DE2936294A1

DE2936294A1 - Vorrichtung zur zuechtung und untersuchung sowie zum transport von mikroorganismen

Info

Publication number: DE2936294A1
Application number: DE19792936294
Authority: DE
Inventors: Annikka Dipl Ing Rantama; Markus Sivonen
Original assignee: Orion Yhtyma Oy
Current assignee: Orion Oyj
Priority date: 1978-11-27
Filing date: 1979-09-07
Publication date: 1980-06-12

Description

Vorrichtung zur ZUchtung und Untersuchung
sowie zum Transport von Mikroorganismen Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf eine leicht trans portierbare Vorrichtung zur Züchtung und Untersuchung von Mikroorganismen. Diese besteht aus einem Platte mit von eine Nährmedium bedeckten Seitenwänden in einem Behälter mit dicht schließendem Deckel. Diese Vorrichtung eignet sich besonders zur Transport mikrobiologischer Proben vom Ort ihrer Entnahme zum Laboratorium.
Die Züchtung von Mikroben in einer ein Nährmedium enthaltenden Petri-Schale ist bekannt. Das Verfahren ist für mikrobiologische Laboratorien geeignet und kann zur Sohaffung günstiger Wachstumsbedingungen fUr unterschiedliche Mikroben stark variiert werden. Die unverwendete oder zur ZUchtung benutzte Petri -Schale ist Jedoch zum Transport nur schwer zu verpacken, weshalb dieses obige Verfahren außerhal mikrobiologischer Laboratorien nur eine recht begrenzte Nutzung findet.
(dip slide device") Auch die Verwendung einer Tau heibenvo=ichtung/zur zur ZUchtung flüssiger Proben, wie Urin, und zum Transport gezüchteter oder ungezuchteter Nährmedien ist bereits bekannt. Diese Vorrichtung besteht aus einer dUnnen Nährmediumschicht, die auf eine Kunststoffplatte aufgebracht und in ein dicht schließendes Kunststoffrohr eingeschlossen ist. Bei dieser Vorrichtung ist es wesentlich, daß sich die Oberfläche des Nährmediums oberhalb des Randes der Kunststoffplatte befindet, so daß nach Züchtung durch Benetzen in einer FlUssigkeit die Uberschussige flUssige Probe auf der Platte leicht abgetrocknet werden kann. Die Nährmediumschicht muß ziemlich dtlrin sein, um sich auf der Tauchscheibe ohne komplizierte Hilfsmittel zu halten.
Vom Standpunkt des Bakterienwachstums ist eine Nährmediumschicht von 3 bis 5 mm Dicke zweckmäßig, weil sie eine reichliche Nährstoffzufuhr ergibt und die Nachteile beim Trocknen nicht so groß sind.
In der vorliegenden Erfindung werden die Eigenschaften des Petri -Schale-Verfahrens mit der praktischen Form der Tauchscheibe (dip slide") kombiniert, indem man die Ränder der Kulturplatte so hoch macht, daß man eine ausreichend dicke Schicht des Nährmedium erhalten kann, wie dies in der Petri-Schale der Fall ist. Die hochränderige erfindungsgemäße Platte ermöglicht die Verwendung von Nährschichten günstiger Dicke vom Standpunkt des mikrobialen Wachstums aus, Jedoch ohne Neigung zum Herabfallen. Weiter erlaubt dieses Verfahren die Verwendung von Nährmedien mit niedrigeren Agarkonzentrationen als die auf einer Kulturscheibe bzw. einem -träger ohne Seitenwände möglich ist. Diese neue Art von Kulturplatte eignet sich besonders zur Züchtung von Bakterien, die große Anforderungen an das Kulturmedium stellen, wie Gonococcen und ß-hämolytische Streptococcen. Ihre ZUchtung nach einem Routine-Verfahren erfordert die Kapazität eines gut ausgestatteten mikrobiologischen Laboratoriums. Andererseits besteht ein großer Bedarf nach einem Testverfahren für diese Bakterien, das in Gesundheitszentren und ähnlichen Einrichtungen verwendbar ist. Die Verwendung eines einfachen und praktischen Trägerverfahrens in diesen mühsame, Jedoch allgemein notwendigen bakteriellen Tests scheint daher sinnvoll.
Die Vorrichtung hat den weiteren Vorteil, leicht transportierbar zu sein, so daß die 6ßere berufliche Erfahrung er-fordernden Phasen des Testes, wie Erfassung der Ergebnisse und fortgesetzte Studien, in einem mikrobiologischen Laboratorium erfolgen können.
Die erfindungsgemäße Vorrichtung besteht aus einem Behälter mit dicht schließendem Deckel, der eine Kulturplatte enthält, die durch den Träger und/oder den Behälter gehalten wird. Entscheidend ist, daß die Platte auf einer oder beiden Seiten Seitenwände hat. Die Platte und ihr Behälter sind steril.
Fig. 1 bis 3 zeigen die Vorrichtung aus der Kulturplatte 1 mit einem Stöpsel 2, um sie an ihrem durch den Deckel 3 und den Behälter 4 gehaltenen Platz zu halten. Die Plattenränder von 3 bis 5 mm Höhe sind wesentlich und können die Platte auf beiden Seiten (Fig. 2) oder nur auf einer Seite (Fig. 3) umgeben.
Fig. 1 zeigt einen Schraubdeckel, wobei Jedoch auch ein Steckdeckel ("thrust cover") möglich ist. Der in Fig. 1 gezeigte Behälter ist nrörinig, kann Jedoch auch andere Formen haben. In Abhängigkeit von der Form der Platte kann der Behälter z.B. quadratisch oder rechteckig im Querschnitt sein. Die Kulturplatte kann im Behälter mittels eines Stöpsel an Ort und Stelle gehalten oder einfach durch Behälter und Deckel getragen werden.
Durch Variieren der Höhe der Plattenränder kann die Dicke des Nährmediums nach Bedarf modifiziert werden, wobei die Seitenwände der Platte außerdem das Nährmedium während des Transportes an Ort und Stelle halten. Gewöhnlich ist eine Nährschicht von etwa 4 mm Dicke von Standpunkt des mikrobialen Wachstums aus zweckmäßig. Auf einer derartigen Platte können auch solche bezüglich des Nährmediums anspruchsvolle Mikroorganismen, wie Gonococcen und ß-hämolytische Streptococcen, gezüchtet werden. Durch Verwendung von Platten mit Seitenwänden auf beiden Seiten kann man auf eine Platte zwei unterschiedliche Nährmedien aufbringen,uum so mehr Informations über die Probe zu erhalten. Durch Verwendung desselben Nährmediums auf beiden Seiten der Platte erhält man wiederum eine größere Kulturfläche, was die Untersuchung von Proben mit sehr hoher oder niedrige mikrobialer Konzentration erleichtert. Die Plattenoberfläche kann auch unterschiedliche Erhöhungen, z.B. ein netzartiges Muster, haben, was dazu beiträgt, das Nährmedium auf der Platte festzuhalten und auch das Ablesen der Ergebnisse erleichtert.
Die mit Nährmedium bedeckte Platte mit Seitenwänden auf einer oder beiten Seiten wird zur Verwendung aus ihrem Behälter genommen und die Probe, gewöhnlich mittels eines Wattestäbchens auf die Nährmediumoberfläche(n) aufgebracht.
Dazu sind alle üblicherweise mit Petri-Schalen verwendeten Verfahren der OberflächenzUchtung anwendbar. Das Nährmedium kann auch mit einer flüssigen Probe benetzt werden, dann muß Jedoch die überschüssige Flüssigkeit möglichst sorgfältig von den Oberflächen entfernt werden. Nach Aufbringung der Probe wird die Platte in ihr Schutzrohr eingeschlossen und nach Bedarf bebrütet. In diesem Stadium können die Röhrchen zur Bebrütung in ein Laboratorium geschickt werden. Dem Röhrchen können Mittel zur Veränderung der BebrUtungsbedingungen, z.B C02 Tabletten für die Züchtung von Gonococcen, zugefügt werden.
Die Kulturplatte kann praktisch mit Jeder Art von festen Nährmedium bedeckt werden. dessen Agar-Agar-Konzentration über 1,2 % liegen kann. Weichere Nährmedium überstehen den Posttransport nicht ohne Herausfallen. Das Verfahren ist Jedoch besonders zweckmäßig in Fällen, wo eine übliche Tauchträgervorrichtung unbefrisdigende Ergebnisse liefert, weil das Nährmedium zu viel Agar-Agar enthält, weil es sich nicht gut in einer dünnen Schicht hält oder weil das bakterielle Wachstum auf der dünnen Schicht des Nährmediums wesentlich schlechter ist als in einer Petri-Schale. Die ZUchtung von Gonococcen und ß-hämolytischen Streptococcen in Pharyngealproben ist ein typisches Anwendungsgebiet.
Die folgenden Beispiele zeigen die Verwendung der erfindungsgemäßen Vorrichtung zur Bestimmung von Mikroorganismen in unterschiedlichen mikrobiologischen Proben.
Beispiel 1 Eine Kulturplatte mit 6 mm hohen Seitenwänden auf einer Seite und 20 mm x 70 mm großer Fläche fUr das Nährmedium wurde mit 6,5 ccm Nährmedium bedeckt, was eine 4 mm hohe Schicht ergab. Das Nährmedium kann eine übliche Blutkultur sein, die Peptone, Salz, Agar, Pferde- oder Schafsblut und Inhibitoren zur Vermeidung eines Ubermäßigen Wachstums der verunreinigungen Bakterien enthält. Das Nährmedium kann z.B. die folgende Zusammensetzung haben: Caseinpepton SoJ apepton NaCl Agar Blut Nalidixan Neomycin 15 g/ 5 g/l 5 g/l 15 g/l 60 ccm/l 15 mg/l 30 mg/l Die leicht hergestellten Platten werden zur Bestimmung von ß-hämolytischen Streptococcen der A-Gruppe in Pharyngealkulturen verwendet. Die Platte kann gleichzeitig für einen Bacitracintest verwendet werden, um vorher festzustellen, ob der gefundene, B-hämolytische Streptococcus zur A-Gruppe gehört. Der Bacitracintest erfolgt, indem man eine Papierscheibe mit Bacitracin auf die beimpfte Platte legt und die Platte nach der Züchtung auf einen möglichen Wachstumsinhibierenden Effekt auf den ß-hämolytischen Kolonien in der Nähe der Bacitracinscheibe untersucht.
Beispiel 2 Eine 20 mm x 70 mm Platte mit 6 mm hohen Seitenwänden auf beiden Seite wurde auf Jeder Seite mit einer 6 mm dicken Schicht aus medifiziertem Thayer's und Martin's Nährmedium (Thayer, J.D. & Martin, F.E.: Public Health Rep. 81; 559-562 (1966), dem 3 g/l Agar-Agar zugefügt worden waren, bedeckt. Die Nährmediumsmenge betrug auf Jeder Seite der Platte 6 ccm Die licht hergestellten Platten wurden zur Bestimmung von Gonococcen in Urethral-, Cervical-, Rectal- und Pharyngealproben verwendet. Vor der Bebrütung wurde dem Röhrchen eine CO2 Tablette zugefügt. Nach nur 24 stündiger BebrUtung kann man das Gonococcenwachstum durch Zugabe einiger Tropfen von Oxydasereagenz, 1 X Dimethyl- oder Tetramethyl-p-phenylendiaminhydrochlorid, zu den vermuteten Kolonien auf einer Seite der Platte bestimmen. Da dieses Reagenz toxisch für die Bakterien ist, ist eine zweiseitige Platte zweckmäßig, weil die Züchtung notwendigenfalls auf der anderen Seite fortgesetzt werden kann. Wenn weiterhin eine gezüchtete Platte an ein Laboratorium zur Untersuchung geschickt werden soll, kann der Absender zuerst eine Plattenseite auf mögliches Gonococcenwachstum untersuchen, die Platten mit negativem Ergebnise aussortieren und die fraglichen Platten dann mit der anderen intakten Seite an ein Laboratorium zur fortgesetzten Untersuchung schicken.

Claims

PatentansprUche 1.- Vorrichtung zur Züchtung, Untersuchung und zum Transport von Mikroorganismen, bestehend aus einem Behälter (4) mit dichtschließendem Deokel (3) und einer im Behälter eingeschlossenen Kulturplatte (1), dadurch gekennzeichnet, daß die Platte (1) im Behälter (4) auf einer oder beiden Seiten Seitenwände (5) unterschiedlicher Höhe aufweist, die ein Bedecken der Platte mit Nährmedium der gewünschten Dicke ermöglichen, so daß die Platte zum Züchten von Mikroorganismen, die große Anforderungen an das Nährmedium stellen, verwendet werden kann.
2.- Vorrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Seitenwände (5) der Kulturplatte (1) 3 bis 10 mm hoch sind.
3.- Vorrichtung nach Anspruch 1 bis 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Seitenwände (5) der Kulturplatte (1) mit einer Nährschicht von mindestens 3 mm Dicke bedeckt sind.
4.- Vorrichtung nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß die zweiseitige Platte (1) mit zwei unterschiedlichen Nährmedium auf Jeder Plattenseite bedeckt ist.
5.- Vorrichtung nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß die zweiseitige Platte (1) auf beiden Seiten mit demselben Nährmedium zur Erzielung einer größeren Kulturoberfläche bedeckt ist.
6.- Vorrichtung nach Anspruch 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß die Agar-Agar-Konzentration des festen Nährmediums mindestens 1,2 , beträgt.
7.- Vorrichtung nach Anspruch 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, daß sie insbesondere zur Züchtung von Gonococcen und ß-hämolytischen Streptococcen verwendet wird.