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CN1055483A - 肽药物的长效脂质体制剂及其制备 - Google Patents

肽药物的长效脂质体制剂及其制备 Download PDF

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CN1055483A
CN1055483A CN91101790A CN91101790A CN1055483A CN 1055483 A CN1055483 A CN 1055483A CN 91101790 A CN91101790 A CN 91101790A CN 91101790 A CN91101790 A CN 91101790A CN 1055483 A CN1055483 A CN 1055483A
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CN
China
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peptide
liposome
preparation
phospholipid composition
transition temperature
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Application number
CN91101790A
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English (en)
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鲍尔-戈哈德·卡巴特
杰根·科特·桑多
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Hoechst AG
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Hoechst AG
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Abstract

本说明书说明了能延长肽的释放时间的肽脂质 体制剂。这种肽的分子量在500和10000之间。脂 质体薄膜的磷脂成分表明其相转变温度至少为 20℃,并且主要含有饱和脂肪酸。皮下注射或肌肉 注射后有效性持续14天以上。此外,还说明了这种 脂质体制剂的制备方法。

Description

本发明涉及用于胃肠外的肽药物的长效脂质体制剂。本发明的制剂用于皮下(S.C.)或肌肉(i.m.)注射,作用时间为14日以上。此外,本发明还涉及此种制剂的制备方法。
脂质体是一些空球形态的超显微粒子。它们具有双层膜,该双层膜由两亲分子,多为磷脂构成,并包围着水性的内腔。它们由类似人体的物质组成,能起到完全不同的物质的载体作用,并有针对性地适合于一些特殊要求。而且亲水的药物大多数被包围在含水的内部,而亲脂的物质大多数被结合在膜中。
脂质体被推荐为许多药物的载体系统,例如作为细胞抑制药,抗感染药和免疫调节剂的载体系统(参见例如Yatvin,M.B.和Lelkes,P.I.,Med.phys.9,(1982))。脂质体的药物主要用于胃肠外,而且常常争取达到静脉给药。其目的是利用贮存效果,降低副作用或提高有效性。脂质体在静脉内注射以后,象所有的胶体体系一样被网状内皮系统(RES)的细胞吸收,以最大限度为2天的半衰期消去,而最好是积聚在肝脏和脾脏内(参见Senior,J.H.,CRC,Critical  Revievs  in  Therapeutic  Drug  Carrier  Systems  3,123(1987))。与静脉内注射相比,皮下或肌肉注射后能保持较长时间的有效浓度。脂质体制剂的作用时间取决于泡囊中的物质释放,取决于它们从注射处的转移,以及取决于小泡的崩解。物质的释放和崩解主要取决于脂质体膜的成分,而转移量依赖于粒子大小,也就是说,随粒度的降低而增加(参见Arrowsmith等Int.J.Pharm.20,347-362(1984))。另一种因素是制剂中的脂质浓度(参见Jackson,A.J.,Res.Comm.Chem.Pathol.Pharmacol.27,293(1980))。
在上述刊物中所叙述的关于肌肉或皮下注射有脂质体的药物载体的研究,丝毫未表明超过14天以上还有药物释放或在注射处有制剂留下。而对各种泡囊成分的脂质体制剂和各种药物的药代动物学研究也表明,有效物质的释放或者在14天内结束,或者在这段时间内脂质体已崩解。
供皮下或肌肉注射的肽脂质体制剂已有说明。长时间释放胰岛素的脂质体配方例如在GB-B-2,050,287中作了叙述。公开号为WO  87/04592的国际专利申请中说明了不能透过膜的分子(实施例中的降(血)钙素)的一种脂质体释放系统,该系统是由小的含有效成分的SUV(单层脂质体,粒度约为30-100nm)和大的MLV(多层泡囊,粒度约为200-10000纳米(nm))的混合物组成。Eukunaga等(见Endocrinology  115,757(1984))叙述了形成了降钙素的脂质体包囊后延长了该蛋白质降低血钙的效果。按照这些刊物中的实施例其有效性证明绝对不会超过14天。
对肽,例如对LHRH类似物叙述了以生物可分解的聚合物为基础的长效配方,例如,关于微胶囊参见EP-B0052510和EP-BO  145240,关于其它受控释放系统参见EP-BO058  481)。EP-AO  299  402叙述了具有拮抗活性的LHRH类似物的长效配方。
上述4个专利文件中没有提到脂质体配方,而GB-B2050287却说明了含LHRH的脂质体的组成,但该组成不同于本发明的组成,它含有释放调节剂和皮下注射后的消去半衰期约为4天。
Scharfer等(见Pharmazie  42,674(1987)和Pharmazie  42,689(1987)叙述了作为LHRH的载体系统的脂质体。他们用卵黄卵磷脂和磷酯酸的混合物制成了MLV,并研究了对家兔或猪的肌肉注射后的药代动力学。药物从注射处消去的半衰期,最大限度为20天。在此半衰期后,LHRH血浓度是不会再测量出的。
用下面表征的特殊脂质体配方,出乎意外地说明,35天后在注射处还可证实有部分LHRH可测出,并会导致有明显的血药浓度和药理学效果。
因此,本发明涉及具有延长肽释放的肽脂质体制剂,其特征在于这类肽的分子量约在500和10000之间,脂质体膜的磷脂成分具有相转变温度至少为20℃,主要含有饱和的脂肪酸;皮下或肌肉注射后有效性持续14天以上。
本发明的脂质体制剂,由于其特殊组成可保证有效性在14天以上。这表示,此制剂由于其特殊的组成不但在给用处停留14天以上不分解,而且超过这段时间制剂所包含的肽药仍可释放出足够的所需的有效剂量。
有效性最好至少持续20天,尤其是30天和更长时间更好。
为了把从注射部位的转移速度降低到最低限度,泡囊(脂质体)的平均体积当量粒度优选在600nm和10000nm之间,尤其要超过800nm。脂质体膜的磷脂成分的相转变温度较好为30℃以上,最好至少37℃。它主要含有链长至少14个碳原子的饱和脂肪酸。
合适的磷脂有例如二肉豆蔻酰-PC(DMPC),二硬脂酰-PC(DSPC),二棕榈酰-PC(PC=磷脂酰胆碱)或者已水解的或部分水解的天然卵磷脂。为了膜的稳定化,例如使用一些甾族化合物的亲脂添加剂如胆固醇是合适的。
被包在脂质体中的肽类(也包括其生理可以接受的盐)有天然的,合成的或半合成的,并在生物体内有特殊作用。因此,在上面和下面的论述中,按本发明的含义,所谓肽既指上面所表征的游离的化合物,又指在生理上可接受的肽盐。它们的分子量约为500至10000。合适的肽例如有LHRH类似物,缓激肽拮抗剂,胰岛素,加压素,催产素,降钙素,肝素,水蛭素和它们的合成的或半合成的类似物。最好包入一些LHRH结构类似物,例如Buserelin  HOE  013(Ac-D-Nal-P-Cl-D-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(α-L-Rha-)Leu-Arg-Pro-Azagly-NHz,参见EP-AO263,521,相当于美国专利申请号396477)但也适用的有例如水蛭素如HBW023(按照EP-A-0324712,R-DNA-水蛭素,相当于美国专利申请号295422),HOE427(=Ebiratide,〔4-二氧化甲硫氨酸,8-D-赖氨酸,9-苯胺〕-α-MSH-(4-9)-(8-氨基-辛基)酰胺-三乙酸酯,参见EP-A-0  179  332,相当于美国专利号4,623,715和4,696,913)和HOE 140(=H-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH 6CH3COOH(参见EP-A-0370453,相当于美国专利申请号374162)。
皆知,适合作药物的一些肽在用于生物体后,只是很短时间有效(参见Banga等,Int.J.Pharm.45,15-50(1988)。由于酶或化学反应可使它们失去活性或者很快消失。通过将这些肽包藏在本发明的脂质体制剂中,可以防止这些有效物质在生物体内迅速代谢失活,并保证在较长时间内不断地连续释放出未变化的药物。
这些脂质体或是单层型或是多层型的。肽不但可以在含水的内腔中作为溶液存在,而且可存在于脂质体膜中。尤其可通过膜来控制活性物质的释放,也就是说,膜的特性和可能在膜中的有效成分含量会影响有效成份的释放时间。通过将肽包藏到大的,例如多层的脂质体中,由于有效物质和载体系统结合,例如把作用持续时间提高到例如20天和更长时间。在本发明的脂质体制剂中,即使30天后在注射部位还可发现脂质体。甚至超过这个时间还可证明有效。
通过加入带负电或带正电的电荷载体例如二棕榈酰-磷脂酰-甘油或膜成中的硬脂酰胺,抗氧化剂或具有稳定特性的或影响释放特性的其它辅助剂还可控制有效物质的释放。
原则上可以按照例如由文献(参见Lichtenberg,D.,Methods  of  Biochemical  Anlysis  33,337(1988))中知道的各种方法制备脂质体。特别合适的是可提供较大量脂质体的生产工艺。
本发明的脂质体制剂的制备方法有如下特征:
a)α)将磷脂成分,必要时和亲脂的添加剂一起溶解在合适的有机溶剂中,去除此溶剂,得到的脂质基体在添加肽的水溶液后溶解形成脂质体,此溶解作用在磷脂成分的相转变温度以上进行,或
β)将磷脂成分,必要时和亲脂的添加剂,以及肽一起溶解在合适的有机溶剂中,去除此溶剂,用水性介质溶解得到的脂质基体,此溶解作用在磷脂成分的相转变温度以上进行,或γ)将磷脂成分,必要时和亲脂的添加剂一起溶解在挥发性的有机溶剂中,加入一含水性的,不能和有机相混合的肽溶液,通过在磷脂成分的相转变温度以上的均化作用使此得到的两相系统转化成一种稳定的乳状液,去除有机溶剂,则生成脂质体。
必要时在均化和平衡作用之后将按α至γ的方法得到的脂质体调节到所要的肽含量,进行灌装和必要时进行冷冻干燥,或
b)按照方法α,β或γ制备不含肽的冻干品和制备装在一个合适容器中的肽的水性溶液,并且在应用前将冻干品和肽溶液合并。
按照本发明方法获得的冻干品可按普通的方法例如将水添加到注射物中变成适于肌肉或皮下注射的合适剂型。
在本发明方法中使用的水性介质由水或者由水和一种有机溶剂例如甲醇或乙醇组成。此外,它还可以含有添加剂如食盐或缓冲剂例如磷酸盐缓冲液。肽的水性溶液也可具有这样的添加剂。
以下适当地实施这些方法。
方法a)
α)将磷脂,必要时和亲脂添加剂(例如胆甾醇)一起溶解在一种有机溶剂中,例如乙醇、甲醇、三氯甲烷、氯仿、叔丁醇中。
去除溶剂,确无残留溶剂,得到其表面尽可能大的脂质基体。对此特别合适的是用旋转式蒸发器抽真空和冻干法或这两种方法结合使用。
在添加水性的、需要时经过缓冲的肽药物溶液后,脂质基体被溶解生成脂质体。此过程必须在配制的温度下进行,该温度高于磷脂成分的相转变温度,当然要低于肽的临界分解温度。通过容器的搅拌和使用加速方法(例如玻璃珠或撇沫器)可促进此过程。接着还可使脂质体的分散体经受例如用Ultraturrax、高压均化器和类似于方法的均化步骤。产生的脂质体在提高的温度下进行平衡,一直达到稳定状态和理想的膨胀为止。通过例如用孔径为1-20μm的膜滤器和玻璃滤器过滤该分散体,分离出粗粒部分的方法来改善分散体的均匀性。
假如药物未定量形成包囊,在多数情况下有必要分离出未形成包囊的部分。交叉过滤在分离结合型的和游离的药物时都显示出一些特别的优点。这种交叉过滤在适当选择薄膜的情况下也可分离脂质体的微细部分(粒度约为400nm)。此外,也可使用离心分离法,色层分离法(凝胶色层分离法,离子交换或吸收色层分离法)或者用吸附法或消化法分离游离的肽。
制成的脂质体分散体可用合适方法检验药物浓度,并稀释到需要的含量,将其装入安瓿或注射瓶中,在合适的条件下保存。
制备药物制剂的所有处理步骤均应在无菌的条件下进行。
β)制备方法类似于α),但将肽和亲脂成分一起溶解在有机溶剂中。这种方法特别适合于具有亲脂特性的肽,适合作溶剂的有乙醇甲醇和叔丁醇。
γ)将磷脂和亲脂的添加剂(例如胆甾醇)溶解在易挥发的有机溶剂,例如乙醚、二异丙醚或它们和二氯甲烷或氯仿的混合物中。在此溶液中加入水性的、与有机相不混合肽溶液。用合适的均化方法(Ultraturrax、超声波、高压均化器)在高于磷脂成分的相转化化温度和低于肽的临界分解温度下使此两相系统转化成一种稳定的乳状液。然后在需要的温度和真空条件下去掉有机溶剂。经过亚稳定的多为凝胶状的中间状态形成脂质体,进一步去除溶剂尽可能地除去脂质体中的杂质。
如α)中所述的方法将脂质体继续加工,精制和装入瓶中。
按照α-γ的方法制备和在水性溶液中含有低温保护剂添加物的或在制备后在其中添加了低温保护剂的脂质体可以冷冻干燥。要把添加剂和冻干法的选择调整到脂质体在应用前容易重新组合并使含有的肽药物大部分以结合形式存在。合适的低温保护剂例如有甘露醇、木糖醇、山梨醇、海藻醇、葡聚醇、聚乙烯吡咯烷酮、清蛋白、羟乙基淀粉和改性明胶。
方法b)
无有效物质的脂质体可按照方法a)α,β或γ进行制备并按如上所述冻干。将无菌的、水性的肽溶液加到冻干品中制成脂质体分散体,然后就可使用此脂质体分散体。
必要时,通过合适的均化方法将按照方法a)α,β或γ得到的不含有效物质的脂质体转化成小泡囊分散体。一种特别合适的方法是例如用微流化器进行高压均化,此外还可用超声波或Ultraturrax进行处理。
可将这里产生的小颗粒脂质体在按上面所述进行冻干之前进行除菌过滤。使用前把这些脂质体与肽溶液合并。如此获得的分散体主要是大泡囊。
本发明的脂质体制剂表明可长时间连续释放出有效物质。此外,它的特点是贮存稳定性高,因此正如实施例9中所述,贮存12个月以后,和脂质体结合的肽仍在99%以上,而且粒度不变。
实施例1
将200毫克LHRH拮抗剂(HOE  013),1348毫克氢化卵磷脂(相转变温度约为53℃)和652毫克胆甾醇在50℃下溶解在50毫升甲醇中。用0.2μm的薄膜过滤器将溶液进行无菌可滤,并在无菌条件下加工成脂质体。为此,在旋转蒸发器中,在55℃下蒸去溶剂直到生成薄层脂质基体(薄膜)。在通氮情况下脂质薄膜加入20毫升无菌的食盐溶液,于55℃下两小时内脂质薄膜从容器壁上溶解,并于50℃振荡过夜。用5μm的薄膜过滤器过滤所获得的脂质体分散体并用食盐溶液补足到100毫升。将获得的分散体转移到聚碳酸酯离心玻璃器皿中,在20.000×g的条件下于5℃离心分离5分钟。取出带有溶解的未形成包囊的LHRH拮抗剂的物料。加入新鲜的食盐溶液后,脂质体再被分散,重复离心分离五次;接着将脂质体添满到20毫升。用高压液相色谱法(HPLC)测定有效物质含量后,用食盐溶液稀释此脂质体分散体到最终浓度为1.6毫克HOEO13/毫升,并装入无菌的注射瓶中。与体积有关的粒度平均为2300纳米,形成包囊的效率为20%。
实施例2
体重约200克的雌性大鼠皮下注射来自实施例1的2×1ml脂质体(相当于一次给药3200μg  HOE  013)。用同样的一组实验动物作对照,对照组试验动物只注射溶剂(食盐溶液,安慰药),而另一组动物每天注射LHRH拮抗剂溶液(60μg,在5%的甘露醇溶液中)。每星期用动情期涂片法检查这些动物的动情抑制作用。在第35天测定尿中的HOE  013的溶度,计算出24小时的排泄量。
实验结果(见表1)表明,注射脂质体组的动物和其它两个对照组不同,35天后还明显地受到抑制。若注射脂质体制剂,在第35天的排泄率(4.5μg)证明是明显的拮抗药物排泄物。此排泄率与与血浆浓度密切相关。
Figure 911017909_IMG1
实施例3
将40毫克LHRH-拮抗剂HOE  013,262毫克二棕榈酰-磷脂酰-胆碱(DPPC)(相转变温度约41℃)和138毫克胆甾醇溶解在15毫升甲醇中。用类似实施例1的方法制备脂质体,但用于溶解薄膜和填满脂质体包囊的水相体积为4毫升。
实施例4
将40毫克LHRH-拮抗剂HOE  013、158.7毫克二肉豆蔻酰-磷脂酰-胆碱(DMPC)(相转变温度约23℃)和41.3毫克胆甾醇按实施例3所述的方法加工成脂质体。
实施例5
将由实施例1,3和4中得到的脂质体进行其在试管中的释放试验。为此,把1毫升分散体封闭在渗析软管内,放在一个容器中,加入10毫升缓冲液(Tris  HCl  0.1M,pH7.4用NaCl等渗化)并于37℃在振荡下保温。每天更换缓冲液并分析HOE  013的含量。实验结果(见表2)表明,释放量明显地依赖于脂质体膜的组成。
Figure 911017909_IMG2
实施例6
用200毫克Buserelinacetat代替HOE  013按实施例1所述的方法加工成脂质体。与体积有关的粒度平均为1800nm,形成包囊效率为10.6%。
实施例7
将250克水解大豆卵磷脂在40℃下溶解在33.3毫升二异丙醚和16.7毫升二氯甲烷中。加入4毫升由500毫克水蛭素(HBW  023)溶于pH值为7.4的10毫摩尔(mM)磷酸盐缓冲液中而成的溶液。混合物在超声浴中均化1分钟。在旋转蒸发器中于55℃下蒸去有机溶剂。生成的脂质体平衡1小时,然后用5μm薄膜过滤器过滤。通过在8000×g条件下的三次离心分离去除未形成包囊的部分之后,把脂质体包囊装入容器至10毫升。形成包囊的效率为11.5%。
实施例8
将135毫克水解卵黄卵磷脂在40℃下溶解在8毫升二异丙醚和4毫升二氯甲烷中,加入4毫升由20毫克Ebiratid(HOE  427)溶于pH值为3.5mM醋酸盐缓冲液中而成的溶液。让此混合物在超声浴中均化1分钟。在旋转式蒸发器中于55℃下蒸去有机溶剂。让生成的脂质体平衡1小时,然后用5μm薄膜过滤器过滤。通过在16000×g速率下三次离心分离去除未形成包囊的部分之后,把脂质包囊装入容器至10毫升。形成包囊的效率为15%。
实施例9
将由实施例1中得到的脂质体在4℃下存放12个月,然后检验其贮存稳定性。通过每分钟16000转(UPM)的离心分离,分离出存放后由脂质体释放入分散体溶剂(水)中的肽,利用高压液相色谱法(HPLC)加以测定。贮存12个月后,由包囊中释放出0.75%的有效物质,99.25%HOE  013仍结合在脂质体中。用光子相关光谱法测定的与体积有关的平均粒度为2300nm,与初始数值相比未发生变化。
实施例10
将2000毫克由二棕榈酰-磷脂酰胆碱(DPPC)、水解卵黄卵磷脂或卵黄卵磷脂和胆甾醇(CH)混合成的等摩尔混合物溶解在甲醇中。在旋转蒸发器,于55℃在真空下蒸去溶剂。用20.0毫升由200毫克HOE  013溶于5.4%的甘露醇水溶液中而成的溶液在55℃下将脂质基体溶解,并在50℃下平衡过夜。用5μm过滤器将生成的脂质体分散体进行过滤,然后冷却到约20℃通过每分钟1000转的离心分离,经过10分钟即可分离出未形成包囊的部分。加入0.9%的食盐溶液和再分散后重复离心分离两次。
把精制过的脂质体部分稀释到需要的HOE  013浓度并装入无菌的注射瓶中。形成包囊的效率:
对于由DPPC/脂甾醇(50∶50摩尔%)制成的脂质体制剂为61.6%;
对于由水解卵黄卵磷脂(HPC)/胆甾醇(50∶50摩尔%制成的脂质体制剂为78.9%;
对于由卵黄卵磷脂(PC)/胆甾醇(50∶50摩尔%)制成的脂质体制剂为74.3%。
实施例11
给平均体重为190-200克的雌性大鼠皮下注射由实施例10制成的脂质体。剂量为每只动物7.2毫克HOE  013。在规定的时间用阴道细胞法计算出对月经周期的抑制作用并和对照试验组比较。对动情期抑制的平均时间间隔:
注射PC/CH-脂质体(第2组)为14天;
注射HPC/CH-脂质体(第3组)为34天;
注射DPPC/CH-脂质体(第4组)为48天。
Figure 911017909_IMG3
实施例12
将3.37克水解卵磷脂和1.63克胆甾醇溶解在100毫升甲醇中。于60℃下在旋转蒸发器内蒸发30分钟成为脂质薄膜。加入玻璃珠后,添加100毫升加热到60℃的甘露醇溶液(5.4%)在旋转蒸发器内于60℃旋转烧瓶60分钟使此脂质薄膜溶解。
将此脂质体分散体在一个小喷嘴(Verstallen公司产品)中于缝隙宽度10和60℃的温度下处理15分钟。生成的少量脂质体通过0.2μm薄膜过滤器进行过滤,在注射瓶中冷却后,接着进行冻干。
而将冻干品和每毫升水中有1毫克HOE  013的溶液一起加到注射液中并在60℃下振荡以再生。
按照实施例1的方法通过重复离心,分离出未形成包囊的部分,有效物质与脂质体结合的部分为28.9%。

Claims (7)

1、能延长释放肽的时间的肽脂质体制剂的制备方法,其特征在于:
a)α)将磷脂成分,必要时和亲脂的添加剂一起溶解在合适的有机溶剂中,去除此溶剂,得到的脂质基体在添加肽的水性溶液后溶解形成脂质体,此溶解作用在磷脂成分的相转变温度以上进行,或
β)将磷脂成分,必要时和亲脂的添加剂,以及肽一起溶解在合适的有机溶剂中,去除此溶剂,用水性介质溶解得到的脂质基体,该溶解作用在磷脂成分的相转变温度以上进行,或
γ)将磷脂成分,必要时和亲脂的添加剂一起溶解在挥发性的有机溶剂中,加入水性的、和有机相不能混合的肽溶液,在磷脂成分的相转变温度以上经均化作用,使得到的两相系统转化成一种稳定的乳状液,去除有机溶剂,则生成脂质体,
按照方法α到γ得到的脂质体分散剂,必要时均相化和平衡化后,调整所需的肽含量、填充、和必要时冷冻干燥,或
b)按照方法α,β或γ制备不含肽的脂质体冻干品,并将水性的肽溶液装于合适的容器中,在应用前将冻干品和肽溶液合并。
所加入的肽,其分子量约在500和10000之间。脂质体薄膜的磷脂成分,其相转变温度至少为20℃并主要含有饱和脂肪酸。这种制剂的有效性在皮下注射或肌肉注射后可持续14天以上。
2、按权利要求1所述的方法,其特征在于要遵照以下一个或多个条件:
a)肽是一种LHRH类似物,一种缓激肽拮抗药剂,HOE427或一种水蛭素衍生物;
b)磷脂成分的相转变温度在30℃以上;
c)磷脂成分中的主要饱和脂肪酸的链长至少有14个碳原子;
d)脂质体薄膜含有一种类甾醇添加物;
e)脂质体的与体积有关的平均粒度至少为600至10000纳米;
f)得到的制剂的有效性至少可持续20天。
3、按权利要求1所述的方法,其特征在于要遵照以下的一个或多个条件:
a)肽是一种LHRH类似物,HOE140,HOE427或HBW023;
b)磷脂成分的相转变温度至少为37℃;
c)磷脂成分中的主要饱和酸的链长至少有14个碳原子;
d)脂质体薄膜含有一种类甾醇添加物;
e)脂质体的与体积有关的平均粒度至少为600至10000纳米;
f)得到的制剂的有效性至少可持续30天。
4、按权利要求1所述的方法,其特征在于要遵照以下的一个或多个条件:
a)肽是Buserelinacetat或HOE  013;
b)磷脂成分的相转变温度至少为37℃;
c)磷脂成分是二棕榈酰-磷脂酰胆碱(DPPC)或天然的水解卵磷脂;
d)薄膜含有胆甾醇添加物;
e)脂质体的与体积有关的平均粒度至少为600至10000纳米;
f)得到的制剂的有效性至少可持续30天。
5、按权利要求1所述的方法,其特征在于:在薄膜材料中附加电荷载体。
6、按权利要求1所述的方法,其特征在于:添加抗氧化剂和其它具有稳定作用或影响释放性能的助剂。
7、按权利要求1所述的脂质体制剂作为皮下注射或肌肉注射的用途。
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