DE29723807U1 - Autologe Fibrin-Blutstillungsmittel - Google Patents
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Description
GRÜNECKER, KIN4<jEki5EY, S 3TOfKMAi ft ^SCHWANHÄUSSER
ANWALTSS0Z1ETÄT MAXIMILIANSTRASSE 58 O-80538 MÜNCHEN GERMANY
MÜNCHEN
DR. HELMUT EICHMANN
GERHARD BARTH
DR. ULRICH BLUMENRÖDER, LLM.
CHRISTA NIKLAS-FALTER
DR. MICHAEL SCHRAMM, DIPL-PHYS.
DR. MAXIMILIAN KINKELDEY, LLM.
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AUGUST GRÜNECKER
DR. GUNTER BE2OLD
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DR. GUNTER BE2OLD
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MÜNCHEN
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WOLFHARD MEISTER
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Anmelder: Medtronic, Inc.
G4056-03196/sm
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf Blutstillungs- bzw. Versiegelungsmittel auf Basis von Fibrin.
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Die Herstellung und Verwendung von Versiegelungsmitteln auf Fibrin-Basis wird in der medizinischen Praxis immer bedeutsamer. Dies ist auf die biologisehe Verträglichkeit dieser Versiegelungsmittel zurückzuführen.
Die biologischen Verträglichkeit ist von großer Bedeutung bei der Prüfung der derzeitigen Verfahren zur Herstellung von Blutstillungs- bzw. Versiegelungsmitteln. Das gebräuchlichste Verfahren besteht darin, sogenannte Rinder-Thrombin-Präparate zu verwenden. Dieser Präparat-Typ ist seit mehreren Jahren für die medizinische Verwendung zugelassen; neuere Ergebnisse lassen jedoch vermuten, daß mit deren Verwendung signifikante Probleme verbunden sind. Zu diesen Problemen gehören:
(1) die Gefahr der Übertragung einer spongioformen Rinder-Encephalitis (BSE) und (2) die Entwicklung von Immun-Antworten gegenüber dem Thrombin und Kontaminanten, die in dem Thrombin enthalten sind, welche die Entwicklung von Autoimmun-Antikörpern gegenüber verschiedenen Human-Koagulationsfaktoren verursachen. Dies führt dazu, daß bei einigen Patienten
(1) die Gefahr der Übertragung einer spongioformen Rinder-Encephalitis (BSE) und (2) die Entwicklung von Immun-Antworten gegenüber dem Thrombin und Kontaminanten, die in dem Thrombin enthalten sind, welche die Entwicklung von Autoimmun-Antikörpern gegenüber verschiedenen Human-Koagulationsfaktoren verursachen. Dies führt dazu, daß bei einigen Patienten
sich eine Pseudohämophilie entwickelt und daß eine erhöhte Gefahr für die Entwicklung schwerer Blutungsprobleme besteht.
Als diagnostisches Reagens für die Verwendung zur Durchführung verschiedener Koagulations-Versuche steht derzeit rekombinantes Human-Thromboplastin zur Verfügung.
Fibrin-Blutstillungs-iDzw. Versiegelungsmittel werden aus mehreren verschiedenen Typen von Ausgangsmaterialien hergestellt, die umfassen (1) Citratplasma, (2) konzentriertes Citratplasma, (3) mit Blutplättchen (Thrombocyten) angereichertes Citratplasma, (4) Kryopräzipitate und (5) gereinigte Plasma-Fraktionen, die große Mengen Fibrinogen enthalten. Die Koagulation (Gerinnung) des Blutes ist ein ziemlich komplexer Vorgang. Die primäre Reaktion der Bildung eines Gerinnsels wird verursacht durch die Einwirkung von Thrombin auf das.Fibrinogen-Molekül, wodurch Fibrinogen in Fibrin umgewandelt wird. Das Fibrin polymerisiert spontan unter Bildung einer netzartigen Struktur. Diese Struktur verfestigt sich später und wird weiter verstärkt durch die Einwirkung von mehreren anderen Faktoren im Blut, die ebenfalls unter der Einwirkung von Thrombin gebildet werden. Die meisten der im Blut gefundenen Faktoren liegen in einer inaktiven Form vor. Prothrombin ist die inaktive Form von Thrombin. An einem gewissen Punkt muß daher ein Auslöser für die Initiierung der Blutgerinnung vorhanden sein. Einer dieser Mechanismen ist das Thromboplastin. Wenn Blut oder Blutplasma dem Thromboplastin ausgesetzt ist, löst es die Aktivierung dieser Faktoren aus, was zur Bildung von Thrombin führt, das seinerseits Fibrinogen in Fibrin umwandelt.
Hauptziel der vorliegenden Erfindung ist es, verbesserte Fibrin-Versiegelungsmittel oder -Verklebungsmittel bereitzustellen.
Ein weiteres Ziel der vorliegenden Erfindung besteht darin, verbesserte Fibrin-Versiegelungsmittel oder -Verklebungsmittel bereitzustellen, bei denen die Gefahr der Übertragung einer Rinder-Krankheit oder einer Human-Virus-Erkrankung, die mit der Verwendung von Human-Thrombinen, die von heterologen Quellen gereinigt worden sind, verbunden ist, wesentlich vermindert oder eliminiert ist.
Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Fibrin-Versiegelungs- bzw. Verklebungsmittel oder -Kleber, die keine immunologischen oder viralen Verunreinigungen umfassen. Zu diesem Zweck wird ein Fibrin-Versiegelungsmittel hergestellt durch Verwendung von rekombinantem Human-Thromboplastin.
Gemäß den obengenannten Zielen ist ein Gegenstand der Erfindung die Bereitstellung von Fibrin-Versiegelungsmitteln oder -Verklebungsmitteln, erhältlich durch ein Verfahren, bei dem rekombinantes Human-Thromboplastin direkt mit dem Vorläufer des Fibrin-Versiegelungsmittels, beispielsweise Blutplasma, mit Blutplättchen angereichertem Blutplasma, konzentriertem Blutplasma oder Kryopräzipitat, direkt gemischt wird. Alternativ wird rekombinantes Human-Thromboplastin zur Bildung von Thrombin in einem geringen Mengenanteil des Plasmas oder des Kryopräzipitations-Überstandes verwendet und dann wird das dadurch gebildete Thrombin mit dem Vorläufer des Fibrin-Versiegelungsmittels kombiniert. Beide Verfahren ergeben ein Fibrin-Versiegelungsmittel, das dann auf konventionelle Weise verwendet werden kann.
Eine der vorliegenden Erfindung zugrunde liegende Aufgabe wird gelöst durch die Bereitstellung eines Fibrin-Blutstillungs- bzw. Versiegelungsmittels, das umfaßt: rekombinantes Human-Thromboplastin und ein an Blutplättchen reiches Plasma.
In einer bevorzugten Ausführungsform wird ein Fibrin-Blutstillungs- bzw. Versiegelungsmittel bereitgestellt, worin das genannte, an Blutplättchen reiche Plasma aus einem Patienten isoliert wird, dem das Fibrin-Versiegelungsmittel verabreicht werden soll.
Die Erfindung stellt femer bereit ein Fibrin-Blutstillungs- bzw. Versiegelungsmittel, das umfaßt: ein an Blutplättchen reiches Plasma, wobei das genannte, an Blutplättchen reiche Plasma aus einem Patienten isoliert worden ist, dem das Fibrin-Versiegelungsmittel verabreicht werden soll; und Human-Thrombin, wobei das genannte Human-Thrombin aus einem Teil des genannten, an Blutplättchen reichen Plasmas isoliert worden ist.
Verfahren 1
Quelle für das Fibrin-Versiegelungsmittel: an Blutplättchen reiches Plasma.
Quelle für das Fibrin-Versiegelungsmittel: an Blutplättchen reiches Plasma.
Das an Blutplättchen (Thrombocyten) reiche Plasma wird in einem 1:9-Volumen von 3,8 %igem Natriumeitrat gesammelt. Eine niedrige Zentrifugierungs-Geschwindigkeit führt zur Bildung des an Blutplättchen (Thrombocyten) reichen Plasmas. Zur Bildung des Versiegelungsmittels wird das an Blutplättchen reiche Plasma mit rekombinantem Thromboplastin in einem geeigneten Behälter gemischt und es wird genügend Calciumchlorid zugegeben, um das als Antikoagulans verwendete Citrat zu neutralisieren. Die Verhältnisse von rekombinantem Thromboplastin, Calcium und an Blutplättchen reichem Plasma werden vorzugsweise in kleinen Reagensröhrchen bestimmt. Das erwünschte Ergebnis besteht darin, die Bildung eines Fibrin-Versiegelungsgels innerhalb von 1 bis 2 min nach dem Kombinieren der obengenannten Agentien zu bewirken.
Verfahren 2
Quelle für das Fibrin-Versiegelungsmittel: an Blutplättchen (Thrombocyten)
reiches Plasma.
reiches Plasma.
Plasma-Quelle für Thrombin: hergestellt durch Hochgeschwindigkeits-Zentrifugieren.
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Blutplasma, das einen Citratgehalt wie oben angegeben aufweist, wird mit rekombinantem Thromboplastin und Calcium gemischt. Das resultierende Blutgerinnsel wird gerührt, um das Blutgerinnsel aufzulösen. Die überstehende
Flüssigkeit, die Thrombin enthält, wird durch Zentrifugieren abgetrennt. Dann wird das Thrombin wie in dem Verfahren 1 beschrieben zur Bildung eines Fibrin-Versiegelungsmittels aus dem an Blutplättchen reichen Plasma verwendet.
Flüssigkeit, die Thrombin enthält, wird durch Zentrifugieren abgetrennt. Dann wird das Thrombin wie in dem Verfahren 1 beschrieben zur Bildung eines Fibrin-Versiegelungsmittels aus dem an Blutplättchen reichen Plasma verwendet.
Claims (3)
1. Fibrin-Blutstillungs- bzw. Versiegelungsmittel, das umfaßt:
rekombinantes Human-Thromboplastin und
ein an Blutplättchen reiches Plasma.
rekombinantes Human-Thromboplastin und
ein an Blutplättchen reiches Plasma.
2. Fibrin-Blutstillungs- bzw. Versiegelungsmittel nach Anspruch 1, worin das genannte, an Blutplättchen reiche Plasma aus einem Patienten isoliert wird, dem das Fibrin-Versiegelungsmittel verabreicht werden soll.
3. Fibrin-Blutstillungs- bzw. Versiegelungsmittel, das umfaßt:
ein an Blutplättchen reiches Plasma, wobei das genannte, an Blutplättchen reiche Plasma aus einem Patienten isoliert worden ist, dem das Fibrin- Versiegelungsmittel verabreicht werden soll; und
Human-Thrombin, wobei das genannte Human-Thrombin aus einem Teil des genannten, an Blutplättchen reichen Plasmas isoliert worden ist.
ein an Blutplättchen reiches Plasma, wobei das genannte, an Blutplättchen reiche Plasma aus einem Patienten isoliert worden ist, dem das Fibrin- Versiegelungsmittel verabreicht werden soll; und
Human-Thrombin, wobei das genannte Human-Thrombin aus einem Teil des genannten, an Blutplättchen reichen Plasmas isoliert worden ist.
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