DE69832715T2

DE69832715T2 - Cyclin-abhängige-kinase inhibierende purinderivate

Info

Publication number: DE69832715T2
Application number: DE69832715T
Authority: DE
Inventors: Roger John Griffin; Alan Hilary Calvert; Nicola Jane Curtin; David Richard Newell; Bernhard Thomas Golding; Anne Jane ENDICOTT; Edward Martin NOBLE; Francis Thomas Boyle; Philip John Jewsbury
Original assignee: Cancer Research Technology Ltd
Current assignee: Cancer Research Technology Ltd
Priority date: 1997-07-12
Filing date: 1998-07-10
Publication date: 2007-01-11
Anticipated expiration: 2018-07-11
Also published as: US6303618B1; EP1017394B1; WO1999002162A9; DE69832715D1; ES2253821T3; JP2001509483A; EP1017394A1; AU8234298A; CA2294244A1; WO1999002162A1; ATE311884T1; AU744986B2

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft bestimmte Purinderivate, die in biologischen Systemen eine Aktivität als Inhibitoren der cyclinabhängigen Kinase (CDK) zeigen und die demgemäß als potenziell nützliche therapeutische Mittel von Interesse sind, die in pharmazeutische Zusammensetzungen oder Formulierungen einbezogen werden können, welche zur Kontrolle bzw. Steuerung oder Inhibierung des Zellwachstums oder der Zellproliferation in Säugern, z.B. im Zusammenhang mit einer Antitumor- oder Krebsbehandlung, verwendet werden.
Cyclinabhängige Kinasen (CDK's) sind eine Familie von Enzymen, die Komplexe mit anderen aktivierenden Proteinen bilden, die als Cycline bekannt sind, um regulatorische Schlüsselfaktoren bereitzustellen, die an der Kontrolle bzw. Steuerung des Wachstums und der Teilung in Tierzellen beteiligt sind. Insbesondere wird die Progression von Tierzellen durch den Zellteilungszyklus (G1-, S-, G2- und M-Phase) durch die aufeinander folgende Bildung, Aktivierung und anschließende Inaktivierung einer Reihe von CDK/Cyclin-Dimerkomplexen reguliert, welche den Durchgang durch Zellzykluskontrollpunkte und Übergänge zwischen aufeinander folgenden Phasen des Zellzyklus kontrollieren bzw. steuern, wobei die CDK's als katalytische Untereinheiten der Komplexe wirken.
Es gibt eine Anzahl verschiedener Cyclinproteine, die wie die verschiedenen CDK's eine relativ entfernt verwandte Familie von CDK-aktivierenden Proteinen bilden. Verschiedene CDK/Cyclin-Komplexe wirken bei verschiedenen Stufen des Zellzyklus mit einer aufeinander folgenden Zunahme und Abnahme der Cyclinexpression während des Zellzyklus, wobei der Cyclinabbau während der M-Phase üblicherweise ein wichtiger Faktor bei der Bestimmung einer geordneten Zellzyklusprogression ist. Folglich wird angenommen, dass eine Progression von der G1- zur S-Phase in Säugerzellen in erster Linie durch die cyclinabhängigen Kinasen CDK2, CDK3 und CDK4 (und in manchen Zellen möglicherweise auch durch CDK6) zusammen mit mindestens den Cyclinen D und E reguliert wird, wobei die Komplexe von CDK2 und CDK4 (und möglicherweise CDK6) mit Cyclinen des D-Typs insbesondere eine wichtige Rolle bei der Kontrolle bzw. Steuerung der Progression durch den G1-Beschränkungs punkt spielen, während die CDK2/Cyclin E-Komplexe zur Herbeiführung des Übergangs von der G1-Phase in die S-Phase essentiell sind. Sobald der Eintritt in die S-Phase erfolgt ist, wird angenommen, dass eine weitere Progression und ein Eintritt in G2 dann aktivierte Komplexe von CDK2 mit einem anderen Cyclin erfordert, das als Cyclin A bezeichnet wird, d.h. die Komplexe CDK2/Cyclin A. Schließlich sind für den Übergang von der G2-Phase in die M-Phase und die Initiierung der Mitose aktivierte Komplexe der mit CDK1 (auch als Cdc2 bekannt) bezeichneten cyclinabhängigen Kinase mit einem als Cyclin B bezeichneten Cyclin (und auch Komplexe von CDK1 mit Cyclin A) erforderlich.
Im Allgemeinen umfasst die Kontrolle bzw. Steuerung des Zellzyklus und die Aktivität von CDK's eine Reihe von stimulatorischen und inhibitorischen Phosphorylierungs- und Dephosphorylierungsreaktionen, und wenn sie ihre regulatorischen Funktionen ausüben, nutzen die CDK/Cyclin-Komplexe, wenn sie aktiviert werden, ATP als Substrat, um verschiedene andere Substratzellproteine, üblicherweise an Serin- und Threoningruppen davon, zu phosphorylieren. Die Kontrolle bzw. Steuerung des Zellzyklus kann auch Inhibitoren der CDK/Cyclin-Komplexe umfassen, welche die katalytische Funktion dieser Enzyme blockieren, so dass der Zellzyklus zum Stillstand kommt. Bestimmte natürliche Inhibitoren, wie z.B. die inhibitorischen Proteine, die als p16 und p21 bekannt sind, können die Progression des Zellzyklus durch selektives Binden an CDK/Cyclin-Komplexe, um diese zu inaktivieren, blockieren.
Die Kontrolle bzw. Steuerung durch Inhibitoren der CDK-Funktion kann daher einen weiteren Mechanismus zur Kontrolle bzw. Steuerung der Zellzyklusprogression bereitstellen, und dies hat zu Vorschlägen zur Verwendung von CDK-Inhibitoren als antiproliferative therapeutische Mittel, z.B. in der Tumortherapie, geführt, um anomale proliferierende Zellen zielgerichtet anzusteuern und einen Stillstand der Zellzyklusprogression zu bewirken. Dies schien besonders zweckmäßig zu sein, da es bekannt ist, dass schwere Störungen der Zellzyklusprogression oder Unregelmäßigkeiten bei der Zellzyklusprogression häufig in menschlichen Tumorzellen vorkommen, die häufig von einer Überexpression von CDK's und anderen damit zusammenhängenden Proteinen begleitet sind. Auch verglichen mit etablierten cytotoxischen Antitumorarzneistoffen hätte die Verwendung von Inhibitoren der Zellproliferation, die durch CDK's wirken, den Vorteil, dass eine direkte Wechselwirkung mit DNA vermie den wird, wodurch ein vermindertes Risiko einer Sekundärtumorentwicklung erhalten wird.
Die potenziellen therapeutischen Anwendungen und andere mögliche Verwendungen haben demgemäß zu einer Suche nach weiteren chemischen Inhibitoren von CDK's, insbesondere nach selektiven Inhibitoren geführt, die für eine pharmazeutische Verwendung geeignet sind. Die inhibitorische Aktivität und Selektivität ausgewählter CDK/Cyclin-Komplexe wird im Allgemeinen durch Messen der Kinaseaktivität bei der Phosphorylierung des Proteins Histon H1 (einer der Hauptproteinbestandteile von Chromatin, das im Allgemeinen ein gutes CDK-Substrat bereitstellt) in der Gegenwart des vermuteten getesteten Inhibitors getestet. Eine Anzahl von Verbindungen mit potenziell geeigneten CDK-inhibitorischen Eigenschaften, die auf diese Weise identifiziert worden sind, sind in einem Übersichtsartikel mit dem Titel „Chemical Inhibitors of cyclin-dependent kinases" von Laurent Meijer, veröffentlicht in Cell Biology (Band 6), Oktober 1996, beschrieben, dessen Inhalt in diese Beschreibung unter Bezugnahme einbezogen wird. Unter den Verbindungen, die in dem vorstehend genannten Artikel beschrieben werden, ist ein stark wirksames CDK1- und CDK2-inhibierendes Adeninderivat 2-(2-Hydroxyethylamino)-6-benzylamino-9-methylpurin mit der Bezeichnung „Olomoucin", und auch ein eng verwandtes Analogon, das Modifizierungen an den Positionen 2, 6 und 9 umfasst, nämlich 6-(Benzylamino)-2(R)-[{1-(hydroxymethyl)propyl}amino]-9-isopropylpurin. Diese letztgenannte Verbindung wird als „Roscovitin" bezeichnet und ist als CDK-Inhibitor noch stärker wirksam als Olomoucin. Die starken, aber selektiven CDK-inhibitorischen Eigenschaften von Olomoucin wurden als erstes in einem Artikel von J. Vesely et al. mit dem Titel „Inhibition of cyclin-dependent kinases by purine analogues", Eur. J. Biochem. 224, 771-786 (1994) beschrieben, und weitere Studien bezüglich CDK-inhibitorischer Eigenschaften einer Reihe von Purinverbindungen in der Form von Adeninderivaten, einschließlich Olomoucin und Roscovitin, sind in einem Artikel von L. Havlicek et al. mit dem Titel „Cytokinin-Derived Cyclin-Dependent Kinase Inhibitors: Synthesis and cdc2 Inhibitory Activity of Olomoucine and Related Compounds", J. Med. Chem. (1997) 40, 408-412, beschrieben und werden darin diskutiert. Auch der Inhalt dieser Veröffentlichungen wird unter Bezugnahme in diese Beschreibung einbezogen.
Es wurde gezeigt, dass sich die inhibitorische Aktivität sowohl von Olomoucin als auch von Roscovitin aufgrund der Wirkung dieser Verbindungen als kompetitive Inhibitoren für die ATP-Bindung ergibt. Es sollte beachtet werden, dass mindestens bezüglich Olomoucin berichtet worden ist, dass es einen vollständigen Mangel an inhibitorischer Aktivität bezogen auf viele gewöhnliche, von CDK's verschiedenen Kinasen aufweist. Die Selektivität manifestiert sich ferner durch die Tatsache, dass sowohl Olomoucin als auch Roscovitin die Aktivität von CDK1, CDK2 und CDK5 inhibieren, wobei jedoch gefunden wurde, dass sie gegen CDK4 oder CDK6 nicht aktiv sind.
Insbesondere bei Olomoucin wurde davon ausgegangen, dass es eine Lead-Verbindung zur Unterstützung bei der Identifizierung und Gestaltung weiterer CDK-Inhibitoren auf Purinbasis bereitstellt, und auf der Basis von Struktur/Aktivitätsstudien wurde in dem vorstehend genannten Artikel von Vesely et al. vorgeschlagen, das eine N9-Substitution durch einen hydrophoben Rest, wie z.B. Methyl, 2-Hydroxyethyl oder Isopropyl z.B. zur Bereitstellung einer direkten hydrophoben Wechselwirkung mit der CDK wichtig ist und dass eine Seitenkette an C2 essentiell ist. Entsprechend wurde in dem Artikel von Havlicek et al. neben der Beobachtung, dass bei Purinverbindungen, um eine CDK-inhibitorische Aktivität aufzuweisen, die 1- und die 7-Position, und gegebenenfalls die 3-Position des Purinrings frei bleiben muss, um eine Wasserstoffbrückenbindung zu ermöglichen, auch festgestellt, dass eine polare Seitenkette an der 2-Position essentiell zu sein scheint und dass eine N9-Substitution durch einen hydrophoben Rest für ein positives Binden möglicherweise ebenfalls wichtig ist. Die Positionen 2, 6 und 9 in dem Purinring wurden als diejenigen Positionen identifiziert, die das Binden an CDK1 kontrollieren bzw. steuern.
In dem Übersichtsartikel von Meijer wird auch erwähnt, dass als Ergebnis einer Kristallisation von CDK-Inhibitor-Komplexen und insbesondere von Cokristallisationsstudien mit CDK2 gefunden wurde, dass Inhibitoren wie z.B. Olomoucin und Roscovitin in der ATP-Bindungstasche lokalisiert sind, die sich in der Spalte zwischen dem kleinen und dem großen Lappen des CDK-Proteinmoleküls befinden, und dass die Spezifität möglicherweise durch Abschnitte der Inhibitormoleküle bereitgestellt wird, die mit den Kinasen außerhalb der ATP-Bindungsstellen eine Wechselwirkung eingehen.
Die vorliegende Erfindung wurde aufgrund einer Beobachtung entwickelt, die im Verlauf des Testens verschiedener Guaninderivate bezüglich der Aktivität als Inhibitoren des DNA-Reparaturproteins O⁶-Methylguanin-DNA-methyltransferase (MGMT) gemacht wurde, als in unerwarteter Weise gefunden wurde, dass, obwohl die Verbindung O⁶-Cyclohexylmethylguanin eine sehr geringe Aktivität als MGMT-Inhibitor aufwies, diese dennoch cytotoxisch war und eine sehr hohe inhibitorische Aktivität bezüglich CDK1 (cdc2)/Cyclin B-Komplexen zeigte, die mit derjenigen von Olomoucin vergleichbar war. Dies war insbesondere bezüglich des vorstehend diskutierten Hintergrunds im Hinblick auf Olomoucin überraschend, und zwar deshalb, weil diese Guaninverbindung weder an der 2-NH₂-Position noch an der 9-Position des Purinrings Substituenten aufweist und der Ersatz von 6-NH durch 6-O die Verbindung zu ATP weniger ähnlich machte, von dem angenommen wird, dass es mit Olomoucin zumindest um Bindungsstellen konkurriert.
Nachfolgend wurden andere Guaninderivate identifiziert, die näher mit O⁶-Cyclohexylmethylguanin als mit Verbindungen wie z.B. Olomoucin und Roscovitin verwandt sind, und die eine signifikante CDK-inhibitorische Aktivität zeigen, und kristallographische Studien haben gezeigt, dass Komplexe von CDK2 (zu CDK1 mindestens bezüglich der katalytischen Bindungsstelle homolog) mit Guaninderivaten wie z.B. O⁶-Cyclohexylmethylguanin und O⁶-Cyclohex-1-enylmethylguanin in einer von Komplexen von CDK2 mit Olomoucin verschiedenen Weise aneinander binden.
Dies ist in den beigefügten Zeichnungen veranschaulicht, wobei
1 ein Diagramm ist, das die Art und Weise zeigt, in der Olomoucin an CDK2 bindet,
2 ein entsprechendes Diagramm ist, das die Art und Weise zeigt, in der gefunden wurde, wie die Verbindung O⁶-Cyclohexylmethylguanin an CDK2 bindet, und
3 ein Diagramm ist, das eine Kristallstruktur darstellt, welche die Art und Weise zeigt, in der gefunden wurde, wie die R-enantiomere Form der Verbindung O⁶-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-methoxy)guanin an CDK2 bindet.
Während es bei Olomoucin die polare Seitenkette von N2 des Purinrings ist, die sich innerhalb der ATP-Ribose-Bindungstasche des CDK2-Proteins befindet, und der N9-Methylsubstituent in einer separaten Tasche mit hydrophober Spezifität sitzt, wobei N7 und 6-NH an der Wasserstoffbrückenbindung an das Protein beteiligt sind, ist es in dem in der 2 veranschaulichten Bindungsmodus der Cycloalkylring des Substituenten an der 6-Position, der in der ATP-Ribose-Bindungstasche sitzt, während Wasserstoffbrückenbindungen zu N9, N3 und 2-NH ausgebildet sind. Mit anderen Worten: Die Orientierung verglichen mit dem Binden von Olomoucin ist vollständig umgekehrt. Eine entsprechende Situation wird mit dem in der 3 veranschaulichten Bindungsmodus erhalten, bei dem auch die Beteiligung einiger Wassermoleküle gezeigt ist.
Demgemäß ist klar, dass es wahrscheinlich ist, dass die Schlüsse, die bezüglich der Struktur/Aktivitätsbeziehungen in der Adeninreihe von Verbindungen, wie z.B. Olomoucin und Roscovitin, gezogen wurden, nicht mehr für alle Purinderivate, insbesondere Guaninderivate, gelten.
Die Verbindungen, welche die vorliegende Erfindung betrifft, sind in erster Linie reine Purinverbindungen, die eine inhibitorische Aktivität bezüglich mindestens einiger CDK's aufweisen und die anstelle der in der 1 gezeigten Weise in der in der 2 (oder der 3) gezeigten Weise binden. Obwohl einige dieser Verbindungen bereits als solche bekannt sind, war nicht bekannt, dass sie ein Vermögen als CDK-Inhibitoren aufweisen. In einigen Fällen wurde gefunden, dass diese inhibitorische Aktivität eine Selektivität bezüglich verschiedener CDK's aufweist, die sich stark von der Selektivität von Olomoucin unterscheidet, und die vorliegende Erfindung hat tatsächlich eine neue Klasse von CDK-Inhibitoren identifiziert und den Bereich von Verbindungen, die zur Verwendung als CDK-Inhibitoren zu Verfügung stehen, beträchtlich erweitert.
In einem Aspekt stellt die vorliegende Erfindung demgemäß pharmazeutische Zusammensetzungen zur Behandlung von Zellproliferationsstörungen in Säugern, wie z.B. Tumoren, bereit, wobei die Zusammensetzungen als Wirkstoff eine CDK-inhibierende Purinverbindung mit der nachstehenden Strukturformel I
enthalten, wobei in bevorzugten Ausführungsformen
X O, S oder CHR_x ist, wobei R_x H oder C_1-4-Alkyl ist;
D ein Halogenatom oder NZ₁Z₂ ist, wobei Z₁ und Z₂ jeweils unabhängig H oder C_1-4-Alkyl oder C_1-4-Hydroxyalkyl sind;
A aus H, C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkoxy, Hydroxy, CH₂(CH₂)_nOH (n = 1 bis 4) und NR_a1R_a2 ausgewählt ist, wobei R_a1 und R_a2 jeweils unabhängig H oder C_1-4-Alkyl sind;
B aus H, C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkoxy, CF₃, einer gegebenenfalls substituierten Arylgruppe (z.B. Phenyl) oder einer gegebenenfalls substituierten Aralkylgruppe (z.B. Benzyl) und einer Hydroxygruppe, die ein C=O-Tautomer bereitstellt, ausgewählt ist; und
Y ein gegebenenfalls substituierter 4- bis 8-gliedriger carbocyclischer oder heterocyclischer Ring ist.
In manchen Fällen kann jedoch Y eine gegebenenfalls substituierte lineare oder verzweigte Kohlenwasserstoffkette, insbesondere eine Kette umfassen, die eine Doppelbindung enthält, wie z.B. ein Allylderivat, auf das nachstehend Bezug genommen wird.
Es gibt einen breiten Bereich von Substituenten, von denen es wahrscheinlich ist, dass sie als Y geeignet sind, so lange der Substituent in die ATP-Ribose-Bindungstasche eines CDK-Proteins passt oder darin sitzt und ein Binden in der anstelle in der 1 in der 2 gezeigten allgemeinen Weise ermöglicht. In manchen Fällen kann es jedoch bezüglich Y hilfreich sein, wenn es eine Ringstruktur umfasst, die polare Hydroxylsubstituenten oder dergleichen umfasst.
In Ausführungsformen, die Verbindungen als solche betreffen, wird Y ein Cycloalkan- oder Cycloalkenring sein, vorzugsweise ein 5- oder 6-gliedriger Ring mit bis zu zwei Doppelbindungen. Ein oder zwei Kohlenstoffatome in dem Ring können jedoch durch Heteroatome oder -gruppen, insbesondere durch O, S, NR' (wobei R' H oder C_1-4-Alkyl ist), oder in einem Cycloalkenring, durch -N= ersetzt sein. Wenn der Ring substituiert ist, wird der Substituent oder jeder Substituent (an jedweder Position) vorzugsweise aus H, C_1-4-Alkyl, OH, C_1-4-Alkoxy, Halogen, CF₃, CN, N₃ und NR_y1R_y2 ausgewählt, wobei R_y1 und R_y2 jeweils unabhängig H oder C_1-4-Alkyl sind. Darüber hinaus können in dem Fall, bei dem zwei Substituenten an benachbarten Atomen des Rings vorliegen, wie z.B.
diese Substituenten P und Q unter Bildung einer zusätzlichen anellierten Ringstruktur, wie z.B. eines 4-, 5- oder 6-gliedrigen carbocyclischen oder heterocyclischen Rings verknüpft sein. Diese zusätzliche Ringstruktur kann z.B. bis zu zwei Heteroatome oder -gruppen, wie z.B. O, S oder NH, enthalten und sie kann auch durch einen oder mehrere Substituenten substituiert sein, wie z.B. (eine) C_1-4-Alkylgruppe oder -gruppen oder eine Phenylgruppe oder substituierte Phenylgruppe. In einigen Ausführungsformen kann Y auch Adamantyl sein.
Beispiele für die Ringstrukturen, die durch Y dargestellt werden, umfassen
worin V und W jeweils unabhängig aus O, S, NR' (R' ist H oder C_1-4-Alkyl) und CH₂ (oder =CH-) ausgewählt sind, und R₁ und R₂ jeweils H oder C_1-4-Alkyl sind.
Wie es vorstehend angegeben worden ist, können diese Ringstrukturen gegebenenfalls Substituenten aufweisen, die gleich oder verschieden sein können und unter anderem aus H, C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkoxy, -OH, NR_y1R_y2 (wobei R_y1 und R_y2 jeweils unabhängig H oder C_1-4-Alkyl sind), CF₃, Halogen, N₃, CN, gegebenenfalls substituiertem Aryl (z.B. Phenyl) und gegebenenfalls substituiertem Aralkyl (z.B. Benzyl) ausgewählt werden können. Wie es bereits angegeben worden ist, kann es bezüglich der Ringstruktur manchmal nützlich sein, dass sie eine Mehrzahl von polaren Substituenten, wie z.B. Hydroxyl, enthält.
Einige spezielle Beispiele der Strukturen potenziell geeigneter, erfindungsgemäßer CDK-inhibitorischer Verbindungen umfassen die folgenden Strukturen:
X = O oder S
R₁ = H, CH₃ oder C₂H₅
R₂ = H, CH₃ oder C₂H₅
Im Allgemeinen enthaften die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen eine effektive CDK-inhibierende nicht-toxische Menge der aktiven Purinverbindung und werden gemäß beliebiger Verfahren, die in dem Gebiet der Pharmazie bekannt sind, zur Verabreichung in jedweder zweckmäßigen Art hergestellt. Die Verbindungen können z.B. in einer Einheitsdosierungsform bereitgestellt werden, in der sie mit mindestens einem anderen Bestandteil gemischt sind, der ein Additiv, einen Träger, ein Verdünnungsmittel oder ein Vehikel bereitstellt, das bzw. der pharmazeutisch verträglich ist.
Es sollte beachtet werden, dass sich dann, wenn in dieser Beschreibung auf Verbindungen der Formel I Bezug genommen wird, diese Bezugnahme auch auf deren pharmazeutisch verträgliche Salze und andere pharmazeutisch verträgliche biologische Vorläufer (Prodrug-Formen) erstreckt, wenn dies relevant ist. Der Begriff „Prodrug" wird in der vorliegenden Beschreibung verwendet, um modifizierte Formen oder Derivate einer pharmakologisch aktiven Verbindung zu bezeichnen, die in vivo biologisch abgebaut werden und nach der Verabreichung, insbesondere nach der oralen oder intravenösen Verabreichung, im Verlauf der therapeutischen Behandlung eines Säugers in die aktive Verbindung umgewandelt wird. Solche Prodrugs werden gewöhnlich aufgrund einer erhöhten Löslichkeit in wässrigen Medien ausgewählt, was bei der Beseitigung von Formulierungsproblemen unterstützt, und in manchen Fällen auch, um eine relativ langsame oder kontrollierte bzw. gesteuerte Freisetzung des Wirkstoffs zu bewirken.
Es sollte auch beachtet werden, dass dann, wenn jedwede der angegebenen Verbindungen in mehr als einer enantiomeren Form und/oder diastereomeren Form vorliegen kann, alle derartigen Formen, deren Gemische und deren Herstellung und Verwendungen innerhalb des Bereichs der Erfindung liegen. Es sollte jedoch beachtet werden, dass es wahrscheinlich ist, dass die stereochemischen Erwägungen wichtig sind und eine beträchtliche Selektivität vorliegen kann, so dass verschiedene Enantiomere oder Diastereoisomere eine signifikant unterschiedliche inhibitorische Aktivität aufweisen.
Die Erfindung umfasst selbstverständlich auch die Verwendung der angegebenen CDK-inhibierenden Verbindungen zur Herstellung von Medikamenten oder pharmazeutischen Zusammensetzungen, wie sie vorstehend angegeben worden sind, und sie umfasst auch die Behandlung anomaler Zellproliferationsstörungen unter Verwendung solcher Medikamente oder pharmazeutischer Zusammensetzungen.
Vorzugsweise wird in Verbindungen gemäß der Strukturformel I, die zur Durchführung der Erfindung verwendet werden, D eine unsubstituierte Aminogruppe -NH₂ und X O sein, obwohl die Aminogruppe in manchen Ausführungsformen mono- oder disubstituiert sein kann, z.B. mit einer Niederalkylgruppe.
Obwohl es gewöhnlich bevorzugt ist, dass Y eine gesättigte oder partiell gesättigte carbocyclische oder heterocyclische Ringstruktur umfasst, sollte beachtet werden, dass Y in manchen Fällen ein aromatisches Ringsystem (z.B. ein gegebenenfalls substituiertes Aryl oder Aralkyl) oder sogar eine lineare oder verzweigte Kette (die vorzugsweise eine Doppelbindung umfasst, wie z.B. in Allylderivaten) umfassen kann und dennoch Verbindungen bereitstellt, die als potenziell selektive CDK-Inhibitoren interessant sind, die im Kontext der vorliegenden Erfindung geeignet sein können, insbesondere insofern sie so strukturiert sein können, dass sie mit CDK's im Wesentlichen in der gleichen Weise binden, wie es in der 2 gezeigt ist.
Obwohl eine Anzahl der CDK-Inhibitorverbindungen, die hier beschrieben sind, als solche bereits bekannt ist, wie es bereits erwähnt worden ist, wird davon ausgegangen, dass einige der Verbindungen neu sind und neue chemische Einheiten darstellen. Beispiele für solche neuen Verbindungen, die hergestellt worden sind, umfassen
O⁶-Ribofuranosylguanin
2-Amino-6-(2-tetrahydrofuranyl)-methyloxypurin
2-Amino-6-adamantylmethyloxypurin
O⁶-Galactosylguanin
2-Amino-6-(2-naphthyl)-methyloxypurin
2-Amino-6-(2-tetrahydropyranyl)-methyloxypurin
2-Amino-6-(1-naphthyl)-methyloxypurin
O⁶-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-methoxy)guanin
O⁶-(1,4-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methoxy)guanin.
Beispiele für Verbindungen, die gegenwärtig zur Verwendung bei der Durchführung der Erfindung besonders bevorzugt sind und welche die am stärksten wirksamen identifizierten CDK-Inhibitoren umfassen, zumindest wenn diese in vitro gegen CDK1 und/oder CDK2 getestet werden, umfassen die folgenden:
2-Amino-6-(3-methyl-2-oxo)butyloxypurinethylenacetal
2-Amino-6-cyclohexylmethyloxypurin
(O⁶-Cyclohexylmethylguanin)
2-Amino-6-cyclopentylmethyloxypurin
(O⁶-Cyclopentylmethylguanin)
2-Amino-6-cyclohex-3-enylmethyloxypurin
2-Amino-6-cyclopent-1-enylmethyloxypurin
(O⁶-Cyclopentenylmethylguanin)
2-Amino-6-(1-cyclohexenyl)-methyloxypurin
(O⁶-Cyclohexenylmethylguanin)
2-Amino-6-perillyloxymethylpurin.
Biologische Aktivität
Es sind Tests zum Testen der inhibitorischen Aktivität der interessierenden Verbindungen gegen eine Reihe von CDK/Cyclin-Komplexen verfügbar, einschließlich CDK1/Cyclin A, CDK1/Cyclin B, CDK1/Cyclin F, CDK2/Cyclin A, CDK2/Cyclin E, CDK4/Cyclin D, CDK5/35 und CDK6/Cyclin D3, und es ist von besonderem Interesse, die Selektivität einiger der Verbindungen gegen verschiedene CDK's anzugeben.
Testergebnisse, welche die CDK-inhibitorischen Aktivitätswerte zeigen, die für einige der hergestellten Verbindungen gemessen worden sind, sind in der Tabelle 1 am Ende der vorliegenden Beschreibung gezeigt. Wenn die Verbindungen in verschiedenen enantiomorphen Formen vorliegen, wurden die Tests im Allgemeinen mit ra cemischen Gemischen durchgeführt. Abgesehen von den Referenzverbindungen ist mit den aufgeführten Verbindungen eine NU-Referenz- oder -Identifizierungscodenummer angegeben. Die Tabelle 1 umfasst die Verbindungen, die von den hergestellten Verbindungen gegenwärtig am meisten bevorzugt sind, obwohl noch nicht alle vollständig getestet worden sind. Vier Verbindungen, NU2036, NU2037, NU2038 und NU2051, sind in diese Tabelle 1 in erster Linie deshalb einbezogen, um zu zeigen, wie drastisch die Aktivität sinkt, wenn Seitenketten an N9 oder N7 vorliegen oder ein Halogensubstituent an C2 vorliegt.
Wie es ersichtlich ist, wurden in einer Anzahl von Fällen die inhibitorischen Tests durchgeführt und Daten wurden bezüglich CDK2 und/oder CDK4 sowie bezüglich CDK1 erhalten. Es ist von beträchtlicher Wichtigkeit, zu beachten, dass einige dieser Verbindungen anders als die bisher bekannten CDK-Inhibitoren Olomoucin und Roscovitin eine sehr signifikante Selektivität zwischen CDK1 und CDK2 aufweisen. Einige zeigen auch eine signifikante Aktivität gegen CDK4.
Im Allgemeinen stützen die durchgeführten Studien die Annahme, dass die CDK-inhibitorischen Eigenschaften der getesteten Verbindungen das Vermögen dieser Verbindungen, als effektive Antitumorarzneistoffe zu wirken, wiedergeben, voll und ganz.
Die Inhibierungstests wurden unter Verwendung von Verfahren durchgeführt, die auf denjenigen beruhen, die in dem vorstehend angegebenen Artikel von J. Vesely et al. und in dem Artikel von L. Azzi et al. (1992), Eur. J. Biochem. 203, 353-360 beschrieben sind. Als Beispiel ist ein typisches Protokoll jedoch nachstehend zusammengefasst.
CDK-Testbeispiel
Reagenzien:
Puffer C (enthält 60 mM b-Glycerophosphat, 30 mM Nitrophenylphosphat, 25 mM MOPS pH 7,0, 5 mM EGTA, 15 mM MgCl₂, 1 mM MgCl₂ und 0,1 mM Natriumorthovanadat) wird wie folgt hergestellt:
Als erstes werden die vorstehend genannten Bestandteile in etwa 80 ml destilliertem Wasser gelöst und der pH-Wert wird auf 7,0 eingestellt.
Dann wird 1 ml 10 mM Natriumorthovanadat (1,84 mg/ml – FW = 183,9 RT), Endkonzentration = 0,1 mM, zugesetzt und auf 4°C gekühlt.
Dann werden
zugesetzt.

(Alternativ werden 100 mM DTT (15,4 mg/ml) bereitgestellt und in 1,2 ml-Aliquots in einem Gefrierschrank gelagert, aufgetaut und 1 ml wird dem vorstehend beschriebenen Puffer zugesetzt)

Es werden 100 ml bereitgestellt und in 5 ml-Aliquots in einem Gefrierschrank gelagert.
Affinitätsgereinigtes p34 cdc2 (CDK1)/cyclin B von M-Phasen-Seestern (Marthasterias glacialis) in 20 % Glycerin wird bei –80°C in einer Kühltruhe gelagert.
100 mM Olomoucin (Kat. # LC-0-3590-M025 Alexis Co. Bingham Nottingham). FW = 298,35, 29,835 mg/ml = 100 mM, 25 ml-Aliquots in einem Gefrierschrank gelagert.
1 % Phosphorsäure (58,8 ml 85 %ige Phosphorsäure + 4,942 Liter Wasser).
Am Tag des Tests wird folgendes bereitgestellt:
Histon H1 (Typ III-S (Sigma) 4°C) 5 mg/ml in Puffer C.
[³²P]ATP 75 mM: Wird unter Verwendung (eines Mehrfachen) der folgenden Anteile bereitgestellt:
2 ml [³²P]ATP (3000 Ci/mmol PB168 Amersham, in einem Radioaktivitätsgefrierschrank gelagert) + 7,5 ml 1 mM kaltes ATP (–20°C) (0,551 mg/ml – 200 ml-Aliquots in einem Gefrierschrank gelagert) + 90,5 ml Puffer C.
Konz. = 12,5 mM im fertigen Test.
Testverfahren
DMSO liegt in einer Menge von nicht mehr als 1 % in dem Testgemisch vor. Inhibitoren werden in einer Menge von 1/10 des Volumens des fertigen Tests und 10 × Endkonzentration zugesetzt. DMSO-Vorratslösungen müssen daher auf 10 × gewünschte Endkonzentration in ≤ 10 % DMSO, ≥ 90 % Puffer C verdünnt werden. Vorgeschlagene Konzentrationsbereiche = 0, 1, 10, 100 mM, so dass DMSO-Vorratslösungen von 0, 100, 1000 und 10000 mM in 1/10 Puffer C verdünnt werden, bevor sie dem Test zugesetzt werden.
Herstellung:
Ein Satz von 0,2 ml-Mikroröhrchen zum Testen in einem geeigneten Testgestell wird markiert (z.B. A₀, A₁, A₁₀, A₁₀₀) und ein weiterer Satz von Eppendorfs zur Arzneistoffverdünnung wird markiert.
Phosphocellulosefilter werden mit einem Bleistift markiert (z.B. A₀, A₁, A₁₀, A₁₀₀) und in Längsrichtung gefaltet, so dass ein „geneigtes Dach" entsteht.
Es wird ein Wasserbad mit 30°C bereitgestellt, das ein zweites Gestell für Mikroröhrchen enthält.
Ein Becher, der einen Drahtnetzeinsatz und ein Magnetrührstäbchen unterhalb des Netzeinsatzes zusammen mit 400 ml 1 %iger Phosphorsäure enthält, wird auf einen Magnetrührer aufgesetzt.
Reaktionsgemisch:
Alle Reagenzien (mit Ausnahme von DMSO-Vorratslösungen) sollten auf Eis aufbewahrt werden, bis mit dem Test begonnen wird.
Das Gestell mit den Teströhrchen wird auf Eis gesetzt.
In jedes Röhren werden
16 ml Puffer C
1 ml cdc2/Cyclin B-Kinase
5 ml Histon H1
3 ml Inhibitor
eingebracht.
Die Reaktion in jedem Röhrchen wird in 30 Sekunden-Intervallen durch Zugeben von 5 ml [³²P]ATP, Vortexieren und Stellen in ein Gestell im Wasserbad bei 30°C gestartet.
Die Reaktion wird nach 10 min in 30 Sekunden-Intervallen in Röhrchen in der gleichen Reihenfolge durch Entfernen beendet.
25 ml des Reaktionsgemischs werden als Flecken auf einen geeignet markierten Filter aufgebracht, es wird 20 bis 30 s trocknen gelassen und die Filter werden in eine gerührte 1 %ige Phosphorsäure überführt.
Eine Blindinkubation wird wie vorstehend durchgeführt, jedoch ohne Histon (stattdessen werden 5 ml Puffer C zugesetzt). Die Blindprobe wird mit 5 ml ATP gewaschen, das dem Filter direkt zugesetzt wird.
Die Filter werden 5 bis 6 Mal jeweils 5 min gewaschen.
Die Filter werden auf einem Papierhandtuch getrocknet.
In Miniszintillationsbehältern wird mit 5 ml Szintillationsmittel gezählt.
Es werden auch 3 × -Standards von 5 ml ATP gezählt (375 pmol ATP).
NB. Der Test kann durch Bereitstellen des Reaktionsgemischvorrats wie folgt vereinfacht werden:
(1 Teil cdc2/Cyclin B, 16 Teile Puffer C, 5 Teile Histon H1) × Anzahl der Teströhrchen + 1 und 22 ml werden jedem Teströhrchen zugesetzt, das 3 ml Puffer C ± Inhibitor enthält. Es ist jedoch nach wie vor erforderlich, getrennt davon eine Blind-Testprobe (d.h. ohne Histon) bereitzustellen.
Die folgenden Beispiele und die Beschreibung von Stufen bei Synthesewegen der Herstellung verschiedener Beispiele für interessierende Verbindungen dienen zur weiteren Veranschaulichung der vorliegenden Erfindung, sind jedoch nicht beschränkend aufzufassen. In vielen Fällen ist mit den beschriebenen Verbindungen eine NU-Referenz- oder -Identifizierungscodenummer angegeben.
Die ersten beiden Verbindungen, deren Herstellung beschrieben ist, nämlich 2-Aminotrimethylpurin-6-ylammoniumchlorid und 2-Amino-6-(1,4-diazabicyclo[2.2.2]-oct-1-yl)puriniumchlorid („DABCO-Purin") sind Zwischenprodukte, die bei der Herstellung vieler der anderen, nachfolgend beschriebenen Verbindungen verwendet werden.
2-Aminotrimethylpurin-6-ylammoniumchlorid
Wasserfreies Trimethylamin wurde 30 min durch eine Lösung von 2-Amino-6-chlorpurin (10 g, 59 mmol) in wasserfreiem N,N-Dimethylformamid (80 ml) geleitet und das Reaktionsgemisch wurde 12 Stunden unter einem Stickstoffstrom bei Raumtemperatur gerührt. Das Rohprodukt wurde mittels Filtration gesammelt, in einer minimalen Menge kaltem Wasser gelöst und das Produkt wurde durch die Zugabe von Aceton ausgefällt. Die Titelverbindung wurde als weißer Feststoff gesammelt (9,96 g, 74 %) (Schmp.: 205-206°C). (Gefunden C, 41,8; H, 5,6; N, 36,9, C₁₀N₁₃N₅O erfordert C, 42,1; H, 5,7; N, 36,8%); v_max/cm^–1 3460 (NH₂), 3320 (NH), 1640 (C=C), 1570 (C=C); λ_max (CH₃OH)/nm 316; δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 13,40 (1H, br s, NH), 8,35 (1H, s, C(8)H), 7,10 (2H, s, NH₂), 3,70 (9H, s, N(CH₃)₃); δ_c (50,3 MHz, d₆-DMSO) 159,5 (C6), 154,9 (C2), 153,5 (C4), 135,0 (C8), 113,6 (C5), 37,8 (3 × CH₃); m/z (FAB) 192 (M⁺-Cl, 8 %), 178 (MH⁺-CH₃Cl, 72), 163 (MH⁺-(CH₃)₂Cl, 35), 149 (MH₂ ⁺-(CH₃)₃Cl, 100), 134 (MH⁺-N(CH₃)₃Cl, 45).
2-Amino-6-(1,4-diazabicyclo[2.2.2]oct-1-yl)puriniumchlorid ("DABCO-Purin")
1,4-Diazabicyclo[2.2.2]octan (3,30 g, 29,3 mmol) wurde einer Lösung von 2-Amino-6-chlorpurin (1,00 g, 5,9 mmol) in wasserfreiem DMSO (20 ml) unter Stickstoff zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und das Produkt wurde durch Filtration unter vermindertem Druck gesammelt und unter vermindertem Druck getrocknet. Eine Umkristallisation aus Isopropanol und Wasser ergab die Titelverbindung als weißen Feststoff (1,49 g, 90 %) (Schmp.: > 230°C); (Gefunden: C, 45,35; H, 5,9; N, 33,65 C₁₁H₁₆N₇Cl + 0,5 M H₂O erfordert C, 45,5; H, 5,9; N, 33,8 %); v_max/cm^–1 3450 (NH₂), 3300 (NH), 1640 (C=C), 1580 (C=N), 1250 (CO); λ_max (CH₃OH)/nm 317; δ_H (200 MHz, D₂O) 8,21 (1H, s, C(8)H), 4,15 und 3,39 (2 × [6H, t, J 7], DABCO); δ_C (125,75 MHz, D₂O) 154,2 (C6), 152,0 (C2), 146,0 (C4), 138,9 (C8), 112,1 (C5), 48,7 und 39,5 (DABCO); m/z (+EI) 281 (M⁺, 6 %), 245 (M⁺-Cl, 8), 189 (7), 163 (51), 113 (DABCO-H⁺, 5), 36 (100).
6-Benzyloxypurin (NU2002)
Natrium (2,5 g, 109 mmol) wurde destilliertem Benzylalkohol (45 ml) unter Stickstoff zugesetzt. 6-Chlorpurin (1,0 g, 6,47 mmol) wurde in destilliertem Benzylalkohol (73 ml) gelöst und die vorstehend genannte Lösung (27 ml, 64,7 mmol) wurde zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 5 Tage bei 100°C unter Stickstoff gerührt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur und Neutralisation unter Verwendung von Eisessig wurde das Lösungsmittel unter vermindertem Druck entfernt. Wasser (70 ml) wurde zugesetzt und das Produkt wurde in Ethylacetat (3 × 30 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte wurden über MgSO₄ getrocknet und das Lösungsmittel wurde entfernt. Nach einem weiteren Trocknen unter vermindertem Druck wurde das Produkt aus Aceton umkristallisiert, wobei die Titelverbindung als weißer kristalliner Feststoff erhalten wurde (0,39 g, 28 %), Schmp.: 173-175°C; (Gefunden: C, 63,14; H, 4,29; N, 24,80; berechnet für C₁₂H₁₀N₄₀: C, 63,71; H, 4,46; N, 24,76 %); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 8,480 (1H, s, C(2)H oder C(8)H), 8,307 (1H, s, C(2)H oder C(8)H), 7,522-7,301 (5H, m, Ph), 5,592 (2H, s, OCH₂); m/z 226 (M⁺, 36 %), 197 (8), 120 (35), 91 (Bn⁺, 100 %), 81 (9), 65 (24), 57 (23), 43 (16), 32 (8).
O⁶-Methylguanin (NU2004)
Verfahren A
Natrium (1,0 g, 44,2 mmol) wurde unter Stickstoff bei Raumtemperatur in Methanol (30 ml) gelöst. 2-Amino-6-chlorpurin (1,5 g, 8,84 mmol) wurde zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 48 Stunden unter Stickstoff unter Rückfluss gehalten. Nach dem Abkühlen wurde das Reaktionsgemisch neutralisiert (Eisessig), die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt und der Rückstand wurde aus Wasser umkristallisiert. Die Titelverbindung wurde als weißer kristalliner Feststoff gesammelt (1,3 g, 89 %) (Schmp.: > 230°C).
Verfahren B
Wasserfreies Methanol (64 mg, 1,99 mmol) wurde Natriumhydrid (17 mg, 0,71 mmol) in wasserfreiem DMSO (0,4 ml) zugesetzt. Nach 1 Stunde wurde „DABCO-Purin" (0,10 g, 0,36 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Essigsäure (0,06 ml) wurde zugesetzt und die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt. Der Rückstand wurde mittels Flashsäulenchromatographie auf Silicagel gereinigt, wobei mit 10 % Methanol in Dichlormethan eluiert wurde. Die Titelverbindung wurde als weißer Feststoff gesammelt (52 mg, 88 %) (Schmp.: > 230°C); v_max/cm^–1 3399 (NH₂), 3346 (NH), 3177 (CH), 2453 (OCH₃); λ_max (CH₃OH)/nm 280; δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,92 (1H, s, C(8)H), 6,35 (2H, s, NH₂), 4,04 (3H, s, OCH₃); m/z (+EI) 165 (M⁺, 100 %), 134 (M⁺-OCH₃, 20); M⁺ gefunden 165,0643, C₆H₇N₅O erfordert 165,0651.
O⁶-Benzylguanin (NU2005)
Benzylalkohol (215 mg, 1,99 mmol) wurde Natriumhydrid (0,017 g, 0,71 mmol) in wasserfreiem DMSO (0,4 ml) zugesetzt. Nach 1 Stunde wurde „DABCO-Purin" (0,10 g, 0,36 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 48 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Essigsäure (0,06 ml) wurde zugesetzt und die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt. Der Rückstand wurde mittels Flashsäulenchromatographie auf Silicagel gereinigt, wobei mit 10 % Methanol in Dichlormethan eluiert wurde. Die Titelverbindung wurde als weißer Feststoff gesammelt (69 mg, 81 %), λ_max (CH₃OH)/nm 285; δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,96 (1H, s, C(8)H), 7,40 (5H, m, Ph), 6,44 (2H, s, NH₂), 5,61 (2H, s, OCH₂).
6-Allyloxypurin (NU2013)
Natrium (2,0 g, 86,96 mmol) wurde destilliertem Allylalkohol (35 ml) unter Stickstoff zugesetzt. 6-Chlorpurin (1,0 g, 6,47 mmol) wurde in destilliertem Allylalkohol (35 ml) gelöst und die Natriumallyloxidlösung (33 ml) wurde zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde unter Stickstoff 20 Stunden bei 100°C erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde das Reaktionsgemisch neutralisiert, worauf der Rückstand aus Wasser umkristallisiert wurde. Es wurde ein weißer kristalliner Feststoff erhalten (550 mg, 48 %), Schmp.: 199-200°C; (Gefunden: C, 54,35; H, 4,49; N, 32,06, berechnet für C₈H₈N₄O: C, 54,54; H, 4,58; N, 31,80 %); v_max/cm^–1 3052, 2977, 2811 (NH, C-H); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 8,526 (1H, s, C(2)H oder C(8)H), 8,438 (1H, s, C(2)H oder C(8)H), 6,280-6,086 (1H, dddd, CH=CH₂), 5,485 (1H, dd, J_gem = 1,5 Hz, J_trans = 17,2 Hz, =CH₂), 5,325 (1H, dd, J_gem = 1,5 Hz, J_cis = 10,4 Hz, =CH₂), 5,107 (2H, d, J = 5,5 Hz, OCH₂); m/z 176 (M⁺, 43 %), 174 (M⁺, 43 %), 161 (31), 147 (39), 136 ([MH-CH₂CH=CH₂]⁺, 21 %), 120 ([MN-OCH₂CH=CH₂]⁺, 49 %), 108 (13), 93 (37), 81 (11), 69 (32), 66 (18), 53 (26), 41 ([CH₂CH=CH₂]⁺, 63 %), 28 (62).
6-Cyclohexylmethoxypurin (NU2017)
Natrium (0,4 g, 17,4 mmol) wurde gerührtem Cyclohexylmethanol (10 ml) unter Stickstoff zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde bei 100°C gerührt, bis kein Natrium mehr vorhanden war. 6-Chlorpurin (500 mg, 3,24 mmol) wurde zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 5 Tage unter Stickstoff bei 100°C gerührt. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wurde das Gemisch mit Eisessig neutralisiert und das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck entfernt. Wasser (20 ml) wurde zugesetzt und das Produkt wurde in Dichlormethan (3 × 30 ml) extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte wurden über MgSO₄ getrocknet und das Volumen des Lösungsmittels wurde verdoppelt. Nach dem Heißfiltrieren und Entfernen des Lösungsmittels ergab eine Umkristallisation aus Ethylacetat die Titelverbindung als weißen kristallinen Feststoff (600 mg, 70 %), Schmp.: 210-211°C; (Gefunden: C, 62,30; H, 6,93; N, 24,36, berechnet für C₁₂H₁₆N₄O: C, 62,05; H, 6,94; N, 24,12 %); v_max/cm^–1 3108, 3050, 2930, 2849, 2801 (NH, C-H); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 8,479 (1H, s, C(2)H oder C(8)H), 8,388 (1H, s, C(2)H oder C(8)H), 4,348 (2H, d, J = 6,2 Hz, OCH₂), 1,854-1,692 (6H, m, Cyclohexyl), 1,357-0,984 (5H, m, Cyclohexyl); δ_C (50 MHz, d₆-DMSO) 159,40, 155, 151,57, 142,88, 118, 71,41 (OCH₂), 37,08, 29,40, 26,24, 25,47 (Cyclohexyl); m/z 233 (MH⁺, 76 %), 202 (33), 149 ([M-C₆H₁₁]⁺, 32 %), 137 (100), 120 ([MH-C₇H₁₃O]⁺, 44 %), 108 (30), 93 (27), 81 (65), 67 (62), 55 (88), 41 (89).
6-(2-Phenylethyloxy)purin (NU2023)
2-Phenylethanol (13 ml) wurde unter Stickstoff gerührt und Natrium (0,75 g, 32,36 mmol) wurde zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde auf 60°C erwärmt. Als kein Natrium mehr vorhanden war, wurden wasserfreies THF (18 ml) und 6-Chlorpurin (1,0 g, 6,47 mmol) zugesetzt. Nach Halten unter Rückfluss unter Stickstoff für 5 Stunden wurde das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur abkühlen gelassen und mit Eisessig neutralisiert. Das THF wurde entfernt und der restliche Alkohol wurde unter vermindertem Druck entfernt. Das Produkt wurde aus Ethanol umkristallisiert und als weißer kristalliner Feststoff isoliert (962 mg, 62 %); Schmp.: 209-210°C; (Gefunden: C, 64,57; H, 5,12; N, 23,54, berechnet für C₁₃H₁₂N₄O: C, 64,99; H, 5,03; N, 23,34 %); v_max/cm^–1 3135, 3063, 3031, 2948, 2897, 2797, 2672, 2583 (NH, C-H); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 8,483 (1H, s, C(2)H oder C(8)H), 8,365 (1H, s, C(2)H oder C(8)H), 7,366-7,194 (5H, m, Ph), 4,741 (2H, t, J = 7,0 Hz, OCH₂), 3,134 (2H, t, J = 7,0 Hz, CH₂Ph); m/z 240 (M⁺, 11 %), 149 ([M-Bn]⁺, 11 %), 136 ([M-CH₂CH₂Ph]⁺, 87 %), 119 ([M-OCH₂CH₂Ph]⁺, 40 %), 104 ([CH₂CH₂Ph]⁺, 100 %), 91 (Bn⁺, 37 %), 77 (Ph⁺, 55 %), 69 (48), 65 (15), 51 (26).
O⁶-Allylguanin (NU2028)
Allylalkohol (116 mg, 1,99 mmol) wurde Natriumhydrid (0,017 g, 0,007 mmol) in wasserfreiem DMSO (0,4 ml) zugesetzt. Nach 1 Stunde wurde „DABCO-Purin" (0,10 g, 0,36 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde unter Stickstoff bei Raumtemperatur gerührt. Nach 12 Stunden wurde Essigsäure (0,06 ml) zugesetzt und die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt. Der Rückstand wurde mit Flashsäulenchromatographie auf Silicagel gereinigt, wobei mit 10 % Methanol in Dichlormethan eluiert wurde. Die Titelverbindung wurde als weißer Feststoff gesammelt (59 mg, 87 %); λ_max (CH₃OH)/nm 282; δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 8,42 (1H, s, C(8)H), 7,92 (2H, s, NH₂), 6,20 (1H, tdd, C(2')H), 5,51 (1H, d, J_trans 17,2, C(3')H), 5,37 (1H, d, J_cis 10,4, C(3')H, 5,03 (2H, d, J_vic 5,5, CH₂O); m/z (+EI) 191 (M⁺, 47 %), 165 (MH⁺-CH=CH₂, 25), 135 (MH⁺-OCH₂CH=CH₂, 25); M⁺ gefunden 191,0814; C₈H₉N₅O erfordert 191,0807.
O⁶-Propargylguanin (NU2031)
Propargylalkohol (110 mg, 1,99 mmol) wurde Natriumhydrid (0,017 g, 0,007 mmol) in wasserfreiem DMSO (0,4 ml) zugesetzt. Nach 1 Stunde wurde „DABCO-Purin" (0,10 g, 0,36 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 48 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Essigsäure (0,06 ml) wurde zugesetzt und die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt. Der Rückstand wurde mittels Flashsäulenchromatographie auf Silicagel gereinigt, wobei mit 10 % Methanol in Dichlormethan eluiert wurde. Die Titelverbindung wurde als weißer Feststoff gesammelt (48 mg, 72 %), λ_max (CH₃OH)/nm 290; δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 8,42 (1H, s, C(8)H), 6,47 (2H, s, NH₂), 5,20 (2H, s, CH₂O), 3,69 (1H, t, J 2,4, C(3')H).
O⁶-(2-Oxo-2-phenylethyl)guanin (NU2033)
A – Herstellung von O⁶-(2,2-Dimethoxy-2-phenylethyl)guanin
Natriumhydrid (231 mg, 9,6 mmol) wurde in wasserfreiem THF (30 ml) suspendiert und 2,2-Dimethoxy-2-phenylethanol (680 mg, 3,74 mmol) in wasserfreiem THF (20 ml) wurde tropfenweise zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde 5 min gerührt und dann wurde 2-Amino-6-chlorpurin (317 mg, 1,87 mmol) zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gehalten. Das Reaktionsgemisch wurde mit Eisessig neutralisiert und das THF wurde entfernt. Nach dem Lösen des Rückstands in Methanol wurde Silica zugesetzt. Das Lösungsmittel wurde entfernt und das Produkt wurde mittels Säulenchromatographie unter Verwendung von Dichlormethan/Ethanol (8,5:1,5) als Elutionsmittel gereinigt und als weißer Feststoff erhalten (420 mg, 71 %). Eine weitere Reinigung durch Umkristallisation aus Ethylacetat ergab die Titelverbindung als weißen Feststoff, Schmp.: 208-209°C; (Gefunden: C, 57,43; H, 5,40; N, 22,14, berechnet für C₁₅H₁₇N₅O₃: C, 57,14; H, 5,43; N, 22,21 %); v_max/cm^–1 3497, 3438, 3310, 3206, 2946, 2832, 1626 (NH, C-R, NH₂); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,772 (1H, s, C(8)H), 7,571-7,530 (2H, m, Ph), 7,376-7,338 (3H, m, Ph), 6,288 (2H, br s, NH₂), 4,682 (2H, s, CH₂), 3,180 (6H, s, OCH₃); m/z 315 (M⁺, 42 %), 284 ([M-OMe]⁺, 48 %), 252 (34), 165 ([M-CH₂C(OMe)₂Ph]⁺, 80 %), 151 ([CH₂C(OMe)₂Ph]⁺, 79 %), 134 (69), 105 ([PhCO]⁺, 100 %), 91 (Bn⁺, 55 %), 59 (42), 43 (82).
B – Herstellung von O⁶-(2-Oxo-2-phenylethyl)guanin (NU2033)
O⁶-(2,2-Dimethoxy-2-phenylethyl)guanin (90 mg, 0,29 mmol) wurde in wässriger Essigsäure (3 M, 20 ml) gelöst und das Reaktionsgemisch wurde 4 Tage gerührt. Das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck entfernt. Das Produkt wurde durch Lösen in Methanol und dann Ausfällen mit Ether gereinigt. Die Titelverbindung wurde als weißer Feststoff erhalten (27 mg, 35 %), Schmp.: > 230°C; (Gefunden: C, 57,69; H, 4,20; N, 25,57, berechnet für C₁₃H₁₁N₅O₂: C, 57,99; H, 4,12; N, 26,01 %); v_max/cm^–1 4390, 3391, 3061, 2973, 2924 (NH, C-H, NH₂), 1690 (C=O); λ_max (EtOH)/nm 207 nm (ε 51500), 241 nm (ε 28200), 282 nm (ε 13100); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 8,041-7,998 (2H, m, Ph), 7,866 (1H, s, C(8)H), 7,707-7,545 (3H, m, Ph), 6,178 (2H, br s, NH₂), 5,897 (2H, s, CH₂); m/z 270 ([MH]⁺, 50 %), 241 (38), 164 ([M-PhCO]⁺, 51 %), 134 (71), 105 ([PhCO]⁺, 100 %), 91 (Bn⁺, 65 %), 77 (Ph⁺, 82 %), 65 (50), 53 (55), 43 (67).
O⁶-(2-Methylallyl)guanin (NU2034)
2-Methyl-2-propen-1-ol (10 ml) wurde Natrium (0,4 g, 17,4 mmol) zugesetzt. Die Zugabe wurde unter Stickstoff durchgeführt. Als das gesamte Natrium umgesetzt war, wurden 2-Amino-6-chlorpurin (500 mg, 2,95 mmol) und THF (10 ml) zugesetzt und das Gemisch wurde 4 Stunden unter Rückfluss gehalten. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wurde das Reaktionsgemisch mit Eisessig neutralisiert und das Lösungsmittel wurde entfernt. Wasser (20 ml) wurde zugesetzt und das Produkt wurde in Ethylacetat (4 × 35 ml) extrahiert. Die organischen Extrakte wurden über MgSO₄ getrocknet und das Lösungsmittel wurde entfernt. Ethanol/Dichlormethan (1:7) wurde zugesetzt und die Lösung wurde mit Ether behandelt. Der gebildete Niederschlag wurde durch Absaugen gesammelt und aus Ethylacetat umkristallisiert, wobei das Produkt als weißer Feststoff erhalten wurde (363 mg, 60 %), Schmp.: 176-178°C; (Gefunden 205,0967, C₉H₁₁N₅O erfordert 205,09722); v_max/cm^–1 3494, 3314, 3185, 2978, 2782 (NH, C-H, NH₂); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,839 (1H, s, C(8)H), 6,275 (2H, s, NH₂), 5,057 (1H, s, =CH₂), 4,933 (1H, s, =CH₂), 4,855 (2H, s, OCH₂), 1,775 (3H, s, CH₃); m/z 205 (M⁺, 42 %), 188 (43), 176 (19), 135 ([MN-OCH₂C(CH₃)=CH₂]⁺, 20%), 108 (15), 81 (14), 69 (35), 55 ([OCH₂C(CH₃)=CH₂]⁺, 46 %), 41 (35), 32 (100).
O⁶-(2-Oxopropyl)guanin (NU2035)
O⁶-(2,2-Diethoxypropyl)guanin (500 mg, 1,78 mmol) wurde in wässriger Essigsäure (1 M, 12 ml) suspendiert und die Suspension wurde 2 Tage bei Raumtemperatur gerührt. Nach dieser Zeit hatte sich der gesamte Feststoff gelöst und das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck entfernt. Der Rückstand wurde aus Aceton umkristallisiert, wobei das gewünschte Produkt als weißer Feststoff erhalten wurde (183 mg, 50 %), Schmp.: 195-196°C; v_max/cm^–1 3355, 3119, 2780 (NH, NH₂, C-H), 1734 (C=O); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,902 (1H, s, C(8)H), 6,270 (2H, s, NH₂), 5,069 (2H, s, OCH₂), 2,175 (3H, s, COCH₃); m/z 207 (M⁺, 53 %), 192 ([M-CH₃]⁺, 15 %), 164 ([M-COCH₃]⁺, 45 %), 134 ([M-OCH₂COCH₃]⁺, 73 %), 119 (10), 108 (23), 92 (12), 80 (11), 65 (12), 53 (25), 43 ([COCH₃]⁺, 85 %), 32 (100).
N⁹,O⁶-Diallylguanin (NU2036)
Natrium (0,3 g, 12,65 mmol) wurde mit Allylalkohol (12 ml) umgesetzt und N⁹-Allyl-2-amino-6-chlorpurin (530 mg, 2,53 mmol) wurde zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 30 min unter Rückfluss gehalten, worauf das Gemisch gekühlt und mit Eisessig neutralisiert wurde. Das Lösungsmittel wurde entfernt und Wasser (30 ml) wurde zugesetzt. Das Produkt wurde in Ethylacetat (3 × 40 ml) extrahiert und die organischen Extrakte wurden über Na₂SO₄ getrocknet. Nach der Entfernung des Lösungsmittels wurde das Produkt mittels Säulenchromatographie auf Silica unter Verwendung von Ethylacetat als Elutionslösungsmittel gereinigt. Die Titelverbindung wurde als weißer kristalliner Feststoff erhalten (500 mg, 86 %) und durch Umkristallisation aus Ethylacetat/Petrolether weiter gereinigt, Schmp.: 86-87°C; (Gefunden: C, 57,36; H, 5,75; N, 29,50, berechnet für C₁₁H₁₃N₅O: C, 57,13; H, 5,67; N, 30,28 %); v_max/cm^–1 3397, 3333, 3220, 3092, 2940 (NH₂, C-H); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,844 (1H, s, C(8)H), 6,446 (2H, s, NH₂), 6,216-5,939 (2H, m, NCH₂CH=CH₂ und OCH₂CH=CH₂), 5,476-4,900 (4H, Reihe von dd, NCH₂CH=CH und OCH₂CH=CH₂), 4,948 (2H, m, OCH₂CH=CH₂), 4,656 (2H, m, NCH₂CH=CH₂); δ_C (50 MHz, d₆-DMSO) 160,26, 160,13, 154,58, 140,05, 133,81, 133,68, 118,34, 117,21, 113,90, 66,34 (OCH₂), 44,92 (NCH₂); m/z 231 (M⁺, 80 %), 202 (22), 190 ([M-CH₂CH=CH₂]⁺, 14 %), 175 (20), 121 (21), 91 (23), 83 (40), 73 (60), 69, (79), 55 (100).
N⁷,O⁶-Diallylguanin (NU2037)
Natrium (120 mg, 5,25 mmol) wurde mit Allylalkohol (5 ml) umgesetzt und N⁷-Allyl-2-amino-6-chlorpurin (220 mg, 1,05 mmol) wurde zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 30 min unter Rückfluss gehalten, worauf das Gemisch abgekühlt und mit Eisessig neutralisiert wurde. Das Lösungsmittel wurde entfernt und Wasser (30 ml) wurde zugesetzt. Das Produkt wurde in Ethylacetat (3 × 40 ml) extrahiert und die organischen Extrakte wurden über Na₂SO₄ getrocknet. Das Lösungsmittel wurde entfernt und das Produkt wurde mittels Säulenchromatographie auf Silica unter Verwendung von Ethylacetat als Elutionslösungsmittel gereinigt. Die Titelverbindung wurde als weißer kristalliner Feststoff erhalten (175 mg, 72 %) und durch Umkristallisation aus Ethylacetat/Petrolether weiter gereinigt, Schmp.: 105-107°C; v_max/cm^–1 3387, 3314, 3198, 3090, 3015, 2990, 2934, 2379 (NH₂, C-H); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 8,089 (1H, s, C(8)H), 6,153 (2H, s, NH₂), 6,187-5,979 (2H, m, NCH₂CH=CH₂ und OCH₂CH=CH₂), 5,406 (1H, dd, J_gem = 1,6 Hz, J_trans = 17,3 Hz, OCH₂CH=CH₂), 5,270 (1H, dd, J_gem = 1,6 Hz, J_cis = 10,5 Hz, OCH₂CH=CH₂), 5,169 (1H, dd, J_gem = 1,3 Hz, J_cis = 10,3 Hz, NCH₂CH=CH₂), 4,978 (1H, dd, J_gem = 1,3 Hz, NCH₂CH=CH₂), 4,921 (2H, d, J = 5,3 Hz, OCH₂CH=CH₂), 4,826 (2H, d, J = 5,3 Hz, NCH₂CH=CH₂); m/z 231 (M⁺, 62 %); 216 ([MH-NH₂]⁺, 13 %), 190 ([M-CH₂CH=CH₂]⁺, 10 %), 173 (MH-OCH₂CH=CH₂]⁺, 7 %), 151 (7), 122 (8), 91 (19), 83 (9), 68 (14), 60 (100).
O⁶-Allyl-N⁹-benzylguanin (NU2038)
Allylalkohol (15 ml) wurde auf 0°C gekühlt und Natrium (0,18 g, 7,7 mmol) wurde zugesetzt. Die Lösung wurde Raumtemperatur erreichen gelassen und 2-Amino-N⁹-benzyl-6-chlorpurin (400 mg, 1,54 mmol) wurde zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 1,75 Stunden unter Rückfluss gehalten. Das Reaktionsgemisch wurde auf Raumtemperatur abkühlen gelassen und mit Eisessig neutralisiert. Wasser (20 ml) wurde zugesetzt und das Produkt wurde in Ethylacetat (3 × 35 ml) extrahiert. Die organischen Extrakte wurden vereinigt und über MgSO₄ getrocknet. Das Lösungsmittel wurde entfernt und der Rückstand wurde aus Petrolether/Ethylacetat umkristallisiert, wobei die Titelverbindung als weißer kristalliner Feststoff erhalten wurde (300 mg, 69 %), Schmp.: 113-114°C; (Gefunden: C, 63,66; H, 5,16; N, 24,72, berechnet für C₁₅H₁₅N₅O: C, 64,04; H, 5,37; N, 24,90 %); v_max/cm^–1 3499, 3320, 3195, 3087, 3058, 3023 (NH₂, C-H); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,967 (1H, s, C(8)H), 7,382-7,199 (5H, m, Ph), 6,460 (2H, s, NH₂), 6,181-6,015 (1H, m, CH=CH₂), 5,415 (1H, dd, J_trans = 17,2 Hz, J_gem = 1,7 Hz, CH=CH₂), 5,276 (1H, dd, CH=CH₂), 5,253 (2H, s, CH₂Ph), 4,945 (2H, d, J = 5,6 Hz, OCH₂); δ_C (50 MHz, d₆-DMSO) 160,31, 160,21, 154,72, 140,21, 137,57, 133,67, 128,97, 127,89, 127,38, 118,35, 113,97, 66,35, 46,09; m/z 281 (M⁺, 61 %), 252 (12), 225 ([MH-OCH₂CH=CH₂]⁺, 9 %), 190 ([M- Bn]⁺, 44 %), 135 ([MH-OCH₂CH=CH₂-Bn]⁺, 10 %), 91 (Bn⁺, 100 %), 65 (29), 41 ([CH₂CH=CH₂]⁺, 34 %), 32 (72).
O⁶-(2-Phenylethyl)guanin (NU2041)
Natriumhydrid (265 mg, 11 mmol) wurde in wasserfreiem THF (40 ml) suspendiert und 2-Phenylethanol (3 ml) in THF (7 ml) wurde unter Kühlen zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 1 Stunde gerührt und Raumtemperatur erreichen gelassen. 2-Amino-6-chlorpurin (750 mg, 4,42 mmol) wurde zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 1 Stunde unter Rückfluss gehalten und dann über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit Eisessig neutralisiert und das Lösungsmittel wurde entfernt. Nach der Reinigung mittels Chromatographie auf Silica unter Verwendung von 15 % Ethanol in Dichlormethan als Elutionsmittel und anschließendem Umkristallisieren aus Ethylacetat wurde das Produkt als weißer Feststoff erhalten (549 mg, 49 %), Schmp.: 206-207°C; (Gefunden: C, 61,32; H, 5,06; N, 26,64, berechnet für C₁₃H₁₃N₅O: C, 61,17; H, 5,13; N, 27,43 %); v_max/cm^–1 3495, 3366, 3127, 2982, 2801 (NH, NH₂, C-H); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,803 (1H, s, C(8)H), 7,371-7,221 (5H, m, Ph), 6,271 (2H, s, NH₂), 4,584 (2H, t, J = 7,2 Hz, OCH₂), 3,084 (2H, t, J = 7,2 Hz, CH₂Ph); m/z 255 (M⁺, 26 %), 151 ([MH-CH₂CH₂Ph]⁺, 100 %), 114 ([M-OCH₂CH₂Ph]⁺, 24 %), 105 (CH₂CH₂Ph]⁺, 41 %), 97 (38), 91 (Bn⁺, 23 %), 81 (51), 69 (86), 55 (82).
O⁶-(2-Phenylallyl)guanin (NU2042)
Natriumhydrid (450 mg, 7,9 mmol) wurde unter Stickstoff in wasserfreiem THF suspendiert. 3-Hydroxy-2-phenyl-1-propen (820 mg, 6,12 mmol) in wasserfreiem THF (20 ml) wurde langsam zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 15 min gerührt. 2-Amino-6-chlorpurin (700 mg, 4,13 mmol) wurde zugesetzt und das Gemisch wurde 12 Stunden unter Rückfluss gehalten. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur und Neutralisieren mit Eisessig wurde das Lösungsmittel entfernt. Der Rückstand wurde in heißem Methanol gerührt und filtriert, worauf Silica zugesetzt und das Lösungsmittel entfernt wurde. Das Produkt wurde mittels Säulenchromatographie auf Silica unter Verwendung von Dichlormethan/Ethanol (9:1) als Elutionsmittel gereinigt. Das Produkt wurde aus Ethylacetat umkristallisiert und als weißer Feststoff erhalten (206 mg, 19 %), Schmp.: 83-85°C; v_max/cm^–1 3484, 3326, 3189, 2787, 1622, 1586 (NH, C-H, NH₂); λ_max (EtOH) 205 nm (ε 84570), 228 nm (ε 32450), 283 nm (ε 14000); δ_H (200 MHz, d₄-Methanol) 8,023 (1H, s, C(8)H), 7,750-7,565 (2H, m, Ph), 7,536-7,464 (3H, m, Ph), 5,817 (1H, s, =CH₂), 5,731 (1H, s, =CH₂), 5,652 (2H, s, OCH₂); m/z 267 (M⁺, 80 %), 250 (68), 151 ([MH-CH₂C(Ph)=CH₂]⁺, 41 %), 134 ([M-OCH₂C-(Ph)=CH₂]⁺, 47 %), 115 (100), 91 (Bn⁺, 76 %), 77 (Ph⁺, 25 %), 69 (43), 44 (50).
O⁶-n-Propylguanin (NU2045)
Natrium (0,35 g, 15,2 mmol) wurde wasserfreiem n-Propanol (30 ml) unter Stickstoff zugesetzt. Nachdem das gesamte Natrium umgesetzt worden ist, wurde 2-Amino-6-chlorpurin (500 mg, 2,95 mmol) zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 24 Stunden unter Rückfluss gehalten. Nach dem Abkühlen wurde das Reaktionsgemisch mit Eisessig neutralisiert und das Lösungsmittel wurde entfernt. Das Produkt wurde aus Wasser umkristallisiert, so dass die Titelverbindung als weißer Feststoff erhalten wurde (204 mg, 36 %), Schmp.: 199-201°C; (M⁺ gefunden 193,0938, C₈H₁₁N₅O erfordert 193,09124); v_max/cm^–1 3490, 3301, 3173, 2975, 2886, 2780, 2539 (NH, C-H, NH₂); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,795 (1H, s, C(8)H), 6,222 (2H, s, NH₂), 4,333 (2H, t, J = 7 Hz, OCH₂), 1,759 (2H, Sextett, J = 7 Hz, CH₂CH₂CH₃), 0,968 (3H, t, J = 7 Hz, CH₃); m/z 193 (M⁺, 37 %), 164 ([M-Et]⁺, 8 %), 151 ([M-Pr]⁺, 56 %), 143 (4), 134 ([M-OPr]⁺, 25 %), 109 (20), 69 (100), 51 (9), 43 (Pr⁺, 10 %), 32 (23).
O⁶-Ethylguanin (NU2046)
Natrium (0,5 g, 22 mmol) wurde wasserfreiem Ethanol (50 ml) unter Stickstoff zugesetzt. Als das gesamte Natrium umgesetzt war, wurde 2-Amino-6-chlorpurin (750 mg, 4,42 mmol) zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 3 Stunden unter Rückfluss gehalten. Nach dem Abkühlen wurde das Reaktionsgemisch mit Eisessig neutralisiert und das Lösungsmittel wurde entfernt. Das Umkristallisieren aus Wasser ergab das Produkt als weißen Feststoff (548 mg, 69 %), Schmp.: > 230°C; (Gefunden: C, 46,76; H, 4,97; N, 39,09, berechnet für C₇H₉N₅O: C, 46,92; H, 5,06; N, 39,09 %); v_max/cm^–1 3505, 3484, 3432, 3324, 3191, 3110, 2984, 2901, 2705, 2544 (NH, C-H, NH₂); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,808 (1H, s, C(8)H), 6,224 (2H, s, NH₂), 4,437 (2H, q, J = 7,1 Hz, OCH₂), 1,353 (3H, t, J = 7,1 Hz, CH₂CH₃); m/z 179 (M⁺, 100 %), 169 (19), 164 (35), 151 ([MH-Et]⁺, 36 %), 135 ([MH-OEt]⁺, 43 %), 131 (38), 119 (34), 109 (54), 81 (41), 69 (39), 60 (21), 55 (31), 41 (48).
O⁶-Allyl-N²-dimethylguanin (NU2048)
6-Allyloxy-2-chlorpurin (50 mg, 0,24 mmol) wurde in DMF (1 ml) gelöst und destilliertes Ethanolamin (50 μl, 0,83 mmol) wurde zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 3 Tage bei 90°C erhitzt. Das Lösungsmittel wurde entfernt und der Rückstand wurde mittels Chromatographie auf Silica unter Verwendung von 8 % Ethanol in Dichlormethan als Elutionslösungsmittel gereinigt. Die Titelverbindung wurde als weißer Feststoff erhalten (36 mg, 68 %), der durch Umkristallisieren aus Ethylacetat weiter gereinigt wurde, Schmp.: 176-177°C; (Gefunden: C, 55,12; H, 5,94; N, 31,88, berechnet für C₁₀H₁₃N₅O: C, 54,78; H, 5,98; N, 31,94 %); v_max/cm^–1 3100, 2938, 2865 (NH, C-H); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,883 (1H, s, C(8)H), 6,219-6,025 (1H, m, CH₂CH=CH₂), 5,419 (1H, m, CH₂CH=CH₂), 5,270 (1H, m, CH₂CH=CH₂), 4,978 (2H, d, J = 5,6 Hz, CH₂CH=CH₂), 3,098 (6H, s, NMe₂); m/z 219 (M⁺, 83 %), 204 ([M-Me]⁺, 45 %), 190 ([M-2Me]⁺, 58 %), 178 ((M-CH₂CH=CH₂]⁺, 77 %), 164 (29), 149 (43), 135 ([M-NMe₂-CH₂CH=CH₂]⁺, 91 %), 71 (24), 53 (28), 41 ([CH₂CH=CH₂]⁺, 100 %), 28 (97).
6-Allyloxy-2-chlorpurin (NU2051)
Natrium (0,37 g, 15,9 mmol) wurde mit Allylalkohol (20 ml) unter Stickstoff und Kühlen mit einem Eisbad umgesetzt. 2,6-Dichlorpurin (1,00 g, 5,29 mmol) wurde zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 2 Stunden unter Rückfluss gehalten, worauf das Reaktionsgemisch abkühlen gelassen wurde. Das Gemisch wurde mit Eisessig neutralisiert und das Lösungsmittel wurde entfernt. Der Rückstand wurde mit kaltem Wasser zerrieben, wobei die Titelverbindung als weißer Feststoff erhalten wurde (1,05 g, 94 %), Schmp.: 208-209°C; v_max/cm^–1 3422, 3017, 2782, 2685, 2595 (NH, C-H); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 8,454 (1H, s, C(8)H), 6,230-6,036 (1H, m, CH₂CH=CH₂), 5,478 (1H, dd, J = 1,6 Hz, J = 17,2 Hz, CH₂CH=CH₂), 5,327 (1H, dd, J = 1,6 Hz, J = 10,4 Hz, CH₂CH=CH₂), 5,054 (2H, d, J = 5,5 Hz, CH₂CH=CH₂); m/z 210 (M⁺, 68 %), 195 (64), 183 (12), 175 ([M-Cl]⁺, 98 %), 154 ([MH-OCH₂CH=CH₂]⁺, 21 %), 135 ([MH-Cl-CH₂CH=CH₂]⁺, 50 %), 119 ([MH-Cl-OCH₂CH=CH₂]⁺, 33 %), 92 (11), 53 (18), 41 ([CH₂CH=CH₂]⁺, 100 %), 32 (53).
O⁶-n-Butylguanin (NU2052)
Natrium (0,34 g, 15 mmol) wurde wasserfreiem n-Butanol (20 ml) unter Stickstoff zugesetzt. Als das gesamte Natrium umgesetzt war, wurde 2-Amino-6-chlorpurin (500 mg, 2,95 mmol) zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde bei 70°C über Nacht erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde das Reaktionsgemisch mit Eisessig neutralisiert. Das Lösungsmittel wurde entfernt und das Produkt wurde aus Wasser umkristallisiert, wobei die Titelverbindung als weißer Feststoff erhalten wurde (331 mg, 54 %), Schmp.: 176-178°C; (Gefunden: C, 52,38; H, 6,56; N, 33,59, berechnet für C₉H₁₃N₅O: C, 52,16; H, 6,32; N, 33,79 %); v_max/cm^–1 3501, 3374, 3106, 2955, 2874, 2803 (NH, C-H, NH₂); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,798 (1H, s, C(8)H), 6,219 (2H, br s, NH₂), 4,381 (2H, t, J = 6,7 Hz, OCH₂), 1,731 (2H, m, CH₂CH₂CH₂), 1,420 (2H, m, CH₂CH₃), 0,934 (3H, t, J = 7,2 Hz, CH₃); m/z 207 (M⁺, 72 %), 164 ([M-ⁿPr]⁺, 10 %), 151 ([MH-ⁿBu]⁺, 100 %), 134 ([M-OⁿBu]⁺, 55 %), 122 (10), 109 (50), 80 (8), 54 (15), 43 (25), 28 (7).
O⁶-(3'-Methyl)butylguanin (NU2053)
Natrium (1,0 g, 44,2 mmol) wurde in 3-Methyl-1-butanol (60 ml) unter Stickstoff gelöst. 2-Amino-6-chlorpurin (1,5 g, 8,84 mmol) wurde zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 48 Stunden unter Stickstoff unter Rückfluss gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde neutralisiert (Eisessig), das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck entfernt und der Rückstand wurde aus Wasser umkristallisiert, wobei die Titelverbindung als weißer kristalliner Feststoff erhalten wurde (1,09 g, 56 %) (Schmp.: 175°C), (Gefunden C, 54,35; H, 6,7; N, 31,5; C₁₀H₁₅N₅O erfordert C, 54,3; H, 6,8; N, 31,7 %), v_max/cm^–1 3505 (NH₂), 3310 (NH), 3182 (CH), 2552 (CH₂); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 12,50 (1H, br s, NH), 7,92 (1H, s, C(8)H), 6,33 (2H, s, NH₂), 4,53 (2H, t, J 6,6, OCH₂), 1,89 (1H, m, CH(CH₃)₂), 1,78 (2H, m, OCH₂CH₂), 1,06 (6H, d, J 6,3, 2 × CH₃); m/z (+EI) 221 (M⁺, 29 %), 165 (MH⁺-CH₂CH(CH₃)₂, 10), 151 (MH⁺-(CH₂)₂CH(CH₃)₂, 88), 134 (M⁺-O(CH₂)₂CH(CH₃)₂, 18).
O⁶-(2-Ethylallyl)guanin (NU2054)
Natriumhydrid (600 mg, 25 mmol) wurde in wasserfreiem THF (40 ml) suspendiert und 2-Ethylallylalkohol (1,0 g, 11,6 mmol) in THF (10 ml) wurde zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde bei Raumtemperatur 30 min gerührt und 2-Amino-6-chlorpurin (1,0 g, 5,90 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktion war nach 24 Stunden unter Rückfluss vollständig, worauf das Reaktionsgemisch abkühlen gelassen und mit Eisessig neutralisiert wurde. Ethanol (40 ml) wurde zugesetzt, worauf Silica zugesetzt wurde. Das Lösungsmittel wurde entfernt und der zurückgebliebene Feststoff wurde auf eine Silicasäule aufgebracht. Eine Elution mit 10 % Ethanol in Dichlormethan ergab die Titelverbindung nach einer Umkristallisation aus Ethylacetat als weißen Feststoff (650 mg, 50 %), Schmp.: 148-149°C; (Gefunden 219,1121, C₁₀H₁₃N₅O erfordert 219,11216); v_max/cm^–1 3465, 3306, 3200, 3137, 2965, 2940, 2915, 2882, 2803, 1630, 1584 (NH, C-H, NH₂); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,833 (1H, s, C(8)H), 6,259 (2H, br s, NH₂), 5,124 (1H, s, =CH₂), 4,964 (1H, s, =CH₂), 4,915 (2H, s, OCH₂), 2,132 (2H, q, J = 7,4 Hz, CH₂CH₃), 1,061 (3H, t, J = 7,4 Hz, CH₂CH₃); δ_C (50 MHz, d₆-DMSO) 160, 159,99, 155,50, 146,48, 138,12, 113,83, 110,89, 67,77 (OCH₂), 25,79 (CH₂CH₃), 12,13 (CH₃); m/z 219 (M⁺, 84 %), 202 (86), 190 ([M-Et]⁺, 90 %), 176 (9), 164 ([M-C(Et)=CH₂)⁺, 22 %), 151 ([MH-CH₂C(Et)=CH₂]⁺, 86 %), 135 ([MH-OCH₂C(Et)=CH₂]⁺, 90 %), 109 (60), 69 ([CH₂C(Et)=CH₂]⁺, 50 %), 53 (52), 41 (100), 32 (30), 29 (54).
O⁶-(2-Isopropylallyl)guanin (NU2055)
Natriumhydrid (600 mg, 25 mmol) wurde in wasserfreiem THF (40 ml) suspendiert und 2-Isopropylallylalkohol (1,77 g, 17,7 mmol) in THF (10 ml) wurde zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde bei Raumtemperatur 30 min gerührt und 2-Amino-6-chlorpurin (1,0 g, 5,90 mmol) wurde zugesetzt. Die Reaktion war nach 24 Stunden unter Rückfluss vollständig, worauf das Reaktionsgemisch abkühlen gelassen und mit Eisessig neutralisiert wurde. Ethanol (40 ml) wurde zugesetzt, worauf Silica zugesetzt wurde. Das Lösungsmittel wurde entfernt und das Produkt wurde mittels Säulenchromatographie unter Verwendung von 10 % Ethanol in Dichlormethan als Elutionsmittel gereinigt, wobei die Titelverbindung nach einer Umkristallisation aus Ethylacetat/Petrolether als weißer Feststoff erhalten wurde (470 mg, 34 %), Schmp.: 170-172°C; (Gefunden 233,1268, C₁₁H₁₅N₅O erfordert 233,12596); v_max/cm^–1 3322, 3189, 2963, 2872, 2789 (NH, C-H, NH₂); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,808 (1H, s, C(8)H), 6,257 (2H, br s, NH₂), 5,098 (1H, d, J = 1 Hz, =CH₂), 4,972 (1H, d, J = 1 Hz, =CH₂), 4,953 (2H, s, OCH₂), 2,387 (1H, Septett, J = 6,8 Hz, CH(CH₃)₂), 1,074 (6H, d, J = 6,8 Hz, CH(CH₃)₂); m/z 233 (M⁺, 60 %), 190 ([M-ⁱPr]⁺, 68 %), 151 ([M-CH₂C(ⁱPr)=CH₂]⁺, 95 %), 108 (55), 91 (100), 79 (27), 70 (79), 55 (47), 41 (58).
O⁶-(3-Methyl-2-oxobutyl)guanin. TFA (NU2056)
O⁶-(3-Methyl-2-oxobutyl)guaninethylenacetal (200 mg, 0,72 mmol) wurde in 80 %iger wässriger Trifluoressigsäure (10 ml) gelöst und das Reaktionsgemisch wurde 4 Tage bei Raumtemperatur gerührt. Nach der Entfernung des Lösungsmittels unter vermindertem Druck wurde der Rückstand aus Ethanol umkristallisiert. Die Titelverbindung wurde als weißes Salz erhalten (173 mg, 69 %), Schmp. (zersetzt); (Gefunden 235,1063, C₁₀H₁₃N₅O₂ erfordert 235,10571); v_max/cm^–1 3854, 3501, 3320, 3183, 2977, 2940, 2791 (NH, NH₂, C-H), 1732 (C=O); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 8,232 (1H, s, C(8)H), 6,624 (2H, s, NH₂), 5,261 (2H, s, OCH₂), 2,802 (1H, Septett, J = 6,9 Hz, CH(CH₃)₂), 1,092 (6H, d, J = 6,9 Hz, CH(CH₃)₂); m/z 235 (M⁺, 67 %), 192 ([M-ⁱPr]⁺, 49 %), 165 ([MH-COCH(CH₃)₂]⁺, 60 %), 135 ([MH-OR]⁺, 75 %), 108 (55), 91 (100), 69 (48), 55 (60), 43 (98), 28 (36).
O⁶-(3-Methyl-2-oxobutyl)guaninethylenacetal (NU2057)
Natriumhydrid (264 mg, 11 mmol) wurde in wasserfreiem THF (30 ml) suspendiert und in einem Eisbad gekühlt. Nach der tropfenweisen Zugabe von 3-Methyl-2-oxo-1-butanolethylenacetal (946 mg, 6,48 mmol) wurde das Reaktionsgemisch 15 min bei Raumtemperatur unter Stickstoff gerührt. 2-Amino-6-chlorpurin (733 mg, 4,32 mmol) wurde zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 8 Stunden unter Rückfluss gehalten. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wurde das Gemisch mit Eisessig neutralisiert und das Lösungsmittel wurde entfernt. Der Rückstand wurde in Methanol gelöst und Silica wurde zugesetzt. Das Lösungsmittel wurde entfernt, so dass ein frei fließender Feststoff erhalten wurde. Nach dem Aufbringen auf eine Silicasäule wurde das Produkt mittels Säulenchromatographie unter Verwendung von 10 % Ethanol in Dichlormethan als Elutionslösungsmittel gereinigt. Das Produkt wurde als weißer Feststoff erhalten (620 mg, 51 %) und durch Umkristallisation aus Ethylacetat weiter gereinigt, Schmp: 234-235°C; (Gefunden: C, 51,58; H, 5,84; N, 24,79, berechnet für C₁₂H₁₇N₅O₃: C, 51,61; H, 6,13; N, 25,02 %); v_max/cm^–1 3459, 3343, 3223, 3133, 2980, 2878, 2799 (NH, NH₂, C-H); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 7,831 (1H, s, C(8)H), 6,274 (2H, s, NH₂), 4,418 (2H, s, OCH₂), 4,087-3,862 (4H, m, OCH₂CH₂O), 2,111 (1H, Septett, J = 6,9 Hz, CH(CH₃)₂), 0,936 (6H, d, J = 6,9 Hz, CH(CH₃)₂); m/z 279 (M⁺, 30 %), 274 (5), 250 (46), 236 ([M-ⁱPr]⁺, 45 %), 222 (13), 212 (42), 194 (5), 180 (5), 164 ([M-C(OCH₂CH₂O)ⁱPr)]⁺, 52 %), 152 (30), 134 ([M-OR]⁺, 70 %), 123 (35), 115 [(C(OCH₂CH₂O)ⁱPr]⁺, 100 %), 96 (32), 82 (45), 67 (35), 55 (35), 43 (ⁱPr⁺, 58 %), 29 (16).
O⁶-Cyclohexylmethylguanin (NU2058)
Cyclohexylmethanol (1,23 ml, 9,84 mmol) wurde wasserfreiem DMSO (8 ml) mit Natriumhydrid (0,085 g, 3,54 mmol) zugesetzt. Nach 1 Stunde Rühren unter N₂ wurde 2-Amino-1,4-diazabicyclo[2.2.2]octylpurin-6-ylammoniumchlorid (500 mg, 1,78 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 48 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das resultierende Gemisch wurde mit Eisessig (0,2 ml) neutralisiert. DMSO und Essigsäure wurden dann entfernt und das Rohprodukt wurde auf Silicagel einer Säulenchromatographie unterworfen, wobei mit 10 % Methanol in Dichlormethan eluiert wurde. Das Produkt wurde als weißer Feststoff isoliert (0,221 g, 51 %); (Gefunden: C, 50,88; H, 5,93; N, 24,29 %; C₁₂H₁₇N₅O und 2 M H₂O erfordert C, 50,88; H, 6,0; N, 24,73 %); v_max/cm^–1 3350 (NH₂), 3200 (NH), 2900 (CH₂), 1640 (C=C); dH-NMR (200 MHz, d₆-DMSO) 1,50 (11H, m, C(3')H, C(4')H, C(5')H und C(2')H, C(1')H, C(6')H), 4,29 (2H, d, J = 6 Hz, OCH₂), 6,31 (2H, s, NH₂), 7,92 (1H, s, C(8)H); m/z (FAB) 247 (M⁺, 14 %), 151 (MH⁺-C₆H₁₁CH₂, 100), 134 (M⁺-OCH₂C₆H₁₁, 8), 81 (8).
O⁶-(5'-Hexenyl)guanin (NU2061)
5-Hexen-1-ol (4 ml) wurde langsam einer Lösung von Natriumhydrid (0,345 g, 14,7 mmol) in wasserfreiem THF (20 ml) zugesetzt. 2-Amino-6-chlorpurin (0,50 g, 2,95 mmol) wurde nach 30 min zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 12 Stunden unter Stickstoff unter Rückfluss gehalten. Das Reaktionsgemisch wurde abgekühlt, neutralisiert (Eisessig), die Lösungsmittel wurden entfernt und der Rückstand wurde aus Wasser umkristallisiert. Die Titelverbindung wurde als weißer Feststoff gesammelt (0,45 g, 70 %) (Schmp.: 203°C), (Gefunden: C, 56,2; H, 6,3; N, 29,6; C₁₁H₁₅N₅O erfordert C, 56,6; H, 6,5; N, 30,0 %), v_max/cm^–1 3483 (NH₂), 3302 (NH), 3181 (CH); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 12,50 (1H, br s, NH), 7,93 (1H, s, C(8)H), 6,33 (2H, s, NH₂), 5,94 (1H, m, CH₂=CH), 5,1 (2H, m, CH₂=CH), 4,49 (2H, t, J 6,55, OCH₂), 2,22 (2H, q, CH₂CH), 1,87 (2H, m, OCH₂CH₂), 1,60 (2H, m, O(CH₂)₂CH₂CH₂CH=CH₂); δ_C (50,3 MHz, d₆-DMSO) 160,1, 138,9, 115,3, 65,6, 33,2, 28,3, 25,1; m/z (+EI) 233 (M⁺, 24 %), 151 (MH⁺-(CH₂)₄CH=CH₂, 100).
O⁶-Heptylguanin (NU2064)
Natrium (0,5 g, 22,1 mmol) wurde in Heptan-1-ol (20 ml) unter Stickstoff gelöst. Nach 30 min wurde 2-Amino-6-chlorpurin (0,75 g, 4,42 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 36 Stunden unter Rückfluss gehalten. Nach dem Abkühlen wurde das Reaktionsgemisch neutralisiert (Eisessig), das Lösungsmittel wurde entfernt und der Rückstand wurde aus Wasser umkristallisiert. Die Titelverbindung wurde als weißer Feststoff gesammelt (0,59 g, 54 %) (Schmp.: 172-175°C), (Gefunden: C, 57,8; H, 7,6; N, 27,7; C₁₂H₁₉N₅O erfordert C, 57,8; H, 7,7; N, 28,1 %), v_max/cm^–1 3499 (NH₂), 3300 (NH), 3179 (CH); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 12,50 (1H, br s, NH), 7,89 (1H, s, C(8)H), 6,33 (2H, s, NH₂), 4,47 (2H, t, J 6,6, OCH₂), 1,84 (2H, m, OCH₂CH₂), 1,38 (8H, m, (CH₂)₄CH₃), 0,96 (3H, t, J 6,4, CH₃); m/z (+EI) 249 (M⁺, 52 %), 164 (M⁺-(CH₂)₅CH₃, 17), 151 (MH⁺-(CH₂)₆CH₃, 10).
Synthese von O⁶-(trans-3'-Hexenyl)guanin (NU2067)
Natriumhydrid (0,345 g, 14,74 mmol) wurde in trockenem THF (20 ml) suspendiert und trans-3-Hexen-1-ol (2 ml, 16,3 mmol) wurde langsam zugesetzt. Nach 30 min wurde 2-Amino-6-chlorpurin (0,50 g, 2,95 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 24 Stunden unter Stickstoff unter Rückfluss gehalten. Das Reaktionsgemisch wurde abgekühlt, neutralisiert (Eisessig), die Lösungsmittel wurden entfernt und der Rückstand wurde aus Wasser umkristallisiert. Die Titelverbindung wurde als weißer Feststoff gesammelt (0,42 g, 61 %) (Schmp.: 204-205°C); v_max/cm^–1 3500 (NH₂), 3190 (NH), 3005 (CH); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 12,50 (1H, s, NH), 7,91 (1H, s, C(8)H), 6,35 (2H, s, NH₂), 5,7-5,4 (2H, m, CH=CH) 2,6-2,5 (m, CH₂CHCH) 2,09 (2H, p, J 6,9, CH₂CH₃) 1,03 (3H, t, J 6,4, CH₃); m/z (+EI) 233 (M⁺, 24 %), 218 (M⁺-CH₃, 2), 191 (M⁺-CHCH₂CH₃), 165 (MH⁺-CH₂CHCHCH₂CH₃, 9), 151 (MH⁺-(CH₂)₂CHCHCH₂CH₃, 100), 134 (MH⁺-OCH₂CH₂CHCHCH₂CH₃, 20).
O⁶-(Cyclopentyl)methylguanin (NU2068) – Verfahren A
Cyclopentanmethanol (199 mg, 1,99 mmol) wurde Natriumhydrid (0,017 g, 0,007 mmol) in wasserfreiem DMSO (0,4 ml) zugesetzt. Nach 1 Stunde wurde "DABCO-Purin" (0,10 g, 0,36 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 48 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Essigsäure (0,06 ml) wurde zugesetzt und die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt. Der Rückstand wurde mittels Flashsäulenchromatographie auf Silicagel gereinigt, wobei mit 10 % Methanol in Dichlormethan eluiert wurde. Die Titelverbindung wurde als weißer Feststoff gesammelt (67 mg, 82 %) (Schmp.: 121°C), (Gefunden: C, 54,4; H, 6,5; N, 28,5; C₁₁H₁₅N₅O + 0,5 M H₂O erfordert C, 54,5; H, 6,2; N, 28,9 %), v_max/cm^–1 3481 (NH₂), 3352 (NH), 3204 (CH), 2957 (CH), 1626 (C=C), 1581 (C=C); λ_max (CH₃OH)/nm 282; δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 12,50 (1H, s, NH), 7,93 (1H, s, C(8)H), 6,35 (2H, s, NH₂), 4,38 (2H, d, J 7, OCH₂), 2,47 (1H, m, C(1')H), 2,0-1,2 (8H, m, C(2')H, C(3')H, C(4')H, C(5')H); m/z (+EI) 233 (M⁺, 21 %), 151 (MH⁺-C₆H₁₁, 100).
Synthese von O⁶-(Cyclopentyl)methylguanin (NU2068) – Verfahren B
Cyclopentanmethanol (50 mg, 5,8 mmol) wurde Natriumhydrid (0,35 g, 14,7 mmol) in wasserfreiem THF (20 ml) zugesetzt. Nach 20 min wurde 2-Amino-6-chlorpurin (0,50 g, 2,9 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 4 Tage unter Stickstoff unter Rückfluss gehalten. Das Reaktionsgemisch wurde abgekühlt, neutralisiert (Essigsäure), die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt und der Rückstand wurde aus Wasser umkristallisiert, wobei die Titelverbindung als weißer Feststoff erhalten wurde (0,42 g, 62 %) (Schmp.: 121°C).
O⁶-(3'-Cyclohexenyl)methylguanin (NU2073)
3-Cyclohexenmethanol (2,5 g, 22 mmol) wurde Natriumhydrid (1,32 g, 55 mmol) in trockenem THF (100 ml) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 30 min bei Raumtemperatur unter Argon gerührt. 2-Amino-6-chlorpurin (1,87 g, 11 mmol) wurde zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 24 Stunden unter Rückfluss gehalten. Die resultierende Lösung wurde abgekühlt und mit Essigsäure angesäuert, die Lösungsmittel wurden entfernt und der Rückstand wurde mit Wasser zerrieben. Die Reinigung durch Flashsäulenchromatographie auf Silicagel, wobei mit 10 % Methanol in Dichlormethan eluiert wurde, ergab die Titelverbindung als weißen kristallinen Feststoff (2,57 g, 95 %) (Schmp.: 176-177°C), (Gefunden: C, 58,0; H, 6,3; N, 27,7; C₁₂H₁₅N₅O + 0,25 M CH₃OH erfordert C, 58,1; H, 6,3; N, 27,7 %); v_max/cm^–1 3340 (NH₂), 3200 (NH), 2900 (CH), 1620 (C=C), 1580 (C=C); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 12,35 (1H, br s, NH), 7,76 (1H, s, C(8)H), 6,15 (2H, s, NH₂), 5,70 (2H, s, C(3')H, C(4')H), 4,30 (2H, d, J 7, OCH₂), 2,10-1,85 (6H, 3 × m, C(2')H, C(5')H, C(6')H), 1,40 (1H, m, C(1')H); δ_C (50,3 MHz, d₆-DMSO) 160,1, 155,3, 137,9, 127,2, 125,9, 69,9, 33,1, 28,0, 25,1, 24,2; m/z (FAB) 246 (MH⁺, 70 %), 152 (MH₂ ⁺-C₇H₁₁, 100), 95 (C₇H₁₁, 8).
O⁶-(1'-Cyclopentenyl)methylguanin (NU2074)
Natriumhydrid (0,57 g, 24 mmol) in wasserfreiem DMSO (6 ml) wurde 1-Cyclopentenmethanol (6,57 g, 67 mmol) zugesetzt. Nach 1 Stunde wurde 2-Aminotrimethylpurin-6-ylammoniumchlorid (2,74 g, 12 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde eine weitere Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Essigsäure (2 ml) und Ether (360 ml) wurden der resultierenden Lösung zugesetzt und der Feststoff wurde gesammelt und mit Wasser zerrieben. Der Ether, das DMSO und das 1-Cyclopentenmethanol wurden aus dem Filtrat entfernt und der Rückstand wurde mit Ether verdünnt, um eine zweite Ausbeute zu erhalten. Die Feststoffe wurden vereinigt, in heißem Ethanol gelöst, filtriert und das Volumen des Lösungsmittels wurde auf 10 ml vermindert, worauf die Titelverbindung als blassgelber Feststoff gesammelt wurde (1,92 g, 70 %) (Schmpq.: 210°C); (Gefunden: C, 57,1; H, 5,9; N, 28,0 C₁₁H₁₅N₅O + 0,4 M CH₃CN₂OH erfordert C, 56,7; H, 6,2; N, 28,0 %), v_max/cm^–1 3460 (NH₂), 3300 (NH), 1640 (C=C), 1280 (CN), 1150 (CO); λ_max (CH₃OH)/nm 385; δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 12,35 (1H, br s, NH), 7,75 (1H, s, C(8)H), 6,15 (2H, s, NH₂), 5,75 (1H, s, C(2')H), 5,00 (2H, s, OCH₂), 2,35 (4H, m, C(3')H, C(5')H), 1,90 (2H, q, J 7,4, C(4')H); δ_C (50,3 MHz, d₆-DMSO) 159,9, 140,2, 138,0, 128,2, 64,2, 32,9, 32,3, 23,1; m/z (FAB) 233 (12 %), 232 (MH⁺, 100), 231 (M⁺, 55), 230 (M⁺-H, 35), 152 (M⁺-C₆H₇, 70).
O⁶-(1'-Cyclohexenyl)methylguanin (NU2076)
1-Cyclohexenmethanol (2,04 g, 18,2 mmol) wurde Natriumhydrid (0,16 g, 6,6 mmol) in wasserfreiem DMSO (6 ml) zugesetzt. Nach 1 Stunde wurde 2-Aminotrimethylpurin-6-ylammoniumchlorid (0,75 g, 3,3 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde eine weitere Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Essigsäure (2 ml) und dann Ether (360 ml) wurden zugesetzt. Nach 2 Stunden wurde der Feststoff gesammelt und mit Wasser zerrieben. Der Ether, das DMSO und der Alkohol wurden aus dem Filtrat entfernt, das mit Ether verdünnt wurde, um eine zweite Ausbeute zu erhalten. Die vereinigten Feststoffe wurden in heißem Methanol gelöst, filtriert und das Volumen des Lösungsmittels wurde auf 10 ml vermindert, worauf die Titelverbindung als blassgelber Feststoff gesammelt wurde (0,57 g, 71 %) (Schmp.: 195-197°C); (Gefunden: C, 55,8; H, 6,0; N, 26,25; C₁₂H₁₅N₅O + 0,85 M H₂O erfordert C, 55,3; H, 6,4; N, 26,9 %); v_max/cm^–1 3457 (NH₂), 3295 (NH), 3186 (CH), 2931 (CH), 1698 (C=C), 1631 (C=C); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 12,50 (1H, br s, NH), 7,92 (1H, s, C(8)H), 6,33 (2H, s, NH₂), 5,93 (1H, s, C(2')H), 4,88 (2H, s, OCH₂), 2,14 und 1,68 (8H, 2 × m, C(3')H und C(6')H, C(4')H und C(5')H); δ_C (50,3 MHz, d₆-DMSO) 159,9, 138,5, 133,7, 125,7, 69,7, 25,8, 24,8, 22,3, 22,1; m/z (+EI) 245 (M⁺, 59 %), 151 (MH⁺-C₇H₁₁, 100), 134 (M⁺-OC₇H₁₁, 56).
O⁶-(S)-[4'-(Isopropen-2''-yl)-cyclohex-1'-enyl])methylguanin (NU2077)
(s)-4-(Isopropen)cyclohex-1-enmethanol ((s)-Perillylalkohol) (3,66 g, 24 mmol) wurde Natriumhydrid (0,21 g, 8,8 mmol) in wasserfreiem DMSO (6 ml) zugesetzt. Nach 1 Stunde wurde 2-Aminotrimethylpurin-6-ylammoniumchlorid (1,00 g, 4,4 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde eine weitere Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Essigsäure (2 ml) und dann Ether (360 ml) wurden zugesetzt. Nach 2 Stunden wurde der Feststoff gesammelt und mit Wasser zerrieben. Der Ether, das DMSO und der Alkohol wurden aus dem Filtrat entfernt und Verdünnen mit Ether ergab eine zweite Ausbeute. Die vereinigten Feststoffe wurden in heißem Methanol gelöst, filtriert und das Volumen des Lösungsmittels wurde auf 10 ml vermindert, worauf die Titelverbindung als weißer Feststoff gesammelt wurde (0,79 g, 64 %) (Schmp.: 190-192°C); (Gefunden: C, 63,0; H, 6,4; N, 23,5; C₁₅H₁₉N₅O + 0,2 M CH₃OH erfordert C, 62,6; H, 6,8; N, 24,0 %), v_max/cm^–1 3460 (NH₂), 3404 (NH), 3315 (CH), 3205 (CH), 2964 (CH), 1626 (C=C), 1584 (C=C); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 12,50 (1H, br s, NH), 7,93 (1H, s, C(8)H), 6,35 (2H, s, NH₂), 5,96 (1H, s, C(2')H), 4,91 (2H, s, CH₂=), 4,82 (2H, s, OCH₂), 2,2-1,9 (6H, m, C(3')H, C(5')H und C(6')H), 1,82 (3H, s, CH₃), 1,60 (1H, m, C(4')H); δ_C (50,3 MHz, d₆-DMSO) 159,9, 149,4, 133,5, 125,1, 109,3, 69,2, 30,2, 27,2, 26,3, 20,9; m/z (+EI) 285 (M⁺, 19 %), 151 (M⁺-C₁₀H₁₅, 100).
O⁶-Ribofuranosylguanin (NU6012)
Methyl-2,3-O-isopropyliden-b-D-ribofuranosid (1,23 g, 6,03 mmol) wurde in wasserfreiem DMSO (10 ml) gelöst und Natriumhydrid (77 mg, 3,21 mmol) wurde ebenfalls zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 1 Stunde bei Raumtemperatur unter N₂ gerührt, worauf 2-Amino-1,4-diazabicyclo[2.2.2]octylpurin-6-ylammoniumchlorid (0,3 g, 1,07 mmol) zugesetzt wurde. Das Reaktionsgemisch wurde 48 Stunden bei Raumtemperatur umgesetzt. Das Gemisch wurde dann mit Eisessig neutralisiert und DMSO wurde unter vermindertem Druck entfernt. Das Rohprodukt wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt, wobei mit 10 % Methanol in Dichlormethan eluiert wurde, wodurch ein cremefarbener Feststoff erhalten wurde (0,0886 g, 74 %), Schmp.: 220-225°C; v_max/cm^–1 3460 (NH₂), 3201 (NH), 2937 (CH₂), 1627 (C=C); dH-NMR (200 MHz, d₆-DMSO) 1,37 (3H, s, CH₃), 1,49 (3H, s, CH₃), 3,34 (3H, s, OCH₃), 4,50 (3H, m, OCH₂, C(4)H), 4,75 (1H, d, C(2)H, J = 6 Hz), 4,91 (1H, d, C(3)H, J = 6 Hz), 5,07 (1H, s, C(1)H), 6,41 (2H, s, NH₂), 7,93 (1H, s, C(8)H), 12,5 (1H, br s, NH); m/z (+EI) 337 (M⁺, 49 %), 322 (M⁺-CH₃, 58), 151 (MN⁺-C_gH₁₄O₄, 68).
O⁶-Tetrahydrofurfurylmethylguanin (NU6013)
Tetrahydrofurfurylalkohol (1,7 g, 16,6 mmol) und Natriumhydrid (0,21 g, 8,75 mmol) wurden wasserfreiem DMSO (8 ml) zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 1 Stun de bei Raumtemperatur unter N₂ gerührt. 2-Amino-6-chlorpurin (0,5 g, 2,95 mmol) wurde dann zugesetzt und das Gemisch wurde 48 Stunden bei 100°C erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde mit Eisessig neutralisiert und DMSO wurde unter vermindertem Druck entfernt. Das Rohprodukt wurde unter Verwendung von 10 % Methanol in Dichlormethan einer Säulenchromatographie unterworfen und das Produkt wurde erhalten, jedoch zeigte ein NMR eine Verunreinigung durch 2-Amino-6-chlorpurin.
Dieses Gemisch wurde folglich in wasserfreiem DMSO (14 ml) suspendiert und 1,4-Diazabicyclo[2.2.2]octan (0,358 g, 3,2 mmol) wurde zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde dann 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das DMSO wurde unter vermindertem Druck entfernt und das Rohprodukt wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt, wobei mit 20 % Methanol in Dichlormethan eluiert wurde. Die Titelverbindung wurde als cremefarbener Feststoff erhalten (0,295 g, 43 %), Schmp.: 224-228°C; (Gefunden: C, 51,06; H, 5,53; N, 29,79 %; C₁₀H₁₃N₅O₂ und 0,01 M CH₂Cl₂ erfordert C, 50,93; H, 5,52; N, 29,67 %); v_max/cm^–1 3331 (NH), 2976 (CH₂), 2550 (NH₂), 1625 (C=C), 1580 (NH); dH-NMR (200 MHz, d₆-DMSO) 1,93 (4H, m, C₄H₇O), 3,84 (2H, m, C₄H₇O), 4,34 (1H, m, C(1)H), 4,47 (2H, d, J = 4,5 Hz, OCH₂), 6,36 (2H, s, NH₂), 7,95 (1H, s, C(8)H), 12,6 (1H, br s, NH); m/z (+EI) 249 (M⁺, 51 %), 165 (MH⁺, C₄H₇O, 42), 151 (MH⁺-C₅H₉O, 78), 134 (M⁺-C₅H₉O₂, 20), 78 (31).
O⁶-Adamantylmethylguanin (NU6014)
1-Adamantanmethanol (1,374 g, 8,3 mmol) wurde in wasserfreiem DMSO (10 ml) gelöst und dann wurde Natriumhydrid zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 1 Stunde bei Raumtemperatur unter N₂ gerührt. 2-Amino-6-chlorpurin (0,25 g, 1,48 mmol) wurde dann dem Reaktionsgemisch zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 4 Tage bei 100°C erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde dann abgekühlt und anschließend mit Eisessig neutralisiert und dann wurden die Lösungsmittel entfernt. Die Reinigung des Rohprodukts wurde durch eine Säulenchromatographie unter Verwendung von 10 % Methanol in Dichlormethan als Elutionslösungsmittel erreicht. Das gewünschte Produkt wurde als cremefarbener Feststoff in einer niedrigen Ausbeute isoliert (0,04 g, 10 %), Schmp.: 260-265°C; (Gefunden: C, 61,6; H, 6,51; N, 22,44 %; C₁₆H₂₁N₅O und 0,7 M H₂O erfordert C, 61,6; H, 7,19: N, 22,46 %); v_max/cm^–1 3315 (NH), 2900 (CH₂), 2573 (NH₂), 1622 (C=C), 1584 (NH); dH-NMR (200 MHz, d₆- DMSO) 1,92 (16H, m, C₁₀H₁₆), 4,11 (2H, s, OCH₂), 6,35 (2H, s, NH₂), 7,90 (1H, s, C(8)H), 12,46 (1H, br s, NH); m/z (+EI) 299 (M⁺, 100 %), 151 (M⁺, C₁₁H₁₆, 44), 135 (M⁺-C₁₁H₁₆O, 20).
O⁶-Galactosylguanin (NU6017)
1,2:3,4-Diisopropyliden-a-D-galactopyranose (1,56 g, 6 mmol) und Natriumhydrid (0,078 g, 3,25 mmol) wurden wasserfreiem DMSO (10 ml) zugesetzt und 1 Stunde bei Raumtemperatur umgesetzt. 2-Amino-1,4-diazabicyclo[2.2.2]octylpurin-6-ylammoniumchlorid (0,3 g, 1,07 mmol) wurde dann zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 48 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, worauf es mit Eisessig neutralisiert wurde. Die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt. Das Rohprodukt wurde in 10 % Methanol in Dichlormethan einer Säulenchromatographie unterworfen und dann aus Ethylacetat-Petrolether umkristallisiert. Das gewünschte Produkt wurde als weißer Feststoff in einer vernünftigen Ausbeute erhalten (0,2256 g, 54 %), Schmp.: 147-149°C; (Gefunden: C, 51,9; H, 5,8; N, 17,81 % C₁₇H₂₃N₅O₆ und 0,01 M CH₂Cl₂ erfordert C, 51,8; H, 5,84; N, 17,77 %); v_max/cm^–1 3459 (NH₂), 3200 (NH), 2936 (CH₂), 1625 (C=C); dH-NMR (200 MHz, d₆-DMSO) 1,39 (6H, d, 2'CH₃), 1,48 (6H, s, 2'CH₃), 4,27 (1H, m, C(5)H), 4,45 (3H, m), 4,61 (1H, dd, J = 7 Hz), 4,74 (1H, dd, J = 7 Hz), 5,59 (1H, d, J = 5 Hz), 6,39 (2H, s, NH₂), 7,91 (1H, s, C(8)H), 7,95 (1H, br s, NH); m/z (+EI) M⁺ (393,58 %), M⁺-CH₃ (378,45), 351 (4), M⁺-C₁₁H₁₆O₅ (165, 14), 151 (100), 93 (11), 43 (63).
2-Amino-6-(2-naphthyl)methylguanin (NU6018)
2-Naphthalinmethanol (0,8 g, 5 mmol) und Natriumhydrid (0,065 g, 2,71 mmol) wurden wasserfreiem DMSO (10 ml) zugesetzt. Nach 1 Stunde wurde dem Reaktionsgemisch 2-Amino-1,4-diazabicyclo[2.2.2]octylpurin-6-ylammoniumchlorid (0,25 g, 0,89 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 5 Tage bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit Eisessig (0,1 ml) neutralisiert und dann wurden die Lösungsmittel entfernt. Das Rohprodukt wurde mittels Säulenchromatographie unter Verwendung eines Lösungsmittelsystems aus 10 % Methanol in Dichlormethan gereinigt. Das Titelprodukt wurde als cremefarbener Feststoff isoliert (0,0645 g, 25 %), Schmp.: 230-234°C; (Gefunden: C, 66; H, 4,47; N, 24,05 %; C₁₆H₁₃N₅O und 0,01 M CH₂Cl₂ erfordert C, 65,83; H, 4,46; N, 23,98 %); v_max/cm^–1 3335 (NH), 2939 (CH₂), 2562 (NH₂), 1642 (C=C), 1585 (NH); dH-NMR (200 MHz, d₆-DMSO) 5,75 (2H, s, OCH₂), 6,44 (2H, br s, NH₂), 7,68 (3H, m, C₁₀H₇), 8,04 (5H, m, C(8)H und C₁₀H₇); m/z (+EI) 291 (M⁺, 53 %), 141 (C₁₁H₉ ⁺, 100), 95 (8), 81 (16).
O⁶-Tetrahydropyranylmethylguanin (NU6019)
Tetrahydropyran-2-methanol (0,235 g, 2,02 mmol) wurde mit Natriumhydrid (0,026 g, 1,08 mmol) in wasserfreiem DMSO (8 ml) versetzt und 1 Stunde bei Raumtemperatur unter N₂ gerührt. 2-Amino-1,4-diazabicyclo[2.2.2]octylpurin-6-ylammoniumchlorid (0,1 g, 0,36 mmol) wurde dem Reaktionsgemisch dann zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 48 Stunden gerührt. Das Gemisch wurde dann mit Eisessig neutralisiert und die Lösungsmittel wurden entfernt. Die Reinigung des Rohprodukts wurde mittels Säulenchromatographie erreicht, wobei mit 10 % Methanol in Dichlormethan eluiert wurde. Das Titelprodukt wurde in einer guten Ausbeute als cremefarbener Feststoff erhalten (0,05127 g, 62 %), Schmp.: 255-260°C; (Gefunden: C, 53,0; H, 6,0; N, 28,1 %; C₁₁H₁₅N₅O₂ und 0,01 M CH₂Cl₂ erfordert C, 52,88; H, 6,01; N, 28,01 %); v_max/cm^–1 3336 (NH), 2940 (CH₂), 2563 (NH₂), 1626 (C=C), 1587 (NH); dH-NMR (200 MHz, d₆-DMSO) 1,63 (6H, m, C₅H₉O), 3,50 (1H, m, C₅H₉O), 3,76 (1H, m, ax C(1)H), 3,99 (1H, m, äquat C(5)H), 4,44 (2H, m, OCH₂), 6,37 (2H, s, NH₂), 7,92 (1H, s, C(8)H), 12,5 (1H, br s, NH); m/z (+EI) 249 (M⁺, 34 %), 165 (M⁺-C₅N₈O, 26), 151 (M⁺-C₆H₁₁O, 100).
2-Amino-6-(1-naphthyl)methylguanin (NU 6020)
1-Naphthalinmethanol (0,096 g, 6,1 mmol) und Natriumhydrid (0,078 g, 3,25 mmol) wurden wasserfreiem DMSO (8 ml) zugesetzt und 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. 2-Amino-1,4-diazabicyclo[2.2.2]octylpurin-6-ylammoniumchlorid (0,3 g, 1,1 mmol) wurde dem Reaktionsgemisch dann zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 4 Tage unter Stickstoff bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wurde dann mit Eisessig neutralisiert und die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt. Die Reinigung des Rohprodukts wurde mittels Säulenchromatographie erreicht, wobei mit 10 % Methanol in Dichlormethan eluiert wurde. Das Titelprodukt wurde als blassgelber Feststoff erhalten (0,1773 g, 57 %), Schmp.: 165- 170°C; (Gefunden: C, 63,94; H, 4,55; N, 22,6 %; C₁₆H₁₅N₅O und 0,01 M CH₂Cl₂ erfordert C, 65,83; H, 4,46; N, 23,98 %); v_max/cm^–1 3424 (NH), 2971 (CH₂), 2638 (NH₂), 1635 (C=C), 1579 (NH); dH-NMR (200 MHz, d₆-DMSO) 1,92 (16H, m, C₁₀H₁₆), 4,11 (2H, s, OCH₂), 6,35 (2H, s, NH₂), 7,90 (1H, s, C(8)H), 12,46 (1H, br s, NH); m/z (+EI) 291 (M⁺, 17 %), 141 (C₁₁H₈ ⁺, 90), 81 (45).
O⁶-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-methoxy)guanin (NU 6021)
2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-methanol (0,079 g, 5,98 mmol) wurde wasserfreiem DMSO (8 ml) mit Natriumhydrid (0,08 g, 3,33 mmol) zugesetzt. Dieses Gemisch wurde 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt, worauf dem Reaktionsgemisch 1,4-Diazabicyclo(2.2.2]octylpurin-6-ylammoniumchlorid (0,3 g, 1,07 mmol) zugesetzt wurde. Das Reaktionsgemisch wurde 5 Tage bei Raumtemperatur unter N₂ gerührt und anschließend mit Eisessig neutralisiert, worauf die Lösungsmittel durch eine Kurzwegdestillation entfernt wurden. Das Rohprodukt wurde durch eine Säulenchromatographie gereinigt, wobei mit 10 % Methanol in Dichlormethan eluiert wurde, wodurch die Titelverbindung als cremefarbener Feststoff in einer guten Ausbeute erhalten wurde (0,2466 g, 87 %); (Gefunden: C, 47,49; H, 6,21; N, 24,42 % C₁₁H₁₅N₅O₃ und 0,15 M CH₃OH und 0,75 M H₂O erfordert C, 47,23; H, 6,04; N, 24,71 %), Schmp.: 170-172°C; v_max/cm^–1 3197 (NH), 2942 (CH₂), 1626 (C=C); dH-NMR (200 MHz, d₆-DMSO) 1,38 (3H, s, CH₃), 1,44 (3H, s, CH₃), 3,84 (1H, dd, C(3)H), 4,18 (1H, dd, C(3)H), 4,48 (3H, m, OCH₂, C(2)H), 6,35 (2H, br s, NH₂), 7,91 (1H, s, C(8)H); δ_C (50 MHz, d₆-DMSO) 25,69 (Me), 26,96 (Me), 66,12, 66,46, 73,82 (OCH₂), 109,19, 159,93; m/z M⁺ (265,28 %), M⁺-CH₃ (250,47), MH⁺-C₆H₁₁O₂ (151, 100).
O⁶-(1,4-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methoxy)guanin (NU 6022)
(+)-1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-2-methanol (0,858 g, 3,9 mmol) und Natriumhydrid (0,065 g, 2,71 mmol) wurden wasserfreiem DMSO (8 ml) zugesetzt und 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Dem Reaktionsgemisch wurde 1,4-Diazabicyclo[2.2.2]octylpurin-6-ylammoniumchlorid (0,25 g, 0,89 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 5 Tage bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wurde mit Eisessig neutralisiert und die Lösungsmittel wurden unter vermin dertem Druck entfernt. Die Reinigung des Rohprodukts mittels Säulenchromatographie unter Verwendung von 10 % Methanol in Dichlormethan ergab das gewünschte Produkt als cremefarbenen Feststoff in einer guten Ausbeute (0,251 g, 92 %), Schmp.: 214-218°C; (Gefunden: C, 54,49; H, 6,38; N, 22,5 %; C₁₄H₁₉N₅O₃ und 0,05 M CH₂Cl₂ erfordert C, 54,52; H, 6,18; N, 22,64 %); v_max/cm^–1 3477 (NH₂), 3182 (NH), 2937 (CH₂), 1618 (C=C); dH-NMR (200 MHz, d₆-DMSO) 1,60 (10H, m, C₅H₁₀), 3,86 (1H, dd, C(3)H), 4,19 (1H, dd, C(3)H), 4,53 (3H, m, OCH₂, C(2)H), 6,37 (2H, br s, NH₂), 7,94 (1H, s, C(8)H); δ_C (50 MHz, d₆-DMSO) 23,74, 23,91, 24,94, 34,92, 36,31, 65,87, 66,55, 73,51 (OCH₂), 109,64, 138,73, 159,92; m/z M⁺ (305,29 %), MH⁺-C₆H₁₀O (208, 7), MH⁺-C₉H₁₅ (151, 86).
In den nachstehend beschriebenen weiteren Beispielen der Herstellung von erfindungsgemäßen O⁶-Alkylguaninderivaten war das allgemeine Syntheseverfahren wie folgt, falls nichts anderes angegeben ist:
Der geeignete Alkohol (5,6 mmol) wurde einer Suspension von Natriumhydrid (0,08 g, 3 mmol) in wasserfreiem DMSO (8 ml) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde unter Stickstoff 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. 1,4-Diazabicyclo[2.2.2]octanpurin („DABCO-Purin", 0,3 g, 1,07 mmol) wurde zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 5 Tage bei Umgebungstemperatur unter einer Stickstoffatmosphäre gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit Eisessig neutralisiert und die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt. Das zurückgebliebene Produkt wurde mittels Säulenchromatographie auf Silica unter Verwendung von Dichlormethan:Methanol (9:1) als Elutionsmittel gereinigt.
2-Amino-6-cyclohexylethyloxypurin (NU6023)
Die Titelverbindung wurde in einer Ausbeute von 82 %, 0,23 g, isoliert; Schmp.: 209,5°C; (Gefunden: C, 59,78; H, 7,24; N, 26,83, berechnet für C₁₃H₁₉N₅O: C, 59,77; H, 7,28; N, 26,82 %); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 1,02 (2H, m, CH₂), 1,20-1,30 (11H, m), 4,518 (2H, t, OCH₂), 6,287 (2H, br s, NH₂), 7,906 (1H, s, C(8)H), 12,503 (1H, br s, NH); m/z (EI) 261 (M⁺).
2-Amino-6-[(R)-2',2'-dimethyl-1',3'-dioxolan-5'-methyl]oxypurin (NU6024)
Die Titelverbindung wurde in einer Ausbeute von 98 %, 0,28 g, erhalten; Schmp.: 190,4°C; (Gefunden: C, 48,17; H, 5,81; N, 25,57, berechnet für C₁₁H₁₅N₅O₃·0,5 Mol H₂O: C, 48,17; H, 5,88; N, 25,53 %; δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 1,409 (6H, d, 2 × CH₃), 3,863 (1H, m), 4,209 (1H, m), 4,576 (3H, m), 6,378 (2H, br s, NH₂), 7,939 (1H, s, C(8)H), 12,5 (1H, br s, NH); m/z (EI) 265 (M⁺).
2-Amino-6-[(S)-2',2'-dimethyl-1',3'-dioxolan-5'-methyl]oxypurin (NU6025)
Das gewünschte Produkt wurde in einer Ausbeute von 98 %, 0,28 g, erhalten; Schmp.: 166,7°C; (Gefunden: C, 49,65; H, 5,66; N, 26,04, berechnet für C₁₁H₁₅N₅O₃: C, 49,81; H, 5,66; N, 26,42 %); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 1,411 (6H, d, 2 × CH₃), 3,904 (1H, m), 4,200 (1H, m), 4,596 (3H, m), 6,370 (2H, br s, NH₂), 7,946 (1H, s, C(8)H), 12,600 (1H, br s, NH); m/z (EI) 265 (M⁺).
2-Amino-6-[1',4'-benzodioxanyl-2'-methyl]oxypurin (NU6026)
Das Produkt wurde in einer Ausbeute von 62 %, 0,20 g, erhalten; Schmp.: 184,5°C; (Gefunden: C, 56,13; H, 4,36; N, 23,12, berechnet für C₁₄H₁₃N₅O₃: C, 56,19; H, 4,35; N, 23,41 %); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 4,252 (1H, m), 4,510 (1H, m), 4,797 (3H, m), 6,401 (2H, br s, NH₂), 7,001 (4H, m), 7,959 (1H, s, C(8)H), 12,592 (1H, br s, NH); m/z (EI) 299 (M⁺).
2-Amino-6-(3'-pyridyl)methyloxypurin (NU 6029)
Als cremefarbener Feststoff in einer Ausbeute von 70 %, 0,18 g, erhalten; (Gefunden: C, 52,93; H, 3,76; N, 30,96 %; C₁₁H₁₀N₆O und 0,5 M CH₃CO₂H erfordert C, 52,94; H, 4,41; N, 30,88 %); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 5,61 (2H, s, OCH₂), 6,44 (2H, br s, NH₂), 7,53 (1H, m, C(2)H), 7,94 (1H, s, C(8)H), 8,04 (1H, m, C(1)H), 8,65 (1H, m, C(3)H), 8,85 (1H, m, C(4)H); m/z (+EI) 242 (M⁺, 100 %), 150 ([M-C₆H₆N]⁺, 12), 134 ([M-C₆H₇NO]⁺, 24), 91 (29).
2-Amino-6-(2'-methylnorbornyl)methyloxypurin (NU 6030)
Das gewünschte Produkt wurde als cremefarbener Feststoff in einer Ausbeute von 51 %, 0,15 g, erhalten; δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 0,99-2,2 (13H, m, C₆H₁₃), 4,28 (2H, d, OCH₂), 4,33-4,53 (1H, m), 6,28 (2H, br s, NH₂), 7,90 (1H, s, C(8)H); m/z (+EI) 273 (M⁺, 12 %), 151 ([MH⁺-C₉H₁₅O], 100), 81 (16), 55 (18).
2-Amino-6-[(S)-2'-oxopyrrolidin-5'-methyl]oxypurin (NU 6031)
Die Titelverbindung wurde in einer Ausbeute von 87 %, 0,23 g, erhalten; Schmp.: 150,9°C; (Gefunden: C, 43,52; H, 5,14; N, 30,13; berechnet für C₁₀H₁₂N6_O2·1,5 Mol H₂O: C, 43,63; H, 5,49; N, 30,53 %); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 2,006 (1H, m), 2,304 (3H, m), 4,005 (1H, m), 4,434 (2H, d, CH₂), 6,337 (2H, br s, NH₂), 7,926 (2H, br s, C(8)H) & NH); m/z (EI) 248 (M⁺).
2-Amino-6-[(R)-2'-oxopyrrolidin-5'-methyl)oxypurin (NU 6032)
Nach Umkristallisieren aus Methanol wurde eine Ausbeute von 46 %, 0,12 g, erhalten; Schmp.: 147,8°C; (Gefunden: C, 44,85; H, 5,19; N, 31,19, berechnet für C₁₀H₁₂N₆O₂·1 Mol H₂O: C, 45,11; H, 5,30; N, 31,56 %); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 2,006 (1H, m), 2,367 (3H, m), 4,062 (1H, m), 4,451 (2H, d, CH₂), 6,337 (2H, br s, NH₂), 7,923 (2H, br s, C(8)H & NH); m/z (EI) 248 (M⁺).
2-Amino-6-cyclohexylmethyloxy-8-oxopurin (NU 6033)
Eine Lösung von 2,5,6-Triamino-4-cyclohexylmethyloxypyrimidin (1,0 g, 4,24 mmol) und 1,1'-Carbonyldiimidazol (0,69 g, 4,24 mmol) in wasserfreiem DMF (5 ml) wurde unter Stickstoff 48 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Zugabe von Wasser (100 ml) ergab einen weißen Feststoff, der durch Filtration gesammelt, in 2 M Natriumhydroxidlösung (200 ml) wieder gelöst und filtriert wurde. Das Filtrat wurde mit Eisessig neutralisiert und 2 Stunden bei 4°C stehen gelassen, worauf der abgeschiedene Niederschlag gesammelt und sorgfältig mit Wasser gewaschen wurde. Eine Umkristallisation aus wässrigem Ethanol ergab das gewünschte Produkt (0,65 g, 58 %), Schmp.: 297°C; (Gefunden: C, 54,66; H, 6,47; N, 26,63 %; C₁₂H₁₇N₅O₂ erfordert C, 54,75; H, 6,46; N, 26,62 %); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 1,04-1,39 (5H, m, C₆H₁₁), 1,76-1,90 (6H, m, C₆H₁₁), 4,17 (2H, d, OCH₂, J = 6,53 Hz), 6,15 (2H, br s, NH₂), 10,49 (1H, br s, NH), 11,09 (1H, br s, NH); m/z (+EI) 263 (M⁺, 75 %), 167 (MH⁺-C₇H₁₃, 100), 81 (6), 69 (7).
2-Amino-6-benzyl-8-oxoguanin (NU6043)
2,5,6-Triamino-4-benzyloxypyrimidin (0,05 g, 0,22 mmol) und 1,1'-Dicarbonyldiimidazol (0,04 g, 0,216 mmol) wurden unter Stickstoff in wasserfreiem DMF gelöst. Das Reaktionsgemisch wurde bei Raumtemperatur 48 Stunden gerührt und ein weiterer Teil von 1,1'-Carbonyldiimidazol (0,04 g, 0,216 mmol) wurde zugesetzt. Nach weiteren 24 Stunden Rühren wurde Wasser (50 ml) zugesetzt und der aufgetretene cremefarbene Niederschlag wurde gesammelt. Die gesammelten Feststoffe wurden in 2 M Natriumhydroxidlösung wieder gelöst und nach der Filtration wurde die Lösung mit Eisessig neutralisiert und 12 Stunden bei 4°C stehengelassen. Der abgeschiedene gelbe Niederschlag wurde gesammelt und sorgfältig mit Wasser gewaschen. Eine Umkristallisation aus wässrigem Methanol ergab das gewünschte Produkt (0,05 g, 84 %), Schmp.: 316°C (zersetzt); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 5,53 (2H, s, OCH₂), 6,29 (2H, br s, NH₂), 7,49-7,60 (5H, m, C₆H₅); m/z (+EI) 257 (M⁺, 34 %), 91 (100), 65 (9).
2-Chlor-6-cyclohexylmethoxypurin (NU6047)
Einer Lösung von Natrium (0,18 g, 7,94 mmol) in Cyclohexylmethanol (10 ml) bei 90°C unter Stickstoff wurde 2,6-Dichlorpurin (0,5 g, 2,645 mmol) zugesetzt. Nach 90 min Rühren wurde das Gemisch auf Raumtemperatur abgekühlt, mit Eisessig neutralisiert und die flüchtigen Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt. Der zurückgebliebene Feststoff wurde mit Wasser zerrieben und filtriert (0,6 g, 85 %); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 1,232 (5H, br m), 1,877 (6H, br m), 4,345 (2H, d, OCH₂), 7,991 (1H, s, C(8)H); m/z (EI) 266 (M⁺).
6-Cyclohexylmethoxy-2-N,N-dimethylaminopurin (NU6048)
Einer Lösung von 2-Chlor-6-cyclohexylmethoxypurin (0,15 g, 0,56 mmol) in DMF (3 ml) wurde 2-Aminoethanol (0,12 ml, 1,95 mmol) zugesetzt und das Reaktionsgemisch wurde 3 Tage bei 90°C gerührt. Die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt und das zurückgebliebene Produkt wurde mittels Säulenchromatographie auf Silicagel unter Verwendung von Dichlormethan:Methanol (9:1) als Elutionsmittel gereinigt. Eine Umkristallisation aus Ethylacetat führte zu einer weiteren Reinigung und ergab die Titelverbindung (98 mg, 63 % Ausbeute); δ_H (200 MHz, d₆-DMSO) 1,216 (5H, br m), 1,918 (6H, br m), 3,307 (6H, s, N(CH₃)₂), 4,350 (2H, d, OCH₂), 7,951 (1H, s, C(8)H, 12,8 (1H, br-s, NH); m/z (EI) 275 (M⁺).
Die vorliegende Erfindung sollte so betrachtet werden, dass sie jedwedes neue Merkmal oder jedwede neue Kombination von Merkmalen, das hier bzw. die hier offenbart ist bzw. sind, umfasst, jedoch umfassen die Hauptaspekte der Erfindung in breiter Form grundsätzlich, jedoch nicht ausschließlich, das Folgende:

(i) Neue Verbindungen der Formel (I), wie sie hier definiert worden sind;
(ii) Verbindungen der Formel (I) mit Substituenten, wie sie vorstehend definiert worden sind (einschließlich Prodrug-Formen und Salze davon), zur Therapie oder zur Verwendung in der Medizin und zur Herstellung medizinischer Präparate, die z.B. als CDK-Inhibitoren bei der Behandlung von Krebs oder anderen Zellproliferationsstörungen geeignet sind;
(iii) Verfahren zur Herstellung von neuen Verbindungen der Formel (I), wie sie hier definiert worden sind, einschließlich jedwede neuen Zwischenverbindungen, die bei der Durchführung dieser Verfahren erzeugt werden;
(iv) Pharmazeutische Zusammensetzungen oder Formulierungen, die eine Verbindung der Formel (I), wie sie hier definiert worden ist, zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger darin umfassen; und
(v) Verfahren zur Herstellung einer pharmazeutischen Formulierung, wie sie vorstehend in (iv) definiert ist, z.B. mit den hier beschriebenen Verfahren.

Tabelle 1
Tabelle 1 (Fortsetzung)
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Claims

Verwendung einer Purinverbindung der allgemeinen Strukturformel I:
oder eines pharmazeutisch verträglichen Salzes und/oder einer Prodrug-Form davon zur Herstellung eines Medikaments zur Verwendung in der Therapie als Antitumormittel oder Zellproliferation-inhibierendes Mittel zur Behandlung von Tumoren oder anderen Zellproliferationsstörungen in Säugern, wobei die Purinverbindung das aktive therapeutische Mittel bereitstellt und dadurch gekennzeichnet ist, dass in der Strukturformel I X O, S oder CHR_x ist, wobei R_x H oder C_1-4-Alkyl ist; D ein Halogenatom oder NZ₁Z₂ ist, wobei Z₁ und Z₂ jeweils unabhängig H oder C_1-4-Alkyl oder C_1-4-Hydroxyalkyl sind; A aus H, C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkoxy, Hydroxy, CH₂(CH₂)_nOH (n = 1 bis 4) und NR_a1R_a2 ausgewählt ist, wobei R_a1 und R_a2 jeweils unabhängig H oder C_1-4-Alkyl sind; B aus H, C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkoxy, CF₃, einer gegebenenfalls substituierten Aryl- oder einer gegebenenfalls substituierten Aralkyl- und einer Hydroxygruppe, die ein C=O-Tautomer bereitstellt, ausgewählt ist; und Y ein gegebenenfalls substituierter 4- bis 8-gliedriger carbocyclischer oder heterocyclischer Ring ist oder aus einer gegebenenfalls substituierten geradkettigen oder verzweigten Kohlenwasserstoffkette besteht, mit der Maßgabe, dass Y nicht 4-Chlorphenyl ist, wenn B H ist, A H ist, X O ist und D Cl ist.
Verwendung nach Anspruch 1 einer in Anspruch 1 definierten Purinverbindung, bei der Y eine Ringstruktur ist, die polare Hydroxylsubstituenten umfasst.
Verwendung nach Anspruch 1 einer in Anspruch 1 definierten Purinverbindung, bei der Y ein Cycloalkan- oder Cycloalkenring ist.
Verwendung nach Anspruch 3 einer in Anspruch 3 definierten Purinverbindung, bei der Y ein 5- oder 6-gliedriger Cycloalkan- oder Cycloalkenring mit einer oder zwei Doppelbindung(en) ist.
Verwendung nach Anspruch 4 einer in Anspruch 4 definierten Purinverbindung, bei der eines oder zwei der Kohlenstoffatome in dem Cycloalkan- oder Cycloalkenring durch Heteroatome oder -gruppen ersetzt ist bzw. sind.
Verwendung nach Anspruch 5 einer in Anspruch 5 definierten Purinverbindung, bei der die Heteroatome oder -gruppen aus O, S, NR' (wobei R' H oder C_1-4-Alkyl ist) und (in einem Cycloalkenring) -N= ausgewählt sind.
Verwendung nach Anspruch 1 einer in Anspruch 1 definierten Purinverbindung, bei der Y ein substituierter 4- bis 8-gliedriger carbocyclischer oder heterocyclischer Ring ist, bei dem der oder jeder Substituent aus H, C_1-4-Alkyl, OH, C_1-4-Alkoxy, Halogen, CF₃, CN, N₃ und NR_y1R_y2 ausgewählt ist, wobei R_y1 und R_y2 jeweils unabhängig H oder C_1-4-Alkyl sind.
Verwendung nach Anspruch 7 einer in Anspruch 7 definierten Purinverbindung, bei der zwei der Substituenten an benachbarten Atomen des Rings vorliegen und so verknüpft sind, dass sie eine zusätzliche anellierte carbocyclische oder heterocyclische Ringstruktur bilden.
Verwendung nach Anspruch 1 einer in Anspruch 1 definierten Purinverbindung, bei der Y eine Ringstruktur umfasst, die durch eine der folgenden Strukturformeln dargestellt ist:
worin V und W jeweils unabhängig aus O, S, NR' (R' ist H oder C_1-4-Alkyl) und CH₂ oder =CH- ausgewählt sind, und R₁ und R₂ jeweils H oder C_1-4-Alkyl sind.
Verwendung nach Anspruch 1 einer in Anspruch 1 definierten Purinverbindung, bei der D eine unsubstituierte Aminogruppe und X Sauerstoff ist.
Verwendung nach Anspruch 1 einer Purinverbindung, die eine Strukturformel aufweist, die aus den folgenden Strukturformeln ausgewählt ist:

X = O oder S R₁ = H, CH₃ oder C₂H₅ R₂ = H, CH₃ oder C₂H₅
Verwendung nach Anspruch 1 einer nach einem der vorstehenden Ansprüche definierten Purinverbindung, bei der die oder jede vorhandene Alkylgruppe, entweder als solche oder als Rest in einer Alkoxygruppe oder einer anderen Gruppe, 1 bis 6 Kohlenstoffatome enthält.
Verwendung nach Anspruch 1 einer Purinverbindung, bei der es sich um eine der folgenden Verbindungen handelt: 2-Amino-6-(3-methyl-2-oxo)butyloxypurinethylenacetal 2-Amino-6-cyclohexylmethyloxypurin (O⁶-Cyclohexylmethylguanin) 2-Amino-6-cyclopentylmethyloxypurin (O⁶-Cyclopentylmethylguanin) 2-Amino-6-cyclohex-3-enylmethyloxypurin 2-Amino-6-cyclopent-1-enylmethyloxypurin (O⁶-Cyclopentenylmethylguanin) 2-Amino-6-(1-cyclohexenyl)-methyloxypurin (O⁶-Cyclohexenylmethylguanin) 2-Amino-6-perillyloxymethylpurin O⁶-Ribofuranosylguanin 2-Amino-6-(2-tetrahydrofuranyl)-methyloxypurin 2-Amino-6-adamantylmethyloxypurin O⁶-Galactosylguanin 2-Amino-6-(2-naphthyl)-methyloxypurin 2-Amino-6-(2-tetrahydropyranyl)-methyloxypurin 2-Amino-6-(1-naphthyl)-methyloxypurin O⁶-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-methoxy)guanin O⁶-(1,4-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methoxy)guanin.
Eine Purinverbindung der allgemeinen Strukturformel I:
oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz und/oder eine Prodrug-Form davon, dadurch gekennzeichnet, dass in der Strukturformel I X O, S oder CHR_x ist, wobei R_x H oder C_1-4-Alkyl ist; D ein Halogenatom oder NZ₁Z₂ ist, wobei Z₁ und Z₂ jeweils unabhängig H oder C_1-4-Alkyl oder C_1-4-Hydroxyalkyl sind; A aus H, C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkoxy, Hydroxy, CH₂(CH₂)_nOH (n = 1 bis 4) und NR_a1R_a2 ausgewählt ist, wobei R_a1 und R_a2 jeweils unabhängig H oder C_1-4-Alkyl sind; B aus H, C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkoxy, CF₃, einer Aryl- oder einer Aralkyl- und einer Hydroxygruppe, die ein C=O-Tautomer bereitstellt, ausgewählt ist; und Y (i) ein 5- oder 6-gliedriger Cycloalkan- oder Cycloalkenring mit einer oder zwei Doppelbindung(en) ist, wobei der Cycloalkan- oder Cycloalkenring gegebenenfalls mit einem Substituenten substituiert ist, der aus der Gruppe bestehend aus C_1-4-Alkyl, OH, C_1-4-Alkoxy, Halogen, CF₃, CN, N₃ und NR_y1R_y2 ausgewählt ist, wobei R_y1 und R_y2 jeweils unabhängig H oder C_1-4-Alkyl sind, oder (ii) eine geradkettige oder verzweigte Kohlenwasserstoffkette ist, die gegebenenfalls eine Doppelbindung umfasst, zur Verwendung in einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Bereitstellung eines aktiven Inhibitors der Tumorzellenproliferation.
Verbindung nach Anspruch 13 zur Verwendung in einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Bereitstellung eines aktiven Inhibitors der Tumorzellenproliferation, bei der Y ein 5- oder 6-gliedriger Cycloalkan- oder Cycloalkenring mit einer oder zwei Doppelbindung(en) ist, wobei der Cycloalkan- oder Cycloalkenring gegebenenfalls mit polaren Hydroxylsubstituenten substituiert ist.
Verbindung nach Anspruch 14, bei der Y ein 5- oder 6-gliedriger Cycloalkan- oder Cycloalkenring mit einer oder zwei Doppelbindung(en) ist, wobei der Cycloalkan- oder Cycloalkenring gegebenenfalls mit einem Substituenten substituiert ist, der aus der Gruppe bestehend aus C_1-4-Alkyl, OH, C_1-4-Alkoxy, Halogen, CF₃, CN, N₃ und NR_y1R_y2 ausgewählt ist, wobei R_y1 und R_y2 jeweils unabhängig H oder C_1-4-Alkyl sind, und zwei der Substituenten an benachbarten Atomen des Rings vorliegen und so verknüpft sind, dass sie eine zusätzliche anellierte carbocyclische oder heterocyclische Ringstruktur bilden.
Verbindung nach Anspruch 14 zur Verwendung in einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Bereitstellung eines aktiven Inhibitors der Tumorzellenproliferation, bei der D eine unsubstituierte Aminogruppe und X Sauerstoff ist.
Eine Purinverbindung zur Verwendung in einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Bereitstellung eines aktiven Inhibitors der Tumorzellenproliferation, dadurch gekennzeichnet, dass sie eine Strukturformel aufweist, die aus den folgenden Strukturformeln ausgewählt ist:

X = O oder S R₁ = H, CH₃ oder C₂H₅ R₂ = H, CH₃ oder C₂H₅
Eine Purinverbindung zur Verwendung als aktive pharmazeutische Substanz, dadurch gekennzeichnet, dass es sich um eine der folgenden Verbindungen handelt: 2-Amino-6-(3-methyl-2-oxo)butyloxypurinethylenacetal 2-Amino-6-cyclohexylmethyloxypurin (O⁶-Cyclohexylmethylguanin) 2-Amino-6-cyclopentylmethyloxypurin (O⁶-Cyclopentylmethylguanin) 2-Amino-6-cyclohex-3-enylmethyloxypurin 2-Amino-6-cyclopent-1-enylmethyloxypurin (O⁶-Cyclopentenylmethylguanin) 2-Amino-6-(1-cyclohexenyl)-methyloxypurin (O⁶-Cyclohexenylmethylguanin) 2-Amino-6-perillyloxymethylpurin O⁶-Ribofuranosylguanin 2-Amino-6-(2-tetrahydrofuranyl)-methyloxypurin 2-Amino-6-adamantylmethyloxypurin O⁶-Galactosylguanin 2-Amino-6-(2-naphthyl)-methyloxypurin 2-Amino-6-(2-tetrahydropyranyl)-methyloxypurin 2-Amino-6-(1-naphthyl)-methyloxypurin O⁶-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-methoxy)guanin O⁶-(1,4-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methoxy)guanin.
Eine Purinverbindung, bei der es sich um eine der folgenden Verbindungen oder um ein pharmazeutisch verträgliches Salz und/oder eine Prodrug-Form davon handelt: O⁶-Ribofuranosylguanin 2-Amino-6-(2-tetrahydrofuranyl)-methyloxypurin 2-Amino-6-adamantylmethyloxypurin O⁶-Galactosylguanin 2-Amino-6-(2-naphthyl)-methyloxypurin 2-Amino-6-(2-tetrahydropyranyl)-methyloxypurin 2-Amino-6-(1-naphthyl)-methyloxypurin O⁶-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-methoxy)guanin O⁶-(1,4-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methoxy)guanin.
Eine pharmazeutische Formulierung oder Zusammensetzung, die im Wesentlichen aus einer effektiven, Tumorzellenproliferation-hemmenden Menge einer Verbindung nach einem der Ansprüche 14 bis 20 in einer Einheitsdosierungsform besteht, die zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger zur Verabreichung an einen Säuger vorliegt, der einer Antitumorbehandlung bedarf.
Eine pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung von Tumoren oder anderen Zellproliferationsstörungen in Säugern, wobei die Zusammensetzung als aktiven therapeutischen Bestandteil eine effektive Antitumor-Menge und CDK-inhibierende Menge einer Purinverbindung der nachstehenden Strukturformel I:
worin X O, S oder CHR_x ist, wobei R_x H oder C_1-4-Alkyl ist; D ein Halogenatom oder NZ₁Z₂ ist, wobei Z₁ und Z₂ jeweils unabhängig H oder C_1-4-Alkyl oder C_1-4-Hydroxyalkyl sind; A aus H, C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkoxy, Hydroxy, CH₂(CH₂)_nOH (n = 1 bis 4) und NR_a1R_a2 ausgewählt ist, wobei R_a1 und R_a2 jeweils unabhängig H oder C_1-4-Alkyl sind; B aus H, C_1-4-Alkyl, C_1-4-Alkoxy, CF₃, einer Aryl- oder einer Aralkyl- und einer Hydroxygruppe, die ein C=O-Tautomer bereitstellt, ausgewählt ist; und Y (i) ein 5- oder 6-gliedriger Cycloalkan- oder Cycloalkenring mit einer oder zwei Doppelbindung(en) ist, wobei der Cycloalkan- oder Cycloalkenring gegebenenfalls mit einem Substituenten substituiert ist, der aus der Gruppe bestehend aus C_1-4-Alkyl, OH, C_1-4-Alkoxy, Halogen, CF₃, CN, N₃ und NR_y1R_y2 ausgewählt ist, wobei R_y1 und R_y2 jeweils unabhängig H oder C_1-4-Alkyl sind, oder (ii) eine geradkettige oder verzweigte C_1-6-Kohlenwasserstoffkette ist, die gegebenenfalls eine Doppelbindung umfasst, oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz und/oder eine Prodrug-Form der Purinverbindung enthält, das bzw. die mit mindestens einem anderen Bestandteil gemischt ist, der ein kompatibles bzw. einen kompatiblen, pharmazeutisch verträgliches bzw. verträglichen Additiv, Träger, Verdünnungsmittel oder Vehikel bereitstellt.
Ein Verfahren zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Verwendung bei der Behandlung von Tumoren oder anderen Zellproliferationsstörungen in Säugern, wobei das Verfahren das Mischen einer effektiven Antitumor-Menge und CDK-inhibierenden Menge einer Purinverbindung nach einem der Ansprüche 14 bis 20 oder einer Prodrug-Form davon mit einem kompatiblen, pharmazeutisch verträglichen Additiv, Träger, Verdünnungsmittel oder Vehikel umfasst.