CN101475573A - 抗流感药物达菲中间体、合成方法及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种如下结构式的达菲中间体、合成方法及其用途，该中间体可以更加经济，操作更加简单的用于合成达菲药物。

Description

抗流感药物达菲中间体、合成方法及其用途

技术领域

本发明涉及达菲的重要中间体、合成方法及其用途，采用较廉价的吡咯为起始原料，整个操作更加简单、安全。

背景技术

在流感爆发期，口服给药预防和治疗流感是最方便和经济的方法。Relenza口服无效，生物利用度低、价格昂贵，这就促使人们试图寻求口服有效、可在胃肠道吸收的高效流感病毒NA抑制剂。1997年Kim等(a.J.Am.Chem.Soc.，1997，119：681-690；b.J.Med.Chem.，1998，41，2451-2460)通过对唾液酸与NA复合物过渡态结构的分析，认为如果采用六元碳环代替二氢吡喃环可以增加母环的牢固程度，可能更易获得强有效抗流感病毒和良好药效的最佳构型，并合成了一系列全碳六元环流感病毒NA抑制剂。这一想法最终导致了口服新药达菲的发明：

抗流感药物—潜药达菲。

达菲(即Oseltamivir，GS-4071)的IC₅₀为lnmol/L(H1N1)，其乙酯GS-4104在动物实验中显示口服有效，经过临床研究于1999年被定名为Oseltamivir，并作为第一个口服有效的流感病毒NA抑制剂在瑞士首次上市，用于预防和治疗A型和B型流行性感冒。达菲是GS-4071的乙酯型前药，可以阻断流感病毒NA对病毒感染细胞表面的唾液酸残基的裂解，从而抑制新生病毒粒从宿主细胞的释放。达菲具有很高的口服活性，并经过体内肝酯酶的代谢生成活性的GS-4071，而产生抑制流感病毒NA的疗效。

目前，达菲由Roche公司研发生产，都是用含有六元碳环的化合物为起始原料，经多步转化获得所需要的手性中心和构型而完成的半合成品。1997年，Kim等(a.J.Am.Chem.Soc.，1997，119：681-690；b.J.Med.Chem.，1998，41，2451-2460)在设计并合成达菲时，采用(-)-shikimic acid(莽草酸)为起始原料，经如下所示的路线得到达菲：

这条路线中，采用了几次NaN₃为试剂的亲核反应，由于试剂和中间体存在的爆炸危险，给大规模工业生产带来了危险性。

1998年，Rohloff等(J.Org.Chem.，1998，63：4545-4550)采用相对较为廉价的(-)-奎宁酸[(-)-quinic acid]为起始原料，经过所示的路线图合成了达菲：

此法可以合成千克级的达菲产品。但是，和kim的路线相似，这条路线同样两次使用了NaN₃作为试剂。

1999年Roche公司的Federspiel等(Org.Process Res.Dev.，1999，3：266-274)报道了工业化生产达菲的一些关键步骤的工艺改进。随后，2001年Karpf等(J.Org.Chem.，2001，66：2044-2051)在前人研究的基础上，从环氧化合物A出发在MgBr₂·OEt催化下用烯丙基胺区域选择性开环氧，后面又利用烯丙基胺选择性开氮杂三元环反应，最后通过Pd-C催化的反应除去氮原子上的烯丙基保护得到达菲，路线如下所示：

这一路线第一次采用烯丙基胺代替NaN₃引入氮原子，从而避免了生产中的爆炸性危险。

2004年，Roche公司的Harrington等(Org.Process Res.Dev.，2004，8：86-91)报道了达菲的第二条工业合成路线。该小组仍然从环氧化合物A出发，在MgCl₂催化下用大位阻的叔丁基胺区域选择性开环氧，然后用甲基磺酸酯保护C₄-位的羟基后随即形成氮杂环丙烷，酸催化条件下用二烯丙基胺区域选择性开环并乙酰化，最后脱除保护就得到达菲，合成路线如下所示：

虽然后者进行了路线改进，但是采用了新的含氮试剂在价格上较NaN₃贵很多，且最后除去保护基是必须使用Pd等贵金属，所以生产成本上扬。其次由于达菲生产所用的莽草酸原料产自中国，产量的提升空间不大；今天由于禽流感爆发各国对于达菲的需求急剧上升，Roche的达菲生产能力显得力不从心。因此，开发一条新的合成达菲的路线非常有必要，一方面需要摆脱对于莽草酸的原料依赖，另外必须避免NaN₃等爆炸性化学试剂(或叠氮化合物中间体)的使用。

2006年Corey提出了一条新的合成路线(J.Am.Chem.Soc.，2006，128，6310-6311)，首先利用不对称Diels-Alder反应高效的构建了六元碳环，胺解、碘代构建手性内酰胺，再通过两次消除构建了环己二烯，并形成了达菲所需的α、β-不饱和酯，然后两步构建三元氮杂环，最后通过戊醇开环、酸化完成了达菲的合成，合成路线如下所示：

该路线采用廉价的小分子为原料，大大降低了合成的成本，而且整个合成路线中也避开了使用叠氮化钠，使整个操作过程更加安全。

2007年台湾的Jim-Min Fang等人以D-木糖为手性源(J.Am.Chem.Soc.，2007，129，11892-11893)，首先通过Horner-Wadsworth-Emmons反应构建了六碳环羧酸酯8a和8b，再通过简短的几步转化实现了达菲的合成，合成路线如下所示：

该合成方法作者尝试了将羧酸酯和氨基分别换成了磷酸酯和胍基取代基，合成了达菲的衍生物13b，活性测试表明13b对流感病毒NA具有更高的抑制活性，这样又扩展了NA抑制剂的化合物范围。

2007年Nina Kann等人利用环己二烯羧酸酯形成羰基铁复合物(Chem.Commun.，2007，3183-3185)，进一步形成烯丙基阳离子，构建氨基碳手性中心，再选择性环氧化，叠氮开环氧化合物，构建三元氮杂环，顺利完成了Corey在达菲合成路线中重要中间体的合成，为达菲的合成工作又开辟一条新的路线。

2008年Trost等人以环己烯内酯为起始原料(Angew.Chem.Int.Ed.，2008，47，3759-3761)，利用手性钯催化开内酯换，高选择性的得到了开环产物，构建α，β-不饱和酯，再利用铑配体催化构建三元氮杂环，戊醇开环，最后经过保护基的转化和脱除，完成了达菲的合成：

人们期望更加高效率的合成方法合成达菲的重要中间体，以便于整个合成路线更加经济，操作更加简单。

发明内容

本发明的目的是提供一种达菲的重要中间体。

本发明的目的还提供一种上述达菲的重要中间体针的合成方法。

本发明的另一目的是提供一种上述达菲的重要中间体的用途，即可以更加经济，操作更加简单的用于合成达菲药物。

对达菲结构特点，本发明小组提出了一种新的达菲的重要中间体，具有如下的结构式的化合物：

或

其中，R¹＝C₂H₅、OC₂H₅、

或OH；R²＝H；R³＝H；或者

或

Boc＝叔丁氧羰基。

本发明的达菲中间体尤其推荐具有如下的结构式：

其中，Boc＝叔丁氧羰基，

本发明的方法采用简单的小分子吡咯为起始原料，应用现代有机化学的一些高效率的合成方法，合成了达菲的重要中间体，整个合成路线更加经济，操作更加简单，具体路线如下所示：

化合物1是以吡咯为原料通过Diels-Alder反应制备得到，2002年Xu等人(Weeresakare，G.-M.；Xu，Q.；Rainier，J.-D.Tetrahedron Lett.2002，43，8913-8915.)已经有过报道；化合物1在有机溶剂中、在-10℃-25℃之间通过2倍量的硼氢化钠还原还原30分钟，实现了烯溴的选择性还原，得到化合物和

实现了烯溴的选择性还原，以化合物1b为主。而还原产物2006年Rainier已经报导过(Org.Lett.2006，8,459-462.)，但是底物和合成方法与本发明均不相同；化合物1b通过双羟化反应得到化合物2，具体地说化合物1b在有机溶剂中与1.5倍量的N-甲基吗啉氧化物和催化量的四氧化锇在室温下搅拌9个小时得到化合物2；化合物2经酮叉保护后得到化合物3，碱性条件开桥环，成功得到化合物4(即目标分子母核—含有α，β-不饱和酯的六元碳环)，并且同时引入了目标分子所需的氨基，碱性条件开桥环也是本合成路线的关键步骤之一；值的注意的是化合物1b及其化合物1a和1b的混合物通过双羟化反应，酮叉保护二醇，碱性条件开桥环也能顺利的得到化合物4，这也提高了本发明方法中原料的利用率；本发明对开桥环一步所使用的碱进行了筛选，发现六甲基二硅氨基锂，六甲基二硅氨基钠，叔丁醇锂，二异丁基氨基锂，叔丁醇钾等均能实现开环目的，而碱的量在1eq-5eq均可以，碱量越大，反应时间会随之缩短，反应温度控制在-78℃～5℃，使用不同的碱对反应温度也有一定的影响；接下来对化合物4进行化学拆分，首先将化合物4经皂化反应得到化合物5，再将化合物5与手性辅基缩合，通过热力学拆分机理成功得到了一对非对映异构体化合物6a和6b，化合物6b正是本发明需要的构型，随后将化合物6a和化合物6b脱除辅基即可高收率的得到一对对映异构体化合物4a和化合物4b；虽然采用辅基可以高收率高异构体过量的得到所需的异构体，但是由于两个对映异构体的极性很相似，大量制备会导致分离上的困难，查阅文献发现，Nagao等曾通过酶催化水解反应从α-烷基-α-氨基丙二酸酯出发，合成了手性α-取代的丝氨酸(a.Tetrahedron：Asymmetry，1997，8,585；b.Tetrahedron：Asymmetry，1997，8，3651)，本发明也尝试了这样一类水解酶，应用与本发明的底物，结果发现，本发明底物的两种构型的水解速度存在着明显的差异，其中一种构型优先水解成酸，利用动力学拆分机理高异构体过量的得到了所需的光学活性的化合物；拆分产物化合物4b在醇中酸性条件脱除酮叉保护得到化合物8，再以环亚硫酸酯保护二醇得到化合物9，叠氮化钠选择性进攻烯丙位开环，成功的立体专一的得到了合成达菲分子的一个重要中间体—化合物10；以此中间体再经过几步已知的转化便可以实现达菲分子的合成，具体实施方案Corey J.Am.Chem.Soc.，2006，128，6310-6311)和Nina Kann(Chem.Commun.，2007，3183-3185)已经有过报道。

本发明的方法可以进一步描述如下：通过下述(1)、(1)～(2)、(1)～(3)、(1)～(4)四种步骤分别制得：

(1)化合物

以有机酮作溶剂与对甲苯磺酸室温下搅拌5～12小时后得到化合物

所述的

和对甲苯磺酸的摩尔比为1：0.05～0.2。

(2)在有机溶剂中，

与碱摩尔比1：0.1-5，在-78～10℃下反应1～3小时后得到

所述的碱是六甲基二硅氨基锂、六甲基二硅氨基钠、叔丁醇锂、二异丁基氨基锂或叔丁醇钾；推荐反应温度是-50～0℃。

(3)对步骤(2)的

消旋体化合物进行拆分：在有机溶剂溶剂中，和一价金属氢氧化物室温下搅拌0.5～3小时，得到化合物

所述的一价金属氢氧化物是氢氧化锂。

(4)将

和缩合剂[1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐]作用下，室温下搅拌1～3小时，得到

和

所述的

和缩合剂的摩尔比为1：1～1.5：1～1.5；或者

反应得到的两个化合物在乙醇中分别再和等摩尔到二倍摩尔量的

室温下搅拌10～24小时，得到化合物

和

其中，R¹、R²、R³和Boc如前所述。

本发明的达菲中间体不仅可以用于合成达菲药物，而且成功开辟了一条新的合成达菲重要中间体的路线，使得达菲的制备变得更加经济，操作更加简便快捷。

具体实施方式

以下实例有助于了解本发明，但不局限于本发明的内容。

实施例1

化合物1(500mg，1.4mmol)溶于二甲亚砜(7.25mL)中，冰盐浴下向二甲亚砜体系中加入硼氢化钠(110mg，2.9mmol)，撤去冷浴，自然升至室温，小心加入氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取(20mL×3)，食盐水洗有机相，无水硫酸钠干燥，滤去硫酸钠，减压脱除溶剂，柱层析分离得纯品(285mg，74％，1a∶1b＝2:1)。化合物1a：¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ 6.39(bs，1H)，6.19(bs，1H)，4.90(bs，1H)，4.68(bs，1H)，4.09(m，2H)，3.14(bs，1H)，2.17(bs，1H)，1.55(bs，1H)，1.42(s，9H)，1.24(t，J＝7.1Hz，3H)。化合物1b；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ 6.36(bs，2H)，4.94(bs，1H)，4.72(bs，1H)，4.18(q，J＝7.3Hz，2H)，2.39-2.31(m，2H)，1.46(bs，1H)，1.40(s，9H)，1.30(t，J＝7.1Hz，3H)。

实施例2

化合物1a(100mg，0.37mmol)溶于叔丁醇(3.12mL)中，室温下分别加入N-氧化甲基吗啉(66mg，0.56mmol)、四氧化锇(0.2mL，2g/100mL in H₂O，0.016mmol)和蒸馏水(0.62mmol)，室温下搅拌9小时，体系加入亚硫酸钠溶液5mL搅拌40分钟后，乙酸乙酯萃取(10mL×5)，有机相用氯化钠溶液洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，石油醚/乙酸乙酯＝2:1，柱层析，分到化合物2(107mg，96％).化合物2：¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ 4.32-4.10(m，4H)，3.89-3.88(m，2H)，3.78(br，1H)，2.97-2.90(m，1H)，1.98-1.88(m，1H)，1.80-1.74(m，1H)，1.46(s，9H)，1.29(t，J＝7.2Hz，3H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)：δ 172.61，156.67，80.77，73.59，70.76，64.64，63.73，61.11，42.75，28.06，27.63，14.07；FT-IR(fim)：3438，2979，2934，1732，1705，1369，1194，1062，900cm^-1；ESI-MS(m/z)：324.1([M+Na]⁺)；ESI-HRMS(m/z)：计算值(Calcd for)C₁₄H₂₃NO₆([M+Na]⁺)：324.1418，实测值(Found)：324.1430.

实施例3

化合物2(432mg，1.44mmol)溶于3-戊酮(4.6mL)中，室温下加入含有一个结晶水的对甲苯磺酸(36mg，0.19mmol)，室温下搅12h，加入碳酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相用氯化钠溶液洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，石油醚/乙酸乙酯＝10:1柱层析，分到化合物3(501mg，94％).化合物3：¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ 4.50-4.15(m，6H)，2.95(br，1H)，1.93(br，1H)，1.72-1.47(m，5H)，1.45(s，9H)，1.29(t，J＝7.0Hz，3H)，0.91(t，，J＝7.5Hz，3H)，0.85(t，J＝7，4Hz，3H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)：δ 171.44，154.09，114.67，81.33，79.76，78.80，60.97，59.79，58.75，42.47，28.41，28.16，27.99，26.53，14.02，8.51，7.52；FT-IR(fim)：2974，2937，2880，1729，1731，1365，1169cm^-1；ESI-MS(m/z)：392.1([M+Na]⁺)；ESI-HRMS(m/z)：Calcd for C₁₉H₃₁NO₆([M+Na]⁺)：392.2044，Found：392.2049.

实施例4

-78℃氩气保护下六甲基二硅氨基锂(1.74mL，1M in甲苯，1.74mmol)，加入无水无氧的四氢呋喃(10mL)中，化合物3(321mg，0.87mmol)的四氢呋喃(7mL)溶液滴加至上述溶液中，-78℃下搅拌2小时，自然升至零摄氏度，冰浴下再搅拌2小时，加水淬灭，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相用氯化钠溶液洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，石油醚/乙酸乙酯＝15:1柱层析，分到化合物(±)-4(257mg，80％).化合物(±)-4：¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ 6.73(t，J＝3.1Hz，1H)，5.03(d，J＝9.4Hz，1H)，4.77-4.74(m，1H)，4.37-4.35(m，1H)，4.21(q，J＝7.2Hz，2H)，3.97-3.89(m，1H)，2.69(dd，J＝5.1，6.5Hz，1H)，2.23-2.12(m，1H)，1.64(q，J＝7.4Hz，2H)，1.56(q，J＝7.4Hz，2H)，1.47(s，9H)，1.30(t，J＝7.1Hz，3H)，0.91(t，J＝7.5Hz，3H)，0.81(t，J＝7.5Hz，3H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)：δ 166.24，155.45，134.77，130.21，113.56，79.70，74.67，72.97，60.90，48.09，30.11，29.62，28.36，25.42，14.15，8.39，7.94；FT-IR(fim)：3454，3360，2974，2937，1715，1506，1365，1242，1167，1068，1014，925,734cm^-1；ESI-MS(m/z)：392.1([M+Na]⁺)；ESI-HRMS(m/z)：Calcd for C₁₉H₃₁NO₆([M+Na]⁺)：392.2044，Found：392.2058.

实施例5

化合物(±)-4(160mg，0.43mmol)溶于四氢呋喃(4.3mL)中，加入水(1.3mL)，0℃加入含有一个结晶水的氢氧化锂(72mg，1.72mmol)，室温下搅拌至体系原料消失，0℃向体系加入1N盐酸溶液调节pH＝2-3，乙酸乙酯稀释，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，石油醚/乙酸乙酯＝2:1柱层析，得到化合物(±)-5(134mg，98％).¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ 9.34(br，1H)，6.85(s，1H)，5.10(d，J＝9.0Hz，1H)，4.78(s，1H)，4.37(d，J＝4.3Hz，1H)，3.95-3.93(m，1H)，2.69(dd，J＝5.5，16.7Hz，1H)，2.21-2.11(m，1H)，1.68-1.52(m，4H)，1.47(s，9H)，0.91(t，J＝7.3Hz，3H)，0.81(t，J＝7.3Hz，3H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)：δ 170.7，155.3，136.9，129.5，113.7，80.0，74.6，72.9，48.0，30.1，29.6，28.3，25.1，8.4，7.9；FT-IR(fim)：3356，2980，2941，1694，1535，1368，1172，1068，928,686cm^-1；ESI-MS(m/z)：364.1([M+Na]⁺)；ESI-HRMS(m/z)：Calcd for C₁₇H₂₇NO₆([M+Na⁺)：364.17306.Found：364.17393.

实施例6

室温下向化合物5(125mg，0.37mmol)的二氯甲烷(1.9mL)溶液中加入辅基(143mg，0.74mmol)、EDCI(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐)(142mg，0.74mmol)、DMAP(N，N-4-二甲氨基吡啶)(19mg，0.16mmol)，室温下搅拌3小时，体系加入乙酸乙酯稀释，水洗、饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，干燥，石油醚/乙醚＝2∶1柱层析，分得化合物6a(92mg)，6b(92mg)，总收率96％。化合物6a：[α]_D ²⁰＝-23.8°(c1.03，CHCl₃)；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.36-7.17(m，5H)，6.21(s，1H)，5.04(d，J＝9.3Hz，1H)，4.87-4.78(m，2H)，4.46-4.29(m，3H)，4.18-4.02(m，1H)，3.36(d，J＝10.5Hz，1H)，2.85-2.77(m，1H)，2.49(d，J＝7.3Hz，2H)，1.69-1.62(m，4H)，1.47(s，9H)，0.94-0.85(m，6H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)：δ 186.2，170.6，154.9，134.7，133.9，132.8，129.2，129.0，128.9，127.5，113.6，79.6，74.7，73.0，71.5，60.0，47.8，36.8，30.2，29.6，29.4，28.3，26.4，8.3，8.1；FT-IR(fim)：3452，3333，2925，1699，1498，1367，1240，1170，924cm^-1；ESI-MS(m/z)：539.2([M+Na]⁺)；ESI-HRMS(m/z)：Calcd for C₂₇H₃₆N₂O₆S([M+Na]⁺)：539.21863，Found：539.21926；化合物6b：[α]_D ²⁰＝-77.8°(c 0.87，CHCl₃)；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ 7.36-7.19(m，5H)，6.07(s，1H)，5.06(d，J＝9.0Hz，1H)，4.81-4.74(m，2H)，4.46-4.32(m，3H)，4.18-4.08(m，1H)，3.38(d，J＝13.3Hz，1H)，2.85-2.77(m，1H)，2.61-2.39(m，2H)，1.67-1.65(m，4H)，1.47(s，9H)，0.99-0.83(m，6H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)：δ 185.6，170.3，155.0，134.9，133.8，130.9，129.3，129.0，127.4，113.7，79.6，74.7，72.9，71.4，60.3，47.9，37.1，30.3，29.4，28.3，26.6，8.3，8.2；FT-IR(fim)：3452，3333，2925，1699，1498，1367，1240，1170，924cm^-1；ESI-MS(m/z)：539.2([M+Na]⁺)；ESI-HRMS(m/z)：Calcd for C₂₇H₃₆N₂O₆S([M+Na]⁺)：539.21863，Found：539.21798；

实施例7

0℃向化合物(-)-6b(83mg，0.16mmol)的二氯甲烷(1.9mL)溶液中加入DMAP(N，N-4-二甲氨基吡啶)(20mg，0.16mmol)、无水乙醇(28uL，0.48mmol)，室温搅拌24小时，乙酸乙酯稀释，水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，石油醚/乙醚＝15:1柱层析，分得化合物(+)-4(43mg，73％)；[α]_D ²⁰＝+24.3°(c1.08，CHCl₃)；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ 6.73(t，J＝3.1Hz，1H)，5.03(d，J＝9.4Hz，1H)，4.77-4.74(m，1H)，4.37-4.35(m，1H)，4.21(q，J＝7.2Hz，2H)，3.97-3.89(m，1H)，2.69(dd，J＝5.1，6.5Hz，1H)，2.23-2.12(m，1H)，1.64(q，J＝7.4Hz，2H)，1.56(q，J＝7.4Hz，2H)，1.47(s，9H)，1.30(t，J＝7.1Hz，3H)，0.91(t，J＝7.5Hz，3H)，0.81(t，J＝7.5Hz，3H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)：δ 166.24，155.45，134.77，130.21，113.56，79.70，74.67，72.97，60.90，48.09，30.11，29.62，28.36，25.42，14.15，8.39，7.94；FT-IR(fim)：3454，3360，2974，2937，1715，1506，1365，1242，1167，1068，1014，925,734cm^-1；ESI-MS(m/z)：392.1([M+Na]⁺)；ESI-HRMS(m/z)：Calcd forC₁₉H₃₁NO₆([M+Na]⁺)：392.2044，Found：392.2058.

实施例8

化合物4(142mg，0.38mmol)溶于甲醇(12mL)中，室温下加入对甲苯磺酸(15mg)，室温搅拌12小时后，体系加入碳酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相用水洗、氯化钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，石油醚/乙酸乙酯＝2:1柱层析，分到化合物(±)-8(92mg，80％)；化合物5：¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ 6.72(s，1H)，5.34(d，J＝7.5Hz，1H)，4.43(s，1H)，4.21(q，J＝7.2Hz，2H)，4.30(s，1H)，3.83(br，1H)，3.50(br，2H)，2.59(dd，J＝5.4，7.9Hz，1H)，2.36-2.27(m，1H)，1.45(s，9H)，1.29(t，J＝7.3Hz，3H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)：δ166.33，155.68，137.58，129.83，79.81，69.51，68.28，60.92，48.71，28.31，26.61，14.09；FT-IR(fim)：3390，2978，2931，1715，1519，1367，1249，1167，1017cm^-1；ESI-MS(m/z)：324.1([M+Na]⁺)；ESI-HRMS(m/z)：Calcd for C₁₄H₂₃NO₆([M+Na]⁺)：324.1418.Found：324.1424.

实施例9

化合物(+)-4(37mg，0.10mmol)溶于甲醇(3.3mL)中，室温下加入对甲苯磺酸(4mg)，室温搅拌12小时后，体系加入碳酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，有机相用水洗、氯化钠溶液洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，石油醚/乙酸乙酯＝2:1柱层析，分到化合物(-)-8(24mg，80％)；[α]_D ²⁰＝-35.7°(c0.97，CHCl₃)；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ 6.72(s，1H)，5.34(d，J＝7.5Hz，1H)，4.43(s，1H)，4.21(q，J＝7.2Hz，2H)，4.30(s，1H)，3.83(br，1H)，3.50(br，2H)，2.59(dd，J＝5.4，7.9Hz，1H)，2.36-2.27(m，1H)，1.45(s，9H)，1.29(t，，J＝7.3Hz，3H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)：δ 166.33，155.68，137.58，129.83，79.81，69.51，68.28，60.92，48.71，28.31，26.61，14.09；FT-IR(fim)：3390，2978，2931，1715，1519，1367，1249，1167，1017cm^-1；ESI-MS(m/z)：324.1([M+Na]⁺)；ESI-HRMS(m/z)：Calcd forC₁₄H₂₃NO₆([M+Na]⁺)：324.1418，Found：324.1424.

实施例10

氩气保护下化合物(±)-8(70mg，0.23mmol)溶于1.2mL四氢呋喃中，冰浴下加入三乙胺(128uL，0.92mmol)和二氯亚砜(50uL，0.69mmol)，恢复室温下搅拌3小时，加入20mL乙酸乙酯稀释，有机相水洗(5mL×2)，氯化钠溶液洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，石油醚/乙酸乙酯＝4:1柱层析，分到化合物(±)-9(80mg，100％)，¹HNMR显示产物为一对非对应异构体，直接投下步反应。

实施例11

氩气保护下化合物(±)-8(20mg，0.066mmol)溶于四氢呋喃(0.33mL)中，冰浴下加入三乙胺(37uL，0.27mmol)和二氯亚砜(15uL，0.20mmol)，恢复室温下搅拌3小时，加入10mL乙酸乙酯稀释，有机相水洗(5mL×2)，氯化钠溶液洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，石油醚/乙酸乙酯＝4:1柱层析，分到化合物9(22mg，96％)，¹HNMR显示产物为一对非对应异构体，直接投下步反应。

实施例12

室温下化合物(±)-9(80mg，0.23mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(2.3mL)中，室温下加入叠氮化钠(75mg，1.15mmol)，室温搅拌12小时，加入20mL乙酸乙酯稀释，有机相氯化铵溶液洗(5mL×2)，水洗(5mL×2)，氯化钠溶液洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，石油醚/乙酸乙酯＝4:1柱层析，分到化合物(±)-10(71mg，95％).¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ 6.76(s，1H)，4.85(br，1H)，4.22(q，J＝7.1，13.7Hz，2H)，4.13(d，J＝2.0Hz，1H)，4.01(s，1H)，3.91(d，J＝5.5Hz，1H)，2.75-2.67(m，1H)，2.51-2.45(m，1H)，1.46(s，9H)，1.31(t，J＝7.1Hz，3H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)：δ 165.6，156.9，132.5，131.5，80.6，71.9，61.2，60.8，48.6，28.5，28.2，14.1；FT-IR(fim)：3369，2979，2928，1718，1514，1367，1245，1168，1095，744cm^-1；ESI-MS(m/z)：349.1([M+Na]⁺)；ESI-HRMS(m/z)：Calcd for C₁₄H₂₂N₄O₅([M+Na]⁺)：349.14824，Found：349.14790.

实施例13

室温下化合物9(22mg，0.063mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(0.63mL)中，室温下加入叠氮化钠(20mg，0.30mmol)，室温搅拌12小时，加入10mL乙酸乙酯稀释，有机相氯化铵溶液洗，水洗，氯化钠溶液洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，石油醚/乙酸乙酯＝4:1柱层析，分到化合物(+)-10(15mg，73％)；[α]_D ²⁰＝+116.3°(c1.0，CHCl₃)；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ 6.76(s，1H)，4.85(br，1H)，4.22(q，J＝7.1，13.7Hz，2H)，4.13(d，J＝2.0Hz，1H)，4.01(s，1H)，3.91(d，J＝5.5Hz，1H)，2.75-2.67(m，1H)，2.51-2.45(m，1H)，1.46(s，9H)，1.31(t，J＝7.1Hz，3H)；¹³CNMR(100MHz，CDCl₃)：δ 165.6，156.9，132.5，131.5，80.6，71.9，61.2，60.8，48.6，28.5，28.2，14.1；FT-IR(fim)：3369，2979，2928，1718，1514，1367，1245，1168，1095，744cm^-1；ESI-MS(m/z)：349.1([M+Na]⁺)；ESI-HRMS(m/z)：Calcd forC₁₄H₂₂N₄O₅([M+Na]⁺)：349.14824，Found：349.14790.

实施例14

0℃向(±)-10(43mg，0.13mmol)的二氯甲烷(1.3mL)溶液中加入三乙胺(54uL，0.39mmol)、甲磺酰氯(20ul，0.26mmol)，0℃搅拌30分钟，加入乙酸乙酯稀释，水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，石油醚/乙酸乙酯＝4:1柱层析，分得化合物(±)-11(50mg，95％)；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ6.83(s，1H)，4.90(s，2H)，4.40(s，1H)，4.25(q，J＝7.0Hz，2H)，4.13-4.11(m，1H)，3.10(s，3H)，2.79(dd，J＝5.4，18.2Hz，1H)，2.45-2.25(m，1H)，1.46(s.9H)，1.33(t，J＝7.2Hz，3H)；ESI-MS(m/z)：427.1([M+Na]⁺).

实施例15

0℃向(+)-10(15mg，0.046mmol)的二氯甲烷(0.46mL)溶液中加入三乙胺(19uL，0.14mmol)、甲磺酰氯(7ul，0.09mmol)，0℃搅拌30分钟，加入乙酸乙酯稀释，水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，石油醚/乙酸乙酯＝4:1柱层析，分得化合物(+)-11(18mg，97％)；[α]_D ²⁰＝+154.3°(c0.8，CHCl₃)；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：δ 6.83(s，1H)，4.90(s，2H)，4.40(s，1H)，4.25(q，J＝7.0Hz，2H)，4.13-4.11(m，1H)，3.10(s，3H)，2.79(dd，J＝5.4，18.2Hz，1H)，2.45-2.25(m，1H)，1.46(s.9H)，1.33(t，J＝7.2Hz，3H)；ESI-MS(m/z)：427.1([M+Na]⁺).

Claims (6)

1.一种达菲中间体，其特征具有如下结构式：

或

其中，R¹＝C₂H₅、OC₂H₅、

或OH；

R²＝H；R³＝H；或者

或

Boc＝叔丁氧羰基。

2.如权利要求1达菲中间体，其特征具有如下结构式：

其中，Boc＝叔丁氧羰基，

3.如权利要求1中所达菲中间体的制备方法，其特征在于用下述(1)、(1)～(2)、(1)～(3)、(1)～(4)四种步骤分别制得：

(1)化合物

以有机酮作溶剂与对甲苯磺酸室温下搅拌5～12小时后得到化合物所述的

和对甲苯磺酸的摩尔比为1：0.05～0.2。

(2)在有机溶剂中，

与碱摩尔比1：0.1-5，在-78～10℃下反应1～3小时后得到

所述的碱是六甲基二硅氨基锂、六甲基二硅氨基钠、叔丁醇锂、二异丁基氨基锂或叔丁醇钾；

(3)对步骤(2)的

消旋体化合物进行拆分：在有机溶剂溶剂中，

和一价金属氢氧化物室温下搅拌0.5～3小时，得到化合物

(4)将和缩合剂[1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐]作用下，室温下搅拌1～3小时，得到

和

所述的

和缩合剂的摩尔比为1：1～1.5：1～1.5；或者每摩尔的

和

应得到的两个化合物在乙醇中分别再和等摩尔到二倍摩尔量的

室温下搅拌10～24小时，得到化合物和

4.如权利要求3中所述的达菲中间体的合成方法，其特征是步骤(2)中所述的反应温度是-50～0℃。

5.如权利要求3中所述的达菲中间体的合成方法，其特征是步骤(3)中所述的一价金属氢氧化物是氢氧化锂。

6.一种如权利要求1中所述的达菲中间体用于制备达菲药物。