CN107589190A - 大体积进样‑双固相萃取‑高效液相色谱在线联用设备 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种大体积进样‑双固相萃取‑高效液相色谱在线联用设备。本发明所述的设备包括：三个色谱泵、一个大体积自动进样器，一个普通进样量的自动进样器、一个高压十通切换阀、两个固相萃取柱、以及柱温箱、色谱柱和检测器，通过该联用设备，使用最简单的硬件设备和流路连接，允许大于1mL的大体积液体样品的直接进样，配备两个平行处理的固相萃取萃取柱，与高效液相色谱联用，进行重叠的进样、前处理与分离，大大减少了单个样品在整个批处理样品中的占用时间，并且，本联用设备可以方便的切换为普通的高效液相色谱系统，实现在线系统与普通分离系统之间的自由切换。

Description

大体积进样-双固相萃取-高效液相色谱在线联用设备

技术领域

本发明属于分析化学样品前处理领域，具体涉及一种大体积进样-双固相萃取-高效液相色谱在线联用设备的设计、分析及应用，适用于环境、食品中液体样品中痕量有机物的进样、在线萃取、富集、除杂、解吸、分离和检测。

背景技术

对于痕量化合物的分析，一般有两种策略：小体积采样(如生物样品)，高灵敏度检测器检测；或大体积采样(如环境样品)，富集除杂后进样分析。

环境样品，如水中痕量污染物的分析检测，通常可以提高采样体积和进样体积，然后使用固相萃取(Solid Phase Extraction；SPE)富集、除杂后，浓缩、重溶解析液再进样分析。但离线固相萃取存在手工误差大、操作繁琐、费时费力等缺陷，因此需要发展在线的“大体积进样(Large Volume Injection；LVI)-固相萃取-在线联用方法”以提高方法的重现性、自动化，缩短分析时间。

高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是目前最常规的分析手段，该技术可对目标物进行准确定量，配以二极管阵列、质谱等定性能力强的检测器可以做到准确的半定性，大部分化合物可通过前处理之后注入HPLC进行高效分离并定量定性。超高效液相色谱系统(Ultra High Performance Liquid Chromatography,UHPLC或者Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)其硬件原理和普通的HPLC一样，同样符合本专利的技术背景。

但是，固相萃取与高效液相色谱的在线联用，存在两个局限性：一是进样体积较小，一般小于1mL，需要手动离线方式对样品进行浓缩后再进样；二是SPE上样和处理样品的时间以及HPLC分离目标物的时间都比较长，导致整个分析时间延长。现有的固相萃取在线联用系统通常使用六通切换阀连接单个固相萃取柱，通过六通切换阀的切换，实现上样萃取和解吸分离两个状态的转换；另外，一般进样器的进样速度约为1mL/min，如果进样体积高达数毫升甚至数十毫升，其进样时间将难以忽略，再加上固相萃取柱还需要活化、除杂和平衡时间，整个分析时间将会非常漫长，分析通量将大大降低。

发明内容

基于此，本发明的目的在于，提供一种在线联用设备，使用最简单的硬件设备和流路连接，允许大于1mL的大体积样品的直接进样，配备两个平行处理的固相萃取萃取柱，与高效液相色谱联用，进行重叠的进样、前处理与分离，大大减少了单个样品在整个批处理样品中的占用时间，并且，本联用设备可以方便的切换为普通的高效液相色谱系统，实现多功能系统的目的。

本发明是通过以下技术方案实现的：一种大体积进样-双固相萃取-高效液相色谱在线联用设备，包括大体积进样-双固相萃取在线联用装置和高效液相色谱分离装置；

所述大体积进样-双固相萃取在线联用装置包括用于推送固相萃取所需溶剂的第一液相色谱泵、用于载入样品的第一自动进样器、用于流路切换的十通切换阀以及用于富集目标物并去除杂质的第一固相萃取柱和第二固相萃取柱；

所述高效液相色谱分离装置包括用于推送分离流动相的第二色谱泵和第三色谱泵、用于载入样品的第二自动进样器以及用于色谱分离的色谱柱；

所述十通切换阀按顺时针顺序依次设置有十个接口：所述第一自动进样器接入第一接口，所述第一固相萃取柱两端分别接入第二接口和第九接口，所述色谱柱接入第三接口，所述第二固相萃取柱两端分别接入第四接口和第七接口，第六接口连接废液管，所述第二自动进样器接入第八接口，第五接口和第十接口连接。

有别于现有技术，本发明采用十通切换阀作为连接中枢把进样-双固相萃取装置和高效液相色谱分离装置连接起来，十通切换阀只有两个状态，从而系统中只有两个流路，操作简单；通过十通切换阀的状态切换实现两个固相萃取和两个流路的同时切换，进行重叠的进样、前处理与分离，缩短整体分析时间。

进一步地，所述十通切换阀的状态为第一接口与第二接口连通、第三接口与第四接口连通、第五接口与第六接口连通、第七接口与第八接口连通、第九接口与第十接口连通时，所述第一液相色谱泵、第一自动进样器、第一固相萃取柱连成萃取流路，所述第二色谱泵、第三色谱泵、第二自动进样器、第二固相萃取柱、色谱柱连成解吸分离流路。

所述十通切换阀的状态为第二接口与第三接口连通、第四接口与第五接口连通、第六接口与第七接口连通、第八接口与第九接口连通、第十接口与第一接口连通时，所述第一液相色谱泵、第一自动进样器、第二固相萃取柱连成萃取流路，所述第二色谱泵、第三色谱泵、第二自动进样器、第一固相萃取柱、色谱柱连成解吸分离流路。

从而，通过十通切换阀的状态切换，全自动切换两个平行的固相萃取柱，两个固相萃取柱在任一时刻都处在清洗、平衡、上样、或者解吸分离阶段，当其中一个固相萃取柱处于清洗、平衡、上样阶段的同时，另一个固相萃取柱处于解吸分离阶段，使两个固相萃取柱的分析进程重叠交替。

进一步地，所述萃取流路和解吸分离流路在固相萃取柱内的流向相反。从而，减少目标物在固相萃取柱内的迁移路程，提高解吸效率和色谱分离表现。

进一步地，所述在线联用设备还包括柱温箱和用于检测信号的检测器，所述第一固相萃取柱、第二固相萃取柱、十通切换阀和色谱柱位于所述柱温箱内，所述检测器连接于色谱柱的出口。

进一步地，所述第一色谱泵内置低压梯度比例阀，选择性推送至少三种成分不同的溶剂。上样或平衡溶剂的洗脱能力低，可以推送上样样品流经固相萃取柱，但不会把富集在固相萃取柱的目标物洗脱下来；洗脱能力中等的清洗液可以把一部分杂质洗脱下来但不会洗脱目标物；高洗脱能力的清洗溶液负责清洗整个萃取管路，并把残留在固相萃取柱上的目标物和基质洗脱下来，从而不会造成下次分析的交叉污染。

进一步地，所述第一自动进样器的进样量大于1mL。

进一步地，所述第一自动进样器设有可切换离开流路的定量环。在完成萃取之后，需要对固相萃取柱进行清洗和平衡，此时将具有大体积进样量的第一自动进样器的定量环切换离开流路，以减少清洗和平衡经过该定量环的时间。

本发明还提供了一种高效液相色谱系统，包括本发明所述的第二色谱泵、第三色谱泵、第二自动进样器、色谱柱和十通切换阀，以及双通接头；所述十通切换阀按顺时针顺序依次设置有十个接口：所述第二自动进样器接入第八接口，所述双通接头两端分别接入第二接口和第九接口，所述色谱柱接入第三接口。

本发明还提供了一种高效液相色谱系统，包括本发明所述的第二色谱泵、第三色谱泵、第二自动进样器、色谱柱和十通切换阀，以及双通接头；所述十通切换阀按顺时针顺序依次设置有十个接口：所述第二自动进样器接入第八接口，所述双通接头两端分别接入第四接口和第七接口，所述色谱柱接入第三接口。

相对于现有技术，本发明将所述第一固相萃取柱和第二固相萃取柱的其中一个替换成双通接头时，其相连的流路即转变成了普通的高效液相色谱系统，从而实现在线分析系统和普通高效液相色谱系统之间的简单切换，满足系统的多功能应用。

为了更好地理解和实施，下面结合附图详细说明本发明。

附图说明

图1为实施例1的在线联用设备示意图；

图2为实施例1中“0”号状态的流路连通示意图；

图3为实施例1中“1”号状态的流路连通示意图；

图4为实施例2中的流路连通示意图；

图5为实验1中酸性上样分析80种药物和个人护理品的色谱图；

图6为实验1中碱性上样分析80种药物和个人护理品的色谱图；

图7为实验2中分析7种农药的色谱图；

图8为实验3中普通高效液相色谱模式分析25种药物和个人护理品的色谱图。

具体实施方式

为更进一步阐述本发明以达成预定发明目的所采取的技术手段及其技术效果，以下结合实施例和附图，对本发明提出的大体积进样-双固相萃取-高效液相色谱在线联用设备的结构、特征及其具体实施方式进行说明，详细说明如下。

实施例1

请参阅图1，其是本实施例的大体积进样-双固相萃取-高效液相色谱在线联用设备示意图，其包括大体积进样-双固相萃取在线联用装置和高效液相色谱分离装置。

所述大体积进样-双固相萃取在线联用装置包括用于推送固相萃取所需不同溶剂的第一液相色谱泵1、用于载入样品的具有大体积进样量的第一自动进样器4、用于流路切换的高压十通切换阀7以及用于富集目标物并去除杂质的第一固相萃取柱8和第二固相萃取柱9。

具体的，所述第一自动进样器4的进样量大于1mL，其内设有可切换离开流路的定量环，在完成萃取之后，需要对萃取柱进行清洗和平衡，此时将具有大体积进样量的第一自动进样器的定量环切换离开流路，以减少清洗和平衡经过该定量环的时间。

所述高效液相色谱分离装置包括用于推送分离流动相的第二色谱泵2和第三色谱泵3、用于载入普通量体积样品的第二自动进样器5、用于色谱分离的色谱柱10以及用于检测信号的检测器11。

所述大体积进样-双固相萃取-高效液相色谱在线联用设备还包括用于装载第一固相萃取柱8、第二固相萃取柱9、高压十通切换阀7和色谱柱10并具有温控功能的柱温箱6。

所述高压十通切换阀7作为连接中枢把所述大体积进样-双固相萃取在线联用装置和所述高效液相色谱分离装置连接起来，其按顺时针顺序依次设置有第一接口a、第二接口b、第三接口c、第四接口d、第五接口e、第六接口f、第七接口g、第八接口h、第九接口i和第十接口j。第一自动进样器4接入第一接口a，第一固相萃取柱8两端分别接入第二接口b和第九接口i，色谱柱10接入第三接口c，第二固相萃取柱9两端分别接入第四d和第七接口g，第六接口f连接废液管，第二自动进样器5接入第八接口h，第五接口e和第十接口j使用一根短管互相连接。

在本实施例中，高压十通切换阀7包括两种连通状态，分别为“0”号状态和“1”号状态。

在高压十通切换阀7为“0”号状态(如图2所示)时，第一接口a与第二接口b连通、第三接口c与第四接口d连通、第五接口e与第六接口f连通、第七接口g与第八接口h连通、第九接口i与第十接口j连通，第一液相色谱泵1、第一自动进样器4、第一固相萃取柱8连成一条流路，所述第二色谱泵2、第三色谱泵3、第二自动进样器5、第二固相萃取柱9、色谱柱10连成另一条流路。具体的，第一液相色谱泵1流出的溶剂按顺序流经第一自动进样器4，进入高压十通切换阀7的第一号接口a，从第二接口b流出，连通第一固相萃取柱8，进入第九接口i，从第十接口j流出，通过连通管路进入第五接口e，从第六接口f流出废液；另一方面，第二色谱泵2和第三色谱泵3推送的流动相流经第二自动进样器5，进入高压十通切换阀7的第八接口h，从第七接口g流出，进入第二固相萃取柱9，再进入第四接口d，从第三接口c流出，进入色谱柱10，最后流进检测器11完成分析。

在高压十通切换阀7为“1”号状态(如图3所示)时，第二接口b与第三接口c连通、第四接口d与第五接口e连通、第六接口f与第七接口g连通、第八接口h与第九接口i连通、第十接口j与第一接口a连通时，第一液相色谱泵1、第一自动进样器4、第二固相萃取柱9连成一条流路，第二色谱泵2、第三色谱泵3、第二自动进样器5、第一固相萃取柱8、色谱柱10连成另一条流路。具体的，第一液相色谱泵1流出的溶剂按顺序流经第一自动进样器4，进入高压十通切换阀7的第一号接口a，从第十接口j流出，通过连通管路进入第五接口e，从第四接口d流出，进入第二固相萃取柱9，再进入第七接口g，从第六接口f流出废液；另一方面，第二色谱泵2和第三色谱泵3推送的流动相流经第二自动进样器5，进入高压十通切换阀7的第八接口h，从第九接口i流出，进入第一固相萃取柱8，流进第二接口b，再从第三接口c流出，进入色谱柱10，最后流进检测器11完成分析。

本实施例的工作原理为：高压十通切换阀7为“0”号状态时，第一液相色谱泵1将目标物溶液推送到第一固相萃取柱8，完成萃取过程后，切换高压十通切换阀7为“1”号状态，使第一固相萃取柱8与色谱柱10串联，利用第二色谱泵2和第三色谱泵3推送的流动相完成解吸分离过程，而此时，第二固相萃取柱9则在上述解析分离时间段内进行清洗、平衡和上样，然后再切换高压十通切换阀7，再次进入解吸和分离。此分析过程的前半段，第一固相萃取柱8的清洗、平衡、上样与第二固相萃取柱9的解吸分离同步进行，高压十通切换阀7切换后进入后半段，此阶段第一固相萃取柱8的解吸分离与第二固相萃取柱9的清洗、平衡、上样同步进行，实现重叠分析。

实施例2

请参阅图4，其是本实施例的流路连通示意图。本实施例的结构设计和连接方式与实施例1基本相同，区别在于将实施例1的第一固相萃取柱8和第二固相萃取柱9的其中一个替换为零死体积双通12，从而切换为普通高效液相色谱分离系统。

本实施例中，将实施例1的第一固相萃取柱8替换为零死体积双通12，从而切换得到的普通高效液相色谱分离系统包括第二色谱泵2、第三色谱泵3、第二自动进样器5、色谱柱10、高压十通切换阀7和零死体积双通12。所述第二自动进样器5接入第八接口h，所述零死体积双通12两端分别接入第二接口b和第九接口i，所述色谱柱接入第三接口7。具体的，第二色谱泵2和第三色谱泵3推送的流动相流经第二自动进样器5，进入高压十通切换阀7的第八接口h，从第九接口i流出，进入零死体积双通12，流进第二接口b，再从第三接口c流出，进入色谱柱10，最后流进检测器11完成分析。

相对于现有技术，本发明使用最简单的硬件设备和流路连接，允许大于1mL的大体积样品的直接进样，无需手动离线方式对样品进行浓缩后再进样；同时，配备两个平行处理的固相萃取柱，与高效液相色谱联用，进行重叠的进样、前处理与分离，缩短整体分析时间，大大减少了单个样品在整个批处理样品中的占用时间；并且，本联用设备可以方便的切换为普通的高效液相色谱系统，实现多功能系统的目的。

以下通过几个实验对本发明进行进一步说明。

实验1

本实验使用实施例1所述的在线联用设备进行水中80种药物和个人护理品的在线分析。在本实验中，第一固相萃取柱8和第二固相萃取柱9均为耐高压反相萃取柱，色谱柱10为超高压反相色谱柱。目标物为80种药物和个人护理品，根据目标物的保留特性，分为酸性和碱性两种上样模式，具体实验条件如下：

液相色谱条件(固相萃取条件)

第一液相色谱泵1配置低压梯度比例阀，共有三种可选溶液，其中A流路为0.05％甲酸水溶液，B流路为乙腈/甲醇/丙酮(1︰1︰1V/V/V)，C流路为0.1％氨水溶液。第一液相色谱泵1的流速为4mL/min。

当上样条件为酸性时，平衡溶液为A流路溶液，上样时高压十通切换阀7为“0”号状态，第一液相色谱泵1以4mL/min流速将目标物溶液推送到第一固相萃取柱8，2.6min后完成萃取过程，同时切换高压十通切换阀7为“1”号状态，使第一固相萃取柱8与色谱柱10串联，同时第一液相色谱泵1切换为B流路，以4mL/min流速清洗第二固相萃取柱9，1min后第一液相色谱泵1切换为A流路，以4mL/min流速平衡第二固相萃取柱9。另一方面，上样时高压十通切换阀7为“1”号状态，第一液相色谱泵1以4mL/min流速将目标物溶液推送到第二固相萃取柱9，2.6min后完成萃取过程，同时切换高压十通切换阀7为“0”号状态，使第二固相萃取柱9与色谱柱10串联，同时第一液相色谱泵1切换为B流路，以4mL/min流速清洗第一固相萃取柱8，1min后第一液相色谱泵1切换为A流路，以4mL/min流速平衡第一固相萃取柱8。若上样条件为碱性，则清洗溶液为C流路溶液，上样过程与前面所述相同。

液相色谱条件(分离条件)

色谱柱：InertSustain AQ-C18(2.10mm I.D.×50mm L.,1.9μm)

流速：0.4mL/min

柱温：40℃

进样量：5mL

当高压十通切换阀7切换位置以后，第二色谱泵2和第三色谱泵3推送的流动相开始解吸和分离过程，有机相初始比例为5％，保持0.2min后开始线性梯度变化，8min后有机相比例为80％，0.1min后有机相比例为100％并保持2.1min，0.1min之内有机相比例变为5％并保持不变直至分析结束。

本实验酸性上样和碱性上样获得的色谱图分别如图5和图6所示，所有化合物的峰型对称、尖锐，回收率介于60～120％之间，整体分析时间比单个SPE在线系统缩短一半，通量提高一倍。

实验2

本实验使用实施例1所述的在线联用设备用于水中7种农药的在线分析。在本实验中，第一固相萃取柱8和第二固相萃取柱9均为耐高压反相萃取柱，色谱柱10为超高压反相色谱柱。目标物为7种农药，具体实验条件如下：

液相色谱条件(固相萃取条件)

清洗液：A-20mM乙酸铵水溶液；B-乙腈

流速：2mL/min

上样时高压十通切换阀7为“0”号状态，第一液相色谱泵1以2mL/min流速将目标物溶液推送到第一固相萃取柱8，4min后完成萃取过程，同时切换高压十通切换阀7为“1”号状态，使第一固相萃取柱8与色谱柱10串联，同时第一液相色谱泵1切换为B流路，以2mL/min流速清洗第二固相萃取柱9，3min后第一液相色谱泵1切换为A流路，以2mL/min流速平衡第二固相萃取柱9。另一方面，上样时高压十通切换阀7为“1”号状态，第一液相色谱泵1以2mL/min流速将目标物溶液推送到第二固相萃取柱9，4min后完成萃取过程，同时切换高压十通切换阀7为“0”号状态，使第二固相萃取柱9与色谱柱10串联，同时第一液相色谱泵1切换为B流路，以2mL/min流速清洗第一固相萃取柱8，3min后第一液相色谱泵1切换为A流路，以2mL/min流速平衡第一固相萃取柱8。

液相色谱条件(分离条件)

色谱柱：InertSustain AQ-C18(2.10mm I.D.×50mm L.,3μm)

流动相：A相-20mM乙酸铵水溶液；B相-乙腈

流速：0.4mL/min

柱温：40℃

进样量：2mL

当高压十通切换阀7切换位置以后，第二色谱泵2和第三色谱泵3推送的流动相开始解吸和分离过程，有机相初始比例为10％，保持0.5min后开始线性梯度变化，1min后有机相比例为60％，3.6min后有机相比例为95％并保持0.5min，0.1min之内有机相比例变为5％并保持不变直至分析结束。

本实验获得的色谱图如图7所示，所有化合物的峰型对称、尖锐，回收率介于60～120％之间，整体分析时间比单个SPE在线系统缩短一半，通量提高一倍。

实验3

本实验使用实施例2所述的在线联用设备的普通高效液相色谱功能进行21种药物和个人护理品的在线分析。在本实验中，使用图4所示流路，第一固相萃取柱8被替换为零死体积双通12，色谱柱10为超高压反相色谱柱。目标物为21种药物，浓缩样品后直接进样10μL，具体实验条件如下：

液相条件

色谱柱：Shim-pack XR-ODS III 2.0mm I.D.×75mm L.,1.6μm

流速：0.3mL/min

柱温：40℃

进样量：10μL

流动相A：0.1％甲酸水溶液

流动相B：甲醇

进样完成后，第二色谱泵2和第三色谱泵3推送的流动相开始解吸和分离过程，有机相初始比例为5％，0.5min后有机相比例为25％，4.5min后有机相比例为35％，1min后有机相比例为95％并保持3min，0.1min之内有机相比例变为5％并保持不变直至分析结束。

本实验获得的色谱图如图8所示，其得到的色谱分离结果和方法指标与普通的超高效液相色谱系统没有显著差别，证明该系统可以简单地切换为普通的超高效液相色谱系统。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种大体积进样-双固相萃取-高效液相色谱在线联用设备，其特征在于：包括大体积进样-双固相萃取在线联用装置和高效液相色谱分离装置；

所述大体积进样-双固相萃取在线联用装置包括用于推送固相萃取所需溶剂的第一液相色谱泵、用于载入样品的第一自动进样器、用于流路切换的十通切换阀以及用于富集目标物并去除杂质的第一固相萃取柱和第二固相萃取柱；

所述高效液相色谱分离装置包括用于推送分离流动相的第二色谱泵和第三色谱泵、用于载入样品的第二自动进样器以及用于色谱分离的色谱柱；

所述十通切换阀按顺时针顺序依次设置有十个接口：所述第一自动进样器接入第一接口，所述第一固相萃取柱两端分别接入第二接口和第九接口，所述色谱柱接入第三接口，所述第二固相萃取柱两端分别接入第四接口和第七接口，第六接口连接废液管，所述第二自动进样器接入第八接口，第五接口和第十接口连接。

2.根据权利要求1所述的大体积进样-双固相萃取-高效液相色谱在线联用设备，其特征在于：所述十通切换阀的状态为第一接口与第二接口连通、第三接口与第四接口连通、第五接口与第六接口连通、第七接口与第八接口连通、第九接口与第十接口连通时，所述第一液相色谱泵、第一自动进样器、第一固相萃取柱连成萃取流路，所述第二色谱泵、第三色谱泵、第二自动进样器、第二固相萃取柱、色谱柱连成解吸分离流路。

3.根据权利要求2所述的大体积进样-双固相萃取-高效液相色谱在线联用设备，其特征在于：所述十通切换阀的状态为第二接口与第三接口连通、第四接口与第五接口连通、第六接口与第七接口连通、第八接口与第九接口连通、第十接口与第一接口连通时，所述第一液相色谱泵、第一自动进样器、第二固相萃取柱连成萃取流路，所述第二色谱泵、第三色谱泵、第二自动进样器、第一固相萃取柱、色谱柱连成解吸分离流路。

4.根据权利要求3所述的大体积进样-双固相萃取-高效液相色谱在线联用设备，其特征在于：所述萃取流路和解吸分离流路在固相萃取柱内的流向相反。

5.根据权利要求1所述的大体积进样-双固相萃取-高效液相色谱在线联用设备，其特征在于：所述在线联用设备还包括柱温箱和用于检测信号的检测器，所述第一固相萃取柱、第二固相萃取柱、十通切换阀和色谱柱位于所述柱温箱内，所述检测器连接于色谱柱的出口。

6.根据权利要求1所述的大体积进样-双固相萃取-高效液相色谱在线联用设备，其特征在于：所述第一色谱泵内置低压梯度比例阀，选择性推送至少三种成分不同的溶剂。

7.根据权利要求1所述的大体积进样-双固相萃取-高效液相色谱在线联用设备，其特征在于：所述第一自动进样器的进样量大于1mL。

8.根据权利要求1所述的大体积进样-双固相萃取-高效液相色谱在线联用设备，其特征在于：所述第一自动进样器设有可切换离开流路的定量环。

9.一种高效液相色谱系统，其特征在于：包括权利要求1所述的第二色谱泵、第三色谱泵、第二自动进样器、色谱柱和十通切换阀，以及双通接头；所述十通切换阀按顺时针顺序依次设置有十个接口：所述第二自动进样器接入第八接口，所述双通接头两端分别接入第二接口和第九接口，所述色谱柱接入第三接口。

10.一种高效液相色谱系统，其特征在于：包括权利要求1所述的第二色谱泵、第三色谱泵、第二自动进样器、色谱柱和十通切换阀，以及双通接头；所述十通切换阀按顺时针顺序依次设置有十个接口：所述第二自动进样器接入第八接口，所述双通接头两端分别接入第四接口和第七接口，所述色谱柱接入第三接口。