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CN114533782A - 全谱cbd油在制备预防或治疗牙周炎药物中的应用 - Google Patents

全谱cbd油在制备预防或治疗牙周炎药物中的应用 Download PDF

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CN114533782A
CN114533782A CN202111586004.9A CN202111586004A CN114533782A CN 114533782 A CN114533782 A CN 114533782A CN 202111586004 A CN202111586004 A CN 202111586004A CN 114533782 A CN114533782 A CN 114533782A
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CN
China
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full
periodontitis
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cbd oil
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Application number
CN202111586004.9A
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项伟
李铖
顾文云
张碧云
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Hamson New Drug R & D Shenzhen Co ltd
Original Assignee
Hamson New Drug R & D Shenzhen Co ltd
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Publication date
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    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
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    • A61K8/922—Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof of vegetable origin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
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Abstract

本发明属于全谱CBD油的新用途技术领域，本发明提供了全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎药物中的应用。本发明通过研究发现，全谱CBD油减少了TNF‑α和IL‑1β的分泌，从而抑制了实验牙周炎模型的牙槽骨吸收。此外，全谱CBD油还可通过抑制TLR4介导的NF‑kB和MAPK信号通路的激活，有效减轻脂多糖(LPS)诱导的牙周膜细胞炎症反应。因此，本发明对于预防或治疗牙周炎疾病，提高患者生活质量具有重要意义。

Description

全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎药物中的应用
技术领域
本发明涉及全谱CBD油的新用途技术领域，尤其涉及全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎药物中的应用。
背景技术
牙周炎是一种慢性炎症性疾病，其严重的炎症反应和牙周组织的破坏，是导致牙齿脱落的主要原因。现有的研究己证明牙周菌斑微生物是牙周病的始动因子，通过本身及其代谢产物直接参与破坏牙周组织，同时还通过抗原成分引起宿主对感染的免疫应答，进一步造成牙周组织损伤，是牙周组织破坏的重要原因。目前牙周炎的临床治疗技术都只是达到机械性去除牙菌斑以治疗牙周炎的目的，未涵盖到宿主的免疫反应这一重要环节对疾病发展的影响，通常还需辅以局部或全身药物治疗以巩固基础治疗疗效、阻断其发展。目前常用的牙周抗炎药物以硝基咪唑类、四环素类、青霉素类、大环内酯类等抗生素为主。而长期使用抗生素副作用较大，对人体有不可避免的危害。因此急需开发一种传统中成药或天然萃取物用于局部或全身的抗炎治疗。
全谱CBD油(Full Spectrum Cannabidiol Oil)是指应用现代色谱技术脱除了毒品成分四氢大麻酚(THC)的汉麻(学名：Cannabis sativa L.)花叶提取物，里面除了含有CBD(大麻二酚)之外，还含有其他大麻素、其他大麻素、和其它萜烯化合物等大麻植物的天然成分。全谱CBD油通常较为粘稠，颜色较深，具有汉麻植物的味道。目前，关于纯大麻二酚(CBD)和全谱CBD油的抗炎特性已多有报道。但有关于全谱CBD油对人牙周膜干细胞的保护作用及其抑制牙周炎的机制尚未见报。
发明内容
本发明的目的在于为克服现有技术中存在的缺陷，提供全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎药物中的应用。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎药物中的应用。
优选的，所述牙周炎是指牙槽骨吸收和LPS诱导的牙周膜细胞炎症。
优选的，所述牙槽骨吸收是由炎症介质TNF-α和IL-1β所致，所述LPS诱导的牙周膜细胞炎症是由TLR4介导的NF-kB和MAPK信号通路的活化所致。
优选的，所述药物为注射剂、散剂、颗粒剂、粉剂、丸剂、口服液或片剂。
优选的，所述药物中还含有医学上可接受的辅料。
本发明还提供了全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎的漱口水中的应用。
本发明还提供了全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎的牙膏中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
本发明提供了全谱CBD油的医药新用途。本发明人通过研究发现，全谱CBD油减少了TNF-α和IL-1β的分泌，从而抑制了实验牙周炎模型的牙槽骨吸收。此外，全谱CBD油还可通过抑制TLR4介导的NF-kB和MAPK信号通路的激活，有效减轻脂多糖(LPS)诱导的牙周膜细胞炎症反应。因此，本发明对于预防或治疗牙周炎疾病，提高患者生活质量具有重要意义。
附图说明
图1为各组大鼠上颌第一磨牙舌侧和剖面牙槽骨吸收程度的Micro-CT扫描重建图(注：从上到下依次为空白对照组(CON组)；对照组(L组)；实验组(CBD组))；
图2为各组大鼠牙槽骨高度的丧失程度图(注：数据均表示平均值±标准差，n＝9)；
图3为各组大鼠第一磨牙与第二磨牙邻接面下骨体积丧失程度图(注：数据均表示平均值±标准差，n＝9)；
图4为ELISA检测各组大鼠牙龈组织中的TNF-α的变化图(注：数据均表示平均值±标准差，n＝9)；
图5为ELISA检测各组大鼠牙龈组织中的IL-1β的变化图(注：数据均表示平均值±标准差，n＝9)；
图6为ELISA检测各组大鼠牙龈组织中的TLR4的变化图(注：数据均表示平均值±标准差，n＝9)；
图7为ELISA检测各组大鼠牙龈组织中的Cat-k的变化图(注：数据均表示平均值±标准差，n＝9)；
图8为不同浓度的全谱CBD油对人牙周膜细胞增殖的影响；
图9为不同浓度的全谱CBD油对牙周膜细胞细胞活性的影响；
图10为各组大鼠牙周膜细胞中TNF-α的RNA的转录水平(注：数据均表示平均值±标准差，n＝3)；
图11为各组大鼠牙周膜细胞中TLR4的RNA的转录水平(注：数据均表示平均值±标准差，n＝3)；
图12为各组大鼠牙周膜细胞中P38的RNA的转录水平(注：数据均表示平均值±标准差，n＝3)；
图13为各组大鼠牙周膜细胞中Erk1的RNA的转录水平(注：数据均表示平均值±标准差，n＝3)；
图14为各组大鼠牙周膜细胞中Erk2的RNA的转录水平(注：数据均表示平均值±标准差，n＝3)；
图15为各组大鼠牙周膜细胞中NF-kB(p65)的RNA的转录水平(注：数据均表示平均值±标准差，n＝3)；
图16为全谱CBD油对ERK、NF-kB蛋白表达的影响(注：数据均表示平均值±标准差，n＝3)。
具体实施方式
下面结合实验例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
本发明是在实验性大鼠牙周炎模型上，外用涂抹全谱CBD油(选自云南汉木森生物科技有限责任公司生产的含60％CBD的全谱大麻二酚油，下同)，收集上颌标本，运用Micro-CT扫描、重建，以各标本第二磨牙釉牙骨质界至牙槽嵴顶的距离(CEJ-AC)和骨密度骨体积分数比为骨形态学测量指标，同时用酶联免疫吸附试验检测大鼠牙周组织中炎症相关蛋白TNF-α、IL-1β、TLR4、Cat-k的表达。用脂多糖(LPS)诱导人牙周膜干细胞的炎症反应，模拟牙周炎的炎症过程。采用cck-8法检测人牙周膜干细胞的活性。实时荧光定量PCR检测细胞中TNF-α、TLR4、Erk1、Erk2、P38、NF-kB基因的表达，同时运用免疫印迹分析检测细胞中Erk、NF-kB蛋白的表达。
1.实验性大鼠牙周炎模型建立及取材
本实验选用8周大雄性SD大鼠，共30只，体重200g±20g，聚丙烯合成塑料大鼠笼分笼饲养，每5只一笼，标准饲料由四川大学实验动物中心提供，自由饮水饮食。
大鼠随机分成3组，每组10只，两组用于牙周炎模型的建立，余一组作为正常对照组。用于建模的两组行7％水合氯醛(500mg/kg)腹膜下注射麻醉。用3-0无菌尼龙线结扎大鼠双侧上颌第一磨牙牙颈部，结扎丝线应该进入龈沟内，近中打结，便于实验过程中观察丝线是否脱落。
药物处理：空白对照组(CON组)，用无菌尼龙线结扎牙颈部，结扎丝线进入龈沟内；对照组(L组)，用无菌尼龙线结扎牙颈部，结扎丝线进入龈沟内，加入食用级醋；实验组(CBD组)，用无菌尼龙线结扎牙颈部，结扎丝线进入龈沟内，加入食用级醋，同时加入的全谱CBD油处理。在吸入乙醚麻醉下处理CBD组实验大鼠，将药物均匀涂抹在大鼠上颌牙周组织周围，每天一次。饲养四周后乙醍麻醉下颈椎脱白处死所有动物，分离双侧上颌骨，一侧上颌骨组织置于0.5％多聚甲酸溶液中，用于Micro-CT扫描，另一侧上颌第一磨牙周围龈缘以下2mm的牙龈分离，用于蛋白质提取。
2.Micro-CT分析牙槽骨吸收
Micro-CT扫描及重建，测量各标本第一磨牙釉牙骨质界至牙槽嵴顶的距离(CEJ-AC)，即沿着第一磨牙颊舌侧牙根长轴测量，每个牙齿3个测量值(μm)，取其平均值作为CEJ-AC距离。使用CT机自带的分析软件计算骨体积。在扫描横截面上选第一磨牙与第二磨牙邻接面区域为选区，计算骨体积占总体积的百分比(BV/TV)。
3.酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测炎性蛋白的表达
收集上述大鼠牙龈组织，组织中总蛋白的提取。根据酶联免疫吸附试剂盒说明进行测定，在450nm读取各样品的吸光度，根据标准曲线计算炎性蛋白TNF-α、IL-1β、TLR4、Cat-k的含量。
4.细胞培养
牙周膜细胞取自因正畸减数拔除的牙周组织健康的16～20岁志愿者的前磨牙(患者及家属均知情同意)，PBS冲洗牙后，无菌条件下刮取根中1/3的牙周膜组织，釆用组织块法进行hPDLCs的原代培养，组织培养基(DMEM中添加0.1％Penicillin-StreptomycinSolution和10％FBS)，每2天更换一次。待细胞从组织块中爬出并铺满培养板达80％时进行首次传代。本发明采用第3代至第5代细胞。
5.CCK-8法检测细胞增殖
将hPDLCs接种于96孔板(5000个/孔，100μL)中。用不同浓度(0.5、1、2、4、8μmol/L)的CBD处理细胞。于实验开始后1、3、5、7d用CCK-8法测定细胞浓度，以DMEM空白对照，评估介质中牙周膜细胞的存活状况，做出细胞增殖曲线，根据公式：细胞活力＝[A(加药)-A(空白)]/[A(对照)-A(空白)]计算出细胞活力，并以时间为x轴，细胞活力为y轴作图。
6.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术测定炎性标志物的表达水平
将细胞以1*106的密度接种在6孔细胞培养板中。在含有10％FBS的DMEM中培养2天后将培养基改为不含FBS的DMEM饥饿1天，加入10mg/L的LPS以及不同浓度的CBD(0、1、2、4和8μmol/L；全谱CBD油含67％CBD，文中所有浓度按CBD纯品计量)。24小时后使用Trizol试剂提取各组的总细胞RNA，根据制造商的说明，使用Prime ScriptTM RT试剂盒(Takara，DRR037A)将2μg总RNA用于合成cDNA。引物设计为：GAPDH的两条引物分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，TNF-α的两条引物分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示，TLR4的两条引物分别如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示，Erk1的两条引物分别如SEQ ID NO.7和SEQID NO.8所示，Erk2的两条引物分别如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示(也可见下表所示)。RT-qPCR的条件如下：①95℃反应3分钟。②9℃10秒；55℃30秒，反应39个循环。重复测量3次，釆用以下公式对目的基因进行相对定量计算：△CT＝CT(X)-CT(GAPDH)，Y＝2-ΔΔCT。
引物设计表
Figure BDA0003421266140000051
Figure BDA0003421266140000061
7.Westernblot分析炎性蛋白的表达
将hPDLSCs以1*106的密度接种在6孔细胞培养板中。在含有10％FBS的DMEM中培养2天后将培养基改为不含FBS的DMEM饥饿1天，加入10mg/L的LPS以及8μmol/L的CBD。24小时后，用冷PBS洗涤hPDLSCs，用RIPA裂解缓冲液充分裂解细胞，13000g离心10min。用BCA蛋白测定试剂盒测定蛋白质浓度。总蛋白用SDS-PAGE凝胶分离，转移到PVDF膜上。用5％脱脂奶封闭PVDF膜，并在4℃下与一抗NF-kB(1：800)、ERK(1:1000)、β-actin(1:1000)孵育过夜。用TBST冲洗PVDF膜4次(5min/次)后置入相应的二抗(1:8000)中，在室温下摇床孵育1h。最后将膜洗涤4次(5min/次)，发光，显影，定影。用Image-J软件定量分析。
8.统计分析
统计分析采用SPSS 22.0和GraphPadPrism 8.0软件。实验结果数值均以平均值±标准差的形式表示，采用单变量方差分析(ANOVA)，用Tukey检验进行组间多重比较。以p<0.05为有统计学意义。
实验例1
研究全谱CBD油对实验性大鼠牙周炎模型的影响，结果如图1至图7所示。
图1为Micro-CT扫描重建图，显示各组大鼠上颌第一磨牙舌侧和剖面牙槽骨吸收程度。
三组CEJ-AC测量结果分别为：CON组0.89±0.13mm，L组1.18±0.08mm，CDB组1.00±0.08mm。Micro-CT重建图显示丝线结扎导致第一磨牙周围出现明显的牙槽骨吸收。由图2可知，CBD治疗组的CEJ-AC距离明显小于L组，表明CBD一定程度抑制了牙槽骨高度的丧失。
第一磨牙与第二磨牙邻接面下骨体积丧失程度，以所测区域骨体积占总体积的百分比指示(BV/TV)，三组的比值分别是：0.80±0.09、0.53±0.04、0.61±0.02。由图3可知，CBD组BV/TV下降少于L组，说明CBD治疗组能显著减少牙槽骨的丢失。
综合来看，与CON组相比，丝线结扎诱导实验性牙周炎大鼠L组和CBD实验组均表现出CEJ-AC距离的增大，且差异有统计学意义(####p<0.0001，与对照组比较)；L组CEJ-AC距离的增加显著大于CBD组(****p<0.0001，与L组比较)。与CON组相比，L组和CBD组均表现出BV/TV减少，且差异有统计学意义(##p<0.01，与对照组比较)；L组BV/TV减少显著多于CBD组(****p<0.0001，与L组比较)。数据均表示平均值±标准差(n＝9)。
ELISA测定了牙龈组织中的TNF-α、IL-1β、TLR4、Cat-k。结果如图4至图7所示。由图4-图7可知，L组和CBD组均表现出炎性蛋白检出增多，且差异有统计学意义(#p<0.05，####p<0.0001，与CON组比较)。与L组的结扎动物相比，CBD组动物牙龈组织中的炎性细胞因子水平显著降低，差异有统计学意义(**p<0.01，****p<0.0001，与L组比较)。数据均表示平均值±标准差(n＝9)。这表明全谱CBD油可以抑制大鼠实验性牙周炎模型的炎症反应。
实验例2
研究全谱CBD油对人牙周膜细胞增殖的影响，结果如图8至图9所示。
由图8、图9可知，牙周膜细胞经不同浓度CBD(0.5、1、2、4、8μmol/L)孵育1、3、5、7天后，CCK-8法所测吸光光度值在各组间无显著性差异，各组细胞活力无明显差异。这说明实验中所用的各个浓度的CBD均未影响牙周膜成纤维细胞的活性。在实验最长观察期内，CBD未对牙周膜成纤维细胞产生细胞毒性。
实验例3
研究全谱CBD油对LPS刺激的人牙周膜细胞的影响，结果如图10至图16所示。
脂多糖是牙周炎发病机制中的关键毒性因素。因此，LPS刺激人牙周膜细胞24小时后能增加细胞中TNF-α、TLR4、P38、Erk1、Erk2、NF-kB(p65)RNA的转录水平。由图10至图15可知，RT-qPCR结果显示，LPS刺激后，TNF-α、TLR4、P38、Erk1、Erk2、NF-kB表达上调，且LPS对照组与空白对照组相比差异有统计学意义(#p<0.05，##p<0.01，###p<0.001，与对照组比较)。加入CBD，随着CBD浓度的增加TNF-α、TLR4、P38、Erk1、Erk2、NF-kB表达均下调，CBD浓度越大，下调越明显，且LPS+CBD组与LPS组相比差异具有统计学意义(*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，****P<0.0001，与LPS组比较)。这表明CBD能浓度依赖性的抑制LPS刺激引起的TNF-α、TLR4、Erk1、Erk2、P38、NF-KB转录水平的增加，浓度越大，抑制作用越明显。
通过Westernblot分析ERK，NF-kB蛋白在LPS刺激24h后的表达。由图16可知，LPS刺激后，ERK、NF-kB蛋白表达上调，且LPS刺激组与空白对照组相比差异有统计学意义(**p<0.01，***p<0.001，与对照组比较)，加入CBD后ERK、NF-kB蛋白表达均下调，且LPS+CBD组与LPS组相比差异具有统计学意义(#p<0.05，##p<0.01，与LPS组比较)。数据均表示平均值土标准差(n＝3)。与qPCR结果相符，CBD可抑制ERK以及NF-kB蛋白的产生。这表明LPS剌激人牙周膜细胞后，通过与TLR4结合，可启动MAPK和NF-kB信号通路，与致炎细胞因子TNF-α的增多有关。而CBD抑制MAPK和NF-kB信号通路的活化，从而能减少TNF-α的表达，进一步抑制炎症的放大。
由上述可知，为了评价CBD对炎症和牙槽骨丢失的影响，本发明测量了实验大鼠牙龈中TNF-α、IL-1β、TLR4和Cat-k水平，并对上颌骨样本进行了Micro-CT扫描重建。Micro-CT分析显示，L组CEJ-AC的距离显著高于CBD组，CBD组BV/TV下降少于L组。上述结果均显示CBD治疗组显著抑制了牙槽骨吸收。已有研究表明，炎症介质TNF-α和IL-1β的表达在牙周炎的发病机制中起着重要的作用。本发明结果表明，CDB治疗组显著抑制了牙周炎引起的TNF-α、IL-1β的表达，表明CBD具有一定的抗炎作用。TLR4是第一个对LPS作出反应的受体，TLR4对LPS的识别可以诱导NF-kB和MAPK的活化。本发明结果表明，TLR4的表达在CBD组中被抑制，因此我们从TLR4入手，探讨了CBD参与牙周炎宿主炎症和牙周骨代谢调节的作用机制。
首先研究了CBD的细胞毒性。本发明目前的数据表明，所用的最高浓度8μmol/L的CBD治疗对牙周膜细胞存活没有影响。TNF-α是牙周炎病理过程中的关键性的致炎细胞因子，它有始发和放大炎症反应的效果，在牙周组织破坏中起着重要作用，本发明研究发现CBD在体外能抑制LPS诱导的牙周膜细胞中TNF-α的产生，在体内也能抑制丝线结扎诱导的牙周炎引起的TNF-α增多，这可能是CBD阻止牙周破坏的机制之一。
以往的研究已经证明LPS和细菌通过介导TLRs的表达来促进TNF-α、IL-1β的产生，这表明通过抑制TLRs可以控制炎症介质的释放。TLRs的激活通常激活NF-kB和MAPK-ERK1/2信号通路，导致炎症基因表达上调，这对于炎症的先天免疫应答至关重要。本发明通过LPS刺激hPDLSCs，诱导TLR4/NF-kB信号通路上调，CBD处理后抑制TLR4/NF-kB信号通路。LPS刺激细胞可以诱导ERK1/2和p38 MAPK的磷酸化和活化。本发明探讨了CBD对LPS诱导的ERK1/2和p38 MAPK活化的影响。结果表明，CBD对LPS诱导的NF-kB和MAPK活化有剂量依赖性的抑制作用。
综上所述，全谱CBD油减少了TNF-α和IL-1β的分泌，从而抑制了实验牙周炎模型的牙槽骨吸收。并且通过抑制TLR4介导的NF-kB和MAPK的激活，减轻了LPS诱导的牙周膜细胞炎症反应。因此，全谱CBD油可被认为是牙周病的潜在治疗剂。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
序列表
<120>全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎药物中的应用
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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Claims (7)

1.全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎药物中的应用，其特征在于，所述牙周炎是指牙槽骨吸收和LPS诱导的牙周膜细胞炎症。
3.根据权利要求1或2所述的全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎药物中的应用，其特征在于，所述牙槽骨吸收是由炎症介质TNF-α和IL-1β所致，所述LPS诱导的牙周膜细胞炎症是由TLR4介导的NF-kB和MAPK信号通路的活化所致。
4.根据权利要求3所述的全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎药物中的应用，其特征在于，所述药物为注射剂、散剂、颗粒剂、粉剂、丸剂、口服液或片剂。
5.根据权利要求4所述的全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎药物中的应用，其特征在于，所述药物中还含有医学上可接受的辅料。
6.全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎的漱口水中的应用。
7.全谱CBD油在制备预防或治疗牙周炎的牙膏中的应用。
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20160166498A1 (en) * 2014-12-16 2016-06-16 Axim Biotechnologies, Inc. Oral care composition comprising cannabinoids
CN109939033A (zh) * 2017-12-20 2019-06-28 汉义生物科技（北京）有限公司 一种含有大麻素的漱口水及其制备方法
CN109939011A (zh) * 2017-12-20 2019-06-28 汉义生物科技（北京）有限公司 一种含有大麻素的牙膏及其制备方法
CN111956664A (zh) * 2019-12-03 2020-11-20 云南汉盟制药有限公司 一种宠物用组合物及其应用
WO2021124316A1 (en) * 2019-12-17 2021-06-24 Swysh Inc. High cbd cannabis sativa lines and extracts with anti-inflammatory potencies for oral and gut health

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20160166498A1 (en) * 2014-12-16 2016-06-16 Axim Biotechnologies, Inc. Oral care composition comprising cannabinoids
CN109939033A (zh) * 2017-12-20 2019-06-28 汉义生物科技（北京）有限公司 一种含有大麻素的漱口水及其制备方法
CN109939011A (zh) * 2017-12-20 2019-06-28 汉义生物科技（北京）有限公司 一种含有大麻素的牙膏及其制备方法
CN111956664A (zh) * 2019-12-03 2020-11-20 云南汉盟制药有限公司 一种宠物用组合物及其应用
WO2021124316A1 (en) * 2019-12-17 2021-06-24 Swysh Inc. High cbd cannabis sativa lines and extracts with anti-inflammatory potencies for oral and gut health

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
李平等: "大麻素2型受体在免疫调节中的作用", 《华中科技大学学报(医学版)》 *
陈来成等: "工业大麻化妆品市场现状及国内发展前景展望", 《中国化妆品》 *

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