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CN109844091B - 反应处理容器及反应处理装置 - Google Patents

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CN109844091B CN201780065196.4A CN201780065196A CN109844091B CN 109844091 B CN109844091 B CN 109844091B CN 201780065196 A CN201780065196 A CN 201780065196A CN 109844091 B CN109844091 B CN 109844091B
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Abstract

反应处理容器(10)包括：基板(14)；形成在基板(14)上的用于样本(50)移动的流路(12)；被设置在流路(12)的两端的第1空气连通口(24)和第2空气连通口(26)；以及在流路(12)的第1空气连通口(24)与第2空气连通口(26)之间形成的用于对样本(50)施加热循环的热循环区域(32)。流路(12)在热循环区域(32)与第1空气连通口(24)之间包括第1分支流路(61)和第2分支流路(62)。

Description

反应处理容器及反应处理装置
技术领域
本发明涉及被用于聚合酶链式反应(PCR：Polymerase Chain Reaction)的反应处理容器及其反应处理装置。
背景技术
基因检查被广泛应用在各医学领域中的检查、农作物或病原性微生物的识别、食品的安全性评价、以及病原性病毒或各种感染症的检查中。为了高灵敏度地检测作为基因的微小量的DNA，已知对将DNA的一部分进行扩增而得到的结果进行分析的方法。其中PCR是对从活体等提取的极微量的DNA的某一部分选择性地扩增的受到瞩目的技术。
PCR是针对将含有DNA的活体样品与由引物或酶等构成的PCR试剂混合而得到的样本施加预定的热循环，反复引起变性、退火和延伸反应，对DNA的特定部分选择性地进行扩增的技术。
在PCR中，一般是将对象样本向PCR配管或形成有多个孔洞的微板(微孔)等反应处理容器中加入预定量来进行的。但近年，使用包括在基板上形成有微细的流路的反应处理容器(也被称为芯片)来进行的技术已被实用化(例如专利文献1)。
[在先技术文献]
[专利文献]
专利文献1：日本特开2009-232700号公报
发明内容
[发明要解决的课题]
在PCR中，需要通过使样本在例如被维持在60℃程度的中温的流路区域与被维持在95℃程度的高温的流路区域之间反复移动，对样本重复进行预定次数的热循环。因样本通常为水溶液，所以在95℃程度的高温区域中蒸气压升高，样本的水分容易蒸发。这些蒸发了的样本的水分的一部分在流路的温度较低的部分凝结或结露而形成液体堆积，存在阻塞流路的可能性。若像这样流路被液体堆积阻塞，则即使在流路内加压，推进力也不能适当地作用于样本，存在不能适当地进行样本的移动的可能性。若像这样不能适当地进行样本的移动，则存在不能进行稳定的PCR的可能。
本发明鉴于以上课题而完成，其目的在于提供一种能够适当地进行样本的移动，进行稳定的PCR的反应处理容器及反应处理装置。
[用于解决技术课题的技术方案]
为解决上述课题，本发明的一种方案的反应处理容器包括：基板；形成在基板上的用于样本移动的流路；被设置在流路的两端的一对空气连通口；以及形成在流路的一对空气连通口之间的用于对样本施加热循环的热循环区域。流路在热循环区域与至少一方的空气连通口之间包括多个分支流路。
也可以是，热循环区域包含被维持在第1温度的第1温度区域，以及被维持在比第1温度高的第2温度的第2温度区域。多个分支流路被配置在第2温度区域与位于该第2温度区域侧的空气连通口之间。
也可以是，热循环区域的流路与多个分支流路的分支部被配置在第2温度区域附近。
也可以是，多个分支流路中的至少一个分支流路被配置为从第2温度区域附近通过。
也可以是，多个分支流路分别包括弯曲部。多个分支流路中的至少一个分支流路的弯曲部以比其他分支流路的弯曲部大的曲率半径弯曲。
本发明的其他方案为反应处理装置。该反应处理装置包括：上述反应处理容器；用于调节热循环区域的温度的温度控制部件；以及使样本在流路内移动和停止的送液部件。
[发明效果]
根据本发明，能够适当地进行样本的移动，进行稳定的PCR。
附图说明
图1的(a)和图1的(b)是用于说明本发明的实施方式的反应处理容器的图。
图2是图1的(a)所示的反应处理容器的A-A剖视图。
图3是反应处理容器具备的基板的俯视图。
图4是示意性地表示样本被导入反应处理容器内的状态的图。
图5是用于说明本发明的实施方式的反应处理装置的示意图。
图6是用于说明本实施方式的反应处理容器的效果的图。
具体实施方式
以下说明本发明的实施方式的反应处理容器和反应处理装置。对各附图中所示的相同或同等的构成要素、构件、处理标注相同的附图标记，并适当省略重复的说明。另外，实施方式并非限定发明而是示例，并非实施方式所述的所有特征或其组合都一定是发明的本质内容。
图1的(a)和图1的(b)是用于说明本发明的实施方式的反应处理容器10的图。图1的(a)是反应处理容器10的俯视图，图1的(b)是反应处理容器10的主视图。图2是图1(a)所示的反应处理容器10的A-A剖视图。图3是反应处理容器10所包括的基板14的俯视图。
反应处理容器10包括：在下表面14a上形成有槽状的流路12的树脂性的基板14；粘贴在基板14的下表面14a上的用于密封流路12的流路密封薄膜16；以及粘贴在基板14的上表面14b上的2张密封薄膜(第1密封薄膜18以及第2密封薄膜20)。
基板14优选由针对温度变化较稳定，且不易被所使用的样本溶液侵入的材质形成。更进一步，基板14优选由成形性好、透明性和屏障性良好、并且具有较低的自身荧光性的材质形成。作为这样的材质，有玻璃、硅(Si)等无机材料，以及丙烯酸、聚酯、硅酮等树脂，其中环烯烃聚合物树脂(COP)为优选。基板14的尺寸的一个示例为长边76mm，短边26mm，厚度4mm。
基板14的下表面14a上形成有槽状的流路12。在本实施方式的反应处理容器10中，流路12的大部分形成为在基板14的下表面14a上露出的槽状。这是因为，能够通过利用了金属模具等的注射成型而容易地成形。为了将该槽密封从而作为流路使用，基板14的下表面14a上粘贴有流路密封薄膜16。流路12的尺寸的一个示例为宽度0.7mm，深度0.7mm。
流路密封薄膜16可以是一个主表面具有粘合性，也可以在一个主表面上形成有通过按压或紫外线等能量的照射、加热等来发挥粘合性或接合性的功能层，具备能够容易地与基板14的下表面14a紧贴并一体化的功能。流路密封薄膜16优选由包含粘合剂在内都具有较低的自身荧光性的材质形成。在这点上，由环烯烃聚合物、聚酯、聚丙烯、聚乙烯或丙烯酸等树脂构成的透明薄膜适用，但并不限定于这些。另外，流路密封薄膜16也可以由板状的玻璃或树脂形成。这种情况下，由于能够期待刚性，所以有助于防止反应处理容器10的翘曲或变形。
在基板14中的流路12的一端12a的位置形成有第1空气连通口24。在基板14的流路12的另一端12b的位置形成有第2空气连通口26。一对第1空气连通口24和第2空气连通口26被形成为在基板14的上表面14b上露出。
在基板14中的第1空气连通口24和流路12的一端12a之间，设有第1过滤器28。在基板14中的第2空气连通口26与流路12的另一端12b之间，设有第2过滤器30。被设置在流路12的两端的一对第1过滤器28和第2过滤器30，除了低杂质特性良好之外，仅使空气透过，并防止污染，以使得不妨碍通过PCR进行目标DNA的扩增或其检测，或使目标DNA的品质不劣化。作为过滤器的材料，例如可以使用对聚乙烯进行过防泼水处理的材料，但只要是具备上述功能的材料，也可以从公知材料中选择。第1过滤器28和第2过滤器30的尺寸被形成为能够无间隙地收纳到基板14上所形成的过滤器设置空间中的尺寸，例如可以为直径4mm，厚度2mm。
如图1的(a)所示，流路12在一对第1空气连通口24和第2空气连通口26之间包括用于对样本施加热循环的热循环区域32，以及用于将预定量的样本抽出进行所谓的分液的分液区域34。热循环区域32位于流路12的第1空气连通口24侧。分液区域34位于流路12的第2空气连通口26侧。热循环区域32与分液区域34连通。通过使在分液区域34分液后的样本移动到热循环区域32，在热循环区域32中所包含的被维持在预定的温度的反应区域间连续地往复移动，能够对样本施加热循环。
流路12的热循环区域32，在反应处理容器10被安装在后述的反应处理装置上时，包含被维持在较低温(约55℃)的反应区域(以下称为“中温区域38”)，被维持在比其高温(约95℃)的反应区域(以下称为“高温区域36”)，以及将高温区域36与中温区域38相连接的连接区域40。高温区域36位于第1空气连通口24侧，中温区域38位于第2空气连通口26侧(换言之为分液区域34侧)。
高温区域36和中温区域38其各自包含组合了曲线部与直线部的连续折返的蜿蜒状的流路。像这样设置为蜿蜒状的流路的情况，能够有效地使用构成后述的温度控制部件的加热器等的有限的有效面积，易于减少反应区域内的温度的偏差，并且能够缩小反应处理容器的实体的大小，具有能够为反应处理容器的小型化做贡献的优点。连接区域40也可以为直线状的流路。
流路12的分液区域34位于热循环区域32的中温区域38与第2过滤器30之间的位置。如上所述，分液区域34具有将供进行PCR的预定量的样本抽出的分液功能。分液区域34包括：用于规定预定量的样本的分液流路42；从分液流路42分支的2个支流路(第1支流路43和第2支流路44)；被配置在第1支流路43的端部的第1样本导入口45；以及被配置在第2支流路44的端部的第2样本导入口46。第1样本导入口45经由第1支流路43与分液流路42连通。第2样本导入口46经由第2支流路44与分液流路42连通。分液流路42为了在最小限的面积进行预定量的样本的分液而被设置为蜿蜒状的流路。第1样本导入口45和第2样本导入口46被形成为在基板14的上表面14b上露出。第1样本导入口45被形成得直径较小，第2样本导入口46被形成得直径较大。将第1支流路43从分液流路42分支的分支点设为第1分支点431，将第2支流路44从分液流路42分支的分支点设为第2分支点441时，供于PCR的样本的体积根据第1分支点431与第2分支点441之间的分液流路42内的体积而大致确定。
本实施方式中，在热循环区域32与第2过滤器30之间设置了分液区域34，但分液区域34的位置并不被限定于此，也可以被设置在热循环区域32与第1过滤器28之间。另外，只要能够准确地用吸液管等进行分液，则也可以不设置分液区域34地构成流路，也可以构成为能够直接将样本导入热循环区域32等的方式。
在本实施方式的反应处理容器10中，流路12进一步包括在热循环区域32的高温区域36与第1空气连通口24之间被并列配置的2个分支流路(第1分支流路61和第2分支流路62)。即流路12在热循环区域32中为单一的流路，但在位于高温区域36附近的分支部63分支为第1分支流路61和第2分支流路62。第1分支流路61和第2分支流路62其各自以从基板14的不同部分通过的方式延伸，并在流路12的一端12a再次合流。如图1的(a)所示，第1分支流路61远离高温区域36地从分支部63向上方延伸后，向左方以较小的曲率半径转弯，到达流路12的一端12a。而第2分支流路62从分支部63向左方以通过高温区域36附近的方式延伸后，到达流路12的一端12a。在本实施方式中，使第2分支流路62的弯曲部以比第1分支流路61的弯曲部大的曲率半径向上方弯曲。通过这样设置，能够期待液体堆积难以集中在局部的效果，但弯曲的方式并不被限定于此，根据反应处理容器的尺寸或反应处理装置的设计和构成上的情况，本领域技术人员可以进行适当地设计。
第1空气连通口24，第2空气连通口26，第1过滤器28，第2过滤器30，第1样本导入口45以及第2样本导入口46在基板14的上表面14b上露出。因此，为了密封第1空气连通口24，第2空气连通口26，第1过滤器28以及第2过滤器30，第1密封薄膜18被粘贴在基板14的上表面14b上。为了密封第1样本导入口45以及第2样本导入口46，第2密封薄膜20被粘贴在基板14的上表面14b上。在粘贴了第1密封薄膜18和第2密封薄膜20的状态下，全流路成为密闭空间。
第1密封薄膜18使用能够将第1空气连通口24，第2空气连通口26，第1过滤器28以及第2过滤器30同时密封的尺寸的薄膜。关于通向第1空气连通口24，第2空气连通口26的加压泵(后述)的连接，通过如下这样进行：用泵的前端所具备的中空的针(前端尖锐的注射针)在第1空气连通口24、第2空气连通口26各自所对应的第1密封薄膜18的一部分上穿孔。因此，第1密封薄膜18优选由容易被针穿孔的材质或厚度构成的薄膜。在本实施方式中记载为将第1空气连通口24、第2空气连通口26、第1过滤器28以及第2过滤器30同时密封的尺寸的密封薄膜，但也可以是将它们分别密封的方式。另外，也可以剥下密封第1空气连通口24、第2空气连通口26的薄膜来与加压泵连接。
第2密封薄膜20使用能够将第1样本导入口45和第2样本导入口46同时密封的尺寸的薄膜。关于通过第1样本导入口45和第2样本导入口46将样本向流路12内导入，要将第2密封薄膜20暂时从基板14上剥下后进行，在预定量的样本导入后，将第2密封薄膜20再次贴回基板14的上表面14b上。因此，作为第2密封薄膜20优选为具有能够耐受多次粘贴/剥下的粘合性的薄膜。另外第2密封薄膜20也可以为在样本导入后粘贴新薄膜的方式，在此情况下，与反复粘贴/剥下相关的特性的重要性能够降低。
第1密封薄膜18和第2密封薄膜20与流路密封薄膜16同样地在一个主表面上形成有粘合剂层，或者也可以形成有通过按压而发挥粘合性或接合性的功能层。在这点上，由环烯烃聚合物、聚酯、聚丙烯、聚乙烯或丙烯酸等树脂构成的透明薄膜适用，但并不被限定于这些。另外，优选即使如上述那样多次粘贴/剥下，其粘合性等特性也不会劣化到对使用造成影响的程度，但在采用在剥离后导入样本等后或在与加压泵连接后粘贴新薄膜的方式的情况下，与该反复粘贴/剥下相关的特性的重要性能够降低。
接下来，说明如上述构成的反应处理容器10的使用方法。首先，准备应通过热循环扩增的样本。作为样本，可例举向包含一或二种以上的DNA的混合物中，添加了作为PCR试剂的荧光探针、耐热性酶以及脱氧核苷三磷酸(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)的样本。更进一步，将对反应处理对象的DNA起特异反应的引物进行混合。也可以使用市售的实时PCR用试剂套装等。
接下来，将第2密封薄膜20从基板14剥下，将第1样本导入口45和第2样本导入口46开放。
接下来，将样本用滴定管或注射器等导入样本导入口。图4示意性地表示样本50被导入到反应处理容器10内的状态。样本50被从第1样本导入口45和第2样本导入口46的任意一者导入到分液流路42中。导入的方法并不被限定于此，例如可以用移液管或滴定管将适量的样本50直接导入。用移液管导入的情况下，从直径较小的第1样本导入口45导入样本50。这种情况下，样本50在分液流路42内被向第2样本导入口46填充。用滴定管导入的情况下，从直径较大的第2样本导入口46导入样本50。这种情况下，样本50在分液流路42内被向第1样本导入口45填充。被从任意一个样本导入口导入的样本中，超出支流路的体积而剩余的样本会向另一个样本导入口堆积。由此，出于将样本导入口部分作为一种服务器(サーバー)而活用的目的，也可以制作为具有一定的空间。如后所述，通过从第1空气连通口24、第2空气连通口26进行加压，将填充在第1分支点431与第2分支点441之间的分液流路42中的样本50供于PCR。如此，反应处理容器10的分液区域34发挥抽出预定量的样本的分液功能。
接下来，将第2密封薄膜20再次贴回基板14，将第1样本导入口45和第2样本导入口46密封。也可以取代剥下的第2密封薄膜20而粘贴新的第2密封薄膜20。以上，向反应处理容器10的样本50的导入完成。
上述反应处理容器的分液功能，并不妨碍使用移液管单体一边精密地分液一边导入的情况。
图5是用于说明本发明的实施方式的反应处理装置100的示意图。
本实施方式的反应处理装置100包括：载置有反应处理装置10的反应处理容器载置部(未图示)，温度控制系统102，以及CPU105。温度控制系统102如图5所示，被构成为针对反应处理容器载置部所载置的反应处理容器10，能够高精度地将反应处理容器10的流路12中的高温区域36维持并控制在约95℃(高温区域)，将中温区域38维持并控制在约60℃。
温度控制系统102维持热循环区域的各温度区域的温度，具体来说，包括：用于加热流路12的高温区域36的高温用加热器104，用于加热流路12的中温区域38的中温用加热器106，用于测量各温度区域的实际温度的例如热电偶等的温度传感器(未图示)，控制高温用加热器104的温度的高温用加热器驱动器108，以及控制中温用加热器106的温度的中温用加热器驱动器110。更进一步，本实施方式的反应处理装置100包括用于加热流路12的分液区域34的分液用加热器112，以及控制分液用加热器112的温度的分液用加热器驱动器114。通过温度传感器而被测量到的实际温度信息被发送到CPU105。CPU105基于各温度区域的实际温度信息，控制各加热器驱动器，使各加热器的温度达到预定的温度。各加热器例如可为电阻加热元件或帕尔贴元件等。温度控制系统102进一步也可以包括用于提高各温度区域的温度控制性的其他要素部件。
本实施方式的反应处理装置100进一步包括用于使样本50在反应处理容器10的流路12内移动和停止的送液系统120。送液系统120包括：第1泵122，第2泵124，用于驱动第1泵122的第1泵驱动器126，用于驱动第2泵124的第2泵驱动器128，第1配管130，以及第2配管132。
反应处理容器10的第1空气连通口24上连接有第1配管130的一端。优选在第1空气连通口24和第1配管130的一端的连接部上配置有用于确保气密性的密封件134或密封圈。第1配管130的另一端被连接在第1泵122的输出上。相同地，反应处理容器10的第2空气连通口26上连接有第2配管132的一端。优选在第2空气连通口26和第2配管132的一端的连接部上配置有用于确保气密性的密封件136或密封圈。第2配管132的另一端被连接在第2泵124的输出上。
第1泵122、第2泵124例如可以是由隔膜泵构成的微型鼓风机泵。作为第1泵122、第2泵124，例如可以使用株式会社村田制作所制造的微型鼓风机泵(型号MZB1001T02)等。该微型鼓风机泵在动作时能够使次级侧的压力比初级侧升高，但在停止的瞬间或者停止时初级侧与次级侧的压力变得相等。
CPU105介由第1泵驱动器126、第2泵驱动器128控制来自第1泵122、第2泵124的送风或加压。来自第1泵122、第2泵124的送风或加压通过第1空气连通口24、第2空气连通口26作用于流路12内的样本50，成为推进力使样本50移动。更详细地说，通过使第1泵122、第2泵124交替动作，施加到样本50的一个端面的压力比施加到另一端的压力大，所以能够得到使样本50移动的推进力。通过使第1泵122、第2泵124交替动作，使样本50在流路内往复式地移动，能够反复处在反应处理容器10的流路12的各温度区域中，其结果，能够对样本50施加热循环。更具体来说，通过反复施加在高温区域变性、在中温区域退火·延伸的各工序，使样本50中的目标DNA选择性地扩增。换言之，可将高温区域看作变性温度域，将中温区域看作退火·延伸温度域。另外在各温度区域滞留的时间可以根据改变样本50在各温度区域的预定位置停止的时间来适当设定。
本实施方式的反应处理装置100进一步包括荧光检测器140。如上所述，样本50中被添加有预定的荧光探针。随着DNA的扩增的进展，从样本50发出的荧光信号的强度增加，所以能够将该荧光信号的强度值作为PCR的进度或反应的终端的判定材料的指标。
作为荧光检测器140，可以使用日本板硝子株式会社制造的光纤型荧光检测器FLE-510，其是非常紧凑的光学系统，能够迅速地进行测定，并且不论在明亮的场所或是黑暗的场所都能检测荧光。该光纤型荧光检测器能够将其激发光/荧光的波长特性事先调谐为适合样本50所发出的荧光的特性，能够对具有各种特性的样本提供最适合的光学·检测系统，进而由于光纤型荧光检测器带来的光线直径的细小度，适合用于检测存在于流路等较小或较细的区域中的样本发出的荧光。
光纤型的荧光检测器140包括光学头142、荧光检测器驱动器144、以及将光学头142与荧光检测器驱动器144相连接的光纤146。荧光检测器驱动器144中包含激励光用光源(LED、激光器或其他被调整为能够出射特定波长的光源)，光纤型波分复用器以及光电转换元件(PD、APD或光电倍增管等光检测器)(均未图示)等，由用于控制它们的驱动器等构成。光学头142由透镜等光学系统构成，承担激发光对样本的指向性照射和样本发出的荧光的聚光的功能。被聚光的荧光通过光纤146被荧光检测器驱动器144内的光纤型波分复用器与激发光分开，通过光电转换元件被转换为电信号。
在本实施方式的反应处理装置100中，光学头142被配置为能够检测将高温区域与中温区域相连接的流路内的样本50的荧光。通过使样本50在流路内重复往复移动从而反应进展，样本50中所包含的预定的DNA扩增，所以通过监控被检测到的荧光的量的变动，能够实时地了解DNA扩增的进度。另外，在本实施方式的反应处理装置100中，如后述，利用来自荧光检测器140的输出值，有效利用于样本50的移动控制。荧光检测器能够发挥检测来自样本的荧光的功能即可，不限定于光纤型荧光检测器。
图6是用于说明本实施方式的反应处理容器的效果的图。在图6所示的反应处理容器10中，被填充在分液区域34的第1分支点431与第2分支点441之间的分液流路42中的样本50被移动到热循环区域32中。具体来说，通过将被填充有样本50的反应处理容器10组装在反应处理装置100上，仅使第2泵124动作，使分液区域34内的样本50推进到热循环区域32中。之后，如上所述，通过使第1泵122、第2泵124(参照图5)交替动作，使样本50在流路12内往复式地移动，通过使其在高温区域36与中温区域38中连续地往复移动，能够对样本50施加热循环。此外，可以控制分液用加热器112，使得对样本50施加热循环时的分液区域34的温度、尤其是分液区域34中的第1样本导入口45和第2样本导入口46的温度比样本50在分液区域34中时的温度低。通过这样，能够防止热循环区域32的热量传导到第1样本导入口45、第2样本导入口46并使其升温，并将第1样本导入口45、第2样本导入口46中所残存的样本挤压到流路中而出现在流路内。因为若像这样的样本分离地存在，则可能会给供于PCR的样本50的往复移动带来障碍。
在高温区域36与中温区域38之间的往复移动中(即PCR的热循环中)，高温区域36中蒸气压升高，样本50的水分容易蒸发。这些蒸发了的样本50的水分的一部分在流路12的温度较低的部分凝结形成液体堆积，存在阻塞流路12的可能性。例如，如图6所示，从远离高温区域36的场所通过的第1分支流路61的温度容易降低，容易产生液体堆积65。
但是，在本实施方式的反应处理容器10中，如图6所示在第1分支流路61被液体堆积65阻塞的情况下，也能够经由未被阻塞的第2分支流路62而使泵(参照图5)的加压作用于样本50，适当地进行样本50的移动，能够进行稳定的PCR。
在分支部63远离高温区域36的情况下，存在分支部63中产生液体堆积的可能。这种情况下，难以使泵的加压作用于样本50。在此，优选将分支部63如图6所示配置在高温区域36附近。通过像这样将分支部63配置在高温区域36附近，高温区域36的热量传递到分支部63从而难以在分支部63发生液体堆积，所以能够更加适当地使泵的加压作用于样本50。
在上述实施方式中，设置了2个分支流路，但分支流路的数量并不被限定于2个，也可以将3个以上的分支流路设置在热循环区域32的高温区域36与第1空气连通口24之间。
优选多个分支流路中的至少一个分支流路被配置为通过高温区域36附近。例如在上述实施方式中，第1分支流路61通过远离高温区域36的场所，而第2分支流路62通过高温区域36附近。通过这样，高温区域36的热量传递到第2分支流路62，在第2分支流路62难以发生液体堆积，所以能够更加适当地使泵的加压作用于样本50。此点反过来也可以如下表述。蒸发了的样本的水分通过结露等形成液体堆积，所阻塞的流路的部分若能通过经验或实验而事先得知，则可允许这些部分的阻塞，即使发生这样的情况，也能够确保作为推进力的送风或加压的备用性或旁路性的通道。
在上述实施方式中，第1分支流路61和第2分支流路62其各自包括弯曲部，但通过高温区域36附近的第2分支流路62的弯曲部以比通过远离高温区域36的场所的第1分支流路61大的曲率半径弯曲。一般来说，弯曲部的曲率半径大则难以发生液体堆积。所以，通过使第2分支流路62的弯曲部以比第1分支流路61的弯曲部大的曲率半径弯曲，在第2分支流路62难以发生液体堆积，所以能够更加适当地使泵的加压作用于样本50。另外，在上述实施方式中，公开了热循环区域32的高温区域36与第1空气连通口24之间的流路有多个的构成，但也可以使其他流路的部分、例如从经验上来说蒸发了的样本容易成为液体堆积、阻塞流路的一部分的部分，也设置为多个流路。
以上，根据实施方式说明了本发明。本领域技术人员应当理解，这些实施方式为示例，其各构成要素或各处理流程的组合可以有各种变形例，并且这些变形例也在本发明的范围内。
[附图标记说明]
10反应处理容器，12流路，14基板，16流路密封薄膜，18第1密封薄膜，20第2密封薄膜，24第1空气连通口，26第2空气连通口，28第1过滤器，30第2过滤器，32热循环区域，34分液区域，36高温区域，38中温区域，40连接区域，42分液流路，43第1支流路，44第2支流路，45第1样本导入口，46第2样本导入口，50样本，61第1分支流路，62第2分支流路，63分支部，65液体堆积，100反应处理装置，102温度控制系统，104高温用加热器，105CPU，106中温用加热器，108高温用加热器驱动器，110中温用加热器驱动器，112分液用加热器，114分液用加热器驱动器，120送液系统，122第1泵，124第2泵，130第1配管，132第2配管，134、136密封件，140荧光检测器，142光学头，144荧光检测器驱动器，146光纤，431第1分支点，441第2分支点。
[工业可使用性]
本发明能够用于聚合酶链式反应(PCR)。

Claims (5)

1.一种反应处理容器，其特征在于，包括：
基板，
流路，其形成在上述基板上，用于样本的移动，
一对空气连通口，其被设置在上述流路的两端，以及
热循环区域，其形成在上述流路的上述一对空气连通口之间，用于对样本施加热循环；
上述流路在上述热循环区域与至少一个上述空气连通口之间包括多个分支流路，
上述热循环区域包含被维持在第1温度的第1温度区域，以及被维持在比上述第1温度高的第2温度的第2温度区域；
上述多个分支流路被配置在上述第2温度区域与位于该第2温度区域侧的空气连通口之间，
上述第2温度区域与位于该第2温度区域侧的空气连通口将上述多个分支流路夹设在之间而连通，
通过从上述一对空气连通口交替地送风或加压，使样本在上述第1温度区域与上述第2温度区域之间往复式地移动，对样本施加热循环。
2.如权利要求1所述的反应处理容器，其特征在于，
上述热循环区域的流路与上述多个分支流路的分支部被配置在上述第2温度区域附近。
3.如权利要求2所述的反应处理容器，其特征在于，
上述多个分支流路中的至少一个分支流路被配置为从上述第2温度区域附近通过。
4.如权利要求1至3的任何一项所述的反应处理容器，其特征在于，
上述多个分支流路分别包括弯曲部；
上述多个分支流路中的至少一个分支流路的弯曲部以比其他分支流路的弯曲部大的曲率半径弯曲。
5.一种反应处理装置，其特征在于，包括：
如权利要求1至4的任何一项所述的反应处理容器，
温度控制部件，其用于调节上述热循环区域的温度，以及
送液部件，其使样本在上述流路内移动和停止。
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