CZ280543B6

CZ280543B6 - Způsob výroby nových thienopyranových derivátů

Info

Publication number: CZ280543B6
Application number: CS903172A
Authority: CZ
Inventors: Dieter Dr. Binder; Franz Dr. Rovenszky; Josef Dipl. Ing. Weinberger; Hubert Peter Dr. Ferber
Original assignee: Chemisch Pharmazeutische Forschungsgesellschaft
Priority date: 1989-06-27
Filing date: 1990-06-26
Publication date: 1996-02-14
Also published as: CZ317290A3; HRP940819A2; SK278012B6; CN1048388A; HUT55787A; NO902832D0; RU1833386C; AU628995B2; DD295850A5; LTIP1590A; US5077307A; HU903998D0; IE63935B1; NO174423C; CN1025621C; IE902097L; LV10776A; LT3799B; MD121C2; UA15930A

Abstract

Nové thienopyranové deriváty obecného vzorce I, kde zbytek a) znamená zbytek IIa, IIb a IIc, kde R znamená vodík nebo zbytek -CN, -CHO, -CH=NOH, -CONH.sub.2 .n.nebo COOR.sub.L.n., R.sub.L .n.znamená alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, n znamená celé číslo 3, 4 nebo 5. Tyto deriváty lze získat tak, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce III, kde zbytek a) znamená zbytek IIa, IIb a IIc a X znamená chlor, brom nebo jod, se sloučeninou obecného vzorce IV, kde n znamená celé číslo 3, 4 nebo 5, v inertním organickém ředidle za přítomnosti alespoň dvou ekvivalentů silné, nenukleofilní baze a takto získaný racemát se popřípadě dělí na enanciomery. Sloučeniny jsou vhodné k léčbě onemocnění, která lze léčit aktivací membránových kanálů K.sup.+.n..ŕ

Description

Oblast techniky

Vynález se týká nových thienopyranových derivátů, způsobu jejich výroby použití. Tyto látky jsou vhodné jako léčiva pro aktivaci membránových kanálů pro K⁺ v hladkých svalech.

Dosavadní stav techniky

Z evropského patentového spisu č. 76 075 jsou známy benzopyrany, obsahující v poloze 4 N-cykloalkanonové zbytky. Tyto látky jsou schopné snížit krevní tlak.

Nyní bylo zjištěno, že některé thienopyranové deriváty mají oproti zmíněným látkám vyšší farmakologický účinek.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou nové thienopyranové deriváty obecného vzorce I

(I) kde zbytek znamená

R (Ila) (lib)

(líc)

-1CZ 280543 B6

R	znamená -coor-l	vodík	nebo zbytek -CN,	-CHO,	-CH=NOH, -CONH₂	nebo
^R1	znamená	alkyl	o 1 až 4 atomech	uhlíku	a
n	je celé	číslo	3, 4 nebo 5,
nina	Tyto látky je možno získat tak, obecného vzorce III	že se	nechá reagovat	slouče-

OH

kde zbytek

znamená

( Hb)

(líc) znamená chlor, brom, nebo jod, se sloučeninou obecného vzorce IV

(IV) kde n má uvedený význam, v inertním organickém rozpouštědle za přítomnosti alespoň dvou ekvivalentů silné báze nenukleofilní povahy a získaný racemát se popřípadě dělí na enantiomery.

-2CZ 280543 B6

Sloučeniny obecného vzorce I jsou chirálni. Do vynálezu spadají racemáty těchto látek a také jejich enantiomery.

Zvláště výhodnými látkami jsou následující látky:

6,7-dihydro-5,5-dimethyl-6-hydroxy-trans-7-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)-5H-thieno[3,2-b]pyran-2-karbonitril a trans-6,7-dihydro-5,5-dimethyl-6-hydroxy-7-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)-5H-thieno[3,2-b]pyran-2-karboxylová kyselina ve formě svého amidu.

Alkylovým zbytkem o 1 až 4 atomech uhlíku se rozumí zejména nasycený uhlovodíkový zbytek o 1 až 4 atomech uhlíku s přímým nebo rozvětveným řetězcem, jako methyl, ethyl, propyl, izopropyl, butyl, izobutyl a terč.butyl.

Reakce sloučeniny obecného vzorce III se sloučeninou obecného vzorce IV se provádí v bezvodém organickém ředidle, které je inertní za reakčních podmínek, například v dimethylformamidu nebo v dimethylsulfoxidu. Množství rozpouštědla není kritické v případě, že se užije naprosto bezvodé rozpouštědlo. V případě, že rozpouštědlo obsahuje stopy vody, je nutno použít co nejmenší množství rozpouštědla a je nutno dbát toho, aby reakční směs byla dobře promíchána.

Při provádění reakce se sloučenina obecného vzorce III užije v rozpouštědle s 1 až 3 ekvivalenty, s výhodou s malým přebytkem silné nenukleofilní báze, jako je hydrid alkalického kovu nebo trimethylsilanolát alkalického kovu. Báze se užije ve stejném rozpouštědle nebo v případě hydridu alkalického kovu v parafinovaném oleji. Reakční teplota je 0 až 40 'C, reakce se s výhodou provádí při teplotě místnosti. Tvorba epoxidu probíhá přibližně 5 minut až 1 hodinu, po tuto dobu se reakční směs míchá. Pak se přidají za mícháni 1 až 3 ekvivalenty, s výhodou 1,2 až 1,6 ekvivalentu sloučeniny obecného vzorce IV, popřípadě rozpuštěné ve stejném rozpouštědle a další ekvivalent, s výhodou 1,2 až 1,6 ekvivalentů uvedené báze. Velký přebytek není na škodu, avšak z praktického hlediska je vhodné užít nejvýše 4 ekvivalenty bází. Reakční teplota je 0 až 50 °C, s výhodou se reakce provádí při teplotě místnosti. Doba reakce je 1 až 6 hodin, při nižší teplotě je nutná delší reakční doba.

Po skončení reakce se směs neutralizuje slabou kyselinou, s výhodou ledovou kyselinou octovou a dále se zpracovává běžným způsobem jako extrakcí, srážením nebo překrystalováním.

Reakcí vzniká racemát v případě, že se neužijí jako výchozí látky enantiomery. Rozdělení je možné například podle publikace J. M. Evens a další, J. Med. Chem. 29 2194 (1986).

Postupuje se například tak, že se při použití čistého α-methylbenzylizokyanátu získá diastereomerní pár urethanu, který se dělí krystalizací nebo chromatografií, a uretanová skupina se reduktivně odstraní chlorsilanem za přítomnosti triethylaminu.

Sloučeniny obecného vzorce III je možno získat ze sloučenin obecného vzorce V podle následujícího reakčního schématu a podle údajů v příkladové části pomocí běžných postupů.

-3CZ 280543 B6

(V)

▼ případě, že R-CORg /'Rg.NHg,

NBSZHgO

-4CZ 280543 B6

LDA: lithiumdiizopropylamid

DMF: dimethylformamid

NBS: N-bromsukcinimid

Sloučeniny obecného vzorce IV jsou známé z literatury a běžně se dodávají.

Nové sloučeniny obecného vzorce I aktivují in vivo a in vitro kanály v membráně pro K⁺ v hladkých svalech.

Vzhledem k těmto farmakologickým vlastnostem mohou být tyto nové látky užity jako takové, nebo spolu s dalšími účinnými látkami ve formě galenických přípravků při onemocnění, která je možno zmírnit aktivací membránových kanálů pro K⁺, jako jsou zvýšený krevní tlak nebo astma.

Sloučeniny obecného vzorce I jsou určeny pro použití u lidí a je možno je podávat obvyklým způsobem perorálně nebo parenterálně, s výhodou perorálně, při denní dávce 0,1 až 100, s výhodou 0,2 až 20 mg/kg. Lékař však může v závislosti na celkovém stavu a stáří nemocného a také na povaze nemoci použít nižší nebo vyšší dávky těchto látek.

V případě, že jsou uvedené látky užity profylakticky, užije se přibližně stejných dávek, s výhodou perorálně.

Sloučeniny obecného vzorce I je možno podávat jako takové, nebo spolu s jinými účinnými látkami, přičemž obsah sloučenin obecného vzorce I je 0,1 až 99 %. Obvykle se tyto látky zpracovávají spolu s běžnými pomocnými látkami, nosiči a/nebo ředidly, jako jsou rozpouštědla, želatina, arabská guma, mléčný cukr, škroby, stearan hořečnatý, mastek, rostlinné oleje, polyalkylenglykol, vazelína a podobně.

Farmaceutické prostředky mohou mít pevnou formu, například jde o tablety, dražé, čípky, kapsle a podobně, nebo kapalnou formu, jako jsou roztoky, suspenze nebo emulze, nebo může jít o prostředky s řízeným uvolňováním účinné látky. Tyto prostředky je možno sterilizovat a přidávat k nim různá činidla, jako konzervační, stabilizační nebo emulgační prostředky, soli k úpravě osmotického tlaku a podobně.

Sloučeniny podle vynálezu je možno užít v kombinaci s dalšími účinnými látkami a současně se svrchu uvedenými pomocnými látkami a/nebo nosiči nebo ředidly.

V příkladové části budou užity následující zkratky:

PE: petrolether

EE: ethylester kyseliny octové

THF: tetrahydrofuran

DNF: dimethylformamid

DMSO:dimethylsulfoxid

-5CZ 280543 B6

Příklad 1

Trans-6,7-dihydro-5,5-dimethyl-6-hydroxy-7-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)-5H-thieno[3,2-b]pyran-2-karbonitril

K 10,2 g 35,4 mmol, trans-6-brom-6,7-dihydro-5,5-dimethyl-7-hydroxy-5H-thieno[3,2-b]-pyran-2-karbonitrilu v 50 ml absolutního DMSO se po kapkách přidá 16,3 g 38,0 mmol, 26,2%roztoku trimethylsilanolátu sodného v absolutním DMSO při teplotě místnosti. Po 20 minutách míchání se po kapkách přidá ještě 4,3 g,

50.3 mmol, 2-pyrrolidinonu a pak ještě 21,5 g, 50,1 mmol, roztoku silanolátu. Po 2,5 hodinách se přidá ještě po kapkách 3,7 g, 62,0 mmol, ledové kyseliny octové. Reakční směs se dělí mezi 150 ml vody a 100 ml ethylacetátu, fáze se oddělí a vodná fáze se extrahuje 4x50 ml ethylacetátu.

Organické fáze se spojí, vysuší se síranem sodným a aktivním uhlím, zfiltrují se a rozpouštědlo se oddestiluje. Získá se

8.3 g oranžovohnědé, částečně krystalické hmoty, která se nechá krystalizovat z ethylacetátu. Po odfiltrování a digerování v 2x 15 ml ledového ethylacetátu se získá 5,0 g žlutavých krystalů, které se nechají překrystalovat z ethanolu s aktivním uhlím.

Ve výtěžku 41,6 % se získá 4,3 g bezbarvých krystalů s teplotou tání 233 C za rozkladu (ethanol).

Výchozí látku je možno získat následujícím způsobem:

5H-thieno[3,2-b]pyran-5-on

95,0 g, 0,75 mol, 3-hydroxythiofen-2-karbaldehydu, 380 g,

3,71 mol, anhydridu kyseliny octové a 61,0 g, 0,74 mol, bezvodého octanu sodného se zahřívá 88 hodin na teplotu varu. Teplota olejové lázně se v průběhu reakce udržuje na hodnotě alespoň 170 °C. Směs se odpaří do sucha, 240 g získaného odparku se převrství 500 ml etheru a směs se neutralizuje 600 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu draselného. Směs se zfiltruje (Hyflo) a filtrační koláč se extrahuje 5x 100 ml horkého ethylacetátu. Fáze se oddělí a vodná fáze se extrahuje 3x 200 ml ethylacetátu. Organické fáze se spojí a promyjí se 100 ml vody.

Organický roztok se vysuší síranem sodným s aktivním uhlím, zfiltruje a odpaří na hustou suspenzi, která se zfiltruje a filtrační koláč se digeruje s 2x 60 ml ledového ethylacetátu. Získá se 74,0 g světle hnědých krystalků, které se nechají překrystalovat z acetonitrilu s aktivním uhlím.

Ve výtěžku 60,5 % se získá 68,2 g světlebéžových krystalků s teplotou tání 117 až 119 °C za rozkladu (acetonitril).

5,5-dimethyl-5H-thieno[3,2-b]pyran

K 370 ml, 1,11 mol, 3N methylmagnesiumbromidu v etheru se přidá roztok 65,0 g, 0,43 mol, 5H-thieno[3,2-b]pyran-5-onu v 650 ml absolutního THF po kapkách v průběhu 35 minut, reakční směs se počne vařit pod zpětným chladičem. Směs se ještě 30 minut míchá a pak se vlije do směsi 1 litr 25% roztoku chloridu amonného a 600 g ledu, fáze se oddělí a vodná fáze se extrahuje 3x

-6CZ 280543 B6

200 ml etheru. Organické fáze se spojí, vysuší se síranem sodným s aktivním uhlím, zfiltrují a rozpouštědlo se oddestiluje. Získá se 98 g červenohnědého oleje, který se smísí s 600 ml absolutního benzenu a směs se zahřívá s 60 g silikagelu 70 minut na teplotu varu při použití odlučovače vody. Silikagel se odfiltruje a důkladně se promyje methanolem, filtrát se vysuší síranem sodným, znovu zfiltruje a rozpouštědlo se oddestiluje. Získá se 74,5 g hnědého oleje, který v 60 ml diizopropyletheru částečně krystalizuje. Směs se zfiltruje, filtrát se odpaří a 63 g získaného odparku se čistí chromatografií na sloupci 350 g silikagelu (KG 60) při použití směsi PE a EE v poměru 9:1.

Ve výtěžku 48,3 % se získá 34,3 g žlutých krystalků s teplotou tání 28 až 32 C as teplotou varu 60 až 65 °C při tlaku 1,6 kPa.

5.5- dimethyl-5H-thieno[3,2-b]pyran-2-karbaldehyd

K 27,0 g, 0,27 mol, diizopropylaminu ve 100 ml absolutního tetrahydrofuranu se při teplotě -40 °C po kapkách přidá 96 ml 0,24 mol, 2,5 N n-butyllithia v n-hexanu. Tento roztok se při teplotě -40C smísí s roztokem 29,1 g, 0,18 mol, 5,5-dimethyl-5H-thieno[3,2-b]pyranu ve 330 ml absolutního THF a směs se nechá stát 2 hodiny při teplotě 0 °C. Pak se k tmavěčervenému roztoku při teplotě -50 °C přidá 19,5 g, 0,27 mol, DMF v 80 ml absolutního THF. Reakční směs se nechá stát při teplotě místnosti, pak se vlije do 1 litru směsi vody a ledové drti a pH směsi se upraví na 4 přidáním 2N kyseliny chlorovodíkové. Fáze se oddělí, vodná fáze se extrahuje 3x 100 ml etheru, organické fáze se spojí, promyjí se 100 ml vody, vysuší se síranem sodným s aktivním uhlím, zfiltrují a rozpouštědlo se odpaří.

Získá se 45 g tmavě hnědého oleje, který se čistí chromatograf ií na sloupci 200 g silikagelu (KG 60) při použití směsi PE : EE v poměru 8:1.

Získaný oranžový olej se nechá krystalizovat z diizopropyletheru, zfiltruje se a digeruje s 2x 35 ml ledového diizopropyletheru.

Ve výtěžku 69,1 % se získá 23,5 g žlutých krystalů s teplotou tání 58 až 60 °C za rozkladu (diizopropylether).

5.5- dimethyl-5H-thieno[3,2-b]pyran-2-karbonitril

K 9,0 g, 138 mmol, hydroxylaminhydrochloridu v 70 ml absolutního methanolu a 7,74 g, 138 mmol, hydroxidu draselného se přidá 18,45 g, 95 mmol, 5,5-dimethyl-5H-thieno[3,2-b]pyran-2-karbaldehydu, pH se upraví na 7. Po 90 minutách míchání při teplotě místnosti se rozpouštědlo odpaří při teplotě 30 °C a odparek se dělí mezi 100 ml vody a 100 ml methylenchloridu. Fáze se oddělí, vodná fáze se extrahuje 3x 60 ml methylenchloridu, organické fáze se spojí, promyjí 40 ml vody, vysuší síranem sodným, zfiltrují a rozpouštědlo se oddestiluje.

Získá se 26,0 g odparku, který se v 80 ml anhydridu kyseliny octové 10 minut vaří. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a odparek se převrství 70 ml etheru. Suspenze se neutralizuje roztokem

-7CZ 280543 B6 uhličitanu sodného a zfiltruje (Hyflo). Fáze se oddělí, vodná fáze se extrahuje 3x 30 ml etheru, organické fáze se spojí, promyjí roztokem uhličitanu sodného, vysuší síranem sodným s aktivním uhlím, zfiltrují a rozpouštědlo se odpaří.

Tímto způsobem se ve výtěžku 72,5 % získá 13,2 g oranžověhnědých krystalků s teplotou tání 73 až 75 C (petrolether).

trans-6-brom-6,7-dihydro-5,5-dimethyl-7-hydroxy-5H-thieno[3,2-b] -pyran-2-karbonitril

K 11,0 g, 57,5 mmol, 5,5-dimethyl-5H-thieno[3,2-b]pyran-2-karbonitrilu ve 100 ml absolutního DMSO se přidá 2,1 g, 117 mmol, vody a 20,5 g, 115 mmol N-bromsukcinimidu.

Po 20 minutách míchání se reakční směs dělí mezi 250 ml vody a 150 ml ethylacetátu, vodná fáze se nasytí chloridem sodným. Fáze se oddělí a vodná fáze se extrahuje 3x 50 ml ethylacetátu. Organické fáze se spojí, promyjí se 2x 70 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu draselného a 50 ml vody. Organická fáze se vysuší síranem sodným s aktivním uhlím, filtruje a rozpouštědlo se oddestiluje. Tímto způsobem se získá 18,0 g světležlutých krystalků, které se nechají překrystalovat z methanolu s aktivním uhlím.

Tímto způsobem se ve výtěžku 85,7 % teoretického množství získá 14,2 g bezbarvé krystalické látky s teplotou tání 155,5 až 156,0 °C za rozkladu (methanol).

Příklad 2

Amid kyseliny trans-6,7-dihydro-5,5-dimethyl-6-hydroxy-7-(2-oxo-1-pyrrolidinyl)-5H-thieno[3,2-b]pyran-2-karboxylové

K 2,0 g, 6,9 mmol, trans-6-brom-6,7-dihydro-5,5-dimethyl-7-hydroxy-5H-thieno[3,2-b]pyran-2-karbonitrilu v 10 ml absolutního DMSO se přidá 0,32 g, 7,29 mmol 50% disperze hydridu sodíku v parafinovém oleji při teplotě místnosti. Po 70 minutách se přidá ještě 0,85 g, 10,0 mmol, 2-pyrrolidinonu a pak 0,44 g, 10,0 mmol, disperze hydridu sodíku. Po 45 minutách se směs zředí 25 ml vody a po kapkách se přidá 0,5 ml ledové kyseliny octové, vzniklá krystalická sraženina se odfiltruje a pak se digeruje s 2x 5 ml ledového petroletheru. Získané béžové krystalky se nechají překrystalovat ze směsi methanolu a dimethylformamidu.

Ve výtěžku 42 % se získá 0,92 g bezbarvých krystalků s teplotou tání 297 °C za rozkladu (methanol/DMF).

Příklad 3

Dělení racemátu

Dělení je možno znázornit následujícím schématem:

-8CZ 280543 B6

-9CZ 280543 B6

-10CZ 280543 B6

-11CZ 280543 B6

1. Reakce na racemický 2-kyano-6,7-dihydro-7-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)-N-[(1-fenyl)ethyl]-5H-thieno[3,2-b]pyran-6-karbamát

4,5 g, 15,4 mmol, racemického 6,7-dihydro-5,5-dimthyl-6-hydroxy-7-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)-5H-thieno[3,2-b]pyran-2-karbonitrilu se uvede spolu s 2,49 g, 16,9 mmol, (S)-(-)-a-methylbenzylizokyanátu do suspenze v toluenu a směs se zahřeje na teplotu varu. Po 70 hodinách je reakce ukončena a získaný čirý roztok se odpaří do sucha.

Získá se 6,85 g žlutavých krystalků, které se nechají překrystalovat z acetonu s přísadou aktivního uhlí.

Ve výtěžku 78,5 % se získá 5,31 g bezbarvých krystalků s teplotou tání 203 až 207 °C (aceton).

2. Dělení diastereomerů

Dělení se provádí chromatografií na sloupci, přičemž získané směsné frakce se opět dále dělí.

Jako rozpouštědlo se užije směs chloroformu a diethyletheru v poměru 5 : 1, stacionární fází je 300 g silikagelu KG 60, výchozím produktem je 5,3 g směsi diastereomerů. Výsledky ze tří dělení jsou uvedeny v následující tabulce 1.

Tabulka 1

	dělení (množství v g)
první	druhé	třetí	celkem
1. frakce	0,82	0,68	0,29	1,79
směsná frakce	3,80	2,35	1,61	1,61
2. frakce	0,52	0,56	0,59	1,67

a) 1. frakce (+ - ) -2-kyano-6,7-dihydro-7- ( 2-oxo-l-pyrrolidinyl) -N- [ (1-f enyl·) ethyl]-5H-thieno[3,2-b]pyran-6-karbamát

Teplota tání: 198 až 200 °C (aceton) c^ (aceton) -0,52 °.

b) 2. frakce (- -)-6-kyano-6,7-dihydro-7-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)-N-[(1-fenyl)ethyl]-5H-thieno[3,2-b]pyran-6-karbamát

Teplota tání: 203 až 205 °C (aceton) c^ (aceton) -0,44°.

-12CZ 280543 B6

3. Odštěpení pomocné skupiny

Vždy 1,4 g, 3,2 mmol, odděleného diastereomeru se rozpustí v dusíkové atmosféře ve 12 ml toluenu s obsahem 0,65 g, 6,4 mmol, triethylaminu. Při teplotě 40 °C se po kapkách přidá 0,87 g, 6,4 mmol, trichlorsilanu a směs se míchá 3 hodiny při této teplotě. Pak se směs míchá přes noc při teplotě místnosti.

K reakční směsi se přidá 1,5 ml methanolu a směs se udržuje 15 minut na teplotě 80 °C, pak se nechá zchladnout a vysrážený chlorid amonný se odfiltruje.

Po odpaření rozpouštědla se surový produkt chromatografíčky čistí na 70 g silikagelu KG 60, jako eluční činidlo se užije ethylacetát.

Získaný produkt se nechá ještě jednou překrystalovat z ethanolu.

a) (+)trans-6,7-dihydro-5,5-dimethyl-6-hydroxy-7-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)-5H-thieno[3,2-b]pyran-2-karbonitril

Výtěžek 71,0 %, získá se 0,66 g bezbarvých krystalů.

c·^ (methanol) + 0,93° ,

Teplota tání: 187 “C za rozkladu (ethanol).

b) ( -)trans-6,7-dihydro-5,5-dimethyl-6-hydroxy-7-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)-5H-thieno[3,2-b]pyran-2-karbonitril

Výtěžek: 79,6 % získá se 0,74 g bezbarvých krystalů.

C, (methanol) - 0,91°C. Teplota tání: 189 °C za rozkladu (ethanol ) .

Příklad 4

Účinek sloučeniny z příkladu 1 na krevní tlak bdících, spontánně hypertenzivních krys.

Pokusy byly prováděny na spontánně hypertenzivních krysách o hmotnosti 245 až 395 g (Madórin, Švýcarsko). Pokusná zvířata měla natrvalo zavedený katetr v A. carotis, spojený k měření krevního tlaku s převaděčem (Fa. Statham). Údaje byly zpracovávány na analyzátoru (Hellige) a zaznamenávány zařízením Vatanabe WR 3101-4.

Sloučenina z příkladu 1 byla rozpuštěna v 10% alkoholovém roztoku a podávána bud’ nitrožilně do ocasní žíly, nebo perorálně. Jako kontrola bylo použito rozpouštědlo bez účinné látky. Účinek na krevní tlak byl zaznamenáván až do jedné hodiny po nitrožilním podání a až 3 hodiny po perorálním podání látky.

Pro každou koncentraci bylo provedeno 4 až 5 pokusů. Ze získaných hodnot byla vypočítána pomocí lineární regresní analýzy

-13CZ 280543 B6 hodnota ED₂₀, to znamená hodnota, která snižuje diastolický krevní tlak o 20 %.

Výsledky jsou uvedeny v následující tabulce 2.

Tabulka 2

koncentrace (μg/kg)	změny systolického tlaku v %	změny diastolického tlaku v %
0 (kontrola)	-1,8 (±2,5)	-1,5 (±4,4)
10 (i.v.)	-9,2 (±3,4)	-5,6 (±7,3)
30 (i.v.)	-30,0 (±4,8)	-46,0 (±6,0)
100 (i.v.)	-41,0 (±6,6)	-65,5 (±3,7)
30 (p.o)	-2,3 (±2,5)	-4,5 (±2,9)
100 (p.o)	-26,5 (±5,4)	-23,0 (±6,7)
300 (p.o)	-38,0 (±12,2)	-36,8 (±13,1)

Z těchto hodnot je možno vypočítat ED₂q při nitrožilním podání 15,5, a při perorálním podání 90,4 μg/kg.

Příklad 5

Opakuje se způsob podle bodu 4 s tím rozdílem, že se jako zkoumaná látka užije Cromakalin, tj. 3,4-dihydro-2-2,dimethyl-3-hydroxy-trans-4-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)-2H-benzo[b]pyran-6-6-karbonitril, výhodná sloučenina z evropského patentového spisu č. 76 075. Výsledky těchto pokusů jsou shrnuty v tabulce 3.

Tabulka 3

koncentrace μg/kg	změny systolického tlaku v %	změny diastolického tlaku v %
0 (kontrola)	-1,8 (±2,5)	-1,5 (±4,4)
10 (i.v.)	-6,6 (±4,0)	-6,6 (±6,3)
30 (i.v.)	-26,5 (±5,9)	-27,5 (±7,9)
100 (i.v.)	-36,3 (±9,0)	-58,3 (±7,9)
30 (p.o)	-3,3 (±1,0)	-4,3 (±1,5)
100 (p.o.)	-11,5 (±6,8)	-11,3 (±9,2)
300 (p.o)	-22,8 (±10,8)	-24,5 (±11,3)

Z těchto hodnot vyplývá ED₂₀ při nitrožilním podání 19,4, a při perorálním podání 213,4 μg/kg.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Nové thienopyranové deriváty obecného vzorce (I) kde zbytek znamená (Ila) (lib) (líc)

R znamená vodík nebo zbytek -CN, -CHO, -CH=NOH, -CONH₂ nebo -COOR-l

R₃ znamená alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, n znamená celé číslo 3, 4 nebo 5.
2. Trans-6,7-dihydro-5,5-dimethyl-6-hydroxy-7-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)-5H-thieno/3,2-b/pyran-2-karbonitril.
3. Amid kyseliny trans-6,7-dihydro-5,5-dimethyl-6-hydroxy-7-(2-oxo-l-pyrrolidinyl)-5H-thieno/3,2-b/pyran-2-karboxylové.
4. Nové thienopyranové deriváty obecného vzorce I podle nároku 1 v čisté enantiomerní formě.
5. Nové thienopyranové deriváty obecného vzorce I podle nároku 1 ve formě směsi optických antipodů.
6. Způsob výroby thienopyranových derivátů obecného vzorce I podle nároku 1, vyznačující se tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce III (III) kde zbytek znamená (líc) (Ha) a

(lib)

X znamená chlor, brom nebo jod, se sloučeninou obecného vzorce IV kde (IV) znamená celé číslo 3, 4 nebo 5, v inertním organickém ředidle za přítomnosti alespoň dvou ekvivalentů silné, nenukleofilní báze a takto získaný racemát se popřípadě dělí na enantiomery.

-16CZ 280543 B6
7. Farmaceutické prostředky, vyznačující se tím, že jako svou účinnou složku obsahují thienopyranové deriváty obecného vzorce I podle nároku 1 v kombinaci s farmaceutickými pomocnými látkami a/nebo nosiči, nebo ředidly.
8. Farmaceutické prostředky, vyznačující se tím, že jako svou účinnou složku obsahují thienopyranové deriváty obecného vzorce I podle nároku 1 v kombinaci s dalšími činnými látkami a farmaceutickými pomocnými látkami a/nebo nosiči, nebo ředidly.
9. Použití thienopyranových derivátů obecného vzorce I podle nároku 1 k výrobě farmaceutických prostředků pro léčbu onemocnění, která je možno léčit aktivací membránových kanálů pro