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CN1471528A - 吡咯烷衍生物及它们作为食糜酶抑制剂的用途 - Google Patents

吡咯烷衍生物及它们作为食糜酶抑制剂的用途 Download PDF

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CN1471528A
CN1471528A CNA018177298A CN01817729A CN1471528A CN 1471528 A CN1471528 A CN 1471528A CN A018177298 A CNA018177298 A CN A018177298A CN 01817729 A CN01817729 A CN 01817729A CN 1471528 A CN1471528 A CN 1471528A
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佐藤文宪
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藤谷武一
本田弥生
喜好昭彦
野竹三津惠
Ф������ά��
G·A·肖维尔
R·G·博伊尔
S·S·克濑尔
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Abstract

可用作食糜酶抑制剂或用于合成所述活性化合物的中间体的新型吡咯烷衍生物或其盐，所述化合物具有式(I),其中R1为环烷基、取代或未取代的苯基或萘基、2，3－二氢化茚基、噻吩基、呋喃基、取代或未取代的吲哚基、苯并呋喃基、取代或未取代的苯并噻吩基等；R2为H、烷基、苯基低级烷基、环烷基或环烷基低级烷基；R3为(i)取代或非取代的单环杂环基团，(ii)取代或非取代的与苯环或吡啶稠合的杂环基团，或(iii)基团(a)：R4和R5独立为H或OH，但是R4和R5不同时为H，或两者结合形成氧代基团；n为0、1、2或3。

Description

吡咯烷衍生物及它们作为食糜酶抑制剂的用途
技术领域
本发明涉及可用作食糜酶抑制剂的吡咯烷衍生物及其合成中间体。
背景技术
食糜酶是在1975年发现的一种胰凝乳蛋白酶类丝氨酸蛋白酶，由肥大细胞脱粒过程释放得到。虽然已知食糜酶能够裂开胞外基体和其它生物活性物质，但更引人注意的还是它能以和血管紧张肽转化酶不同的方式将血管紧张肽I转化为控制血管收缩的血管紧张肽II。先前的研究表明在人心脏中，血管紧张肽II的形成主要受食糜酶，而非血管紧张肽转化酶的控制[Circ.Res.66，883-890(1990)]。因此，可猜测食糜酶对于心血管疾病，如心脏肥大、心肌梗塞、血管增生和血管成形术后的再狭窄等疾病的发展起着重要的作用。
此外，研究还表明食糜酶增强了肥大细胞的组胺释放，并诱导独立于组胺的微血管通透性的持续提高[Eur.J.Pharmacol.352，91-98(1998)]。因此，很有可能食糜酶不但对涉及到肥大细胞的速发型过敏性炎性反应，而且对其迟发型过敏性炎性反应均起重要作用。
含有食糜酶和类胰蛋白酶的肥大细胞主要分布在结缔组织中，而那些含有类胰蛋白酶但不含食糜酶的肥大细胞则主要分布在粘膜组织中。另外，已有报导随着包括形成腹膜内粘合的组织纤维化的发展，食糜酶的活性显著提高[FEBS Letters 406，301-304(1997)，J.Surg.Res.92，40-44(2000)]。这些发现表明食糜酶可能参与了组织纤维化。
食糜酶除了可能与各种疾病和并发症有关外，还已知具有各种其它的生理学活性，如形成其它用于分解基体的活性蛋白酶、活化炎性细胞因子IL-1β前体、在纤维化中形成活性TGF-β、增强泡沫细胞的形成、维持动脉粥样化形成以及将大内皮缩血管肽转化成收缩的31-氨基酸长的内皮缩血管肽。因此，表明食糜酶将在血液流动调节、过敏反应、炎症和组织改型中起重要作用。结合上述信息，可预期作为抗过敏药、抗炎药、抗再狭窄药或抗动脉硬化药的食糜酶抑制剂可为各种疾病和并发症提供新的治疗方法。
迄今为止作出的研究已发现优异的食糜酶抑制剂，并已报导了各种类型的食糜酶抑制剂，如在WO-A-93/25574中公开了各种具有食糜酶抑制活性的化合物，但没有公开这种活性的具体数据。WO-A-93/25574包括非常宽范围的权利要求，公开了28个实施例，其中实施例21的化合物具有下式(A)：
Figure A0181772900091
具有下式(I)的本发明化合物不包括上述化合物(A)。即是下式(D)的R3表示不饱和的单环杂环基团，而不是饱和的单环杂环基团。另外，如在以下描述的实验的公开，化合物(A)的食糜酶抑制活性比本发明化合物的活性要低得多。
发明公开
本发明的一个目的是提供新型的具有食糜酶抑制活性的吡咯烷衍生物。本发明的另一个目的是提供一种含有所述新型吡咯烷衍生物作为活性成分，并混合有药学上可接受的载体或稀释剂的药物组合物。本发明的另一个目的是提供一种食糜酶抑制剂。
本发明的吡咯烷衍生物具有下式(I)的结构，或为其盐：
Figure A0181772900101
其中R1为环烷基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的萘基、四氢萘基、2，3-二氢化茚基、噻吩基、呋喃基、取代或未取代的吲哚基、取代或未取代的二氢吲哚基、苯并呋喃基、二氢苯并呋喃基、取代或未取代的苯并噻吩基或其S-单氧化物或二氧化物，或二氢苯并噻吩基，所述取代的苯基、萘基和苯并噻吩基各自独立具有1至3个独立选自卤原子、低级烷氧基、羟基、任选具有1至3个卤原子的低级烷基的取代基，所述取代的吲哚基和二氢吲哚基在其1-位氮上具有选自低级烷基和低级烷基羰基的取代基；
R2为氢原子、烷基、苯基低级烷基、环烷基或环烷基低级烷基；
R3为(i)取代或非取代的、不饱和单环杂环基团；
(ii)取代或非取代的、饱和或不饱和的与苯环或吡啶环稠合的单环杂环基团；其中所述(i)和(ii)中的取代杂环各自独立具有1至3个独立选自卤原子、低级烷基、低级烷氧基、低级烷基-羰基、氰基、酰胺基、苯基和苯氧基的取代基；所述苯基和苯氧基取代基还可任选具有1至3个独立选自卤原子、低级烷基和卤基-低级烷基的取代基；或
(iii)具有下式(a)的基团：其中A为低级亚烷基，D1和D2同时为亚甲基(-CH2-)，或者，D1和D2中一个为亚甲基(-CH2-)而另一个为亚乙烯基(-CH＝CH-)，其中各个亚甲基任选被氧代基或低级烷基取代，所述亚乙烯基任选被低级烷基取代；R6为被羧基、低级烷氧基羰基或苯基取代的低级烷基；
R4和R5各自独立为氢原子或羟基，但是R4和R5不同时为氢原子，或两者结合形成氧代基团；
n为0、1、2或3。
在整篇说明书和权利要求书中，术语“低级烷基基团”或“低级烷基”部分代表具有1-6个碳原子的直链和支链烷基，包括如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基和己基。
术语“低级烷氧基”代表具有1-6个碳原子的直链或支链烷氧基，包括如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、戊氧基和己氧基。
术语“环烷基”代表具有3-8个碳原子的环烷基，包括如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。
术语“低级亚烷基”代表具有1-6个碳原子的直链或支链亚烷基，包括如亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、异亚丁基、亚戊基、和亚己基。
“低级烷基-羰基”代表被具有1-6个碳原子的直链或支链烷基取代的羰基，包括如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基和己酰基。
“卤原子”代表氟原子、溴原子、氯原子或碘原子。
R3中“不饱和的单环杂环基团”代表不饱和的5-7元、优选5或6元含有1-3个选自氮原子、氧原子和硫原子的杂原子的单环杂环基团，包括如呋喃基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噁二唑基和吡啶基。
R3中“饱和或不饱和的与苯环或吡啶环稠合的单环杂环基团”代表饱和或不饱和的5-7元、优选5或6元含有1-3个选自氮原子、氧原子和硫原子的杂原子的单环杂环基团，该杂环基团与苯环或吡啶环稠合，包括如苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并呋咱基或其N-氧化物、喹啉基、苯并二氧杂环戊烯基以及异噁唑并[4，3-b]吡啶基。R3的式(a)基团包括如以下各式的基团：其中A和R6如上定义。
本发明优选的化合物为式(I)中各基团和符号符合以下条件的化合物或其盐：其中R1为C3-C8环烷基，苯基，被1-3个独立选自卤原子、C1-C4烷氧基、羟基、C1-C4烷基和卤代-C1-C4烷基的取代基取代的苯基，萘基，四氢萘基，2，3-二氢化茚基，噻吩基，呋喃基，吲哚基，N-(C1-C4烷基)吲哚基，N-(C1-C4烷基羰基)吲哚基，二氢吲哚基，苯并呋喃基，二氢苯并呋喃基，苯并噻吩基或其S-单氧化物或二氧化物或二氢苯并噻吩基；
R2为氢原子、C1-C6烷基、苯基-C1-C4烷基、C3-C8环烷基或C3-C8环烷基-C1-C4烷基；
R3为(i)选自呋喃基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噁二唑基和吡啶基的不饱和单环杂环基团；
(ii)与苯或吡啶稠合的饱和或不饱和的单环杂环基团，所述基团选自苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并呋咱基或其N-氧化物、喹啉基、苯并二氧杂环戊烯基和异噁唑并[4，3-b]吡啶基，其中所述(i)和(ii)中的杂环基团可各自独立具有1-3个独立选自以下基团的取代基：氟或氯原子、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基-羰基、氰基、酰胺基、苯基和苯氧基；所述苯基和苯氧基取代基还可任选具有1-3个独立选自以下基团的取代基：卤原子、C1-C4烷基和卤代-C1-C4烷基；或
(iii)式(a-1)-(a-4)中的任一种基团：其中A为C1-C4亚烷基，R6为被羧基、C1-C5烷氧基羰基或苯基取代的C1-C4烷基；
R4和R5各自独立为氢原子或羟基，但是R4和R5不同时为氢原子，或两者结合形成氧代基团；
n为1或2。
本发明的更优选的化合物为式(I)中各基团和符号符合以下条件的化合物或其盐：其中R1为C5-C7环烷基，苯基，被1-3个独立选自氟、氯或溴原子、C1-C4烷氧基、羟基、C1-C4烷基和三氟甲基的取代基取代的苯基，萘基，四氢萘基，2，3-二氢化茚基，噻吩基，呋喃基，吲哚基，N-(C1-C4烷基)吲哚基，N-乙酰基吲哚基，二氢吲哚基，苯并呋喃基，二氢苯并呋喃基，苯并噻吩基或其S-单氧化物或二氧化物或二氢苯并噻吩基；
R2为氢原子、C1-C4烷基、苯基-C1-C2烷基、C5-C7环烷基或C5-C7环烷基-C1-C2烷基；
R3为(i)选自呋喃基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噁二唑基和吡啶基的不饱和单环杂环基团；
(ii)与苯或吡啶稠合的饱和或不饱和的单环杂环基团，所述基团选自苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并呋咱基或其N-氧化物、喹啉基、苯并二氧杂环戊烯基和异噁唑并[4，3-b]吡啶基，其中所述(i)和(ii)中的杂环基团可各自独立具有1-3个独立选自以下基团的取代基：氟或氯原子、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、乙酰基、氰基、酰胺基、苯基和苯氧基；所述苯基和苯氧基取代基还可任选具有1-3个独立选自以下基团的取代基：氟或氯原子、C1-C3烷基和三氟甲基；或(iii)式(a-1)-(a-4)中的任一种基团：
Figure A0181772900141
其中A为C1-C2亚烷基，R6为被羧基、叔丁氧基羰基或苯基取代的C1-C2烷基；
R4和R5各自独立为氢原子或羟基，但是R4和R5不同时为氢原子，或两者结合形成氧代基团；
n为1或2。
根据R4和R5基团的种类，可以将本发明的化合物(I)分成两类，即是当R4和R5基团结合形成氧代基团时，所述化合物具有下式(I-A)的结构，当R4和R5基团中一个为氢原子，而另一个为羟基时，所述化合物具有式(I-B)的结构。
Figure A0181772900142
其中R1、R2、R3和n如上定义。
式(I-A)的化合物可具有其中相应于式(I)的R4和R5的酮基通过水分子的加成反应而转化为两个羟基的结构。
式(I-A)的化合物具有优异的食糜酶抑制活性，因此可被用作药物。可通过氧化作用将式(I-B)的化合物转化成式(I-A)的化合物，因此可用作制备活性化合物(I-A)的中间体。
式(I-A)的化合物通过口服给药具有高的血液浓度，从而显示出优异的食糜酶抑制活性。化合物(I-A)的特性可归因于取代基R3的种类，尤其是所述R3与其它取代基，如R1和其它基团的结合而产生的效果。
考虑到优异的食糜酶抑制活性，特别优选的化合物为式(I-A′)的化合物或其药学上可接受的盐：
Figure A0181772900151
其中R3a和R3b独立为氢原子，低级烷基，低级烷基-羰基或可被卤原子或卤代低级烷基取代的苯基；X为碳原子或硫原子；Y为氧原子或氮原子；符号 是指单键或双键，R1、R2和n如上定义。
在所述优选的化合物(I-A′)中，特别优选的化合物为式(I-A′)中X和Y符合以下条件的化合物或其药学上可接受的盐：其中X为碳原子且Y为氧原子，或X为硫原子且Y为氮原子，其它符号如上定义。在特别优选的式(I-A′)化合物中，R1为取代或非取代的苯基、取代或非取代的萘基或苯并噻吩基，所述取代的苯基和取代的萘基基各自独立具有1-3个独立选自以下基团的取代基：卤原子、甲基、甲氧基、三氟甲基和羟基。
实施本发明的最佳方案
适合的式(I-A′)化合物示例如下。化合物1-A-1：
N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基甲基)-3，3，3-三氟-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-(甲基乙基)-2-氧代乙基](3，5-二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺；化合物1-A-2：
N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(2-萘基甲基)-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-(甲基乙基)-2-氧代乙基](3，5-二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺；化合物1-A-3：
N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基甲基)-3，3，3-三氟-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-乙基-2-氧代乙基](3，5二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺；化合物1-A-4：
N-[1-((1R)-1-甲基丙基)(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基甲基)-3，3，3-三氟-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-2-氧代乙基](3，5-二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺；化合物1-A-5：
N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基甲基)-3，3，3-三氟-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-甲基-2-氧代乙基](3，5二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺；化合物1-A-20：
N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基甲基)-3，3，3-三氟-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-(甲基乙基)-2-氧代乙基](4-甲基(1，2，3-噻二唑-5-基))甲酰胺；
本发明的化合物(I)具有几个不对称碳，包括对映异构体、非对映异构体及其混合物。这些异构体及其混合物也包括在本发明中。另外，化合物(I)可为水合物和/或盐的形式，这些都包括在本发明中。式(I)化合物的盐不受任何特别的限定，但优选为其药学上可接受的盐，如与有机碱(如三甲胺、三乙胺、N-甲基吗啉)所成的盐、与无机金属(如钠、钾)所成的盐。一些式(I)的化合物可与有机酸如酒石酸、富马酸、乙酸、乳酸、琥珀酸、甲磺酸、马来酸、丙二酸、葡糖酸、氨基酸(例如天门冬氨酸)形成酸加成盐，或与无机酸(如盐酸、磷酸)形成酸加成盐。制备化合物(I)的方法
本发明的化合物(I)通过如下方法制备。
一种优选的方法为如下所示的反应方案1。反应方案-1
Figure A0181772900181
其中R为氨基保护基，W为离去基团，R1、R2、R3和n如上定义。
由R定义的氨基保护基包括任何常用的氨基保护基，如烷氧基羰基(如叔丁氧基羰基，缩写为“Boc”)，该基团可通过酸或碱水解除去；或取代或非取代的苄氧基羰基(通常表示为“Z”)，该基团可通过氢解除去。
在以上反应中由“W”定义的离去基团包括羟基、卤原子、低级烷氧基、低级烷硫基、低级烷基亚磺酰基或低级烷基磺酰基。
在上述反应方案1的步骤1中，用低聚甲醛处理已知化合物(1)得到化合物(2)。在步骤2中，通过以下反应将化合物(2)转化为化合物(3)：在氟化铯存在下，使化合物(2)与三(低级烷基)(三氟甲基)硅烷化合物(如三甲基(三氟甲基)硅烷)反应，用甲醇处理反应产物，将所得产物还原开环，随后进行脱羟基甲基化反应。还原开环通常用硼氢化钠来实施，脱羟基甲基化反应通过用碱如碳酸钾处理来实施。在步骤3中，通过上述的常规方法除去化合物(3)的氨基保护基“R”，得到化合物(4)。步骤1、2和3的反应可逐步进行，或者可通过单罐反应实施。
在步骤4中，将以上所得的化合物(4)与已知化合物(5)反应。该步骤的反应通过通常用于制备肽的常规酰胺化反应来实施。如通过将化合物(4)与化合物(5)在溶剂(如二氯甲烷、二甲基甲酰胺)中混合来使它们反应，或者不使用溶剂，在室温或高温下，在存在或不存在碱(如三乙胺)下搅拌所述混合物。当化合物(5)中的符号“W”为羟基时，步骤4的反应最好在缩合试剂如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺、N，N′-二环己基碳二亚胺、1，1′-羰基二咪唑或碳酸N，N′-二琥珀酰亚胺酯的存在下实施。当所述符号“W”为羟基时，步骤4的反应还可通过如下反应来实施：先使化合物(5)与氯甲酸乙酯在叔胺(如三乙胺或优选N-甲基吗啉)存在下反应，接着使所得产物与化合物(4)反应。
在步骤5中，通过常规方法除去化合物(6)的氨基保护基“R”。例如，当所述氨基保护基为叔丁氧基羰基时，通过使化合物(6)与酸，如三氟乙酸、氢氯酸、氢溴酸、硫酸或乙酸接触来将其除去。所述反应在溶剂，如二氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃、苯、甲苯或它们的混合物中实施。当化合物(6)的氨基保护基“R”为苄氧基羰基时，最好可通过在溶剂(如乙酸乙酯、乙醇)中，在催化剂(如铂、钯、阮内镍)存在下，在低于60℃，通常在室温下用氢气处理所述化合物(6)来将其除去。
随后在步骤6中，将如此制得的化合物(7)与化合物(8)反应。按与步骤4相同的方式实施所述反应，得到化合物(I-B)。当符号“R3”为式(a)的基团时，化合物(8)是新的物质，所述化合物可通过在以下的参考实施例中描述的方法或其相似方法来制备。当“R3”不为式(a)的基团时，化合物(8)是已知物质，其中下式(II)的化合物特别重要。其中R3a、R3b、X、Y、W和
Figure A0181772900202
如上定义。虽然上式(II)的化合物是已知的，但是它们从未被用于制备本发明的式(I-A)的化合物。
在以上步骤6中制得的式(I-B)的化合物为新化合物，可用作制备本发明所需的具有优异食糜酶抑制活性的式(I-A)化合物的中间体。
即是，在步骤7中，通过将化合物(I-B)(OH-化合物)的羟基氧化而将其转化为化合物(I-A)(酮化合物)。步骤7的氧化反应可通过在溶剂(如二氯甲烷、二甲基甲酰胺、四氢呋喃、乙酸乙酯、甲苯)中用氧化剂处理化合物(I-B)来实施。所述氧化剂为例如Dess-Martin试剂(一种碘化苯衍生物)。所述氧化反应可采用五氧化二磷，在二甲亚砜存在下实施；采用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基碳二亚胺-二氯乙酸，在二甲亚砜存在下实施；或采用草酰氯与三乙胺的混合物，在二甲亚砜存在下实施(所谓的Swem氧化)。
在上述方案1的各步骤中，具有游离羧基的化合物可任选通过常规的保护基(如叔丁基、苄基)进行保护，反应后，所述保护基可通过常规的方法除去。此外，当在各步骤中制得的化合物具有异构体时，这些异构体可通过常规的方法解析。实施例
通过以下的实施例、参考实施例和实验对本发明进行举例说明，但不能认为是对本发明的限定。
在这些实施例中使用了以下缩写符号：
Boc：叔丁氧基羰基
Ph：苯基
Me：甲基
Et：乙基
Z：苄氧基羰基或(苯基甲氧基)羰基
THF：四氢呋喃
DMSO：二甲亚砜
DMF：二甲基甲酰胺
LSIMS：液体二次离子质谱
1H-NMR：质子核磁共振波谱
APCIMS：大气压力化学电离光谱
        (atmospheric pressure chemical ionization spectrometry)
IR：红外光谱参考实施例1
制备反应方案1的原料化合物(8)：2-(3-{[(叔丁基)氧基羰基]甲基}-2-氧代咪唑烷基)乙酸(8a)：
(1)在0℃，往2-氧代咪唑烷(0.3g)和溴代乙酸叔丁酯(1.50g)的无水DMF(10ml)溶液中加入叔丁醇锂(0.6g)。在该温度下搅拌30分钟后，在室温下再将所述反应混合物搅拌1小时。将反应混合物倒入冰水中，随后收集沉淀，用水洗涤并干燥。沉淀物用乙酸乙酯重结晶，过滤得到为白色固体的2-(3-{[(叔丁基)氧基羰基]甲基}-2-氧代咪唑烷基)乙酸叔丁酯(0.86g)。
m.p.100-102℃。
LSIMS(m/z)：315[M+H)+]
1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.46(18H，s)，3.54(4H，s)，3.89(4H，s)。
(2)往2-(3-{[(叔丁基)氧基羰基]甲基}-2-氧代咪唑烷基)乙酸叔丁酯(1.14g)在乙醇(10ml)和水(10ml)中的溶液中加入氢氧化钾(0.22g)，随后在70℃下将所述反应混合物搅拌5小时。减压除去乙醇后，往剩余物中加入饱和碳酸氢钠水溶液。将水相用乙酸乙酯洗涤，用10％的盐酸酸化，用乙酸乙酯萃取。所得有机相用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。沉淀物用乙酸乙酯重结晶，过滤得到为无色固体的2-(3-{[(叔丁基)氧基羰基]甲基}-2-氧代咪唑烷基)乙酸(0.30g)。
m.p.112-113℃
LSIMS(m/z)：259[(M+H)+]
1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.46(9H，s)，3.53(4H，s)，3.89(2H，s)4.01(2H，s)，7.11(1H，br s)。参考实施例2
制备反应方案1的原料化合物(8)：
2-(3-{[(叔丁基)氧基羰基]甲基}-2，4-二氧代-1，3-二氢嘧啶基)乙酸(8b)：
(1)往2，4-二氧代嘧啶(1.0g)的无水DMF(10ml)溶液中加入溴代乙酸苄酯(2.5g)和碳酸钾(2.5g)。在室温下搅拌15小时后，将反应混合物倒入水中，用乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗涤，随后用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。沉淀物用乙醚洗涤得到为无色固体的2-(2，4-二氧代-1，3二氢嘧啶基)乙酸苯基甲酯(1.4g)。
m.p.192-194℃
LSIMS(m/z)：261[(M+H)+]
1H-MR(300MHz，d6-DMSO)：δ4.59(2H，s)，5.20(2H，s)，5.62(1H，d)，7.37(5H，m)，7.65(1H，d)，11.4(1H，s)。
(2)在0℃，往2-(2，4-二氧代-1，3二氢嘧啶基)乙酸苯基甲酯(1.0g)的无水DMF(10ml)溶液中分批加入氢化钠(0.18g)，在冰浴冷却下将所述反应混合物搅拌15分钟后，加入溴化乙酸叔丁酯(0.9g)。室温下搅拌所述混合物1小时后，往所述反应混合物中加入饱和的氯化铵水溶液，所得的反应混合物用乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。剩余物经柱层析纯化(硅胶，正己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)，得到为无色油状物的2-(3-{[(叔丁基)氧基羰基]甲基}-2，4-二氧代-1，3-二氢嘧啶基)乙酸苯基甲酯(1.2g)。
LSIMS(m/z)：375[M+H)+]
1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.46(9H，s)，4.51(2H，s)，4.58(2H，s)5.21(2H，s)，5.81(1H，d)7.10(1H，d)7.36(5H，m)。
(3)往2-(3-{[(叔丁基)氧基羰基]甲基}-2，4-二氧代-1，3-二氢嘧啶基)乙酸苯基甲酯(1.2g)的乙酸乙酯(20ml)溶液中加入20％重量的氢氧化钯(50mg)。在室温及氢气气氛下搅拌所述混合物1小时后，过滤除去催化剂。减压蒸发滤液得到为白色粉末的2-(3-{[(叔丁基)氧基羰基]甲基}-2，4-二氧代-1，3-二氢嘧啶基)乙酸。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ1.46(9H，s)，4.51(2H，s)，4.59(2H，s)，5.86(1H，d)，7.17(1H，d)。参考实施例3
制备反应方案1的原料化合物(8)：2-(2-氧代-3-苄基咪唑烷基)乙酸(8c)：
Figure A0181772900241
(1)在0℃，往N-苄基乙二胺(6.0g，40mmol)的甲苯(50ml)溶液中加入1，1′-羰基双(1H-咪唑)(7.8g，48mmol)。在室温下搅拌所述反应混合物过夜后，将所述反应混合物用水、5％的柠檬酸水溶液和盐水洗涤。有机相用无水硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。剩余物用温热的乙酸乙酯重结晶，过滤得到1-苄基咪唑烷-2-酮(3.47g)。
1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)：δ7.22-7.37(5H，m)，6.41(1H，br s)，4.23(2H，s)，3.14-3.26(4H，m)。
APCIMS：177(MH+)
mp.131-131.5℃
(2)在0℃，往1-苄基咪唑烷-2-酮(3.5g，19.9mmol)的DMF(50ml)溶液中加入叔丁醇锂(1.9g，23.8mmol)和溴化乙酸叔丁酯(3.2ml，21.8mmol)。室温下搅拌所述混合物过夜后，将反应混合物倒入水(100ml)中，并将所得混合物用乙酸乙酯萃取。有机相用水、10％柠檬酸水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，有机溶液用无水硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。结晶剩余物用正己烷洗涤，干燥得到2-(2-氧代-3-苄基咪唑烷基)乙酸叔丁酯(5.08g)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.24-7.36(5H，m)，4.40(2H，s)，3.90(2H，s)，3.40-3.46(2H，m)，3.26-3.20(2H，m)。
(3)往2-(2-氧代-3-苄基咪唑烷基)乙酸叔丁酯(2.51g，8.64mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液中加入三氟乙酸(10ml)。室温下搅拌所述混合物1小时后，减压除去溶剂。通过用乙酸乙酯处理将油状残余物重结晶，过滤得到2-(2-氧代-3-苄基咪唑烷基)乙酸(1.56g)。
1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)：δ7.65(1H，br s)，7.26-7.36(5H，m)，4.41(2H，s)，4.04(2H，s)，3.45-3.50(2H，m)，3.25-3.30(2H，m)。
APCIMS：235(MH+)
mp.132-133℃参考实施例4
制备反应方案1的原料化合物(8)：
2-(2，5-二氧代-3-苄基咪唑烷基)乙酸(8d)：
Figure A0181772900251
(1)在60℃，往乙内酰脲(10.0g，0.10mol)的DMF(100ml)溶液中加入碳酸钾(20.7g，0.15mol)和溴化乙酸苄酯(18.9ml，0.12mol)。在60℃下搅拌所述反应混合物过夜后，将该反应混合物倒入水(250ml)中，用乙酸乙酯萃取所得混合物。有机相用5％柠檬酸水溶液和盐水洗涤。有机相用无水硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。结晶剩余物用乙醚洗涤，干燥得到2-(2，5-二氧代咪唑烷基)乙酸苯基甲酯(14.9g)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ8.24(1H，br s)，7.32-7.42(5H，m)，5.17(2H，s)，4.23(2H，s)，4.03(2H，s)。
APCIMS：249(MH+)
mp.142-144℃
(2)在0℃，往2-(2，5-二氧代咪唑烷基)乙酸苯基甲酯(4.0g，16.1mmol)的DMF(50ml)溶液中加入叔丁醇锂(1.6g，19.3mmol)和苄基溴(2.1ml，17.7mmol)。室温下搅拌所述混合物过夜后，将反应混合物倒入水(100ml)中，将所得混合物用乙酸乙酯萃取。有机相用水、10％柠檬酸水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机溶液用无水硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。剩余物经柱层析纯化(硅胶，正己烷∶乙酸乙酯＝3∶1)，得到2-(2，5-二氧代-3-苄基咪唑烷基)乙酸苯基甲酯(3.42g)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.22-7.41(10H，m)，5.20(2H，s)，4.59(2H，s)，4.34(2H，s)，3.81(2H，s)。
(3)往2-(2，5-二氧代-3-苄基咪唑烷基)乙酸苯基甲酯(3.42g，10.0mmol)的THF-H2O(3∶1，40ml)溶液中加入一水合氢氧化锂(0.85g，20.0mmol)。在50℃下搅拌所述混合物6小时后，将所述反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化，用乙酸乙酯洗涤。水相用稀盐酸酸化，用乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。剩余物用乙酸乙酯重结晶，过滤得到2-(2，5-二氧代-3-苄基咪唑烷基)乙酸(1.28g)。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.24-7.38(10H，m)，4.57(2H，s)，3.99(2H，s)，3.96(2H，d，J＝5.0Hz)。
APCIMS：249(MH+)
mp.125-127℃参考实施例5
制备方案1的原料化合物(8)：
2-(5-甲基-2，4-二氧代-3-苄基-1，3-二氢嘧啶基)乙酸(8e)：
按照参考实施例4相同的方式制得化合物8e。
1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ8.42(1H，br s)，7.23-7.44(5H，m)，6.91(1H，s)，5.13(2H，s)，4.45(2H，s)，1.94(3H，s)。
APCIMS：275(MH+)
mp.130-131℃参考实施例6
制备反应方案1的原料化合物(4)：
(2S，3S)-3-氨基-4-苯并[b]噻吩-3-基-1，1，1-三氟丁-2-醇盐酸盐(化合物4-1)
(1)往化合物1：(2S)-3-苯并[b]噻吩-3-基-2[(叔丁氧基)羰基氨基]丙酸(20.0g，62.2mmol)的甲苯(220ml)溶液中加入低聚甲醛(6.2g)和对甲苯磺酸一水合物(375mg)。在90℃搅拌所得混合物3小时后，将所述反应混合物用冰浴冷却，随后用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机相用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。剩余物经柱层析纯化(硅胶，正己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)得到化合物2：(4S)-4-(苯并[b]噻吩-3-基-甲基)-5-氧代-1，3-噁唑烷-3-甲酸叔丁酯(17.4g)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.79-7.86(2H，m)，7.32-7.37(2H，m)，7.25(1H，s)，5.11-5.41(1H，m)，4.60(1H，brs)，4.16-4.48(1H，m)，3.37-3.74(2H，m)，1.44(9H，s)
LSIMS(m/z)：334[(M+H)+]
(2)室温下，往化合物2(25.3g，75.9mmol)和三甲基(三氟甲基)硅烷(13.5g，94.9mmol)的THF(75ml)溶液中加入氟化铯(2.3g，15.2mmol)。将所述混合物搅拌1小时。往所述反应混合物加入甲醇(25ml)后，在室温下将所述混合物搅拌15分钟。减压除去溶剂，剩余物用乙酸乙酯萃取，随后用水和盐水洗涤。有机相用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。
在0℃将剩余物溶解在甲醇(100ml)中，并往所得溶液中加入硼氢化钠(2.9g，75.9mmol)。搅拌所述混合物1小时后，用10％柠檬酸水溶液将所述反应混合物酸化，并用乙酸乙酯萃取。有机相用10％柠檬酸水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机溶液用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。
室温下将剩余物溶解在DMF(100ml)和水(75ml)中，并往所得溶液中加入碳酸钾(12.6g，91.1mmol)。搅拌所述混合物1小时后，用10％柠檬酸水溶液将所述反应混合物酸化，并用乙酸乙酯萃取。有机相用10％柠檬酸水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机溶液用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。剩余物经柱层析纯化(硅胶，正己烷∶乙酸乙酯10∶1)得到化合物3：N-[(1S，2S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基-甲基)-3，3，3-三氟-2-羟丙基](叔丁氧基)甲酰胺(22.4g)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.80-7.89(2H， m)，7.35-7.44(2H，m)，7.25(1H，s)，5.05(1H，brs)，4.81-4.83(1H，d，J＝7.5Hz)，3.99-4.02(2H，m)，3.23-3.40(2H，m)，1.44(9H，s)
LSIMS(m/z)：376[(M+H)+]
m.p.：118-120℃
(3)往化合物3(3.75g，10mmol)中加入4mol/1000ml氯化氢的1，4-二噁烷溶液(25ml)。室温下搅拌所述混合物30分钟后，减压除去溶剂。剩余物通过用乙醚处理重结晶，过滤得到化合物4-1：(2S，3S)-3-氨基-4-苯并[b]噻吩-3-基-1，1，1-三氟丁-2-醇盐酸盐(3.1g)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ8.02-8.05(1H，m)，7.91-7.94(1H，m)，7.71(1H，brs)，7.40-7.50(2H，m)，4.12-4.15(1H，m)，3.70(1H，brs)，3.28-3.32(2H，m)
APCIMS：276(MH+)
m.p.：123-125℃参考实施例7
制备反应方案1的原料化合物(4)：
(2S，3S)-3-氨基-1，1，1-三氟-4-(2-萘基)丁-2-醇(化合物4-2)
Figure A0181772900291
(1)往化合物1：(2S)-3-(2-萘基)-2-[(苯基甲氧基)羰基氨基]丙酸(14.3g，40.9mmol)的甲苯(140ml)悬浮液中加入低聚甲醛(2.0g)和对甲苯磺酸一水合物(600mg)。将所述混合物回流30分钟后，在冰浴中冷却所述反应混合物，随后用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机相用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。剩余物用异丙醚处理重结晶得到化合物2：(4S)-4-(2-萘基甲基)-5-氧代-1，3-噁唑烷-3-甲酸苯基甲酯(11.8g)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.68-7.81(3H，m)，7.40-7.60(8H，m)，7.18(1H，brs)，5.21-5.29(3H，m)，4.64(1H，s)，4.23(1H，s)，3.36(1H，s)
APCIMS：362(MH+)
m.p.：88-89℃
(2)往冰浴冷却的化合物2(11.8g，32.7mmol)和三甲基(三氟甲基)硅烷(5.8g，40.8mmol)的THF(30ml)溶液中加入氟化铯(1.0g，6.53mmol)。室温下将所述混合物搅拌30分钟，减压除去溶剂。往剩余物中加入甲醇(60ml)后，室温下搅拌所得混合物15分钟。
在0℃的冰浴中冷却溶液，并往其中加入硼氢化钠(1.2g，32.7mmol)。搅拌所得混合物30分钟后，往所述溶液中加入水(45ml)和碳酸钾(5.4g，39.2mmol)。室温下搅拌所述溶液30分钟后，减压除去甲醇，剩余物用乙酸乙酯萃取。有机相用10％柠檬酸水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机溶液用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。剩余物经柱层析纯化(硅胶，正己烷∶乙酸乙酯9∶1)得到化合物3：N-[(1S，2S)-3，3，3-三氟-2-羟基-1-(2-萘基甲基)丙基](苯基甲氧基)甲酰胺(8.4g)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.74-7.84(3H，m)，7.65(1H，brs)，7.46-7.51(2H，m)，7.33(6H，m)，5.22-5.25(1H，m)，5.12(2H，s)，4.10-4.12(2H，m)，3.98(1H，m)，3.28(1H，m)3.17-3.19(1H，m)
APCIMS：404(MH+)
m.p.：172-174℃
(3)往化合物3(8.4g，20.8mmol)的乙酸乙酯(100ml)溶液中加入20％重量的氢氧化钯(1.5g)。室温下，在氢气气氛中搅拌所述混合物3小时后，过滤除去催化剂。减压蒸发滤液，将剩余物的白色固体用正己烷洗涤，得到化合物4-2：(2S，3S)-3-氨基-1，1，1-三氟-4-(2-萘基)丁-2-醇(5.3g)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.79-7.85(3H，m)，7.66(1H，s)，7.45-7.53(2H，m)，7.33-7.36(1H，m)，3.71-3.78(1H，m)，3.62-3.68(1H，m)，3.02-3.09(1H，m)，2.78-2.90(1H，m)
APCIMS：270(MH+)
p.：122-125℃参考实施例8
制备反应方案1的原料化合物(4)：
按照参考实施例6或7描述的相同方式得到表1所示的化合物。
                         表1
Figure A0181772900321
                                  *APCIMS
                                  **非对映体混合物
                             表1(续)
                                      *APCIMS
                                      **非对映体混合物实施例1
制备N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基-甲基)-3，3，3-三氟-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-(甲基乙基)-2-氧代乙基](3，5-二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺(化合物I-A-1)：
(1)(步骤4)往化合物4：(2S，3S)-3-氨基-4-苯并[b]噻吩-3-基-1，1，1-三氟丁-2-醇盐酸盐(14.1g，45.2mmol)的吡啶(135ml)溶液中加入N-(叔丁氧基羰基)-L-缬氨酰-L-脯氨酸(反应方案1的化合物5)(14.2g，45.2mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(9.1g，47.5mmol)。室温下搅拌所述反应混合物15小时，随后减压除去溶剂。剩余物用乙酸乙酯萃取，随后用5％硫酸氢钾水溶液、水和盐水洗涤。有机溶液用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。剩余物经柱层析纯化(硅胶，正己烷∶乙酸乙酯2∶1)得到化合物6：N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S，2S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基甲基)-3，3，3-三氟-2-羟丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-(甲基乙基)-2-氧代乙基](叔丁氧基)甲酰胺(19.8g)。
APCIMS：572(MH+)
(2)(步骤5)往化合物6(19.8g，34.6mmol)中加入4mol/1000ml氯化氢的1，4-二噁烷溶液(90ml)。室温下搅拌30分钟后，减压除去溶剂。将剩余物的白色粉末用正己烷洗涤得到化合物7：[(2S)-1-((2S)-2-氨基-3-甲基丁酰基)吡咯烷-2-基]-N-[(1S，2S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基-甲基)-3，3，3-三氟-2-羟丙基]甲酰胺盐酸盐(17.6g)。
APCIMS：472(MH+)
(3)(步骤6)往化合物7(10.2g，20.1mmol)的吡啶(100ml)溶液中加入3，5-二甲基异噁唑-4-甲酸(反应方案1的化合物8)(2.8g，20.1mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(4.0g，21.1mmol)。室温下搅拌反应混合物15小时，随后减压除去溶剂。剩余物用乙酸乙酯萃取，随后依次用5％硫酸氢钾水溶液、水和盐水洗涤。有机溶液用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。剩余物经中压CHP20P(Mitsubishi Chemical Co.Ltd.)柱层析纯化，以30-70％的乙腈梯度水溶液为洗脱液，得到化合物I-B-1：N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S，2S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基甲基)-3，3，3-三氟-2-羟丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-(甲基乙基)-2-氧代乙基](3，5-二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺(8.2g)。
APCIMS：595(MH+)
(4)(步骤7)往化合物I-B-1(8.2g，13.8mmol)的二氯甲烷(160ml)溶液中加入叔丁醇(1.4ml，13.8mmol)和Dess-Martin periodinane(11.7g，27.6mmol)。室温下搅拌所得反应混合物15小时，随后减压除去溶剂。剩余物用乙酸乙酯萃取，随后用饱和硫代硫酸钠水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。用硫酸钠干燥有机溶液，过滤并减压蒸发。剩余物经中压CHP20P柱层析纯化，以30-70％的乙腈梯度水溶液为洗脱液，得到化合物I-A-1：N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基甲基)-3，3，3-三氟-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-(甲基乙基)-2-氧代乙基](3，5-二-甲基异噁唑-4-基)甲酰胺(5.9g)。APCIMS：572(MH+)
1H NMR(300MHz，d6-DMSO)：δ0.93(3H，d)，0.95(3H，d)1.69-2.13(4H，m)，2.25(3H，s)，2.47(3H，s)，2.89(1H，dd)，3.28-3.45(3H，m)，3.52-3.59(1H，m)，3.73-3.80(1H，m)，4.37-4.46(2H，m)，7.26-7.48(4H，m)，7.78(1H，d)，7.93-8.11(2H，m).
对C28H31F3N4O5S·0.25H2O的元素分析：
计算值：C 56.32，H 5.32，F 9.54，N 9.38，S 5.37
实测值：C 56.04，H 5.51，F 9.34，N 9.11，S 5.13实施例2
制备N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(2-萘基甲基)-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-(甲基乙基)-2-氧代乙基]-(3，5-二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺(化合物I-A-2)：
Figure A0181772900361
(1)(步骤4)往化合物4：(2S，3S)-3-氨基-1，1，1-三氟-4-(2-萘基)丁-2-醇(0.93g，3.44mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液中加入N-(苄氧基基)-L-缬氨酰-L-脯氨酸(反应方案1的化合物5)(1.20g，3.44mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.69g，3.62mmol)。室温下搅拌所得反应混合物15小时，随后减压除去溶剂。剩余物用乙酸乙酯萃取，随后用10％盐酸、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机溶液用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。剩余物经中压CHP20P柱层析纯化，以20-70％的乙腈梯度水溶液为洗脱液，得到化合物6：N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S，2S)-3，3，3-三氟-2-羟基-1-(2-萘基甲基)丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-(甲基乙基)-2-氧代乙基]-(苯基甲氧基)甲酰胺(1.6g)。
APCIMS：600(MH+)
(2)(步骤5)往化合物6(1.6g，2.67mmol)的乙酸乙酯(20ml)溶液中加入20％重量的氢氧化钯(0.3g)。在室温及氢气气氛下搅拌3小时后，过滤除去催化剂。减压蒸发滤液得到化合物7：[(2S)-1-((2S)-2-氨基-3-甲基丁酰基)吡咯烷-2-基]-N-[(1S，2S)-3，3，3-三氟--2-羟基-1-(2-萘基甲基)丙基]甲酰胺(1.24g)。
APCIMS：466(MH+)
(3)(步骤6)往化合物7(1.24g，2.67mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入3，5-二甲基异噁唑-4-甲酸(反应方案1的化合物8)(0.38g，2.67mmol)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(0.54g，2.80mmol)。室温下搅拌所得反应混合物15小时，随后减压除去溶剂。剩余物用乙酸乙酯萃取，随后用10％盐酸、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机溶液用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。剩余物经中压CHP20P柱层析纯化，以20-70％的乙腈梯度水溶液为洗脱液，得到化合物I-B-2：N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S，2S)-3，3，3-三氟-2-羟基-1-(2-萘基甲基)丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-(甲基乙基)-2-氧代乙基](3，5-二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺(1.2g)。
APCIMS：589(MH+)
(4)(步骤7)往化合物I-B-2(1.2g，2.04mmol)的二氯甲烷(25ml)溶液中加入叔丁醇(0.20ml，2.04mmol)和Dess-Martin periodinane(1.7g，4.08mmol)。室温下搅拌所得反应混合物15小时，随后减压除去溶剂。剩余物用乙酸乙酯萃取，随后用饱和硫代硫酸钠水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机溶液用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。剩余物经中压CHP20P柱层析纯化，以20-70％的乙腈梯度水溶液为洗脱液，得到化合物I-A-2：N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(2-萘基甲基)-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-(甲基乙基)-2-氧代乙基](3，5-二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺(0.60g)。
APCIMS：587(MH+)
1H NMR(300MHz，d6-DMSO)：δ8.05(1H，d)，7.71-7.94(4H，m)，7.40-7.45(2H，m)，7.16-7.22(2H，m)，4.28-4.42(3H，m)，3.70(1H，m)，3.50(1H，m)，3.30-3.34(3H，m)，2.88(1H，dd)，2.40(3H，s)，2.30(3H，s)，1.99-2.07(1H，m)，1.58-1.91(2H，m)，0.87(3H，d)，0.85(3H，d)
对C30H33F3N4O5·0.75H2O的元素分析：
计算值：C 60.04，H 5.79，F 9.50，N 9.34
实测值：C 60.06，H 5.85，F 9.53，N 9.16实施例3
制备化合物I-A：
按照实施例1或2描述的相同方法得到下表2至12中公开的化合物。在这些表中，质谱为APCIMS，另有声明除外。
                                  表2
                                  表2(续)
Figure A0181772900401
                                  表3
                                  表4
Figure A0181772900421
                                  表5
                                  表5(续)
                                  表5(续)
Figure A0181772900451
                                  表6
Figure A0181772900461
                                  表7
                                  表8
                                  表9
Figure A0181772900491
                                  表9(续)
                                  表9(续)
                                  表10
                                  表11
Figure A0181772900531
                                  表12
Figure A0181772900541
                                  表12(续)参考实施例9
制备WO-A-93/25574公开的参比化合物(A)。
Figure A0181772900561
A.{(2S)-1-[(2S)-2-({4-[(叔丁氧基)-N-甲基羰基氨基]哌啶基}-羰基氨基)-3-甲基丁酰基]吡咯烷-2-基}-N-[(1S，2S)-3，3，3-三氟-2-羟基-1-苄基丙基]甲酰胺：
A将[(2S)-1-((2S)-2-氨基-3-甲基丁酰基)吡咯烷-2-基]-N-[(1S，2S)-3，3，3-三氟-2-羟基-1-苄基丙基]甲酰胺盐酸盐(2.7g，6.03mmol)和三乙胺(0.67g，6.63mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液加入0-5℃的经搅拌的羰基二咪唑(1.1g，6.63mmol)和咪唑(0.82g，12.1mmol)的二氯甲烷(30ml)淤浆中，将所得混合物在25℃搅拌30分钟。加入4-[N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]甲基氨基]哌啶(1.3g，6.03mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液，将所得混合物在25℃搅拌2天。所得溶液用5％硫酸氢钾水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机溶液用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。剩余物经中压CHP20P柱层析纯化，以20-70％的乙腈梯度水溶液为洗脱液，得到题述化合物(1.0g，产率：25％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ0.96-0.98(3H，d，J＝6.8Hz)，1.00-1.02(3H，d，J＝6.6Hz)，1.46(9H，s)，1.57-1.77(7H，m)，1.84-1.90(1H，m)，2.36-2.42(1H，m)，2.72(3H，s)，2.90-3.06(4H，m)，3.13-3.20(1H，m)，3.43-3.53(1H，m)，3.84-4.05(5H，m)，4.35-4.38(1H，d，J＝7.3Hz)，4.85-4.90(2H，m)，6.08-6.12(1H，d，J＝11.7Hz)，7.19-7.30(5H，m)，7.78-7.81(1H，d，J＝9.9Hz)
APCI-MS：656(MH+)B.{(2S)-1-[(2S)-2-({4-[(叔丁氧基)-N-甲基羰基氨基]哌啶基}-羰基氨基)-3-甲基丁酰基]吡咯烷-2-基}-N-[(1S，2S)-3，3，3-三氟-2-氧代-1-苄基丙基]甲酰胺：
往{(2S)-1-[(2S)-2-({4-[(叔丁氧基)-N-甲基羰基氨基]哌啶基}羰基氨基)-3-甲基丁酰基]吡咯烷-2-基-N-[(1S，2S)-3，3，3-三氟-2-羟基-1-苄基丙基]甲酰胺(1.0g，1.52mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入叔丁醇(0.15ml，1.52mmol)和Dess-Martin periodinane(1.3g，3.05mmol)。在室温下搅拌所得反应混合物1小时，随后减压除去溶剂。剩余物用乙酸乙酯萃取，随后用饱和硫代硫酸钠水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机溶液用硫酸钠干燥，过滤并减压蒸发。剩余物经中压CHP20P柱层析纯化，以30-70％的乙腈梯度水溶液为洗脱液，得到题述化合物(0.8g，产率：81％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ0.94-0.96(3H，d，J＝6.8Hz)，0.99-1.01(3H，d，J＝6.6Hz)，1.47(9H，s)，1.56-1.86(7H，m)，2.11-2.17(1H，m)，2.73(3H，s)，2.76-3.05(4H，m)，3.28-3.36(1H，m)，3.85-4.13(4H，m)，4.36-4.39(1H，d，J＝8.1Hz)，4.65(1H，m)，4.82-4.85(1H，d，J＝7.9Hz)，5.76(1H，s)，6.16(1H，s)，7.14-7.31(5H，m)，7.37-7.40(1H，d，J＝9.0Hz)
APCI-MS：654(MH+)C.[(2S)-1-((2S)-3-甲基-2-{[4-(甲基氨基)哌啶基]羰基氨基}丁酰基)吡咯烷-2-基]-N-[(1 S)-3，3，3-三氟-2-氧代-1-苄基丙基]甲酰胺盐酸盐：
往{(2S)-1-[(2S)-2-({4-[(叔丁氧基)-N-甲基羰基氨基]哌啶基}羰基氨基)-3-甲基丁酰基]吡咯烷-2-基-N-[(1S，2S)-3，3，3-三氟-2-氧代-1-苄基丙基]甲酰胺(0.5g，0.77mmol)中加入4N-氯化氢的1，4-二噁烷溶液(10ml)。在0-5℃搅拌1小时后，减压除去溶剂。剩余物用异丙醇处理，减压蒸发得到题述化合物(0.35g，产率：78％)。
1H NMR(300MHz，d6-DMSO)：δ0.87-0.89(3H，d)，0.89-0.93(3H，d)，1.32-1.39(3H，m)，1.63-1.76(2H，m)，1.93-1.96(3H，m)，2.52(3H，s)，2.61-2.73(2H，m)，3.11-3.15(2H，m)，3.37-3.39(1H，m)，3.86(4H，m)，4.04-4.37(4H，m)，6.48-6.50(1H，d，J＝8.1Hz)，7.12-7.24(5H，m)，7.79-7.82(1H，d，J＝9.3Hz)，8.93(1H，m)
APCI-MS：554(MH+)
元素分析：C27H38F3N5O4·1.25HCl·1.50H2O·0.50二噁烷
计算值：C 51.97，H 6.96，F 8.50，N 10.45，Cl 6.61
实测值：C 51.99，H 7.23，F 8.23，N 10.23，Cl 6.66药理学特性
以下对本发明化合物(I-A)的药理学特性作出解释说明。
由实验1可见，本发明的化合物(I-A)具有优异的食糜酶抑制活性，可用于治疗各种疾病，包括肥大细胞起主要作用的过敏性疾病。在这些过敏性疾病中，肥大细胞脱粒后血管通透性的加速将通过诱导炎性细胞发生渗透以及免疫复合物在血管壁上的沉积来引起炎性反应。
由实验2可见，本发明的化合物(I-A)抑制了由食糜酶诱导的血管通透性的加速作用，从而可抑制皮肤发炎。该发现表明本发明的化合物(I-A)可用作皮肤消炎药。
除上述特性外，本发明的化合物(I-A)即使通过口服给药也能保持高的血浆浓度，并显示出低的毒性(实验3和4)。综合以上药理学特性，相信本发明的化合物(I-A)可作为药物使用。药理学实验 实验1：食糜酶抑制活性(IC50)
在体外测试所述化合物对猴食糜酶和人食糜酶的抑制活性。用表13和14的化合物编号表示所用的受测化合物。猴食糜酶的制备
按照以下方法从猴的颊囊和胃中提纯食糜酶。
简要地说，用含2mol/1000ml KCl和0.1％Nonidet P-40(AmrescoInc.)的0.01mol/1000ml磷酸钠缓冲液(pH7.4)，从均化的猴颊囊和胃中萃取出食糜酶。将所述含食糜酶的溶液施加到肝素actigel柱上，收集富含食糜酶的流分。人食糜酶的制备
使用DNA重组技术在哺乳动物细胞中制备人食糜酶。
按照以下方法进行人食糜酶原(prochymase)表达质粒的构造。简要地说，从人心脏的mRNA(Clontech Laboratories，Inc.)合成单链cDNA。使用所述cDNA作为模板和适当的引物对进行聚合酶链反应的扩增反应。根据人前食糜酶原(preprochymase)测定所述引物的序列。将扩增产物克隆至质粒pUC18中，随后再克隆至质粒pBlueScriptII KS(+)(Stratagene)中。最后，通过常规方法将携带有完整的人前食糜酶原的蛋白质编码序列的DNA片断插入到瞬时表达媒介物中，得到人食糜酶原表达质粒。
使用FuGeneTM 6转染试剂(Boehringer Mannheim)进行人食糜酶原表达质粒对COS7细胞的转染。在与DNA接触大约7小时后，所述培养基不再含有血清。经过培养2天后，收集培养液的上层清液。
使用以上制备猴食糜酶中描述的肝素actigel柱从所述培养液的上层清液中提纯人食糜酶原。
为了制备活性食糜酶，用二肽基肽酶I(Sigma)培养所述人食糜酶原。使用上述肝素actigel柱纯化所得的活性人食糜酶。用含2mol/1000ml NaCl的0.01mol/1000ml磷酸钠缓冲液(pH7.4)洗脱该活性人食糜酶。食糜酶抑制活性的测量(体外测试)
按照以下方法测量本发明的化合物I-A的食糜酶抑制活性。简要地说，用含2mol/1000ml KCl和0.1％Nonidet P-40的0.01mol/1000ml磷酸钠缓冲液(pH7.4)将所述经过纯化的猴或人食糜酶稀释至适当的浓度，用作酶溶液。用水将血管紧张素I(Peptide Institute Inc.)稀释至5mg/ml，用作底物溶液。用10％DMSO将受测化合物连续地稀释。将10μl酶溶液和10μl经过稀释的受测化合物与60μl的0.1mol/1000ml磷酸钠缓冲液(pH7.4)混合，并保持在室温下。将所述混合物在37℃下预温育后，将20μl底物溶液加入到所述酶测试化合物混合物中，将所得的混合物在37℃下温育。最后加入50μl 30％三氯乙酸溶液终止所述酶反应。
测定由所述酶反应产生的作为血管紧张素II的L-His-L-Leu的量。简要地说，将10μl反应混合物和10μl溶于甲醇的1％邻苯二醛溶液与100μl 2mol/1000ml NaOH混合，保持在室温下。随后通过加入10μl 6mol/1000ml的HCl终止反应。最后，使用激发波长为355nm和发射波长为460nm的光度计测量反应产生的荧光。将受测化合物的食糜酶抑制活性表达为50％的抑制浓度(IC50)。结果
本发明化合物的食糜酶抑制活性显示在表13和14中，其中表13为对猴食糜酶的抑制活性，表14为对人食糜酶的抑制活性。
            表13猴食糜酶抑制活性
    化合物编号   猴食靡酶抑制活性(IC50∶nM)
    I-A-1     3.8
    I-A-2     54
    I-A-3     9.3
    I-A-4     12
    I-A-5     16
    I-A-6     33
    I-A-7     34
    I-A-8     48
    I-A-9     61
    I-A-10     77
    I-A-13     50
    I-A-14     59
    I-A-15     82
    I-A-16     110
    I-A-17     140
    I-A-18     220
    I-A-20     5.1
    I-A-21     19
    I-A-22     37
    I-A-23     50
    I-A-24     150
    I-A-26     44
    I-A-27     51
    I-A-28     54
    I-A-29     57
    I-A-30     65
    I-A-31     68
    I-A-32     73
    I-A-33     73
    I-A-34     76
    I-A-35     80
                   表13(续)
    化合物编号   猴食靡酶抑制活性(IC50∶nM)
    I-A-36     89
    I-A-37     95
    I-A-38     110
    I-A-39     120
    I-A-40     120
    I-A-41     120
    I-A-42     130
    I-A-43     140
    I-A-44     150
    I-A-45     170
    I-A-46     170
    I-A-47     350
    I-A-52     31
    I-A-53     31
    I-A-54     42
    I-A-55     63
    I-A-56     47
    I-A-57     100
    I-A-58     210
    I-A-59     250
    I-A-60     430
    I-A-63     150
    I-A-64     73
    I-A-65     37
    I-A-66     49
    I-A-67     94
    I-A-68     27
    I-A-69     98
    I-A-70     140
    I-A-71     140
    I-A-72     160
    I-A-73     300
    I-A-74     350
                     表13(续)
    化合物编号   猴食靡酶抑制活性(IC50∶nM)
    I-A-75     380
    I-A-83     61
    I-A-84     190
    I-A-85     75
    I-A-86     210
    I-A-87     250
    I-A-88     68
    I-A-89     150
    I-A-90     280
    I-A-91     150
    I-A-92     860
    I-A-93     200
    I-A-94     15
    I-A-95     47
    I-A-96     50
    I-A-97     59
    I-A-98     63
    I-A-99     83
    I-A-100     260
    参比化合物(A)     1600
          表14人食糜酶抑制活性
    化合物编号   人食靡酶抑制活性(IC50∶nM)
    I-A-1     55
    I-A-2     83
    I-A-3     50
    I-A-4     57
    I-A-5     83
    I-A-20     36
    I-A-52     57
    I-A-53     69
    I-A-54     90
    I-A-63     92
    I-A-64     96
    I-A-95     95
    I-A-96     77
    I-A-97     75
   参比化合物(A)     1200
如表13和14所示，本发明的化合物对猴食糜酶和人食糜酶均显示出优异的抑制活性。另一方面，在WO-A-93/25574的实施例28中公开的参比化合物(A)仅具有非常低的食糜酶抑制活性。实验2：血管通透性的抑制作用
实验2使用染料作为标记以证明通过给服本发明化合物抑制了由食糜酶引起的血管通透性的加速。皮肤通透性测试
按照以下方法实施皮肤通透性测试。简要地说，通过腹膜内注射NembutalTM(30mg/kg；Dainippon Pharmaceutical Co.，Ltd.，Japan)将雄性Hartley豚鼠(350-460g，Shizuoka Laboratory Animal Center，Japan)麻醉。将所述豚鼠背部的毛发刮去后，在每只动物背部3个位置经真皮注射入50μl经过纯化的人食糜酶(Elastin Products Inc.，USA)，所述人食糜酶用磷酸盐缓冲的盐水(PBS)稀释至1.8单位/55μg蛋白质/ml(1单位食糜酶代表在25℃，每分钟水解1.0μmol N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯(BTEE)所需的食糜酶量；pH7.8)。同样，在同一只动物的3个其它背部位置上注射入溶剂(0.05mol/1000ml乙酸钠和1mol/1000ml氯化钠的用PBS稀释的混合物)。最后一次注射后，经静脉将1％(w/v)的Evans蓝色染料的盐水溶液(0.4ml/100g体重)注射入隐静脉中。30分钟后，在麻醉条件下放血杀死所述动物，取下它们的背部皮肤。按照以下方法测量渗漏到背部皮肤的染料的量。
简要地说，从皮肤内侧冲压下各注射部位周围的区域(直径16mm)，通过在55℃，将冲压下的皮肤在N，N-二甲基甲酰胺(DMF，3ml)中温育过夜，萃取出渗漏的染料。随后使用分光光度计在620nm的波长下测定染料萃取液的透光率。为了测量出渗漏到背部皮肤的染料的量，按照以下方法从Evans蓝色染料外标得到校准曲线：将Evan蓝色染料(3.75-30μg)加入在DMF(3ml)中的对比皮肤中。按照与处理冲压出的皮肤相同的方法处理对比皮肤，将它们的染料萃取物作为外标。将各种情况下3个经处理的背部位置的染料渗漏量的平均值计算作为各只动物的食糜酶诱导的染料渗漏量(ACDL)和溶剂诱导的染料渗漏量(ASDL)。用受测化合物进行的处理
使动物口服0.5％西黄蓍胶或悬浮于0.5％西黄蓍胶溶液1中的受测化合物(100mg/kg)，1小时后在真皮内注射人食糜酶。使用下式计算受测化合物对由食糜酶引起的染料渗漏的抑制率：
染料渗漏抑制率(％)＝{(A-B)-(C-D)}/(A-B)×100
A：经西黄蓍胶处理的组的ACDL
B：经西黄蓍胶处理的组的ASDL
C：经受测化合物处理的组的ACDL
D：经受测化合物处理的组的ASDL结果
受测化合物(I-A-1)和(I-A-20)分别显著抑制了染料渗漏的34％和59％。实验3：血浆浓度
按照以下方法测试受测化合物的血浆浓度。
简要地说，将受测化合物溶解于DMSO中至100mg/ml，并用0.5％的西黄蓍胶溶液悬浮至浓度为1mg/ml。对体重为约30g的雄性ddy小鼠口服给予所述受测化合物溶液。1小时后，在Nembutal(Dainippon Pharmaceutical Co.，Ltd.)麻醉条件下从心脏采血，离心得到血浆。将收集得到的血浆(125μl)与10％DMSO(120μl)和乙酸乙酯(720μl)混合。离心后，收集乙酸乙酯层并蒸发。将剩余物用10％DMSO溶解并连续稀释为受测样品。按照实验1描述的相同方式测试受测样品的食糜酶抑制活性。在这个受测样品的食糜酶抑制测试中，0.1mol/1000ml磷酸钠缓冲液(pH7.4)含有5mmol/1000ml乙二胺四乙酸(EDTA)二钠盐，0.77mmol/1000ml氟代磷酸二异丙酯(DFP)和8mmol/1000ml联吡啶。由校准曲线计算受测化合物的血浆浓度。
按照以下方法得到校准曲线。将受测化合物(0.06-60ng)加入到对比血浆中。按照用于受测样品的相同方式处理对比血浆。最后，测定10％DMSO溶解的剩余物的食糜酶抑制活性，并将其相对于受测化合物的量作图。结果
结果显示在表15中。
           表15血浆浓度
    化合物编号     血浆浓度(μg/ml)
    I-A-1     0.48
    I-A-2     2.7
    I-A-3     0.32
    I-A-4     0.94
    I-A-5     0.63
    I-A-20     0.57
如表15所示，本发明化合物即是通过口服给药也具有高的血液浓度。实验4：毒性研究
对5周龄雄性ddy小鼠每天经口给服化合物I-A-1，剂量为30-300mg/kg/日，持续2周。在这些小鼠中，在包括体重、饮食消耗、心脏重量、肝重量、肾重量、尸体剖检发现、血液学和血液化学在内的各种参数中任何一项均没有观察到与处理相关的发现。
从上述实验结果清楚可见，本发明的化合物为一种优异的食糜酶抑制剂，可用于治疗各种与食糜酶相关的疾病。
本发明的化合物可经口途径、胃肠外途径、皮肤途径/透皮途径、眼睛途径等给药，但优选经口途径给药。所述化合物的剂量可根据给药途径、疾病的严重程度、患者体重和年龄等的不同而异。例如，当本发明的化合物经口给药时，其剂量通常为每日约0.5至约5000mg/60kg体重、优选每日约5至约2000mg/60kg体重、最优选每日15至300mg/60kg体重。当本发明的化合物以滴剂的形式给药时，其剂量通常为每日0.06至30mg、优选0.3至6mg/60kg体重。
本发明的化合物以常规的药物剂型使用。这些药物剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、细颗粒剂、粉剂、水性或油性液体剂、软膏剂等。这些药物制剂可使用常规的药学上可接受的组分，按照常规的方式制备。可使用任何组分，只要它们不与本发明的化合物(I-A)反应即可。
固体制剂的组分的具体例子包括玉米淀粉、甘露糖醇、乳糖、低取代的HPC(即低取代的羟丙基纤维素)、HPC(即羟丙基纤维素)、结晶纤维素、羧甲基纤维素钙、硬脂酸镁、轻质无水硅酸等。液体制剂的组分的例子包括注射用水，大豆油、表面活性剂如脱水山梨糖醇单油酸酯、Poloxamer 188和Polysorbate 80等。软膏剂的组分的例子包括白凡士林。
通过以下的制剂对本发明的药物制剂进行说明。在以下的制剂中，作为活性成分的本发明化合物在微粒化为粒径5μm或以下的细粒后使用。制剂A、B和C：片剂
表16所列出的颗粒组分通过常规方式粒化，并往其中加入外部赋形剂，并将所得混合物压片得到重120mg至300mg的片剂。
                            表16
组分               量(mg)
  制剂A   制剂B   制剂C
颗粒 化合物I-A-1乳糖玉米淀粉低取代的HPCHPC     184.2-123     1075.2123     100117.5-308
外部赋形剂 结晶纤维素硬脂酸镁轻质无水硅酸     181.20.6     181.20.6     403.01.5
总量(mg)     120     120     300
制剂D、E和F：颗粒剂
表17所列出的颗粒组分通过常规方式粒化，并往其中加入外部赋形剂以得到颗粒。
                         表17
组分             量(％重量)
  制剂D   制剂E   制剂F
颗粒 化合物I-A-1D-甘露糖醇低取代的HPCHPC     185.5103     1076.5103     5036.5103
  外部赋形剂 轻质无水硅酸     0.5     0.5     0.5
  总量(％)     100     100     100
制剂G和H：水性液体剂
按照常规方式将表18所列的组分混合均匀，得到水性液体剂，这种液体剂可用作滴剂或注射剂。
                    表18
组分       量(％重量)
  制剂G   制剂E
化合物I-A-20Poloxamer 188氯化钠注射用水     10.50.9适量     1010.9适量
总量(％)     100     100
制剂J、K和L：油性液体剂
按照常规方式将表19所列的组分混合均匀，得到油性液体剂，这种液体剂可用作注射液，或可填充在软胶囊中用作口服制剂。
                        表19
组分             量(％重量)
  制剂J   制剂K 制剂L
化合物I-A-5大豆油脱水山梨糖醇单油酸酯     198.90.1     1089.90.1   5049.90.1
总量(％)     100     100   100
制剂M、N和P：软膏剂
按照常规方式将表20所列的组分混合均匀，得到软膏剂，这种软膏剂可用作经皮给药制剂。
                表20
组分          量(％重量)
  制剂M   制剂N 制剂P
化合物I-A-1白凡士林     1090     2080   3070
总量(％)     100     100   100
工业应用性
本发明的化合物(I-A)具有优异的食糜酶抑制活性，因此可用作预防或治疗各种与食糜酶相关的疾病的食糜酶抑制剂，例如用作抗过敏药、抗炎药、抗再狭窄药或抗动脉硬化药。化合物(I-B)可用作制备所述活性化合物(I-A)的中间体。

Claims (17)

1.一种具有下式(I)的化合物或其盐：其中R1为环烷基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的萘基、四氢萘基、2，3-二氢化茚基、噻吩基、呋喃基、取代或未取代的吲哚基、取代或未取代的二氢吲哚基、苯并呋喃基、二氢苯并呋喃基、取代或未取代的苯并噻吩基或其S-单氧化物或二氧化物、或二氢苯并噻吩基，所述取代的苯基、萘基和苯并噻吩基各自独立具有1至3个独立选自卤原子、低级烷氧基、羟基、任选具有1至3个卤原子的低级烷基的取代基，所述取代的吲哚基和二氢吲哚基在其1-位氮上具有选自低级烷基和低级烷基羰基的取代基；
R2为氢原子、烷基、苯基低级烷基、环烷基或环烷基低级烷基；
R3为(i)取代或非取代的、不饱和单环杂环基团；
(ii)取代或非取代的、饱和或不饱和的与苯环或吡啶环稠合的单环杂环基团；其中所述(i)和(ii)中的取代杂环各自独立具有1至3个独立选自卤原子、低级烷基、低级烷氧基、低级烷基-羰基、氰基、酰胺基、苯基和苯氧基的取代基；所述苯基和苯氧基取代基还可任选具有1至3个独立选自卤原子、低级烷基和卤代低级烷基的取代基；或
(iii)具有下式(a)的基团：
Figure A0181772900022
其中A为低级亚烷基，D1和D2同时为亚甲基，或者，D1和D2中一个为亚甲基而另一个为亚乙烯基，其中各个亚甲基任选被氧代基或低级烷基取代，所述亚乙烯基任选被低级烷基取代；R6为被羧基、低级烷氧基羰基或苯基取代的低级烷基；
R4和R5各自独立为氢原子或羟基，但是R4和R5不同时为氢原子，或两者结合形成氧代基团；
n为0、1、2或3。
2.权利要求1的化合物或其盐，其中R1为C3-C8环烷基，苯基，被1-3个独立选自卤原子、C1-C4烷氧基、羟基、C1-C4烷基和卤代-C1-C4烷基的取代基取代的苯基，萘基，四氢萘基，2，3-二氢化茚基，噻吩基，呋喃基，吲哚基，N-(C1-C4烷基)吲哚基，N-(C1-C4烷基羰基)吲哚基，二氢吲哚基，苯并呋喃基，二氢苯并呋喃基，苯并噻吩基或其S-单氧化物或二氧化物或二氢苯并噻吩基；
R2为氢原子、C1-C6烷基、苯基-C1-C4烷基、C3-C8环烷基或C3-C8环烷基-C1-C4烷基；
R3为(i)选自呋喃基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噁二唑基和吡啶基的不饱和单环杂环基团；
(ii)与苯或吡啶稠合的饱和或不饱和的单环杂环基团，所述基团选自苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并呋咱基或其N-氧化物、喹啉基、苯并二氧杂环戊烯基和异噁唑并[4，3-b]吡啶基，其中所述(i)和(ii)中的杂环基团可各自独立具有1-3个独立选自以下基团的取代基：氟原子或氯原子、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基-羰基、氰基、酰胺基、苯基、苯氧基；所述苯基和苯氧基取代基还可任选具有1-3个独立选自以下基团的取代基：卤原子、C1-C4烷基和卤代基-C1-C4烷基；或
(iii)式(a-1)-(a-4)中的任一种基团：其中A为C1-C4亚烷基，R6为被羧基、C1-C5烷氧基羰基或苯基取代的C1-C4烷基；
R4和R5各自独立为氢原子或羟基，但是R4和R5不同时为氢原子，或两者结合形成氧代基团；
n为1或2。
3.权利要求2的化合物或其盐，其中R1为C5-C7环烷基，苯基，被1-3个独立选自氟、氯或溴原子、C1-C4烷氧基、羟基、C1-C4烷基和三氟甲基的取代基取代的苯基，萘基，四氢萘基，2，3-二氢化茚基，噻吩基，呋喃基，吲哚基，N-(C1-C4烷基)吲哚基，N-乙酰基吲哚基，二氢吲哚基，苯并呋喃基，二氢苯并呋喃基，苯并噻吩基或其S-单氧化物或二氧化物或二氢苯并噻吩基；
R2为氢原子、C1-C4烷基、苯基-C1-C2烷基、C5-C7环烷基或C5-C7环烷基-C1-C2烷基；
R3为(i)选自呋喃基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噁二唑基和吡啶基的不饱和单环杂环基团；
(ii)与苯或吡啶稠合的饱和或不饱和的单环杂环基团，所述基团选自苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并呋咱基或其N-氧化物、喹啉基、苯并二氧杂环戊烯基和异噁唑并[4，3-b]吡啶基，其中所述(i)和(ii)中的杂环基团可各自独立具有1-3个独立选自以下基团的取代基：氟或氯原子、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、乙酰基、氰基、酰胺基、苯基和苯氧基；所述苯基和苯氧基取代基还可任选具有1-3个选自以下基团的取代基：氟或氯原子、C1-C3烷基和三氟甲基；或
(iii)式(a-1)-(a-4)中的任一种基团：其中A为C1-C2亚烷基，R6为被羧基、叔丁氧基羰基或苯基取代的C1-C2烷基；
R4和R5各自独立为氢原子或羟基，但是R4和R5不同时为氢原子，或两者结合形成氧代基团；
n为1或2。
4.一种式(I-A)的化合物，
Figure A0181772900051
其中R1、R2、R3和n如权利要求1所定义。
5.权利要求4的化合物，其中R1、R2、R3和n如权利要求2所定义。
6.权利要求4的化合物，其中R1、R2、R3和n如权利要求3所定义。
7.一种式(I-A＇)的化合物或其药学上可接受的盐：
Figure A0181772900052
其中R3a和R3b独立为氢原子、低级烷基、低级烷基-羰基或可被卤原子或卤代低级烷基取代的苯基；X为碳原子或硫原子；Y为氧原子或氮原子；符号 是指单键或双键，R1、R2和n如权利要求1所定义。
8.权利要求7的化合物，其中X为碳原子，Y为氧原子。
9.权利要求7的化合物，其中X为硫原子，Y为氮原子。
10.权利要求7、8或9中任一项的化合物，其中R1为取代或非取代的苯基、取代或非取代的萘基或苯并噻吩基，所述取代的苯基和取代的萘基各自独立具有1-3个独立选自以下基团的取代基：卤原子、甲基、甲氧基、三氟甲基和羟基。
11.权利要求10的化合物，其中R2为异丙基。
12.一种化合物，所述化合物独立选自以下的各种化合物：
N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基甲基)-3，3，3-三氟-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-(甲基乙基)-2-氧代乙基](3，5-二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺；
N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(2-萘基甲基)-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-(甲基乙基)-2-氧代乙基](3，5-二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺；
N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基甲基)-3，3，3-三氟-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-乙基-2-氧代乙基](3，5二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺；
N-[1-((1R)-1-甲基丙基)(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基甲基)-3，3，3-三氟-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-2-氧代乙基](3，5-二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺；
N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基甲基)-3，3，3-三氟-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-甲基-2-氧代乙基](3，5-二甲基异噁唑-4-基)甲酰胺；和
N-[(1S)-2-((2S)-2-{N-[(1S)-1-(苯并[b]噻吩-3-基甲基)-3，3，3-三氟-2-氧代丙基]氨基甲酰基}吡咯烷基)-1-(甲基乙基)-2-氧代乙基](4-甲基(1，2，3-噻二唑-5-基))甲酰胺。
13.一种药物组合物，所述药物组合物包含权利要求4至12中任一项所阐述的化合物作为活性成分，并混合有药学上可接受的载体或稀释剂。
14.一种食糜酶抑制剂，所述食糜酶抑制剂包含权利要求4至12中任一项所阐述的化合物作为活性成分。
15.权利要求14的抑制剂，其中所述化合物为权利要求12所阐述的各种化合物中的任一种。
16.一种用于炎性疾病的血管通透性抑制剂，所述抑制剂包含权利要求4至12中任一项所阐述的化合物作为活性成分。
17.权利要求16的抑制剂，其中所述化合物为权利要求12所阐述的各种化合物中的任一种。
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