CN105283178A

CN105283178A - 用于治疗癌症的包含mps-1激酶抑制剂和有丝分裂抑制剂的组合

Info

Publication number: CN105283178A
Application number: CN201480033084.7A
Authority: CN
Inventors: A.M.温格纳; G.西迈斯特
Original assignee: Bayer Pharma AG
Current assignee: Bayer Pharma AG
Priority date: 2013-06-11
Filing date: 2014-06-06
Publication date: 2016-01-27
Also published as: SG11201509350RA; US20160128988A1; EA201600003A1; CA2914742A1; JP2016520665A; MX2015017120A; HK1219879A1; AU2014280354A1; KR20160018534A; EP3007692A1; WO2014198645A1; MA38656A1; CL2015003585A1; PH12015502757A1; TN2015000543A1

Abstract

本发明涉及包含Mps-1激酶抑制剂和有丝分裂抑制剂的组合。本发明还涉及所述组合用于治疗癌症，尤其是胰腺癌、胶质母细胞瘤、卵巢癌、非小细胞肺癌、乳腺癌和/或胃癌的用途。

Description

用于治疗癌症的包含MPS-1激酶抑制剂和有丝分裂抑制剂的组合

发明背景

Mps-1(单极纺锤体1)激酶(也称为酪氨酸苏氨酸激酶，TTK)是双特异性Ser/Thr激酶，其在有丝分裂检验点(也称为纺锤体检验点、纺锤体组装检验点)的活化中起重要作用，由此确保有丝分裂过程中染色体适当地分离[AbrieuA等人，Cell，2001，106，83-93]。每一个分裂细胞必须确保将已复制的染色体等分至两个子细胞中。进入有丝分裂后，染色体在它们的着丝点处结合至纺锤体的微管。有丝分裂检验点是一种只要存在未结合的着丝点就处于活化状态的监督机制，并预防有丝分裂细胞进入分裂后期并且由此使未结合的染色体完成细胞分裂[SuijkerbuijkSJ和KopsGJ，BiochemicaetBiophysicaActa，2008，1786，24-31；MusacchioA和SalmonED，NatRevMolCellBiol.，2007，8，379-93]。一旦所有的着丝点以正确的双向即两极方式与有丝分裂纺锤体结合，即可通过检验点，细胞进入分裂后期并且进行整个有丝分裂。有丝分裂检验点由多种必需蛋白质的复杂网络组成，包括MAD(有丝分裂阻滞缺陷蛋白，MAD1-3)和Bub(苯并咪唑出芽抑制解除同源物，Bub1-3)家族成员、动力蛋白CENP-E、Mps-1激酶以及其他组分，其中许多在增殖细胞(例如癌细胞)和组织中过度表达[YuanB等人，ClinicalCancerResearch，2006，12，405-10]。已通过shRNA-沉默、化学遗传学以及Mps-1激酶的化学抑制剂证明了Mps-1激酶活性在有丝分裂检验点信号转导中的重要作用[JellumaN等人，PLosONE，2008，3，e2415；JonesMH等人，CurrentBiology，2005，15，160-65；DorerRK等人，CurrentBiology，2005，15，1070-76；SchmidtM等人，EMBOReports，2005，6，866-72]。

有充足的证据将减少的但是不完全的有丝分裂检验点功能与非整倍性和肿瘤发生联系起来[WeaverBA和ClevelandDW，CancerResearch，2007，67，10103-5；KingRW，BiochimicaetBiophysicaActa，2008，1786，4-14]。相反，已确认对有丝分裂检验点的完全抑制会导致严重的染色体错误分离并且在肿瘤细胞中诱导凋亡[KopsGJ等人，NatureReviewsCancer，2005，5，773-85；SchmidtM和MedemaRH，CellCycle，2006，5，159-63；SchmidtM和BastiansH，DrugResistanceUpdates，2007，10，162-81]。

基于这些发现，MPS-1激酶已被认为是用于癌症治疗的最有希望的药物靶标之一。

WO2011/064328、WO2011/063907、WO2011/063908和WO2013/087579A1涉及[1,2,4]-三唑并-[1,5-a]-吡啶及其用于抑制Mps-1激酶的用途。

已确定的抗有丝分裂药物诸如长春花生物碱、紫杉烷类或埃博霉素通过使微管动力学稳定或不稳定来激活SAC，导致有丝分裂停滞。这种停滞防止姐妹染色单体分离形成两个子细胞。延长的有丝分裂停滞迫使细胞进入有丝分裂退出(mitoticexit)而不发生胞质分裂，或者有丝分裂崩溃(mitoticcatastrophe)，导致细胞死亡。相比之下，Mps-1激酶抑制剂诱导SAC失活，这加速细胞通过有丝分裂的进程，导致严重的染色体错误分离并最终导致细胞死亡。Mps-1的沉默导致细胞不能进行相应于抗有丝分裂药物的停滞有丝分裂。值得注意的是，微管干扰剂和Mps-1抑制的组合甚至增加染色体分离错误和细胞死亡(AbrieuA，Magnaghi-JaulinL，KahanaJA，PeterM，CastroA，VigneronS，LorcaT，ClevelandDW，LabbéJC.Mps1isakinetochore-associatedkinaseessentialforthevertebratemitoticcheckpoint.Cell2001；106：83-93，StuckeVM，SilljéHH，ArnaudL，NiggEA.etal.HumanMps-1kinaseisrequiredforthespindleassemblycheckpointbutnotforcentrosomeduplication.EMBOJ2002；21:1723-1732)。

因此，抗有丝分裂物质与SAC抑制的组合所诱导的染色体分离错误的组合增加构成用于选择性除去肿瘤细胞的有效策略。

发明概述

本发明涵盖一种组合，其包含：

通式(I)的化合物A：

其中：

R¹表示

其中*指示所述基团与分子其余部分的连接点；

R²表示

其中*指示所述基团与分子其余部分的连接点；

R³表示选自以下的基团：甲基-、HO-CH₂-、H₂N-CH₂-、-NH₂；

R⁴表示选自以下的基团：甲氧基-、F₃C-CH₂-O-；

R⁵表示选自以下的基团：

H₃C-S(O)₂-、H₂N-C(O)-、(CH₃)₂N-C(O)-、

或其水合物、溶剂合物或盐，或其混合物；

和

一种或多种有丝分裂抑制剂。

本发明进一步涉及如上文所定义的组合，其用于治疗或预防癌症，尤其是胰腺癌、胶质母细胞瘤、卵巢癌、非小细胞肺癌、乳腺癌和/或胃癌。

本发明进一步涉及如上文所定义的组合用于预防或治疗癌症，尤其是胰腺癌、胶质母细胞瘤、卵巢癌、非小细胞肺癌、乳腺癌和/或胃癌的用途。

本发明进一步涉及如上文所定义的组合用于制备预防或治疗癌症，尤其是胰腺癌、胶质母细胞瘤、卵巢癌、非小细胞肺癌、乳腺癌和/或胃癌的药物的用途。

发明详述

根据第一个方面，本发明涉及一种包含Mps-1激酶抑制剂和一种或多种有丝分裂抑制剂的组合。

所述Mps-1激酶抑制剂选自式(I)的化合物：

其中：

R¹表示

其中*指示所述基团与分子其余部分的连接点；

R²表示

其中*指示所述基团与分子其余部分的连接点；

R³表示选自以下的基团：甲基-、HO-CH₂-、H₂N-CH₂-、-NH₂；

R⁴表示选自以下的基团：甲氧基-、F₃C-CH₂-O-；

且

R⁵表示选自以下的基团：

H₃C-S(O)₂-、H₂N-C(O)-、(CH₃)₂N-C(O)-、

或其水合物、溶剂合物或盐，或其混合物。

在一个优选的实施方案中，R³表示甲基-基团。

在另一个优选的实施方案中，R⁴表示甲氧基-基团。

在另一个优选的实施方案中，R⁵表示-S(=O)₂CH₃基团。

在另一个优选的实施方案中，所述Mps-1激酶抑制剂选自：

(2R)-2-(4-氟苯基)-N-[4-(2-{[2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯基]氨基}-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]丙酰胺、

(2R)-N-[4-(2-{[2-乙氧基-4-(甲磺酰基)苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]-2-(4-氟苯基)丙酰胺、

(2R)-2-(4-氟苯基)-N-[4-(2-{[4-(甲磺酰基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)-苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]丙酰胺、

4-{[6-(4-{[(2R)-2-(4-氟苯基)丙酰基]氨基}苯基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基]氨基}-3-甲氧基-N-(2,2,2-三氟乙基)苯甲酰胺、

4-{[6-(4-{[(2R)-2-(4-氟苯基)丙酰基]氨基}苯基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]-吡啶-2-基]氨基}-3-甲氧基苯甲酰胺、

4-{[6-(4-{[(2R)-2-(4-氟苯基)丙酰基]氨基}苯基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]-吡啶-2-基]氨基}-3-(2,2,2-三氟乙氧基)苯甲酰胺、

(2R)-N-{4-[2-({4-[(3-氟氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-甲氧基苯基}氨基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基]苯基}-2-(4-氟苯基)丙酰胺、

(2R)-N-[4-(2-{[4-(氮杂环丁烷-1-基羰基)-2-甲氧基苯基]氨基}-[1,2,4]-三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]-2-(4-氟苯基)丙酰胺、

(2R)-2-(4-氟苯基)-N-[4-(2-{[2-甲氧基-4-(2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基)-苯基]-氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]丙酰胺、

(-)-2-(4-氟苯基)-3-羟基-N-[4-(2-{[4-(甲磺酰基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]丙酰胺、

(2R)-2-氨基-2-(4-氟苯基)-N-[4-(2-{[2-甲氧基-4-(甲磺酰基)-苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]乙酰胺、

4-{[6-(4-{[(2R)-2-(4-氟苯基)丙酰基]氨基}苯基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基]氨基}-3-甲氧基-N,N-二甲基苯甲酰胺、

(2R)-2-(4-氟苯基)-N-[4-(2-{[2-甲氧基-4-(吡咯烷-1-基羰基)苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]丙酰胺、

(2R)-N-{4-[2-({4-[(3-氟氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}氨基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基]苯基}-2-(4-氟苯基)丙酰胺、

(2R)-2-(4-氟苯基)-N-{4-[2-({4-[(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}氨基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基]苯基}丙酰胺、

(2R)-2-(4-氟苯基)-N-[4-(2-{[4-(吡咯烷-1-基羰基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]丙酰胺、

(2S)-2-(4-氟苯基)-3-羟基-N-[4-(2-{[2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]丙酰胺、

(2S)-N-{4-[2-({4-[(3-氟氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}氨基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基]苯基}-2-(4-氟苯基)-3-羟基丙酰胺、

(2R)-2-氨基-2-(4-氟苯基)-N-[4-(2-{[4-(甲磺酰基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]乙酰胺、

(2R)-2-氨基-2-(4-氟苯基)-N-[4-(2-{[2-甲氧基-4-(2-氧代-1,3-噁唑烷-3-基)苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]乙酰胺、

(2R)-2-氨基-N-{4-[2-({4-[(3-氟氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-甲氧基苯基}氨基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基]苯基}-2-(4-氟苯基)乙酰胺、

(2R)-2-氨基-N-[4-(2-{[4-(氮杂环丁烷-1-基羰基)-2-甲氧基苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]-2-(4-氟苯基)乙酰胺、

(2R)-2-氨基-2-(4-氟苯基)-N-[4-(2-{[2-甲氧基-4-(吡咯烷-1-基羰基)苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]乙酰胺、

(2R)-2-氨基-N-{4-[2-({4-[(3-氟氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}氨基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基]苯基}-2-(4-氟苯基)乙酰胺，和

(2R)-2-氨基-2-(4-氟苯基)-N-[4-(2-{[4-(吡咯烷-1-基羰基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]乙酰胺，

或其互变异构体、N-氧化物、水合物、溶剂合物或盐，或其混合物。

在本发明的另一个优选的实施方案中，所述Mps-1激酶抑制剂为(2R)-2-(4-氟苯基)-N-[4-(2-{[2-甲氧基-4-(甲磺酰基)-苯基]-氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]丙酰胺或其互变异构体、N-氧化物、水合物、溶剂合物或盐，或其混合物。

所述Mps-1激酶抑制剂可以水合物或溶剂合物的形式存在，其中所述Mps-1激酶抑制剂含有极性溶剂，尤其是水、甲醇或乙醇，例如作为化合物晶格的结构元素。极性溶剂，尤其是水的量可以化学计量或非化学计量的比例存在。在化学计量的溶剂合物，例如水合物的情况下，半-(hemi-)、半(semi-)、单-、倍半-、二-、三-、四-、五-等溶剂合物或水合物分别是可行的。本发明包括所有此类的水合物或溶剂合物。

另外，所述Mps-1激酶抑制剂可以游离的形式存在，例如以游离碱，或游离酸，或两性离子的形式存在，或可以盐的形式存在。所述盐可以是有机或无机加成盐的任何盐，特别是药学中通常使用的任何药学上可接受的有机或无机加成盐。

术语“药学上可接受的盐”是指Mps-1抑制剂的相对无毒的无机或有机酸加成盐。例如，参见S.M.Berge等人“PharmaceuticalSalts”，J.Pharm.Sci.1977，66，1-19。

另外，所述Mps-1激酶抑制剂可以N-氧化物的形式存在，其定义为化合物的至少一个氮是氧化的。本发明包括所有此类可能的N-氧化物。

此外，本发明包括Mps-1激酶抑制剂的所有可能的晶形或多晶型物，或者作为单独的多晶型物，或者作为多于一种多晶型物的任何比例的混合物。

总之，本发明也涉及如本文所公开的Mps-1激酶抑制剂的有用形式。如本文所公开的Mps-1抑制剂和Mps-1抑制剂的任何有用形式也称为化合物A。

根据本发明的组合进一步包含一种或多种有丝分裂抑制剂。

所述有丝分裂抑制剂在下文中也称为化合物B。

在本发明的一个优选的实施方案中，所述有丝分裂抑制剂为长春花生物碱，包括长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、desoxyvincaminol、vincaminol、长春布宁、长春蔓晶、长春内日定和长春布宁。

在一个更优选的实施方案中，所述有丝分裂抑制剂选自长春碱、长春新碱、长春地辛和长春瑞滨。

在一个甚至更优选的实施方案中，所述有丝分裂抑制剂为长春瑞滨。

在本发明的另一个优选的实施方案中，所述有丝分裂抑制剂为紫杉烷类，包括多西他赛、紫杉醇及其类似物。

紫杉烷类是本领域已知的并包括，例如，紫杉醇、多西他赛等。

紫杉醇：

(2α,4α,5β,7β,10β,13α)-4,10-双(乙酰氧基)-13-{[(2R,3S)-3-(苯甲酰基氨基)-2-羟基-3-苯基丙酰基]氧基}-1,7-二羟基-9-氧代-5,20-环氧紫杉-11-烯-2-基苯甲酸酯；商品名：Taxol、Anzatax、Paxene。

多西他赛：

1,7β,10β-三羟基-9-氧代-5β,20-环氧紫杉-11-烯-2α,4,13α-三基4-乙酸酯2-苯甲酸酯13-{(2R,3S)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-羟基-3-苯基丙酸酯}；商品名：Taxotere。

基于紫杉烷类的癌症治疗方案广泛地用于治疗卵巢癌、乳腺癌、非小细胞肺癌和小细胞肺癌、头颈癌、食管癌、前列腺癌、膀胱癌和AIDS相关的卡波西肉瘤。紫杉烷类，包括紫杉醇、多西他赛及其类似物，为抗微管剂，抑制细胞内的微管结构，并最终引起细胞死亡。具体地，紫杉烷类诸如紫杉醇结合并稳定微管，引起细胞停滞有丝分裂，并导致细胞生长抑制或细胞毒性响应(E.Chu等人，edCancerChemotherapyDrugManual(2010)JonesandBartlettePublishers)。

被美国食品药品监督管理局(FDA)或其外国同行认可的其他紫杉烷类也优选在本发明的方法和组合中使用。可以在本发明中使用的其他紫杉烷类包括例如在以下中描述的那些：10thNCI-EORTCSymposiumonNewDrugsinCancerTherapy，Amsterdam，第100页，第382和383期(1998年6月16-19日)；和美国专利号4,814,470、5,721,268、5,714,513、5,739,362、5,728,850、5,728,725、5,710,287、5,637,484、5,629,433、5,580,899、5,549,830、5,523,219、5,281,727、5,939,567、5,703,117、5,480,639、5,250,683、5,700,669、5,665,576、5,618,538、5,279,953、5,243,045、5,654,447、5,527,702、5,415,869、5,279,949、5,739,016、5,698,582、5,478,736、5,227,400、5,516,676、5,489,601、5,908,759、5,760,251、5,578,739、5,547,981、5,547,866、5,344,775、5,338,872、5,717,115、5,620,875、5,284,865、5,284,864、5,254,703、5,202,448、5,723,634、5,654,448、5,466,834、5,430,160、5,407,816、5,283,253、5,719,177、5,670,663、5,616,330、5,561,055、5,449,790、5,405,972、5,380,916、5,912,263、8,808,113、5,703,247、5,618,952、5,367,086、5,200,534、5,763,628、5,705,508、5,622,986、5,476,954、5,475,120、5,412,116、5,916,783、5,879,929、5,861,515、5,795,909、5,760,252、5,637,732、5,614,645、5,599,820、5,310,672、RE34,277、美国专利号5,877,205、5,808,102、5,766,635、5,760,219、5,750,561、5,637,723、5,475,011、5,256,801、5,900,367、5,869,680、5,728,687、5,565,478、5,411,984、5,334,732、5,919,815、5,912,264、5,773,464、5,670,673、5,635,531、5,508,447、5,919,816、5,908,835、5,902,822、5,880,131、5,861,302、5,850,032、5,824,701、5,817,867、5,811,292、5,763,477、5,756,776、5,686,623、5,646,176、5,621,121、5,616,739、5,602,272、5,587,489、5,567,614、5,498,738、5,438,072、5,403,858、5,356,928、5,274,137、5,019,504、5,917,062、5,892,063、5,840,930、5,840,900、5,821,263、5,756,301、5,750,738、5,750,562、5,726,318、5,714,512、5,686,298、5,684,168、5,681,970、5,679,807、5,648,505、5,641,803、5,606,083、5,599,942、5,420,337、5,407,674、5,399,726、5,322,779、4,924,011、5,939,566、5,939,561、5,935,955、5,919,455、5,854,278、5,854,178、5,840,929、5,840,748、5,821,363、5,817,321、5,814,658、5,807,888、5,792,877、5,780,653、5,770,745、5,767,282、5,739,359、5,726,346、5,717,103、5,710,099、5,698,712、5,683,715、5,677,462、5,670,653、5,665,761、5,654,328、5,643,575、5,621,001、5,608,102、5,606,068、5,587,493、5,580,998、5,580,997、5,576,450、5,574,156、5,571,917、5,556,878、5,550,261、5,539,103、5,532,388、5,470,866、5,453,520、5,384,399、5,364,947、5,350,866、5,336,684、5,296,506、5,290,957、5,274,124、5,264,591、5,250,722、5,229,526、5,175,315、5,136,060、5,015,744、4,924,012、6,118,011、6,114,365、6,107,332、6,072,060、6,066,749、6,066,747、6,051,724、6,051,600、6,048,990、6,040,330、6,030,818、6,028,205、6,025,516、6,025,385、6,018,073、6,017,935、6,011,056、6,005,138、6,005,138、6,005,120、6,002,023、5,998,656、5,994,576、5,981,564、5,977,386、5,977,163、5,965,739、5,955,489、5,939,567、5,939,566、5,919,815、5,912,264、5,912,263、5,908,835和5,902,822，其公开内容通过引用以其整体并入本文。

可用于本发明的其它化合物是通过紫杉烷机制起作用的那些。通过紫杉烷机制起作用的化合物包括具有产生微管稳定效应和对抗快速繁殖细胞诸如肿瘤细胞或其它过度增殖细胞疾病的细胞毒素活性的能力的化合物。此类化合物包括，例如埃博霉素化合物，例如埃博霉素A、B、C、D、E和F及其衍生物。其他通过紫杉烷机制(例如，埃博霉素化合物)起作用的化合物(被FDA或其外国同行认可的)也优选在本发明的方法和组合中使用。埃博霉素化合物及其衍生物是现有技术中已知的并描述在例如美国专利号6,121,029、6,117,659、6,096,757、6,043,372、5,969,145和5,886,026；和WO97/19086、WO98/08849、WO98/22461、WO98/25929、WO98/38192、WO99/01124、WO99/02514、WO99/03848、WO99/07692、WO99/27890和WO99/28324中，其公开内容通过引用以其整体并入本文。

在一个优选的实施方案中，所述紫杉烷为紫杉醇。

在另一个优选的实施方案中，所述紫杉烷为多西他赛。

本发明的组合可包含一种或多种其他药剂。在一个优选的实施方案中，本发明的组合进一步包含顺铂。

另外，本发明涉及：

一种试剂盒，其包含：

-下列的组合：

组分A：一种或多种如上所述的Mps-1激酶抑制剂或其生理学上可接受的盐、溶剂合物或水合物；

和

组分B：一种或多种有丝分裂抑制剂，包括多西他赛、紫杉醇、长春碱、长春新碱、长春地辛和长春瑞滨；

和，任选地，一种或多种其他药剂C；

其中任选地所述组分A和B中的任一种或两种为准备用于同时(simultaneously)、共同(concurrently)、单独或依序给药的药物制剂形式。

所述组分可通过口服、静脉内、局部、局部滴注(localinstallation)、腹膜内或经鼻途径相互独立地给药。

所述Mps-1激酶抑制剂优选口服给药。所述紫杉烷类优选静脉内给药。所述长春花生物碱优选静脉内给药。

组分A和/或B通常以由药学上可接受的载体和药学有效量的本发明的化合物A和/或化合物B组成的药物组合物的形式给药。

可使用将此类组合物制备成适当的剂型的常规操作。成分和操作包括以下参考文献中描述的那些，其各自通过引用并入本文：Powell，M.F.等人，“CompendiumofExcipientsforParenteralFormulations”PDAJournalofPharmaceuticalScience&Technology1998，52(5)，238-311；Strickley，R.G“ParenteralFormulationsofSmallMoleculeTherapeuticsMarketedintheUnitedStates(1999)-Part-1”PDAJournalofPharmaceuticalScience&Technology1999，53(6)，324-349；和Nema，S.等人，“ExcipientsandTheirUseinInjectableProducts”PDAJournalofPharmaceuticalScience&Technology1997，51(4)，166-171。

本发明的组合可用于治疗或预防癌症。

在一个优选的实施方案中，本发明的组合用于治疗胰腺癌。

在另一个优选的实施方案中，本发明的组合用于治疗胶质母细胞瘤。

在另一个优选的实施方案中，本发明的组合用于治疗非小细胞肺癌。

在另一个优选的实施方案中，本发明的组合用于治疗卵巢癌。

在另一个优选的实施方案中，本发明的组合用于治疗胃癌。

在另一个优选的实施方案中，本发明的组合用于治疗乳腺癌。

本发明的组合可用于抑制、阻断、减少、降低等细胞增殖和/或细胞分裂，和/或产生细胞凋亡。

所述治疗或预防包括：给予需要其的哺乳动物(包括人)有效治疗所述病症的量的本发明的化合物A和量的本发明的化合物B，或其药学上可接受的盐、异构体、多晶型物、水合物、溶剂合物或酯；等。

本文通篇提及的术语“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”是常规使用的，例如，为了抵抗、减轻、减少、缓解、改善诸如癌的疾病或病症的状态等的目的来管理或护理个体。

非小细胞肺癌(NSCLC)是除小细胞肺癌(SCLC)以外的任何类型的上皮肺癌。作为一类，NSCLC与小细胞癌相比对化疗相对不敏感。可能的话，他们主要是通过具有治愈目的的手术切除来治疗，尽管在手术前(新辅助化疗)和手术后(辅助化疗)越来越多地使用化疗。

NSCLC的最常见类型是鳞状细胞癌、大细胞癌和腺癌，但存在一些发生频率较低的其他类型，并且所有类型可在不寻常的组织学变体中并作为混合细胞型的组合发生(“Non-smallcelllungcancertreatment-NationalCancerInstitute”；2008-10-19获取；http://www.cancer.gov/CANCERTOPICS/PDQ/TREATMENT/NON-SMALL-CELL-LUNG/PATIENT)。

在不吸烟者中肺癌几乎普遍是NSCLC，其中绝大多数是腺癌。

在相对罕见的情况下，发现恶性肺肿瘤含有SCLC和NSCLC二者的组分。在这些情况下，所述肿瘤应被分类为复合性小细胞肺癌(c-SCLC)，并且(通常)如同“纯”SCLC来治疗。

乳腺癌是一类源于乳腺组织的癌症，最通常源于输乳管或供应导管乳的小叶的内衬。源于导管的癌被称为导管癌，而源于小叶的那些被称为小叶癌。乳腺癌发生在人类和其他哺乳动物中。尽管绝大多数人类病例发生在女性，但雄性乳腺癌也可能发生。乳腺癌的实例包括但不限于浸润性导管癌、浸润性小叶癌、原位导管癌和原位小叶癌。

卵巢癌是源于卵巢的癌性生长。大多数(超过90%)卵巢癌被分类为“上皮的”和被认为源于卵巢的表面(上皮)。然而，一些证据表明，输卵管也可以是一些卵巢癌的来源。由于卵巢和管彼此密切相关，因此认为这些输卵管(fallopian)癌细胞可模拟卵巢癌。其他类型可源于卵细胞(生殖细胞瘤)或支持细胞。

胃癌(Gastriccancer)，也被称为胃癌(stomachcancer)，影响胃，其见于腹上部和恰好在肋骨下。胃是人体消化系统的一部分。它产生酸和酶，其在食物传递到小肠之前分解食物。癌可在胃的任何部位发展并向上至食道(连接嘴和胃的管)或向下进入小肠展开。

多形性胶质母细胞瘤(GBM)，WHO分类名称“胶质母细胞瘤”，是人类，包括神经胶质细胞，中最常见和最具侵袭性的恶性原发性脑肿瘤。

胰腺癌是源自在形成胰腺的组织中产生的变异细胞的恶性肿瘤。胰腺癌最常见的类型是胰腺的外分泌组分内所产生的腺癌(在光学显微镜中显示腺体结构的肿瘤)。少数源于胰岛细胞，并被分类为神经内分泌肿瘤。

剂量和给药

基于已知用来评价用于治疗过度增殖性病症(包括癌症)的化合物的标准实验室技术，通过标准毒性试验和通过标准药理学测定，其用于确定对哺乳动物中上述确定的疾病状态的治疗，并且通过将这些结果与用于治疗这些疾病状态的已知药物的结果进行比较，可以容易地确定用于治疗每种期望适应症的本发明的化合物的有效剂量。在这些疾病状态之一的治疗中所给予的活性成分的量可以根据如下考量而在很大程度上变化：使用的具体化合物和剂量单位、给药方式、疗程、治疗患者的年龄和性别、和治疗疾病状态的性质和程度。

待给药的活性成分的总量通常在约0.001mg/kg至约200mg/kg体重/天，并且优选约0.01mg/kg至约20mg/kg体重/天的范围。

临床上有用的化合物给药安排将在每天给药一次至三次至每四周给药一次的范围。另外，“休药期”(其中在某一段时间内不给予患者药物)对于药理学效应和耐受性之间的整体平衡可能是有利的。单位剂量可含有约0.5mg至约1500mg活性成分，并且可每天给药一次或多次，或者少于每天一次。通过包括静脉内、肌内、皮下和肠胃外注射在内的注射以及使用输注技术给药的平均每日剂量将优选为0.01至200mg/kg总体重。平均每日直肠剂量方案将优选为0.01至200mg/kg总体重。平均每日阴道剂量方案将优选为0.01至200mg/kg总体重。平均每日局部剂量方案将优选为每天一次至四次给药0.1至200mg。透皮浓度将优选为维持0.01至200mg/kg的每日剂量所需要的浓度。平均每日吸入剂量方案将优选为0.01至100mg/kg总体重。

当然每位患者的具体起始和持续剂量方案将根据以下因素而变化：主治医师所确定的疾病状态的性质和严重程度、所使用的具体化合物的活性、患者的年龄和一般状况、给药时间、给药途径、药物的排泄速率、药物组合等。因此，本发明的化合物或其药学上可接受的盐或酯或组合物的期望的治疗方式和剂量数量可由本领域技术人员使用常规的治疗试验来确定。

实验部分

通式(I)的化合物的制备

通式(I)的取代的三唑并吡啶化合物可根据WO2013/087579(A1)和WO2014/009219(A1)中描述的方法来制备。

生物数据

用于测得通式(I)的化合物的生物数据的测定描述在WO2013/087579(A1)中。

通式(I)的化合物的特征在于以下属性(更多细节参见WO2013/087579(A1))：

-在10μMATP的浓度下进行的Mps-1激酶测定中测得的IC₅₀小于或等于1nM。

-在2mMATP的浓度下进行的Mps-1激酶测定中测得的IC₅₀小于10nM。优选的化合物的IC₅₀甚至小于5nM。更优选的化合物的IC₅₀甚至小于3nM。最优选的化合物的IC₅₀甚至小于2nM。

-大鼠中的最大口服生物利用度(F_max)(通过大鼠肝微粒体测得)高于50%。优选的化合物的F_max甚至高于70%。更优选的化合物的F_max甚至高于80%。

-犬中的最大口服生物利用度(F_max)(通过犬肝微粒体测得)高于45%。优选的化合物的F_max甚至高于52%。更优选的化合物的F_max甚至高于70%。

-人中的最大口服生物利用度(F_max)(通过人肝微粒体测得)高于45%。优选的化合物的F_max甚至高于60%。更优选的化合物的F_max甚至高于85%。

-HeLa细胞增殖测定中测得的IC₅₀小于600nM。优选的化合物的IC₅₀甚至小于400nM。更优选的化合物的IC₅₀甚至小于200nM。最优选的化合物的IC₅₀甚至小于100nM。

Mps-1抑制剂作为单一药剂治疗和与紫杉醇组合的作用方式

基于Mps-1激酶在有丝分裂SAC中的生物功能，可从Mps-1激酶抑制剂预期微核和/或多核性(multinuclearity)的诱导。为了解释Mps-1激酶抑制剂在单一药剂治疗和与紫杉烷类组合治疗中的体内作用方式，将顺铂耐药的卵巢癌细胞A2780cis植入到雌性NMRI(NavalMedicalResearchInstitute)裸鼠中。

(2R)-2-(4-氟苯基)-N-[4-(2-{[2-甲氧基-4-(甲磺酰基)-苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]丙酰胺(下文中称为化合物A1)以在异种移植物模型中已诱导抗肿瘤功效的剂量以2QD(每天2次)的间歇性2天用药/5天停药给药方案PO(口服，经口，口服)给予，其中在单一药剂治疗中高达MTD(最大耐受剂量)(2.5mg/kg)，且在组合治疗中为(1mg/kg)。紫杉醇在单一药剂和组合治疗中以其MTD(24mg/kg)QW(每周一次(指1天用药/6天停药的治疗方案))IV(静脉内)给予。化合物A1单独或与紫杉醇组合治疗后在不同时间点分离肿瘤组织。将肿瘤包埋在石蜡中，制备切片并用苏木精-伊红染色以进行组织病理学分析。

A2780cis肿瘤的化合物A1单一药剂治疗显示多形性表型的诱导，包括首次给药后24小时采集的肿瘤样品中的多核性。紫杉醇治疗在单一药剂治疗后4和8小时诱导非典型有丝分裂和增加坏死，并在治疗后28、32和48小时采集的肿瘤组织中观察到凋亡。化合物A1与紫杉醇的组合治疗在A2780cis卵巢肿瘤中诱导非典型有丝分裂以及增加多形性和多核的肿瘤细胞(首次治疗后32和48小时所采集的肿瘤组织样品中观察到的)。

这些结果显示，化合物A1在细胞分裂周期中抑制染色体物质的正确分布，在以肿瘤细胞的多核性为特征的肿瘤组织中诱导多形性表型，而紫杉醇诱导有丝分裂停滞，如通过增加的非典型有丝分裂的表型所示。化合物A1单一药剂、紫杉醇单一药剂或化合物A1与紫杉醇组合治疗后不同表型的观察表明，在肿瘤或替代组织中使用细胞多核性作为药效生物标志物以确认Mps-1激酶抑制剂单一药剂或与紫杉烷类组合治疗中Mps-1激酶抑制剂活性的机会。

Mps-1激酶抑制剂与紫杉醇的组合在裸鼠的NCI-H1299人NSCLC模型中的体内抗肿瘤功效

在裸鼠的NCI-H1299紫杉烷固有耐药的人肺癌(NSCLC)异种移植物模型中研究Mps-1抑制剂和紫杉醇的组合治疗的效果。

化合物A1在与紫杉醇组合中以优化的每天两次间歇性(2天用药/5天停药)给药方案以次优剂量(sub-optimaldoses)(MTD的18%)口服施用。紫杉醇以其各自的MTD每周一次静脉内施用。物质在最优的媒介物中配制以获得溶液。动物体重和肿瘤大小每周测定两至三次。所有组的治疗在肿瘤细胞接种后第10天以32mm2的肿瘤大小开始。对于组合治疗，化合物A1和紫杉醇在4小时的时间范围内在同一天施用。对照和单一疗法组(仅化合物A1)的动物治疗持续28天。紫杉醇单一疗法和紫杉醇/Mps-1抑制剂治疗组的动物治疗持续37天。在最后一次治疗后，在研究结束时，对血浆和肿瘤进行取样以进行PK分析并测定最终的肿瘤重量。

图1A和1B显示NCI-H1299人NSCLC异种移植肿瘤对化合物A1与紫杉醇组合治疗的反应。NCI-H1299人NSCLC肿瘤细胞在第0天皮下植入到裸鼠内。当肿瘤已达到约32mm2的大小时，在第10天开始治疗。在单一疗法和与紫杉醇组合中，化合物A1以0.45mg/kg每天两次(2QD)达2天用药/5天停药(2on/5off)口服(p.o.)给予。在单一疗法和组合疗法中，紫杉醇以20mg/kg每天一次(QD)每周一次(1on/6off)静脉内(i.v.)给予。每周两至三次使用测径器测量通过确定肿瘤面积来监测肿瘤生长。图1A：肿瘤生长的时间过程。图1B：在研究过程中动物体重变化的时间过程。

表1：Mps-1激酶抑制剂与紫杉醇组合在裸鼠的NCI-H1299异种移植物中的抗肿瘤功效。

^#P<0.05(在媒介物组结束当天与媒介物组相比)

^##P<0.05(在治疗第37天与紫杉醇组相比)

a)T/C=治疗/对照比例，由给药停止时相对平均肿瘤面积[(给药停止时治疗组的肿瘤面积)-(首次治疗前当天治疗组的肿瘤面积)]或平均最终肿瘤重量来计算。

b)体重减轻：最大平均体重减轻表示为动物的起始重量的百分比。体重减轻大于20%被认为是有毒的。

PEG400=平均分子量为400的聚乙二醇

Cremophor=聚氧乙烯蓖麻油。

以0.45mg/kg每天两次(相当于其单一疗法MTD的18%)2天用药/5天停药口服给药治疗28天后，化合物A1在单一疗法中显示对肿瘤生长没有效果(图1A，表1)。

以其MTD(20mg/kg)1天用药/6天停药静脉内施用的紫杉醇单一疗法，和紫杉醇(20mg/kg，1on/6off，i.v.)与以其MTD的18%(0.45mg/kg)每天两次2天用药/5天停药口服给药的化合物A1的组合疗法，治疗28天后与媒介物治疗对照组相比均实现肿瘤大小的统计学显著的减少，显示紫杉醇单一疗法的0.28的相对T/C_面积和紫杉醇/Mps-1激酶抑制剂组合疗法的-0.05的相对T/C_面积。紫杉醇单一疗法和紫杉醇/Mps-1激酶抑制剂组合组再治疗9天。治疗37天后，紫杉醇单一疗法功效的统计学显著的改善在紫杉醇/Mps-1激酶抑制剂组合治疗组中实现。虽然进行性疾病在紫杉醇单一疗法和紫杉醇/Mps-1激酶抑制剂组合治疗组中均观察到，但疾病稳定化的迹象可在组合治疗中检测到，与紫杉醇单一疗法相比在NCI-H1299人肺肿瘤中实现总体明显的肿瘤生长延迟(图1A，表1)。

Mps-1激酶抑制剂(化合物A1)以及紫杉醇单一疗法和组合治疗均良好耐受而无严重的体重减轻或毒性(图1B，表1)。

总之，该研究表明在紫杉醇固有耐药的人NCI-H1299肺癌(NSCLC)模型中Mps-1激酶抑制剂和紫杉醇的协同性，与紫杉醇单一疗法相比实现显著的肿瘤生长延迟。

Mps-1激酶抑制剂与多西他赛组合在裸鼠的NCI-H1299人NSCLC模型中的体内抗肿瘤功效

在裸鼠的NCI-H1299紫杉烷固有耐药的人肺癌(NSCLC)异种移植物模型中研究Mps-1激酶抑制剂(化合物A1)与多西他赛(用作NSCLC患者的护理标准的另一SAC活化、微管去稳定化、抗有丝分裂剂)的组合治疗的效果。

化合物A1在与多西他赛组合中以优化的每天两次间歇性(2天用药/5天停药)给药方案以次优剂量(MTD的80%)口服施用。多西他赛以其各自的MTD每周一次静脉内施用。物质在最优的媒介物中配制以获得溶液。动物体重和肿瘤大小每周测定两次。所有组的治疗在肿瘤细胞接种后第10天以28mm2的肿瘤大小开始。对于组合治疗，化合物A1和多西他赛在4小时的时间范围内在同一天施用。对照和Mps-1激酶抑制剂单一疗法组的动物治疗持续20天。多西他赛单一疗法和多西他赛/Mps-1激酶抑制剂组合治疗组的动物治疗持续42天。在最后一次治疗后，在研究结束时，对血浆和肿瘤进行取样以进行PK分析并测定最终的肿瘤重量。

图2A、2B和2C显示NCI-H1299人NSCLC异种移植肿瘤对化合物A1与多西他赛组合治疗的反应。NCI-H1299人NSCLC肿瘤细胞在第0天皮下植入到裸鼠内。当肿瘤已达到约28mm2的大小时，在第10天开始治疗。在单一疗法和与多西他赛组合中，化合物A1以2.0mg/kg每天两次(2QD)2天用药/5天停药(2on/5off)口服(p.o.)给予。在单一疗法和组合疗法中，多西他赛以15mg/kg每天一次(QD)每周一次(1on/6off)静脉内(i.v.)给予。每周两至三次使用测径器测量通过确定肿瘤面积来监测肿瘤生长。图2A：肿瘤生长的时间过程。图2B：在肿瘤细胞接种后第52天研究结束时多西他赛/Mps-1激酶抑制剂组合组的肿瘤重量。图2C：在研究过程中动物体重变化的时间过程。

表2：Mps-1激酶抑制剂与多西他赛组合在裸鼠NCI-H1299异种移植物中的抗肿瘤功效。

^#P<0.05(在媒介物组结束当天与媒介物组相比)

^##P<0.05(在治疗第42天与多西他赛组相比)

以其单一疗法MTD的80%(2mg/kg)每天两次2天用药/5天停药口服给药治疗20天后，化合物A1在单一疗法中实现微弱的功效(图2A，表2)。

以其MTD(15mg/kg)1天用药/6天停药静脉内施用的多西他赛单一疗法，和多西他赛(15mg/kg，1on/6off，i.v.)与以其MTD的80%(2mg/kg)每天两次2天用药/5天停药口服给药的化合物A1的组合疗法，治疗20天后与媒介物治疗对照组相比均实现肿瘤大小的统计学显著的减少，显示多西他赛单一疗法的0.16的相对T/C_面积和多西他赛/Mps-1激酶抑制剂组合疗法的0.08的相对T/C_面积。多西他赛单一疗法和多西他赛/Mps-1激酶抑制剂组合组再治疗21天。治疗42天后，多西他赛单一疗法功效的统计学显著的改善在多西他赛/Mps-1激酶抑制剂组合治疗组中实现。虽然进行性疾病在多西他赛单一疗法和多西他赛/Mps-1激酶抑制剂组合治疗组中均观察到，但与多西他赛单一疗法相比在NCI-H1299人肺肿瘤中在与化合物A1组合治疗中实现总体明显的肿瘤生长延迟(图2A，图2B，表2)。

Mps-1激酶抑制剂以及多西他赛单一疗法治疗良好耐受，而无严重的体重减轻或毒性。多西他赛/Mps-1激酶抑制剂组合的耐受性是可接受的而无毒性。此处，在治疗周期后观察到-1至-8%的最大体重(图2C，表2)。

总之，该研究表明Mps-1激酶抑制剂与多西他赛(另一SAC活化、微管去稳定化、抗有丝分裂剂)的组合也实现协同性。此外，以及在与紫杉醇的组合中，与多西他赛单一疗法相比在紫杉烷固有耐药的人肺癌(NSCLC)中可实现肿瘤生长延迟的显著改善。

Mps-1激酶抑制剂与紫杉醇组合在裸鼠的MDA-MB231人三阴性乳腺癌模型中的体内抗肿瘤功效

在裸鼠的MDA-MB231人三阴性(不表达Her2/neu、孕酮受体、雌激素受体)异种移植物模型中研究Mps-1激酶抑制剂(化合物A1)和紫杉醇的组合治疗的效果。

化合物A1在与紫杉醇组合中以优化的每天两次间歇性(2天用药/5天停药)给药方案以次优剂量(MTD的40%)口服施用。紫杉醇以其各自的MTD每周一次静脉内施用。物质在最优的媒介物中配制以获得溶液。动物体重和肿瘤大小每周测定三次。所有组的治疗在肿瘤细胞接种后第24天以27mm2的肿瘤大小开始。对于组合治疗，化合物A1和紫杉醇在4小时的时间范围内在同一天施用。对照和单一疗法组(仅化合物A1)的动物治疗持续28天。紫杉醇单一疗法和紫杉醇/Mps-1激酶抑制剂治疗组的动物治疗持续50天。在最后一次治疗后，在研究结束时，对血浆和肿瘤进行取样以进行PK分析并测定最终的肿瘤重量。

图3A、3B和3C显示MDA-MB231人三阴性乳腺癌异种移植肿瘤对化合物A1与紫杉醇组合治疗的反应。MDA-MB231人乳腺癌细胞在第0天皮下植入到裸鼠内。当肿瘤已达到约27mm2的大小时，在第24天开始治疗。在单一疗法和与紫杉醇组合中，化合物A1以1mg/kg每天两次(2QD)2天用药/5天停药(2on/5off)口服(p.o.)给予。在单一疗法和组合疗法中，紫杉醇以20mg/kg每天一次(QD)每周一次(1on/6off)静脉内(i.v.)给予。每周三次使用测径器测量通过确定肿瘤面积来监测肿瘤生长。图3A：肿瘤生长的时间过程。图3B：在肿瘤细胞接种后第73天研究结束时紫杉醇/Mps-1激酶抑制剂组合组的肿瘤重量。图3C：在研究过程中动物体重变化的时间过程。

表3：Mps-1激酶抑制剂与紫杉醇组合在裸鼠MDA-MB231异种移植物中的抗肿瘤功效。

^#P<0.05(在媒介物组结束当天与媒介物组相比)

^##P<0.05(在治疗第73天与紫杉醇组相比)

以其单一疗法MTD的40%(1mg/kg)每天两次2天用药/5天停药口服给药治疗28天后，化合物A1在单一疗法中显示对肿瘤生长没有效果(图3A，表3)。

以其MTD(20mg/kg)1天用药/6天停药静脉内施用的紫杉醇单一疗法，和紫杉醇(20mg/kg，1on/6off，i.v.)与以其MTD的40%(1mg/kg)每天两次2天用药/5天停药口服给药的化合物A1的组合疗法，治疗28天后与媒介物治疗对照组相比均实现肿瘤大小的统计学显著的减少，显示紫杉醇单一疗法的0.14的相对T/C_面积和紫杉醇/Mps-1激酶抑制剂组合疗法的-0.07的相对T/C_面积。紫杉醇单一疗法和紫杉醇/Mps-1激酶抑制剂组合组再治疗22天。治疗50天后，紫杉醇单一疗法功效的统计学显著的改善在紫杉醇/Mps-1激酶抑制剂组合治疗组中实现。在用紫杉醇与Mps-1激酶抑制剂组合治疗后观察到明显的疾病稳定化，与紫杉醇单一疗法相比在MDA-MB231人三阴性乳腺癌模型中实现肿瘤生长控制的明显改善(图3A，图3B，表3)。

Mps-1激酶抑制剂(化合物A1)以及紫杉醇单一疗法和组合治疗均良好耐受而无严重的体重减轻或毒性(图3C，表3)。

总之，该研究表明在人三阴性乳腺癌模型MDA-MB231中Mps-1激酶抑制剂和紫杉醇的协同性，显示紫杉醇单一疗法的显著改善并实现明显的疾病稳定化。

在原发性人NSCLC模型LU387中Mps-1抑制剂与紫杉醇的组合

在裸鼠的皮下原发性人NSCLC异种移植物模型LU387中评价与媒介物相比化合物A1和紫杉醇的效果。

媒介物治疗的小鼠的平均肿瘤大小在治疗后第42天达到1516mm³。用化合物A1以1mg/kg和2.5mg/kg(PO，2QD，2天用药/5天停药经6周)治疗在同一时间分别产生1788和1137mm³的平均肿瘤大小。低剂量没有产生任何抗肿瘤活性。高剂量产生一些肿瘤抑制作用，其中T/C_体积为0.73，这是不显著的(P=0.552)。用紫杉醇以20mg/kg(IV；QW)治疗6周产生1494mm³的平均肿瘤大小(P=1.000，与媒介物治疗组相比)。用化合物A1和紫杉醇组合治疗在第42天产生741mm³的平均肿瘤大小(P=0.054，与媒介物治疗组相比)，其比任何单一药剂治疗更有效。肿瘤重量结果与肿瘤体积数据一致。基于体重变化，治疗被动物良好耐受。

然而，化合物A1作为单一药剂以1mg/kg和2.5mg/kg的剂量对原发性人NSCLC异种移植物模型LU387显示没有显著的抗肿瘤活性。相反，化合物A1与紫杉醇组合治疗在该研究中显示更多的加成功效(additiveefficacy)。

在IGR-OV1人卵巢癌模型中Mps-1激酶抑制剂与紫杉醇的组合

在裸鼠的IGR-OV1人卵巢癌模型中研究化合物A1与SAC活化、微管稳定化、抗有丝分裂剂紫杉醇组合治疗的效果。化合物A1在单一药剂治疗中以高达各自MTD和在组合中以单一药剂MTD的80%以2QD2天用药/5天停药的给药方案PO给予。紫杉醇以其各自MTD的50%IVQW给予。所有组的治疗在肿瘤细胞接种后第5天以27mm2的肿瘤大小开始。对于组合治疗，化合物A1和紫杉醇在4小时的时间内在同一天给予。对照和化合物A1单一药剂治疗组的动物治疗38天。紫杉醇单一药剂治疗和化合物A1与紫杉醇组合治疗组的动物治疗77天。

以MTD2.5mg/kg2QD2天用药/5天停药PO给药治疗38天后，与媒介物治疗对照组相比，化合物A1实现中度的单一药剂功效和肿瘤生长抑制的统计学显著的改善，实现0.52的T/C_重量和0.57的相对T/C_面积。以其MTD的50%(12mg/kgIVQW)的紫杉醇单一药剂治疗和紫杉醇(相同的剂量和方案)与以其单一药剂MTD的80%(2mg/kg)2QD2天用药/5天停药PO给药的化合物A1的组合治疗，治疗38天后与媒介物治疗对照组相比实现肿瘤大小的统计学显著的减少，其中紫杉醇单一药剂治疗的相对T/C_面积为0.34和化合物A1与紫杉醇组合治疗的相对T/C_面积为0.07。与紫杉醇单一药剂治疗相比，化合物A1与紫杉醇组合治疗组中实现统计学显著的改善，从治疗第38天增加至治疗第59天，当紫杉醇单一药剂治疗组显示明显的肿瘤进展时，而化合物A1与紫杉醇组合治疗组在50%的IGR-OV1肿瘤中诱导疾病稳定化和在10%的IGR-OV1肿瘤中诱导部分消退。从治疗第59天起，来自紫杉醇单一药剂治疗组的大的(80mm²)逐渐生长的肿瘤用化合物A1(除紫杉醇外)以2mg/kg2QD2天用药/5天停药PO治疗达另2个治疗周期(肿瘤生长观察另外18天)。紫杉醇不敏感的肿瘤的该组合治疗诱导明显的肿瘤生长停滞和疾病稳定化，表明通过将化合物A1加入到紫杉醇单一药剂治疗中抑制了大的紫杉醇预处理的难治性肿瘤的生长。化合物A1以及紫杉醇单一药剂治疗和组合治疗均良好耐受而无严重的体重减轻或毒性。

总之，该研究显示在卵巢癌模型IGR-OV1中Mps-1激酶抑制剂和紫杉醇的明显协同性。此外，该研究表明，进行性紫杉烷难治性肿瘤生长可通过将Mps-1激酶抑制剂加入到紫杉醇预处理的大肿瘤中得到抑制。

在A2780cis人卵巢癌模型中Mps-1激酶抑制剂与紫杉醇的组合

在裸鼠的人卵巢癌模型中，即在获得性(adaptive)顺铂耐药的和紫杉醇固有耐药的A2780cis异种移植物模型中研究化合物A1与紫杉醇组合治疗的效果。化合物A1在组合治疗中以单一药剂MTD的40%的剂量以间歇性2QD2天用药/5天停药的给药方案PO给予。紫杉醇以其各自的MTDIVQW给予。所有组的治疗在肿瘤细胞接种后第6天以26mm2的肿瘤大小开始。对于组合治疗，化合物A1和紫杉醇在4小时的时间内在同一天给予。对照和化合物A1单一药剂治疗组的动物治疗14天。紫杉醇单一药剂治疗和化合物A1与紫杉醇组合治疗组的动物治疗36天。

以单一药剂MTD的40%(1mg/kg)2QD2天用药/5天停药PO给药治疗14天后，化合物A1实现微弱的单一药剂功效，实现0.87的T/C_重量和0.89的相对T/C_面积。以其MTD(24mg/kgIVQW)的紫杉醇单一药剂治疗和紫杉醇(24mg/kgIVQW)与以1mg/kgPO2QD2天用药/5天停药的化合物A1的组合治疗，治疗14天后与媒介物治疗对照组相比均实现肿瘤大小的统计学显著的减少，显示紫杉醇单一药剂治疗的0.09的相对T/C_面积和化合物A1与紫杉醇组合治疗的0.03的相对T/C_面积。紫杉醇单一药剂治疗和化合物A1与紫杉醇组合治疗组再治疗22天。治疗36天后，紫杉醇单一药剂功效的统计学显著的改善在化合物A1与紫杉醇组合治疗组中实现。虽然进行性疾病在紫杉醇单一药剂和化合物A1与紫杉醇组合治疗组中均观察到，但与紫杉醇单一药剂治疗相比在A2780cis卵巢肿瘤中在组合治疗中观察到明显的肿瘤生长延迟。化合物A1以及紫杉醇单一药剂和组合治疗均良好耐受而无严重的体重减轻或毒性。

总之，该研究表明在紫杉醇固有耐药的卵巢癌模型A2780cis中Mps-1激酶抑制剂和紫杉醇的协同性，与紫杉醇单一药剂治疗相比实现显著的肿瘤生长延迟。

在A2780人卵巢癌模型中Mps-1激酶抑制剂与顺铂和紫杉醇的组合(三重组合)

在裸鼠的A2780人卵巢癌模型中研究化合物A1与顺铂和紫杉醇的组合治疗的效果。顺铂与紫杉醇组合疗法当前用作卵巢和肺癌患者的SoC。A2780模型先前已表明对以组合治疗MTD给予的顺铂与紫杉醇组合治疗不敏感。本研究的目的是调查，化合物A1与顺铂和紫杉醇的三重组合治疗是否能克服不敏感性/耐药性。化合物A1以高达其单一药剂MTD和在组合治疗中以其40%的较低剂量PO给予。使用2QD间歇性2天用药/5天停药的给药方案。在组合中顺铂和紫杉醇以其各自的MTD给予，每两周(Q2W)腹膜内(IP)顺铂和IVQW紫杉醇。所有组的治疗在肿瘤细胞接种后第4天以27mm2的肿瘤大小开始。对于组合治疗，化合物A1、紫杉醇和顺铂在4小时的时间内在同一天给予。对照和化合物A1单一药剂治疗组的动物治疗8天。顺铂与紫杉醇和三重组合(化合物A1与顺铂和紫杉醇)治疗组的动物治疗17天。

以其MTD的40%(1mg/kg)和以其MTD(2.5mg/kg)2QD2天用药/5天停药PO治疗8天后，化合物A1实现微弱的单一药剂功效。以其MTD(以4.5mg/kgQ2WIP顺铂和以18mg/kgIVQW紫杉醇)的顺铂与紫杉醇组合治疗以及以其MTD的顺铂和紫杉醇和以其单一药剂MTD的40%(1mg/kgPO2QD，2天用药/5天停药)的化合物A1的三重组合治疗组在治疗8天后与媒介物治疗对照组相比实现肿瘤大小的统计学显著的减少，其中顺铂与紫杉醇的相对T/C_面积为0.14和化合物A1与顺铂和紫杉醇三重组合治疗的相对T/C_面积为0.03。治疗17天后，在三重组合治疗组中观察到相对于顺铂与紫杉醇功效的统计学显著的改善。虽然在顺铂与紫杉醇和化合物A1与顺铂和紫杉醇三重组合治疗组中均观察到肿瘤进展，但与顺铂与紫杉醇组合治疗相比，该三重组合显示强烈的肿瘤生长延迟，在A2780人卵巢肿瘤中具有疾病稳定化的明显迹象。顺铂与紫杉醇以及化合物A1与顺铂和紫杉醇组合治疗良好耐受而无严重的体重减轻或毒性。从治疗第4天至第13天在两种组合组中观察到短暂性体重减轻(最大：-3至-7%)，表明该体重减轻是由顺铂与紫杉醇组合治疗所诱导的。

总之，该研究表明在顺铂/紫杉醇固有不敏感的人卵巢癌模型A2780中Mps-1激酶抑制剂与顺铂和紫杉醇的三重组合的明显协同性，与顺铂与紫杉醇SoC组合治疗相比实现显著的肿瘤生长延迟。

在MKN1人胃癌模型中Mps-1激酶抑制剂与紫杉醇的组合

在裸鼠的紫杉烷敏感的MKN1人胃癌模型中研究化合物A1与紫杉醇组合治疗的效果。化合物A1在单一药剂治疗中以高达各自MTD和在组合中以单一药剂MTD的40%的剂量以2QD间歇性(2天用药/5天停药)给药方案PO给予。紫杉醇以其各自MTDIVQW给予。所有组的治疗在肿瘤细胞接种后第7天以27mm2的肿瘤大小开始。对于组合治疗，化合物A1和紫杉醇在4小时的时间内在同一天给予。对照和化合物A1单一药剂治疗组的动物治疗40天。紫杉醇单一药剂和化合物A1与紫杉醇组合治疗组的动物治疗78天。由于MKN1肿瘤相关的恶病质(cachexia)，其诱导严重的体重减轻和毒性，因此媒介物治疗对照和化合物A1单一药剂治疗组不得不在达到最大肿瘤面积(80至90mm²)前终止。

以单一药剂MTD的40%(1mg/kg)或以MTD(2.5mg/kg)的剂量2QD2天用药/5天停药PO给予治疗40天后，化合物A1在单一药剂治疗中显示对肿瘤生长抑制没有效果。以其MTD(24mg/kgIVQW)的紫杉醇单一药剂治疗和紫杉醇(24mg/kgIVQW)与以1mg/kgPO2QD2天用药/5天停药的化合物A1的组合治疗，治疗40天后与媒介物治疗对照组相比均实现肿瘤生长的明显和统计学显著的减少，显示紫杉醇单一药剂治疗的0.05的相对T/C_面积和化合物A1与紫杉醇组合治疗的-0.12的相对T/C_面积。紫杉醇单一药剂和化合物A1与紫杉醇组合治疗组再治疗38天。治疗78天后，研究结束时，紫杉醇单一药剂治疗组实现总体的疾病稳定化，其中80%肿瘤生长延迟和20%部分消退。化合物A1与紫杉醇组合治疗在MKN1肿瘤模型中诱导75%肿瘤消退，包括1例完全消退。该组合治疗也显示紫杉醇单一药剂功效的统计学显著的改善。紫杉醇单一药剂和组合治疗总体良好耐受而无严重的体重减轻。致死毒性在紫杉醇单一药剂治疗组的1个动物中在治疗第57天发生以及在化合物A1与紫杉醇组合治疗组的2个动物中在第一个治疗周期后发生。

总之，该研究表明在紫杉醇敏感的胃癌模型MKN1中Mps-1激酶抑制剂和紫杉醇的协同性。引人注目地，与紫杉醇单一药剂治疗相比，以单一药剂MTD以下剂量的化合物A1和以其MTD的紫杉醇的组合治疗显著地改善总体的疾病稳定化，诱导肿瘤消退。

在MiaPaCa2人胰腺肿瘤模型中Mps-1激酶抑制剂与长春新碱的组合

本研究的目的是评价在异种移植到裸鼠上的MiaPaCa2人胰腺肿瘤模型中Mps-1激酶抑制剂化合物A1与紫杉醇的组合的功效和耐受性。

将获自细胞培养物的MiaPaCa2细胞皮下植入到雌性裸鼠的腹股沟区域。当肿瘤大小为30-40mm2时开始治疗。每周两次通过测径器测量确定肿瘤面积。治疗组为：

1)媒介物，PEG400/乙醇/Solutol(70:5:25)，bid2on/5offp.o.

2)化合物A1，0.45mg/kgbid2on/5offp.o.

3)化合物A1，0.6mg/kgbid2on/5offp.o.

4)紫杉醇，24.0mg/kgi.v.od1on/6off

5)化合物A1，0.45mg/kgbid2on/5offp.o.+紫杉醇，24.0mg/kgi.v.od1on/6off

6)化合物A1，0.6mg/kgbid2on/5offp.o.+紫杉醇，24.0mg/kgi.v.od1on/6off。

在该研究中，与紫杉醇单一疗法相比，在MiaPaCa2胰腺肿瘤模型中通过以其MTD给药的紫杉醇(24mg/kgod1天on/6天off)与次优剂量的Mps-1抑制剂化合物A1(0.6mg/kgbid2天on/5天off)的组合可表明肿瘤生长抑制的显著改善。在100mm²时组合治疗相对于紫杉醇单一疗法的肿瘤生长延迟(TGD)为约21天。

没有发生严重的体重减轻。在2个组合治疗组中观察到急性毒性(tox2/8,tox1/8)。

与单独的紫杉醇治疗相比，在紫杉醇和化合物A1的组合治疗中未能检测到紫杉醇血浆浓度的差异。

总之，在紫杉烷半敏感的胰腺肿瘤模型MiaPaCa2中，与紫杉醇单一疗法相比，通过以MTD的紫杉醇与低剂量的化合物A1的组合(良好耐受)可表明肿瘤生长抑制的显著改善。

在人胶质母细胞瘤模型U87MG中Mps-1激酶抑制剂与长春新碱的组合

在裸鼠中异种移植的人胶质母细胞瘤模型U87MG中调查化合物A1单独或与长春新碱组合的剂量依赖性肿瘤抑制效果。

该研究被设计用于确定该胶质母细胞瘤模型对用研究性化合物A1和长春新碱(均单独以固定的剂量)以及长春新碱与两种不同剂量但均低于单一疗法方案中所用化合物A1的剂量的化合物A1的组合的反应。胶质母细胞瘤的大小用作反应的读出参数。

细胞培养物衍生的人异种移植物U87MG通过将肿瘤细胞移植到小鼠脑的左半球中开始。以三个周期第3天至第19天进行治疗。在第24天处死小鼠，分离脑并冲击冻结(shockfrozen)于2甲基-丁烷中。肿瘤大小确定为染色后来自冻结大小(cryo-slizes)的肿瘤生长抑制的量度。

所有药物治疗均耐受而无显著的体重减轻。仅A和B组的小鼠在实验结束时具有由肿瘤引起的可见的体重减轻。来自包括对照组在内的几个组的几只小鼠具有严重的腹泻，表明胃肠毒性，在一些情况下具有致死结果，表明对媒介物不耐受。在致死情况下，肿瘤的分离是复杂的或不可能的。当小鼠的一般状况在一夜之间变得不可预测的恶化时，肿瘤模型在实验期间但大多数在实验结束时引起几个猝死。

16只小鼠中脑肿瘤不仅在脑颅内部生长而且在颅外生长。测量两种面积并合计用于分析。结果概括于表4中。

化合物A1作为单一药物在该方案中和以2.5mg/kg的剂量用于治疗U87MG胶质瘤生长没有抑制效果。仅用长春新碱单独或与化合物A1组合治疗的小鼠显示介于38.6%(C组；长春新碱单独)和64.0%(D组，高剂量化合物A1和长春新碱的组合)之间的肿瘤生长的抑制。基于大脑内肿瘤面积的大小，D组中肿瘤生长的抑制显著不同于对照组(p<0.05)。如果将脑内和脑外肿瘤面积一起与其他组相比，结果是更好的。该抑制显著不同于对照组(p<0.05)以及B和C组，p<0.01(来自表4的数据)。

总之，在人U87-MG小鼠异种移植物中化合物A1与长春新碱的组合导致肿瘤生长的显著抑制，其好于单一药物治疗。该治疗伴有严重的胃肠毒性，其最可能由对媒介物不耐受所引起。

Claims

1.一种组合产品，其包含：

通式(I)的化合物A：

其中：

R¹表示

其中*指示所述基团与分子其余部分的连接点；

R²表示

其中*指示所述基团与分子其余部分的连接点；

R³表示选自以下的基团：甲基-、HO-CH₂-、H₂N-CH₂-、-NH₂；

R⁴表示选自以下的基团：甲氧基-、F₃C-CH₂-O-；

R⁵表示选自以下的基团：

H₃C-S(O)₂-、H₂N-C(O)-、(CH₃)₂N-C(O)-、

或其水合物、溶剂合物或盐，或其混合物；

和

一种或多种有丝分裂抑制剂。

2.根据权利要求1的组合产品，其中所述有丝分裂抑制剂为长春花生物碱，包括长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、desoxyvincaminol、vincaminol、长春布宁、长春蔓晶、长春内日定和长春布宁。

3.根据权利要求1的组合产品，其中所述有丝分裂抑制剂为紫杉烷类，包括多西他赛、紫杉醇及其类似物。

4.根据权利要求1的组合产品，其中所述有丝分裂抑制剂选自多西他赛和紫杉醇。

5.根据权利要求1至4中任一项的组合产品，其中

R³表示甲基-基团，

R⁴表示甲氧基-基团；和

R⁵表示

基团；

其中*指示所述基团与分子其余部分的连接点。

6.根据权利要求1至4中任一项的组合产品，其中化合物A选自：

或其N-氧化物、水合物、溶剂合物或盐，或其混合物。

7.根据权利要求1至4中任一项的组合产品，其中化合物A为(2R)-2-(4-氟苯基)-N-[4-(2-{[2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯基]氨基}-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)苯基]丙酰胺或其N-氧化物、水合物、溶剂合物或盐，或其混合物。

8.根据权利要求1至7中任一项的组合产品，其进一步包含顺铂。

9.根据权利要求1至8中任一项的组合产品，其用于治疗或预防胰腺癌、胶质母细胞瘤、卵巢癌、非小细胞肺癌、乳腺癌和/或胃癌。

10.根据权利要求1至8中任一项的组合产品用于制备治疗或预防胰腺癌、胶质母细胞瘤、卵巢癌、非小细胞肺癌、乳腺癌和/或胃癌的药物的用途。

11.一种治疗或预防个体的卵巢癌、非小细胞肺癌、乳腺癌和/或胃癌的方法，其包括给予所述个体治疗有效量的根据权利要求1至8中任一项的组合产品。

12.一种试剂盒，其包含以下的组合：

组分A：一种或多种如权利要求1、5、6和7中任一项所定义的化合物A；

和

和，任选地，一种或多种其他药剂C；其中任选地所述组分A和B中的所有或任一种为准备用于同时、共同、单独或依序给药的药物制剂形式。

13.根据权利要求12的试剂盒，其中所述有丝分裂抑制剂选自多西他赛、紫杉醇并且所述任选的药剂C为顺铂。