilciclopropilo, 2-metilciclopentilo, 2-metilciclooctilo, y similares, o estructuras de múltiples anillos o con puentes, tales como 1-biciclo[1.1.1]pentilo, biciclo[2.1.1]hexilo, biciclo[2.2.1]heptilo, biciclo[2.2.2]octilo, adamantilo y similares. Ejemplos de grupos cicloalquilo insaturados incluyen ciclohexenilo, ciclopentenilo, ciclohexadienilo, butadienilo, pentadienilo, hexadienilo, entre otros. Un grupo cicloalquilo puede estar sustituido o sin sustituir. Tales grupos cicloalquilo sustituidos incluyen, a modo de ejemplo, ciclohexanol y similares.
Un grupo "arilo" es un grupo carbocíclico aromático de 6 hasta 14 átomos de carbono que tiene un único anillo (por ejemplo, fenilo) o múltiples anillos condensados (por ejemplo, naftilo o antrilo). En algunas realizaciones, los grupos arilo contienen 6-14 carbonos, y en otras desde 6 hasta 12 o incluso desde 6 hasta 10 átomos de carbono en las porciones de anillo de los grupos. Arilos particulares incluyen fenilo, bifenilo, naftilo y similares. Un grupo arilo puede estar sustituido o sin sustituir. La expresión "grupos arilo" también incluye grupos que contienen anillos condensados, tales como sistemas de anillos aromáticos-alifáticos condensados (por ejemplo, indanilo, tetrahidronaftilo y similares).
Un grupo "heteroarilo" es un sistema de anillo arilo que tiene de uno a cuatro heteroátomos como átomos de anillo en un sistema de anillo heteroaromático, en donde el resto de los átomos son átomos de carbono. En algunas realizaciones, los grupos heteroarilo contienen 3 a 6 átomos de anillo, y en otras desde 6 hasta 9 o incluso desde 6 hasta 10 átomos en las porciones de anillo de los grupos. Heteroátomos adecuados incluyen oxígeno, azufre y nitrógeno. En determinadas realizaciones, el sistema de anillo heteroarilo es monocíclico o bicíclico. Los ejemplos no limitantes incluyen, pero no se limitan a, grupos tales como grupos pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, triazolilo, tetrazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, bencisoxazolilo (por ejemplo, benzo[d]isoxazolilo), tiazolilo, pirolilo, piridazinilo, pirimidilo, pirazinilo, tiofenilo, benzotiofenilo, furanilo, benzofuranilo, indolilo (por ejemplo, indolil-2-onilo o isoindolin-1-onilo), azaindolilo (pirrolopiridilo o 1H-pirrolo[2,3-b]piridilo), indazolilo, bencimidazolilo (por ejemplo, 1H-benzo[d]imidazolilo), imidazopiridilo (por ejemplo, azabencimidazolilo o 1H-imidazo[4,5-b]piridilo), pirazolopiridilo, triazolopiridilo, benzotriazolilo (por ejemplo, 1H-benzo[d][1,2,3]triazolilo), benzoxazolilo (por ejemplo, benzo[d]oxazolilo), benzotiazolilo, benzotiadiazolilo, isoxazolopiridilo, tianaftalenilo, purinilo, xantinilo, adeninilo, guaninilo, quinolinilo, isoquinolinilo (por ejemplo, 3,4-dihidroisoquinolin-1(2H)-onilo), tetrahidroquinolinilo, quinoxalinilo y quinazolinilo.
Un "heterociclilo" es un cicloalquilo aromático (también denominado heteroarilo) o no aromático en el que de uno a cuatro de los átomos de carbono del anillo están sustituidos independientemente con un heteroátomo del grupo que consiste en O, S y N. En algunas realizaciones, los grupos heterociclilo incluyen 3 a 10 miembros de anillo, mientras que otros de dichos grupos tienen 3 a 5, 3 a 6, o 3 a 8 miembros de anillo. Los heterociclilos también pueden estar unidos a otros grupos en cualquier átomo del anillo (es decir, en cualquier átomo de carbono o heteroátomo del anillo heterocíclico). Un grupo heterocicloalquilo puede estar sustituido o sin sustituir. Los grupos heterociclilo abarcan sistemas anulares insaturados, parcialmente saturados y saturados, tales como, por ejemplo, grupos imidazolilo, imidazolinilo e imidazolidinilo (por ejemplo, imidazolidin-4-ona o imidazolidin-2,4-dionilo). La expresión heterociclilo incluye especies de anillos condensados, que incluyen las que comprenden grupos aromáticos y no aromáticos condensados, tales como, por ejemplo, 1- y 2-aminotetralina, benzotriazolilo (por ejemplo, 1H-benzo[d][1,2,3]triazolilo), bencimidazolilo (por ejemplo, 1H-benzo[d]imidazolilo), 2,3-dihidrobenzo[1,4]dioxinilo y benzo[1,3]dioxolilo. La expresión también incluye sistemas de anillos policíclicos puenteados que contienen un heteroátomo, tal como, pero no se limitan a, quinuclidilo. Los ejemplos representativos de un grupo heterociclilo incluyen, pero no se limitan a, grupos aziridinilo, azetidinilo, azepanilo, oxetanilo, pirrolidilo, imidazolidinilo (por ejemplo, imidazolidin-4-onilo o imidazolidin-2,4-dionilo), pirazolidinilo, tiazolidinilo, tetrahidrotiofenilo, tetrahidrofuranilo, dioxolilo, furanilo, tiofenilo, pirrolilo, pirrolinilo, imidazolilo, imidazolinilo, pirazolilo, pirazolinilo, triazolilo, tetrazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, bencisoxazolilo (por ejemplo, benzo[d]isoxazolilo), tiazolilo, tiazolinilo, isotiazolilo, tiadiazolilo, oxadiazolilo, piperidilo, piperazinilo (por ejemplo, piperazin-2-onilo), morfolinilo, tiomorfolinilo, tetrahidropiranilo (por ejemplo, tetrahidro-2H-piranilo), tetrahidrotiopiranilo, oxatianilo, dioxilo, ditianilo, piranilo, piridilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazinilo, triazinilo, dihidropiridilo, dihidroditiinilo, dihidroditionilo, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanilo, homopiperazinilo, quinuclidilo, indolilo (por ejemplo, indolil-2-onilo o isoindolin-1 -onilo), indolinilo, isoindolilo, isoindolinilo, azaindolilo (pirrolopiridilo o 1H-pirrolo[2,3-b]piridilo), indazolilo, indolizinilo, benzotriazolilo (por ejemplo 1H-benzo[d][1,2,3]triazolilo), bencimidazolilo (por ejemplo, 1H-benzo[d]imidazolilo o 1H-benzo[d]imidazol-2(3H)-onilo), benzofuranilo, benzotiofenilo, benzotiazolilo, benzoxadiazolilo, benzoxazinilo, benzoditiinilo, benzoxatiinilo, benzotiazinilo, benzoxazolilo (es decir, benzo[d]oxazolilo), benzotiazolilo, benzotiadiazolilo, benzo[1,3]dioxolilo, pirazolopiridilo (por ejemplo, 1H-pirazolo[3,4-b]piridilo, 1H-pirazolo[4,3-b]piridilo), imidazopiridilo (por ejemplo, azabencimidazolilo o 1 H-imidazo[4,5-b]piridilo), triazolopiridilo, isoxazolopiridilo, purinilo, xantinilo, adeninilo, guaninilo, quinolinilo, isoquinolinilo (por ejemplo, 3,4-dihidroisoquinolin-1(2H)-onilo), quinolizinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinnolinilo, ftalazinil, naftiridinilo, pteridinilo, tianaftalenilo, dihidrobenzotiazinilo, dihidrobenzofuranilo, dihidroindolilo, dihidrobenzodioxinilo, tetrahidroindolilo, tetrahidroindazolilo, tetrahidrobencimidazolilo, tetrahidrobenzotriazolilo, tetrahidropirrolopiridilo, tetrahidropirazolopiridilo, tetrahidroimidazopiridilo, tetrahidrotriazolopiridilo, tetrahidropirimidin-2(1H)-ona y tetrahidroquinolinilo. Grupos heterociclilo no aromáticos representativos no incluyen especies de anillos condensados que comprenden un grupo aromático condensado. Los ejemplos de grupos heterociclilo no aromáticos incluyen aziridinilo, azetidinilo, azepanilo, pirrolidilo, imidazolidinilo (por ejemplo, imidazolidin-4-onilo o imidazolidin-2,4-dionilo), pirazolidinilo, tiazolidinilo, tetrahidrotiofenilo, tetrahidrofuranilo, piperidilo, piperazinilo (por ejemplo, piperazin-2-onilo), morfolinilo, tiomorfolinilo, tetrahidropiranilo (por ejemplo, tetrahidro-2H-piranilo), tetrahidrotiopiranilo, oxatianilo, ditianilo, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanilo, homopiperazinilo, quinuclidilo o tetrahidropirimidin-2(1H)-ona. Grupos heterociclilo sustituidos representativos pueden estar monosustituidos o sustituidos más de una vez, tales como, pero no limitados a grupos piridilo o morfolinilo, que están 2, 3, 4, 5 o 6-sustituidos o disustituidos con diversos sustituyentes tales como los que se enumeran más adelante.
Un grupo "cicloalquilalquilo" es un radical de la fórmula: -alquil-cicloalquilo, en el que alquilo y cicloalquilo son como se definen anteriormente. Los grupos cicloalquilalquilo sustituidos puede estar sustituidos en el alquilo, el cicloalquilo, o tanto en las porciones de alquilo como de cicloalquilo del grupo. Los grupos cicloalquilalquilo representativos incluyen, pero no se limitan a, metilciclopropilo, metilciclobutilo, metilciclopentilo, metilciclohexilo, etilciclopropilo, etilciclobutilo, etilciclopentilo, etilciclohexilo, propilciclopentilo, propilciclohexilo y similares.
Un grupo "aralquilo" es un radical de la fórmula: -alquil-arilo, en donde alquilo y arilo se definen anteriormente. Los grupos aralquilo sustituidos puede estar sustituidos en el alquilo, el arilo, o tanto las porciones de alquilo como de arilo del grupo. Los grupos aralquilo representativos incluyen, pero no se limitan a, grupos bencilo y fenetilo y grupos (cicloalquilaril)alquilo condensados tales como 4-etil-indanilo.
Un grupo "heterociclilalquilo" es un radical de la fórmula: -alquil-heterociclilo, en donde alquilo y heterociclilo se han definido anteriormente. Grupos heterocicloalquilo sustituidos pueden estar sustituidos en las porciones alquilo, heterociclilo o ambas, alquilo y heterociclilo del grupo. Los grupos heterocililalquilo representativos incluyen, pero no se limitan a, 4-etil-morfolinilo, 4-propilmorfolinilo, furan-2-ilmetilo, furan-3-ilmetilo, piridin-3-ilmetilo, tetrahidrofuran-2-iletilo, e indol-2-ilpropilo.
Un "halógeno" es cloro, yodo, bromo o fluoro.
Un grupo "hidroxialquilo" es un grupo alquilo como se describe en el presente documento sustituido con uno o más grupos hidroxi.
Un grupo "alcoxi" es -O-(alquilo), en donde alquilo se define en el presente documento.
Un grupo "alcoxialquilo" es -(alquil)-O-(alquilo), en donde alquilo se define en el presente documento.
Un grupo "amina" es un radical de la fórmula: -NH2.
Un grupo "hidroxil amina" es un radical de la fórmula: -N(R#)OH o -NHOH, en donde R# es un grupo alquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo, aralquilo, heterociclilo o heterociclilalquilo sustituido o sin sustituir como se define en el presente documento.
Un grupo "alcoxiamina" es un radical de la fórmula: -N(R#)O-alquilo o -NHO-alquilo, en donde R# y alquilo son como se definen en el presente documento.
Un grupo "ariloxiamina" es un radical de la fórmula: -N(R#)O-arilo o -NHO-arilo, en donde R# y arilo son como se definen en el presente documento.
Un grupo "aralcoxiamina" es un radical de la fórmula: -N(R#)O-aralquilo o -NHO-aralquilo, en donde R# y aralquilo como se define en el presente documento.
Un grupo "alquilamina" es un radical de la fórmula: -NH-alquilo o -N(alquilo)2, en donde cada alquilo es independientemente como se define en el presente documento.
Un grupo "aminocarbonilo" es un radical de la fórmula: -C(=O)N(R#)2, -C(=O)NH(R#) o -C(=O)NH2, en donde cada R# es como se define en el presente documento.
Un grupo "acilamino" es un radical de la fórmula: -NHC(=O)(R#) o -N(alquil)C(=O)(R#), en donde cada alquilo y R# son independientemente como se define en el presente documento.
Un grupo "O(alquil)aminocarbonilo" es un radical de la fórmula: -O(alquil)C(=O)N(R#)2, -O(alquil)C(=O)NH(R#) o -O(alquil)C(=O)NH2, en donde cada R# y alquilo son independientemente como se define en el presente documento.
Un grupo "N-óxido" es un radical de la fórmula: -N+-O-.
Un grupo "carboxi" es un radical de la fórmula: -C(=O)OH.
Un grupo "cetona" es un radical de la fórmula: -C(=O)(R#), en donde R# es como se define en el presente documento. Un grupo "aldehído" es un radical de la fórmula: -CH(=O).
Un grupo "éster" es un radical de la fórmula: -C(=O)O(R#) o -OC(=O)(R#), en donde R# es como se define en el presente documento.
Un grupo "urea" es un radical de la fórmula: -N(alquil)C(=O)N(R#)2, -N(alquil)C(=O)NH(R#), -N(alquil)C(=O)NH2, -NHC(=O)N(R#)2, -NHC(=O)NH(R#) o -NHC(=O)NH2#, en donde cada alquilo y R# son independientemente como se define en el presente documento.
Un grupo "imina" es un radical de la fórmula: -N=C(R#)2 o -C(R#)=N(R#), en donde cada R# es independientemente como se define en el presente documento.
Un grupo "imida" es un radical de la fórmula: -C(=O)N(R#)C(=O)(R#) o -N((C=O)(R#))2, en donde cada R# es independientemente como se define en el presente documento.
Un grupo "uretano" es un radical de la fórmula: -OC(=O)N(R#)2, -OC(=O)NH(R#), -N(R#)C(=O)O(R#) o -NHC(=O)O(R#), en donde cada R# es independientemente como se define en el presente documento.
Un grupo "amidina" es un radical de la fórmula: -C(=N(R#))N(R#)2, -C(=N(R#))NH(R#), -C(=N(R#))NH2, -C(=NH)N(R#)2, -C(=NH)NH(R#), -C(=NH)NH2, -N=C(R#)N(R#)2, -N=C(R#)NH(R#), -N=C(R#)NH2, -N(R#)C(R#)=N(R#), -NHC(R#)=N(R#), -N(R#)C(R#)=NH, o -NHC(R#)=NH, en donde cada R# es independientemente como se define en el presente documento. Un grupo "guanidina" es un radical de la fórmula: -N(R#)C(=N(R#))N(R#)2, -NHC(=N(R#))N(R#)2, -N(R#)C(=NH)N(R#)2, -N(R#)C(=N(R#))NH(R#), -N(R#)C(=N(R#))NH2, -NHC(=NH)N(R#)2, -NHC(=N(R#))NH(R#), -NHC(=N(R#))NH2, -NHC(=NH)NH(R#), -NHC(=NH)NH2, -N=C(N(R#)2)2, -N=C(NH(R#))2 o -N=C(NH2)2, en donde cada R# es independientemente como se define en el presente documento.
Un grupo "enamina" es un radical de la fórmula: -N(R#)C(R#)=C(R#)2, -NHC(R#)=C(R#)2, -C(N(R#)2)=C(R#)2, -C(NH(R#))=C(R#)2, -C(NH2)=C(R#)2, -C(R#)=C(R#)(N(R#)2), -C(R#)=C(R#)(NH(R#)) o -C(R#)=C(R#)(NH2), en donde cada R# es independientemente como se define en el presente documento.
Un grupo "oxima" es un radical de la fórmula: -C(=NO(R#))(R#), -C(=NOH)(R#), -CH(=NO(R#)) o -CH(=NOH), en donde cada R# es independientemente como se define en el presente documento.
Un grupo "hidrazida" es un radical de la fórmula: -C(=O)N(R#)N(R#)2, -C(=O)NHN(R#)2, -C(=O)N(R#)NH(R#), -C(=O)N(R#)NH2, -C(=O)NHNH(R#)2 o -C(=O)NHNH2, en donde cada R# es independientemente como se define en el presente documento.
Un grupo "hidrazina" es un radical de la fórmula: -N(R#)N(R#)2, -NHN(R#)2, -N(R#)NH(R#), -N(R#)NH2, -NHNH(R#)2, o -NHNH2, en donde cada R# es independientemente como se define en el presente documento.
Un grupo "hidrazona" es un radical de la fórmula: -C(=N-N(R#)2)(R#)2, -C(=N-NH(R#))(R#)2, -C(=N-NH2)(R#)2, -N(R#)(N=C(R#)2), o -NH(N=C(R#)2), en donde cada R# es independientemente como se define en el presente documento. Un grupo "azida" es un radical de la fórmula: -N3.
Un grupo "isocianato" es un radical de la fórmula: -N=C=O.
Un grupo "isotiocianato" es un radical de la fórmula: -N=C=S.
Un grupo "cianato" es un radical de la fórmula: -OCN.
Un grupo "tiocianato" es un radical de la fórmula: -SCN.
Un grupo "tioéter" es un radical de la fórmula; -S(R#), en donde R# es como se define en el presente documento.
Un grupo "tiocarbonilo" es un radical de la fórmula: -C(=S)(R#), en donde R# es como se define en el presente documento. Un grupo "sulfinilo" es un radical de la fórmula: -S(=O)(R#), en donde R# es como se define en el presente documento. Un grupo "sulfona" es un radical de la fórmula: -S(=O)2(R#), en donde R# es como se define en el presente documento. Un grupo "sulfonilamino" es un radical de la fórmula: -NHSO2(R#) o -N(alquil)SO2(R#), en donde cada alquilo y R# se define en el presente documento.
Un grupo "sulfonamida" es un radical de la fórmula: -S(=O)2N(R#)2, o -S(=O)2NH(R#), o -S(=O)2NH2, en donde cada R# es independientemente como se define en el presente documento.
Un grupo "fosfonato" es un radical de la fórmula: -P(=O)(O(R#))2, -P(=O)(OH)2, -OP(=O)(O(R#))(R#) o -OP(=O)(OH)(R#), en donde cada R# es independientemente como se define en el presente documento.
Un grupo "fosfina" es un radical de la fórmula: -P(R#)2, en donde cada R# es independientemente como se define en el presente documento.
Cuando se dice que los grupos descritos en el presente documento, con excepción del grupo alquilo, están "sustituidos", pueden estar sustituidos con cualquier sustituyente o sustituyentes apropiados. Los ejemplos ilustrativos de sustituyentes son los encontrados en los compuestos y realizaciones a modo de ejemplo desvelados en el presente documento, así como halógeno (cloro, yodo, bromo o fluoro); alquilo; hidroxilo; alcoxi; alcoxialquilo; amino; alquilamino; carboxi; nitro; ciano; tiol; tioéter; imina; imida; amidina; guanidina; enamina; aminocarbonilo; acilamino; fosfonato; fosfina; tiocarbonilo; sulfinilo; sulfona; sulfonamida; cetona; aldehído; éster; urea; uretano; oxima; hidroxilamina; alcoxiamina; ariloxiamina, aralcoxiamina; N-óxido; hidracina; hidrazida; hidrazona; azida; isocianato; isotiocianato; cianato; tiocianato; oxígeno (=O); B(OH)2, O(alquil)aminocarbonilo; cicloalquilo, que puede ser monocíclico o policíclico condensado o no condensado (por ejemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo o ciclohexilo), o un heterociclilo, que puede ser monocíclico o policíclico condensado o no condensado (por ejemplo, pirrolidilo, piperidilo, piperazinilo, morfolinilo o tiazinilo); arilo o heteroarilo monocíclico o policíclico condensado o no condensado (por ejemplo, fenilo, naftilo, pirrolilo, indolilo, furanilo, tiofenilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, pirazolilo, piridinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, acridinilo, pirazinilo, piridazinilo, pirimidinilo, bencimidazolilo, benzotiofenilo o benzofuranilo), ariloxi; aralquiloxi; heterocicliloxi; y heterociclilalcoxi.
Como se usa en el presente documento, el término "compuesto de aminopurina" se refiere a compuestos de los ejemplos desvelados en la fórmula (I), así como a ejemplos adicionales desvelados en el presente documento. Un "compuesto de aminopurina" puede ser un compuesto expuesto en la Tabla 1. El término "compuesto de amonipurina" incluye sales, tautómeros, isotopólogos y estereoisómeros farmacéuticamente aceptables de los compuestos desvelados en el presente documento.
Como se usa en el presente documento, el término "sal(es) farmacéuticamente aceptable(s)" se refiere a una sal preparada a partir de un ácido o base no tóxico farmacéuticamente aceptable, que incluye un ácido y base inorgánico y un ácido y base orgánico. Las sales de adición de bases farmacéuticamente aceptables adecuadas de los compuestos de fórmula (I) incluyen, pero no se limitan a, sales metálicas obtenidas a partir de aluminio, calcio, litio, magnesio, potasio, sodio y zinc, o sales orgánicas obtenidas a partir de lisina, N,N'-dibenciletilendiamina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilendiamina, meglumina (N-metilglucamina) y procaína. Ácidos no tóxicos adecuados incluyen, pero no se limitan a, ácidos inorgánicos y orgánicos, tales como ácido acético, algínico, antranílico, bencenosulfónico, benzoico, canfosulfónico, cítrico, etenosulfónico, fórmico, fumárico, furoico, galacturónico, glucónico, glucurónico, glutámico, glicólico, bromhídrico, clorhídrico, isetiónico, láctico, maleico, málico, mandélico, metanosulfónico, múcico, nítrico, pamoico, pantoténico, fenilacético, fosfórico, propiónico, salicílico, esteárico, succínico, sulfanílico, sulfúrico, tartárico y ácido p-toluenosulfónico. Los ácidos no tóxicos específicos incluyen los ácidos clorhídrico, bromhídrico, maleico, fosfórico, sulfúrico y metanosulfónico. Los ejemplos de sales específicas incluyen, por lo tanto, sales de clorhidrato y mesilato. Otras son bien conocidos en la técnica, véase, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18a ed., Mack Publishing, Easton PA (1990) o Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19a eds., Mack Publishing, Easton PA (1995).
Como se usa en el presente documento y a menos que se indique lo contrario, el término "estereoisómero" o "estereoméricamente puro" significa un estereoisómero de un compuesto de aminopurina que está sustancialmente libre de otros estereoisómeros de ese compuesto. Por ejemplo, un compuesto puro en cuanto a los estereoisómeros que tenga un centro quiral estará sustancialmente libre del enantiómero opuesto del compuesto. Un compuesto puro en cuanto a los estereoisómeros que tenga dos centros quirales estará sustancialmente libre de otros diastereómeros del compuesto. Un compuesto puro en cuanto a los estereoisómeros típico comprende más de aproximadamente 80 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de 20 % en peso de otros estereoisómeros del compuesto, más de aproximadamente 90 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente 10 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, más de aproximadamente 95 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente 5 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, o más de aproximadamente 97 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente 3 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto. Los compuestos de la invención pueden tener centros quirales y pueden ocurrir como racematos, enantiómeros individuales o diastereómeros, y mezclas de los mismos. Todas las formas isoméricas de este tipo están incluidas en las realizaciones descritas en el presente documento, incluyendo mezclas de las mismas.
El uso de formas estereoméricamente puras de los compuestos de la invención, así como el uso de mezclas de las formas, están englobados por las realizaciones desveladas en el presente documento. Por ejemplo, se pueden usar mezclas que comprenden cantidades iguales o desiguales de los enantiómeros de un compuesto particular de la invención. Estos isómeros pueden sintetizarse o resolverse asimétricamente utilizando técnicas estándares tales como columnas quirales o agentes de resolución quirales. Véase, por ejemplo, Jacques, J., et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions (WileyInterscience, Nueva York, 1981); Wilen, S. H., et al., Tetrahedron 33:2725 (1977); Eliel, E. L., Stereochemistry of Carbón Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962); y Wilen, S. H., Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E.L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN, 1972).
También se debe observar que los compuestos de aminopurina pueden incluir isómeros E y Z, o una mezcla de los mismos, e isómeros cis y trans, o una mezcla de los mismos. En ciertas realizaciones, los compuestos de la invención se aíslan como cualquiera del isómero E o Z. En otras realizaciones, los compuestos de la invención son una mezcla de los isómeros E y Z.
"Tautómeros" se refiere a formas isoméricas de un compuesto que están en equilibrio entre sí. Las concentraciones de las formas isoméricas dependerán del entorno en el que se encuentre el compuesto y pueden ser diferentes dependiendo, por ejemplo, de si el compuesto es un sólido o está en una disolución orgánica o acuosa. Por ejemplo, en disolución acuosa, los pirazoles pueden exhibir las siguientes formas isoméricas, que se denominan tautómeros unos de otros:
Como es fácilmente entendido por un experto en la técnica, una amplia variedad de grupos funcionales y otras estructuras pueden presentar tautomería y todos los tautómeros de compuestos de la invención están dentro del alcance de la presente invención.
También se debe observar que los compuestos de aminopurina pueden contener proporciones no naturales de isótopos atómicos en uno o más de los átomos. Por ejemplo, los compuestos pueden estar radiomarcados con isótopos radiactivos, tales como, por ejemplo, tritio (3H), yodo-125 (125I), azufre-35 (35S), o carbono-14 (14C), o pueden estar enriquecidos isotópicamente, tal como con deuterio (2H), carbono-13 (13C) o nitrógeno-15 (15N). Tal como se utiliza en el presente documento, un "isotopólogo" es un compuesto enriquecido isotópicamente. El término "isotópicamente enriquecido" se refiere a un átomo que tiene una composición isotópica distinta de la composición isotópica natural de ese átomo. "Isotópicamente enriquecido" también se puede referir a un compuesto que contiene al menos un átomo que tiene una composición isotópica distinta de la composición isotópica natural de ese átomo. El término "composición isotópica" se refiere a la cantidad de cada isótopo presente para un átomo dado. Los compuestos radiomarcados y enriquecidos isotópicamente son útiles como agentes terapéuticos, por ejemplo, agentes terapéuticos contra el cáncer y la inflamación, reactivos de investigación, por ejemplo, reactivos de ensayos de unión, y agentes de diagnóstico, por ejemplo, agentes de formación de imágenesin vivo.Todas las variaciones isotópicas de los compuestos de la invención, tanto radiactivos como no, pretenden estar englobadas dentro del alcance de las realizaciones proporcionadas en el presente documento. En algunas realizaciones, se proporcionan isotopólogos de los compuestos de la invención, por ejemplo, los isotopólogos están enriquecidos en deuterio, carbono-13 o nitrógeno-15.
"Tratar", tal como se utiliza en el presente documento, significa un alivio, total o parcial, de un trastorno, enfermedad o afección, o de uno o más de los síntomas asociados con un trastorno, enfermedad o afección, o una desaceleración o detención de una progresión adicional o un empeoramiento de esos síntomas, o aliviar o erradicar la(s) causa(s) del trastorno, enfermedad o afección en sí. El trastorno puede ser melanoma.
"Prevenir", tal como se utiliza en el presente documento, significa un método para retrasar y/o impedir la aparición, recurrencia o propagación, total o parcial, de un trastorno, enfermedad o afección; impedir que un sujeto adquiera un trastorno, enfermedad o afección; o reducir el riesgo de un sujeto de adquirir un trastorno, enfermedad o afección. El trastorno puede ser melanoma, como se describe en el presente documento, o síntomas del mismo.
El término "cantidad eficaz", a propósito de un compuesto de aminopurina, significa una cantidad capaz de tratar o prevenir un trastorno, enfermedad o afección, o síntomas del mismo, desvelado en el presente documento. El trastorno puede ser melanoma.
El término "sujeto" incluye un animal, que incluye, pero no se limita a, un animal tal como una vaca, mono, caballo, oveja, cerdo, pollo, pavo, codorniz, gato, perro, ratón, rata, conejo o cobaya, en un ejemplo un mamífero, en otro ejemplo un ser humano. En un ejemplo, un sujeto es un humano que tiene o está en riesgo de tener melanoma, o un síntoma del mismo.
COMPUESTOS DE AMINOPURINA
(La sección "COMPUESTOS DE AMINOPURINA" se desvela como referencia. Las realizaciones en esta sección no se reivindican.)
En el presente documento se proporcionan compuestos que tienen la siguiente fórmula (I):
y sales, tautómeros, estereoisómeros, enantiómeros e isotopólogos farmacéuticamente aceptables de los mismos,
en donde:
R1 es alquilo C1-8 sustituido o sin sustituir, cicloalquilo sustituido o sin sustituir, cicloalquilalquilo sustituido o sin sustituir, o heterociclilo no aromático sustituido o sin sustituir;
R2 es H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir;
R3 es fenilo, sustituido con uno o más halógenos, opcionalmente sustituido además con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, CN y -OR', en donde cada R' es independientemente alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir;
siempre que el compuesto no sea 4-[2-[(1-metiletil)amino]-8-[(2,4,6-trifluorofenil)amino]-9H-purin-9-il]-cisciclohexanocarboxamida
o 4-[8-[(2,4-difluorofenil)amino]-2-[(trans-4-hidroxiciclohexil)amino]-9H purin-9-il]-cis-ciclohexanocarboxamida
En una realización, el compuesto es un compuesto de la fórmula (II):
En algunas realizaciones o compuestos de la fórmula (I), R1 es alquilo Ci-8 sustituido o sin sustituir. En algunas realizaciones, R1 es metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, isobutilo, terc-butilo, n-pentilo, 2-metilpentilo, 3-metilpentilo, isopentilo o neopentilo sustituido o sin sustituir. En algunas realizaciones, R1 está sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno y OR, en donde cada R es independientemente H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir. Por ejemplo, R1 está sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de F, OH y OCH3. En algunas realizaciones, R1 es etilo, isopropilo, isobutilo, terc-butilo, CH2CH2F, CH2CHF2, CH2CF3, CH2CH(CH3)OH, CH2CH(CH3)OCH3, CH(CH3)CH2OH, CH(CH3)CH2OCH3, CH2C(F2)CH2OH, CH2C(F2)CH2OCH3, CH(CF3)CH2OH, CH(CF3)CH2OCH3, CH(CH2OH)CH2CH3, CH(CH2OCH3)CH2CH3, CH2C(CH3)2CH2OH o CH2C(CH3)2CH2OCH3. Por ejemplo, R1 es isopropilo, isobutilo, terc-butilo, CH2CF3, CH2CH(CH3)OH, CH(CH3)CH2OH, CH(CH3)CH2OCH3, CH2C(F2)CH2OH, CH(CF3)CH2OH, CH(CH2OH)CH2CH3 o CH2C(CH3)2CH2OH.
En una realización, R1 es isopropilo, CH(CH3)CH2OH o CH(CH2OH)CH2CH3. En algunas realizaciones, R1 es (S)-2-propan-1-ol:
En algunas realizaciones, R1 es cicloalquilo sustituido o sin sustituir. En algunas realizaciones, R1 es ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo o cicloheptilo sustituido o sin sustituir. En algunas realizaciones, R1 está sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, OR, SO2R', alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir y heterociclilo sustituido o sin sustituir, en donde cada R es independientemente H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, y cada R' es independientemente alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir. En algunas realizaciones, R1 está sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de F, OH, OCH3, SO2CH3, metilo y heterociclilo de 5 miembros sustituido o sin sustituir, por ejemplo, pirrolidindionilo, u oxadiazolilo. En algunos otras realizaciones, R1 es ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo o cicloheptilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de F, OH, OCH3, SO2CH3, metilo, pirrolidindionilo y oxadiazolilo. En algunas realizaciones, R1 es
en donde
cada R1a es independientemente F, OH, OCH3, SO2CH3 o metilo;
R1b es H o CH3;
y a es 0-4.
En algunas realizaciones, R1 es cicloalquilalquilo sustituido o sin sustituir. En algunas realizaciones, R1 es (alquil C1-3)-(cicloalquilo C1-8) sustituido o sin sustituir, por ejemplo, R1 es CH2-ciclopropilo, CH2-ciclobutilo, CH2-ciclopentilo, CH2-ciclohexilo o CH2-cicloheptilo sustituido o sin sustituir. En algunas realizaciones, R1 está sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de (alquil C1-3)OR u OR, en donde cada R es independientemente H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir. Por ejemplo, R1 es CH2-ciclopropilo, CH2-ciclobutilo, CH2-ciclopentilo o CH2-ciclohexilo, opcionalmente sustituido con uno o más CH2OH u OH.
En algunas realizaciones, R1 es heterociclilo no aromático sustituido o sin sustituir. En algunas realizaciones, R1 es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo sustituido o sin sustituir. En algunas realizaciones, R1 está sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, OR, SO2R4, C(=O)R5, C(=O)OR6, C(=O)NRR7, alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, arilo sustituido o sin sustituir, heteroarilo sustituido o sin sustituir, o alquilarilo sustituido o sin sustituir, en donde cada R es independientemente H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R4 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, o arilo sustituido o sin sustituir; R5 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R6 es alquilo C1-6 sustituido o sin sustituir; y R7 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, o arilo sustituido o sin sustituir. Por ejemplo, R1 es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de F, OH, SO2CH3, SO2-tosilo, C(=O)CH3, C(=O)OCH3, C(=O)O-terc-butilo, C(=O)O-isopropilo, C(=O)NHCH3, C(=O)NH-fenilo, metilo, etilo, isopropilo, CH2OH, fenilo, piridilo o bencilo. En una realización, R1 es
en donde cada R1c es independientemente F, OH, metilo o CH2OH;
y c es 0-3.
En algunas de dichas realizaciones, R1c es F o metilo y c es 1 o 2.
En algunas realizaciones de compuestos de la fórmula (I), R2 es H. En otras, R2 es CH3.
En algunas realizaciones de compuestos de la fórmula (I), R3 es fenilo orto-sustituido con halógeno. En una realización R3 es fenilo sustituido con o-fluoro u o-cloro. En algunas realizaciones, el fenilo está además para-sustituido, por ejemplo, el fenilo está además sustituido con p-cloro, p-bromo, p-fluoro, p-CN, p-metilo, p-CF3 o p-OCH3. En otras realizaciones, R3 es fenilo para-sustituido con halógeno. En algunas realizaciones, R3 es fenilo sustituido con p-fluoro o p-cloro. En algunas realizaciones, el fenilo está además orto-sustituido, por ejemplo, el fenilo está además sustituido con o-cloro, ofluoro u o-metilo. En otras realizaciones, R3 es fenilo para-sustituido con CN. En algunas realizaciones, el fenilo está además orto-sustituido, por ejemplo, el fenilo está además sustituido con o-cloro u o-fluoro. En aún otras realizaciones, R3 es fenilo orto,orto sustituido con dihalógeno. En una realización R3 es fenilo sustituido con o,o-difluoro u o,o-dicloro. En algunas realizaciones, el fenilo está además para-sustituido, por ejemplo, el fenilo está además sustituido con p-cloro, pbromo, p-fluoro, p-CN, p-metilo, p-CF3 o p-OCH3. En aún otras realizaciones, R3 es fenilo orto,para sustituido con dihalógeno. En una realización R3 es fenilo sustituido con o,p-difluoro o fenilo sustituido con o,p-dicloro. En algunas realizaciones, el fenilo está además orto-sustituido, por ejemplo, el fenilo está además sustituido con o-cloro, o-fluoro u o metilo. En otras realizaciones más, R3 es fenilo sustituido con 2,4,6-trihalógeno. En una realización R3 es fenilo sustituido con 2,4,6-trifluoro, fenilo sustituido con 4-cloro-2,6-difluoro o fenilo sustituido con 2,4,6-tricloro. En otra realización más, R3 es fenilo sustituido con orto-halógeno, para-CN. En una realización R3 es fenilo sustituido con o-fluoro-p-CN, o fenilo sustituido con o-cloro-para-CN. En algunas realizaciones, el fenilo está además orto-sustituido, por ejemplo, el fenilo está además sustituido con o-cloro u o-fluoro.
En algunas realizaciones de compuestos de la fórmula (I), R3 es
en donde
cada Hal es independientemente halógeno;
cada R8 es independientemente alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, CN u OR';
cada R' es independientemente alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir;
m es 1-3;
y p es 0-2.
En algunas realizaciones, cada Hal es independientemente Cl o F. En otras, cada R8 es independientemente CH3, CF3, CN u OCH3. En aún otras, m es 2 o 3. En todavía más, p es 0 o 1.
En algunas realizaciones de compuestos de la fórmula (I), R3 es
y cada Hal es independientemente halógeno.
En algunas realizaciones, cada Hal es independientemente Cl.
Realizaciones adicionales proporcionadas en el presente documento incluyen combinaciones de una o más de las realizaciones particulares arriba recogidas.
Los compuestos representativos de la fórmula (I) se exponen en la Tabla 1.
Los compuestos de aminopurina expuestos en la Tabla 1 se probaron en el ensayo antiproliferativo Lox-IMVI descrito en el presente documento y se descubrió que tenían actividad. En una realización, el compuesto de aminopurina es un compuesto como se describe en el presente documento, en donde el compuesto a una concentración de 10 pM inhibe la proliferación celular del melanoma (por ejemplo, de una célula del sujeto, o una estirpe celular, por ejemplo, Lox-IMVI) en al menos aproximadamente el 50 % o más.
MÉTODOS DE PREPARACIÓN DE COMPUESTOS DE AMINOPURINA
Los compuestos de aminopurina se pueden preparar usando síntesis orgánicas convencionales y materiales de partida comercialmente disponibles. A modo de ejemplo y no limitación, los compuestos de aminopurina de la fórmula (I) se pueden preparar como se describe en la patente de EE. UU. n.° 7.723.340, y la patente de EE. UU. n.° 8.158.635, o como se expone brevemente en el Esquema 1, mostrado a continuación, así como en los ejemplos expuestos en el presente documento. Cabe señalar que un experto en la técnica sabría cómo modificar los procedimientos recogidos en los esquemas y ejemplos ilustrativos para llegar a los productos deseados.
Como se muestra en el Esquema 1, los compuestos de la fórmula (I), en donde R1, R2 y R3 son como se definen en las reivindicaciones, se pueden preparar a partir de una nitropirimidina apropiadamente derivatizada, en donde Hal1 es Cl, y Hal2 es Cl. El tratamiento de la nitropirimidina dihalogenada con el derivado de 4-aminociclohexano-1-carboxamida apropiado, en presencia de una base, tal como, por ejemplo, DIEA, TEA, o piridina, en un disolvente, tal como, por ejemplo, DCM o THF, a temperatura reducida (por ejemplo, -78 °C), proporcionó la incorporación de la cadena lateral de la ciclohexilamida. El tratamiento de este producto con R1NH2, en presencia de una base, tal como DIEA, TEA, o piridina, en un disolvente tal como DCM, THF, dioxano o DMF, a temperatura elevada (por ejemplo, 25 - 80 °C), produjo la incorporación de la cadena lateral de R1. La reducción del resto nitro, usando, por ejemplo, hidrógeno en presencia de un catalizador, tal como Pd/C, en un disolvente, tal como MeOH o acetato de etilo, proporcionó el derivado de aminopirimidina. El derivado de aminopirimidina se trató con R3NCS, en un disolvente, tal como THF, DMF, NMP, dioxano, o EtOH, para obtener el derivado de tiourea (opcionalmente aislado), que se cicló, usando, por ejemplo, EDC o DIC, en un disolvente, por ejemplo, THF, dioxano, NMP o DMF, opcionalmente a temperatura elevada (por ejemplo, 40- 80 °C), para proporcionar compuestos de la fórmula (I).
Alternativamente, como se muestra en el Esquema 2, los compuestos de la fórmula (I), en donde R1, R2 y R3 son como se definen en las reivindicaciones, y R# es alquilo C1-2, se pueden preparar a partir de, como antes, una nitropirimidina apropiadamente derivatizada, en donde Hal1 es Cl y Hal2 es Cl. El tratamiento de la nitropirimidina dihalogenada con el derivado de éster alquílico de 4-aminociclohexano-1-carboxilato apropiado, en presencia de una base, tal como DIEA, TEA o piridina, en un disolvente, tal como DCM o THF, a temperatura reducida (por ejemplo, -78 °C), proporcionó la incorporación de la cadena lateral del éster de ciclohexilalquilo. El tratamiento de este producto con R1NH2, en presencia de una base, tal como DIEA, TEA, o piridina, en un disolvente tal como DCM, THF, dioxano o DMF, a temperatura elevada (por ejemplo 25 - 80 °C), produjo la incorporación de la cadena lateral de R1. La reducción del resto nitro, usando, por ejemplo, hidrógeno en presencia de un catalizador, tal como Pd/C, en un disolvente, tal como MeOH o acetato de etilo, proporcionó el derivado de aminopirimidina. El derivado de aminopirimidina se trató con R3NCS, en un disolvente, tal como THF, DMF, NMP, dioxano o EtOH, para obtener el derivado de tiourea (opcionalmente aislado), que se cicló, usando, por ejemplo, EDC o DIC, en un disolvente, por ejemplo, THF, NMP, dioxano o DMF, opcionalmente a temperatura elevada (por ejemplo, 40 °C a 80 °C), para proporcionar el derivado de diaminopurina derivatizado. La saponificación del éster alquílico, usando una base (tal como hidróxido de litio, hidróxido sódico o hidróxido potásico), en un disolvente (tal como THF, MeOH o EtOH acuoso), opcionalmente a temperatura elevada (por ejemplo, 40 - 80 °C), seguido por formación de amida, mediante el tratamiento con NH4Cl, en presencia de un agente de acoplamiento (tal como, por ejemplo, HATU, CDI, HBTU, EDC, opcionalmente en combinación con HOBt, o cloroformiato de etilo) y una base (tal como DIEA, TEA, piridina, DBU, o NMM), en un disolvente, por ejemplo, DMF, proporcionó los compuestos de la fórmula (I).
En un tercer enfoque, los compuestos de la fórmula (I), en donde R1, R2 y R3 son como se definen en las reivindicaciones, y P es un soporte sólido, tal como una resina, se pueden preparar a partir de, como antes, una nitropirimidina apropiadamente derivatizada, en donde Hal1 es Cl y Hal2 es Cl. El tratamiento de la nitropirimidina dihalogenada con el derivado de 4-aminociclohexano-1 -carboxilato apropiado, en presencia de una base, tal como DIEA, TEA o piridina, en un disolvente, tal como DCM o THF, a temperatura reducida (por ejemplo, -78 °C), proporcionó la incorporación de la cadena lateral del carboxilato de ciclohexilalquilo. El tratamiento de este producto con R1NH2, en presencia de una base, tal como DIEA, TEA, o piridina, en un disolvente tal como DCM, THF, dioxano o DMF, a temperatura elevada (por ejemplo, 25 -80 °C), produjo la incorporación de la cadena lateral de R1. Este producto intermedio se acopló a un soporte sólido, tal como una resina polimérica (por ejemplo, resina Rink-H) usando un agente de acoplamiento (por ejemplo, HATU, CDI, HBTU, EDC, opcionalmente en combinación con HOBt, o cloroformiato de etilo), en un disolvente, por ejemplo, DMF, a temperatura elevada, por ejemplo 50 °C. El tratamiento del producto intermedio unido a la resina con un agente reductor (tal como cloruro de cromo(II)), en un disolvente (tal como mezcla de DMF/MeOH), produjo la reducción del grupo nitro. El resto amina resultante se hizo reaccionar con R3NCS, en un disolvente, por ejemplo, EtOH, a temperatura elevada, por ejemplo, 40 °C a 60 °C, proporcionando el producto intermedio de derivado de tiourea. Este producto intermedio se cicló usando, por ejemplo, EDC o DIC, en un disolvente, por ejemplo, THF, NMP, dioxano o DMF, opcionalmente a temperatura elevada (por ejemplo, 40 °C a 80 °C), para proporcionar el derivado de diaminopurina unido a la resina. Finalmente, el tratamiento ácido (por ejemplo, tratamiento con TFA en un disolvente tal como DCM) produjo la escisión de compuestos de la fórmula (I) de la resina.
La presente invención proporciona compuestos como se define en las reivindicaciones. En un aspecto, en el presente documento se proporcionan métodos de preparación de un compuesto de la fórmula (I):
poner en contacto un compuesto de fórmula (Ia)
con EDC o DIC, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (I), en donde:
R1 es heterociclilo no aromático sustituido o sin sustituir;
R2 es H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir;
R3 es fenilo, sustituido con uno o más halógenos, opcionalmente sustituido además con uno o más sustituyentes seleccionados de alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, CN y -OR', en donde cada R' es independientemente alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir.
En una realización, el disolvente es THF, dioxano, NMP o DMF. En algunas realizaciones, el contacto se realiza a temperatura elevada, por ejemplo, desde aproximadamente 40 °C hasta aproximadamente 80 °C.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden además preparar un compuesto de fórmula (Ia):
comprendiendo los métodos poner en contacto un compuesto de fórmula (Ib)
con R3NCS, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (Ia).
En una realización, el disolvente es THF, DMF, NMP, dioxano o EtOH.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden además preparar un compuesto de la fórmula (Ib):
comprendiendo los métodos reducir un compuesto de la fórmula (Ic)
con un agente reductor, en presencia de un catalizador, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (Ib).
En una realización, el agente reductor es H2. En algunas realizaciones, el catalizador Pd/C. En otras realizaciones, el disolvente es MeOH o acetato de etilo.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden, además, preparar un compuesto de fórmula (Ic):
comprendiendo los métodos poner en contacto un compuesto de fórmula (Id)
con R1NH2, en presencia de una base, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (Ic), en donde Hal1 es un halógeno.
En una realización, Hal1 es Cl. En algunas realizaciones, la base es DIEA, TEA o piridina. En otras realizaciones, el disolvente es DCM, THF, dioxano o DMF. En algunas realizaciones, el contacto se realiza a temperatura elevada, por ejemplo, desde aproximadamente 25 °C hasta aproximadamente 80 °C.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden, además, preparar un compuesto de fórmula (Id):
dos poner en contacto un compuesto de fórmula (Ie)
en presencia de una base, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (Id), en donde Hal2 es un halógeno.
En una realización, Hal2 es Cl. En algunas realizaciones, la base es DIEA, TEA o piridina. En otras realizaciones, el disolvente es DCM o THF. En algunas realizaciones, el contacto se realiza a temperatura reducida, por ejemplo, aproximadamente -78 °C.
En otro aspecto, en el presente documento se proporcionan métodos de preparación de un compuesto de la fórmula (I):
comprendiendo los métodos poner en contacto un compuesto de fórmula (If)
con NH4Cl, en presencia de un agente de acoplamiento y una base, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (I), en donde:
R1 es heterociclilo no aromático sustituido o sin sustituir;
R2 es H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir;
R3 es fenilo, sustituido con uno o más halógenos, opcionalmente sustituido además con uno o más sustituyentes seleccionados de alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, CN y -OR', en donde cada R' es independientemente alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir.
En algunas realizaciones, el agente de acoplamiento es HATU, CDI, HBTU, EDC, opcionalmente en combinación con HOBt, o cloroformiato de etilo. Por ejemplo, el agente de acoplamiento es HATU. En algunas realizaciones, la base es DIEA, TEA, piridina, DBU o NMM. En una realización, el disolvente es DMF.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden además preparar un compuesto de fórmula (If)
comprendiendo los métodos poner en contacto un compuesto de fórmula (Ig)
con una base, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (If), en donde R# es alquilo C1-2.
En una realización, la base es hidróxido de litio, hidróxido sódico o hidróxido potásico. En algunas realizaciones, el disolvente es THF, MeOH o EtOH acuoso. En algunas realizaciones, el contacto se realiza a temperatura elevada, por ejemplo, desde aproximadamente 40 °C hasta aproximadamente 80 °C.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden además preparar un compuesto de la fórmula (Ig):
comprendiendo los métodos poner en contacto un compuesto de fórmula (Ih)
con EDC o DIC, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (Ig).
En una realización, el disolvente es THF, dioxano, NMP o DMF. En algunas realizaciones, el contacto se realiza a temperatura elevada, por ejemplo, desde aproximadamente 40 °C hasta aproximadamente 80 °C.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden, además, preparar un compuesto de fórmula (Ih):
dos poner en contacto un compuesto de la fórmula (Ii)
con R3NCS, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (Ih).
En una realización, el disolvente es THF, DMF, NMP, dioxano o EtOH.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden además preparar un compuesto de la fórmula (Ii):
dos reducir un compuesto de fórmula (Ij)
con un agente reductor, en presencia de un catalizador, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (Ii).
En una realización, el agente reductor es H2. En algunas realizaciones, el catalizador Pd/C. En otras realizaciones, el disolvente es MeOH o acetato de etilo.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden además preparar un compuesto de la fórmula (Ij):
dos poner en contacto un compuesto de la fórmula (Ik)
con R1NH2, en presencia de una base, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (Ij), en donde Hal1 es un halógeno.
En una realización, Hal1 es Cl. En algunas realizaciones, la base es DIEA, TEA o piridina. En otras realizaciones, el disolvente es DCM, THF, dioxano o DMF. En algunas realizaciones, el contacto se realiza a temperatura elevada, por ejemplo, desde aproximadamente 25 °C hasta aproximadamente 80 °C.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden además preparar un compuesto de la fórmula (Ik):
dos poner en contacto un compuesto de fórmula (le)
con
en presencia de una base, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (Ik), en donde Hal2 es un halógeno.
En una realización, Hal2 es Cl. En algunas realizaciones, la base es DIEA, TEA o piridina. En otras realizaciones, el disolvente es DCM o THF. En algunas realizaciones, el contacto se realiza a temperatura reducida, por ejemplo, aproximadamente -78 °C.
En otro aspecto más, en el presente documento se proporcionan métodos de preparación de un compuesto de la fórmula (I):
comprendiendo los métodos poner en contacto un compuesto de la fórmula (Im)
con un ácido, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (I), en donde:
R1 es heterociclilo no aromático sustituido o sin sustituir;
R2 es H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir;
R3 es fenilo, sustituido con uno o más halógenos, opcionalmente sustituido además con uno o más sustituyentes seleccionados de alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, CN y -OR', en donde cada R' es independientemente alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; y
P es una resina.
En algunas realizaciones, el ácido es TFA. En algunas realizaciones, el disolvente es DCM. En otras realizaciones, la resina es resina de Rink.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden además preparar un compuesto de la fórmula (Im)
comprendiendo los métodos poner en contacto un compuesto de la fórmula (In)
con EDC o DIC, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (Im). En una realización, el disolvente es THF, NMP, dioxano o DMF. En algunas realizaciones, el contacto se realiza a temperatura elevada, por ejemplo, desde aproximadamente 40 °C hasta aproximadamente 80 °C.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden además preparar un compuesto de la fórmula (In):
comprendiendo los métodos poner en contacto un compuesto de la fórmula (Io)
con R3NCS, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (In).
En una realización, el disolvente es EtOH. En algunas realizaciones, el contacto se realiza a temperatura elevada, por ejemplo, desde aproximadamente 40 °C hasta aproximadamente 60 °C.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden además preparar un compuesto de la fórmula (lo):
comprendiendo los métodos poner en contacto un compuesto de la fórmula (Ip)
con un agente reductor, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (lo). En una realización, el agente reductor es cloruro de cromo(ll). En una realización, el disolvente es DMF, MeOH o mezclas de los mismos.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden además preparar un compuesto de la fórmula (Ip):
comprendiendo los métodos poner en contacto un compuesto de la fórmula (Iq)
con una resina polimérica, en presencia de un agente de acoplamiento, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (Ip).
En una realización, el agente de acoplamiento es HATU, CDI, HBTU, EDC, opcionalmente en combinación con HOBt, o cloroformiato de etilo. En otras realizaciones, el disolvente es, por ejemplo, DMF. En algunas realizaciones, el contacto se realiza a temperatura elevada, por ejemplo, aproximadamente 50 °C.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden además preparar un compuesto de la fórmula (Iq):
comprendiendo los métodos poner en contacto un compuesto de la fórmula (Ir)
con R1NH2, en presencia de una base, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (Iq), en donde Hal1 es un halógeno.
En una realización, Hal1 es Cl. En algunas realizaciones, la base es DIEA, TEA o piridina. En otras realizaciones, el disolvente es DCM, THF, dioxano o DMF. En algunas realizaciones, el contacto se realiza a temperatura elevada, por ejemplo, desde aproximadamente 25 °C hasta aproximadamente 80 °C.
En algunas realizaciones, los métodos comprenden además preparar un compuesto de la fórmula (Ir):
comprendiendo los métodos poner en contacto un compuesto de fórmula (Ie)
en presencia de una base, en un disolvente, en condiciones adecuadas para proporcionar un compuesto de la fórmula (Ir), en donde Hal2 es un halógeno.
En una realización, Hal2 es Cl. En algunas realizaciones, la base es DIEA, TEA o piridina. En otras realizaciones, el disolvente es DCM o THF. En algunas realizaciones, el contacto se realiza a temperatura reducida, por ejemplo, aproximadamente -78 °C.
MÉTODOS DE USO (La sección "MÉTODOS DE USO” se desvela como referencia)
Los compuestos de aminopurina tienen utilidad como productos farmacéuticos para tratar, prevenir o mejorar afecciones en animales o seres humanos. Por consiguiente, los compuestos de aminopurina se pueden usar en todos los métodos como se desvela en el presente documento. Particularmente, los compuestos de aminopurina son para su uso en el tratamiento o la prevención de melanoma. Los métodos desvelados como referencia en el presente documento comprenden la administración de una cantidad eficaz de uno o más compuestos de aminopurina a un sujeto que lo necesita.
También se desvelan en el presente documento como referencia métodos de prevención o tratamiento de melanoma, que comprenden administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad eficaz de un compuesto de aminopurina, como se describe en el presente documento. También se desvelan en el presente documento como referencia los compuestos de aminopurina para su uso en dichos métodos.
COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS Y VÍAS DE ADMINISTRACIÓN
(La sección "COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS Y VÍAS DE ADMINISTRACIÓN" se desvela como referencia)
Los compuestos de aminopurina se pueden administrar a un sujeto por vía oral, por vía tópica o por vía parenteral en la forma convencional de preparados, tales como cápsulas, microcápsulas, comprimidos, gránulos, polvo, trociscos, píldoras, supositorios, inyecciones, suspensiones, jarabes, parches, cremas, lociones, pomadas, geles, esprays, disoluciones y emulsiones. Las formulaciones adecuadas se pueden preparar por métodos comúnmente empleados usando aditivos orgánicos o inorgánicos convencionales, tales como un excipiente (por ejemplo, sacarosa, almidón, manitol, sorbitol, lactosa, glucosa, celulosa, talco, fosfato de calcio o carbonato cálcico), un aglutinante (por ejemplo, celulosa, metilcelulosa, hidroximetilcelulosa, polipropilpirrolidona, polivinilpirrolidona, gelatina, goma arábiga, polietilenglicol, sacarosa o almidón), un disgregante (por ejemplo, almidón, carboximetilcelulosa, hidroxipropilalmidón, hidroxipropilcelulosa de baja sustitución, bicarbonato sódico, fosfato de calcio o calcio citrato), un lubricante (por ejemplo, estearato de magnesio, ácido silícico anhidro ligero, talco o laurilsulfato de sodio), un aromatizante (por ejemplo, ácido cítrico, mentol, glicina o polvo de naranja), un conservante (por ejemplo, benzoato de sodio, bisulfito de sodio, metilparabeno o propilparabeno), un estabilizador (por ejemplo, ácido cítrico, citrato de sodio o ácido acético), un agente de suspensión (por ejemplo, metilcelulosa, polivinilpirrolidona o estearato de aluminio), un agente dispersante (por ejemplo, hidroxipropilmetilcelulosa), un diluyente (por ejemplo, agua) y cera base (por ejemplo, manteca de cacao, vaselina filante o polietilenglicol). La cantidad eficaz de los compuestos de aminopurina en la composición farmacéutica puede estar a un nivel que ejercerá el efecto deseado; por ejemplo, aproximadamente 0,005 mg/kg del peso corporal de un sujeto a aproximadamente 10 mg/kg del peso corporal de un sujeto en dosis unitaria para administración tanto oral como parenteral.
La dosis de un compuesto de aminopurina a administrar a un sujeto es bastante ampliamente variable y se puede someter al criterio de un profesional sanitario. En general, los compuestos de aminopurina se pueden administrar de una a cuatro veces al día en una dosis de aproximadamente 0,005 mg/kg de peso corporal de un sujeto a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal de un sujeto, pero la dosis anterior puede ser variada apropiadamente dependiendo de la edad, el peso corporal y la afección médica del sujeto y el tipo de administración. La dosis puede ser aproximadamente 0,01 mg/kg de peso corporal de un sujeto a aproximadamente 5 mg/kg de peso corporal de un sujeto, aproximadamente 0,05 mg/kg de peso corporal de un sujeto a aproximadamente 1 mg/kg de peso corporal de un sujeto, aproximadamente 0,1 mg/kg de peso corporal de un sujeto a aproximadamente 0,75 mg/kg de peso corporal de un sujeto o aproximadamente 0,25 mg/kg de peso corporal de un sujeto a aproximadamente 0,5 mg/kg de peso corporal de un sujeto. Se puede administrar una dosis por día. En cualquier caso dado, la cantidad del compuesto de aminopurina administrada dependerá de factores tales como la solubilidad del componente activo, la formulación usada y la vía de administración. La administración de una concentración tópica puede proporcionar exposiciones intracelulares o concentraciones de aproximadamente 0,01 -10 pM.
También se desvelan en el presente documento como referencia métodos para el tratamiento o la prevención de una enfermedad o trastorno que comprende la administración de aproximadamente 0,375 mg/día a aproximadamente 750 mg/día, aproximadamente 0,75 mg/día a aproximadamente 375 mg/día, aproximadamente 3,75 mg/día a aproximadamente 75 mg/día, aproximadamente 7,5 mg/día a aproximadamente 55 mg/día o aproximadamente 18 mg/día a aproximadamente 37 mg/día de un compuesto de aminopurina a un sujeto que lo necesita.
También se desvelan en el presente documento como referencia métodos para el tratamiento o la prevención de una enfermedad o trastorno que comprende la administración de aproximadamente 1 mg/día a aproximadamente 1200 mg/día, aproximadamente 10 mg/día a aproximadamente 1200 mg/día, aproximadamente 100 mg/día a aproximadamente 1200 mg/día, aproximadamente 400 mg/día a aproximadamente 1200 mg/día, aproximadamente 600 mg/día a aproximadamente 1200 mg/día, aproximadamente 400 mg/día a aproximadamente 800 mg/día o aproximadamente 600 mg/día a aproximadamente 800 mg/día de un compuesto de aminopurina a un sujeto que lo necesita. Los métodos pueden comprender la administración de 400 mg/día, 600 mg/día o 800 mg/día de un compuesto de aminopurina a un sujeto que lo necesita.
También se desvelan en el presente documento como referencia formulaciones de dosis unitaria que comprenden entre aproximadamente 1 mg y 200 mg, aproximadamente 35 mg y aproximadamente 1400 mg, aproximadamente 125 mg y aproximadamente 1000 mg, aproximadamente 250 mg y aproximadamente 1000 mg, o aproximadamente 500 mg y aproximadamente 1000 mg de un compuesto de aminopurina.
También se desvelan como referencia formulaciones de administración que pueden comprender aproximadamente 100 mg o 400 mg de un compuesto de aminopurina.
Las formulaciones de dosis unitaria pueden comprender 1 mg, 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 30 mg, 35 mg, 50 mg, 70 mg, 100 mg, 125 mg, 140 mg, 175 mg, 200 mg, 250 mg, 280 mg, 350 mg, 500 mg, 560 mg, 700 mg, 750 mg, 1000 mg o 1400 mg de un compuesto de aminopurina.
Un compuesto de aminopurina se puede administrar una vez, dos veces, tres, cuatro o más veces al día. Dosis de 600 mg o menos se pueden administrar como una dosis diaria de una vez y dosis de más de 600 mg se administran dos veces al día en una cantidad igual a la mitad de la dosis diaria total.
Un compuesto de aminopurina se puede administrar por vía oral por motivos de conveniencia. Cuando se administran por vía oral, un compuesto de aminopurina se puede administrar con una comida y agua. El compuesto de aminopurina se puede dispersar en agua o zumo (por ejemplo, zumo de manzana o zumo de naranja) y administrar por vía oral como una suspensión.
El compuesto de aminopurina también se puede administrar por vía intradérmica, por vía intramuscular, por vía intraperitoneal, por vía percutánea, por vía intravenosa, por vía subcutánea, por vía intranasal, por vía epidural, por vía sublingual, por vía intracerebral, por vía intravaginal, por vía transdérmica, por vía rectal, por vía mucosa, por inhalación, o por vía tópica a los oídos, nariz, ojos o piel. El modo de administración se deja a criterio del profesional sanitario, y puede depender en parte del sitio de la afección médica.
También se desvelan en el presente documento como referencia cápsulas que contienen un compuesto de aminopurina sin un portador, excipiente o vehículo adicional.
También se desvelan en el presente documento como referencia composiciones que comprenden una cantidad eficaz de un compuesto de aminopurina y un portador o vehículo farmacéuticamente aceptable, en donde un portador o vehículo farmacéuticamente aceptable puede comprender un excipiente, diluyente, o una mezcla de los mismos. La composición puede ser una composición farmacéutica.
Las composiciones pueden estar en forma de comprimidos, comprimidos masticables, cápsulas, disoluciones, disoluciones parenterales, trociscos, supositorios y suspensiones y similares. Las composiciones se pueden formular para que contengan una dosis diaria, o una fracción conveniente de una dosis diaria, en una unidad de administración, que puede ser un solo comprimido o cápsula o un volumen conveniente de un líquido. Las disoluciones se pueden preparar a partir de sales solubles en agua, tales como la sal de clorhidrato. En general, todas las composiciones se preparan de acuerdo con métodos conocidos en la química farmacéutica. Las cápsulas se pueden preparar mezclando un compuesto de aminopurina con un vehículo o diluyente adecuado y llenando la cantidad apropiada de la mezcla en cápsulas. Los portadores y diluyentes usuales incluyen, pero no se limitan a, sustancias inertes en polvo, tales como almidón de muchos tipos diferentes, celulosa en polvo, especialmente celulosa cristalina y microcristalina, azúcares tales como fructosa, manitol y sacarosa, harinas de granos y polvos comestibles similares.
Los comprimidos se pueden preparar por compresión directa, por granulación en húmedo o por granulación en seco. Sus formulaciones incorporan habitualmente diluyentes, aglutinantes, lubricantes y disgregantes, así como el compuesto.
Diluyentes típicos incluyen, por ejemplo, diversos tipos de almidón, lactosa, manitol, caolín, fosfato o sulfato de calcio, sales inorgánicas, tales como cloruro sódico y azúcar en polvo. Los derivados de celulosa en polvo también son útiles. Los aglutinantes de comprimidos típicos son sustancias tales como almidón, gelatina y azúcares, tales como lactosa, fructosa, glucosa y similares. También son convenientes las gomas naturales y sintéticas, que incluyen goma arábiga, alginatos, metilcelulosa, polivinilpirrolidina y similares. El polietilenglicol, la etilcelulosa y las ceras también pueden servir de aglutinantes.
Podría ser necesario un lubricante en una formulación de comprimido para evitar que el comprimido y los punzones se peguen al colorante. El lubricante se puede elegir entre sólidos resbaladizos, tales como talco, estearato de magnesio y calcio, ácido esteárico y aceites vegetales hidrogenados. Los disgregantes de comprimidos son sustancias que se hinchan cuando se humedecen para romper el comprimido y liberar el compuesto. Incluyen almidones, arcillas, celulosas, alginas y gomas. Más particularmente, se pueden utilizar almidones de maíz y patata, metilcelulosa, agar, bentonita, celulosa de madera, esponja natural en polvo, resinas de intercambio catiónico, ácido algínico, goma guar, pulpa de cítricos y carboximetilcelulosa, por ejemplo, así como laurilsulfato de sodio. Los comprimidos se pueden recubrir con azúcar como saborizante y sellador, o con agentes protectores que forman películas para modificar las propiedades de disolución del comprimido. Las composiciones también se pueden formular como comprimidos masticables, por ejemplo, utilizando sustancias tales como manitol en la formulación.
Cuando se desea administrar un compuesto de aminopurina como un supositorio, se pueden usar bases típicas. La manteca de cacao es una base de supositorio tradicional, que se puede modificar mediante la adición de ceras para elevar ligeramente su punto de fusión. Las bases para supositorios miscibles con agua que comprenden, en particular, polietilenglicoles de diversos pesos moleculares tienen un amplio uso.
El efecto del compuesto de aminopurina puede ser retardado o prolongado por la formulación apropiada. Por ejemplo, se puede preparar una pella lentamente soluble del compuesto de aminopurina e incorporar en un comprimido o cápsula, o como un dispositivo implantable de liberación lenta. La técnica también incluye la preparación de pellas de varias velocidades de disolución diferentes y el llenado de cápsulas con una mezcla de las pellas. Los comprimidos o cápsulas se pueden recubrir con una película que resista la disolución durante un período de tiempo predecible. Incluso los preparados parenterales se pueden preparar de acción prolongada, disolviendo o suspendiendo el compuesto de aminopurina en vehículos aceitosos o emulsionados que permiten que se disperse lentamente en el suero.
EJEMPLOS
Los siguientes Ejemplos se presentan a modo de ilustración, no de limitación. Los compuestos se nombran usando la herramienta de generación automática de nombres proporcionada en Chemdraw Ultra 9.0 (Cambridgesoft), que genera nombres sistemáticos para estructuras químicas, con soporte para las reglas de Cahn-Ingold-Prelog para estereoquímica. Un experto en la técnica puede modificar los procedimientos recogidos en los ejemplos ilustrativos para llegar a los productos deseados.
Abreviaturas utilizadas:
SÍNTESIS DE COMPUESTOS
Ejemplo 1. (1s,4s)-4-(8-((4-Cloro-2,6-d¡fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da
Éster terc-butíl¡co del ác¡do c¡s-(4-carbamo¡l-c¡clohex¡l)-carbám¡co, se disolvieron ácido cis-4-tercbutoxicarbonilamino-ciclohexanocarboxílico (1 equiv.) y TEA (1,1 equiv.) en THF 0,3 M y la mezcla se enfrió hasta 0 °C. Se añadió gota a gota cloroformiato de etilo (1,1 equiv.). Después de agitar a 0 °C durante 30 min, se añadió NH3 en THF. La mezcla se dejó con agitación a -78 °C durante 2 h. La mezcla se diluyó con agua, y el disolvente se evaporó hasta que solo quedó agua. El precipitado resultante se recogió por filtración y se secó a vacío dando éster terc-butílico del ácido cis-(4-carbamoil-ciclohexil)-carbámico (45 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7,10 (s a, 1 H), 6,69 (s a, 2 H), 3,41 (s a, 1 H), 2,10 (m, 1 H), 1,72 (m, 2 H), 1,53 (m, 2 H), 1,42 (m, 4 H), 1,36 (s, 9 H).
Clorhidrato de amida de ácido c/s-4-amino-ciclohexanocarboxílico. A una disolución de éster terc-butílico del ácido cis-(4-carbamoil-ciclohexil)-carbámico (1 equiv.) en 1/1 de DCM /TFA. La mezcla se agitó durante 1 h. Los disolventes se evaporaron a presión reducida. Al residuo resultante se añadió HCl 2 M/éter dando un sólido blanco. El disolvente se evaporó. El sólido resultante se trató con éter y se filtró dando clorhidrato de amida de ácido cis-4-aminociclohexanocarboxílico (100 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 8,08 (s a, 3 H), 7,28 (s, 1 H), 6,78 (s, 1 H), 3,06 (m, 1 H), 2,22 (m, 1 H), 1,86 (m, 2. H), 1,66 (m, 4 H), 1,48 (m, 2 H).
(1s,4s)-4-((2-Cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida. Se disolvieron clorhidrato de (1s,4s)-4-aminociclohexanocarboxamida (0,56 moles) y 2,4-dicloro-5-nitropirimidina (1 equiv.) en DCM (0,16 M). La mezcla se enfrió hasta -78 °C. Un embudo de adición se cargó con DIEA (3 equiv.) y DCM (1,0 M). La disolución de DIEA se añadió gota a gota mediante un embudo de adición. Después de completarse la adición, la reacción se agitó durante 2 h adicionales a -78 °C. La reacción se monitorizó por CL-EM. Una vez la reacción se completó, la mezcla de reacción se repartió entre DCM y agua, la fase orgánica se separó y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. La mezcla se filtró, entonces el filtrado se concentró y se lavó con una mezcla de éter de petróleo y acetato de etilo (1:1) dando (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4- il)amino)ciclohexanocarboxamida (65 %) como un sólido amarillo. 1H r Mn (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm: 9,01 (s, 1H), 8,51 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 6,75 (s,1H), 4,26 (s, 1H), 2,24 (s, 1H), 1,60~1,83 (m,8H).
5- Cloro-1,3-difluoro-2-isotiocianatobenceno. A una disolución de 4-cloro-2,6-difluoroanilina (1 equiv.) en DCM anhidro (0,24 M) se añadió DIEA (2,5 equiv) en una porción. Después de agitar durante 30 min a temperatura ambiente, la mezcla se enfrió hasta 0 °C y se añadió gota a gota tiofosgeno (1,8 equiv) durante 1 h a esta temperatura. La TLC (éter de petróleo) mostró que la reacción estaba terminada. La mezcla se concentró, el residuo se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice dando 5-cloro-1,3-difluoro-2-isotiocianatobenceno (97 %) como un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm: 7,02 (d,J= 7,2 Hz, 2H).
(1s,4s)-4-((5-Nitro-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida. Se disolvieron (1s,4s)-4-((2-Cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) y clorhidrato de tetrahidro-2H-piran-4-amina (1 equiv.) en THF (0,5 M) y se añadió DIEA (2,5 equiv.). La reacción se agitó a 70 °C durante 3 h, se diluyó con agua , y se filtró dando (1s,4s)-4-((5-nitro-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (rendimiento del 98 %) como un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, DMsO-d6) 5 ppm: 8,84 (s, 1H); 8,52 (d,J= 7,1Hz, 1H); 8,39 (d,J= 7,1 Hz, 1H); 7,23 (s, 1H); 6,74 (s, 1H); 4,24 (s, 1H); 3,87 (m, 3H); 3,58 (s, 1H); 3,10 (s, 1H); 2,22 (m, 2H); 1,61 (m, 13H); 1,25 (m, 5H).
(1s,4s)-4-((5-Amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida. A un matraz redondo se añadió (1s,4s)-4-((5-nitro-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il) amino) pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) y Pd-C (0,1 equiv., 10 % de Pd por peso) en MeOH (0,15 M) dando una suspensión negra. La suspensión se agitó bajo 1 atm de H2 durante la noche. La reacción se completó como se muestra por CL-EM. La mezcla de reacción se filtró, y se lavó con MeOH adicional. El filtrado se concentró a vacío dando (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (87 %). MS (ESI)m/z= 335,1 [M+1]+.
(1s,4s)-4-((5-(3-(4-Cloro-2,6-difluorofenil)tioureido)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida. En un matraz de tres bocas se añadió (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) y 5-cloro-1,3-difluoro-2-isotiocianatobenceno (1 equiv.) en THF/DMF (3/1, 0,5 M) dando una suspensión de color morado. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 72 h. La CL-EM mostró que quedaba una pequeña cantidad de material de partida. La reacción se repartió entre DCM y agua. La fase orgánica se separó, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se evaporó a vacío proporcionando (1s,4s)-4-((5-(3-(4-cloro-2,6-difluorofenil)tioureido)-2-((tetrahidro-2H- piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (rendimiento del 79 %). MS (ESI)m/z540 = [M+1]+.
(1s,4s)-4-(8-((4-Cloro-2,6-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida. En un matraz redondo se añadió (1s,4s)-4-((5-(3-(4-cloro-2,6-difluorofenil)tioureido)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) y EDC (2 equiv.) en THF (0,2 M) dando una suspensión blanquecina. La suspensión se calentó hasta 60 °C durante 1 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((4-cloro-2,6-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (rendimiento del 57 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 8,37 (s a., 1h ) 8,02 (s a., 1H) 7,46 (d,J= 6,31 Hz, 2H) 7,26 (s a., 1H) 6,72 (s a., 1H) 4,52 (s a., 1H) 4,08 (s a., 1H) 3,86 (dt,J= 11,74, 3,74 Hz, 2H) 3,64 (t,J= 10,56 Hz, 2H) 2,59 - 2,72 (m, 2 H) 2,21 (d,J= 12,93 Hz, 2H) 1,93 (d, J=9,77 Hz, 2H) 1,68 (d,J= 10,72 Hz, 2H) 1,55 - 1,65 (m, 2H) 1,44 - 1,55 (m, 2H). MS (ESI) m/z = 506,2 [M+1]+.
Ejemplo 2. (1s,4s)-4-(2-((Tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida
(1s,4s)-4-(2-((Tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-8-((2,4,6-tr¡clorofen¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxamida. Se agitó una mezcla de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) y 1,3,5-tricloro-2-isotiocianatobenceno (1 equiv.) a temperatura ambiente durante 2 h. Se añadió EDC (2 equiv.) en THF (0,17 M) y la reacción se calentó hasta 60 °C y se agitó durante 1 h. La reacción se enfrió, y los disolventes orgánicos se concentraron completamente. El residuo resultante se diluyó con agua, se agitó durante 30 min y se filtró. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (rendimiento del 79 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm: 8,11 (s a., 1H) 7,69 (s a., 2H) 7,23 (s a., 1H) 6,71 (s a., 1H) 4,47 (s a., 1H) 4,05 (s a., H) 3,86 (dt,J= 11,59, 3,66 Hz, 2H) 3,61 (d,J= 11,03 Hz, 2H) 2,59 - 2,74 (m, 2H) 2,20 (d,J= 13,24 Hz, 2H) 1,90 (d,J=10,40 Hz, 2H) 1,69 (s a., 2H) 1,41 - 1,64 (m, 4H). MS (ESI) m/z = 540,2 [M+H]+.
Ejemplo 3. (1s,4s)-4-(8-((2-Cloro-4,5-d¡fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
1-Cloro-4,5-d¡fluoro-2-¡sot¡oc¡anatobenceno. A una mezcla de 2-cloro-4,5-difluoroanilina (1 equiv.) e hidróxido sódico (3 equiv.) en DCM (0,24 M) y agua (0,24 M) se añadió gota a gota tiofosgeno (3 equiv.) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante la noche. La TLF mostró que la reacción estaba completa. La fase orgánica se separó y se secó sobre MgSO4, luego se concentró dando 1-cloro-4,5-difluoro-2-isotiocianatobenceno (53 %) como un sólido blanco.
(1s,4s)-4-(8-((2-Cloro-4,5-d¡fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) en DMF (0,24 M) se añadió 1-cloro-4,5-difluoro-2-isotiocianatobenceno (1,1 equiv.) en una porción. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Se añadió EDC (2,5 equiv.) a la disolución de reacción. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((2-cloro-4,5-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (35 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-afe) 5 ppm: 10,21 - 8,21 (m, 1H), 8,02 - 7,54 (m, 2H), 7,24 (s, 1H), 6,74 (s, 1H), 6,53 (d,J= 6,0 Hz, 1H), 4,34 - 4,20 (m, 1H), 3,85 - 3,83 (m, 3H), 3,60 - 3,45 (m, 2H), 2,73 - 2,51 (m, 2H), 2,48 - 2,39 (m, 1H), 2,23 (d,J= 13,3 Hz, 2H), 1,91 - 1,79 (m, 2H), 1,74 - 1,37 (m, 6H). MS (ESI)m/z= 506,1 [M+1]+.
Ejemplo 4. (1s,4s)-4-(8-((2-Cloro-4-fluoro-6-met¡lfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1 -carboxam¡da
2-Cloro-4-fluoro-6-metilan¡l¡na. A una mezcla de 4-fluoro-2-metilanilina (1 equiv.) en acetonitrilo (0,4 M) se añadió NCS (1 equiv.) a 90 °C. La mezcla se agitó a 90 °C durante 1 h. La mezcla se concentró dando un residuo, el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice dando 2-cloro-4-fluoro-6-metilanilina (24 %) como un aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 7,87 (dd,J=8,4, 2,8 Hz, 1H), 7,73 (dd,J= 8,8, 2,8 Hz 2,8 Hz, 1H), 2,17 (s, 3H).
1-Cloro-5-fluoro-2-isotioc¡anato-3-met¡lbenceno. A una mezcla de 2-cloro-4-fluoro-6-metilanilina 2 (0,3 g, 1,9 mmoles) en DCM/ H2O (1/2, 0,15 M) se añadió NaOH (21 equiv.) y SCCl2 (5 equiv.) a 0 °C. Después de la adición, la mezcla se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. La mezcla se filtró, y el filtrado se extrajo con DCM. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron dando un residuo. El residuo se purificó por cromatografía en sílice dando 1-cloro-5-fluoro-2-isotiocianato-3-metilbenceno (52 %) como un aceite amarillo.
c¡s-4-(8-((2-Cloro-4-fluoro-6-metilfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-il)ciclohexanocarboxamida. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,12 M) se añadió 1-cloro-5-fluoro-2-isotiocianato-3-metilbenceno (1 equiv.). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, y se añadió DIC (2 equiv.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron cis-4-(8-((2-cloro-4-fluoro-6-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (50 %). 1H Rm N (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 7,93 (s, 1H), 7,21 (t, J=7,2 Hz, 1H), 7,09 (d, J=7,6 Hz, 1H), 4,34 (s, 1H), 4,07 - 3,96 (m, 3H), 3,71 -3,66 (s, 2H), 2,93 - 2,90 (m, 2H), 2,67 (s, 1H), 2,35 - 231 (m, 5H), 2,04 - 2,01 (m, 2H), 1,82 - 1,80 (m, 4H), 1,58 - 1,51 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 502,2 [M+1]+.
Ejemplo 5. (1s,4s)-4-(8-((2,3-D¡fluoro-4-metilfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-il)ciclohexano-1 -carboxamida
2.3- Difluoro-4-metilanilina. A una mezcla de ácido 2-cloro-6-fluoro-3-metilbenzoico (1 equiv.) en THF (0,45 M) se añadió DPPA (1,07 equiv.) y TEA (3 equiv.) a 25 °C. La mezcla se agitó a 25 °C durante 2 h, entonces la mezcla se calentó hasta reflujo durante 2 h. Se añadió agua a la reacción y la mezcla se sometió a reflujo durante 1 h. La mezcla se concentró dando un residuo, que se purificó por cromatografía en gel de sílice dando 2-cloro-6-fluoro-3-metilanilina (46 %) como un aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 6,83 (dd,J= 8,4, 10,3 Hz, 1H), 6,56 (dd,J= 5,8, 8,3 Hz, 1H), 4,08 (s a, 1H), 2,31 (s, 1H).
2.3- Difluoro-1-isot¡oc¡anato-4-met¡lbenceno. A una mezcla de 2-cloro-6-fluoro-3-metilanilina (1 equiv.) en DCM/ agua (1/2, 0,1 M) se añadió NaOH (6 equiv.) y SCCl2 (3 equiv.) a 0 °C. Después de la adición, la mezcla se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. La mezcla se filtró, el filtrado se extrajo con DCM, y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron dando un residuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice dando 2,3-difluoro-1-isotiocianato-4-metilbenceno (63 %) como un aceite amarillo. 1H<r>M<n>(400 MHz, CDCl3) 5 ppm: 7,09 (dd,J= 5,7, 8,6 Hz, 1H), 7,01 - 6,93 (m, 1H), 2,36 (s, 3H).
(1s,4s)-4-(8-((2,3-D¡fluoro-4-met¡lfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxamida. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,12 M) se añadió 2,3-difluoro-1-isotiocianato-4-metilbenceno (1 equiv.). La mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 1 h. Se añadió DIC (2 equiv.) a la mezcla y la agitación a 25 °C continuó durante 16 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron cis-4-(8-((2-cloro-6-fluoro-3-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (42 %). 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 7,96 (s, 1H), 7,31 - 6,92 (m, 2H), 4,42 (s, 1H), 4,12 - 3,91 (m, 3H), 3,68 (t,J= 11,3 Hz, 2H), 2,89 (d,J= 11,7 Hz, 2H), 2,65 (s, 1H), 2,45 - 2,23 (m, 5H), 2,09 - 1,97 (m, 2H), 1,92 - 1,68 (m, 4H), 1,62 - 1,47 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 486,3 [M+1]+.
Ejemplo 6. (1s,4s)-4-(8-((2-Cloro-3-fluoro-4-met¡lfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1 -carboxam¡da
2-Cloro-3-fluoro-4-met¡lan¡l¡na. A una disolución enfriada (0 °C) de 3-fluoro-4-metilanilina (1 equiv.) en DMF (1,6 M) se añadió NCS (1 equiv.). Después de que la adición estaba terminada, la reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante 18 h. La reacción se diluyó con acetato de etilo, se lavó con Na2SO3 saturado, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice proporcionando 2-cloro-3-fluoro-4-metilanilina (8 %) como un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCta) 5 ppm: 6,87 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 6,49 (dd,J=1,2, 8,2 Hz, 1H), 4,02 (s, 2H), 2,20 (d,J=1,8 Hz, 3H).
2-Cloro-3-fluoro-1-¡sot¡oc¡anato-4-met¡lbenceno. A una disolución enfriada de 2-cloro-3-fluoro-4-metilanilina (1 equiv.) en DCM/H2O (1/1, 0,3 M) se añadió NaOH (3 equiv.), seguido por SCCl2 (3 equiv.) gota a gota durante 10 min. Después de la adición, la mezcla se agitó durante 60 min a temperatura ambiente. La reacción se diluyó con éter de petróleo, y se filtró a través de una almohadilla de gel de sílice. El filtrado se concentró proporcionando 2-cloro-3-fluoro-1 -isotiocianato-4-metilbenceno (48 %) como un aceite amarillo.
(1s,4s)-4-(8-((2-Cloro-3-fluoro-4-met¡lfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF anhidra (0,15 M) se añadió 2-cloro-3-fluoro-1-isotiocianato-4-metilbenceno (3 equiv.), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 90 min. Se añadió DIC (6 equiv.) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron cis-4-(8-((2-cloro-3-fluoro-4-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (40 %). 1H RMN (400 MHz, MeOH-aO) 5 ppm: 8,07 (s, 1H), 7,34 - 7,12 (m, 2H), 4,37 (s, 1H), 4,11 - 3,92 (m, 3H), 3,71 (t,J= 11,0 Hz, 2H), 2,89 (d,J= 11,0 Hz, 2H), 2,67 (s, 1H), 2,47 - 2,17 (m, 5H), 2,04 (d,J= 11,5 Hz, 2H), 1,89 - 1,71 (m, 4H), 1,64 - 1,47 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 502,2 [M+1]+.
Ejemplo 7. (1s,4s)-4-(8-((4-Cloro-2,5-d¡fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1 -carboxam¡da
4-Cloro-2,5-d¡fluoroan¡l¡na . A una mezcla de 1-cloro-2,5-difluoro-4-nitrobenceno (1 equiv.) en ácido acético (0,5 M) se añadió Fe (5 equiv.), que se calentó hasta reflujo a 110 °C durante 3 h. La mezcla se filtró, el filtrado se concentró dando el producto en bruto, que se purificó por cromatografía en gel de sílice dando 4-cloro-2,5-difluoroanilina (80 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 7,08 - 6,99 (m, 1H), 6,65 (dd,J= 7,8, 10,7 Hz, 1H).
1-Cloro-2,5-difluoro-4-isotiocianatobenceno. A una mezcla de 4-cloro-2,5-difluoroanilina (1,0 g, 6,1 mmoles) en DCM/agua (0,1 M, 1/2) se añadió NaOH (6 equiv.) y SCCl2 (3 equiv.) a 0 °C. Después de la adición, la mezcla se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. La mezcla se filtró, y el filtrado se extrajo con DCM. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron dando un residuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice dando 1-cloro-2,5-difluoro-4-isotiocianatobenceno (48 %) como un aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 5 ppm: 7,26 - 7,22 (m, 1H), 7,00 (dd,J= 6,7, 8,5 Hz, 1H).
(1s,4s)-4-(8-((4-Cloro-2,5-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,37 M) se añadió 1-cloro-2,5-difluoro-4-isotiocianatobenceno (1 equiv.). La mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 1 h. Se añadió DIC (1 equiv.) y la mezcla se agitó a 25 °C durante 16 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((4-cloro-2,5-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (32 %). 1H RMN (400 MHz, MeOH-d4) 5 ppm: 8,16 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 4,34 (s, 1H), 4,11 - 3,84 (m, 3H), 3,69 (t, J=11,2 Hz, 2H), 2,87 (d, J=11,7 Hz, 2H), 2,65 (s, 1H), 2,31 (d, J=12,9 Hz, 2H), 2,02 (d, J=12,8 Hz, 2H), 1,75 (s, 4H), 1,64 - 1,45 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 506,2 [M+1]+.
Ejemplo 8. (1s,4s)-4-(8-((4-Cloro-2,3-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1 -carboxamida
4-Cloro-2,3-difluoroanilina. A una mezcla de 1-cloro-2,3-difluoro-4-nitrobenceno (1 equiv.) en ácido acético (0,5 M) se añadió Fe (5 equiv.). Después de la adición, la mezcla se sometió a reflujo durante 3 h. La mezcla se filtró, el filtrado se concentró dando un residuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice dando 4-cloro-2,3-difluoroanilina (41 %) como un aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 7,05 - 6,98 (m, 1H), 6,62 - 6,53 (m, 1H), 5,67 (a.s, 2H).
1-Cloro-2,3-difluoro-4-isotiocianatobenceno. A una mezcla de 4-cloro-2,3-difluoroanilina (1 equiv.) en DCM / agua (0,3 M, 1/27) se añadió NaOH (3 equiv.) y SCCl2 (3 equiv.) a 0 °C. Después de la adición, la mezcla se dejó calentar hasta 25 °C y se agitó durante 2 h. La mezcla se filtró, y el filtrado se extrajo con DCM. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron dando un residuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice dando 1-cloro-2,3-difluoro-4-isotiocianatobenceno (68 %) como un aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 7,54 - 7,47 (m, 1H), 7,41 - 7,34 (m, 1H).
(1s,4s)-4-(8-((4-Cloro-2,3-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,3 M) se añadió 1 -cloro-2,3-difluoro-4-isotiocianatobenceno 2 (1,2 equiv.). La mezcla de reacción se agitó a 30 °C durante 1 h. Se añadió DIC (2 equiv.), y la mezcla se agitó a 30 °C durante 16 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((4-cloro-2,3-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (26 %). 1H R<m>N (400 MHz, MeOH-d4) 5 ppm: 8,11 (s, 1H), 7,46 - 7,36 (m, 1H), 7,33 - 7,23 (m, 1H), 4,42 - 4,29 (m, 1H), 4,11 - 3,94 (m, 3H), 3,77 - 3,65 (m, 2H), 3,00 - 2,79 (m, 2H), 2,70 - 2,64 (m, 1H), 2,39 - 2,28 (m, 2H), 2,09 - 1,98 (m, 2H), 1,85 - 1,71 (m, 4H), 1,64 - 1,52 (m, 2H). MS (ESI)m/z =506,2 [M+1]+.
Ejemplo 9. (1s,4s)-4-(8-((2,4-Difluoro-6-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1 -carboxamida
2.4- D¡fluoro-6-((met¡lt¡o)met¡l)anil¡na. A una mezcla de 2,4-difluoroanilina (1 equiv.) en DCM (0,5 M) se añadió Me2S (1 equiv.), NCS (1 equiv.) y TEA (1 equiv.) a -15 °C. Después de la adición, la mezcla se dejó calentar hasta temperatura ambiente. La mezcla se calentó hasta reflujo durante 16 h. La mezcla se concentró a vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice proporcionando 2,4-difluoro-6-((metiltio)metil)anilina (40 %) como un aceite marrón. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 6,75 (ddd, J=2,9, 8,3, 10,8 Hz, 1H), 6,62 (td, J=2,2, 8,8 Hz, 1H), 3,67 (s, 2H), 2,01 (s, 3H).
2.4- D¡fluoro-6-met¡lan¡l¡na. A una mezcla de 2,4-difluoro-6-((metiltio)metil)anilina (1 equiv.) en EtOH (0,32 M) se añadió Ni Raney bajo N2. La mezcla se agitó bajo H2 (345 KPa (50 psi)) durante 16 h. La mezcla se filtró, y el filtrado se concentró dando 2,4-difluoro-6-metilanilina 3 (0,8 g, rendimiento: 89 %) como un aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 6,74 - 6,53 (m, 2H), 3,63 - 3,34 (m, 2H), 2,19 (s, 3H).
1.5- D¡fluoro-2-¡sot¡oc¡anato-3-met¡lbenceno. A una mezcla de 2,4-difluoro-6-metilanilina (1 equiv.) en DCM/agua (1/2, 0,2 M) se añadió NaOH (6 equiv.) y SCCl2 (3 equiv.) a 0 °C. Después de la adición, la mezcla se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. La mezcla se filtró, y el filtrado se extrajo con DCM. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron dando un residuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice proporcionando 1,5-difluoro-2-isotiocianato-3-metilbenceno (48 %) como un aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 6,80 - 6,72 (m, 2H), 2,39 (s, 3H).
(1s,4s)-4-(8-((2,4-D¡fluoro-6-met¡lfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,12 M) se añadió 1,5-difluoro-2-isotiocianato-3-metilbenceno (1 equiv.). La mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 1 h. A la reacción se añadió DIC (2 equiv.), y la mezcla se agitó a 25 °C durante 16 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((2,4-difluoro-6-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida (54 %). 1H r Mn (400 MHz, MeOH-dí) 5 ppm: 7,93 (s, 1H), 6,98 - 6,79 (m, 2H), 4,39 (t,J= 12,0 Hz, 1H), 4,09 - 3,90 (m, 3H), 3,67 (dt,J= 1,9, 11,5 Hz, 2H), 2,99 - 2,79 (m, 2H), 2,66 (s, 1H), 2,37 - 2,17 (m, 5H), 2,06 - 1,95 (m, 2H), 1,87 - 1,71 (m, 4H), 1,63 - 1,47 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 486,3 [M+1]+.
Ejemplo 10. (1s,4s)-4-(8-((2-Cloro-6-fluoro-3-met¡lfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1 -carboxam¡da
2-Cloro-6-fluoro-3-met¡lan¡l¡na. A una mezcla de ácido 2-cloro-6-fluoro-3-metilbenzoico (1 equiv.) en THF (0,3 M) se añadió DPPA (1,07 equiv.), y TEA (3 equiv.) a 25 °C. La mezcla se agitó a 25 °C durante 2 h, entonces la mezcla se calentó hasta reflujo durante 2 h. Se añadió agua y la reacción se sometió a reflujo durante 1 h. La mezcla se concentró dando un residuo, que se purificó por cromatografía en gel de sílice dando 2-cloro-6-fluoro-3-metilanilina (46 %) como un aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 6,83 (dd,J= 8,4, 10,3 Hz, 1H), 6,56 (dd,J= 5,8, 8,3 Hz, 1H), 4,08 (s a, 1H), 2,31 (s, 1H).
2-Cloro-4-fluoro-3-¡sot¡oc¡anato-1-met¡lbenceno. A una mezcla de 2-cloro-6-fluoro-3-metilanilina (1 equiv.) en DCM/agua (1/2, 0,1 M) se añadió NaOH (6 equiv.) y SCCl2 (3 equiv.) a 0 °C. Después de la adición, la mezcla se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. La mezcla se filtró. El filtrado se extrajo con DCM. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron dando un residuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (éter de petróleo) dando 2-cloro-4-fluoro-3-isotioc¡anato-1-met¡lbenceno (63 %) como un aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 7,09 (dd,J= 5,7, 8,6 Hz, 1H), 7,01 - 6,93 (m, 1H), 2,36 (s, 3H).
(1s,4s)-4-(8-((2-cloro-6-fluoro-3-met¡lfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxamida. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,1 M) se añadió 2-cloro-4-fluoro-3-isotiocianato-1 -metilbenceno (1 equiv.). La mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 1 h. A la mezcla de reacción se añadió DIC (2 equiv.). La mezcla se agitó a 25 °C durante 16 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron cis-4-(8-((2-cloro-6-fluoro-3-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (42 %). 1H RMN (400 MHz, MeOH-aL) 5 ppm: 7,96 (s, 1H), 7,31 - 6,92 (m, 2H), 4,42 (s, 1H), 4,12 - 3,91 (m, 3H), 3,68 (t,J= 11,3 Hz, 2H), 2,89 (d, J=11,7 Hz, 2H), 2,65 (s, 1H), 2,45 - 2,23 (m, 5H), 2,09 - 1,97 (m, 2H), 1,92 - 1,68 (m, 4H), 1,62 - 1,47 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 502,1 [M+1 ]+.
Ejemplo 11. (1s,4s)-4-(8-((3,4-D¡cloro-2-fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da
1,2-D¡cloro-3-fluoro-4-¡sot¡oc¡anatobenceno. Una disolución de hidróxido sódico (3 equiv.) en agua (0,5 M) se añadió a una disolución de 3,4-dicloro-2-fluoroanilina (1 equiv.) en DCM (1 M). La mezcla se enfrió hasta 0 °C y se añadió tiofosgeno (3 equiv.) gota a gota mediante una jeringa. La mezcla de reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se extrajo con DCM, las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron a vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna para proporcionar 1,2-dicloro-3-fluoro-4-isotiocianatobenceno (79 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 7,24 (dd,J= 8,8, 2,0 Hz, 1H), 7,06 (t,J= 8,2 Hz, 1H).
(1s,4s)-4-(8-((3,4-D¡cloro-2-fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da. Una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) y 1,2-dicloro-3-fluoro-4-isotiocianatobenceno (1,2 equiv.) en DMF (0,5 M) se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La LCMS mostró que se formó el producto intermedio tiourea. Entonces se añadió EDC (2,5 equiv.) y la reacción se agitó durante otras 16 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((3,4-dicloro-2-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (31 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 8,01 (s a, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,35 (dd,J= 8,8, 2,0 Hz, 1H), 4,39-4,35 (m, 1H), 4,04-3,96 (m, 3H), 3,72-3,66 (m, 2H), 2,89 2,85 (m, 2H), 2,65 (s, 1H), 2,32 (d,J= 12,4 Hz, 2H), 2,02 (d,J= 10,8 Hz, 2H), 1,78-1,55 (m, 4H), 1,16-1,12 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 522,2 [M+1]+.
Ejemplo 12. (1s,4s)-4-((5-(3-(2-Cloro-4-c¡ano-6-fluorofen¡l)t¡oure¡do)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)c¡clohexanocarboxam¡da
4-Amino-3-cloro-5-fluorobenzon¡tr¡lo. Una mezcla de 4-amino-3-fluorobenzonitrilo (1 equiv.) y W-clorosuccinimida (1,5 equiv.) en acetonitrilo (0,24 M) se agitó a 85 °C durante 5 h. El disolvente se retiró por concentración y el residuo se repartió entre acetato de etilo y 5 % de NaOH. La fase orgánica se lavó con 5 % de NaOH y salmuera. Entonces la fase orgánica se secó sobre MgSO4 y se secó a vacío proporcionando 4-amino-3-cloro-5-fluorobenzonitrilo (88 %) como un sólido beis. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 7,41 (t,J= 6 Hz, 1H), 7,24 (dd,J= 1,8, 10,2 Hz, 1H), 4,66 (s, 2H).
3-Cloro-5-fluoro-4-isot¡oc¡anatobenzon¡tr¡lo. A una mezcla de 4-amino-3-cloro-5-fluorobenzonitrilo (1 equiv.) y DIEA (3,5 equiv.) en DCM (1 M) se añadió tiofosgeno (3,5 equiv.) a 0 °C . La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El disolvente se retiró y el residuo se purificó por CCF preparativa dando 3-cloro-5-fluoro-4-isotiocianatobenzonitrilo (34 %) como un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCb) 5 ppm: 7,55 (t,J= 1,6 Hz, 1H), 7,40 (dd,J= 1,7, 8,5 Hz, 1H).
(1s,4s)-4-((5-(3-(2-Cloro-4-c¡ano-6-fluorofen¡l)t¡oure¡do)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)c¡clohexanocarboxam¡da. Una mezcla de 3-cloro-5-fluoro-4-isotiocianatobenzonitrilo (1 equiv.) y (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El disolvente se retiró y el residuo se purificó por CCF preparativa dando (1s,4s)-4-((5-(3-(2-cloro-4-ciano-6-fluorofenil)tioureido)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (33 %) como un sólido amarillo. MS (ESI)m/z= 547,2 [M+1]+.
(1s,4s)-4-(8-((2-Cloro-4-c¡ano-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-(3-(2-cloro-4-ciano-6-fluorofenil)tioureido)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) en DMF se añadió EDC (2,5 equiv.) en una porción. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1 s,4s)-4-(8-((2-cloro-4-ciano-6-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (43 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 7,71 (s, 1H), 7,56 (d,J= 9,7 Hz, 1H), 4,54 (t,J= 12,2 Hz, 1H), 4,06 - 3,95 (m, 3H), 3,69 (t,J= 11,3 Hz, 2H), 2,92 - 2,78 (m, 2H), 2,68 - 2,63 (m, 1H), 2,33 (d,J= 14,2 Hz, 2H), 2,03 (d,J= 13,7 Hz, 2H), 1,83 - 1,70 (m, 4H), 1,64 - 1,52 (m, 2H). MS (ESI)m/z531,2 [M+1]+.
Ejemplo 13. (1s,4s)-4-(8-((4-C¡ano-2,6-d¡fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1 -carboxam¡da
3,5-D¡fluoro-4-¡sot¡oc¡anatobenzon¡tr¡lo. A una disolución enfriada (0 °C) de 4-amino-3,5-difluorobenzonitrilo (1 equiv.) en DCM anhidro (0,2 M) se añadió DIEA (2,5 equiv.) en una porción. Entonces se añadió cloruro de sulfonilo (1,5 equiv.) gota a gota durante 20 min. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 3 h a 0 °C. El disolvente se evaporó dando un sólido marrón, que se purificó por cromatografía en columna dando 3,5-difluoro-4-isotiocianatobenzonitrilo (67 %) como un sólido amarillo claro.
(1s,4s)-4-(8-((4-C¡ano-2,6-d¡fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (preparada como se describe en el presente documento) en DMF anhidra (3,0 ml) se añadió 3,5-difluoro-4-isotiocianatobenzonitrilo (1 equiv.). Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. Se añadió EDC (2,5 equiv.) en una porción. La mezcla de reacción se agitó durante 16 h a temperatura ambiente. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((4-ciano-2,6-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida (9 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 8,14 (s, 1 H), 7,70-7,41 (m, 2 H), 4,55 (s, 1 H), 3,99 (d, J=11,67 Hz, 3 H), 3,70 (t, J=10,79 Hz, 2 H), 2,86 (s, 2 H), 2,66 (s, 1 H), 2,33 (d, J=12,55 Hz, 2 H), 2,02 (d, J=11,54 Hz, 2 H), 1,76 (s, 4 H), 1,67-1,47 (m, 2 H). MS (ESI)m/z= 497,2 [M+1]+.
Ejemplo 14. (1s,4s)-4-(8-((3-C¡ano-2,6-d¡fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1 -carboxam¡da
Ácido 3-ciano-2,6-difluorobenzoico. A una disolución enfriada (0 °C) de diisopropilamina (1,15 equiv.) en THF anhidro se añadió n-BuLi (1,15 equiv.) gota a gota durante un periodo de 10 min. Después de la adición, la disolución se agitó durante aproximadamente 30 min a 0 °C. La mezcla se enfrió hasta -78 °C y se agitó durante aproximadamente 30 min. Una disolución de 2,4-difluorobenzonitrilo (1 equiv.) en THF se añadió gota a gota durante un periodo de 20 min. La disolución de reacción se agitó durante 10 min a -78 °C y se burbujeó CO2 en la mezcla mediante una jeringa durante 15 min. La reacción se agitó a -78 °C durante 2 h. Se añadió HCl (6 M) en la reacción a pH = 3-4. La fase acuosa se extrajo con DCM/MeOH. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con disolución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a vacío dando un residuo blanco, que se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice dando ácido 3-ciano-2,6-difluorobenzoico (53 %) como un sólido blanco.
(3-Ciano-2,6-difluorofenil)carbamato de terc-butilo. A una disolución de ácido 3-ciano-2,6-difluorobenzoico (1 equiv.) en 1:4 t-BuOH/dioxano se añadió DPPA (1,1 equiv.), dicarbonato de di-t-butilo (1,2 equiv.) y trietanolamina (3,5 equiv.). Después de la adición, la reacción se calentó hasta 100 °C, y se agitó durante aproximadamente 6 h. El disolvente se concentró dando un residuo blanco, y se añadió agua al residuo. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con disolución saturada de cloruro sódico, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a vacío dando un residuo blanco, que se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice dando (3-ciano-2,6-difluorofenil)carbamato de terc-butilo (38 %) como un sólido blanco.
3-Amino-2,4-difluorobenzonitrilo. Se disolvió (3-ciano-2,6-difluorofenil)carbamato de terc-butilo (1 equiv.) en HCl 4 M/1,4-dioxano (0,2 M). La mezcla de reacción se agitó durante 4 h a temperatura ambiente. El disolvente se concentró dando 3-amino-2,4-difluorobenzonitrilo (93 %) como un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 7,19-7,09 (m, 1 H), 7,09-6,99 (m, 1 H), 5,85 (s, 2 H).
2,4-Difluoro-3-isotiocianatobenzonitrilo. A una disolución enfriada (0 °C) de 3-amino-2,4-difluorobenzonitrilo (1 equiv.) en DCM anhidro (1,0 ml) se añadió DIEA (4 equiv.) en una porción. Se añadió cloruro de sulfonilo (5 equiv.) gota a gota durante 10 min. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 0,5 h a 0 °C. La reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 3 h. El disolvente se evaporó dando un sólido marrón, que se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice dando 2,4-difluoro-3-isotiocianatobenzonitrilo (31 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 7,60-7,45 (m, 1 H), 7,13 (td,J= 8,72, 1,64 Hz, 1 H).
(1s,4s)-4-(8-((3-Ciano-2,6-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF anhidra se añadió 2,4-difluoro-3-isotiocianatobenzonitrilo (1,1 equiv.). Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. Se añadió DIC (1,1 equiv.) en una porción. La mezcla de reacción se agitó durante 16 h a temperatura ambiente. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron cis-4-(8-((3-ciano-2,6-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (15 %). 1H R<m>N (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 8,00 (s, 1 H), 7,79-7,56 (m, 1 H), 7,33-7,06 (m, 1 H), 4,49 (s, 1 H), 4,12-3,91 (m, 3 H), 3,70 (t,J= 10,98 Hz, 2 H), 3,00-2,75 (m, 2 H), 2,67 (s, 1 H), 2,34 (d,J= 13,68 Hz, 2 H), 2,03 (d,J= 11,04 Hz, 2 H), 1,89-1,68 (m, 4 H), 1,46 - 1,65 (m, 2 H). MS (ESI)m/z497,3 = [M+1]+.
Ejemplo 15. (1s,4s)-4-(8-((2-Cloro-6-fluoro-4-(trifluorometil)fenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida
2-Cloro-6-fluoro-4-(tr¡fluoromet¡l)an¡l¡na. A una mezcla de 2-fluoro-4-(trifluorometil)anilina (1 equiv.) en acetonitrilo (10 ml) se añadió N-clorosuccinimida (1,15 equiv.) a 90 °C. La mezcla de reacción se agitó a 90 °C durante 5 h. La mezcla se concentró dando un residuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice dando el producto deseado 2-cloro-6-fluoro-4-(trifluorometil)anilina (50 %). 1H Rm N (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 7,36 (s, 1H), 7,20 (d,J= 10,4 Hz, 1H), 4,41 (s, 2H).
1-Cloro-3-fluoro-2-¡sot¡oc¡anato-5-(tr¡fluoromet¡l)benceno. A una disolución de 2-cloro-6-fluoro-4-(trifluorometil)anilina (1 equiv.) en DCM (5 ml) se añadió DIEA (3 equiv.) y dicloruro de tiocarbonilo (3 equiv.). Después de la adición, la mezcla se calentó hasta 50 °C y se agitó durante 2 h. La CCF (éter de petróleo/acetato de etilo=50:1) mostró que la 2-cloro-6-fluoro-4-(trifluorometil)anilina se consumió completamente. La mezcla se concentró y se purificó con cromatografía en gel de sílice dando el producto deseado 1-cloro-3-fluoro-2-isotiocianato-5-(trifluorometil)benceno (67 %) como un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 7,51 (s, 1H), 7,35 (d,J= 8,8 Hz, 1H).
(1s,4s)-4-(8-((2-Cloro-6-fluoro-4-(tr¡fluoromet¡l)fen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (preparada como se describe en el presente documento) (1 equiv.), en DMF se añadió 1-cloro-3-fluoro-2-isotiocianato-5-(trifluorometil)benceno (1 equiv.). La mezcla de reacción se agitó a 30 °C durante 2 h. A la mezcla de reacción se añadió EDC (2 equiv.), la mezcla se agitó a 30 °C durante 16 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((2-cloro-6-fluoro-4-(trifluorometil)fenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (32 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 7,63 - 7,53 (m, 2H), 7,48 - 7,39 (m, 1H), 4,60 - 4,47 (m, 1H), 4,07 - 3,90 (m, 3H), 3,75 - 3,62 (m, 2H), 2,97 - 2,75 (m, 2H), 2,66 - 2,59 (m, 1H), 2,37 - 2,27 (m, 2H), 2,04 - 1,95 (m, 2H), 1,88 - 1,68 (m, 4H), 1,62 - 1,47 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 556,2 [M+1]+.
Ejemplo 16. (1s,4s)-4-(8-((3-Cloro-2-met¡lfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1 -carboxam¡da
Ác¡do (1s,4s)-4-((2-cloro-5-n¡trop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)c¡clohexano-1-carboxíl¡co. Se suspendieron 2,4-dicloro-5-nitropirimidina (1 equiv.) y (1s,4s)-4-aminoácido ciclohexanocarboxílico (1 equiv.) en THF y se enfriaron hasta -78 °C. Se añadió gota a gota DIEA (3 equiv.) y la reacción se agitó a -78 °C durante 45 min. El baño de refrigeración se retiró y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El disolvente se retiró a presión reducida dando el producto deseado ácido (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxílico (84 %), que se filtró y usó sin más purificación. MS (ESI)m/z301,2 [M+1]+.
Ác¡do (1s,4s)-4-((5-N¡tro-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)c¡clohexano-1-carboxíl¡co. Se suspendieron ácido (1s,4s)-4-((2-Cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxílico (1 equiv.) y clorhidrato de tetrahidro-2H-piran-4-amina (1 equiv.) en THF seguido de la adición de DIEA (4 equiv.). La reacción se agitó a 50 °C durante la noche. El disolvente se redujo a vacío dando el producto deseado ácido (1s,4s)-4-((5-nitro-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxílico (69 %). El producto se usó sin más purificación. MS (ESI)m/z366,4 [M+1]+.
(1s,4s)-4-((5-n¡tro-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)p¡r¡mid¡n-4-¡l)am¡no)c¡clohexano-1-carboxam¡da unida a resina. Se disolvió ácido (1s,4s)-4-((5-Nitro-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxílico (1 equiv.) en DMF, seguido de la adición de resina de Rink-H (1 equiv.) y HOBt (1,5 equiv.). La mezcla de reacción se agitó durante la noche, seguido de la adición de EDC (2,3 equiv.), y la mezcla de reacción se calentó a 50 °C durante 1 h. La resina se lavó con tres porciones de MeOH, tres porciones de DCM, tres porciones de MeOH y dos porciones de éter. La resina se llevó a la siguiente etapa. MS (ESI)m/z484,2 [M+1]+.
(1s,4s)-4-((5-(3-(3-cloro-2-met¡lfen¡l)t¡oure¡do)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)c¡clohexano-1-carboxam¡da un¡da a res¡na. Se trató (1s,4s)-N-metil-4-((5-nitro-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) unida a resina con relación DMF:MeOH (3:1), seguido de la adición de cloruro de cromo (II) (3 equiv.). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, seguido de la adición de 1-cloro-3-isotiocianato-2-metilbenceno (5 equiv.). La resina se lavó con tres porciones de MeOH seguido de tres porciones de DCM, luego se aclaró con EtOH. La resina una vez lavada se llevó a la siguiente etapa. MS (ESI)m/z519,2 [M+1]+.
(1s,4s)-4-(8-((3-Cloro-2-met¡lfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da. Se suspendió (1 s,4s)-4-((5-(3-(3-cloro-2-metilfenil)tioureido)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1 -carboxamida (1 equiv.) unida a resina en EtOH, seguido de la adición de EDC (5 equiv.). La mezcla de reacción se calentó hasta 50 °C durante 3 h. La resina se lavó con tres porciones de MeOH, seguido de tres porciones de DCM, luego MeOH/DCM alternando el lavado tres veces cada uno. La resina se transfirió entonces a un vial y se usó 50 % de DCM/TFA para escindir el compuesto de la resina. La mezcla se dejó con agitación durante 30 min, se filtró, la resina se aclaró con DCM y el filtrado se concentró a presión reducida proporcionando (1s,4s)-4-(8-((3-cloro-2-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida como la sal de TFA. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((3-cloro-2-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida (7 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 8,31 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,56 (d,J= 7,81 Hz, 1H), 7,32 (d,J= 1,17 Hz, 1H), 7,10 - 7,28 (m, 2H), 6,76 (s a., 1H), 6,45 (d,J= 7,81 Hz, 1H), 4,30 (s a., 1H), 3,78 - 3,94 (m, 3H), 3,53 (t,J= 10,94 Hz, 2H), 2,57 - 2,76 (m, 2H), 2,13 - 2,36 (m, 5H), 1,85 (d,J= 12,50 Hz, 2H), 1,34 - 1,71 (m, 7H). MS (ESI)m/z= 484,2 [M+1]+.
Ejemplo 17. (1s,4s)-4-(8-((2-Cloro-4-c¡anofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1 -carboxam¡da
3-Cloro-4-¡sot¡oc¡anatobenzon¡tr¡lo. A una disolución enfriada (0 °C) de 4-amino-3-clorobenzonitrilo (1 equiv.) en DCM anhidro (0,65 M) se añadió DIEA (3 equiv.) en una porción. Entonces se añadió CsCl2 (3 equiv.) gota a gota durante 20 min. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 2 h a 0 °C. El disolvente se evaporó dando un sólido marrón, que se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice) dando 3-cloro-4-isotiocianatobenzonitrilo (61 %) como un sólido amarillo claro.
(1s,4s)-4-(8-((2-Cloro-4-c¡anofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF anhidra (0,3 M) se añadió 3-cloro-4-isotiocianatobenzonitrilo (1 equiv.). Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. Se añadió DIC (2 equiv.) en una porción. La mezcla de reacción se agitó durante 16 h a temperatura ambiente. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1 s,4s)-4-(8-((2-cloro-4-cianofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida (14 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 8,29 (s, 1 H), 7,88 (s, 1 H), 7,76 -7,52 (m, 2 H), 4,32 (s, 1 H), 4,10-3,96 (m, 4 H), 3,76-3,66 (m, 2 H), 2,87 (d,J= 10,67 Hz, 2 H), 2,66 (s, 1 H), 2,33 (d,J= 13,55 Hz, 2 H), 2,03 ( s, 2 H), 1,82-1,70 (m, 4 H), 1,60 (d,J= 11,80 Hz, 2 H). MS (ESI)m/z= 495,2 [M+1]+.
Ejemplo 18. (1s,4s)-4-(8-((2,3-D¡fluoro-4-(tr¡fluorometox¡)fen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da
2.3- Difluoro-4-metoxianilina. A una mezcla de 2,3-difluoro-1-metoxi-4-nitrobenceno 1 (1 equiv.) en EtOH (0,5 M) se añadió SnCl2 (5 equiv.). Entonces se añadió HCl (25 ml) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. Se añadieron acetato de etilo y H2O, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, y se filtraron, a continuación el filtrado se concentró a vacío dando 2,3-difluoro-4-metoxianilina (90 %) como un sólido marrón.
2.3- Difluoro-1-isotiocianato-4-metoxibenceno. A una disolución de 2,3-difluoro-4-metoxianilina (1 equiv.) en DCM (0,8 M) se añadió DIEA (2,5 equiv.) a 0 °C, a continuación se añadió SCCl2 (5 equiv.) gota a gota a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente orgánico se condensó a vacío y se purificó por gel de sílice dando 2,3-difluoro-1-isotiocianato-4-metoxibenceno (94 %) como un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 7,42 - 7,27 (m, 1H), 7,08 (dt,J=2,1,8,9 Hz, 1H), 3,99 - 3,83 (m, 3H).
(1s,4s)-4-(8-((2,3-Difluoro-4-(trifluorometoxi)fenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida. A una disolución de 2,3-difluoro-1-isotiocianato-4-metoxibenceno (1 equiv.) en DMF (0,5 M) se añadió (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. A la mezcla obtenida en la etapa previa se añadió DIC (2 equiv.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 12 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1 s,4s)-4-(8-((2, 3-difluoro-4-metoxifenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (5 %). 1H r Mn (400 MHz, CDCb) 5 ppm: 8,33 (s, 1H), 7,76 (dt,J= 2,5, 8,8 Hz, 1H), 7,37 (s, 1H), 6,96 - 6,75 (m, 1H), 5,61 - 5,39 (m, 2H), 4,81 - 4,55 (m, 2H), 4,19 - 3,98 (m, 3H), 3,92 (s, 3H), 3,67 - 3,54 (m, 2H), 2,85 - 2,66 (m, 2H), 2,63 (s a., 1H), 2,22 (d,J= 15,4 Hz, 2H), 2,14 - 2,03 (m, 2H), 1,94 - 1,72 (m, 4H), 1,58 - 1,46 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 502,3 [M+1]+.
Ejemplo 19. (ls,4s)-4-(8-((4-Fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida
Clorhidrato de (1s,4s)-4-aminociclohexano-1-carboxilato de metilo. A una disolución de ácido cis-4-aminociclohexanocarboxílico (1 equiv.) en metanol seco (0,5 M), se añadió gota a gota dicloruro sulfuroso (4 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente se retiró a vacío dando clorhidrato de (1s,4s)-4-aminociclohexano-1-carboxilato de metilo (96 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3-d4) 5 ppm: 8,34 (s a., 3H), 3,80 - 3,66 (m, 3H), 3,32 (s a., 1H), 2,58 (s a., 1H), 2,31 - 1,50 (m, 8H).
(1s,4s)-4-((2-Cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxilato de metilo. Se disolvieron 2,4-dicloro-5-nitropirimidina (1 equiv.) y clorhidrato de (1s,4s)-4-aminociclohexano-1-carboxilato de metilo (1 equiv.) en THF (0,5 M) y se enfrió hasta -78 °C. Se añadió DIEA (2,5 equiv.) gota a gota y la reacción se agitó a -78 °C durante 45 min. El baño de refrigeración se retiró y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. El disolvente se retiró a vacío dando (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxilato de metilo (95 %) como un sólido amarillo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin más purificación. MS (ESI)m/z= 315,1 [M+1]+.
(1s,4s)-4-((5-Nitro-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxilato de metilo. A una mezcla de (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1 -carboxilato de metilo (1 equiv.) y tetrahidro-2H-piran-4-amina (1,2 equiv.) en THF (0,3 M) se añadió DIEA (3 equiv.). La mezcla se agitó a 70 °C durante la noche. Se añadieron agua y acetato de etilo a la mezcla y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron a vacío dando (1s,4s)-4-((5-nitro-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxilato de metilo (60 %) como un sólido amarillo.
1H RMN (400 MHz, CDCL) 5 ppm: 9,06 - 8,90 (m, 1H), 8,64 - 8,35 (m, 1H), 5,70 - 5,30 (m, 1H), 4,2 (m, 1H), 4,07 - 3,95 (m, 3H), 3,72 (m, 3H), 3,60 - 3,46 (m, 2H), 2,60-2,47 (m, 1H), 2,04 - 1,92 (m, 4H), 1,89 - 1,69 (m, 6H), 1,65 - 1,55 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 380,2 [M+1]+.
(1s,4s)-4-((5-Am¡no-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)c¡clohexano-1-carbox¡lato de metilo. A (1s,4s)-4-((5-nitro-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxilato de metilo (1 equiv.) en MeOH (0,3 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv, 10 % de Pd en peso) bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se hidrogenó durante la noche bajo H2 (1 atm). La reacción se filtró sobre Celite y se lavó con MeOH. El filtrado se concentró a vacío dando (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxilato de metilo, que se usó en la siguiente etapa sin más purificación. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 7,23 (s, 1H), 5,78 (d,J= 7,2 Hz, 1H), 5,54 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 4,01 - 3,90 (m, 1H), 3,89 - 3,77 (m, 4H), 3,75 - 3,65 (m, 1H), 3,63 (s, 3H), 3,34 - 3,28 (m, 2H), 2,61 - 2,53 (m, 1H), 2,00 - 1,90 (m, 2H), 1,79 (dd,J= 1,9, 12,4 Hz, 2H), 1,75 - 1,67 (m, 2H), 1,62 - 1,35 (m, 6H).
(1s,4s)-4-(8-((4-Fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carbox¡lato de met¡lo. A (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxilato de metilo (1 equiv.) en DMF (0,2 M) se añadió 1-fluoro-4-isotiocianatobenceno (1 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La disolución de reacción se usó directamente en la siguiente etapa sin más purificación. A la disolución de reacción de antes se añadió DIC (1 equiv.). La reacción se agitó a 50 °C durante la noche. Se añadieron agua y acetato de etilo a la disolución y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua, luego se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron a vacío. El residuo se lavó con acetato de etilo dando (1s,4s)-4-(8-((4-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxilato de metilo (64 %) como un sólido blanco. MS (ESI)m/z= 469,3 [M+1]+.
Ác¡do (1s,4s)-4-(8-((4-Fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxíl¡co. Se agitó una mezcla de (1s,4s)-4-(8-((4-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxilato de metilo (1 equiv.), L<ío>H (1 equiv.) y THF/ H2O (4/1, 0,1 M) a 70 °C durante la noche. Se añadió agua al residuo, el pH de la mezcla se ajustó a 6 con HCl 1 N, y la disolución se filtró dando ácido (1s,4s)-4-(8-((4-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il) amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxílico (88 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, Metanol<U) 5 ppm: 8,01 (s, 1H), 7,67 - 7,58 (m, 2H), 7,13 (t,J= 8,8 Hz, 2H), 4,46 - 4,35 (m, 1H), 4,18 - 4,06 (m, 1H), 4,03 - 3,94 (m, 2H), 3,77 (dt,J= 11,2, 1,8 Hz, 2H), 2,89 - 2,73 (m, 3H), 2,41 (d,J= 13,7 Hz, 2H), 2,08 - 2,03 (m, 2H), 1,88 - 1,74 (m, 4H), 1,71 - 1,54 (m, 2H).
(1s,4s)-4-(8-((4-Fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da. A una disolución de ácido (1s,4s)-4-(8-((4-Fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxílico (1 equiv.) en DMF (0,2 M) se añadió NH4Cl (3,3 equiv.), DIEA (4 equiv.) y HATU (1,2 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron ácido (1 s,4s)-4-(8-((4-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1 -carboxílico (36 %).
1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 7,95 (s, 1H), 7,76 - 7,71 (m, 2H), 7,20 - 7,13 (m, 2H), 4,51 (tt,J= 12,0, 4,0 Hz, 1H), 4,27-4,14 (m, 1H), 4,01 (td,J= 11,2, 3,6 Hz, 2H), 3,76 (t,J= 11,2 2H), 2,95 - 2,82 (m, 2H), 2,74-2,68 (m, 1H), 2,32 (d,J= 13,6 Hz, 2H), 2,05 (dd,J= 12,8, 2,4 Hz, 2H), 1,89 - 1,78 (m, 4H), 1,73 - 1,61 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 454,3 [M+H]+.
Ejemplo 20. (1s,4s)-4-(8-((2,6-D¡cloro-4-fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1 -carboxam¡da
(1s,4s)-4-((5-(3-(2,6-D¡cloro-4-fluorofen¡l)t¡oure¡do)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)c¡clohexano-1-carbox¡lato de met¡lo. A una disolución de 4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxilato de (1s,4s)-metilo (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,3 M) se añadió 1,3-dicloro-5-fluoro-2-isotiocianatobenceno (1 equiv.). La reacción se agitó a 25 °C durante 2 h. La mezcla se usó directamente en la siguiente etapa sin más purificación. MS (ESI)m/z= 571,1 [M+H]+.
4-(8-((2,6-D¡cloro-4-fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexanocarbox¡lato de (1s,4s)-metilo. A la disolución de antes se añadió DIC (2 equiv.). La mezcla se agitó a 40 °C durante 16 h. La mezcla se diluyó con salmuera y se filtró. La torta de filtración se cristalizó con acetato de etilo dando 4-(8-((2,6-dicloro-4-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxilato de (1s,4s)-metilo (82 %). 1H RMN (400 MHz, MetanokU) 5 ppm: 8,44 - 8,13 (m, 1H), 7,17 (d,J= 7,6 Hz, 2H), 4,94 - 4,79 (m, 1H), 4,59 - 4,44 (m, 1H), 4,12 - 3,95 (m, 3H), 3,74 (s, 3H), 3,68 - 3,57 (m, 2H), 2,83 - 2,75 (m, 1H), 2,75 - 2,60 (m, 2H), 2,39 - 2,28 (m, 2H), 2,11 -2,01 (m, 2H), 1,81 - 1,61 (m, 4H), 1,60 - 1,46 (m, 2H).
Ác¡do (1s,4s)-4-(8-((2,6-d¡cloro-4-fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexanocarboxíl¡co. A una mezcla de 4-(8-((2,6-dicloro-4-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxilato de (1s,4s)-metilo (1 equiv.) en THF/agua (5/1, 0,12 M) se añadió LiOH (5 equiv.). La reacción se agitó a 60 °C durante 16 h. Se añadió agua a la mezcla y el pH se ajustó a 6 con HCl 1 N, entonces la mezcla se concentró dando el producto en bruto, que se usó directamente en la siguiente etapa sin más purificación. MS (ESI)m/z= 523,1 [M+H]+.
(1s,4s)-4-(8-((2,6-D¡cloro-4-fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da. A una disolución de ácido (1s,4s)-4-(8-((2,6-dicloro-4-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxílico (1 equiv.) en DMF (0,2 M) se añadió DIEA (2 equiv.), HATU (1,2 equiv.) y NH4Cl (2 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((2,6-dicloro-4-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (30 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol<U) 5 ppm: 8,04 - 7,87 (m, 1H), 7,48 - 7,18 (m, 2H), 4,53 - 4,34 (m, 1H), 4,08 - 3,91 (m, 3H), 3,74 - 3,61 (m, 2H), 2,97 - 2,77 (m, 2H), 2,70 - 2,62 (m, 1H), 2,38 - 2,26 (m, 2H), 2,06 - 1,96 (m, 2H), 1,88 - 1,71 (m, 4H), 1,63 - 1,48 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 522,2 [M+H]+.
Ejemplo 21. (1s,4s)-4-(8-((2,6-D¡fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-met¡lc¡clohexano-1 -carboxam¡da
4-(8-((2,6-D¡fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-met¡lc¡clohexanocarbox¡lato de c¡s-et¡lo. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1 -carboxilato de etilo (preparada como se describe en el presente documento) (1 equiv.) en d Mf anhidra (0,36 M) se añadió 1,3-difluoro-2-isotiocianatobenceno (1 equiv.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 90 min. Se añadió DIC (2 equiv.) y la agitación continuó a temperatura ambiente. La reacción se diluyó con agua, y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en columna proporcionando 4-(8-((2,6-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexanocarboxilato de cis-etilo (80 %) como un sólido amarillo. MS (ESI)m/z= 515,3 [M+H]+.
Ác¡do (1s,4s)-4-(8-((2,6-d¡fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-met¡lc¡clohexano-1-carboxíl¡co. A 4-(8-((2,6-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexanocarboxilato de cis-etilo (1 equiv.) en MeOH/agua (0,1 M, 3/1) se añadió KOH (7 equiv.). La reacción se sometió a reflujo durante 72 h. La reacción se concentró, se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase acuosa se acidificó con HCl 6 M a pH=3-5, y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se evaporaron proporcionando ácido (1 s,4s)-4-(8-((2,6-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1 -metilciclohexano-1-carboxílico (67 %) como un sólido amarillo, que se usó directamente en la siguiente etapa sin más purificación.
A una disolución de ácido (1s,4s)-4-(8-((2,6-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1 -carboxílico (1 equiv.) en d Mf (0,3 M) se añadieron HATU (2 equiv.), TEA (2 equiv.) y NH4Cl (2 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((2,6-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (88 %). 1H R<m>N (400 MHz, Metanol<U) 5 ppm: 8,00 (s a., 1H), 7,45 - 6,92 (m, 3H), 4,37 (s a., 1H), 4,07 - 3,93 (m, 3H), 3,72 (t,J= 10,7 Hz, 2H), 2,79 (d,J= 12,0 Hz, 2H), 2,41 (d,J= 13,1 Hz, 2H), 2,04 (d,J= 13,7 Hz, 2H), 1,84 (d,J= 11,0 Hz, 2H), 1,65 - 1,53 (m, 2H), 1,46 (dt, J = 3,1, 13,8 Hz, 2H), 1,26 (s, 3H). MS (ESI)m/z= 486,2 [M+H]+.
Ejemplo 22. (1s,4s)-1-Met¡l-4-(2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-8-((2,4,6-tr¡fluorofen¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1 -carboxam¡da
1,4-Dioxaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de etilo. A una disolución de 4-oxociclohexanocarboxilato de etilo (1 equiv.) en DCM (0,6 M) se añadieron etano-1,2-diol (2 equiv.), trietoximetano (2 equiv.) y pTSA (0,05 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se concentró a vacío. El residuo resultante se diluyó con petróleo/acetato de etilo, se filtró a través de una almohadilla de gel de sílice. El filtrado se concentró dando 1,4-dioxaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de etilo (100 %). 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 4,11 (c,J= 7,2 Hz, 2H), 3,93 (s, 4H), 2,37 - 2,26 (m, 1H), 1,98 - 1,87 (m, 2H), 1,85 - 1,71 (m, 4H), 1,59 - 1,48 (m, 2H), 1,22 (t,J= 7,2 Hz, 3H).
8-Metil-1,4-dioxaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de etilo. A una disolución enfriada (0 °C) de DIA (1,2 equiv.) en THF anhidro (1 M) se añadió n-BuLi (1,6 equiv.) gota a gota durante 20 min. La mezcla se agitó durante 30 min a 0 °C y entonces se enfrió hasta -78 °C. Se añadió gota a gota una disolución de 1,4-dioxaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de etilo (1 equiv.) en THF (1 M) durante 30 min, seguido por yodometano (3 equiv.). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La reacción se diluyó con salmuera y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SÜ4 y se filtraron. El filtrado se concentró dando 8-metil-1,4-dioxaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de etilo 3 (100 %). 1H RMN (400 MHz, CDCb) 5 ppm: 4,16 (c,J= 7,1 Hz, 2H), 3,95 (s, 4H), 2,19 - 2,11 (m, 2H), 1,72 - 1,57 (m, 4H), 1,57 - 1,45 (m, 2H), 1,30 - 1,24 (m, 3H), 1,20 (s, 3H).
1-Metil-4-oxociclohexano-1-carboxilato de etilo. A una disolución de 8-metil-1,4-dioxaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de etilo (1 equiv.) en acetona/H2Ü (0,5 M, 1/1) se añadió pTSAH2Ü (1 equiv.). La mezcla se sometió a reflujo durante la noche, a continuación se concentró para retirar acetona. La disolución resultante se diluyó con acetato de etilo, y las capas se separaron. La fase orgánica se lavó con NaHCÜ3 saturado, se secó sobre Na2SÜ4 y se filtró. El filtrado se concentró proporcionando 1-metil-4-oxociclohexanocarboxilato de etilo (67 %). H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 4,23 (c,J= 7,2 Hz, 2H), 2,49 - 2,39 (m, 4H), 2,37 - 2,27 (m, 2H), 1,75 - 1,64 (m, 2H), 1,34 - 1,28 (m, 6H).
4- (Hidroxiim ino)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo. A una disolución de 1 -metil-4-oxociclohexano-1 -carboxilato de etilo (1,8 g, 9,78 mmoles) en CH3OH/H2O (0,3 M, 4/1) se añadieron NH2ÜH-HCl (1,1 equiv.) y NaOAc (1,1 equiv). La reacción se sometió a reflujo durante la noche y se evaporó para retirar MeOH. El residuo resultante se diluyó con agua, y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se evaporaron a vacío. La purificación del residuo por cromatografía en columna sobre gel de sílice dio 4-(hidroxiimino)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (72 %). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 5 ppm: 4,20 (c,J= 7,1 Hz, 2H), 3,04 (td,J= 4,5, 15,1 Hz, 1H), 2,38 - 2,21 (m, 4H), 2,20 - 2,08 (m, 1H), 1,53 - 1,37 (m, 2H), 1,29 (t,J= 7,0 Hz, 2H), 1,24 (s, 3H).
Clorhidrato de 4-amino-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo. A una disolución de 4-(hidroxiimino)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (1 equiv.) en MeOH (0,3 M) se añadió Ni-Raney bajo atmósfera de N2. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó varias veces, y se agitó a 50 °C bajo 345 KPa (50 psi) de H2 durante la noche. La reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite, se lavó con MeOH y se trató con HCl 4 M/dioxano. La disolución resultante se evaporó a presión reducida proporcionando clorhidrato de 4-amino-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (77 %).
(1r,4r)-4-((2-Cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo y (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirim idin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo. A una disolución enfriada (-78 °C) de 2,4-dicloro-5- nitropirimidina (1 equiv.) y clorhidrato de 4-amino-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (1 equiv.) en THF anhidro (0,46 M) se añadió DlEA (3 equiv.) gota a gota durante 30 min. Después de la adición, la agitación continuó durante 45 min a -78 °C, a continuación durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó proporcionando (1r,4r)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (46 %), 1H RMN (400 MHz, Benceno-d6) 5 ppm: 8,55 (s, 1H), 8,08 (d,J= 6,8 Hz, 1H), 4,03 (c,J= 7,1 Hz, 2H), 3,97 - 3,80 (m, 1H), 1,87 (ddd,J= 3,8, 9,5, 13,6 Hz, 2H), 1,68 -1,57 (m, 2H), 1,48 - 1,37 (m, 2H), 1,32 - 1,18 (m, 2H), 1,09 (s, 3H), 1,04 (t,J =7,1 Hz, 3H); y (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (27%), 1H RMN (400 MHz, Benceno-d6) 5 ppm: 8,44 (s, 1H), 7,85 (d,J= 7,0 Hz, 1H), 4,00 - 3,90 (m, 2H), 3,79 (tdt,J= 4,0, 7,7, 11,6 Hz, 1H), 2,19 - 2,07 (m, 2H), 1,76 - 1,65 (m, 2H), 1,36 - 1,22 (m, 2H), 0,98 (s, 2H), 0,95 - 0,90 (m, 2H), 0,85 (dt,J= 3,6, 13,4 Hz, 1H).
(1s,4s)-1-Metil-4-((5-nitro-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxilato de etilo. A una disolución de (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxilatocarboxilato de etilo (1,0 equiv.) en DMF anhidra (0,4 M) se añadieron clorhidrato de tetrahidro-2H-piran-4-amina (1,2 equiv.) y DIEA (3 equiv.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La reacción se diluyó con acetato de etilo, la fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se suspendió con acetato de etilo y se filtró proporcionando (1s,4s)-1-metil-4-((5-nitro-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxilato de etilo (80 %).<m>S (ESI) m/z = 408,1 [M+H]+.
(1s,4s)-4-((5-Amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo. A una disolución de (1s,4s)-1-metil-4-((5-nitro-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxilato de etilo (1 equiv.) en MeOH (0,1 M) se añadió Pd/C (0,1 g, 10% de Pd en peso) bajo N2. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con hidrógeno. La suspensión se agitó bajo un globo de hidrógeno a temperatura ambiente durante 3 h. La reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite, y se lavó con MeOH. El filtrado se concentró proporcionando (1 s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1 -metilciclohexano-1 -carboxilato de etilo (100 %).
(1s,4s)-1-Metil-4-(2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-trifluorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxilato de etilo. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1 -carboxilato de etilo (1 equiv.) en DMF anhidra (0,36 M) se añadió 1,3,5-trifluoro-2-isotiocianatobenceno (1 equiv.), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 90 min. Se añadió DIC (2 equiv.) y la agitación continuó a temperatura ambiente. La reacción se diluyó con agua, y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se evaporaron. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna proporcionando (1s,4s)-1-metil-4-(2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-trifluorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxilato de etilo (49 %). Ms (ESI)m/z= 533,3 [M+H]+.
Ácido (1s,4s)-1-metil-4-(2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-trifluorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxílico. A (1s,4s)-1-metil-4-(2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-trifluorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxilato de etilo (1 equiv.) en MeOH/H2O (0,1 M, 4/1) se añadió KOH (8 equiv.). La reacción se sometió a reflujo durante 72 h. La reacción se concentró, se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase acuosa se acidificó con HCl 6 M a pH=3-5, y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos combinados se evaporaron a presión reducida proporcionando ácido (1s,4s)-1-metil-4-(2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-trifluorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1 -carboxílico (70 %).
(1s,4s)-1-Metil-4-(2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-trifluorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida. A una disolución de ácido (1s,4s)-1-metil-4-(2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-trifluorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxílico (1 equiv.) en DMF (0,2 M) se añadieron HATU (2 equiv.), TEA (2 equiv.) y NH4Cl (2 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-1-metil-4-(2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-trifluorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida (56 %). 1H Rm N (400 MHz, Metanol<U) 5 ppm: 8,01 (s, 1H), 7,02 (s, 2H), 4,33 (s, 1H), 4,08 - 3,93 (m, 3H), 3,72 (t,J= 11,2 Hz, 2H), 2,91 - 2,66 (m, 2H), 2,43-2,40 (m, 2H), 2,05-2,01 (m, 2H), 1,85-1,82 (m, 2H), 1,65 - 1,53 (m, 2H), 1,46 -1,43(m, 2H), 1,26 (s,3H). MS (ESI) m/z = 504,2 [M+H]+.
Ejemplo 23. (1s,4s)-4-(8-((2,4-Dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1 -carboxamida
2.4- Dicloro-6-fluoro-anilina. A una disolución de 2-fluoroanilina (1 equiv.) en MeOH (0,9 M) se añadió NCS (1 equiv.) en porciones a 65 °C bajo N2. La mezcla se agitó a esta temperatura durante 60 min. La mezcla se evaporó para retirar MeOH , se diluyó con acetato de etilo y se filtró proporcionando el producto en bruto. La purificación por cromatografía en gel de sílice proporcionó el producto. La trituración del material con éter de petróleo a 0 °C dio 2,4-dicloro-6-fluoro-anilina (36 %). 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 7,07 (s, 1H), 6,94 - 6,97 (m, 1H), 4,06 (s, 2H).
1.5- Dicloro-3-fluoro-2-isotiocianatobenceno. A una disolución de 2,4-dicloro-6-fluoro-anilina (1 equiv.) en tolueno anhidro (0,76 M) se añadió una cantidad catalítica de DMF (0,05 equiv.) y dicloruro de tiocarbonilo (2,5 equiv.) gota a gota durante 10 min bajo nitrógeno. La mezcla se calentó lentamente a 90-100 °C durante 2 h. Después de 2 h, la reacción estaba completa. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró dando producto en bruto, que se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice dando 1,5-dicloro-3-fluoro-2-isot¡oc¡anato-benceno (66 %). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm: 7,25-7,28 (m, 1H), 7,11 (d,J= 2,0 Hz, 1H).
(1s,4s)-4-((5-(3-(2,4-D¡cloro-6-fluorofen¡l)t¡oure¡do)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxilato de met¡lo. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,28 M) se añadió 1,5-dicloro-3-fluoro-2-isotiocianatobenceno (1,1 equiv.). La reacción se agitó a 25 °C durante 2 h. La mezcla se usó directamente en la siguiente etapa sin más purificación. Se añadió DIC (2 equiv.) a la mezcla de reacción y la agitación continuó a 40 °C durante 16 h. La CL-EM mostró que la reacción estaba completa. A la mezcla se añadió salmuera, y el precipitado se filtró. La torta de filtración se cristalizó con acetato de etilo dando 4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxilato de (1s,4s)-metilo (65 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400<m>H<z>, Metanol<U) 5 ppm: 8,01 (s, 1H), 7,62 - 7,13 (m, 2H), 4,57 - 4,28 (m, 1H), 4,12 - 4,02 (m, 1H), 4,02 - 3,94 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,76 - 3,64 (m, 2H), 2,89 - 2,63 (m, 3H), 2,42 -2,28 (m, 2H), 2,07 - 1,94 (m, 2H), 1,89 - 1,67 (m, 4H), 1,63 - 1,49 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 537,2 [M+H]+.
Ácido (1s,4s)-4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-il)ciclohexanocarboxílico. A una mezcla de 4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxilato de (1s,4s)-metilo (1 equiv.) en THF/ agua (5/1, 0,5 M) se añadió LiOH (5 equiv.). La reacción se agitó a 60 °C durante 16 h. Se añadió agua a la mezcla y el pH se ajustó a 6 mediante la adición de HCl 1 N, a continuación la mezcla se concentró dando el producto en bruto que se usó directamente en la siguiente etapa sin más purificación. MS (ESI)m/z= 523,1 [M+H]+.
(1s,4s)-4-(8-((2,4-Dicloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida. A una disolución de ácido (1s,4s)-4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxílico (1 equiv.) en DMF (1,2 M) se añadió DIEA (2 equiv.), HATU (436 mg, 1,15 mmoles) y NH4Cl (1,2 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (16 %). 1H R<m>N (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 10,32 (s a, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,48 - 7,37 (m, 1H), 7,27 - 7,14 (m, 1H), 6,77 - 6,66 (m, 1H), 6,57 - 6,45 (m, 1H), 4,45 - 4,30 (m, 1H), 3,92 -3,76 (m, 3H), 3,61 - 3,44 (m, 2H), 2,71 - 2,55 (m, 2H), 2,45 - 2,39 (m, 1H), 2,27 - 2,16 (m, 2H), 1,90 - 1,77 (m, 2H), 1,72 -1,36 (m, 6H). MS (ESI)m/z= 522,2 [M+H]+.
Ejemplo 24. (1s,4s)-4-(8-((2-Cloro-3-metilfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-il)ciclohexano-1 -carboxamida
2-Cloro-3-metilanilina. A 2-cloro-1-metil-3-nitrobenceno (1 equiv.) en ácido acético (0, 5 M) se añadió Fe (4 equiv.). La reacción se calentó a 100 °C durante 2 h. El disolvente se retiró y se añadió MeOH al residuo. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 12 h, a continuación se filtró. El filtrado se concentró y se purificó por cromatografía en gel de sílice dando 2-cloro-3-metilanilina (60 %) como un aceite rojo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 6,90 (t, J=7,7 Hz, 1H), 6,66 (d, J=7,9 Hz, 1H), 6,50 (d, J=7,4 Hz, 1H), 5,23 (s a, 2H), 2,24 (s, 3H).
2-Cloro-1-isotioc¡anato-3-met¡lbenceno. A 2-cloro-3-metilanilina (1 equiv.) en DCM/agua (0,5 M, 1/2) a 0 °C se añadió NaOH (3 equiv.), la disolución se agitó a 0 °C durante 5 min, entonces se añadió CsCl2 (3 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se extrajo con DCM. Las fases orgánicas combinadas se concentraron a sequedad dando 2-cloro-1-isotiocianato-3-metilbenceno en bruto. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice con éter de petróleo dando 2-cloro-1-isotiocianato-3-metilbenceno (61 %) como un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 7,19 - 7,09 (m, 3H), 2,42 (s, 3H).
c¡s-4-(8-((2-Cloro-3-met¡lfen¡l)amino)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1 -carboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,3 M) se añadió 2-cloro-1-isotiocianato-3-metilbenceno (1,1 equiv.). La reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente, y entonces se añadió DIC (3 equiv.), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((2-cloro-3-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida (58 %). 1H r Mn (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 8,07 (s, 1H), 7,48 - 7,34 (m, 1H), 7,24 (t,J= 7,7 Hz, 1H), 7,16 (d,J= 7,4 Hz, 1H), 4,38 (t,J= 11,8 Hz, 1H), 4,10 - 3,94 (m, 3H), 3,77 - 3,65 (m, 2H), 2,96 - 2,81 (m, 2H), 2,71-2,63 (m, 1H), 2,44 (s, 3H), 2,34 (d,J= 13,4 Hz, 2H), 2,05 (d,J= 10,5 Hz, 2H), 1,88 - 1,72 (m, 4H), 1,65 - 1,52 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 484,2 [M+H]+.
Ejemplo 25. (1s,4s)-4-(8-((4-Cloro-2-fluoro-5-met¡lfen¡l)am¡no)-2-((tetrahidro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-il)ciclohexano-1 -carboxam¡da
1-Cloro-5-fluoro-2-met¡l-4-n¡trobenceno. A una disolución enfriada (-5 °C) de 2-fluoro-5-metilanilina (1 equiv.) en H2SO4 concentrado (0,7 M) se añadió KNO3 (1,3 equiv.) en varias porciones en 1 h. La reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se vertió en agua con hielo lentamente, y se extrajo con MTBE, se lavó con NaHCO3 saturado y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se recristalizó en acetato de etilo y éter de petróleo proporcionando 1-cloro-5-fluoro-2-metil-4-nitrobenceno (61 %) como un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 8,00 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 7,35 (d,J= 10,4 Hz, 1H), 2,45 (s, 3H).
4-Cloro-2-fluoro-5-met¡lan¡l¡na. A una suspensión de 1 -cloro-5-fluoro-2-metil-4-nitrobenceno (1 equiv) en EtOH (2 M) se añadió Fe (5 equiv.), seguido de HCl concentrado (2 M). La reacción se sometió a reflujo durante 3 h. La reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite. El filtrado se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna proporcionando 4-cloro-2-fluoro-5-metilanilina (32 %) como un sólido de color morado. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 7,41 (d,J= 7,03 Hz, 1H), 6,97-7,13 (m, 2H), 2,33 (s, 3H).
1-Cloro-5-fluoro-4-¡sot¡oc¡anato-2-met¡lbenceno. A una disolución enfriada de 4-cloro-2-fluoro-5-metilanilina 3 (1,0 g, 6,3 mmoles) en DCM/H2O (0,6 M, 1/1) se añadió NaOH (3 equiv.), seguido de la adición gota a gota de SCCl2 (3 equiv.) durante 10 min. Después de la adición, la mezcla se agitó durante 60 min a temperatura ambiente. El filtrado se concentró proporcionando 1-cloro-5-fluoro-4-isotiocianato-2-metilbenceno (75 %) como un aceite incoloro.
c¡s-4-(8-((5-Cloro-2-fluoro-4-met¡lfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da. A una disolución de cis-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF anhidra (0,3 M) se añadió 1-cloro-5-fluoro-4-isotiocianato-2-metilbenceno (1 equiv.), y la disolución se agitó a temperatura ambiente durante 90 min. Se añadió DIC (3 equiv.) y la agitación continuó a temperatura ambiente durante 12 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron cis-4-(8-((5-cloro-2-fluoro-4-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (58 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol<U) 5 ppm: 8,09 (s, 1H), 7,55 (d,J= 9,5 Hz, 1H), 7,27 (d,J= 10,0 Hz, 1H), 4,34 (d,J= 15,6 Hz, 1H), 4,11 - 3,91 (m, 3H), 3,80 - 3,63 (m, 2H), 2,98 - 2,80 (m, 2H), 2,67 (s, 1H), 2,46 - 2,26 (m, 5H), 2,12 - 1,93 (m, 2H), 1,88 - 1,67 (m, 4H), 1,66 - 1,38 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 502,2 [M+H]+.
Ejemplo 26. (1s,4s)-4-(8-((4-Cloro-2-fluoro-6-met¡lfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1 -carboxam¡da
4-Cloro-2-fluoro-6-met¡lan¡l¡na. A una disolución de 2-fluoro-6-metilanilina (1 equiv.) en DMF (0,8 M) se añadió NCS (1,2 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente. Se añadieron agua y acetato de etilo a la disolución y las fases se separaron. La fase orgánica se lavó con H2O, se secó con Na2SÜ4 y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice dando 4-cloro-2-fluoro-6-metilanilina (58 %) como un aceite marrón. 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm: 10,33 (dd,J= 10,8, 2,0 Hz, 1H), 6,87 (s, 1H), 4,53 (s a. 2H), 2,11 (s, 3H).
5-Cloro-1-fluoro-2-isotiocianato-3-metilbenceno. A una disolución de 4-cloro-2-fluoro-6-metilanilina (1 equiv.) en DCM/agua (0,8 M, 1/2) a 0 °C se añadió NaOH (3 equiv.). La disolución se agitó a 0 °C durante 5 min y se añadió CsCl2 (2 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de gel de sílice y la almohadilla se lavó con DCM. Los filtrados combinados se concentraron a sequedad dando 5-cloro-1-fluoro-2-isotiocianato-3-metilbenceno (43 %) como un aceite marrón. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 7,52 (dd,J= 9,2, 2,4 Hz, 1H), 2,35 (s, 3H).
(1s,4s)-4-(8-((4-Cloro-2-fluoro-6-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,3 M) se añadió 5-cloro-1-fluoro-2-isotiocianato-3-metilbenceno (1,1 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, a continuación se añadió DIC (3 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron cis-4-(8-((4-cloro-2-fluoro-6-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (30 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol<U) 5 ppm: 8,01 - 7,93 (m, 1H), 7,24 - 7,12 (m, 2H), 4,50-4,33 (m, 1H), 4,10 - 3,95 (m, 3H), 3,75 - 3,65 (m, 2H), 2,98 - 2,83 (m, 2H), 2,72 - 2,65 (m, 1H), 2,34 (d,J= 14,1 Hz, 2H), 2,27 (s, 3H), 2,06 - 1,99 (m, 2H), 1,82 (d,J= 11,2 Hz, 4H), 1,64 - 1,50 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 502,2 [M+H]+.
Ejemplo 27. (1s,4s)-4-(8-((2,3-Dicloro-4-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1 -carboxamida
2.3- Dicloro-4-metilanilina. A una disolución de 3-cloro-4-metilanilina (1 equiv.) en DMF (0,7 M) a 0 °C se añadió NCS (1 equiv.) en DMF gota a gota. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió agua y acetato de etilo a la disolución y las fases se separaron. La fase orgánica se lavó con H2O, se secó sobre Na2SO4 y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice dando 2,3-dicloro-4-metilanilina (26 %).
1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm: 6,98 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 6,69 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 5,41 (s a. 2H), 2,20 (s, 3H). y 2,5-dicloro-4-metilanilina (16 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 7,17 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 5,38 (s a. 2H), 2,15 (s, 3H).
2.3- Dicloro-1-isotiocianato-4-metilbenceno. A una disolución de 2,3-dicloro-4-metilanilina (500 mg, 2,86 mmoles) en DCM/agua (0,4 M, 1/2) a 0 °C se añadió NaOH (3 equiv.) y H2O (4 ml). La disolución se agitó a 0 °C durante 5 min, a continuación se añadió CsCl2 (3 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celite y la almohadilla se lavó con DCM. Los filtrados combinados se concentraron a sequedad dando 2,3-dicloro-1-isotiocianato-4-metilbenceno en bruto. El producto en bruto se purificó por cromatografía en gel de sílice dando 2,3-dicloro-1-isotiocianato-4-metilbenceno (66 %) como un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm: 7,48-7,40 (m, 2H), 2,40 (s, 3H).
(1s,4s)-4-(8-((2,3-Dicloro-4-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida. A una disolución (1 s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1 -carboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,3 M) se añadió 2,3-dicloro-1-isotiocianato-4-metilbenceno (1,1 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Se añadió DIC (2 equiv.) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((2,3-Dicloro-4-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida (38 %). 1H<r>MN (400 MHz, Metanol<U) 5 ppm: 8,07 (s, 1H), 7,43 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 7,30 (d,J= 8,0 Hz, 1H), 4,43 - 4,30 (m, 1H), 4,10 - 3,94 (m, 3H), 3,71 (t,J= 10,9 Hz, 2H), 2,96 - 2,81 (m, 2H), 2,72 - 2,64 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,39 - 2,29 (m, 2H), 2,04 (d,J= 11,4 Hz, 2H), 1,88 - 1,72 (m, 4H), 1,65 - 1,52 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 518,2 [M+H]+.
Ejemplo 28. (1s,4s)-4-(8-((4-cloro-2-fluoro-3-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1 -carboxamida
4-Cloro-2-fluoro-3-metilan¡l¡na. A una disolución de 2-fluoro-3-metilanilina (1 equiv.) en DMF (0,8 M) se añadió NCS (1 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió agua y acetato de etilo a la disolución y las fases se separaron. La fase orgánica se lavó con H2O, se secó sobre Na2SO4 y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice dando 4-cloro-2-fluoro-3-metilanilina (22 %) como un aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCls) 5 ppm: 6,92 (dd, J=1,2, 8,4 Hz, 1H), 6,61 (t,J= 9,2 Hz, 1H), 5,20 (s, 2H), 2,18 (d,J= 2,5 Hz, 3H).
1-Cloro-2-fluoro-4-isotioc¡anato-3-met¡lbenceno. A una disolución de 4-cloro-2-fluoro-3-metilanilina (1 equiv.) en DCM/agua (0,3 M, 1/2) a 0 °C se añadió NaOH (7 equiv.). La disolución se agitó a 0 °C durante 5 min. Se añadió CsCl2 (7 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de gel de sílice y la almohadilla se lavó con DCM. Los filtrados combinados se concentraron a sequedad dando 1-cloro-2-fluoro-4-isotiocianato-3-metilbenceno (91 %) como un aceite marrón. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 7,38-7,34 (m, 2H), 2,28 (d,J= 2,4 Hz, 3H).
(1s,4s)-4-(8-((4-cloro-2-fluoro-3-met¡lfen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxamida. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,4 M) se añadió 1-cloro-2-fluoro-4-isotiocianato-3-metilbenceno (1,1 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, a continuación se añadió DIC (3 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((4-cloro-2-fluoro-3-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida (40 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 8,08 (s, 1H), 7,43 (t,J= 8,4 Hz, 1H), 7,22 (d,J= 8,8 Hz, 1H), 4,43 - 4,28 (m, 1H), 4,11 - 3,93 (m, 3H), 3,78 - 3,65 (m, 2H), 2,98 - 2,78 (m, 2H), 2,73 - 2,63 (m, 1H), 2,40 - 2,27 (m, 5H), 2,04 (d,J= 10,4 Hz, 2H), 1,85 - 1,70 (m, 4H), 1,66 - 1,50 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 502,2 [M+H]+.
Ejemplo 29. (1s,4s)-4-(8-((2,3-D¡cloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-il)ciclohexano-1 -carboxamida
4-Bromo-5-cloro-2-fluoroanilina. A una mezcla de 5-cloro-2-fluoroanilina (1 equiv.) en acetonitrilo (0,5 M) se añadió N-bromosuccinimida (1 equiv.) a 25 °C. La mezcla se agitó a 25 °C durante 1 h. La mezcla se concentró dando un residuo, el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice dando 4-bromo-5-cloro-2-fluoroanilina (91 %) como un aceite amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 7,23 (d,J= 10,2 Hz, 1H), 6,88 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 3,92 - 2,64 (a, 2H).
4-Bromo-2,3-dicloro-6-fluoroanilina. A una mezcla de 4-bromo-5-cloro-2-fluoroanilina (1 equiv.) en acetonitrilo (0,36 M) se añadió NCS (1 equiv.) en porciones a 90 °C durante 30 min. La mezcla se agitó a 90 °C durante 1 h. El residuo se purificó por cromatografía dando 4-bromo-2,3-dicloro-6-fluoroanilina (76 %) como un sólido marrón. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 7,35 (d,J= 10,5 Hz, 1H).
2,3-Dicloro-6-fluoroanilina. A una mezcla de 4-bromo-2,3-dicloro-6-fluoroanilina (1 equiv.) en THF (0,28 M) se añadió n-BuLi (2 equiv.) gota a gota a -78 °C durante 10 min. Después de la adición, la mezcla se calentó hasta -30 °C y se agitó durante 1 h, y a continuación la mezcla se enfrió hasta -78 °C. A la mezcla se añadió H2O. La mezcla se calentó hasta 25 °C, y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron dando un residuo. El residuo se purificó por cromatografía dando 2,3-dicloro-6-fluoroanilina (43 %) como un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 6,93 - 6,85 (m, 1H), 6,83 - 6,76 (m, 1H), 4,23 (s a., 2H)
1,2-Dicloro-4-fluoro-3-isotiocianatobenceno. A una mezcla de 2,3-dicloro-6-fluoroanilina (1 equiv.) en DCM (0,1 M, 1/2) se añadió NaOH (5 equiv.) y SCCl2 (3 equiv.) a 0 °C. Después de la adición, la mezcla se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. La mezcla se filtró, y el filtrado se extrajo con DCM. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, y se concentraron dando un residuo. El residuo se purificó por cromatografía dando 1,2-dicloro-4-fluoro-3-isotiocianatobenceno (59 %) como un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 5 ppm: 7,05 (t,J= 8,78 Hz, 1 H) 7,33 (dd,J= 9,03, 5,14 Hz, 1 H)
cis-4-(8-((2,3-Dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,8 M) se añadió 1,2-dicloro-4-fluoro-3-isotiocianatobenceno (1 equiv.). La mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 1 h. Se añadió DIC (2 equiv.) y agitación continuó a 25 °C durante 16 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((2,3-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida (38 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol<U) 5 ppm: 7,79 (s, 1H), 7,39-7,32 (m, 1H), 7,20 (t,J= 9,1 Hz, 1H), 4,58 - 4,39 (m, 1H), 4,11 - 3,90 (m, 3H), 3,81 - 3,61 (m, 2H), 2,97 - 2,79 (m, 2H), 2,67 (s, 1H), 2,34 (d,J= 13,8 Hz, 2H), 2,13 - 1,98 (m, 2H), 1,88 - 1,70 (m, 4H), 1,64 - 1,49 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 522,4 [M+H]+.
Ejemplo 30. (1s,4s)-4-(8-((4-Cloro-3-fluoro-2-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1 -carboxamida.
4-Cloro-3-fluoro-2-metilanilina. A una disolución de 3-fluoro-2-metilanilina (1 equiv.) en DMF (0,8 M) se añadió NCS (1 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se añadieron agua y acetato de etilo a la disolución y las fases se separaron. La fase orgánica se lavó con H2O, se secó sobre Na2SO4 y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice dando 4-cloro-3-fluoro-2-metilanilina (12 %) como un aceite marrón. 1H RMN (400 MHz, CDCta) 5 ppm: 7,02 (t, J=8,0 Hz, 1H), 6,42 (dd,J= 1,6, 8,8 Hz, 1H), 3,71 (s a, 2H), 2,11 (d,J= 1,6 Hz, 3H).
1-Cloro-2-fluoro-4-isotiocianato-3-metilbenceno. A una disolución de 4-cloro-3-fluoro-2-metilanilina (1 equiv.) en DCM/agua (0,3 M, 1/2) a 0 °C se añadió NaOH (2 equiv.). La disolución se agitó a 0 °C durante 5 min, a continuación se añadió CsCl2 (2 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de gel de sílice y la almohadilla se lavó con DCM. Los filtrados combinados se concentraron a sequedad dando 1-cloro-2-fluoro-4-isotiocianato-3-metilbenceno (75 %) como un aceite marrón. 1H RMN (400 MHz, CDCta) 5 ppm: 7,22 (t,J= 8,0 Hz, 1H), 7,00 (dd,J= 1,6, 8,4 Hz, 1H), 2,35 (d,J= 2,4 Hz, 3H).
(1s,4s)-4-(8-((4-Cloro-3-fluoro-2-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,4 M) se añadió 1-cloro-2-fluoro-4-isotiocianato-3-metilbenceno (1,1 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, a continuación se añadió DIC (3 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1 s,4s)-4-(8-((4-cloro-3-fluoro-2-metilfenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida (31 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol<U) 5 ppm: 8,00 (s, 1H), 7,33 (t,J= 8,4 Hz, 1H), 7,18-7,05 (m, 1H), 4,44 - 4,30 (m, 1H), 4,11 - 3,91 (m, 3H), 3,79 - 3,64 (m, 2H), 2,98 - 2,82 (m, 2H), 2,73-2,63 (m, 1H), 2,34 (d,J= 14,1 Hz, 2H), 2,18 (d,J= 2,4 Hz, 3H), 2,09 - 1,98 (m, 2H), 1,87 - 1,72 (m, 4H), 1,65 - 1,50 (m, 2H). MS (ESI)m/z= 502,2 [M+H]+.
Ejemplo 31. (1s,4s)-4-(8-((6-Cloro-2,3-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1 -carboxamida
4-Bromo-2,3-difluoroanilina. A una disolución de 2,3-difluoroanilina (1 equiv.), N-bromosuccinimida (1 equiv.) en acetonitrilo (1 M). La mezcla se agitó a 35 °C durante 2 h, y entonces se redujo a vacío proporcionando un residuo. El residuo se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo, a continuación se concentró dando el producto en bruto, que se purificó por cromatografía en gel de sílice para proporcionar el producto deseado 4-bromo-2,3-difluoroanilina (68 %).
4-Bromo-6-cloro-2,3-difluoroanilina. A una disolución de 4-bromo-2,3-difluoroanilina (1 equiv.) en acetonitrilo (3 M). La disolución se calentó a reflujo, y a continuación se añadió NCS (1,1 equiv.) en porciones. La reacción se agitó a 70 °C. La disolución se concentró a vacío dando un residuo, que se vertió en agua, se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se recogieron, se concentraron dando producto en bruto. El producto en bruto se purificó por columna de gel de sílice dando el producto deseado 4-bromo-6-cloro-2,3-difluoroanilina (78 %). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm: 7,24 -7,22 (m, 1H), 4,21 (s a, 2H).
6-Cloro-2,3-difluoroanilina. A una disolución de 4-bromo-6-cloro-2,3-difluoroanilina (1 equiv.) en THF (1,6 M). La disolución se enfrió hasta -78 °C y a continuación se añadió n-BuLi (2 equiv.) gota a gota. La reacción se agitó a -78 °C durante 1,5 h, y a continuación se enfrió rápidamente con agua. La disolución se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se concentró a vacío proporcionando el producto en bruto, que se purificó por columna de gel de sílice dando el producto deseado 6-cloro-2,3-difluoroanilina (55 %). 1H RMN (400 MHz,<c>D<c>I3) 5 ppm: 6,99 - 6,95 (m, 1H), 6,53 - 6,48 (m, 1H), 4,19 (s a, 2H).
(1s,4s)-4-(8-((6-Cloro-2,3-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida. A una disolución de 6-cloro-2,3-difluoroanilina (1 equiv.), KOH (6 equiv.) en DCM/H2O (1,2 M, 1/2). La disolución se enfrió hasta 0 °C y se agitó durante 20 min, y a continuación .) se añadió SCCI2 (6 equiv.) gota a gota. La reacción se agitó a 36 °C - 40 °C durante 10 h. La disolución se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se concentró a vacío para conseguir el producto en bruto, que se usó directamente en la siguiente etapa sin más purificación. A una disolución de 1-cloro-3,4-difluoro-2-isotiocianatobenceno (1 equiv.) y (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (1,2 M), se añadió DIC (2 equiv.) gota a gota. La reacción se agitó a 31 °C -35 °C durante 12 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((6-cloro-2,3-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (23 %). 1H<r>M<n>(400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 10,37 (s a., 1H) 7,65 (s a., 1H) 7,30 (s a., 1H) 7,20 (s a., 1H) 7,07 (s a., 1H) 6,71 (s a., 1H) 6,51 (s a., 1H) 4,40 (t,J= 11,86 Hz, 1H) 3,80 - 3,94 (m, 3H) 3,52 (d,J= 10,92 Hz, 2H) 2,55 - 2,77 (m, 2H) 2,44 (s a., 1H) 2,24 (d,J= 13,20 Hz, 2H) 1,84 (d,J= 12,80 Hz, 2H) 1,38 - 1,70 (m, 6H). MS (ESI)m/z= 506,1 [M+H]+.
Ejemplo 32. (1S,4s)-4-(2-(((3S,4R)-3-Fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1 -carboxamida
4,4-Dimetoxitetrahidro-2H-pirano. Se añadió CH(OMe)3 (1,2 equiv) gota a gota durante un periodo de 20 min a una disolución de dihidro-2H-piran-4(3H)-ona (1 equiv.) y pTSA (0,03 equiv.) en MeOH anhidro (8 M), mientras que los reactantes se mantuvieron con reflujo suave. Después de 15 min, los productos se neutralizaron con metóxido de sodio/MeOH (1 M) y se destilaron dando 4,4-dimetoxitetrahidro-2H-pirano (41 %) como un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm: 3,68 (t,J= 5,2 Hz, 4H), 3,22 (s, 6H), 1,77 (t,J= 5,6 Hz, 4H).
4-Metoxi-3,6-dih¡dro-2H-p¡rano. Se dispusieron juntos 4,4-dimetoxitetrahidro-2H-pirano (1 equiv.) y pTSA (0,01 equiv.) en un aparato de destilación. La reacción se calentó (baño temperatura: 160 °C) a presión atmosférica. Cuando se recogió la cantidad teórica de MeOH, la reacción se destiló a presión reducida (bomba de agua) dando 4-metoxi-3,6-dihidro-2H-pirano (21 %) como un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCta) 5 ppm: 4,55-4,68 (m, 1H), 4,20 (c,J= 2,3 Hz, 2H), 3,80-3,87 (m, 2H), 3,53-3,57 (m, 3H), 2,19 (ttd,J= 5,6 Hz, 2,2 Hz, 1,1 Hz, 2H).
3- Fluorodihidro-2H-piran-4(3H)-ona. A una disolución de SelectFluor (0,85 equiv.) en acetonitrilo/H2O (1/1, 0,4 M) se añadió una disolución de 4-metoxi-3,6-dihidro-2H-pirano (1 equiv.) en acetonitrilo gota a gota manteniendo la temperatura a 0-5 °C. Después de la adición, la reacción se agitó a 0 °C durante 30 min, y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Se añadió NaCl sólido (40,0 g), la mezcla se extrajo con MTBE, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró proporcionando 3-fluorodihidro-2H-piran-4(3H)-ona (42 %) como un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCta) 5 ppm: 4,85-5,05 (m, 1H), 4,36-4,42 (m, 1H), 4,16-4,24 (m, 1H), 3,60-3,78 (m, 2H), 2,61-2,76 (m, 2H).
frans-N -Bencil^-fluoro tetrahidro^H -piran^-am ina y c/'s-W -bencil^-fluorotetrahidro^H-piran^-am ina. A una disolución enfriada (0 °C) de 3-fluorodihidro-2H-piran-4(3H)-ona (1 equiv.) en MeOH (0,3 M) se añadió bencilamina (1,05 equiv.), NaBHaCN (1,4 equiv.) y ácido acético (1 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se concentró, se diluyó con agua, se extrajo con acetato de etilo, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se purificó con HPLC preparativa proporcionando trans-N-bencil-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina y cis-N-bencil-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina como un aceite incoloro. írans-diastereómero - 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 7,34-7,40 (m, 1H), 7,25-7,33 (m, 1H), 4,33-4,54 (m, 1H), 4,08 (dt,J= 11,1, 5,6 Hz, 1H), 3,82 3,97 (m, 3H), 3,41 (td,J= 11,4, 2,5 Hz, 1H), 3,33 (ddd,J= 11,2, 9,2, 4,6 Hz, 1H), 2,94 (dddd,J= 11,4, 10,4, 8,2, 4,8 Hz, 1H), 2,00-2,09 (m, 1H), 1,47-1,63 (m, 1H). c/s-diastereómero - 1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 7,33-7,42 (m, 4H), 7,26 7,32 (m, 1H), 4,64-4,84 (m, 1H), 4,14-4,25 (m, 1H), 4,03 (dtd,J= 11,4, 3,6, 1,1 Hz, 1H), 3,82-3,97 (m, 2H), 3,52 (dd,J=13,1,0,9 Hz, 1H), 3,37-3,46 (m, 2H), 2,72-2,86 (m, 1H), 1,80-1,88 (m, 2H).
^R ^S ^N -B e nc il^ -fluo ro te trah id ro^H -p iran^-am ina y ^S ^R ^N -benc il^ -fluo ro te trah id ro^H -p iran^-am ina . Se separó trans-N-bencil-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina por HPLC quiral (columna AD-3S_3_5_40_3ML: Chiralpak AD-3 100x4,6 mm D.I., 3 um, fase móvil: MeOH (0,05 % de DEA) en CO2 desde 5 % hasta 40 %, caudal: 3 ml/min, longitud de onda: 220 nm) proporcionando (3R,4S)-N-bencil-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina y (3S,4R)-N-bencil-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina como un aceite incoloro.
Clorhidrato de (3R,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina. A una disolución de (3R,4S)-N-bencil-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina (1 equiv.) en MeOH anhidro (0,3 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv, 10% de Pd en peso) bajo atmósfera de N2. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con hidrógeno varias veces. La mezcla de reacción se agitó bajo globo de hidrógeno durante 3 h a temperatura ambiente. Entonces la reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con MeOH. El filtrado se trató con HCl 4 M y se concentró proporcionando clorhidrato de (3R,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina como un sólido blanco (100 %).
Clorhidrato de (3S,4R)-3-Fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina. A una disolución de (3S,4R)-N-bencil-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina (1 equiv.) en MeOH anhidro (0,3 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv., 10% de Pd en peso) bajo atmósfera de N2. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con hidrógeno varias veces. La mezcla de reacción se agitó bajo globo de hidrógeno durante 3 h a temperatura ambiente. La reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con MeOH. El filtrado se trató con HCl 4 M y se concentró proporcionando clorhidrato de (3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina como un sólido blanco (100 %).
(3R,4R)-N-Bencil-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina y (3S,4S)-N-bencil-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina. Se separó cis-N-bencil-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina por HPLC quiral (columna AS-3S_5_5_40_3m L: Chiralpak AS-3 150x4,6 mm D.I., 3 um, fase móvil: EtOH (0,05 % de DEA) en CO2 desde 5 % hasta 40 %, caudal: 3 ml/min, longitud de onda: 220 nm) proporcionando (3R,4R)-N-bencil-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina y (3S,4S)-N-bencil-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4- amina como un aceite incoloro.
Clorhidrato de (3R,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina. A una disolución de (3R, 4R)-N-bencil-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina (1 equiv.) en MeOH anhidro (0,2 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv., 10 % de Pd/C) bajo atmósfera de N2. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con hidrógeno varias veces. La mezcla de reacción se agitó bajo globo de hidrógeno durante 3 h a temperatura ambiente. La reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con MeOH. El filtrado se trató con HCl 4 M y se concentró proporcionando clorhidrato de (3R,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina como un sólido blanco (100 %).
Clorhidrato de (3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina. A una disolución de (3S,4S)-N-bencil-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina (1 equiv.) en MeOH anhidro (0,2 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv., 10% de Pd/C) bajo atmósfera de N2. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con hidrógeno varias veces. La mezcla de reacción se agitó bajo globo de hidrógeno durante 3 h a temperatura ambiente. La reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con MeOH. El filtrado se trató con HCl 4 M y se concentró proporcionando clorhidrato de (3S, 4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina como un sólido blanco (100 %).
(1S,4R)-4-((2-(((3R,4S)-3-Fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-nitrop¡r¡m¡d¡n-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida. A una disolución de (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF anhidra (0,3 M) se añadieron clorhidrato de (3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina (1 equiv.) y DIEA (3 equiv.). El precipitado sólido formado se recogió por filtración dando (1S,4R)-4-((2-(((3R,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (38 %). 1H RMN (400<m>H<z>, DMSO-afe) 5 ppm: 8,99-8,85 (m, 1H), 8,75-8,29 (m, 2H), 7,35-7,14 (m, 1H), 6,87-6,65 (m, 1H), 4,65-3,78 (m, 5H), 3,49-3,41 (m, 1H), 2,38-2,19 (m, 1H), 2,09-1,45 (m, 11H).
(1S,4r)-4-((5-Am¡no-2-(((3R,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-il)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)c¡clohexano-1-carboxamida. A una disolución de (1S,4R)-4-((2-(((3R,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida en MeOH (0,1 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv, 10 % de Pd/C) bajo una atmósfera de nitrógeno. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con hidrógeno varias veces. La mezcla de reacción se agitó bajo globo de hidrógeno durante 16 h a temperatura ambiente. La reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con MeOH. El filtrado se concentró a vacío proporcionando (1S,4r)-4-((5-amino-2-(((3R,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1 -carboxamida como un sólido de color morado (88 %). MS (ESI)m/z= 353,1 [M+H]+.
(1S,4s)-4-(2-(((3S,4R)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-8-((2,4,6-triclorofen¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-il)ciclohexano-1-carboxamida A una disolución de (1S,4r)-4-((5-amino-2-(((3R,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) en DMF anhidra (0,2 M) se añadió 1,3,5-tricloro-2-isotiocianatobenceno (1 equiv.). La reacción se agitó durante 90 min a temperatura ambiente. A continuación, se añadió DIC (1 equiv.) y la agitación continuó a temperatura ambiente durante la noche. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1 S,4s)-4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida. 1H RMN (400 MHz, DMSO-afe) 5 ppm: 10,29 (s, 1H), 8,10-7,56 (m, 2H), 7,33-7,17 (m, 1H), 6,95-6,62 (m, 1H), 4,64-4,29 (m, 2H), 4,18 (s, 1H), 4,00 (s, 1H), 3,79 (d,J=9,40 Hz, 1H), 3,60 (s, 1H), 3,48-3,42 (m, 1H), 2,68 (t,J=12,42 Hz, 2H), 2,45-2,33 (m, 1H), 2,22 (s, 2H), 2,00 (d,J= 11,92 Hz, 1H), 1,76-1,37 (m, 5H). MS (ESI)m/z= 556,5 [M+H]+.
Ejemplo 33. (1S,4s)-4-(8-((2,4-Dicloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-il)am¡no)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida
(1S,4s)-4-(8-((2,4-Dicloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida. A una mezcla de (1S,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) en DMF (0,2 M) se añadió 1,5-dicloro-3-fluoro-2-isotiocianatobenceno (1,1 equiv., preparada como se describe en el presente documento). La mezcla se agitó a temperatura ambiente y se añadió DIC (2 equiv.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1S,4s)-4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (34 %). 1H RMN (400 MHz,<d>M<s>O-<o>6) 5 ppm: 10,37 (s, 1H), 7,66 - 7,45 (m, 2H), 7,44 - 7,18 (m, 2H), 6,90 - 6,68 (m, 2H), 4,62 - 4,44 (m, 1H) 4,43 - 4,33 (m, 1H) 4,19 (s, 1H) 4,05 - 3,96 (m, 1H) 3,80-3,65 (m, 1H) 3,64-3,58 (m, 1H) 3,44-3,38 (m, 1H) 2,77 - 2,60 (m, 2H) 2,46-2,40 (m, 1H), 2,24 2,18 (m, 2H) 2,05-1,97 (m, 1H) 1,71 - 1,42 (m, 5H). MS (ESI)m/z= 540,1 [M+H]+.
Ejemplo 34. (1S,4s)-4-(8-((2-Cloro-4,6-difluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-purin-9-il)-1 -metilciclohexano-1 -carboxamida
(1S,4s)-4-(8-((2-Cloro-4,6-d¡fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-il)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-metilciclohexano-1-carboxamida. A una mezcla de (1S,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv., preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,24 M) se añadió 1-cloro-3,5-difluoro-2-isotiocianatobenceno (1 equiv.) en una porción. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Se añadió DIC (2 equiv.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h, y la agitación continuó a 30 °C durante 14 h. Las condiciones de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1S,4s)-4-(8-((2-cloro-4,6-difluorofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (36 %) como un sólido blanco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-ds) 5 ppm: 8,55-10,38 (m, 1,0H) 7,55-8,21 (m, 0,9H) 7,40-7,51 (m, 0,8H) 7,24-7,40 (m, 1,6H) 7,20 (s a., 0,6H) 6,81 (d,J= 8,2 Hz, 1,0H) 6,60-6,78 (m, 1,0H), 4,44-4,62 (m, 1,0H) 4,33-4,44 (m, 1,0H) 4,11-4,28 (m, 1,0H) 3,93-4,06 (m, 1,0H) 3,74-3,86 (m, 1,0H) 3,52-3,70 (m, 1,0H) 3,38-3,50 (m, 1,0H) 2,58-2,86 (m, 2,1H) 2,36-2,48 (m, 1,2H) 2,15-2,31 (m, 2,0H) 1,93-2,10 (m, 1,0H) 1,39-1,77 (m, 5,1 H). MS (ESI) m/z = 524,2 [M+H]+.
Ejemplo 35. (1R,4s)-4-(8-((2,4-Dicloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-il)am¡no)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida
(1R,4s)-4-((2-(((3S,4S)-3-Fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)amino)-5-n¡trop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)c¡clohexano-1-carboxamida. A una disolución de (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF anhidra (0,3 M) se añadieron clorhidrato de (3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina (preparada como se describe en el presente documento) (1,1 equiv.) y DIEA (3 equiv.). El precipitado sólido formado se recogió por filtración dando (1 R,4s)-4-((2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (100 %). MS (ESI)m/z= 383,1 [M+H]+.
(1R,4s)-4-((5-Am¡no-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-il)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)c¡clohexano-1-carboxamida. A una disolución de (1R,4s)-4-((2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) en MeOH (0,18 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv., 10 % de Pd en peso) bajo una atmósfera de nitrógeno. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con hidrógeno varias veces. La mezcla de reacción se agitó bajo globo de hidrógeno durante 3 h a temperatura ambiente. La reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con MeOH. El filtrado se concentró a vacío proporcionando (1R,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida como un sólido de color morado (100 %).
(1R,4s)-4-(8-((2,4-Dicloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida. A una disolución de (1R,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) en DMF anhidra (0,2 M) se añadió 1,5-dicloro-3-fluoro-2-isotiocianatobenceno (preparada como se describe en el presente documento) (1 equiv.). La reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. Se añadió DIC (1 equiv.) y la agitación continuó durante 18 h a temperatura ambiente. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1 R,4s)-4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida (21 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm: 10,34 (s, 1H), 7,78-7,63 (m, 2H), 7,25 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 6,56 (s, 1H), 4,81-4,64 (m, 1H), 4,40 (s, 1H), 4,10-3,87(m, 4H), 3,90-3,52 (m, 1H), 2,70-2,58 (m, 2H), 2,45 (s, 1H), 2,18 (s, 2H), 1,92-1,88(m, 1H), 1,63-1,56 (m, 5H). MS (ESI) miz=540,2 [M+1]+.
Ejemplo 36. (1R,4s)-4-(8-((2,4-D¡cloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-purin-9-il)-1 -met¡lc¡clohexano-1 -carboxam¡da
(1R,4s)-4-((2-(((3S,4S)-3-Fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-n¡trop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1-met¡lc¡clohexanocarboxam¡da. A una mezcla de (1s,4s)-4-((2-cloro-5-n¡trop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1-met¡lc¡clohexano-1-carboxamida (1 equ¡v., preparada como se descr¡be en el presente documento) y clorhidrato de (3S,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-am¡na (1,1 equ¡v., preparada como se descr¡be en el presente documento) en DMF (0,3 M) se añad¡ó DIEA (3 equ¡v.) en una porc¡ón a 20 °C bajo N2. La mezcla se ag¡tó a 20 °C durante 18 h. La mezcla se d¡luyó con acetato de et¡lo, la fase orgán¡ca se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SÜ4, se f¡ltró y se concentró. El res¡duo se recr¡stal¡zó en acetato de et¡lo proporc¡onando (1 R,4s)-4-((2-(((3S,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-n¡trop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1-met¡lc¡clohexanocarboxam¡da (95 %). 1H r Mn (400 MHz, DMSO-afe) 5 ppm: 8,87 (s, 1H), 8,48 - 8,22 (m, 1H), 8,12 (t, J=8,4 Hz, 1H), 7,16 (s, 1H), 6,83 (s, 1H), 4,89 - 4,59 (m, 1H), 4,34 - 3,82 (m, 4H), 3,64 - 3,44 (m, 2H), 2,23 - 2,08 (m, 2H), 2,04 - 1,91 (m, 1H), 1,89 - 1,75 (m, 2H), 1,70 - 1,57 (m, 1H), 1,50 - 1,32 (m, 2H), 1,28 - 1,12 (m, 2H), 1,07 (s, 3H).
(1R,4s)-4-((5-Am¡no-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1-met¡lc¡clohexanocarboxam¡da. A una d¡soluc¡ón de (1 R,4s)-4-((2-(((3S,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-n¡trop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1-met¡lc¡clohexanocarboxam¡da (1 equ¡v.) en MeOH (0,13 M) se añad¡ó PdiC (0,1 equ¡v, 10 % de Pd en peso) bajo N2. La suspens¡ón se desgas¡f¡có a vacío y se purgó con H2 var¡as veces. La mezcla se ag¡tó bajo H2 (138 kPa (20 ps¡)) a 20 °C durante 3 h. La mezcla de reacc¡ón se f¡ltró y el f¡ltrado se concentró dando (1 R,4s)-4-((5-am¡no-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1-met¡lc¡clohexanocarboxam¡da (98 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-afe) 5 ppm: 7,33 (s, 1H), 4,77 - 4,61 (m, 1H), 4,15 - 3,95 (m, 3H), 3,95 - 3,85 (m, 1H), 3,54 (s, 2H), 2,28 - 2,18 (m, 2H), 2,01 - 1,75 (m, 4H), 1,49 - 1,27 (m, 4H), 1,19 (s, 3H).
(1R,4s)-4-(8-((2,4-d¡cloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-met¡lc¡clohexano-1-carboxam¡da. A una d¡soluc¡ón de (1R,4s)-4-((5-am¡no-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1-met¡lc¡clohexanocarboxam¡da (1 equ¡v.) en DMF anhidra (0,25 M) se añad¡ó 1,5-d¡cloro-3-fluoro-2-¡sot¡oc¡anatobenceno (preparada como se descr¡be en el presente documento) (1,1 equ¡v.) y la mezcla se ag¡tó a 20 °C durante 90 m¡n. Se añad¡ó DIC (2 equ¡v.) y la ag¡tac¡ón cont¡nuó a 20 °C durante 18 h. Los métodos de procesamiento y de pur¡f¡cac¡ón estándar proporc¡onaron (lR,4s)-4-(8-((2,4-d¡cloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-met¡lc¡clohexanocarboxam¡da (41 %). 1H R<m>N (500 MHz, Metanold4) 5 ppm: 8,06 (s, 1H), 7,64 - 7,18 (m, 2H), 4,84 - 4,65 (m, 1H), 4,59 - 4,33 (m, 1H), 4,29 - 3,99 (m, 3H), 3,98 - 3,72 (m, 2H), 2,89 - 2,59 (m, 2H), 2,46 - 2,33 (m, 2H), 2,04 - 1,91 (m, 1H), 1,91 - 1,76 (m, 3H), 1,52 - 1,38 (m, 2H), 1,26 (s, 3H). MS (ESI)miz =554,1 [M+1]+.
Ejemplo 37. (1R,4s)-4-(2-(((3S,4S)-3-Fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-8-((2,4,6-tr¡clorofen¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1 -carboxam¡da
(1R,4s)-4-(2-(((3S,4S)-3-Fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-8-((2,4,6-triclorofen¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-il)ciclohexano-1-carboxamida. A una disolución de cis-4-((5-amino-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF anhidra (0,2 M) se añadió 1,3,5-tricloro-2-isotiocianatobenceno (1 equiv.). La reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. Se añadió DIC (1 equiv.) y la agitación continuó durante 18 h a temperatura ambiente. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron cis-4-(2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (21 %). 1H r Mn (400 MHz, DMSO-afe) 5 ppm: 10,34 (s, 1H), 7,78-7,63 (m, 2H), 7,25 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 6,56 (s, 1H), 4,81-4,64 (m, 1H), 4,40 (s, 1H), 4,10-3,87(m, 4H), 3,90 3,52 (m, 1H), 2,70-2,58 (m, 2H), 2,45 (s, 1H), 2,18 (s, 2H), 1,92-1,88(m, 1H), 1,63-1,56 (m, 5H). MS (ESI)m/z= 557,2 [M+1]+.
Ejemplo 38. (1s,4s)-4-(8-((2,6-dicloro-4-c¡anofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-il)ciclohexano-1 -carboxamida
3,5-Dicloro-4-isotiocianatobenzonitrilo. A una disolución enfriada (0 °C) de 4-amino-3,5-diclorobenzonitrilo (1 equiv.) en DCM anhidro (0,5 M) se añadió DIEA (3 equiv.) en una porción. Se añadió SCCl2 (3 equiv.) gota a gota durante 20 min. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 5 h a 0 °C. El disolvente se evaporó dando un sólido marrón, que se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (petróleo/acetato de etilo = 25/1) dando 3,5-dicloro-4-isotiocianatobenzonitrilo como un sólido amarillo claro (75 %).
(1s,4s)-4-(8-((2,6-D¡cloro-4-c¡anofenil)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxamida. A una disolución de 3,5-dicloro-4-isotiocianatobenzonitrilo (1 equiv.) en DMF anhidra (0,3 M) se añadió cis-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento). Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. Se añadió DIC (1 equiv.) en una porción. La mezcla de reacción se agitó durante 16 h a temperatura ambiente. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1 s,4s)-4-(8-((2,6-dicloro-4-cianofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida (18 %). 1H<r>MN (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 7,85-7,59 (m, 2 H), 7,47 (s, 1 H), 4,61- 4,42 (m, 1 H), 4,00 (d, J = 11,29 Hz, 3 H), 3,68 (t, J = 10,85 Hz, 2 H), 2,85 (d, J = 10,79 Hz, 2 H), 2,65 (s, 1 H), 2,34 (d, J = 14,31 Hz, 2 H), 2,08-1,93 (m, 2 H), 1,80-1,68 (m, 4 H), 1,65-1,49 (m, 2 H). MS (ESI)m/z529,1 [M]+.
Ejemplo de referencia 39. (1R,4s)-4-(8-((2,6-D¡cloro-4-c¡anofen¡l)amino)-2-(((S)-1-h¡drox¡propan-2-¡l)am¡no)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida
(1R,4s)-4-((2-(((S)-1-h¡drox¡propan-2-¡l)am¡no)-5-nitrop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)c¡clohexano-1-carboxam¡da. A una mezcla de (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,3 M) se añadió (S)-2-aminopropan-1-ol (1 equiv.), DIEA (1 equiv.) a 25 °C. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 12 h. La mezcla se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. Los disolventes orgánicos se concentraron dando el producto en bruto. El sólido se purificó por cromatografía en columna dando (1 R,4s)-4-((2-(((S)-1 -hidroxipropan-2-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1 -carboxamida (69 %) como un sólido marrón. MS (ESI)m/z= 339,1 [M+H]+.
(1R,4s)-4-((5-Amino-2-(((S)-1-hidroxipropan-2-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida. A una mezcla de (1R,4s)-4-((2-(((S)-1-hidroxipropan-2-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) en MeOH (0,05 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv., 10% de Pd en peso). La mezcla se agitó bajo globo de H2 a 25 °C durante 12 h. La mezcla se filtró, el disolvente orgánico se concentró dando (1R,4s)-4-((5-amino-2-(((S)-1-hidroxipropan-2-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1 -carboxamida (81 %).
(1R,4s)-4-(8-((2,6-Dicloro-4-cianofenil)amino)-2-(((S)-1-hidroxipropan-2-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida. A una disolución de (1R,4s)-4-((5-amino-2-(((S)-1-hidroxipropan-2-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) en DMF (0,4 M) se añadió 3,5-dicloro-4-isotiocianatobenzonitrilo (1,1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento). La mezcla de reacción se agitó a 30 °C durante 2 h. A la mezcla de reacción se añadió DIC (2 equiv.), y la mezcla se agitó a 30 °C durante 16 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1 R,4s)-4-(8-((2,6-dicloro-4-cianofenil)amino)-2-(((S)-1-hidroxipropan-2-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (31 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 10,49 (s, 1H), 8,01 (s, 2H), 7,67 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,26 (s, 1H), 4,75-4,72 (m, 1H), 4,37-4,35 (m, 1H), 3,82-3,90 (m, 1H), 3,51-3,59 (m, 1H), 3,24-3,10 (m, 1H), 2,63-2,74 (m, 2H), 2,45 (s., 1H), 2,23-2,18 (m, 2H), 1,51-1,66 (m, 4H), 1,14 (d,J= 6,5 Hz, 3H). MS (ESI)m/z= 503,1 [M+H]+.
Ejemplo de referencia 40. (1S,4s)-4-(8-((4-Cloro-2,6-difluorofenil)amino)-2-(((R)-3,3-difluorociclopentil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida
3-Azidociclopentanona. A una mezcla de TMSN3 (5 equiv.) y ácido acético (5 equiv.) en DCM (1 M) se añadió ciclopent-2-enona (1 equiv.) y TEA (0,20 equiv.) en una porción a temperatura ambiente bajo N2. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. A la mezcla se añadió NaHCO3 saturado y la agitación continuó durante 20 min, a continuación, la fase acuosa se extrajo con DCM. La fase orgánica combinada se lavó con salmuera saturada, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró a vacío dando 3-azidociclopentanona como un producto en bruto. El producto en bruto se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación.
(3-Oxociclopentil)carbamato de terc-butilo. A una disolución de 3-azidociclopentanona (1,00 equiv.) en acetato de etilo (1,2 M) se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (1,20 equiv.) y Pd/C (0,1 equiv. 10 % en peso) bajo N2. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con H2 varias veces. La mezcla se agitó bajo H2 (345 kPa (50 psi)) a 15 °C durante 5 h. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía en gel de sílice (29 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 4,68-4,67 (m, 1H), 4,23 (s, 1H), 2,66 (dd,J= 18,45, 7,15 Hz, 1 H), 2,38-2,34 (m, 2 H), 2,25- 2,13 (m, 2 H), 1,85-1,84 (m, 1 H), 1,45 (s, 9 H).
(3,3-Difluorociclopentil)carbamato de terc-butilo. A una mezcla de (3-oxociclopentil)carbamato de terc-butilo (1 equiv.) en DCM (0,2 M) se añadió DAST (5,00 equiv.) en una porción a temperatura ambiente bajo N2. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 h. La mezcla se vertió en agua con hielo (p/p = 1/1) y se agitó durante 20 min. La fase acuosa se extrajo con DCM. La fase orgánica combinada se lavó con salmuera saturada, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró a vacío dando un residuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice proporcionando (3,3-difluorociclopentil)carbamato de terc-butilo (36 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 4,68 (s, 1H), 4,19-4,17 (m, 1H), 2,54 (qd,J= 14,28, 7,97 Hz, 1H), 2,23-2,21 (m, 2H), 2,21- 2,09 (m, 2H), 1,70-1,68 (m, 1H), 1,46 (s, 9H).
Clorhidrato de 3,3-difluorociclopentanamina. La mezcla de (3,3-difluorociclopentil)carbamato de terc-butilo (1 equiv.) en HCl/acetato de etilo (2,00 equiv.) se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. El sólido precipitó. La mezcla se filtró y la torta de filtración se secó a vacío proporcionando clorhidrato de 3,3-difluorociclopentanamina (73%) como un sólido blanco.
(3,3-Difluorociclopentil)carbamato de (R)-bencilo y (3,3-difluorociclopentil)carbamato de (S)-bencilo. A una mezcla de clorhidrato de 3,3-difluorociclopentanamina (1 equiv.) y CbzCl (1,5 equiv.) en DCM (1,3 M) se añadió TEA (3 equiv.) en una porción. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. A la mezcla se añadió agua, la agitación continuó durante 20 min, y la fase acuosa se extrajo con DCM. La fase orgánica combinada se lavó con salmuera saturada, se secó con sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró a vacío dando (3,3-difluorociclopentil)carbamato de bencilo (rendimiento: 62 %) como un sólido blanco. La separación por SFC de la mezcla mediante columna OD-3S_4_5%-40%_3ML: Chiralcel OD-3 100x4,6 mm D.I., 3 pm, fase móvil: iso-propanol (0,05 % de DEA) en CO2 desde 5 % hasta 40 %, caudal: 3 ml/min, longitud de onda: 220 nm) dio (3,3-difluorociclopentil)carbamato de (R)-bencilo y (3,3-difluorociclopentil)carbamato de (S)-bencilo. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 ppm: 57,40-7,33 (m, 5H), 5,14-5,10 (m, 2H), 4,93 (s, 1H), 4,27-4,22 (m, 1H), 2,51 (qd,J= 14,26, 8,28 Hz, 1H), 2,24-2,01(m, 4H) 1,71-1,70 (m, 1H). MS (ESI)m/z= 256,3 [M+H]+.
(R)-3,3-Difluorociclopentanamina. A una disolución de (3,3-difluorociclopentil)carbamato de (R)-bencilo (1 equiv.) en MeOH (0,15 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv., 10% de Pd en peso) bajo N2. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con H2 varias veces. La mezcla se agitó bajo H2 (138 kPa (20 psi)) a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró a vacío dando (R)-3,3-difluorociclopentanamina (57 %) como un aceite amarillo.
1H RMN (400 MHz, DMSO-afe) 5 ppm: 3,37-3,30 (m, 1H), 3,16 (s, 2H), 2,35-2,20 (m, 2H), 1,93-1,89 (m, 3H), 1,46-1,41 (m, 1H).
cis-4-((2-(((R)-3,3-Difluorociclopentil)amino)-5-nitropirim idin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida. A una mezcla de (R)-3,3-difluorociclopentanamina (1,00 equiv.) y cis-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1,50 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,5 M) se añadió DIEA (2 equiv.) en una porción a temperatura ambiente. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla se purificó por HPLC preparativa proporcionando cis-4-((2-(((R)-3,3-difluorociclopentil)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (60 %) como un sólido amarillo. 1H r Mn (400 MHz, c Dc I3) 5 ppm: 9,02-8,96 (m, 1H), 8,69-8,48 (m, 1H), 5,90 (d, J=5,65 Hz, 1H), 5,49 ( s, 2H), 4,45-4,28 (m, 2H), 2,64 (qd,J= 13,85, 8,03 Hz, 1H), 2,29-2,39 (m, 5H), 1,96-1,84 (m, 9H). MS (ESI)m/z= 385,1 [M+H]+.
cis-4-((5-Amino-2-(((R)-3,3-difluorociclopentil)amino)pirim idin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida. A una disolución de cis-4-((2-(((R)-3,3-difluorociclopentil)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1,00 equiv.) en MeOH (0,02 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv., 10% de Pd en peso) bajo N2. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con H2 varias veces. La mezcla se agitó bajo H2 (138 kPa (20 psi)) a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró a vacío dando cis-4-((5-amino-2-(((R)-3,3-difluorociclopentil)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (94%) como un sólido de color violeta. MS (ESI)m/z= 355,2 [M+H]+.
cis-4-(8-((2,4-Dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-(((R)-3,3-difluorociclopentil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida. A una mezcla de cis-4-((5-amino-2-(((R)-3,3-difluorociclopentil)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (1 equiv.) en DMF (0,35 M) se añadió 1,5-dicloro-3-fluoro-2-isotiocianatobenceno (1 equiv., preparada como se describe en el presente documento). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. A la mezcla se añadió DIC (2 equiv.), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. El procesamiento y purificación estándar proporcionó cis-4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-(((R)-3,3-difluorociclopentil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (30 %). 1H Rm N (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 8,01 (s, 1H), 7,62-7,24 (m, 2H), 4,54-4,52(m, 2H), 2,89-2,65 (m, 2H), 2,71-2,62 (m, 2H), 2,35-2,24 (m, 5H), 2,11-2. 04 (m, 1H), 1,81-1,74(m, 5H). MS (ESI)m/z= 542,1 [M+H]+.
Ejemplo 41. (1 S,4s)-4-(8-((2,6-Dicloro-4-cianofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida
3-Metiltetrahidropiran-4-ona. A una disolución enfriada (0 °C) de DIA (1,1 equiv.) en THF anhidro (0,6 M) se añadió n-BuLi (1,2 equiv., 2,5 M en hexano) gota a gota durante 40 min. Después de la adición, la mezcla se agitó durante 30 min a 0 °C y a continuación se enfrió hasta -78 °C. Se añadió una disolución de tetrahidropiran-4-ona (1 equiv.) y HMPA (1 equiv.) en THF (6 M) gota a gota durante 2 h. Se añadió yoduro de metilo (3 equiv.) gota a gota a -78 °C. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, a continuación se enfrió rápidamente mediante la adición de ácido cítrico y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica combinada se secó sobre Na2SO4 y se concentró a vacío. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice dando 3-metiltetrahidropiran-4-ona como un aceite amarillo (15%).
1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 4,30-4,23 (m, 1H), 4,22-4,15 (m, 1H), 3,73 (dt,J= 3,1, 11,5 Hz, 1H), 3,34 (t,J= 10,9 Hz, 1H), 2,74 - 2,61 (m, 2H), 2,41 (td,J= 2,7, 14,1 Hz, 1H), 1,01 (d,J= 6,7 Hz, 3H).
trans-N-Bencil-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina 4 trans y cis-N-bencil-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina. A una mezcla de 3-metiltetrahidropiran-4-ona (1,1 equiv.) y fenilmetanamina (1 equiv.) en MeOH (0,9 M) se añadieron ácido acético (1 equiv.) y NaBHaCN (1,5 equiv.) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El disolvente se retiró a vacío y se repartió entre DCM y carbonato de potasio acuoso. La fase orgánica separada se secó sobre Na2SO4 y se concentró. El residuo se purificó por HPLC preparativa dando trans-N-bencil-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina (12 %) y cis-N-bencil-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina como un sólido blanco (13 %). trans-1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm: 7,46 - 7,41 (m, 2H), 7,37 (t,J= 7,3 Hz, 2H), 7,33 - 7,27 (m, 1H), 4,03- 4,0 (m, 2H), 3,86 (dd,J= 4,6, 11,5 Hz, 1H), 3,82 - 3,78 (m, 1H), 3,38 (dt,J= 2,2, 11,8 Hz, 1H), 3,01 (t,J= 11,0 Hz, 1H), 2,40 (dt,J= 4,1, 10,3 Hz, 1H), 2,01 (tdd,J= 2,1,4,2, 13,0 Hz, 1H), 1,82 - 1,67 (m, 1H), 1,66 - 1,53 (m, 1H), 0,96 (d,J= 6,5 Hz, 3H). cis-1H RMN (400 MHz, MeOH-d4) 5 ppm: 7,40 - 7,31 (m, 4H), 7,29-7,23 (m, 1H), 3,92 (td,J= 3,4, 11,4 Hz, 1H), 3,82-3,74 (m, 2H), 3,72 (dd,J= 2,4, 9,0 Hz, 1H), 3,49 (dd,J= 2,5, 11,4 Hz, 1H), 3,40 (dt,J= 3,0, 11,4 Hz, 1H), 2,85 (td,J= 4,3, 10,8 Hz, 1H), 1,98 (dq,J= 4,0, 6,7 Hz, 1H), 1,75-1,63 (m, 1H), 1,05 (d,J= 7,2 Hz, 3H).
(3R,4S)-N-Bencil-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina y (3S,4R)-N-bencil-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina. Se separó trans-N-bencil-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina 5A trans (2,6 g 12,6 mmoles) por HPLC quiral (columna AD-3S_3_5_40_3ML: Chiralpak AD-3 100x4,6 mm D.I., 3 um, fase móvil: MeOH (0,05 % de DEA) en CO2 desde 5 % hasta 40 %, caudal: 3 ml/min, longitud de onda: 220 nm) proporcionando (3R,4S)-N-bencil-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina como un aceite incoloro y (3S,4R)-N-bencil-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina como un sólido blanco.
Clorhidrato de (3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina. A una disolución de (3S,4R)-N-bencil-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina (1 equiv.) en MeOH anhidro (0,12 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv., 10 % de Pd/C en peso) bajo atmósfera de N2. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con hidrógeno varias veces. La mezcla de reacción se agitó bajo globo de hidrógeno durante 3 h a temperatura ambiente. La reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con MeOH. El filtrado se trató con HCl 4 M/MeOH y se concentró proporcionando clorhidrato de (3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina como un sólido blanco (86 %).
(1S,4s)-4-((2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida. A una disolución de (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento) en DMF anhidra (0,5 M) se añadieron clorhidrato de (3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina (1 equiv.) y DIEA (3 equiv.). La disolución de reacción se diluyó con salmuera. El precipitado sólido formado se recogió por filtración dando (1S,4s)-4-((2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5 -nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (63 %).
(1S,4s)-4-((5-Amino-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida . A una disolución de (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) en MeOH (0,1 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv, 10 % de Pd en peso) bajo una atmósfera de nitrógeno. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con hidrógeno varias veces. La mezcla de reacción se agitó bajo globo de hidrógeno durante 16 h a temperatura ambiente. La reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con MeOH. El filtrado se concentró a vacío proporcionando (1S,4s)-4-((5-Amino-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (82 %). 1H<r>M<n>(400 MHz, CDCla) 5 ppm: 7,51 (s, 1 H), 5,58 5,28 (m, 3 H), 4,38 (d, J=8,92 Hz, 1 H), 4,14 (s, 1 H), 4,02-3,93 (m, 1 H), 3,89 (dd,J= 11,54, 4,38 Hz, 1 H), 3,69-3,56 (m, 1 H), 3,55-3,42 (m, 1 H), 3,12 (t,J= 11,12 Hz, 1 H), 2,48 (s, 2 H), 2,33 (td,J= 8,30, 3,94 Hz, 1 H), 2,12-2,00 (m, 1 H), 1,94-1,70 (m, 8 H), 1,45 (qd,J= 12,02, 4,58 Hz, 1 H), 0,90 (d,J= 6,68 Hz, 3H).
(1S,4s)-4-(8-((2,6-Dicloro-4-cianofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida . A una disolución de (1S,4s)-4-((5-Amino-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) en DMF anhidra (0,17 M) se añadió 3,5-dicloro-4-isotiocianatobenzonitrilo (1 equiv.) (preparada como se describe en el presente documento). La reacción se agitó durante 90 min a temperatura ambiente. A continuación, se añadió DIC (2 equiv.) y la agitación continuó a temperatura ambiente durante la noche. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1S,4s)-4-(8-((2,6-dicloro-4-cianofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida (59 %). 1H RMN (400 MHz, MetanokU) 5 ppm: 7,82 (s, 2H), 7,58 (s, 1 H), 4,63-4,41 (m, 1 H), 3,99 (dd,J= 11,42, 4,02 Hz, 1 H), 3,91 (dd,J= 11,48, 4,32 Hz, 1 H), 3,84-3,61 (m, 2 H), 3,32-3,22 (m, 1 H), 2,86 (d,J= 12,56 Hz, 2 H), 2,66 (s, 1 H), 2,35 (d, J=13,04 Hz, 2 H), 2,07-1,95 (m, 1 H), 1,87-1,65 (m, 5 H), 1,54 (qd, J=12,16, 4,52 Hz, 1 H), 0,93 (d,J= 6,64 Hz, 3 H). MS (ESI)m/z= 544 [M+H]+.
Ejemplo 42. (1S,4s)-1-Metil-4-(2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida
(1S,4s)-1-Met¡l-4-(2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-8-((2,4,6-tr¡clorofen¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-il)ciclohexano-1-carboxilato de et¡lo. A una mezcla de (1S,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (1 equiv., preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,35 M) se añadió 1,3,5-tricloro-2-isotiocianatobenceno (1 equiv.). La mezcla se agitó a 15-20 °C durante 1,5 h. Se añadió DIC (1 equiv.) a la reacción en una porción. La mezcla se agitó a 15-20 °C durante 16 h. La reacción se diluyó con agua, se extrajo con acetato de etilo, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó con cromatografía en columna (petróleo/acetato de etilo=5:1~1:1) dando 1-metil-4-(2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxilato de (1S,4s)-etilo (88 %) como un sólido amarillo.
Ác¡do (1S,4s)-1-met¡l-4-(2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-8-((2,4,6-tr¡clorofen¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxíl¡co . A una disolución de 1-metil-4-(2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxilato de (1S,4s)-etilo (1 equiv.) en MeOH/agua (4/1, 0,1 M) se añadió NaOH (6 equiv.). La reacción se sometió a reflujo durante 30 h. La reacción se concentró, se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase acuosa se acidificó con HCl 3 M a pH = 3-5, se extrajo con DCM, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando ácido (1S,4s)-1-metil-4-(2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxílico. (53 %) como un sólido amarillo. MS (ESI)m/z= 567,1 [M+H]+.
(1S,4s)-1-Met¡l-4-(2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-8-((2,4,6-tr¡clorofen¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1-carboxam¡da. A una mezcla de ácido cis-1-metil-4-(2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxílico (1 equiv.) en<d>M<f>(0,4 M) se añadió HATU (1 equiv.), DIEA (2 equiv.) y NH4Cl (3 equiv.) en una porción a temperatura ambiente. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1S,4s)-1-metil-4-(2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (19 %). 1H RMN (400 MHz, MetanokU) 5 ppm: 7,99 (s, 1H), 7,61-7,48 (m, 2H), 4,51-4,40 (m, 1H), 4,05 - 3,96 (m, 1H), 3,94-3,90 (m, 1H), 3,80 - 3,64 (m, 2H), 3,32 - 3,23 (m, 1H), 2,88 - 2,69 (m, 2H), 2,48 - 2,33 (m, 2H), 2,01-1,98 (m, 1H), 1,84-1,73 (m, 3H), 1,59-1,36 (m, 3H), 1,25 (s, 3H), 0,92 (d, J=6,7 Hz, 3H). MS (ESI)m/z= 566,2 [M+H]+.
Ejemplo 43. (1S,4s)-4-(2-(((3S,4R)-3-Met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-8-((2,4,6-tr¡fluorofen¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexano-1 -carboxam¡da
(1s,4s)-4-(2-(((3S,4R)-3-Met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-8-((2,4,6-tr¡fluorofen¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)c¡clohexanocarboxam¡da. A una mezcla de (1S,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (preparada como se describe en el presente documento) (1 equiv.) en DMF (0,2 M) se añadió 1,3,5-trifluoro-2-isotiocianatobenceno (1,2 equiv.) en una porción. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Se añadió DIC (2 equiv.) y la agitación continuó a temperatura ambiente durante 20 h. La LCMS mostró que la reacción estaba completa. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-trifluorofenil)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (47 %). 1H r Mn (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 8,00 (s, 1H), 7,07 - 6,83 (m, 2H), 4,38 (s, 1H), 4,02 - 3,97 (m, 1H), 3,91 (dd,J= 4,3, 11,5 Hz, 1H), 3,86 - 3,69 (m, 2H), 3,38 - 3,34 (m, 1H), 2,92 (d,J= 11,4 Hz, 2H), 2,68 (s, 1H), 2,35 (d,J = 12,5 Hz, 2H), 2,02 (s, 1H), 1,86 - 1,69 (m, 5H), 1,60 - 1,48 (m, 1H), 0,93 (d,J =6,5 Hz, 3H). MS (ESI)m/z= 504,4 [M+H]+.
Ejemplo 44. (1S,4s)-4-(8-((4-Cloro-2,6-d¡fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-metiltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida
(1S,4s)-4-(8-((4-Cloro-2,6-d¡fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-il)ciclohexanocarboxamida. A una mezcla de (1S,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (preparada como se describe en el presente documento (1 equiv.) en DMF (0,09 M) se añadió 5-doro-1,3-difluoro-2-isotiocianatobenceno (preparada como se describe en el presente documento) (1,2 equiv.) en una porción. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 8 h. Se añadió DIC (2 equiv.) y la agitación continuó a temperatura ambiente durante 20 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1S,4s)-4-(8-((4-cloro-2,6-difluorofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexanocarboxamida (44 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 8,02 (s, 1H), 7,29 - 7,06 (m, 2H), 4,58 - 4,33 (m, 1H), 3,99 (d,J= 7,9 Hz, 1H), 3,91 (dd,J= 4,3, 11,5 Hz, 1H), 3,85 - 3,69 (m, 2H), 3,37 (s, 1H), 2,90 (s, 2H), 2,68 (s, 1H), 2,35 (d,J= 12,5 Hz, 2H), 2,03 (d,J= 12,8 Hz, 1H), 1,77 (d,J= 11,8 Hz, 5H), 1,60 - 1,48 (m, 1H), 0,93 (d,J= 6,7 Hz, 3H). MS (ESI)m/z= 520,3 [M+H]+.
Ejemplo 45. (1S,4s)-4-(8-((2,4-Dicloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida
(1S,4s)-4-(8-((2,4-D¡cloro-6-fluorofenil)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-il)ciclohexano-1-carboxamida. A una disolución (1S,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexanocarboxamida (preparada como se describe en el presente documento (1 equiv.) en DMF anhidra (0,2 M) se añadió 1,5-dicloro-3-fluoro-2-isotiocianatobenceno (1 equiv., preparada como se describe en el presente documento). La reacción se agitó durante 90 min a temperatura ambiente. Se añadió DIC (2 equiv.) y la agitación continuó a temperatura ambiente durante la noche. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1S,4s)-4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)ciclohexano-1-carboxamida (40 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol<U) 5 ppm: 8,00 (s, 1 H), 7,63-7,20 (m, 2 H), 4,45 (s, 1 H), 3,99 (dd,J= 11,36, 4,08 Hz, 1 H), 3,91 (dd,J= 11,48, 4,32 Hz, 1 H), 3,86-3,66 (m, 2 H), 3,32-3,25 (s, 1 H), 3,01 -2,77 (s, 2 H), 2,67 (s, 1 H), 2,35 (d,J= 13,04 Hz, 2 H), 2,02 (d,J= 12,80 Hz, 1 H), 1,88-1,64 (m, 5 H), 1,62-1,44 (m, 1 H), 0,93 (d,J= 6,64 Hz, 3 H). MS (ESI)m/z= 536,2 [M+H]+.
Ejemplo 46. (1s,4s)-4-(8-((4-Cloro-2,6-difluorofen¡l)am¡no)-2-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-metilciclohexano-1 -carboxamida
1.4- Dioxaesp¡ro[4.5]decano-8-carbon¡trilo. A una disolución a -10 °C de 1,4 dioxaespiro[4.5]decan-8-ona (1 equiv.), etanol (1,78 equiv.) e isocianuro de toluenosulfonilmetilo (1,3 equiv.) en DME (0,3 M) se añadió 2-metilpropan-2-olato de potasio (2,3 equiv.) en porciones. La reacción se agitó a -10 °C durante 1 h, y 15 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró dando un sólido beis, se disolvió en agua y se extrajo con éter. Los extractos combinados se lavaron con salmuera y se secaron. La concentración a presión reducida dio un aceite naranja. Este material se purificó mediante destilación [(103 °C (baño de aceite 150 °C) a aproximadamente 2-3 mbares] dando 1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-ona como un aceite incoloro (rendimiento del 87 %). 1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm: 3,88-4,02 (m, 4 H), 2,56-2,74 (m, 1 H), 1,79-2,05 (m, 6 H), 1,50-1,71 (m, 2H).
Metil-4-oxo-ciclohexanocarbonitrilo. A una disolución a 0 °C de 1,4-dioxaespiro[4.5]decano-8-carbonitrilo (1 equiv.) en THF (0,5 M) se añadió bis(trimetilsilil)amida de litio 1 M en THF (1,25 equiv.) gota a gota. La disolución resultante se agitó durante 1 h a 0 °C antes de añadir yodometano (1,5 eq). Después de 1 h de agitación a 0 °C, la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 h. La mezcla de reacción se inactivó con cloruro de amonio acuoso saturado y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinaron y se lavaron con cloruro sódico acuoso saturado. La fase orgánica se secó sobre MgSO4 anhidro, se filtró y se concentró. El producto en bruto se agitó con ácido clorhídrico (2 equiv.) en acetona (0,3 M) a 25 °C durante 5 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C y el pH se ajustó a 8 con hidróxido sódico 3 N. La mezcla se extrajo con éter. Las porciones orgánicas se combinaron, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice proporcionando 1-metil-4-oxociclohexanocarbonitrilo como un sólido blanco (rendimiento del 56 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 2,41-2,48 (m, 2H), 2,23-2,34 (m, 2H), 2,09-2,23 (m, 2H), 1,86 (td,J= 13,18, 4,49 Hz, 2H), 1,37-1,47 (m, 3H). MS (ESI)m/z= 138,3 [M+H]+.
(Is^sH ^B enc ilam inoH -m etilc ic lohexanoca rbon itrilo . A una disolución de 1-metil-4-oxociclohexanocarbonitrilo (1 equiv.) en MeOH (0,5 M) se añadió fenilmetanamina (3 equiv.). La disolución resultante se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La disolución se enfrió hasta -78 °C y se añadió borohidruro de litio (2 M en THF, 1,1 equiv.) gota a gota. Se dejó que la disolución se calentara lentamente hasta temperatura ambiente durante la noche. Después de 12 h, la mezcla de reacción se inactivó con bicarbonato sódico acuoso saturado y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se combinó y se lavó con bicarbonato sódico acuoso saturado. La fase orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó proporcionando el compuesto del título ((1s,4s)-4-(bencilamino)-1-metilciclohexanocarbonitrilo como un sólido blanco (cis:trans 8:1). 1H RMN (400 MHz, CHCh) 5 ppm: 7,29-7,40 (m, 4 H), 7,23-7,28 (m, 1 H), 3,83 (s, 2 H), 2,46 (tt,J= 10,98, 3,66 Hz, 1 H), 1,95-2,06 (m, 4 H), 1,45-1,58 (m, 2 H), 1,23-1,40 (m, 5 H). MS (ESI)m/z= 229,2 [M+H]+.
(Is^sH ^B encilam inoH -m etilc ic lohexano-l-ca rboxam ida . A una disolución de (1s,4s)-4-(bencilamino)-1-metilciclohexanocarbonitrilo (1 equiv.) en 1,4-dioxano (4,75 M) se añadió ácido sulfúrico 95-98 % (5 equiv.). La reacción se agitó a 100 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se enfrió rápidamente con bicarbonato sódico acuoso saturado y se ajustó hasta pH 8 con carbonato sódico. La disolución se extrajo con DCM/MeOH. Las fases orgánicas se combinaron, y se lavaron con bicarbonato sódico acuoso saturado. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice proporcionando una mezcla 8/1 de diastereómeros de (1s,4s)-4-(bencilamino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida como un sólido blanco (rendimiento del 83 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 7,25-7,35 (m, 4 H), 7,14-7,24 (m, 1 H), 7,08 (s, 1 H), 6,77 (s, 1 H), 3,69 (s, 2 H), 2,24-2,35 (m, 1 H), 2,07 (d,J= 12,50 Hz, 2 H), 1,63-1,75 (m, 2 H), 0,92-1,17 (m, 7 H). MS (ESI)m/z= 247,2 [M+H]+.
(Is^sH -A m ino-l-m etilc ic lohexano-l-carboxam ida . A una disolución de (1s,4s)-4-(bencilamino)-1-metilciclohexanocarboxamida (1 equiv.) en MeOH (0,5 M) se añadió Pd/C (0,015 equiv, 10 % en peso). La disolución se agitó bajo hidrógeno (1 atm) a temperatura ambiente durante 15 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y se concentró proporcionando (1s,4s)-4-amino-1-metilciclohexano-1-carboxamida como un sólido blanco (100 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm: 7,07 (s a., 1 H), 6,75 (s a., 1 H), 2,38-2,48 (m, 1 H), 1,97-2,13 (m, 2 H), 1,45-1,60 (m, 2 H), 0,96-1,11 (m, 7 H). MS (ESI)m/z= 157,2 [M+H]+.
( I s ^ s H -^ -C lo ro ^ -n itro p ir im id in ^ - iOaminoH -metilciclohexano-l-carboxam ida. A una disolución -78 °C de (1 s,4s)-4-amino-1 -metilciclohexanocarboxamida (1 equiv), DIEA (1,5 equiv.) en DCM (0,5 M) se añadió la suspensión de 2.4- dicloro-5-nitropirimidina (1,0 equiv.) en THF (1,5 M) gota a gota. La reacción se agitó a -78 °C durante 1 h, y se dejó que se calentara hasta temperatura ambiente durante 2 h. La reacción se agitó durante otra hora a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice. El sólido resultante se trituró varias veces en acetato de etilo proporcionando (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida como un sólido amarillo (rendimiento del 65 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 8,54 (d,J= 8,20 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 6,86 (s, 1 H), 3,98-4,15 (m, 1 H), 2,16 (d,J= 13,28 Hz, 2 H), 1,73 (dd,J= 12,69, 3,32 Hz, 2 H), 1,50-1,65 (m, 2 H), 1,16-1,28 (m, 2 H), 1,06 (s, 3 H). MS (ESI)m/z= 314,0 [M+H]+.
(1s,4s)-1-Metil-4-((5-nitro-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida. Se suspendieron (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) y clorhidrato de tetrahidro-2H-piran-4-amina (1 equiv.) en THF (0,06 M) a temperatura ambiente. Se añadió DIEA (4 equiv.) y la reacción se agitó a 50 °C durante la noche. El volumen de la mezcla de reacción se redujo a vacío y se usó directamente en la siguiente etapa.
(1s,4s)-4-((5-Amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida. A una disolución de MeOH (0,05 M) de (1s,4s)-1 -metil-4-((5-nitro-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) se añadió Pd/C (0,1 equiv, 10 % de Pd en peso). La reacción se agitó bajo 1 atm de H2 durante la noche. La reacción se filtró a través de Celite y el filtrado se redujo a vacío proporcionando (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexanocarboxamida (rendimiento del 91 %). MS (ESI)m/z= 349,3[M+1]+.
(1s,4s)-4-(8-((4-Cloro-2,6-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxamida. A una disolución de (1s,4s)-4-((5-amino-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexanocarboxamida (1 equiv.) de DMF (0,15 M) se añadió 5-cloro-1,3-difluoro-2-isotiocianatobenceno (preparada como se describe en el presente documento) (1,09 equiv.) dando una disolución amarilla. La disolución se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. A la mezcla de reacción se añadió EDC (1,09 equiv.) y la mezcla se calentó a 50 °C durante 1,5 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1s,4s)-4-(8-((4-cloro-2,6-difluorofenil)amino)-2-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexanocarboxamida (38 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm: 7,59 (s, 1 H) 7,43 (d,J= 7,81 Hz, 1 H) 7,21-7,30 (m, 1 H) 7,10-7,21 (m, 1 H) 6,67 (d,J= 8,20 Hz, 1 H) 6,49 (d,J= 7,03 Hz, 1 H) 4,17-4,44 (m, 1 H) 3,71-3,86 (m, 3 H) 3,42-3,62 (m, 2 H) 2,49-2,67 (m, 1 H) 2,26 (t,J= 12,89 Hz, 2 H) 1,72-1,88 (m, 2 H) 1,61 (d,J= 10,54 Hz, 1 H) 1,54 (d,J= 10,54 Hz, 1 H) 1,33-1,47 (m, 2 H) 1,11-1,27 (m, 2 H) 0,95-1,09 (m, 3 H). MS (ESI)m/z= 520,2 [M]+.
Ejemplo de referencia 47. (1R,4s)-4-(2-(((S)-1-Hidroxipropan-2-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)-1 -metilciclohexano-1 -carboxamida
(1R,4s)-4-((2-(((S)-1-Hidroxipropan-2-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida. Se suspendieron (1s,4s)-4-((2-Cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) y (S)-2-aminopropan-1 -ol (1,03 equiv.) en THF (0,3 M) y se añadió DIEA (4 equiv.). La reacción se agitó a 50 °C durante la noche. La mezcla de reacción se concentró y se usó sin más purificación.
(1R,4s)-4-((5-amino-2-(((S)-1-hidroxipropan-2-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida. A una disolución de (1 R,4s)-4-((2-(((S)-1 -hidroxipropan-2-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1 -metilciclohexano-1 -carboxamida (1 equiv.) en MeOH (0,1 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv., 10 % de Pd en peso) y la reacción se purgó a vacío seguido por H2. La reacción se agitó a temperatura ambiente bajo H2. La reacción se filtró a través de Celite y se concentró proporcionando (1 R,4s)-4-((5-amino-2-(((S)-1 -hidroxipropan-2-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1 - metilciclohexano-1 -carboxamida (99 %). MS (ESI)m/z= 323,4[M+1]+.
(1R,4s)-4-(2-(((S)-1-Hidroxipropan-2-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxamida. Se agitaron (1 R,4s)-4-((5-Amino-2-(((S)-1 -hidroxipropan-2-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1 -metilciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) y 1,3,5-tricloro-2-isotiocianatobenceno (1,1 equiv.) en DMF (0,15 M) a temperatura ambiente durante 1 h. A esta reacción, se añadió EDC (2 equiv.) y la mezcla se calentó hasta 50 °C durante 1,5 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1R,4s)-4-(2-(((S)-1-hidroxipropan-2-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (28 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm: 7,51-7,64 (m, 2 H), 7,25 (s a, 1 H), 6,81 (s, 1 H), 6,12 (d,J= 6,31 Hz, 1 H), 4,70 (t,J= 5,99 Hz, 1 H), 4,39 (t,J =3,94 Hz, 1 H), 3,77-3,93 (m, 1 H), 3,42-3,57 (m, 1 H), 3,21-3,30 (m, 1 H), 2,58-2,73 (m, 3 H), 2,29 (t,J =10,56 Hz, 1 H), 1,63 (s a., 1 H), 1,20-1,35 (m, 2 H), 1,11-1,19 (m, 2 H), 1,09 (s, 2 H). MS (ESI)m/z= 527 [M+H]+.
Ejemplo de referencia 48. (1R,4s)-4-(8-((2,4-D¡cloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-(((S)-1-h¡drox¡propan-2-¡l)am¡no)-9H-purin-9-il)-1 -met¡lc¡clohexano-1 -carboxam¡da
(1R,4s)-4-(8-((2,4-D¡cloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-(((S)-1-h¡drox¡propan-2-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-met¡lc¡clohexano-1-carboxam¡da. ((1 R,4s)-4-((5-Amino-2-(((S)-1-hidroxipropan-2-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (1 equiv., preparada como se desvela en el presente documento) y 1,5-dicloro-3-fluoro-2-isotiocianatobenceno (preparada como se describe en el presente documento) (1,1 equiv.) se agitaron en DMF (0,15 M) durante 1 h. Se añadió EDC (2 equiv.) a la mezcla de reacción y la agitación continuó a 50 °C durante 1,5 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1R,4s)-4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-(((S)-1-hidroxipropan-2-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (22 %). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 7,52 - 7,64 (m, 1 H) 7,36 - 7,49 (m, 1 H) 7,26 (s a., 1 H) 6,74 - 6,93 (m, 1 H) 6,12 (s a., 1 H) 4,67 - 4,81 (m, 1 H) 4,28 -4,49 (m, 1 H) 3,86 (dt,J= 12,53, 6,50 Hz, 1 H) 3,45 - 3,63 (m, 1 H) 3,21 - 3,28 (m, 1 H) 2,72 (d,J= 17,65 Hz, 1 H) 2,56 -2,69 (m, 2 H) 2,18 - 2,33 (m, 1 H) 1,60 (s a., 2 H) 1,19 - 1,32 (m, 2 H) 1,07 - 1,19 (m, 4 H). MS (ESI)m/z= 510,2 [M+H]+.
Ejemplo de referenc¡a 49. (1R,4s)-4-(8-((2,6-D¡cloro-4-c¡anofen¡l)am¡no)-2-(((S)-1-h¡drox¡propan-2-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1 -met¡lc¡clohexano-1 -carboxam¡da
(1R,4s)-4-(8-((2,6-D¡cloro-4-c¡anofen¡l)am¡no)-2-(((S)-1-h¡drox¡propan-2-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-met¡lc¡clohexano-1-carboxam¡da. Se agitaron ((1 R,4s)-4-((5-Amino-2-(((S)-1-hidroxipropan-2-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (1 equiv., preparada como se desvela en el presente documento) y 3,5-dicloro-4-isotiocianatobenzonitrilo (1,1 equiv.) en DMF (0,15 M). La disolución se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Se añadió EDC (2 equiv.) a la mezcla de reacción, y la reacción se agitó a 50 °C durante 1,5 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1 R,4s)-4-(8-((2,6-dicloro-4-cianofenil)amino)-2-(((S)-1-hidroxipropan-2-il)amino)-9H-purin-9-il)-1 -metilciclohexano-1 -carboxamida (6 %). 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm: 8,01 (s, 1 H) 7,68 (s, 1 H) 7,25 (s a., 1 H) 6,82 (s, 1 H) 6,21 (s a., 1 H) 4,71 (t,J= 5,99 Hz, 1 H) 4,31 - 4,48 (m, 1 H) 3,77 - 3,92 (m, 1 H) 3,53 (dt,J= 10,40, 4,89 Hz, 1 H) 3,20 - 3,30 (m, 1 H) 2,53 - 2,74 (m, 3 H) 2,28 (t,J= 10,56 Hz, 1 H) 1,62 (s a., 1 H) 1,20 - 1,34 (m, 1 H) 1,10 - 1,20 (m, 2 H) 1,09 (s, 2 H). MS (ESI)m/z= 5172 [M+H]+.
Ejemplo 50. (1S,4s)-4-(8-((2,6-D¡cloro-4-c¡anofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1 -met¡lc¡clohexano-1 -carboxam¡da
(1S,4s)-4-((2-(((3S,4R)-3-Fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-n¡trop¡r¡m¡d¡n-4-il)am¡no)-1-met¡lc¡clohexano-1-carboxamida. A una mezcla de (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (1,00 equiv.) y clorhidrato de (3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina (1,02 equiv.) en DMF (0,3 M) se añadió DIEA (2,2 equiv.). La mezcla se agitó a 30 °C durante 16 h. La mezcla se diluyó con H2O y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica combinada se lavó con salmuera saturada, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró a vacío proporcionando (1S,4s)-4-((2-(((3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (rendimiento del 99 %) como un sólido amarillo. El producto en bruto se usó sin más purificación. MS (ESI)m/z= 397,1 [M+H]+.
(1S,4s)-4-((5-Am¡no-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1-met¡lc¡clohexano-1-carboxam¡da. A una disolución de (1S,4s)-4-((2-(((3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (1,0 equiv.) en MeOH (0,25 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv, 10 % de Pd en peso). La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con H2 varias veces. La reacción se agitó bajo un globo de H2 (103,4 kPa (15 psi)) a 30 °C durante 2 h. La mezcla se filtró y se concentró a vacío proporcionando (1 S,4s)-4-((5-amino-2-(((3 S ,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (90 %) como un sólido violeta. El producto en bruto se usó directamente en la siguiente etapa sin más purificación. MS (ESI)m/z= 367,2 [M+H]+.
(1S,4s)-4-(8-((2,6-D¡cloro-4-c¡anofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-met¡lc¡clohexano-1-carboxam¡da. A una disolución de (1S,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (1 equiv.) en DMF (0,14 M) se añadió 3,5-dicloro-4-isotiocianatobenzonitrilo (1,00 equiv) (preparada como se describe en el presente documento). La mezcla se agitó a 30 °C durante 2 h. Se añadió DIC (2 equiv.) y la mezcla se agitó a 30 °C durante 16 h. La mezcla se diluyó con H2O y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera saturada, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a vacío. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1S,4s)-4-(8-((2,6-dicloro-4-cianofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (64 %). 1H R<m>N (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 7,82 (s, 2H), 7,60 (s, 1H), 4,62 - 4,45 (m, 2H), 4,27 - 4,17 (m, 1H), 4,11 - 4,05 (m, 1H), 3,93 - 3,90 (m, 1H), 3,74 - 3,69 (m, 1H), 3,62 - 3,56 (m, 1H), 2,79 - 2,73 (m, 2H), 2,41 - 2,38 (m, 2H), 2,23 - 2,20 (m, 1H), 1,84 - 1,81 (m, 2H), 1,68 - 1,61 (m, 1H), 1,45 - 1,39 (m, 2H), 1,25 (s, 3H). MS (ESI)m/z= 561,1 [M+H]+.
Ejemplo 51. (1 S,4s)-4-(8-((2,4-d¡cloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1 -met¡lc¡clohexano-1 -carboxam¡da
(1S,4s)-1-Met¡l-4-((2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-n¡trop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)c¡clohexano-1-carbox¡lato de et¡lo. A una mezcla de (1 s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1 -metilciclohexano-1 -carboxilato de etilo (1 equiv.) y clorhidrato de (3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina (1,05 equiv.) en DMF (0,4 M) se añadió DIEA (2,3 equiv.) en una porción a temperatura ambiente bajo N2. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La reacción se diluyó con agua, y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron dando (1 S,4s)-1 -metil-4-((2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1-carboxilato de etilo (98 %).<m>S (ESI)m/z422,2 [M+1]+.
(1S,4s)-4-((5-Am¡no-2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1-met¡lc¡clohexano-1-carboxilato de et¡lo. A una disolución de (1S,4s)-1-metil-4-((2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)ciclohexano-1 -carboxilato de etilo (1 equiv.) en MeOH (0,2 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv, 10 % de Pd en peso) bajo N2. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con H2 varias veces. La mezcla se agitó bajo H2 a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite y el filtrado se concentró dando (1 S,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1 -metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (99 %).
(1S,4s)-4-(8-((2,4-D¡cloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-met¡lc¡clohexano-1-carbox¡lato de et¡lo. A una mezcla de (1S,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (1 equiv.) en DMF (0,1 M) se añadió 1,5-dicloro-3-fluoro-2-isotiocianatobenceno (preparada como se describe en el presente documento) (1 equiv.). La mezcla se agitó a 15-20 °C durante 1,5 h. Se añadió DIC (2 equiv.) a la reacción en una porción. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La reacción se diluyó con agua, se extrajo con acetato de etilo, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna dando (1S,4s)-4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (90 %) como un sólido amarillo.
Ác¡do (1S,4s)-4-(8-((2,4-Dd¡cloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-met¡lc¡clohexano-1-carboxíl¡co. A una disolución de (1S,4s)-4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3 -metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (1 equiv.) en MeOH/agua (0,2 M. 4/1) se añadió NaOH (3 equiv.). La reacción se sometió a reflujo durante 48 h. La reacción se concentró, se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase acuosa se acidificó con HCl 3 M a pH= 3-5, se extrajeron con DCM, la fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando ácido (1S,4s)-4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxílico (53 %) como un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, Metanol<U) 5 ppm: 7,70 (s, 1H), 7,47-7,31 (m, 2H), 4,02 - 3,75(m, 4H), 3,42 - 3,37 (m, 1H), 2,27 - 2,61 (m, 1H), 2,45 - 2,41 (m, 2H), 1,98 - 1,91 (m, 3H), 1,85 - 1,81 (m, 1H), 1,70 - 1,60 (m, 1H), 1,51 -1,43(m, 2H), 1,29 (s, 3H), 0,94 (d,J= 8,0 Hz, 3H).
(1S,4s)-4-(8-((2,4-d¡cloro-6-fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-met¡lc¡clohexano-1-carboxam¡da. A una mezcla de ácido (1S,4s)-4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexanocarboxílico (1 equiv.) en DMF (0,19 M) se añadieron HATU (1,1 equiv.), TEA (1,1 equiv.) y NH4Cl (1,1 equiv.) en una porción a temperatura ambiente. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1 S,4s)-4-(8-((2,4-dicloro-6-fluorofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (37 %). 1H RMN (400 MHz, CHCla) 5 ppm: 7,87 (s, 1H), 7,47 - 7,30 (m, 2H), 4,40 - 4,34 (m, 1H), 4,02-3,98 (m, 1H), 3,94-3,90 (m, 1H), 3,76 - 3,70 (m, 2H), 2,80 - 2,67 (m, 2H), 2,46 - 2,34 (m, 2H), 2,03 - 1,95 (m, 1H), 1,88 - 1,78 (m, 2H), 1,77 - 1,70 (m, 1H), 1,61 -1,41 (m, 3H), 1,25 (s, 3H), 0,92 (d,J= 8,0 Hz, 3H). MS (ESI)m/z= 550,2 [M+H]+.
Ejemplo 52. (1R,4s)-4-(8-((2-Cloro-4,6-d¡fluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1 -met¡lc¡clohexano-1 -carboxam¡da
(1R,4s)-4-((2-(((3S,4S)-3-Fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-5-n¡trop¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1-met¡lc¡clohexano-1-carbox¡lato de et¡lo. A una mezcla de (1 s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1 -metilciclohexano-1 -carboxilato de etilo (1 equiv., preparada como se describe en el presente documento) y clorhidrato de (3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina (1,1 equiv., preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,1 M) se añadió DIEA (3 equiv.), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La reacción se diluyó con agua, y se extrajo con acetato de etilo. Los disolventes orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron dando (1 R,4s)-4-((2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (96 %). MS (ESI)m/z= 426,2 [M+H]+.
(1R,4s)-4-((5-Am¡no-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)-1-met¡lc¡clohexano-1-carbox¡lato de et¡lo. A una disolución de (1 R,4s)-4-((2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5 -nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (1 equiv.) en MeOH (0,2 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv., 10 % de Pd en peso) bajo atmósfera de N2. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con H2 varias veces. La reacción se agitó bajo un globo de H2 a temperatura ambiente durante 16 h. La reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite y se concentró dando (1 R,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1 -metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (95 %) como un sólido de color morado. m S (ESI)m/z= 396,2 [M+H]+.
(1R,4s)-4-(8-((2-Cloro-4,6-difluorofenil)amino)-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo. A una disolución de (1R,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1 -metilciclohexano-1 -carboxilato de etilo (1 equiv.) en DMF (0,4 M) se añadió 1 -cloro-3,5-difluoro-2-isotiocianatobenceno (1 equiv.). La disolución se agitó a temperatura ambiente durante 90 min. Se añadió DIC (2 equiv.) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 18 h. La reacción se diluyó con agua, se extrajo con acetato de etilo, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna dando (1 R,4s)-4-(8-((2-cloro-4,6-difluorofenil)amino)-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (86 %) como un sólido amarillo. MS (ESI)m/z= 567,2 [M+H]+.
Ácido (1R,4s)-4-(8-((2-cloro-4,6-difluorofenil)amino)-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxílico. A una disolución de (1 R,4s)-4-(8-((2-cloro-4,6-difluorofenil)amino)-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (1 equiv.) en MeOH/agua (0,1 M, 4/1) se añadió NaOH (5 equiv). La reacción se sometió a reflujo durante 48 h. La reacción se diluyó con agua, y se extrajo con acetato de etilo. La fase acuosa se ajustó con HCl 3 M a pH=3-5, se extrajo con DCM, la fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando ácido (1 R,4s)-4-(8-((2-cloro-4,6-difluorofenil)amino)-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxílico (51 %) como un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, Metanol<U) 5 ppm: 7,86 (s, 1H), 7,39 - 6,92 (m, 2H), 4,84 - 4,71 (m, 1H), 4,58 - 4,43 (m, 1H), 4,41 - 4,25 (m, 1H), 4,20 - 4,13 (m, 1H), 4,06 - 3,77 (m, 3H), 2,74-2,67 (m, 2H), 2,46 - 2,33 (m, 2H), 2,01 - 1,81 (m, 4H), 1,51 -1,44 (m, 2H), 1,30 (s, 3H).
(1R,4s)-4-(8-((2-Cloro-4,6-difluorofenil)amino)-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxamida. A una mezcla de ácido (1 R,4s)-4-(8-((2-cloro-4,6-difluorofenil)amino)-2-(((3 S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxílico (1 equiv.) en DMF (0,1 M) se añadió HATU (1,1 equiv.), TEA (2 equiv.) y NH4Cl (2 equiv.) en una porción a temperatura ambiente. La mezcla se agitó durante 24 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar (1 R,4s)-4-(8-((2-cloro-4,6-difluorofenil)amino)-2-(((3S,4S)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (15 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 7,92 (s, 1H), 7,29 - 7,03 (m, 2H), 4,85 - 4,60 (m, 1H), 4,50 - 4,35 (m, 1H), 4,26-4,11 (m, 2H), 4,07 -3,70 (m, 3H), 2,85 - 2,69 (m, 2H), 2,42-2,38 (m, 2H), 2,04 - 1,91 (m, 1H), 1,86-1,84 (m, 3H), 1,55 - 1,38 (m, 2H), 1,25 (s, 3H). MS (ESI)m/z= 538,2 [M+H]+.
Ejemplo 53. (1S,4s)-4-(2-(((3S,4R)-3-Fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)-1 -metilciclohexano-1 -carboxamida
(1S,4s)-4-((2-(((3S,4R)-3-Fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida. A una mezcla de (1s,4s)-4-((2-cloro-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1 -metilciclohexano-1-carboxamida (1 equiv., preparada como se describe en el presente documento) y clorhidrato de (3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-amina (1,02 equiv, preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,3 M) se añadió DIEA (2,20 equiv.), y la mezcla se agitó a 30 °C durante 16 h. La mezcla se diluyó con H2O y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera saturada, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron a vacío proporcionando (1S,4s)-4-((2-(((3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (99 %). El producto en bruto se usó en la siguiente etapa sin más purificación. MS (ESI)m/z= 397,1 [M+H]+.
(1S,4s)-4-((5-Amino-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida. A una disolución de (1S,4s)-4-((2-(((3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-nitropirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (1,0 equiv.) en MeOH (0,1 M) se añadió Pd/C (0,1 equiv, 10 % de Pd en peso). La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con H2 varias veces. La reacción se agitó bajo H2 a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se filtró y se concentró a vacío proporcionando (1S,4s)-4-((5-amino-2-(((3 S ,4R)-3 -fluorotetrahidro2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (90 %). El producto en bruto se usó directamente en la siguiente etapa sin más purificación. MS (ESI)m/z= 367,2 [M+H]+.
(1S,4s)-4-(2-(((3S,4R)-3-Fluorotetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-8-((2,4,6-tr¡clorofen¡l)am¡no)-9H-purin-9-¡l)-1-metilciclohexano-1-carboxamida. A la disolución (1S,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (1,0 equiv.) en DMF (0,4 M) se añadió 1,3,5-tricloro-2-isotiocianatobenceno (1,0 equiv.). La mezcla se agitó a 30 °C durante 2 h. Se añadió DIC (2,0 equiv.) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla se diluyó con H2O y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica combinada se lavó con salmuera saturada, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró a vacío. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1S,4s)-4-(2-(((3S,4R)-3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenil)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (40 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 5 ppm: 8,02 (s, 1H), 7,56 - 7,49 (m, 2H), 4,63 - 4,46 (m, 2H), 4,22 (s, 1H), 4,11 - 4,05 (m, 1H), 3,93 - 3,90 (m, 1H), 3,73 (s, 1H), 3,62 - 3,60 (m, 1H), 2,76 - 2,68 (m, 2H), 2,42 - 2,38 (m, 2H), 2,21 (s, 1H), 1,85 (s, 2H), 1,68 - 1,61 (m, 1H), 1,47 - 1,41 (m, 2H), 1,25 (s, 3H). MS (ESI)m/z= 570,1 [M+H]+.
Ejemplo 54. (1S,4s)-4-(8-((2-Cloro-4,6-difluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-purin-9-il)-1 -metilciclohexano-1 -carboxamida
4-(8-((2-Cloro-4,6-d¡fluorofenil)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-metilciclohexanocarboxilato de (1S,4s)-etilo. A una mezcla de (1S,4s)-4-((5-amino-2-(((3S,4R)-3 -metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)pirimidin-4-il)amino)-1 -metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (1 equiv., preparada como se describe en el presente documento) en DMF (0,03 M) se añadió 1-cloro-3,5-difluoro-2-isotiocianatobenceno (1 equiv.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. Se añadió DIC (2 equiv.) a la reacción en una porción. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La reacción se diluyó con agua, se extrajo con acetato de etilo, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna dando (1S,4s)-4-(8-((2-cloro-4,6-difluorofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (97 %) como un sólido amarillo. MS (ESI)m/z= 563,3 [M+H]+.
Ácido (1S,4s)-4-(8-((2-cloro-4,6-difluorofen¡l)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-metilciclohexano-1-carboxíl¡co . A una disolución de (1S,4s)-4-(8-((2-cloro-4,6-difluorofenil)amino)-2-(((3 S,4R)-3 -metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxilato de etilo (1 equiv.) en MeOH/agua (0,1 M, 4/1) se añadió NaOH (5 equiv.). La reacción se sometió a reflujo durante 48 h. La reacción se diluyó con agua, y se extrajo con acetato de etilo. La fase acuosa se ajustó con HCl 3 M a pH=3-5, se extrajo con DCM, la fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró dando ácido (1S,4s)-4-(8-((2-cloro-4,6-difluorofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxílico (51 %) como un sólido amarillo.
(1S,4s)-4-(8-((2-Cloro-4,6-d¡fluorofenil)am¡no)-2-(((3S,4R)-3-met¡ltetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)am¡no)-9H-pur¡n-9-¡l)-1-metilciclohexano-1-carboxamida. A una disolución de ácido (1S,4s)-4-(8-((2-cloro-4,6-difluorofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3 -metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxílico (1 equiv.) en DMF (0,3 M) se añadieron HATU (1,2 equiv.), TEA (3 equiv.) y NH4Cl (3 equiv.) en una porción a temperatura ambiente. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Los métodos de procesamiento y de purificación estándar proporcionaron (1S,4s)-4-(8-((2-cloro-4,6-difluorofenil)amino)-2-(((3S,4R)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-9H-purin-9-il)-1-metilciclohexano-1-carboxamida (15 %). 1H RMN (400 MHz, Metanol<U) 5 ppm: 7,98 (s, 1H), 7,34 - 6,80 (m, 2H), 4,38 4,35 (m, 1H), 4,05 - 3,89 (m, 2H), 3,71-3,65 (m, 2H), 3,28-3,25 (m, 1H), 2,88-2,75 (m, 2H), 2,462,42 (m, 2H), 2,08 - 1,96 (m, 1H), 1,95 - 1,64 (m, 3H), 1,61 - 1,44 (m, 1H), 1,43 - 1,32 (m, 2H), 1,23 (s, 3H), 0,91 (d,J= 6,7 Hz, 3H). MS (ESI)m/z= 534,2 [M+H]+.
ENSAYOS (La sección "ENSAYOS" se desvela en el presente documento como referencia) ENSAYOS CELULARES
Determinación del efecto inhibidor del crecim iento de compuestos de aminopurina. La estirpe celular de melanoma Lox-IMVI (fuente: NCI-DCTD, n.° de catálogo 0507283) se mantuvo y probó en RPMI 10 % de FBS. La densidad de siembra para la estirpe celular se optimizó para garantizar la linealidad del ensayo en placas de 384 pocillos.
Se depositaron concentraciones crecientes del compuesto de aminopurina (0,5 nM a 10 pM) en un modo de dilución sucesiva de 10 puntos (dilución triple) por duplicado dentro de la placa mediante un dispensador acústico (EDC ATS-100) en una placa vacía de 384 pocillos. La concentración de sulfóxido de dimetilo (DMSO) se mantuvo constante para una concentración de ensayo final del 0,2 % de DMSO. Antes de la prueba, las células se cultivaron y se expandieron en matraces de cultivo para proporcionar cantidades suficientes de material de partida. A continuación se diluyeron las células a sus densidades deseadas y se añadieron directamente a las placas de 384 pocillos en las que se depositó el compuesto. Se dejó que las células crecieran durante 72 horas en 5 % de CO2 a 37 °C. En el momento en el que empezó la exposición de células al compuesto (tü), el número inicial de células se evaluó mediante un ensayo de viabilidad (Cell Titer-Glo) cuantificando el nivel de luminiscencia generado por la adenosina-5'-trifosfato (ATP) presente en células viables. Después de 72 horas, se evaluó la viabilidad celular de las células tratadas con el compuesto mediante el ensayo de viabilidad celular luminiscente Cell Titer-Glo (Promega Corporation, Madison, WI) y se leyó para luminiscencia.
Todos los datos se normalizaron y representaron como un porcentaje de las células tratadas con control de DMSO después de 72 h. Los resultados se expresaron como un valor de CI50, que es la concentración de compuesto requerida para inhibir el 50 % de las células de control no tratadas durante las 72 horas de tratamiento.
Se usó un modelo logístico de cuatro parámetros (modelo sigmoide de respuesta frente a la dosis) para determinar la CI50 del compuesto.
y = (A+((B-A)/(l+((C/x)AD))))
en donde:
A = YMín
B = YMáx
C = CE50
D = Pendiente de Hill
CI50 es la concentración de compuesto cuando Y=50 % del control de DMSO
Y = Unidad de luminiscencia
Todas las curvas de inhibición se procesaron y evaluaron usando XLFit y la base de actividad (IDBS).
MODELOS ANIMALES
Modelo de xenoinjerto. Para los estudios del modelo de xenoinjerto, se inyectaron estirpes celulares de cáncer de melanoma humano en ratones SCID (inmunodeficiencia combinada grave). Las estirpes celulares del cáncer se propagaron en cultivoin vitro.Se generaron animales portadores de tumor inyectando números determinados con precisión de células en ratones. Tras la inoculación de los animales, se dejó que los tumores crecieran hasta un cierto tamaño antes de la aleatorización. Los ratones portadores de tumores de xenoinjerto que varían entre tamaños predeterminados se reunieron y se aleatorizaron en diversos grupos de tratamiento. Un diseño de eficacia típico del estudio implicó la administración de uno o más compuestos a diversos niveles de dosis a ratones portadores de tumor. Además, agentes quimioterapéuticos de referencia (control positivo) y controles negativos fueron similarmente administrados y mantenidos. Se hicieron las mediciones de los pesos del tumor y corporales durante el transcurso del estudio.
Se anestesiaron ratones con isoflurano inhalado y a continuación se inocularon con células tumorales LOX-IMVI por vía subcutánea por encima de la pata trasera derecha con 0,1 ml de una suspensión de células individuales en PBS usando una jeringa estéril de 1 ml equipada con una aguja de calibre 26. Tras la inoculación de los animales, se dejó que los tumores crecieran hasta aproximadamente 75-125 mm3 o en algunos casos 250-400 mm3 antes de la aleatorización de los ratones. Se midió el tumor de cada animal y los animales con tumores en el intervalo apropiado se incluyeron en el estudio. Los animales del conjunto del estudio se distribuyeron entonces aleatoriamente en diversas jaulas y las jaulas se asignaron aleatoriamente a vehículo, control positivo o grupos experimentales de producto. Todos los ratones fueron marcados con marcas metálicas de oreja en la oreja derecha. Un grupo típico consistió en 8-10 animales. Para un estudio de xenoinjerto típico, ratones SCID portadores de tumores se aleatorizaron y administraron con compuestos que variaban desde, por ejemplo, 100 mg/kg hasta 0,1 mg/kg con diferentes programas de dosis, que incluyeron, pero no se limitaron a, cada día, cada dos días, cada tres días, cada cinco días, cada siete días y dos veces al día. Los ratones fueron administrados durante 1-4 semanas. Los tumores se midieron dos veces a la semana usando un compás calibrador y los volúmenes de tumor se calcularon usando la fórmula de W2 x L / 2.
En este modelo de melanoma, los compuestos de aminopurina tienen, o se espera que tengan, un valor de DE50 de <100 mg/kg, teniendo algunos compuestos una DE50 de <10 mg/kg y otros una DE50 de <1 mg/kg.
TABLAS DE ACTIVIDADES
Se probó cada uno de los compuestos en la Tabla 1 en uno o más de los ensayos y se descubrió que tenían actividad, teniendo todos los compuestos una CI50 inferior a 10 pM en el ensayo basado en células, teniendo algunos compuestos una CI50 por encima de 1 pM (nivel de actividad A), algunos una CI50 entre 500 nM y 1 pM (nivel de actividad B), algunos una CI50 entre 250 nM y 500 nM (nivel de actividad C), y teniendo otros una CI50 inferior a 250 nM (nivel de actividad D).
Tabla 1

Claims (9)

  1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de la fórmula (la)
    en donde: R1 es heterociclilo no aromático sustituido o sin sustituir, preferentemente en donde R1: (i) es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo sustituido o sin sustituir; o (ii) está sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, OR, SO2R4, C(=O)R5, C(=O)OR6, C(=O)NRR7, alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, arilo sustituido o sin sustituir, heteroarilo sustituido o sin sustituir, alquilarilo sustituido o sin sustituir, en donde cada R es independientemente H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R4 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir o arilo sustituido o sin sustituir; R5 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R6 es alquilo C1-6 sustituido o sin sustituir; y R7 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, o arilo sustituido o sin sustituir; o (iii) es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de F, OH, SO2CH3, SO2-tosilo, C(=O)CH3, C(=O)OCH3, C(=O)O-terc-butilo, C(=O)O-isopropilo, C(=O)NHCH3, C(=O)NH-fenilo, metilo, etilo, isopropilo, CH2OH, fenilo, piridilo o bencilo; R2 es H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R3 es fenilo, sustituido con uno o más halógenos, opcionalmente sustituido además con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, CN y -OR', en donde cada R' es independientemente alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir.
  2. 2. Un compuesto de la fórmula (Ib)
    en donde: R1 es heterociclilo no aromático sustituido o sin sustituir, preferentemente en donde R1: (i) es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo sustituido o sin sustituir; o (ii) está sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, OR, SO2R4, C(=O)R5, C(=O)OR6, C(=O)NRR7, alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, arilo sustituido o sin sustituir, heteroarilo sustituido o sin sustituir, alquilarilo sustituido o sin sustituir, en donde cada R es independientemente H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R4 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir o arilo sustituido o sin sustituir; R5 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R6 es alquilo C1-6 sustituido o sin sustituir; y R7 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, o arilo sustituido o sin sustituir; o (iii) es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de F, OH, SO2CH3, SO2-tosilo, C(=O)CH3, C(=O)OCH3, C(=O)O-terc-butilo, C(=O)O-isopropilo, C(=O)NHCH3, C(=O)NH-fenilo, metilo, etilo, isopropilo, CH2OH, fenilo, piridilo o bencilo; y R2 es H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir.
  3. 3. Un compuesto de la fórmula (Ic)
    en donde: R1 es heterociclilo no aromático sustituido o sin sustituir, preferentemente en donde R1: (i) es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo sustituido o sin sustituir; o (ii) está sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, OR, SO2R4, C(=O)R5, C(=O)OR6, C(=O)NRR7, alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, arilo sustituido o sin sustituir, heteroarilo sustituido o sin sustituir, alquilarilo sustituido o sin sustituir, en donde cada R es independientemente H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R4 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir o arilo sustituido o sin sustituir; R5 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R6 es alquilo C1-6 sustituido o sin sustituir; y R7 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, o arilo sustituido o sin sustituir; o (iii) es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de F, OH, SO2CH3, SO2-tosilo, C(=O)CH3, C(=O)OCH3, C(=O)O-terc-butilo, C(=O)O-isopropilo, C(=O)NHCH3, C(=O)NH-fenilo, metilo, etilo, isopropilo, CH2OH, fenilo, piridilo o bencilo; y R2 es H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir.
  4. 4. Un compuesto de la fórmula (Ih)
    en donde: R1 es heterociclilo no aromático sustituido o sin sustituir, preferentemente en donde R1: (i) es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo sustituido o sin sustituir; o (ii) está sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, OR, SO2R4, C(=O)R5, C(=O)OR6, C(=O)NRR7, alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, arilo sustituido o sin sustituir, heteroarilo sustituido o sin sustituir, alquilarilo sustituido o sin sustituir, en donde cada R es independientemente H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R4 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir o arilo sustituido o sin sustituir; R5 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R6 es alquilo C1-6 sustituido o sin sustituir; y R7 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, o arilo sustituido o sin sustituir; o (iii) es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de F, OH, SO2CH3, SO2-tosilo, C(=O)CH3, C(=O)OCH3, C(=O)O-terc-butilo, C(=O)O-isopropilo, C(=O)NHCH3, C(=O)NH-fenilo, metilo, etilo, isopropilo, CH2OH, fenilo, piridilo o bencilo; R2 es H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R3 es fenilo, sustituido con uno o más halógenos, opcionalmente sustituido además con uno o más sustituyentes seleccionados de alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, CN y -OR', en donde cada R' es independientemente alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; y R# es alquilo C1-2.
  5. 5. Un compuesto de la fórmula (Ii)
    en donde: R1 es heterociclilo no aromático sustituido o sin sustituir, preferentemente en donde R1: (i) es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo sustituido o sin sustituir; o (ii) está sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, OR, SO2R4, C(=O)R5, C(=O)OR6, C(=O)NRR7, alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, arilo sustituido o sin sustituir, heteroarilo sustituido o sin sustituir, alquilarilo sustituido o sin sustituir, en donde cada R es independientemente H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R4 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir o arilo sustituido o sin sustituir; R5 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R6 es alquilo C1-6 sustituido o sin sustituir; y R7 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, o arilo sustituido o sin sustituir; o (iii) es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de F, OH, SO2CH3, SO2-tosilo, C(=O)CH3, C(=O)OCH3, C(=O)O-terc-butilo, C(=O)O-isopropilo, C(=O)NHCH3, C(=O)NH-fenilo, metilo, etilo, isopropilo, CH2OH, fenilo, piridilo o bencilo; R2 es H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; y R# es alquilo C1-2.
  6. 6. Un compuesto de la fórmula (Ij)
    en donde: R1 es heterociclilo no aromático sustituido o sin sustituir, preferentemente en donde R1: (i) es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo sustituido o sin sustituir; o (ii) está sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, OR, SO2R4, C(=O)R5, C(=O)OR6, C(=O)NRR7, alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, arilo sustituido o sin sustituir, heteroarilo sustituido o sin sustituir, alquilarilo sustituido o sin sustituir, en donde cada R es independientemente H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R4 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir o arilo sustituido o sin sustituir; R5 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R6 es alquilo C1-6 sustituido o sin sustituir; y R7 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, o arilo sustituido o sin sustituir; o (iii) es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de F, OH, SO2CH3, SO2-tosilo, C(=O)CH3, C(=O)OCH3, C(=O)O-terc-butilo, C(=O)O-isopropilo, C(=O)NHCH3, C(=O)NH-fenilo, metilo, etilo, isopropilo, CH2OH, fenilo, piridilo o bencilo; R2 es H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; y R# es alquilo C1-2.
  7. 7. Un compuesto de la fórmula (Io)
    en donde: R1 es heterociclilo no aromático sustituido o sin sustituir; R2 es H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; y P es una resina.
  8. 8. Un compuesto de la fórmula (Ip)
    en donde: R1 es heterociclilo no aromático sustituido o sin sustituir; R2 es H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; y P es una resina.
  9. 9. Un compuesto de la fórmula (Iq)
    en donde: R1 es heterociclilo no aromático sustituido o sin sustituir, preferentemente en donde R1: (i) es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo sustituido o sin sustituir; o (ii) está sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de halógeno, OR, SO2R4, C(=O)R5, C(=O)OR6, C(=O)NRR7, alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, arilo sustituido o sin sustituir, heteroarilo sustituido o sin sustituir, alquilarilo sustituido o sin sustituir, en donde cada R es independientemente H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R4 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir o arilo sustituido o sin sustituir; R5 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir; R6 es alquilo C1-6 sustituido o sin sustituir; y R7 es alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir, o arilo sustituido o sin sustituir; o (iii) es oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidro-tiopirandióxido, piperidilo, oxepanilo u oxaespiroheptilo, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes independientemente seleccionados de F, OH, SO2CH3, SO2-tosilo, C(=O)CH3, C(=O)OCH3, C(=O)O-terc-butilo, C(=O)O-isopropilo, C(=O)NHCH3, C(=O)NH-fenilo, metilo, etilo, isopropilo, CH2OH, fenilo, piridilo o bencilo; y R2 es H o alquilo C1-3 sustituido o sin sustituir.
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Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL3204386T3 (pl) * 2014-10-06 2021-09-20 Signal Pharmaceuticals, Llc Podstawione związki aminopurynowe, ich kompozycje i sposoby leczenia nimi
JP6903577B2 (ja) 2014-12-16 2021-07-14 シグナル ファーマシューティカルズ，エルエルシー 皮膚におけるｃ−Ｊｕｎ Ｎ末端キナーゼの阻害の測定方法
WO2016123291A1 (en) 2015-01-29 2016-08-04 Signal Pharmaceuticals, Llc Isotopologues of 2-(tert-butylamino)-4-((1r,3r,4r)-3-hydroxy-4-methylcyclohexylamino)-pyrimidine-5-carboxamide
EP3271360B1 (en) 2015-03-18 2020-04-22 Bristol-Myers Squibb Company Substituted tricyclic heterocyclic compounds
JP6793658B2 (ja) 2015-03-18 2020-12-02 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｔｎｆ阻害剤として有用な三環式ヘテロ環式化合物
KR102696304B1 (ko) 2015-03-18 2024-08-16 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Tnf의 억제제로서 유용한 헤테로시클릭 화합물
EP3795553B1 (en) 2015-07-24 2024-05-15 Celgene Corporation Methods of synthesis of (1r,2r,5r)-5-amino-2-methylcyclohexanol hydrochloride and intermediates useful therein
JP6811233B2 (ja) 2015-08-03 2021-01-13 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｔｎｆアルファの修飾因子として有用な環状化合物
NZ746554A (en) * 2016-04-01 2023-03-31 Signal Pharm Llc Substituted aminopurine compounds, compositions thereof, and methods of treatment therewith
MX2018011970A (es) * 2016-04-01 2019-05-20 Signal Pharm Llc Formas sólidas de (1s,4s)-4-(2-(((3s,4r)-3-fluorotetrahidro-2h-pir an-4-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenilo)amino)-9h-purin-9-il)-1-m etilciclohexano-1-carboxamida y métodos para utilizarlas.
EP3464312A4 (en) 2016-06-02 2019-11-27 Celgene Corporation ANTI-TRYPANOSOMA AND ANTI-LEISHMANIA AGENTS FOR ANIMALS AND HUMANS
JP6970126B2 (ja) * 2016-06-02 2021-11-24 セルジーン コーポレイション 動物及びヒトの抗マラリア薬
BR122022005778B1 (pt) 2017-10-04 2024-01-09 Celgene Corporation Cápsula compreendendo cis-4-[2-{[(3s,4r)-3-fluoro-oxan-4-il]amino}-8-(2,4,6-tricloroanilino)-9h-purin-9-il]-1-metilciclohexano-1-carboxamida
JP2020536100A (ja) * 2017-10-04 2020-12-10 セルジーン コーポレイション シス−４−［２−｛［（３ｓ，４ｒ）−３−フルオロキサン−４−イル］アミノ｝−８−（２，４，６−トリクロロアニリノ）−９ｈ−プリン−９−イル］−１−メチルシクロヘキサン−１−カルボキサミドの製造プロセス
CN115916747A (zh) * 2020-07-01 2023-04-04 四川海思科制药有限公司 一种并环杂环衍生物及其在医药上的应用
US12084453B2 (en) 2021-12-10 2024-09-10 Incyte Corporation Bicyclic amines as CDK12 inhibitors
CN114478326B (zh) * 2022-01-21 2023-10-03 安徽宁亿泰科技有限公司 一种苯嘧磺草胺关键中间体的合成方法

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL99699A (en) 1990-10-10 2002-04-21 Autoimmune Inc Drug with the option of oral, intra-intestinal, or inhaled dosing for suppression of autoimmune response associated with type I diabetes
FI109088B (fi) 1997-09-19 2002-05-31 Leiras Oy Tabletti ja menetelmä sen valmistamiseksi
CZ27399A3 (cs) 1999-01-26 2000-08-16 Ústav Experimentální Botaniky Av Čr Substituované dusíkaté heterocyklické deriváty, způsob jejich přípravy, tyto deriváty pro použití jako léčiva, farmaceutická kompozice a kombinovaný farmaceutický přípravek tyto deriváty obsahující a použití těchto derivátů pro výrobu léčiv
US7672705B2 (en) * 2004-07-19 2010-03-02 Resonant Medical, Inc. Weighted surface-to-surface mapping
US7759342B2 (en) 2005-01-13 2010-07-20 Signal Pharmaceuticals, Llc Methods of treatment and prevention using haloaryl substituted aminopurines
US7521446B2 (en) 2005-01-13 2009-04-21 Signal Pharmaceuticals, Llc Haloaryl substituted aminopurines, compositions thereof, and methods of treatment therewith
US7723340B2 (en) * 2005-01-13 2010-05-25 Signal Pharmaceuticals, Llc Haloaryl substituted aminopurines, compositions thereof, and methods of treatment therewith
US20090215744A1 (en) 2005-11-18 2009-08-27 Astrazeneca Ab Solid Formulations
JO3235B1 (ar) 2006-05-26 2018-03-08 Astex Therapeutics Ltd مركبات بيررولوبيريميدين و استعمالاتها
CA2667345C (en) 2006-10-27 2016-03-22 Signal Pharmaceuticals, Llc Solid forms comprising 4-[9-(tetrahydro-furan-3-yl)-8-(2,4,6-trifluoro-phenylamino)-9h-purin-2-ylamino]-cyclohexan-1-ol, compositions thereof, and uses therewith
US8491930B2 (en) 2008-04-23 2013-07-23 Farmasierra Manufacturing, S.L. Pharmaceutical formulation containing ibuprofen and codeine
WO2011071491A1 (en) 2009-12-09 2011-06-16 Signal Pharmaceuticals, Llc Isotopologues of 4-[9-(tetrahydro-furan-3-yl)-8-(2, 4, 6- trifluoro-phenylamino)-9h-purin-2-ylamino]-cyclohexan-1-ol
US8603527B2 (en) 2010-10-25 2013-12-10 Signal Pharmaceuticals, Llc Pharmaceutical formulations of a substituted diaminopurine
US8680076B2 (en) 2010-10-25 2014-03-25 Signal Pharmaceuticals, Llc Methods of treatment, improvement and prevention using haloaryl substituted aminopurines
WO2014172616A2 (en) 2013-04-18 2014-10-23 President And Fellows Of Harvard College Methods, compositions and kits for promoting motor neuron survival and treating and diagnosing neurodegenerative disorders
GB201321737D0 (en) 2013-12-09 2014-01-22 Ucb Pharma Sa Therapeutic Agents
PL3204386T3 (pl) * 2014-10-06 2021-09-20 Signal Pharmaceuticals, Llc Podstawione związki aminopurynowe, ich kompozycje i sposoby leczenia nimi
MX2018011970A (es) 2016-04-01 2019-05-20 Signal Pharm Llc Formas sólidas de (1s,4s)-4-(2-(((3s,4r)-3-fluorotetrahidro-2h-pir an-4-il)amino)-8-((2,4,6-triclorofenilo)amino)-9h-purin-9-il)-1-m etilciclohexano-1-carboxamida y métodos para utilizarlas.

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