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CN109563215A - 聚合物连接子及其用途 - Google Patents

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CN109563215A CN201780046754.2A CN201780046754A CN109563215A CN 109563215 A CN109563215 A CN 109563215A CN 201780046754 A CN201780046754 A CN 201780046754A CN 109563215 A CN109563215 A CN 109563215A
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Abstract

本文提供了基于聚‑1‑羟基甲基乙烯基羟基‑甲基缩甲醛(PHF)的药物递送系统。本文还揭露了制备抗体‑药物缀合物的方法和使用这些缀合物的治疗方法。

Description

聚合物连接子及其用途
相关申请的交叉引用
基于35 U.S.C.§119(e)，本申请主张2016年6月3日递交的美国临时专利申请序列号US 62/345,557的优先权，前述临时申请的完整内容通过引用而并入本文。
背景技术
抗体-药物缀合物是一类经由连接子将抗体与药物连接的治疗剂。抗体用作表达抗体识别的抗原的细胞的药物递送系统。诸如聚-1-羟基甲基乙烯基羟基甲基缩甲醛(“PHF”)的连接子已经用于这种类型的药物递送系统中。高度亲水性聚缩醛基PHF聚合物可用作连接子以将多种疏水性药物连接至抗体，而不影响抗体或药物的物理化学性质。然而，现有的基于PHF的连接子具有显着的局限性。
在已知的基于PHF的连接子中，药物或小分子通过PHF上的羟基的酰化而连接到PHF骨架上，导致酰化位点处的酯键联。这种基于PHF的药物或小分子于美国专利第8,685,383号中揭露，其全部内容通过引用并入本文。然而，这些新形成的酯键联可在给予受试者后进行酶促裂解。另外，这些酯键联也在碱性条件下裂解。此外，除了PHF上的羟基的酯键联之外，现有的基于PHF的技术利用第二可裂解的酯键联，导致两个酶促可裂解位点，使化合物的各种机理过程复杂化。抗体-药物缀合物的连接子上的多个酶促可裂解位点可降低抗肿瘤活性并增加由于抗体过早和非靶向释放药物而引起的毒性风险。这种过早释放可能使治疗窗缩小。此外，由于在连接的化合物中发生更复杂的动力学作用，多个可裂解位点通常使药代动力学研究更具挑战性。因此，用酯连接子递送药物的有效负载因此可能是不可靠的并且难以再现。
因此，本领域需要识别用作有效的抗体-药物缀合物，以可靠和可重复的方式递送药物的不可裂解的连接子。目前揭露的连接子和方法满足了这种需求。
发明内容
通过在药物和如本文所述的PHF聚合物之间使用不可裂解的键联，可以克服PHF系连接子的缺点。当需要可裂解的连接子时，可根据需要在键联中引入可优化和可裂解的部分(moiety)。然而，目前揭露的化合物的合成允许独立控制靶向部分和聚合物主链之间可裂解连接子的数量和类型。另外，还可以控制治疗剂和聚合物骨架之间可裂解连接子的数量和类型。这种控制减轻了与已知PHF抗体药物缀合物相关的几种并发症。
PHF在水中具有高溶解度，但在非极性有机溶剂中的溶解度非常有限。PHF是多元醇，因此PHF上的羟基的选择性化学转化和纯化是具有挑战性的。此外，PHF含有pH敏感的缩醛基，并且在酸性条件下可降解。因此，通常需要选择性，温和和清洁的化学方法以将不可裂解的键联引入PHF。本文还提供了合成能够产生抗体-药物缀合物的PHF化合物的方法。在一些具体实施例中，本文描述的化合物的合成包括：
(a)使PHF与亲电试剂反应，形成含有能够被硫醇置换的活化基团的聚合物；
(b)通过硫醇取代所述活化基团，所述硫醇包含能够与药物或小分子共价键合(或经历共价键合反应)的键联。
在一些具体实施例中，合成包括实施例1中所示的合成步骤。在一些具体实施例中，合成还包括将包含所述键联的一部分单体单元转化为能够共价键合(或经历共价键合反应)到靶向部分的第二键联的步骤。在一些具体实施例中，合成包括实施例6或实施例7中所示的合成步骤。
可通过任何所述合成方法产生的本文所述的PHF缀合物包含嵌段重复嵌段单体单元(a)和/或(b)和/或(c)和/或(d)
L1是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任意组合所组成群组的连接基团；
L2不存在，或者可以是具下式者：
L2A是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，-C(O)-，-N(RC)-及其任意组合所组成群组的连接子基团；
L2B和L2C独立地不存在或是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基，-C(O)-，-N(RC)-及其任意组合所组成群组的连接子基团；
B2A和B2B独立缺失或是可裂解的连接子；
T是选自由化学治疗剂，微管抑制剂，DNA损伤剂和RNA转录抑制剂所组成群组的治疗剂。
L3是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任意组合所组成群组的的连接子基团；
Re是选自氢，烷基和杂烷基的取代基；
L4是下式的基团：
L4A是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，-C(O)-，-N(RC)-及其任何组合所组成群组的的连接子基团；
L4B和L4C独立地不存在或是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基，-C(O)-，-N(RC)-和它们的任意组合所组成群组的连接基团；
B4A和B4B独立地不存在或是可裂解的连接子；
C4A是选自由
以及所组成群组；
其中
A是-H或选自由抗体，合成功能化抗体，肽和靶向配体所组成群组的靶向部分；
“n”在每次出现时独立地为0至5的整数；
Rc和Rd在每次出现时独立地选自氢，烷基，杂烷基，环烷基和杂环基；
其中每个单体独立地取代任何另外的单体；
条件是式(I)化合物含有一种或多种治疗剂，T和一种或多种靶向部分A。在一些具体实施例中，PHF化合物包含聚合单体(a)，(b)，(d)和任选地(c)的嵌段：
其中“a”在每次出现时独立地为1至约3000的整数(例如，约1至约2000等)；
“b”在每次出现时独立地为1至约500的整数；
“c”不存在或在每次出现时独立地为1至约500的整数；
“d”在每次出现时独立地为1至约200的整数；和
单体单元(a)，(b)，(c)和(d)的每个嵌段共价连接至至少一个嵌段单体单元(a)，(b)，(c)和/或(d)，且每个单体单元的嵌段独立地取代任何其他单体单元的嵌段。用于B2A，B2B，B4A和B4B的示例性可裂解的连接子(例如，可生物降解的连接子等)可包括–S–S–，–C(＝O)O–，–OC(＝O)–，–C(＝O)NRc–，–N(Rc)C(＝O)–，–OC(＝O)O–，–NRcC(＝O)O–，–OC(＝O)N(Rc)–或–N(Rc)C(＝O)N(Rd)–，–C(＝O)N(Rc)C(＝O)–，–C(＝O)S–，–SC(＝O)–，–SC(＝O)S–，–OC(＝O)S–，–SC(＝O)O–，–OC(＝S)O–，–SC(＝S)S–，–N(Rc)SO2–，–SO2N(Rc)–，–N(Rc)SO2N(Rd)，–C(＝O)N(Rc)N(Rd)–，–N(Rc)N(Rd)C(＝O)–，–N(Rc)N(Rd)C(＝O)O–，–OC(＝O)N(Rc)N(Rd)–，–C(Rc)＝N–NH–C(＝O)–，–C(＝O)NH–N＝C(Rc)–，–C(Rc)＝N–O–，–O–N＝C(Rc)–， 以及通常，L2A，L2B，L2C及其组合(即，当不存在B2A和/或B2B时)是不可生物降解的连接子部分。
类似地，L4A，L4B和L4C及其组合(即，当不存在L4A和/或L4B时)可以是不可生物降解的连接子部分。在一些具体实施例中，L2不包含可裂解的连接子。
所述化合物还可具有重复嵌段单体单元(a)，(b)和(e)
L1是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任意组合所组成群组的连接子基团；
L2不存在，或者可以是具下式者：
L2A是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基及其任意组合的连接基团所组成群组；
L2B和L2C独立地不存在或是选自亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任意组合所组成群组的连接子基团；
B2A和B2B独立地不存在或是可裂解的连接子；
T是选自由化学治疗剂，微管抑制剂，DNA损伤剂和RNA转录抑制剂所组成群组的治疗剂。
L3是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任意组合所组成群组的连接子基团；
L4是下式的基团：
L4A是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基及其任意组合所组成群组的连接子基团；
L4B和L4C独立地不存在或是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任何组合所组成群组的连接子基团；
B4A和B4B独立地不存在或是可裂解的连接子
C4A是选自由
以及所组成群组；
A是-H或选自由抗体，合成功能化抗体，肽和靶向配体所组成群组的靶向部分；
“n”在每次出现时独立地为0至5的整数；
Rc和Rd在每次出现时独立地选自氢，烷基，杂烷基，环烷基和杂环基；
其中每个单体独立地取代任何另外的单体；
条件是式(II)化合物含有一种或多种治疗剂和一种或多种靶向部分。在一些具体实施例中，化合物可包含聚合单体(a)，(b)和(e)的嵌段：
其中“a”在每次出现时独立地为1至1860的整数；
“b”在每次出现时独立地为1至372的整数；
“e”在每次出现时独立地为1至186的整数；和
单体单元(a)，(b)和(e)的每个嵌段共价连接至至少一个嵌段单体单元(a)，(b)和/或(e)；和
每个单体单元的嵌段独立地取代任何其他单体单元的嵌段。通常，L2A，L2B，L2C及其组合(即，当不存在B2A和/或B2B时)是不可生物降解的连接子部分。类似地，L4A，L4B和L4C及其组合(即，当不存在L4A和/或L4B时)可以是不可生物降解的连接子部分。在一些具体实施例中，L2不包含可裂解的连接子。
还描述了药物组合物，其包含任何化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。药物组合物可用于抑制癌细胞的方法中，包括使癌细胞与包含有效量的一种或多种化合物的药物组合物接触。所述药物组合物还可以用于治疗或抑制患者的癌症的方法，包括使癌细胞与抗癌有效量的包含所述化合物的药物组合物接触。在一些具体实施例中，治疗可包括将有效量的药物组合物给予有需要的患者。
附图说明
当结合附图阅读时，可以更好地理解下述示例性具体实施例的详细描述。
然而，应该理解的是，本揭露内容不限于附图中所示的具体实施例的精确安排和手段。
图1描绘了用阿司他丁F(Auristatin F)，化合物14至化合物17和顺铂(Cisplatin)处理的存活％HCC 1954细胞的剂量反应曲线。
图2描绘了用阿司他丁F，化合物14至化合物17和顺铂处理的存活％的NCI-N87细胞的剂量响应曲线。
图3描绘了用阿司他丁F，化合物14至化合物17和顺铂处理的存活％SKBR3细胞的剂量响应曲线。
图4描绘了用阿司他丁F，化合物14至化合物17和顺铂处理的存活％的BT-474细胞的剂量响应曲线。
具体实施方式
定义
除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语通常具有与本领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。以下参考文献为本领域技术人员提供了本揭露中使用的许多术语的一般定义：Singleton等人,Dictionary of Microbiology and MolecularBiology(2nd ed.1994)；The Cambridge Dictionary of Science and Technology(Walker编辑,1988)；The Glossary of Genetics,5th Ed.,R.Rieger et al.(eds.),Springer Verlag(1991)；以及Hale&Marham,The Harper Collins Dictionary ofBiology(1991)。
通常，本文使用的命名法和医学，有机化学和聚合物化学中的实验室程序是彼等本领域公知和常用者。
如本文所用，冠词“一(a)”和“一(an)”指的是冠词的一个或多于一个(即，至少一个)语法对象。举例来说，“一个元素”表示一个元素或多于一个元素。
如本文所用，术语“约”将为本领域普通技术人员所理解，并且将在某种程度上根据其使用的上下文而变化。如本文所用，当提及诸如量，时间持续时间等可测量值时，术语“约”意味着包括特定值的±20％或±10％，例如±5％，例如±1％，例如±0.1％的变化，因为这些变化适合于执行所揭露的方法。
除非另有说明，否则本文所用的术语“烷基”本身或作为另一取代基的一部分是指支链或非支链的饱和烃基。术语“正烷基”是指无支链的烷基。术语“Cx-Cy烷基”是指包括在支链或非支链烃基中具有x和y碳原子的烷基。作为说明，但不限于，术语“C1-C8烷基”是指具有1，2，3，4，5，6，7或8个碳原子的直链或支链烃部分。“C1-C6”是指具有1，2，3，4，5或6个碳原子的的直链或支链烃部分，“C1-C4烷基”是指具有1，2，3，或4个碳原子的直链或支链烃部分，包括甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，异丁基，仲丁基和叔丁基。术语“C1-C4正烷基”是指具有1，2，3，或4个碳原子的直链烃部分，包括甲基，乙基，正丙基，和正丁基。“亚烷基”是指共价键合两个取代基或单个取代基两次的烷基取代基。
如本文所用，术语“芳族”是指具有一个或多个多不饱和环并具有芳族特征的碳环或杂环，即具有(4n+2)离域的π(pi)电子，其中n是整数。
除非另有说明，本文所用的术语“芳基”，单独使用或与其它术语组合使用时，是指含有一个或多个环(通常为一个，两个或三个环)的碳环芳族体系，其中这些环可以连接在一起以悬垂的方式，例如联苯，或可以是稠合的，例如萘。实例包括苯基，蒽基和萘基。优选的是苯基和萘基，最优选的是苯基。“亚芳基”是共价键合两个取代基或单个取代基两次的芳基取代基。
除非另有说明，本文所用的术语“杂烷基”本身或作为另一取代基的一部分是指支链或非支链烷基，其中主链中的一个或多个碳原子已被杂原子取代。杂原子包括但不限于氧，硫，硅，磷，氮原子或其组合。“亚杂烷基”是共价键合两个取代基或单个取代基两次的杂烷基取代基。
如本文所用，术语“酰氨基烷基”是指在烷基的任一末端或烷基内具有-C(O)NRa-或-NRaC(O)-基团的烷基。例如，Ra选自H，烷基和杂烷基。“酰氨基亚烷基”是共价键合两个取代基或单个取代基两次的酰氨基烷基取代基。
如本文所用，术语“酰氨基杂烷基”是指在杂烷基的任一末端或杂烷基链内具有-C(O)NRa-或-NRaC(O)-基团的杂烷基。例如，Ra选自H，烷基和杂烷基。
“酰氨基亚杂烷基”是共价键合两个取代基或单个取代基两次的酰氨基杂烷基取代基。
除非另有说明，本文所用的术语“烷氧基”本身或作为另一取代基的一部分是指-O-烷基，包括1至10个碳原子的直链，支链，饱和环状构型及其组合，通过氧与母体分子结构连接。实例包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基，叔丁氧基，戊氧基，环丙氧基，环己氧基等。在一些具体实施例中，烷氧基可具有1至6个碳，表示为C1至C3。在一些具体实施例中，C1-4烷氧基是涵盖1至4个碳原子的直链和支链烷基的烷氧基。在一些方面，烷氧基是(C1-C3)烷氧基，例如但不限于乙氧基和甲氧基。
除非另有说明，本文所用的术语“杂环”或“杂环基(heterocyclyl)”或“杂环(heterocyclic)”本身或作为另一取代基的一部分是指由碳原子组成的未取代或取代的，稳定的单环或多环杂环系统，所述系统是由碳和至少一个选自由N，O和S所组成群组的杂原子，并且其中氮和硫杂原子可以任选被氧化，并且氮原子可以任选被季铵化。除非另有说明，杂环系统可以连接在任何提供稳定结构的杂原子或碳原子上。杂环本质上可以是芳族的或非芳族的。在一个具体实施例中，杂环是杂芳基。“亚杂环基”是共价键合两个取代基或单个取代基两次的杂环基取代基。
如本文所用，术语“杂芳基”或“杂芳族”是指具有芳族特征的杂环。多环杂芳基可包括一个或多个部分饱和的环。实例包括四氢喹啉和2,3-二氢苯并呋喃基。“亚杂芳基”是共价键合两个取代基或单个取代基两次的杂芳基取代基。
非芳族杂环的实例包括单环基团，例如氮丙啶，环氧乙烷，硫杂丙环，氮杂环丁烷，氧杂环丁烷，硫杂环丁烷，吡咯烷，吡咯啉，咪唑啉，吡唑烷，二氧戊环，环丁砜，2,3-二氢呋喃，2,5-二氢呋喃，四氢呋喃，噻吩烷，哌啶，1,2,3,6-四氢吡啶，1,4-二氢吡啶，哌嗪，吗啉，硫代吗啉，吡喃，2,3-二氢吡喃，四氢吡喃，1,4-二恶烷，1,3-二恶烷，高哌嗪，高哌啶，1,3-二氧杂环庚烷，4,7-二氢-1,3-二氧杂环庚烯和六亚甲基氧化物。
杂芳基的实例包括吡啶基，吡嗪基，嘧啶基(特别是2-和4-嘧啶基)，哒嗪基，噻吩基，呋喃基，吡咯基(特别是2-吡咯基)，咪唑基，噻唑基，恶唑基，吡唑基(特别是3-和5-吡唑基)，异噻唑基，1,2,3-三唑基，1,2,4-三唑基，1,3,4-三唑基，四唑基，1,2,3-噻二唑基，1,2,3-恶二唑基，1,3,4-噻二唑基和1,3,4-恶二唑基。
多环杂环的实例包括吲哚基(特别是3-，4-，5-，6-和7-吲哚基)，二氢吲哚基，喹啉基，四氢喹啉基，异喹啉基(特别是1-和5-异喹啉基)，1,2,3,4-四氢异喹啉基，噌嗪基，喹喔啉基(特别是2-和5-喹喔啉基)，喹唑啉基，酞嗪基，1,8-萘啶基，1,4-苯并二恶烷基，香豆素，二氢香豆素，1,5-萘啶基，苯并呋喃基(特别是3-，4-，5-，6-和7-苯并呋喃基)，2,3-二氢苯并呋喃基，1,2-苯并异恶唑基，苯并噻吩基(特别是3-，4-，5-，6-和7-苯并噻吩基)，苯并恶唑基，苯并噻唑基(特别是2-苯并噻唑基和5-苯并噻唑基)，嘌呤基，苯并咪唑基(特别是2-苯并咪唑基)，苯并三唑基，噻吨基，咔唑基，咔啉基，吖啶基，吡咯里西啶基和喹嗪基。
上述杂环基和杂芳基部分的列表旨在是代表性，而非限制性的。
如本文所用，关于核磁共振结果的术语“δ”是指测量的核的测量的化学位移。除非另有说明，否则δ是以ppm为单位。
如本文所用，术语“DMSO”是指二甲基亚砜。
除非另有说明，本文所用的术语“卤代”或“卤素”单独使用或作为另一取代基的一部分是指氟，氯，溴或碘原子，如氟，氯或溴，进一步如氟或氯。
如本文所用，“羟基”是指-OH。
如本文所用，术语“反应条件”是指物理处理，化学试剂或其组合，其是促进反应所需或任选地需要的。反应条件的非限制性实例是电磁辐射，热，催化剂，化学试剂(例如但不限于酸，碱，亲电试剂或亲核试剂)和缓冲剂。
如本文所用，术语“盐”是指本文考虑的化合物的盐，包括其无机酸，有机酸，无机碱，有机碱，溶剂化物，水合物或包合物。如本文所用，术语“盐”包括游离酸或游离碱的加成盐，其是可用于本文所述方法的化合物。在一些情况下，不希望的盐可能具有诸如高结晶度的性质，这可以在本文所述方法的实践中具有实用性，例如，在合成或纯化本文所述化合物的过程中的实用性。
合适的酸加成盐可以由无机酸或有机酸制备。无机酸的实例包括盐酸，氢溴酸，氢碘酸，硝酸，碳酸，硫酸，磷酸，高氯酸和四氟硼酸。合适的有机酸可选自脂族，脂环族，芳族，芳脂族，杂环，羧酸和磺酸类有机酸，其实例包括甲酸，乙酸，丙酸，琥珀酸，乙醇酸，葡糖酸，乳酸，苹果酸，酒石酸，柠檬酸，抗坏血酸，葡萄糖醛酸，马来酸，富马酸，丙酮酸，天冬氨酸，谷氨酸，苯甲酸，邻氨基苯甲酸，4-羟基苯甲酸，苯乙酸，扁桃酸，双羟萘酸(扑酸)，甲磺酸，乙磺酸，苯磺酸，泛酸，三氟甲磺酸，2-羟基-乙磺酸，对甲苯磺酸，对氨基苯磺酸，环己基氨基磺酸，硬脂酸，海藻酸，β-羟基丁酸，水杨酸，半乳糖和半乳糖醛酸。所揭露化合物的合适的碱加成盐包括，例如，金属盐，包括碱金属，碱土金属和过渡金属盐，例如锂，钙，镁，钾，铵，钠和锌盐。可接受的碱加成盐还包括由碱性胺制成的有机盐，例如N，N'-二苄基-乙二胺，氯普鲁卡因(chloroprocain)，胆碱，二乙醇胺，乙二胺，葡甲胺(N-甲基-葡糖胺)和普鲁卡因(procain)。所有这些盐可以通过常规方法由相应的游离碱化合物通过使例如适当的酸或碱与相应的游离碱反应来制备。
如本文所用，术语“取代的”是指原子或原子团已经取代氢作为与另一基团连接的取代基。除非另有说明，否则本文所述的任何基团均可被取代。
对于芳基和杂环基，应用于这些基团的环的术语“取代的”是指在允许这种取代处的任何取代水平，即单-，二-，三-，四-或五-取代。取代基是独立选择的，并且取代可以在任何化学上可接近的位置。在一个具体实施例中，取代基的数目在1至4之间变化。在另一个具体实施例中，取代基的数目在1至3之间变化。在又一个具体实施例中，取代基的数目在1和2之间变化。在又一个具体实施例中，取代基独立地选自C1-C6烷基，-OH，C1-C6烷氧基，卤素，氨基，乙酰氨基和硝基。如本文所用，当取代基是烷基或烷氧基时，碳链可以是支链的，直链的或环状的，例如直链的。
如本文所用，术语“靶向部分”是能够结合生物实体的化学部分。术语靶向部分可以指化学物质，例如抗体，酶，蛋白质或肽或任何其他生物结合配体。
如本文所用，术语药剂的“有效量”或“治疗有效量”是足以产生有益或所需结果的量，例如临床结果，并且因此，“有效量”取决于正在应用所述剂的上下文。例如，在给药作为抗癌剂的药剂的情况下，有效量的药剂是例如足以实现减轻或改善或预防(prevention)或预防(prophylaxis)一种或多种症状或病症的量；减少癌症，疾病或病况的程度；稳定(即没有恶化)癌症，病症或病况的状态；预防癌症，疾病或病况的传播；延迟或减缓疾病，病症或病况的进展；改善或缓和疾病，病症或病况；与不给药药剂所获得的反应相比，无论是可检测的还是不可检测的缓解。
如本文所用的术语“药物组合物”表示含有与药学上可接受的赋形剂一起配制的本文所述化合物的组合物。在一些具体实施例中，药物组合物在政府管理机构的批准下制造或销售，作为治疗哺乳动物疾病的治疗方案的一部分。药物组合物可以配制成例如以单位剂型口服给药(例如片剂，胶囊，囊片，软胶囊或糖浆)；用于局部给药(例如，作为乳膏，凝胶，洗剂或软膏)；用于静脉内给药(例如，作为无颗粒栓塞的无菌溶液和适于静脉内使用的溶剂系统)；或在本文所述的任何其他配方中(见下文)。用于制备本发明组合物的有用的药物载剂可以是固体，液体或气体。因此，组合物可以采取片剂，丸剂，胶囊，栓剂，粉末，肠溶包衣或其他受保护的制剂的形式(例如，结合离子交换树脂或脂质-蛋白质囊泡中的包装)，持续释放制剂，溶液，悬浮液，酏剂和气溶胶。载剂可选自各种油，包括石油，动物，植物或合成来源的油，例如花生油，大豆油，矿物油和芝麻油。水，盐水，葡萄糖水溶液和二醇是优选的液体载剂，特别是(当与血液等渗时)用于可注射溶液。例如，用于静脉内给药的制剂包含活性成分的无菌水溶液，其通过将固体活性成分溶解在水中以产生水溶液，并使溶液无菌来制备。合适的药物赋形剂包括淀粉，纤维素，滑石，葡萄糖，乳糖，滑石，明胶，麦芽，大米，面粉，白垩，二氧化硅，硬脂酸镁，硬脂酸钠，甘油单硬脂酸酯，氯化钠，脱脂奶粉，甘油，丙二醇，水和乙醇。所述组合物可以经受常规的药物添加剂，例如防腐剂，稳定剂，润湿剂或乳化剂，用于调节渗透压的盐和缓冲剂。合适的药物载剂及其制剂描述于E.W.Martin的Remington's Pharmaceutical Sciences中。在任何情况下，这些组合物将含有有效量的活性化合物和合适的载剂，以便制备适当的剂型以用于给药受体。
如本文所用，“单位剂量”是包含预定量活性成分的离散量的药物组合物。活性成分的量通常等于会给药受试者的活性成分的剂量或这种剂量的方便部分，例如这种剂量的一半或三分之一。单位剂型可以是单日剂量或多日剂量中的一种(例如，每天约1至4次或更多次)。当使用多个日剂量时，每个剂量的单位剂型可以相同或不同。
将理解，本文化合物的描述受到本领域技术人员已知的化学键合原理的限制。因此，当基团可以被许多取代基中的一个或多个取代时，选择这样的取代以符合关于化合价等的化学键合原理，并得到非固有不稳定的化合物。例如，任何碳原子将与两个，三个或四个其他原子键合，与碳的四个价电子一致。
贯穿本揭露内容，本揭露的各个方面可以以范围格式呈现。应当理解，范围形式的描述仅仅是为了方便和简洁，不应该被解释为对本发明权利要求范畴的不可改变的限制。因此，应该认为范围的描述具体揭露了所有可能的子范围以及所述范围内的各个数值，并且在适当时，范围内的数值的部分整数。例如，应当认为对诸如1至6的范围的描述具有特别揭露的子范围，例如1至3，1至4，1至5，2至4，2至6，3至6等，以及所述范围内的个别数字，例如，1，2，2.7，3，4，5，5.3和6。无论范围的广度如何，这都适用。
化合物与组合物
本文提供药物递送系统，其包括从聚合物主链形成的抗体-药物缀合物，与抗体连接的第一连接子和与治疗剂或小分子连接的第二连接子。在一个具体实施例中，所述聚合物是基于聚-1-羟基甲基乙烯基羟基甲基缩甲醛(PHF)的聚合物。在一些具体实施例中，第一连接子包括与聚合物键合的硫化物(-S-)，其与靶向部分(例如抗体)共价连接。在一些具体实施例中，第二连接子包括与聚合物键合的硫化物(-S-)，其与治疗剂连接。在其他具体实施例中，第二连接子与蛋白质连接。蛋白质可包含半胱氨酸和/或赖氨酸。在一些具体实施例中，半胱氨酸和/或赖氨酸可以是与蛋白质缀合的点。
在某些具体实施例中，本发明的聚合物是聚缩醛，例如聚-1-羟基甲基乙烯基羟基甲基缩甲醛(PHF)。在其他具体实施例中，聚缩醛的分子量为约10kDa至250kDa。
在某些具体实施例中，靶向部分选自由抗体，合成功能化抗体，肽和其他靶向配体所组成群组。靶向抗体的实例可包括，但不限于，对癌细胞中过表达的抗原特异的单克隆抗体，驱动癌基因调节的抗原，肿瘤基质中的抗原和血液系统中的抗原或血液系统恶性肿瘤中发现的抗原。在某些具体实施例中，靶向部分可包括，但不限于，HER-2，EGFR，GPNMB，CD56，TACSTD2(TROP2)，CEACAM5，叶酸受体-α，间皮素，ENPP3，鸟苷酸环化酶C，SLC44A4，NaPi2b，CD70，粘蛋白1，STEAP1，连接蛋白4，5T4，SLTRK6，SC-16，LIV-1，P-钙粘着蛋白，PSMA，纤连蛋白外结构域B，内皮素受体ETB，肌腱蛋白c，胶原蛋白IV，VEGFR2，骨膜蛋白，CD30，CD79b，CD19，CD22，CD138，CD37，CD33，CD74，CD19和CD98。在某些具体实施例中，靶向部分选自曲妥珠单抗(trastuzumab)和帕妥珠单抗(pertuzumab)。
不受任何一种理论的限制，靶向部分可以使治疗剂或小分子定位于特定的靶向位点，例如肿瘤或组织。这可以有效地增加治疗剂在靶向位点的功效，同时最小化对正常细胞的不想要的副作用。
在某些具体实施例中，治疗剂是化学治疗剂(例如喹诺酮类生物碱，例如喜树碱等)。在一些具体实施例中，治疗剂(例如，化学治疗剂)可包括，但不限于，微管抑制剂，DNA损伤剂和RNA转录抑制剂，及其任何组合。在其他具体实施例中，微管抑制剂可以是一种或多种选自由阿司他丁，美登醇(maytansinoid)，紫杉醇衍生物，长春花生物碱及其任何衍生物所组成群组，但不限于此。在其他具体实施例中，DNA损伤剂可以是一种或多种选自由加利车霉素(calicheamicin)，倍癌霉素(duocarmycin)，多柔比星(doxorubicin)，CC-1065类似物，甲氨蝶呤，吡咯并苯并二氮杂卓(PBD)及其任何衍生物所组成群组，但不限于此。在其他具体实施例中，RNA转录抑制剂可以是鹅膏覃碱(amanitin)，包括α-鹅膏覃碱，
β-鹅膏覃碱，γ-鹅膏覃碱和ε-鹅膏覃碱及其任何衍生物。治疗剂可以是微管蛋白抑制剂，激酶抑制剂，MEK抑制剂，KSP抑制剂或其任何组合。
本发明提供如下所示的式(I)的抗体-药物缀合物，其包含羟基单体嵌段(a)和/或(b)和/或(c)和/或(d)。
“*”表示与选自由(a)，(b)，(c)和(d)所组成群组的式的游离羟基单体的另外区段的共价键，其中每个单体的取代与任何另外的单体无关；
L1是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任意组合所组成群组的连接基团；
L2不存在，或者可以是具下式者：
其中：
L2A是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基及其任意组合所组成群组的连接基团；
B2A不存在或选自由–S–S–，–C(＝O)O–，–OC(＝O)–，–C(＝O)NRc–，–NRcC(＝O)–，–OC(＝O)O–，–NRcC(＝O)O–，–OC(＝O)NRc–或–NRcC(＝O)NRd–，–C(＝O)NRcC(＝O)–，–C(＝O)S–，–SC(＝O)–，–SC(＝O)S–，–OC(＝O)S–，–SC(＝O)O–，–OC(＝S)O–，–SC(＝S)S–，–NRcSO2–，–SO2NRc–，–NRcSO2NRd–，–C(＝O)NRcNRd–，–NRcNRdC(＝O)–，–NRcNRdC(＝O)O–，–OC(＝O)NRcNRd–，–CRc＝N–NH–C(＝O)–，–C(＝O)NH–N＝CRc–，–CRc＝N–O–以及–O–N＝CRc–的可裂解的连接子，其中Rc和Rd各自是独立地选自氢，烷基，杂烷基，环烷基和杂环基的取代基；
L2B可以不存在或选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任何组合所组成群组的连接子基团；
B2B可以不存在或是选自–S–S–，–C(＝O)O–，–OC(＝O)–，–C(＝O)NRc–，–NRcC(＝O)–，–OC(＝O)O–，–NRcC(＝O)O–，–OC(＝O)NRc–或–NRcC(＝O)NRd–，–C(＝O)NRcC(＝O)–，–C(＝O)S–，–SC(＝O)–，–SC(＝O)S–，–OC(＝O)S–，–SC(＝O)O–，–OC(＝S)O–，–SC(＝S)S–，–NRcSO2–，–SO2NRc–，–NRcSO2NRd–，–C(＝O)NRcNRd–，–NRcNRdC(＝O)–，–NRcNRdC(＝O)O–，–OC(＝O)NRcNRd–，–CRc＝N–NH–C(＝O)–，–C(＝O)NH–N＝CRc–，–CRc＝N–O–以及–O–N＝CRc–的可裂解的连接子，其中Rc和Rd各自是独立地选自氢，烷基，杂烷基，环烷基和杂环基的取代基；
L2c可以不存在或是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任何组合所组成群组的连接基团；
T是治疗剂；
L3是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任意组合所组成群组的连接基团；
Re是选自氢，烷基和杂烷基的取代基；
L4是具下式的基团：
其中：
L4A是选自亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基及其任意组合的连接基团；
B4A不存在或或是选自–S–S–，–C(＝O)O–，–OC(＝O)–，–C(＝O)NRc–，–NRcC(＝O)–，–OC(＝O)O–，–NRcC(＝O)O–，–OC(＝O)NRc–或–NRcC(＝O)NRd–，–C(＝O)NRcC(＝O)–，–C(＝O)S–，–SC(＝O)–，–SC(＝O)S–，–OC(＝O)S–，–SC(＝O)O–，–OC(＝S)O–，–SC(＝S)S–，–NRcSO2–，–SO2NRc–，–NRcSO2NRd–,–C(＝O)NRcNRd–，–NRcNRdC(＝O)–，–NRcNRdC(＝O)O–，–OC(＝O)NRcNRd–,–CRc＝N–NH–C(＝O)–，–C(＝O)NH–N＝CRc–，–CRc＝N–O–，–O–N＝CRc–的可裂解的连接子，其中Rc和Rd各自是独立地选自氢，烷基，杂烷基，环烷基和杂环基的取代基；
L4B不存在或是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任何组合所组成群组的子连接基团，
B4B不存在或或选自–S–S–，–C(＝O)O–，–OC(＝O)–，–C(＝O)NRc–，–NRcC(＝O)–，–OC(＝O)O–，–NRcC(＝O)O–，–OC(＝O)NRc–或–NRcC(＝O)NRd–，–C(＝O)NRcC(＝O)–，–C(＝O)S–，–SC(＝O)–，–SC(＝O)S–，–OC(＝O)S–，–SC(＝O)O–，–OC(＝S)O–，–SC(＝S)S–，–NRcSO2–，–SO2NRc–，–NRcSO2NRd–，–C(＝O)NRcNRd–，–NRcNRdC(＝O)–，–NRcNRdC(＝O)O–，–OC(＝O)NRcNRd–，–CRc＝N–NH–C(＝O)–，–C(＝O)NH–N＝CRc–，–CRc＝N–O–,–O–N＝CRc–的可裂解的连接子，其中Rc和Rd各自是独立地选自氢，烷基，杂烷基，环烷基和杂环基的取代基；
L4c不存在或是选自亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任何组合的连接基团；
C4A是选自以下的连接子基团：
A是如上所述的靶向部分，或H；
n是0至5的整数
a是1至1860的整数；
b是1至372的整数；
c是0至465的整数；
d是1至186的整数；以及
条件是式(I)的抗体-药物缀合物必须含有一种或多种治疗剂和一种或多种靶向部分。
本发明还提供如下所示的式(II)的抗体-药物缀合物，其包含羟基单体嵌段(a)，(b)和(e)：
其中*，L1，L2，T，L3，L4和A如上所述；
a是1至1860的整数；
b是1至372的整数；
e是1至186的整数；
条件是式(II)的抗体-药物缀合物必须含有一种或多种治疗剂和一种或多种靶向部分。
在某些具体实施例中，可裂解的连接子B2A，B2B，B4A和B4B可以被酶促裂解，可被生物降解，或可以通过pH的变化(例如酸或碱不稳定)而裂解。也可以使用在还原或氧化条件下可裂解的连接子(综述：Jain等人，Pharm.Res.2015,32,第3526-3540页)。可裂解连接子可以选自但不限于以下结构中的一种或多种：
以及
在其他具体实施例中，连接子L2不具有可裂解的键联(B2A和B2B都不存在)，并且治疗剂T可以通过抗体降解而被裂解(参见美国公开案第2005/0238649号和本文的参考文献)。在一些具体实施例中，单体单元(b)具有以下结构：
在某些具体实施例中，靶向部分具有亲核基团，使其与亲电子C4A反应。在其他具体实施例中，靶向部分包含具有化学侧链的位点特异性修饰的非天然氨基酸，其允许与C4A的双正交缀合化学。在某些具体实施例中，靶向部分用叠氮化物或炔烃修饰，以允许分别在C4A上与炔烃或叠氮化物进行[3+2]环加成反应。
在其他具体实施例中，靶向部分(A)可以通过选自由N-琥珀酰亚胺基-4-(马来酰亚胺甲基)环己烷羧酸酯(SMCC)，4-(N-马来酰亚胺基甲基))环己烷-1-羧酸磺基琥珀酰亚胺酯(sulfo-SMCC)，马来酰亚胺-聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺，N-琥珀酰亚胺基-1-(2-吡啶基二硫代)丙酸酯(SPDP)，N-琥珀酰亚胺基-4-(2-吡啶基二硫代)戊酸酯(SPP)，N-琥珀酰亚胺基-4-(2-吡啶基二硫代)丁酸酯(SPDB)，碘乙酸N-琥珀酰亚胺酯(SLA)，溴乙酸N-琥珀酰亚胺酯(SBA)和亚胺基3-(溴乙酰氨基)丙酸N-琥珀酯(SBAP)所组成群组的交联剂与L4C连接。
通常，治疗剂(T)与靶向部分(A)的摩尔比通常大于1：1。在一些具体实施例中，所述比例大于约5：1或大于约8：1或大于约10：1或大于约12：1或大于约15：1或大于约18：1。在一些具体实施例中，所述比例为约1：1至约20：1(例如，约5：1至约15：1，约8：1至约13：1等)。
在一些具体实施例中，式(I)化合物为化合物16，化合物17，化合物25或化合物30：
本发明还提供式(III)的阿司他丁衍生物：
其中LT是选自-(CH2)m-，-(OCH2)m-，-(OCH2CH2)m-和-(CH2CH2O)m-的连接部分，“m”是0至6的整数(即LT是键)；和
Rf是选自氢，–NH2,–C(O)–NH2,–[C(Rc)(Rd)]p–NH2,–C(O)–[C(Rc)(Rd)]p–NH2, 以及“p”是1至4的整数。在一些具体实施例中，阿司他丁衍生物具有以下结构：
其中“m”是1至6的整数；和
Rf选自： 以及在一些具体实施例中，阿司他丁衍生物可通过使Rf部分与具有合适官能基的聚合物接触而与PHF聚合物连接，以在聚合物和阿司他丁衍生物之间形成共价键。在一些具体实施例中，Rf包含所述喜树碱衍生物与所述化合物的连接点。Rf可以是氢(如果Rf是氢和连接点，那么它是键)或
本发明还提供具有式(IV)结构的喜树碱衍生物：
其中LT是选自-(CH2)m-，-(OCH2)m-，-(OCH2CH2)m-和-(CH2CH2O)m-的连接部分，“m”是0至6的整数(即LT是键)；和
Rf是选自氢，–NH2,–C(O)–NH2,–[C(Rc)(Rd)]p–NH2,–C(O)–[C(Rc)(Rd)]p–NH2, 以及“p”是1至4的整数。在一些具体实施例中，喜树碱衍生物可通过使Rf部分与具有合适官能基的聚合物接触而与PHF聚合物连接，以在聚合物和喜树碱衍生物之间形成共价键。在一些具体实施例中，Rf包含所述喜树碱衍生物与所述化合物的连接点。Rf可以是氢(如果Rf是氢和连接点，那么它是键)或
本发明的化合物可具有一个或多个立体中心，并且每个立体中心可以以(R)或(S)构型独立存在。在某些具体实施例中，本文描述的化合物是以光学活性或外消旋形式存在。本文所述化合物包括具有本文所述治疗有用性质的外消旋，光学活性，区域异构和立体异构形式或其组合。光学活性形式的制备以任何合适的方式实现，包括通过非限制性实例，通过用重结晶技术拆分外消旋形式，从光学活性原料合成，手性合成，或使用手性固定相进行色谱分离。本文通过外消旋配方表示的化合物进一步代表两种对映体中的任一种或其混合物，或者在存在两个或更多个手性中心的情况下，所有非对映异构体或其混合物。
在某些具体实施例中，本发明的化合物是以互变异构体形式存在。所有互变异构体都包括在本文所述化合物的范畴内。
本文所述的化合物还包括同位素标记的化合物，其中一个或多个原子被具有相同原子序数的原子置换，但原子质量或质量数不同于通常在自然界中发现的原子质量或质量数。适合包含在本文所述化合物中的同位素的实例包括，但不限于，2H，3H，11C，13C，14C，36Cl，18F，123I，125I，13N，15N，15O，17O，18O，32P和35S。在某些具体实施例中，用较重的同位素例如氘取代提供了更高的化学稳定性。同位素标记的化合物通过任何合适的方法或使用适当的同位素标记的试剂代替未另外使用的未标记的试剂的方法制备。
在某些具体实施例中，本文所述化合物通过其他方式标记，包括但不限于使用发色团或荧光部分，生物发光标记或化学发光标记。
在本文提供的所有具体实施例中，合适的任选取代基的实例不旨在限制要求保护的发明的范畴。本发明的化合物可含有本文提供的任何取代基或取代基的组合。
盐
本文所述的化合物可与酸或碱形成盐，并且这些盐包括在本发明中。术语“盐”包括可用于本发明方法的游离酸或碱的加成盐。术语“药学上可接受的盐”是指具有在药学应用中提供效用的范围内的毒性特征的盐。在某些具体实施例中，盐是药学上可接受的盐。尽管如此，药学上不可接受的盐类可具有诸如高结晶度的性质，其在本发明的实践中具有实用性，例如在本发明方法中有用的化合物的合成，纯化或配制过程中的实用性。
合适的药学上可接受的酸加成盐可以由无机酸或有机酸制备。无机酸的实例包括硫酸盐，硫酸氢盐，盐酸，氢溴酸，氢碘酸，硝酸，碳酸，硫酸和磷酸(包括磷酸氢盐和磷酸二氢盐)。合适的有机酸可选自脂族，脂环族，芳族，芳脂族，杂环，羧酸和磺酸类有机酸，其实例包括甲酸，乙酸，丙酸，琥珀酸，乙醇酸，葡糖酸，乳酸，苹果酸，酒石酸，柠檬酸，抗坏血酸，葡萄醣醛酸，马来酸，富马酸，丙酮酸，天冬氨酸，谷氨酸，苯甲酸，邻氨基苯甲酸，4-羟基苯甲酸，苯乙酸，扁桃酸，双羟萘酸(扑酸)，甲磺酸，乙磺酸，苯磺酸，泛酸，对氨基苯磺酸，2-羟基乙磺酸，三氟甲磺酸，对甲苯磺酸，环己基氨基磺酸，硬脂酸，海藻酸，β-羟基丁酸，水杨酸，半乳糖，半乳醣醛酸，甘油膦酸和糖精(例如醣酸(saccharinate)，蔗糖酸(saccharate))。相对于本发明的任何化合物，盐类可以由几分之一，一或超过一的摩尔当量的酸或碱组成。
本发明化合物的合适的药学上可接受的碱加成盐包括，例如，铵盐和金属盐，包括碱金属，碱土金属和过渡金属盐，例如钙，镁，钾，钠和锌盐。药学上可接受的碱加成盐还包括由碱性胺制成的有机盐，例如N,N'-二苯基乙烯-二胺，氯普鲁卡因，胆碱，二乙醇胺，乙二胺，葡甲胺(或N-甲基葡糖胺)和普鲁卡因。所有这些盐可以通过使例如适当的酸或碱与化合物反应由相应的化合物制备。
方法
本发明还提供抑制癌细胞的方法，所述方法包括给药抗癌有效量的包含式(I)化合物的组合物。在另一个具体实施例中，本文提供抑制癌细胞的方法，所述方法包括给药抗癌有效量的包含式(II)化合物的组合物。在某些具体实施例中，本发明提供治疗或抑制受试者的癌症的方法，所述方法包括将包含式(I)或式(II)化合物的组合物给药有需要的受试者。
在一些具体实施例中，癌症可以是HER2阳性癌症。在一些具体实施例中，癌症可以是乳腺癌。在一些具体实施例中，癌症可以是HER2阳性乳腺癌。
在该方法的一些具体实施例中，HER2在乳腺癌细胞中过表达。在一些情况下，式(I)或式(II)的化合物包含与PHF聚合物连接的抗肿瘤剂(例如阿司他丁F)，例如在化合物16或17中。在一些具体实施例中，式(I)或式(II)的化合物包括与PHF聚合物连接的抗体，例如曲妥珠单抗。已知曲妥珠单抗与HER2过表达乳腺癌细胞中的HER2蛋白的细胞外结构域结合。本发明的化合物可使药物靶向癌细胞，从而使脱靶活性或毒性最小化。
在某些具体实施例中，本发明的方法包括给药式(I)或式(II)的化合物作为药物组合物的一部分，还包含一种或多种另外的成分。在一些具体实施例中，本发明的化合物可以包装为冻干块状物，其可以用一定体积的无菌水重构。
在某些具体实施例中，本发明的方法包括将式(I)或式(II)的化合物与另一种化合物或治疗剂(例如抗肿瘤剂，化学治疗剂，抗细胞增殖剂或其任何组合)联合给药。在某些具体实施例中，本发明的方法包括将式(I)或式(II)的化合物与另一种标准乳腺癌治疗方法联合给药，包括但不限于外科手术和放射疗法。
在该方法的某些具体实施例中，本发明化合物可以1ng/kg/天至500mg/kg/天的剂量给药受试者。在一些优选的具体实施例中，本发明化合物可以0.1mg/kg至约10mg/kg的剂量给药受试者。在一些具体实施例中，每日给药化合物。在一些具体实施例中，每隔一天给药化合物。在一些具体实施例中，每周给药一次，每隔一周给药一次，每月给药一次或每隔一个月给药一次化合物。
在一些具体实施例中，化合物作为标准化疗方案的一部分给药。
合成
通过采用本领域技术人员已知的标准合成方法和程序，可以从市售起始材料，文献中已知的化合物或易于制备的中间体制备化合物。化合物也可以由实施例1至27中概述的合成方案制备。用于制备有机分子和官能基转化和操作的标准合成方法和程序可以从相关科学文献或本领域的标准教科书中容易地获得。应将理解，在给出典型或优选的工艺条件(即反应温度，时间，反应物的摩尔比，溶剂，压力等)的情况下，除非另有说明，否则也可以使用其他工艺条件。最优选的反应条件可随所用的特定反应物或溶剂而变化，但这些条件可由本领域技术人员通过常规优化程序确定。有机合成领域的技术人员将认识到，为了优化本文所述化合物的形成，可以改变所提出的合成步骤的性质和顺序。
可用于合成本文所述化合物的合成化学转化(包括保护基团方法)是本领域已知的，包括例如R.C.Larock,Comprehensive Organic Transformations,2d.Ed.,Wiley-VCHPublishers(1999)；P.G.M.Wuts和T.W.Greene,Protective Groups in OrganicSynthesis,4th Ed.,John Wiley and Sons(2007)；L.Fieser和M.Fieser,Fieser’sReagents for Organic Synthesis,John Wiley and Sons(1994)；以及L.Paquette,ed.,Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis,John Wiley and Sons(1995)及其后续版本。
可以根据本领域已知的任何合适的方法监测本文所述的方法。例如，可以通过光谱手段监测产物形成，例如核磁共振光谱(例如，1H或13C)，红外光谱(FT-IR)，分光亮度法(例如，UV-可见光)或质谱(MS)，或通过色谱法如高效液相色谱(HPLC)或薄层色谱(TLC)。
化合物的制备可涉及各种化学基团的保护和去保护。本领域技术人员可以容易地确定对保护和去保护的需要以及适当保护基团的选择。保护基团的化学性质可以在例如Greene等人,Protective Groups in Organic Synthesis,2d.Ed.,Wiley&Sons,1991中找到，其全部内容通过引用方式并入本文。
本文所述方法的反应可在合适的溶剂中进行，所述溶剂可由有机合成领域的技术人员容易地选择。合适的溶剂可以在进行反应的温度与起始材料(反应物)，中间体或产物实质上不反应，即温度范围可以为溶剂的冷冻温度至溶剂的沸腾温度。给定的反应可以在一种溶剂或一种以上溶剂的混合物中进行。取决于具体的反应步骤，可以选择用于特定反应步骤的合适溶剂。
化合物的外消旋混合物的拆分可以通过本领域已知的许多方法中的任何一种进行。示例性方法包括分别制备相应醇或胺的Mosher酯或酰胺衍生物。然后通过质子和/或19FNMR光谱测定酯或酰胺的绝对构型。一种示例性方法包括使用“手性拆分酸”进行分级重结晶，所述“手性拆分酸”是光学活性的形成盐有机酸。用于分级重结晶方法的合适的拆分剂是，例如，光学活性酸，例如D和L形式的酒石酸，二乙酰基酒石酸，二苯甲酰基酒石酸，扁桃酸，苹果酸，乳酸或各种光学活性的樟脑磺酸。外消旋混合物的拆分也可以通过在填充有光学活性拆分剂(例如二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸)的柱上洗脱来进行。合适的洗脱溶剂组合物可由本领域技术人员确定。
药物组合物和制剂
本发明还涵盖至少一种本发明化合物或其盐的药物组合物用于实施本发明方法的用途。
这种药物组合物可以由适于给药受试者的形式的至少一种本发明化合物或其盐所组成，或者所述药物组合物可以包含至少一种本发明化合物或其盐，和一种或多种药学上可接受的载剂，一种或多种另外的成分，或这些的一些组合。如本领域所熟知的，本发明的至少一种化合物可以生理学上可接受的盐的形式存在于药物组合物中，例如与生理学上可接受的阳离子或阴离子组合。
在某些具体实施例中，可以给药可用于实施本发明方法的药物组合物以递送1ng/kg/天至100mg/kg/天的剂量。在其他具体实施例中，可给药可用于实施本发明的药物组合物以递送1ng/kg/天至500mg/kg/天的剂量。
本发明药物组合物中的活性成分，药学上可接受的载剂和任何其它成分的相对量将根据所治疗的受试者的身份，体积和状况而变化，并且还取决于将给药的组合物的途径。举例来说，组合物可包含0.1％至100％(重量/重量)的活性成分。
可用于本发明方法的药物组合物可适用于吸入，口服，直肠，阴道，肠胃外，局部，透皮，肺，鼻内，口腔，眼科，鞘内，静脉内或其他给药途径。其他预期的制剂包括投射的纳米颗粒，脂质体制剂，含有活性成分的重新密封的红细胞和基于免疫学的制剂。给药途径将对于技术人员来说是显而易见的，并且取决于许多因素，包括所治疗疾病的类型和严重程度，所治疗的兽医或人类患者的类型和年龄等。
本文所述药物组合物的制剂可通过药理学领域已知或以后开发的任何方法制备。通常，这种制备方法包括使活性成分与载剂或一种或多种其它辅助成分结合的步骤，然后，如果必要或需要，将产品成型或包装成所需的单剂量或多剂量单位。
尽管本文提供的药物组合物的描述主要涉及适合于对人类进行伦理给药的药物组合物，本领域技术人员将理解，此类组合物通常适合给药于各种动物。适合对人类给药的药物组合物的改性使组合物适合对各种动物给药是很好理解的，并且普通技术的兽医药理学家可以仅通过普通的(如果有的话)实验来设计和进行这种修饰。预期给予本发明药物组合物的受试者包括，但不限于，人类和其他灵长类动物，哺乳动物，包括商业上相关的哺乳动物，如牛，猪，马，绵羊，猫和狗。
在一个具体实施例中，使用一种或多种药学上可接受的赋形剂或载剂配制本发明的组合物。在一个具体实施例中，本发明的药物组合物包含治疗有效量的至少一种本发明化合物和药学上可接受的载剂。可用的药学上可接受的载剂包括，但不限于，甘油，水，盐水，乙醇和其他药学上可接受的盐溶液，例如磷酸盐和有机酸盐。Remington'sPharmaceutical Sciences(1991,Mack Publication Co.,New Jersey)中描述了这些和其他药学上可接受的载剂的实例。
载剂可以是溶剂或分散介质，其含有例如水，乙醇，多元醇(例如甘油，丙二醇和液体聚乙二醇等)，其合适的混合物和植物油。例如，通过使用诸如卵磷脂的涂层，通过在分散的情况下保持所需的粒度和通过使用表面活性剂，可以保持适当的流动性。可以通过各种抗细菌剂和抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯，氯丁醇，苯酚，抗坏血酸，硫柳汞等来实现对微生物作用的预防。在许多情况下，可以在组合物中包括等渗剂，例如糖，氯化钠或多元醇如甘露醇和山梨糖醇。通过在组合物中包括延迟吸收的剂，例如单硬脂酸铝或明胶，可以实现可注射组合物的延长吸收。
制剂可以与常规赋形剂混合使用，所述赋形剂是适用于口服，肠胃外，鼻腔，静脉内，皮下，肠内或本领域已知的任何其它合适给药方式的药学上可接受的有机或无机载体物质。药物制剂可以灭菌，并且如果需要，可以与助剂混合，例如润滑剂，防腐剂，稳定剂，润湿剂，乳化剂，影响渗透压缓冲剂的盐，着色剂，调味剂和/或芳香物质等。它们也可以根据需求与其他活性剂(例如其他镇痛剂)组合。
如本文所用，“另外的成分”包括，但不限于，以下一种或多种：赋形剂；表面活性剂；分散剂；惰性稀释剂；制粒和崩解剂；粘合剂；润滑剂；甜味剂；调味剂；着色剂；防腐剂；生理可降解的组合物，如明胶；含水载体和溶剂；油性载体和溶剂；悬浮剂；分散剂或润湿剂；乳化剂，缓和剂；缓冲剂；盐；增稠剂；填料；乳化剂；抗氧化剂；抗生素；抗真菌剂；稳定剂；和药学上可接受的聚合或疏水材料。可以包括在本发明的药物组合物中的其他“其他成分”是本领域已知的并且描述于例如Genaro,ed.(1985，Remington's PharmaceuticalSciences,Mack Publishing Co.,Easton,PA)，其通过引用方式并入本文。
本发明的组合物可包含占所述组合物的总重量约0.005％至2.0％的防腐剂。所述防腐剂用于在暴露于环境中的污染物的情况下防止变质。可用于本发明的防腐剂的实例包括，但不限于，彼等选自由苄醇，山梨酸，对羟基苯甲酸酯，咪唑脲及其组合所组成群组者。非限制性防腐剂是约0.5％至2.0％苄醇和0.05％至0.5％山梨酸的组合。
所述组合物优选包含抗氧化剂和螯合剂，其抑制化合物的降解。一些化合物的示例性抗氧化剂是BHT，BHA，α-生育酚和抗坏血酸，优选范围为约0.01％至0.3％，例如BHT，占组合物总重量的0.03％至0.1％。螯合剂可以以组合物总重量的0.01％至0.5％的量存在。示例性的螯合剂包括乙二胺四乙酸盐(例如乙二胺四乙酸二钠)和柠檬酸，其重量范围为组合物总重量的约0.01％至0.20％，例如0.02％至0.10％重量。螯合剂可用于螯合组合物中的金属离子，这可能对制剂的保存期限有害。虽然BHT和乙二胺四乙酸二钠分别是某些化合物的特别优选的抗氧化剂和螯合剂，如本领域技术人员所知，其它合适的和等同的抗氧化剂和螯合剂可以被取代。
可以使用常规方法制备液体悬浮液，以实现活性成分在水性或油性载体中的悬浮。水性载体包括例如水和等渗盐水。油性载体包括例如杏仁油，油性酯，乙醇，植物油如花生，橄榄油，芝麻油或椰子油，分馏植物油和矿物油如液体石蜡。液体悬浮液可进一步包含一种或多种另外的成分，包括但不限于悬浮剂，分散剂或润湿剂，乳化剂，缓和剂，防腐剂，缓冲剂，盐，调味剂，着色剂和甜味剂。油性悬浮液可进一步包含增稠剂。已知的悬浮剂包括，但不限于，山梨糖醇糖浆，氢化食用脂肪，海藻酸钠，聚乙烯吡咯烷酮，黄蓍胶，阿拉伯树胶和纤维素衍生物如羧甲基纤维素钠，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素。已知的分散剂或润湿剂包括，但不限于，天然存在的磷脂如卵磷脂，烯化氧与脂肪酸，与长链脂族醇，与衍生自脂肪酸的偏酯和己糖醇，或与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯(例如，分别为聚氧乙烯硬脂酸酯，十七烷氧基乙醇，聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯和聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯)的缩合产物。已知的乳化剂包括，但不限于，卵磷脂和阿拉伯胶。已知的防腐剂包括，但不限于，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯，抗坏血酸和山梨酸。已知的甜味剂包括例如甘油，丙二醇，山梨糖醇，蔗糖和糖精。用于油性悬浮液的已知增稠剂包括例如蜂蜡，硬石蜡和鲸蜡醇。
活性成分在水性或油性溶剂中的液体溶液可以以与液体悬浮液实质上相同的方式制备，主要区别在于活性成分溶解，而不是悬浮在溶剂中。如本文所用，“油性”液体是包含含碳液体分子并且表现出比水低的极性的液体。本发明的药物组合物的液体溶液可包含关于液体悬浮液描述的每种组分，应理解悬浮剂不一定有助于活性成分在溶剂中的溶解。水性溶剂包括例如水和等渗盐水。油性溶剂包括例如杏仁油，油性酯，乙醇，植物油如花生油，橄榄油，芝麻油或椰子油，分馏植物油和矿物油如液体石蜡。
可以使用已知方法制备本发明药物制剂的粉末和颗粒制剂。此类制剂可以直接给药受试者，例如，用于形成片剂，填充胶囊，或通过向其中加入水性或油性载体而制备水性或油性悬浮液或溶液。这些制剂中的每一种可进一步包含分散剂或润湿剂，悬浮剂和防腐剂中的一种或多种。这些制剂中还可包含其他赋形剂，例如填充剂和甜味剂，调味剂或着色剂。
本发明的药物组合物还可以以水包油乳液或油包水乳液的形式制备，包装或销售。油相可以是植物油，如橄榄油或花生油，矿物油，如液体石蜡，或它们的组合。此类组合物可进一步包含一种或多种乳化剂，例如天然存在的树胶，例如阿拉伯树胶或黄蓍胶，天然存在的磷脂，例如大豆或卵磷脂磷脂，衍生自脂肪酸和己糖醇酐的组合的酯或偏酯，例如脱水山梨糖醇，以及这种偏酯与环氧乙烷的缩合产物如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。这些乳液还可含有其他成分，包括例如甜味剂或调味剂。
用化学组合物浸渍或涂覆材料的方法是本领域已知的，并且包括但不限于将化学组合物沉积或粘合到表面上的方法，将化学组合物掺入材料结构中的方法。材料的合成(即，例如用生理上可降解的材料)，以及将水性或油性溶液或悬浮液吸收到吸收性材料中(有或没有随后的干燥的方法)。
给药/剂量
给药/用剂给药方案可能会影响何谓有效量。治疗制剂可以在与癌症相关的外科手术之前或之后给予患者。此外，可以每天或依次给药几种分开的剂量以及交错剂量，或者可以连续输注剂量，或者可以是推注注射。此外，治疗制剂的剂量可按比例增加或减少，如治疗或预防情况的紧急情况所示。
将本发明的组合物给药患者，优选哺乳动物，更优选人类，可以使用已知的方法，在治疗患者癌症的有效剂量和时间段内进行。达到治疗效果所需的治疗化合物的有效量可根据所用特定化合物的活性；给药时间；化合物的排泄率；治疗的持续时间；与化合物组合使用的其他药物，化合物或材料；所治疗患者的疾病或病症的状态，年龄，性别，体重，状况，一般健康状况和患者在治疗前的既往病史，以及医学领域中众所周知的相似因素等因素而变化。可以调整剂量方案以提供最佳治疗反应。例如，可以每天给药几个分开的剂量，或者可以按照治疗情况的紧急程度按比例减少剂量。本发明治疗化合物的有效剂量范围的非限制性实例是每天约0.01和50mg/kg体重。本领域普通技术人员将能够研究相关因素并且无需过度实验就可以确定治疗化合物的有效量。
所述化合物可以每天数次给药动物，或者可以较少给药，例如每天一次，每周一次，每两周一次，每月一次或甚至更少，例如一次。每隔几个月甚至一年或更少。应当理解，在非限制性实例中，每天给药的化合物的量可以每天，隔天，每2天，每3天，每4天或每5天给药。例如，每隔一天给药，可以在星期一开始每天5mg剂量，其中在星期三给药第一个随后的每天5mg剂量，在星期五给药第二个随后的每天5mg剂量，依此类推。剂量的频率将对于技术人员来说是显而易见的，并且将取决于任何数量的因素，例如但不限于所治疗疾病的类型和严重程度，动物的类型和年龄等。
可以改变本发明药物组合物中活性成分的实际剂量水平，以便获得有效实现特定患者，组合物和给药方式的所需治疗反应的活性成分的量，而不是对患者有毒。
具有本领域普通技术的医生(例如，医生或兽医)可以容易地确定和开出所需药物组合物的有效量。例如，医生或兽医可以以低于实现所需治疗效果所需的水平开始药物组合物中使用的本发明化合物的剂量，并逐渐增加剂量直至达到所需效果。
在特定的具体实施例中，特别有利的是以剂量单位形式配制化合物，以便于给药和剂量的均匀性。本文所用的剂量单位形式是指适合作为待治疗患者的单位剂量的物理上离散的单位；每个单元含有预定量的治疗化合物，经计算可与所需的药物载体一起产生所需的治疗效果。本发明的剂量单位形式是决定并且直接取决于(a)治疗化合物的独特特征和要实现的特定治疗效果(b)混合/配制这种用于治疗患者癌症的化合物治疗剂领域中固有的局限性。
在一个具体实施例中，本发明的组合物以每天一至五次或更高的剂量给予患者。在另一个具体实施例中，本发明的组合物以剂量范围给药患者，所述剂量范围包括，但不限于，每天，每两天，每三天一次至每周一次，以及每两周一次。对于本领域技术人员来说将显而易见的是，本发明的各种组合组合物的给药频率将因受试者而异，取决于许多因素，包括但不限于待治疗的年龄，疾病或病症，性别，整体健康和其他因素。因此，本发明不应被解释为限于任何特定的剂量方案，并且将通过考虑患者的所有其他因素而考虑身体来确定给予任何患者的精确剂量和组合物。
用于给药的本发明化合物可以为约1mg至约7,500mg，约20mg至约7,000mg，约40mg至约6,500mg，约80mg至约6,000mg，约100mg至约5,500mg。约200mg至约5,000mg，约400mg至约4,000mg，约800mg至约3,000mg，约1mg至约2,500mg，约2mg至约2,000mg，约5mg至约1,000mg，约10mg至约750mg，约20mg至约600mg，约30mg至约500mg，约40mg至约400mg，约50mg至约300mg，约60mg至约250mg，约70mg至约200mg，约80mg至约150mg，以及它们之间的任何和所有全部或部分增量。在某些优选的具体实施例中，本发明化合物可以约0.1mg/kg体重至约10mg/kg体重的剂量给药受试者。
在一些具体实施例中，本发明化合物的剂量为约0.5mg至约5,000mg。在一些具体实施例中，本文所述组合物中使用的本发明化合物的剂量小于约5,000mg，或小于约4,000mg，或小于约3,000mg，或小于约2,000mg，或小于约1,000mg，或小于约800mg，或小于约600mg，或小于约500mg，或小于约200mg，或小于约50mg。类似地，在一些具体实施例中，如本文所述的第二化合物的剂量小于约1,000mg，或小于约800mg，或小于约600mg，或小于约500mg，或小于约400mg，或小于约300mg，或小于约200mg，或小于约100mg，或小于约50mg，或小于约40mg，或小于约30mg，或小于约25mg，或小于约20mg，或小于约15mg，或小于约10mg，或小于约5mg，或小于约2mg，或小于约1mg，或小于约0.5mg，以及任何以及其全部或部分增量。
在一个具体实施例中，本发明涉及包装的药物组合物，其包含容纳治疗有效量的本发明化合物的容器，所述化合物单独存在或与第二药剂组合；以及使用所述化合物治疗，预防或减轻患者癌症的一种或多种症状的说明书。
术语“容器”包括用于容纳药物组合物的任何收容器。例如，在一个具体实施例中，容器是包含药物组合物的包装。在其他具体实施例中，容器不是包含药物组合物的包装，即容器是收容器，例如包含包装的药物组合物或未包装的药物组合物的盒子或小瓶以及药物组合物的使用说明书。此外，包装技术在本领域中是公知的。应当理解，药物组合物的使用说明书可以包含在含有药物组合物的包装上，因此说明书与包装产品形成增加的功能关系。然而，应该理解，说明书可以包含关于化合物执行其预期功能的能力的信息，例如治疗，预防或减少患者的癌症。
给药途径
本发明任何组合物的给药途径包括吸入，口服，鼻腔，直肠，肠胃外，舌下，透皮，透粘膜(例如，舌下，舌，(透)口腔，(透)尿道，阴道(例如，透阴道及阴道周地)，鼻(内)和(s透)直肠)，膀胱内，肺内，十二指肠内，胃内，鞘内，皮下，肌肉内，皮内，动脉内，静脉内，支气管内，吸入和局部给药。
合适的组合物和剂型包括，例如，片剂，胶囊，囊片，丸剂，空胶囊，锭剂，分散体，悬浮液，溶液，糖浆，颗粒，珠粒，透皮贴剂，凝胶，粉末，小丸，淤浆，口含锭剂，乳膏，糊剂，膏药，洗剂，圆片，栓剂，用于鼻腔或口服给药的液体喷雾剂，用于吸入的干粉或雾化制剂，用于膀胱内给药的组合物和制剂等。应当理解，可用于本发明的制剂和组合物不限于本文所述的特定制剂和组合物。
口服给药
对于口服给药，特别合适的是片剂，糖衣丸，液体，滴剂，栓剂或胶囊，囊片和软胶囊。适于口服给药的其它制剂包括，但不限于，粉末或颗粒制剂，水性或油性混悬剂，水性或油性溶液，糊剂，凝胶，牙膏，漱口水，包衣，口腔清洗剂，或乳液。用于口服使用的组合物可根据本领域已知的任何方法制备，并且此类组合物可含有一种或多种选自由适合制备片剂的惰性，无毒的药物赋形剂所组成群组的剂。这些赋形剂包括，例如，惰性稀释剂，如乳糖；制粒和崩解剂，如玉米淀粉；粘合剂如淀粉；以及润滑剂，如硬脂酸镁。
片剂可以是未包衣的，或者可以使用已知方法包衣，以在受试者的胃肠道中实现延迟的崩解，从而提供活性成分的持续释放和吸收。举例来说，诸如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯的材料可用于包衣片剂。进一步举例来说，可以使用美国专利第4,256,108、4,160,452；和4,265,874号中描述的方法涂覆片剂，以形成渗透控制的释放片剂。片剂可进一步包含甜味剂，调味剂，着色剂，防腐剂或这些的一些组合，以提供药学上优雅和可口的制剂。
包含活性成分的硬胶囊可以使用生理可降解的组合物制备，例如明胶。这种硬胶囊包含活性成分，并且可以进一步包含其他成分，包括例如惰性固体稀释剂，例如碳酸钙，磷酸钙或高岭土。
包含活性成分的软明胶胶囊可以使用生理可降解的组合物制备，例如明胶。这种软胶囊包含活性成分，其可以与水或油介质如花生油，液体石蜡或橄榄油混合。
对于口服给药，本发明化合物可以是片剂或胶囊形式，通过常规方法用药学上可接受的赋形剂如粘合剂；填料；润滑剂；崩解剂；或润湿剂制备。如果需要，可以使用合适的方法和涂层材料涂覆片剂，例如购自Colorcon,West Point,Pa.的OPADRYTM薄膜涂层系统(例如，OPADRYTM OY型，OYC型，有机肠OY-P型，水性肠OY-A型，OY-PM型和OPADRYTM白色，32K18400)。
用于口服给药的液体制剂可以是溶液，糖浆或悬浮液的形式。液体制剂可以通过常规方法用药学上可接受的添加剂如悬浮剂(例如山梨糖醇糖浆，甲基纤维素或氢化食用脂肪)制备；乳化剂(例如卵磷脂或阿拉伯胶)；非水性载体(例如杏仁油，油性酯或乙醇)；和防腐剂(例如，对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸)。适于口服给药的本发明药物组合物的液体制剂可以以液体形式或以干燥产品的形式制备，包装和销售，以用于在使用前用水或其它合适的载体重构。
包含活性成分的片剂可以例如通过压缩或模制活性成分，任选地与一种或多种另外的成分一起制备。压缩片剂可以通过在合适的装置中压制自由流动形式的活性成分如粉末或颗粒制剂，任选地与粘合剂，润滑剂，赋形剂，表面活性剂和分散剂中的一种或多种混合来制备。模制片剂可以通过在合适的装置中模制活性成分，药学上可接受的载体和至少足以润湿混合物的液体的混合物来制备。用于制备片剂的药学上可接受的赋形剂包括，但不限于，惰性稀释剂，制粒和崩解剂，粘合剂和润滑剂。已知的分散剂包括，但不限于，马铃薯淀粉和淀粉乙醇酸钠。已知的表面活性剂包括，但不限于，十二烷基硫酸钠。已知的稀释剂包括，但不限于，碳酸钙，碳酸钠，乳糖，微晶纤维素，磷酸钙，磷酸氢钙和磷酸钠。已知的制粒和崩解剂包括，但不限于，玉米淀粉和海藻酸。已知的粘合剂包括，但不限于，明胶，阿拉伯胶，预胶化的玉米淀粉，聚乙烯吡咯烷酮和羟丙基甲基纤维素。已知的润滑剂包括，但不限于，硬脂酸镁，硬脂酸，二氧化硅和滑石。
制粒技术被用于改性活性成分的起始粉末或其他颗粒材料在制药领域中是众所周知的。粉末通常与粘合剂材料混合成较大的永久自由流动的附聚物或颗粒，称为“造粒”。例如，使用溶剂的“湿”造粒方法的特征通常在于粉末与粘合剂材料结合，并且在导致形成湿造粒的块状物的条件下用水或有机溶剂润湿，然后必须蒸发溶剂。
熔体造粒通常包括在室温使用固体或半固体材料(即具有相对低的软化点或熔点范围)以在基本上在没有添加水或其他液体溶剂的情况下，促进粉末或其他材料的造粒。当加热至熔点范围内的温度时，低熔点固体液化以充当粘合剂或造粒介质。液化的固体在与其接触的粉末材料的表面上扩散，并且在冷却时形成其中初始材料结合在一起的固体造粒的块状物。然后可将所得熔融制粒提供给压片机或包封，以制备口服剂型。熔融制粒通过形成固体分散体或固体溶液来改善活性物质(即药物)的溶解速率和生物利用度。
美国专利第5,169,645号揭露了具有改进的流动性质的可直接压缩的含蜡颗粒。当蜡在熔体中与某些流动改进添加剂掺混，然后冷却和造粒掺混物时，得到颗粒。在某些具体实施例中，只有蜡本身在蜡和添加剂的熔融组合中熔化，并且在其它情况下，蜡和添加剂都将熔化。
本发明还包括多层片剂，其包含提供延迟释放一种或多种可用于本发明方法内的化合物的层，和提供立即释放一种或多种可用于本发明方法内的化合物的另一层。使用蜡/pH敏感性聚合物混合物，可以获得其中捕获活性成分的胃不溶性组合物，以确保其延迟释放。
肠胃外给药
如本文所用，药物组合物的“肠胃外给药”包括任何给药途径，其特征在于物理破坏受试者的组织和通过组织中的破口给药药物组合物。因此，肠胃外给药包括，但不限于，通过注射组合物给药药物组合物，通过手术切口给药组合物，通过组织穿透非手术伤口给药组合物等。特别地，预期肠胃外给药包括，但不限于，皮下，静脉内，腹膜内，肌肉内，胸骨内注射和肾透析输注技术。
适于肠胃外给药的药物组合物的制剂包含活性成分与药学上可接受的载体，例如无菌水或无菌等渗盐水组合。这些制剂可以以适于推注给药或连续给药的形式制备，包装或出售。可以以单位剂量形式制备，包装或销售可注射制剂，例如含有防腐剂的安瓿或多剂量容器。用于肠胃外给药的制剂包括，但不限于，悬浮液，溶液，油性或水性载体中的乳液，糊剂和可植入的缓释或可生物降解的制剂。此类制剂可进一步包含一种或多种另外的成分，包括但不限于悬浮剂，稳定剂或分散剂。在用于肠胃外给药的制剂的一个具体实施例中，活性成分以干燥(即粉末或颗粒)形式提供，用于在肠胃外给予重构组合物之前用合适的载体(例如无菌无热原水)重建。
药物组合物可以以无菌可注射水性或油性悬浮液或溶液的形式制备，包装或销售，或者作为冻干饼，其可以通过添加溶剂重构。所述悬浮液或溶液可根据已知技术配制，并且除活性成分外，还可包含其他成分，例如本文所述的分散剂，润湿剂或悬浮剂。这种无菌可注射制剂可以使用无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂制备，例如水或1,3-丁二醇。其他可接受的稀释剂和溶剂包括，但不限于，林格氏溶液，等渗氯化钠溶液和固定油，例如合成的甘油单酯或甘油二酯。其它可用于肠胃外给药的制剂包括彼等含有微晶形式的活性成分，脂质体制剂中的或作为可生物降解的聚合物系统的组分的制剂。用于持续释放或植入的组合物可包含药学上可接受的聚合或疏水材料，例如乳液，离子交换树脂，微溶聚合物或微溶盐。
局部给药
局部给药药物的障碍是表皮的角质层。角质层是由蛋白质，胆固醇，鞘脂，游离脂肪酸和各种其他脂质组成的高度抗性层，并且包括角质化细胞和活细胞。限制化合物穿过角质层的渗透速率(通量)的因素之一是可以加载或施加到皮肤表面上的活性物质的量。每单位面积皮肤给药的活性物质的量越多，皮肤表面和皮肤下层之间的浓度梯度越大，反过来活性物质通过皮肤的扩散力越大。因此，含有较高浓度活性物质的制剂更可能导致活性物质穿透皮肤，并且更多，并且，比浓度较低的制剂(所有其他者相同)，以更一致的速率穿透皮肤。
适于局部给药的制剂包括，但不限于，液体或半液体制剂，例如搽剂，洗剂，水包油或油包水乳剂，例如乳膏，软膏或糊剂，以及溶液或悬浮液。局部给药制剂可以例如包含约1％至约10％(重量/重量)的活性成分，尽管活性成分的浓度可以与活性成分在溶剂中的溶解度限值一样高。用于局部给药的制剂还可包含一种或多种本文所述的其他成分。
可以使用渗透增强剂。这些材料增加了药物穿透皮肤的速度。本领域的典型增强剂包括乙醇，甘油单月桂酸酯，PGML(聚乙二醇单月桂酸酯)，二甲基亚砜等。其他增强剂包括油酸，油醇，乙氧基二甘醇，月桂氮卓酮，烷羧酸，二甲基亚砜，极性脂质或N-甲基-2-吡咯烷酮。
用于局部递送本发明的一些组合物的一种可接受的载体可含有脂质体。脂质体的组成及其用途是本领域已知的(例如，参见美国专利第6,323,219号)。
在替代具体实施例中，局部活性药物组合物可任选地与其他成分组合，例如佐剂，抗氧化剂，螯合剂，表面活性剂，发泡剂，润湿剂，乳化剂，增粘剂，缓冲剂，防腐剂等。在另一个具体实施例中，渗透或渗透增强剂包括在组合物中，并且相对于缺乏渗透增强剂的组合物，其有效改善活性成分经皮穿透进入和穿过角质层。各种渗透增强剂，包括油酸，油醇，乙氧基二甘醇，月桂氮卓酮，烷羧酸，二甲基亚砜，极性脂质或N-甲基-2-吡咯烷酮，是本领域技术人员已知的。另一方面，所述组合物可进一步包含水溶助长剂，其作用是增加角质层结构的紊乱，因此允许增加穿过角质层的输送。各种水溶助长剂如异丙醇，丙二醇或二甲苯磺酸钠是本领域技术人员已知的。
局部活性药物组合物应以有效影响所需变化的量给药。如本文所用，“有效量”应指足以覆盖需要改变的皮肤表面区域的量。活性化合物的含量应为组合物的约0.0001重量体积％至约15重量体积％存在。更优选的是，活性化合物的含量应为组合物的约0.0005％至约5％；最优选地，活性化合物的含量应为组合物的约0.001％至约1％。这些化合物可以是合成或天然衍生的。
口腔给药
本发明的药物组合物可以以适于口腔给药的制剂制备，包装或销售。此类制剂可以是例如使用常规方法制备的片剂或口含锭剂形式，并且可以含有例如0.1至20％(重量/重量)的活性成分，余量包含口服可溶解或可降解的组合物，及任选地，一种或多种本文所述的其他成分。或者，适于口腔给药的制剂可包含含有活性成分的粉末或雾化或雾化溶液或悬浮液。当分散时，这种粉末，雾化或雾化制剂优选具有约0.1至约200纳米的平均颗粒或液滴尺寸，并且还可包含一种或多种本文所述的其他成分。本文所述制剂的实例并非详尽无遗，并且应理解，本发明包括对本文未描述但本领域技术人员已知的这些和其他制剂的其他改良。
直肠给药
本发明的药物组合物可以以适于直肠给药的制剂制备，包装或出售。这种组合物可以是例如栓剂，保留灌肠剂和直肠或结肠灌洗液的形式。
栓剂制剂可以通过将活性成分与无刺激性的药学上可接受的赋形剂组合而制备，所述赋形剂在普通室温(即，约20℃)呈固体并且在受试者的直肠温度呈液体(即，在健康的人类中是约37℃)。合适的药学上可接受的赋形剂包括，但不限于，可可脂，聚乙二醇和各种甘油酯。栓剂制剂可进一步包含各种其他成分，包括但不限于抗氧化剂和防腐剂。
可以通过将活性成分与药学上可接受的液体载剂组合来制备用于直肠或结肠冲洗的保留灌肠制剂或溶液。如本领域公知的，灌肠制剂可以使用适合于受试者的直肠解剖结构的递送装置来给药，并且可以包装在所述递送装置内。灌肠制剂可进一步包含各种其他成分，包括但不限于抗氧化剂和防腐剂
控释制剂和药物递送系统
可以使用常规技术制备本发明药物组合物的控释或持续释放制剂。在一些情况下，待使用的剂型可以缓释或控制释放其中的一种或多种活性成分，例如，使用羟丙基甲基纤维素，其他聚合物基质，凝胶，渗透膜，渗透系统，多层涂层，微粒，脂质体或微球或其组合，以提供不同比例的所需释放曲线(profile)。可以容易地选择本领域普通技术人员已知的合适的控释制剂(包括本文所述的那些)，与本发明的药物组合物一起使用。因此，适于口服给药的单一单位剂型，例如适于控制释放的片剂，胶囊，空胶囊和囊片，包括在本发明中。
大多数控释药物产品的共同目标是改善药物治疗，而不是由它们的非受控制药物治疗。理想地，在医学治疗中使用最佳设计的控释制剂的特征在于使用最少量的药物物质在最短的时间内治愈或控制病症。控释制剂的优点包括延长药物活性，降低剂量频率和增加患者依从性。另外，控释制剂可用于影响作用开始的时间或其他特征，例如药物的血液水平，因此可影响副作用的发生。
大多数控释制剂被设计成最初释放一定量的药物，其迅速产生所需的治疗效果，并逐渐和持续释放其他量的药物以在延长的时间段内维持这种水平的治疗效果。为了在体内维持这种恒定的药物水平，药物必须以一定的速率从剂型中释放出来，所述速率将取代被代谢和从体内排出的药物量。
可以通过各种诱导剂刺激活性成分的控制释放，例如pH，温度，酶，水或其他生理条件或化合物。在本发明的上下文中，术语“控释组分”在本文中定义为一种或多种化合物，包括但不限于促进活性成分的控释的聚合物，聚合物基质，凝胶，渗透膜，脂质体或微球或其组合。
在某些具体实施例中，本发明的制剂可以是，但不限于，短期的，快速弥补(offset)的，以及受控的，例如持续释放，延迟释放和脉冲释放的制剂。
术语持续释放以其常规意义使用，是指在延长的时间段内提供药物逐渐释放的药物制剂，并且尽管不是必需的，可以导致药物的血液水平在延长的时间段内基本恒定。所述时间段可以长达一个月或更长时间，并且应该是比以推注形式给药的相同量的药剂更长的释放。
为了持续释放，可以用为化合物提供持续释放性质的合适聚合物或疏水材料配制所述化合物。因此，用于本发明方法的化合物可以以微粒的形式给药，例如通过注射或通过植入以粉片或圆片的形式给药。
在本发明的一个优选具体实施例中，使用持续释放制剂将本发明化合物单独或与另一种药剂组合而给药患者。
本文中使用的术语延迟释放在以其常规意义用于指药物制剂，其在药物给药后延迟一段时间后提供药物的初始释放，并且尽管不是必需的，包括延迟约10分钟至高达大约12个小时释放。
本文中使用的术语脉冲释放以其常规意义使用，是指药物制剂，其以在药物给药后产生药物的脉冲血浆曲线的方式提供药物释放。
术语立即释放以其常规意义使用，是指在药物给药后立即释放药物的药物制剂。
如本文所用，短期是指高达并包括在给药后给药后约8小时，约7小时，约6小时，约5小时，约4小时，约3小时，约2小时，约1小时，约40分钟，约20分钟，或约10分钟的任何时间段及其任何及全部或部分增量。
如本文所用，快速弥补是指高达并包括给药后约8小时，约7小时，约6小时，约5小时，约4小时，约3小时，约2小时，约1小时，约40分钟，约20分钟，或约10分钟的任何时间段以及其全部或部分增量。
本领域技术人员将认识到或能够使用不超过常规的实验，而确定本文所述的具体程序，具体实施例，权利要求和实施例的许多等同物。这些等同物被认为是在本公开的范畴内并且由所附权利要求涵盖。例如，应该理解，反应条件的改变，包括但不限于反应时间，反应尺寸/体积和实验试剂，例如溶剂，催化剂，压力，大气条件(例如氮气氛，和还原/氧化剂)，具有本领域公认的替代方案并且仅使用常规实验，都落入本申请的范畴内。
提出以下实施例以向本领域普通技术人员提供如何制备和使用测定，筛选和方法的完整揭露和描述，并且不旨在限制发明人的范畴将视为发明。
实施例
本文公开的化合物可使用有机合成领域熟知的技术合成。合成所需的起始材料料和中间体可以从商业来源获得，和/或根据本领域技术人员已知的和/或本文其他地方其他处揭露的方法合成。
提供以下实施例仅用于说明的目的，并且本揭露不限于这些实施例，而是包括由于本文提供的教导而显而易见的所有变化。
缩写
μl＝微升
Boc或BOC＝叔丁氧基羰基
DMAP＝4-二甲基氨基吡啶
DMSO＝二甲基亚砜
DTT＝二硫苏糖醇
EDC＝1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺
ESI或ES＝电喷雾电离
g＝克
h＝小时
HPLC＝高效液相色谱
LC＝液相色谱
LCMS＝液相色谱质谱
Min＝分钟
mg＝毫克
ml＝毫升
mmol＝毫摩尔
MS＝质谱
MWCO＝截留分子量
NMR＝核磁共振光谱
PBS＝磷酸盐缓冲盐水，0.9％NaCl
SPA＝3-硫烷基丙酸
SSPy＝2-(吡啶-2-基二硫烷基)
TEAA＝乙酸三乙铵
TFA＝三氟乙酸
Ts或甲苯磺酰基＝对甲苯磺酰基
变量*，a，b，c，d和e具有如上和本文所述的范围。
实施例1：一般制备方法
聚-1-羟基甲基乙烯基羟基甲基缩甲醛(PHF)1可以与亲电试剂反应形成聚合物2，其中G是活化基团，例如甲苯磺酰基，甲磺酰基或三氟甲磺酰基。通常，聚合物1中必须存在多于3个。变量a，b，c和d如上所述。在这描述的一般制备方法中，z是a+b+c+d，其为<或＝1862。
活化基团G可以被硫醇L-SH置换，形成具有硫化物连接子的聚合物3。在一个具体实施例中，L是可以与药物或小分子共价连接的基团。在另一个具体实施例中，L是已经与药物或小分子连接的基团。
或者，硫化物连接子也可以如下形成：
本文中，通过亲核取代反应安装诸如溴或氯的离去基团X，而得到聚合物4。然后，硫醇L-SH可置换卤化物，形成如下所示的硫化物3。
实施例2：聚(1-羰基乙烯基羰基甲醛)(化合物6)的合成
将葡聚糖(5，8.0g，Mn 15KDa至25KDa，来自明串珠菌属物种)溶于20ml去离子水中。将溶于480ml去离子水中的偏高碘酸钠(26.38g，0.123mol)溶液在0至5℃，在光保护的烧瓶中加入葡聚糖溶液中。将反应混合物在0至5℃搅拌3小时，然后在25℃搅拌11小时。使用渗滤(Amicon Ultra-15离心过滤器，截留分子量(MWCO)：3K)使反应混合物脱盐，并浓缩至60ml。通过滴加5.0N氢氧化钠溶液将产物溶液的pH调节至8至9。聚(1-羰基乙烯基甲缩醛)(化合物6)溶液直接用于下一步骤。
实施例3：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)(化合物1)的合成
将硼氢化钠(4.31g，0.113mol)加入10ml去离子水中，在0℃搅拌2分钟，然后在0℃加入起始聚(1-羰基乙基羰基甲醛)(化合物6，6.42g，在60ml水中)。将反应混合物在0℃搅拌2小时。通过缓慢加入1.0N氯化氢水溶液将反应溶液的pH调节至pH 7。使用AmiconUltra-15离心过滤器(MWCO：3K)通过渗滤使所得溶液脱盐。将溶液冻干，得到呈无色固体(1.2g)的聚(1-羟基甲基乙烯基-羟基-甲基缩甲醛)(化合物1)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6:D2O＝95:5)δppm 3.30-3.41(m,2H),3.46(d,J＝4.89Hz,2H),3.60-3.67(m,2H),3.67-3.75(m,1H),4.64(t,J＝5.26Hz,1H)。
实施例4：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-对甲苯磺酰基(化合物7)的合成
在0℃将聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)(化合物1，2.21g)溶于无水吡啶(2.2ml)中，然后加入对甲苯磺酰氯(90mg)。首先将反应混合物在0℃搅拌1小时，然后升温至25℃并搅拌16小时。真空蒸发吡啶，并将产物(聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-对甲苯磺酰基，化合物7)直接用于下一步骤，无需单离或纯化。
实施例5：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA(化合物8)的合成
在15℃，将碳酸钾(2.14g，15.5mmol)加入聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-甲苯磺酰基(化合物7)于甲醇(10.0ml)溶液中，然后加入3-巯基丙酸(0.329g，0.27ml，3.10mmol)。将反应混合物在15℃搅拌16小时。加入3-巯基丙酸(0.11g，0.09ml，1.03mmol)，将反应混合物于8小时加热至40℃。将反应溶液冷却至室温并真空浓缩。加入水(15.0ml)，并在15℃搅拌30分钟。过滤固体，使用Amicon Ultra-15离心过滤器(MWCO：3K)通过渗滤使滤液脱盐。将脱盐的溶液冻干，得到呈无色固体(298mg)的聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA(化合物8)。1H NMR(400MHz，D2O)显示与酸相邻的亚甲基(δppm2.39，t，J＝6.35Hz)。通过NMR测定，发现3-硫酰基丙酸含量为12％。
实施例6：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-马来酰亚胺(化合物9)的合成
在0℃，将N-羟基琥珀酰亚胺(18mg，0.155mmol)加入聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA(化合物8，200mg，3-硫酰基丙酸含量：19％)在去离子水(1ml)中的溶液中)。将EDC(24mg，0.027ml，0.155mmol)在0℃加入反应溶液中，然后加入N-(2-氨基乙基)马来酰亚胺三氟乙酸盐(39mg，0.155mmol)。将反应溶液温热至20℃并搅拌16小时。过滤反应混合物，使用Amicon Ultra-15离心过滤器(MWCO：3K)通过渗滤使滤液脱盐。将脱盐的溶液冻干，得到呈无色固体(106mg)的聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-马来酰亚胺(化合物9)。通过NMR测定，发现马来酰亚胺含量为6％。
实施例7：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-SSPy(化合物10)的合成
在0℃，将N-羟基琥珀酰亚胺(7mg，0.062mmol)加入聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA(化合物8，149mg，3-硫酰基丙酸含量：12％)于去离子水(1ml)溶液中)。将EDC(10mg，0.011ml，0.062mmol)在0℃加入反应溶液中，然后加入吡啶二硫乙胺盐酸盐(14mg，0.062mmol)。将反应溶液温热至20℃并搅拌16小时。过滤反应混合物，使用AmiconUltra-15离心过滤器(MWCO：3K)通过渗滤使滤液脱盐。将脱盐的溶液冻干，得到呈无色固体(100mg)的聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-SSPy(化合物7)。1H NMR(400MHz，D2O)显示SSPy上的吡啶基：δ＝8.33(br.s，1H)，7.77(br.s，1H)，7.23(br.s，1H)。通过NMR测定，发现SSPy含量为4％。
实施例8：阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺(化合物11)的合成
将N，N-二异丙基乙胺(26mg，0.034ml，0.198mmol)在10℃加入阿司他丁F盐酸盐(52mg，0.066mmol)于无水DMF(1.4ml)溶液中，然后加入(1-[双(二甲基氨基)亚甲基)-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓-3-氧化物六氟磷酸盐)(50mg，0.132mmol)。将反应溶液在10℃搅拌15分钟，然后加入2-(2-氨基-乙氧基)-乙醇(0.021mg，0.020ml，0.198mmol)并将反应溶液在10℃搅拌16小时。真空除去溶剂，残余物通过反相制备型HPLC纯化，得到呈白色固体的阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺(化合物11，TFA盐，16.9mg)。C44H76N6O9+H的质量计算值，[M+H]+833.57，实测值LC/MS(ESI)m/z 833.29[M+H]+，855.25[M+Na]+。
实施例9：阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺Boc-L-丙氨酸(化合物12)的合成
将Boc-L-丙氨酸(14mg，0.072mmol)和DMAP(11mg，0.09mmol)溶解在无水二氯甲烷(2.0ml)中，然后在0℃加入二异丙基碳二亚胺(9mg，0.072mmol)。在0℃加入阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺(化合物11，TFA盐，16.9mg)，并将反应混合物在23℃搅拌21小时。将反应混合物真空浓缩，并将残余物通过反相制备型HPLC纯化，得到呈白色固体的阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺Boc-L-丙氨酸(化合物12，TFA盐，11.6mg)。C52H89N7O12+H的质量计算值，[M+H]+1004.66，实测值LC/MS(ESI)m/z 1004.33[M+H]+，1026.29[M+Na]+。
实施例10：阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸(化合物13)的合成
将三氟乙酸(0.10ml)滴加到阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺Boc-L-丙氨酸(化合物12，TFA盐，11.6mg，0.01mmol)于二氯甲烷(0.3ml)溶液中，并将反应溶液在25℃搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩。将残余物溶于二氯甲烷(1ml)中，然后加入乙酸乙酯。收集沉淀物，得到阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸(化合物12，TFA盐，10mg)。C47H81N7O10+H的质量计算值，[M+H]+904.60，实测值LC/MS(ESI)m/z 904.27[M+H]+，926.30[M+Na]+。
实施例11：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-马来酰亚胺(化合物14)的合成
将N-羟基琥珀酰亚胺(1.5mg，0.013mmol)在10℃加入聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-马来酰亚胺的溶液中(化合物9,15mg，3-硫酰基丙酸含量：13％，马来酰亚胺含量：6％)于去离子水(0.8ml)的溶液中。将EDC(2.0mg，2.3μl，0.013mmol)在10℃加入反应溶液中，然后加入阿司他丁F2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸(化合物13，TFA盐，5mg)于乙腈(0.4ml)中。将反应溶液温热至23℃并搅拌18小时。过滤反应混合物并真空浓缩。将残余物用去离子水(1.0ml)稀释，并使用Amicon Ultra-15离心过滤器(MWCO：3K)通过渗滤脱盐。将脱盐的溶液冻干，得到呈无色固体的聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-马来酰亚胺(化合物14)。1HNMR(400MHz，D2O)显示阿司他丁F上的苯基：δppm7.11-7.31(m，5H)。通过NMR测定，发现阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸的含量为6％。
实施例12：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-SSPy(化合物15)的合成
将N-羟基琥珀酰亚胺(1.5mg，0.013mmol)在10℃加入聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-SSPy的溶液中(化合物10，15mg，3-硫酰基丙酸含量：8％，SSPy含量：4％)的去离子水(0.8ml)的溶液中。将EDC(2.0mg，2.3μl，0.013mmol)在10℃加入反应溶液中，然后加入阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸(化合物13，TFA盐，5mg)于乙腈(0.4ml)中。将反应溶液温热至23℃并搅拌18小时。过滤反应混合物并真空浓缩。将残余物用去离子水(1.0ml)稀释，并使用Amicon Ultra-15离心过滤器(MWCO：3K)通过渗滤脱盐。将脱盐的溶液冻干，得到呈无色固体的聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-SSPy(化合物15)。1H NMR(400MHz，D2O)显示阿司他丁F上的苯基：δppm7.11-7.31(m，5H)。通过NMR测定，发现阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸的含量为4.8％。
实施例13：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-(曲妥珠单抗-MCC)(化合物16)的制备
将琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸酯(SMCC)于DMSO(5μl，15mg/ml)的溶液加入曲妥珠单抗(5mg)于TEAA缓冲液(1.0ml，pH＝7.0)的溶液。将反应混合物在25℃搅拌3小时。使用Amicon Ultra离心过滤器(MWCO：30K)通过渗滤使反应混合物脱盐，得到曲妥珠单抗-MCC。将曲妥珠单抗-MCC储存在PBS缓冲液(pH＝7.0，20mg/ml)中。
将二硫苏糖醇(DTT，5.0mg)加入聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-SSPy(化合物15，5mg)于去离子水(0.25毫升)中。将混合物在23℃搅拌30分钟，用去离子水(1ml)稀释。用Amicon Ultra-15离心过滤器(截止值：3K)纯化反应溶液，得到聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-SH(在去离子水中的储存浓度：20mg/ml)。
将聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-SH(3mg)于去离子水(150μl)的溶液加入曲妥珠单抗-MCC(3mg)于PBS缓冲液(pH＝7.0,350μl)的溶液。将反应混合物在23℃搅拌5小时，并使用Superose-6柱(洗脱液：PBS缓冲液，pH＝7.0)通过尺寸排阻色谱法纯化，得到聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-(曲妥珠单抗-MCC)(化合物16)。HPLC分析确定阿司他丁F与曲妥珠单抗的摩尔比为约9：1至12：1。
实施例14：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-曲妥珠单抗(化合物17)的制备
将参(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP，54μl，在TEAA缓冲液中的2.0mM溶液，pH＝7.4)加入曲妥珠单抗(3mg)于TEAA缓冲液(400μl，pH＝7.4)的溶液，并且将溶液在37℃培养1小时。聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-马来酰亚胺(化合物14，912μg)于去离子水(45.6μl)的溶液，将溶液在25℃培养6小时。使用Superose-6柱(洗脱液：PBS缓冲液，pH＝7.0)通过尺寸排阻色谱法纯化产物，得到聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙基酰胺L-丙氨酸)-曲妥珠单抗(化合物17)。HPLC分析确定阿司他丁F与曲妥珠单抗的摩尔比为约12：1至15：1。
实施例15：3-(2-(2-(3-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙酰胺基)乙氧基)乙氧基)丙酸2,5-二氧代吡咯烷-1-基酯(化合物18)的合成
将N-羟基琥珀酰亚胺(105.2mg，0.914mmol)在室温加入3-(2-(2-(3-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙酰胺基)乙氧基)乙氧基)丙酸(300mg，0.914mmol)于5ml无水二氯甲烷的溶液，然后加入N,N'-二环己基碳二亚胺(198mg，0.96mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时。过滤形成的白色固体，真空浓缩滤液，得到粗产物(化合物18,346mg)，将其直接用于下一步骤。
实施例16：(16-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)-4,14-二氧代-7,10-二氧杂-3,13-二氮杂十六烷基)氨基甲酸叔丁酯(化合物19)的合成
将(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(139.5mg，0.138ml，0.871mmol)在室温加入3-(2-(2-(3-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙酰胺基)乙氧基)乙氧基)丙酸2,5-二氧代吡咯烷-1-基酯(化合物18)于4ml无水乙腈的溶液，然后加入三乙胺(88.1mg，0.121ml，0.871mmol)。将反应混合物在室温搅拌16小时。过滤混合物，真空浓缩滤液，得到淡黄色油状物(化合物19)。
实施例17：N-(2-氨基乙基)-3-(2-(2-(3-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙酰胺基)乙氧基)乙氧基)丙酰胺(化合物20)的合成
将三氟乙酸(1.0ml)滴加入(16-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)-4,14-二氧代-7,10-二氧杂-3,13-二氮杂十六烷基)氨基甲酸叔丁酯(化合物19)于二氯甲烷(3.0ml)的溶液，将反应溶液在室温搅拌2小时。将反应混合物真空浓缩，并通过反相制备型HPLC纯化残余物，得到呈无色油状物的N-(2-氨基乙基)-3-(2-(2-(3-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙酰胺基)乙氧基)乙氧基)丙酰胺(化合物20，TFA盐)。C16H26N4O6+H的质量计算值,[M+H]+371.19,实测值LC/MS(ESI)m/z 371.43[M+H]+。
实施例18：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-马来酰亚胺(化合物21)的合成
在20℃，将N-羟基琥珀酰亚胺(2.2mg，0.019mmol)加入聚(1-羟基甲基乙烯基甲基-缩甲醛)-SPA(化合物8，30mg，3-硫酰基丙酸含量：10.7％)于去离子水(2ml)的溶液。N-(2-氨基乙基)-3-(2-(2-(3-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙酰氨基)乙氧基)乙氧基)丙酰胺。在20℃，将TFA(9.0mg，0.019mmol)加入反应溶液。使用0.05N NaOH溶液将反应混合物的pH调节至6。加入EDC.HCl(4.5mg，0.024mmol)，将反应溶液在20℃搅拌40分钟。40分钟后，再次加入EDC.HCl(4.5mg，0.024mmol)，将反应溶液搅拌18小时。过滤反应混合物，使用Amicon Ultra-15离心过滤器(MWCO：3K)通过渗滤使滤液脱盐。将脱盐的溶液冻干，得到呈无色固体的聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-马来酰亚胺(33mg，化合物21)。1H NMR(400MHz，D2O)显示马来酰亚胺基团：δ＝6.76(s，2H)。通过NMR测定，发现马来酰亚胺的含量为2.9％。
实施例19：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-马来酰亚胺(化合物22)的合成
在10℃，将N-羟基琥珀酰亚胺(2.0mg，0.014mmol)加入聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-马来酰亚胺的溶液中(化合物21，16mg，3-硫酰基丙酸含量：7.8％，马来酰亚胺含量：2.9％)于去离子水(1.0ml)的溶液中。在10℃，将阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸(TFA盐，14mg)加入反应溶液中。使用0.05N NaOH溶液将反应混合物的pH调节至6。加入EDC.HCl(4mg，0.021mmol)，将反应溶液在20℃搅拌40分钟。将EDC.HCl(4mg，0.021mmol)再次加入溶液中，然后将溶液搅拌18小时。过滤反应混合物，使用AmiconUltra-15离心过滤器(MWCO：3K)通过渗滤使滤液脱盐。将脱盐的溶液冻干，得到呈白色固体的产物(化合物22，18mg)。1H NMR(400MHz，D2O)显示阿司他丁F上的苯基：δppm＝7.16-7.26(m，5H)。通过NMR测定，发现阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸的含量为7％。
实施例20：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-马来酰亚胺(化合物23)的合成
在20℃，将N-羟基琥珀酰亚胺(10mg，0.090mmol)加入聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA(化合物8，86mg，3-硫酰基丙酸含量：21％)于去离子水(3.0ml)的溶液。在20℃，将1-[2-(2-氨基乙氧基)-乙基]马来酰亚胺-HCl(20.0mg，0.090mmol)加入反应溶液中。使用0.05N NaOH溶液将反应混合物的pH调节至6。加入EDC.HCl(17.5mg，0.090mmol)，将反应溶液在20℃搅拌40分钟。将EDC.HCl(17.5mg，0.090mmol)再次加入反应混合物中，然后搅拌18小时。过滤反应混合物，使用Amicon Ultra-15离心过滤器(MWCO：3K)通过渗滤使滤液脱盐。将脱盐的溶液冻干，得到呈无色固体的聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-马来酰亚胺(化合物23,89mg)。1H NMR(400MHz，D2O)显示马来酰亚胺基团：δ＝6.76(s，2H)。通过NMR测定，发现马来酰亚胺的含量为5.8％。
实施例21：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-马来酰亚胺(化合物24)的合成
在10℃，将N-羟基琥珀酰亚胺(9.4mg，0.066mmol)加入聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-马来酰亚胺(75mg，3-硫酰基丙酸含量：15.2％，马来酰亚胺含量：5.8％)于去离子水(4.5ml)的溶液。在10℃，将阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸(TFA盐，66mg，0.065mmol)加入反应溶液中。使用0.05N NaOH溶液将反应混合物的pH调节至6。加入EDC.HCl(19mg，0.099mmol)，将反应溶液在20℃搅拌40分钟。将EDC.HCl(19mg，0.099mmol)第二次加入反应溶液中，然后搅拌18小时。过滤反应混合物，使用AmiconUltra-15离心过滤器(MWCO：3K)通过渗滤使滤液脱盐。将脱盐的溶液冻干，得到呈白色固体的产物(68mg)。1H NMR(400MHz，D2O)显示阿司他丁F上的苯基：ppm＝7.18-7.26(m，5H)。通过NMR测定，发现阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸(化合物24)含量为7.7％。
实施例22：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-曲妥珠单抗(化合物25)的制备
将参(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP，510μl，1.02μmol，2.0mM溶液于TEAA，pH＝7.4)在Ar下加入曲妥珠单抗(30mg，0.2895μmol)于TEAA缓冲液(1.5ml，pH＝7.4)的溶液。)将溶液在37℃培养2小时。将反应混合物冷却至0℃。在0℃，将部分还原的曲妥珠单抗溶液加入聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F 2-(2-羟基-乙氧基)-乙酰胺L-丙氨酸)-马来酰亚胺的溶液中(化合物24，37.5mg)于去离子水(1.5ml)的溶液中。将溶液在0℃搅拌30分钟，然后升温至室温并搅拌4小时。用半胱氨酸盐酸盐水溶液(21mg)淬灭反应。将反应混合物在室温搅拌1小时。使用Superose-6柱(洗脱液：PBS缓冲液，pH＝7.0)通过尺寸排阻色谱法纯化产物，得到聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(阿司他丁F2-(2-羟基-乙氧基)-乙基酰胺L-丙氨酸)-曲妥珠单抗(化合物25)。阿司他丁F与曲妥珠单抗的平均比率为约8。
实施例23：(S)-叔丁基(4,11-二乙基-4-羟基-3,14-二氧代-3,4,12,14-四氢-1H-吡喃并[3',4':6,7)吲哚并[1,2-b]喹啉-9-基)碳酸酯(化合物26)
将二碳酸二叔丁酯(144mg，0.629mmol)加入7-乙基-10-羟基-喜树碱(SN-38，190mg，0.484mmol)于19mL无水二氯甲烷中的悬浮液中，然后加入无水吡啶(1.157mL，14.365mmol)。将反应悬浮液在室温搅拌过夜。过滤悬浮液，并用0.5N HCl(3×12mL)和饱和NaHCO 3(1×12mL)萃取滤液。有机相经MgSO4干燥，过滤并在真空下蒸发，得到浅黄色固体(化合物26，232mg，产率：97.3％)。
实施例24：(S)-(2-(2-(2-((((9-((叔丁氧基羰基)氧基)-4,11-二乙基-3,14-二氧代-3 4,12,14-四氢-1H-吡喃并[3',4':6,7]吲哚并[1,2-b]喹啉-4-基)氧基)羰基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸的叔丁基酯(化合物27)的合成
将(S)-叔丁基(-4,11-二乙基-4-羟基-3,14-二氧代-3,4,12,14-四氢-1H-吡喃并[3',4':6,7]吲哚并[1,2-b]喹啉-9-基)碳酸酯(化合物29，0.232g，0.471mmol)，DMAP(0.173g，1.413mmol)和三光气(0.061g，0.207mmol)加入圆底烧瓶中，然后加入二氯甲烷(1.0mL)。将反应混合物搅拌几分钟，并通过TLC监测。将2-[2-(2-Boc-氨基乙氧基)乙氧基]乙醇(0.143g，0.575mmol)加入上述溶液中。将反应混合物搅拌5分钟，然后使用乙酸乙酯通过快速色谱法纯化，得到化合物27(279mg，产率：77％)。C39H49N3O13的质量计算值，[M+H]+768.3，实测值LC/MS(ESI)m/z 768.2[M+H]+，790.2[M+Na]+。
实施例25：(S)-2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙基(4,11-二乙基-9-羟基-3,14-二氧代-3,4,12,14-四氢-1H-吡喃并[3',4':6,7]吲哚并[1,2-b]喹啉-4-基)碳酸酯(化合物28)的合成
将(S)-(2-(2-(2-((((9-((叔丁氧基羰基)氧基)-4,11-二乙基-3,14-二氧代-3,4,12,14-四氢-1H-吡喃并[3',4':6,7]吲哚并[1,2-b]喹啉-4-基)氧基)羰基)氧基)乙氧基)乙氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(化合物27，123mg，0.16mmol)溶于0.4mL TFA中，并在室温搅拌5分钟。向反应溶液加入4mL乙醚，并将混合物搅拌5分钟。过滤悬浮液，收集固体，冻干，得到化合物28(82mg)。质量计算值C29H33N309，[M+H]+568.2，实测值LC/MS(ESI)m/z 568.2[M+H]+，590.2[M+Na]+。
实施例26：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(7-乙基-10-羟基-喜树碱)-马来酰亚胺(化合物29)的合成
在20℃，将N-羟基琥珀酰亚胺(4mg，0.033mmol)加入聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-马来酰亚胺(化合物8，50mg，3-硫酰基丙酸含量：27.6％，马来酰亚胺含量：3％，10K聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)于去离子水(1.0ml)的溶液。在20℃，将(S)-2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙基(4,11-二乙基-9-羟基-3,14-二氧代-3,4,12,14-四氢-1H-吡喃并[3',4':6,7)吲哚并[1,2-b]喹啉-4-基)碳酸酯(化合物28，TFA盐，24mg，0.036mmol)加入反应溶液中。将所得混合物冷却至5至10℃，并使用0.05N NaOH溶液将反应混合物的pH调节至6。加入EDC.HCl(11mg，0.054mmol)，将反应溶液在5至10℃搅拌40分钟。将EDC.HCl(11mg，0.054mmol)第二次加入反应溶液中，并将溶液在20℃搅拌18小时。过滤反应混合物，使用Amicon Ultra-15离心过滤器(MWCO：3K)通过渗滤使滤液脱盐。将脱盐的溶液冻干，得到产物(44mg)。1H NMR(400MHz，D2O)显示喜树碱上的芳族氢：δ ppm7.41,6.94。通过NMR测定，发现喜树碱的含量为8％。
实施例27：聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(7-乙基-10-羟基-喜树碱)-曲妥珠单抗(化合物30)的制备
将参(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP，120μl，0.241μmol，于TEAA的2.0mM溶液，pH＝7.4)加入曲妥珠单抗(10mg，0.0687μmol)于TEAA缓冲液(0.5ml，pH＝7.4)的溶液。在Ar下，将溶液在37℃培养2小时。将反应混合物冷却至0℃。在0℃，将部分还原的曲妥珠单抗溶液加入聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(7-乙基-10-羟基-喜树碱)-马来酰亚胺(化合物29，19.0mg)于去离子水(1.14ml)和DMF(50μl)的溶液中。将溶液在0℃搅拌30分钟，然后升温至室温并搅拌4小时。用半胱氨酸盐酸盐水溶液(7mg)淬灭反应。将反应混合物在室温搅拌1小时。使用Superose-6柱(洗脱液：PBS缓冲液，pH＝7.0)通过尺寸排阻色谱法纯化产物，得到聚(1-羟基甲基乙烯基羟基-甲基缩甲醛)-SPA-(7-乙基-10-羟基-喜树碱)-曲妥珠单抗(化合物30)。7-乙基-10-羟基-喜树碱与曲妥珠单抗的平均比率为约16。
实施例28：细胞活力测定法
使用细胞活力测定法(来自Promega的CellTiter-发光细胞活力测定法(Luminescent Cell Viability Assay))测试化合物和缀合物的活性，其基于存在的ATP定量而测定在用本发明化合物或缀合物处理72小时后测量培养物中的活细胞数(细胞活力.IC50)。
三种表达HER2的乳腺癌细胞系(BT474，HCC1954和SK-BR-3)和表达HER2的胃癌细胞系NCI-N87用于活力测定。将细胞置于不透明壁的96孔盘中，并使其在37℃，5％CO2和95％湿度的气氛中粘附过夜。每孔细胞密度：7000(BT474)，3000(HCC1954)，5000(NCI-N87)，4000(SK-BR-3)。将测试化合物或缀合物加入实验孔中，并在37℃，5％CO2和95％湿度的气氛中培养72小时。将盘在室温平衡30分钟。加入等于每个孔中存在的细胞培养基体积的CellTiter-Glo试剂。在轨道振荡器上细胞裂解2分钟后，将盘在室温培养10分钟。使用MultilabelReader(PerkinElmer，2104-0010A)记录发光。GraphPad Prism 5.0用于分析数据。测定剂量反应曲线，并计算IC50值。
表1提供了具有阿司他丁F和顺铂作为对照的上述细胞系中化合物14至17的IC50数据。见图1至4。
表1
这数据表明，HER2癌细胞系中的已知抗肿瘤剂阿司他丁F通过抗体-药物偶联物化合物16和17递送至癌细胞。化合物14和15缺乏抗体曲妥珠单抗，因此阿司他丁F不靶向癌细胞。这两种化合物具有与游离阿司他丁F相似的活性。然而，当抗体存在于化合物16和17中时，HER2的抑制显着增加，证明了所揭露的抗体-药物偶联物在靶向治疗特定细胞中的有效性。
另一种测定法测量化合物24和25在相同细胞系和MCF7乳腺癌细胞上的IC50值。表2提供了具有阿司他丁F，曲妥珠单抗和顺铂作为对照的上述细胞系中化合物24和25的IC50数据。与不包含靶向部分和每种对照的化合物24相比，化合物25显示活性显着增加。
表2
本文引用的每个专利，专利申请和出版物的揭示内容均通过引用方式整体并入本文。
虽然本揭示内容已经参考了特定具体实施例，但是显而易见的是，在不脱离本发明的真实精神和范畴的情况下，本领域技术人员可以设计出其他具体实施例和变化。所附权利要求旨在被解释为包括所有这样的实施例和等同变化。

Claims (57)

1.一种包含嵌段重复嵌段单体单元(a)和/或(b)和/或(c)和/或(d)的式(I)化合物：
L1是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任意组合所组成群组的连接基团；
L2不存在，或者可以是具下式者：
L2A是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，-C(O)-，-NRc-及其任意组合所组成群组的连接基团；
L2B和L2C独立地不存在或者选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基，-C(O)-，-NRc-及其任何组合所组成群组的连接子基团；
B2A和B2B独立地不存在或是可裂解的连接子；
T是选自由化学治疗剂，微管抑制剂，DNA损伤剂和RNA转录抑制剂所组成群组的治疗剂；
L3是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任意组合所组成群组的连接子基团；
Re是选自氢，烷基和杂烷基的取代基；
L4是下式的基团：
L4A是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，-C(O)-，-NRc-及其任意组合所组成群组的连接子基团；
L4B和L4C独立地不存在或选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基，-C(O)-，-NRc-及其任何组合所组成群组的连接子基团；
B4A和B4B独立地不存在或是可裂解的连接子；
C4A是选自由
以及所组成群组；
其中A是-H或选自由抗体，合成功能化抗体，肽和靶向配体所组成群组的靶向部分；
“n”在每次出现时独立地为0至5的整数；
Rc和Rd在每次出现时独立地选自氢，烷基，杂烷基，环烷基和杂环基；
每个可裂解的连接子B2A，B2B，B4A和B4B(如果存在的话)独立地选自–S–S–，–C(＝O)O–，–OC(＝O)–，–C(＝O)NRc–，–N(Rc)C(＝O)–，–OC(＝O)O–，–NRcC(＝O)O–，–OC(＝O)N(Rc)–或–N(Rc)C(＝O)N(Rd)–，–C(＝O)N(Rc)C(＝O)–，–C(＝O)S–，–SC(＝O)–，–SC(＝O)S–，–OC(＝O)S–，–SC(＝O)O–，–OC(＝S)O–,–SC(＝S)S–,–N(Rc)SO2–，–SO2N(Rc)–，–N(Rc)SO2N(Rd)–，–C(＝O)N(Rc)N(Rd)–，–N(Rc)N(Rd)C(＝O)–，–N(Rc)N(Rd)C(＝O)O–，–OC(＝O)N(Rc)N(Rd)–，–C(Rc)＝N–NH–C(＝O)–，–C(＝O)NH–N＝C(Rc)–，–C(Rc)＝N–O–，–O–N＝C(Rc)–， 以及
其中每个单体独立地取代任何另外的单体；
条件是式(I)的化合物含有一种或多种治疗剂T和一种或多种靶向部分A。
2.根据权利要求1所述的化合物，包括聚合单体(a)，(b)，(d)和任选的(c)嵌段：
其中“a”在每次出现时独立地为1至1860的整数；
“b”在每次出现时独立地为1至372的整数；
“c”在每次出现时不存在或独立地为1至465的整数；
“d”在每次出现时独立地为1至186的整数；和
单体单元(a)，(b)，(c)和(d)的每个嵌段共价连接至至少一个嵌段单体单元(a)，(b)，(c)和/或(d)每个单体单元嵌段独立地取代任何其他单体单元嵌段。
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中所述治疗剂T是化学治疗剂。
4.根据权利要求1或2所述的化合物，其中所述治疗剂T是选自阿司他汀，美登木素生物碱，紫杉醇，生物碱，加利车霉素，倍癌霉素，多柔比星，CC-1065类似物，甲氨蝶呤，吡咯并苯并二氮杂卓(PBD)，微管蛋白抑制剂，激酶抑制剂，MEK抑制剂，KSP抑制剂，α-鹅膏覃碱，β-鹅膏覃碱，γ-鹅膏覃碱，ε-鹅膏覃碱及其任何衍生物所组成群组的一者。
5.根据权利要求4所述的化合物，其中所述治疗剂是具以下结构的阿司他丁衍生物：
其中LT是选自由-(CH2)m-，-(OCH2)m-，-(CH2O)m-，-(OCH2CH2)m-和-(CH2CH2O)m-的连接部分，“m”是0至6的整数；和
Rf是选自氢，–NH2，–C(O)–NH2，–[C(Rc)(Rd)]p–NH2，–C(O)–[C(Rc)(Rd)]p–NH2， 以及以及“p”是1至4的整数。
6.根据权利要求5所述的化合物，其中Rf包括所述阿司他丁衍生物与所述化合物的连接点。
7.根据权利要求5或6所述的化合物，其中Rf是氢或
8.根据权利要求4所述的化合物，其中所述治疗剂是选自喜树碱及其衍生物的喹啉生物碱。
9.根据权利要求8所述的化合物，其中所述治疗剂是具有以下结构的喜树碱衍生物：
其中LT是选自–(CH2)m–，–(OCH2)m–，–(CH2O)m–，–(OCH2CH2)m–以及–(CH2CH2O)m–的连接部分；其中“m”是0至6的整数(即LT是键)；和
Rf选自氢，–NH2，–[C(Rc)(Rd)]p–NH2， 以及其中“p”是1至4的整数。
10.根据权利要求9所述的化合物，其中Rf包括所述喜树碱衍生物与所述化合物的连接点。
11.根据权利要求9或10所述的化合物，其中Rf是氢或
12.根据权利要求1至11中任一项所述的化合物，其中所述靶向部分A是对癌细胞中过表达的抗原特异的抗体或合成功能化抗体。
13.权利要求12所述的化合物，其中所述靶向部分A是对选自由HER-2，EGFR，GPNMB，CD56，TACSTD2(TROP2)，CEACAM5，叶酸受体-a，间皮素，ENPP3，鸟苷酸环化酶C，SLC44A4，NaPi2b，CD70，粘蛋白1，STEAP1，连接蛋白4，5T4，SLTRK6，SC-16，LIV-1，P-钙粘着蛋白，PSMA，纤连蛋白外结构域B，内皮素受体ETB，肌腱蛋白c，胶原IV，VEGFR2，骨膜蛋白，CD30，CD79b，CD19，CD22，CD138，CD37，CD33，CD74，CD19和CD98所组成群组的抗原特异的抗体或合成功能化抗体。
14.根据权利要求12所述的化合物，其中所述靶向部分A是曲妥珠单抗或合成功能化的曲妥珠单抗。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的化合物，其中L2不存在。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的化合物，其中L1是亚烷基。
17.根据权利要求16所述的化合物，其中L1是亚甲基或亚乙基。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的化合物，其中单体单元(b)具有以下结构：
19.根据权利要求18所述的化合物，其中单体单元(b)具有以下结构：
20.根据权利要求1至19中任一项所述的化合物，其中C4A是
21.根据权利要求1至20中任一项所述的化合物，其中L4具有以下结构：
22.根据权利要求1至21中任一项所述的化合物，其中L4A是亚烷基或亚杂烷基。
23.根据权利要求1至22中任一项所述的化合物，其中所述化合物中的T：A的摩尔比大于约5：1。
24.根据权利要求1所述的化合物，其中所述式(I)的化合物是选自化合物16，化合物17，化合物25和化合物30：
25.一种包含嵌段重复单体单元(a)和/或(b)和/或(e)的式(II)化合物
L1是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任意组合所组成群组的连接基团；
L2不存在，或者可以是具下式者：
L2A是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，-C(O)-，-N(RC)-及其任意组合所组成群组的连接基团；
L2B和L2C独立地不存在或选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基，-C(O)-，-N(RC)-及其任意组合所组成群组的连接基团；
B2A和B2B独立地不存在或是可裂解的连接子；
T是选自由化学治疗剂，微管抑制剂，DNA损伤剂和RNA转录抑制剂的治疗剂所组成群组；
L3是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基及其任意组合所组成群组的连接子基团；
L4是具下式者：
L4A是选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基及其任意组合所组成群组的连接子基团；
L4B和L4C独立地不存在或选自由亚烷基，亚杂烷基，亚环烷基，亚杂环基，亚芳基，亚杂芳基，酰氨基亚烷基，酰氨基亚杂烷基，-C(O)-，-N(RC)-及其任何组合所组成群组的连接子基团；
B4A和B4B独立地不存在或是可裂解的连接子
C4A是选自由
以及所组成群组；
A是-H或选自由抗体，合成功能化抗体，肽和靶向配体所组成群组的靶向部分；
“n”在每次出现时独立地为0至5的整数；
Rc和Rd在每次出现时独立地选自氢，烷基，杂烷基，环烷基和杂环基；
每个可裂解的连接子B2A，B2B，B4A和B4B(如果存在的话)独立地选自–S–S–，–C(＝O)O–，–OC(＝O)–，–C(＝O)NRc–，–N(Rc)C(＝O)–，–OC(＝O)O–，–NRcC(＝O)O–，–OC(＝O)N(Rc)–或–N(Rc)C(＝O)N(Rd)–，–C(＝O)N(Rc)C(＝O)–，–C(＝O)S–,–SC(＝O)–，–SC(＝O)S–，–OC(＝O)S–，–SC(＝O)O–，–OC(＝S)O–，–SC(＝S)S–,–N(Rc)SO2–,–SO2N(Rc)–，–N(Rc)SO2N(Rd)–，–C(＝O)N(Rc)N(Rd)–，–N(Rc)N(Rd)C(＝O)–，–N(Rc)N(Rd)C(＝O)O–，–OC(＝O)N(Rc)N(Rd)–，–C(Rc)＝N–NH–C(＝O)–，–C(＝O)NH–N＝C(Rc)–，–C(Rc)＝N–O–，–O–N＝C(Rc)–， 以及
其中每个单体独立地取代任何另外的单体；
条件是式(II)化合物含有一种或多种治疗剂和一种或多种靶向部分。
26.根据权利要求25所述的化合物，包含聚合单体(a)，(b)和(e)的嵌段：
其中“a”在每次出现时独立地为1至1860的整数；
“b”在每次出现时独立地为1至372的整数；
“e”在每次出现时独立地为1至186的整数；和
单体单元(a)，(b)和(e)的每个嵌段共价连接至至少一个嵌段单体单元(a)，(b)和/或(e)；和
每个单体单元嵌段独立地取代任何其他单体单元嵌段。
27.根据权利要求25或26所述的化合物，其中所述治疗剂T是化学治疗剂。
28.根据权利要求25或26所述的化合物，其中所述治疗剂T是选自由阿司他丁，美登木素生物碱，紫杉醇，生物碱，加利车霉素，倍癌霉素，多柔比星，CC-1065类似物，甲氨蝶呤，吡咯并苯并二氮杂卓(PBD)，微管蛋白抑制剂，激酶抑制剂，MEK抑制剂，KSP抑制剂，α-鹅膏覃碱，β-鹅膏覃碱，γ-鹅膏覃碱，ε-鹅膏覃碱及其任何衍生物所组成群组中的一者。
29.根据权利要求28所述的化合物，其中所述治疗剂是以下结构的阿司他丁衍生物：
其中LT是选自-(CH2)m-，-(OCH2)m-，-(OCH2CH2)m-和-(CH2CH2O)m-的连接部分，“m”是0至6的整数(即LT是键)；和
Rf选自氢，–NH2，–C(O)–NH2，–[C(Rc)(Rd)]p–NH2，–C(O)–[C(Rc)(Rd)]p–NH2， 以及“p”是1至4的整数。
30.根据权利要求29所述的化合物，其中Rf包含所述阿司他丁衍生物与所述化合物的连接点。
31.根据权利要求28的化合物，其中所述治疗剂是选自喜树碱及其衍生物的喹啉生物碱。
32.根据权利要求31的化合物，其中所述治疗剂是具有以下结构的喜树碱衍生物：
其中LT是选自-(CH2)m-，-(OCH2)m-，-(CH2O)m-，-(OCH2CH2)m-和-(CH2CH2O)m-的连接部分；其中“m”是0到6的整数；和
Rf选自氢，–NH2，–[C(Rc)(Rd)]p–NH2， 以及其中“p”是1至4的整数。
33.根据权利要求32的化合物，其中Rf包括所述喜树碱衍生物与所述化合物的连接点。
34.根据权利要求25至33中任一项所述的化合物，其中所述靶向部分A是对癌细胞中过表达的抗原特异的抗体或合成功能化抗体。
35.根据权利要求34的化合物，其中所述靶向部分A是对选自由HER-2，EGFR，GPNMB，CD56，TACSTD2(TROP2)，CEACAM5，叶酸受体-a，间皮素，ENPP3，鸟苷酸环化酶C，SLC44A4，NaPi2b，CD70，粘蛋白1，STEAP1，连接蛋白4，5T4，SLTRK6，SC-16，LIV-1，P-钙粘着蛋白，PSMA，纤连蛋白外结构域B，内皮素受体ETB，肌腱蛋白c，胶原IV，VEGFR2，骨膜蛋白，CD30，CD79b，CD19，CD22，CD138，CD37，CD33，CD74，CD19和CD98所组成群组的的抗原特异的抗体或合成功能化抗体。
36.根据权利要求34所述的化合物，其中所述靶向部分是曲妥珠单抗或合成功能化的曲妥珠单抗。
37.根据权利要求25至36中任一项所述的化合物，其中L2不存在。
38.根据权利要求25至36中任一项所述的化合物，其中L1是亚烷基。
39.根据权利要求25至36中任一项所述的化合物，其中L1是亚甲基或亚乙基。
40.根据权利要求25至39中任一项所述的化合物，其中单体单元(b)具有以下结构：
41.根据权利要求40所述的化合物，其中单体单元(b)具有以下结构：
42.一种权利要求1至41中任一项所述的化合物，其中所述聚合物的分子量为约10kDa至约250kDa。
43.一种药物组合物，其包含至少一种根据权利要求1至41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
44.根据权利要求43所述的药物组合物，其中所述组合物被包装为冻干饼，其可以在添加无菌水时重构或溶解。
45.根据权利要求43所述的药物组合物，其中所述组合物被配制用于通过注射给药。
46.一种抑制癌细胞的方法，所述方法包括使所述癌细胞与抗癌有效量的根据权利要求43所述的药物组合物接触。
47.根据权利要求46所述的方法，其中所述药物组合物包含选自化合物16，化合物17，化合物25和化合物30的化合物。
48.一种用于治疗或抑制受试者的癌症的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给药抗癌有效量的根据权利要求43所述的药物组合物。
49.根据权利要求48所述的方法，其中所述癌症是HER2阳性癌症。
50.根据权利要求49所述的方法，其中HER2阳性癌症是其中HER2过表达的癌症。
51.根据权利要求48至50中任一项所述的方法，其中所述癌症是乳腺癌。
52.根据权利要求48至51中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含选自化合物16，化合物17，化合物25和化合物30的化合物。
53.根据权利要求48至52中任一项所述的方法，其中将所述药物组合物作为标准化学疗法治疗的一部分给药所述受试者。
54.根据权利要求48至53中任一项所述的方法，其中所述抗癌有效量的所述药物组合物包含约0.1mg/kg至约10mg/kg的式(I)或式(II)的化合物。
55.根据权利要求48至54中任一项所述的方法，其中所述药物组合物通过选自由吸入，口服，直肠，阴道，肠胃外，局部，透皮，肺，鼻内，口腔，眼科，鞘内，皮下和静脉内所组成群组的给药途径给药。
56.根据权利要求48至55中任一项所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物。
57.根据权利要求56所述的方法，其中所述哺乳动物是人类。
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