CN101094689B

CN101094689B - 治疗肥胖以及肥胖相关疾病和病症的方法

Info

Publication number: CN101094689B
Application number: CN2005800456795A
Authority: CN
Inventors: J·罗思; C·M·安德森; A·贝伦
Original assignee: Amylin Pharmaceuticals LLC; AstraZeneca Pharmaceuticals LP
Current assignee: Amylin Pharmaceuticals LLC; AstraZeneca Pharmaceuticals LP
Priority date: 2004-11-01
Filing date: 2005-11-01
Publication date: 2013-06-12
Anticipated expiration: 2025-11-01
Also published as: EP2286837A2; DK1814590T4; WO2006052608A2; EP1814590B2; EP1814590A2; ZA200704239B; EP2286838A3; CN101094689A; EP2286840A2; ES2325773T3; CA2584806C; KR20070089683A; CA2584806A1; IL182764A0; US20090156474A1; DK1814590T3; EP2286838A2; WO2006052608A3; KR101123549B1; ATE427759T1

Abstract

本发明公开了治疗肥胖或肥胖相关病症的方法。这些方法包括指向前脑的抗肥胖剂和指向后脑的抗肥胖剂的组合使用。

Description

治疗肥胖以及肥胖相关疾病和病症的方法

与相关申请的交叉引用

本申请要求于2004年11月1日提交的第60/624,357号美国临时专利申请的利益，该临时申请的全部内容为所有目的引入本文。

发明领域

本发明涉及医学领域，且具体涉及健康、饮食和营养领域。本发明涉及抗肥胖剂的用途。

背景

肥胖及其相关病症是美国及全世界常见的且非常严重的公共健康问题。上半身肥胖已知是2型糖尿病最强的风险因素，且是心血管疾病的强风险因素。肥胖也是高血压、动脉粥样硬化、充血性心力衰竭、中风、胆囊疾病、骨关节炎、睡眠性呼吸暂停、比如多囊性卵巢综合征这样的生殖病症、乳癌、前列腺癌、和结肠癌、和全身麻醉并发症发病率提高的公认风险因素(参见，例如，Kopelman，Nature404：635-43(2000))。

肥胖减少寿命并带有上述共病(co-morbidities)以及比如感染、静脉曲张、黑色棘皮症、湿疹、运动耐受不良、胰岛素抵抗、高血压、高胆固醇血症、胆石病、矫形损伤和血栓栓塞性疾病这样的病症的严重风险(Rissanen等人，Br.Med.J.301：835-7(1990))。肥胖也是一组称作胰岛素抵抗综合征、或“X综合征”和代谢综合征的状况的风险因素。全世界的肥胖及相关病症的医疗费用是巨大的。

据信，肥胖的发病机理是多因素的。肥胖受试者中的一个问题是，营养物利用率与能量消耗不平衡，直至出现过量脂肪组织。中枢神经系统(CNS)控制能量平衡并协调合乎动物代谢状态的各种行为、自主和内分泌活动。控制这些活动的机制或系统广泛分布于前脑(例如，下丘脑)、后脑(例如，脑干)和脊髓。最终，将来自这些系统的代谢(也即，燃料利用率)和认知(也即，习得的偏好)信息进行整合，并开启(进餐获得和开始)或关闭(进餐终止)参与求欲形为(寻找食物)和完善行为(摄食)的决定。下丘脑被认为主要负责整合这些信号并随后向脑干发布指令。脑干核控制完善运动控制系统(the consummatory motor control system)元件(例如，负责咀嚼和吞咽的肌肉)。同样，这些CNS核在字面上被称为构成摄食行为的“最后共同途径”。

神经解剖学和药理学证据支持，能量和营养稳态的信号整合在前脑核中，且完善运动控制系统位于脑干核中，可能在环绕三叉神经运动核的区域中。下丘脑和脑干间有着广泛的相互连接。多种CNS-指向的抗肥胖治疗剂(例如，小分子和肽)主要聚焦在位于下丘脑中的前脑基底和/或位于脑干中的后脑基底上。

肥胖维持一种难以治疗的、慢性、基本上难以处理的代谢病症。因此，需要用于减少和/或维持受试者体重的新疗法。这样的疗法将对受试者健康产生深远的有益作用。

本文所引用的所有专利、专利申请和公开文本均全文引入本文作为参考。

概述

本发明提供用于控制、治疗和预防肥胖及肥胖相关状况、病症和疾病的方法和组合物。本发明的方法包括向受试者施用控制、治疗和预防肥胖及肥胖相关状况、病症和疾病有效量的至少两种抗肥胖剂。

在一方面，本发明提供降低受试者营养物利用率的方法。在另一方面，本发明提供减少受试者重量的方法。在一方面，本发明提供诱导化合物之中的协同抗肥胖作用的方法。

在一方面，本发明提供治疗受试者肥胖的方法，其包括外周施用治疗有效量的至少两种不同的抗肥胖剂，其中至少一种抗肥胖剂作用于前脑中参与食物摄入或体重调节的结构，且至少一种抗肥胖剂作用于后脑中参与食物摄入或体重调节的结构，其中当一种抗肥胖剂是PYY(3-36)、PYY(3-36)类似物或PYY(3-36)激动剂时，另一种抗肥胖剂不是淀粉状蛋白毒素、淀粉状蛋白毒素激动剂、淀粉状蛋白毒素类似物、CCK、CCK类似物或CCK激动剂，且其中当一种抗肥胖剂是毒蜥外泌肽、毒蜥外泌肽衍生物或毒蜥外泌肽激动剂时，另一种抗肥胖剂不是淀粉状蛋白毒素、淀粉状蛋白毒素激动剂、淀粉状蛋白毒素类似物。

在特定实施方案中，本发明的方法包括向受试者施用至少两种不同的抗肥胖剂，其中至少一种抗肥胖剂选自NPY1受体拮抗剂、NPY5受体拮抗剂、NPY2受体激动剂、NPY4受体激动剂、苗条蛋白、苗条蛋白衍生物、苗条蛋白激动剂、CNTF、CNTF激动剂/调节剂、CNTF衍生物、MCH1R拮抗剂、MCH2R拮抗剂、黑皮质素4激动剂、MC4受体激动剂、大麻素受体(CB-1)拮抗剂/逆激动剂、生长素释放肽拮抗剂、5HT2c激动剂、5-羟色胺重摄取抑制剂、5-羟色胺转运抑制剂、毒蜥外泌肽、毒蜥外泌肽衍生物、毒蜥外泌肽激动剂、GLP-1、GLP-1类似物、GLP-1激动剂、DPP-IV抑制剂、阿片样物质拮抗剂、食欲肽拮抗剂、代谢型谷氨酸亚型5受体拮抗剂、组胺3拮抗剂/逆激动剂、托吡酯、CCK、CCK类似物、CCK激动剂、淀粉状蛋白毒素、淀粉状蛋白毒素类似物和淀粉状蛋白毒素激动剂。在特定实施方案中，所施用的抗肥胖剂是苯丁胺、利莫那班(rimonabant)、西布茶明或普兰林肽。

在一种实施方案中，本发明提供治疗受试者肥胖的方法，其包括外周施用治疗有效量的至少两种抗肥胖剂，其中第一种抗肥胖剂选自NPY1受体拮抗剂、NPY5受体拮抗剂、NPY2受体激动剂、NPY4受体激动剂、苗条蛋白、苗条蛋白衍生物、苗条蛋白激动剂、CNTF、CNTF激动剂/调节剂、CNTF衍生物、MCH1R拮抗剂、MCH2R拮抗剂、黑皮质素4激动剂、MC4受体激动剂、大麻素受体(CB-1)拮抗剂/逆激动剂、生长素释放肽拮抗剂、5HT2c激动剂、5-羟色胺重摄取抑制剂、5-羟色胺转运抑制剂、毒蜥外泌肽、毒蜥外泌肽衍生物、毒蜥外泌肽激动剂、GLP-1、GLP-1类似物、GLP-1激动剂、DPP-IV抑制剂、阿片样物质拮抗剂、食欲肽拮抗剂、代谢型谷氨酸亚型5受体拮抗剂、组胺3拮抗剂/逆激动剂、托吡酯，其中第二种抗肥胖剂选自CCK、CCK类似物、CCK激动剂、淀粉状蛋白毒素、淀粉状蛋白毒素类似物和淀粉状蛋白毒素激动剂，其中当第一种抗肥胖剂不是PYY(3-36)、PYY(3-36)类似物或PYY(3-36)激动剂时，且当其中第一种抗肥胖剂是毒蜥外泌肽、毒蜥外泌肽衍生物或毒蜥外泌肽激动剂时，第二种抗肥胖剂不是淀粉状蛋白毒素、淀粉状蛋白毒素激动剂、淀粉状蛋白毒素类似物。

在一种实施方案中，本发明提供治疗肥胖的方法，其包括组合施用选自淀粉状蛋白毒素、淀粉状蛋白毒素类似物或淀粉状蛋白毒素激动剂的第一种抗肥胖剂和选自苗条蛋白、苗条蛋白衍生物或苗条蛋白激动剂的第二种抗肥胖剂，其中与单独施用任一试剂相比该试剂施用导致协同作用。

在特定实施方案中，本发明提供使受试者借助其减少体重至少10％、减少身体脂肪量、丧失异位脂肪、或其任意组合的方法。

在一些实施方案中，这些方法涉及患有肥胖、肥胖相关病症，肥胖相关疾病、肥胖相关状况、糖尿病、胰岛素抵抗综合征、脂肪营养不良(lypodystrpohy)、非酒精性脂肪性肝炎、心血管疾病、多囊性卵巢综合征、代谢综合征或者想减轻体重的受试者。

在一方面，抗肥胖剂的组合施用可以是同时、并行或者相继施用。

本发明还关注肥胖及肥胖相关状况、病症和疾病的治疗，以及抗肥胖剂和本发明组合物在制备用于治疗这些状况的药物中的用途。

附图简述

图1是表示施用苗条蛋白和淀粉状蛋白毒素对食物摄入的作用的图。

图2是表示施用苗条蛋白和淀粉状蛋白毒素对体重的作用的图。

图3是表示施用苗条蛋白和淀粉状蛋白毒素对身体组成的作用的图。

图4是表示施用苗条蛋白和淀粉状蛋白毒素对身体组成的作用的图。

图5是表示施用苗条蛋白和淀粉状蛋白毒素对能量消耗的作用的图。

图6A是表示单独或组合施用苗条蛋白(500μg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对体重的作用的图。图6B是表示单独或组合施用苗条蛋白(500μg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对身体脂肪的作用的图。图6C是表示单独或组合施用苗条蛋白(500μg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对身体蛋白的作用的图。

图7是表示单独施用苗条蛋白(500μg/kg/天)、单独施用对喂组(pair-fed)苗条蛋白(500μg/kg/天)和组合施用苗条蛋白(500μg/kg/天和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对体重的作用的图。

图8显示表示正常HSD和DIO倾向动物中的血清苗条蛋白浓度的图，所述动物接受载体、为淀粉状蛋白毒素处理组的对喂组或接受淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周。

图9A是表示在正常动物中施用载体或苗条蛋白(500μg/kg/天)对体重的作用的图。图9B是表示在DIO倾向动物中施用载体或苗条蛋白(500μg/kg/天)对体重的作用的图。

图10A是表示单独或组合施用西布茶明(3mg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对体重的作用的图。图6B是表示单独或组合施用西布茶明(3mg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对身体脂肪的作用的图。图6C是表示单独或组合施用西布茶明(3mg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对身体蛋白质的作用的图。

图11A是表示单独或组合施用苯丁胺(10mg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对体重的作用的图。图6B是表示单独或组合施用苯丁胺(10mg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对身体脂肪的作用的图。图6C是表示单独或组合施用苯丁胺(10mg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对身体蛋白质的作用的图。

图12A是表示单独或组合施用利莫那班(3mg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对体重的作用的图。图6B是表示单独或组合施用利莫那班(3mg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对身体脂肪的作用的图。图6C是表示单独或组合施用利莫那班(3mg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对身体蛋白质的作用的图。

图13是表示单独或与淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)组合施用一定剂量范围的CB-1拮抗剂对体重的作用的图。环形区域中的组合的时程表示在图14A和B中。

图14A是表示单独或组合施用CB-1拮抗剂(1mg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)对于体重的作用的图。图14B是表示单独或组合施用CB-1拮抗剂(3mg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)对于体重的作用的图。

图15A是表示单独或组合施用毒蜥外泌肽-4类似物(10μg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对于体重的作用的图。图6B是表示单独或组合施用毒蜥外泌肽-4类似物(10μg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对于身体脂肪的作用的图。图6C是表示单独或组合施用毒蜥外泌肽-4类似物(10μg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对于身体蛋白质的作用的图。

图16A是表示单独或组合施用PYY(3-36)(1mg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对于体重的作用的图。图6B是表示单独或组合施用PYY(3-36)(1mg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对于身体脂肪的作用的图。图6C是表示单独或组合施用PYY(3-36)(1mg/kg/天)和淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)两周对于身体蛋白质的作用的图。

详述

我们已经发现，组合施用作用于前脑中参与食物摄入和/或体重调节结构的抗肥胖剂和作用于后脑中参与食物摄入和/或体重调节结构的抗肥胖剂对于减少营养物利用率和治疗肥胖及肥胖相关状况、病症和疾病惊人地有效。还已发现，当以这种方式组合施用这样的抗肥胖剂时，抗肥胖剂对于降低接受者的营养物利用率比单独施用其中一种试剂更为有效。如本文所示，例如，抗肥胖剂组合可协同作用以降低营养物利用率，例如，以减轻体重、减少脂肪、减少食物摄入或这三种的任意组合。

前脑的特定区域(端脑和间脑衍生的脑成分)和后脑或脑干(包括中脑、脑桥和髓质)已被鉴定为参与控制能量平衡。参与食物摄入和/或体重调节的前脑结构或位于下丘脑中的核包括，例如，弓状核(ARC)、室旁核(PVN)、背内侧下丘脑(DMH)、腹内侧核(VMH)和下丘脑外侧核(LHA)。参与食物摄入和/或体重调节的后脑结构或位于脑干中的核包括，例如，孤束核(NST)、最后区(AP)和臂旁外侧核(IPBN)。控制完善运动控制系统元件的脑干核有可能受来自如NST、AP和IPBN这样的脑干区域的初级或二级投射(projections)的控制。值得注意的是，AP、NST和IPBN已全部显示出(共同地和独立地)具有其自身的综合能力。

多种CNS-指向的抗肥胖剂作用于位于下丘脑中的参与食物摄入和/或体重调节的前脑结构。此外，CNS-指向的抗肥胖剂作用于位于脑干中的参与食物摄入和/或体重调节的后脑结构。这样的抗肥胖剂在本文中有描述。参见例如表1。这样的试剂包括，例如，神经肽Y1(NPY1)受体拮抗剂、NPY5受体拮抗剂、苗条蛋白和苗条蛋白激动剂、睫状神经营养因子(CNTF)和CNTF激动剂、黑色素浓缩激素(MHC)和MCH拮抗剂、黑皮质素(melacortins)(MC)和MC激动剂、大麻素受体(CB-1)拮抗剂、5-羟色胺(5-HT)和5-HT激动剂、肽YY(PYY)和PYY激动剂、毒蜥外泌肽和毒蜥外泌肽激动剂、GLP-1和GLP-1激动剂、DPP-IV抑制剂、生长素释放肽和生长素释放肽拮抗剂、缩胆囊肽(CCK)和CCK激动剂、和淀粉状蛋白毒素和淀粉状蛋白毒素激动剂。

表1.单个抗肥胖靶及定位

在特定实施方案中，这些方法包括主要靶向比如ARC、PVN、VM和LH这样的下丘脑能量平衡中心的第一种化合物。在特定实施方案中，这些方法包括主要靶向比如NST、AP和IPBN这样的后脑能量平衡中心的第二种化合物。

在特定实施方案中，这些化合物是抗肥胖剂。在特定实施方案中，这些方法可包括使用一种或多种主要前脑作用抗肥胖剂。在其它实施方案中，这些方法可包括使用一种或多种主要后脑作用抗肥胖剂。示例性的抗肥胖剂包括NPY1受体拮抗剂、NPY5受体拮抗剂、苗条蛋白或苗条蛋白激动剂或类似物、CNTF(例如，AXOKINE

)、MCH拮抗剂、MC4激动剂、CB-1拮抗剂(例如，利莫那班)、5-HT2C激动剂、NPY2受体激动剂(例如、PYY(3-36)或PYY(3-36)激动剂)、毒蜥外泌肽或毒蜥外泌肽激动剂或类似物、GLP-1或GLP-1激动剂或类似物、DPP-IV抑制剂、生长素释放肽拮抗剂、CCK或CCK激动剂或类似物和淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素激动剂或类似物。

如本文所举例的，作为本发明抗肥胖剂的激动剂和拮抗剂包括，例如，比如肽、多肽和小分子试剂这样的分子。

本发明的一种或多种实施方案的细节在附图和以下说明书中给出。从说明书和附图以及从权利要求书来看，本发明的其它特征、目的和优点是显然的。

定义

“抗肥胖剂”是在施用后能够降低身体营养物利用率的化合物。“重量-诱导剂”是将提高身体营养物利用率的化合物。在一方面，重量诱导剂是抗肥胖剂的拮抗剂。

如本文所使用的，“作用于参与食物摄入和/或体重调节的前脑结构”的抗肥胖剂刺激或抑制前脑中特定区域的活性，例如，特定的核和/或神经元回路。该前脑刺激或抑制导致身体营养物利用率下降。“作用于参与食物摄入和/或体重调节的后脑结构”的抗肥胖剂刺激或抑制后脑中特定区域的活性，例如，特定的核和/或神经元回路。该后脑刺激或抑制导致身体营养物利用率下降。

“降低的营养物利用率”意欲包括任何方法，通过所述方法身体降低可以获得的作为脂肪储存的营养物。换言之，可以通过包括但不限于，降低食欲、提高饱满感、影响食物选择/味觉厌恶、提高代谢、和/或降低或抑制食物吸收的方法来降低营养物利用率。可受影响的示例性机制包括延迟胃排空或减少食物在肠中的吸收。

“提高的营养物利用率”意欲包括任何方法，通过所述方法身体提高可获得的作为脂肪储存的营养物。换言之，可以通过包括，但不限于，增进食欲、降低饱满感、影响食物选择、减少味觉厌恶、降低代谢和/或提高食物吸收的方法来提高营养物利用率。可受影响的示例性机制包括减弱胃运动不足或提高食物在肠中的吸收。

尽管“肥胖”通常被定义为体重指数(BMI)大于30，但为本公开内容的目的，任何需要或者希望减轻体重或预防体重增加的受试者，包括那些体重指数低于30的受试者，都包括在“肥胖”范围内。因此，BMI低于30和25及以上(视为超重)或低于25的受试者也包括在本发明的受试者内。病态肥胖指BMI为40或更高。

关于降低营养物利用率的方法，如本文所使用的，“需要其的受试者”包括超重或肥胖或病态肥胖、或渴望减轻体重的受试者。此外，胰岛素抵抗、葡萄糖耐受不良或患有任何形式糖尿病(例如，1型、2型或妊娠糖尿病)的受试者可从降低营养物利用率的这些方法中受益。

关于提高营养物利用率的方法，如本文所使用的，“需要其的受试者”包括体重不足或希望增重的受试者。

“受试者”意欲包括意欲包括任何动物，包括人，灵长类动物，和其它哺乳动物，其包括大鼠，小鼠，比如猫、狗这样的宠物，比如马、牛、绵羊和山羊这样的家畜；以及鸡，火鸡，以及其它任何体重或改变身体组成有可能成问题的动物。

“代谢率”意指每单位时间释放/消耗的能量的量。每单位时间的代谢可通过食物消耗、作为热释放的能量、或代谢过程中所使用的氧来估计。当人们想要丧失体重时通常需要具有较高的代谢率。例如，具有较高代谢率的人完成一项活动可能比具有低代谢率的人完成该活动能够消耗更多的能量(例如，身体燃烧更多的热量)。

如本文所使用的，“无脂肪组织”或“瘦体重”指肌肉和骨。瘦体重不必然指无脂肪量。瘦体重包含中枢神经系统(脑和脊髓)、骨髓和内部器官内的小脂肪百分数(约为3％)。瘦体重以密度测量。测定脂肪量和无脂肪组织的方法包括，但不限于，水下称重、空气置换体积描记器、x-射线、DEXA扫描、MRI和CT扫描。在一种实施方案中，采用水下称重来测量脂肪量和无脂肪组织。

“脂肪分布”意指身体内脂肪沉积的位置。这样的脂肪沉积位置包括，例如，皮下、内脏和异位脂肪库(depot)。

“皮下脂肪”意指紧靠在皮肤表面下的脂质沉积。受试者的皮下脂肪量可采用任何一种可采用的测量皮下脂肪的方法来测量。测量皮下脂肪的方法是本领域已知的，例如，在第6,530,886号美国专利中描述的那些，该专利全文引入本文作为参考。

“内脏脂肪”意指作为腹内脂肪组织的脂肪沉积。内脏脂肪围绕着重要器官，且可以被肝脏代谢从以产生血胆固醇。内脏脂肪已与提高的比如多囊性卵巢综合征、代谢综合征和心血管疾病这样的状况的风险相关。

“异位脂肪储存”意指在构成瘦体重的组织和器官(例如，骨骼肌、心脏、肝、胰、肾、血管)内或其周围的脂质沉积。总的来说，异位脂肪储存是脂质在身体的经典脂肪组织库之外的累积。

如本文所使用的，以及本领域通常理解的，“治疗”是获得有益或所需结果(包括临床结果)的方法。“治疗”或“减轻”疾病、病症或状况意指，与未治疗该病症相比，状况、病症或疾病状态的程度和/或不期望的临床表现减轻和/或进展的时程被延缓或者延长。例如，在治疗肥胖、减轻体重中，例如，至少5％体重减轻是所需治疗结果的一个例子。为本发明目的，有益或所需的临床结果包括，但不限于，一种或多种症状的减轻或改善，疾病程度减低、稳定的(也即，未恶化)疾病状态、延迟或延缓疾病进展、改善或减轻疾病状态以及免除(无论是部分还是总体)，无论是可检测的还是不可检测的。“治疗”还可意指与如果不接受治疗所预期的存活相比延长存活。而且，治疗不必定通过施用一剂来发生，而是常常在施用一系列剂次后发生的。因此，治疗有效量，足以减轻的量，或足以治疗疾病、病症或状况的量可以以一次或多次施用来施用。

如本文所使用的，术语“治疗有效量”意指组合物中的活性化合物的量，该量将在组织、系统、受试者或人中引发研究人员、兽医、医生或其它临床医生所寻求的生物学或医学应答，所述应答包括所治疗病症的症状的减轻。本发明的新治疗方法针对本领域技术人员已知的病症。

如本文所使用的，术语“预防有效量”意指组合物中的活性化合物的量，该量将在组织、系统、受试者或人中引发研究人员、兽医、医生或其它临床医生所寻求的生物学或医学应答以预防有肥胖或肥胖相关病症、状况或疾病风险的受试者发作肥胖或肥胖相关病症、状况或疾病。

如本文所使用的，单数形式“一种(a)”、“一种(an)”和“该(the)”包括复数含意，除非另行指明或者在上下文中是清楚的。例如，“一种”淀粉状蛋白毒素激动剂可包括一种或多种淀粉状蛋白毒素激动剂，这在上下文中就是清楚的。

如本文所使用的，“类似物”指其序列衍生自基础参照肽例如，淀粉状蛋白毒素和降钙素的序列的肽，并包括参照氨基酸系列的插入、取代、延伸和/或缺失，例如与基础肽具有至少50或55％氨基酸序列同一性，在其它情况下，例如，与基础肽具有至少70％、80％、90％或95％氨基酸序列同一性。这样的类似物可包含保守或非保守氨基酸取代(包括非天然氨基酸以及L和D形式)。类似物包括具有激动剂的化合物和具有拮抗剂活性的化合物。如本文所定义的类似物包括衍生物。

“衍生物”定义为，如上述的，在其一个或多个氨基酸侧基、α-碳原子、末端氨基或末端羧基上带有化学修饰的参照肽或类似物。化学修饰包括，但不限于，添加化学部分(moiety)、生成新键和除去化学部分。在氨基酸侧基上的修饰包括，不限于，赖氨酸ε-氨基的酰基化，精氨酸、组氨酸或赖氨酸的N-烷基化，谷氨酸或天冬氨酸羧酸基团的烷基化，和谷氨酰胺或天冬酰胺的脱酰胺化。末端氨基的修饰包括，不限于，脱氨，N-低级烷基，N-二-低级烷基，和N-酰基修饰。末端氨基的修饰包括，不限于，脱氨，N-低级烷基，N-二-低级烷基，和N-酰基修饰，比如烷基酰基、分支的烷基酰基、烷基芳基-酰基。末端羧基的修饰包括，不限于，酰胺，低级烷基酰胺，二烷基酰胺，芳基酰胺，烷基芳基酰胺和低级烷基酯修饰。低级烷基是C1-C4烷基。此外，一种或多种侧基，或末端基团，可以用具备普通技术的合成化学家已知的保护基团进行保护。氨基酸的α-碳可以是单或二甲基化的。

通常，关于氨基酸序列，术语“修饰”包括单独的取代、插入、延长、缺失和衍生或组合。本发明的多肽可包括对“非必需”氨基酸残基的一种或多种修饰。在本发明的上下文中，“非必需”氨基酸残基是在新氨基酸序列中可以被改变，例如，缺失或取代，但不取消或大大降低该多肽(例如，类似物多肽)活性(例如，激动剂活性)的残基。本发明的多肽可包括1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多个非必需氨基酸残基的缺失。本发明的多肽可包括至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多个氨基酸的添加而不取消或大大降低该多肽的活性。

取代包括保守氨基酸取代。“保守氨基酸取代”是氨基酸残基被具有相似侧链、或物化特性(例如，静电、氢键、等排的、疏水特性)的氨基酸残基取代的一种取代。氨基酸可以是天然存在的或非天然的。具有相似侧链的氨基酸残基家族是本领域已知的。这些家族包括带有碱性侧链(例如，赖氨酸、精氨酸、组氨酸)、酸性侧链(例如，天冬氨酸、谷氨酸)、非荷电极性侧链(例如，甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸)、非极性侧链(例如，丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸)、β-分支的侧链(例如，苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸)和芳族侧链(例如，酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、组氨酸)的氨基酸。取代还可包括非保守改变。

“氨基酸”或“氨基酸残基”意指天然氨基酸、非天然氨基酸和经过修饰的氨基酸。除非与所指相反，对氨基酸的任何提及，通常所指或者特别用名称提及，如果它们的结构允许这样的立体异构体形式，均包括对D和L立体异构体的提及。天然氨基酸包括丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)、天冬酰胺(Asn)、天冬氨酸(Asp)、半胱氨酸(Cys)、谷氨酰胺(Gin)、谷氨酸(Giu)、甘氨酸(Gly)、组氨酸(His)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、赖氨酸(Lys)、甲硫氨酸(Met)、苯丙氨酸(Phe)、脯氨酸(Pro)、丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和缬氨酸(Val)。非天然氨基酸包括，但不限于高赖氨酸、高精氨酸、高丝氨酸、氮杂环丁烷羧酸、2-氨基己二酸、3-氨基己二酸、β-丙氨酸、氨基丙酸、2-氨基丁酸、4-氨基丁酸、6-氨基己酸、2-氨基庚酸、2-氨基异丁酸、3-氨基异丁酸、2-氨基庚二酸、叔丁基甘氨酸、2，4-二氨基异丁酸、锁链素、2，2’-二氨基庚二酸、2，3-二氨基丙酸、N-乙基甘氨酸、N-乙基天冬酰胺、高脯氨酸、羟赖氨酸、别羟赖氨酸、3-羟脯氨酸、4-羟脯氨酸、异锁链素、别异亮氨酸、N-甲基丙氨酸、N-甲基甘氨酸、N-甲基异亮氨酸、N-甲基戊基甘氨酸、N-甲基缬氨酸、naphthalanine、正缬氨酸、正亮氨酸、鸟氨酸、戊基甘氨酸、六氢吡啶羧酸和硫代脯氨酸。其它的非天然氨基酸包括经过修饰的氨基酸残基，它们被可逆或不可逆地化学阻断，或其N-末端氨基或侧链基团经过了化学修饰，比如例如，N-甲基化的D和L氨基酸或残基——其中侧链官能团被修饰成为另一种官能团。例如，经过修饰的氨基酸包括甲硫氨酸亚砜；甲硫氨酸砜；天冬氨酸-(β-甲酯)，一种经过修饰的天冬氨酸氨基酸；N-乙基甘氨酸，一种经过修饰的甘氨酸氨基酸；或丙氨酸氨甲酰，一种经过修饰的丙氨酸氨基酸。其它可以掺入的残基描述于Sandberg等人，J.Med.Chem.41：2481-91，1998中。

应当注意，在整个申请中，马库什基团中写出了替代物，例如，各氨基酸位置包含超过一个的可能氨基酸。特别预期，马库什基团中的每个成员应当分别考虑，由此构成本发明的另一种实施方案，并且马库什基团不能作为单个单位来解读。

本发明的方法

在总体方面，本发明提供通过组合施用抗肥胖剂来降低营养物利用率的方法。因此，本发明提供治疗将受益于营养物利用率降低的肥胖及肥胖相关疾病、病症和/或状况的方法。假设组合施用时有效性提高，则本发明的方法可允许组合施用与比例如单一疗法中单独使用试剂相比更低剂量的一种或多种抗肥胖剂。

本发明的方法提供抗肥胖剂的组合施用。试剂的“组合”施用应被理解为意指向需要接受治疗的受试者提供每一试剂。试剂的施用可作为包含所有想要的抗肥胖剂的单一药物剂量制剂形式发生或者用每一想要的试剂以其各自的剂量制剂分别发生。

在采用分离的剂量制剂的情况下，单独的抗肥胖剂可基本同时，也即并行施用，或者在单独地交错的时间，也即，在施用该方法的另一种抗肥胖剂之前或之后顺序施用。在一些实施方案中，组合施用包括在重叠的时间间隔期间施用分离的剂量制剂。例如，第1至30天施用抗肥胖剂1，且第20至50天施用抗肥胖剂2。在其它实施方案中，组合施用包括顺序、非重叠时间间隔地施用分离的剂量制剂。例如，第1至30天施用抗肥胖剂1，且第35至50天施用抗肥胖剂2。本发明因此被理解为包括所有这样的在整个治疗过程中同时进行的、交替的或者完全分开的治疗方案，且术语“施用”和“组合施用”作相应解释。

在一种实施方案中，本发明提供通过组合施用至少一种作用于参与食物摄入和/或体重调节的前脑结构的抗肥胖剂和至少一种作用于参与食物摄入和/或体重调节的后脑结构的抗肥胖剂来降低营养物利用率的方法。在一些情况下，本发明的方法提高或增强当单独使用时(单一疗法)具有有限效力(如果有的话)的抗肥胖剂的效力。在这样的情况下，本发明的方法通过，例如，通过持续使用或提高效能从而预防或延迟效力丧失来提高或增强抗肥胖剂的效力。本发明的方法可允许施用在组合中使用的比任一试剂单独使用时更低剂量的一或多种抗肥胖剂。

在一方面，本发明的方法提供所施用试剂之中的协同抗肥胖作用。因此，在一种实施方案中，组合施用抗肥胖剂产生，例如，营养物利用率下降、体重下降、食物摄入减少、代谢提高这样的作用，这些作用大于单独施用(单一疗法)抗肥胖剂的结果的组合。

在本发明的另一方面，提供了降低或消除受试者对抗肥胖剂抗性的方法，从而使得施用该试剂时，它将能够引发抗肥胖应答(例如，降低营养物利用率，降低重量，降低脂肪量)。例如，且无意于受此以及任何其它理论的束缚，已形成这样的理论：苗条蛋白抗性可能是由于在肥胖受试者体内发现的高水平苗条蛋白(也即，该身体已对苗条蛋白脱敏)而导致的。因此，本分明的一种方法包括施用除苗条蛋白外的抗肥胖剂(例如，淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素激动剂)以减轻受试者的体重从而降低或除去苗条蛋白抗性。一旦已达到这一效果，就再将苗条蛋白单独或与抗肥胖剂(例如，淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素激动剂)组合施用以实现进一步的抗肥胖作用。还预期了其它减轻体重以改善苗条蛋白抗性的方法，比如饮食、运动、其它饮食药物、以及外科手术设备。

在一种实施方案中，本发明涉及，在施用作用于参与食物摄入和/或体重调节的前脑结构的第二种抗肥胖剂之前，送递作用于参与食物摄入和/或体重调节的后脑结构的第一种抗肥胖剂以使身体做好准备。在特定实施方案中，在施用第二种试剂前施用第一种试剂数日、数周或者甚至数月。在这一点上，第二种试剂可以单独施用或者与第一种试剂组合施用。在特定实施方案中，第一种抗肥胖剂是淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素激动剂，且第二种试剂是苗条蛋白或苗条蛋白激动剂。在一些实施方案中，施用抗肥胖剂之前的受试者的血清苗条蛋白浓度大于10ng/ml，在其它实施方案中，它大于20ng/ml。

在一种实施方案中，在施用苗条蛋白或苗条蛋白激动剂之前向受试者施用淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素激动剂至少1天、2天、3天、5天、7天、10天、14天、21天、28天或更多。在一些实施方案中，在施用苗条蛋白或苗条蛋白激动剂之前，向受试者施用淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素激动剂直至受试者的血清苗条蛋白浓度为约4ng/ml、小于4ng/ml、小于2ng/ml、小于1ng/ml或小于约0.5ng/ml。在一些实施方案中，以替代疗法的量(a replacementtherapy amount)施用苗条蛋白或苗条蛋白激动剂以实现接近血浆中的苗条蛋白生理浓度。

在本发明的另一方面，提供了降低发展为代谢病症的风险的方法，该方法包括向受试者施用有效量的抗肥胖剂的组合以减轻受试者体重。

在本发明的一些实施方案中，本发明的方法用于提高受试者的代谢率，降低受试者代谢率的降低，或者保持受试者的代谢率。在一种实施方案中，代谢率可涉及相比于无脂肪身体组织更优先使用身体的脂肪作为能量来源。在一方面，瘦体重在组合施用抗肥胖剂后不降低。在另一方面，在组合施用抗肥胖剂后，瘦体重的减轻得到减少或者阻止。仍在另一方面，在组合施用抗肥胖剂后瘦体重得到提高。这样的优先使用脂肪作为能量来源可以通过比较脂肪组织与无脂肪身体组织的量来确定，并通过在治疗时间段开始和结束时测量总体重和脂肪含量来确认。代谢率的提高是，与在未施用抗肥胖剂组合的基本相似或相同条件下的另一时间段内受试者的热量或其它能量来源的利用水平相比，在所述时间段内受试者的热量或另一种能量来源的更高水平的利用。在一种实施方案中，受试者的代谢率提高至少约5％，在其它实施方案中，受试者的代谢率提高至少约10％、15％、20％、25％、30％或35％，与在未施用抗肥胖剂组合的基本相似或相同条件下的另一时间段内受试者的热量或其它能量来源的利用水平相比。代谢率的提高可利用例如呼吸热量计来测量。该实施方案中所使用的有效量的抗肥胖剂是，与未接受试剂或仅接受其中一种试剂的受试者相比，各试剂组合施用时有效提高受试者代谢率的量。

在另一种实施方案中，提供了减少受试者代谢率降低的方法。这样的代谢率降低可以是任何导致代谢率降低的条件或营养或身体状况的结果，例如，由于降低的热量饮食、受限制的饮食或体重丧失。受限制的饮食包括在一个饮食允许的食物类型或者是食物量或者是二者的容许量或禁止或两者，而并非必定基于热量。例如，比如在个人饮食中，身体根据较低的热量摄入用降低的代谢率来补偿。本质上，身体下调对食物的需求，由此以更少的食物来维持生存。随着节食的继续，热量摄入的阈值会降低。当节食结束时，在食用正常饮食时，个体通常会由于降低的热量摄入阈值和较低的基线代谢率而增加体重(NIH Technology Assessment Conference Panel(1992)Ann.Intern.Med.116：942-949；Wadden(1993)Ann.Intern.Med.119：688-693)。在一方面，提供了降低受试者代谢率损失的方法，其中代谢率损失是降低的热量饮食或体重减少的结果。通过使用这样的方法，受试者的代谢率减少降低了至少约10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或95％。对于这样的方法，需要在启动了引导代谢率损失或降低的条件或营养或身体状况时施用抗肥胖剂组合。然而，还预期可以在启动条件或营养或身体状况之前施用这些试剂。在一种情况中，用呼吸热量计来测量代谢率。如同本实施方案中所使用的抗肥胖剂的有效量是，在组合施用时每一试剂能够有效降低受试者代谢率减少的量。

在另一方面，提供了降低代谢平台的方法，所述方法包括向受试者组合施用有效量的抗肥胖剂。在一种实施方案中，受试者正在减轻体重，或者已经减轻了体重，例如，由于降低的热量饮食、增强运动或其组合。“代谢平台”意指稳定代谢率的时间间隔，该过程中身体进行调节以适应热量或能量输入变化。热量输入或消耗可以是，例如，降低的热量饮食或增强的身体活动的结果。这样的平台可以在，例如，重量减轻方案过程中重量减轻减缓或停止时进行观察。在一种实施方案中，与其他方面相同的不施用抗肥胖剂组合的受试者在基本类似或相同的条件下在相同的时间段中的代谢平台持续时间相比，本发明的方法降低了受试者的代谢平台持续时间。在另一种实施方案中，与其他方面相同的不施用抗肥胖剂组合的受试者在基本类似或相同的条件下在相同的时间段中的代谢平台频率相比，本发明的方法降低了受试者的代谢平台频率。在又一种实施方案中，与其他方面相同的不施用抗肥胖剂组合的受试者在基本类似或相同的条件下在相同的时间段中的代谢平台开始相比，本发明的方法延迟了受试者的代谢平台开始。在一种实施方案中，代谢平台通过对减少的体重减轻或者无体重减轻的时间段进行作图来鉴定。在一种实施方案中，降低了至少一种代谢平台。在其它实施方案中，降低了至少两、三、四、五、六、七、八、九或十种代谢平台。在另一方面，与在相同或类似条件下未施用抗肥胖剂组合的受试者相比，代谢平台被延迟一天。在其他方面，受试者的代谢平台被延迟2天、3天、4天、5天、6天、1周、10天、2周或3周。

在另一种实施方案中，提供了保持受试者代谢率的方法。在一种实施方案中，受试者可能面临例如由于降低的热量饮食、受限制的饮食或预计重量减轻的起始而导致的损失代谢率的风险。代谢率的保持是，与在基本相似或相同的条件下，在相同时间段内其他方面相同的未施用抗肥胖剂组合的受试者对热量或其他热量来源的利用水平相比，受试者在所述时间段内对热量或另一种能量来源的利用水平的维持。在一方面，代谢率维持在在导致代谢率降低这一事件起始之前的受试者代谢率的15％内。在其他方面，代谢率维持在受试者代谢率的10％以内、7％以内、5％以内、3％或更低以内。在一方面，在热量降低的饮食、受限制的饮食或运动方案开始时施用抗肥胖剂组合。

可以采用任何可以用于测定这样的速率方法来估定代谢率，例如通过使用呼吸热量计。这样的用于测定代谢率的方法和装置是本领于已知的，且描述于，例如，第4,572,208、4,856,531、6,468,222、6,616,615、6,013,009和6,475,158号美国专利中。作为选择，动物的代谢率可通过测量动物在限定饮食阶段后所分解代谢的无脂肪组织对脂肪组织的量来估定。因此，总体重和脂肪含量可以在限定饮食阶段结束时测量。在大鼠中，常用于测定总身体脂肪的方法是用外科手术方法取出腹膜后脂肪垫，位于后腹壁以及后壁腹膜之间区域后腹膜(retroperitoneum)中的脂肪体并称重。该垫的重量被认为与动物的百分比身体脂肪直接相关。由于大鼠的体重与身体脂肪间的关系是线性的，所以肥胖动物具有相应较高的百分比身体脂肪以及腹膜后脂肪垫重量。

在本发明的另一方面，提供了一种通过降低受试者代谢率来降低脂肪量的方法，其中的方法包括施用抗肥胖剂组合，所述组合的量能够有效地通过提高受试者的代谢率来降低脂肪量。脂肪量可以总体重的百分数表示。在一些方面，脂肪量在治疗过程中被减少至少1％、至少5％、至少10％、至少15％、至少20％或至少25％。在一方面，受试者的无脂肪组织在治疗过程中不降低。在另一方面，受试者的无脂肪组织在治疗过程中得以保持或者提高。在另一方面，受试者正接受降低的热量饮食或者受限制的饮食。“降低的热量饮食”意指，与相同受试者的正常饮食相比，受试者每天摄食更少的热量。在一种情况中，受试者每天少消耗至少50卡路里。在其它情况中，受试者每天少消耗至少100、150、200、250、300、400、500、600、700、800、900或1000卡路里。

在本发明的一种实施方案中，提供了一种改变受试者中脂肪分布的方法，该方法包括施用抗肥胖剂组合，所述组合的量能够有效地改变受试者的脂肪分布。在一方面，这一改变源于受试者的内脏或异位脂肪或者这两者的代谢的提高。在一些实施方案中，该方法涉及内脏或异位脂肪或二者的代谢率比皮下脂肪代谢率高至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％或50％。在一方面，这些方法导致令人满意的脂肪分布。在一种实施方案中，令人满意的脂肪分布是皮下脂肪与内脏脂肪、异位脂肪或这两者的比率提高。在一方面，该方法涉及由，例如，肌细胞量的提高导致的瘦体重的提高。

在另一种实施方案中，提供了降低受试者皮下脂肪量的方法，其中所述方法包括向有此需求的受试者施用抗肥胖剂组合，所述组合的量能够有效降低受试者的皮下脂肪的量。在一种情况中，受试者的皮下脂肪量减少至少约5％。在其它情况下，与施用抗肥胖剂之前的受试者相比，皮下脂肪量减少至少约10％、15％、20％、25％、30％40％或50％。

本文中所描述的方法可用于减少受试者的内脏脂肪量。在一种情况下，受试者的内脏脂肪量减少至少约5％。在其它情况下，与施用抗肥胖剂组合之前的受试者相比，受试者的内脏脂肪减少至少约10％、15％、20％、25％、30％40％或50％。内脏脂肪可通过任何可获得的测定受试者内脏脂肪量的方法来测量。这样的方法包括，例如，借助CT扫描和MRI的腹部体层摄影术。例如，第6,864,415、6,850,797和6,487,445号美国专利中描述了测定内脏脂肪的其他方法。

在一种实施方案中，提供了预防异位脂肪累积或减少受试者中异位脂肪量的方法，其中所述方法包括向有此需求的受试者施用抗肥胖剂组合，所述组合的量能够有效预防异位脂肪累积或减少受试者中的异位脂肪的量。在一种情况下，与施用抗肥胖剂组合之前的受试者相比，受试者的异位脂肪量减少至少约至少约5％。在其它情况下，受试者的异位脂肪量减少至少约10％或至少约15％、20％、25％、30％40％或50％。作为选择，与受试者的皮下脂肪相比，异位脂肪的量按比例减少5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％。可以用可获得的任何测量异位脂肪的方法来测量受试者中的异位脂肪。

在另一种实施方案中，提供了在受试者中产生更令人满意的脂肪分布的方法，所述方法包括向受试者施用抗肥胖剂组合，所述组合的量能有效地产生令人满意的脂肪分布。在一种实施方案中，抗肥胖剂组合的施用减少受试者中内脏脂肪或异位脂肪或这二者的量。例如，抗肥胖剂组合的施用，其中至少一种作用于前脑中参与食物摄入或体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂与至少一种作用于后脑中参与食物摄入或体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂组合施用。在一种实施方案中，与减少皮下脂肪相比，该方法优选减少内脏或异位脂肪或这二者组合的量。这样的方法导致产生更高的皮下脂肪与内脏脂肪或异位脂肪的比率。这样的提高的比率可导致心血管疾病，多囊性卵巢综合征，代谢综合征或其任意组合的发展的风险降低。在一种实施方案中，异位或内脏脂肪比皮下脂肪的代谢率高5％。在其它实施方案中，异位或内脏脂肪比皮下脂肪的代谢率高至少10％、15％、20％、25％、30％50％、60％、70％、80％、90％或100％。

在另一方面，本发明的方法包括使用与糖皮质类固醇组合施用的治疗有效量的抗肥胖剂组合。糖皮质类固醇有提高脂肪量和减少无脂肪组织的副作用。因此预期，抗肥胖剂组合可在糖皮质类固醇使用有益的条件下与糖皮质类固醇联合施用。

还提供了降低病态肥胖受试者体重的方法，该方法通过首先将受试者体重降低至病态肥胖以下的水平，再向受试者施用有效量的抗肥胖剂组合以进一步降低受试者体重来实现。将受试者体重降低至病态肥胖以下的方法包括，减少热量摄入、增强身体活动、药物治疗、比如胃旁路外科手术这样的肥胖症治疗外科手术、或前述方法的任意组合。在一方面，施用抗肥胖剂组合可进一步减轻受试者体重。在另一种实施方案中，提供了降低体重指数为40或更低的受试者的体重指数的方法，其通过施用有效量的抗肥胖剂组合来进一步降低受试者的体重来实现。

减轻体重，意指，受试者在治疗过程中丧失他/她的部分总体重，无论该治疗过程是数天、数周、数月还是数年。作为选择，减轻体重可被定义为脂肪量与无脂肪组织之比的降低(换言之，受试者损失了脂肪量，但维持或增加了无脂肪组织，并不必定对应总体重的损失)。该实施方案中组合施用的有效量的抗肥胖剂是在治疗过程中有效降低受试者体重的量，或作为选择是在治疗过程中有效降低受试者的脂肪量百分数的量。在特定实施方案中，治疗过程中受试者的体重减少了至少约1％、至少约5％、至少约10％、至少约15％或至少约20％。作为选择，在治疗过程中，受试者的脂肪量百分数降低了至少1％、至少5％、至少10％、至少15％、至少20％或至少25％。

在特定实施方案中，降低受试者营养物利用率，例如，降低受试者体重的方法包括一日内向受试者施用一次或多次有效量的单次给药量(bolus dose)抗肥胖剂。单次给药量是间歇式的药物剂量(与连续输注相反)。受试者可每日施用一个或多个单次给药量。单次给药量可以是相同的，无论其什么时候向受试者施用，或者可进行调节从而使得在一天当中的特定次与其他次相比施用更大的单次给药量。以特定的制剂施用试剂，例如持续释放制剂，单次给药量可施用得不那么频繁，例如，每三天一次、每周一次、每月两次、每月一次。此外，单次给药量间的时间优选足够长以允许所施用的在之前的单次给药量中的药物从受试者血流中清除。

在其它实施方案中，降低受试者营养物利用率，例如，降低受试者体重的方法包括向受试者施用有效量的连续给药的抗肥胖剂。连续给药，欲意指药物通过，例如静脉注射或经皮贴剂的连续输注。作为选择，连续给药可以以受控释放胶囊或片剂的形式经口施用，所述胶囊或片剂在一段时间内将药物释放入受试者的系统。当以连续给药施用时，药物在约1小时的时间段内释放，在一些情况下，药物在约2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、18或24小时的时间段内释放。

“组合施用”意指，抗肥胖剂以单次施用、作为分离剂次同时施用或顺序施用。顺序施用指，在施用一种抗肥胖剂之前或之后施用抗肥胖剂之一。在一种实施方案中，第一种抗肥胖剂在至少一种其他抗肥胖剂之前或之后约30分钟施用，在其它实施方案中在至少一种其他抗肥胖剂之前或之后约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12小时施用。任一种所施用的抗肥胖剂均可以以单次给药量或连续给药施用。

本发明还涉及提高受试者产热的方法，该方法包括向有此需求的受试者组合施用有效量的至少一种作用于前脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂和至少一种作用于后脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂。产热是通过提高身体代谢率来将热量以热的形式释放的过程。产热由包括补充、营养、运动和暴露于冷中在内的机制激活。

本发明还涉及提高受试者氧化代谢的方法，该方法包括向有此需要的受试者组合施用有效量的至少一种作用于前脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂和至少一种作用于后脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂。氧化代谢是利用氧从碳水化合物(糖)产生能量的过程。

在另一方面，提供了诱导受试者丰满感的方法，其中所述方法包括向所述受试者组合施用有效量的至少一种作用于前脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂和至少一种作用于后脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂。

在另一方面，提供了控制受试者饥饿的方法，其中所述方法包括向所述受试者组合施用有效量的至少一种作用于前脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂和至少一种作用于后脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂。

在又一方面，提供了延长受试者饱满感的方法，其中所述方法包括向所述受试者组合施用有效量的至少一种作用于前脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂和至少一种作用于后脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂。

在又一方面，提供了通过减少膳食量来降低热量摄入的方法，其中所述方法包括向所述受试者组合施用有效量的至少一种作用于前脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂和至少一种作用于后脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂。

在另一方面，提供了控制食物摄入的方法，其中所述方法包括向所述受试者组合施用有效量的至少一种作用于前脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂和至少一种作用于后脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂。

在又一方面，提供了保证或帮助与降低热量的或受限制的饮食一致的方法，其中所述方法包括向所述受试者组合施用有效量的至少一种作用于前脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂和至少一种作用于后脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂。

在又一方面，提供了调节受试者的调定点从而使身体的稳态倾向调节至一个更健康的调定点的方法，其中所述方法包括向所述受试者组合施用有效量的至少一种作用于前脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂和至少一种作用于后脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂。

在又一方面，提供了维持体重减轻或者维持体重丧失(weightlost)的方法，其中所述方法包括向所述受试者组合施用有效量的至少一种作用于前脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂和至少一种作用于后脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂。在本发明该方面的一种实施方案中，通过重新设置受试者的调定点来维持体重减轻。

此外，在特定实施方案中，抗肥胖剂的组合施用在本文所述的任意方法中产生协同效应。此外，在特定实施方案中，抗肥胖剂的组合施用导致对至少一种试剂的更低剂量需求而具有相同的作用。

在一种实施方案中，本发明的方法可用于治疗和/或预防受益于营养物利用率降低的代谢状况或病症。因此，这些方法可用于治疗和/或预防肥胖、糖尿病(例如，2型或非胰岛素依赖性糖尿病，1型糖尿病，和妊娠糖尿病)、进食障碍疾患、胰岛素抵抗综合征和心血管疾病。

在一种实施方案中，提供了在受试者中改变受试者脂肪分布、降低脂肪量或这二者的方法。因此，对于改变身体组成是有益的受试者来说，他们也可受益于本发明的方法。如本文中所欲意指的，改变的身体组成包括身体脂肪的损失或维持，以及瘦体重损失的最小化、维持或获得。在这样的情形中，体重可以增加也可以减少。因此，根据这些术语在本领域通常所使用的，受试者可以是瘦弱的、超重的或者肥胖的。本发明的方法还包括减少非脂肪组织中的脂肪而不损害无脂肪组织。该方法的用途包括治疗比如非酒精性脂肪性肝炎(NASH)或脂肪营养不良这样的疾病。

本文所述方法利用至少一种作用于前脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂和至少一种作用于后脑中参与食物摄入、体重调节或这二者的结构的抗肥胖剂的组合施用来控制、预防和/或治疗这样的状况或病症。

在另一方面，提供了通过施用作用于前脑和后脑的试剂来刺激食物摄入、促进体重增加或这二者的方法。在这样的方法中，组合地且以刺激受试者食物摄入、促进受试者体重增加或这二者的有效量向受试者施用重量诱导剂。这些方法尤其对诸如恶病质和食欲缺乏以及其他以丧失食欲、食物摄入减少、以及受试者体重减轻为特征的消耗性疾病这样的疾病和病症有益。示例性的重量诱导剂包括NPY1受体激动剂、NPY5受体激动剂、苗条蛋白拮抗剂、MCH激动剂、MC4拮抗剂、大麻素受体激动剂、5-HT2C拮抗剂、毒蜥外泌肽拮抗剂、GLP-1拮抗剂、生长素释放肽激动剂、CCK拮抗剂和淀粉状蛋白毒素拮抗剂。因此，一种实施方案提供了刺激有此需要的受试者食物摄入、促进有此需要的受试者体重增加或这二者的方法，该方法包括向所述受试者施用至少两种或更多种重量诱导剂。

关于重量诱导剂的施用，重量诱导剂以单次施用，作为分离的剂次的同时施用，或顺序施用。在使用分离的剂量制剂时，单个重量诱导剂可在基本相同的时间(也即，并行)施用，或单独地交错的时间，例如，在施用该方法的另一种重量诱导剂之前或之后顺序施用。在一种实施方案中，第一种重量诱导剂在至少一种其他重量诱导剂之前或之后约30分钟施用，在其它实施方案中在至少一种其他重量诱导剂之前或之后约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12小时施用。在一些实施方案中，组合施用涉及以重叠的时间间隔施用分离的剂量制剂。例如，重量诱导剂1自第1天至第30天施用，且重量诱导剂2自第20天至第50天施用。在其它实施方案中，组合施用涉及以顺序的、非重叠的时间间隔施用分离的剂量制剂。例如，重量诱导剂1自第1天至第30天施用，且重量诱导剂2自第35天至第50天施用。本发明由此被理解为包括所有这样的在整个治疗过程中同时、交替或完全分离的治疗方案。所施用的任一种重量诱导剂均可以单次给药量或连续给药施用。

此外，在特定实施方案中，重量诱导剂的组合施用在本发明的任一方面导致协同效应。此外，在特定实施方案中，重量诱导剂的组合施用导致对至少一种试剂的更低剂量需求而具有相同的作用。

用于本发明的抗肥胖剂包括苗条蛋白、苗条蛋白衍生物、重组苗条蛋白和苗条蛋白激动剂。苗条蛋白(源自希腊文leptos，意指瘦)是一种主要由脂肪细胞产生的激素。在肥胖人中，苗条蛋白血液水平通常与身体中所存储的脂肪量相关。通常，脂肪量越大，苗条蛋白的量就越大。大多数肥胖人中的血清苗条蛋白水平浓度是高的，并认为存在苗条蛋白抗性状态(Mantzoros等人(2000)J.Clin.Endocrinol.Metab.85：4000-4002)。尽管有治疗性尝试使用苗条蛋白来治疗肥胖，但是重组人苗条蛋白的效果却在使肥胖个体减轻体重中受到限制(如果存在限制的话)。其例外包括对先天性苗条蛋白缺陷个体的治疗和对皮下脂肪萎缩个体的治疗。参见，例如，Heymsfield等人(1999)J AMA 282：1568-1575，Farooqi等人(1999)N.Engl.J.Med.341：879-884，和第2005/0020496号美国专利公开。

在特定实施方案中，苗条蛋白以替代疗法的形式施用，从而实现在血浆中接近生理苗条蛋白浓度。据估计，苗条蛋白的生理替换剂量对所有年龄的男性为约0.02mg/kg体重每天，对18岁以下的女性为约0.03mg/kg体重每天，对成年女性为约0.04mg/kg体重每天。当尝试实现接近苗条蛋白生理浓度时，人们可以，例如，在第一个月的治疗中用50％的估计替代剂量，在第二个月的治疗中用100％的替代剂量，在第三个月的治疗中用200％的替代剂量，等来治疗受试者。血清苗条蛋白水平可通过本领域已知的方法来测量，包括，例如，用商业可获得免疫测定。

本发明的一个方面是，通过比如施用淀粉状蛋白毒素来治疗苗条蛋白抗性这样的方法来减少脂肪。一旦苗条蛋白抗性得到改善(减轻)，就可施用苗条蛋白来进一步治疗肥胖。

适用于本发明所述方法的苗条蛋白和包含苗条蛋白的组合物是本领域已知的，且包括，但不限于重组人苗条蛋白(PEG-OB，HoffmanLa Roche)和重组甲硫氨酰人苗条蛋白(Amgen)。苗条蛋白、类似物、衍生物、制品、制剂、药物组合物、剂量和施用途径之前已经在以下专利公开文本中作过描述，这些文献在此全文引入作为参考：第5,552,524、5,552,523、5,552,522、5,521,283号美国专利；和第WO96/05309、WO 96/40912、WO 97/06816、WO 00/20872、WO 97/18833、WO 97/38014、WO 98/08512和WO 98/284427号PCT申请公开文本。

苗条蛋白激动剂和拮抗剂是本领域已知的，并可以通过在专利数据库检索得到。例如，苗条蛋白激动剂描述于第2004/0072219、2003/049693、2003/0166847、2003/0092126号美国专利公开文本和第6,777,388和6,936,439号美国专利中。苗条蛋白拮抗剂描述于第2004/0048773、2002/0160935号美国专利公开文本和第6,399,745号美国专利中。测试苗条蛋白激动作用和拮抗作用的方法描述于第6,007,998和5,856,098号美国专利中。这些专利是示例性的，且全文引入本文作为参考。

可用于本发明的抗肥胖剂还包括淀粉状蛋白毒素和淀粉状蛋白毒素激动剂。淀粉状蛋白毒素是一种37氨基酸的肽激素，其响应营养物刺激与胰岛素共同分泌自胰腺β细胞。人淀粉状蛋白毒素(h淀粉状蛋白毒素)具有以下氨基酸序列：

Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-His-Ser-Ser-Asn-Asn-Phe-Gly-Ala-Ile-Leu-Ser-Ser-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr(SEQ ID NO：1)。大鼠淀粉状蛋白毒素(r淀粉状蛋白毒素)具有以下序列：KCNTATCATQRLANFLVRSSNNLGPVLPPTNVGSNTY(SEQ IDNO：2)。预期可使用任何物种来源的淀粉状蛋白毒素。

已经令人惊奇地发现，比如通过使用淀粉状蛋白毒素、淀粉状蛋白毒素激动剂和淀粉状蛋白毒素拮抗剂来调节有效的体内淀粉状蛋白毒素水平，可调节体内的有效生长素释放肽水平。

预期在本发明中使用的淀粉状蛋白毒素激动剂包括描述于第5,686,411、6,114,304和6,410,511号美国专利中的那些，这些专利全文引入本文作为参考。这样的化合物包括具有式I的那些：¹A₁-X-Asn-Thr-⁵Ala-Thr-Y-Ala-Thr-¹⁰Gln-Arg-Leu-B₁-Asn-¹⁵Phe-Leu-C₁-D₁-E₁-²⁰F₁-G₁-Asn-H₁-Gly-²⁵I₁-J₁-Leu-K₁-L₁-³⁰Thr-M₁-Val-Gly-Ser-³⁵Asn-Thr-Tyr-Z(SEQ ID NO：3)

其中A₁是Lys、Al a、Ser或氢；

B₁是Ala、Ser或Thr；

C₁是Val、Leu或Ile；

D₁是His或Arg；

E₁是Ser或Thr；

F₁是Ser、Thr、Gln或Asn；

G₁是Asn、Gln或His；

H₁是Phe、Leu或Tyr；

I₁是Ala或Pro；

J₁是Ile、Val、Ala或Leu；

K₁是Ser、Pro、Leu、Ile或Thr；

L₁是Ser、Pro或Thr；

M₁是Asn、Asp、或Gln；

X和Y是独立选择的带有侧链的氨基酸残基，所述侧链彼此间化学键合从而形成分子内连接；和

Z是氨基、烷基氨基、二烷基氨基、环烷基氨基、芳氨基、芳烷基氨基、烷氧基、芳氧基或芳烷氧基(aralkyloxy)。

X和Y的适宜侧链包括衍生自可形成二硫键的烷基硫醇的基团；可形成环内酰胺的烷基酸和烷基胺；可缩合和还原以形成烷基胺桥的烷基醛或烷基卤化物和烷基胺；或可相连以形成烷基、链烯基、炔基、醚或硫醚键的侧链。优选的烷基链包括具有约1至约6个碳原子的低级烷基基团。

本发明的又一方面涉及未桥化的SEQ ID NO：3的激动剂类似物，且其中X和Y独立地选自Ala、Ser、Cys、Val、Leu和Ile或Ser或Cys的烷基、芳基、或芳烷基酯和醚。

上述激动剂类似物的生物学活性衍生物也包括在本发明的范围内，其中单独的氨基酸的立体化学可在一个或多个特定位点从(L)/S转化为(D)/R。

还包括在本发明范围内的是Asn、Ser和/或Thr残基经过糖基化修饰的激动剂类似物。

包含较少肽特征的淀粉状蛋白毒素的生物学活性激动剂类似物包括在本发明范围内。这样的肽模拟物包括，例如，--CO--NH--酰胺键的以下一种或多种取代：酯肽(--CO--O--)，亚氨基亚甲基(--CH2--NH--)，反式烯(trans-alkenes)(--CH＝CH--)，β-烯胺腈(beta-enaminonitriles)(--C(＝CH--CN)--NH--)，硫代酰胺(--CS--NH--)，硫代亚甲基(--S--CH2--或--CH2--S--)，亚甲基(--CH2--C2--)和逆酰胺(retro-amide)(--NH--CO--)。

本发明的化合物与各种无机和有机酸和碱形成盐。这样的盐包括用有机和无机酸，例如，HCl、HBr、H₂SO₄、H₃PO₄、三氟乙酸、乙酸、甲酸、甲磺酸、甲苯磺酸、马来酸、延胡索酸和樟脑磺酸，制备的盐。用碱制备的盐包括，例如，铵盐、碱金属盐(比如钠盐和钾盐)和碱土盐(比如钙和镁盐)。乙酸盐、盐酸盐和三氟乙酸盐为优选的。

整个申请中，氨基酸序列可用与参照肽毗连的位置a至位置b的氨基酸来表示。例如，1-7h淀粉状蛋白毒素指人淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：1)(本例中的参照肽)中从位置1至位置7(包括在内)的氨基酸序列。对参照肽的修饰可用与修饰毗连的修饰的位置来表示。例如，(2Asp 7Lys)1-7h淀粉状蛋白毒素表示，在位置2带有Cys变为Asp和在位置7处带有Cys变为Lys的修饰的人淀粉状蛋白毒素中位置1至7的氨基酸序列。对于另一个例子，¹⁸Arg^25，28Pro-h-淀粉状蛋白毒素表示在位置18处带有His变为Arg的修饰、在位置25处带有Ala变为Pro的修饰以及在位置28处带有Ser变为Pro的修饰的人淀粉状蛋白毒素的氨基酸序列。

示例性的化合物包括，但不限于des-¹Lys-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：4)、²⁸Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：5)、^25，28，29Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：6)、¹⁸Arg^25，28Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：7)和des-¹Lys¹⁸Arg^25，28Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：8)，所有都在被治疗的测试动物中均显示淀粉状蛋白毒素活性(例如，激起显著的hyperlactemia，随后为高血糖症)。除具有淀粉状蛋白毒素活性特征外，还发现本发明特定的优选化合物与人淀粉状蛋白毒素相比时具有更令人满意的溶解性和稳定性特征。这些化合物的例子包括²⁵Pro²⁶Val^28，29Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：9)、^25，28，29Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：10)和¹⁸Arg^25，28Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：7)。

其他的化合物包括¹⁸Arg^25，28，29Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ IDNO：11)、des-¹Lys¹⁸Arg^25，28，29Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ IDNO：12)、des-¹Lys^25，28，29Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：13)、²⁵Pro²⁶Val^28，29Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：14)、²³Leu²⁵Pro²⁶Val^28，29Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：15)、²³Leu²⁵Pro²⁶Val²⁸Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：16)、des-¹Lys²³Leu²⁵Pro²⁶Val²⁸Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：17)、¹⁸Arg²³Leu²⁵Pro²⁶Val²⁸Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：18)、¹⁸Arg²³Leu^25，28，29Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：19)、¹⁸Arg²³Leu^25，28Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：20)、¹⁷Ile²³Leu^25，28，29Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：21)、¹⁷Ile^25，28，29Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：22)、des-¹Lys¹⁷Ile²³Leu^25，28，29Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：23)、¹⁷Ile¹⁸Arg²³Leu-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：24)、¹⁷Ile¹⁸Arg²³Leu²⁶Val²⁹Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：25)、¹⁷Ile¹⁸Arg²³Leu²⁵Pro²⁶Val^28，29Pro-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ IDNO：26)、¹³Thr²¹His²³Leu²⁶Ala²⁸Leu²⁹Pro³¹Asp-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：27)、¹³Thr²¹His²³Leu²⁶Ala²⁹Pro³¹Asp-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：28)、des-¹Lys¹³Thr²¹His²³Leu²⁶Ala²⁸Pro³¹Asp-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：29)、¹³Thr¹⁸Arg²¹His²³Leu²⁶Ala²⁹Pro³¹Asp-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ IDNO：30)、¹³Thr¹⁸Arg²¹His²³Leu^28，29Pro³¹Asp-h-淀粉状蛋白毒素(SEQID NO：31)和¹³Thr¹⁸Arg²¹His²³Leu²⁵Pro²⁶Ala^28，29Pro³¹Asp-h-淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：32)。

有用的淀粉状蛋白毒素激动剂类似物包括在第WO 93/10146号PCT申请公开文本中鉴定的那些，该公开文本的内容引入本文作为参考。

用于本发明的淀粉状蛋白毒素激动剂还包括淀粉状蛋白毒素片段及其如上述的以及EP 289287(其内容引入本文作为参考)中描述的那些类似物。淀粉状蛋白毒素激动剂可以是与具有淀粉状蛋白毒素活性的SEQ ID NO：1具有至少60、65、70、75、80、85、90、95或99％氨基酸序列同一性的化合物。淀粉状蛋白毒素激动剂还包括小分子、非肽分子，例如基于小分子化学的那些。如本文所使用的“淀粉状蛋白毒素活性”包括淀粉状蛋白毒素影响身体内生长素释放肽水平的能力。淀粉状蛋白毒素激动剂还包括在SEQ ID NO：1的至少一个或多个氨基酸位置具有插入、缺失、延伸和/或取代的淀粉状蛋白毒素的类似物。氨基酸插入、缺失或取代的数目不超过5、10、15、20、25或30。插入、延伸或取代可以是用其他的天然氨基酸、合成氨基酸、肽模拟物或其他的化合物进行的。淀粉状蛋白毒素激动剂，如本发明中所预期的，还可以是降钙素，比如硬骨鱼降钙素，及其类似物，以及降钙素基因相关肽(CGRP)及其类似物。

淀粉状蛋白毒素激动剂还包括第60/543,275号美国专利申请和2005年2月11日提交的第PCT/US2005/004631号PCT申请(各引入本文作为参考)中描述的多肽(本文中称为LHC(环螺旋C-末端)肽)及其类似物和衍生物。用于本发明的LHC肽作为本文所公开的降钙素、淀粉状蛋白毒素、CGRP或这三种的任意组合的至少一种生物学作用的激动剂起作用，或与淀粉状蛋白毒素、降钙素或CGRP受体的至少一种结合。示例性LHC肽的受体结合活性和生物学活性描述于第60/543,275号美国专利申请和第PCT/US2005/004631号PCT申请中。在一个总的方面，这些多肽激动剂具有淀粉状蛋白毒素或降钙素及其类似物的至少环区域、降钙素或其类似物α螺旋区域的至少部分的α螺旋区域，或具有淀粉状蛋白毒素α螺旋区域和降钙素α螺旋区域或其各自类似物的部分的α螺旋区域，和淀粉状蛋白毒素或降钙素或其类似物的C-末端尾部，附带条件是降钙素或降钙素类似物的C-末端尾部不是脯氨酸(Pro)、羟脯氨酸(Hyp)、高丝氨酸(Hse)或Hse的衍生物。

在特定实施方案中，这些LHC肽具有淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素类似物环区域，至少部分的降钙素或降钙素类似物α螺旋区域和淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素类似物C-末端尾部。在其它实施方案中，这些LHC肽具有降钙素或降钙素类似物环区域，至少部分的降钙素或降钙素类似物α螺旋区域和淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素类似物C-末端尾部。在其他实施方案中，这些LHC肽具有淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素类似物环区域，至少部分的淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素类似物α螺旋区域和至少部分的降钙素或降钙素类似物α螺旋区域和淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素类似物C-末端尾部。仍在其他实施方案中，这些LHC肽具有降钙素或降钙素类似物环区域，至少部分的淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素类似物α螺旋区域和至少部分的降钙素或降钙素类似物α螺旋区域和淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素类似物C-末端尾部。仍在其他实施方案中，这些LHC肽具有淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素类似物环区域、部分或降钙素或降钙素类似物α螺旋区域或至少部分的淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素类似物α螺旋区域和至少部分的降钙素或降钙素类似物α螺旋区域，和降钙素或降钙素类似物C-末端尾部。

在特定实施方案中，这些LHC肽的环区域还包含不超过一个、两个、三个或四个修饰，所述修饰包括来自于淀粉状蛋白毒素或降钙素环及其类似物的取代、插入或缺失。还预期，这些LHC肽可在包含N-帽区域的环的N-末端部分具有其他修饰，所述修饰可具有疏水或亲水特征，比如乙酰基、异己酰基(isocaproyl)、3，6-二羟基辛酸(3，6-dioxyoctanoic acid)或1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三胺琥珀酰亚胺酸(succinimic acid)。修饰还可包括一个、两个、三个或更多个附加氨基酸。这是允许多得不能悉数提及，但是可以被本领域技术人员根据本申请中进一步的举例来理解的许多修饰的区域。

这些LHC肽还可通过，比如，比如酰胺化、糖基化、酰化、硫酸盐化、磷酸化、乙酰化和环化作用这样的化学改变进行衍生化。这样的化学改变可通过化学或者生物化学方法、以及通过体内过程、或者其任意组合得到。这些LHC肽的衍生物还包括与一种或多种聚合物或小分子取代基的缀合。一种类型的聚合物缀合是聚乙二醇(“PEG”)聚合物、聚氨基酸(例如，聚组氨酸、聚精氨酸、聚赖氨酸等)和/或各种长度的脂肪酸链与多肽的N-或C-末端或氨基酸残基侧链的连接或附着。小分子取代基包括短烷基和约束的(constrained)烷基(例如，分支的、环化的、稠合的、金刚烷基(adamantyl))和芳族基团。此外，比如R和K这样的碱性残基可以用homoR和homoK、瓜氨酸或鸟氨酸取代以改善肽的代谢稳定性。用于本发明的多肽包括酸以及酰胺形式。

在特定实施方案中，LHC肽的α螺旋区域包含降钙素或降钙素类似物α螺旋区域的至少四个连续的氨基酸。在其他实施方案中，该α螺旋区域包含降钙素或降钙素类似物α螺旋区域的至少5、6、7或8个连续氨基酸。在其它实施方案中，该α螺旋区域包含降钙素或降钙素类似物α螺旋区域的至少10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21或更多个连续氨基酸。在特定实施方案中，当连续氨基酸的数目少于8时，预期该α螺旋区域还包含淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素类似物α螺旋区域的至少4、5、6、7、9、10、11或更多个氨基酸。在特定实施方案中，设想该新化合物α螺旋区域中可发现更少的降钙素或降钙素类似物的氨基酸和更多的淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素类似物的氨基酸。构成α螺旋区域的氨基酸数目可为约10至23个氨基酸。因此，该α螺旋区域可以为10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22或23个氨基酸长。此外，这些氨基酸应当提供约3至约6个α螺旋转角。还预期，这些化合物的α螺旋区域还包含不超过一、二、三、四、五、六、七、八、九或十个包括来自降钙素和/或淀粉状蛋白毒素α螺旋区域及其类似物的取代、插入或缺失的修饰。

在特定实施方案中，LHC肽的C-末端尾部包含淀粉状蛋白毒素或降钙素及其类似物的至少最后六个、五个或四个氨基酸。在特定实施方案中，该新化合物的C-末端尾部包含至少部分带有β转角的C-末端。在特定实施方案中，该β转角通过氨基酸组合Gly-Ser导入。因此，该LHC肽可具有包含部分带有Gly-Ser或起始于Gly-Ser的淀粉状蛋白毒素或降钙素C-末端尾部(及其类似物)的C-末端。

在特定实施方案中，LHC肽的该C-末端尾部还包含不超过一个、两个或三个包括来自淀粉状蛋白毒素或降钙素环及其类似物的取代、插入或缺失的修饰。还预期，该LHC肽可在C-末端尾部的C-末端部分带有其他修饰，这些修饰包括，例如，L-辛基甘氨酸、4ABU(4-氨基丁酸)、9Anc(9氨基壬酸(9amiononanoic acid))、3，6-二羟基辛酸或1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三胺琥珀酰亚胺酸。修饰还可包括一个、两个、三个或更多个其他的氨基酸。预期该区域中的修饰的类型可由本领域技术人员根据本申请中进一步的举例来理解。

在一方面，环区域定义为，在N-末端发现的包含至少5至8个氨基酸的区域，其中第一个和最后一个氨基酸能够形成键，例如，淀粉状蛋白毒素的第2-7位的残基或降钙素的第1-7位的残基以及其各自的类似物的相应区域。在另一方面，α螺旋区域定义为，淀粉状蛋白毒素或降钙素中两侧为环区域和C-末端尾部的中间部分，其在结构上形成α螺旋，例如，淀粉状蛋白毒素的第8-23位的残基或降钙素的第8-27位的残基以及其各自的类似物的相应区域。在另一方面，C-末端尾部定义为α螺旋后的区域，例如，淀粉状蛋白毒素第33-37位的残基或更长的比如第27-37位的残基或降钙素第27或28至32位的残基。LHC肽中同时包括了所公开的化合物的酰胺和酸形式。

如本文所定义的淀粉状蛋白毒素和降钙素包括所有天然的和物种变异。淀粉状蛋白毒素和降钙素的例子包括，但不限于：人淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：1)、大鼠淀粉状蛋白毒素(SEQ ID NO：2)、鲑鱼降钙素(sCT)CSNLSTCVLGKLSQELHKLQTYPRTNTGSGTP(SEQ ID NO：33)和人降钙素(hCT)CGNLSTCMLGTYTQDFNKFHTFPQTAIGVGAP(SEQ IDNO：34)。

在一个总的方面，该LHC肽包含至少环区域、α螺旋区域和C-末端尾部。该环区域包含一段包含式(II)X-Xaa1序列-Y的氨基酸序列，其中的X和Y能够成键，且为独立选择的具有侧链的残基，所述侧链彼此化学结合或能够彼此化学结合以形成分子内连接，比如例如二硫键；酰胺键；例如由烷基酸和烷基胺形成的环内酰胺；例如，通过缩合和还原烷基醛或烷基卤化物和烷基胺而形成的烷基胺或亚胺桥；和例如，通过侧链的连接形成的烷基、链烯基、炔基、醚或硫醚键。烷基链可包括带有约1至约6个碳原子的低级烷基基团。在特定实施方案中，分子内连接可以是二硫键、酰胺键、亚胺键、胺键、烷基键和烯键。在特定实施方案中，式(II)的X和Y独立选自Ser、Asp、Glu、Lys、Orn(鸟氨酸)或Cys。在特定实施方案中，式(II)的X和Y是Cys和Cys。在其它实施方案中，式(II)的X和Y是Ser和Ser。仍在其他实施方案中，式(II)的X和Y是Asp和Lys或Lys和Asp。

式(II)的Xaa1序列包含介于X和Y之间的3、4、5或6个氨基酸的氨基酸序列。在特定实施方案中，该Xaa1序列包含氨基酸序列，该氨基酸序列具有带有相邻于Y的一个或多个取代或非取代的含羟基残基的区域。例如，该含羟基残基区域可具有相邻于Y的3个氨基酸中的至少2个，其为Ser或Thr。Xaa1序列中的其他氨基酸可以是任何氨基酸。在特定实施方案中，Xaa1序列是3个氨基酸。在其它实施方案中，Xaa1序列是4个氨基酸。仍在其他的实施方案中，Xaa1序列是5个氨基酸。在又一其他实施方案中，Xaa1序列是6个氨基酸。因此，式(II)的Xaa1可用Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7(SEQ ID NO：35)表示。在特定实施方案中，Xaa2、Xaa3、Xaa4、任意两个或所有这三个都可以不存在。在特定实施方案中，Xaa5、Xaa6和Xaa7包含含羟基的残基区域。同样，三个氨基酸中的至少两个可以是Ser、Hse、Thr、别苏氨酸(alloThr)、d-苏氨酸(d-Thr)、或其其他的非天然类似物。Xaa2可以是任何氨基酸或不存在，Xaa3可以是任何氨基酸或不存在，Xaa4可以是任何氨基酸或不存在，如果Xaa6是Ser或Thr且Xaa7是Ser或Thr则Xaa5可以是任何氨基酸，如果Xaa5是Ser或Thr且Xaa7是Ser或Thr则Xaa6可以是任何氨基酸，如果Xaa5是Ser或Thr且Xaa6是Ser或Thr则Xaa7可以是任何氨基酸。因此，在特定实施方案中，Xaa1可以表示为Xaa2不存在，Xaa3为Ala、Gly、Ser、Asp或不存在，Xaa4为Asn、Ala、Asp、Gly或不存在；Xaa5为Ala、Leu、Thr或Ser；Xaa6为Ala、Ser或Thr；且Xaa7为Ala、Ser、Val、Hse、(S)-2-氨基(amio)-3-羟基甲基丁酸(Ahb)、(2S，3R)-2-氨基-3羟基甲基戊酸(Ahp)、d-Thr、Thr或其衍生物。在其它实施方案中，Xaa1可表示为Xaa2不存在，Xaa3为Ser、Gly或不存在，Xaa4为Asn或Asp，Xaa5为Ala、Ser、Thr或Leu，Xaa6为Ala、Thr或Ser，且Xaa7为Ser、d-Thr、alloThr或Thr。在特定实施方案中，式(II)的环区域包括上述的Xaa1代表，其中Xaa3为Ala，其中Xaa3为Ser，或其中Xaa3为Gly。作为选择或另外地，该环区域包括上述的Xaa1代表，其中Xaa4为Ala，其中Xaa4为Asn，其中Xaa4为Asp，或其中Xaa4为Gly。作为选择或另外地，该环区域包括上述的Xaa1代表，其中Xaa5为Ala，其中Xaa5为Thr，或其中Xaa5为Leu。作为选择或另外地，该环区域包括上述的Xaa1代表，其中Xaa6为Ser，或其中的Xaa6为Ala。作为选择或另外地，该环区域包括上述的Xaa1代表，其中Xaa7为Thr，或其中Xaa7为d-Thr。还预期，可对该环区域做不超过一个、两个或三个比如取代、插入、缺失和/或衍生的修饰。

本发明的环区域例子包括，但不限于，CNTATC(SEQ IDNO：36)；CATATC(SEQ ID NO：37)；CDTATC(SEQ ID NO：38)；CGTATC(SEQ ID NO：39)；CNAATC(SEQ ID NO：40)；CNTSTC(SEQ ID NO：41)；CNTA-dThr-C(SEQ ID NO：42)；CNTA-T(OPO3H2)-C(SEQ ID NO：43)；CNTASC(SEQ ID NO：44)；CNTAAC(SEQ ID NO：45)；CNTAVC(SEQ ID NO：46)；CNTA-Hse-C(SEQ ID NO：47)；CNTA-Ahb-C(SEQ ID NO：48)；CNTA-Ahp-C(SEQ ID NO：49)；CSNLSTC(SEQ ID NO：50)；CGNLSTC(SEQID NO：51)；CANLSTC(SEQ ID NO：52)；CSALSTC(SEQ IDNO：53)；CSNASTC(SEQ ID NO：54)；CSNLATC(SEQ ID NO：55)；和CSNLSAC(SEQ ID NO：56)。如前述指出的，还预期，可对该环区域做不超过一个、两个或三个比如取代、插入、缺失和/或衍生的修饰。

LHC肽的环区域还可在N-末端包含修饰或附加的氨基酸。这样的修饰包括添加比如Lys、Ala、Phe、Ile、Ser、辛基甘氨酸、Isocap、Fmoc-3，6-二羟基辛酸、Fmoc-1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三胺琥珀酰亚胺酸、乙酰基、和/或用于溶解性、送递、信号传导的基团这样的化合物。示例性的修饰环包括向序列Xaa1添加Lys或向序列Xaa1添加Ile。例如，该修饰的环区域可以是KCNTATC(SEQ ID NO：57)。在特定实施方案中，在环区域的N-末端的添加和/或修饰可改变该环区域。例如，该环区域可作下述修饰：环(2，7)1-7h淀粉状蛋白毒素、环(²Asp⁷Lys)1-7h淀粉状蛋白毒素、N-异己酰1-7h淀粉状蛋白毒素、N-3，6二羟基辛酰1-7h淀粉状蛋白毒素、L-辛基甘氨酸1-7h淀粉状蛋白毒素、乙酰基(²Agy，⁷Agy)1-7h淀粉状蛋白毒素(其中Agy为烯丙基甘氨酸)、乙酰基(¹Ala)1-7h淀粉状蛋白毒素、(¹Thr ³Asp)1-7h淀粉状蛋白毒素、Isocap(⁷Ala)5-7sCT、乙酰基(²Agy，⁷Agy)1-7sCT和环(1，7)(¹Asp⁷Lys)1-7sCT。因此，以Isocap(⁷Ala)5-7sCT为例，特定的实施方案在环区域的N-末端区域包含修饰，由此氨基酸Xaa2至Xaa5为不存在。

LHC肽的α螺旋区域长度可为约8至23个氨基酸。在特定实施方案中，α螺旋区域为双亲的。在特定实施方案中，α螺旋区域包含约3至6个螺旋转角。在特定实施方案中，α螺旋区域包含3、4、5或6个螺旋转角。在其它实施方案中，α螺旋区域是相当于约3、4、5或6个螺旋转角的刚性结构。一个理想化的螺旋的例子是LLQQLQKLLQKLKQY(SEQ ID NO：58)。在特定实施方案中，该α螺旋是双亲结构。因此，可以选择将提供该类型结构的所需氨基酸的特征。

已发现，降钙素α螺旋区域、淀粉状蛋白毒素和降钙素α螺旋区域的组合、或其部分，和/或一些CGRP元件在LHC肽的α螺旋区域中是需要的。预期，如同环区域，α螺旋区域可来自任何淀粉状蛋白毒素或降钙素，及其类似物。因此，在特定实施方案中，α螺旋区域为至少部分的降钙素或降钙素类似物的α螺旋区域。在其它实施方案中，α螺旋区域为至少部分的降钙素或降钙素类似物的α螺旋区域和至少部分的淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素类似物的α螺旋。仍在其他实施方案中，LHC肽的α螺旋区域包含CGRP的元件。还预期，这些新化合物可具有不超过一、二、三、四、五、六、七、八、九或十个比如取代、插入、缺失和/或衍生这样的其他修饰。

在特定实施方案中，LHC的α螺旋区域可包含I型α螺旋区域。I型α螺旋区域包含自sCT第8位至sCT第18、19、20、21、22、23、24、25、26或27位的氨基酸。此外，I型α螺旋区域可包含相同或不同物种的降钙素或降钙素类似物α螺旋区域的超过一个部分，例如8-21sCT 19-27sCT；8-21sCT 18-27sCT；或8-16 hCT 17-27sCT；或(¹¹Arg)8-16hCT(¹⁸Arg)17-27sCT。作为选择或另外地，上述8-18sCT至8-27sCT的α螺旋还可包含(¹⁰Aib)、(¹¹Arg)、(¹¹Orn)、(¹¹hArg)、(¹¹Cit)、(¹¹hLys)、(¹¹Lys(for))、(¹⁷Aib)、(¹⁸Arg)、(¹⁸Orn)、(¹⁸hArg)、(¹⁸Cit)、(¹⁸hLys)、(¹⁸Lys(for))、(¹⁸Lys(PEG5000))、(²²Leu)、(²⁴Pro)或其任意组合的一种或多种的取代。

在一种实施方案中，LHC肽的I型α螺旋区域可表示为：X1 V LXaa10 Xaa11 L S Q Xaa15 L Xaa17 Xaa18 L Q T Xaa22 P Xaa24 T NT X1(SEQ ID NO：59)，其中

Xaa10是Gly或Aib；

Xaa11是Lys、Arg、Orn、hArg、Cit、hLys或Lys(for)；

Xaa15是Glu或Phe；

Xaa17是His或Aib；

Xaa18是Lys、Arg、Orn、hArg、Cit、hLys、Lys(for)、Lys(PEG 5000)；

Xaa22是Try或Leu；

Xaa24是Arg或Pro；或

X1不存在或包含1-4个附加氨基酸。

应当记住，马库什基团中的各成员或其组合是本发明的另一种实施方案，且不被视为单一的单元。这是用于陈述的速记方法，作为举例，LHC肽的实施方案包括I型α螺旋区域式，其中Xaa18可为Lys、Arg、Orn、hArg、Cit、hLys或Lys(for)，且各变化都是本发明单独的实施方案。因此，I型α螺旋区域式具有一种其中Xaa18为Lys的实施方案。还有其中Xaa18为Arg等的另一种实施方案。还预期，α螺旋区域可包含不超过一、二、三、四、五、六、七、八、九或十个比如取代、插入、缺失和/或衍生这样的修饰。因此，I型α螺旋区域的化合物还可在C-末端带有缺失。在特定实施方案中，X1的氨基酸能够形成α螺旋转角。

LHC肽I型α螺旋区域的例子包括，但不限于，

8-18sCT，8-21sCT，8-24sCT，8-27sCT，(¹¹Arg)8-18sCT，(¹⁸Arg)8-18sCT，(¹¹Arg¹⁸Arg)8-18sCT，(¹¹Orn¹⁸Orn)8-18sCT，(¹¹Arg¹⁸Cit)8-18sCT，(¹¹hArg¹⁸hArg)8-18sCT，(¹¹Arg ¹⁸Orn)8-18sCT，(¹¹Cit¹⁸Arg)8-18sCT，(¹¹Cit¹⁸Cit)8-18sCT，(¹¹hLys¹⁸hLys)g-18sCT，(¹⁰Aib¹¹Arg¹⁷Aib¹⁸Arg)8-18sCT，(¹¹Lys(for)¹⁸Lys(for))8-18sCT，(¹⁰Aib¹¹Lys(for)¹⁷Aib¹⁸Lys(for))8-18sCT，(¹¹Arg¹⁸Lys(PEG 5000))8-18sCT，(¹¹Arg)8-21sCT，(¹⁸Arg)8-21sCT，(¹¹Arg¹⁸Arg)8-21sCT，(¹¹Orn¹⁸Orn)8-21sCT，(¹¹Arg¹⁸Cit)8-21sCT，(¹¹hArg¹⁸hArg)8-21sCT，(¹¹Arg¹⁸Orn)8-21sCT，(¹¹Cit¹⁸Arg)8-21sCT，(¹¹Cit¹⁸Cit)8-21sCT，(¹¹hLys¹⁸hLys)8-21sCT，(¹⁰Aib¹¹Arg¹⁷Aib¹⁸Arg)8-21sCT，(¹¹Lys(for)¹⁸Lys(for))8-21sCT，(¹⁰Aib¹¹Lys(for)¹⁷Aib¹⁸Lys(for))8-21sCT，(¹¹Arg¹⁸Lys(PEG5000))8-21sCT，(¹¹Arg)8-24sCT，(¹⁸Arg)8-24sCT，(¹¹Arg¹⁸Arg)8-24sCT，(¹¹Arg¹⁸Arg²²Leu)8-24sCT，(¹¹Arg¹⁸Arg²⁴Pro)8-24sCT，(¹¹Orn¹⁸Orn)8-24sCT，(¹¹Arg¹⁸Cit)8-24sCT，(¹¹hArg¹⁸hArg)8-24sCT，(¹¹Arg¹⁸Orn)8-24sCT，(¹¹Cit¹⁸Arg)8-24sCT，(¹¹Cit18Cit)8-24sCT，(¹¹hLys¹⁸hLys)8-24sCT，(¹⁰Aib¹¹Arg¹⁷Aib18Arg)8-24sCT，(¹¹Lys(for)¹⁸Lys(for))8-24sCT，(¹⁰Aib¹¹Lys(for)¹⁷Aib¹⁸Lys(for))8-24sCT，(¹¹Arg¹⁸Lys(PEG 5000))8-24sCT，(¹¹Arg)8-27sCT，(¹⁸Arg)8-27sCT，(¹¹Arg¹⁸Arg)8-27sCT，(¹¹Arg¹⁸Arg²²Leu)8-27sCT，(¹¹Arg¹⁸Arg²⁴Pro)8-27sCT，(¹¹Orn¹⁸Orn)8-27sCT，(¹¹Arg¹⁸Cit)8-27sCT，(¹¹hArg¹⁸hArg)8-27sCT，(¹¹Arg¹⁸Orn)8-27sCT，(¹¹Cit¹⁸Arg)8-27sCT，(¹¹Cit¹⁸Cit)8-27sCT，(¹¹hLys¹⁸hLys)8-27sCT，(¹⁰Aib¹¹Arg¹⁷Aib¹⁸Arg)8-27sCT，(¹¹Lys(for)¹⁸Lys(for))8-27sCT，(¹⁰Aib¹¹Lys(for)¹⁷Aib¹⁸Lys(for))8-27sCT，(¹¹Arg¹⁸Lys(PEG 5000))8-27sCT，(¹¹Arg¹⁸Arg)8-21sCT-19-27sCT，and(¹¹Arg¹⁸Arg)8-21sCT-(¹⁸Leu)18-27sCT。

在特定实施方案中，LHC肽的α螺旋区域可包含II型α螺旋区域。II型α螺旋区域包含部分的淀粉状蛋白毒素或淀粉状蛋白毒素类似物的α螺旋区域和部分的降钙素或降钙素类似物的α螺旋区域。II型α螺旋区域可包含自h淀粉状蛋白毒素中第8位至h淀粉状蛋白毒素中第11、12、13、14、15、16、17、18或19位氨基酸，和sCT的第13、14、15、16、17、18和19位至sCT的第18、19、20、21、22、23、24、25、26或27位的氨基酸。作为选择或另外地，上述淀粉状蛋白毒素和降钙素的α螺旋区域还可包含(⁸Val)、(⁹Leu)、(⁹Met)、(¹⁰Gly)、(¹⁰His)、(¹²Thr)、(¹³Thr)、(¹³Ash)、(¹³Phe)、(¹³Tyr)、(¹⁴Arg)、(¹⁴Ala)、(¹⁴Asp)、(¹⁴Glu)、(¹⁴Gln)、(¹⁴Thr)、(¹⁴Gly)、(¹⁵Leu)、(¹⁵Ser)、(¹⁵Glu)、(¹⁵Ala)、(¹⁵Tyr)、(¹⁶Asp)、(¹⁷Ser)、(¹⁷Phe)、(¹⁸Arg)、(¹⁷Aib)、(¹⁸Arg)、(¹⁸Orn)、(¹⁸hArg)、(¹⁸Cit)、(¹⁸hLys)、(¹⁸Lys(for))、(¹⁸Lys(PEG5000))、(¹⁹Phe)、(²⁰His)、(²¹Asn)、(²²Met)、(²²Val)、(²²Phe)、(²²Leu)、(²⁴Pro)或其任意组合中的一种或多种的取代。在特定实施方案中，LHC肽II型α螺旋区域中的氨基酸数目为至少10个氨基酸。在其它实施方案中，LHC肽II型α螺旋区域中的氨基酸数目为11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22或23。在其它实施方案中，LHC肽II型α螺旋区域中的氨基酸数目为24或更多。

在一种实施方案中，LHC肽II型α螺旋区域可表示为：X1 Xaa8Xaa9 Xaa10 R Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Xaa18 Xaa19Xaa20 Xaa21 Xaa22 P Xaa24 T N T X1(SEQ ID NO：60)其中

Xaa8是Ala或Val；

Xaa9是Thr、Met或Leu；

Xaa10是Gln、Gly、His；

Xaa12是Leu或Thr；

Xaa13是Ala、Thr、Asn、Phe、Tyr、Ser或Thr；

Xaa14是Asn、Arg、Ala、Asp、Glu、Gln、Thr或Gly；

Xaa15是Phe、Leu、Ser、Glu、Ala、Asp或Tyr；

Xaa16是Leu或Asp；

Xaa17是Val、His、Ser、Phe或Aib；

Xaa18是His、Arg、Lys、Orn、hArg、Cit、hLys、Lys(for)或Lys(PEG5000)；

Xaa19是Leu、Ser或Phe；

Xaa20是Gln或His；

Xaa21是Thr或Asn；

Xaa22是Tyr、Val、Phe、Leu或Met；

Xaa24是Arg或Pro；和

X1是不存在或包含1-4个附加的氨基酸。

再次说明，马库什基团中的各成员或其组合是本发明的另一种实施方案，且不被视为单一的单元。还预期II型α螺旋区域可包含对本文所述化合物的不超过一、二、三、四、五、六、七、八、九或十个比如取代、插入、缺失和/或衍生这样的修饰。例如，在特定实施方案中，该II型α螺旋区域可在C-末端带有导致第27、26、25、24或22位缺失的缺失。在其它实施方案中，然而，这些缺失并不除去第19、20、21或22位氨基酸。

LHC肽II型α螺旋区域的例子包括，但不限于，(⁸Val⁹Leu¹⁰Gly)11-15h淀粉状蛋白毒素16-27sCT、(⁸Val⁹Leu¹⁰Gly)11-15h淀粉状蛋白毒素(¹⁸Arg)16-27sCT、8-12h淀粉状蛋白毒素(¹⁸Arg)13-27sCT、8-18h淀粉状蛋白毒素19-23sCT、8-18H淀粉状蛋白毒素19-27sCT、(¹⁵Glu¹⁸Arg)8-18h淀粉状蛋白毒素19-24sCT、(¹⁴Arg¹⁵Ser)8-18h淀粉状蛋白毒素19-22sCT、(¹³Ala¹⁴Ala¹⁵Ala)8-18h淀粉状蛋白毒素19-27sCT、(¹³Ala¹⁴Asp¹⁵Ala)8-18h淀粉状蛋白毒素19-22sCT、(¹³Ala¹⁴Asp)8-18h淀粉状蛋白毒素19-23sCT、(¹³Ala¹⁴Asp)8-18h淀粉状蛋白毒素19-27sCT、(¹³Ala¹⁴Ala)8-18h淀粉状蛋白毒素19-22sCT、(¹³Ala¹⁴Glu)8-18h淀粉状蛋白毒素19-22sCT、(¹³Thr¹⁴Asp¹⁵Tyr)8-18h淀粉状蛋白毒素19-22sCT、(¹³Ala¹⁴Gln)8-18h淀粉状蛋白毒素19-22sCT、(¹³Asn¹⁴Glu¹⁵Tyr)8-18h淀粉状蛋白毒素19-27sCT、(¹³Phe¹⁴Asp)8-18h淀粉状蛋白毒素19-27sCT、(¹³Ala¹⁴Asp)8-18h淀粉状蛋白毒素(¹⁵Glu¹⁸Arg)8-18h淀粉状蛋白毒素19-24sCT、(¹⁹Phe²²Phe)19-27sCT、(¹³Ala¹⁴Asp)8-18h淀粉状蛋白毒素(¹⁹Phe²⁰His²²Phe)19-27sCT、(¹³Ala¹⁴Asp)8-18h淀粉状蛋白毒素(¹⁹Phe²²Phe)19-27sCT、(⁹Thr¹⁰His)8-18h淀粉状蛋白毒素19-22sCT、(⁹Thr¹⁰His¹⁴Gly¹⁵Leu¹⁷Ser¹⁸Arg)8-19h淀粉状蛋白毒素20-23sCT、8-18h淀粉状蛋白毒素(²¹Asn²²Phe²³Val)19-23sCT、8-18h淀粉状蛋白毒素(²²Met)19-27sCT、8-18h淀粉状蛋白毒素(²²Val)19-27sCT、(⁹Met¹²Thr¹³Tyr¹⁴Thr¹⁵Glu¹⁶Asp¹⁷Phe)8-17h淀粉状蛋白毒素(¹⁸Arg)18-20sCT)。在其它实施方案中，新化合物包括上述示例性化合物的变化，其中α螺旋终止于相应于sCT第22、23、24、25、26或27位。换言之，化合物8-18h淀粉状蛋白毒素19-24sCT也确切的描述为，该化合物仅为上述8-18h淀粉状蛋白毒素19-27sCT截短至第24位。如另一实施例，由于应用于(13Ala14Asp15Ala)8-18h淀粉状蛋白毒素19-22的上述语言，也具体描述了化合物(13Ala14Asp15Ala)8-18h淀粉状蛋白毒素19-23。

在特定实施方案中，LHC肽的C-末端尾部包含h淀粉状蛋白毒素自第27、28、29、30、31、32或33位至第36或37位的氨基酸。在其它实施方案中，LHC肽的C-末端尾部包含sCT自第27或28位至第32位的氨基酸；然而，当环区域来自降钙素或降钙素类似物，且α螺旋区域来自降钙素或降钙素类似物时，C-末端尾部的最后位置不是Pro、Hyp、Hse或Hse的衍生物。作为选择或另外地，淀粉状蛋白毒素和降钙素的上述α螺旋还可包含(²⁷Tyr)h淀粉状蛋白毒素、(²⁹Arg)h淀粉状蛋白毒素、(³²Val)h淀粉状蛋白毒素、(³²Thr)h淀粉状蛋白毒素、(³⁴Glu)h淀粉状蛋白毒素、(³⁵Lys)h淀粉状蛋白毒素、(³⁶Phe)h淀粉状蛋白毒素、(³⁶Ala)h淀粉状蛋白毒素、(³⁷Phe)h淀粉状蛋白毒素、(³⁰Asn)sCT、(³²Tyr)sCT或其任意组合中的一种或多种的取代。

在一种实施方案中，LHC肽的C-末端尾部可表示为Xaa28 Xaa29Xaa30 Xaa31 Xaa32 Xaa33 G Xaa35 Xaa36 Xaa37 Xaa38(SEQ IDNO：61)，其中

Xaa28是Lys、Tyr或不存在；

Xaa29是Ser、Pro或不存在；

Xaa30是Ser、Pro、Arg或不存在；

Xaa31是Thr或不存在；

Xaa32是Asn或不存在；

Xaa33是Val、Thr或不存在；

Xaa35是Ser、Glu

Xaa36是Asn、Lys或Gly；

Xaa37是Thr、Phe或Ala；

Xaa38是Tyr、Phe、Pro或不存在；

附带条件是，当LHC激动剂的环区域来自降钙素或降钙素类似物且α螺旋区域来自降钙素或降钙素类似物时，C-末端尾部的最后位置不是Pro、Hyp、Hse或Hse的衍生物。

再次说明，马库什基团中的各成员或其组合是本发明的另一种实施方案，且不被视为单一的单元。还预期C-末端尾部可包含对本文所述化合物的不超过一、二或三个比如取代、插入、缺失和/或衍生这样的修饰。

LHC激动剂的C-末端尾部的例子包括，但不限于，27-37r淀粉状蛋白毒素、(²⁷Tyr²⁹Arg³²Thr)27-37r淀粉状蛋白毒素、(²⁹Arg³²Thr)28-37r淀粉状蛋白毒素、30-37h淀粉状蛋白毒素、(³²Thr)30-37h淀粉状蛋白毒素、(³⁵Lys³⁶Ala³⁷Phe)30-37h淀粉状蛋白毒素、30-36h淀粉状蛋白毒素、(³²Val)30-36h淀粉状蛋白毒素、(³⁴Glu³⁶Phe)30-36h淀粉状蛋白毒素、31-37h淀粉状蛋白毒素(Amyin)、31-36h淀粉状蛋白毒素、33-36h淀粉状蛋白毒素、33-37h淀粉状蛋白毒素、28-32sCT、(³⁰Asn³²Tyr)28-32sCT和27-32sCT。在其它实施方案中，该C-末端尾部包含氨基酸序列KSNFVPTN(SEQ IDNO：62)或SNFVPTNV(SEQ ID NO：63)。

还预期，还可以如前述段落中所述，对本发明的C-末端尾部作不超过一、二或三个比如取代、插入、缺失和/或衍生这样的修饰。LHC肽的C-末端尾部还可在C-末端包含修饰或附加的氨基酸。这样的修饰包括添加比如Lys、最多4个Lys、L-辛基甘氨酸、4ABU(4-氨基丁酸)、9Anc(9-氨基壬酸)和/或用于溶解性、稳定性或送递的基团这样的化合物。例子包括，但不限于，33-37h淀粉状蛋白毒素L-辛基甘氨酸、33-37h淀粉状蛋白毒素4ABU和33-37h淀粉状蛋白毒素9Anc。

在一个总的方面，用于本发明的LHC肽包含

(a)如本文所述的LHC激动剂环区域中的任一个；

(b)如本文所述的LHC激动剂α螺旋区域中的任一个；和

(c)任何如本文所述的LHC激动剂C-末端尾部，附带条件是，当环区域来自降钙素或降钙素类似物且α螺旋区域来自降钙素或降钙素类似物时，C-末端尾部的最后位置不是Pro、Hyp、Hse或Hse的衍生物。

在另一个总的方面，用于本发明的LHC肽包含

(a)在N-末端含有式(II)Xaa1或带有修饰的Xaa1的环区域；

(b)含有I型或II型α螺旋区域的α螺旋区域；

(c)C-末端尾部由SEQ ID NO：61所示，附带条件是，当环区域来自降钙素或降钙素类似物且α螺旋区域来自降钙素或降钙素类似物时，C-末端尾部的最后位置不是Pro、Hyp、Hse或Hse的衍生物。C-末端可包含其他修饰。

在又一方面，用于本发明的LHC肽包含式(III)的氨基酸序列：Xaa1 X Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Y Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Xaa18 Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28 Xaa29 Xaa30 Xaa31 Xaa32(SEQ ID NO：64)其中

Xaa1是A、C、hC、D、E、F、I、L、K、hK、R、hR、S、Hse、T、G、Q、N、M、Y、W、P、Hyp、H、V或不存在；

Xaa3是A、D、E、N、Q、G、V、R、K、hK、hR、H、I、L、M或不存在；

Xaa4是A、I、L、S、Hse、T、V、M或不存在；

Xaa5是A、S、T、Hse、Y、V、I、L或M；

Xaa6是T、A、S、Hse、Y、V、I、L或M；

Xaa8是A、V、I、L、F或M；

Xaa9是L、T、S、Hse、V、I或M；

Xaa10是G、H、Q、K、R、N、hK或hR；

Xaa11是K、R、Q、N、hK、hR或H；

Xaa12是L、I、V、F、M、W或Y；

Xaa13是A、F、Y、N、Q、S、Hse或T；

Xaa14是A、D、E、G、N、K、Q、R、H、hR或hK；

Xaa15是A、D、E、F、L、S、Y、I、V或M；

Xaa16是L、F、M、V、Y或I；

Xaa17是H、Q、N、S、Hse、T或V；

Xaa18是K、hK、R、hR、H、u(Cit)或n(Orn)；

Xaa19是F、L、S、Hse、V、I、T或不存在；

Xaa20是H、R、K、hR、hK、N、Q或不存在；

Xaa21是T、S、Hse、V、I、L、Q、N或不存在；

Xaa22是F、L、M、V、Y或I；

Xaa23是P或Hyp；

Xaa24是P、Hyp、R、K、hR、hK或H；

Xaa25是T、S、Hse、V、I、L、F或Y；

Xaa26是N、Q、D或E；

Xaa27是T、V、S、F、I或L；

Xaa28是G或A；

Xaa29是S、Hse、T、V、I、L或Y；

Xaa30是E、G、K、N、D、R、hR、hK、H或Q；

Xaa31是A、T、S、Hse、V、I、L、F或Y；和

Xaa32是F、P、Y、Hse、S、T或Hyp；

其中X和Y能够成键，且为独立选择的具有侧链的残基，所述侧链彼此化学结合以形成分子内连接，比如例如二硫键；酰胺键；可形成环内酰胺的烷基酸和烷基胺；可缩合和还原以形成烷基胺或亚胺桥的烷基醛或烷基卤化物和烷基胺；或可连接以形成烷基、链烯基、炔基、醚或硫醚键的侧链。烷基链可包括带有约1至约6个碳原子的低级烷基基团。在特定实施方案中，分子内连接可以是二硫键、酰胺键、亚胺键、胺键、烷基键和烯键。在特定实施方案中，X和Y独立选自Ser、Asp、Glu、Lys、Orn或Cys。在特定实施方案中，X和Y是Cys和Cys。在其它实施方案中，X和Y是Ser和Ser。仍在其他实施方案中，X和Y是Asp和Lys或Lys和Asp。

在又一方面，用于本发明的LHC肽包含式(IV)的氨基酸序列：Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Xaa18 Xaa19 Xaa20 Xaa21Xaa22 P Xaa24 T N Xaa27 G S Xaa30 Xaa31 Xaa32(SEQ ID NO：65)其中

Xaa1是A、C、D、F、I、K、S、T或不存在；

Xaa2是C、D、S或不存在；

Xaa3是A、D、N或不存在；

Xaa4是A、L、T或不存在；

Xaa5是A或S；

Xaa6是T、A、S或V；

Xaa7是C、K或A；

Xaa8是A、V、L或M；

Xaa9是L或T；

Xaa10是G、H或Q；

Xaa11是K、R、Q或hArg；

Xaa12是L、W或Y；

Xaa13是A、F、N、Q、S或T；

Xaa14是A、D、E、G、N、K、Q或R；

Xaa15是A、D、E、F、L、S或Y；

Xaa16是L或F；

Xaa17是H、Q、S或V；

Xaa18是K、R、hArg、u(Cit)或n(Orn)；

Xaa19是F、L、S或不存在；

Xaa20是H、Q或不存在；

Xaa21是T、N或不存在；

Xaa22是F、L、M、V或Y；

Xaa24是P或R；

Xaa27是T或V；

Xaa30是E、G、K或N；

Xaa31是A或T；和

Xaa32是F、P或Y。

在又一方面，用于本发明的LHC肽包含式(V)的氨基酸序列：Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 T Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 LXaa13 Xaa14 Xaa15 L Xaa17 Xaa18 Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 PXaa24 T N Xaa27 G S Xaa30 Xaa31 Xaa32，(SEQ ID NO：66)其中

Xaa1是A、C、F、I、K、S或不存在；

Xaa2是C、D或S；

Xaa3是A、D或N；

Xaa4是A、L或T；

Xaa5是A或S；

Xaa7是C或K；

Xaa8是A或V；

Xaa9是L或T；

Xaa10是G、H或Q；

Xaa11是K、R或hArg；

Xaa13是A、F、N、S或T；

Xaa14是A、D、E、G、N、Q或R；

Xaa15是A、E、F、L、S或Y；

Xaa17是H、S或V；

Xaa18是K、R、hArg、u(Cit)或n(Orn)；

Xaa19是F、L或S；

Xaa20是H或Q；

Xaa21是T或N；

Xaa22是F、L、M、V或Y；

Xaa24是P或R；

Xaa27是T或V；

Xaa30是E、G、K或N；

Xaa31是A或T；和

Xaa32是F、P或Y。

在一个总的方面，式(III)、(IV)或(V)的序列还包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或更多个取代、插入、缺失、延长和/或衍生的修饰。在特定实施方案中，式(III)、(IV)或(V)的序列在第22和23位氨基酸之间包含插入的Val。在其它实施方案中，式(III)、(IV)或(V)的序列在第22和23位之间包含插入的Gln。在又一个其他实施方案中，式(III)、(IV)或(V)的序列在第22和23位之间包含Gln-Thr-Tyr序列。在又一个其他实施方案中，式(III)、(IV)或(V)的序列在第22和23位之间包含Leu-Gln-Thr-Tyr序列(SEQ ID NO：67)。在另一个总的方面，式(III)、(IV)或(V)的修饰可以在N-末端。在特定实施方案中，式(III)、(IV)或(V)的N-末端部分具有添加的辛基甘氨酸。在其它实施方案中，式(III)、(IV)或(V)的N-末端部分具有添加的isocap。

在又一方面，用于本发明的LHC肽包含式(VI)的氨基酸序列：Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Xaa18 Xaa19 Xaa20 Xaa21Xaa22 P Xaa24 T N Xaa27 G S Xaa30 Xaa31 Xaa32(SEQ ID NO：68)其中

Xaa1是A、C、D、F、K、T或不存在；

Xaa2是A、C、D、S或不存在；

Xaa3是A、D、N或不存在；

Xaa4是A、L、T或不存在；

Xaa5是A或S；

Xaa6是A、S、T或V；

Xaa7是A、C或K；

Xaa8是A、L、M或V；

Xaa9是L或T；

Xaa10是G、H或Q；

Xaa11是K、Q或R；

Xaa12是L、W或Y；

Xaa13是A、N、Q、S或T；

Xaa14是A、D、E、G、K、N、Q或R；

Xaa15是A、D、E、F、L、S或Y；

Xaa16是F或L；

Xaa17是H、Q、S或V；

Xaa18是K或R；

Xaa19是F、L、S或不存在；

Xaa20是H、K、Q或不存在；

Xaa21是Q、T或不存在；

Xaa22是F、L或Y；

Xaa24是P或R；

Xaa27是T或V；

Xaa30是E、K或N；

Xaa31是A或T；和

Xaa32是F、Y或不存在。

在一个总的方面，式(VI)的序列还包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或更多个取代、插入、缺失、延长和/或衍生的修饰。在特定实施方案中，式(III)、(IV)、(V)或(VI)的序列在第24位包含缺失。

在又一方面，用于本发明的LHC肽包含氨基酸序列，所述氨基酸序列包含：

a)包含式(II)Xaa1的环区域；其中Xaa1包含氨基序列X Xaa2Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Y(SEQ ID NO：69)其中，

Xaa2是任意氨基酸或不存在；

Xaa3是Ala、Gly、Ser、Asp或不存在；

Xaa4是Asn、Ala、Asp、Gly或不存在；

Xaa5是Ala、Leu、Thr或Ser；

Xaa6是Ala、Ser或Thr；和

Xaa7是Ala、Ser、Val、Hse、(S)-2-氨基-3-羟基-甲基丁酸(Ahb)、(2S，3R)-2-氨基-3羟基-甲基正戊酸(Ahp)、d-Thr、Thr或其衍生物；

X和Y是能够成键的氨基酸，且为独立选择的具有侧链的残基，所述侧链可彼此化学结合以形成分子内连接，比如例如二硫键；酰胺键；由烷基酸和烷基胺形成的环内酰胺；通过缩合和还原烷基醛或烷基卤化物和烷基胺而形成的烷基胺或亚胺桥；和通过侧链的连接形成的烷基、链烯基、炔基、醚或硫醚键；

b)包含序列X1 V L Xaa10 Xaa11 L S Q Xaa15 L Xaa17 Xaa18 LQ T Xaa22 P Xaa24 T N T X1(SEQ ID NO：70)的I型α螺旋区域，其中

Xaa10是Gly或Aib；

Xaa11是Lys、Arg、Orn、hArg、Cit、hLys或Lys(for)；

Xaa15是Glu或Phe；

Xaa17是His或Aib；

Xaa18是Lys、Arg、Orn、hArg、Cit、hLys、Lys(for)、Lys(PEG 5000)；

Xaa22是Try或Leu；

Xaa24是Arg或Pro；和

X1是不存在或包含1-4个附加的氨基酸；和

c)包含序列Xaa28 Xaa29 Xaa30 Xaa31 Xaa32 Xaa33 G Xaa35Xaa36 Xaa37 Xaa38(SEQ ID NO：71)的C-末端尾部，其中

Xaa28是Lys、Tyr或不存在；

Xaa29是Ser、Pro或不存在；

Xaa30是Ser、Pro、Arg或不存在；

Xaa31是Thr或不存在；

Xaa32是Asn或不存在；

Xaa33是Val、Thr或不存在；

Xaa35是Ser、Glu

Xaa36是Asn、Lys或Gly；

Xaa37是Thr、Phe或Ala；

Xaa38是Tyr、Phe、Pro或不存在；

附带条件是，当环区域来自降钙素或降钙素类似物且α螺旋区域来自降钙素或降钙素类似物时，C-末端尾部的最后位置不是Pro、Hyp、Hse或Hse的衍生物。

a)包含Xaa1的环区域；

a)包含式(II)Xaa1的环区域；其中Xaa1包含氨基序列X Xaa2Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Y(SEQ ID NO：72)，其中，

Xaa2是任意氨基酸或不存在；

Xaa3是Ala、Gly、Ser、Asp或不存在；

Xaa4是Asn、Ala、Asp、Gly或不存在；

Xaa5是Ala、Leu、Thr或Ser；

Xaa6是Ala、Ser或Thr；和

Xaa7是Ala、Ser、Val、Hse、Ahb、Ahp、d-Thr、Thr或其衍生物；

b)含有序列X1 Xaa8 Xaa9 Xaa10 R Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15Xaa16 Xaa17 Xaa18 Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 P Xaa24 T N T X1(SEQ ID NO：73)的II型α螺旋区域，其中

Xaa8是Ala或Val；

Xaa9是Thr、Met或Leu；

Xaa10是Gln、Gly、His；

Xaa12是Leu或Thr；

Xaa13是Ala、Thr、Asn、Phe、Tyr、Ser或Thr；

Xaa14是Asn、Arg、Ala、Asp、Glu、Gln、Thr或Gly；

Xaa15是Phe、Leu、Ser、Glu、Ala、Asp或Tyr；

Xaa16是Leu或Asp；

Xaa17是Val、His、Ser、Phe或Aib；

Xaa18是His、Arg、Lys、Orn、hArg、Cit、hLys、Lys(for)或Lys(PEG5000)；

Xaa19是Leu、Ser或Phe；

Xaa20是Gln或His；

Xaa21是Thr或Asn；

Xaa22是Tyr、Val、Phe、Leu或Met；

Xaa24是Arg或Pro；和

X1是不存在或包含1-4个附加的氨基酸；和

c)含有序列Xaa28 Xaa29 Xaa30 Xaa31 Xaa32 Xaa33 G Xaa35Xaa36 Xaa37 Xaa38(SEQ ID NO：74)的C-末端尾部，其中

Xaa28是Lys、Tyr或不存在；

Xaa29是Ser、Pro或不存在；

Xaa30是Ser、Pro、Arg或不存在；

Xaa31是Thr或不存在；

Xaa32是Asn或不存在；

Xaa33是Val、Thr或不存在；

Xaa35是Ser或Glu

Xaa36是Asn、Lys或Gly；

Xaa37是Thr、Phe或Ala；

Xaa38是Tyr、Phe、Pro或不存在。

在又一个方面，用于本发明的LHC肽包括：

(SEQ ID NO：75)KCNTATCVLGKLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：76)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：77)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPPTNTGSNTY

(SEQ ID NO：78)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNVGSNTY

(SEQ ID NO：79)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLPPTNVGSNTY

(SEQ ID NO：80)KCNTATCVLGRLANFLHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：81)ACNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：82)KCBAATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：83)KCNTAACVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：84)CANLSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：85)异己酰-STAVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：86)CSNASTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：87)CSNLATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：88)CSNLSACVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：89)KCNTATCVLGRLSQELHKLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：90)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSGTP

(SEQ ID NO：91)CSALSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：92)Ac-(Agy)SNLST(Agy)VLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：92)Ac-K(Agy)NTAT(Agy)VLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：93)异己酰-STAVL(Aib)RLSQELRLQTYPRTNTGSGTP

(SEQ ID NO：94)异己酰-STAVLG[K(For)]LSQELH[K(For)]LQTYPRTNTGSGTP

(SEQ ID NO：95)异己酰-STAVL(Aib)[K(For)]LSQEL(Aib)[K(For)]LQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：96)异己酰-STAVL(Aib)[K(For)]LSQEL(Aib)[K(For)]LQTYPRTNVGSNTY

(SEQ ID NO：97)KCNTATCLLQQLQKLLQKLKQYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：98)KCNTASCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：99)KCNTAVCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：100)KCNTATCVLGRLSQELHRYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：101)KCNTATCVLGK(For)LSQELHK(For)LQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：102)KCNTA(d-Thr)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：103)KCNTA(dAh)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：104)Ac-ACNTATCVLGRLSQELHK(PEG5000)LQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：105)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：106)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：107)KCNTATCVLGKLSQELHKLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：108)KCNTSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：109)KCNTATCATQRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：110)KCNTATCATQRLSQELHRLQTYPRTNVGSNTY

(SEQ ID NO：111)KCNTSTCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSNTY

(SEQ ID NO：112)KCNTA(Hse)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：113)KCNTA(Ahb)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：114)KCNTA(Ahp)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：115)KCNTAT(OPO3H2)CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：116)KCNTATCVLG(Orn)LSQELH(Orn)LQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：117)KCNTATCVLG(Cit)LSQELH(Cit)LQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：118)KCNTATCVLG(hoMoK)LSQELH(homoK)LQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：119)L-辛基甘氨酸KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：120)N-3，6-二羟基辛酰-CNTATCVLGRLSQELHRLQTVPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：121)KCNTATCMLGRYTQDFHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：122)DSNLSTKVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：123)KDNTATKVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：124)CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：125)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(9Anc)

(SEQ ID NO：126)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(L-辛基甘氨酸)

(SEQ ID NO：127)N-异己酰-KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：128)KCNTATCVLG(homoR)LSQELH(homoR)LQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：129)FCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：130)KCNTATCVLGRLSQELH(Cit)LQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：131)KCNTATCVLGRLSQELH(Orn)LQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：132)ICNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：133)1-辛基甘氨酸-CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：134)异己酰-CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：135)KCNTATCVLG(Cit)LSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：136)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(4ABU)

(SEQ ID NO：137)异己酰-KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(4ABU)

(SEQ ID NO：138)KCNTSTCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSEAF

(gEQ ID NO：139)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPTNVGSEAF

(SEQ ID NO：140)KCNTATCVLGRLSRSLHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：141)KCNTATCVTHRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：142)KCNTATCVLGRLADFLHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：143)CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNT

(SEQ ID NO：144)KCNTATCVLGRLSQELHRLQNFVPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：145)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSETF

(SEQ ID NO：146)ACDTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：147)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSKAF

(SEQ ID NO：148)KCDTATCVTHRLAGLLSRSQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：149)KCNTATCVLGRLADALHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：150)KCNTATCVLGRLAAFLHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：151)SCNTATCVLGRLADFLHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：152)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTMPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：153)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTVPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：154)KCNTATCVLGRLNEYLHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：155)SCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：156)KCNTATCVLGRLTEFLHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：157)KCNTAFCVLGRLAEFLHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：158)KCNTATCVLGRLTDYLHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：159)KCNTATCVLGRLAQFLHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：160)KCNTATCVLGRLADFLHRFQTFPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：161)KCNTATCVLGRLADFLHRFHTFPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：162)KCNTATCVLGRLADFLHRFQTFPRTNTGSGTP

(SEQ ID NO：163)CNTATCVLGRLADFLHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：164)KCDTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：165)KCNTATCVLGRLFDFLHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：166)KCNTATCVLGRLAAALHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：167)TCDTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：168)CSNLSTCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSNTY

(SEQ ID NO：169)KCNTATCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSNTY

(SEQ ID NO：170)CSNLSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

(SEQ ID NO：171)KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY

在又一方面，用于本发明的LHC肽包括SEQ ID NO：75至171的生物学活性片段。生物学活性片段可包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或更多个氨基酸的缺失。在特定实施方案中，SEQ ID NO：75至171的氨基酸序列包含至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多个比如取代、插入、缺失和/或衍生这样的修饰。在其它实施方案中，SEQ ID NO：75至171的氨基酸序列具有不超过1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个比如取代、插入、缺失和/或衍生这样的修饰。在本发明的又一方面，本发明的化合物包括与SEQ ID NO：75至171中任一个具有至少75、80、85、90、95或97％氨基酸序列同一性的那些。同一性百分数通过用AlignX

modulein Vector NTI

(Invitrogen；Carlsbad CA)分析测定。意欲使所描述的各百分数同一性、或生物学活性片段或修饰的参考都可单独应用于各SEQ ID NO：。例如，所描述的各实施方案，片段、修饰或％同一性可应用于SEQ ID NO：75、76、77、78、44等，或任一组SEQ IDNO。

通常，淀粉状蛋白毒素激动剂或淀粉状蛋白毒素激动剂类似物被视为指通过直接或间接与一个或多个受体相互作用或结合来模拟淀粉状蛋白毒素的作用的化合物。因此，本发明的化合物可作为本文所公开的降钙素、淀粉状蛋白毒素、CGRP或这三种的任意组合的至少一种生物学作用的激动剂起作用或者与淀粉状蛋白毒素、降钙素或CGRP的受体的至少一种结合。相反，淀粉状蛋白毒素拮抗剂通过直接或间接与一种或多种受体相互作用或结合，抑制淀粉状蛋白毒素的作用。这样的相互作用或结合事件包括影响生长素释放肽水平的那些。

预期在本发明中使用的淀粉状蛋白毒素拮抗剂包括AC66(sCT[8-32])(SEQ ID NO：172)和比如AC187(Ac 30Asn，32Tyr-sCT[8-32])(SEQ ID NO：173)这样的25氨基酸鲑鱼降钙素肽片段的衍生物，开发为CGRP受体的选择性淀粉状蛋白毒素受体拮抗剂。其他有用的拮抗剂包括第5,625,032和5,580,953号美国专利所述的拮抗剂，这些专利引入本文作为参考。这样的拮抗剂化合物包括含有式(VII)：X-R1-Thr-Gln-R2-Leu-Ala-Asn-R3-Leu-Val-Arg-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Val-Gly-R4-Asn-Thr-Tyr-NH2(SEQ ID NO：174)的那些

其中

R1是Ala或键；

R2是Arg、Gln、Lys、Asn或Leu；

R3是Gln、Glu、Asn、Asp或Phe；

R4是Ala或Ser；和

X是氢或乙酰基。

淀粉状蛋白毒素拮抗剂可以是N-末端乙酰化的或非乙酰化的，且包括该分子的酸和酰胺形式。淀粉状蛋白毒素拮抗剂的例子包括，但不限于，

乙酰基-Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu Val Arg LeuGln Thr Tyr Pro Arg Thr Asn Val Gly Ser Asn Thr Tyr(SEQ ID NO：175)，Ala Thr Gln GlnLeu Ala Asn Gln Leu Val Arg Leu Gln Thr Tyr Pro Arg Thr Asn Val Gly Ser Asn Thr Tyr(SEQ ID NO：176)，Ala Thr Gln Leu Leu Ala Asn Gln Leu Val Arg Leu Gln Thr Tyr ProArg Thr Asn Val Gly Ser Asn Thr Tyr(SEQ ID NO：177)，Ala Thr Gln Arg Leu Ala AsnGln Leu Val Arg Leu Gln Thr Tyr Pro Arg Thr Asn Val Gly Ser Asa Thr Tyr(SEQ IDNO：178)，Ala Thr Gln Leu Leu Ala Asn Glu Leu Val Arg Leu Gln Thr Tyr Pro Arg ThrAsn Val Gly Ser Asn Thr Tyr(SEQ ID NO：179)，Ala Thr Gln Gln Leu Ala Asn Glu LeuVal Arg Leu Gln Thr Tyr Pro Arg Thr Asn Val Gly Ser Asn Thr Tyr(SEQ ID NO：180)。

测试具有淀粉状蛋白毒素活性的化合物的方法是本领域已知的。测试淀粉状蛋白毒素激动剂或拮抗剂的示例性筛选方法和测定描述于本文实施例中，特别是实施例4，以及第5,264,372和5,686,411号美国专利，其引入本文作为参考。

通过进行各种筛选测定可以证实并定量作为淀粉状蛋白毒素激动剂和/或类似物的活性，所述测定包括依核(nucleus aceumben)受体结合测定，之后进行比目鱼肌测定、胃排空测定，或通过诱导哺乳动物低血钙症或降低哺乳动物餐后高血糖的能力。

受体结合测定是一种测量化合物与膜结合的淀粉状蛋白毒素受体特异性结合的能力的竞争性测定，第5,264,372和5,686,411号美国专利对其作了描述，这些公开文本引入本文作为参考。该测定中所使用的膜制剂的优选来源是基底前脑，其包含来自依核及其周围区域的膜。所测定的化合物与125I Bolton Hunter大鼠淀粉状蛋白毒素竞争结合这些受体制剂。将结合量(B)作为配体浓度对数的函数作图得到竞争曲线，借助计算机利用对4-参数逻辑方程的非线性回归分析(INPLOT程序；GraphPad Software，San Diego，Calif.)或DeLean等人的ALLFIT程序(ALLFIT，版本2.7(NIH，Bethesda，Md.20892))对所述竞争曲线进行分析。Munson和Rodbard(1980)Anal.Biochem.107：220-239。

对比目鱼肌中的淀粉状蛋白毒素激动剂/类似物的生物学活性的测定可利用前述方法进行(Leighton等人(1988)Nature 335：632-635；Cooper等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85：7763-7766)，在该测定中可以通过测量对胰岛素-刺激的糖原合成的抑制来评估淀粉状蛋白毒素激动剂活性。简言之，示例性方法包括从禁食12小时的雄性Wistar大鼠制得的比目鱼肌条。在附着到不锈钢夹子上之前将肌腱结扎。将肌肉条在含有3.5ml Krebs-Ringer碳酸氢盐缓冲液、7mM N-2-羟乙基-哌嗪(peperazine)-N’-2-乙磺酸，pH 7.4和5.5mM丙酮酸盐的锥形瓶中预温育。密封瓶，并持续充入比率为19∶1(v/v)的O₂和CO₂。肌肉于37℃下在置于振荡水浴的该培养基中预温育30分钟后，将肌肉条转移到含有相同添加了[U-14C]葡萄糖(0.5μCi/ml)和胰岛素(100μU/ml)的培养基(除丙酮酸盐外)的类似小瓶中。密封瓶，并在1小时温育的初始15分钟内再次充气。温育阶段结束时，将肌肉吸干(blotted)并在液氮中快速冷冻。温育培养基中的乳酸浓度可通过分光光度法测定，并测量糖原中掺入的[U-14C]葡萄糖。淀粉状蛋白毒素拮抗剂活性可通过测量100nM大鼠淀粉状蛋白毒素和淀粉状蛋白毒素拮抗剂存在下胰岛素-刺激的糖原合成的恢复来评估。

测定胃排空率的方法公开于，例如，Young等人中。在酚红法中，有意识的大鼠通过管饲法接受含有甲基纤维素和酚红指示剂的acoloric gel。管饲法后二十分钟，用三氟氯溴甲烷麻醉动物，使胃部暴露并在幽门和食道下端括约肌处夹住，取出并置入碱性溶液中。胃容量可得自碱性溶液中的酚红强度，后者可通过560am波长处的吸光度来测量。在氚标记葡萄糖法中，用溶于水中的氚标记葡萄糖管饲有意识的大鼠。在尾部轻柔限制大鼠，尾尖用利多卡因麻醉。在各个时间点收集从尾血中分离的血浆中的氚并在β计数器中检测。测试化合物通常在管饲法前约一分钟施用。

淀粉状蛋白毒素激动剂和拮抗剂化合物在受体结合测定中可表现小于约1至5nM数量级的活性，优选小于约1nM和更优选小于约50pM。在比目鱼肌测定中，淀粉状蛋白毒素激动剂化合物可表现小于约1至10微摩尔数量级的EC50值。在比目鱼肌测定中，淀粉状蛋白毒素拮抗剂可表现小于约1至2微摩尔数量级的IC₅₀值。在胃排空测定中，优选的激动剂化合物显示小于100μg/大鼠数量级的ED₅₀值。拮抗剂化合物在胃排空测定中将不显示效果或显示相反的效果。

在制备化合物的一种示例方法中，本发明的化合物可通过标准的固相肽合成技术来制备，并优选使用自动或半自动肽合成仪。一般，用这样的技术，在比如二环己基碳二亚胺和1-羟基苯并三唑这样的偶联剂以及比如二异丙基乙胺这样的碱存在下，α-N-氨基甲酰保护的氨基酸和附着于位于树脂上的生长中的肽链的氨基酸于室温下在比如二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮或二氯甲烷这样的惰性溶剂中偶联。用比如三氟乙酸或哌啶这样的试剂从所得肽-树脂上除去α-N-氨基甲酰保护基，并重复偶联反应，其中下一个所需N-保护氨基酸添加到肽链上。适宜的N-保护基团是本领域熟知的，其中叔丁氧羰基(t-butyloxycarbonyl)(tBoc)和芴基甲氧羰基(Fmoc)是本文优选的。其它合成或表达淀粉状蛋白毒素和淀粉状蛋白毒素激动剂以及纯化它们的方法是本领域技术人员已知的。

用于本发明的抗肥胖剂还包括毒蜥外泌肽激素和毒蜥外泌肽激动剂。天然毒蜥外泌肽激素是本领域已知的，功能性的肽类似物和衍生物也是本领域已知的。本文中描述了特定的天然肽、肽类似物和衍生物，然而应当认识到，任何已知的表现本领域已知的激素活性的毒蜥外泌肽均可用于本发明。示例性的毒蜥外泌肽包括毒蜥外泌肽-3(His Ser Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu GluGlu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro SerSer Gly Ala Pro Pro Pro Ser(SEQ ID NO：181))和毒蜥外泌肽-4(HisGly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu GluAla Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser SerGly Ala Pro Pro Pro Ser(SEQ ID NO：182))。

本领域已知的任何毒蜥外泌肽类似物或衍生物均可用于本发明。在一种实施方案中，毒蜥外泌肽类似物和衍生物具有天然毒蜥外泌肽的至少一种激素活性。在特定实施方案中，该毒蜥外泌肽类似物是天然毒蜥外泌肽能特异性结合的受体的激动剂。毒蜥外泌肽化合物包括毒蜥外泌肽类似物，其中一个或多个天然存在的氨基酸被除去或者被另一种氨基酸替代。如本领域已知的，这样的毒蜥外泌肽类似物可以是酰胺化的或者是酸形式。

在一种实施方案中，毒蜥外泌肽类似物与天然或天然存在的毒蜥外泌肽相比可具有一个或多个氨基酸取代、缺失、倒置或添加。因此，与天然存在的毒蜥外泌肽，例如，毒蜥外泌肽-4相比，毒蜥外泌肽类似物的氨基酸序列可具有一个或多个氨基酸取代、添加或缺失。在一种实施方案中，与比如毒蜥外泌肽-4这样的天然存在的毒蜥外泌肽相比，毒蜥外泌肽类似物具有带有约30或更少、25或更少、20或更少、15或更少、10或更少、5或更少、4或更少、3或更少、2或更少、或1或更少的取代、添加或缺失的氨基酸序列。

示例性毒蜥外泌肽化合物包括毒蜥外泌肽-4的激动剂类似物，包括但不限于，¹⁴Leu，²⁵Phe-毒蜥外泌肽-4(His Gly Glu Gly Thr Phe ThrSer Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe IleGlu Phe Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser(SEQ ID NO：183)、⁵Ala，¹⁴Leu，²⁵Phe-毒蜥外泌肽-4(His Gly Glu GlyAla Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu Glu Glu Ala Val ArgLeu Phe Ile Glu Phe Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala ProPro Pro Ser(SEQ ID NO：184))、和¹⁴Leu，²²Ala，²⁵Phe-毒蜥外泌肽-4(His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu GluGlu Glu Ala Val Arg Leu Ala Ile Glu Phe Leu Lys Asn Gly Gly ProSer Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser(SEQ ID NO：185))。其它的示例性毒蜥外泌肽类似物包括，但不限于，毒蜥外泌肽-4(1-30)(His GlyGlu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu AlaVal Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly(SEQ IDNO：186))、毒蜥外泌肽-4(1-28)酰胺(His Gly Glu Gly Thr Phe ThrSer Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe IleGlu Trp Leu Lys Asn-NH₂(SEQ ID NO：187))、¹⁴Leu，²⁵Phe毒蜥外泌肽-4(1-28)酰胺(His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser LysGln Leu Glu Glu Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Phe Leu Lys Asn-NH₂(SEQ ID NO：188))、和¹⁴Leu，²²Ala，²⁵Phe毒蜥外泌肽-4(1-28)酰胺(His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu GluGlu Glu Ala Val Arg Leu Ala Ile Glu Phe Leu Lys Asn-NH₂(SEQ IDNO：189))。

另外的示例性毒蜥外泌肽激动剂描述于第10/181,102号美国专利申请和第PCT/US98/16387号PCT申请，二者都要求了1997年8月8日提交的第No.60/055,404号美国专利申请的利益，所有申请均引入本文作为参考。示例性毒蜥外泌肽激动剂包括第10/181,102号美国专利申请和第PCT/US98/16387号PCT申请中的式(I)、式(II)和式(III)的化合物。

其它的毒蜥外泌肽激动剂描述于第09/554,533号美国专利申请和第PCT/US98/24210号PCT申请，两者都要求了1997年11月14日提交的第60/065,442号美国临时申请的利益，所有申请均引入本文作为参考。其它的毒蜥外泌肽激动剂描述于第09/554,531号美国专利申请和第PCT/US98/24273号PCT申请，两者都要求了1997年11月14日申请的第60/066,029号美国临时申请的利益，所有申请均引入本文作为参考。其它的毒蜥外泌肽激动剂描述于1997年8月8日提交的第PCT/US97/14199号PCT申请，它是1996年8月8日提交的第08/694,954号美国专利申请的部分继续申请，两者均引入本文作为参考。其它的毒蜥外泌肽激动剂描述于第6,956,026号美国专利，其要求了1997年1月7日提交的第60/034,905号美国临时申请的优先权，两者均引入本文作为参考。其它的毒蜥外泌肽类似物和衍生物描述于2003年12月19日提交的US 2004/0209803 A1中，其引入本文作为参考。

本发明中的抗肥胖剂还包括睫状神经营养因子(CNTF)、CNTF-相关多肽、修饰的CNTF多肽、CNTF激动剂和CNTF类似物，包括但不限于AXOKINE

(Regeneron)。适于本发明方法中使用的含有CNTF、CNTF-相关多肽和CNTF和/或CNTF-相关多肽的组合物是本领域已知的。CNTF多肽、CNTF-相关多肽、修饰的CNTF多肽、CNTF激动剂、类似物、衍生物、制品、制剂、药物组合物、剂量和施用途径以前已经描述于，例如，第6,680,291和6,767,894号美国专利和第WO 94/09134、WO 98/22128和WO 99/43813号PCT申请公开文本中，其全文引入本文作为参考。

本发明的抗肥胖剂还包括5-羟色胺(5HT)转运抑制剂，包括但不限于，帕罗西汀、氟西汀、氟苯丙胺、氟伏沙明、舍曲林(sertraline)和依米帕明。本发明的抗肥胖剂还包括选择性5-羟色胺重摄取抑制剂，包括但不限于右旋氟苯丙胺、氟西汀、西布茶明(例如，MERIDIA

)和第6,365,633号美国专利以及第WO 01/27060和WO01/162341号PCT专利申请公开文本中描述的那些，其全文引入本文作为参考。这样的5HT转运抑制剂和5-羟色胺重摄取抑制剂、类似物、衍生物、制品、制剂、药物组合物、剂量和施用途径在之前已经描述过了。

用于本发明的抗肥胖剂还包括选择性5-羟色胺激动剂和选择性5-HT2C受体激动剂，包括但不限于，第3,914,250号美国专利；和第WO 02/36596、WO 02/48124、WO 02/10169、WO 01/66548、WO02/44152；WO 02/51844、WO 02/40456和WO 02/40457号PCT申请公开文本，其全文引入本文作为参考。这样的选择性5-羟色胺激动剂和5-HT2C受体激动剂、含有这样的激动剂组合物、以及适于本发明方法中使用的施用途径是本领域已知的。参见，例如，Halford等人(2005)Curr.Drug Targets 6：201-213和Weintraub等人(1984)Arch.Intern.Med.144：1143-1148。

用于本发明的抗肥胖剂还包括中央大麻素受体(CB-1受体)的拮抗剂/逆激动剂，包括但不限于，利莫那班(Sanofi Synthelabo)、和SR-147778(Sanofi Synthelabo)。CB-1拮抗剂/逆激动剂，衍生物、制品、制剂、药物组合物、剂量和施用途径之前已经描述于，例如，第6,344,474、6,028,084、5,747,524、5,596,106、5,532,237、4,973,587、5,013,837、5,081,122、5,112,820、5,292,736、5,624,941号美国专利；第EP-656 354和EP-658546号欧洲专利申请；和第WO96/33159、WO 98/33765、WO 98/43636、WO 98/43635、WO 01/09120、WO 98/31227、WO 98/41519、WO 98/37061、WO 00/10967、WO00/10968、WO 97/29079、WO 99/02499、WO 01/58869和WO02/076949号PCT申请公开文本中，其全文引入本文作为参考。

用于本发明的抗肥胖剂还包括黑皮质素和黑皮质素激动剂。黑皮质素是来自阿黑皮素原基因的肽，其包括α-黑素细胞-刺激激素(α-MSH)和促肾上腺皮质激素(ACTH)，且五种黑皮质素受体MC1-5R是已知的。MC4R在能量平衡和肥胖中起作用。参见，例如，Anderson等人(2001)Expert Opin.Ther.Patents 11：1583-1592，Speake等人(2002)Expert Opin.Ther.Patents 12：1631-1638，Bednarek等人(2004)Expert Opin.Ther.Patents 14：327-336。黑皮质素激动剂，包括但不限于，MC4R激动剂，且适于本发明方法使用的含有这样的激动剂的组合物是本领域已知的。MCR激动剂、MC4R激动剂、衍生物、制品、制剂、药物组合物、剂量和施用途径之前已描述于，例如，以下PCT专利公开文本中，其全文引入本文作为参考：WO03/007949、WO 02/068388、WO 02/068387、WO 02/067869、WO03/040117、WO 03/066587、WO 03/068738、WO 03/094918和WO03/031410。

用于本发明的抗肥胖剂还包括代谢型谷氨酸亚型5受体(mGluR5)拮抗剂，包括但不限于，比如2-甲基-6-(苯乙炔基)-吡啶(MPEP)和(3-[(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)乙炔基]吡啶)(MTEP)这样的化合物和那些描述于Anderson等人(2003)J.Eur.J.Pharmacol.473：35-40；Cosford等人(2003)Bioorg.Med.Chem.Lett.13(3)：351-4；和Anderson等人(2002)J.Pharmacol.Exp.Ther.303：1044-1051中的化合物。

用于本发明的抗肥胖剂还包括托吡酯(TOPIMAX(OrthoMcNeil Pharmaceuticals)，示为抗抽搐剂和抗抽搐剂，但也显示出提高体重减轻。

用于本发明的抗肥胖剂还包括神经肽Y1(NPY1)拮抗剂和NPY5拮抗剂。NPY1和NPY5拮抗剂是本领域已知的。参见，例如Duhault等人(2000)Can.J Physiol.Pharm.78：173-185，和第6,124,331、6,214,853和6,340,683号美国专利。NPY1和NPY5拮抗剂、衍生物、制品、制剂、药物组合物、剂量和施用途径之前已描述过。可用于本发明的NPY1拮抗剂，包括：第6,001,836号美国专利；和第WO96/14307、WO 01/23387、WO 99/51600、WO 01/85690、WO 01/85098、WO 01/85173和WO 01/89528号PCT申请公开文本，其全文引入本文作为参考。可用于本发明的NPY5拮抗剂，包括但不限于，第6,140,354、6,191,160、6,258,837、6,313,298、6,337,332、6,329,395、6,340,683、6,326,375和6,335,345号美国专利；第EP-01010691和EP-01044970欧洲专利；和第WO 97/19682、WO 97/20820、WO97/20821、WO 97/20822、WO 97/20823、WO 98/27063、WO 00/64880、WO 00/68197、WO 00/69849、WO 01/09120、WO 01/85714、WO01/85730、WO 01/07409、WO 01/02379、WO 01/02379、WO 01/23388、WO，01/23389、WO 01/44201、WO 01/62737、WO 01/62738、WO01/09120、WO 02/22592、WO 0248152、WO 02/49648和WO 01/14376号PCT专利公开文本中描述的那些化合物。

用于本发明的抗肥胖剂还包括黑色素浓缩激素(MCH)拮抗剂，其包括比如T-226296(Takeda)这样的黑色素浓缩激素1受体(MCH1R)拮抗剂和黑色素浓缩激素2受体(MCH2R)拮抗剂。MCH受体拮抗剂，衍生物、制品、制剂、药物组合物、剂量和施用途径之前已描述于，例如，第2005/0009815、2005/0026915、2004/0152742、2004/0209865号美国专利申请公开文本；第WO01/82925、WO 01/87834、WO 02/06245、WO 02/04433和WO 02/51809号PCT专利申请公开文本；和第JP 13226269号日本专利申请中，其全文引入本文作为参考。

用于本发明的抗肥胖剂还包括阿片样物质拮抗剂，包括但不限于描述于第WO 00/21509号PCT申请中的那些。可用于本发明的特定阿片样物质拮抗剂包括但不限于，纳美芬(REVEX

)、3-甲氧基纳曲酮纳洛酮(3-methoxynaltrexone naloxone)、纳曲酮、纳洛肼(naloxonazine)、β-funaltrexamine、δ1([D-Ala2，Leu5，Cys6]-英脑啡肽(DALCE)、异硫氰酸纳屈吲哚(naltrindole isothiocyanate)和nor-binaltorphamine。

用于本发明的抗肥胖剂还包括食欲肽拮抗剂，包括但不限于，描述于第WO 01/96302、WO 01/68609、WO 02/51232和WO 02/51838号PCT专利申请中的那些。可用于本发明的特定食欲肽拮抗剂包括但不限于，SB-334867-A。

用于本发明的抗肥胖剂还包括神经肽Y2(NPY2)激动剂，包括但不限于，比如PYY3-36(例如，Batterham等人(2003)Nature418：650-654)、NPY3-36这样的化合物，和其它比如N乙酰基[Leu(28，31)]NPY 24-36(White-Smith等人(1999)Neuropeptides33：526-533，TASP-V(Malis等人(1999)Br.J.Pharmacol.126：989-996)、环-(28/32)-Ac-[Lys28-Glu32]-(25-36)-pNPY(Cabrele等人(2000)J.Pept.Sci.6：97-122)这样的Y2激动剂。本发明的抗肥胖剂还包括神经肽Y4(NPY4)激动剂，包括但不限于，比如胰肽(PP)(例如，Batterham等人(2003)J.Clin.Endocrinol.Metab.88：3989-3992)这样的化合物和比如1229U91(Raposinho等人(2000)Neuroendocrinology 71：2-7)这样的其他Y4激动剂。NPY2激动剂和NPY4激动剂、衍生物、制品、制剂、药物组合物、剂量和施用途径之前已描述于，例如，第2002/0141985号美国专利公开文本和第WO2005/077094号PCT申请公开文本中。

用于本发明的抗肥胖剂还包括组胺3(H3)拮抗剂/逆激动剂，包括但不限于，描述于第WO 02/15905号PCT申请中的那些，O-[3-(1H-咪唑-4-基)丙醇]氨基甲酸酯(Kiec-Kononowicz等人(2000)Pharmazie 55：349-355)、含哌啶的组胺H3-受体拮抗剂(Lazewska等人(2001)Pharmazie 56：927-932)、二苯酮衍生物和相关化合物(Sasse等人(2001)Arch.Pharm.(Weinheim)334：45-52)、取代的N-苯基氨基甲酸酯(Reidemeister等人(2000)Pharmazie 55：83-86)、和proxifan衍生物(Sasse等人(2000)J.Med.Chem.43：3335-3343)。用于本发明的特定H3拮抗剂/逆激动剂包括但不限于，thioperamide、3-(1H-咪唑-4-基)丙基N-(4-戊烯基)氨基甲酸酯、clobenpropit、iodophenpropit、imoproxifan和GT2394(Gliatech)。

用于本发明的抗肥胖剂还包括缩胆囊肽(CCK)和CCK激动剂。用于本发明的缩胆囊肽-A(CCK-A)激动剂包括但不限于，描述于第5,739,106号美国专利中的那些。特定CCK-A激动剂包括，但不限于，AR-R 15849、GI 181771、JMV-180、A-71378、A-71623和SR146131。

用于本发明的抗肥胖剂还包括比如描述于第WO 01/87335和WO 02/08250号PCT申请公开文本中的那些的生长素释放肽拮抗剂。生长素释放肽拮抗剂也称为GHS(生长激素促分泌素受体)拮抗剂。因此本发明的组合物和方法包括用GHS拮抗剂取代生长素释放肽拮抗剂。

剂量/制剂

抗肥胖剂和重量诱导剂(本文中这一部分称作“化合物”)可以以单剂或多剂，单独施用或与药学可接受载体或赋形剂组合施用。这些药物化合物可与药学可接受载体或稀释剂以及任何其他已知的佐剂和赋形剂根据比如Remington’s Pharmaceutical Sciences by E.W.Martin中公开的常规技术配制。亦参见Wang等人(1988)J.ofParenteral Sci.And Tech.，Technical Report No.10，Supp.42：2S。

通常，化合物可配制成向患者施用的稳定安全的药物组合物。预期用于本发明方法的药物制剂可包含约0.01至1.0％(w/v)、在特定情况中0.05至1.0％的化合物，使最终组合物的pH为约3.0至约7.0的约0.02至0.5％(w/v)乙酸盐、磷酸盐、柠檬酸盐或谷氨酸盐缓冲液；约1.0至10％(w/v)的碳水化合物或多元醇强壮剂(tonicifier)和，任选地，约0.005至1.0％(w/v)选自间甲酚，苄醇，甲基、乙基、丙基和丁基对羟基苯甲酸酯和苯酚的防腐剂。如果所配制的肽包括在多次使用的产品中，则这样的防腐剂通常包括在内。

在本发明的特定实施方案中，本发明的药物制剂可包含一定浓度范围的化合物，例如，在该实施方案中为约0.01％至约98％w/w，或为约1至约98％w/w，或优选80％至90％w/w，或优选约0.01％至约50％w/w，或更优选约10％至约25％w/w。可以使用足量的用于注射用水以获得所需的溶液浓度。

如果需要的话，还可以存在比如氯化钠这样的附加的强壮剂(tonicifying agent)，以及其它的已知赋形剂。在一些情况下，这样的赋形剂对于维持化合物的整体张度是有用的。目前描述的制剂中可包含各种浓度的赋形剂。例如，可包括浓度范围为约0.02％至约20％w/w，优选约0.02％至0.5％w/w，约0.02％至约10％w/w，或约1％至约20％w/w的赋形剂。此外，与目前的制剂本身相似，所包括的赋形剂可以是固体(包括粉末)、液体、半固体或凝胶形式。

药物制剂可以以各种形式组成，例如，固体、液体、半固体或液体。术语“固体”，如本文所使用的，意指包括该术语的所有正常用途，包括例如，粉末和冻干制剂。当前描述的制剂可以是冻干的。

术语缓冲液、缓冲溶液和缓冲的溶液，当关于氢离子浓度或pH使用时，指系统，尤其是水性溶液，在添加酸或碱或用溶剂稀释后抵抗pH变化的能力。缓冲的溶液的特征，是存在弱酸和弱酸的盐、或弱碱和弱碱的盐，所述溶液在加入酸或碱后发生小的pH变化。前述系统的例子是乙酸和乙酸钠。pH的改变是轻微的，只要所加入的水合氢离子或羟离子不超过缓冲系统将其中和的能力。

如本文所述，多种液体载体适用于肽抗肥胖剂的制剂中，例如，水或水性/有机溶剂混合物或悬浮液。

当是液体形式时，用于本发明的肽制剂的稳定性通过将制剂的pH维持在约3.0至约7.0的范围内而得到增强。在特定实施方案中，制剂的pH被维持在约3.5至5.0，或约3.5至6.5的范围内，在一些实施方案中为约3.7至4.3，或约3.8至4.2。在一些实施方案中，pH可以是约4.0。尽管不寻求受该理论的限制，但目前所理解的是，若药物制剂的pH超过5.5，则会加速肽的化学降解由此使得保存期限小于约两年。

在特定实施方案中，抗肥胖剂的缓冲液是乙酸盐缓冲液(优选终制剂浓度为约1-5至约60mM)、磷酸盐缓冲液(优选终制剂浓度为约1-5至约30mM)或谷氨酸盐缓冲液(优选终制剂浓度为约1-5至约60mM)。在一些实施方案中，缓冲液是乙酸盐(优选终制剂浓度为约5至约30mM)。

抗肥胖剂制剂中可包括稳定剂，但重要的是，它不是必需的。然而，如果包括的话，用于本发明实践的稳定剂是碳水化合物和多元醇。用于本发明实践的合适稳定剂是约1.0至10％(w/v)的碳水化合物和多元醇。多元醇和碳水化合物在其主链上共有相同的特征，也即，-CHOH-CHOH-，其负责稳定蛋白质。多元醇包括比如山梨糖醇、甘露糖醇、甘油和聚乙二醇(PEGs)这样的化合物。这些化合物是直链分子。另一方面，比如甘露糖、核糖、蔗糖、果糖、海藻糖、麦芽糖、肌醇和乳糖这样的碳水化合物是可包含酮基或醛的环形分子。已证实这两类化合物对于稳定蛋白质不被由升高的温度和冻融或冷冻干燥过程引起的变性有效。适宜的碳水化合物包括：半乳糖、阿拉伯糖、乳糖或任何其他对糖尿病患者无不利作用的碳水化合物，也即，碳水化合物不被代谢以形成不可接受的血液中高浓度的葡萄糖。这样的碳水化合物在本领域中已知适于糖尿病。蔗糖和果糖适用于非糖尿病应用(例如用于治疗肥胖)的化合物。

在特定实施方案中，如果包括了稳定剂，就用比如山梨糖醇、甘露糖醇、肌醇、甘油、木糖醇和聚丙二醇/聚乙二醇共聚物以及分子量为200、400、1450、3350、4000、6000和8000的各种聚乙二醇这样的多元醇来稳定化合物。在一些实施方案中，甘露糖醇是优选的多元醇。本发明的冻干制剂的另一个有用的特征，是用与用于维持其稳定性的相同的制剂组分来维持本文所述冻干制剂的张度。在一些实施方案中，甘露糖醇是用于此目的的优选多元醇。

美国药典(The United States Pharmacopeia，USP)规定，多剂量容器所含的制品中必须添加制菌或制真菌浓度的抗微生物剂。抗微生物剂必须在使用时以足够的浓度存在以预防在用皮下注射针和注射器，或用其他的比如笔注射器这样的侵入性送递方式，抽出部分内容物时不经意导入制品中的微生物的繁殖。抗微生物剂应当进行评估以确保其与制剂中所有其他组分的相容性，也要评估它们在总制剂中的活性以确保在一种制剂中有效的特定试剂在另一种制剂中不会无效。具体抗微生物剂在一种制剂中有效而在另一种制剂中无效是不常见的。

在通常的药学概念中，防腐剂是预防或抑制微生物生长且可为此目的添加到药物制剂中以避免该由微生物造成的对该制剂的随后损害的物质。尽管防腐剂的量不大，但它仍然会影响肽的总体稳定性。

尽管用于药物组合物的防腐剂可为0.005至1.0％(w/v)，但在一些实施方案中各防腐剂单独或与其他防腐剂组合的范围是：苄醇(0.1-1.0％)或间甲酚(0.1-0.6％)或苯酚(0.1-0.8％)或甲基(0.05-0.25％)和乙基或丙基或丁基(0.005％-0.03％)对羟基苯甲酸酯的组合。对羟基苯甲酸酯是对羟基苯甲酸的低级烷基酯。各防腐剂的详细描述列于Remington’s Pharmaceutical Sciences by Martin。

普兰林肽，人^25，28，29Pro-淀粉状蛋白毒素，以液体形式存在于玻璃容器中时不具有吸附于玻璃上的倾向，因此，不需要表面活性剂来进一步稳定该药物制剂。然而，对于处于液体形式时具有这种倾向的化合物，在其制剂中应当使用表面活性剂。这些制剂之后可被冻干。表面活性剂常导致疏水破坏和盐桥分离的蛋白质变性。由于表面活性剂部分与蛋白质的活性位点之间的强烈相互作用，相对低浓度的表面活性剂都会发挥潜在的变性活性。然而，对这一相互作用的明智利用可使蛋白质抵抗界面或表面变性而稳定。能够进一步稳定肽的表面活性剂可任选地以总制剂的约0.001至0.3％(w/v)存在，且包括聚山梨醇酯80(也即，聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐单油酸酯)、CHAPS

(也即，3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲氨基]1-丙磺酸盐)、Brij

(例如，Brij 35，其为(聚氧乙烯(23)十二烷基醚)、泊洛沙姆(poloxamer)，或另一种非离子表面活性剂。

根据所选择的强壮剂加入氯化钠或其他的盐来调节药物制剂的张度，也是所需的。然而，这是任选的，且依赖于所选择的特定制剂。肠胃外制剂优选可以是等张或基本等张的。

肠胃外产品的优选载体是水。质量适于肠胃外施用的水可通过蒸馏或反渗制备。注射用水是用于药物制剂的优选水性载体。

药物制剂中有可能存在其他的成分。这样的附加成分可包括，例如，湿润剂、乳化剂、油、抗氧化剂、填充剂、张度调节剂、螯合剂、金属离子、油质载体、蛋白质(例如，人血清清蛋白、明胶或蛋白质)和两性离子(例如，比如甜菜碱、牛磺酸、精氨酸、甘氨酸、赖氨酸和组氨酸这样的氨基酸)。此外，聚合物溶液或与聚合物的混合物提供肽的受控释放的机会。这样的附加成分，当然，不应当影响本发明药物制剂的总体稳定性。

容器也是注射制剂的整体部分且可被考虑为组分，因为没有容器是完全惰性的，或者没有容器不会以某种方式影响其所包含的液体，尤其是该液体为水性时。因此，对特定注射用容器的选择必须基于对容器和溶液组成以及将用于的治疗的考虑。如果需要的话，还可以利用硼硅酸盐玻璃，例如，I型Wheaton硼硅酸盐玻璃#33(WheatonType I-33)或其等同物(Wheaton Glass Co.)，来使得肽对小瓶玻璃表面的吸附最小化。类似的硼硅酸盐玻璃小瓶和可接受用于生产的筒的其他商家包括Kimbel Glass Co.、West Co.、Bünder Glas GMBH和Forma Vitrum。可通过在Wheaton Type I-33硼硅酸盐血清小瓶中在5％甘露糖醇和0.02％Tween 80存在下配制和冻干终浓度为0.1mg/ml和10mg/ml的化合物来稳定化合物的生物学和化学特性。

对于通过注射送递的，为了使皮下注射器的针插入多剂量小瓶中并且在抽出针后立即再次密封，各小瓶的开口端优选用被铝带定位的橡胶塞密封。

玻璃小瓶的塞子，比如West 4416/50，4416/50(特氟隆贴面的)和4406/40，Abbott 5139，或任何其他的等同塞子，可用作注射用药物的闭塞物。对于含有肽抗肥胖剂的制剂，这些塞子与肽以及制剂中的其他组分相容。发明人还发现，利用患者使用模式进行测试时这些塞子通过了塞子完整性测试，例如，塞子可承受至少约100次注射。作为选择，为之后的重构，肽可在小瓶、注射器或筒中冻干。本发明的液体制剂可填充入一室或两室的筒，或一室或两室的注射器。

上述药物制剂的各组分是本领域已知的，且描述于Pharmaceutical Dosage Forms：Parenteral Medications，Vol.1，2nded.，Avis等人Ed.，Mercel Dekker，New York，N.Y.1992(其全文引入本文作为参考)。

上述液体制剂的生产过程通常涉及化合、无菌过滤和填充步骤。化合的步骤包括将成分以特定顺序(防腐剂，之后是稳定剂/强壮剂、缓冲液和肽)溶解或同时溶化。

可替代的制剂，例如，非肠胃外，可无需灭菌。然而，如果灭菌是需要的或者必需的，则任何适宜的灭菌方法均可用于开发本发明的肽药物制剂。一般的灭菌方法包括过滤、蒸汽(湿热)、干热、充气(例如，环氧乙烷、甲醛、二氧化氯、氧化丙烯、β-丙醇酸内酯、臭氧、三氯硝基甲烷、过乙酸甲基溴等)、暴露于辐射源以及无菌操作。过滤是本发明液体制剂的优选灭菌方法。无菌过滤包括通过可串联连接的0.45μm和0.22μm(1或2)的过滤。过滤后，将溶液填充入适宜的小瓶或容器。

在一种实施方案中，抗肥胖剂通过外周施用给受试者。在一些实施方案中，本发明的液体药物制剂意欲是为肠胃外施用的。适宜的施用途径包括肌内、静脉内、皮下、皮内、关节内、鞘内等。在一些实施方案中，皮下施用途径是优选的。在特定实施方案中，粘膜送递也是优选的。这些途径包括，但不限于，经口、经鼻、经舌下、经肺和经口腔途径，这些途径可包括液体、半固体或固体形式的肽的施用。对于含有肽抗肥胖剂的制剂，由于与肠胃外送递相比，通过这些途径的施用具有降低的生物利用率，所以通过这些途径的施用需要基本上更多的肽以获得所需的生物学效果。此外，通过形成多聚微囊、基质、溶液、植入体和装置，并将它们通过肠胃外途径或外科手术途径进行施用，可实现肠胃外的受控释放送递。受控释放制剂的例子描述于第6,368,630、6,379,704和5,766,627号美国专利(其引入本文作为参考)。这些制剂形式由于一些肽在多聚基质和装置中的截留可能会具有较低的生物利用率。参见，例如，第6,379,704、6,379,703和6,296,842号美国专利。

化合物可以以包含一定量带或不带胰岛素或葡萄糖(或葡萄糖源)的化合物的剂量单位形式提供，所述量在一剂或多剂中有效控制生长素释放肽的作用。化合物用于治疗生长素释放肽-相关疾病或病症的治疗有效量是足以治疗、预防或改善不期望的生长素释放肽水平的生理学作用的量。

如同将被本领域人员所认识到的，抗肥胖剂的有效量将随着包括患者年龄和体重、患者的身体条件、所治疗的状况、以及其他因素在内的许多因素而变化。抗肥胖剂的有效量还将随着所施用的特定组合而变化。如本文所述，试剂的组合施用将使得任一所施用试剂的有效量能够降低。

然而，通常剂量可包括每天从下限约1μg、5μg、10μg、50μg至100μg至上限约100μg、500μg、1mg、5mg、10mg、50mg或100mg的药物化合物。还预期了其他剂量范围，比如每剂0.1μg至1mg化合物。每日剂量可以以不连续的单位剂量送递，只要在24小时时间段或在所述24小时的任何部分内持续。每日的给药数可为每日1至约4次，尽管可以更多。连续送递可以是连续输注的形式。示例性的剂量和输注率包括0.005nmol/kg至约20nmol/kg/不连续剂量或约0.01/pmol/kg/分钟至约10pmol/kg/分钟连续输注。这些剂量和输注可通过静脉内施用(i.v.)或皮下施用(s.c.)来送递。示例性的经静脉内给予的药物组合物的总剂量/送递可为每日约2μg至约8mg，而经皮下给予的药物组合物的总剂量/送递可为每日约6μg至约6mg。

苗条蛋白和苗条蛋白衍生物可以，例如，以约0.01mg/kg至约20mg/kg，在一些情况下，约0.01mg/kg至约0.3mg/kg的日剂量进行施用。施用可以是通过单剂或分开的剂次注射。

西布茶明可以，例如，以约0.01mg/kg至约10mg/kg的日剂量，在一些情况下约0.01mg/kg至约1mg/kg的日剂量，以单剂或每日2至3次分开的剂次，或以持续释放形式施用。在一些情况中，西布茶明可以以5mg、10mg、15mg、20mg或30mg的单次日剂量经口施用。

利莫那班可以，例如，以约0.01mg/kg至约8mg/kg体重的日剂量，在一些情况中为约0.3mg/kg至约3mg/kg体重的日剂量，以单剂或每日2至3次分开的剂次，或以持续释放形式施用。

为说明本发明，但不限制本发明，提供了以下实施例。

实施例

实施例1

Sprague-Dawley大鼠中饮食诱导的肥胖(DIO)是进行肥胖研究和能量稳态调节研究的一种有价值的模型。这些大鼠从饲以脂肪和能量相对高的饮食的有肥胖倾向的大鼠(Crl：CD

(SD)BR)系开发而来。参见，例如，Levin(1994)Am.J.Physiol.267：R527-R535，Levin等人(1997)Am.J.Physiol.273：R725-R730。DIO雄性大鼠获自Charles River Laboratories，Inc.(Wilmington，MA)。将这些大鼠在22℃下单独圈养在鞋盒笼子里，光暗周期为12/12-小时。在进行药物治疗前，以中度高脂肪饮食(32％kcal来自脂肪；ResearchDiets D1226B)随意维持这些大鼠6-7周。增肥时间段结束时(施用药物之前)，通常动物的平均体重达到约500g。

将DIO动物分成四个治疗组。各组植入设计用于送递载体、苗条蛋白(500μg/kg/天)、淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)或苗条蛋白(500μg/kg/天)+淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)14天时间段的皮下渗透微泵(DURECT Corp.，Cupertino，CA)。如本文所述，淀粉状蛋白毒素作用于后脑中参与食物摄入和/或体重调节的结构，且苗条蛋白作用于下丘脑中参与食物摄入和/或体重调节的结构。每日记录食物摄入和体重。在药物治疗前和治疗后用NMR(EchoMedical Systems，Houston，TX)测量身体组成。在药物治疗第4、5和6天用间接量热术测量能量消耗变化(Oxymax；ColumbusInstruments，Columbus，OH)。所有数据以平均值±SEM表示。用方差分析(Analysis of variance，ANOVA)和事后比较检验(post-hoc tests)测试组差异。P-值＜0.05视为显著。用PRISM

4 forWindows(GraphPad Software，Inc.，San Diego，CA)进行统计学分析和作图。在一些早期研究中，用SYSTAT

for Windows(SystatSoftware，Inc.，Point Richmond CA)进行分析。

图1和2显示淀粉状蛋白毒素和苗条蛋白在药物施用14天后对累积食物摄入和体重总变化的作用。尤其重要的是(1)苗条蛋白，前脑作用试剂，在该肥胖模型中对其自身无效(无论对食物摄入还是体重均无效)，和(2)用淀粉状蛋白毒素和苗条蛋白组合治疗的大鼠相对于单独用载体或淀粉状蛋白毒素或苗条蛋白治疗的大鼠消耗显著更少的食物并丧失显著更多的体重(p＜0.05；不同的字母表示这些组彼此显著不同)。

在身体组成上观察到了类似的作用。图3描述了由治疗产生的身体脂肪的变化，且图4描绘了由治疗产生的身体蛋白质的变化。用苗条蛋白+淀粉状蛋白毒素组合治疗的动物中的脂肪损失显著大于用各单独试剂或载体治疗的动物的(p＜0.05)。这些身体脂肪上的变化并不伴有显著的无脂肪组织减少(p＞0.05；图4)。

图5描绘了治疗组的暗循环过程中能量消耗的变化。尽管药物(或饮食)-诱导的食物摄入和体重减少常伴有代谢率减缓(热，kcal/h/kg)，但用苗条蛋白和淀粉状蛋白毒素组合治疗的大鼠相对于其他组在暗循环过程中具有显著更高的代谢率(p＜0.05)。因此，用淀粉状蛋白毒素+苗条蛋白组合同时靶向后脑和前脑摄食中枢导致在提高代谢率的同时使食物摄入、体重和身体脂肪显著和持续减少。此外，体重和身体脂肪的减少并不伴有无脂肪组织量的减少。

实施例2

进行了另一系列的试验来进一步开发淀粉状蛋白毒素和苗条蛋白组合对体重和身体组成变化的协同作用。为进行这些研究从Charles Rivers Labs获得了近交DIO(Levin)大鼠。这些大鼠由BarryLevin从饲以脂肪和能量相对高的饮食的有肥胖倾向的大鼠Crl：CD

(SD)BR系开发而来。它们被单独圈养在22℃的鞋盒笼子里，光暗周期为12/12-小时。除对喂组对照(PF)之外，药物治疗前以及在整个试验过程中用中等高脂肪饮食(32％kcal来自脂肪；Research DietsD1226B)随意维持大鼠约6周。PF大鼠受限于任一淀粉状蛋白毒素-治疗组的摄入。施用药物前，大鼠一般已达到平均体重500g。

将动物分成体重平均的治疗组，并植入皮下渗透微泵(DurectCorp.，Cupertino，CA)。各大鼠植入两个含有药物或适宜载体的微泵。大鼠淀粉状蛋白毒素(AC0128；Lot#28)溶于以无菌水为溶剂的50％DMSO中，而鼠苗条蛋白(Peprotech，catalog#450-31)溶于无菌水中。这些泵被设计用于以100μg/kg/天送递载体、淀粉状蛋白毒素或以500μg/kg/天送递鼠苗条蛋白14天时间段。

各组植入设计用于送递载体、苗条蛋白(500μg/kg/天)、淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)或苗条蛋白(500μg/kg/天)+淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)14天时间段的皮下渗透微泵(DURECTCorp.，Cupertino，CA)。每日记录体重和食物摄入。在药物治疗前和治疗后用NMR(Echo Medical Systems，Houston，TX)测量身体组成。为测量身体组成，将大鼠短暂(～1分钟)置于充分通风的有机玻璃管中，之后将该管插入专门的啮齿类动物NMR机器中。在泵植入之前以及在实验最后一天扫描大鼠。这样就使得能够计算脂肪和干燥无脂肪组织的实际克数的变化(例如，治疗后身体脂肪的克数-基线身体脂肪克数＝身体脂肪克数的变化)和以％表示的脂肪和干燥无脂肪组织的身体组成变化(例如，％治疗后的身体脂肪-％基线身体脂肪＝％身体脂肪变化)。

图6A的图显示，治疗组在治疗两周过程中，经载体校正的体重百分数变化。在该实验中，苗条蛋白施用导致体重整体降低2％，而淀粉状蛋白毒素施用导致体重整体降低6％。特别地，响应于组合施用淀粉状蛋白毒素和苗条蛋白的体重百分数降低为约12％，该作用大于单个试剂单独施用的作用组合。因此，淀粉状蛋白毒素和苗条蛋白对于减轻体重起协同作用。图6B和6C分别显示了治疗两周后产生的身体脂肪的变化以及身体蛋白质的变化。此外，试剂组合导致的身体脂肪减少大于单独试剂导致的身体脂肪减少的组合。身体脂肪的这些变化未伴随有身体蛋白质的减少，而是伴有身体蛋白质的增加。这些结果支持了试剂组合的代谢作用以及体重减轻作用。

已知淀粉状蛋白毒素对接受者有厌食作用。为检查在淀粉状蛋白毒素的厌食作用背景下的淀粉状蛋白毒素+苗条蛋白的作用，进行了对喂实验。如上述确立DIO大鼠和药物治疗组。载体、淀粉状蛋白毒素和淀粉状蛋白毒素+苗条蛋白治疗组的DIO大鼠可自由获得食物，而对喂的苗条蛋白治疗组的摄入则受限于淀粉状蛋白毒素-治疗组所消耗的量。治疗两周内每日记录体重。如图7所示，淀粉状蛋白毒素治疗组和对喂的苗条蛋白治疗组相对于载体对照都有约6％的体重下降。该结果与之前的苗条蛋白对DIO动物的体重有小或没有作用的结果一致。淀粉状蛋白毒素+苗条蛋白的组合相对于载体对照导致约12％的体重下降。因此，该对喂实验证实，淀粉状蛋白毒素+苗条蛋白组合减少的体重超过由于热量限制所带来的体重下降。

实施例3

如本文所讨论的，大多数肥胖人中的血清苗条蛋白水平是高的，且认为在这些个体中存在苗条蛋白抗性状态。检查了正常HarlanSprague-Dawley(HSD)和DIO倾向大鼠中的血浆苗条蛋白水平和苗条蛋白抗性。

将DIO倾向和正常HSD大鼠分成三个治疗组。两个治疗组植入设计用于送递载体或淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)14天时间段的皮下渗透微泵(DURECT Corp.，Cupertino，CA)，而第三个组以淀粉状蛋白毒素治疗组所消耗的量对喂14天时间段。用商业试剂盒(Linco Research，Inc.，St.Charles，MO)通过免疫测定确定了血清苗条蛋白水平。如图8所示，DIO倾向动物中的血清苗条蛋白水平约为正常HSD动物的三倍。因此，DIO倾向大鼠是hyper-leptinemic。淀粉状蛋白毒素治疗以及将热量限制于淀粉状蛋白毒素治疗动物食入的食物量均显著降低DIO倾向和正常动物中的血浆苗条蛋白水平。

通常，将瘦HSD大鼠分成两个治疗组。各组植入设计用于送递载体或苗条蛋白(500μg/kg/天)14天时间段的皮下渗透微泵(DURECT Corp.，Cupertino，CA)，并每周记录体重。如图9所示，DIO倾向动物中的苗条蛋白(500mg/kg/天)有效剂量，引发正常HSD大鼠的显著和持续的体重下降。本文所述的DIO倾向动物表现出对苗条蛋白的体重减轻作用的抗性。

实施例4

为证实淀粉状蛋白毒素与5-羟色胺能/去甲肾上腺素能重摄取抑制剂的组合对体重和身体组成变化的作用，使DIO雄性大鼠增肥，并分成四个治疗组，如实施例2所述。将大鼠淀粉状蛋白毒素溶于以无菌水为溶剂的50％DMSO中，并将西布茶明溶于无菌水中。各组植入设计用于送递载体、西布茶明(3mg/kg/天)或淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)14天时间段的皮下渗透微泵。每日记录体重和食物摄入。药物治疗之前和之后用NMR(Echo Medical Systems，Houston，TX)测量身体组成。为测量身体组成，将大鼠短暂(～1分钟)置于充分通风的有机玻璃管中，之后将该管插入专门的啮齿类动物NMR机器中。在泵植入之前以及在实验最后一天扫描大鼠。这样就使得能够计算脂肪和干燥无脂肪组织的实际克数的变化(例如，治疗后身体脂肪的克数-基线身体脂肪克数＝身体脂肪克数的变化)和以％表示的脂肪和干燥无脂肪组织的身体组成变化(例如，％治疗后的身体脂肪-％基线身体脂肪＝％身体脂肪变化)。

图10A的图显示，治疗组在治疗两周过程中，经载体校正的体重百分数变化。西布茶明单独施用和淀粉状蛋白毒素单独施用导致约6％的体重下降。响应于组合施用淀粉状蛋白毒素和西布茶明的体重百分数降低为约12％。图10B和10C分别显示了治疗两周后产生的身体脂肪的变化以及身体蛋白质的变化。单独用淀粉状蛋白毒素或单独用西布茶明治疗的脂肪量减少是明显的，且组合施用淀粉状蛋白毒素和西布茶明时得到了协同作用(图10B)。淀粉状蛋白毒素单独施用导致无脂肪(蛋白质)组织的增加。西布茶明单独施用或与淀粉状蛋白毒素组合施用相对来说未改变无脂肪(蛋白质)组织(图10C)。这些结果支持了试剂组合的代谢作用以及体重减轻作用。

还测试了淀粉状蛋白毒素与儿茶酚胺能激动剂苯丁胺的组合对体重和身体组成的改变的作用。由于苯丁胺实际上命中NA/5-HT受体，所以它通常被称作儿茶酚胺能激动剂。使DIO雄性大鼠增肥，并分成四个治疗组，如上所述。各组植入皮下渗透微泵和/或插入经口管饲管(oral gavage)，它们设计用于送递载体、苯丁胺(10mg/kg/天)、淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)或苯丁胺(10mg/kg/天)+淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)14天时间段。微泵包含载体(溶于水的50％DMSO)或淀粉状蛋白毒素，而所施用的经口管饲包含无菌水或苯丁胺。每日记录体重，且药物治疗之前和之后用NMR测量身体组成。

图11A的图显示，治疗组在治疗两周过程中，经载体校正的体重百分数变化。苯丁胺单独施用导致约5％的体重下降，且淀粉状蛋白毒素单独施用导致约7％的体重下降。响应于组合施用淀粉状蛋白毒素和苯丁胺的体重百分数降低为约12％。图11B和11C分别显示了治疗两周后产生的身体脂肪的变化以及身体蛋白质的变化。单独用苯丁胺治疗时中等量的脂肪量损失是明显的，而单独用淀粉状蛋白毒素治疗时较大量的脂肪量损失是明显的。当淀粉状蛋白毒素与苯丁胺组合施用时，可获得协同作用(图11B)。单独施用苯丁胺时，无脂肪(蛋白质)组织不变或倾向于损失。单独施用淀粉状蛋白毒素保持无脂肪(蛋白质)组织，且淀粉状蛋白毒素和苯丁胺的组合倾向于具有较大的无脂肪(蛋白质)组织提高，甚至是在动物体重减轻约12％时(图11C)。这些结果支持了试剂组合的代谢作用以及体重减轻作用。

实施例5

为证实淀粉状蛋白毒素和CB-1拮抗剂组合对于体重和身体组成变化的作用，从Charles Rivers Labs获得了近交DIO(Levin)。这些大鼠由Barry Levin从饲以脂肪和能量相对高的饮食的有肥胖倾向的大鼠Crl：CD(SD)BR系开发而来。它们被单独圈养在22℃的鞋盒笼子里，光暗周期为12/12-小时。药物治疗前以及在整个试验过程中用中度高脂肪饮食(32％kcal来自脂肪；Research DietsD1226B)随意维持大鼠约6周。施用药物前，大鼠一般达到平均体重500g。治疗前使大鼠习惯经口管饲1周。经口管饲施用一定剂量范围(0.1、0.3、1.0、3.0、10mg/kg/天)的利莫那班。通过微泵施用淀粉状蛋白毒素(溶于以无菌水为溶剂的50％DMSO)或载体(100μg/kg/天)。利莫那班总是在临熄灯前送递。治疗后1和2周测量食物摄入和体重。药物治疗之前和之后用NMR(Echo MedicalSystems，Houston，TX)测量身体组成。为测量身体组成，将大鼠短暂(～1分钟)置于充分通风的有机玻璃管中，之后将该管插入专门的啮齿类动物NMR机器中。在泵植入之前以及在实验最后一天扫描大鼠。这样就使得能够计算脂肪和干燥无脂肪组织的实际克数的变化(例如，治疗后身体脂肪的克数-基线身体脂肪克数＝身体脂肪克数的变化)和以％表示的脂肪和干燥无脂肪组织的身体组成变化(例如，％治疗后的身体脂肪-％基线身体脂肪＝％身体脂肪变化)。

图12A的图显示，治疗组在治疗两周过程中，经载体校正的体重百分数变化。利莫那班单独施用导致约4％的体重下降，且淀粉状蛋白毒素单独施用导致约6％的体重下降。响应于组合施用淀粉状蛋白毒素和利莫那班的体重百分数降低为约11％。图12B和12C分别显示了治疗两周后产生的身体脂肪的变化以及身体蛋白质的变化。单独用淀粉状蛋白毒素或单独用利莫那班的治疗所产生的脂肪量损失是明显的，且当淀粉状蛋白毒素与利莫那班组合施用时可获得协同作用(图12B)。单独施用淀粉状蛋白毒素、单独施用利莫那班和组合施用淀粉状蛋白毒素+利莫那班导致相对等量的无脂肪(蛋白质)组织增加(图12C)。这些结果支持了试剂组合的代谢作用以及体重减轻作用。

在另一个测定中，CB-1拮抗剂利莫那班(rimonanbant)(AC163720)与淀粉状蛋白毒素组合施用。DIO倾向大鼠在治疗前以中度高脂肪饮食(32％kcal来自脂肪；Research Diets D1226B)随意维持6周。增肥期结束时，它们的平均体重一般为500g。之后将大鼠分成治疗组，并植入一个皮下微泵(Durect Corp)和插入经口管饲管。微泵包含载体(溶于水中的50％DMSO)或淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)，而所施用的经口管饲包含无菌水或一定剂量范围的利莫那班(AC163720)(0.1、0.3、1.0、3.0、10.0mg/kg/天)。两周后的体重变化描绘于图13中，且这些组合中有两个在图14A和14B中更为详细地着重显示(加圆圈的)。

实施例6

为证实淀粉状蛋白毒素和毒蜥外泌肽类似物¹⁴Leu-毒蜥外泌肽-4：His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Leu Glu GluGlu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro SerSer Gly Ala Pro Pro Pro Ser(SEQ ID NO：190)组合对于体重和身体组成变化的作用，使DIO雄性大鼠增肥并将其分作四个治疗组，如上所述。药物施用之前，大鼠一般达到平均体重500g。用微泵施用一定剂量范围(0.3、1、3、10、30μg/kg/天)的毒蜥外泌肽-4类似物。淀粉状蛋白毒素(溶于以水为溶剂的50％DMSO)或载体通过微泵施用(100μg/kg/天)。每日记录体重和食物摄入。药物治疗之前和之后用NMR(Echo Medical Systems，Houston，TX)测量身体组成。为测量身体组成，将大鼠短暂(～1分钟)置于充分通风的有机玻璃管中，之后将该管插入专门的啮齿类动物NMR机器中。在泵植入之前以及在实验最后一天扫描大鼠。这样就使得能够计算脂肪和干燥无脂肪组织的实际克数的变化(例如，治疗后身体脂肪的克数-基线身体脂肪克数＝身体脂肪克数的变化)和以％表示的脂肪和干燥无脂肪组织的身体组成变化(例如，％治疗后的身体脂肪-％基线身体脂肪＝％身体脂肪变化)。

图15A的图显示，治疗组在治疗两周过程中，经载体校正的体重百分数变化。单独毒蜥外泌肽-4类似物和单独施用淀粉状蛋白毒素各导致约6％的体重下降。响应于组合施用淀粉状蛋白毒素和毒蜥外泌肽-4类似物的体重百分数降低为约12％。图15B和15C分别显示了治疗两周后产生的身体脂肪的变化以及身体蛋白质的变化。单独用毒蜥外泌肽-4类似物治疗时，脂肪量减少是明显的。单独施用淀粉状蛋白毒素和淀粉状蛋白毒素+毒蜥外泌肽-4类似物组合施用导致相对等量的脂肪量下降(图15B)。淀粉状蛋白毒素的单独施用、毒蜥外泌肽-4类似物的单独施用和淀粉状蛋白毒素+AC3174的组合施用导致相对等量的无脂肪(蛋白质)组织(图15C)增加。这些结果支持了试剂组合的代谢作用以及体重减轻作用。

实施例7

为证实淀粉状蛋白毒素和PYY激动剂组合对于体重和身体组成变化的作用，使DIO雄性大鼠增肥并将其分作四个治疗组，如上所述。各组植入设计用于送递载体、PYY(3-36)(1000μg/kg/天)、淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)或PYY(3-36)(1000μg/kg/天)+淀粉状蛋白毒素(100μg/kg/天)14天时间段的皮下渗透微泵。用微泵施用一定剂量范围的PYY(3-36)(100、200、400、800、1000μg/kg/天)。淀粉状蛋白毒素100μg/kg/天(溶于以无菌水为溶剂的50％DMSO)、PYY(3-36)(溶于以无菌水为溶剂的50％DMSO)或载体用微泵施用。每日记录食入摄入和体重。药物施用之前和之后用NMR(Echo Medical Systems，Houston，TX)测量身体组成。为测量身体组成，将大鼠短暂(～1分钟)置于充分通风的有机玻璃管中，之后将该管插入专门的啮齿类动物NMR机器中。在泵植入之前以及在实验最后一天扫描大鼠。这样就使得能够计算脂肪和干燥无脂肪组织的实际克数的变化(例如，治疗后身体脂肪的克数-基线身体脂肪克数＝身体脂肪克数的变化)和以％表示的脂肪和干燥无脂肪组织的身体组成变化(例如，％治疗后的身体脂肪-％基线身体脂肪＝％身体脂肪变化)。

图16A的图显示，治疗组在治疗两周过程中，经载体校正的体重百分数变化。PYY(3-36)单独施用导致约9％的体重下降，且淀粉状蛋白毒素单独施用导致约7％的体重下降。响应于组合施用淀粉状蛋白毒素和PYY(3-36)的体重百分数降低为约15％。图16B和16C分别显示了治疗两周后产生的身体脂肪的变化以及身体蛋白质的变化。用PYY(3-36)单独治疗、用淀粉状蛋白毒素单独治疗和用淀粉状蛋白毒素+PYY(3-36)组合治疗时的，逐渐提高的脂肪量损失量是明显的(图16B)。淀粉状蛋白毒素的单独施用以及与淀粉状蛋白毒素+PYY(3-36)的组合施用导致无脂肪(蛋白质)组织增加(图16C)。这些结果支持了试剂组合的代谢作用以及体重减轻作用。

尽管前述说明连同所提供用于具体说明的实施例对本发明作了公开，但可以理解，本发明的实践包括所有在所要求的本发明范围内的通常的变化、改编或修饰。因此，说明书和实施例不应当被解释为对由所附权利要求书所描绘的本发明范围的限制。