CZ20012344A3 - Kombinace pro kardiovaskulární indikace - Google Patents

Description

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká způsobu léčení kardiovaskulárních nemocí, zejména se týká kombinací sloučenin, prostředků a způsobů pro jejich použití v lékařství, zejména v profylaxi a léčbě hyperlipidemických stavů, jako jsou stavy spojené s aterosklerózou, hypercholesterolémií a ostatních nemocí koronární artérie u savců, včetně hypertenze. Zejména se vynález týká sloučenin inhibujících transport ileální žlučové kyseliny (IBAT), inhibitorů aktivity transferního proteinu cholesterylesterů, derivátů kyseliny fibrové (fibráty), derivátů kyseliny nikotinové, mikrosomálních triglyceridových transferních proteinových (MTP) inhibitorů, antagonistů absorpce cholesterolu, stanolů, fytosterolů nebo antihypertenzivních činidel.

Dosavadní stav techniky

Je dobře známé, že hyperlipidemické stavy spojené se zvýšenými koncentracemi celkového cholesterolu a cholesterolu s lipoproteiny o nízké hustotě (LDL cholesterolu) jsou hlavními rizikovými faktory pro koronární srdeční choroby a zejména aterosklerózu. Řada studií uvádí, že nízká koncentrace cholesterolu s lipoproteiny o vysoké hustotě (HDL cholesterolu) v plazmě je silný rizikový faktor pro vývoj aterosklerózy (Barter a Rye, Atherosclerosis, 121, 1-12 (1996). HDL je jednou z hlavních tříd lipoproteinů, které působí při přenosu lipidů v krvi. Bylo zjištěno, že hlavní

lipidy, spojené, s HDL zahrnuji cholesterol, cholesterylester, triglyceridy, fosfolipidy a mastné kyseliny. Další třídy lipoproteinů nalezené v krvi jsou lipoprotein o nízké hustotě (LDL), lipoprotein o střední hustotě (IDL) a lipoprotein o velmi nízké hustotě (VLDL). Jelikož nízké úrovně HDL cholesterolu zvyšují nebezpečí aterosklerózy, způsoby zvyšující úroveň HDL cholesterolu v plazmě by mohly být terapeuticky příznivé pro léčbu aterosklerózy a ostatních nemocí spojených s akumulací lipidu v krevních cévách. Tyto nemoci zahrnují, nikoliv však s omezením, koronární srdeční nemoc, nemoci periferních cév a mrtvici.

Ateroskleróza je původcem řady nemocí koronárních tepen (CAD) a je hlavní příčinou nemocnosti a úmrtnosti v moderní společnosti. Vysoké úrovně LDL cholesterolu (více než okolo 180 mg/dl) a nízké úrovně HDL cholesterolu (pod 35 mg/dl) jsou důležitými příčinami pro rozvoj aterosklerózy. Další nemoci nebo rizikové faktory, jako jsou nemoci periferních cév, mrtvice a hypercholesterolemie jsou negativně ovlivněny nepříznivými poměry HDL/LDL.

Zabránění recirkulace žlučových kyselin z lumenu intestinálního traktu snižuje hladinu sérového cholesterolu v přímém vztahu. Epidemiologická data, která byla zjištěna naznačují, že taková redukce vede ke zlepšení zdravotního stavu u aterosklerózy. Stedronski v článku „Interaction of bíle acids and cholesterol with nonsystemic agents having hypocholesterolemic properties, Biochimica et Biophysica Acta, 1210, 255-287 (1994) diskutuje biochemii, fyziologii a známá aktivní činidla vztahující se ke žlučovým kyselinám a cholesterolu.

Přechodné patofyziologické změny jsou spojeny s přerušením enterohepatálního oběhu žlučových kyselin u člověka se zděděným snížením aktivity IBAT, jak uvádí Heubi, J. Έ. a kol., „Primary Bíle Acid Malabsorption: Defective in Vitro

Ileal Active Bile Acid Transport, Gastroenterology, 83, 80411 (1982) .

V dalším přiblížením k redukci recirkulace žlučových kyselin, ileální transportní systém žlučových kyselin je předpokládaný farmaceutický cíl pro léčbu hyperholesterolémie, založený na přerušení enterohepatálního oběhu specifickými transportními inhibitory (Kramer a kol., „Intestinal Bile Acid Absorption The Journal of Biological Chemistry, 268 (24),

18035-46 (1993).

V některých patentových přihláškách Hoechst Aktiengesellschaft jsou popisovány polymery různých v přírodě se vyskytujících složek enterohepatálního oběhového systému a jejich derivátů, zahrnující žlučové kyseliny, které inhibují fyziologický transport s cílem zredukovat dostatečně hladinu LDL cholesterolu, aby byly účinné jako farmaceutické látky, zejména jako hypocholesterolemická činidla. Jednotlivé Hoechstovy patentové přihlášky, které popisují sloučeniny inhibující transport žlučových kyselin jsou uvedené v dále.

R1.	Kanadská	patentová	přihláška č.	2	025	294.
R2.	Kanadská	patentová	přihláška č.	2	078	588.
R3.	Kanadská	patentová	přihláška č.	2	‘085	782.
R4 .	Kanadská	patentová	přihláška č.	2	085	830.
R5.	Evropská	přihláška	č. 0379 161.
R6.	Evropská	přihláška	č. 0549 967.
R7 .	Evropská	přihláška	č. 0559 064.
R8 .	Evropská	přihláška	č. 0563 731.
	Vybrané	benzothiepiny jsou popsány v	mezinárodní patentové

přihlášce WO 93/321146 pro mnohá použití zahrnující metabolismus mastných kyselin a koronární vaskulárni choroby.

Další vybrané benzothiepiny, známé pro použití jako hypolipaemická a hypocholesterolaemická činidla, zejména pro léčbu nebo prevenci aterosklerózy jsou popsány v patentové přihlášce EP 508425. Francouzská patentová přihláška FR

2661676 popisuje další benzothiepiny pro použiti jako hypolipaemická a hypocholesterolaemická činidla. Dále, patentová přihláška č. WO 92/18462 uvádí další benzothiepiny pro použití jako hypolipaemická a hypocholesterolaemická činidla. US patent č. 5 994 391 (Lee a kol.). Každé z těchto hypolipaemických a hypocholesterolaemických činidel popsané v těchto individuálních patentových přihláškách je omezeno amidovou vazbou k atomu uhlíku přilehlému k fenylovému kruhu kondenzovaného bicyklobenzothiepinového kruhu.

Další benzothiepiny užitečné pro léčbu hypercholesterolemie a hyperlipidemie jsou popsány v patentové přihlášce č. PCT/US95/10863.' Další benzothiepiny užitečné pro profylaxi a léčbu hypercholesterolemie a hyperlipidemie a rovněž farmaceutické prostředky obsahující takové benzothiepiny jsou popsány v patentové přihlášce č. PCT/US97/04076. Ještě další benzothiepiny a prostředky je obsahující, užitečné pro profylaxi a léčbu hypercholesterolemie a hyperlipidemie jsou popsány v US patentové přihlášce č. 08/816 065.

Inhibice transportu žlučových kyselin in vitro je v souladu s hypolipidemickou aktivitou popsanou v patentové přihlášce The Welcome Foundation Limitid č. WO 93/16055 „ Hypolipidemic Benzothiazepine Compounds. Tato publikace popisuje řadu hypolipidemických benzothiazepinových sloučenin. Další hypolipidemické benzothiazepinové sloučeniny (zejména 2,3,4,5-tetrahydrobenzo-l-thia-4-azepinové sloučeniny) jsou popsány v patentové přihlášce č. WO 96/05188. Zejména užitečný benzothiazepin popsaný ve WO 96/05188 je sloučenina vzorce B2. Další hypolipidemické benzothiazepinové sloučeniny jsou popsány v patentové přihlášce č. WO 96/16051.

(3R,5R)-3-butyl-3-ethyl-2,3,4,5-tetrahydro-7, 8-dimethoxy-5-fenyl-l-4-benzothiazepin

1,1-dioxid

Další benzothiazepinové sloučeniny užitečné pro regulaci cholesterolu jsou 2,3,4,5-tetrahydrobenzo-l-thi-5-azepinové inhibitory IBAT, popsané v přihlášce PCT č. WO 99/35135. Zde se uvádí sloučenina vzorce B-7.

Další sloučeniny, které jsou inhibitory IBAT zahrnují třídu naftalenových sloučenin, kterou popsal T. Ichihashi a kol. v J. Pharmacol. Exp. Ther., 284(1), 43-50 (1998). V této třídě je zejména užitečný S-8921 (methyl 1-(3,4-dimethoxyfenyl)-3-(3-ethylvaleryl)-4-hydroxy-6,7,8-trimethoxy-2-haftoát). Struktura S-8921 je uvedena vzorcem B-20. Další naftalenové sloučeniny nebo deriváty ligninu, užitečné pro

94/24087.

léčbu nebo profylaxi hyperlipidemie nebo aterosklerózy popsány v patentové přihlášce PCT č.

Další třídou léčiv snižujících lipidy jsou léčiva proti obezitě. Příklad takového léčiva je orlistat, který je popsán v evropské patentové přihlášce č. 0 129 748.

Inhibice transferního proteinu cholesterylesteru (CETP) účinně modifikuje poměry HDL/LDL a očekává se, že kontroluje postup a/nebo vznik určitých kardiovaskulárních nemocí. CETP je plazmový protein, který usnadňuje přesun cholesterylesterů a triglyceridů mezi různými lipoproteiny v krvi (Tall, J. Lipid Res., 34, 1255-74 (1993)). Přesun cholesterylesteru z HDL k LDL pomocí CETP má vliv na snížení HDL cholesterolu. Inhibice CETP povede ke zvýšení HDL cholesterolu v plazmě a ke snížení LDL cholesterolu v plazmě, což má za následek terapeuticky příznivý profil lipidů v plazmě. Důkaz tohoto účinku je popsán v McCarthy, Medicinal Res. Revs., 13, 139-59 (1993) . Další důkaz tohoto účinku popsal Sitori, Pharmac. Ther., 67, 443-47 (1995)). Tento fenomén prvně demonstroval Swenson a kol., (J. Biol. Chem., 264, 14318 (1989)) za použití monoklonální protilátky, která specificky inhibuje CETP. U

·· ♦ · · · « _ · · · Π · · ·· ' 9 99

9 999· králíků tato protilátka zvýšila HDL cholesterol v plazmě a snížila LDL cholesterol. Son a kol. (Biochim. Biophys. Acta, 795, 743-780 (1984)) popisuje proteiny z lidské plazmy, které inhibují CETP. US patent 5 519 001, uváděný zde jako odkaz, Kushawaha a kol., popisuje peptid o 36 aminokyselinách, který inhibuje aktivitu CETP. Cho a kol. (Biochim. Biophys. Acta 1391, 133-144 (1998) popisují peptid z plazmy vepře, který inhibuje lidský CETP. Bonin a kol. (J. Peptide Res., 51,. 216225 (1998)) popisují dekapeptidový inhibitor CETP. Depsipeptidový fungální metabolit popsal jako inhibitor CETP Hedge a kol., v Bioorg. Med. Chem. Lett., 8, 1277-80 (1998).

Bylo uvedeno několik zpráv o nepeptidových sloučeninách, které působí jako inhibitory CETP. Barrett a kol. (J. Am. Chem. Soc., 188, 7863-63 (1996) popisují inhibitory CETP obsahující cyklopropan. Dále, inhibitory obsahující cyklopropan popsal Kuo a kol. (J. Am. Chem. Soc., 117, 1062934 (1995)). Pietzonka a kol. (Bioorg. Med. Chem. Lett., 6, 1951-54 (1996) popsal fosfonát obsahující analogy cholesterylesteru jako inhibitory CETP. Coval a kol. (Bioorg. Med. Chem. Lett., 5, 605-610 (1995)) popisují Widediol-A a -B a příbuzné seskviterpenové sloučeniny jako inhibitory CETP. Lee a kol. (J. Antibiotics, 49, 693-96 (1996)) popisují inhibitory CETP odvozené od insekticidních hub. Busch a kol. (Lipids, 25, 216-220, (1990)) popisují cholesterylacetylbromid jako inhibitor CETP. Morton a Zilversmit (J. Lipid Res., 35, 836-47 (1982)) popisují, že p-chlormerkurifenylsulfonát, phydroxymerkuribenzoát a ethylmerkurithiosalicylát inhibují CETP. Connolly a kol. (Biochem. Biophys. Res. Comm., 223, 4247 (1996)) popisují další cysteinová. modifikační činidla jako inhibitory CETP. Xia a kol., popisují 1,3,5-triaziny jako inhibitory CETP (Bioorg. Med. Chem. Lett., 6, 919-22 (1996)). Bisgaier a kol. (Lipids, 29, 811-8 (1994)) popisují 4-fenyl-5-tridecyl-4H-l,2,4-triazolthiol jako inhibitor CETP. Další triazolové inhibitory CETP jsou popsány v US patentové ·· « · · ··· ···· ·· ······ ··· · · · ·· ···· · · · · ·· • · · · · · ·· ·· ··· ··· ··· ·♦ ··· přihlášce 09/153,360, uváděné zde jako odkaz. Sikorski a kol. popisuji další nové inhibitory CETP v patentové přihlášce PCT č. WO 99/14204.

Substituované 2-merkaptoanilinamidové sloučeniny se mohou použít jako inhibitory CETP a takové sloučeniny popsal H. Shinkai a kol. v patentové přihlášce PCT č. WO 98/35937.

Jsou známé některé heteroalkylaminové sloučeniny jako inhibitory CETP. V Evropské patentové přihlášce č. 796846, Schmidt a kol., jsou popsány 2-arylsubstituované pyridiny jako inhibitory transferního proteinu cholesterolesteru, které jsou užitečné jako kardiovaskulární činidla. Jeden substituent v poloze C₃ pyridinového kruhu může být hydroxyalkylová skupina. V Evropské patentové přihlášce č. 801060, Dow a Wright popisují heterocyklické deriváty substituované aldehydovým adičním produktem alkylaminu za vzniku 1-hydroxy1-aminů. Tyto sloučeniny jsou uváděny jako P3-adrenergické receptorové agonisty, které jsou užitečné pro léčbu diabetů a ostatních chorob. V patentové přihlášce GB č. 2305665, Fischer a kol. popisují sekundární aminoalkoholové substituované pyridinové deriváty, které jsou užitečné pro léčbu některých chorob, včetně úrovní cholesterolu a aterosklerotických chorob. V Evropské patentové přihlášce č. 818448 (zde uváděné jako odkaz) Schmidt a kol. popisují tetrahydrochinolinové deriváty jako inhibitory transferního proteinu cholesterolesteru. Evropská patentová přihláška č. 818197, Schmek a kol., popisuje pyridinové deriváty s kondenzovanými heterocykly jako inhibitory transferního proteinu cholesterolesteru. Brandes a kol. v patentové přihlášce Německa č. 19627430 popisuje bicyklické kondenzované pyridinové deriváty, které jsou užitečné jako inhibitory transferního proteinu cholesterolesteru. V patentové přihlášce PCT č. WO 98/39299, Muller-Gliemann a kol. jsou popsány chinolinové deriváty jako inhibitory transferního proteinu cholesterylesteru.

Polycyklické sloučeniny, které jsou užitečné jako inhibitory CETP také popsal A. Oomura a kol. v japonské patentové přihlášce č. 10287662. Například terapeutické sloučeniny, mající struktury C-l a C-8 byly připraveny kultivací Penicillium spp.

Cykloalkylpyridiny, užitečné jako inhibitory CETP popsal Schmidt a kol. v Evropské patentové přihlášce č. EP 818448. Například terapeutická sloučenina, která má strukturu C-9 je popsána jako sloučenina, která je zejména účinná jako inhibitor CETP.

Substituované tetrahydronaftalenové sloučeniny, užitečné jako inhibitory CETP jsou popsány v patentové přihlášce PCT č. WO 99/14174. Zejména je v této přihlášce popsán jako užitečný inhibitor CETP (8S)-3-cyklopentyl-l-(4-fluorfenyl)-2-[(S)-fluor(4-trifluormethylfenyl)methyl]-8-hydroxy-6-spirocyklobutyl-5,6, 7-tetrahydronaftalen.

Některé 4-heteroaryltetrahydrochinoliny, užitečné jako inhibitory CETP jsou popsány v patentové přihlášce PCT č. WO 99/14215. Například je popsán 3-(4-trifluormethylbenzoyl)-5,6,7,8-tetrahydrochinolin-5-on, jako inhibitor CETP.

Další přístup ke snížení celkového cholesterolu spočívá v poznatku, že HMG CoA reduktáza katalyzuje stupeň omezující rychlost v biosyntéze cholesterolu (The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9. vydání, J.G. Hardman a L. E. Limberd, vyd. Mcgraw-Hill lne., New York, str. 884-888 (1996), zde uváděno jako odkaz). Inhibitory HMG CoA reduktázy (včetně třídy terapeutik obecně nazývaných „statiny) redukují úrovně LDL cholesterolu v krevním seru konkurenční inhibicí tohoto biosyntetického stupně (M. S. Brown a kol., J. Biol. Chem., 253, 1121-28 (1978), zde uváděno jako odkaz. Ve světě bylo vyvinuto několik statinů nebo jsou komerčně dosažitelné. Mezi prvními statiny byl vyvinut mevastatin, který je popsán v US patentu č. 3 983 140 (zde uváděn jako odkaz). Lovastatin, další důležitý inhibitor HMG CoA reduktázy je popsán v US • · * · ··· · • · ·· ·· ♦· · ··· ··· · · · ·· · · · 9 · · · ·♦ ··· 9 · · ·· ·· ·♦· ··· ··· ·· ··· patentu č. 4 231 938 (zde uváděn jako odkaz). Simvastatin je popsán v US patentu č. 4 444 784 (zde uváděn jako odkaz). Každý z těchto inhibitorů HMG CoA reduktázy obsahuje šestičlennou laktonovou funkci, která zřejmě napodobuje strukturu HMG Coa v konkurenci s reduktázou. Příkladem další třídy léčiv snižujících cholesterol na bázi inhibitoru HMG CoA reduktázy je dále skupina léčiv, která obsahuje funkční skupiny 2, 4-dihydroxyheptanové kyseliny, spíše než lakton. Jeden ze členů této skupiny je pravastatin, popsaný v US patentu č. 4 346 227 (zde uváděný jako odkaz). Další inhibitor HMG CoA reduktázy, který obsahuje 2,4-dihydroxyheptanovou kyselinu je fluvastatin, popsaný v US patentu č. 5 354 772 (zde uváděný jako odkaz). Varovné vedlejší postranní účinky z použití inhibitorů HMG CoA reduktázy zahrnují jaterní dysfunkci, skeletální svalovou myopathii, rhabdomyolysis a akutní renální selhání. Některé z těchto účinků jsou aktivovány, když se inhibitory HMG CoA reduktázy kombinují s fibráty nebo s kyselinou nikotinovou.

Deriváty kyseliny fibrové zahrnují další třídu léčiv, které mají účinek na úrovně lipoproteinů. Mezi první z těchto sloučenin patří clofibrát, popsaný v US patentu č. 3 262 850, uváděný zde jako odkaz. Clofibrát je ethylester pchlorfenoxyizobutanové kyseliny. Široce používané léčivo v této třídě je gemfibrozil, popsaný v US patentu č. 3 674 836, uváděný zde jako odkaz. Gemfibrozil je často používán ke snížení úrovně triglyceridů nebo ke zvýšení koncentrací HDL cholesterolu (The Pharmacological Basis of Therapeutics, str. 893, zde uváděno jako odkaz). Fenofibrát (US patent č. 4 058 552, uváděný zde jako odkaz) má podobný účinek jako gemfibrozil, ale navíc snižuje úrovně HDL. Ciprofibrát (US patent č. 3 948 973, uváděný zde jako odkaz) má podobné účinky jako fenofibrát. Další léčivo této třídy je bezafibrát (US patent č. 3 781 328, uváděný zde jako odkaz). Varovné postranní účinky používání derivátů kyseliny fibrové zahrnují • · 4 « · ♦·4 • · · · · · · ·· ··· • · · · ·· · · ···· · · · · ·4 • · · · ···· ·· ··· ··· ··· ·4*·· nemoci žlučníku (cholelithiáza), rhabdomyolysis a akutní renální selhání. Některé z těchto účinků jsou aktivovány, když se fibráty kombinuji s inhibitory HMG CoA reduktázy.

Probucol je silný antioxidant, který má schopnost snižovat úrovně cholesterolu v séru a způsobuje regresi xantomů u pacientů, majících homozygotní familiální hypercholesterolemii (A. Yamamoto a kol., Am. J. Cardiol., 57, 29H-35H (1986). Nicméně, léčba samotným probucolem někdy vykazuje nepravidelnou regulaci LDL a často snížení HDL (The Pharmalogical Basis of Therapeutics, str. 891). Probucol je kontraindikován u‘ pacientů s progresivním myokardiálním poškozením a/nebo ventrikulárními arytmiemi.

Skupina látek, která působí jiným mechanizmem na snížení LDL cholesterolu zahrnuje maskovací činidla žlučových kyselin. Taková činidla jsou typické měniče aniontů podávané pacientovi orálně. Jak činidlo prochází střevem, anionty žlučových kyselin jsou činidlem maskovány a vyměšovány. Předpokládá se, že takové maskování zabraňuje reabsorbci střevem, například kyčelníkem a tím je zabráněno konverzi žlučových kyselin na cholesterol. Jedno takové maskovací činidlo žlučových kyselin je cholestyramin, styren-divinylbenzenový kopolymer, obsahující kvartérní amoniové kationtové skupiny, schopné vázat žlučové kyseliny. Má se za to, že cholestyramin váže žlučové kyseliny v intestinálním traktu, čímž interferuje jejich normální enterohepatický oběh. Tento účinek popsal Reihnér a kol. v „Regulation of hepatic cholesterol metabolism in humans: stimulatory effects of cholestyramine on HMG-CoA reductase activity and low density lipoprotein receptor expression in gallstone patients, Journal of Lipid Research, 31, 2219-2226 (1990). Další popis tohoto účinku lze nalézt v Suckling a kol., „Cholesterol Lowering and bile acid excretion in the hamster with cholestyramine treatment, Atherosclerosis, 89, 183-190 (1991). To vede ke zvýšení syntézy jaterních žlučových kyselin, poněvadž játra užívají «· •· «· •·

♦ * · ·ν· ·· ·· ·· · ··· • · · · »· • · · · a · ·· • ♦ · · ·· ··· ··· « » · *4» «· cholesterol za současného zvýšeni jaterních LDL receptorů, což vede ke zvýšeni klearance cholesterolu a ke sníženi úrovní LDL cholestrolu.

Další maskovací činidlo žlučových kyselin je colestipol, koploymer diethylentriaminu a l-chlor-2,3-epoxypropanu. Colestipol je popsán v US patentu č. 3 692 895. Častý vedlejší účinek colestipolu a cholestyraminu je gastrický stres.

Další maskovací činidla žlučových kyselin jsou popsána v US patentu č. 5 703 188, Geltex Pharmaceuticals lne. Například jedno takové maskovací činidlo je 3-methakrylamidopropyltrimethylamoniumchlorid, kopolymerovaný s ethylenglylkoldimethakrylátem za získání kopolymeru.

Ještě další třída materiálů navrhovaných jako maskovací činidla žlučových kyselin zahrnuje částice, obsahující amfifilní kopolymery, mající síťovanou vrstvu a vnitřní jádro (patentová přihláška PCT/US 97/11610). Struktury a příprava takových síťovaných amfifilních kopolymeru jsou popsány v PCT/US97/11345. Takové částice jsou obecně pojmenovány „knedels (K. B. Thurmond a kol., J. Am. Chem. Soc., 118 (30), 7239-40 (1996)).

Kyselina nikotinová (niacin) je vitaminový B-komplex, o kterém se již v r. 1955 uvedlo, že působí jako hypolipidemické činidlo (R. Altschl, a kol., Arch. Biochem. Bioiphys., 54, 558-9 (1955)). Někdy se používá ke zvýšení úrovní HDL a ke snížení úrovní VLDL a LDL. Užitečné komerční produktu kyseliny nikotinové zahrnují Niacor, Niaspan, Nicobid, Nicolar, SloNiacin. Kyselina nikotinová je kontraindikována u pacientů, kteří mají hepatickou dysfunkci, aktivní peptický vřed nebo arteriální krvácení. Další sloučeninou této třídy, užitečnou pro kardiovaskulární indikace je niceritrol (T. Kazumi a kol.. Curr. Ther. Res., 55, 546-51). J. Sasaki a kol. (Int. J. Clin. Pharm. Ther., 33 (7), 420-26 (1995)) popisují snížení aktivity přenosu cholesterolesteru niceritrolovou monoterapií. Acipimox (4-oxid 5-methyl pyrazin-2-karboxylové kyseliny, US *· · • 4 ·« • « 4 ♦ ··« »· »4 4 ·44

9 4 ·4 • 4 4

4« 44 · · · · ·

4·· 44 444 patent č. 4 002 750) je strukturně podobný kyselině nikotinové a má antihyperlipidemickou účinnost.

Studie, kterou provedl Wetterau a kol. (Science, 282, 75154 (1988)) popisuje řadu alkylpiperidinových sloučenin, izoindolových sloučenin a fluorenových sloučenin, užitečných pro inhibici mikrosomálniho triglyceridového transferniho proteinu (MTP inhibitory). Hlodavci a hyperlipidemičtí králíci ošetření těmito sloučeninami vykazuji sníženou produkci lipoproteinových částic.

Antagonisty absorpce cholesterolu mohou být užitečnými pro léčbu nebo profylaxi kardiovaskulárních nemocí, jako je hypercholesterolemie nebo ateroskleróza. Například azetidinony, jako je SCH 58235 ([3R-[3a(S*), 4β]]-1-(4-fluorfenyl) — 3—[3— (4-fluorfenyl) -3-hydroxypropyl]-4 . (4-hydroxyfenyl) -2-azetidinon) (vzorec A-l), popsané v J. Med. Chem., 41(6), 973-980 (1998), jsou užitečné antagonisty absorpce cholesterolu. SCH 58 235 dále popsal Van Heek a kol. v J. Pharmacol. Exp. Ther. 283 (1), 157-163 (1997)). Další azetidinonové sloučeniny, užitečné pro léčbu nebo profylaxi kardiovaskulárních chorob jsou popsány v US patentu č.

767 115.

([3R-[3a(S*) , 4β]]-1- (4-fluorfenyl) —3—[3— (4-fluorfenyl) -3-hydroxypropyl]-4- (4-hydroxyfenyl) -2-azetidinon

Bylo prokázáno, že fytosteroly, zejména stanoly účinně inhibuji absorpci cholesterolu z gastrointestinálniho traktu a negativně působí na syntézu cholesterolu. Předpokládá se, že fytosteroly zpomalují nebo inhibuji progres a vznik určitých kardiovaskulárních stavů, včetně hyperlipidemických stavů, jako je hypercholesterolemie a ateroskleróza. Stanoly jsou 5a nasycené deriváty fytosterolů (Straub, US patent č. 5 244 887). Předpokládá se, že fytosteroly snižují úrovně cholesterolu v krvi redukcí absorpce cholesterolu ze střeva (Lining a Jones, „Minireview Dietary Phytosterols: A Review of Metabolism, Benefits and Side Effects, Life Science, 57 (3), 195-206 (1995) ) .

Sitostanol, clionastanol, 22,23-dihydrobrassicastanol, campestanol a jejich směsi, obsažené v aditivech pro potraviny určené ke snížení absorpce cholesterolu z potravin a nápojů obsahujících cholesterol popsal Straub v US patentu č.

244 887.

Beta-sitostanol ester mastné kyseliny nebo směsi esterů mastné kyseliny, které snižují cholesterol v séru jsou popsány Mittienem a kol. v US patentu č. 5 502 045.

Stanolová kompozice, obsahující sitostanol a campestanol, která účinně snižuje úrovně cholesterolu v séru po inkorporaci do potravin je popsána ve WO 98/06405.

Terapeutická kompozice jednoho nebo více oxysterolů a vhodného nosiče k inhibici absorpce cholesterolu ze stravy popsal Haines v US patentu č. 5 929 062.

Kardiovaskulární choroba je také způsobena nebo zhoršena hypertenzí. Hypertenze je definována jako trvale vysoký krevní tlak. Obecně, dospělí jsou klasifikováni jako hypertenzivní, pokud systolický tlak je vyšší než 140 mmHg nebo když diastolický tlak je vyšší než 90 mmHg. Dlouhodobá rizika pro kardiovaskulární úmrtnost je v přímém vztahu s trvalým krevním tlakem (E. Braunwald, Heart Disease, 5. vydání, W. B. Saunders ··· ·· · · · «· ··· ··· ··· · · ··· & Co, Filadelfie, 1997, str. 807-823). Pro kontrolu hypertenze je využívána řada mechanizmů. Například, výhodná antihypertenzivní činidla zahrnují, avšak bez omezení, andrenergní blokátory, směsné alfa-beta andrenergní blokátory, beta andrenergní blokátory, andrenergní stimulanty, inhibitory enzymu konvertujícího angiotensin (ACE) , agonist receptoru angiotensinu II, blokátory draslíkových kanálků, diuretika nebo vasodilátory. Zvlášť užitečným antihypertenzivním činidlem je eplerenon (viz například US patent č. 4 559 332). Eplereon snižuje krevní tlak tím, že působí jako diuretikum. Eplerenon byl dříve nazýván epoxymexrenon.

Některé kombinační terapie pro léčbu kardiovaskulárních chorob jsou popsány v literatuře. Kombinace inhibitorů IBAT s inhibitory HMG CoA reduktázy užitečná pro léčbu kardiovaskulárních nemocí jsou popsány v US. patentové přihlášce Č. 09/037,308 a v přihlášce PCT č. 98/40375.

Kombinační terapii za použití fluvastatinu a niceritrolu popsal J. Sasaki a kol., (tamtéž). Tito výzkumníci uvádějí, že kombinace fluvastatinu s niceritrolem „v dávce 750 mg/den nezvyšuje nebo nesnižuje užitečné účinky fluvastatinu.

L. Cashin-Hemphill a kol. (J. Am. Med. Assoc., 264 (23), 3013-17 (1990), popisují užitečné účinky kombinační terapie za použití colestipolu a niacinu na koronární aterosklerózu. Popsané účinky zahrnují zastavení postupu a regrese vyskytujících se v nativních koronárních tepenných lézích.

Kombinační terapie za použití acipimoxu a simvastatinu ukazuje příznivé účinky na HDL u pacientů, majících vysoké úrovně triglyceridů (N. Hoogerbrugge a kol., J. Internal Med., 241, 151-55 (1997)).

Kombinační terapii za použití sitostanol ester margarinu a pravastatinu popsali H. Gylling a kol. (J. Lipid Res., 37, 1776-85 (1986)). O této terapii se uvádí, že současně podstatně inhibuje absorpci cholesterolu a snižuje LDL cholesterol u mužů s diabetem nezávislým na inzulínu.

• · · · · · · • · · · · · ·· ·· • · · · * · ·

Brown a kol. (New Eng. J. Med., 323 (19), 1289-1339 (1990)) popisuji kombinační terapii za použití lovastatinu a colestipolu, která snižuje progres aterosklerotické léze a zvýšení regrese léze vzhledem k samostatnému lovastatinu.

Scott a kol. (patentová přihláška PCT č. WO 99/11260) popisují kombinační terapii zahrnující atorvastatin (inhibitor HMG CoA reduktázy) a antihypertenzivní činidlo pro léčbu angíny pectoris, aterosklerózy, kombinované hypertenze a hyperlipidemie a symptomů kardiálního nebezpečí.

Egan a kol. (patentová přihláška PCT č. WO 96/40255) popisuje kombinační terapii za použití antagonistu angiotensinu II a antagonistu epoxy-steroidního aldeosteronu. Antagonist epoxy-steroidního aldosteronu v Eganově aplikaci zahrnuje eplerenon.

Shora uvedené odkazy ukazují na kontinuální potřebu nalézt bezpečná a účinná činidla pro profylaxi nebo léčbu kardiovaskulárních nemocí.

Podstata vynálezu k

Vzhledem k existující potřebě nalézt bezpečná a účinná činidla pro profylaxi a léčbu kardiovakulárních nemocí, uvádí se v předkládané přihlášce kombinační terapie kardiovaskulárních léčiv.

Předkládaná přihláška poskytuje kombinační terapii, zahrnující použití prvního množství inhibitoru IBAT a druhého množství dalšího kardiovaskulárního terapeuticky účinného léčiva k profylaxi a léčbě hyperlipidemie nebo aterosklerózy, kde množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství uvedených sloučenin. Například jedno z mnoha provedení vynálezu je terapeutická kompozice, zahrnující první množství inhibitoru IBAT a druhé množství mikrosomálního triglyceridového transferního proteinového inhibitoru • · «· ··· ··· ··· ·» · (inhibitor MTP), kde první a druhé množství společně zahrnují antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství sloučenin. Ve výhodném provedení podle vynálezu je inhibitor IBAT na bázi benzothiepinu. V dalším provedení může být inhibitor IBAT na bázi benzotiazepinu. Ještě v dalším provedení může být inhibitor IBAT na bázi naftalenu.

Předkládaný vynález dále poskytuje terapeutickou kompozici, obsahují první množství inhibitoru IBAT a druhé množství antagonistu absorpce cholesterolu, kde první a druhé množství dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství sloučenin.

Předkládaný vynález dále poskytuje terapeutickou kombinaci, obsahují první množství sloučeniny inhibující transport ileálních žlučových kyselin a druhé množství antihypertenzivní sloučeniny, kde první a druhé množství dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství sloučenin.

V dalším provedení předkládaný vynález dále poskytuje terapeutickou kombinaci, obsahují první množství sloučeniny inhibující transport ileálních žlučových kyselin a druhé množství sloučeniny proti obezitě, kde první a druhé množství dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství sloučenin, například sloučenina proti obezitě může být orlistat. Orlistat je popsán v Evropské patentové přihlášce č. EP 0 129 748.

Předkládaný vynález dále poskytuje kombinaci, zahrnující první množství inhibitoru IBAT a druhé množství dalšího kardiovaskulárního terapeutika účinného při profylaxi nebo léčbě hyperlipidemie nebo aterosklerózy, kde první a druhé množství dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství sloučenin.

Například jedno z mnoha provedení předkládaného vynálezu je kombinace, zahrnující terapeutické dávky inhibitoru IBAT a fytosterolu. Výhodné provedení podle vynálezu je kombinace, zahrnující terapeutické dávky inhibitoru IBAT a fytosterolu. V dalším výhodném provedení předkládaný vynález zahrnuje kombinaci inhibitoreu IBAT a stanolu.

Ještě v dalším provedení předkládaný vynález zahrnuje použití jakékoliv kardiovaskulární kombinační terapie popsané v tomto dokumentu pro profylaxi nebo léčbu hypercholesterolemie nebo aterosklerózy.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje způsob profylaxe nebo léčby hyperlipidemického stavu nebo choroby u savce, který zahrnuje podání prvního množství inhibitoru transportu ileálních žlučových kyselin a druhého množství mikrosomálního triglýceridového transferního proteinového inhibitoru, kde první a druhé množství společně zahrnují antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství sloučenin.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje způsob profylaxe nebo léčby hyperlipidemického stavu nebo choroby u savce, který zahrnuje podání prvního množství inhibitoru transportu ileálních žlučových kyselin a druhého množství antagonistu absorpce cholesterolu, kde první a druhé množství společně zahrnují antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství sloučenin.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje způsob profylaxe nebo léčby hyperlipidemického stavu nebo choroby u savce, který zahrnuje podání prvního množství inhibitoru transportu ileálních žlučových kyselin a druhého množství antihypertenzivni sloučeniny, kde první a druhé množství společně zahrnují antihyperlipidemicky účinné množství sloučenin.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje způsob profylaxe nebo léčby hyperlipidemického stavu nebo choroby u savce, který zahrnuje podání prvního množství inhibitoru transportu ileálních žlučových kyselin a druhého množství fytosterolové sloučeniny, kde první a druhé množství společně zahrnují antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihyperCholesterolemicky účinné množství sloučenin. Výhodně fytosterolová sloučenina zahrnuje stanol.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje soupravu pro dosažení terapeutického účinku u savce, obsahující množství sloučeniny inhibující transport ileálních žlučových kyselin v první jednotkové dávkové formě; a množství mikrosomálního triglyceridového transferního proteinového inhibitoru v druhé jednotkové dávkové formě; a zásobní prostředky obsahující uvedené první a druhé jednotkové dávkové formy.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje soupravu pro dosažení terapeutického účinku u savce, obsahující množství sloučeniny inhibující transport ileálních žlučových kyselin v první jednotkové dávkové formě; a množství antagonistu absorpce cholesterolu v druhé jednotkové dávkové formě; a zásobní prostředky obsahující uvedené první a druhé jednotkové dávkové formy.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje soupravu pro dosažení terapeutického účinku u savce, obsahující množství sloučeniny inhibující transport ileálních žlučových kyselin v první jednotkové dávkové formě; a množství antihypertenzivní sloučeniny v druhé jednotkové dávkové formě; a zásobní prostředky obsahující uvedené první a druhé jednotkové dávkové formy.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje soupravu pro dosažení terapeutického účinku u savce, obsahující • · ·· ·· • » · ·· · · • · ·· • ·· · · • · · · · « · • · · · · · · · · · · · · · množství sloučeniny inhibující transport ileálních žlučových kyselin v první jednotkové dávkové formě; a množství fytosterolové sloučeniny v druhé jednotkové dávkové formě; a zásobní prostředky obsahující uvedené první a druhé jednotkové dávkové formy.

Další rozsah aplikovatelnosti předkládaného vynálezu bude zřejmý z detailního popisu uvedeném dále. Nicméně je třeba vzít v úvahu, že následující podrobný popis a příklady, ačkoli uvádějí výhodná provedení vynálezu jsou uvedeny pouze pro ilustraci a odborník může provést řadu změn a modifikací v rámci rozsahu předkládaného vynálezu.

Následující detailní popis vynálezu slouží jako pomoc odborníkům v oblasti při praktickém užívání předkládaného vynálezu. Nicméně, tento detailní popis není konstruován tak, aby příliš omezoval vynález. Odborník může provést řadu modifikací a změn, aniž by došlo k odchýlení od podstaty nebo rozsahu předkládaného vynálezu.

Obsahy každého citovaného odkazu, včetně obsahů odkazů citovaných v rámci primárních odkazů, jsou zde začleněny odkazem ve své úplnosti.

Aby čtenář porozuměl následujícímu detailnímu popisu, platí následující definice:

„Benzothiepinový inhibitor IBAT znamená inhibitor transportu žlučových kyselin, který obsahuje terapeutickou sloučeninu zahrnující 2,3,4,5-tetrahydro-l-benzothiepin 1,1-dioxidovou strukturu nebo 2,3,4,5-tetrahydro-l-benzothiepin-1-oxidovou strukturu.

„Benzothiazepinový inhibitor IBAT znamená inhibitor transportu žlučových kyselin, který obsahuje terapeutickou sloučeninu zahrnující 2,3,4,5-tetrahydro-l-benzothi-4-azepin 1,1-dioxidovou strukturu nebo 2,3,4,5-tetrahydro-l-benzothi-5-azepin 1,1-dioxidovou strukturu.

„Naftalenový inhibitor IBAT znamená inhibitor transportu žlučových kyselin, který obsahuje terapeutickou sloučeninu zahrnující substituovanou naftalenovou strukturu.

„Derivát kyseliny nikotinové znamená terapeutickou sloučeninu, zahrnující pyridin-3-karboxylátovou strukturu nebo pyrazin-2-karboxylátovou strukturu, včetně kyselých forem, solí, esterů, obojetných ionů a tautomerů. Derivát kyseliny nikotinové zahrnuje například kyselinu nikotinovou (niacin), niceritrol a acipimox.

„Fytosterol znamená přírodní nebo syntetický steroid obsahující v poloze 17 alifatický postranní řetězec o okolo 8 až 10 atomech uhlíku a alespoň jednu alkoholovou hydroxylovou skupinu (Miller-Keane, Encyclopedia & Dictionary of Medicine, Nursing, & Allied Health, 5. vydáni). Výraz „fytosterol jak se zde používá, zahrnuje stanoly.

„Stanoly znamená třídu fytosterolů, majících 5oc-nasycení.

„Kombinační terapie znamená podání dvou nebo více terapeutických činidel k léčbě hyperlipidemického stavu, například aterosklerózy a hypercholesterolemie. Takové podání zahrnuje společné podání těchto terapeutických činidel v podstatě současně, jako je jedna dávková forma, obsahující pevně určený poměr aktivních složek nebo více oddělených dávkových forem pro každou inhibiční sloučeninu. Navíc toto podání zahrnuje také využití každého typu terapeutického činidla v sekvenčním způsobu. V tomto případě bude léčebný režim poskytovat užitečné účinky kombinací léčiv při léčbě hyperlipidemických stavů.

Fráze „terapeuticky účinné je vztažena k označení kombinovaného množství inhibitorů v kombinační terapii. Toto kombinované množství dosáhne cíle, spočívající v redukci nebo eliminaci hyperlipidemického stavu.

„Terapeutická sloučenina znamená sloučeninu užitečnou při profylaxi a léčbě hyperlipidemického stavu, včetně aterosklerózy a hypercholesterolemie.

Kombinace

Kombinace podle předkládaného vynálezu budou mit řadu využiti. Například úpravou dávky a lékařským dohledem budou jednotlivé dávky použitých terapeutický sloučenin nižší, než jsou typické dávky použité při monoterapii. Snižování dávek přinese výhody, spočívající ve snížení vedlejších účinků ve srovnání s monoterapii. Dále, menší vedlejší účinky kombinační terapie ve srovnání s monoterapii povede k lepším podmínkám pro pacienta při dávkovém režimu.

Další použití předkládaného vynálezu bude v kombinaci, mající doplňkové účinky nebo doplňkový způsob podání. Například inhibitory IBAT často snižují LDL lipoprotein, ale také snižují HDL lipoprotein. Naproti tomu inhibitory CETP zvyšují HDL. Terapeutická kombinace inhibitoru IBAT a inhibitoru CETP při optimálních dávkách udrží nižší LDL nebo zvýší HDL.

Sloučeniny užitečné v předkládaném vynálezu zahrnují široký rozsah terapeutických sloučenin. Inhibitory IBAT užitečné v předkládaném vynálezu jsou popsány v patentové přihlášce č. PCT/US95/10863, zde uváděné jako odkaz. Další ' inhibitory IBAT jsou popsány v PCT/US97/04076, zde uváděné jako odkaz. Ještě další inhibitory IBAT, užitečné v předkládaném vynálezu jsou popsány v US patentové přihlášce č. 08/816 065, zde uváděné jako odkaz. Další sloučeniny užitečné jako inhibitory IBAT v předkládaném vynálezu jsou popsány ve WO 98/40375, zde uváděné jako odkaz. Další sloučeniny užitečné jako inhibitory IBAT v předkládaném vynálezu jsou popsány v US patentové přihlášce č. 08/816 065, zde uváděné jako odkaz. Zvlášť zajímavé inhibitory IBAT podle vynálezu zahrnují inhibitory uvedené v tabulce 1 a rovněž diastereomery, enantiomery, racemáty, soli a tautomery inhibitorů IBAT tabulky 1.

Tabulka 1

Compound Number	Structure
B-l
) B-2	\// * - (3R, 5R)-3 -butyl-3-ethyl-2,3,4,5 -tetrahydro-7,8-dimethoxy- 5 -fenyl-1,4-benzothiazepin 1,1,-dioxid

··· ·· · ·t· • ·

		°V/° r
		A	>*°^**\ 1
	1	JU
B-6		<$ %H
	·-		J	^COoH V
		°\		1 \/N\^CO2H
			%//°
	HCK
B-7	C]<		Ν'—
		o
B-8			n	.0
			W 1
		lí	X/
		II
	(h3c)2n	**	%Η
			A
			o
B-9		°v/° 'e·
	(H3C)2N
		/ %H
			J
		0		C1‘
			x0*\.	-o.
				X.—-\+
				N(CH2CH3)3

• •	• 9	• •	* 99 9	• • · 9	• 9 9 9	9 9	9 99 9
.9 9	9 9
• •	i	•	•	9	9	9	9	9
	9.9		999	♦ · ·	999		9 9	99 9

B-10	°v/° r\ 1 X
	íl	-O
	<H3C)2N^		— X '—
	/	Ť)H
	X	4	0 N^\ _ H ----X	cr
				—χ+
				N(CH2CH3)3
B-ll			V r
			\Z
	(H3C)2N^
		•š '''/ OH ff
			χ N\
			H	so3h
B-12			0
			Dw /
	Γ			__/
	''-íZ 1			•
		v	J
	H3Cq/

·· * « · ·» · ···« ·· · ♦ ···· · ·· · · ··· ·· «·· · · · ··♦

B-15	- (H3C)2N^	V γ\ 'α 1 x
^C	ΌΗ
				N H	0 Λ NH
	ΐ Rx — 5000 hmotnost vzorce polytehylenglykolu	s „X R\
					0 /
B-16		c	0
	-.....1 -			Z	ď
				JL	+ ^N(CH2CH3)3
B-17				9 ζθ w 's---
	Z 1			/ Z<ÓH	.COnH z
			v	J	V „COnH N-^Z
			0	o

·· a

	·· •	• * · •
e •	> •
•	•	•	•
··		*··	·

•	«·	«
·<	•	•	··
•	•	•	•
•		•	•
9··		··	»» ·

B-21		0 %ll _ \ /s·^
			N .......		/ .......		.....
			|	£
			1	sz	OH
			.......
					JL·
					Ί C1
					v
B-22			0
			II >	—
	N 1		1 %H
			ΓΙ1
			O	'. '.í '.' '.			' Cl“
			Ok		s.		/X +
				^C)			N(CH2CH3)3.
B-23			0
			o^ll —
	\ T,
	N
	I		Z
	1		zz	ΌΗ
			o				Cl
				X HN			+
						xN(CH2CH3)3
				0

• · • · · · · · · ·· ··· ··· ··· ·· ···

• ·

B-28

B-29 ·· ·

PEG

PEG = 3400 molekulární hmotnost polyethylenoglykolového polymemího řetězce

PEG = 3400 molekulární hmotnost . polyethylenoglykolového polymemího řetězce · ·· ♦ ' * · ·· · • · · · · · « · • · · · · · · · · · • · · · · ··· ♦ · · · · ··· ··· ·· ···

B-30	PEG O ϊ λ \ Ck N-- V° oxi J / 0 < \ PEG = 3400 molekulární hmotnost polyethylenoglykolového polymemího řetězce
B-31	7— Ϊ
B-32	0 N=Z CO2H

B-33	o*„° iCVsA/-O
	1 %i
	O y ]Τ Ry =	PEG 1000
	°x Ry
B-34	o*,P
	.0	Me-	0 o S“O ‘ 0 0
	s
	HO
B-35	Λ
	1 ZOH	N JI	H z N
B-36	rtV
	WyV 1 jS ΌΗ
	P_	H z-N.	γΝΗ2
			II NH ·
B-37	0^,0 r N ' A 0H
	9_o	γ
		11	^.N
			co2h

B-38	1	o*,P [—
/X		Λ [ V-nh
	J
B-39	°x/°
				2	cr
					O O °x '
	1
	Γ		\ / -N.		1 OH O
				2

Některé individuální inhibitorové sloučeniny CETP užitečné v předkládaném vynálezu jsou popsány v následujících patentových přihláškách, pricemz kazda ne zde uvadena odkaz.

R9. US patentová přihláška

R10. US patentová přihláška

Rll. US patentová přihláška

R12. US patentová přihláška

R13. US patentová přihláška

R14. US patentová přihláška

R15. US patentová přihláška

R16. US patentová přihláška

R17. US patentová přihláška

R18. US patentová přihláška

R19. US patentová přihláška

R20. US patentová přihláška

R21. US patentová přihláška

R22. US patentová přihláška pořadového čísla 60/101661. pořadového čísla 60/101711. pořadového čísla 60/101660. pořadového čísla 60/101664. pořadového čísla 60/101668. pořadového čísla 60/101662. pořadového čísla 60/101663. pořadového čísla 60/101669. pořadového čísla 60/101667. pořadového čísla 09/401916. pořadového čísla 09/405524. pořadového čísla 09/404638. pořadového čísla 09/404638. pořadového čísla 09/400915.

R23. US patent číslo 5 932 587.

R24. US patent číslo 5 925 645.

Zvlášť zajímavé sloučeniny jako inhibitory CETP v předkládaném vynálezu jsou uvedeny v tabulce 2.

Tabulka 2

• · « · · ♦ · • · · · · · · · · * « • · · * · · · . — · · · · · · · · ··. ··· ··· ··♦ ·· ···

9 « ♦ · ·♦ • 9 99 9 9 99 9 ·9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9

999 999 999 99 999

C-14		Π
	f3c'^x	v	u
		r	JL· 0 cf2h
C-15			An
	hqwh Ύ f3c	1 ΙΛ
		Ol p2 .........
C-16		A
	7 f3cx>^'x	A	u
			Ί f’ '^'O^C''CF2H
C-17			F
			rS
			u
			x°
	OH		A
	f3c<^		/Vv®’

Deriváty kyseliny fibrové užitečné v kombinacích a metodách podle předkládaného vynálezu zahrnují řadu struktur a funkčních skupin. Výhodné deriváty kyseliny fibrové podle, vynálezu jsou popsány v tabulce 2. Terapeutické sloučeniny tabulky 2 se mohou použít v předkládaném vynálezu v řadě · · 9 ··· • 9 ·· 99 99 9 999

9 9 9 9999 * 9 * 9 9 99999

999 9 9999

999 999 999 99999 forem, zahrnující formu kyseliny, formu soli, racemáty, enantiomery, obojetná činidla a tautomery. Individuální US patenty uváděné v tabulce 4 jsou zde uváděny jako odkaz.

Tabulka 4

Sloučenina č.	Obecný název	Registrační číslo CAS	Odkaz na patent
G-41	Clofibrát	637-07-0	U.S. 3 262 850
G-70	Fenofibrát	49562-28-9	U.S. 4 058 552
G-38	Ciprofibrát	52214-84-3	U.S. 3 948 973
G-20	Bezafibrát	41859-67-0	U.S. 3 781 328
G-78	Gemfibrozil	25182-30-1	U.S. 3 674 836

MTP inhibitorové sloučeniny užitečné v kombinacích a metodách podle předkládaného vynálezu zahrnují řadu struktur a funkčních skupin. Některé MTP inhibitorové sloučeniny zvláště zajímavé pro použití v předkládaném vynálezu jsou popsány v tabulce 4b. Terapeutické sloučeniny tabulky 4b se mohou použít v předkládaném vynálezu v řadě forem, zahrnující formu kyseliny, formu soli, racemáty, enantiomery, obojetná činidla a tautomery. Popis sloučenin uvedených v tabulce 4b lze nalézt v Science, 282, 23.10.1998, str. 751-754, zde uváděno jako odkaz.

Tabulka 4b

Antagonisty absorpce cholesterolu užitečné v kombinacích a metodách podle předkládaného vynálezu zahrnují řadu struktur a funkčních skupin. Některé zvláště zajímavé antagonisty absorpce cholesterolu pro použití v předkládaném vynálezu jsou popsány v US patentu č. 5 767 115, uváděný zde jako odkaz. Další antagonisty absorpce cholesterolu zvlášť zajímavé pro použití v předkládaném vynálezu a způsoby přípravy takových antagonistů absorpce cholesterolu jsou popsány v US patentu č. 5 631 365, zde uváděném jako odkaz. Zvlášť výhodný antagonist absorpce cholesterolu pro použití v kombinacích a * 9 9 999 • · · · 9 9 · 9 9 99 9 • · 9 9 · 9 *9

9 9 9 9 9 9 9 99 • 99 9 9999

999 999 999 99999 metodách předkládaného vynálezu je SCH 58235 ([3R-[3a (S*) , 4β]]-1- (4-fluorfenyl) —3—[3— (4-fluorfenyl) -3-hydroxypropyl]-4- (4hydroxyfenyl)-2-azetidinon).

V dalším provedení předkládaný vynález zahrnuje terapeutickou kombinaci, obsahující první množství inhibitoru transportu ileálních žlučových kyselin a druhé množství fytosterolové sloučeniny, kde první a druhé množství společně zahrnují antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo ántihypercholesterolemicky účinné množství sloučenin. Řadu fytosterolů popsali Ling a Joned v „Dietary Phytesterols: A Review of Metabolism, Benefits and Side Effects, Life Sciences, 57 (3), 195-206 (1995). Některé fytosteroly, avšak bez omezení, které jsou zejména vhodné pro použití v kombinaci podle předkládaného vynálezu jsou uvedeny v tabulce 4c. Fytosteroly také obecně uvádí Nes (Physiology and Biochemistry of Sterols, Američan Oil Chemists' Society, Champaign, 111, 1991, tabulka 7-2). Z fytosterolů pro použití v kombinaci podle předkládaného vynálezu jsou zejména výhodné nasycené fytosteroly nebo stanoly. Další stanoly také popisuje Nes (tamtéž) a jsou užitečné v kombinaci podle předkládaného vynálezu. Výhodný stanol pro použití v kombinaci podle předkládaného vynálezu je stanol. V jednom výhodném provedení je stanol campestanol. V dalším výhodném provedení je stanol cholestanol. V dalším výhodném provedení je stanol clionastanol. V dalším výhodném provedení je stanol coprostanol. V dalším výhodném provedení je stanol 22,23dihydrobeassicastanol. V dalším výhodném provedení je stanol epicholestanol. V dalším výhodném provedení je stanol fucostanol. V dalším výhodném provedení je stanol stigmastanol. V kombinaci podle předkládaného vynálezu je výhodně inhibitor IBAT na bázi benzothiazepinu. V jednom výhodném provedení je benzothiazepinový inhibitor IBAT sloučenina B-2. V dalším výhodném provedení je • · · · · · · ·· ··· ··· ··· ·· · benzothiazepinový inhibitor IBAT sloučenina B-7. Ještě v dalším výhodném provedení je inhibitor IBAT na bázi benzothiepinu. Každý z následujících benzothiepinových inhibitorů IBAT představuje oddělené výhodné provedení předkládaného vynálezu.

B-l.

B-3.

B-4.

B-5.

B-6.

B-8.

B-9.

B-10.

B-ll.

B-12.

B-13.

B-14 .

B-15.

B-16.

B-17.

B-18.

B-19.

B-21.

B-22.

B-23.

B-24.

B-25.

B-26.

B-27.

B-27.

B-28 .

B-29.

B-30.

B-31.

« · · • ft ·· ·

B-32.

B-33.

B-34.

B-35.

B-36.

B-37.

B-38.

B-39.

Ještě v dalším výhodném provedení je inhibitor IBAT naftalenový inhibitor IBAT, například sloučenina B-20.

Tabulka 4c

Slouč. č. 1	Struktura sloučeniny	Název sloučeniny
P-l	Her = H	Campesterol

·· • « ·

• 4 « • · ·

• ♦ · • · · · '·

·· · · * ·· · • · ·· ·· ·· · ♦ · · • · · · * · · · • » · · · · · · ·· ··· ··· ··· ·· ••9

V dalším provedením předkládaný vynález zahrnuje terapeutickou kombinaci inhibitoru IBAT a antihypertenzivního činidla. Hypertenze je definována jako trvale vysoký krevní tlak. Obecně, dospělí jsou klasifikováni jako hypertenzivní, pokud systolický tlak je vyšší než 140 mmHg nebo když diastolický tlak je vyšší než 90 mmHg. Dlouhodobá rizika pro kardiovaskulární úmrtnost je v přímém vztahu s trvalým krevním tlakem (E. Braunwald, Heart Disease, 5. vydání, W. B. Saunders & Co, Filadelfie, 1997, str. 807-823) . Krevní tlak je funkcí minutového objemu srdečního a periferní rezistence vaskulárního systému a může být představen následující rovnicí:

BP

CO X PR • · · * · · · ·· ··· ··· ··· ·· ··· kde BP je krevní tlak, CO je minutový srdeční objem a PR je periferní rezistence (tamtéž., str. 816). Faktory ovlivňující periferní rezistenci zahrnují obezitu a/nebo funkční konstrikci. Faktory ovlivňující minutový srdeční objem zahrnují venózní konstrikci. Funkční konstrikce krevních cév může být způsobena řadou faktorů, jako je tloušťka krevních cév vedoucí ke zmenšení vnitřního průměru cév. Další faktor, který působí na systolický krevní tlak je rigidita aorty (tamtéž., str. 811).

Hypertenze a ateroskleróza nebo ostatní hyperlipidemické stavy se často vyskytují u pacienta současně. Je možné, že určité hyperlipidemické stavy, jako je ateroskleróza mohou mít přímý nebo nepřímý vliv na hypertenzi. Například, ateroskleróza často vede ke zmenšení vnitřního průměru krevních cév. Kromě toho ateroskleróza často vede ke zvýšené rigiditě krevních cév, včetně aorty. Jak zmenšený vnitřní průměr krevních cév, tak rigidita krevních cév často přispívají k hypertenzi.

Infarkt myokardu je nekróza buněk srdečního svalu následkem zbavení kyslíku a obvykle je způsoben obstrukcí dodávání krve do postižených tkání. Například hyperlipidemie nebo cholesterolemie mohou způsobit tvorbu aterosklerotických plátů, které mohou způsobit obstrukci toku krve a tím infarkt myokardu (tamtéž str. 1185-1187). Další hlavní rizikový faktor pro infarkt myokardu je hypertenze (tamtéž 815). Jinými slovy, hypertenzní nebo hyperlipidemické stavy, jako je ateroskleróza nebo hypercholesterolemie spolu způsobují infarkt myokardu.

Koronární nemoc srdce je další nemoc, která je způsobena nebo zhoršena násobnými faktory, zahrnujícími hyperlipidemické stavy a hypertenzi. Regulace hyperlipidemických stavů a hypertenze jsou důležité pro kontrolu symptomů nebo progrese koronární nemoci srdce.

·· ··· ··· ·*· ·· ···

Angína pectoris je akutní bolest v hrudníku, která je způsobena sníženou dodávkou krve do srdce. Snížená dodávka krve do srdce. Snížená dodávka krve do srdce je známá jako ischémie myokardu. Angína pectoris může být například výsledkem stenózy aorty a ventrikulární hypertrofie. Některá antihypertenzivní činidla, například amlodipin regulují angínu pectoris snížením periferní rezistence.

Nyní bylo nalezeno, že terapie, která reguluje hypertenzi a která v kombinaci reguluje hyperlipidemické stavy bude snižovat riziko kardiovaskulární nemoci nebo symptomy srdeční nemoci, například koronární nemoc srdce, infarkt myokardu nebo angínu pectoris. Tak jedno provedení předkládaného vynábezu popisuje terapeutickou kombinaci, obsahující první množství sloučeniny, inhibující transport ileálních žlučových kyselin a druhé množství antihypertenzivního činidla, kde množství obou sloučenin dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství uvedených sloučenin.

Některá antihypertenzivní činidla, která jsou užitečná podle předkládaného vynálezu jsou, avšak bez omezení, uvedená v tabulce 5. Široká řada různých chemických struktur je užitečná jako antihypertenzivní činidla v kombinaci podle předkládaného vynálezu a tato činidla mohou působit různými mechanizmy. Například, výhodná antihypertenzivní činidla zahrnují, avšak bez omezení, andrenergické blokátory, směsné alfa/beta andrenerické blokátory, alfa andrenergické blokátory, beta andrenergické blokátory, andrenergické stimulanty, inhibitory enzymu konvertujícího angiotensin (ACE) , antagonist receptoru angiotensinu II, blokátory draslíkových kanálků, diuretika nebo vasodilátory. Další hypertenzivní činidla užitečná podle předkládaného vynálezu jsou popsána R. Scottem v US patentové přihlášce č. 60/057,276

(prioritní dokument pro PCT přihlášku č. WO 99/11260), zde uváděné jako odkaz) .

Tabulka 5.

Sloučenina číslo	Antihypertenzivní klasifikace	Název sloučeniny	Dávka
N-l	andrenergický blokátor	fenoxybenzamin	1-250 mg/den
N-2	andrenergický blokátor	guanadrel	5-60 mg/den
N-3	andrenergický blokátor	guanethidin
N-4	andrenergický blokátor	reserpin
N-5	andrenergický blokátor	terazosin	0,1-60 mg/den
N-6	andrenergický blokátor	prazosin	0,5-75 mg/den
N-7	andrenergický blokátor	polythiazid	0,25-10 mg/den
N-8	andrenergický stimulant	methyldopa	100-4000 mg/den
N-9	andrenergický stimulant	methyldopat	100-4000 mg/den
N-10	andrenergický stimulant	clonidin	0,1-2,5 mg/den .
N-ll	andrenergický stimulant	chlorthalidon	10-50 mg/den
N-12	andrenergický stimulant	guanfacin	0,25-5 mg/den
N-13	andrenergický stimulant	guanabenz	2-40 mg/den

N-14	andrenergický stimulant	trimethapan
N-15	alfa/beta andrenergický blokátor	carvedilol	6-25 mg 2x denně
N-16	alfa/beta andrenergický blokátor	labetalol	10-500 mg/den
N-17	beta andrenergický blokátor	propranolol	10-1000 mg/den
N-Í8	beta andrenergický blokátor	metoprolol	10-500 mg/den
N-19	alfa andrenergický blokátor	doxazosin	1-16 mg/den
N-20	alfa andrenergický blokátor	phentolamin
N-21	inhibitor enzymu konvertuj iciho angiotensin	quinapril	1-250 mg/den
N-22	inhibitor enzymu konvertuj íčího angiotensin	perindopril erbumin	1-25 mg/den
N-23	inhibitor enzymu konvertuj íčího angiotensin	ramipril	0,25-20 mg/den
N-24	inhibitor enzymu konvertuj ičího angiotensin	captopril	6-50 mg 2x nebo 3x denně
N-25	inhibitor enzymu konvertuj íčího	trandolapril	0,25-25 mg/den

	angiotensin
N-2 6	inhibitor enzymu konvertuj ícího angiotensin	fosinopril	2-80 mg/den
N-27	inhibitor enzymu konvertuj ícího angiotensin	lisinopril	1-80 mg/den
N-28	inhibitor enzymu konvertuj ícího angiotensin	moexipril	1-100 mg/den
N-29	inhibitor enzymu konvertuj ícího angiotensin	enalapril	2,5-40 mg/den
N-30	inhibitor enzymu konvertuj ícího angiotensin	benazepril	10-80 mg/den
N-31	antagonist receptoru angiotensinu II	candersartan cilexetil	2-32 mg/den
N-32	antagonist receptoru angiotensinu II	inbesartan
N-33	antagonist receptoru angiotensinu II	losartan	10-100 mg/den
N-34	antagonist receptoru angiotensinu II	valsartan	20-600 mg/den
N-35	blokátor draslíkového kanálku	verapamil	100-600 mg/den
N-36	blokátor draslíkového kanálku	diltiazem	150-500 mg/den

4«· « ·99 ·9 ♦ ·· · • ··

99999 » 999

99 9· • · 99

9 9 99

9 99 • ·· 99999

N-37	blokátor draslíkového kanálku	nifedipin	1-200 mg/den
N-38	blokátor draslíkového kanálku	nimodipin	5-500 mg/den
N-39	blokátor draslíkového kanálku	delodipin
N-40	blokátor draslíkového kanálku	nicardipin	1-20 mg/hod. i.v; 5-100 mg/den orálně
N-41	blokátor draslíkového kanálku	isardipin
N-42	blokátor draslíkového kanálku	amlodipin	2-10 mg/den
N-43	diuretický	hydrochlorothiazid	5-100 mg/den
N-44	diuretický	chlorothiazid	250-2000 mg 2x nebo 3x denně
N-45	diuretický	furosemid	5-1000 mg/den
N-4 6	diuretický	bumetanid
N-47	diuretický	ethakrynová kyselina	20-400 mg/den
N-48	diuretický	amilorid	1-20 mg/den
N-49	diuretický	triameteren
N-50	diuretický	spironolakton	5-1000 mg/den
N-51	diuretický	eplerenon	10-150 mg/den
N-52	vasodilatátor	hydralazin	5-300 mg/den
N-53	vasodilatátor	minoxidil	1-100 mg/den
N-54	vasodilatátor	diazoxid	1-3 mg/kg

N-55

vasodilatátor

nitrprussid

Další blokátory draslíkových kanálků, které jsou užitečné v kombinaci podle předkládaného vynálezu zahrnují, avšak bez omezení, ty, které jsou uvedeny v tabulce 5a.

Tabulka 5a.

Číslo sloučeniny	Název sloučeniny	Odkaz
N-56	bepridil	U.S. patent č. 3 962 238 nebo U.S. Reissue č. 30 577
N-57	clentiazem	U.S. patent č. 4 567 175
N-58	diltiazem	U.S. patent č. 3 562 257
N-59	fendilin	U.S. patent č. 3 262 977
N-60	gallopamil	U.S. patent č. 3 261 859
N-61	mibefradil	U.S. patent č. 4 808 605
N-62	prenylamin	U.S. patent č. 3 152 173
N-63	semotiadil	U.S. patent č. 4 786 635
N-64	terodilin	U.S. patent č. 3 371 014
N- 65	verapamil	U.S. patent č. 3 261 859
N-66	aranipin	U.S. patent č. 4 572 909
N-67	bamidipin	U.S. patent č. 4 220 649
N-68	benidipin	Evropská patentová přihláška č. 106 275
N-69	cilnidipin	U.S. patent č. 4 672 068
N-70	efonidipin	U.S. patent č. 4 885 284
N-71	elgodipin	U.S. patent č. 4 962 592
N-72	felodipin	U.S. patent č. 4 264 611
N-73	isradipin	U.S. patent č. 4 466 972
N-74	lacidipin	U.S. patent č. 4 801 599
N-75	lercanidipin	U.S. patent č. 4 705 797

• · · · · · · ···· * · · · · · · • v · e · · · ···> ··· ··· ·· ···

N-76	manidipin	U.S. patent č. 4 892 875
N-77	nicardipin	U.S. patent č. 3 985 758
N-78	nifendipin	U.S. patent č. 3 485 847
N-79	nilvadipin	U.S. patent č. 4 338 322
N-80	nimodipin	U.S. patent č. 3 799 934
N-81	nisoldipin	U.S. patent č. 4 154 839
N-82	nitrendipin	U.S. patent č. 3 799 934
N-83	cinnarizin	U.S. patent č. 2 882 271
N-84	flunarizin	U.S. patent č. 3 773 939
N-85	lidoflazin	U.S. patent č. 3 267 104
N-86	lomerizin	U.S. patent č. 4 663 325
N-87	bencyklan	Maďarský patent č. 151 865
N-88	etafenon	Německý patent č. 1 265 758
N-89	perhexilin	Britský patent č. 1 025 578

Další inhibitory ACE, které jsou užitečné v kombinaci podle předkládaného vynálezu zahrnují, avšak bez omezení, ty, které jsou uvedeny v tabulce 5b.

Tabulka 5b.

Číslo sloučeniny	Název sloučeniny	Odkaz
N-90	alacepril	U.S. patent č. 4 248 883
N-91	benazepril	U.S. patent č. 4 410 520
N-92	captopril	U.S. patent č. 4 046 889 a 4 105 776
N-93	ceronapril	U.S. patent č. 4 452 790
N-94	delapril	U.S. patent č. 4 385 051
N-95	enalapril	U.S. patent č. 4 374 829 *
N-96	fosinopril	U.S. patent č. 4 337 201
N-97	imadapril	U.S. patent č. 4 508 727
N-98	lizinopril	U.S. patent č. 4 555 502
N-99	moveltopril	Belgický patent č. 893 553

• ·

N-100	perindopril	U.S. patent č. 4 508 729
N101	quinapril	U.S. patent č. 4 344 949
N-102	ramipril	U.S. patent č. 4 587 258
N-103	spirapril	U.S. patent č. 4 470 972
N-104	temocapril	U.S. patent č. 4 699 905
N-105	trandolapril	U.S. patent č. 4 933 361

Další beta andrenergické blokátory, které jsou užitečné v kombinaci podle předkládaného vynálezu zahrnují, avšak bez omezení, ty, které jsou uvedeny v tabulce 5c.

Tabulka 5c.

Číslo sloučeniny	Název sloučeniny	Odkaz
N-106	acebutolol	U.S. patent č. 3 857 952
N-107	alprenolol	Holandská patentová přihláška č. 6 605 692
N-108	amosulalol	U.S. patent č. 4 217 305
N-109	arotinolol	U.S. patent č. 3 932 400
N-110	atenolol	U.S. patent č. 3 663 607 nebo 3 836 671
N-lll	befunolol	U.S. patent č. 3 853 923
N-112	betaxolol	U.S. patent č. 4 252 984
N-113	bevantolol	U.S. patent č. 3 857 981
N-114	bisoprolol	U.S. patent č. 4 171 370
N-115	bopindolol	U.S. patent č. 4 340 641
N-116	bucumolol	U.S. patent č. 3 663 570
N-117	bufetolol	U.S. patent č. 3 723 476
N-118	bufuralol	U.S. patent č. 3 929 836
N-119	bunitrolol	U.S. patent č. 3 940 489

		a 3 961 071
N-120	buprandolol	U.S. patent č. 3 309 406
N-121	butiridin hydrochlorid	Francouzský patent č. 1 390 056
N-122	butofilolol	U.S. patent č. 4 252 825
N-123	carazolol	U.S. patent č. 2 240 599
N-124	carteolol	U.S. patent č. 3 910 924
N-125	carvedilol	U.S. patent č. 4 503 067
N-126	celiprolol	U.S. patent č. 4 034 009
N-127	cetamolol	U.S. patent č. 4 059 622
N-128	cloranolol	U.S. patent č. 2 213 044
N-129	dilevalol	Clifton a kol., Journal of Medicinal Chemistry, 1982 25, 670
N-130	epanolol	Evropská patentová přihláška č 41 491
N-131	indenolol	U.S. patent č. 4 045 482
N-132	labetalol	U.S. patent č. 4 012 444
N-133	levobunolol	U.S. patent č. 4 '463 176
N-134	mepindolol	Seeman a kol., Helv. Chim. Acta, 1971, 54, 241
N-135	metipranolol	Československý patent č. 128 471
N-136	metoprolol	U.S. patent č. 3 873 600
N-137	moprolol	U.S. patent č. 3 501 769
N-138	nadolol	U.S. patent č. 3 935 267
N-139	nadoxolol	U.S. patent č. 3 819 702
N-140	nebivalol	U.S. patent č. 4 654 362
N-141	nipradilol	U.S. patent č. 4 394 382
N-142	oxprenolol	Britský patent č. 1 077 603
N-143	perbutolol	U.S. patent č. 3 551 493
N-144	pindolol	Švýcarské patenty č. 469 002

i

Í· · Μ ♦ · «9 • · · · » · · · ··· · » · ♦ ·

		a 472 404
N-145	practolol	U.S. patent č. 3 408 387
N-146	pronethalol	Britský patent č. 909 357
N-147	propranolol	U.S. patent č. 3 337 628 a 3 520 919
N-148	sotalol	Uloth a kol., Journal of Medicinal Chemistry, 1966, 9, 88
N-149	sufinalol	Německý patent č. 2 728 641
N-150	talindol	U.S. patent č. 3 935 259 a 4 038 313
N-151	tertatolol	U.S. patent č. 3 960 891
N-152	tilisolol	U.S. patent č. 4 129 565
N-153	timolol	U.S. patent č. 3 655 663
N-154	toliprolol	U.S. patent č. 3 432 545
N-155	xibenolol	U.S. patent č. 4 018 824

Další alfa andrenergické blokátory, které jsou užitečné v kombinaci podle předkládaného vynálezu zahrnují, avšak bez omezení, ty, které jsou uvedeny v tabulce 5d.

Tabulka 5d.

Číslo sloučeniny	Název sloučeniny	Odkaz
N-156	amosulalol	U.S. patent č. 4 217 307
N-157	arotinolol	U.S. patent č. 3 932 400
N-158	dapiprazol	U.S. patent č. 4 252 721
N-159	doxazosin	U.S. patent č. 4 188 390
N-160	fenspirld	U.S. patent č. 3 399 192
N-161	indoramin	U.S. patent č. 3 527 761
N-162	labetalol	U.S. patent č. 4 012 444
N-163	naftopidil	U.S. patent č. 3 997 666

• · · · • 99 • · « · · Φ »

N-164	nicergolin	U.S. patent č. 3 228 943
N-l 65	prazosin	U.S. patent č. 3 511 836
N-l 66	tamsulosin	U.S. patent č. 4 703 063
N-l 67	tolazolin	U.S. patent č. 2 161 938
N-168	trimazosin	U.S. patent č. 3 669 968
N-169	j ohimbin	Raymond-Hamet, J. Pharm. Chim., 19, 209 (1934)

Další anatgonisty receptoru angiotensinu II, které jsou užitečné v kombinaci podle předkládaného vynálezu zahrnují, avšak bez omezení, ty, které jsou uvedeny v tabulce 5e.

Tabulka 5e.

Číslo sloučeniny	Název sloučeniny	Odkaz
N-170	candesartan	U.S. patent č. 5 196 444
N-171	eprosartan	U.S. patent č. 5 185 351
N-172	irbesartan	U.S. patent č. 5 270 317
N-173	losartan	U.S. patent č. 5 138 069
N-174	valsartan	U.S. patent č. 5 399 578

Další vasodilatátory, které jsou užitečné v kombinaci podle předkládaného vynálezu zahrnují, avšak bez omezení, ty, které jsou uvedeny v tabulce 5f.

Tabulka 5f.

Číslo sloučeniny	Název sloučeniny	Odkaz
N-175	aluminum nikotinát	U.S. patent č. 2 970 082
N-176	amotrifen	U.S. patent č. 3 010 965
N-177	bamethan	Corrigan a kol., Journal of

· « · · · • 4*· 4 · ·· ·* · 4 4 · ·· • 4 · β · 4 4 44 · · 4 4 44

4> «44 444 444··

		the Američan Chemical Society, 1945, 67, 1894
N-178	bencyklan	Maďarský patent č. 151 865
N-180	bendazol	J. Chem. Soc., 1968, 2426
N-181	benfurodil hemisuccinát	U.S. patent č. 3 355 463
N-182	benziodaron	U.S. patent č. 3 012 042
N-183	betahistin	Walter a kol.; Journal of the Američan Chemical Society, 1941, 63, 2771
N-184	bradykinin	Hamburg a kol., Arch. Biochem. Biophys., 1958, 76, 252
N-1.85	brovinkamin	U.S. patent č. 4 146 643
N-186	bufeniod	U.S. patent č. 3 542 870
N-187	buflomedil	U.S. patent č. 3 895 030
N-188	butalamin	U.S. patent č. 3 338 899
N-189	cetiedil	Francouzský patent č. 1 460 571
N-190	chloracizin	Britský patent č. 740 932
N-191	chromonar	U.S. patent č. 3 282 938
N-192	ciklonikát	Německý patent č. 1 910 481
N-194	cinepazid	Belgický patent č. 730 345
N-195	cinnarizin	U.S. patent č. 2 882 271
N-197	citicolin	Kennedy a kol., Journal of the Američan Chemical Society, 1955, 77, 250 nebo připraveny jak popsal Kennedy, Journal of Biological Chemistry, 1956, 222, 185
N-198	clobenfural	Britský patent č. 1 160 925
N-199	clonitrát	viz Annalen, 1870, 155, 165
N-200	cloricromen	U.S. patent č. 4 452 811

• · * · · · · ♦ 9 ♦ · · « · · · * ♦ « · í 9 · · · · · ·

99· · · «»· • · · · · ··· ··· 9 ► ·· ·

N-201	cyklandelát	ÍJ.S. patent č. 2 707 193
N-203	diizopropylamin dichloroacetát	Neutralization of dichloroacetic acid wit diisopropylamine
N-204	diizopropylamin dichloroacetát	Britský patent č. 862 248
N-205	dilazep	U.S. patent č. 3 532 685
N-206	dipyridamol	Britský patent č. 807 826
N-207	droprenilamin	Německý patent č. 2 521 113
N-208	ebumamonin	Hermann a kol., Journal of the Američan Chemical Society, 1979, 101, 1540
N-209	efloxát	Britský patent č. 803 372 a 824 547
N-210	eledoisin	Britský patent č. 984 810
N-211	erythrityl tetranitrát	Může být připraven nitrací’ erythrytolu podle metod dobře známých odborníkům. Viz například Měrek Index
N-212	etafenon	Německý patent č. 1 265 758
N-213	fasudil	U.S. patent č. 4 678 783
N-214	fendilin	U.S. patent č. 3 262 977
N-215	fenoxedil	U.S. patent č. 3 818 021 nebo Německý patent č. 1 964 712
N-217	floredil	Německý patent č. 2 020 464
N-218	flunarizin	Německý patent č. 1 929 330 nebo Francouzský patent č. 2 014 487
N-219	flunarizin	U.S. patent č. 3 773 939
N-220	ganglefen	U.S.S.R. Č. patentu 115 905
N-221	hepronicát	U.S. patent č. 3 384 642
N-222	hexestrol	U.S. patent č. 2 357 985
N-223	hexobendin	U.S. patent č. 3 267 103

• a

N-224	ibudilast	U.S. patent č. 3 850 941
N-225	ifenprodil	U.S. patent č. 3 509 164
N-227	iloprost	U.S. patent č. 4 692 464
N-228	inositol niacinát	Badgett a kol., Journal of the Američan Chemical Society, 1947, 69, 2907
N-229	izoxsuprin	U.S. patent č. 3 056 836
N-230	itramintosylát	Švédský patent, č. 168 308
N-231	kallidin	Biochem. Biophys. Re& Commun., 1961, 6, 210
N-232	kallikrein	Německý patent č. 1 102 973
N-233	khellin	Baxter a kol., Journal of the Chemical Society, 1949, S 30
N-234	lidofiazin	U.S. patent č. 3 267 104
N-235	lomerizin	U.S. patent č. 4 663 325
N-236	mannitol hexanitrát	může být připraven nitraci mannitolu podle metod dobře známým odborníkům
N-237	medibazin	U.S. patent č. 3 119 826
N-238	moxisylyt	Německý patent č. 905 738
N-239	nafronyl	U.S. patent č. 3 334 096
N-241	nicametát	Blicke & Jenner, J. Am. Chem. Soc., 64, 1722 (1942)
N-243	nicergolin	U.S. patent č. 3 228 943
N-245	nicofuranosa	Švýcarský patent č. 366 523
N-2 4 6	nimodipin	U.S. patent č. 3 799 934
N-247	nitroglycerin	Sobrero, Ann., 64, 398 (1847)
N-248	nylidrin	U.S. patent č. 3 661 372 a 3 661 373
N-249	papaverin	Goldberg, Chem. Prod. Chem.

• · • ·

		News, 1954, 17, 371
N-250	pentaerythritol tetranitrát	U.S. patent č. 2 370 437
N-251	pentifyllin	Německý patent č. 860 217
N-253	pentoxifyllin	U.S. patent č. 3 422 107
N-254	pentrinitrol	Německý patent č. 638, 422-3
N-255	perhexillin	Britský patent č. 1 025 578
N-256	pimefyllin	U.S. patent č. 3 350 400
N-257	piribedil	U.S. patente. 3 299 067
N-258	prenylamin	U.S. patent č. 3 152 173
N-259	propatyl nitrát	Francouzský patent č. 1 103 113
N-260	prostaglandin El	může být připraven kterýmkoliv způsobem popsaným v Měrek Index, 12. vydáni, Budaved, Ed., New Jersey, 1996, str. 1353
N-261	suloctidil	Německý patent č. 2 334 404
N-262	tinofedrin	U.S. patent č. 3 563 997
N-263	tolazolin	U.S. patent č. 2 161 938
N-264	trapidil	Východoněmecký patent č. 55 956
N-265	tricromyl	U.S. patent č. 2 769 015
N-266	trimetazidin	U.S. patent č. 3 262 852
N-267	trolnitrát fosfát	Francouzský patent č. 984 523 nebo Německý patent č. 830 955
N-268	vincamin	U.S. patent č. 3 770 724
N-269	vinpocetin	U.S. patent č. 4 035 750
N-270	viquidil	U.S. patent č. 2 500 444
N-271	visnadin	U.S. patent č. 2 816 118 a 2 980 699 *
N-272	xanthinol niacinát	Německý patent č. 1 102 750 nebo Korbonits a kol., Acta. Pharm. Hung., 1968, 38, 98

♦ * · · : í : « » · « » · · ·

Další diuretika, která jsou užitečná v kombinaci podle předkládaného vynálezu zahrnuji, avšak bez omezení, ty, které jsou uvedeny v tabulce 5g.

Tabulka 5g.

Číslo sloučeniny	Název sloučeniny	Odkaz
N-273	acetazolamíd	U.S. patent č. 2 980 679
N-274	althiazid	Britský patent č. 902 658
N-275	amanozin	Rakouský patent č. 168 063
N-276	ambusid	U.S. patent č. 3 188 329
N-277	amilorid	Belgický patent č. 639 386
N-278	arbutin	Tschb&habln, Annalen, 1930, 479, 303
N-279	azosemid	U.S. patent č. 3 665 002
N-280	bendroflumethiazid	U.S. patent č. 3 265 573
N-281	benzthiazid	McManus a kol., 136th Am. Soc. Meeting (Atlantic City, září 1959). Abstract of Papers, str. 13-0
N-282	benzylhydrochlorothiazid	U.S. patent č. 3 108 097
N-283	bumetanid	U.S. patent č. 3 634 583
N-284	butazolamid	Britský patent č. 769 757
N-285	buthiazid	Britský patent č. 861 367 a 885 078
N-286	chloraminofenamid	U.S. patent č. 2 809 194, 2 965 655 a 2 965 656
N-287	chlorazanil	Rakouský patent č. 168 063
N-288	chlorothiazid	U.S. patent č. 2 809 194 a 2 937 169
N-289	chlorthalidon	U.S. patent č. 3 055 904

	*	9	• ·	•
• ·	• · *	• · f	* ♦ * «	• · •
• ·	♦	í	• · ·	•
	•	•	• ·	·· *
• · ·	·♦ ·	9· ·	• ·

• · ♦ « • 4

N-290	clofenamid	Olivier, Rec. Trav. Chim.,
1918, 37, 307
N-291	clopamid	U.S. patent č. 3 459 756
N-292	clorexolon	U.S. patent č. 3 183 243
N-293	cyklopetnthiazid	Belgický patent č. 587 225
N-294	cyklothiazid	Whitehead a kol., Journal of Organic Chemistry, 1961, 26, 2814
N-295	disulfamid	Britský patent č. 851 287
N-296	epithiazid	U.S. patent č. 3 009 911
N-297	ethacrynická kyselina	U.S. patent č. 3 255 241
N-298	ethiazid	Britský patent č. 861 367
N-299	ethoxolamid	Britský patent č. 795 174
N-300	etozolin	U.S. patent č. 3 072 653
N-301	fenquizon	U.S. patent č. 3 870 720
N-302	furosemid	U.S. patent č. 3 058 882
N-303	hydrakarbazin	Britský patent č. 856 409
N-304	hydrochlorothiazid	U.S. patent č. 3 164 588
N-305	hydroflumethiazid	U.S. patent č. 3 254 076
N-306	indapamid	U.S. patent č. 3 565 911
N-307	izosorbid	U.S. patent č. 3 160 641
N-308	mannitol	U.S. patent č. 2 642 462; nebo 2 749 371; nebo 2 759 024
N-309	inefrusid	U.S. patent č. 3 356 692
N-310	methazolamid	U.S. patent č. 2 783 241
N-311	methyclothiazid	Close a kol., Journal of the Američan Chemical Society, 1960, 82, 1132
N-312	meticran	Francouzský patent č. M2790 a 1 365 504
N-313	metochalcon	Freudenberg a kol., Ber., 1957, 90, 957

J ♦

• · • · ·· ♦

N-314	metolazon	U.S. patent č. 3 360 518
N-315	muzolimin	U.S. patent č. 4 018 890
N-316	paraflutizid	Belgický patent č. 620 829
N-317	perhexilin	Britský patent č. 1 025 578
N-318	piretanid	U.S. patent č. 4 010 273
N-319	polythiazid	U.S. patent č. 3 009 911
N-320	quinethazon	U.S. patent č. 2 976 289
N-321	teklothiazid	Cloše a kol., Journal of the Američan Chemical Society, 1960, 82, 1132
N-322	ticrynafen	U.S. patent č. 3 758 506
N-323	torasemid	U.S. patent č. 4 018 929
N-324	triamteren	U.S. patent č. 3 081 230
N-325	trichlormethiazid	deStevens a kol., Experientia, 1960, 16, 113
N-326	tripamid	Japonský patent č. 73 05, 585
N-327	urea	Může být dodána z komerčních zdrojů
N-328	xipamid	U.S. patent č. 3 567 777

Řada sloučenin podle předkládaného vynálezu může obsahovat alespoň dva asymetrické atomy uhlíku a proto vynález zahrnuje racemáty a stereoizomery, jako jsou diastereomery a enantiomery, jak v čisté formě, tak ve směsi. Tyto stereoizomery se mohou připravit za použití konvenčních technik, buď rekcí enantiomerních výchozích látek nebo separací izomerů sloučenin podle vynálezu.

Izomery mohou zahrnovat geometrické izomery, například izomery cis nebo trans přes dvojnou vazbu. Všechny tyto izomery jsou uvažovány jako sloučeniny podle předkládaného vynálezu.

··

Sloučeniny užitečné podle vynálezu také zahrnují tautomery.

Sloučeniny užitečné podle předkládaného vynálezu, jak jsou uvedeny dále, také zahrnují jejich soli, solváty a proléčiva.

Dávkování, formulace a způsoby podávání

Prostředky podle vynálezu mohou být podávány při profylaxi nebo léčbě hyperlipidemických chorob nebo chorobných stavů jakýmkoliv způsobem, výhodně orálně, tak se zajisti kontakt těchto sloučenin s místem jejich účinku v těle, například v ileu, plazmě nebo játrech savců, například člověka.

Pro profylaxi nebo léčbu stavů popsaných výše mohou být sloučeniny užitečné v prostředcích a způsobech předkládaného vynálezu jako takové. Farmaceuticky přijatelné soli jsou zvláště vhodné pro léčebnou aplikaci, diky jejich větší rozpustnosti ve vodě vzhledem ke sloučeninám z nichž vznikly. Takové soli musí obsahovat farmaceuticky přijatelný anion nebo kation. Vhodné farmaceuticky přijatelné soli sloučenin podle vynálezu vznikající přidáním kyseliny, pokud je to možné, zahrnují soli anorganických kyselin jako je kyselina chlorovodíková, bromovodíková, fosforečná, metafosforečná, dusičná, sulfonová, sírová a organických kyselin jako octová, benzensulfonová, benzoová, citrónová, etansulfonová, fumarová, glukonová, glykolová, isothionová,. mléčná, laktobionová, maleinová, jablečná, methansulfonová, jantarová, toluensulfonová, vinná a trifluoroctová. Chloridy jsou zvlášť výhodné pro léčebné účely. Vhodné farmaceuticky přijatelné bazické soli mohou zahrnovat amoniové soli, soli alkalických kovů jako sodné a draselné soli, soli kovů alkalických zemin jako hořečnaté a vápenaté soli.

Anionty podle vynálezu musí být samozřejmě také farmaceuticky přijatelné a jsou také vybrány z těch uvedených shora.

	9	9	9 ·
	• 9		• X	• ·
	9	•	* ♦
• 9	•	9	• 9 9
		•	• 9
• ·		·· ·	• ·	• 9

Sloučeniny podle vynálezu mohou být spolu s vhodným nosičem ve formě farmaceutické kompozice. Nosič musí být samozřejmě vhodný ve smyslu kompatibility s dalšími složkami kompozice a nesmí být škodlivý pro příjemce. Nosič může být pevný nebo tekutý nebo oboje a je s výhodou formulován se sloučeninou jako jednotková dávková kompozice například tableta, která obsahuje od 0,05 hmotn. % do 95 % aktivní látky. Další farmaceuticky aktivní substance mohou být také přítomny, včetně ostatních sloučenin podle vynálezu. Farmaceutické prostředky podle vynálezu mohou být připraveny jakoukoliv známou farmaceutickou technikou zahrnující v podstatě přimíchání komponent.

Tyto sloučeniny mohou být podávány jakýmkoliv běžným způsobem vhodným pro použití, ve spojení s farmaceutiky a to nejen jako individuální terapeutická sloučenina, ale i jako kombinace terapeutických sloučenin.

Množství sloučeniny, které je potřebné k dosažení požadovaného biologického účinku bude samozřejmě záležet na množství faktorů jako je výběr specifické sloučeniny, užití, pro jaké je zamýšlena, způsob podávání a klinický stav pacienta.

Celková denní dávka inhibitoru IBAT může být v rozsahu od okolo 0,01 do okolo 1000 mg/den, výhodně od okolo 0,1 mg do okolo 50 mg/den, výhodněji od okolo 1 do 10 mg/den.

Celková denní dávka derivátu kyseliny fibrové může být obecně v rozsahu od okolo 1000 do okolo 3000 mg/den v jedné nebo rozdělených dávkách. Gemfibrozil nebo clinofibrát jsou například často podávány odděleně v dávce 1200 mg/den. Clofibrát se často podává v dávce 2000 mg/den. Binifibrát se často podává v dávce 1800 mg/den.

Obecně celková denní dávka probucolu může být v rozsahu od okolo 250 do okolo 2000 mg/den, výhodně od okolo 500 do okolo

1500 mg/den, výhodněji od okolo 750 do okolo 1000 mg/den v jedné nebo několika dávkách.

• *9 •'*

9· •* • · ·

Celková dávka derivátu kyseliny nikotinové je v rozsahu od okolo 500 do okolo 10 000 mg/den, výhodně okolo 1000 do okolo 8000 mg/den a výhodněji od okolo 3000 do okolo 6000 mg/den v jedné nebo několika dávkách.

Celková denní vhodná dávka inhibitoru CETP může být obecně v rozsahu od okolo 0,01 do okolo 100 mg/kg tělesné hmotnosti za den, výhodně od okolo 0,5 do okolo 20 mg/kg tělesné hmotnosti za den.

Denní vhodná dávka stanolů je od okolo 1000 do okolo 4000 mg/kg tělesné hmotnosti/den, výhodně od okolo 500 do okolo 1500 mg/kg tělesné hmotnosti/den a výhodněji od okolo 150 do okolo 600 mg/kg tělesné hmotnosti/den.

Denní dávka pro antihypertenzivní činidla bude závislá na specifickém mechanizmu působení, chemické povaze antihypertenzivního činidla a na pacientovi. Obecné dávkové rozsahy pro specifická antihypertenzivní činidla jsou popsány v tabulce 5 nebo v sekci „Biologické zkoušky.

Denní vhodná dávka pro antagonisty absorpce cholesterolu je od okolo 0,001 do okolo 500 mg/kg tělesné hmotnosti/den, výhodně od okolo 0,05 do okolo 300 mg/kg tělesné hmotnosti/den, výhodněji od okolo 1 do okolo 200 mg/kg tělesné hmotnosti/den.

Pro inhibitory MTP bude vhodná denní dávka od okolo 0,001 do okolo 800 mg/kg tělesné hmotnosti/den, výhodně od okolo 0,01 do okolo 500 mg/kg tělesné hmotnosti/den, výhodněji od okolo 0,1 do okolo 300 mg/kg tělesné hmotnosti/den a ještě výhodněji od okolo 1 do okolo 200 mg/kg tělesné hmotnosti/den. ·

Denní dávka popsaná v předchozích odstavcích pro různé terapeutické sloučeniny může být podána pacientovi v jedné dávce nebo ve více přiměřených dávkách. Tyto menší dávky mohou být podávány 2 až 6-krát denně. Dávky mohou být ve formě nepřetržitého uvolňování účinné k získání požadovaných výsledků.

• ♦ · ♦ · ··· ·· ···

V případě farmaceuticky přijatelné soli, výše uvedená hmotnost se vztahuje k hmotnosti ekvivalentu kyseliny nebo ekvivalentu báze terapeutické sloučeniny odvozené ze soli.

Orální podávání kombinací podle vynálezu může zahrnovat formulace, dobře známé v oboru, k zajištěni prodloužení nepřetržitého podávání léku do gastrointestinálního traktu za využití řady mechanizmů. Mezi takové mechanizmy patří, ale bez omezení, uvolňování z dávkové formy závislé na pH založené na změně pH v tenkém střevě, pomalá erose tablety nebo kapsle, retence v žaludku založená na fyzikálních vlastnostech formulace, bioadheze dávkové formy na mukózní vrstvu intenstinálního traktu, enzymatické uvolňování aktivního léku z dávkové formy. Pro některé terapeutické sloučeniny užitečné podle předkládaného vynálezu (například inhibitory IBAT nebo inhibitory CETP) zamýšleným efektem je prodloužení periody o kterou je aktivní složka léku dopravena na místo účinku (například ileum) manipulací s lékovou formou. Enterosolventní formulace a enterosolventní formulace s řízeným uvolňováním spadají do rozsahu předkládaného vynálezu. Vhodné enterické povlaky jsou ftalát acetátcelulózy, ftalát polyvinylacetátu, ftalát hydroxypropylmetylcelulózy a aniontové polymery methakrylové kyseliny a metylester methakrylové kyseliny.

Kombinace podle předkládaného vynálezu se mohou dodávat orálně, jako pevné látky, polopevné látky nebo v kapalné formě. Pokud jsou v kapalné nebo polotuhé formě, mohou být kombinace podle předkládaného vynálezu například ve formě kapaliny, sirupu nebo v želatinových tobolkách. V jednom provedení, když se použije inhibitor CETP v kombinaci podle předkládaného vynálezu, může se použít inhibitor CETP ve formě kapaliny, sirupu nebo v želatinové kapsli.

Při intravenózním podání může být dávka inhibitoru IBAT například v rozsahu od okolo 0,1 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 1,0 mg/kg tělesné hmotnosti, výhodně od okolo 0,25 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 0,75 mg/kg tělesné hmotnosti, výhodněji od okolo 0,4 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 0,6 mg/kg tělesné hmotnosti.

Při intravenóznim podání může být dávka inhibitoru CETP například v rozsahu od okolo 0,003 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 1,0 mg/kg tělesné hmotnosti, výhodně od okolo 0,01 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 0,75 mg/kg tělesné hmotnosti, výhodněji od okolo 0,1 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 0,6 mg/kg tělesné hmotnosti.

Při intravenóznim podání může být dávka derivátu kyseliny fibrové například v rozsahu od okolo 100 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 2000 mg/kg tělesné hmotnosti, výhodně od okolo 300 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 1000 mg/kg tělesné hmotnosti, výhodněji od okolo 400 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 750 mg/kg tělesné hmotnosti.

Při intravenóznim podání může být dávka derivátu kyseliny nikotinové například v rozsahu od okolo 15.0 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 3000 mg/kg tělesné hmotnosti, výhodně od okolo 300 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 2000 mg/kg tělesné hmotnosti, výhodněji od okolo 500 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 1000 mg/kg tělesné hmotnosti.

Při intravenóznim podání může být dávka probucolu například v rozsahu od okolo 50 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 1500 mg/kg tělesné hmotnosti, výhodně od okolo 100 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 1000 mg/kg tělesné hmotnosti, výhodněji od okolo 200 mg/kg tělesné hmotnosti do okolo 750 mg/kg tělesné hmotnosti.

Dávka kterýchkoliv terapeutických sloučenin může být výhodně podávána jako infuze od okolo 10 ng/kg tělesné hmotnosti do okolo 100 ng/kg tělesné hmotnosti za minutu. Infuzní kapaliny vhodné pro tento účel mohou obsahovat například od okolo 0,1 ng do okolo 10 mg, výhodně od okolo 1 ng do okolo 10 mg na mililitr. Jednotková dávka může například obsahovat od okolo 1 mg do okolo 10 g sloučeniny podle • * • · • · • · ♦ «

	*	•	99
	• ·	9 ·	9 9	9 9
	9	•	• 4
• 9	9	•	9 9 ·
	t	♦	• 4
• ·	♦ ♦ ·	99 9	• ·	9 9

předkládaného vynálezu. Tak může ampule pro injekci obsahovat například od okolo 1 mg do okolo 100 mg.

Farmaceutické kompozice podle vynálezu zahrnují kompozice vhodné k orální, rektální, topické, bukální (například sublinguální) a parenterální (například subkutánní, intramuskulární, intradermální nebo intravenózní) aplikaci, nejvhodnější způsob podávání záleží na původu a vážnosti chorobného stavu, který je léčen a na konkrétní sloučenině, která je použita. Ve většině případů je výhodné orální podávání.

Farmaceutické kompozice vhodné pro orální podávání mohou být jako diskrétní jednotky jako kapsle, oplatky, pastilky nebo tablety, kde každá obsahuje určené množství minimálně jedné sloučeniny podle vynálezu; jako je prášek nebo granule; jako roztoky nebo suspenze ve vodném nebo nevodném rozpouštědle; nebo jako emulze oleje ve vodě nebo vody v oleji. Jak je naznačeno, tyto kompozice mohou být vyrobeny jakoukoliv vhodnou farmaceutickou metodou, obsahující krok smísení aktivní látky nebo látek a nosiče (ten může být tvořen jednou nebo více přídavnými látkami). Obecně, kompozice jsou připraveny jednotným a bezprostředním přimíšením aktivní sloučeniny k tekutému nebo jemné rozmělněnému pevnému nosiči nebo k oběma a poté, pokud je to nutné, vytvarováním produktu. Například tablety mohou být připraveny lisováním prášku nebo granulí sloučeniny, případně s jednou nebo více přídavnými látkami. Lisované tablety mohou být připraveny lisováním pomocí vhodného přístroje, kdy se sloučeniny ve volně tekoucí formě jako je prášek nebo granule případně smíchají s pojivém, mazadlem inertním rozpouštědlem a nebo povrchově aktivními či dispergujíčími látkami. Tvarované tablety mohou být připraveny tvarováním pomocí vhodného přístroje, práškové sloučeniny zvlhčené inertním tekutým rozpouštědlem.

Farmaceutické kompozice vhodné pro bukální (sublinguální) podávání zahrnují pastilky obsahující sloučeninu podle vynálezu v chuťovém základu, obvykle sacharóze a arabské gumě nebo tragantu a pastilky obsahující sloučeninu v inertní matrici jako je želatina a glycerin nebo sacharóza a arabská guma.

Farmaceutické kompozice vhodné pro parenterální podávání vhodně zahrnují sterilní vodné přípravky sloučeniny podle vynálezu. Tyto přídavky jsou výhodně podávány intravenózně, ačkoliv podání může být provedeno také jako subkutánní, intramuskulární nebo transdermální injekce. Takové přípravky mohou být pohodlně připraveny smísením sloučeniny s -vodou a přípravou roztoku který je sterilní a isotonický s krví. Injektovatelné kompozice podle vynálezu obecně obsahují od 0,1 do 5 % hmot./hmot, sloučenin popsaných v tomto dokumentu.

Farmaceutické kompozice vhodné pro rektální podávání jsou výhodně připravovány jako čípky s jednotkou dávky. Ty mohou být připraveny smísením sloučeniny podle vynálezu s jedním nebo více vhodnými pevnými nosiči, jako je například kakaové máslo, a tvarováním vznikající směsi.

Farmaceutické kompozice vhodné pro topickou aplikaci na kůži jsou výhodně ve formě mastí, krémů, mlék, past, gelů, sprejů, aerosolů nebo olejů. Použité nosiče mohou obsahovat vaselinu z ropy, lanolin, polyetylén glykoly, alkoholy a kombinace dvou nebo více těchto látek. Aktivní sloučenina je obecně přítomna v koncentraci od 0,1 do 50 % hmotn./hmotn., například od 0,5 do 2 hmotn. %.

Možná je také transdermální aplikace. Farmaceutické kompozice vhodné pro transdermální aplikaci mohou být přítomny ve formě jednotlivých náplastí přizpůsobených k zajištění těsného kontaktu s epidermem příjemce po delší dobu. Tyto náplasti vhodně obsahují sloučeninu podle vynálezu, případně pufrovanou v jejím vodném roztoku, rozpuštěnou nebo dispergovanou v lepidle nebo dispergovanou v polymeru. Vhodná koncentrace aktivní sloučeniny je v rozmezí od okolo 1 % do okolo 35 % hmotnost/hmotnost, výhodně od okolo 3 do 15 %.

Jako zvláštní možnost zůstává elektrotransport sloučeniny nebo iontoforéza, například jak je popsáno v Pharmaceutical Research, 3(6), 319 (1996).

Ve všech případech množství aktivní složky, která může být kombinována s nosiči za vzniku jednotkové dávkové formy k podávání, bude různé v závislosti na léčeném hostiteli a zvláště způsobu podávání.

Pevné dávkové formy pro orální podávání zahrnující kapsle, tablety, dražé, prášek a granule zmíněné výše obsahují jednu nebo více sloučenin podle vynálezu smíchanou s minimálně jedním inertním rozpouštědlem jako je sacharóza, laktóza nebo škrob. Tyto dávkové formy mohu také obsahovat, jak je v praxi normální, přídavné substance jiné než inertní ředidla, například lubrikační činidla jako je stearát hořečnatý nebo solubilizační činidla, jako jsou cyklodextriny. V případě kapslí, tablet, prášků, granulí, želatinových kapslí a dražé, dávková forma může také obsahovat pufrační činidla. Tablety a dražé mohou být navíc připraveny s enterickými povlaky.

Tekuté dávkové formy určené pro orální podání mohou zahrnovat farmaceuticky přijatelné emulze, roztoky, suspenze, sirupy a elixíry obsahující inertní rozpouštědla běžně používaná v oboru, jako je voda. Tyto kompozice mohou obsahovat také adjuvanty, jako zvlhčující činidla, emulgátory a suspenzní činidla, také sladidla, ochucovadla a parfémy.

Injektovatelné přípravky, například sterilní injektovatelné vodné nebo olej ovité suspenze, mohou být formulovány podle znalostí v oboru s využitím vhodných dispergujících nebo přídavných činidel a suspendačních činidel. Sterilní injektovatelné preparáty mohou být sterilní injektovatelné roztoky nebo suspenze v netoxických a parenterálně přijatelných rozpouštědlech nebo ředidlech, například roztok v 1,3-butandiolu. Mezi přijatelné vehikuly a rozpouštědla patří voda, Ringerův roztok a izotonický roztok chloridu sodného. Navíc, sterilní, stálé oleje jsou běžně • · ·,,· ,ϊ· ··· ··» ·· ··· využívány jako rozpouštědla nebo suspenzní médium. Pro tyto účely může být použit jakýkoliv stálý nedráždivý olej, včetně mono - nebo diglyceridů. Využití při přípravě injekcí nalézají také mastné kýseliny jako kyselina olejová.

Farmaceuticky přijatelné nosiče zahrnují všechny zmíněné látky a podobně.

V kombinované terapii může být podávání dvou nebo více terapeutických činidel užitečných podle vynálezu postupné v jednotlivých formulacích nebo může být podáváno simultáně, podáváním jednotlivých nebo oddělených formulací. Podávání může být prováděno orálně, intravenózně, intramuskulárně, nebo subkutánně injekcí. Formulace může být ve formě bolusu nebo ve formě vodného nebo nevodného isotonického sterilního injekčního roztoku nebo suspenze. Tyto roztoky a suspenze mohou být připraveny ze sterilního prášku nebo granulí obsahujících jeden nebo více farmaceuticky přijatelných nosičů nebo ředidel nebo pojidlo jako je želatina nebo hydroxypropylmethylce.lulóza, společně s jedním nebo více lubrikačními, konzervačními, povrchově aktivními nebo dispergujícími činidly.

Farmaceutická kompozice pro orální aplikaci může být ve formě například tablet, kapslí, suspenzí nebo tekutin. Kapsle, tablety atd. mohou být připraveny konvenčními metodami dobře známými v oboru. Farmaceutické kompozice jsou výhodně vyráběny ve formě dávkových jednotek obsahujících specifické množství aktivní složky nebo složek. Příklady dávkových jednotek jsou tablety nebo kapsle. Ty mohou s výhodou obsahovat jednu nebo více terapeutických sloučenin v množství uvedeném shora.

V případě inhibitoru IBAT, dávka se může pohybovat v rozmezí ód okolo 0,01 mg/den do okolo 500 mg/den nebo i jinak, záleží na specifickém inhibitoru, jak je v oboru známo.

Aktivní složky mohou být také podávány injekcí, jako kompozice, kde jako vhodný nosič je použit například chlorid sodný, dextróza nebo voda. Vhodná denní dávka všech aktivních

··· ··· “4 terapeutických sloučenin je taková, aby způsobila stejnou hladinu v krevním séru jako při orální aplikaci, jak je popsáno shora.

Terapeutické sloučeniny mohou být také podávány jakoukoliv kombinací aplikačních cest jako orálně/orálně, orálně/parenterálně nebo parenterálně/parenterálně.

Farmaceutické kompozice pro použití v léčebných metodách podle vynálezu mohou být podávány orálně nebo intravenózně. Výhodné je při kombinované terapii orální podávání. Dávkování pro orální podávání může být v režimu jedné denní dávky nebo jedné dávky za několik dnů nebo násobných rozdělených dávek během jednoho dne. Terapeutické sloučeniny, které jsou podstatou kombinované terapie mohou být podávány simultánně, nejen v kombinované dávkové formě, ale i ve formě jednotlivých dávkových formách zamýšlených hlavně pro simultánní orální podávání. Terapeutické sloučeniny, které jsou podstatou kombinované terapie mohou být podávány také následně, s každou terapeutickou sloučeninou podávanou-v režimu nazvaném užívání ve dvou krocích. Režim podávání se může nazývat s následným podáváním, kdy jsou terapeutické sloučeniny užívány odděleně jako samostatné aktivní látky. Časový úsek mezi násobnými užívacími kroky může být v rozmezí několika minut do několika hodin., v závislosti na vlastnostech každé terapeutické sloučeniny, jako je síla, rozpustnost, biologická dostupnost, plasmatický poločas a kinetický profil terapeutické sloučeniny, účinek požité potravy a věk a stav pacienta. Optimální dávkový interval může být také ovlivněn změnou koncentrace cílové molekuly během dne. Terapeutické sloučeniny kombinované terapie, pokud jsou podávány simultánně, hlavně simultánně nebo následně, mohou zahrnovat režimy podávání jedné terapeutické sloučeniny orální cestou a druhé terapeutické sloučeniny intravenózně. Pokud jsou terapeutické sloučeniny kombinované terapie podávány orálně nebo intravenózně, odděleně nebo společně, každá taková

9» • 9 <

9

9

sloučenina bude obsažena ve vhodné farmaceutické formulaci farmaceuticky přijatelných excipientů, ředidel nebo jiných formulačních komponent. Příklady vhodných farmaceuticky přijatelných formulací obsahujících terapeutické sloučeniny pro orální podávání jsou uvedeny shora.

Léčebné režimy

Dávkovači režimy sloučenin a nebo kompozic podle vynálezu pro prevenci, ulehčení nebo zlepšení chorobných stavů s hyperlipidémií jako část choroby, například ateroskleróza, nebo pro zabránění nebo léčbu vysoké hladiny plazmového nebo krevního cholesterolu sloučeninami a/nebo kompozicemi podle vynálezu jsou vybrány s ohlédnutím na řadu faktorů. Ty zahrnují typ, věk, hmotnost, pohlaví, životosprávu a lékařský stav pacienta, stupeň choroby, cestu podávání, farmakologická hlediska jako je aktivita, účinnost, farmakokinetika a toxikologický profil konkrétní použité sloučeniny, jestli je využít systém dodání léku a zde je sloučenina podávána jako část kombinace léků. Tak se použitý dávkovači režim může velice lišit od výhodných dávkovačích režimů uvedených shora.

Počáteční léčba pacienta s hyperlipidémií může začít režimem uvedeným výše. Léčba by měla obecně trvat jak je nutné po dobu několika týdnů až měsíců nebo roků dokud není hyperlipidemický stav kontrolován nebo eliminován. Pacienti léčení sloučeninami nebo kompozicemi popsanými v tomto dokumentu mohou být, za účelem určeni účinnosti kombinované terapie, rutinně sledováni například měřením hladin sérového LDL a celkového cholesterolu jakoukoliv metodou známou v oboru. Kontinuální analýza takových dat dovoluje modifikaci léčebného režimu v průběhu terapie tak, aby bylo podáváno účinné množství každého typu inhibitoru v jakékoliv době a aby byla správně určena délka trvání léčby. V tomto případě, léčebný režim či dávkovači rozvrh může být rozumně modifikován • · • · • · • · ··

	•	•		··	•
··	··	··		•	··
	•	•	•	•	•
• ·	•	•	• ·	•	•
	•	•	•	•	•
···	···	···		9·

v průběhu terapie tak, aby bylo podáváno minimální množství terapeutických sloučenin, které společně vykáží uspokojující účinnost, a aby toto podávání trvalo pouze dobu nezbytně nutnou k léčbě hyperlipidemických stavů.

Potenciální výhodou kombinační terapie popsané v tomto dokumentu může být snížení množství jakékoliv individuální terapeutické sloučeniny nebo všech terapeutických sloučenin, účinných v léčbě hyperlipidemických stavů jako je ateroskleróza a hypercholesterolémie.

Jedno z několika provedení předkládaného vynálezu zahrnuje kombinační terapii, zahrnující použití prvního množství inhibitoru IBAT a druhého množství dalšího kardiovaskulárního terapeuticky účinného léčiva k profylaxi a léčbě hyperlipidemie nebo aterosklerózy, kde množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství a antiateroskleroticky účinné množství uvedených sloučenin. Například jedno z mnoha provedení vynálezu je kombinační terapie zahrnující terapeutické dávky inhibitoru IBAT a inhibitoru CETP. Výhodné provedení podle předkládaného vynálezu zahrnuje kombinační terapii zahrnující terapeutické dávky benzothiepinového inhibitoru IBAT a inhibitoru CETP.

V další provedení předkládaný vynález zahrnuje kombinační terapii, zahrnující první množství inhibitoru IBAT a druhé množství derivátu kyseliny fibrové, kde první a druhé množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství uvedených sloučenin. Ještě provedení zahrnuje kombinační terapii zahrnující první množství inhibitoru IBAT a druhé množství derivátu kyseliny nikotinové, kde první a druhé množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství uvedených sloučenin. Inhibitor IBAT v těchto provedeních tohoto odstavce je výhodně benzothiepinový· inhibitor IBAT.

• · * · · · ♦ ···· · · ♦ · ♦ · ·

Alternativně provedeni podle předkládaného vynálezu poskytuje kombinační terapii, zahrnující první množství inhibitoru CETP a druhé množství kardiovaskulárního terapeutika, kde první a druhé množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství uvedených sloučenin. Výhodné provedení poskytuje kombinační terapii zahrnující první množství inhibitoru CETP a druhé množství derivátu kyseliny fibrové, kde první a druhé množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství uvedených sloučenin. Vynález také zahrnuje terapeutický prostředek obsahující první množství inhibitoru CETP a druhé množství derivátu kyseliny fibrové, kde první a druhé množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství uvedených sloučenin.

Inhibitor CETP v těchto provedeních tohoto odstavce je výhodně sloučenina vzorce C-l.

V dalším z mnoha provedení předkládaný vynález poskytuje kombinaci, zahrnující terapeutické dávky inhibitoru IBAT a fytosterolu. Ve výhodném provedení předkládaný vynález poskytuje kombinační terapii, zahrnující terapeutické dávky benzothiepinového inhibitoru IBAT a fytosterolu. V dalším výhodném provedení předkládaný vynález poskytuje kombinační terapii zahrnující terapeutické dávky inhibitoru IBAT a stanolu.

V dalším z mnoha provedení předkládaný vynález poskytuje kombinaci, zahrnující první množství inhibitoru IBAT a druhé množství derivátu kyseliny fibrové, kde první a druhé množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství uvedených sloučenin. Ve výhodném provedení je inhibitor IBAT benzothiepinový inhibitor IBAT. V dalším výhodném provedení je inhibitor IBAT benzothiazepinový inhibitor IBAT. Ještě v dalším výhodném provedení je inhibitor IBAT naftalenový inhibitor IBAT.

V dalším z mnoha provedení předkládaný vynález poskytuje kombinaci, zahrnující terapeutické dávky inhibitoru IBAT a antagonistu absorpce cholesterolu. Ve výhodném provedení předkládaný vynález poskytuje kombinační terapii, zahrnující terapeutické dávky benzothiepinového inhibitoru IBAT a antagonistu absorpce cholesterolu.

Provedení podle předkládaného vynálezu může zahrnovat kombinační terapii užívající dvě nebo více sloučenin popsaných v tomto dokumentu. Kombinační terapie může zahrnovat dvě nebo více terapeutických sloučenin z různých chemických tříd, například inhibitor IBAT může být terapeuticky kombinován s inhibitorem CETP. Terapeutické kombinace mohou zahrnovat více než dvě terapeutické sloučeniny. Například dvě nebo více terapeutických sloučenin ze stejné chemické třídy může zahrnovat terapii, například kombinační terapii, zahrnující dva nebo více inhibitorů IBAT nebo dva nebo více inhibitorů CETP. V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje kombinaci, zahrnující dva nebo více inhibitorů IBAT nebo dva nebo více stanolů.

Další provedení předkládaného vynálezu zahrnuje použití kterékoliv kardiovaskulární kombinační terapie popsané v tomto dokumentu pro profylaxi nebo léčbu hypercholesterolemie nebo aterosklerózy.

Následující příklady jsou uvedeny pouze pro ilustraci a v žádném případě neomezují rozsah předkládaného vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Tabulka 6 ilustruje příklady některých z mnoha kombinací předkládaného vynálezu, kde kombinace zahrnuje první množství inhibitoru IBAT a druhé množství inhibitoru CETP, kde množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství uvedených sloučenin.

Tabulka 6

Example Number	Component 1	Component 2
1	B-l	C-l
2	. B-l	C-2
3	B-l	C-3
4	B-l	C-4
5	B-l	C-5
6	B-l	C-6
7	B-l	C-7
8	B-l	C-8
9	B-l	C-9
10	B-l	C-10
11	B-l	C-ll
12	B-l	C-12
13	B-l	C-13
14	B-l	C-14
15	B-l	C-15
16	B-l	C-l, 6
17	B-l	C-17

• ·:

• ·

18	B-l	C-18
19	B-l	C-19
20	B-l	C-20
21	B-2	C-l
22	B-2	C-2
23	B-2	C-3
24	B-2	C-4
25	B-2	C-5
26	B-2	C-6
27	B-2	C-7
28	B-2	C-8
29	B-2	C-9
30	B-2	C-10
31	B-2	C-ll
32	B-2	C-12
33	B-2	C-13
34	B-2	C-14
35	B-2	C-15
36	B-2	C-16
37	B-2	C-17
38	B-2	C-18
39	B-2	C-19
40	B-2	C-20
41	B-3	C-l
42	B-3	C-2
43	B-3	C-3
44	B-3	C-4
45	B-3	C-5
46	B-3	C-6
47	B-3	C-7
48	B-3	C-8
49	B-3	C-9
50	B-3	C-10
51	B-3	C-ll
52	B-3	C-12
53	B-3	C-13
54	B-3	C-14
55	B-3	C-15
56	B-3	C-16
57	B-3	C-17
58	B-3	C-18

59	Β-3	C-19
βο	Β-3	C-20
61	Β-4	C-1
62	Β-4	C-2
63	Β-4	C-3
64	Β-4	C-4
65	Β-4	C-5
66	Β-4	C-6
67	Β-4	C-7
68	Β-4	C-8
69	Β-4	C-9 '
70	Β-4	C-10
71	Β-4	C-11
72	• Β-4	C-12.
73	Β-4	C-13
74	Β-4	C-14
75	Β-4	C-15
76	Β-4	C-16
77	Β-4	C-17
78	Β-4	C-18
79	Β-4	C-19
80	Β-4	C-20
81	Β-5	C-1
82	Β-5	C-2
83	Β-5	C-3
84	Β-5	C-4
85	Β-5	C-5
86	Β-5	C-6
87	Β-5	C-7
88	Β-5	C-8
89	Β-5	C-9
90	Β-5	C-10
91	Β-5	C-11
92	Β-5	C-12
93	Β-5	C-13
94	Β-5	C-14
95	Β-5	C-15
96	Β-5	C-16
97	Β-5	C-17
98	Β-5	C-18
99	Β-5	C-19

100	B-5	C-20
101	B-6	C-l
102	B-6	C-2
103	B-6	C-3
104	B-6	C-4
105	B-6	C-5
106	B-6	C-6
107	B-6	C-7
108	B-6	C-8
109	B-6	C-9
- 110	B-6	C-10
111	B-6	C-ll
112	B-6	C-12
113	. B-6	C-13
114	B-6	C-14
115	B-6	C-15
116	B-6	C-16
117	B-6	C-17
118	B-6	C-18
119	B-6	C-19
120	B-6	C-20
121	B-7	C-l
122	' B-7 ·	C-2
123	B-7	C-3
124	B-7	C-4
125	B-7	C-5
126	B-7	C-6
127	B-7	C-7
128	B-7	C-8
129	B-7	C-9
130	B-7	C-10
131	B-7	C-ll
132	B-7	C-12
133	B-7	C-13
ι· 134	B-7	C-14
135	B-7	C-15
136	B-7	C-16
137	B-7	C-17
138	B-7	C-18
139	B-7	C-19
140	B-7	C-20

• · ··· · · · ♦ ··

141	B-8	C-l
142	B-8	C-2
143	B-8	C-3
144	B-8	C-4
145	B-8	C-5
146	B-8	C-6
147	B-8	C-7
148	B-8	C-8
149	B-8	C-9
150	B-8	C-10
151	B-8	C-ll
152	B-8 '	C-.12
153	B-8	C-13
154	B-8	C-14
155	B-8	C-15
156	B-8	C-16
157	B-8	C-17
158	B-8	C-18
159	B-8	C-19
160	B-8	C-20
161	B-9	C-l
162	B-9	C-2
163	B-9	C-3
164	B-9	C-4
165	B-9	C-5
166	B-9	C-6
167	B-9	C-7
168	B-9	C-8
169	B-9	C-9
170	B-9	C-10
171	B-9	C-ll
172	B-9	C-12
173	B-9	C-13
174	B-9	C-14
175	B-9	C-15
176	B-9	C-16
177	B-9	C-17
178	B-9	C-18
179	B-9	C-19
180	B-9	C-20
181	B-10	C-l

182	B-10	C-2
183	B-10	<2-3
184	B-10	C-4
185	B-10	C-5
186	B-10	C-6
187	B-10	C-7
188	B-10	C-8
189	B-10	C-9
190	B-10	C-10’
191	B-10	C-ll
192	B-10	C-12
193	B-10	C-13
194 .	B-10	C-14
195	B-10	C-15
196	B-10	C-16
197	B-10	C-17
198	B-10	C-18
199	B-10	C-19
200	B-10	C-20
201	B-ll	C-l
202	B-ll	C-2
203	B-ll -	C-3
204	B-ll	C-4
205	B-ll	C-5
206	B-ll	C-6
207	B-ll	C-7
208	B-ll	C-8
209	B-ll	C-9
210	B-ll	C-10
211	B-ll	C-ll
212	B-ll	C-12
213	B-ll	C-13
214	B-ll	C-14
215	B-ll	C-15
216	B-ll	C-16
217	B-ll	C-17
218	B-ll	C-18
219	B-ll	C-19
220	B-ll	C-20
221	B-12	C-l
222	B-12	C-2

i 97

223	B-12	C-3
224	B-12	C-4
225	B-12	C-5
226	B-12	C-6
227	B-12	C-7
228	B-12	C-8
229	B-12	C-9
230	B-12	C-10
231	B-12	C-ll
232	B-12	C-12
233	B-12	C-13
234	B-12	C-14
235	B-12	C-15
236	B-12	C-16
237	B-12	C-17
238	B-12	C-18
239	B-12	C-19
240	B-12	C-20
241	B-13	C-l
242	B-13	C-2
243	B-13	C-3
244	B-13	C-4
245	B-13	C-5 /
246	B-13	C-6
247	B-13	C-7
248	B-13	C-8
249	B-13	C-9
250	B-13	C-10
251	B-13	C-ll
252	B-13	C-12
253	B-13	C-13
254	B-13	C-14
255	B-13	C-15
256	B-13	C-16
257	B-13	C-17
258	B-13	C-18
259	B-13	C-19
260	B-13	C-20
261	B-14	C-l
262	B-14	C-2
263	B-14	C-3

• ·

264	Β-14	C-4
265	Β-14	C-5
266	Β-14	C-6
267	Β-14	C-7
268	Β-14	C-8
269	Β-14	C-9
270	Β-14	C-10
271	Β-14	C-11
272	Β-14	C-12
273	Β-14	C-13
274	Β-14	C-14
275	Β-14	C-15
276	Β-14	C-16
277	Β-14	C-17
278	Β-14	C-18
279	Β-14	C-19
280	Β-14	C-20
281	Β-15	C-1
282	Β-15	C-2
283	Β-15	C-3
284	Β-15	C-4
285	Β-15	C-5
286 ..,	Β-15	C-6
287	Β-15	C-7
288	Β-15	C-8
289	Β-15	C-9
290	Β-15	C-10
291	Β-15	C-11
292	Β-15	C-12
293	Β-15	C-13
294	Β-15	C-14
295	Β-15	C-15
296	Β-15	C-16
297	Β-15	C-17
298	Β-15	C-18
299	Β-15	C-19
300	Β-15	C-20
301	Β-16	C-1
302	Β-16	C-2
303	Β-16	C-3
304	Β-16	C-4

• ·

305	B-16	C-5
306	B-16	C-6
307	B-16	C-7
308	B-16	C-8
309	B-16	C-9
310	B-16	C-10
311	B-16	C-ll
312	B-16	C-12
313	B-16	C-13
314	B-16	C-14
315	B-16	C-15
316	B-16	C-16
317 ·	B-16	C-17
318	B-16	C-18
319	B-16	C-19
320	B-16	C-20
321	B-17	C-l
322	B-17	C-2
323	B-17	C-3
324	B-17	C-4
325	B-17	C-5
326	B-17	C-6
327	B-17	C-7
328	B-17	C-8
329	B-17	C-9
330	B-17	C-10
331	B-17	C-ll
332	B-17	C-12
333	B-17	C-13
334	B-17	C-14
335	B-17	C-15
336	B-17	C-16
337	B-17	C-17
338	B-17	C-18
339	B-17	C-19
340	B-17	C-20
341	B-18	C-l
342	B-18	C-2
343	B-18	C-3
344	B-18	C-4
345	B-18	C-5

346	B-18	C-6
347	B-18	C-7
348	B-18	C-8
349	B-18	C-9
350	B-18	C-10
351	B-18	C-ll
352	B-18	C-12
353	B-18	C-13
354	B-18	C-14
355	B-18	C-15
356	B-18	C-16
357	B-18	C-17
358	B-18	C-18
359	B-18	C-19
360	B-18	C-20
361	B-19	C-l
362	B-19	C-2
363	B-19	C-3
364	B-19	C-4
365	B-19	C-5
366	B-19	C-6
367	B-19	C-7
368	. B-19 .	C-8
369	B-19	C-9
370	B-19	C-10
371	B-19	C-ll .
372	B-19	C-12
373	B-19	C-13
374	B-19	C-14
375	B-19	C-15
376	B-19	C-16
377	B-19	C-17
378	B-19	C-18
379	B-19	C-19
380	B-19	C-20
381	B-20	C-l
382	B-20	C-2
383	B-20	C-3
384	B-20	C-4
385	B-20	C-5
386	B-20	C-6

101 • ·

3S7	B-20	C-7
388	B-20	C-8
389	B-20	C-9
390	B-20	C-10
391	B-20	C-ll
392	B-20	C-12
393	B-20	C-13
3 94	B-20	C-14
395	B-20	C-15
396	B-20	C-16
397	B-20	C-17
398	B-20	C-18
399	B-20	C-19
400	B-20	C-20

Tabulka 8 ilustruje příklady kombinací podle vynálezu, kde kombinace zahrnuje první množství inhibitoru IBAT a druhé množství derivátu kyseliny fibrové, kde první a druhé množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství uvedených sloučenin.

Tabulka 8.

Číslo příkladu	Sožka 1	Složka 2
601	B-l	clofibrát
602	B-2	clofibrát
603	B-3	clofibrát
604	B-4	clofibrát
605	B-5	clofibrát
606	B-6	clofibrát
607	B-7	clofibrát
608	B-8	clofibrát
609	B-9	clofibrát
610	B-10	clofibrát
611	B-ll	clofibrát

• 4

102

612	B-12	clofibrát
613	B-13	clofibrát
614	B-14	clofibrát
615	B-15	clofibrát
616	B-16	clofibrát
617	B-17	clofibrát
618	B-18	clofibrát
619	B-19	clofibrát
620	B-20	clofibrát
621	B-l	fenofibrát
622	B-2	fenofibrát
623	B-3	fenofibrát
624	B-4	fenofibrát
625	B-5	fenofibrát
626	B-6	fenofibrát
627	B-7	fenofibrát
628	B-8	fenofibrát
629	B-9	fenofibrát
630	B-10	fenofibrát
631	B-ll	fenofibrát
632	B-12	fenofibrát
633	B-13	fenofibrát
634	B-14	fenofibrát
635	B-15	fenofibrát
636	B-16	fenofibrát
637	B-17	fenofibrát
638	B-18	fenofibrát
639	B-19	fenofibrát
640	B-20	fenofibrát
641	B-l	ciprofibrát
642	B-2	ciprofibrát
643	B-3	ciprofibrát
644	B-4	ciprofibrát

103

645	B-5	ciprofibrát
646	B-6	ciprofibrát
647	B-7	ciprofibrát
648	B-8	ciprofibrát
649	B-9	ciprofibrát
650	B-10	ciprofibrát
651	B-ll	ciprofibrát
652	B-12	ciprofibrát
653	B-13	ciprofibrát
654	B-14	ciprofibrát
655	B-15	ciprofibrát
656	B-16	ciprofibrát
657	B-17	ciprofibrát
658	B-18	ciprofibrát
659	B-19	ciprofibrát
660	B-20	ciprofibrát
661	B-l	bezafibrát
662	B-2	bezafibrát
663	B-3	bezafibrát
664	B-4	bezafibrát
665	B-5	bezafibrát
666	B-6	bezafibrát
667	B-7	bezafibrát
668	B-8	bezafibrát
669	B-9	bezafibrát
670	B-10	bezafibrát
671	B-ll	bezafibrát
672	B-12	bezafibrát
673	B-13	bezafibrát
674	B-14	bezafibrát
675	B-15	bezafibrát
676	B-16	bezafibrát
677	B-17	bezafibrát

104

678	B-18	bezafibrát
679	B-19	bezafibrát
680	B-20	bezafibrát
681	B-l	gemfibrozil
682	B-2	gemfibrozil
683	B-3	gemfibrozil
684	B-4	gemfibrozil
685	B-5	gemfibrozil
686	B-6	gemfibrozil
687	B-7	gemfibroz.il
688	B-8	gemfibrozil
689	B-9	gemfibrozil
690	B-10	gemfibrozil
691	B-ll	gemfibrozil
692	B-12	gemfibrozil
693	B-13	gemfibrozil
694	B-14	gemfibrozil
695	B-15	gemfibrozil
696	B-16	gemfibrozil
697	B-17	gemfibrozil
698	B-18	gemfibrozil
699	B-19	gemfibrozil
700	B-20	gemfibrozil

Tabulka 10 ilustruje příklady kombinací podle vynálezu, kde kombinace zahrnuje první množství inhibitoru IBAT a druhé množství derivátu kyseliny nikotinové, kde první a druhé množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství uvedených sloučenin.

105

Tabulka 10.

Číslo příkladu	Složka 1	Složka 2
901	B-l	nikotinová kyselina (niacin)
902	B-2	nikotinová kyselina (niacin)
903	B-3	nikotinová kyselina (niacin)
904	B-4	nikotinová kyselina (niacin)
905	B-5	nikotinová kyselina (niacin)
906	B-6	nikotinová kyselina (niacin)
907	B-7	nikotinová kyselina (niacin)
908	B-8	nikotinová kyselina (niacin)
909	B-9	nikotinová kyselina (niacin)
910	B-10	nikotinová kyselina (niacin)
911	B-ll	nikotinová kyselina (niacin)
912	B-12	nikotinová kyselina (niacin)
913	B-13	nikotinová kyselina (niacin)
914	B-14	nikotinová kyselina (niacin)
915	B-15	nikotinová kyselina (niacin)
916	B-16	nikotinová kyselina (niacin)
917	B-17	nikotinová kyselina (niacin)
918	B-18	nikotinová kyselina (niacin)
919	B-19	nikotinová kyselina (niacin)
920	B-20	nikotinová kyselina (niacin)
921	B-l	niceritrol
922	B-2	niceritrol
923	B-3	niceritrol
924	B-4 '	niceritrol
925	B-5	niceritrol
926	B-6	niceritrol
927	B-7	niceritrol
928	B-8	niceritrol
929	B-9	niceritrol

106

930	B-10	niceritrol
931	B-ll	niceritrol
932	B-12	niceritrol
933	B-13	niceritrol
934	B-14	niceritrol
935	B-15	niceritrol
936	B-16	niceritrol
937	B-17	niceritrol
938	B-18	niceritrol
939	B-19	niceritrol
940	B-20	niceritrol
941	B-l	acipimox
942	B-2	acipimox
943	B-3	acipimox
944	B-4	acipimox
945	B-5	acipimox
946	B-6	acipimox
947	B-7	acipimox
948	B-8	acipimox
949	B-9	acipimox
950	B-10	acipimox
951	B-ll	acipimox
952	B-12	acipimox
953	B-13	acipimox
954	B-14	acipimox
955	B-15	acipimox
956	B-16	acipimox
957	B-17	acipimox
958	B-18	acipimox
959	B-19	acipimox
960	B-20	acipimox

107

Tabulka 13 ilustruje příklady kombinací podle vynálezu, kde kombinace zahrnuje první množství inhibitoru CETP a druhé množství derivátu kyseliny fibrové, kde první a druhé množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství uvedených sloučenin.

Tabulka 13.

Číslo příkladu	Složka 1	Složka 2
5601	C-l	clofibrát
5602	C-2	clofibrát
5603	C-3	clofibrát
5604	C-4	clofibrát
5605	C-5	clofibrát
5606	C-6	clofibrát
5607	C-7	clofibrát
5608	C-8	clofibrát
5609	C-9	clofibrát
5610	C-10	clofibrát
5611	C-ll	clofibrát
5612	C-12	clofibrát
5613	C-13	clofibrát
5614	C-14	clofibrát
5615	C-15	clofibrát
5616	C-16	clofibrát
5617	C-17	clofibrát
5618	C-18	clofibrát
5619	C-19	clofibrát
5620	C-20	clofibrát
5621	C-l	fenofibrát
5622	C-2	fenofibrát
5623	C-3	fenofibrát

• ·

108

5624	C-4	fenofibrát
5625	C-5	fenofibrát
5626	C-6	fenofibrát
5627	C-7	fenofibrát
5628	C-8	fenofibrát
5629	C-9	fenofibrát
5630	C-10	fenofibrát
5631	C-ll	fenofibrát
5632	C-12	fenofibrát
5633	C-13	fenofibrát
5634	C-14	fenofibrát
5635	C-15	fenofibrát
5636	C-16	fenofibrát
5637	C-17	fenofibrát
5638	C-18	fenofibrát
5639	C-19	fenofibrát
5640	C-20	fenofibrát
5641	C-l	ciprofibrát
5642	C-2	ciprofibrát
5643	C-3	ciprofibrát
5644	C-4	ciprofibrát
5645	C-5	ciprofibrát
5646	C-6	ciprofibrát
5647	C-7	ciprofibrát
5648	C-8	ciprofibrát
5649	C-9	ciprofibrát
5650	C-10	ciprofibrát
5651	C-ll	ciprofibrát
5652	C-12	ciprofibrát
5653	C-13	ciprofibrát
5654	C-14	ciprofibrát
5655	C-15	ciprofibrát
5656	C-16	ciprofibrát

109

5657	C-17	ciprofibrát
5658	C-18	ciprofibrát
5659	C-19	ciprofibrát
5660	C-20	ciprofibrát
5661	C-l	bezafibrát
5662	C-2	bezafibrát
5663	C-3	bezafibrát
5664	C-4	bezafibrát
5665	C-5	bezafibrát
5666	C-6	bezafibrát
5667	C-7	bezafibrát
5668	C-8	bezafibrát
5669	C-9	bezafibrát
5670	C-10	bezafibrát
5671	C-ll	bezafibrát
5672	C-12	bezafibrát
5673	C-13	bezafibrát
5674	C-14	bezafibrát
5675	C-15	bezafibrát
5676	C-16	bezafibrát
5677	C-17	bezafibrát
5678	C-18	bezafibrát
5679	C-19	bezafibrát
5680	C-20	bezafibrát
5681	C-l	gemfibrozil
5682	C-2	gemfibrozil
5683	C-3	gemfibrozil
5684	C-4	gemfibrozil
5685	C-5	gemfibrozil
5686	C-6	gemfibrozil
5687	C-7	gemfibrozil
5688	C-8	gemfibrozil
5689	C-9	gemfibrozil

110

5690	c-io	gemfibrozil
5691	C-ll	gemfibrozil
5692	C-12	gemfibrozil
5693	C-13	gemfibrozil
5694	C-14	gemfibrozil
5695	C-15	gemfibrozil
5696	C-16	gemfibrozil
5697	C-17	gemfibrozil
5698	C-18	gemfibrozil
5699	C-19	gemfibrozil
5700	C-20	gemfibrozil

Tabulka 15 ilustruje příklady kombinací podle vynálezu, kde kombinace zahrnuje první množství inhibitoru CETP a druhé množství derivátu kyseliny nikotinové, kde první a druhé množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství nebo antiateroskleroticky účinné množství uvedených sloučenin.

Tabulka 15.

Číslo příkladu	Složka 1	Složka 2
5901	C-l	nikotinová kyselina (niacin)
5902	C-2	nikotinová kyselina (niacin)
5903	C-3	nikotinová kyselina (niacin)
5904	C-4	nikotinová kyselina (niacin)
5905	C-5	nikotinová kyselina (niacin)
5906	C-6	nikotinová kyselina (niacin)
5907	C-7	nikotinová kyselina (niacin)
5908	C-8	nikotinová kyselina (niacin)
5909	C-9	nikotinová kyselina (niacin)
5910	C-10	nikotinová kyselina (niacin)

111

5911	C-ll	nikotinová kyselina (niacin)
5912	C-12	nikotinová kyselina (niacin)
5913	C-13	nikotinová kyselina (niacin)
5914	C-14	nikotinová kyselina (niacin)
5915	C-15	nikotinová kyselina (niacin)
5916	C-16	nikotinová kyselina (niacin)
5917	C-17	nikotinová kyselina (niacin)
5918	C-18	nikotinová kyselina (niacin)
5919	C-19	nikotinová kyselina (niacin)
5920	C-20	nikotinová kyselina (niacin)
5921 *·	C-l	niceritrol
5922	C-2	niceritrol
5923	C-3	niceritrol
5924	C-4	niceritrol
5925	C-5	niceritrol
5926	C-6	niceritrol
5927	C-7 ·	niceritrol
5928	C-8	niceritrol
5929	C-9	niceritrol
5930	C-10	niceritrol
5931	C-ll	niceritrol
5932	C-12	niceritrol
5933	C-13	niceritrol
5934	C-14	niceritrol
5935	C-15	niceritrol
5936	C-16	niceritrol ·
5937	C-17	niceritrol
5938	C-18	niceritrol
5939	C-19	niceritrol
5940	C-20	niceritrol
5941	C-l	acipimóx
5942	C-2	acipimóx
5943	C-3	acipimóx

112

5944	C-4	acipimox
5945	C-5	acipimox
5946	C-6	acipimox
5947	C-7	acipimox
5948	C-8	acipimox
5949	C-9	acipimox
5950	C—10	acipimox
5951	c-ll	acipimox
5952	C-12	acipimox
5953	C-13	acipimox
5954	C-14	acipimox
5955	C-15	acipimox
5956	C-16	acipimox
5957	C-17	acipimox
5958	C-18	acipimox
5959	C-19	acipimox
5960	C-20	acipimox

V kombinacích podle předkládaného vynálezu se může použít kterýkoliv z inhibitorů MTP, které popsal Wetterau a kol. (tamtéž), kde kombinace zahrnuje první množství sloučeniny inhibující transport ileálních žlučových kyselin a druhé množství inhibitoru MTP, kde první a druhé množství společně zahrnují antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství, antihypercholesterolemicky účinné množství nebo antihypertenzivně účinné množství sloučenin. Ve výhodném provedení podle vynálezu je inhibitor IBAT na bázi benzothiepinu. V dalším výhodném provedení může být inhibitor IBAT na bázi benzotiazepinu. Ještě v dalším výhodném provedení může být inhibitor IBAT na bázi naftalenu. Inhibitor IBAT může být, bez omezení, kterákoliv z kombinací sloučenin uvedených v tabulce 1.

113

Tabulka 16 ilustruje příklady některých kombinací podle předkládaného vynálezu, kde kombinace zahrnuje první množství sloučeniny inhibující transport ileálních žlučových kyselin a druhé množství antagonistu absorpce cholesterolu, kde první a druhé množství společně zahrnují antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství, antihypercholesterolemicky účinné množství nebo antihypertenzivně účinné množství sloučenin. Ve výhodném provedení podle vynálezu je inhibitor IBAT na bázi benzothiepinu. V dalším výhodném provedení může být inhibitor IBAT na bázi benzotiazepinu. Ještě v dalším výhodném provedení může být inhibitor IBAT na bázi naftalenu. Inhibitor IBAT může být, bez omezení, kterákoliv z kombinací sloučenin uvedených v tabulce 1. Výhodně antagonist absorpce cholesterolu je azetidinová sloučenina, výhodněji je antagonist absorpce cholesterolu sloučenina A-l.

Tabulka 16

1 Příklad číslo	i Sloučenina 1	Sloučenina 2
7001	B-l	A-l
7002	B-2	A-l
7003	B-3	A-l
7004	B-4	A-l
7005	B-5	A-l
7006	B-6	A-l
7007	B-7	A-l
7008	B-8	A-l
7009	B-9	A-l
7010	B-10	A-l
7011	B-ll	A-l
7012	B-12	A-l
7013	B-13	A-l

• ·

114 ···

7014	B-14	A-l
7015	B-15	A-l
7016	B-16	A-l
7017	B-17	A-l
7018	B-18	A-l
7019	B-19	A-l..... -
7020	B-20	A-l
7021	B-21	... A-l
7022	B-22	A-l
7023	B-23	A-l
7024	B-24	A-l
7025	B-25	A-l
7026	B-26	A-l
7027	B-27	A-l
7028	B-28	A-l
7029	B-29	A-l
7030	B-30	A-l
7031	B-31	A-l
7032	B-32	A-l
7033	B-33	A-l
7034	B-34	A-l
7035	B-35	A-l
7036	B-36	A-l
7037	B-37	A-l
7038	B-38	A-l .
7039	. B.-39	A-l ··

Tabulka 21 ilustruje příklady některých kombinací podle předkládaného vynálezu, kde kombinace zahrnuje první množství sloučeniny inhibující transport ileálních žlučových kyselin a druhé množství kardiovaskulárního terapeutika, užitečného v profylaxi nebo léčbě hypertenze, kde první a druhé množství společně zahrnují antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství, antihypercholesterolemicky účinné množství nebo antihypertenzivně účinné množství sloučenin. Ve výhodném provedení podle vynálezu je inhibitor IBAT na bázi benzothiepinu. V dalším výhodném provedení může být inhibitor IBAT na bázi benzotiazepinu. Ještě v dalším výhodném provedení může být inhibitor IBAT na bázi naftalenu. Inhibitor IBAT může být, bez omezení, kterákoliv z kombinací sloučenin uvedených v tabulce 1.

115

Tabulka 21.

Číslo příkladu	Sloučenina 1	Sloučenina 2
12000	amilorid	B-l
12001	amlodipin	B-l
12002	benazepril	B-l
12003	bumetanid	B-l
12004	candesartan cilexetil	B-l
12005	captopril	B-l
12006	carvedilol	B-l
12007	chlorothiazid	B-l ,
12008	chlorthalidon	B-l
12009	clonidin	B-l
12010	delodipin	B-l
12011	diazoxid	B-l
12012	diltiazem	B-l
12013	doxazosin	B-l
12014	enalapril	B-l
12015	eplerenon	B-l
12016	ethakrynová kyselina	B-l
12017	fosinopril	B-l
12018	furosemid	B-l
12019	guanabenz	B-l
12020	guanadrel	B-l
12021	guanethidin	B-l
12022	guánfacin	B-l
12023	hydralazin	B-l
12024	hydrochlorothiazid	B-l
12025	inbesartan	B-l
12026	isradipin	B-l
12027	labetalol	B-l
12028	lizinopril	B-l
12029	lozartan	B-l
12030	metyldopa	B-l
12031	metyldopát	B-l
12032	metoprolol	B-l
12033	minoxidil	B-l
12034	moexipril	B-l
12035	nicardipin	B-l
12036	nifedipin	B-l
12037	nimodipin	B-l
12038	nitroprusid	B-l
12039	perindropil erbumin	B-l
12040	fenoxybenzamin	B-l
12041	fentolamin	B-l
12042	polythiazid	B-l
12043	prazosin	B-l
12044	propranolol	B-l
12045	qinapril	B-l

116

12046	ramipril	B-l
12047	reserpin	B-l
12048	spironolakton	B-l
12049	terazosin	B-l
12050	trandolapril	B-l
12051	triameteren	B-l
12052	trimetafan	B-l
12053	valsartan	B-l
12054	verapamil	B-l
12055	amilorid	B-2
12056	amlodipin	B-2
12057	benazepril	B-2
12058	bumetanid	B-2
12059	candesartan cilexetil	B-2
12060	captopril	B-2
12061	carvedilol	B-2
12062	chlorothiazid	B-2
12063	chlorthalidon	B-2
12064	clonidin	B-2
12065	delodipin	B-2
12066	diazoxid	B-2
12067	diltiazem	B-2
12068	doxazosin	B-2
12069	enalapril	B-2
12070	eplerenon	B-2
12071	ethakrynová kyselina	B-2
12072	fosinopril	B-2
12073	furosemid	B-2
12074	guanabenz	B-2
12075	guanadrel	B-2
12076	guanethidin	B-2
12077	guanfacin	B-2
12078	hydralazin	B-2
12079	hydrochlorothiazid	B-2
12080	inbesartan	B-2
12081	isradipin	B-2
12082	labetalol	B-2
12083	lisinopril	B-2
12084	losartan	B-2
12085	metyldopa	B-2
12086	metyldopát	B-2
12087	metoprolol	B-2
12088	minoxidil	B-2
12089	moexipril	B-2
12090	nicardipin	B-2
12091	nifedipin	B-2
12092	nimodipin	B-2
12093	nitroprusid	B-2
12094	perindopril erbumin	B-2

117

• ·

12095	fenoxybenzamin	B-2
12096	fentolamin	B-2
12097	polythiazid	B-2
12098	prazosin	B-2
12099	propranolol	B-2
12100	qinapril	B-2
12101	ramipril	B-2
12102	reserpin	B-2
12103	spironolakton	B-2
12104	terazosin	B-2
12105	trandolapril	B-2
12106	triameteren	B-2
12107	trimetafan	B-2
12108	valsartan	B-2
12109	verapamil	B-2
12110	amilorid	B-3
12111	amlodipin	B-3
12112	benazepril	B-3
12113	bumetanid	B-3
12114	candesartan cilexetil	B-3
12115	captopril	B-3
12116	carvedilol	B-3
12117	chlorothiazid	B-3
12118	chlorthalidon	B-3
12119	clonidin	B-3
12120	delodipin	B-3
12121	diazoxid	B-3
12122	diltiazem	B-3
12123	doxazosin	B-3
12124	enalapril	B-3
12125	eplerenon	B-3
12126	ethakrynová kyselina	B-3
12127	fosinopril	B-3
12128	furosemid	B-3
12129	guanabenz'	B-3
12130	guanadrel	B-3
12131	guanethidin	B-3
12132	guanfacin	B-3
12133	hydralazin	B-3
12134	hydrochlorothiazid	B-3
12135	inbesartan	B-3
12136	isradipin	B-3
12137	labetalol	B-3
12138	lisinopril	B-3
12139	losartan	B-3
12140	metyldopa	B-3
12141	metyldopát	B-3
12142	metoprolol	B-3
12143	minoxidil	B-3

118

12144	moexipril	B-3
12145	nicardipin	B-3
12146	nifedipin	B-3
12147	nimodipin	B-3
12148	nitroprusid	B-3
12149	perindopril erbumin	B-3
12150	fenoxybenzamin	B-3
12151	fentolamin	B-3
12152	polythiazid	B-3
12153	prazosin	B-3
12154	propranolol	B-3
12155	quinapril	B-3
12156	ramipril	B-3
12157	reserpin	B-3
12158	spironolakton	B-3
12159	terazosin	B-3
12160	trandolapril	B-3
12161	triameteren	B-3
12162	trimethaphan	B-3
12163	valsartan	B-3
12164	verapamil	B-3
12165	amilorid	B-4
12166	amlodipin	B-4
12167	benazepril	B-4
12168	bumetanid	B-4
12169	candesartan cilexetil	B-4
12170'	captopril	B-4
12171	carvedilol	B-4
12172	chlorothiazid	B-4
12173	chlorthalidon	B-4
12174	clonidin	B-4
12175	delodipin	B-4
12176	diazoxid	B-4
12177	diltiazem	B-4
12178	doxazosin	B-4
12179	enalapril	B-4
12180	eplerenon	B-4
12181	ethakrynová kyselina	B-4
12182	fosinopril	B-4
12183	furosemid	B-4
12184	guanabenz	B-4
12185	guanadrel	B-4
12186	guanethidin	B-4
12187	guanfacin	B-4
12188	hydralazin	B-4
12189	hydrochlorothiazid	B-4
12190	inbesartan	B-4
12191	isradipin	B-4
12192	labetalol	B-4

119

12193	lisinopril	B-4
12194	losartan	B-4
12195	methyldopa	B-4
12196	methyldopát	B-4
12197	metoprolol	B-4
12198	minoxidil	B-4
12199	moexipril	B-4
12200	nicardipin	B-4
12201	nifedipin	B-4
12202	nimodipin	B-4
12203	nitroprusid	B-4
12204	perindopril erbumin	B-4
12205	fenoxybenzamin	B-4
12206	fentolamin	B-4
12207	polythiazid	B-4
12208	prazosin	B-4
12209	propranolol	B-4
12210	quinapril	B-4
12211	ramipril	B-4
12212	reserpin	B-4
12213	spironolakton	B-4
12214	terazosin	B-4
12215	trandolapril	B-4
12216	triameteren	B-4
12217	trimethaphan	B-4
12218	valsartan	B-4
12219	verapamil	B-4
12220	amilorid	B-5
12221	amlodipin	B-5
12222	benazepril	B-5
12223	bumetanid	B-5
12224	candesartan cilexetil	B-5
12225	captopril	B-5
12226	carvedilol	B-5
12227	chlorothiazid	B-5
12228	chlorthalidon	B-5
12229	clonidin	B-5
12230	delodipin	B-5
12231	diazoxid	B-5
12232	diltiazem	B-5
12233	doxazosin	B-5
12234	enalapril	B-5
12235	eplerenon	B-5
12236	ethakrynová kyselina	B-5
12237	fosinopril	B-5
12238	furosemid	B-5
12239	guanabenz	B-5
12240	guanadrel	B-5
12241	guanethidin	B-5

120

12242	guanfacin	B-5
12243	hydralazin	B-5
12244	hydrochlorothiazid	B-5
12245	inbesartan	B-5
12246	isradipin	B-5
12247	labetalol	B-5
12248	lisinopril	B-5
12249	losartan	B-5
12250	methyldop	B-5
12251	mythyldopát	B-5
12252	metoprolol	B-5
12253	minoxidil	B-5
12254	moexipril	B-5
12255	nicardipin	B-5
12256	nifedipin	B-5
12257	nimodipin	B-5
12258	nitroprusid	B-5
12259	perindopril erbumin	B-5
12260	fenoxybenzamin	B-5
12261	fentolamin	B-5
12262	polythiazid	B-5
12263	prazosin	B-5
12264	propranolol	B-5
12265	quinapril	B-5
12266	ramipril	B-5
12267	reserpin	B-5
12268	spironolakton	B-5
12269	terazosin	B-5
12270	trandolapril	B-5
12271	triameteren	B-5
12272	trimethaphan	B-5
12273	valsartan	B-5
12274	verapamil	B-5
12275	amilorid	B-6
12276	amlodipin	B-6
12277	benazepril	B-6
12278	bumetanid	B-6
12279	candesartan cilexetil	B-6
12280	captopril	B-6
12281	carvedilol	B-6
12282	chlorothiazid	B-6
12283	chlorthalidon	B-6
12284	clonidin	B-6
12285	delodipin	B-6
12286	diazoxid	B-6
12287	diltiazem	B-6
12288	doxazosin	B-6
12289	enalapril	B-6
12290	eplerenon	B-6

• · • 9

121

12291	ethakrynová kyselina	B-6
12292	fosinopril	B-6
12293	furosemid	B-6
12294	guanabenz	B-6
12295	guanadrel	B-6
12296	guanethidin	B-6
12297	guanfacin	B-6
12298	hydralazin	B-6
12299	hydrochlorothiazid	B-6
12300	inbesartan	B-6
12301	isradipin	B-6
12302	labetalol	B-6
12303	lisinopril	B-6
12304	losartan	B-6
12305	methyldopa	B-6
12306	methyldopát	B-6
12307	metoprolol	B-6
12308	minoxidil	B-6
12309	moesipril	B-6
12310	nicardipin	B-6
12311	nifedipin	B-6
12312	nimodipin	B-6
12313	nitroprusid	B-6
12314	perindopril erbumin	B-6
12315	fenoxybenzamin	B-6
12316	fentolamin	B-6
12317	polythiazid	B-6
12318	prazosin	B-6
12319	propranolol	B-6
12320	quinapril	B-6
12321	ramipril	B-6
12322	reserpin	B-6
12323	spi.ronolakton	B-6
12324	terazosin	B-6
12325	trandolapril	B-6
12326	triameteren	B-6
12327	trimethanaphan	B-6
12328	valsartan	B-6
12329	verapamil	B-6
12330	amilorid	B-7
12331	amlodipin	B-7
12332	benazepril	B-7
12333	bumétanid	B-7
12334	candesartan cilexetil	B-7
12335	captopril	B-7
12336	carvedilol	B-7
12337	chlorothiazid	B-7
12338	chlorthalidon	B-7
12339	clonidin	B-7

122

12340	delodipin	B-7
12341	diazoxid	B-7
12342	diltiazem	B-7
12343	doxazosin	B-7
12344	enalapril	B-7
12345	eplerenon	B-7
12346	ethakrynová kyselina	B-7
12347	fosinopril	B-7
12348	furosemid	B-7
12349	guanabenz	B-7
12350	guanadrel	B-7
12351	guanethidin	B-7
12352	guanfacin	B-7
12353	hydralazin	B-7
12354	hydrochlorothiazid	B-7
12355	inbesartan	B-7
12356	isradipin	B-7
12357	labetalol	B-7
12358	lisinopril	B-7
12359	losartan	B-7
12360	methyldopa	B-7
12361	methyldopát	B-7
12362	metoprolol	B-7
12363	minoxidil	B-7
12364	moesipril	B-7
12365	nicardipin	B-7
123'66	nifedipin	B-7
12367	nimodipin	B-7
12368	nitroprusid	B-7
12369	perindopril erbumin	B-7
12370	fenoxybenzamin	B-7
12371	fentolamin	B-7
12372	polythiazid	B-7
12373	prazosin	B-7
12374	propranolol	B-7
12375	quinapřil	B-7
12376	ramipril	B-7
12377	reserpin	B-7
12378	spironolakton	B-7
12379	terazosin	B-7
12380	trandolapril	B-7
12381	triameteren	B-7
12382	trimethanaphan	B-7
12383	valsartan	B-7
12384	verapamil	B-7
12385	amilorid	B-8
12386	amlodipin	B-8
12387	benazepril	B-8
12388	bumetanid	B-8

123

12389	candesartan cilexetil	B-8
12390	captopril	B-8
12391	carvedilol	B-8
12392	chlorothiazid	B-8
12393	chlorthalidon	B-8
12394	clonidin	B-8
12395	delodipin	B-8
12396	diazoxid	B-8
12397	diltiazem	B-8
12398	doxazosin	B-8
12399	enalapril	B-8
12400	eplerenon	B-8
12401	ethakrynová kyselina	B-8
12402	fosinopril	B-8
12403	furosemid	B-8
12404	guanabenz	B-8
12405	guanadrel	B-8
12406	guanethidin	B-8
12407	guanfacin	B-8
12408	hydralazin	B-8
12409	hydrochlorothiazid	B-8
12410	inbesartan	B-8
12411	isradipin	B-8
12412	labetalol	B-8
12413	lisinopril	B-8
12414	losartan	B-8
12415	methyldopa	B-8
12416	methyldopát	B-8
12417	metoprolol	B-8
12418	minoxidil	B-8
12419	moesipril	B-8
12420	nicardipin	B-8
12421	nifedipin	B-8
12422	nimodipin	B-8
12423	nitroprusid	B-8
12424	perindopril erbumin	B-8
12425	fenoxybenzamin	B-8
12426	fentolamin	B-8
12427	polythiazid	B-8
12428	prazosin	B-8
12429	propranolol	B-8
12430	quinapril	B-8
12431	ramipril	B-8
12432	reserpin	B-8
12433	spironolakton	B-8
12434	terazosin	B-8
12435	trandolapril	B-8
12436	triameteren	B-8
12437	trimethanaphan	B-8

124

12438	valsartan	B-8
12439	verapamil	B-8
12440	amilorid	B-9
12441	amlodipin	B-9
12442	benazepril	B-9
12443	bumetanid	B-9
12444	candesartan cilexetil	B-9
12445	captopril	B-9
12446	carvedilol	B-9
12447	chlorothiazid	B-9
12448	chlorthalidon	B-9
12449	clonidin	B-9
12450	delodipin	B-9
12451	diazoxid	B-9
12452	diltiazem	B-9
12453	doxazosin	B-9
12454	enalapril	B-9
12455	eplerenon	B-9
12456	ethakrynová kyselina	B-9
12457	fosinopril	B-9
12458	furosemid	B-9
12459	guanabenz	B-9
12460	guanadrel	B-9
12461	guanethidin	B-9
12462	guanfacin	B-9
12463	hydralazin	B-9
12464	hydrochlorothiazid	B-9
12465	inbesartan	B-9
12466	isradipin	B-9
12467	labetalol	B-9
12468	lisinopril	B-9
12469	losartan	B-9
12470	methyldopa'	B-9
12471	methyldopát	B-9
12472	metoprolol	B-9
12473	minoxidil	B-9
12474	moesipril	B-9
12475	nicardipin	B-9
12476	nifedipin	B-9
12477	nimodipin	B-9
12478	nitroprusid	B-9
12479	perindopril erbumin	B-9
12480	fenoxybenzamin	B-9
12481	fentolamin	B-9
12482	polythiazid	B-9
12483	prazosin	B-9
12484	propranolol	B-9
12485	quinapril	B-9
1248 6	ramipril	B-9

125

12487	reserpin	B-9
12488	spironolakton	B-9
12489	terazosin	B-9
12490	trandolapril	B-9
12491	triameteren	B-9
124 92	trimethanaphan	B-9
12493	valsartan	B-9
12494	verapamil	B-9
12495	amilorid	B-10
12496	amlodipin	B-10
12497	benazepril	B-10
12498	bumetanid	B-10
12499	candesartan cilexetil	B-10
12500	captopril	B-10
12501	carvedilol	B-10
12502	chlorothiazid	B-10
12503	chlorthalidon	B-10
12504	clonidin	B-10
12505	delodipin	B-10
12506	diazoxid	B-10
12507	diltiazem	B-10
12508	doxazosin	B-10
12509	enalapril	B-10
12510	eplerenon	B-10
12511	ethakrynová kyselina	B-10
12512	fosinopril	B-10
12513	furosemid	B-10
12514	guanabenz	B-10
12515	guanadrel	B-10
12516	guanethidin	B-10
12517	guanfacin	B-10
12518	hydralazin	B-10
12519	hydrochlorothiazid	B-10
12520	inbesartan	B-10
12521	isradipin	B-10
12522	labetalol	B-10
12523	lisinopril	B-10
12524	losartan	B-10
12525	methyldopa	B-10
12526	methyldopát	B-10
12527	metoprolol	B-10
12528	minoxidil	B-10
12529	moesipril	B-10
12530	nicardipin	B-10
12531	nifedipin	B-10
12532	nimodipin	B-10
12533	nitroprusid	B-10
12534	perindopril erbumin	B-10
12535	fenoxybenzamin	B-10

126

12536	fentolamin	B-10
12537	polythiazid	B-10
12538	prazosin	B-10
12539	propranolol	B-10
12540	quinapril	B-10
12541	ramipril	B-10
12542	reserpin	B-10
12543	spironolakton	B-10
12544	terazosin	B-10
12545	trandolapril	B-10
12546	triameteren	B-10
12547	trimethaphan	B-10
12548	valsartan	B-10
12549	verapamil	B-10
12550	amilorid	B-ll
12551	amlodipin	B-ll
12552	benazepril	B-ll
12553	bumetanid	B-ll
12554	candesartan cilexetil	B-ll
12555	captopril	B-ll
12556	carvedilol	B-ll
12557	chlorothiazid	B-ll
12558	chlorthalidon	B-ll
12559	clonidin	B-ll
12560	delodipin	B-ll
12561	diazoxid	B-ll
12562	diltiazem	B-ll
12563	doxazosin	B-ll
12564	enalapril	B-ll
12565	eplerenon	B-ll
12566	ethakrynová kyselina	B-ll
12567	fosinopril	B-ll
12568	furosemid	B-ll
12569	guanabenz	B-ll
12570	guanadrel	B-ll
12571	guanethidin	B-ll
12572	guanfacin	B-ll
12573	hydralazin	B-ll
12574	hydrochlorothiazid	B-ll
12575	inbesartan	B-ll
12576	isradipin	B-ll
12577	labetalol	B-ll
12578	lisinopril	B-ll
12579	losartan	B-ll
12580	methyldopa	B-ll
12581	methyldopát	B-ll
12582	metoprolol	B-ll
12583	minoxidil	B-ll
12584	moesipril	B-ll

127 ·

4* ·

12585	nicardipin	B-ll
12586	nifedipin	B-ll
12587	nimodipin	B-ll
12588	nitroprusid	B-ll
12589	perindopril erbumin	B-ll
12590	fenoxybenzamin	B-ll
12591	fentolamin	B-ll
12592	polythiazid	B-ll
12593	prazosin	B-ll
12594	propranolol	B-ll
12595	quinapril	B-ll
12596	ramipril	B-ll
12597	reserpin	B-ll
12598	spironolakton	B-ll
12599	terazosin	B-ll
12600	trandolapril	B-ll
12601	triameteren	B-ll
12602	trimethaphan	B-ll
12603	valsartan	B-ll
12604	verapamil	B-ll
12605	amilorid	B-12
12606	amlodipin	B-12
12607	benazepril	B-12
12608	bumetanid	B-12
12609	candesartan cilexetil	B-12
12610	captopril	B-12
12611	carvedilol	B-12.
12612	chlorothiazid	B-12
12613	chlorthalidon	B-12
12614	clonidin	B-12
12615	delodipin	B-12
12616	diazoxid	B-12
12617	diltiazem	B-12
12618	doxazosin	B-12
12619	enalapril	B-12
12620	eplerenon	B-12
12621	ethakrynová kyselina	B-12
12622	fosinopril	B-12
12623	furosemid	B-12
12624	guanabenz	B-12
12625	guanadrel	B-12
12626	guanethidin	B-12
12627	guanfacin	B-12
12628	hydralazin	B-12
12629 .	hydrochlorothiazid	B-12
12630	inbesartan	B-12
12631	isradipin	B-12
12632	labetalol	B-12
12633	lisinopril	B-12

128

12634	losartan	B-12
12635	methyldopa	B-12
12636	methyldopát	B-12
12637	metoprolol	B-12
12638	minoxidil	B-12
12639	moesipril	B-12
12640	nicardipin	B-12
12641	nifedipin	B-12
12642	nimodipin	B-12
12643	nitroprusid	B-12
12644	perindopril erbumin	B-12
12645	fenoxybenzamin	B-12
12646	fentolamin	B-12
12647	polythiazid	B-12
12648	prazosin	B-12
12649	propranolol	B-12
12650	quinapril	B-12
12651	ramipril	B-12
12652	reserpin	B-12
12653	spironolakton	B-12
12654	terazosin	B-12
12655	trandolapril	B-12
12656	triameteren	B-12
12657	trimethaphan	B-12
12658	valsartan	B-12
12659	verapamil	B-12
12660	amilorid	B-13
12661	amlodipin	B-13
12662	benazepril	B-13
12663	bumetanid	B-13
12664	candesartan cilexetil	B-13
12665	captopril	B-13
12666	carvedilol	B-13
12667	chlorothiazid	B-13
12668	chlorthalidon	B-13
12669	clonidin	B-13
12670	delodipin	B-13
12671	diazoxid	B-13
12672	diltiazem	B-13
12673	doxazosin	B-13
12674	enalapril	B-13
12675	eplerenon	B-13
12676	ethakrynová kyselina	B-13
12677	fosinopril	B-13
12678	furosemid	B-13
12679	guanabenz	B-13
12680	guanadrel	B-13
12681	guanethidin	B-13
12682	guanfacin	B-13

129

12683	hydralazin	B-13
12684	hydrochlorothiazid	B-13
12685	inbesartan	B-13
12686	isradipin	B-13
12687	labetalol	B-13
12688	lisinopril	B-13
12689	losartan	B-13
12690	methyldopa	B-13
12691	methyldopát	B-13
12692	metoprolol	B-13
12693	minoxidil	B-13
12694	moesipril	B-13
12695	nicardipin	B-13
12696	nifedipin	B-13
12697	nimodipin	B-13
12698	nitroprusid	B-13
12699	perindopril erbumin	B-13
12700	fenoxybenzamin	B-13
12701	fentolamin	B-13
12702	polythiazid	B-13
12703	prazosin	B-13
12704	propranolol	B-13
12705	quinapril	B-13
12706	ramipril	B-13
12707	reserpin	B-13
12708	spironolakton	B-13
12709	terazosin	B-13
12710	trandolapril	B-13
12711	triameteren	B-13
12712	trimethaphan	B-13
12713	valsartan	B-13
12714	verapamil	B-13
12715	amilorid	B-14
12716	amlodipin	B-14
12717	benazepril	B-14
12718	bumetanid	B-14
12719	candesartan cilexetil	B-14
12720	captopril	B-14
12721	carvedilol	B-14
12722	chlorothiazid	B-14
12723	chlorthalidon	B-14
12724	clonidin	B-14
12725	delodipin	B-14
12726	diazoxid	B-14
12727	diltiazem	B-14
12728	doxazosin	B-14
12729	enalapril	B-14
12730	eplerenon	B-14
12731	ethakrynová kyselina	B-14

♦ 9 ·

130

12732	fosinopril	B-14
12733	furosemid	B-14
12734	guanabenz	B-14
12735	guanadrel	B-14
12736	guanethidin	B-14
12737	guanfacin	B-14
12738	hydralazin	B-14
12739	hydrochlorothiazid	B-14
12740	inbesartan	B-14 .
12741	isradipin	B-14
12742	labetalol	B-14
12743	lisinopril	B-14
12744	losartan	. B-14
12745	methyldopa	B-14
12746	methyldopát	B-14
12747	metoprolol	B-14
12748	minoxidil	B-14
12749	moesipril	B-14
12750	nicardipin	B-14
12751	nifedipin	B-14
12752	nimodipin	B-14
12753	nitroprusid	B-14
12754	perindopril erbumin	B-14
12755	fenoxybenzamin	B-14
12756	fentolamin	B-14
12757	polythiazid	B-14
12758	prazosin	B-14
12759	propranolol	B-14
12760	quinapril	B-14
12761	ramipril	B-14
12762	reserpin	B-14
12763	spironolakton	B-14
12764	terazosin	B-14
12765	trandolapríl	B-14
12766	triameteren	B-14
12767	trimethaphan	B-14
12768	valsartan	B-14
12769	verapamil	B-14
12770	amilorid	B-15
12771	amlodipin	B-15
12772	benazepril	B-15
12773	bumetanid	B-15
12774	candesartan cilexetil	B-15
12775	captopril	B-15
12776	carvedilol	B-15
12777	chlorothiazid	B-15
12778	chlorthalidon	B-15
12779	clonidin	B-15
12780	delodipin	B-15

131

12781	diazoxid	B-15
12782	diltiazem	B-15
12783	doxazosin	B-15
12784	enalapril	B-15
12785	eplerenon	B-15
12786	ethakrynová kyselina	B-15
12787	fosinopril	B-15
12788	furosemid	B-15
12789	guanabenz	B-15
12790	guanadrel	B-15
12791	guanethidin	B-15
12792	guanfacin	B-15
12793	hydralazin	B-15
12794	hydrochlorothiazid	B-15
12795	inbesartan	B-15
12796	isradipin	B-15
12797	labetalol	B-15
12798	lisinopril	B-15
12799	losartan	B-15
12800	methyldopa	B-15
12801	methyldopát	B-15
12802	metoprolol	B-15
12803	minoxidil	B-15
12804	moesipril	B-15
12805	nicardipin	B-15
12806	nifedipin	B-15
12807	nimodipin	B-15
12808	nitroprusid	B-15
12809	perindopril erbumin	B-15
12810	fenoxybenzamin	B-15
12811	fentolamin	B-15
12812	polythiazid	B-15
12813	prazosin	B-15
12814	propranolol	B-15
12815	quinapril	B-15
12816	ramipril	B-15
12817	reserpin	B-15
12818	spironolakton	B-15
12819	terazosin	B-15
12820	trandolapril	B-15
12821	triameteren	B-15
12822	trimethaphan	B-15
12823	valsartan	B-15
12824	verapam.il	B-15
12825	amilorid	B-16
12826	amlodipin	B-16
12827	benazepril	B-16
12828	bumetanid	B-16
12829	candesartan cilexetil	B-16

132

12830	captopril	B-16
12831	carvedilol	B-16
12832	chlorothiazid	B-16
12833	chlorthalidon	B-16
12834	clonidin	B-16
12835	delodipin	B-16
12836	diazoxid	B-16
12837	diltiazem	B-16
12838	doxazosin	B-16
12839	enalapril	B-16
12840	eplerenon	B-16
12841	ethakrynová kyselina	B-16
12842	fosinopril	B-16
12843	furosemid	B-16
12844	guanabenz	B-16
12845	guanadrel	B-16
12846	guanethidin	B-16
12847	guanfacin	B-16
12848	hydralazin	B-16
12849	hydrochlorothiazid	B-16
12850	inbesartan	B-16
12851	isradipin	B-16
12852	labetalol	B-16
12853	lisinopril	B-16
12854	losartan	B-16
12855	methyldopa	B-16
12856	methyldopát	B-16
12857	metoprolol	B-16
12858	minoxidil	B-16
12859	moesipril	B-16
12860	nicardipin	B-16
12861	nifedipin	B-16
12862	nimodipin	B-16
12863	nitroprusid	B-16
12864	perindopril erbumin	B-16
12865	fenoxybenzamin	B-16
12866	fentolamin	B-16
12867	polythiazid	B-16
12868	prazosin	B-16
12869	propranolol	B-16
12870	quinapril	B-16
12871	ramipril	B-16
12872	reserpin	B-16
12873	spironolakton	B-16
12874	terazosin	B-16
12875	trandolapril	B-16
12876	triameteren	B-16
12877	trimethaphan	B-16
12878	valsartan	B-16

133

12879	verapamil	B-16
12880	amilorid	B-17
12881	amlodipin	B-17
12882	benazepril	B-17
12883	bumetanid	B-17
12884	candesartan cilexetil	B-17
12885	captopril	B-17
12886	carvedilol	B-17
12887	chlorothiazid	B-17
12888	chlorthalidon	B-17
12889	clonidin	B-17
12890	delodipin	B-17
12891	diazoxid	B-17
12892	diltiazem	B-17
12893	doxazosin	B-17
12894	enalapril	B-17
12895	eplerenon	B-17
12896	ethakrynová kyselina	B-17
12897	fosinopril	B-17
12898	furosemid	B-17
12899	guanabenz	B-17
12900	guanadrel	B-17
12901	guanethidin.	B-17
12902	guanfacin	B-17
12903	hydralazin	B-17
12904	hydrochlorothiazid	B-17
12905	inbesartan	B-17
12906	isradipin	B-17
12907	labetalol	B-17
12908	lisinopril	B-17
12909	losartan	B-17
12910	methyldopa	B-17
12911	methyldopát	B-17
12912	metoprolol	B-17
12913	minoxidil	B-17
12914	moesipril	B-17
12915	nicardipin	B-17
12916	nifedipin	B-17
12917	nimodipin	B-17
12918	nitroprusid	B-17
12919	perindopril erbumin	B-17
12920	fenoxybenzamin	B-17
12921	fentolamin	B-17
12922	polythiazid	B-17
12923	prazosin	B-17
12924	propranolol	B-17
12925	quinapril	B-17
12926	ramipril	B-17
12927	reserpin	B-17

·

134

12928	spironolakton	B-17
12929	terazosin	B-17
12930	trandolapril	B-17
12931	triameteren	B-17
12932	trimethaphan	B-17
12933	valsartan	B-17
12934	verapamil	B-17
12935	amilorid	B-18
12936	amlodipin	B-18
12937	benazepril	B-18
12938	bumetanid	B-18
12939	candesartan cilexetil	B-18
12940	captopril	B-18
12941	carvedilol	B-18
12942	chlorothiazid	B-18
12943	chlorthalidon	B-18
12944	clonidin	B-18
12945	delodipin	B-18
12946	diazoxid	B-18
12947	diltiazem	B-18
12948	doxazosin	B-18
12949	enalapril	B-18
12950	eplerenon	B-18
12951	ethakrynová kyselina	B-18
12952	fosinopril	B-18
12953	furosemid	B-18
12954	guanabenz	B-18
12955	guanadrel	B-18
12956	guanethidin	B-18
12957	guanfacin	B-18
12958	hydralazin	B-18
12959	hydrochlorothiazid	B-18
12960	inbesartan	B-18
12961	isradipin	B-18
12962	labetalol	B-18
12963	lisinopril	B-18
12964	losartan	B-18
12965	methyldopa	B-18
12966	methyldopát	B-18
12967	metoprolol	B-18
12968	minoxidil	B-18
12969	1 moesipril	B-18
12970	nicardipin	B-18
12971	nifedipin	B-18
12972	nimodipin	B-18
12973	nitroprusid	B-18
12974	perindopril erbumin	B-18
12975	fenoxybenzamin	B-18
12976	fentolamin	B-18

135

12977	polythiazid	B-18
12978	prazosin	B-18
12979	propranolol	B-18
12980	quinapril	B-18
12981	ramipril	B-18
12982	reserpin	B-18
12983	spironolakton	B-18
12984	terazosin	B-18
12985	trandolapril	B-18
12986	triameteren	B-18
12987	trimethaphan	B-18
12988	valsartan	B-18
12989	verapamil	B-18
12990	amilorid	B-19
12991	amlodipin	B-19
12992	benazepril	B-19
12993	bumetanid	B-19
12994	candesartan cilexetil	B-19
12995	captopril	B-19
12996	carvedilol	B-19
12997	chlorothiazid	B-19
12998	chlorthalidon	B-19
12999	clonidin	B-19
13000	delodipin	B-19
13001	diazoxid	B-19
13002	diltiazem	B-19
13003	doxazosin	B-19
13004	enalapril	B-19
13005	eplerenon	B-19
13006	ethakrynová kyselina	B-19
13007	fosinopril	B-19
13008	furosemid	B-19
13009	guanabenz	B-19
13010	guanadrel	B-19
13011	guanethidin	B-19
13012	guanfacin	B-19
13013	hydralazin	B-19
13014	hydrochlorothiazid	B-19
13015	inbesartan	B-19
13016	isradipin	B-19
13017	labetalol	B-19
13018	lisinopril	B-19
13019	losartan	B-19
13020	methyldopa	B-19
13021	methyldopát	B-19
13022	metoprolol	B-19
13023	minoxidil	B-19
13024	moesipril	B-19
13025	nicardipin	B-19

136

9· •·

9* •·

•	9		99	•
• ·	99	•	9	99
•	9	•	9	9
•	9	• ·	9	1*
•	9	9	ft,	•
999	«··		99	999

13026	nifedipin	B-19
13027	nimodipin	B-19
13028	nitroprusid	B-19
13029	perindopril erbumin	B-19
13030	fenoxybenzamin	B-19
13031	fentolamin	B-19
13032	polythiazid	B-19
13033	prazosin	B-19
13034	propranolol	B-19
13035	quinapril	B-19
13036	ramipril	B-19
13037	reserpin	B-19
13038	spironolakton	B-19
13039	terazosin	B-19
13040	trandolapril	B-19
13041	triameteren	B-19
13042	trimethaphan	B-19
13043	valsartan	B-19
13044	verapamil	B-19
13045	amilorid	B-20
13046	amlodipin	B-20
13047	benazepril	B-20
13048	bumetanid	B-20
13049	candesartan cilexetil	B-20
13050	captopril	B-20
13051	carvedilol	B-20
13052	chlorothiazid	B-20
13053	chlorthalidon	B-20
13054	clonidin	B-20
13055	delodipin	B-20
13056	diazoxid	B-20
13057	diltiazem	B-20
13058	doxazosin	B-20
13059	enalapril	B-20
13060	eplerenon .	B-20
13061	ethakrynová kyselina	B-20
13062	fosinopril	B-20
13063	furosemid	B-20
13064	guanabenz	B-20
13065	guanadrel	B-20
13066	guanethidin	B-20
13067	guanfacin	B-20
13068	hydralazin	B-20
13069	hydrochlorothiazid	B-20
13070	inbesartan	B-20
13071	isradipin	B-20
13072	labetalol	B-20
13073	lisinopril	B-20
13074	losartan	B-20

137

13075	methyldopa	B-20
13076	methyldopát	B-20
13077	metoprolol	B-20
13078	minoxidil	B-20
13079	moesipril	B-20
13080	nicardipin	B-20
13081	nifedipin	B-20
13082	nimodipin	B-20
13083	nitroprusid	B-20
13084	perindopril erbumin	B-20
13085	fenoxybenzamin	B-20
13086	fentolamin	B-20
13087	polythiazid	B-20
13088	prazosin	B-20
13089	propranolol	B-20
13090	quinapril	B-20
13091	ramipril	B-20
13092	reserpin	B-20
13093	spironolakton	B-20
13094	terazosin	B-20
13095	trandolapril	B-20
13096	triameteren	B-20
13097	trimethaphan	B-20
13098	valsartan	B-20
13099	verapamil	B-20
13100	amilorid	B-21
13101	amlodipin	B-21
13102	benazepril	B-21
13103	bumetanid	B-21
13104	candesartan cilexetil	B-21
13105	captopril	B-21
13106	carvedilol	B-21
13107	chlorothiazid	B-21
13108	chlorthalidon	B-21
13109	clonidin	B-21
13110	delodipin	B-21
13111	diazoxid	B-21
13112	diltiazem	B-21
13113	doxazosin	B-21
13114	enalapril	B-21
13115	eplerenon	B-21
13116	ethakrynová kyselina	B-21
13117	fosinopril	B-21
13118	furosemid	B-21
13119	guanabenz	B-21
13120	guanadrel	B-21
13121	guanethidin	B-21
13122	guanfacin	B-21
13123	hydralazin	B-21

138

13124	hydrochlorothiazid	B-21
13125	inbesartan	B-21
13126	isradipin	B-21
13127	labetalol	B-21
13128	lisinopril	B-21
13129	losartan	B-21
13130	methyldopa	B-21
13131	methyldopát	B-21
13132	metoprolol	B-21
13133	minoxidil	B-21
13134	moesipril	B-21
13135	nicardipin	B-21
13136	nifedipin	B-21
13137	nimodipin	B-21
13138	nitroprusid	B-21
13139	perindopril erbumin	B-21
13140	fenoxybenzamin	B-21
13141	fentolamin	B-21
13142	polythiazid	B-21
13143	prazosin	B-21
13144	propranolol	B-21
13145	quinapril	B-21
13146	ramipril	B-21
13147	reserpin	B-21
13148	spironolakton	B-21
13149	terazosin	B-21
13150	trandolapril	B-21
13151	triameteren	B-21
13152	trimethaphan	B-21
13153	valsartan	B-21
13154	verapam.il	B-21
13155	amilorid	B-22
13156	amlodipin	B-22
13157	benazepril	B-22
13158	bumetanid	B-22
13159	candesartan cilexetil	B-22
13160	captopril	B-22
13161	carvedilol	B-22
13162	chlorothiazid	B-22
13163	chlorthalidon	B-22
13164	clonidin	B-22
13165	delodipin	B-22
13166	diazoxid	B-22
13167	diltiazem	B-22
13168	doxazosin	B-22
13169	enalapril	B-22
13170	eplerenon	B-22
13171	ethakrynová kyselina	B-22
13172	fosinopril	B-22

139

13173	furosemid	B-22
13174	guanabenz	B-22
13175	guanadrel	B-22
13176	guanethidin	B-22
13177	guanfacin	B-22
13178	hydralazin	B-22
13179	hydrochlorothiazid	B-22
13180	inbesartan	B-22
13181	isradipin	B-22
13182	labetalol	B-22
13183	lisinopril	B-22
13184	losartan	B-22
13185	methyldopa	B-22
13186	methyldopát	B-22
13187	metoprolol	B-22
13188	minoxidil	B-22
13189	moesipril	B-22
13190	nicardipin	B-22
13191	nifedipin	B-22
13192	nimodipin	B-22
13193	nitroprusid	B-22
13194	perindopril erbumin	B-22
13195	fenoxybenzamin	B-22
13196	fentolamin	B-22
13197	polythiazid	B-22
13198	prazosin	B-22
13199	propranolol	B-22
13200	quinapril	B-22
13201	ramipril	B-22
13202	reserpin	B-22
13203	spironolakton	B-22
13204	terazosin	B-22
13205	trandolapril	B-22
13206	triameteren	B-22
13207	trimethaphan	B-22
13208	valsartan	B-22
13209	verapamil	B-22
13210	amilorid	B-23
13211	amlodipin	B-23
13212	benazepril	B-23
13213	bumetanid	B-23
13214	candesartan cilexetil	B-23
13215	captopril	B-23
13216	carvedilol	B-23
13217	chlorothiazid	B-23
13218	chlorthalidon	B-23
13219	clonidin	B-23
13220	delodipin	B-23
13221	diazoxid	B-23

140

13222	diltiazem	B-23
13223	doxazosin	B-23
13224	enalapril	B-23
13225	eplerenon	B-23
13226	ethakrynová kyselina	B-23
13227	fosinopril	B-23
13228	furosemid	B-23
13229	guanabenz	B-23
13230	guanadrel	B-23
13231	guanethidin	B-23
13232	guanfacin	B-23
13233	hydralazin	B-23
13234	hydrochlorothiazid	B-23
13235	inbesartan	B-23
13236	isradipin	B-23
13237	labetalol	B-23
13238	lisinopril	B-23
13239	losartan	B-23
13240	methyldopa	B-23
13241	methyldopát	B-23
13242	metoprolol	B-23
13243	minoxidil	B-23
13244	moesipril	B-23
13245	nicardipin	B-23
13246	nifedipin	B-23
13247	nimodipin	B-23
13248	nitroprusid	B-23
13249	perindopril erbumin	B-23
13250	fenoxybenzamin	B-23
13251	fentolamin	B-23
13252	polythiazid	B-23
13253	prazosin	B-23
13254	propranolol	B-23
13255	quinapril	B-23
13256	ramipril	B-23
13257	reserpin	B-23
13258	spironolakton	B-23
13259	terazosin	B-23
13260	trandolapril	B-23
13261	triameteren	B-23
13262	trimethaphan	B-23
13263	valsartan	B-23
13264 '	verapamil	B-23
13265	amilorid	B-24
13266	amlodipin	B-24
13267	benazepril	B-24
13268	bumetanid	B-24
13269	candesartan cilexetil	B-24
13270	captopril	B-24

141

13271	carvedilol	B-24
13272	chlorothiazid	B-24
13273	chlorthalidon	B-24
13274	clonidin	B-24
13275	delodipin	B-24
13276	diazoxid	B-24
13277	diltiazem	B-24
13278	doxazosin	B-24
13279	enalapril	B-24
13280	eplerenon	B-24
13281	ethakrynová kyselina	B-24
13282	fosinopril	B-24
13283	furosemid	B-24
13284	guanabenz	B-24
13285	guanadrel	B-24
13286	guanethidin	B-24
13287	guanfacin	B-24
13288	hydralazin	B-24
13289	hydrochlorothiazid	B-24
13290	inbesartan	B-24
13291	isradipin	B-24
13292	labetalol	B-24
13293	lisinopril	B-24
13294	losartan	B-24
13295	methyldopa	B-24
13296	methyldopát	B-24
13297	metoprolol	B-24
13298	minoxidil	B-24
13299	moesipril	B-24
13300	nicardipin	B-24
13301	nifedipin	B-24
13302	nimodipin	B-24
13303	nitroprusid	B-24
13304	perindopril erbumin	B-24
13305	fenoxybenzamin	B-24
13306	fentolamin	B-24
13307	polythiazid	B-24
13308	prazosin	B-24
13309	propranolol	B-24
13310	quinapril	B-24
13311	ramipril	B-24
13312	reserpin	B-24
13313	spironolakton	B-24
13314	terazosin	B-24
13315	trandolapril	B-24
13316	triameteren	B-24
13317	trimethaphan	B-24
13318	valsartan	B-24
13319	verapamil	B-24

♦ ·

142

13320	amilorid	B-25
13321	amlodipin	B-25
13322	benazepril	B-25
13323	bumetanid	B-25
13324	candesartan cilexetil	B-25
13325	captopril	B-25
13326	carvedilol	B-25
13327	chlorothiazid	B-25
13328	chlorthalidon	B-25
13329	clonidin	B-25
13330	delodipin	B-25
13331	diazoxid	B-25
13332	diltiazem	B-25
13333	doxazosin	B-25
13334	enalapril	B-25
13335	eplerenon	B-25
13336	ethakrynová kyselina	B-25
13337	fosinopril	B-25
13338	furosemid	B-25
13339	guanabenz	B-25
13340	guanadrel	B-25
13341	guanethidin	B-25
13342	guanfacin	B-25
13343	hydralazin	B-25
13344	hydrochlorothiazid	B-25
13345	inbesartan	B-25
1334 6	isradipin	B-25
13347	labetalol	B-25
13348	lisinopril	B-25
13349	losartan	B-25
13350	methyldopa	B-25
13351	methyldopát	B-25
13352	metoprolol	B-25
13353	minoxidil	B-25
13354	moesipril	B-25
13355	nicardipin	B-25
13356	nifedipin	B-25
13357	nimodipin	B-25
13358	nitroprusid	B-25
13359	perindopril erbumin	B-25
13360	fenoxybenzamin	B-25
13361	fentolamin	B-25
13362	polythiazid	B-25
13363	prazosin	B-25
13364	propranolol	B-25
13365	quinapril	B-25
13366	ramipril	B-25
13367	reserpin	B-25
13368	spironolakton	B-25

143 • · · · · · · ·· ··· »·· ··· 99 9

13369	terazosin	B-25
13370	trandolapril	B-25
13371	triameteren	B-25
13372	trimethaphan	B-25
13373	valsartan	B-25
13374	verapamil	B-25
13375	amilorid	B-26
13376	amlodipin	B-26
13377	benazepril	B-26
13378	bumetanid	B-26
13379	candesartan cilexetil	B-26
13380	captopril	B-26
13381	carvedilol	B-26
13382	chlorothiazid	B-26
13383	chlorthalidon	B-26
13384	clonidin	B-26
13385	delodipin	B-26
13386	diazoxid	B-26
13387	diltiazem	B-26
13388	doxazosin	B-26
13389	enalapril	B-26
13390	eplerenon	B-26
13391	ethakrynová kyselina	B-26
13392	fosinopril	B-26
13393	furosemid	B-26
13394	guanabenz	B-26
13395	guanadrel	B-26
13396	guanethidin	B-26
13397	guanfacin	B-26
13398	hydralazin	B-2 6
13399	hydrochlorothiazid	B-26
13400	inbesartan	B-26
13401	isradipin	B-26
13402	labetalol	B-26
13403	lisinopril	B-26
13404	losartan	B-26
13405	methyldopa	B-26
13406	methyldopát	B-26
13407	metoprolol	B-26
13408	minoxidil	B-26
13409	moesipril	B-26
13410	nicardipin	B-2 6
13411	nifedipin	B-26
13412	nimodipin	B-2 6
13413	nitroprusid	B-26
13414	perindopril erbumin	B-2 6
13415	fenoxybenzamin	B-26
13416	fentolamin	B-2 6
13417	polythiazid	B-2 6

• 4

13418	prazosin	B-26
13419	propranolol	B-26
13420	quinapril	B-26
13421	ramipril	B-26
13422	reserpin	B-26
13423	spironolakton	B-2 6
13424	terazosin	B-26
13425	trandolapril	B-26
13426	triameteren	B-26
13427	trimethaphan	B-26
13428	valsartan	B-26
13429	verapamil	B-26
13430	amilorid	B-27
13431	amlodipin	B-27
13432	benazepril	B-27
13433	bumetanid	B-27
13434	candesartan cilexetil	B-27
13435	captopril	B-27
13436	carvedilol	' B-27
13437	chlorothiazid	B-27
13438	chlorthalidon	B-27
13439	clonidin	B-27
13440	delodipin	B-27.
13441	diazoxid	B-27
13442	diltiazem	B-27
13443	doxazosin	B-27
13444	enalapril	B-27
13445	eplerenon	B-27
13446	ethakrynová kyselina	B-27
13447	fosinopril	B-27
13448	furosemid	B-27
13449	guanabenz	B-27
13450	guanadrel	B-27
13451	guanethidin	B-27
13452	guanfacin	B-27
13453	hydralazin	B-27
13454	hydrochlorothiazid	B-27
13455	inbesartan	B-27
13456	isradipin	B-27
13457	labetalol	B-27
13458	lisinopril	B-27
13459	losartan	B-27
13460	methyldopa	B-27
13461	methyldopát	B-27
13462	metoprolol	B-27
13463	minoxidil	B-27
13464	moesipril	B-27
13465	nicardipin	B-27
13466	nifedipin	B-27

145 ® 9

13467	nimodipin	B-27
13468	nitroprusid	B-27
13469	perindopril erbumin	B-27
13470	fenoxybenzamin	B-27
13471	fentolamin	B-27
13472	polythiazid	B-27
13473	prazosin	B-27
13474	propranolol	B-27
13475	quinapril	B-27
13476	ramipril	B-27
13477	reserpin	B-27
13478	spironolakton	B-27
13479	terazosin	B-27
13480	trandolapril	B-27
13481	triameteren	B-27
13482	trimethaphan	B-27
13483	valsartan	B-27
13484	verapamil	B-27
13485	amilorid	B-28
13486	amlodipin	B-28
13487	benazepril	B-28
13488	bumetanid	B-28
13489	candesartan cilexetil	B-28
13490	captopril	B-28
13491	carvedilol	B-28
13492	chlorothiazid	B-2 8
13493	chlorthalidon	B-28
13494	clonidin	B-28
13495	delodipin	B-28
13496	diazoxid	B-28
13497	diltiazem	B-28
13498	doxazosin	B-28
13499	enalapril	B-28
13500	eplerenon	B-28
13501	ethakrynová kyselina	B-28
13502	fosinopril	B-28
13503	furosemid	B-28
13504	guanabenz	B-28
13505	guanadrel	B-28
13506	guanethidin	B-28
13507	guanfacin	B-28
13508	hydralazin	B-28
13509	hydrochlorothiazid	B-28
13510	inbesartan	B-28
13511	isradipin	B-28
13512	labetalol	B-28
13513	lisinopril	B-28
13514	losartan	B-28
13515	methyldopa	B-28

146 ·

13516	methyldopát	B-28
13517	metoprolol	B-28
13518	minoxidil	B-28
13519	moesipril	B-28
13520	nicardipin	B-28
13521	nifedipin	B-28
13522	nimodipin	B-28
13523	nitroprusid	B-28
13524	perindopril erbumin	B-28
13525	fenoxybenzamin	B-28
13526	fentolamin	B-28
13527	polythiazid	B-28
13528	prazosin	B-28
13529	propranolol	B-28
13530	quinapril	B-28
13531	ramipril	B-28
13532	reserpin	B-28
13533	spironolakton	B-28
13534	terazosin	B-28
13535	trandolapril	B-28
13536	triameteren	B-28
13537	trimethaphan	B-28
13538	valsartan	B-28
13539	verapamil	B-28
13540	amilorid	B-29
13541	amlodipin	B-29
13542	benazepril	B-29
13543	bumetanid	B-29
13544	candesartan cilexetil	B-29
13545	captopril	B-29
13546	carvedilol	B-29
13547	chlorothiazid	B-29
13548	chlorthalidon	B-29
13549	clonidin	B-29
13550	delodipin	B-29
'13551	diazoxid	B-29
13552	diltiazem	B-29
13553	doxazosin	B-29
13554	enalapril	B-29
13555	eplerenon	B-29
13556	ethakrynová kyselina	B-29
13557	fosinopril	B-29
13558	furosemid	B-29
13559	guanabenz	B-29
13560	guanadrel	B-29
13561	guanethidin	B-29
13562	guanfacin	B-29
13563	hydralazin	B-29
13564	hydrochlorothiazid	B-29

• ·

147 : : :

• 9 « • · · · ·

13565	inbesartan	B-29
13566	isradipin	B-29
13567.	labetalol	B-29
13568	lisinopril	B-29
13569	losartan	B-29
13570	methyldopa	B-29
13571	methyldopát	B-29
13572	metoprolol	B-29
13573	minoxidil	B-29
13574	moesipril	B-29
13575	nicardipin	B-29
13576	nifedipin	B-29
13577	nimodipin	B-29
13578	nitroprusid	B-29
13579	perindopril erbumin	B-29
13580	fenoxybenzamin	B-29
13581	fentolamin	B-29
13582	polythiazid	B-29
13583	prazosin	B-29
13584	propranolol	B-29
13585	quinapril	B-29
13586	ramipril	B-29
13587	reserpin	B-29
13588	spironolakton	B-29
13589	terazosin	B-29
13590	trandolapril	B-2 9
13591	triameteren	B-29
13592	trimethaphan	B-29
13593	valsartan	B-29
13594	verapamil	B-29
13595	amilorid	B-30
13596	amlodipin	B-30
13597	benazepril	B-30
13598	bumetanid	B-30
13599	candesartan cilexetil	B-30
13600	captopril	B-30
13601	carvedilol	B-30
13602	chlorothiazid	B-30
13603	chlorthalidon	B-30
13604	clonidin	B-30
13605	delodipin	B-30
13606	diazoxid	B-30
13607	diltiazem	B-30
13608	doxazosin	B-30
13609	enalapril	B-30
13610	eplerenon	B-30
13611	ethakrynová kyselina	B-30
13612	fosinopril	B-30
13613	furosemid	B-30

148 • « « · · · · • · ·♦ · · · · ·· » · ♦ ·

13614	guanabenz	B-30
13615	guanadrel	B-30
13616	guanethidin	B-30
13617	guanfacin	B-30
13618	hydralazin	B-30
13619	hydrochlorothiazid	B-30
13620	inbesartan	B-30
13621	isradipin	B-30
13622	labetalol	B-30
13623	lisinopril	B-30
13624	losartan	B-30
13625	methyldopa	B-30
13626	methyldopát	B-30
13627	metoprolol	B-30
13628	minoxidil	B-30
13629	moesipril	B-30
13630	nicardipin	B-30
13631	nifedipin	B-30
13632	nimodipin	B-30
13633	nitroprusid	B-30
13634	perindopril erbumin	B-30
13635	fenoxybenzamin	B-30
13636	fentolamin	B-30
13637	polythiazid	B-30
13638	prazosin	B-30
13639	propranolol	B-30
13640	quinapril	B-30
13641	ramipril	B-30
13642	reserpin	B-30
13643	špironolakton	B-30
13644	terazosin	B-30
13645	trandolapril	B-30
13646	triameteren	B-30
13647	trimethaphan	B-30
13648	valsartan	B-30
13649	verapamil	B-30
13650	amilorid	B-31
13651	amlodipin	B-31
13652	benazepril	B-31
13653	bumetanid	B-31
13654	candesartan cilexetil	B-31
13655	captopril	B-31
13656	carvedilol	B-31
13657	chlorothiazid	B-31
13658	chlorthalidon	B-31
13659	clonidin	B-31
13660	delodipin	B-31
13661	diazoxid	B-31
13662	diltiazem	B-31

149 «· · · · ·· • · β ♦ ·· · · ♦ »· • · · · · ·· · ♦ · · · ♦ 9· • · · 9 · ·*

9« ··· ··· · · * *·9

13663	doxazosin	B-31
13664	enalapril	B-31
13665	eplerenon	B-31
13666	ethakrynová kyselina	B-31
13667	fosinopril	B-31
13668	furosemid	B-31
13669	guanabenz	B-31
13670	guanadrel	B-31
13671	guanethidin	B-31
13672	guanfacin	B-31
13673	' hydralazin	B-31
13674	hydrochlorothiazid	B-31
13675	inbesartan	B-31
13676	isradipin	B-31
13677	labetalol	B-31
13678	lisinopril	B-31
13679	losartan	B-31
13680	methyldopa	B-31
13681	methyldopát	B-31
13682	metoprolol	B-31
13683	minoxidil	B-31
13684	moesipril	B-31
13685	nicardipin	B-31
13686	nifedipin	B-31
13687	nimodipin	B-31
13688	nitroprusid	B-31
13689	perindopril erbumin	B-31
13690	fenoxybenzamin	B-31
13691	fentolamin	B-31
13692	polythiazid	B-31
13693	prazosin	B-31
13694	propranolol	B-31
13695	quinapril	B-31
13696	ramipril	B-31
13697	reserpin	B-31
13698	spironolakton	B-31
13699	terazosin	B-31
13700	trandolapril	B-31
13701	triameteren	B-31
13702	trimethaphan	B-31
13703	valsartan	B-31
13704	verapamil	B-31
13705	amilorid	B-32
13706	amlodipin	B-32
13707	benazepril	B-32
13708	bumetanid	B-32
13709	candesartan cilexetil	B-32
13710	captopril	B-32
13711	carvedilol	B-32

150

13712	chlorothiazid	B-32
13713	chlorthalidon	B-32
13714	clonidin	B-32
13715	delodipin	B-32
13716	diazoxid	B-32
13717	diltiazem	B-32
13718	doxazosin	B-32
13719	enalapril	B-32
13720	eplerenon	B-32
13721	ethakrynová kyselina	B-32
13722	fosinopril	B-32
13723	furosemid	B-32
13724	guanabenz	B-32
13725	guanadrel	B-32
13726	guanethidin	B-32
13727	guanfacin	B-32
13728	hydralazin	B-32
13729	hydrochlorothiazid	B-32
13730	inbesartan	B-32
13731	isradipin	B-32
13732	labetalol	B-32
13733	lisinopril	B-32
13734	losartan	B-32
13735	methyldopa	B-32
13736	methyldopát	B-32
13737	metoprolol	B-32
13738	minoxidil	B-32
13739	moesipril	B-32
13740	nicardipin	B-32
13741	nifedipin	B-32
13742	nimodipin	B-32
13743	nitroprusid	B-32
13744	perindopril erbumin	B-32
13745	fenoxybenzamin	B-32
13746	fentolamin	B-32
13747	polythiazid	B-32
13748	prazosin	B-32
13749	propranolol	B-32
13750	quinapril	B-32
13751	ramipril	B-32
13752	reserpin	B-32
13753	spironolakton	B-32
13754	terazosin	B-32
13755	trandolapril	B-32
13756	triameteren	B-32
13757	trimethaphan	B-32
13758	valsartan	B-32
13759	verapam.il	B-32
13760	amilorid	B-33

• · ·«

151

13761	amlodipin	B-33
13762	benazepril	B-33
13763	' bumetanid	B-33
13764	candesartan cilexetil	B-33
13765	captopril	B-33
13766	carvedilol	B-33
13767	chlorothiazid	B-33
13768	chlorthalidon	B-33
13769	clonidin	B-33
13770	delodipin	B-33
13771	diazoxid	B-33
13772	diltiazem	B-33
13773	doxazosin	B-33
13774	enalapril	B-33
13775	eplerenon	B-33
13776	ethakrynová kyselina	B-33
13777	fosinopril	B-33
13778	furosemid	B-33
13779	guanabenz	B-33
13780	guanadrel	B-33
13781	guanethidin	B-33
13782	guanfacin	B-33
13783	hydralazin	B-33
13784	hydrochlorothiazid	B-33
13785	inbesartan	B-33
13786	isradipin	B-33
13787	labetalol	B-33
13788	lisinopril	B-33
13789	losartan	B-33
13790	methyldopa	B-33
13791	methyldopát	B-33
13792	metoprolol	B-33
13793	minoxidil	B-33
13794	moesipril	B-33
13795	nicardipin	B-33
13796	nifedipin	B-33
13797	nimodipin	B-33
13798	nitroprusid	B-33
13799	perindopril erbumin	B-33
13800	fenoxybenzamin	B-33
13801	fentolamin	B-33
13802	polythiazid	B-33
13803	prazosin	B-33
13804	propranolol	B-33
13805	quinapril	B-33
13806	ramipril	B-33
13807	reserpin	B-33
13808	spironolakton	B-33
13809	terazosin	B-33

152

9*

13810	trandolapril	B-33
13811	triameteren	B-33
13812	trimethaphan	B-33
13813	valsartan	B-33
13814	verapamil	B-33
13815	amilorid	B-35
13816	amlodipin	B-35
13817	benazepril	B-35
13818	bumetanid	B-35
13819	candesartan cilexetil	B-35
13820	captopril	B-35
13821	carvedilol	B-35
13822	chlorothiazid	B-35
13823	chlorthalidon	B-35
13824	clonidin	B-35
13825	delodipin	B-35
13826	diazoxid	B-35
13827	diltiazem	B-35
13828	doxazosin	B-35
13829'	enalapril	B-35
13830	eplerenon	B-35
13831	ethakrynová kyselina	B-35
13832	fosinopril	B-35
13833	furosemid	B-35
13834	guanabenz	B-35
13835	guanadrel	B-35
13836	guanethidin	B-35
13837	guanfacin	B-35
13838	hydralazin	B-35
13839	hydrochlorothiazid	B-35
13840	inbesartan	B-35
13841	isradipin	B-35
13842	labetalol	B-35
13843	lisinopril	B-35
13844	losartan	B-35
13845	methyldopa	B-35
13846	methyldopát	B-35
13847	metoprolol	B-35
13848	minoxidil	B-35
13849	moesipril	B-35
13850	nicardipin	B-35
13851	nifedipin	B-35
13852	nimodipin	B-35
13853	nitroprussid	B-35
13854	perindopril erbumin	B-35
13855	fenoxybenzamin	B-35
13856	fentolamin	B-35
13857	polythiazid	B-35
13858	prazosin	B-35

153

13859	propranolol	B-35
13860	quinapril	B-35
13861	ramipril	B-35
13862	reserpin	B-35
13863	spironolakton	B-35
13864	terazosin	B-35
13865	trandolapril	B-35
13866	triameteren	B-35
13867	trimethaphan	B-35
13868	valsartan	B-35
13869	verapamil	B-35
13870	amilorid	B-36
13871	amlodipin	B-36
13872	benazepril	B-36
13873	bumetanid	B-36
13874	candesartan cilexetil	B-36
13875	captopril	B-36
13876	carvedilol	B-36
13877	chlorothiazid	B-36
13878	chlorthalidon	B-36
13879	clonidin	B-36
13880	delodipin	B-36
13881	diazoxid	B-36
13882	. diltiazem	B-36
13883	doxazosin	B-36
13884	enalapril	B-36
13885	eplerenon	B-36
13886	ethakrynová kyselina	B-36
13887	fosinopril	B-36
13888	furosemid	B-36
13889	guanabenz	B-36
13890	guanadrel	B-36
13891	guanethidin	B-36
13892	guanfacin	B-36
13893	hydralazin	B-36
13894	hydrochlorothiazid	B-36
13895	inbesartan	B-36
13896	isradipin	B-36
13897	labetalol	B-36
13898	lisinopril	B-36
13899	losartan	B-36
13900	methyldopa	B-36
13901	methyldopát	B-36
13902	metoprolol	B-36
13903	minoxidil	B-36
13904	moesipril	B-36
13905	nicardipin	B-36
13906	nifedipin	B-36
13907	nimodipin	B-36

154

13908	nitroprusid	B-36
13909	perindopril erbumin	B-36
13910	fenoxybenzamin	B-36
13911	fentolamin	B-36
13912	polythiazid	B-36
13913	prazosin	B-36
13914	propranolol	B-36
13915	quinapril	B-36
13916	ramipril	B-36
13917	reserpin	B-36
13918	spironolakton	B-36
13919	terazosin	B-36
13920	trandolapril	B-36
13921	triameteren	B-36
13922	trimethaphan	B-36
13923	valsartan	B-36
13924	verapamil	B-36
13925	amilorid	B-37
•13926	amlodipin	B-37
13927	benazepril	B-37
13928	bumetanid	B-37
13929	candesartan cilexetil	B-37
13930	captopril	B-37
13931	carvedilol	B-37
13932	chlorothiazid	B-37
13933	chlorthalidon	B-37
13934	clonidin	B-37
13935	delodipin	B-37
13936	diazoxid	B-37
13937	diltiazem	B-37
13938	doxazosin	B-37
13939	enalapril	B-37
13940	eplerenon	B-37
13941	ethakrynová kyselina	B-37
13942	fosinopril	B-37
13943	furosemid	B-37
13944	guanabenz	B-37
13945	guanadrel	B-37
13946	guanethidin	B-37
13947	guanfacin	B-37
13948	hydralazin	B-37
13949	hydrochlorothiazid	B-37
13950	inbesartan	B-37
13951	isradipin	B-37
13952	labetalol	B-37
13953	lisinopril	B-37
13954	losartan	B-37
13955	methyldopa	B-37
13956	methyldopát	B-37

155

13957	metoprolol	B-37
13958	minoxidil	B-37
13959	moesipril	B-37
13960	nicardipin	B-37
13961	nifedipin	B-37
13962	nimodipin	B-37
13963	nitroprusid	B-37
13964	perindopril erbumin	B-37
13965	fenoxybenzamin	B-37
13966	fentolamin	B-37
13967	polythiazid	B-37
13968	prazosin	B-37
13969	propranolol	B-37
13970	quinapril	B-37
13971	ramipril	B-37
13972	reserpin	B-37
13973	spironolakton	B-37
13974	terazosin	B-37
13975	trandolapril	B-37
13976	triameteren	B-37
13977	trimethaphan	B-37
13978	valsartan	B-37
13979	verapamil	B-37
13980	amilorid	B-38
13981	amlodipin	B-38
13982	benazepril	B-38
13983	bumetanid	B-38
13984	candesartan cilexetil	B-38
13985	captopril	B-38
13986	carvedilol	B-38
13987	chlorothiazid	B-38
13988	chlorthalidon	B-38
13989	clonidin	B-38
13990	delodipin	B-38
13991	diazoxid	B-38
13992	diltiazem	B-38
13993	doxazosin	B-38
13994	enalapril	B-38
13995	eplerenon	B-38
13996	ethakrynová kyselina	B-38
13997	fosinopril	B-38
13998	furosemid	B-38
13999	guanabenz	B-38
14000	guanadrel	B-38
14001	guanethidin	B-38
14002	guanfacin	B-38
14003	hydralazin	B-38
14004	hydrochlorothiazid	B-38
14005	inbesartan	B-38

» ·

156

14006	isradipin	B-38
14007	labetalol	B-38
14008	lisinopril	B-38
14009	losartan	B-38
14010	methyldopa	B-38
14011	methyldopát	B-38
14012	metoprolol	B-38
14013	minoxidil	B-38
14014	moesipril	B-38
14015	nicardipin	B-38
14016	nifedipin	B-38
14017	nimodipin	B-38
14018	nitroprusid	B-38
14019	perindopril erbumin	B-38
14020	fenoxybenzamin	B-38
14021	fentolamin	B-38
14022	polythiazid	B-38
14023	prazosin	B-38
14024	propranolol	B-38
14025	quinapril	B-38
14026	ramipril	B-38
14027	reserpin	B-38
14028	spironolakton	B-38
14029	terazosin	B-38
14030	trandolapril	B-38
14031	triameteren	B-38
14032	trimethaphan	B-38
14033	valsartan	B-38
14034	verapamil	B-38
14035	amilorid	B-38
14036	amlodipin	B-38
14037	benazepril	B-38
14038	bumetanid	B-38
14039	candesartan cilexetil	B-38
14040	captopril	B-38
14041	carvedilol	B-38
14042	chlorothiazid	B-38
14043	chlorthalidon	B-39
14044	clonidin	B-39
14045	delodipin	B-39
14046	diazoxid	B-39
14047	diltiazem	B-39
14048	doxazosin	B-39
14049	enalapril	B-39
14050	eplerenon	B-39
14051	ethakrynová kyselina	B-39
14052	fosinopril	B-39
14053	furosemid	B-39
14054	guanabenz	B-39

157 <· · • *·· • ·« • *» • ♦·

14055	guanadrel	B-39
14056	guanethidin	B-39
14057	guanfacin	B-39
14058	hydralazin	B-39
14059	hydrochlorothiazid	B-39
14060	inbesartan	B-39
14061	isradipin	B-39
14062	labetalol	B-39
14063	lisinopril	B-39
14064	losartan	B-39
14065	methyldopa	B-39
14066	methyldopát	B-39
14067	metoprolol	B-39
14068	minoxidil	B-39
14069	moesipril	B-39
14070	nicardipin	B-39
14071	nifedipin	B-39
14072	nimodipin	B-39
14073	nitroprusid	B-39
14074	perindopril erbumin	B-39
14075	fenoxybenzamin	B-39
14076	fentolamin	B-39
14077	polythiazid	B-39
14078	prazosin	B-39
14079	propranolol	B-39
14080	quinapril	B-39
14081	ramipril	B-39
14082	reserpin	B-39
14083	spironolakton	B-39
14084	terazosin	B-39
14085	trandolapril	B-39
14086	triameteren	B-39
14087	trimethaphan	B-39
14088	valsartan	B-39
14089	verapamil	B-39

158

9» 4 · · '»·· « · ·· ·· »· · *·· • · ¥ · · » ·· ·*·« · · ♦ · ·· ·«· ····· 4« ··· ··· ··· *·*··

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje způsob profylaxe nebo léčby hyperlipidemického stavu nebo choroby u savce, který zahrnuje podání prvního inhibitoru transportu ileální kyseliny žlučové a druhého množství mikrosomálního triglyceridového transferního inhibitoru, kde první a druhé množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství sloučenin.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje způsob profylaxe nebo léčby hyperlipidemického stavu nebo choroby u savce, který zahrnuje podání prvního inhibitoru transportu ileální kyseliny žlučové a druhého množství antagonistu absorpce cholesterolu, kde první a druhé množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství sloučenin.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje způsob profylaxe nebo léčby hyperlipidemického stavu nebo choroby u savce, který zahrnuje podání prvního inhibitoru transportu ileální kyseliny žlučové a druhého množství antihypertenzivní sloučeniny, kde první a druhé množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství sloučenin.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje způsob profylaxe nebo léčby hyperlipidemického stavu nebo choroby u savce, který zahrnuje podání prvního inhibitoru transportu ileální kyseliny žlučové a druhého množství fytosterolové sloučeniny, kde první a druhé množství uvedených látek dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství sloučenin.

159

··· ··· · · ···

V dalším provedeni předkládaný vynález poskytuje soupravu pro dosaženi terapeutického účinku u savce, obsahující množství inhibitoru transportu ileální kyseliny žlučové v první jednotkové dávkové formě; a množství mikrosomálního triglyceridového transferního proteinu v druhé jednotkové dávkové formě; a zásobní prostředky pro uvedené první a druhé jednotkové dávkové formy.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje soupravu pro dosažení terapeutického účinku u savce, obsahující množství inhibitoru transportu ileální kyseliny žlučové v první jednotkové dávkové formě; a množství antagonistu absorpce cholesterolu v druhé jednotkové dávkové formě; a zásobní prostředky pro uvedené první a druhé jednotkové dávkové formy.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje soupravu pro dosažení terapeutického účinku u savce, obsahující množství inhibitoru transportu ileální kyseliny žlučové v první jednotkové dávkové formě; a množství antihypertenzivní sloučeniny v druhé jednotkové dávkové formě; a zásobní prostředky pro uvedené první a druhé jednotkové dávkové formy.

V dalším provedení předkládaný vynález poskytuje soupravu pro dosažení terapeutického účinku u savce, obsahující množství inhibitoru transportu ileální kyseliny žlučové v první jednotkové dávkové formě; a množství fytosterolové sloučeniny v druhé jednotkové dávkové formě; a zásobní prostředky pro uvedené první a druhé jednotkové dávkové formy. Výhodně je fytosterolová sloučenina stanol.

Biologické testy

Užitečnost kombinací podle vynálezu je ukázána v následujících testech. Tyto testy jsou prováděny in vitro a

160 ·· ··· 9·· ··· ·· na zvířecích modelech hlavně využívající postupy určené k ukázání užitečnost sloučenin podle vynálezu.

In vitro test sloučenin, které inhibují IBAT-zprostředkované vstřebávání (¹⁴C)-taurocholátu (TC) H14 buňkami

Buňky ledvin mladých křečků transfektované cDNA lidských IBAT (H14 buňky) jsou naočkovány v počtu 60 000 buněk na jamku do 96 jamkových Top-Count destiček tkáňových kultur pro testy prováděné 24 hodin po naočkování, 30 000 buněk na jamku pro testy prováděny během 48 hodin a 10 000 buněk na jamku pro testy prováděné během 72 hodin.

V den testu se monovrstva buněk jemně promyje jednou 100 μΐ testovacího pufru (Dulbeccovo Modifikované Eagleovo médium s 4,5 g na litr glukózy + 0,2 % (hmotn./obj.) albuminu z hovězího séra prostého mastných kyselin (FAF)BSA). Do každé jamky se přidá 50 μΐ dvojnásobného koncentrátu testované sloučeniny v testovacím pufru a 50 μΐ 6 mM (¹⁴C)-taurocholátu v testovacím pufru (konečná koncentrace (¹⁴C)-taurocholátu je 3 mM) . Buněčné kultury jsou inkubovány dvě hodiny při teplotě 37 °C, potom se každá jamka dvakrát jemně promyje 100 μΐ Dulbeccova fosfátového fyziologického roztoku (PBS) vychlazeným na teplotu 4 °C, obsahujícím 0,2 %, (hmotn./obj.) (FAF)BSA. Jamky jsou potom jemně promyty jedenkrát 100 μΐ PBS o teplotě 4 °C bez (FAF)BSA. Do každé jamky se přidá 200 μΐ tekutého scintilačního média, plotny jsou tepelně uzavřeny a míchány po dobu 30 minut při teplotě místnosti a potom se měří množství radioaktivity v každé jamce s využitím přístroje Packard Top-Count.

In vitro test sloučenin, které inhibují vstřebávání (¹⁴C)alaninu • ·

161 · ·

Test pro vstřebáváni alaninu je prováděn stejným způsobem jako taurocholátový test, s výjimkou, že označený taurocholát nahrazuje označený alanin.

In vivo test sloučenin, které u krys inhibuji ileálni vstřebáváni (¹⁴C)-taurocholátu do žluči (viz. „Meatabolism of 3a, 7p-dihydroxy-7oc-methyl-5pcholanoic acid and 3a, 73-dihydroxy-7a-metyl-53~cholanoic acid in hamsters in Biochimica et Biophysica Acta 833 (1985) 196.202 by Une a kol.)

Samci krys wistar (200-300 g) jsou podrobeny anestézii látkou inactin 100 mg/kg. Do žlučovodů se zavede kanyla PE10, délka 25,4 cm. Tenké střevo je vyjmuto a položeno na gázovou podložku. Kanyla (3,2 mm uzávěr, kuželovitý vnější adaptor) je vložena 12 cm od spojení tenkého střeva se slepým střevem. Řez je veden 4 cm od toho stejného spoje (využívá se 8 cm střeva). Střevní segment se propláchne 20 ml teplého Dulbeccova fosfátového pufrovaného solného roztoku (PBS), pH 6,5. Do distálního otevření je zavedena kanyla se silikonovou trubičkou o délce 20 cm (0,02 I.D. x 0,037 O.D.). Proximální kanyla je připojena k peristaltické pumpě a střevo se promývá 20 minut teplým PBS průtokem 0,25 ml/min. Teplota střevního segmentu se kontinuálně monitoruje. Na začátku experimentu se do střevního segmentu nadávkují 2,0 ml kontrolního vzorku ( (¹⁴C)-taurocholátu @ 0,05 mCi/ml s 5 mM studeným taurocholátem) injekční stříkačkou o obsahu 3 ml a začnou se odebírat vzorky žluči. Kontrolní vzorek se zavádí infúzí rychlostí 0,25 ml/min po dobu 21 minut. Vzorky frakcí žluči jsou odebírány každé tři minuty po dobu prvních 27 minut procedury. Po 21 minutách infúze vzorku se ileálni smyčka vymyje 20 ml teplého PBS (s použitím stříkačky 30 ml), potom se smyčka promývá 21 minut teplým PBS průtokem 0,25 ml/min. Druhá perfuze se provede způsobem uvedeným výše, ale tentokrát • ·

162 s testovanou sloučeninou, která je podávána společně (21 minut podávání následované 21 minutou promývání) , a odebírají se vzorky žluči každé 3 minuty po dobu prvních 27 minut. Pokud je to nutné, provede se třetí perfuze stejným způsobem, ta obvykle obsahuje kontrolní vzorek.

Měření koncentrace jaterního cholesterolu (HEPATIC CHOL)

Jaterní tkáň se zváží a zhomogenizuje ve směsi chlorform:metanol (2:1). Po homogenizaci a odstředění se supernatant oddělí a pod proudem dusíku se suší. Zbytek se rozpustí izopropanolu a obsah cholesterolu se stanoví enzymaticky s využitím kombinace cholesteroloxidázy a peroxidázy, viz. Allain, C. A., a kol. (1974) Clin. Chem. 20, 470.

Stanovení sérového cholesterolu (SER. CHOL., HDL-CHOL, TGI a VLDL + LDL)

Celkový sérový cholesterol (SER. CHOL.) se stanovuje enzymaticky s využitím komerční soupravy od firmy Wako Fine Chemicals (Richmond, VA); Cholesterol Cil, č. katalogu 27664909. HDL cholesterol (HDL-CHOL) se stanovuje použitím stejné soupravy po vysrážení VLDL a LDL s reagéntem Sigma Chemical Co. HDL Cholesterol katalog č. 352-3 (dextransulfátová metoda). Celkové sérové triglyceridy (TGI) jsou stanoveny enzymaticky použitím Sigma Chemical Co. GPO-Trinder, katalog č. 337-B. VLDL a LDL (VLDL + LDL) cholesterolové koncentrace jsou vypočítány jako rozdíl mezi celkovým a HDL cholesterolem.

Stanovení jaterní cholesterol 7-cc-hydroxylázové aktivity (7aOHase)

163

Homogenizací jaterních vzorků v pufru fosfát/sacharóza a následným odstředěním se získají jaterní mikrozómy. Konečný peletovaný materiál se resuspenduje v pufru a alikvot se testuje na cholesterol 7-oc-hydroxylázovou aktivitu, inkubací 5 minut při teplotě 37 °C v přítomnosti NADPH. Suspenze se potom extrahuje petroletherem, organické rozpouštědlo se odpaří a zbytek se znovu rozpustí ve směsi acetonitril/metanol. Enzymatický produkt se separuje injekcí alikvotu extraktu do Cl8 HPLC kolony s obrácenými fázemi a měří se eluovaný materiál za použití UV detekce při '240 nm. (viz. Horton, J. D., a kol. (1994) J. Clin. Invest. 93, 2084).

Zkouška na výživu žaludeční sondou u krys

Samcům krys Wistar (275-300 g) se podávají inhibitory IBAT za použití žaludeční sondy. Léčivo nebo vehikulum (0,2% TWEEN 80 ve vodě) se podává jednou denně (9,00 až 10,00 dopoledne) po dobu 4 dnů v různých dávkách v celkovém objemu 2 ml na kg tělesné hmotnosti (TWEEN 80 je 20 molární polyethylenoxidsorbitanmonooleátová povrchově aktivní látka, vyráběná ICI Speciality Chemicals, Wilmington, Delaware, USA) . Vzorky fekálií se sbírají během posledních 48 hodin léčebné periody a analyzují se na obsah žlučových kyselin, za použití enzymové zkoušky popsané dále. Účinnost sloučenin se stanoví porovnáním zvýšení koncentrací žlučových kyselin (FBA) u léčených krys k středním koncentracím FBA krys, které dostávaly vehikulum.

Stanovení koncentrace fekálních žlučových kyselin u krys (FBA)

Fekálie samostatně chovaných krys se sbíraly každých 24 nebo 48 hodin, vysušily se pod proudem dusíku, rozdrtily se na prášek a zvážily. Bylo odváženo přibližně 0,1 g a extrahováno do organického rozpouštědla (butanol/voda). Po separaci a • ·

sušení byl zbytek rozpuštěn v metanolu a množství žlučových kyselin bylo stanovováno enzymaticky s využitím 3ahydroxysteroid steroid dehydrogenázy reakcí se žlučovými kyselinami redukujícími NAD. (viz. Mashige, F., a kol. (1981) Clin. Chem. 27, 1352).

Vstřebávání (³H)taurocholátu v králičích membránových vezikulech kartáčového lemu (BBMV)

Králičí ileální membrány kartáčového lemu byly připraveny ze zmrzlé ileální mukózy pomocí vápníkové precipitace popsané Malathi a kol. (Biochimica Biophysica Acta, 554, 259 (1979)). Metoda pro měření taurocholátu se v podstatě převzala z práce Kramer a kol. (Biochimica Biophysica Acta, 1111, 93 (1992)) mimoto, že bylo použito 200 μΐ testovaného vzorku místo uváděných 100 μΐ. Stručně, pří pokojové teplotě se 190 μΐ roztoku obsahujícího 2 μΜ (³H)taurocholátu (0,75 μθί), 20 mM tris, 100 mM NaCl, 100 mM manitol pH 7,4 inkubovalo 5 sekund s 10 μΐ membránových vezikulů kartáčového lemu (60-120 μς proteinu). Inkubace začala přídavkem BBMV za víření a reakce se ukončila přídavkem 5 ml ledem vychlazeného pufru (20 mM Hepes-tris, 150 mM KC1) a bezprostředně následovanou filtrací přes nylonový filtr (póry 0,2 μη) a dalším promytím 5 ml ukončovacího pufru.

Acyl-CoA; cholesterol acyl transferáza (ACAT)

Křeččí jaterní a krysí intenstinální mikrozómy byly připraveny z tkání postupem popsaným výše (J. Biol. Chem. 255, 9098, (1980)) a využily jako zdroj ACAT enzymu. Test se sestával z inkubace 2 ml obsahujících.24 μΜ Oleoyl-CoA (0,05 μCi) v 50 mM fosforečnanu sodném, 2 mM DTT pH 7,4 pufru obsahujícím 0,25 % BSA a 200 μρ mikrozomálního proteinu. Test

165 • · · · · · • · · · «·· ·· · byl inicializován přídavkem Oleoyl-CoA. Reakce probíhala 5 minut při 37 °C a byla ukončena přídavkem 8,0 ml směsi chloroform/metanol (2:1). K extrakci bylo přidáno 125 pg cholesterololeátu ve směsi chloroform/metanol jako nosiče,· organická a vodná fáze byly odděleny odstředěním emulze vzniklé intenzívním promícháváním vířením. Chloroformová fáze byla vysušena, nanesena na silikagelovou destičku 60 TLC a vyvolána ve směsi hexan/ethylether (9:1). Množství vytvořeného cholesterol esteru bylo kvantifikováno měřením množství radioaktivity zainkorporované do skvrny odpovídající cholesterololeátu na TLC destičce pomocí Packard Instaimager.

Hodnocení léčiv na snížení lipidů u psů

Samcům psů beagle, získaných z Marshallových farem o hmotnosti 6 až 12 kg se podává strava jednou denně po dobu dvou hodin, přičemž vodu mají k dispozici dle libosti. Psi se náhodně rozdělí do skupin obsahující 6 až 12 psů a dávkuje se: vehikulum i.g.; 1 mg/kg, i.g.; 2 mg/kg, i.g.; 4 mg/kg, i.g.; 2 mg/kg p.o. (prášek v kapsli). Intragastrická dávka terapeutického materiálu je rozpuštěna ve vodném roztoku (například 0,2% Tween 80 [polyoxyethylenmonooleát, Sigma Chemical Co., St. Lois, MO]) se může podat za použití žaludeční sondy. Před začátkem dávkování se odeberou ráno před podáním stravy z cefalické vény vzorky krve, aby se stanovila úroveň cholesterolu v séru (celkový a HDL) a triglyceridy. Po několik po sobě jdoucích dnů je ráno podána zvířatům před krmením dávka sloučeniny. Zvířata mají k dispozici potravu 2 hodiny. Po dobu 2 dnů kdy zkouška končí se sbírají výkaly, aby mohla být provedena analýza kyseliny žlučové a stanoven obsah lipidů. Ke konci léčebné periody se také odeberou vzorky krve k porovnání k úrovním lipidů před zkouškou. Statistická hodnota bude určena za použití standardního Studentova T-testu s p < 0,05.

• v

166 ·· ·*· ··· ··· ··

Měřeni obsahu lipidů v séru u psů

Krev se sebere z cefalické vény hladových psů do sérových separačnich zkumavek (Vacutainer SST, Becton Dickinson a Co., Franklin Lakes, NJ). Krev se odstřeďuje při 2000 ot./min po dobu 20 minut a sérum se dekantuje.

Celkový cholesterol se může měřit v 96 jamkové enzymatické diagnostické soupravě Wako (Cholesterol Cil) (Wako Chemicals, Richmond, VA) za využití cholesterol oxidázové reakce k produkci peroxidu vodíku, který se měří kolorimetricky. V prvních dvou sloupcích plotny se připraví standardní křivka od 0,5 do 10 pg cholesterolu. Do oddělených jamek se duplikátně přidají vzorky séra (20 až 40 μΐ, v závislosti na očekávané koncentraci lipidů) nebo vzorky kontrolního séra. Do každé jamky se přidá voda^-k doplnění objemu na 100 μΐ. Do každé jamky se přidá 100 pl alikvotu barviva a provede se odečet při 500 nm po 15 minutách inkubace při 37 °C.

HDL cholesterol se může zkoumat za použití soupravy Sigma č. 352-3 (Sigma Chemical Co., St Louis, MO), která využívá ke srážení LDL a VLDL dextransulfátu a iontů Mg. Do jednotlivých zkumavek se přidá 150 pl vzorku séra a poté 15 pl reakčního činidla na cholesterol HDL (Sigma 352-3). Vzorky se smísí a odstřeďují se při 5000 ot./min po dobu 5 minut. Potom se 50 μΐ alikvotu supernatantu smísí s 200 pl fyziologického roztoku a provede se analýza stejným způsobem jako při měření celkového cholesterolu.

Triglyceridy se měří za použití soupravy Sigma č. 337 v 96 jamkové plotně. Změří se glycerol uvolněný reakcí triglyceridů s lipoproteinovou lipázou. K získání standardní křivky se použijí standardní roztoky glycerolu (Sigma 339-11) v rozsahu 1 až 24 pg. Do každé jamky se duplikátně přidají vzorky séra (20 až 40 pl, v závislosti na očekávané koncentraci lipidů). K doplnění objemů jamky na 100 μΐ se přidá voda a potom 100 pl

167 «* « · ··· ···· · * ♦· ·* · • · · < · ·· • · · ► ♦ · ♦ «· • · · · ♦ ·· ·· ··· ··· *··♦· · barviva. Po smísení a 15 minutové inkubaci se hodnoty odečtou při 540 nm a ze standardní křivky se vypočtou triglyceridy. Pro případnou korekci na endogenní glycerol ve vzorcích séra se provede slepý pokus s enzymovým činidlem.

Měření kyseliny žlučové ve výkalech u psa

Za účelem měření koncentrací fekální žlučové kyseliny (FBA) se seberou od každého živočicha výkaly. Vzorky se odebírají během posledních 48 hodin pokusu po dvě po sobě jdoucí 24 hodinové periody mezi 9,00 a 10,00 dopoledne, před dávkováním a krmením. Oddělené dvoudenní odběry od každého zvířete se zváží, spojí a homogenizují se s destilovanou vodou v zařízení (Cuisinart) k vytvoření homogenní kaše. Přibližně 1,4 g homogenátu se extrahuje ve směsi 50% terciární butanol/destilovaná voda (2:0,6) po dobu 45 minut ve vodní lázni 37 °C a odstřeďuje se 13 minut při 2000 x g. Koncentrace žlučových kyselin (mol/den) se může stanovit za použití 96-jamkového enzymatického zkušebního systému (1,2).

μΐ alikvotu fekálního extraktu se přidá do dvou oddělených sad, přičemž každá obsahuje trojnásobné jamky v 96-jamkové plotně. Za účelem kontroly kvality zkoušky se provede analýza standardního taurocholátu sodného a standardního fekálního extrakčního roztoku (předem připraven ze spojených vzorků charakterizovaných koncentrací kyseliny žlučové). Dvacetimikrolitrové alikvoty taurochlorátu sodného, postupně ředěné k vytvoření standardní křivky se přidají ke dvěma sadám trojnásobných jamek. Do každé jamky se přidá 230 μΐ reakční směsi obsahující 1M hydrazinhydrát, 0,lM pyrofosforečnan a 0,46 mg/ml NAD. Potom se do jedné ze dvou sad trojnásobků přidá 50 μΐ alikvotu 3a-hydroxysteroidního dehydrogenázového enzymu (HSD; 0,8 jednotek/ml) nebo zkušební pufr (0,1 M pyrofosforečnan sodný). Všechny reakční složky se mohou získat od Sigma Chemical Co., St. Louis, MO. Po 60 minutách inkubace

168 ··· ··· ··· · * · při teplotě místnosti se měří optická hustota při 340 nm a vypočte se průměr každé sady trojnásobných vzorků. Rozdíl v optické hustotě ± HSD enzym se použije ke stanovení koncentrace kyseliny žlučové (mM) každého vzorku vzhledem ke standardní křivce taurocholátu sodného. Pro každé zvíře se použije koncentrace kyseliny žlučové v extraktu, hmotnost fekálního homogenátu (gramy) a tělesná hmotnost zvířete k výpočtu odpovídající koncentrace FBA v mmol/kg/den. Střední koncentrace FBA (mmol/kg/den) skupiny s vehikulem se odečte z koncentrací léčené skupiny, aby se stanovilo zvýšení (hodnota delta) v koncentraci FBA jako výsledek léčby.

Zmýdelnění a extrakce neutrálních sterolů ve výkalech křečků

Obecně, vzorek sušených zvířecích výkalů se přímo zmýdelňuje s 0,3N KOH/methanol po dobu 1 hodiny. Po zmýdelnění se vzorky filtrují, aby se odstranil pevný materiál. Vzorky se extrahují dvakrát petroletherem a extrakty se spojí a odpaří se do sucha zahříváním pod proudem dusíku. Vzorek se může analyzovat za použití Hewlett Packard Model 6890 GC s automatickým vzorkovačem, za použití 50 m HP-5 Ultra-2 kapilární kolony, 0,33 jxm tloušťky filmu, 0,32 ID, dělící poměr 100:1 a detektoru FID.

Pro přípravu zmýdelněného vzorku se 0,25 g sušených práškových výkalů přenese do značené 20 x 150 milimetrové zkumavky s šroubovým uzávěrem. Do zkumavek se přidají 3 ml 0,3 N KOH/MEOH (7,5 ml 8N (45%) KOH qs 200 ml s HPLC, methanol vysoké čistoty) a 25 mikrolitrů 20 mg/ml 5-alfa cholestanu jako vnitřního standardu. Trubky se těsně uzavřou a víří. Trubky se vloží do vyhřívaného bloku Reacti-Therm v digestoři a zahřívají se na 7 0 °C po dobu 1 hodiny za přerušovaného míchání.

Pro přípravu zmýdelněných standardů se každý standardní vzorek smísí s 3 mililitry 0,3N KOH/MROH a 25 mikrolitry 5• · φ « ·· ·· ·· ♦ ♦♦ • Φ Φ 4 · *·

ΖΆ · * ♦ ♦ · · Φ ··

169 · · · · ♦ «* · · ·· Φ * 4 ·· 4 · · · alfa cholestanu. Standardy se uzavřou, zahřívají se na 70 °C po dobu jedné hodiny a extrahují se. Standard 1 bude zahrnovat kombinaci 40 mikrolitrů 20 mg/ml zásobního roztoku stigmasterolu, coprostanolu a beta-sitosterolu. Standard 2 bude kombinací jednoho mikrolitrů 20 mg/ml cholesterolu (0,04 μυ/μΐ) a 5 mikrolitrů 20 mg/,1 sitostanolu (0,2 μg/μl).

Standard 3 bude kombinací 40 mikrolitrů 20 mg/ml cholesterolu (1,6 μg/μl) a 200 mikrolitrů 20 mg/ml sitostanolu (8,0 μg/μl).

Pro přípravu nezmýdelněných standardů se standardy pipetují do jednomililitrové V-lékovky a přidá se 25 mikrolitrů 5-alfa cholestanu. Standardy se odpaří do sucha ve vyhřívaném bloku Reacti-Therm , vyndají se z bloku a ochladí. Potom se přidá methylenchlorid (500 μΐ). Extrakty se smísí a filtrují přes filtry Whatman Anatop. Standard 1 bude zahrnovat kombinaci 40 mikrolitrů 20 mg/ml zásobního roztoku stigmasterolu, coprostanolu a beta-sitosterolu. Standard 2 bude zahrnovat kombinaci pěti mikrolitrů 20 mg/ml cholesterolu (0,2 μg/μl) a 25 mikrolitrů 20 mg/ml sitostanolu (1 μg/μl). Standard 3 bude zahrnovat kombinaci 20 mikrolitrů 20 mg/ml cholesterolu (0,8 μg/μl) a 100 mikrolitrů 20 mg/ml sitostanolu (4,0 μg/μl). Standard 4 bude zahrnovat kombinaci 80 mikrolitrů 20 mg/ml cholesterolu (3,2 μg/μl) a 30 mikrolitrů 20 mg/ml sitostanolu (12,0 μρ/μΐ).

Všechny zkumavky se odstraní ze zahřívacích bloků a ochladí se. Každý zmýdelněný vzorek a standard se filtruje přes filtrační zařízení Whatman Autovial Syingeless, 0,45 pm PTFE (Teflon) membránu. Každá zkumavka se promyje petroletherem, obsah se víří a spojí ve filtračním zařízení. Píst se vytlačí k sebrání vzorku do čisté 50 ml skleněné zkumavky. Ke každému vzorku v 50 ml zkumavce se přidá další petrolether (10 ml), společně se 2 ml vody. Každý vzorek se víří při mírné rychlosti (příliš rychlé míchání způsobí tvorbu emulze) po dobu 20 sekund. Po rozdělení vrstev se 2 x 7 ml ♦ ♦

17Π · * · · · · i/v ··· ··· ♦·· · petroletherové fáze odstraní a převede se do 16 x 125 milimetrové skleněné zkumavky. Vzorky se extrahují ještě jednou dalšími 10 ml petroletheru a 8 ml se odstraní a extrakty každého vzorku se spojí. Všechny zkumavky se odpaří do sucha pod proudem plynného dusíku při 70 °C. Zbytek každého vzorku se kvantitativně přenese do 1,5 ml skleněné lékovky za použití 3 x 0,5 ml petroletheru. Vzorky se opět odpaří do sucha. Po ochlazení lékovky na teplotu místnosti se přidá 500 mikrolitrů methylenchloridu. Všechny vzorky a standardy se filtrují přes Whatman Anotop 10 Plus (0,2gm, 10 mm) injekční filtry. Dostačující filtrát (přibližně 300 mikrolitrů) se sebere do mikro GC zkumavek. Tyto mikrozkumavky se vloží do lékovek uzavřených šroubem a pevně se utěsní. Analýza se provede plynovou chromatografií za použití Hewlet Packard aparatury.

Zkouška na aktivitu CETP v lidské plazmě (tritiovaný cholesterylester)

Krev se získá od zdravých dobrovolníků. Krev se sebere do zkumavek, obsahujících EDTA (rezerva plazmy EDTA) . Rezerva lidské plazmy EDTA, skladovaná při -20 °C se roztaví při teplotě místnosti a odstřeďuje se 5 minut k odstranění pevných částic. K plazmě se přidá tritiovaný HDL, radioznačený v cholesterylové esterové části ((³H]CE-HDL) jak popsali Morton a Zilversmit (J. Biol. Chem., 256, 11992-95 (1981)) na finální koncentraci 25 pg /ml cholesterolu. K plazmě se přidají inhibitorové sloučeniny: Stejné objemy plazmy obsahující ([³H]CE-HDL (396 μΐ) se přidají pipetou do mikrozkumavek (Titertube®, Bio-Rad laboratories, Hercules, CA) ). Sloučeniny, obvykle rozpuštěné jako 20-50 mM zásobní roztoky v DMSO se postupně zředí v DMSO (nebo v některých případech alternativním rozpouštědle, jako je dimethylformamid nebo ethanol). Do každé zkumavky s plazmou se přidají 4 pl každého

171 ředěni' inhibitorových sloučenin nebo samotný DMSO. Zkumavky se ihned promíchají. Trojnásobné alikvoty (100 μΐ) z každé zkumavky se potom přenesou do 96-jamkových polystyrénových mikrotitračních ploten s kulatým dnem (Corning, Corning, NY). Plotny se utěsní plastickým filmem a inkubují se při 37 °C po dobu 4 hodin. Testované jamky obsahují plazmu s příslušným naředěním inhibitorové sloučeniny. Kontrolní jamky obsahují plazmu se samotným DMSO. Slepé jamky obsahují plazmu se samotným DMSO, které se nechají inkubovat v mirozkumavkách při 4 °C po dobu 4 hodin a přidají se do mikrotitračních jamek ke konci inkubační periody. VLDL a LDL se vysráží přidáním 10 μΐ srážecího činidla (1% (hmotnost/objem) dextransulfát (Dextralip50)/0,5 M chlorid hořečnatý, pH 7,4). Obsah jamek se smísí plotnovým mixérem a potom se inkubuje při teplotě okolí po dobu 10 minut. Plotny se potom odstředí při 1000 x g po dobu 30 minut při teplotě 10 °C. Supernatanty (50 μΐ) z každé jamky se potom přenesou do Picoplate™ (plotny s 96 jamkami, Packard, Meriden, CT) obsahující 250:1 Microscint™-40 (Packard, Meriden, CT). Plotny se potom za tepla utěsní (TopSeal™-P, Packard, Meriden, CT) podle návodu výrobce a míchají se 30 minut. Radioaktivita se měří na scintilačním čítači pro plotny (TopCount, Packard, Meriden, CT).

Hodnoty IC50 jsou koncentrace inhibitorové sloučeniny inhibující přenos [³H]CE ze supernatantu [³H]CE-HDL do sraženého VLDL a LDL na 50 % ve srovnání s přenosem získaným v kontrolních jamkách. Maximální procentový přenos (v kontrolních jamkách) se určí podle následující rovnice:

% přenosu = [dpm_{3iepý pokus} - dpm_kontroia] x 100 dpm_si_epý po_kus

Procenta přenosu v jamkách obsahujících inhibitorové sloučeniny se stanoví následovně:

172 • · •·

4t •· % kontroly = [dpm_si_ePý _pokus - dpm_test] x 100

Hodnoty IC₅₀ se urči z grafů % kontroly vůči koncentraci inhibitorové sloučeniny.

CETP aktivita in vitro

Schopnost sloučenin inhibovat aktivitu CETP se zjišťuje za použití in vitro zkoušky, při které se měří rychlost přenosu radioznačeného cholesterylového esteru ([³H]CE) z HDL donorových částic k LDL akceptorovým částicím. Podrobnosti této zkoušky popsali Glenn a kol. (Glenn a Melton, „Quantification of Cholesteryl Ester Transfer Protein (CETP): A) CETP Activity and B) Immunochemical Assay of CETP Protein, Meth. Enzymol., 263, 339-351 (1996)). CETP se může získat z bezsérového upraveného prostředí CHO buněk transfektovaných s cDNA na CETP (Wang, S. a kol., J. Biol. Chem. 267, 1748717490 (1992)) . K měření aktivity CETP se [³H] CE-značený HDL, LDL, CETP a zkušební pufr (50 mM tris(hydroxymethyl)aminomethan, pH 7,4; 150 mM chlorid sodný;

mM ethylendiamintetraoctová kyselina; 1% hovězí Sérum albumin) inkubují v objemu 200 μΐ, po dobu 2 hodin při 37 °C v 96 jamkových plotnách. Potom se sráží LDL postupným srážením přidáním 50 μΐ 1% (hmotnost/objem) dextransulfátu/0,5 M chlorid hořečnatý, mícháním a inkubováním při teplotě místnosti 10 minut. Roztok (200 μΐ) se přenese na filtrační desku (Millipore). Po filtraci se měří radioaktivita ve vysráženém LDL za pomoci scintilačního čítače. Korekce na nespecifický přenos nebo srážení se provede za použití vzorků, které neobsahují CETP. Rychlost přenosu [³H]CE za použití této zkoušky je lineární s ohledem na dobu a koncentraci CETP do 25 až 30 % přeneseného [³H]CE.

173

·· · ♦ ·· · ·

Síla testovaných sloučenin se může stanovit provedením shora uvedené zkoušky v přítomnosti různých koncentrací testovaných sloučenin a stanovením koncentrace, požadované pro 50% inhibici přenosu [³H]CE z HDL do LDL. Tato hodnota se definuje jako IC₅₀. Hodnoty IC₅o stanovené v této zkoušce budou přesné, když je IC₅₀ větší než 10 nM. V případě, že sloučeniny mají větší inhibiční sílu, přesné měření IC₅₀ může být určeno za použití delších inkubačních časů (do 18 hodin) a nižších finálních koncentrací CETP (< 50 nM).

Inhibice CETP aktivity in vivo

Inhibice aktivity CETP testovanou sloučeninou se může určit podáním sloučeniny zvířeti intravenózní injekcí nebo žaludeční sondou, měřením množství přenosu tritiem značeného cholesterylového esteru ([³H]CE) z HDL do částic VLDL a LDL a porovnáním tohoto přeneseného množství s množstvím přeneseným u kontrolních zvířat.

Samci zlatých syrských křečků se udržují při dietě, kdy potrava obsahuje 0,24 % cholesterolu, alespoň dva týdny před provedením studie. Zvířata, která dostala intravenózní dávku bezprostředně před pokusem se anestezují pentobarbitalem. Anestezie se udržuje v průběhu celého pokusu. Do jugulární vény a karotické artérie se zavedou katetry. Na začátku pokusu obdrží všechna zvířata do jugulární vény 0,2 ml roztoku obsahujícího [³H]CE-HDL. [³H]CE-HDL je preparát lidského HDL, obsahující tritiem značený cholesterylester a připraví se podle postupu, který popsal Glenn a kol. (Met. Enzymol., 263, 339-351 (1996)). Testovaná sloučenina se rozpustí jako 80 mM zásobní roztok ve vehikulu (2 % ethanol : 98 % PEG 400, Sigma Chemical Company, St. Louis, Missouri, USA) a podá se buď bolusovou injekcí nebo kontinuální infuzí. Dvě minuty poté se podá dávka [³H]CE-HDL, zvířatům se injektuje do jugulární vény 0,1 ml testovaného roztoku. Kontrolní zvířata dostanou 0,1 ml

174 • · · · · ··« ·· ··· ··· ··· ·· ··· vehikulového roztoku bez testované sloučeniny. Po 5 minutách se z karotické artérie odebere 1. vzorek krve (0,5 ml) a přenese se do mikrozkumavek obsahujících ethylendiamintetraoctovou kyselinu. Do katetru se injektuje k propláchnutí fyziologický roztok, který nahradí objem krve. Následné vzorky krve se odeberou stejným způsobem po dvou a čtyřech hodinách stejným způsobem. Krevní vzorky se dobře promíchají a udržují se na ledu, do skončení pokusu. Plazma se získá odstředěním vzorků krve při 4 °C. Na plazmu (50 μΐ) se působí 5 μΐ srážecího činidla (dextransulfát, 10 g/1; 0,5 M chlorid hořečnatý) k odstranění VLDL/LDL. Po odstředění se vzniklý supernatant (25 μΐ) obsahující HDL analyzuje na radioaktivitu za použití kapalného scintilačního čítače.

Procenta [³H]CE převedená z HDL do LDL a VLDL (% přenosu) se vypočítají na základě celkové radioaktivity v ekvivalentních vzorcích plazmy před srážením. Typicky je množství přenosu z HDL do LDL a VLDL u kontrolních zvířat 20 až 35 % po 4 hodinách.

Alternativně, při vědomí, anestezovaná zvířata mohou dostat orálně žaludeční sondou dávku testované sloučeniny jako suspenzi v 0,1% methylcelulóze ve vodě. V době, určené pro každou sloučeninu, při které úrovně plazmy testované sloučeniny dosáhnou svého vrcholu (C_max) po orální dávce, zvířata jsou anestezována pentobarbitalem a do jugulární vény se dávkuje 0,2 ml roztoku obsahujícího [³H]CE-HDL jak bylo popsáno shora. Kontrolní zvířata dostanou žaludeční sondou 0,25 ml roztoku vehikula bez testované sloučeniny. Po 4 hodinách se zvířata usmrtí, vzorky krve se seberou a procenta [³H]CE přenesená z HDL do LDL a VLDL (% přenosu) se zjišťují jak je popsáno shora.

Alternativně, inhibice aktivity CETP testovanou sloučeninou se může určit podáním sloučeniny myši, která byla vybrána pro expresi lidské CETP (hCETP) transgenní manipulací (hCETP myš). Testovaná sloučenina může být podána intravenózní

175

• · · · · ·*· ··· ·♦ ··· injekcí nebo orálně žaludeční sondou a množství přenosu tritiem značeného cholesterylesteru ([³H]CE) z HDL a LDL se stanoví a porovná se s množstvím přenosu zjištěným u kontrolních zvířat. Myši C57B1/D, které jsou homozygotní vůči hCETP genu jsou udržovány při dietě, s vysokým obsahem tuku, jako je TD 88051, jak popsal Nishina a kol. (J Lipid Res., 31, 859-869 (1990)) po dobu alespoň dvou týdnů předcházející studii. Myši obdrží orální sondou dávku testované sloučeniny jako suspenzi v 0,1% methylcelulóze ve vodě nebo intravenózní bolusovou injekcí testovanou sloučeninu v 10% ethanolu a 90% polyethylenglykolu. Kontrolní zvířata dostanou roztok vehikula bez testované sloučeniny orální žaludeční sondou nebo intravenózní bolusovou injekcí. Na začátku pokusu všechna zvířata dostanou 0,05 ml roztoku obsahujícího [³H]CE-HDL do ocasní vény. [³H]CE-HDL je preparát lidského HDL obsahující tritiem značený cholesterylester, a připraví se podle metody, kterou popsal Glenn a kol. (Meth. Enzymol., 263, 339-351 (1996)). Po 30 minutách se zvířata nechají vykrvácet a krev se sebere do standardních mikrozkumavek obsahujících ethylendiamintetraoctovou kyselinu. Vzorky krve se dobře promíchají a udržují se na ledu do skončení pokusu. Plazma se získá odstředěním vzorků krve při 4 °C. Plazma se oddělí a analyzuje gelovou filtrační chromatografií a určí se relativní poměry [³H]CE v VLDL, LDL a HDL.

Procenta [³H]CE přenesená z HDL do LDL a VLDL (% přenosu) se vypočítají na základě celkové radioaktivity v ekvivalentních vzorcích plasmy před srážením. Typicky, množství přenosu z LDL a VLDL u kontrolních zvířat bude 20 % až 35 % po 30 minutách.

Zkouška na absorpci cholesterolu ze střeva

Je známa řada sloučenin, které inhibují absorpci cholesterolu z intestinálního traktu. Tyto sloučeniny snižují

176

·· ·» • ·· • · ·· • ·· • ··· «« úrovně cholesterolu v seru snížením intestinální absorpce cholesterolu jak z exogenních zdrojů (dietní cholesterol) tak endogenní cholesterol (vylučovaný močovým měchýřem do intestinálního traktu).

U křečků byla použita zlepšená metoda pro měření absorpce cholesterolu do střev, při které se měří poměr dvou odlišných radioaktivních izotopů v plazmě, jak popsal Turley a kol. (J. Lipid Res. 35, 329-339 (1994), zde uváděné jako odkaz).

Samcům křečků o hmotnosti 80 až 100 g se podává potrava a voda dle libosti v místnosti, kde se ve 12 hodinových periodách střídá světlo a tma. Čtyři hodiny do světlé periody se nejprve podá intravenózní dávka 2,5 pCi [1,2-³H] cholesterolu suspendovaném v Intralipidu (20 %) a potom orální dávka [4—¹⁴C]cholesterolu v oleji triglyceridů se středním řetězcem (MCT). I.v. dávka se podá injektováním 0,4 ml Intralipidové směsi do distální femorální vény. Orální dávka se podá žaludeční sondou podáním 0,6 ml MCT olejové směsi zavedené intragastrikálně polyethylenovou trubkou. Po 72 hodinách se křečkům odebere krev a kapalnou scintilační spektroskopií se stanoví množství ³H a ¹⁴C v plazmě a v původním množství podané dávky. Absorpce cholesterolu se vypočte na základě následující rovnice:

Procento absorbované cholesterolu = % orální dávky na ml ve vzorku plazmy po 72 hodinách x 100 % i.v. dávky na ml ve vzorku plazmy po 72 hodinách

Zkouška na mikrosomální triglyceridový transferní protein (MTP)

MTP se může čistit z jaterní tkáně nebo kulturních buněk (například buněk HepG2) za použití standardních metod jak

177 ·· · 4 ·· · • · ·· ·· t ··· · · · ♦ ’♦ • « · · · · · · ·· ··· · 9 · ·· ·· 4·· ··· ► ·· ·· *44 popsal Ohringer a kol. (Acta Crystallogr. D52, 224-225 (1996), zde uváděno jako odkaz).

Následná analýza aktivity MTP se může provést jak popsal Jamil a kol. (Proč. Nati. Acad. Sci. 93, 11991-11995 (1996) zde uváděno jako odkaz).

Základem této zkoušky je měření přenosu značených trigliceridů z dárcovských vezikulů do akcepotorových vezikulů v přítomnosti MTP. Inhibitory MTP se mohou hodnotit jejich přidáním do směsi před zavedením MTP. Dárcovské vezikuly se připraví sonifikací vodné směsi vaječných fosfolipidů, kardiolipinu, ³H-značeného fosfolipidů a ¹⁴C-značených triglyceridů. Akceptorové vezikuly se připraví sonifikací vodné směsi vaječných fosfolipidů. Vezikulové roztoky se spolu smísí, s nebo bez přidání MTP inhibitorů a k vyvolání přenosové reakce se přidá MTP. Zkouška se zakončí po 60 minutách přidáním 0,5 ml celulózy DE-52 a následuje odstředění na pelety donorových molekul. Množství ³H a ¹⁴C v peletě a v původním množství směsi se stanoví kapalinovou scintilační spektrometrií. Rychlost přenosu lipidu se vypočte na základě kinetiky prvního řádu za použití výrazu [S] = [SJo e^kt kde [S]_o a [S] jsou frakce ¹⁴C značené v donorové membránové peletě v době 0 a t, a výraz k je frakce značeného materiálu přeneseného za jednotku času.

Zkouška na lipidy v plazmě u králíků

Lipidy v plazmě se mohou zkoušet za použití metod, které popsali J. R. Schuh a kol., J. Clin. Invest., 91, 1453-1458 (1993), zde uváděné jako odkaz. Skupiny samců bílých králíků z Nového Zélandu se podrobí standardní dietě (100 g/den) obohacené 0,3 % cholesterolu a 2 % kukuřičného oleje (Zeigler

178 ♦ « ·· ·· ·· · · · • · · · · ·· ···· · · · ·· • « · · · ·· ·· ··· ··· »4 · ···

Bothers, lne., Gardners, PA). Voda je k dispozici dle libosti. Skupiny ošetřených zvířat se usmrtí po 1 a 3 měsících léčby. Pro charakterizaci aterosklerotických lézí se odeberou tkáně. Pro určení koncentrace lipidů v plazmě se odeberou krevní vzorky.

Lipidy v plazmě

Plazma pro analýzu lipidů se získá odebráním krve z ušní vény do zkumavek obsahujících EDTA (Vacutainer; Becton Dickenson & Co, Rutherford, NJ), a poté separací buněk odstředěním. Celkový cholesterol se stanoví enzymaticky, za použití cholesteroloxidázové reakce (C.A. Allain a kol., Clin. Chem., 20, 470-475 (1994), zde uváděné jako odkaz). HDL cholesterol se také měří enzymaticky, po srážení LDL a VLDL dextransulfátem s hořčíkem (G. R. Warnick a kol., Clin. Chem., 28, 1379-1388 (1982), zde uváděné jako odkaz). Úrovně triglyceridů v plazmě se stanoví měřením množství glycerolu uvolněného lipoproteinlipázou zkouškou vazby na enzym (G. Bucolo a kol., Clin. Chem., 19, 476-482 (1973), zde uváděné jako odkaz).

Ateroskleróza

Zvířata se usmrtí pentobarbitalovou injekcí. Torakální aorty se rychle vyjmou, ponoří se do 10% neutrálního pufrového formalinu a obarví se olejovou červení O (0,3 %). Po jednoduché podélné incizi podél stěny naproti arteriálnímu ústí se cévy otevřou pro hodnocení plochy plátů. Procento pokrytí plátem se určí z hodnot celkové zkoumané plochy prahovou analýzou, za použití barevného zobrazovacího analyzéru (Videometric 150; Američan Innovision, lne., San Diego, CA) propojeného s barevnou kamerou (Toshiba 3CCD) upevněnou na mikroskop. Tkáňový cholesterol se měří

179

4

64 • 44 •·

44· enzymaticky, jak je popsáno, po extrakci směsí chloroform/methanol (2:1) podle metody kterou popsal Folch a kol. (J. Biol. Chem., 226, 497-509 (1957), zde uváděné jako odkaz.

In vitro vaskulárni odezva.

Abdominální aorty se rychle excisuji po injekci pentobarbitalem sodným a umístí se do okysličeného Krebsbikarbonátového pufru. Po odstranění perivaskulární tkáně se nařežou 3 mm kroužky, které se vloží do 37 °C svalové lázně obsahující Krebs-bikarbonátový roztok a zavěsí se mezi dva nerezavějící ocelové dráty, přičemž jeden z nich je připojen k silovému převodníku (Grass Instrument Co., Quincy, ΜΆ) . Změny síly jako odezva na angiotensin II přidaný do lázně se zanesou do grafu.

Renální hypertenzivní krysí model

Kombinační terapie antihypertenzivního činidla a inhibitoru transportu ileálních žlučových kyselin může být hodnocena na aktivitu sníženi krevního tlaku v podvázané renální artérii hypertenzivní krysy, model vysoké reninové hyperetenze. V tomto modelu se šest dnů po podvázání renální artérie podstatně zvýší jak renin v plazmě, tak krevní tlak (J. L. Cangiano a kol., J. Pharmacol. Exp. Ther., 206, 310-313 (1979)). Samci krys . Sprague-Dawley se vybaví radiotelemetrickým přenašečem krevního tlaku, aby mohl být kontinuálně sledován krevní tlak. Krysy se anestetizují směsí ketaminu-HCl (100 mg/kg) a maleátu acepromazinu (2,2 mg/kg). Abdominální aorta se obnaží. Na aortu se distálně k renálním artériím a ilikální bifurikaci umístí mikrovaskulární sponky. Aorta se propíchne 22-kalibrovanou jehlou a zavede se špička katetru. Katetr, který se udržuje na místě podvázáním

180

·· • •	♦ •	• o· •	* ··	* •		··
• •	• •
•	•	•		•		•
··		···	···	···	«9

v bederním svalu se připojí k radiotelemetrickému přenašeči krevního tlaku (Mini-Mitter Co., Inc., Sunriver, OR). Přenašeč se umístí do peritoneální dutiny a přišije se k abdominálnímu svalu po uzavření incize. Krysy se chovají jednotlivě nad radiometrickým přijímačem a podává se jim standardní potrava a voda dle libosti. Alespoň 5 dnů je povolena rekonvalescence. Průměrný arteriální tlak a srdeční tep se měří na vhodném zapisovači, jako je například- minipočítač. Data se vzorkují 10 sekund při 200-500 Hz v 2,5 až 10 min. intervalech 24 hodin denně. Po sebrání kontrolních dat za 24 hodin se krysy anestetizují methohexitalem (30 mg/kg i.p.). Provede se abdominální incize, přibližně 2 cm délky k obnažení. Renální artérie se oddělí z vény blízko aorty tak, aby nedošlo k poruše vény. Artérie se. kompletně podváže sterilním hedvábím 4-0. Incise se uzavře pečlivým zašitím svalové vrstvy a kůže. Šest dnů později, kdy se MAP zvýší o 50-70 mmHg se začne podávat žaludeční sondou antihypertenživní činidlo nebo jeho kombinace s jedním nebo více kardiovaskulárními terapeutickými činidly. Podávání se provádí každý den po dobu alespoň 8 týdnů. Jedna dávka léčiva obsahuje 20 až 200 mg/kg/den antihypertenzivního činidla (například eplerenon) a 1, 3, 10, 30 a 100 mg/kg/den dalšího kardiovaskulárního terapeutického činidla. Léčivé směsi se získají podáním kombinace dávky 1, 3, 10, 30 nebo 100 mg/kg/den dalšího kardiovaskulárního činidla s dávkou buď 20 nebo 200 mg/kg/den antihypertenzivního činidla. Snížení krevního tlaku se sleduje radiotelemetrickým systémem a odezvy se sloučeninami se porovnají s odezvami získanými u zvířat léčených vehikulem. Sledují se úrovně sodíku a draslíku v plazmě a moči jako míra účinnosti blokády aldosteronu. Vzorky moči se sbírají přes noc za použití metabolických klícek k izolaci vzorků. Vzorky plazmy se získají venózní kateterizací. Sodík a draslík se měří plamenovou fotometrií. Srdeční fibróza se stanoví histologickým a chemickým měřením excizovaných srdcí po

181 perfuzní fixaci. Levá a pravá komora se zváží, uloží a rozdělí na části. Poté se jednotlivé části obarví s pikrosiriovou červení a červeně zbarvené kolagenové oblasti se kvantifikují počítačovou zobrazovací analýzou. Apex srdce se kysele štěpí a volný hydroxyprolin se měří kolorimetricky. Předpokládá se, že MAP bude podstatně nižší vůči normálnímu tlaku u testovaných zvířat ošetřených kombinační terapií a že stav srdeční fibrózy bude zastaven nebo k němu nedojde.

Účinek inhibitoru IBAT a antihypertenzivního činidla, samotného nebo v kombinaci na léčbu aterosklerózy

Tato studie bude prospektivní randomizované hodnocení účinku kombinace inhibitoru IBAT nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli a antihypertenzivního činidla na postup nebo regresi nemoc koronární a karotické artérie. Studie má ukázat, že kombinace inhibitoru IBAT nebo její farmaceuticky přijatelné soli a antihypertenzivního činidla je účinná ke zpomalení nebo zastavení postupu nebo způsobit regresi stávající nemoci koronární artérie (CAD), jak vyplývá ze změn v koronární angiografii nebo karotickém ultrazvuku u subjektů s prokázanou nemocí.

Tato studie bude angiografickou dokumentací nemoci koronární artérie provedené jako dvojitý slepý, placebem kontrolovaný pokus u minimálně okolo 500 subjektů a výhodně, výhodně okolo 780 až okolo 1200 subjektů. Je zvlášť výhodné, studii provést u okolo 1200 subjektů. Subjekty budou připuštěni do studie po splnění určitých kritérií uvedených dále.

Vstupní kritéria. Subjekty připuštěné do studie musí splňovat určitá kritéria. Tak subjekt musí být dospělý, muž nebo žena, věk 18-80 let, u kterého byla klinicky doporučena koronární angiografie. Subjekty by měly mít angiografíčky ověřenou výraznou fokální lézi, takže 30 až v 50 % při

182 následném vyhodnocení kvantitativní koronární angiografií (QCA) nejméně v jednom segmentu (bez-PTCA, bez-bypas nebo cévy bez-MI) bude vyhodnoceno, že pravděpodobně nebude vyžadován během příštích 3 let zásah. Je požadováno, aby segmenty, které budou podrobeny analýze s nimi neinterferovali. Jelikož perkutánní transluminální srdeční angioplastie (PTCA) intreferuje se segmenty insercí balonového katetru, jsou požadovány pro analýzu segmenty bezPTCA . Je také požadováno, aby segmenty, které mají být analyzovány netrpěli trombotickou příhodou, jako je infarkt myokardu (MI). Požadavek je tak na cévy bez-MI. Segmenty, které budou analyzovány zahrnují: levé hlavní, proximální, střední a distální přední sestoupení, první a druhé diagonální rozvětvení, proximální a distální levý circumflex, první nebo největší marginální tupý prostor, proximální, střední a distální pravá koronární artérie. Subjekty budou mít ejekční frakci větší než 40 %, jak stanoveno kateterizací nebo radionukliidovou ventrikulografií nebo EKG kardiogramem v době hodnocení angiogramem nebo v průběhu předchozích tří měsíců před přijetím kvalifikačního angiogramu pod podmínkou, že se nevyskytla žádná příhoda vyžadující zákrok, jako je trombotická příhoda nebo postup, jako je PTCA.

Obecně, v důsledku počtu pacientů a fyzikálních omezení kteréhokoliv zařízení, studie se bude provádět na více místech. Při vstupu do studie budou objekty podrobeni kvantitativní koronární angiografií a rovněž karotické arteriární ultrasonografii B-modu a stanovení karotické arteriální shody na označených testovacích centrech. Pro každý subjekt bude tak stanoven výchozí stav. Jakmile jsou subjekty zařazeni do testu, jsou náhodně rozděleni k obdržení antihypertenzivního činidla (například eplerenonu) nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli (dávka je závislá na konkrétním antihypertenzivním činidle nebo jeho použité soli) a placeba nebo antihyperlipidemického činidla, jako je inhibitor IBAT

183

(50 mg) a placeba nebo antihypertenzivního činidla nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli (dávka je závislá na konkrétním antihypertenzivním činidle nebo jeho soli) a inhibitoru IBAT (50 mg) . Je třeba uvést·, že odborník pozná, zda může být použita tomto vynálezu volná bázová forma nebo jiné solné formy antihypertenzivního činidla nebo volná bázová forma nebo jiné solné formy inhibitoru IBAT. Výpočet dávkového množství pro tyto jiné formy inhibitoru IBAT a amlodipinbesylátu je snadný, vychází se z relativních molekulárních hmotností použitých sloučenin. Množství antihypertenzivního činidla se může lišit, jak je požadováno. Množství inhibitoru IBAT bude snižováno od 80 mg, pokud bude lékařem stanoveno, že to je v zájmu pacienta. Subjekty jsou sledováni po dobu jednoho až tří roků, výhodně po dobu 3 roků. Během studie se v pravidelných intervalech provádí ultrazvukové stanovení aterosklerózy karotické arterie. Obvykle se toto zkoumání provádí za použití ultrazvukového zařízení B-modu. Nicméně odborník může použít i jiné metody stanovení koronární angiografie, prováděné v závěru jedno až tří leté léčebné periody. Vyhodnocují se angiogramy výchozího stavu a angiogramy po léčbě a mezitím prováděné ultrasonogramy se vyhodnocují na přítomnost nových lézí nebo změny existujících lézí. Měření arteriální kompliance jsou vyhodnocována ve srovnání se základním stavem a 6-měsíčním intervalem.

Základním objektem této studie je ukázat, že kombinace antihypertenzivního činidla a inhibitoru IBAT snižuje postup aterosklerotických lézí, jak bylo změřeno kvantitativní koronární angiografií (QCA) u subjektů s klinickou chorobou koronární artérie. QCA měří Primárním závěrečným bodem této studie je změna v průměru průměrného středního segmentu stromkovitě rozvětvené koronární artérie. Průměr arteriálního segmentu se měří v různých částech tohoto segmentu. Potom se stanoví střední průměr tohoto segmentu. Po stanovení průměrů mnoha středních segmentů se stanoví střed všech segmentů a • ·

184 :::·:· .

·· ··· ··· ·** ¹ potom se určí střední průměr segmentu. Střední průměr segmentu u subjektů, kteří byli léčeni inhibitorem IBAT nebo jeho farmaceuticky přijatelnou solí a antihypertenzivním činidlem nebo jeho farmaceuticky přijatelnou solí se snižuje mnohem ' pomaleji nebo se zastaví nebo dojde ke zvýšení středního průměru segmentu. Tyto výsledky představují zpomalení postupu aterosklerózy, zastavení aterosklerózy, respektive regresi aterosklerózy.

Sekundární objekt této studie spočívá v tom, že kombinace antihypertenzivního činidla a inhibitoru IBAT nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli snižuje rychlost postupu aterosklerózy v karotických arteriích, jak bylo prokázáno měřením sklonu maximálních středních tlouštěk průměrných měření stěn 12 separátních segmentů (Mean Max) jako funkce času více než v případě použití amlodipinu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli nebo samotného inhibitoru nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli. Střední tloušťka stěn subjektů, kteří byli léčeni inhibitorem IBAT nebo jeho farmaceuticky přijatelnou solí a amlodipinem nebo jeho farmaceuticky přijatelnou solí se bude zvyšovat mnohem pomaleji, zastaví se nebo se bude snižovat. Tyto výsledky ukazují na zpomalený postup aterosklerózy, uzdravování aterosklerózy a regresi aterosklerózy. Dále tyto výsledky mohou být použity k usnadnění určení dávek při léčbě.

Užitečnost sloučenin podle předkládaného vynálezu jako lékařského činidla při léčbě angíny pectoris u savců (například lidí) je demonstrována aktivitou sloučenin podle vynálezu v obecných zkouškách a klinickém protokolu popsaném dále:

Účinek ihibitoru IBAT a antihypertenzivního činidla, samotného nebo v kombinaci na léčbu angíny.

Tato studie bude dvojitě slepá, paralelně větvená randomická, která ukáže účinnost inhibitoru IBAT nebo jeho • · farmaceuticky přijatelné soli a antihypertenzivního činidla v kombinaci na léčbu symptomatické angíny.

Vstupní kritéria: Subjekty jsou muži nebo ženy ve věku 18 až 80 let s typickou bolestí v hrudníku spojenou s jedním z následujících důkazů srdeční ischémie: (1) EKG vykazuje zvýšení tlaku zkoušeného segmentu okolo 1 mm nebo více; ( (2) pozitivní zvýšení tlaku při zkoušce na šlapacím mlýně; (3) nové abnormalita pohybu cévní stěny na ultrazvuku; nebo (4) koronární angiogram s významným zúžením. Obecně, za podstatné se pokládá zúžení okolo 30 až 50 %.

Každý subjekt se hodnotí po dobu okolo deseti do třiceti dvou týdnů. K provedení kompletní studie se vyžaduje alespoň deset týdnů. V případě, že má být použito okolo 200 až 800 subjektů, výhodně okolo 400 subjektů, použijí se další subjekty. Subjekty se sledují po dobu 4 týdnů s ohledem na shodu s vstupními kritérii popsanými dále. Jakmile jsou pozorovací kritéria splněna, subjekty jsou odstaveni od své běžné antianginální medikace a stabilizováni na dlouhodobou léčbu nitrátem, jako je nitroglycerin, isosorbid-5-mononitrát nebo isosorbid dinitrát. Výraz „odstaveni používaný ve spojení s tímto pozorováním znamená zbavení běžné antianginální medikace, takže tělo subjektu je zbaveno v podstatě všech medikací a subjekt je stabilizován na stabilní dávky nitrátu. Subjekty, mající jedno nebo dvě napadení angínou za týden při stabilním dlouhodobém dávkování nitrátu jsou vynecháni z fáze odstavení. Jakmile jsou subjekty stabilizováni na nitrátech, vstupují do randomizované fáze, za předpokladu, že mají jedno nebo dvě napadení angínou pectoris za týden. V randomizované fázi jsou subjekty náhodně rozmístěni do čtyř směrů studie popsaných dále. Po skončení „odstavné fáze jsou subjekty podrobeni, v souladu s se vstupními kritérii, 24 hodinovému EKG, jako je Holterovo monitorování, a zatěžkávacímu cvičení, jako je zkouška na

186 šlapacím mlýnu a hodnocení myokardiální perfuze za použití PET (fotonová emisní tomografie) snímáním k dosažení výchozího stavu. Při zatěžkávací zkoušce na šlapacím mlýnu technik může řídit rychlost a gradient šlapacího mlýnu. Rychlost šlapacího mlýnu a úhel gradientu se obecně během testu zvyšuje. Časové intervaly mezi každým zvýšením rychlosti a gradientu se obecně stanoví za použití Bruceho protokolu.

Po'skončení zkoumání výchozího stavu se subjekty podrobí jedné z následujících větví studie: (1) placebo; (2) inhibitor IBAT (okolo 1 mg do okolo 80 mg); (3) antihypertienzivní činidlo (dávka je závislá na konkrétním vybraném antihypertenzivním činidle); nebo (4) kombinaci shora uvedeného dávkování inhibitoru IBAT a antihypertenzivního činidla společně. Odborník pozná, že podle vynálezu může být použita bazická forma nebo jiná forma soli amlodipinbesylátu nebo bazická forma nebo jiná forma soli inhibitoru IBAT. Výpočet dávkového množství těchto jiných forem inhibitoru IBAT a amlodipinbesylátu je snadný a je v poměru molekulárních hmotností jednotlivých sloučenin. Subjekty se potom sledují po dobu dvou až dvacet čtyři týdnů.

Po skončení monitorovací periody jsou subjekty podrobeni následujícímu zkoumání: (1) 24 hodinovému ambulantnímu EKG, jako je Holterovo monitorování, a (2) zatěžkávacímu cvičení ( jako je zkouška na šlapacím mlýnu za použití modifikovaného Bruceho protokolu; a (c) hodnocení myokardiální perfuze za použití PET snímání. Pacienti si evidují bolestivé ischemické příhody a spotřebu nitroglycerinu. Je obecně žádoucí, aby si pacienti vedli během testu přesnou evidenci o anginálních záchvatech. Jelikož si obecně pacienti berou nitroglycerin k ulehčení bolesti anginálního záchvatu, představuje počet podání nitroglycerinu počet anginalních záchvatů.

K demonstraci účinnosti a dávkování léčivé kombinace podle vynálezu budou osoby provádějící test hodnotit subjekty za použití popsaných metod. Úspěšná léčba vede k menšímu výskytu • ·

187 ischemických příhod, jak je stanoveno EKG, subjekty budou moci déle a s větším zatížením cvičit na šlapacím mlýnu nebo bez bolesti na šlapacím mlýnu nebo dojde k lepší perfuzí nebo menšímu výskytu poruch perfuze.

Užitečnost sloučenin podle předkládaného vynálezu jako léčiv v léčbě hypertenze a hyperlipidemie u savců (například lidí), trpících kombinací hypertenze a hyperlipidemie je demonstrována aktivitou sloučenin podle předkládaného vynálezu v konvenčních zkouškách a klinických protokolech popsaných dále.

Účinek inhibitoru IBAT a antihypertenzivního činidla, samotného nebo v kombinaci na léčbu subjektů majících jak hypertenzi, tak hyperlipidemii

Tato studie bude dvojitě slepá, paralelně větvená randomická, která ukáže účinnost inhibitoru IBAT nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli a antihypertenzivního činidla v kombinaci k regulaci jak hypertenze tak hyperlipidemie u subjektů, kteří mají mírnou, střední nebo vážnou hypertenzi a hyperlipidemii.

Každý subjekt je hodnocen po dobu 10 až 20 týdnů, výhodně 14 týdnů. K zabezpečení provedení studie se použije dostatečné množství subjektů, k hodnocení kompletní studie se použije 400 až 800 subjektů.

Vstupní kritéria: Subjekty jsou muži nebo ženy ve věku 18 až let mající jak hyperlipidemii, tak hypertenzi. Přítomnost hyperlipidemie je prokázána hodnocením úrovně lipoproteinů s nízkou hustotou (LDL) subjektu vzhledem k určitým rizikovým faktorům. Jestliže subjekt nemá žádnou koronární nemoc srdce (CHD) a má méně než dva pozitivní rizikové faktory, potom je subjekt považován jako subjekt který má hyperlipidemii který vyžaduje léčebnou terapii jestliže LDL subjektu je větší nebo

188 rovno 190. Jestliže subjekt nemá žádnou koronární nemoc srdce a má dva nebo více rizikových faktorů, potom je subjekt považován za subjekt který má hyperlipidémií, který vyžaduje léčebnou jestliže LDL subjektu je větší nebo rovno 160. Jestliže subjekt má koronární nemoc, potom je subjekt považován za subjekt který má hyperlipidémií, jestliže je LDL subjektu větší nebo rovno 130.

Pozitivní rizikový faktor zahrnují (1) muž nad 45, (2) žena nad 55, kde žena není podrobena hormonální náhradní terapii (HIRT), (3) výskyt předčasné kardiovaskulární nemoci v rodině, (4) subjekt je pravidelný kuřák, (5) subjekt má diabetes, (6) HDL méně než 45 a (7) subjekt má hypertenzi. Pokud je HDL více než 60, pokládá se tato skutečnost za negativní rizikový faktor a jeden ze shora uvedených pozitivních rizikových faktorů bude vykompenzován. Přítomnost hypertenze je určena pokud je diastolický tlak při měření v klidové poloze větší než 90 nebo systolický tlak větší než 140. Oba tlaky krve se obecně stanoví na základě průměrů ze tří měření prováděná nezávisle po 5 minutách. Subjekty jsou sledováni na shodu se vstupními kritérii uvedenými shora. Jakmile jsou kritéria sledování splněna, subjekty se odstaví z běžné anihypertenzivní medikace a medikace snižující lipidy a převedou se na dietu NCEP ATP stupeň 1. NCEP ATP 11 (léčebný panel pro dospělé, 2. revize), stupeň I diety uvádí množství nasycených a nenasycených tuků, které může být spotřebováno jako poměr celkové kalorické spotřeby potravy. Výraz „odstaveni používaný ve spojení s tímto pozorováním znamená zbavení běžné antihypertenzivní medikace a medikace ke snížení lipidů, takže tělo subjektu je zbaveno v podstatě všech medikací. Nově diagnozované subjekty obecně zůstávají neléčeni dokud zkouška nezačne. Tyto subjekty se také převedou na dietu NCPE stupeň 1. Po čtyřtýdenním vymývání a dietní stabilizační periodě jsou subjekty podrobeni následujícímu zkoumání výchozího stavu: (1) krevní tlak (2) stav lipidů * ·

189 • · ··· ·· · ··· nalačno. Stav lipidů nalačno stanovuje základní úrovně lipidů ve stavu nalačno. Obecně, subjekt nepřijímá potravu po dobu dvanácti hodin, kdy se měří úrovně lipidů. Po zkoumání výchozího stavu jsou subjekty převedeni do jednoho z následujících režimů: (1) fixní dávka antihypertenzivního činidla, kde je dávka závislá na konkrétním vybraném antihypertenzivním činidle; (2) fixní dávka inhibitoru IBAT, obecně okolo 1 do 80 mg; nebo (3) kombinace shora uvedených dávek inhibitoru IBAT a antihypertenzivního činidla spolu. Odborník pozná, že podle vynálezu může být použita bazická forma nebo jiná forma soli amlodipinbesylátu nebo bazická forma nebo jiná forma soli inhibitoru IBAT. Výpočet dávkového množství těchto jiných forem inhibitoru IBAT a amlodipinbesylátu je snadný a je v poměru molekulárních hmotností jednotlivých sloučenin. Subjekty dostávají tyto dávky po dobu minimálně 6 týdnů, obecně po dobu maximálně 8 týdnů. Subjekty se vrátí do testovacího centra v závěru šestého až osmého týdne, takž může být provedeno hodnocení výchozího stavu. Porovnává se krevní tlak subjektu v závěru studie s krevním tlakem na počátku. Stav lipidů měří celkový cholesterol, LDL-cholesterol, HDL-cholesterol, triglyceridy, apoB, VLDL (lipoproteiny s velmi nízkou hustotou) a ostatní složky lipidového profilu subjektu. Zlepšení v hodnotách získaných po léčbě, vzhledem k hodnotám získaným před léčbou indikují užitečnost kombinace léčiv. Užitečnost sloučenin podle předkládaného vynálezu jako léčiv k léčbě kardiálního ohrožení u savců (například lidí), při ohrožení nebezpečnou kardiální příhodou je demonstrována aktivitou sloučenin podle vynálezu v konvenčních zkouškách a klinických protokolech popsaných dále.

Účinek ihibitoru IBAT a antihypertenzivního činidla, samotného nebo v kombinaci na léčbu subjektů ohrožených budoucími kardiovaskulárními příhodami

190 • 9 · 9 9·· • «99 · 9 999

9 9 · 99 • 9 99 9999 • 9 9 9 99 «9 999 999 99999

Tato studie bude dvojitě slepá, paralelně větvená randomická, která ukáže účinnost inhibitoru IBAT nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli a antihypertenzivniho činidla v kombinaci ke snížení celkového vypočteného nebezpečí budoucích příhod u subjektů, které jsou v ohrožení pro výskyt budoucích kardiovaskulárních příhod. Toto nebezpečí se vypočte za použití Framinghamovy rizikové rovnice. Subjekt je považován za ohrožený na budoucí výskyt kardiovaskulární příhody jestliže tento subjekt vykazuje více než jednu standardní odchylku shora od průměru, jak je vypočteno Framinghamovou rizikovou rovnicí. Studie se používá k hodnocení účinnosti fixní kombinace inhibitoru IBAT nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli a antihypertenzivniho činidla k regulaci kardiovaskulárního ohrožení regulací jak hypertenze tak hyperlipidemie u pacientů,

Každý subjekt je hodnocen po dobu 10 až 20 týdnů, výhodně 14 týdnů. K zabezpečení provedení studie se použije dostatečné množství subjektů, k hodnocení kompletní studie se použije 400 až 800 subjektů.

Vstupní kritéria: Subjekty jsou muži nebo ženy ve věku 18 až 80 let, kteří jsou po dobu 5 let v ohrožení, kde ohrožení je nad průměrné ohrožení s ohledem na věk a pohlaví subjektu, jak je definováno Framinghamovou studií srdce, což je vývojová prospektivní studie dospělých mužů a žen vykazujících že určité rizikové faktory mohou být použity k předpovědi vývoje koronární srdeční nemoci. Věk, pohlaví, systolický a diastolický krevní tlak, návyk na kouření, přítomnost nebo nepřítomnost nesnášenlivosti cukru, přítomnost nebo nepřítomnost levé ventrikulární hypertrofie, sérový cholesterol a lipoprotein s vysokou hustotou (HDL) jsou, v případě jedné nebo více standardních odchylek shora, normou pro Framinghamovu populaci pro hodnocení, zda je pacient

191

v nebezpečí kardiální příhody. Hodnoty pro rizikové faktory jsou dosazeny do Franghamovy rizikové rovnice a vypočte se, zda je subjekt v nebezpečí pro budoucí kardiovaskulární příhodu. Subjekty se sledují na komplianci se vstupními kritérii popsanými shora. Jakmile jsou všechna kritéria sledování splněna, pacienti se zbaví své běžné antihypertenzivní medikace a medikace snižující lipidy a kterékoliv další medikace, která by ovlivnila výsledky pozorování. Pacienti se potom převedou na dietu NCEP ATP 11 stupeň I, jak je popsáno shora. Nově diagnozované subjekty obecně zůstávají neléčeni dokud zkouška nezačne. Tyto subjekty se také převedou na dietu NCPE stupeň 1. Po čtyřtýdenním vymývání a dietní stabilizační periodě jsou subjekty podrobeni následujícímu zkoumání na výchozí čáře: (1) krevní tlak (2) půst; (3) sledování DPW; (4) test na toleranci glukózy; (5) EKG; a (6) kardiální ultrazvuk. Tyto testy se provedou za použití standardních postupů dobře známých odborníkovi. EKG a kardiální ultrazvuk se obecně použijí k měření přítomnosti nebo nepřítomnosti levé vertrikulární hypertrofie.

Po zkoumání výchozího stavu jsou pacienti převedeni do jednoho z následujících režimů: (1) fixní dávka antihypertenzivního činidla, kde je dávka závislá na konkrétním vybraném antihypertenzivním činidle; (2) fixní dávka inhibitoru IBAT, obecně okolo 1 do 80 mg; nebo (3) kombinace shora uvedených dávek inhibitoru IBAT a antihypertenzivního činidla spolu. Odborník pozná, že podle vynálezu může být použita bazická forma nebo jiná forma soli amlodipinbesylátu nebo bazická forma nebo jiná forma soli inhibitoru IBAT. Výpočet dávkového množství těchto jiných forem inhibitoru IBAT a amlodipinbesylátu je snadný a je v poměru molekulárních hmotností jednotlivých sloučenin. Pacienti jsou udržováni na těchto dávkách a během šesti až osmi týdnů se vrátí k hodnocení výchozího stavu. V tuto dobu se dosadí nové hodnoty do Framinghamovy rizikové rovnice ke stanovení, zdali

192 subjekt má nižší, větší nebo nezměněné nebezpečí pro budoucí kardiovaskulární příhodu.

Shora uvedené zkoušky demonstrují účinnost amlodipinu nebo jeho farmaceuticky přijatelných kyselých adičních solí a inhibitoru IBAT nebo jeho farmaceuticky přijatelných solí při léčbě angíny pectoris, ateriosklerózy, hypertenze nebo hyperlipidemie společně a léčba kardiálního nebezpečí také poskytuje prostředky, kterými mohou být navzájem porovnávány sloučeniny podle vynálezu a další známé sloučeniny. Výsledky těchto porovnání jsou užitečné pro stanovení dávkových úrovní u savců, včetně lidí, pro léčbu takových nemocí. Pro lidského pacienta o hmotnosti 65 až 70 kg se používají následující dávková množství a ostatní dávková množství uvedená v předkládaném popise a v přiložených nárocích. Odborník snadno stanoví dávková množství pro pacienty odlišující se od hmotnosti 65 kg až 70 kg, s ohledem na používání léčiv subjektem v minulosti a přítomnost nemocí u subjektu, například diabetů. Všechny dávky uvedené v tomto dokumentu a v přiložených nárocích jsou denní dávky.

Jako obecný příklad a v souladu s předkládaným vynálezem, mohou být podávána následující antihypertenzivní léčiva a v následujících denních dávkách.

diltiazem,	obecně	okolo	120	mg	do	okolo	480	mg;
verapamil,	obecně	okolo	20 j	mg i	do	okolo	48 mg;
felodipin,	obecně	okolo	2,5	mg	do	okolo	40	mg;
isradipin,	obecně	okolo	2,5	mg	do	okolo	40	mg;
lacidipin,	obecně	okolo	1 mg do okolo 6	mg;
nicardipin,	obecně	‘ okolc	i 32	mg	do	okolo	120	mg;
nifedipin,	obecně	okolo	10 mg i	do	okolo	120	mg;
nimodipin,	obecně	okolo	120	mg	do	okolo	480	mg;

nisoldipin, obecně okolo 5 mg do okolo 80 mg;

193

nitrendipin	, obecně okolo	5	mg	do	okolo	20	mg;
benazepril,	obecně	okolo	10	mg	do	okolo	80	mg;
captoproil,	obecně	okolo	50	mg	do	okolo	150	| mg;
enalapril,	obecně i	okolo 5	mg dc	i okolo 40	1 mg;
fosinopril,	obecně	okolo	10	mg	do	okolo	80	mg;
lisinopril,	obecně	okolo	10	mg	do	okolo	80	1 mg;

quinapril, obecně okolo 10 mg do okolo 80 mg; losartan, obecně okolo 25 mg do okolo 100 mg; valsartan, obecně okolo 40 mg do okolo 640 mg; doxasozin, obecně okolo 0,5 mg do okolo 16 mg; prazosin, obecně okolo 1 mg do okolo 40 mg; trimazosin, obecně okolo 1 mg do okolo 20 mg; arnilorid, obecně okolo 5 mg do okolo 20 mg; a eplerenon, obecně okolo 10 do okolo 150 mg.

Odborník pozná, že dávky pro shora uvedené antihypertenzivní sloučeniny musí být individualizovány pro každý specifický subjekt, tato individualizace bude závislá na historii používání léčiv subjektem a na tom, zde subjekt bere nebo nebere další léčiva, která mohou nebo nemusí interferovat nebo mít vedlejší účinek v kombinaci se shora uvedenými antihypertenzivy. Individualizace se potom dosáhne tak, že se začne s malou dávkou sloučeniny, která se upravuje do dosažení žádaného účinku. Obecně, podle vynálezu se inhibitor IBAT obecně podává v dávce okolo 0,1 mg/den do okolo 500 mg/den. Výhodně se inhibitor IBAT podává v dávce okolo 1 mg/den do okolo 100 mg/den.

Protože se předkládaný vynález týká léčby nemocí a stavů kombinací aktivních složek, mohou být tyto složky také podávány odděleně a vynález se také týká kombinování farmaceutických kompozic do formy soupravy. Souprava zahrnuje

194 •· · •· •* •· ·· · • · · • · • · • · ·♦ · dvě oddělené farmaceutické kompozice: antihypertenzivní činidlo nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl a inhibitor IBAT nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl. Souprava také zahrnuje zásobní prostředky pro oddělené uložení kompozic jako je rozdělená nádoba nebo rozdělený fóliový obal, ačkoliv rozdělené kompozice mohou být v jednom nerozděleném zásobníku. Souprava také obsahuje návod pro podávání jednotlivých složek. Souprava je také vhodná, jestliže jsou jednotlivé formy výhodně podávány v různých dávkových formách (například orální a parenterální), jsou podávány v různých dávkových intervalech nebo když lékař vyžaduje titraci individuálních složek.

Příklady uvedené v tomto dokumentu mohou být provedeny náhradou genericky nebo specificky popsaných terapeutických sloučenin nebo inertních nosičů za ty, které se použily v předchozích příkladech.

Z výše uvedeného vynálezu vyplývá, že stejného účinku může být dosaženo různými cestami. Takové variace nejsou na závadu myšlenky a rozsahu předkládaného vynálezu a všechny takové modifikace a ekvivalenty, které jsou pro odborníka zřejmé spadají do rozsahu následujících nároků.

Claims (115)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Terapeutická kombinace, vyznačující se tím, že obsahuje první množství sloučeniny inhibující transport ileální žlučové kyseliny a druhé množství mikrosomálního triglyceridového transferního proteinového inhibitoru, kde první množství a druhé množství dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství uvedených sloučenin.
2. 2. Terapeutická kombinace č u j í c í s podle nároku 1, vyzná transport ileální žlučové e t i m, že sloučenina inhibující kyseliny má vzorec B-2:

   nebo její

   B-2
3. 3. Terapeutická kombinace vyznačující s transport ileální žlučové podle nároku 1, e tím, že sloučenina inhibující kyseliny má vzorec B-12 :

   196 ♦ · ·

   ·« • * • ·* ·· · · • ·4 ·

   W · ♦ ·· • · ♦·

   Uf »····

   B-12 ··
4. 4» ·*· nebo její enantiomer nebo racemát.

   4. Terapeutická kombinace podle nároku 1, vyznačuj lei se t i m, že sloučenina inhibujici transport ileálni žlučové kyseliny má vzorec:

   PEG nebo její enantiomer nebo racemát, kde PEG je polyethylenglykolový polymerní řetězec molekulové hmotnosti od okolo 3000 do okolo 4000.
5. 5. Terapeutická kombinace podle nároku 1,

   197 vyznačující se tím, že sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má vzorec B-7 :

   nebo její enantiomer nebo racemát.
6. 6. Tearapeutická kombinace, vyznačující se tím, že obsahuje první množství sloučeniny inhibující transport ileální žlučové kyseliny a druhé množství antagonistu absorpce cholesterolu, kde první množství a druhé množství dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství uvedených sloučenin.
7. 7. Kombinace podle nároku 6, vyznačující se tím, že antagonist absorpce cholesterolu zahrnuje azetidinonovou sloučeninu.
8. 8. Kombinace podle nároku 7,vyznačující se tím, že antagonist absorpce cholesterolu zahrnuje [3R[3a(S*) , 4β]]—1— (4-fluorfenyl) —3—[3— (4-fluorfenyl)-3hydroxypropyl]-4- (4-hydroxyf enyl) -2-azetidinon.
9. 9. Tearapeutická kombinace, vyznačující se tím, že obsahuje první množství sloučeniny inhibující transport ileální žlučové kyseliny a druhé množství sloučeniny proti obezitě, kde první množství a druhé množství

   198 ♦

   dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství uvedených sloučenin.
10. 10. Kombinace podle nároku 9, vyznačující se tím, že sloučenina proti obezitě zahrnuje orlistat.
11. 11. Tearapeutická kombinace, vyznačující se tím, že obsahuje první množství sloučeniny inhibující transport ileální žlučové kyseliny a druhé množství antihypertenzivní sloučeniny, kde první množství a druhé množství dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství uvedených sloučenin.
12. 12. Kombinace podle nároku 11, vyznačující se tím, že sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny je benzothiazepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny.
13. 13. Kombinace podle nároku 12, vyznačující se tím, že benzothiazepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    199 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
14. 14. Kombinace podle nároku 12, vyznačující se tím, že benzothiazepinová sloučenina inhibujíci transport strukturu:

    ileálni žlučové kyseliny má
15. 15. Kombinace podle nároku 11, vyznačující se tím, že antihypertenzivní sloučenina zahrnuje eplerenon.
16. 16. Kombinace podle nároku 11, vyznačující se t i m, že antihypertenzivní sloučenina zahrnuje spironolakton.
17. 17. Kombinace podle nároku 11, vyznačující se tím, že antihypertenzivní sloučenina zahrnuje losartan nebo jeho sůl.
18. 18. Kombinace podle nároku 11, vyznačující se tím, že sloučenina inhibujíci transport ileálni žlučové kyseliny je benzothiepinová sloučenina inhibujíci transport ileálni žlučové kyseliny.
19. 19. Kombinace podle nároku 18, vyzna.čující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibujíci transport ileálni žlučové kyseliny má strukturu:

    200 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
20. 20. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
21. 21. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    201 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
22. 22. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
23. 23. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    202 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
24. 24. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:
25. 25. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    203
26. 26. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
27. 27. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    204 ··· nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
28. 28. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
29. 29. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    205 i

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
30. 30. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
31. 31. Kombinace podle nároku 18,vyznačující se t i m, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    206 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát kde R^x je polyethylenglykolová skupina molekulové hmotnosti od okolo

    4000 do okolo 6000.
32. 32. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
33. 33. Kombinace podle nároku 18, vyznačuj ící

    207 tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
34. 34. Kombinace podle nároku 18·, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
35. 35. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    208 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
36. 36. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    Cl +

    N(CH₂CH₃)₃ nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.

    209 • 9 · •9 •9
37. 37. Kombinace podle nároku 18, v y z tím, že benzothiepinová sloučenina n a č u j i inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    c i se nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
38. 38. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
39. 39. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    210 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
40. 40. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
41. 41. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    211 ··· ·· ♦ nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
42. 42. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    PEG nebo její sůl, enantiomer nebo racemát kde PEG je polyethylenglykolový polymerní řetězec o hmotnosti od okolo

    3000 do okolo 4000.
43. 43. Kombinace podle nároku 18, vyznačuj ící

    212 * ·· ♦ · ··· ··· ··· ·· tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo polyethylenglykolový polymerní 3000 do okolo 4000.

    racemát kde PEG je řetězec o hmotnosti od okolo
44. 44. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    213 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
45. 45. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
46. 46. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo polyethylenglykolový polymerní 500 do okolo 1500.
47. 47. Kombinace podle nároku 18, racemát kde R^y je řetězec o hmotnosti od okolo í vyznačující se

    214 Í :

    ·«

    4 4 • 99 4 ·♦ ·· 9 9 ·· ♦ * • 9 4 • • · • • • · • • • 9 • 9 • ·* 4 < ·· «4 • 4·

    tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl,
48. 48. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
49. 49. Kombinace podle nároku 18, vyznačuj ící se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    215 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
50. 50. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se t i m, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
51. 51. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    216 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
52. 52. Kombinace podle nároku 18, vyznačující se t í m, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát·.
53. 53. Terapeutická kombinace, vyznačující se tím, že obsahuje první množství sloučeniny inhibující transport ileální žlučové kyseliny a druhé množství fytosterolové sloučeniny, kde první množství a druhé množství dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství uvedených sloučenin.

    217
54. 54.

    • · • ·· •· •·

    Kombinace podle nároku 54, m, že fytosterol zahrnuje stanol.
55. 55.

    Kombinace podle nároku 54,
56. 56.
57. 57 .
58. 58 .
59. 59.

    m, že stanol je

    Kombinace podle m, že stanol je

    Kombinace podle m, že stanol je

    Kombinace podle m, že stanol je

    Kombinace podle campestanol.

    nároku 54, v cholestanol.

    nároku 54, v clionastanol.

    nároku 54, v y coprostanol.

    nároku 54, vy m, že stanol je

    22,23-dihydrobrassicastanol.
60. 60.

    Kombinace podle nároku 54, v y z m, že stanol je epicholestanol.
61. 61.

    Kombinace podle nároku 54, vy
62. 62.
63. 63.

    m, že stanol je

    Kombinace podle m, že stanol je

    Kombinace podle fucostanol.

    nároku 54, vy stigmastanol.

    nároku 53, v y m, že sloučenina inhibujici transport ileálni žlučové kyseliny je benzothiazepinová sloučenina inhibujici transport ileálni žlučové kyseliny.
64. 64. Kombinace podle nároku 63, vyznačuj lei

    218 tím, že sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
65. 65. Kombinace podle nároku 63, vyznačující se tím, že benzothiazepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
66. 66. Kombinace podle nároku 53, vyznačující se tím, že sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny je benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny.

    219
67. 67. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
68. 68. Kombinace podle nároku 66-, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
69. 69. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    220 • · · nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
70. 70. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
71. 71. Kombinace podle nároku 66, vyznačuj ící

    221 tím., že benzothiepinová sloučenina inhibujici transport ileálni žlučové kyseliny má strukturu.:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
72. 72. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibujici transport ileálni žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
73. 73. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibujici transport ileálni žlučové kyseliny má strukturu:

    • ·

    222

    I

    9· •· •·

    9· nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
74. 74. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
75. 75. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se t i m, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    • ·

    223 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
76. 76. Kombinace podle nároku 66, vyznačuj ící tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
77. 77. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
78. 78. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
79. 79. Kombinace podle nároku 66, vyznačuj ící • ·

    225 tím, že benzothiepinová sloučenina inhibujíci transport ileálni žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát, kde R^x je polyethylenglykolová skupina molekulové hmotnosti od okolo 4000 do okolo 6000.
80. 80. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibujíci transport ileálni žlučové kyseliny má strukturu:

    226 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
81. 81. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
82. 82. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:· nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
83. 83. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se

    227 tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
84. 84. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
85. 85. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    228 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
86. 86. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
87. 87. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:
88. 88. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
89. 89. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    230 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
90. 90. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát kde PEG je polyethylenglykolový polymerní řetězec molekulové hmotnosti od okolo 3000 do okolo 4000.
91. 91. Kombinace podle nároku 66, vyznačuj ící

    231

    * « » • · • · • 9 • • • • · • · • • • · • • • • « ♦ < « · * **· ·· *

    tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny ma strukturu:

    PEG racemát kde PEG je nebo její sůl, enantiomer nebo polyethylenglykolový polymerní řetězec molekulové hmotnosti od okolo 3000 do okolo 4000.
92. 92. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová Sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.

    232

    *4 • V « 9 • ·· • · ·· • • • • • • 9 • 9 • • • • 9 * «·· • ·· ··

    <
93. 93. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
94. 94. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát kde R^y je polyethylenglykolový polymerní řetězec molekulové hmotnosti od okolo 500 do okolo 1500.
95. 95. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    233 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
96. 96. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
97. 97. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    234
98. 98. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
99. 99. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

    235 nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
100. 100. Kombinace podle nároku 66, vyznačující se tím, že benzothiepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny má strukturu:

     nebo její sůl, enantiomer nebo racemát.
101. 101. Kombinace podle nároku 53, vyznačující se tím, že sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny je naftalenová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny.
102. 102. Terapeutická kombinace, vyznačující se tím, že obsahuje první množství sloučeniny inhibující transport ileální žlučové kyseliny a druhé množství probucolu, kde první množství a druhé množství dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství uvedených sloučenin.
103. 103. Kombinace podle nároku 102, vyznačující se tím, že sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny je benzothiepinová sloučenina inhibující transport, ileální žlučové kyseliny.

     236
104. 104. Kombinace podle nároku 102, vyznačující se tím, že sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny je benzothiazepinová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny.
105. 105. Kombinace podle nároku 102, vyznačující se tím, že sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny je naftalenová sloučenina inhibující transport ileální žlučové kyseliny.
106. 106. Způsob profylaxe nebo léčby hyperlipidemického stavu nebo choroby u savce, vyznačující se tím, že se podá první množství sloučeniny inhibující transport ileální žlučové kyseliny a druhé množství mikrosomální triglyceridové transferní proteinové inhibující sloučeniny, kde první a druhé množství dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství uvedených sloučenin.
107. 107. Způsob profylaxe nebo léčby hyperlipidemického stavu nebo choroby u savce, vyznačující se tím, že se podá první množství sloučeniny inhibující transport ileální žlučové kyseliny a druhé množství antagonistové sloučeniny absorpce cholesterolu, kde první a druhé množství dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství uvedených sloučenin.
108. 108. Způsob profylaxe nebo léčby hyperlipidemického stavu nebo choroby u savce, vyznačující se tím, že se podá první množství sloučeniny inhibující transport ileální

     237 žlučové kyseliny a druhé množství antihypertenzivní sloučeniny, kde první a druhé množství dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství uvedených sloučenin.
109. 109. Způsob profylaxe nebo léčby hyperlipidemického stavu nebo choroby u savce, vyznačující se tím, že se podá první množství sloučeniny inhibující transport ileální žlučové kyseliny a druhé množství fytosterolové sloučeniny, kde první a druhé množství dohromady zahrnuje antihyperlipidemicky účinné množství, antiateroskleroticky účinné množství nebo antihypercholesterolemicky účinné množství uvedených sloučenin.
110. 110. Způsob podle nároku 110, vyznačující se tím, že fytosterolová sloučenina zahrnuje stanol.
111. 111. Souprava pro dosažení terapeutického účinku u savce, vyznačújící se tím, že obsahuje množství sloučeniny inhibující transport ileální žlučové kyseliny v první jednotkové dávkové formě; a množství mikrosomálního triglyceridového transferního proteinového inhibitoru v druhé jednotkové dávkové formě; a zásobní prostředky obsahující uvedené první a druhé jednotkové dávkové formy.
112. 112. Souprava pro dosažení terapeutického účinku u savce, v y značující se tím, že obsahuje množství sloučeniny inhibující transport ileální žlučové kyseliny v první jednotkové dávkové formě; a množství antagonistu absorpce cholesterolu v druhé jednotkové dávkové formě; a zásobní prostředky obsahující uvedené první a druhé jednotkové dávkové formy.
113. 113. Souprava pro dosažení terapeutického účinku u savce, v y značující se tím, že obsahuje množství

     238 sloučeniny inhibující transport ileální žlučové kyseliny v první jednotkové dávkové formě; a množství antihypertenzivní sloučeniny v druhé jednotkové dávkové formě; a zásobní prostředky obsahující uvedené první a druhé jednotkové dávkové formy.
114. 114. Souprava pro dosažení terapeutického účinku u savce, vyznačující se tím, že obsahuje množství sloučeniny inhibující transport ileálních žlučových kyselin v první jednotkové dávkové formě; a množství fytosterolové sloučeniny v druhé jednotkové dávkové formě; a zásobní prostředky obsahující uvedené první a druhé jednotkové dávkové formy.
115. 115. Souprava podle nároku 114, vyznačující se tím, že fytosterolová sloučenina zahrnuje stanol.