DK175783B1 - Midler og fremgangsmåder til administrering af terapeutisk aktive forbindelser - Google Patents

Description

DK 175783 B1

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte midler og fremgagnsmåder til deres anvendelse.

5

Mere specielt angår opfindelsen et middel til at forbedre effektiviteten af visse terapeutisk aktive forbindelser.

I en mere speciel udførelsesform angår opfindelsen forbedrede midler af terapeutisk ak-10 tive forbindelser såsom antibiotika, antiinflammatoriske midler, antikoaguleringsmid-ler, antibakterielle midler, diuretiske midler, krampedæmpende midler eller antihypertensive midler, som er forskellige fra vitamin C.

15 Endnu mere specielt angår opfindelsen anvendelsen af aldonforbindelser til fremstilling af forbedrede anti-inflammatoriske midler indeholdende vitamin C.

I forebyggende og helbredende lægemiddelterapi ønske s det i 2o almindelighed at etablere en fysiologisk effektiv begyndelsesmængde af et lægemiddel eller en anden terapeutisk aktiv forbindelse i .mennesket eller dyret og derpå vedligeholde den effektive mængde i længere tid, som krævet for at bevirke det ønskede fysiologiske resultat. En forbedring i enten absorptionshastigheden (optagelsen) eller tilbageholdelsen (nedsæt-2 5 telse i udskillelseshastigheden) eller begge dele giver i almindelighed vigtige fysiologiske og terapeutiske fordele. Det er også meget fordelagtigt, hvis uønskede bivirkninger af den terapeutisk aktive forbindelse kan reduceres eller elimineres.

30

Ifølge opfindelsen er nu opdaget midler og fremgangsmåder til at forbedre effektiviteten, dvs. tilvejebringelsen og/eller vedligeholdelsen af legemsmængder af terapeutisk aktive forbindelser, (fer normalt elimineres fra legemet uden metabolisme 35 via nyregangenes udskillelsesbane for organiske anioner. Sådanne terapeutisk aktive forbindelser har en molekylvægt under ca. 5.000, har en sur funktionel gruppe og en pKa på 6

I DK 175783 B1 I

I I

I ved en fysiologisk pH-værdi på 7,4. Den terapeutisk aktive forbindelse af midlerne H

I ifølge opfindelsen omfatter antiinflammatoriske midler, antikoaguleringsmidler, antibi- I

I otika, antibakterielle midler, diuretiske midler, krampedæmpende midler eller antihy- I

I pertensive midler, forskellige fra vitamin C og mindst en forbindelse valgt af klassen H

I 5 bestående af L-threonsyre, L-xylonsyre og L-lyxonsyre og de ugiftige, spiselige salte, I

I aldonolactoner og aldonolactider, deraf. Foretrukket er den terapeutisk aktive forbin- I

I delse aspirin eller piroxicam. I

I 10 Det terapeutiske middel ifølge opfindelsen kan anvendes til behandling af inflammato- I

I riske sygdomme, virale eller bakterielle infektioner, kramper eller hypertension. I

I Den foreliggende opfindelse tilvejebringer også anvendelsen af mindst en forbindelse H

I valgt af klassen bestående af L-threonsyre, L-xylonsyre og L-lyxonsyre og deres spise- I

I lige salte, aldonolactoner og aldonolactider i kombination med en forbindelse, der har H

I vitamin C-alctivitet til fremstilling af et lægemiddel til behandling af inflammatoriske H

I sygdomme. H

I 20 Som anvendt i den foreliggende beskrivelse betyder udtrykket I

I "forbindelse, der har vitamin C-aktivitet" vitamin C (L- I

I ascorbinsyre) og ethvert derivat deraf, som udviser antiskørbugs- I

I virkning. Sådanne derivater indbefatter f.eks. oxidations- I

I produkter såsom dehydroascorbinsyre og spiselige salte af I

I 25 ascorbinsyre såsom calcium-, natrium-, magnesium-, kalium- H

I og zinkascorbater, estere af vitamin C med organiske og uorga- H

I niske syrer, f.eks. L-ascorbinsyre-2-O-sulfat, L-ascorbinsyre- H

I 2-O-phosphat, L-ascorbinsyre-3-O-phosphat, L-ascorbinsyre-6- i I

I hexadecanoat, L-ascorbinsyre-monostearat, L-ascorbinsyre- ; I

I 30 dipalmitat og lignende. i I

Metabolater af ascorbinsyre og dets derivater indbefatter H

I aldonsyrerne, aldonolactonerne, aldonolactiderne og de spise- H

lige salte af aldonsyrer. Som det vil fremgå, er midlerne H

35 ifølge opfindelsen ejendommelige ved tilstedeværelse af mindst H

I ån eller flere af disse metabolitter, svarende til tre speci- H

I fikke aldonsyrer: L-threonsyre, L-xylonsyre og L-lyxonsyre. I

I Aldonolactonerne har strukturformlen H

3 DK 175783 B1 Γ”Ί R-CH-(CHOH) -C=0 n 5 hvor R er hydrogen eller -CH-OH, og n = 1 - 3.

Tilstedeværelsen af en eller flere af disse metabolitter i midlerne ifølge opfindelsen er både en bekvem måde til at identificere disse midler og er også nødvendig for at opnå det ønskede resultat, forbedring i absorption og/eller tilbageholdelse af den terapeutisk aktive forbindelse.

En egnet metode til at fremstille det forbedrede vitamin C-antiinflammatoriske middel 15 ifølge opfindelsen omfatter opvarmning af L-ascorbinsyre med en ugiftig metalforbindelse, f.eks. calciumcarbonat, natrium-bicarbonat og lignende, under oxiderende betingelser til en højere temperatur, f.eks. 40 - 89°C, for at omdanne en væsentlig del af ascorbinsyren til dens tilsvarende salt, f.eks. cal-20 cium- eller natriumascorbat, og tørre reaktionsblandingen til fremstilling af et fast produkt med i hovedsagen neutral pH-værdi (f.eks. 6,0 - 7,5). Fortrinsvis haves et lille støkiometrisk overskud af metalsaltet. Det.fremkomne produkt har en jodascorbatmåling i intervallet 50 - 480 mg/500 mg prøve, af-__ hængende af fremgangsmådeparametrene, idet den højere ascorbat- do aktivitet foretrækkes af praktiske grunde. Længere opvarmning ved oxiderende betingelser frembringer lavere jodascorbatmålin-ger.

30 Vitamin C-midlerne ifølge opfindelsen er også nyttige til be handling af inflammatoriske sygdomme såsom artritis.

Effektiviteten af aldonforbindelserne til at forbedre absorptionen, tolerancen og/eller tilbageholdelseshastigheden af 3 s terapeutisk aktive forbindelser er også generelt anvendelig til forbedring af disse egen skaber af antiinflammatoriske midler, antikoaguleringsmidler, antibiotika, antibakteri-elle midler, diuretiske midler, krampedæmpende midler eller antihypertensive midler forskellige fra vitamin C, der har en molekylvægt under ca. 5.000, og som har en sur,

I DK 175783 B1 I

I ! I

funktionel gruppe og pKa-6. De fysiologiske mekanismer, som I

I er ansvarlige for disse forbedringer, synes at være hæmning af I

normal eliminering af sådanne umetaboliserede, terapeutisk ak- I

I tive forbindelser fra legemet via nyregangenes udskillelses- I

I 5 I

bane for organiske anioner og den forbedrede absorption af disse komponenter gennem legemsvævets cellevægge. Aldonforbin-

delserne virker tilsyneladende til at tilvejebringe både den I

I forbedrede absorption og hæmmede nyreudskillelsesvirkning. En I

I almen beskrivelse af de forskellige renale udskillelsesbaner I

I er indeholdt i artiklen af Hirsch & Hook, Journal of Pharma- I

I oology and Experimental Therapeutics [bind 171, side 103 I

I (1970)]. I

I Den mængde af aldonforbindelsen, som er nødvendig i midlerne I

I 1® ifølge opfindelsen, er en terapeutisk effektiv mængde. Den I

I nøjagtige mængde vil variere noget, afhængende af den nøjag- I

I tige karakter af den terapeutisk aktive forbindelse og andre I

faktorer, som vil fremgå for fagfolk. I almindelighed bliver

den reducerede nyreudskillelseshastighed og/eller forøgede I

20 legemsabsorptionshastighed forbedret noget af selv meget små I mængder af aldonforbindelserne. Disse egenskaber vil blive

I forbedret ved at forøge mængderne af aldonforbindelsen, og I

I den øvre grænse fastslås af praktiske overvejelser såsom und- I

I gåelse af for stor fortynding af den terapeutisk aktive be- I

I 2 e I

e standdel til det punkt, hvor en tilstrækkelig minimums-

I dosis ikke administreres. Ifølge den bedste viden for tiden I

I kan mængden af aldonforbindelse i midlerne ifølge opfindelsen H

I variere fra mindre end 1 vægt% til 24 vægt%. Praktiske tera-

I peutiske virkninger er blevet iagttaget med koncentrationer I

I 30 af aldonforbindelsen i intervallet 0,10 vægt%, og det for tiden I

I foretrukne interval er fra ca. 1 vægt% til ca. 7 vægt% af I

I aldonforbindelsen. H

I Midlerne ifølge opfindelsen kan fremstilles ved blot fysisk I

I 35 at blande komponenterne af midlet. Alternativt, hvor det I

5 DK 175783 B1 drejer sig om antiinflammatoriske vitamin C midler, kan disse fremstilles in situ ved teknik, der er illustreret i eksemplerne.

S Repræsentative eksempler på sådanne terapeutisk aktive forbindelser, der kan forbedres ifølge opfindelsen, indbefatter forbindelser, der har en pKa 3d, og som har sure, funktionelle grupper såsom carboxylsyregrupper, en-diolgrupper, phenoliske grupper og lignende. Disse forbindelser er af meget forskellig struktur og farmaceutisk anvendelighed og indbefat-ter f.eks.:

Navn pKa Farmaceutisk aktivitet 15 Piroxicam 5,1 Antiinf lammatorisk

Warfarin kalium 5,05 Antikoagulant

Ampicillin 3,3 Antibiotisk

Aspirin 3,5 Antiinflammatorisk

Carbenicillin 2,6 Antibiotisk 20 Mezlocillin 2,7 Antibakteriel

Penicillin G. kalium 2,76 Antibakteriel

Oxacillin natrium 2,84 Antiinflammatorisk

Sulindac 4,7 Antiinflammatorisk

Suprofen 3,9 Antiinflammatorisk 25 Ethacryainsyre 3,5 Diuretisk

Furosemid 3,9 Diuretisk

Indomethacin 4,5 Antiinflammatorisk

Fusinsyre 5,35 Antibakteriel

Meclofenaminsyre 4,0 Antiinflammatorisk 30 Tolmetin 3,5 Antiinflammatorisk

Benoxaprofen 3,5 Antiinflammatorisk

Valproinsyre 4,8 Anti-krampe

Sulfisoxazol 5,0 Antibakteriel

Alclofenac 4,6 Antiinflammatorisk 35 captropril 3,7 Antihypertensiv

Cefoxitin 2,2 Antibakteriel

Bumetanid 4,0 Diuretisk

Cefoperazon 2,55 Antibakteriel

Indomethacin natrium 4,5 Antiinflammatorisk

I DK 175783 B1 I

6 I

B Terapeutisk aktive forbindelser af den ovenfor beskrevne type, I

I der er egnede til brug ved udøvelse af opfindelsen, kan let I

I udvælges og identificeres ved rutineprøver af fagfolk. Be- I

B stenunelse af, om en given forbindelse udskilles umetaboliseret, I

B 5 kan foretages ved urinanalyse. Udvælgelsen kan yderligere be- I

B kræftes ved de glatmuskelprøver, der er beskrevet i eksempel I

B 14, og de dyreundersøgelser, som er beskrevet i eksempel 12 og I

I I

B på tegningen er I

B 10 fig. 1 en histogramgengivelse af forsøgsdata, der viser for- I

B bedringen i absorption/tilbageholdelseshastigheden af I

B aspirin ifølge opfindelsen, I

B fig. 2 en serumsalicylat-tidsprofil, der illustrerer disse I

B forbedringer, I

B 15 fig. 3 en plasmapiroxicam-tidsprofil, der viser forbedring i I

B absorption/tilbageholdelse af piroxicam, der skyldes I

B administrering af et kombinationspræparat af piroxicam I

B og aldonforbindelse,. I

B fig. 4 en lignende plasmapiroxicam-tidsprofil, der viser for- I

B 20 bedringen i absorption/tilbageholdelse af piroxicam, I

B der fremkommer ved administration i rækkefølge af aldon- I

B komponenten og pirocixamkomponenten, og I

fig. 5 den forbedrede optagelse af ascorbinsyre af 3T3 fibro- I

B blaster, der skyldes inkludering af aldonkomponenten. I

B 25 De følgende eksempler anføres med det formål at illustrere op- I

B findelsen. I

7 DK 175783 B1 EKSEMPEL 1.

Til en 30,4 liter dampopvarmet, rustfri stål-reaktionsbeholder blev sat 27 kg varmt vand (44°C). Ascorbinsyre U.S.P., 49,59 kg, blev tilsat i én portion til det varme vand. Den 5 fremkomne opslæmning blev omrørt mekanisk og opvarmet med 2 damp (tryk 1,054 kg pr. cm ), indtil der blev nået en temperatur på 70°C.

Til den vandige'opslæmning af ascorbinsyre blev sat 10,35 kg calciumcarbonat. Den portionsvise tilsætning af carbonatet 10 krævede 3-4 minutter. Reaktionsblandingen havde en grå farve, og der var megen skumning på grund af udvikling af CC^.

Efter 8 minutters omrøring var det meste af skumningen hendøet, og reaktionsblandingen havde en rødbrun farve. Opløsningens temperatur var 80°C. Omrøring og opvarmning blev fortsat i 15 15 minutter, indtil reaktionsblandingens temperatur nåede 98°C, hvor den blev holdt i yderligere 20 minutter, hvorefter der under omrøring blev tilsat yderligere 3,71 kg calciumcarbonat.

Efter at skumningen var ophørt, blev reaktionsblandingen pumpet til et dobbeltcylindret, dampopvarmet tørreapparat (over-20 fladetemperatur ca. 121°C). Pumpnings- og tørringstrinet krævede 35 minutter. Det tørrede produkt havde en lysebrun farve, og udbyttet var ca. 54 kg produkt.

- Eventuelt kan luft bobles gennem reaktionsblandingen for at fremme reaktionen af ascorbinsyren.

25 Prøver blev udført straks på 5,00 g prøver opløst i 500 ml destilleret vand.

Materiale opsamlet under tørreprocessen viste 400 mg vandfrit calciumascorbat pr. 500 mg ved standard-jodtitreringsteknik.

Den samme vandige opløsning viste pH 7,0.

I DK 175783 B1 I

I I

Η H

I

Η H

I I

I EKSEMPEL 2. I

I Det følgende eksempel beskriver kliniske prøver, som sammen- I

ligner produktet fra eksempel 1 (forsøgsmateriale) med L- I

I ascorbinsyre og citronsyre (placebo) ved måling af intra- 1 I

5 cellulære og serumascorbat-mængder, urinascorbat-produktion I

I og urinoxalat-udskillelse på forskellige tidspunkter efter I

indtagelse af standarddoser af forsøgspræparatet, L-ascorbin- I

I syre, og placebo. I

I Resumé af protokol. I

H 10 Der blev undersøgt 12 mænd i en alder fra 27 til 45 år. I

Alle blev instrueret om, at de skulle være på en kost med lav I

vitéuriin C-mængde i én uge før undersøgelsen (ingen citrusproduk- I

ter og ingen store mængder bladgrønsager). I

Efter faste natten over blev der taget blodprøver og 24 timers I

15 urinprøver. Hvide blodceller og 24 timers urinascorbat- og I

-oxalatmængder blev bestemt og sat i relation til serumascorbat- I

H niveauerne. I

De 12 masnd blev delt i tre grupper og fik givet følgende supple- I

H menter: I

I 20 (a) Forsøgsgruppe: 4000 mgX^pr. dag af produktet fra eksempel I

I I

(b) Ascorbatgruppe: 3000 mg L-ascorbinsyre pr. dag. I

(c) Citronsyregruppe: 3000 mg citronsyre pr. dag. I

H x) 4000 mg er askvi valent i ascorbat (jodprøve) med 3000 mg I

25 L-ascorbinsyre. I

H Alle 12 fortsatte på en kost med lavt indhold af vitamin C. I

Blodprøver blev taget på tidspunkterne 0, 4, 8 og 24 timer ef- I

ter morgenindtagelse af supplementerne. 24 timers ascorbat- og I

oxalatmasngder i urinen blev bestemt. I

9 i DK 175783 B1 !

Efter en udvaskningsperiode (varierende fra 2 dage til flere dage som følge af deltagernes arbejdssituation) blev grupperne skiftet over til et andet supplement som følger: (a) Forsøgsgruppe, til citratgruppe.

5 (b) Citratgruppe til ascorbatgruppe.

(c) Ascorbatgruppe til forsøgsgruppe.

Supplementer blev taget i samme mængde (4000 mg fra eksempel 1-produktet, 3000 mg L-ascorbinsyre og 3000 mg citronsyre) af alle tre grupper. Blodprøver blev igen udtaget på tidspunkter-10 ne 0/ 4, 8 og 24 timer fra indtagelsen. Orin blev også opsamlet efter 24 timer af alle 12 deltagere efter endt periode.

Igen blev alle prøver analyseret for deres respektive koncentration af ascorbat og oxalat.

Analytiske metoder.

15 De anvendte analytiske metoder er beskrevet i Clinical Chemistry, Principles and Techniques, redigeret af Richard J.Henry, Donald D.Cannon & James W.Windelman, Harper & Row, 1974, side 1393 -1398, Standard Method of Clinical Chemistry, J.S.Roe, redigeret af D.

20 Seligson, New York, Academic Press, 1961, bind 3, side 35.

Ved kvantificeringen af 24 timers urinoxalat blev en portion urin rystet med et adsorbent, der selektivt binder oxalatet. Den ekstraherede urin kasseres, og oxalatet elueres af adsorbenten med fortyndet alkali.

25 Oxalatet oxideres til hydrogenperoxid og carbondioxid med oxalat-oxydase..- Hydrogenperoxidet reagerer med 3-methyl-2-benzo-thiazolinonhydrazon (MBTH) og 3-(dimethylaraino)benzoesyre (DMAB) i nærværelse af peroxidase til dannelse af et indamin-farvestof med maksimal absorbans ved 590 nm.

I DK 175783 B1 I

1' 10 I

I Urinoxalatprøven er nærmere beskrevet i følgende litteratur: I

I A.Hodgekinson: Oxalic Acid in Voilogy and Medicine, Academic I

Press, New York, 1977. I

I W.D.Robertson, G.A.Chrystowski: Urinary Oxalate Excretion I

5 by Main Follcwing Ascorbine Acid Ingestion, Prog.Soc.Exp.Bil.Med. I

I 85:190, 1954. I

J.Costello: The Effect of Ascorbic Acid on Oxalate Metabolism I

I in Human Biochemistry and Clinical Pathology, redigeret af I

I G.A.Rose, W.G.Robertson & R.W.E.Watts,Proceedings of an Internatio- I

I 10 nal. Meeting in London 1971, side 270 - 273. I

I Resultaterne af denne kliniske undersøgelse er anført nedenfor: I

I TABEL 1. I

I I

% ændring i gruppe

I Serumascorbatniveau: Citrat L-ascorbinsyre Forsøg I

I 15 4'rde time 10 180,3 264,8 I

I 8'ende time 19,6 91,6 144,2 I

I 24'ende time 5,9 24,6 56,2 I

I 7’ende dag 45,3 102,5 I

Hvid blodcelle (:WBC)ascorbatniveau: I

I 20 4'rde time -40,5 34,1 38 I

I 8'ende time -21,2 -21,9 -6,80 I

I 24'ende time -6,3 -5,3 18,2 I

7'ende dag 27,6 30,5 I

24 timers urinascorbat: I

I 25 % ændring 27,7 2760,6 486,3 I

I mg/24 timer 43,65 314,5 252 I

(forts.) I

11 DK 175783 B1 % ændring** i gruppe 7'ende dag, urinascorbat: Citrat L-ascorbinsyre Forsøg % ændring 4583 617 mg/24 timer 459 321 24'ende time, urinoxalat: 5 % ændring 7 162 35,9 mg/24 timer 25,9 63,8 41,6 γ)

Stigning, med mindre andet er anført.

Konklusionerne draget af denne undersøgelse er:

Seruroascorbatniveau: 10 Efter 4, 8 og 24 timer og 7 dage senere havde forsøgsgrupperne højere serumascorbatniveau end både citratgruppen og L-ascorbin-syregruppen.

WBC-ascorbatniveau: i

Selv om alle 8 timers WBC-ascorbatgrupper viste et gennemsnitligt 15 fald, havde forsøgsgruppen det mindste procentiske fald. Målinger efter 4 timer og 24 timer og niveauet efter 7 dage viste, at forsøgsgruppen var i stand til at vedligeholde det højeste niveau af ascorbat i hvide blodceller.

24 timers WBC-ascorbat: 20 24 timer efter forskellige belastninger af citrat, L-ascorbin syre og forsøgsforbindelse giver lignende resultater. Både citratgruppen og L-ascorbinsyregruppen udviste et fald i WBC-ascorbatniveauer. Forsøgsgrupperne bevarede et meget højere niveau sammenlignet med grundlinien.

I DK 175783 B1 I

I I

7 dage efter belastning med L-ascorbinsyre og forsøqspræparat; I

I Den gennemsnitlige procentiske andring i WBC-ascorbat er endnu I

I højere i forsøgsgruppen end i L-ascorbinsyregruppen. I

I Produktion af urinascorbat efter 24 timer: I

I 5 Forsøgsgrupperne havde mindre ascorbatproduktion end citrat- I

I gruppen og L-ascorbatgruppen. I

I 7 dage - 24 timer, urinascorbatproduktion; I

Forsøgsgrupperne havde mindre ascorbatproduktion end citrat- I

gruppen og L-ascorbatgruppen. I

I 10 Urinoxalatproduktion efter 24 timer; I

I Oxalatproduktionen er meget nedsat i forsøgsgruppen sammenlignet I

med ascorbinsyregruppen. Dette betyder, at når man tager for- I

søgsproduktet som supplement, har en person mindre risiko for I

at danne oxalatholdige nyresten end en person, der tager L- I

15 ascorbinsyre. I

7 dage - 24 timer, oxalatproduktion: I

Forlænget supplement med forsøgsproduktet fører til mindre ud- I

skillelse af urinoxalat end supplement med L-ascorbinsyre. I

EKSEMPEL 3. I

20 Til en 2 liter reaktionsbeholder, udstyret med omrører og ter- I

mometer, sættes 30 ml destilleret vand og 440 g (2,5 mol) L- I

ascorbinsyre. Til denne omrørte opslæmning sættes portionsvis I

findelt calciumcarbonat med en sådan hastighed, at der skabes I

en konstant udvikling af carbondioxid {reaktionsbiprodukt), og I

13 DK 175783 B1 reaktionstemperaturen holdes på ca. 20°C. Tilsætningen af calciumcarbonat afbrydes, efter at ca. 25 - 37,5 g er blevet tilsat (repræsenterende fra ca. 20 til 30% af det, der kræves til fuldstændig reaktion med L-ascorbinsyren).

5 på dette tidspunkt hæves temperaturen til 80°C. Yderligere tilsætninger af calciumcarbonat påbegyndes, idet temperaturen holdes i intervallet 60 - ca. 70°C. Den samlede mængde tilsat calciumcarbonat er 125 g -(1,25 mol).

Reaktionsblandingen overføres til en lav beholder, der holdes 10 ved en temperatur mellem 60 og 80°C i en periode fra 12 til 36 timer, hvorunder blandingens pH-værdi stiger til intervallet 6,0-7,0. På dette tidspunkt fjernes overskydende vand under vakuum.

De tørre·produkter har en lysebrun farve og er let opløselige i 15 vand, med undtagelse af ureageret calciumcarbonat, og giver neutrale opløsninger.

EKSEMPEL 4.

Kliniske undersøgelser under anvendelse af produktet fra eksempel 3 giver lignende resultater som de i eksempel 2 anførte.

20 EKSEMPEL 5.

Produkterne fra eksempel 1 og 3 underkastes kvalitativ analyse som følger:

Efter frafiltrering af overskud af uopløseligt calciumcarbonat fjernes calciumascorbat fra produktet ved kromatografi, og rema-25 nensen underkastes kernemagnetisk resonansspektroskopi. Der blev udarbejdet sandsynlige muligheder for strukturerne af komponenterne påvist ved spektroskop!, og disse autentiske for-

I DK 175783 B1 I

I I

bindeiser blev så syntetiseret. Efter at der var taget NMR- I

I spektre af disse autentiske forbindelser, blev de sammenlignet I

med NMR-spektrene af forsøgsforbindelserne. Sammenfald af I

H spektrene blev anvendt til at identificere komponenterne af I

H 5 forsøgspræparaterne. I

H Den anvendte teknik var IH og 13C NMR. De identificerede I

aldonsyresalte er calciumsaltene af L-threonsyre, L-xylonsyre I

I og L-lyxonsyre. I

I EKSEMPEL 6. I

10 Fremgangsmåderne i eksempel 1 gentages med undtagelse af, at I

reaktionsdeltageren sat til ascorbinsyren ændres til at give I

tilsvarende forskellige salte af ascorbinsyre, som er ugiftige I

og spiselige i rimelig mængde: I

Reaktant Salt I

H

I 15 Natriumbicarbonat Natriumascorbat ^ I

Magnesiumcarbonat Magnesiumascorbat I

Kaliumbicarbonat Kaliumascorbat I

H Zinkoxid Zinkascorbat I

Disse produkter indeholder aldonsyresaltene svarende til dem, I

H 20 der er identificeret i eksempel 5. I

I EKSEMPEL 7. I

m

H Kvantitativ analyse af produkterne fra eksempel 1, 4 og 6 fore- I

tages. Produkterne har de viste sammensætninger: I

Γ~---- DK 175783 B1 15 Vægt%

Vandfrit metalascorbat 80-92

Ureageret metalreagens 0-7

Dehydroascorbinsyre 3-9

Fugtighed 1,5-4,5 5 Aldonsyrederivater 5-6

Aldonsyrederivaterne indbefatter derivater af den viste syre i følgende tilnærmede mængder i ovennævnte remanens:

Syre (derivat) Vægtdele

Threonsyre 8 10 Xylonsyre 3

Lyxonsyre 1

Der er tegn på, at noget af en eller flere af aldonsyrerne kan være bundet til hinanden eller til ascorbater, eller at ascorba-terne kan være bundne sammen.

15 EKSEMPEL 8.

Dyrefodringsundersøgelser med produktet fra eksempel 1 giver lignende resultater som undersøgelserne med mennesker i eksempel 2.

EKSEMPEL 9.

Fremgangsmåderne i eksempel 2 gentages med undtagelse af, at 20 forsøgsproduktet syntetiseres ved at blande calciumascorbat af reagenskvalitet med

Forsøg A - threonsyre (calciumsalt)

Forsøg B - xylonsyre (calciumsalt)

Forsøg C - lyxonsyre (calciumsalt)

I DK 175783 B1 I

I 16 I

I i samme vægtmængder som komponenterne fundet i eksempel 7. H

I Prøverne 1 eksempel 2 gentages under anvendelse af disse for- H

søgsforbindelser og under anvendelse af rent calciumascorbat I

I som yderligere kontrol.

I 5 Disse prøver bekræfter, at den fysiologiske aktivitet af det H

I blandede ascorbat-aldonsyreprodukt skyldes aldonkomponenten, H

I og at enhver af disse aldonkomponenter bevirker lignende for- H

I bedret absorption og tilbageholdelse af vitamin C-komponenten. H

I EKSEMPEL 10. H

I 10 Dette eksempel illustrerer praktisering af opfindelsen til for- H

bedring af absorption/tilbageholdelse af aspirin. H

I 16 albinorotter af Wistar-stammen, 8 hanner (242 - 333 g) og 8 H

I hunner (295 - 345 g), blev akklimatiseret i 7 dage før påbegyn- H

I delse af undersøgelsen. I denne periode blev rotterne fodret H

I 15 med Purina(R)-gnaverfoder, vandet ad libitum og opbevaret i H

I selvrensende, rustfrie stålbure. Dyrerummet blev holdt på H

I 21 - 1°C og 60 - 80% relativ fugtighed og havde en fotoperiode I

I på 12 timers lys og 12 timers mørke. H

I Rotterne blev tilfældigt delt i to grupper med 8 i hver (4 hanner j H

I 20 og 4 hunner) og anbragt i metabolisme-bure. Gruppe A fik U.S.P.- | H

I aspirin i en mængde på 54 mg pr. kg i 2,0 ml destilleret vand j H

I ved tvangsfodring. Gruppe AM fik U.S.P.-aspirin i en mængde af j H

I 54 mg pr. kg plus calciumthreonat (en metabolit af ascorbinsyre) H

I i en mængde af 15 mg pr. kg i 2,0 ml destilleret vand, ligeledes H

I 25 ved tvangsfodring. Blodprøver blev udtaget efter 1, 2, 3 og H

I 4 timer efter dosering med henblik på analyse for serumsalicylat. H

I Hvis der blev produceret urin, blev denne opsamlet i samme tids- H

I perioder, ligeledes med henblik på salicylat-analyse. I en be- H

I stræbelse på at maksimere urinproduktionen fik rotterne yderli- H

17 DK 175783 B1 gere vand efter 1, 2, 3 og 4 timer ved tvangsfodring (3 ml).

Blod og urin blev opsamlet og analyseret ved metoden ifølge Natleson [S.Natelson, Techniques of Clinical Chemistry, 3.udgave, side 649, Charles C.Thomas, pub. (1971)]. Undersøgelsen 5 blev afsluttet efter opsamlingen efter 4 timer.

Alle statistiske data blev beregnet via Statistical Analysis System (SAS Institute, Inc., box 8000, Cary, NC, 27511) software. ANOVA-metoden (model med gentagne målinger) blev anvendt for at bestemme forskelle i salicylatkoncentrationer mellem grupper.

10 Tabel 2 viser de faktiske serumsalicylatkoncentrationer for hvert dyr i både gruppe A og gruppe AM på hvert prøveudtagningstidspunkt. Gennemsnitsværdierne (X) og standardafvigelsen (SD) for hver gruppe og tid er anført. Figur 1 er en histogramfremstilling af dataene i tabel 2. Signifikansniveauet (P) af for-15 skellene mellem de to grupper på hver prøveudtagningstid_ i salicylatkoncentration i serum er anført ved siden af hvert sæt histogrammer. Figur 2 er serumsalicylatprofilen gennem tiden for begge grupper rotter, inklusive standardafvigelse.

Den første optagelseshastighed (gastrointestinal) er beregnet 20 ud fra den lineariserede kurve i den første time efter dosering. Urinsalicylatdata er ikke vist i enkeltheder, men vil blive diskuteret nedenfor. Grupperne er ikke delt op i hanner og hunner, fordi der ikke er nogen signifikant forskel i serumsalicylat i forhold til dyrenes køn.

I DK 175783 B1 I

I I

I TABEL 2. I

I Individuelle dyreserumsalicylatkoncentrationer (mg %) efter I

I i, 2, 3 og 4 timer i U.S.P-aspirin-gruppen (A) og D.S.P.- I

aspirin plus aldon-gruppen (AM): I

5 Gruppe A I

I Dyr nr. 1 2 3 4 timer I

I 1 1,4 7,1 4,3 6,4 I

I 2 7,1 9,3 4,6 3,6 I

I 3 5,0 7,4 7,9 x) I

I 10 4 6,7 7,4 10,7 x) I

I 5 3,1 6,4 x) x) I

I 6 4,0 x) x) x) I

7 6,7 11,4 11,1 7,1 I

I 8 5,7 11,4 12,1 8,6 I

I 15 X-.SD: 4,96-2,00 8,63±2,09 8,45-3,40 6,43^2,10 I

Gruppe AM I

I Dyr nr. 1 2 3 4 timer I

I 9 12,9 9,3 12,1 10,0 I

I 10 15,0 13,9 12,1 10,1 I

I 20 11 16,1 9,3 8,6 8,6 I

I 12 10,7 12,9 9,3 9,9 I

I 13 11,1 xx) xx) 11,4 I

I 14 13,6 7,9 15,7 15,7 . I

15 7,8 7,1 15,7 15,6 I

25 16 10,7 6,7 10,2 12,1 I

I X - SD: 12,24-2,69 9,59-2,8011,96-2,87 11,68-2,67 I

X = gennemsnit, SD = standardafvigelse. H

x) = død før 4 timer. H

I xx)= prøve tabt ved håndtering. H

19 DK 175783 B1

Det fremgår af dataene, at AM-gruppen havde en meget højere begyndelsesoptagelse eller absorption af U.S.P.-aspirin.

Denne gruppe havde en optagelseshastighed på 11,76 mg pr. time, medens gruppe A havde en meget langsommere optagelses-5 hastighed på 4,40 mg pr. time. Kurven for AM-gruppen er tofaset, som viser to processer. Den første del af kurven vedrører optagelsen eller absorptionen i det gastrointesti-nale område. Der er en accelereret optagelse i AM-gruppen sammenlignet med A-gruppen, og dette er klart ud fra de respek-10 tive serumprofiler. Den anden del af kurven vedrører fordelingen til andre legemsdele og nyreudskillelse. Forskellen i kurverne på dette punkt (2 timer) skyldes sandsynligvis nedsat salicylatudskillelse af nyren i AM-gruppen (U.S.P.-aspirin plus aldonforbindelse). Denne gruppe synes at nærme sig en 15 "steady state"-koncentration af salicylat på et højere niveau end U.S.P.-aspiringruppen, som aftager på dette tidspunkt.

Eliminationshastigheden i de to grupper er betydeligt forskellige. Eliminationshastigheden i gruppe A (beregnet ud fra logaritmen til toppen)-plasmakoncentrationen er 1,30 mg pr. time, 20 medens den i AM-gruppen er 0,05 mg pr. time. Denne eliminationshastighed er ca. 26 gange større uden tilstedeværelse af meta-bolitten.

Urinsalicylat-analyse viser en tendens, der viser, at mindre salicylat blev udskilt gennem tiden i AM-gruppen i forhold til 25 A-gruppen. I den første time efter dosering var urinen i gruppe A ca. 9,1 mg% og i AM-gruppen 5,0 mg%. Dette er i overensstemmelse med de højere serumniveauer i AM-gruppen og lavere niveauer i gruppe A.

Resultaterne bekræfter, at tilstedeværelse af metabolitten for-30 øger aspirinabsorption til at begynde med, idet den virker lokalt på de gastrointestinale epitelceller. Efterhånden som metabolitten selv bliver absorberet og vokser i koncentration i

I DK 175783 B1 I

I 20 I

I blodet, udøver den en hæmmende virkning på nyren. Denne virk- I

I ning resulterer i en nedsat udskillelse af aspirin af nyre- I

mekanismerne. En forsinkelsestid forventes, indtil hæmning I

I af nyreudskillelsen er tilvejebragt, og dette afspejles i fal-

I 5 det i AM-profilen efter 2 timer. Opsvinget mellem 2 og 3 ti- I

I mer skyldes så hæmningen af nyreudskillelsesprocessen og ' I

I fortsat absorption. I

I De forøgede serumsalicylatniveauer i AM-gruppen er mere resul- I

tatet af nedsat udskillelse end af forøget optagelse. AM- I

I 10 optagelseshastigheden var 2,67 gange større end A-optagelses- I

I hastigheden. AM-elimineringshastigheden var imidlertid 26 gan- I

I ge mindre end A-gruppens. Den nedsatte nyreudskillelse havde I

I derfor mere virkning på vedligeholdelse af serumsalicylat- I

I niveauer gennem tiden end forøget optagelseshastighed.

I 15 De foregående prøver viser, at tilsætningen af aldonforbindelsen I

I ikke blot forøger absorptionshastigheden af aspirin, men også I

I hæmmer det renale, organiske anion-transportsystem. Dette re- I

I suiterer i opretholdelse af aspirinblodniveauer i længere tid H

I ved at reducere elimineringshastigheden via udskillelsesproces- H

I 20 sen, som foregår i nyrernes proksimale tubuler. I

EKSEMPEL 11. I

I 180 hunde af varierende race og alder blev fodret med 3 x 30 mg I

I pr. kg af produktet fra eksempel 1. Alle hundene led af bevægel- I

I sesforstyrrelser. I

25 Virkningen af tilskuddet blev målt ved ændringer i de faktiske I

I symptomer, således som de ses ved en ny klinisk bedømmelse, og I

I ved ejerens rapport om dyrets tilstand. Virkningen blev målt I

I 7 dage efter tilskuddet og derpå igen efter 6 uger. Den sidste I

bedømmelse var efter mere end 6 måneder. I

21 DK 175783 B1

Diaqnoseqrupper:

En række forskellige lidelser blev behandlet, både akutte og kroniske. Ved akut sygdom, hvor symptomerne hurtigt ændres, er dét vanskeligt at skelne mellem virkningen af tilskud og 5 andre faktorer. Denne prøve vindersøgte derfor kun sygdomme, med kendt årsag, som forbliver permanent, hvor symptomerne havde været stabile gennem en periode, og hvor man ville antage, at de kunne fortsætte uden tilskud.

Der blev valgt dyr med følgende kroniske lidelser: ledskader 10 med sekundære permanente ændringer, artrose, spondylose, hofte- dysplasi, ældre diskusprolaps med sekundære permanente ændringer, muskelatrofi som følge af nedsat funktion og senile slidændringer i understøttelses- og bevægelsessystemet.

100 hunde er kvalificeret under ovennævnte kriterier. Alder 15 eller race blev ikke taget i betragtning ved denne rapport.

DK 175783 B1 I

22 I

TABEL 3. I

Antal hunde, der viste:

God Ringe I

forbedring/ forbedring/ I

fri for ingen I

symptomer virkning Totalt antal I

5 Efter 1 uge 75 (75%) 25 (25%) 100 (100%)

Efter 6 uger 79 (79%) 21 (11%) 100 (100%) I

Efter 6 måneder 65 (77,5%) 20 (22,5%) 85 (100%) I

Resultaterne med forskellige typer lidelser er: I

Haltning og smerte forårsaget af hofte-dysplasi: I

10 Efter 1 uge 32 (72%) 13 (28%) 45 (100%)

Efter 6 uger 35 (78%) 10 (22%) 45 (100%) I

Spondylose og ryg-prolaps: I

Efter 1 uge 13 (76,5%) 4 (23,5%) 17 (100%)

Efter 6 uger 13 (76,5%) 4 (23,5%) 17 (100%) I

15 Artrose-ændringer: I

Efter 1 uge 30 (79%) 8 (21%) 38 (100%) I

Efter 6 uger 31 (81,6%) 7 (18,4%) 38 (100%)

Dette eksempel viser, at produktet fra eksempel 1 givet oralt I

giver symptomatisk lindring af smerten ved kroniske deforme rings- I

20 forandringer i leddet og skeletsystemet i de fleste tilfælde i I

denne gruppe patienter. Hverken calciumascorbat alene eller L- I

ascorbinsyre alene giver en sådan lindring. I

EKSEMPEL 12. I

10 albinorotter af Wistar-stammen, hanner (375 - 411 g), blev ak- I

25 klimatiseret i 7 dage før påbegyndelse af undersøgelsen. I den- I

ne periode blev rotterne fodret med Purina(R)-gnaverfoder, van- I

det ad libitum og opbevaret i selvrensende, rustfrie stålbure. I

23 DK 175783 B1

Dyrerummet blev holdt på 21°C - 1°C og 60 - 80% relativ fugtighed og havde en fotoperiode på 12 timers lys og 12 timers mørke.

Rotterne blev tilfældigt fordelt i to grupper på 5 hver og an-5 bragt i Nalgene(R)-bure. Gruppe A fik U.S.P.-piroxicam i en mængde af 0,6 mg pr. kg, og gruppe AM fik U.S.P.-piroxicam i en mængde af 0,6 mg pr. kg plus calciumthreonat i en mængde af 15 mg pr. kg ved tvangsfodring. Plasmaprøver blev taget efter 4, 6, 8 og 10 timer efter dosering med henblik på analyse for 10 plasma-piroxicam.

Selektiv HPLC blev anvendt til at.analysere piroxicam, og dataene blev analyseret via SAS. ANOVA-metoden med gentagne målinger blev anvendt til at bestemme forskelle i plasma-piroxicam-koncentrationer mellem grupperne.

15 Tabel 4 viser de faktiske plasmakoncentrationer for hvert dyr i gruppe A og AM på hvert prøveudtagningstidspunkt. Gennemsnitsværdierne (X) for hver gruppe og tid er anført. Figur 3 er plasmaprofilen af dataene i tabel 4.

Den første stigning i plasmaniveauerne af piroxicam er væsent-20 ligt større i AM-gruppen end i A-gruppen. Der er en stigning til det dobbelte i top-niveauerne af piroxicam-plasma i AM-gruppen efter 4 timer. Disse niveauer begynder derefter at falde gennem 6 timers-punktet og nærmer sig A-gruppen efter 8 timer. AM-plasmaniveauerne begynder imidlertid at stige igen 25 efter 8 timer. Det er klart, at der er en virkning af threona-tet på piroxicam-plasmaniveauerne. Statistiske forskelle fandtes gennem 10 timers-perioden at være p 50,07. Dette er en stærk indikation for, at der sker en threonat-virkning.

I DK 175783 B1 I

I 24 I

I TABEL 4. I

B Plasma-piroxicamkoncentration (Aag/ml): I

I Timer I

I Dyr nr. 4 6 8 10 I

5 Gruppe A: I

l 2,2 ‘2,1 1,7 2,0 I

I 2 1,9 1,7 1,9 1,4 I

I 3 1,5 1,5 x) x) I

I 4 2,1 2,0 1,9 1,7 I

I 10 5 1,1 1,0 1,6 2,0 I

I X: 1,8 1,7 1,8 1,8 I

Gruppe AM:

I 6 3,1 1,2 1,4 0,9 I

I 7 2,2 2,0 1,8 1,6 I

I 15 8 5,9 4,8 3,1 5,6 I

I 9 1,3 1,0 0,8 0,6 I

I 10 3,3 2,7 2,5 2,3 I

I X: 3,2 2,3 1,9 2,2 I

Gruppe A: U.S.P.-piroxicam (0,6 mg/kg). I

B Gruppe AM: U.S.P.-piroxicam (0,6 mg/kg), threonat (15 mg/kg). I

B 20 x) Død under undersøgelsen. I

I EKSEMPEL 13. I

B ____________ v I

B 10 albinorotter af Wistar-stammen, hanner (420 - 456 g), blev I

B akklimatiseret i 7 dage før påbegyndelse af undersøgelsen. I I

B denne periode blev rotterne fodret med Purina(R)-gnaverfoder, I

B 25 vandet ad libitum og opbevaret i selvrensende, rustfrie stål- I

B bure. Dyrerummet blev holdt på 21°C - 1°C og 60 - 80% relativ I

25 DK 175783 B1 j fugtighed og havde en fotoperiode på 12 timers lys og 12 timers mørke. | i i !

Rotterne blev tilfældigt fordelt i to grupper på 5 hver. Gruppe j A-rotterne blev tvangsfodret dagligt i 3 dage med 1,0 ml destil-5 leret vand før påbegyndelse af undersøgelsen. Gruppe AM-rotterne blev tvangsfodret dagligt med 15 mg/kg/ml calciumthreonat i 3 dage. Threonatdoseringerne blev korrigeret dagligt for stigninger i legemsvægt for at sikre, at dosen på 15 mg/kg blev opretholdt.

10 På dag 4 blev gruppe A-rotterne tvangsfodret med piroxicam i en mængde af 0,6 mg pr. kg og gruppe AM-rotterne med 0,6 mg/kg piroxicam og 15 mg/kg threonat. Plasmaprøver blev udtaget efter 4, 6, 8 og 10 timer efter dosering med henblik på analyse af plasma-piroxicam.

15 Selektiv HPLC blev anvendt til at analysere piroxicam. Dataene blev analyseret statistisk ved SAS-måden. ANOVA-metoden med gentagne målinger blev anvendt til at bestemme forskelle i plasma-piroxicamkoncentrationer mellem grupperne.

Tabel 5 viser de faktiske plasma-piroxicamkoncentrationer for 20 hvert dyr i gruppe A og AM (metabolit-forbehandling). Gennemsnitsværdierne (X) for hver gruppe på hvert tidspunkt er anført. Figur 4 er plasmaprofilen konstrueret ud fra dataene i tabel 5.

i

Det er på baggrund af plasmaprofilerne klart, at AM-forbehand-lingsgruppen havde betydeligt højere piroxicam-plasmaniveauer 25 end den ubehandlede gruppe. AM-gruppen havde højere optagelseshastighed og bevarede højere plasmaniveauer i perioden på 10 timer. Forskellen er i gennemsnit ca. 60% højere plasmaniveauer i AM-gruppen. Disse højere niveauer er statistisk signifikante ved p5: 0,05.

30 Forbehandling med calciumthreonat forøgede betydeligt og bevare- de plasmaniveauerne af piroxicam (Feldene) i 10 timers-perioden.

I DK 175783 B1 I

I 26 I

I TABEL 5. I

I Piroxicam-plasmakoncentration Qug/ml): I

Timer I

I Dyr nr. 4 6 8 10 I

I Gruppe A: I

I 5 1 2,1 1,8 1,7 1,4 I

2 1,1 1,0 0,6 0,6 I

I 3 1,5 1,4 1,3 1,1 I

I 4 0,8 0,7 0,7 0,6 I

I 5 1,1 1,6 1,1 1,0 I

I 10 X: 1,3 1,3 1,1 0,9 I

I Gruppe AM: I

I 6 2,4 2,3 1,7 1,4 I

I 7 2,2 1,7 1,6 1,7 I

I 8 2,0 1,7 1,9 1,5 I

15 9 1,9 2,3 1,4 1,0 I

I 10 1,4 1,1 0,9 0,8 I

X: 1,9 1,8 1,5 1,2 I

Gruppe A (ingen forbehandling): Dag 4: 0,6 mg/kg U.S.P.- I

piroxicam. I

I 20 Gruppe AM (forbehandling): Dag 1-3: 15 mg/kg metabolit . I

Dag 4: 0,6 mg/kg.U.S.P.-piroxicam I

·+ 15 mg/kg threonat. I

I EKSEMPEL 14. I

Η I

25 cm T-kolber, indeholdende 3T3-musefibroblaster, blev inku-

25 beret med 100 mg% (1 mg/ml) calcium-L-threonat (pH 7,4) i I

1 time ved 37°C. En kontrolgruppe blev inkuberet med Riner's ! I

H som kontrol. I

DK 175783 B1 27

Inkubationsvæsken blev fjernet, og 1,25 mg% ascorbinsyre blev 14 sat til hver kolbe. (Der blev tilsat 5 /il C L-ascorbinsyre, 10,0 mCi/mmol, 0,05 mCi/ml). pH-værdien blev indstillet til 7,62, og kolberne blev holdt på 37°C i 20 minutter.

5 Kolberne blev derefter vasket med 4 ml HBSS(-) og blev så tryp-sineret med 0,1 ml trypsin-EDTA i 5 minutter. Cellerne blev gensuspenderet i 4 ml iskold HBSS(-) for at, standse den enzymatiske reaktion. Cellerne blev centrifugeret i 10 minutter ved 1000 G. Cellerne blev så vasket og gensuspenderet i 4 ml HBSS(-).

10 Cellerne blev igen centrifugeret (10 minutter, 1000 G), gensuspenderet i 1,0 ml destilleret H20 og sonikeret i 90 sekunder.

14 ' 0,5 ml af hver prøve blev anvendt til at tælle C, og 0,5 ml blev anvendt til proteinanalyse under anvendelse af Bradford-metoden.

15 Optagelsen af ^C i cellerne blev beregnet og gav følgende resultater: TABEL 6.

Kolbe ft DPM/jug Optagelses forhold

Calcium- 3.5.15 0,835 1,30 20 L-threonat 3.5.5 1,341 2,09 3.5.1 1,384 2,16

Kontrol 3.5.10 0>697 1,09 3.5.7 0,626 0,976 3.5.8 0,601 0,937 25 Gennemsnit (calcium-L-threonat):1,19 1,86

Gennemsnit (Ringer’s): 0,641 1,00 _ ___

I DK 175783 B1 I

I 28 I

I 14 I

Optagelsen af C-L-ascorbinsyre var således 1,86 gange større

I i cellerne fra kolberne indeholdende threonatet end i cellerne I

I indeholdende.kontrolopløsningen. Disse resultater er stati- I

I stisk signifikante (Student's T-test, α = 0,05). Disse resul- I

I 5 tater er vist grafisk på figur 5. I

I

Claims (5)

1. Terapeutisk middel, kendetegnet ved, at det omfatter (a) en terapeutisk aktiv forbindelse, der har j (i) en molekylvægt under ca. 5.000, (ii) en sur, funktionel gruppe og en pKa S 6 ved en 10 fysiologisk pH-værdi på 7,4 , og (iii) som normalt elimineres umetaboliseret via nyrernes tubulære udskillelseskanal for organiske anioner, og (b) mindst én forbindelse valgt af gruppen bestående af L-15 threonsyre, L-xylonsyre og L-lyxonsyre, og de spiselige, ugiftige salte, aldonolactoner og aldonolactider, deraf.

2. Middel ifølge krav 1, hvori den terapeutisk aktive forbindelse er aspirin. 20

3. Middel ifølge krav 1, hvori den terapeutisk aktive forbindelse er piroxicam.

4. Middel ifølge krav 1, til anvendelse i behandling af inflammatoriske sygdomme, virale eller bakterielle infektioner, kramper eller hypertension. 25

5. Anvendelse af mindst en forbindelse valgt blandt gruppen bestående af L- ! threonsyre, L-xylonsyre og L-lyxonsyre, og de spiselige, ugiftige salte, aldonolactoner i og aldonolactider deraf i kombination med en forbindelse, som har vitamin C aktivitet 3 o til fremstilling af et lægemiddel til behandling af inflammatoriske sygdomme. i 35