CN110522753A - 一种新型抗肿瘤药物组合物、制剂和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种新型抗肿瘤药物组合物，所述组合物为拓扑替康与克唑替尼的组合物。本发明组合药物将拓扑替康与克唑替尼组合使用，在低效量下的组合物在治疗非小细胞肺癌治疗中具有显著的协同增效作用，尤其是在治疗非小细胞肺癌方面中具有协同作用，并且体内动物实验也初步证实组合药物对细胞增殖抑制作用显著，提高了抑制肿瘤的效果，为降低非小细胞肺癌的耐药性发生时患者的治疗提供了新的思路，为研发新药提供了科学依据。

Description

一种新型抗肿瘤药物组合物、制剂和应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，尤其是一种新型抗肿瘤药物组合物、制剂和应用。

背景技术

肺癌是当今世界威胁人类健康的第一大恶性肿瘤，此种恶性肿瘤不仅发病几率非常高，而且预后疗效很差。肺癌的发生主要是由于位于肺组织细胞的生长不受调控因而引发了转移和浸润四周的组织细胞，严重危害了人类的生命。

肺癌可分为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和小细胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC)，80％以上是非小细胞肺癌。在非小细胞肺癌中，约65％的患者在首诊时已经发生了局部进展或者远处转移。目前，随着突变基因在非小细胞肺癌中的发现，分子靶向药物极大地改善了该类型患者的临床疗效，其中，EGFR基因突变是亚洲非小细胞肺癌患者常见的突变类型，已有三代靶向药物应用于临床中，但靶向治疗药物如厄洛替尼或克唑替尼往往只是初期疗效较为显著，几个月后由于肿瘤细胞演化出不同的代谢旁路而逐渐产生耐药。因此，肿瘤化疗方案中提倡多种药物组合治疗，选择不同作用机制、毒副作用不重叠的药物，起到协同抗肿瘤作用。组合药物作为新的药物研究趋势，同联合用药类似，可通过不同的作用机制发挥抗肿瘤作用。

拓扑替康属喜树碱类，为拓扑异构酶Ⅰ抑制剂，可以干扰DNA复制过程于复制叉部位发生断裂的DNA单链的再连接，抑制肿瘤细胞增殖，发挥其抗肿瘤作用。拓扑替康在1996年被美国FDA批准用于小细胞肺癌的治疗。克唑替尼是2011年被美国FDA批准用于治疗间变性淋巴瘤激酶(ALK)阳性的非小细胞晚期患者的小分子靶向药物，是一种口服型小分子ATP竞争性的ALK抑制剂，它可以抑制c-Met激酶，破坏c-Met的信号转导通路，进而抑制ALK融合基因，达到抑制肿瘤细胞生长的效果，已在临床应用于ALK阳性非小细胞肺癌的治疗，也是ALK受体和肝细胞生长因子受体(c-Met)的抑制剂。克唑替尼对晚期ALK阳性的非小细胞肺癌患者的有效率高达60％-70％，效果远超化疗，但克唑替尼易产生耐药，且中枢神经系统的复发进展较为常见。

通过检索，尚未发现与本发明专利申请相关的专利公开文献。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术中的不足之处，提供一种新型抗肿瘤药物组合物、制剂和应用，该组合药物将拓扑替康与克唑替尼组合使用，在低效量下的组合物在治疗非小细胞肺癌治疗中具有显著的协同增效作用，尤其是在治疗非小细胞肺癌方面中具有协同作用，并且体内动物实验也初步证实组合药物对细胞增殖抑制作用显著，提高了抑制肿瘤的效果。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种新型抗肿瘤药物组合物，所述组合物为拓扑替康与克唑替尼的组合物。

而且，所述拓扑替康和克唑替尼的质量比为1:0.1～1:20；

或者，所述组合物的给药剂量能够根据给药对象、给药途径或药物的制剂形式进行变化，但以保证该组合物在哺乳动物体内能够达到有效的血药浓度为前提。

包含如上所述的新型抗肿瘤药物组合物的制剂。

而且，所述新型抗肿瘤药物组合物直接混合做成制剂；

或者，所述新型抗肿瘤药物组合物中的拓扑替康、克唑替尼分别与相应的辅料混合分别做成制剂，然后再按照常规的方式包装或结合在一起；

或者，所述新型抗肿瘤药物组合物中的拓扑替康、克唑替尼分别与相应的辅料混合后，再混合做成制剂；

所述辅料不与新型抗肿瘤药物组合物发生反应或不能影响新型抗肿瘤药物组合物的疗效。

而且，所述新型抗肿瘤药物组合物在制剂中的含量在1～99wt％之间。

而且，所述拓扑替康和克唑替尼的辅料包括稀释溶剂，该稀释溶剂为二甲基亚砜。

如上所述的新型抗肿瘤药物组合物在作为癌症治疗药物方面中的应用。

如上所述的新型抗肿瘤药物组合物在作为非小细胞肺腺癌治疗药物方面中，或在作为恶性肿瘤的临床辅助治疗药物方面中的应用。

本发明取得的优点和积极效果为：

1、本发明组合药物将拓扑替康与克唑替尼组合使用，在低效量下的组合物在治疗非小细胞肺癌治疗中具有显著的协同增效作用，尤其是在治疗非小细胞肺癌方面中具有协同作用，并且体内动物实验也初步证实组合药物对细胞增殖抑制作用显著，提高了抑制肿瘤的效果，为降低非小细胞肺癌的耐药性发生时患者的治疗提供了新的思路，为研发新药提供了科学依据。

2、本发明将拓扑替康与克唑替尼组合为一种新的药物组合物，为一种高活性抗肿瘤药物组合物，采用体外细胞试验和体内动物试验进行研究，本发明发现，与单药拓扑替康和单药克唑替尼相比，该组合物对EGFR突变的非小细胞肺腺癌有显著疗效，该组合物的研制为临床治疗肺癌及其他种类的癌症提供理论和试验依据。

3、本发明组合药物将拓扑替康与克唑替尼组合，一方面可以多靶点、多通路调节肺癌细胞的生长和增殖；另一方面拓扑替康与克唑替尼组合物在对细胞的毒副作用方面也有所减轻。

4、本发明新型抗肿瘤组合物即拓扑替康与克唑替尼组合作为一种潜在的治疗肺癌的药物，为肺癌患者尤其是EGFR突变的肺癌患者带来新的希望，我国EGFR突变的患者人群较多，应用前景较广。

附图说明

图1为本发明中单药拓扑替康与克唑替尼及组合物对H1975细胞的抑制率图；其中，TPT—拓扑替康；CRI—克唑替尼；T+C—组合物；

图2为本发明组合物对H1975细胞的CI值图；其中，T+C—组合物；

图3为本发明中单药拓扑替康与克唑替尼及组合物对HCC827细胞的抑制率图；其中，TPT—拓扑替康；CRI—克唑替尼；T+C—组合物；

图4为本发明组合物对HCC827细胞的CI值图；其中，T+C—组合物；

图5为本发明中单药拓扑替康与克唑替尼及组合物对H1299细胞的抑制率图；其中，TPT—拓扑替康；CRI—克唑替尼；T+C—组合物；

图6为本发明组合物对H1299细胞的CI值图；其中，T+C—组合物；

图7为本发明中单药拓扑替康和克唑替尼及组合物对裸鼠异种移植瘤作用的研究图；其中，Model—模型组；TPT—拓扑替康；CRI—克唑替尼；T+C—组合物。

具体实施方式

下面详细叙述本发明的实施例，需要说明的是，本实施例是叙述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。

本发明中所使用的原料，如无特殊说明，均为常规的市售产品；本发明中所使用的方法，如无特殊说明，均为本领域的常规方法。

一种新型抗肿瘤药物组合物，所述组合物为拓扑替康与克唑替尼的组合物。

较优地，所述拓扑替康和克唑替尼的质量比为1:0.1～1:20；

或者，所述组合物的给药剂量能够根据给药对象、给药途径或药物的制剂形式进行变化，但以保证该组合物在哺乳动物体内能够达到有效的血药浓度为前提。

包含如上所述的新型抗肿瘤药物组合物的制剂。

较优地，所述新型抗肿瘤药物组合物直接混合做成制剂；

或者，所述新型抗肿瘤药物组合物中的拓扑替康、克唑替尼分别与相应的辅料混合分别做成制剂，然后再按照常规的方式包装或结合在一起；

或者，所述新型抗肿瘤药物组合物中的拓扑替康、克唑替尼分别与相应的辅料混合后，再混合做成制剂；

所述辅料不与新型抗肿瘤药物组合物发生反应或不能影响新型抗肿瘤药物组合物的疗效。

较优地，所述新型抗肿瘤药物组合物在制剂中的含量在1～99wt％之间。

较优地，所述拓扑替康和克唑替尼的辅料包括稀释溶剂，该稀释溶剂为二甲基亚砜。

如上所述的新型抗肿瘤药物组合物在作为癌症治疗药物方面中的应用。

如上所述的新型抗肿瘤药物组合物在作为非小细胞肺腺癌治疗药物方面中，或在作为恶性肿瘤的临床辅助治疗药物方面中的应用。

本发明中拓扑替康和克唑替尼的结构式如Ⅰ、Ⅱ所示：

本发明所述的抗肿瘤药物组合物，优选的情况下，所述拓扑替康和克唑替尼的稀释溶剂为二甲基亚砜。

具体地，本发明中所用生物材料、药品和实验方法如下：

所用非小细胞肺癌株包括三种人源肺腺癌细胞NCI-H1975(H1975)、NCI-HCC827(HCC827)和NCI-H1299(H1299)。

所用药品拓扑替康标准品、克唑替尼标准品。以二甲基亚砜分别溶解，配成拓扑替康浓度为100mmol/L，克唑替尼浓度为100mmol/L的母液在-20℃下保存。使用时稀释到表中所列举的合适的浓度。

MTT检测组合药物的细胞毒作用，肺癌细胞于含1％的青霉素-链霉素溶液(双抗)、10％的胎牛血清的RPMI1640的细胞培养基中，置于37℃、5％CO₂培养箱培养。将细胞用胰酶消化后，用血球计数板进行计数，调整细胞密度为5×10⁴cell/mL，接种于96孔板上，每孔加入细胞悬液100μL，同时设置空白孔和对照孔。于37℃，5％CO₂培养箱中培养24h，分别加入不同浓度梯度化合物，每孔0.5μL，每个药物浓度设置3个复孔，置于37℃，5％CO₂恒温培养箱中，孵育48～72h后，每孔加入5mg/mL的MTT溶液20μL，置于37℃，5％CO₂恒温培养箱孵育4h，终止培养。小心移除孔内培养上清液，每孔加100μL二甲基亚砜，37℃放置10min后，使紫色结晶物甲瓒充分溶解，用酶标仪(490nm,630nm或570nm,630nm)测定各孔的吸光度(OD)值，按以下公式计算细胞抑制率。

细胞抑制率(％)＝(1-(实验组OD-空白组OD)/(对照组OD-空白组OD))×100％。

IC₅₀：又称半数有效抑制浓度，即细胞存活率为一半时的药物浓度。根据MTT结果求直线回归方程，并计算IC₅₀值。

采用药物的联合指数(CI)评价组合物拓扑替康和克唑替尼与单药的作用，应用计算机软件CompuSyn计算，CI<1，表示组合物具有协同作用；CI＝1，表示组合物具有相加作用；CI>1，表示组合物具有拮抗作用。

实施例1

研究单药拓扑替康和克唑替尼对H1975、HCC827和H1299细胞的增殖抑制作用，这两个单药在三种细胞的IC₅₀值如表1所示。

表1单药拓扑替康和克唑替尼对肺癌细胞的IC₅₀值

实施例2

不同浓度的单药拓扑替康和克唑替尼以及组合物对H1975细胞增殖抑制作用的实验结果见图1，组合物的CI值见图2。从图1和图2可以看出，组合物的CI<1，表明该组合物比单药具有很好的优效性。

实施例3

不同浓度的单药拓扑替康和克唑替尼以及组合物对HCC827细胞增殖抑制作用的实验结果见图3，组合物的CI值见图4。从图3和图4可以看出，组合物CI<1，表明该组合物比单药具有很好的优效性。

实施例4

不同浓度的单药拓扑替康和克唑替尼以及组合物对H1299细胞增殖抑制作用的实验结果见图5，组合物的CI值见图6。从图5和图6可以看出，组合物的CI<1，表明该组合物比单药具有很好的优效性。

实施例5

建立非小细胞肺腺癌裸鼠动物模型，单药拓扑替康和克唑替尼及组合物对裸鼠异种移植瘤的作用见图7。单药拓扑替康和克唑替尼以及组合物能够明显地抑制肿瘤的生长，单药拓扑替康的抑制率为38％，拓扑替康的抑制率为64％，组合物的抑制率为86％，由此表明，组合物具有很强的抗肿瘤作用，并且远优于单药组。本发明实验结果证实本发明的组合物具有很强的抗肺腺癌作用，可用于治疗肺腺癌患者。

尽管为说明目的公开了本发明的实施例，但是本领域的技术人员可以理解：在不脱离本发明及所附权利要求的精神和范围内，各种替换、变化和修改都是可能的，因此，本发明的范围不局限于实施例所公开的内容。

Claims (8)

1.一种新型抗肿瘤药物组合物，其特征在于：所述组合物为拓扑替康与克唑替尼的组合物。

2.根据权利要求1所述的新型抗肿瘤药物组合物，其特征在于：所述拓扑替康和克唑替尼的质量比为1:0.1～1:20；

或者，所述组合物的给药剂量能够根据给药对象、给药途径或药物的制剂形式进行变化，但以保证该组合物在哺乳动物体内能够达到有效的血药浓度为前提。

3.包含如权利要求1或2所述的新型抗肿瘤药物组合物的制剂。

4.根据权利要求3所述的包含新型抗肿瘤药物组合物的制剂，其特征在于：

所述新型抗肿瘤药物组合物直接混合做成制剂；

或者，所述新型抗肿瘤药物组合物中的拓扑替康、克唑替尼分别与相应的辅料混合分别做成制剂，然后再按照常规的方式包装或结合在一起；

或者，所述新型抗肿瘤药物组合物中的拓扑替康、克唑替尼分别与相应的辅料混合后，再混合做成制剂；

所述辅料不与新型抗肿瘤药物组合物发生反应或不能影响新型抗肿瘤药物组合物的疗效。

5.根据权利要求3或4所述的包含新型抗肿瘤药物组合物的制剂，其特征在于：所述新型抗肿瘤药物组合物在制剂中的含量在1～99wt％之间。

6.根据权利要求4所述的新型抗肿瘤药物组合物，其特征在于：所述拓扑替康和克唑替尼的辅料包括稀释溶剂，该稀释溶剂为二甲基亚砜。

7.如权利要求1或2所述的新型抗肿瘤药物组合物在作为癌症治疗药物方面中的应用。

8.如权利要求1或2所述的新型抗肿瘤药物组合物在作为非小细胞肺腺癌治疗药物方面中，或在作为恶性肿瘤的临床辅助治疗药物方面中的应用。