CN1682843A - 一种预防禽流感的中药组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种预防鸡、鸭禽流感的中药组合物，它是由有效成分和/或药学上可接受的载体组成，其特征在于所述的有效成分是由下列原料制成的：连翘90－110重量份、金银花40－60重量份、北板兰根25－45重量份、黄芩40－60重量份、绵马贯众40－60重量份、黄芪70－90重量份。上述组方可以是任何一种兽用药内服剂型。本发明药物对家禽禽流感防治效果显著，使用安全、方便。
Description
技术领域
本发明涉及一种用于预防鸡、鸭等家禽禽流感的内服中药组合物及其制备方法和应用。
背景技术
禽流感是A型禽流感病毒所引起的禽类的一种急性高度致死性传染病。鸡、火鸡、鸭和鹌鹑等家禽及野鸟、水禽、海鸟等均可感染，但以鸡和火鸡为主。猪、猫、猴等多种动物和人类也可感染。
禽流感最早于1878年发生在意大利，历史上曾被称为鸡瘟或真性鸡瘟。一百多年来，禽流感不断地侵袭着整个世界的养禽业，并直接威胁人类的健康和生命。1997年，香港爆发的禽流感导致家禽大规模死亡，并先后有18人感染禽流感病毒，其中6人死亡；2003年12月至2004年3月在东南亚爆发的H5N1型禽流感波及几乎所有的东南亚国家和地区，造成数千万只家禽染病死亡，及20余人感染禽流感病毒而死亡。
虽然禽流感被发现已有100多年的历史，但至今人类尚未掌握完全有效的预防、治疗和控制技术。禽流感疫苗是预防禽流感爆发的主要手段。如果使用的疫苗与侵袭的病毒的亚型一致，则疫苗对家禽的保护率可达到90％以上。但目前已分离出的禽流感具有15种H抗原和9种N抗原，两种抗原的不同组合可以形成上百个血清亚型，而且流行的病毒亚型不稳定，产生“漂移”，这给疫苗的研制及禽流感的诊断和防治带来很大困难。
病毒是寄生于宿主活细胞内的微生物，凡对病毒有抑制或杀灭作用的药物，对宿主细胞也有一定毒性，这给抗病毒药物的研制带来很大困难。目前针对流感和禽流感病毒的化疗药物主要是金刚烷胺和金刚乙胺。利巴韦林是一种广谱抗病毒药物，临床上也常用于治疗流感，但病毒抑制试验表明，利巴韦林在体外对流感病毒并无抑制作用。金刚烷胺和金刚乙胺在应用初期对预防鸡、鸭禽流感具有较好效果，但随着这类药物的普遍、长期应用，禽流感病毒已对这类药物产生严重抗药性，致使这类药物在临床上应用无明显效果。1999年上市的抗流感新药扎那米韦(Zaramivir)和奥司米韦(Oseltamivir)对人流感有确切的防治效果，对家禽禽流感的预防未见报道。但这两种药价格昂贵，即使对禽流感有效也难以用于养禽业。因此在禽流感的防治中，至今还没有理想的化疗药物。
在我国，中医中药用于防治人的感冒和流感已有逾千年的历史，积累了丰富的经验。人医用于治疗感冒和流感的中药主要是清热解毒类中药和解表类中药，前者有连翘、金银花、黄芩、鱼腥草、板蓝根、大青叶、野菊花、桑叶、牛蒡子、蒲公英、牛黄等，后者有生姜、桂枝、麻黄、柴胡、荆芥、紫苏、辛夷、薄荷等。此外，黄芪、防风等中药对人体免疫有显著促进调节作用，也是常用的防治感冒药物。用于防治人感冒的中成药也品种繁多，较著名的有“银翘片”、“双黄连”、“清开灵”、“桂枝麻黄汤”等。
随着我国畜禽养殖业的迅速发展和兽医药研究的不断深入，中药在畜禽疾病防治上的应用也越来越普遍，对提高畜禽的成活率和健康水平起到了积极作用。但总的来看，目前我国的中兽药还处于药物配伍缺少系统研究、产品剂型粗糙、有效成分不明确、产品质量不稳定的低技术水平。应用中药防治家禽禽流感的研究报道很少，未见有系统深入的研究报道，兽药市场也未见对禽流感有很好防治效果的中兽药产品。
发明内容
本发明的目的在于提供一种对鸡、鸭等家禽禽流感有显著预防效果的中药组合物及其制备方法和应用。
为了实现上述目的，本发明采取如下的技术方案：
本发明预防禽流感的中药组合物，它是由有效成分和/或药学上可接受的载体组成，其中所述的有效成分是由下列原料制成的：连翘90-110重量份、金银花40-60重量份、北板兰根25-45重量份、黄芩40-60重量份、绵马贯众40-60重量份、黄芪70-90重量份。
优选地，连翘100重量份、金银花50重量份、北板兰根35重量份、黄芩50重量份、绵马贯众50重量份、黄芪80重量份。更优选为连翘1000g、金银花500g、北板兰根350g、黄芩500g、绵马贯众500g、黄芪800g。
本发明的中药组合物剂型是散剂、饮水剂或颗粒冲剂。
本发明中药组合物的制备方法，包括如下步骤：
(1)将连翘、金银花、北板兰根、黄芩、绵马贯众、黄芪分别粉碎成粗粉；
(2)取步骤(1)连翘粗粉用乙醇水溶液作溶剂进行渗漉提取，收集渗漉液；
(3)取步骤(1)制得的金银花粗粉、北板兰根粗粉、黄芩粗粉、绵马贯众粗粉，用乙醇水溶液作溶剂，进行渗漉提取，收集渗漉液；
(4)取经步骤(1)制得的黄芪粗粉用蒸馏水作溶剂，进行渗漉提取，收集渗漉液；
(5)合并(2)、(3)、(4)步骤的渗漉液，静置，过滤，减压蒸馏回收乙醇，剩余药液在温度65-75℃、真空度0.02-0.04Mpa下减压浓缩成稠膏，加入辅料制成所需剂型。
本发明的中药组合物的又一种制备方法，包括如下步骤：按权利要求1所述百分比用量称取连翘、金银花、北板兰根、黄芩、绵马贯众、黄芪，并分别粉碎成粗粉，按水煎煮法煎煮，收集各次煎出液，沉降过滤后，在温度65-75℃、真空度0.02-0.04Mpa下减压浓缩至药液的重量为中药原材料总重量的1.0±0.1倍，往浓缩药液中加入0.1％的苯甲酸钠和0.05％的尼泊金作防腐剂，即得饮水剂。
本发明的中药组合物在制备用于预防禽流感的药物中的应用。
本发明首先利用“禽流感病毒鸡胚攻毒试验”(以下简称“鸡胚试验”)对40余种清热解毒和解表类中药进行筛选，发现绵马贯众、连翘、金银花、黄芩、鱼腥草、板蓝根、大青叶、甘草、贯叶连翘、柴胡等十余种中药对鸡胚内禽流感病毒有显著抑制作用。然后利用筛选出的上述药物进行不同的组方，分别用水煮和醇提两种方法提取药效成分。最后对复方进行鸡胚试验和人工发病禽流感鸡治疗试验，筛选出效果较好的复方。根据试验结果，最终确定以连翘、金银花、北板兰根、黄芩、绵马贯众、黄芪等6味中药为原料进行组方，该方对鸡、鸭禽流感有显著防治效果。方中前5味药均为清热解毒之要药，对禽流感病毒都有较强抑制作用；各味药协同作用，不仅加强了对病毒、细菌的抑制作用，而且减少了单味药的毒性及病毒耐药性的产生。其中，连翘主含苯乙醇咖啡酸甙类化合物，绵马贯众主含绵马素、三叉厥酚，金银花主含绿原酸，板蓝根主含靛蓝、靛玉红，黄芩主含黄芩甙、汉黄芩素，这些成分对细菌及病毒均有不同程度的抑制活性。黄芪含黄芪多糖，黄芪多糖对人和动物的免疫活性有显著的促进作用，能明显增强巨噬细胞的吞噬功能，增加TNF分泌，促进病毒抗体的生成。
具体实施方式
实施例1
本发明散剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)称取连翘10000g、金银花5000g、北板兰根3500g、黄芩5000g、绵马贯众5000g、黄芪8000g，并分别粉碎成粗粉；
(2)取连翘粗粉用80％乙醇作溶剂，照流浸膏剂渗漉法进行渗漉，2.5ml/kg.min，收集渗漉液；
(3)取经步骤(1)制得的金银花粗粉、北板兰根粗粉、黄芩粗粉、绵马贯众粗粉，用60％乙醇作溶剂，照流浸膏剂渗漉法进行渗漉，3ml/kg.min，收集渗漉液；
(4)取经步骤(1)制得的黄芪粗粉用蒸馏水作溶剂，照流浸膏剂渗漉法进行渗漉，3ml/kg.min，收集渗漉液；
(5)合并(2)、(3)、(4)步骤中的渗漉液，静置，过滤，减压蒸馏
回收乙醇，剩余药液在温度65℃、真空度0.02Mpa下减压浓缩成稠膏，喷雾干燥或减压干燥，粉碎过60目筛，得干燥细粉；
(6)往步骤(5)干燥细粉中加入1.5％的白炭黑，即得散剂。其中白炭黑的作用在于改善流散性，减少吸潮性。本发明的散剂为流散性良好的粉末或粉末状颗粒，呈棕色或棕褐色，味苦。
实施例2
本发明颗粒冲剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)称取连翘9000g、金银花5000g、北板兰根3500g、黄芩5000g、绵马贯众5000g、黄芪7000g，并分别粉碎成粗粉；
(2)取连翘粗粉用70％乙醇作溶剂，照流浸膏剂渗漉法进行渗漉，2.5ml/kg.min，收集渗漉液；
(3)取经步骤(1)制得的金银花粗粉、北板兰根粗粉、黄芩粗粉、绵马贯众粗粉，用50％乙醇作溶剂，照流浸膏剂渗漉法进行渗漉，2.5ml/kg.min，收集渗漉液；
(4)取经步骤(1)制得的黄芪粗粉用蒸馏水作溶剂，照流浸膏剂渗漉法进行渗漉，3ml/kg.min，收集渗漉液；
(5)合并(2)、(3)、(4)步骤的渗漉液，静置，过滤，减压蒸馏回收乙醇，剩余药液在温度75℃、真空度0.03Mpa下减压浓缩成相对密度为1.37的稠膏；
(6)向步骤(5)的稠膏加入蔗糖粉适量，蔗糖占颗粒剂成品重量的28％，混匀，制成颗粒，烘箱干燥即得颗粒冲剂。
实施例3
本发明饮水剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)称取连翘1100g、金银花500g、北板兰根300g、黄芩600g、绵马贯众400g、黄芪800g，并分别粉碎成粗粉；
(2)取连翘粗粉用70％乙醇作溶剂，照流浸膏剂渗漉法进行渗漉，2.5ml/kg.min，收集渗漉液；
(3)取经步骤(1)制得的金银花粗粉、北板兰根粗粉、黄芩粗粉、绵马贯众粗粉，用50％乙醇作溶剂，照流浸膏剂渗漉法进行渗漉，2.5ml/kg.min，收集渗漉液；
(4)取经步骤(1)制得的黄芪粗粉用蒸馏水作溶剂，照流浸膏剂渗漉法进行渗漉，3.0ml/kg.min，收集渗漉液；
(5)合并渗漉液，静置，过滤，减压蒸馏回收乙醇，剩余药液在温度65℃、真空度0.02Mpa下减压浓缩得重量为3700g的浓缩药液；
(6)往步骤(5)的浓缩药液中加入0.1％的苯甲酸钠和0.05％的尼泊金作防腐剂，即得饮水剂。
实施例4
本发明饮水剂的又一种制备方法，包括如下步骤：
称取连翘1050g、金银花400g、北板兰根450g、黄芩400g、绵马贯众600g、黄芪700g，并分别粉碎成粗粉；按水煎煮法煎煮，收集各次煎出液，沉降过滤后，在温度72℃、真空度0.04Mpa下减压浓缩至药液的重量为3600g，该浓缩药液的重量在3240g-3960g范围内都是可行的。往浓缩药液中加入0.1％的苯甲酸钠和0.05％的尼泊金作防腐剂，即得饮水剂。
实施例5：本发明的散剂
按照实施例1所述的方法，不同之处是选用下列重量的原料：连翘9500g、金银花4500g、北板兰根3000g、黄芩5500g、绵马贯众6000g、黄芪8500g。
实施例6：本发明的颗粒冲剂
按照实施例2所述的方法，不同之处是选用下列重量的原料：连翘10500g、金银花5500g、北板兰根4000g、黄芩4500g、绵马贯众5000g、黄芪7500g。
实施例7：本发明的饮水剂
按照实施例3所述的方法，不同之处是选用下列重量的原料：连翘920g、金银花420g、北板兰根260g、黄芩580g、绵马贯众520g、黄芪710g。
实施例8：本发明的饮水剂
按照实施例4所述的方法，不同之处是选用下列重量的原料：连翘1080g、金银花580g、北板兰根430g、黄芩430g、绵马贯众590g、黄芪870g。
本发明的药物可以采用中药制剂的常规方法制备成任何常规内服中药制剂。例如，超微粉剂、片剂等。但是为了便于给鸡、鸭群体用药，本发明优选饮水剂、颗粒冲剂、散剂等。散剂作饲料添加用药，饮水剂和颗粒冲剂作饮水添加用药。但是这些不能用于限制本发明的保护范围。
本发明的中药组合物预防禽流感的用量分别是：
(1)散剂用于预防鸡、鸭禽流感，在饲料中的添加量为每吨饲料1500克至2000克；用于治疗鸡、鸭禽流感，在饲料中的添加量为每吨饲料2500克至3000克；
(2)饮水剂用于预防鸡、鸭禽流感，在适量的饮水中添加量为鸡、鸭每1000克体重每天用饮水剂3-5ml；用于治疗鸡、鸭禽流感，在适量的饮水中添加量为鸡、鸭每1000克体重每天用饮水剂6-8ml；
(3)颗粒冲剂用于预防鸡、鸭禽流感，在适量的饮水中添加量为鸡、鸭每1000克体重每天用冲剂0.4-0.6克；用于治疗鸡、鸭禽流感，在适量的饮水中添加量为鸡、鸭每1000克体重每天用冲剂0.7-0.9克。
以下通过试验例进一步说明本发明所述预防禽流感的中药复议制剂的动物急性毒性、药效以及临床前对禽流感鸡的防治效果。
试验一：中药组合物的动物急性毒性试验
材料与方法
动物：昆明种小鼠，体重为20.3±1.2g，雌雄各半。从广州军区后勤部军事医学研究所购进。
药品：中药组合物颗粒冲剂，华南农业大学兽医学院广东省兽药研制与安全评价重点实验室研制提供。
(一)小鼠LD50测定
小鼠60只，随机分为6组，每组10只，用灌喂法给药，给药量与浓度祥见表1，组间剂量比值为1∶0.8，剂距1∶3，一次给药后小鼠正常，连续观察7天，小鼠全部存活，无法测得LD50。
(二)最大耐受量试验
取小鼠30只，观察三天后进行试验，试验前一天禁食不禁水，在室温25±2℃条件下，灌喂一次，药物浓度为0.5g/ml(最大混悬浓度)，给药量为1ml/20g(最大体积)，一日内给药累计为25g/kg，给药后，饲养观察二周。
给药后观察期间，小鼠饮食、粪便、皮毛正常，生长活动情况良好，无一动物死亡，剖检观察主要脏器未见异常。
表1 中药组合物饮水剂LD50测定结果
| 组别 | 动物数 | 药物浓度g/ml | 给药体积ml | 给药剂量g/kg | 小鼠死亡数 | 存活小鼠情况 |
| 1 | 10 | 0.16 | 0.5 | 4.00 | 0 | 正常 |
| 2 | 10 | 0.20 | 0.5 | 5.00 | 0 | 正常 |
| 3 | 10 | 0.26 | 0.5 | 6.50 | 0 | 正常 |
| 4 | 10 | 0.32 | 0.5 | 8.00 | 0 | 正常 |
| 5 | 10 | 0.40 | 0.5 | 10.00 | 0 | 正常 |
| 6 | 10 | 0.50 | 0.5 | 12.50 | 0 | 正常 |
讨论与小结
用药物的最大混悬浓度(0.50g/ml)灌喂给药(剂量为12.5g/kg)，无法测出LD50，故测定其最大耐受量。在小鼠能够接受的最大浓度下(0.5g/ml)的最大体积(1ml)进行急性毒性测定，主要观察给药两周内的不良反应。结果小鼠在给药量为25g/kg的最大药物剂量下，观察期间未见小鼠有不良反应，尸检也未见主要脏器有异常变化，结果提示该药基本无毒性，临床使用安全。
试验二：中药组合物口服液药效学试验
1.试验材料
1.1试验鸡：50天龄优质黄鸡。1天龄时从广东省家禽研究所粤禽公司购进，饲养至50天龄开始试验。在鸡40天龄采用红细胞凝集抑制试验(HI)测定禽流感病毒(AIV)为阴性。
1.2饲料：从华南农业大学动物科学学院试验鸡场购进，不添加任何药物。
1.3药物：所用中药材原料均从广州市药材公司购进，华南农业大学兽医学院广东省兽药研制与安全评价重点实验室提取并配制中药组合物饮水剂(口服液)。每毫升口服液相当于1g生药。金刚烷胺购自华南农业大学华天公司，金刚乙胺购自浙江裕康制药有限公司，两种药物均经熔点测定和质谱分析与文献值一致。金刚烷胺和金刚乙胺用蒸馏水直接溶解，配成质量浓度为0.2％的药液。
1.4攻毒毒株：H5血清亚型禽流感病毒(半数感染浓度1.0×10-6)，华南农业大学兽医学院禽病研究室保存。
2.试验方法
试验分组：50天龄优质黄鸡90只，雌雄各半，随机分为5组，正常对照组10只，其余各组均为20只，详细分组情况见表2。
攻毒：将含禽流感病毒的鸡胚尿囊液稀释为0.5×10-5浓度，每只鸡腹部肌肉注射0.2ml接种。
给药：试验给药各组在接种AIV当天，灌喂给药，给药各组均灌喂5ml，健康对照组和感染对照组灌喂生理盐水，每天灌喂1次，连续灌喂7天。
药效评价标准：试验持续21天，每天观察鸡的死亡情况和临床表现，病死鸡进行尸体剖检，试验前后每只鸡进行称重。按下列标准对药效进行评价：(1)死亡：凡在试验期间，出现禽流感典型症状并死亡，尸体剖检有典型病变特征的即判定为感染死亡。(2)有效：试验结束后，所有经给药后仍存活的鸡均判定为有效，试验结束时每组存活的鸡数占试验鸡数的百分率为有效率。(3)增重：根据试验开始时和试验结束时每只鸡的体重，计算每只鸡的增重、每组试验鸡的平均体重和标准差。相对增重率是按各用药治疗组与健康对照组的平均增重之比计算，其中健康对照组设为100％。
3.动物试验结果
3.1感染对照组
20只感染鸡中有17只在接种禽流感病毒15天内死亡，存活的3只至第21天仍健康存活。其中接种病毒后第3天死亡2只，第4天死亡3只，第4天死亡5只，第5天至第10天死亡5只，第11天至第15天死亡2只。主要症状：精神沉郁，食欲下降或废绝；羽毛松乱，眼流泪液；排水样粪便；不愿走动，严重者卧地不起，有弯颈、打转、蹦跳等神经症状。尸体剖检特征：口腔有粘液，肝、肾、胆等多个器官肿大并有出血点，出血点通常呈紫黑色。
3.2给药组
感染鸡经给药治疗后，中药组合物组只有1只死亡，成活率为95％，大部分鸡只未出现临床症状，个别鸡只出现眼流泪、羽毛松乱等轻度病症，但在试验第21天症状完全消失。金刚烷胺组鸡只死亡18只，金刚乙胺组鸡只死亡15只。具体见表2。
表2 三种药物对禽流感病毒感染鸡的防治效果
| 组别 | 数量 | 处理 | 死亡数 | 死亡率％ | 有效率％ | 50d体重m/g | 71d体重m/g | 增重率％ | 相对增重率％ |
| 健康对照组 | 10 | 不感染、不给药 | 0 | 0 | - | 685.3±58.7 | 1103.6±63.0 | 61.04 | 100 |
| 中药复方制组 | 20 | 感染、5.0ml口服液灌喂 | 1 | 5 | 95 | 683.9±63.7 | 1091.2±72.8 | 59.56 | 97.58 |
| 金刚烷胺组 | 20 | 感染、10mg灌喂 | 18 | 90 | 10 | 692.4±67.5 | 978.2±55.3 | 41.28 | 67.63 |
| 金刚乙胺组 | 20 | 感染、10mg灌喂 | 15 | 75 | 25 | 679.0±72.5 | 982.0±81.6 | 44.62 | 73.10 |
| 感染对照组 | 20 | 感染、不给药 | 17 | 85 | - | 677.6±62.0 | 971.6±35.4 | 43.39 | 71.10 |
4.结论
试验结果表明，本发明的中药组合物对人工感染禽流感病毒的鸡具有很好的保护效果，感染鸡只的存活率达95％，而传统的抗流感病毒药物“金刚烷胺”、“金刚乙胺”的有效率分别只有10％和25％，差异极显著。中药组合物组鸡只的增重与健康对照组相当，显著优于“金刚烷胺”和“金刚乙胺”组，表明中药组合物不仅对鸡禽流感具有良好的防治效果，而且对鸡的生长无不良影响。
试验三：中药组合物饮水剂对同居感染禽流感鸡的防治效果试验
1.试验材料
1.1试验鸡：50天龄优质黄鸡。1天龄时从广东省家禽研究所粤禽公司购进，饲养至50天龄开始试验。在鸡40天龄采用红细胞凝集抑制试验(HI)测定禽流感病毒(AIV)为阴性。
1.2饲料：从华南农业大学动物科学学院试验鸡场购进，不添加任何药物。
1.3药物：所用中药材原料均从广州市药材公司购进，华南农业大学兽医学院广东省兽药研制与安全评价重点实验室提取并配制中药组合物饮水剂。每毫升饮水剂相当于1g生药。金刚乙胺购自浙江裕康制药有限公司，熔点测定和质谱分析结果与文献值一致。金刚乙胺用蒸馏水直接溶解，配成质量浓度为1％的药液。
1.4攻毒毒株：H5血清亚型禽流感病毒(半数感染浓度1.0×10-6)，华南农业大学兽医学院禽病研究室保存。
2.试验方法
人工感染禽流感鸡只：45天龄优质黄鸡50只，雌雄各半，将含禽流感病毒的鸡胚尿囊液稀释为0.5×10-5浓度，每只鸡腹部肌肉注射0.2ml接种。接种后第3天开始发病，每日将有明显临床症状的发病鸡只做好标记，并平均分配至各试验鸡群中，直至接种后第10天。
试验分组：45天日龄优质黄鸡110只，雌雄各半，随机分为6组，正常对照组10只，其余各组均为20只，详细分组情况见表3。
给药：在有人工感染禽流感鸡只转入试验栏的当天开始饮水给药。饮水给药前断水3小时。中药组合物饮水剂分别按每只鸡5ml、10ml的份量，1％的金刚乙胺分别按每只鸡1ml、2ml的份量加入装有600ml自来水的饮水器中，每天1次，供鸡只自由饮水。加入药物的水饮完后，给自来水供鸡饮用。对照组供饮自来水。
药效评价标准：试验持续28天，每天观察鸡的死亡情况和临床表现，病死鸡进行尸体剖检，试验前后每只鸡进行称重。药效评价标准同试验二。
人工感染的供毒源鸡只与同居试验鸡只分别记录、统计处理。
3.动物试验结果
3.1同居感染对照组
20只同居感染鸡中有13只在转入人工发病禽流感鸡只后28天内死亡。其中第3天死亡1只，第4天死亡2只，第5天死亡4只，第5天至第10天死亡4只，第11天至第28天死亡2只。
3.2给药组
同居感染鸡经给药治疗后，中药组合物5ml剂量组全部存活，10ml剂量组有1只死亡，存活率为95％。金刚乙胺10mg和20mg剂量组鸡只分别死亡9只和11只。具体见表3。人工感染供毒源鸡只全部死亡。
表3 中药组合物和金刚乙胺对同居感染禽流感鸡的防治效果
| 组别 | 数量 | 处理 | 死亡数 | 死亡率％ | 存活率％ | 45d体重m/g | 80d体重m/g | 增重率％ | 相对增重率％ |
| 健康对照组 | 10 | 不感染、不给药 | 0 | 0 | - | 617.2±45.3 | 1356.3±67.2 | 119.8 | 100 |
| 中药组合物I组 | 20 | 感染、5.0ml/只饮水剂 | 0 | 0 | 100 | 623.0±60.5 | 1327.0±76.2 | 113.0 | 94.32 |
| 中药组合物II组 | 20 | 感染、10ml/只饮水剂 | 1 | 5 | 95 | 625.5±56.6 | 1330.5±70.4 | 112.7 | 94.07 |
| 金刚乙胺I组 | 20 | 感染、10mg/只饮水剂 | 9 | 45 | 55 | 612.7±50.9 | 1259.1±63.2 | 105.5 | 88.06 |
| 金刚乙胺II组 | 20 | 感染、20mg/只饮水剂 | 11 | 55 | 45 | 622.8±68.7 | 1179.0±77.8 | 89.31 | 75.55 |
| 感染对照组 | 20 | 感染、不给药 | 13 | 65 | 35 | 629.5±47.2 | 1297.6±54.0 | 106.1 | 88.56 |
4.结论
同居感染的药物防治试验结果表明，本发明的中药组合物对同居感染禽流感鸡只具有良好的保护效果，每只每天供5ml和10ml饮水剂的存活率分别达100％和95％，显著优于金刚乙胺的保护效果。此外，同居感染对照组的鸡只并未全部发病，存活率为35％。
中药组合物组鸡只的增重比健康对照组稍差，但差异不显著，相对健康组分别为94.32％和94.07％。金刚乙胺对鸡的生长有明显影响，10mg和20mg剂量组增重比健康对照组分别下降12％和24％。同居感染试验表明本发明的中药组合物对自然感染禽流感鸡具有良好的防治效果。
Claims (7)
1.一种预防禽流感的中药组合物，它是由有效成分和/或药学上可接受的载体组成，其特征在于所述的有效成分是由下列原料制成的：连翘90-110重量份、金银花40-60重量份、北板兰根25-45重量份、黄芩40-60重量份、绵马贯众40-60重量份、黄芪70-90重量份。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述的有效成分是由下列原料制成的：连翘100重量份、金银花50重量份、北板兰根35重量份、黄芩50重量份、绵马贯众50重量份、黄芪80重量份。
3.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述的有效成分是由下列原料制成的：连翘1000g、金银花500g、北板兰根350g、黄芩500g、绵马贯众500g、黄芪800g。
4.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于其剂型是散剂、饮水剂或颗粒冲剂。
5.一种制备权利要求1所述的中药组合物的方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)将连翘、金银花、北板兰根、黄芩、绵马贯众、黄芪分别粉碎成粗粉；
(2)取步骤(1)连翘粗粉用乙醇水溶液作溶剂进行渗漉提取，收集渗漉液；
(3)取步骤(1)制得的金银花粗粉、北板兰根粗粉、黄芩粗粉、绵马贯众粗粉，用乙醇水溶液作溶剂，进行渗漉提取，收集渗漉液；
(4)取经步骤(1)制得的黄芪粗粉用蒸馏水作溶剂，进行渗漉提取，收集渗漉液；
(5)合并(2)、(3)、(4)步骤的渗漉液，静置，过滤，减压蒸馏回收乙醇，剩余药液在温度65-75℃、真空度0.02-0.04Mpa下减压浓缩成稠膏，加入辅料制成所需剂型。
6.一种制备权利要求1所述的中药组合物的方法，其特征在于包括如下步骤：按权利要求1所述百分比用量称取连翘、金银花、北板兰根、黄芩、绵马贯众、黄芪，并分别粉碎成粗粉，按水煎煮法煎煮，收集各次煎出液，沉降过滤后，在温度65-75℃、真空度0.02-0.04Mpa下减压浓缩至药液的重量为中药原材料总重量的1.0±0.1倍，往浓缩药液中加入0.1％的苯甲酸钠和0.05％的尼泊金作防腐剂，即得饮水剂。
7.如权利要求1所述的中药组合物在制备用于预防禽流感的药物中的应用。
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