CN108125905A

CN108125905A - 一种具有鼠李糖乳杆菌发酵活性成分的美白乳液

Info

Publication number: CN108125905A
Application number: CN201810152699.1A
Authority: CN
Inventors: 王甲林
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2018-02-18
Filing date: 2018-02-18
Publication date: 2018-06-08

Abstract

本发明公开了一种具有鼠李糖乳杆菌发酵活性成分的美白乳液，其由如下方法制备而成：（1）制备鼠李糖乳杆菌发酵产物溶胞物；（2）配置乳液：按照质量百分比，加入甘油硬脂酸酯柠檬酸酯（及）蔗糖硬脂酸酯（及）聚甘油‑4椰油酸酯（及）鲸蜡醇（及）蓖麻醇酸钠1%，山茶花油3%，霍霍巴油1%，半乳化单甘油脂0.6%，鲸蜡硬脂醇1%，聚谷氨酸0.1%，寡聚透明质酸0.8%，鱼皮胶原蛋白2%，甘油3%，1，3‑丁二醇2%，汉生胶0.11%，防腐剂适量，余量为水；按照“一锅煮”方法直接制备乳液，均质10分钟，温度控制在80℃；降温至40℃的时候加入1‑10%的鼠李糖乳杆菌发酵溶胞产物。

Description

一种具有鼠李糖乳杆菌发酵活性成分的美白乳液

技术领域

本发明涉及一种乳液，尤其涉及一种具有鼠李糖乳杆菌发酵活性成分的美白乳液。

背景技术

具有美白祛斑功能的化妆品倍受东方女性青睐，皮肤颜色除了主要取决于表皮的黑色素含量以外，还受多种内外因素的影响。

皮肤白皙一直是亚洲女性追求的美容目标之一，也是亚洲女性美容的首要难题。现今市场上已经开发出许多皮肤美白产品，并且发展迅速，如早期的氢醌、中期的果酸及组织提取物胎盘膏，以及近期的熊果苷、维生素Ｃ（Ｖｃ）衍生物及甘草提取物等。

人体皮肤的颜色取决于皮肤中黑色素的含量与分布，而黑素细胞的结构、功能和数量是产生黑色素的决定因素，直接影响皮肤中黑色素的含量。在黑素细胞中，黑色素是由酪氨酸转化而来，其中酪氨酸酶是黑色素合成的主要限制酶，因此酪氨酸酶抑制剂是使得黑色素减少的经典皮肤美白剂。

首先在活性原料开发阶段，可利用体外方法快速筛检证明原料的美白生物学效应，如本测试产品含有的大黄覆盆子酮、苦参提取物( 苦参醇、苦参黄素) 在体外表明具有抑制酪氨酸酶的活性。亚洲人最崇尚肌肤美白，美白产品在化妆品领域中占据重要位置，因而美白产品的研究保持着日益增长的趋势。美白产品的发展趋向于高效、稳定、安全的新型美白剂，动植物美白成分提取物会越来越多地用于美白产品，以提高美白化妆品的安全性、温和度和美白效果。相信随着科技的不断进步和对美白产品的急切需求，新的美白化合物和新剂型如脂质体包裹美白剂，它可以提高美白成分的透皮性和稳定性；微乳化技术以及新的透皮技术的应用，将会提高美白物质的渗透性，增强美白功效；此外微胶囊技术也用于保护不稳定美白成分。

本发明旨在提供一种具有美白功效的生物发酵乳液，其美白效果好，温和无刺激。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提供一种具有美白功效的生物发酵乳液，其美白效果好，温和无刺激。

鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus GG,LGG)是从健康人肠道分离出的乳杆菌。鼠李糖乳杆菌能够耐受动物消化道环境，在人和动物肠道内定植，起到调节肠道菌群，提高机体免疫力等。

白酒草属双子叶植物纲菊科植物。一或二年生或多年生草本，稀灌木。主要分布于东、西半球的热带和亚热带地区。

本发明人在大量的实践基础上，通过不断改进配方，研制出具有美白功效的生物发酵乳液，尤其是白酒草加入发酵具有预料不到的效果。

本发明的技术方案如下：

一种具有鼠李糖乳杆菌发酵活性成分的美白乳液，其由如下方法制备而成：

（1）制备鼠李糖乳杆菌发酵产物溶胞物：

a、将鼠李糖乳杆菌于种子培养基中扩培；

所述种子培养基配方：罗汉果新鲜未成熟果实浆30-50g，白酒草泥3-6g，葡萄糖10g、蛋白胨15g、氯化钠6g、吐温-80 1ml、磷酸氢二钾1g、七水硫酸镁0.65g、一水硫酸锰0.19g、加水至1000ml，调pH至6.5，灭菌备用；

b、将扩培的鼠李糖乳杆菌种子接种至发酵培养基中发酵，得到发酵液；

发酵培养基：罗汉果新鲜未成熟果实浆5-9%、蛋白胨1％、白酒草泥0.8-1.5%、海藻糖2%、葡萄糖1.5％、吐温-80 0.1％、一水硫酸锰0.019％磷酸氢二钾0.2％、七水硫酸镁0.058％；

发酵参数：38℃、控制起始pH:6.5，发酵pH:5.0，搅拌转速：100r/min；时间：10-12h；

c、离心处理：

将发酵液离心处理，离心转速8000r/min，时间25min，倾倒上清液收集菌泥；

d、乳化：

加入菌泥质量20%的海藻糖，经高速搅拌器进行充分乳化，得到乳化液；

e、消毒：

将乳化液进行巴氏消毒，得到鼠李糖乳杆菌发酵溶胞产物；

（2）配置乳液：

按照质量百分比，加入甘油硬脂酸酯柠檬酸酯（及）蔗糖硬脂酸酯（及）聚甘油-4椰油酸酯（及）鲸蜡醇（及）蓖麻醇酸钠1%，山茶花油3%，霍霍巴油1%，半乳化单甘油脂0.6%，鲸蜡硬脂醇1%，聚谷氨酸0.1%，寡聚透明质酸0.8%，鱼皮胶原蛋白2%，甘油3%，1，3-丁二醇2%，汉生胶0.11%，防腐剂适量，余量为水；

按照“一锅煮”方法直接制备乳液，均质10分钟，温度控制在80℃；

降温至40℃的时候加入1-10%的鼠李糖乳杆菌发酵溶胞产物。

所述防腐剂优选为：天然防腐剂CMG，化学组成：脂肪酸异构体，辛酸单甘油酯。

本发明的有益之处在于：

1.提供一种具有美白功效的生物发酵乳液，其美白效果好，温和无刺激。

2.本品还具有修复抗炎的效果。

具体实施方式

本发明所有实施例用到的提取液可购自任意公司，许多厂家都有出售。

本发明的实验在香港雪奈美实验室完成，雪奈美乳液和面膜已经投入生产，市场反响很好。

实施例1：

制备鼠李糖乳杆菌发酵产物溶胞物：

a、将鼠李糖乳杆菌于种子培养基中扩培；

所述种子培养基配方：罗汉果新鲜未成熟果实浆30g，白酒草泥6g，葡萄糖10g、蛋白胨15g、氯化钠6g、吐温-80 1ml、磷酸氢二钾1g、七水硫酸镁0.65g、一水硫酸锰0.19g、加水至1000ml，调pH至6.5，灭菌备用；

发酵培养基：罗汉果新鲜未成熟果实浆9%、蛋白胨1％、白酒草泥0.9%、海藻糖2%、葡萄糖1.5％、吐温-80 0.1％、一水硫酸锰0.019％、磷酸氢二钾0.2％、七水硫酸镁0.058％；

发酵参数：38℃、控制起始pH:6.5，发酵pH:5.0，搅拌转速：100r/min；时间：10h；

c、离心处理：

d、乳化：

e、消毒：

将乳化液进行巴氏消毒，得到鼠李糖乳杆菌发酵溶胞产物。

实施例2：

制备鼠李糖乳杆菌发酵产物溶胞物：

a、将鼠李糖乳杆菌于种子培养基中扩培；

所述种子培养基配方：罗汉果新鲜未成熟果实浆39g，白酒草泥5g，葡萄糖10g、蛋白胨15g、氯化钠6g、吐温-80 1ml、磷酸氢二钾1g、七水硫酸镁0.65g、一水硫酸锰0.19g、加水至1000ml，调pH至6.5，灭菌备用；

发酵培养基：罗汉果新鲜未成熟果实浆6%、蛋白胨1％、白酒草泥1.2%、海藻糖2%、葡萄糖1.5％、吐温-80 0.1％、一水硫酸锰0.019％、磷酸氢二钾0.2％、七水硫酸镁0.058％；

发酵参数：38℃、控制起始pH:6.5，发酵pH:5.0，搅拌转速：100r/min；时间： 12h；

c、离心处理：

d、乳化：

e、消毒：

将乳化液进行巴氏消毒，得到鼠李糖乳杆菌发酵溶胞产物。

实施例3：

制备鼠李糖乳杆菌发酵产物溶胞物：

a、将鼠李糖乳杆菌于种子培养基中扩培；

所述种子培养基配方：罗汉果新鲜未成熟果实浆42g，白酒草泥3g，葡萄糖10g、蛋白胨15g、氯化钠6g、吐温-80 1ml、磷酸氢二钾1g、七水硫酸镁0.65g、一水硫酸锰0.19g、加水至1000ml，调pH至6.5，灭菌备用；

发酵培养基：罗汉果新鲜未成熟果实浆7%、蛋白胨1％、白酒草泥1.1%、海藻糖2%、葡萄糖1.5％、吐温-80 0.1％、一水硫酸锰0.019％、磷酸氢二钾0.2％、七水硫酸镁0.058％；

发酵参数：38℃、控制起始pH:6.5，发酵pH:5.0，搅拌转速：100r/min；时间：12h；

c、离心处理：

d、乳化：

e、消毒：

将乳化液进行巴氏消毒，得到鼠李糖乳杆菌发酵溶胞产物。

实施例4：

不加入罗汉果新鲜未成熟果实浆：

制备鼠李糖乳杆菌发酵产物溶胞物：

a、将鼠李糖乳杆菌于种子培养基中扩培；

所述种子培养基配方：白酒草泥3g，葡萄糖10g、蛋白胨15g、氯化钠6g、吐温-80 1ml、磷酸氢二钾1g、七水硫酸镁0.65g、一水硫酸锰0.19g、加水至1000ml，调pH至6.5，灭菌备用；

发酵培养基：蛋白胨1％、白酒草泥1.1%、海藻糖2%、葡萄糖1.5％、吐温-80 0.1％、一水硫酸锰0.019％、磷酸氢二钾0.2％、七水硫酸镁0.058％；

c、离心处理：

d、乳化：

e、消毒：

将乳化液进行巴氏消毒，得到鼠李糖乳杆菌发酵溶胞产物；

实施例5：

不加入白酒草泥：

制备鼠李糖乳杆菌发酵产物溶胞物：

a、将鼠李糖乳杆菌于种子培养基中扩培；

所述种子培养基配方：罗汉果新鲜未成熟果实浆38g，葡萄糖10g、蛋白胨15g、氯化钠6g、吐温-80 1ml、磷酸氢二钾1g、七水硫酸镁0.65g、一水硫酸锰0.19g、加水至1000ml，调pH至6.5，灭菌备用；

发酵培养基：罗汉果新鲜未成熟果实浆7%、蛋白胨1％、海藻糖2%、葡萄糖1.5％、吐温-80 0.1％、一水硫酸锰0.019％磷酸氢二钾0.2％、七水硫酸镁0.058％；

发酵参数：38℃、控制起始pH:6.5，发酵pH:5.0，搅拌转速：100r/min；时间：100；

c、离心处理：

d、乳化：

e、消毒：

将乳化液进行巴氏消毒，得到鼠李糖乳杆菌发酵溶胞产物。

实施例6：

不加入白酒草泥和罗汉果新鲜未成熟果实浆：

制备鼠李糖乳杆菌发酵产物溶胞物：

a、将鼠李糖乳杆菌于种子培养基中扩培；

所述种子培养基配方：葡萄糖10g、蛋白胨15g、氯化钠6g、吐温-80 1ml、磷酸氢二钾1g、七水硫酸镁0.65g、一水硫酸锰0.19g、加水至1000ml，调pH至6.5，灭菌备用；

发酵培养基：蛋白胨1％、海藻糖2%、葡萄糖1.5％、吐温-80 0.1％、一水硫酸锰0.019％磷酸氢二钾0.2％、七水硫酸镁0.058％；

c、离心处理：

d、乳化：

e、消毒：

将乳化液进行巴氏消毒，得到鼠李糖乳杆菌发酵溶胞产物。

实施例7 功效测定：

1.美白效果

体外评价实验主要用于新原料或者配方的评估，便于早期发现待评物质的效应，也可以了解其细胞毒性作用大小，这样可以减少研发过程的盲目性和不必要的投入。体外实验应围绕黑色素形成过程中的关键步骤进行设计，传统方法检测指标主要包括酪氨酸酶的活性、黑色素的生成量等。随着人们对黑色素形成机制了解的深入，新的特异的方法不断被开发。

酪氨酸酶是一种多活性酶，实验原理是通过测定催化多巴氧化成多巴醌过程中的多巴化酶活性求得酪氨酸酶的抑制效果。在 96 孔细胞培养板上以密度为 3*10⁴细胞 /孔接种人黑色素细胞悬液培养 24 h，用 PBS 洗涤细胞两次，再加入含有曲通 100 的 PBS溶液添加 L-多巴和实施例1-5的鼠李糖乳杆菌发酵溶胞产物，继续培养 1 h 后，计算反应前后的 475 nmA 的差值，结果除以细胞数，作为评价酪氨酸酶活性高低的指标。结果以半数抑制量 IC50表示，结果越小，表明美白物质的抑制作用越大。结果如下所示：

表1

	半数抑制量 IC50 （mmol/L）
		实施例1	19.58
实施例2	11.51
		实施例3	31.12
实施例4	61.77
		实施例5	71.50
实施例6	75.67

可见，加入白酒草泥和罗汉果新鲜未成熟果实浆可以增强美白效果，而且同时加入后起到显著的协同作用，令美白效果得到了很大的提升。

白藜芦醇对酪氨酸酶有较强的抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)为5.3mmol/L。最优实施例1的半数抑制浓度(IC50)达到了18.63，这是因为本品为未经过浓缩的混合液体。

稳定性：

实施例6的鼠李糖乳杆菌发酵产物溶胞物在25℃下放置一个月后，几乎检测不到酪氨酸酶抑制活性，放置一个月后，具体参数如下表所示：

表2

	半数抑制量 IC50 （mmol/L）
		实施例1	20.62
实施例2	11.62
		实施例3	33.11
实施例4	101.23
		实施例5	121.57
实施例6	几乎检测不到

可见，加入白酒草泥和罗汉果新鲜未成熟果实浆可以增强美白效果的储存稳定性，而且同时加入后起到显著的协同作用。

毒理学测试：

选用小鼠进行毒理学测试，结果：

25 % 水溶液下：

急性口服毒性：无毒

眼睛刺激：非常耐受

致敏试验：无致敏

单次表皮斑贴试验：极好耐受性

对3T3-NRU 3T3成纤维细胞中性红摄取光毒性试验(评估光毒性)：无光毒性。

结果显示，本发明的鼠李糖乳杆菌发酵产物溶胞物具有非常优异的皮肤耐受性，接受性，无毒不致敏。

实施例8：

降温至40℃的时候加入1-10%的鼠李糖乳杆菌发酵溶胞产物。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种具有美白功效的生物发酵乳液，其由如下方法制备而成：

（1）制备鼠李糖乳杆菌发酵产物溶胞物：

a、将鼠李糖乳杆菌于种子培养基中扩培；

c、离心处理：

d、乳化：

e、消毒：

将乳化液进行巴氏消毒，得到鼠李糖乳杆菌发酵溶胞产物；

（2）配置乳液。

2.权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述防腐剂为天然防腐剂CMG，化学组成：脂肪酸异构体，辛酸单甘油酯。

3.权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述配置乳液包括以下步骤：

降温至40℃的时候加入1-10%的鼠李糖乳杆菌发酵溶胞产物。