DE668388C - Verfahren zur Darstellung reiner, nicht enzymatischer Aktivatoren des enzymatischen Kohlehydratabbaues - Google Patents
Verfahren zur Darstellung reiner, nicht enzymatischer Aktivatoren des enzymatischen KohlehydratabbauesInfo
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Description
- Verfahren zur Darstellung reiner, nicht enzymatischer Aktivatoren des enzymatischen Kohlehydratabbaues Im Patent 667 696 ist ein Verfahren zur Darstellung von hochgereinigten Cozymasepräparaten beschrieben, die einem Wirkungswert von ,4o0 ooo Einheiten Co pro Gramm entsprechen. Für viele Zwecke ist es nun wünschenswert oder notwendig, eine vollkommen reine Gozymase zu gewinnen, welche durch das Verfahren des Haupfpatents noch nicht vollkommen erreicht wird.
- In weiterer Ausbildung des Verfahrens des Hauptpatents wurde nun gefunden, da-8 es gelingt, die Cozymase noch weiter zu reinigen und Präparate herzustellen, deren Wirkungswert noch um 40% über die Wirkung der Präparate hinausgeht, die nach dem Reinigungsverfahren des Hauptpatents hergestellt werden, und in welche Verunreinigungen durch freie Adenyl:säure nicht mehr nachweisbar sind. Die weitere Reinigung erfolgt dadurch, daß die z. B. nach dem Hauptpatent gewonnenen festen Präparate in Wasser gelöst und von Begleitstoffen befreit werden, indem man mit Baryumsalzlösungen neutralisiert, die Fällung entfernt, die Lösung mit Schwefelsäure von Bäryum befreit und dann durch eine Säule von Tonerde treibt, mit Wasser eluiert und die erhaltene Lösung mit einem überschuß eines organischen, mit Wasser mischbaren Lösungsmittels, wie z. B. Alkohol oder Aceton, versetzt. Hierdurch wird die Cozymase mit einem Reinheitsgrad von A C O = 65o ooo ausgefällt. ' Anstatt die Cozymase an Tonerde zu adsorbieren, kann man nach der Fällung mit Baryumsalzen der wäßrigen Cozymaselösung Bleisalze zusetzen; nach Entfernung des entstehenden Niederschlags wird das Filtrat mit Schwefehvasserstoff entbleit und darauf wie oben beschrieben die Cozymase gefällt.
- Die Verfahrensprodukte sollen zu pharmakologischen und physiologischen Zwecken Verwendung finden.
- Beispiel I Verwendet wird eine Lösung von i,o g Cozymase, dargestellt nach Patent 667696, mit einem Wirksamkeitsgrad von A C O = 38o ooo in 2o ccm Wasser. Die Lösung wird mit Barytlösung. neutralisiert (pH=6,5), die Fällung abzentrifugiert und aus der Lösung Baryt mit Schwefelsäure entfernt. Darauf wird durch eine Säule von Tonerde (M e r c k, standardisiert nach B r o c k m a n n) getrieben, mit ioo ccm Wasser eluiert, die Lösung eingeengt und mit der iofachen Menge Aceton die Cozymase gefällt. Ausbeute: 0,32 g; ACO=65oooo (=¢5,6%).
- Beispiel 2 47 g Cozymasepräparat (dargestellt, wie in Beispiel i angegeben) von A C O = 38o ooo, in 3o ccm Wasser gelöst, wird durch Zusatz von Barytlösung auf die Azodität pii = 6, 5 eingestellt. Der entstandene Niederschlag wird anzentrifugiert, die Lösung mit Schwefelsäure auf pll=2,5 gebracht, Baryunisulfat abzentrifugiert, die Lösung mit 5 g fein pulverisiertem Bleiacetat versetzt und in der Kälte einige Zeit stehengelassen. Nach :Entfernung der Fällung durch Zentrifugieren wird die Lösung mit Schwefelwasserstoff von Blei befreit, eingedunstet und mit der iofachen Menge Alkohol gefällt. Gewonnen werden 0,45 g Cozymase, A C O = 65o ooo. Ausbeute: 45 0;o .
Claims (2)
- PATENTANSPRÜCHE i. Weitere Ausbildung des Verfahrens gemäß Patent 667 696 zur Darstelhuig nicht enzymatischer Aktivatoren des enzymatischen Kohlehydratabbaues, dadurch gekennzeichnet, daß die Aktivatoren durch Lösungen. der Halogenide des einwertigen Kupfers in saurer Lösung gefällt, in Wasser gelöst und mit Baryt behandelt werden, worauf die Gozymase in bekannter Weise mit Tonerde adsorbiert, eluiert@ und mit einem mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmittel ausgefällt wird.
- 2. Verfahren nach Anspruch i, dadurch gekennzeichnet, daß die Cozymase an Stelle der Adsorption mit Tonerde mit Bleisalzen behandelt, der entstehende Nie-. derschlag entfernt, die Lösung mit Schwefelwasserstoff vom Blei befreit und dann die Cozymase mit organischen Lösungsmitteln ausgefällt wird.
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