[go: up one dir, main page]
More Web Proxy on the site http://driver.im/

CN112051346A - 一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的hplc方法 - Google Patents

一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的hplc方法 Download PDF

Info

Publication number
CN112051346A
CN112051346A CN202011018331.XA CN202011018331A CN112051346A CN 112051346 A CN112051346 A CN 112051346A CN 202011018331 A CN202011018331 A CN 202011018331A CN 112051346 A CN112051346 A CN 112051346A
Authority
CN
China
Prior art keywords
mobile phase
indacaterol
glycopyrronium bromide
test solution
hplc method
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202011018331.XA
Other languages
English (en)
Inventor
陈永奇
杨栋
叶永浩
韩飞
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhuhai Rispril Pharmaceutical Technology Co ltd
Original Assignee
Zhuhai Reispril Biopharmaceutical Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhuhai Reispril Biopharmaceutical Co ltd filed Critical Zhuhai Reispril Biopharmaceutical Co ltd
Priority to CN202011018331.XA priority Critical patent/CN112051346A/zh
Publication of CN112051346A publication Critical patent/CN112051346A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/30—Control of physical parameters of the fluid carrier of temperature
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/32—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/60—Construction of the column
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/74—Optical detectors
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N2030/042—Standards
    • G01N2030/047—Standards external
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/32—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed
    • G01N2030/324—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed speed, flow rate

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，属于药物分析技术领域。本发明的方法采用的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，采用流动相A和流动相B进行反相高效液相色谱梯度洗脱；其中，流动相A为盐浓度为10～30mmol/L、用pH调节剂调至pH为2.5～4.0的磷酸盐缓冲液，流动相B为甲醇或乙腈。本发明的方法简单高效、易操作、通用性强、灵敏度高，对茚达特罗和格隆溴铵的测定均具有较低的定量限，快捷高效，能够很好地满足研发和生产的需求。

Description

一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法
技术领域
本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法。
背景技术
马来酸茚达特罗是一种长效β2-肾上腺素受体激动剂(LABA)，可以激活部分细胞内腺苷环化酶，该酶能够催化三磷酸腺苷(ATP)转化为环-3’,5’-一磷酸腺苷(环一磷酸腺苷)。环磷酸腺苷(cAMP)水平升高引起支气管平滑肌松弛，可以舒张气道、减少肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒和介质的释放、降低微血管的通透性、增加气道上皮纤毛的摆动，在肺内局部发挥支气管扩张剂的作用，缓解慢性阻塞性肺病的症状。格隆溴铵是一种抗胆碱能药物，是长效乙酰胆碱受体拮抗剂(LAMA)，对人体乙酰胆碱能M3受体的选择性高于M2受体4倍，可特异性结合并抑制支气管平滑肌分布的M3型乙酰胆碱受体而扩张气道。
马来酸茚达特罗格隆溴铵复方药物由诺华开发，商品名为
Figure BDA0002699850540000011
中文名“杰润”，于2019年4月11日在中国上市，剂型为胶囊型吸入粉雾剂，每粒含马来酸茚达特罗110μg(以C24H28N2O3计)和格隆溴铵50μg(以C19H28NO3计)。用于包括慢性支气管炎和肺气肿等成人慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的维持性支气管扩张治疗以缓解症状。
在药品研究和开发过程中，有效物质的含量和杂质的准确测定和分析是保证药品质量的重要条件。该复方药中，茚达特罗和格隆铵的有效成分是μg级别的，且在粉雾剂的研究中，需要对其微细粒子分布进行重点研究，用设备进行体外分析时，各部位的沉积量更是少之又少，因此在含量分析中，要求分析方法有足够的灵敏度和准确度。现有技术对茚达特罗和格隆溴铵含量测定的报道(Rapid simultaneous determination of indacaterolmaleate and glycopyrronium bromide in inhaler capsules using a validatedstability-indicating monolithic LC method，Zayed and Belal Chemistry CentralJournal，2017，11:36)，需要用超高效液相色谱仪，利用内标物替诺昔康进行定量，且灵敏度分别为0.16μg/mL和0.34μg/mL，操作复杂，对操作人员的要求高，定量限不能满足研发需求。另有文献(RP-HPLC-DAD method for the simultaneous quantification ofquantification of indacaterol and glycopyrronium in their pharmaceuticalformulation，World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences，2018，Volume7,Issue 3,166-176)测得的定量限分别为0.5μg/mL和0.1μg/mL，不能满足微细粒子分布测试的需要。还有文献(HPLC Determination of Indacaterol Maleate in PharmaceuticalPreparations Adopting Ultraviolet and Fluorescence Detection，InternationalJournal of Pharma Sciences and Research，2015，Volume 6，No 11)是采用两种检测器-紫外检测器和荧光检测器进行测定，操作复杂，设备要求高，检测成本高。
因此，亟需开发一种操作简单、通用性强、灵敏度高的高效液相色谱分析方法来同时测定复方制剂中马来酸茚达特罗和格隆溴铵的含量。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，该方法简单高效、易操作、通用性强、灵敏度高，对茚达特罗和格隆溴铵的测定均具有较低的定量限，快捷高效，能够很好地满足研发和生产的需求。
为解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：
一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，所述方法采用的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，采用流动相A和流动相B进行反相高效液相色谱梯度洗脱；
所述流动相A为盐浓度为10～30mmol/L、用pH调节剂调至pH为2.5～4.0的磷酸盐缓冲液，优选盐浓度为20mmol/L、pH为3.0；所述流动相B为甲醇或乙腈，优选为乙腈。
作为本发明优选的实施方式，所述磷酸盐缓冲液中磷酸盐选自磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠中的一种。
作为本发明优选的实施方式，所述pH调节剂为稀磷酸、冰醋酸、三氟乙酸、甲酸中的一种，优选稀磷酸。
作为本发明优选的实施方式，所述流动相A和流动相B的体积比起始比例为50:50～85:15，优选为70:30～80:20。
作为本发明优选的实施方式，所述流动相进行洗脱的流速为0.8～1.2mL/min，优选为1.0mL/min。
作为本发明优选的实施方式，色谱条件如下：色谱柱的柱长为50～150mm，优选100mm；柱温为20～40℃，优选25～35℃，最优选为30℃；检测波长为200～230nm，优选为205～220nm，最优选为210nm。
作为本发明优选的实施方式，本发明的HPLC方法具体包括以下步骤：
S1、供试品溶液的制备：
精密称取样品适量，加稀释剂溶解并稀释，作为供试品溶液；
S2、对照溶液的制备：
精密量取供试品溶液适量，用流动相稀释，作为对照溶液；
S3、测定方法：
取对照溶液注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20％；再精密量取供试品溶液与对照溶液，注入色谱仪，记录色谱图，按照外标法以峰面积计算供试品溶液中茚达特罗和格隆溴铵的含量。
作为本发明优选的实施方式，步骤S1中的稀释剂为流动相A与流动相B按流动相A：流动相B＝5:1～1:5体积比的混合物，两者的体积比优选为2:1～1:1。可以加入少量添加剂或溶剂，包括冰醋酸、三乙胺、水、乙醇、甲醇、乙腈等。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
本发明所提供的HPLC方法能够准确地同时测定复方制剂中茚达特罗和格隆溴铵的含量，茚达特罗和格隆溴铵的定量限可以分别低至0.005μg/mL和0.015μg/mL，能够很好地满足微细粒子分布测试需要的定量限，且本发明对仪器的配置要求低、分析快捷高效，解决了现有的分析方法对仪器要求高、系统压力大、定量限不够、溶液配制操作复杂等问题，本发明还对该方法进行了验证，保证方法的准确性和重现性，适用性广泛，适于中、高、低配置的大部分高效液相色谱仪-紫外检测器。
综上所述，本发明的HPLC方法简单高效、易操作、通用性强、灵敏度高、定量限低，可以广泛地满足研发和生产的需求，对单方或复方制剂中茚达特罗和格隆溴铵的含量进行有效的控制。
附图说明
图1为本发明实施例1的HPLC图；
图2为本发明实施例2的HPLC图；
图3为本发明实施例3的HPLC图；
图4为本发明实施例4的HPLC图；
图5为本发明实施例5的HPLC图；
图6为本发明实施例6的HPLC图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细说明。
以下实施例所用仪器为：安捷伦1260高效液相色谱仪，DAD，色谱柱为Waters C18色谱柱，使用其他类型仪器和色谱柱型号等，都可以得到本发明的目的。
实施例1
一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，包括以下步骤：
S1、色谱条件：
色谱柱：Waters xbridge C18,50mm，柱温：35℃，波长：210nm；
流动相A：用稀磷酸调至pH为3.5的30mM磷酸盐缓冲液；
流动相B：乙腈；
流动相以1.5ml/min的流速按如下梯度进行梯度洗脱；
Figure BDA0002699850540000051
S2、供试品溶液的制备：
精密称取样品适量，加稀释剂(冰醋酸:水:乙醇＝1:70:30)溶解并稀释，作为格隆溴铵浓度为6μg/ml、茚达特罗浓度为20μg/ml的供试品溶液。
S3、对照溶液的制备：
精密量取供试品溶液适量，用流动相稀释，作为对照溶液；
S4、测定方法：
取对照溶液注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20％；再精密量取25μl供试品溶液与对照溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按照外标法以峰面积计算供试品溶液中茚达特罗和格隆溴铵的含量。
色谱图见图1，色谱峰参数见表1。
表1 30mM磷酸盐缓冲液(pH3.5)-乙腈等比例洗脱时色谱峰各参数
保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 拖尾因子
1.804min 195 84 9295 1.2
2.251min 2118 581 7035 1.2
实施例2：
一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，包括以下步骤：
S1、色谱条件：
色谱柱：Sunfire C18,100mm，柱温：35℃，波长：210nm；
流动相A：用稀磷酸调至pH为3.5的30mM磷酸盐缓冲液；
流动相B：乙腈；
流动相以1.0ml/min的流速按如下梯度进行梯度洗脱；
Figure BDA0002699850540000061
S2、供试品溶液的制备：
精密称取样品适量，加稀释剂(流动相A:流动相B＝1:1)溶解并稀释，作为格隆溴铵浓度为3μg/ml、茚达特罗浓度为100μg/ml的供试品溶液。
S3、对照溶液的制备：
精密量取供试品溶液适量，用流动相稀释，作为对照溶液；
S4、测定方法：
取对照溶液注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20％；再精密量取5μl供试品溶液与对照溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按照外标法以峰面积计算供试品溶液中茚达特罗和格隆溴铵的含量。
色谱图见图2，色谱峰参数见表2。
表2 30mM磷酸盐缓冲液(pH3.5)-乙腈梯度洗脱时色谱峰各参数
保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 拖尾因子
5.598min 58 8 14695 1.3
8.326min 2007 367 5654 1.2
实施例3：
一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，包括以下步骤：
S1、色谱条件：
色谱柱：Sunfire C18,100mm，柱温：35℃，波长：210nm；
流动相A：用稀磷酸调至pH为3.5的20mM磷酸盐缓冲液；
流动相B：乙腈；
流动相以0.8ml/min的流速按如下梯度进行梯度洗脱；
Figure BDA0002699850540000071
S2、供试品溶液的制备：
精密称取样品适量，加稀释剂(流动相A:流动相B＝2:1)溶解并稀释，作为格隆溴铵浓度为6μg/ml、茚达特罗浓度为20μg/ml的供试品溶液。
S3、对照溶液的制备：
精密量取供试品溶液适量，用流动相稀释，作为对照溶液；
S4、测定方法：
取对照溶液注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20％；再精密量取20μl供试品溶液与对照溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按照外标法以峰面积计算供试品溶液中茚达特罗和格隆溴铵的含量。
色谱图见图3，色谱峰参数见表3。
表3 20mM磷酸盐缓冲液(pH3.5)-乙腈梯度洗脱时色谱峰各参数
保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 拖尾因子
6.627min 93 11 16405 1.2
9.721min 2195 215 21697 1.4
实施例4：
一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，包括以下步骤：
S1、色谱条件：
色谱柱：Sunfire C18,100mm，柱温：30℃，波长：210nm；
流动相A：用稀磷酸调至pH为3.0的20mM磷酸盐缓冲液；
流动相B：乙腈；
流动相以1.0ml/min的流速按如下梯度进行梯度洗脱；
Figure BDA0002699850540000081
Figure BDA0002699850540000091
S2、供试品溶液的制备：
精密称取样品适量，加稀释剂(流动相A:流动相B＝2:1)溶解并稀释，作为格隆溴铵浓度为6μg/ml、茚达特罗浓度为20μg/ml的供试品溶液。
S3、对照溶液的制备：
精密量取供试品溶液适量，用流动相稀释，作为对照溶液；
S4、测定方法：
取对照溶液注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20％；再精密量取20μl供试品溶液与对照溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按照外标法以峰面积计算供试品溶液中茚达特罗和格隆溴铵的含量。
色谱图见图4，色谱峰参数见表4。
表4 20mM磷酸盐缓冲液(pH3.0)-乙腈梯度洗脱时色谱峰各参数
保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 拖尾因子
5.188min 74 11 13504 1.3
7.847min 1757 191 18206 1.4
实施例5：
一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，包括以下步骤：
S1、色谱条件：
色谱柱：Sunfire C18,100mm，柱温：30℃，波长：210nm；
流动相A：用稀磷酸调至pH为4.0的10mM磷酸盐缓冲液；
流动相B：乙腈；
流动相以1.0ml/min的流速按如下梯度进行梯度洗脱；
Figure BDA0002699850540000092
Figure BDA0002699850540000101
S2、供试品溶液的制备：
精密称取样品适量，加稀释剂(流动相A:流动相B＝3:1)溶解并稀释，作为格隆溴铵浓度为6μg/ml、茚达特罗浓度为5μg/ml的供试品溶液。
S3、对照溶液的制备：
精密量取供试品溶液适量，用流动相稀释，作为对照溶液；
S4、测定方法：
取对照溶液注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20％；再精密量取100μl供试品溶液与对照溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按照外标法以峰面积计算供试品溶液中茚达特罗和格隆溴铵的含量。
色谱图见图5，色谱峰参数见表5。
表5 10mM磷酸盐缓冲液(pH4.0)-乙腈梯度洗脱时色谱峰各参数
保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 拖尾因子
5.670min 323 38 12951 1.5
8.520min 2748 240 23365 1.5
实施例6：
一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，包括以下步骤：
S1、色谱条件：
色谱柱：Sunfire C18,100mm，柱温：30℃，波长：210nm；
流动相A：用稀磷酸调至pH为3.0的20mM磷酸盐缓冲液；
流动相B：乙腈；
流动相以1.0ml/min的流速按如下梯度进行梯度洗脱；
Figure BDA0002699850540000111
S2、供试品溶液的制备：
精密称取样品适量，加稀释剂(流动相A:流动相B＝1:1)溶解并稀释，作为格隆溴铵浓度为6μg/ml、茚达特罗浓度为5μg/ml的供试品溶液。
S3、对照溶液的制备：
精密量取供试品溶液适量，用流动相稀释，作为对照溶液；
S4、测定方法：
取对照溶液注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20％；再精密量取100μl供试品溶液与对照溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按照外标法以峰面积计算供试品溶液中茚达特罗和格隆溴铵的含量。
色谱图见图6，色谱峰参数见表6。
表6 20mM磷酸盐缓冲液(pH3.0)-乙腈梯度洗脱时间20min色谱峰各参数
保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 拖尾因子
5.168min 324 42 10650 1.4
7.788min 2747 269 14067 1.4
实施例7：
一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，包括以下步骤：
S1、色谱条件：
色谱柱：Sunfire C18,100mm，柱温：30℃，波长：210nm；
流动相A：用稀磷酸调至pH为3.0的20mM磷酸盐缓冲液；
流动相B：乙腈；
流动相以1.0ml/min的流速按如下梯度进行梯度洗脱；
Figure BDA0002699850540000121
S2、供试品溶液的制备：
精密称取样品适量，加稀释剂(流动相A:流动相B＝1:1)溶解并稀释，作为格隆溴铵浓度为0.015μg/ml、茚达特罗浓度为0.005μg/ml的供试品溶液。
S3、对照溶液的制备：
精密量取供试品溶液适量，用流动相稀释，作为对照溶液；
S4、测定方法：
取对照溶液注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20％；再精密量取100μl供试品溶液与对照溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按照外标法以峰面积计算供试品溶液中茚达特罗和格隆溴铵的含量。
色谱峰参数见表7。
表7 20mM磷酸盐缓冲液(pH3.0)-乙腈梯度洗脱时间20min色谱峰各参数
保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 信噪比
5.164min 1.9 0.26 12372 13.7
7.786min 2.8 0.28 16343 16.7
从以上实验数据可以看出，本发明的定量限分别低至：格隆溴铵0.015μg/ml、茚达特罗0.005μg/ml，完全满足研发和生产中的定量限和快速检测的需求。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。

Claims (8)

1.一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，其特征在于：所述方法采用的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，采用流动相A和流动相B进行反相高效液相色谱梯度洗脱；
所述流动相A为盐浓度为10～30mmol/L、用pH调节剂调至pH为2.5～4.0的磷酸盐缓冲液；所述流动相B为甲醇或乙腈。
2.根据权利要求1所述的同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，其特征在于：所述磷酸盐缓冲液中磷酸盐选自磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠中的一种。
3.根据权利要求1所述的同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，其特征在于：所述pH调节剂为稀磷酸、冰醋酸、三氟乙酸、甲酸中的一种。
4.根据权利要求1所述的同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，其特征在于：所述流动相A和流动相B的体积比起始比例为50:50～85:15。
5.根据权利要求1所述的同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，其特征在于：所述流动相进行洗脱的流速为0.8～1.2mL/min。
6.根据权利要求1所述的同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，其特征在于：色谱条件如下：色谱柱的柱长为50～150mm、柱温为20～40℃，检测波长为200～230nm。
7.根据权利要求1～6种任一项所述的同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，其特征在于：具体包括以下步骤：
S1、供试品溶液的制备：
精密称取样品适量，加稀释剂溶解并稀释，作为供试品溶液；
S2、对照溶液的制备：
精密量取供试品溶液适量，用流动相稀释，作为对照溶液；
S3、测定方法：
取对照溶液注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20％；再精密量取供试品溶液与对照溶液，注入色谱仪，记录色谱图，按照外标法以峰面积计算供试品溶液中茚达特罗和格隆溴铵的含量。
8.根据权利要求7所述的同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的HPLC方法，其特征在于：步骤S1中的稀释剂为流动相A与流动相B按流动相A：流动相B＝5:1～1:5体积比的混合物。
CN202011018331.XA 2020-09-24 2020-09-24 一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的hplc方法 Pending CN112051346A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011018331.XA CN112051346A (zh) 2020-09-24 2020-09-24 一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的hplc方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011018331.XA CN112051346A (zh) 2020-09-24 2020-09-24 一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的hplc方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112051346A true CN112051346A (zh) 2020-12-08

Family

ID=73604676

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011018331.XA Pending CN112051346A (zh) 2020-09-24 2020-09-24 一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的hplc方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112051346A (zh)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102665680A (zh) * 2009-12-23 2012-09-12 奇斯药制品公司 用于copd的气雾剂制剂
US20150182450A1 (en) * 2013-12-30 2015-07-02 Chiesi Farmaceutici S.P.A. Stable pressurised aerosol solution composition of glycopyrronium bromide and formoterol combination
CN104955449A (zh) * 2013-01-31 2015-09-30 普罗索尼克斯有限公司 用于吸入治疗的多组分结晶颗粒
GB201615910D0 (en) * 2016-09-19 2016-11-02 Mexichem Fluor Sa De Cv Pharmaceutical composition
CN109789126A (zh) * 2016-09-19 2019-05-21 墨西哥氟石股份公司 药物组合物

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102665680A (zh) * 2009-12-23 2012-09-12 奇斯药制品公司 用于copd的气雾剂制剂
CN104955449A (zh) * 2013-01-31 2015-09-30 普罗索尼克斯有限公司 用于吸入治疗的多组分结晶颗粒
US20150182450A1 (en) * 2013-12-30 2015-07-02 Chiesi Farmaceutici S.P.A. Stable pressurised aerosol solution composition of glycopyrronium bromide and formoterol combination
GB201615910D0 (en) * 2016-09-19 2016-11-02 Mexichem Fluor Sa De Cv Pharmaceutical composition
CN109789126A (zh) * 2016-09-19 2019-05-21 墨西哥氟石股份公司 药物组合物

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DWIVEDI JAYA EY AL: "DEVELOPMENT AND VALIDATION OF CHROMATOGRAPHIC AND SPECTROPHOTOMETRIC METHODS FOR SIMULTANEOUS ESTIMATION OF INDACATEROL MALEATE AND GLYCOPYRRONIUM BROMIDE IN PHARMACEUTICAL DOSAGE FORM AND THEIR COMPARISION USING STUDENT t-TEST", 《J. GLOBAL TRENDS PHARM SCI》 *
NASR MOHAMED A ET AL: "APPLICATION OF TLC DENSITOMETRIC AND UV SPECTROPHOTOMETRIC TECHNIQUES FOR SIMULTANEOUS DETERMINATION OF INDACATEROL AND GLYCOPYRRONIUM IN INHALATION CAPSULES USED FOR TREATMENT OF CHRONIC OBSTRUCTIVE PULMONARY DISEASE", 《EUROPEAN JOURNAL OF BIOMEDICAL AND PHARMACEUTICAL SCIENCES》 *
NASR MOHAMED A. EL-ABASAWY ET AL: "RP-HPLC-DAD METHOD FOR THE SIMULTANEOUS QUANTIFICATION OF INDACATEROL AND GLYCOPYRRONIUM IN THEIR PHARMACEUTICAL FORMULATION", 《WORLD JOURNAL OF PHARMACY AND PHARMACEUTICAL SCIENCES》 *
SAHAR ZAYED ET AL: "Rapid simultaneous determination of indacaterol maleate and glycopyrronium bromide in inhaler capsules using a validated stability‑indicating monolithic LC method", 《ZAYED AND BELAL CHEMISTRY CENTRAL JOURNAL》 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111983113B (zh) 一种检测依折麦布辛伐他汀片中6-氧代辛伐他汀含量的方法
CN105334274A (zh) 枸橼酸托法替布含量及其有关物质的反相高效液相色谱法测定方法
CN105424822B (zh) 检测替格瑞洛中(1r,2s)‑2‑(3,4‑二氟苯基)环丙胺的方法
CN112198260B (zh) 一种盐酸丙卡特罗药物制剂中工艺杂质含量的检测方法
CN105510482B (zh) 一种替格瑞洛原料中异构体杂质含量的检测方法
Maithani et al. Simultaneous estimation of ambroxol hydrochloride and cetirizine hydrochloride in tablet dosage form by RP-HPLC method
CN112051346A (zh) 一种同时测定茚达特罗和格隆溴铵含量的hplc方法
CN113447592A (zh) 一种甲硝唑凝胶中乙二胺四乙酸二钠的检测方法
CN109030653B (zh) 一种左亚叶酸中有关物质的检测方法
CN109142585B (zh) 一种泛酸钠异构体的检测方法
CN114324642B (zh) 一种氢溴酸右美沙芬有关物质的测定方法
CN104655757B (zh) Bc-02的液相色谱检测方法
CN115561351A (zh) 注射用哌拉西林钠他唑巴坦钠中有关物质ⅱ的检测方法
CN107884496B (zh) 一种琥珀酸曲格列汀中琥珀酸的含量测定方法
CN112881538B (zh) 一种福多司坦及福多司坦片中杂质及对映异构体的检测方法
CN117890496B (zh) 一种复方制剂愈酚溴新口服溶液的有关物质检测方法
CN110632221B (zh) 吸入用异丙托溴铵溶液中甲酸、乙酸和丙酮的检测方法
CN111521693B (zh) 一种单硝酸异山梨酯的检测方法
CN111007181A (zh) 一种单硝酸异山梨酯的检测方法
CN114280169B (zh) 一种莫那比拉韦中异构体的测定方法
CN117310022B (zh) 一种分离和检测乌美溴铵中间体奎宁环二苯甲醇有关物质的方法
CN114428131B (zh) 一种拆分格隆溴铵中间体的非对映异构体的检测方法
CN111812227B (zh) 一种多巴丝肼复方制剂中苄丝肼杂质a的分析方法
CN117741008A (zh) 一种采用高效液相色谱法检测阿莫奈韦片中阿莫奈韦含量的方法
CN118033022A (zh) 一种盐酸丙卡特罗吸入溶液中枸橼酸含量测定的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
TA01 Transfer of patent application right
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20201209

Address after: 519000 3rd and 4th floors, building 2, international health port, 628 Airport West Road, Sanzao Town, Jinwan District, Zhuhai City, Guangdong Province

Applicant after: Zhuhai rispril Pharmaceutical Technology Co.,Ltd.

Address before: Room 313-10, 3rd floor, aviation new town planning exhibition hall, Jinwan District, Zhuhai City, Guangdong Province

Applicant before: Zhuhai Reispril Biopharmaceutical Co.,Ltd.

SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20201208