CN105107230B - 一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法 - Google Patents
一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及将层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，包括：(1)在层析仪基础上改装为具有两条流路并行同时运行两根柱子的仪器，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱；(2)在(1)的基础上多加一根柱子，两条流路并行，三根柱子两两运行；(3)在层析仪基础上改装为具有两条流路并行同时运行三根柱子的仪器，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，第三根柱子可以接受来自另外两根柱子的流出液；(4)具有放大性通用性的两条流路并行改装方案。本发明改装容易，操作方便，过程简单，使灌流培养下游工艺连续进行并实现自动化运行，且能实现小试到生产的平行放大，便于大规模工业化生产。
Description
技术领域
本发明属分离纯化领域和灌流培养技术领域，特别是涉及一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法。
背景技术
传统的补料分批细胞培养通常使用数千至上万升的反应罐，培养时间为7-21天，不同抗体的产品收率范围为2-6g/L。而灌流培养技术通过向反应器内连续补加新鲜培养基，同时取出耗竭的培养基，可维持更长的细胞培养时间，最高可达数月。
灌流培养工艺的优势在于可以获得更高的细胞密度，以及在同等规模反应器水平，能得到更多的产物产量。一般情况下，灌流培养的操作浓度是补料分批培养的10-30倍，例如，使用50L的生物反应器，配用灌流培养技术，其产量可达到1,000L补料分批生物反应器的生产能力。
此外，灌流培养技术在产品质量方面也具有明显优势，在细胞灌流培养过程中，废液不会累积，因为耗竭的培养基被新鲜培养基连续替换并清除。产物的收获和纯化也更快速，这尤其有益于不稳定产品(如VIII因子)的生产。随着工艺的进步和对连续培养的逐渐了解，未来10到15年内，连续培养可能将成为“未来工厂”的主流生产平台。
但灌注培养也受到一定的限制，比如大量的收获液连续积累，加大了下游处理量。一般层析仪的流路只有一条，系统泵和样品泵接于七通阀上，然后与流向阀连接，再接两个柱位阀，最后与系统的检测器和收集器连接。此种流路只能运行单根柱子，即样品泵的溶液和系统泵的溶液只能有一种进入柱子。这种层析仪是针对批次性生产设计的，不能进行连续层析。本发明针对收获液连续积累的问题设计改装层析仪，可实现对收获液的连续处理，直接从收获液中连续捕获目的产品，同时能实现填料满载状态运行，大大减少了下游的固定成本和人力成本。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，解决层析仪对收获液不能连续处理的问题，减少下游的固定成本和人力成本，且具有两条流路并行同时运行多根柱子的功能。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：提供一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其中所述的方法为：在层析仪上使用两个阀，所述的两个阀为七通阀时，将第一个七通阀的⑤号口和⑦号口分别与第二个七通阀的③号口、①号口连接，所述的第二个七通阀的⑤号口封死，所述的第二个七通阀的⑦号口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，所述的两个七通阀的④号口均为废液口，两根柱子分别装在两个七通阀的②和⑥号口之间，系统泵溶液由第一个七通阀的①号口进入，样品泵溶液由第一个阀的③号口进入，通过切换两个七通阀的阀位状态实现两条流路并行同时运行两根柱子，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，且具有自动切换的功能。
所述的两个阀为七通阀时，将第一个七通阀的③号口与⑤号口用三通连接并接于第一根柱子的上端，将第二个七通阀的③号口与⑤号口用三通连接并接于第一根柱子的下端，将第一个七通阀的①号口接于第二根柱子的上端，第二个七通阀的①号口接于第二根柱子的下端，将第一个七通阀的④号口与⑥号口用三通连接并接于第三根柱子的上端，将第二个七通阀的④号口与⑥号口用三通连接并接于第三根柱子的下端，第二个七通阀的②号口为废液口，第二个七通阀的⑦号口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，系统泵溶液由第一个七通阀的⑦号口进入，样品泵溶液由第一个七通阀的②号口进入，通过切换七通阀的阀位状态实现两条流路并行，三根柱子两两运行，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，具有自动切换的功能，且方便连续生产时更换柱子。
所述的两个阀用一个七通阀和三个八通阀代替时，将七通阀的③号口与⑤号口用三通连接并接于第一根柱子的上端，第一根柱子的下端连接第一个八通阀，将七通阀的①号口接于第二根柱子的上端，第二根柱子的下端接第二个八通阀，将七通阀的④号口与⑥号口用三通连接并接于第三根柱子的上端，第三根柱子的下端接第三个八通阀，所述的三个八通阀的②号出口为废液口，三个八通阀的①号出口通过三通或四通汇成一条流路为产品出口、接于系统仪器的检测器上，第一个八通阀的③号口和④号口分别通过三通接于第三根柱子和第二根柱子上端，第二个八通阀的③号口和④号口分别通过三通接于第三根柱子和第一根柱子上端，第三个八通阀的③号口和④号口分别通过三通接于第二根柱子和第一根柱子上端，系统泵溶液由七通阀的⑦号口进入，样品泵溶液由七通阀的②号口进入，通过切换七通阀和八通阀的阀位状态实现具有两条流路并同时运行三根柱子的仪器，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，第三根柱子可以接受来自另外两根柱子的流出液，且三根柱子能自动切换循环进行，从而达到在不牺牲收率的条件下大幅节约成本的目的。
所述的两个阀用五个八通阀代替时，柱上端两个八通阀，第四个八通阀的①、②、③号口分别与第五个八通阀的③、①、②号口连接、并通过三通分别连接于第一根柱子、第二根柱子和第三根柱子上端，且第一根柱子、第二根柱子和第三根柱子的下端分别接第一个八通阀、第二个八通阀和第三个八通阀，第一个八通阀的③号口和④号口分别通过三通接于第三根柱子和第二根柱子上端，第二个八通阀的③号口和④号口分别通过三通接于第三根柱子和第一根柱子上端，第三个八通阀的③号口和④号口分别通过三通接于第二根柱子和第一根柱子上端，第一个、第二个和第三个八通阀的②号出口为废液口，①号口通过三通或四通汇成一条流路为产品出口、接于仪器的检测器上，系统泵溶液由第四个八通阀中心进入，样品泵溶液由第五个八通阀中心进入，通过切换五个八通阀的阀位状态实现两条流路并行，三根柱子两两运行，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，具有自动切换的功能，且方便连续生产时更换柱子，或具有两条流路并行同时运行三根柱子的仪器，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，第三根柱子可以接受来自另外两根柱子的流出液，且三根柱子能自动切换循环进行，从而达到在不牺牲收率的条件下大幅节约成本的目的的功能。
所述的两个阀用六个七通阀代替时，其中三个七通阀的②号口分别接于三根柱子的上端，另外三个七通阀的⑦号口分别接于三根柱子的下端，第一个七通阀、第二个七通阀和第三个七通阀的④号口与第四个七通阀、第五个七通阀和六个七通阀的⑥号口用三通或四通连在一起，系统泵溶液由第一个七通阀、第二个七通阀和第三个七通阀的①号口进入，样品泵溶液由第一个七通阀、第二个七通阀和第三个七通阀的③号口进入，所述的第一个七通阀、第二个七通阀和第三个七通阀的⑤、⑥、⑦号口封死，所述的第四个七通阀、第五个七通阀和六个七通阀的⑤号口为废液口、①号口为产品出口接于系统的检测器上，②号口封死，每个柱子后的三个七通阀的③号口和④号口短接，通过切换六个七通阀的阀位状态，实现具有两条流路并行同时运行三根柱子的仪器，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，第三根柱子可以接受来自另外两根柱子的流出液，且三根柱子能自动切换循环进行，从而达到在不牺牲收率的条件下大幅节约成本的目的。
一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其中所述的方法为：在新型层析仪上使用两个阀，所述的两个阀为七通阀时，第一根柱子和第二根柱子分别接于两个七通阀的LoopE口和LoopF口之间，第一个七通阀的Syp口与第二个七通阀的Col口连接，第一个七通阀的W2口与第二个七通阀的Sap口连接，系统泵溶液由第一个七通阀的Col口进入，样品泵溶液由第一个七通阀的Sap口进入，两个七通阀的W1均为废液口，第二个七通阀的Syp口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，通过切换两个七通阀的阀位状态，实现两条流路并行同时运行两根柱子，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，且具有自动切换的功能。
所述的两个阀其中一个为七通阀，另一个为柱位阀时，所述的七通阀的LoopE口和LoopF口短接、Col口连接第一根柱子上端，且W1口和W2口通过三通连接于第二根柱子上端，所述的柱位阀的2A口和1B口通过三通连接于第一根柱子下端，将柱位阀的2B和1A通过三通连接于第二根柱子的下端，系统泵溶液由七通阀的Syp口进入，样品泵溶液由七通阀的Sap口进入，柱位阀进口为废液口，柱位阀出口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，通过切换七通阀的阀位状态和柱位阀的不同柱位，实现两条流路并行同时运行两根柱子，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，且具有自动切换的功能。
所述的两个阀其中一个为柱位阀，另一个为七通阀时，所述的柱位阀的3A口与1B口通过三通连接于第一根柱子上端、1A口与2B口通过三通连接于第二根柱子的上端和2A口与3B口通过三通接于第三根柱子上端，所述的七通阀的LoopE口与LoopF口通过三通接于第一根柱子下端、W1口与W2口通过三通接于第二根柱子下端和Col口接于柱3下端，系统泵溶液由柱位阀的进口进入，样品泵溶液由柱位阀的出口进入，所述的七通阀的Sap口为废液口，所述的七通阀的Syp口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，通过切换七通阀的阀位状态和柱位阀的不同柱位，实现两条流路并行，三根柱子两两运行，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，具有自动切换的功能，且方便连续生产时更换柱子。
所述的两个阀为两个柱位阀或两个七通阀，其连接流路与一个柱位阀和一个七通阀流路一致，通过切换两个七通阀或两个柱位阀的阀位状态，实现两条流路并行，三根柱子两两运行，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，具有自动切换的功能，且方便连续生产时更换柱子。
有益效果
本发明的优点有：
(1)本发明的方法可实现两条流路并行同时运行两根柱子，从而达到工艺连续化；
(2)本发明能实现每根柱子满载，在不牺牲收率的条件下达到大幅节约成本的目的。
(3)本发明可用于其他纯化仪器的改装，特别适合大规模生产，可灵活设计柱子的使用数量。
(4)本发明改装容易，操作方便，过程简单，能使灌流培养下游工艺连续进行并实现自动化运行
(5)本发明用于层析仪改装，能实现小试到生产的平行放大，便于大规模工业化生产。
附图说明
图1：层析仪-两个七通阀两根柱的改装方案；
图2：层析仪-两个七通阀三根柱的改装方案；
图3：层析仪-一个七通阀和三个八通阀三根柱子的改装方案；
图4：层析仪-五个八通阀(或等效)三根柱子的改装方案；
图5：新型层析仪-两个七通阀两根柱的改装方案；
图6：新型层析仪-一个七通阀和一个柱位阀两根柱的改装方案；
图7：新型层析仪-一个七通阀和一个柱位阀三根柱的改装方案；
图8：层析仪-六个七通阀三根柱子的改装方案；
图9a～图9c：分别为新型层析仪七通阀的Inject、Direct inject、Sample pumpload阀位状态图。
图9d～图9f：分别为层析仪七通阀的LOAD(Down Flow)、INJECT(Up Flow)、WASTE阀位状态图。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明做各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
如图1、图9d和图9e所示，一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其中所述的方法为：在层析仪上使用两个阀，所述的两个阀为七通阀1、2时，将第一个七通阀1的⑤号口和⑦号口分别与第二个七通阀2的③号口、①号口连接，所述的第二个七通阀2的⑤号口封死，所述的第二个七通阀2的⑦号口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，所述的两个七通阀1、2的④号口均为废液口，两根柱子3、4分别装在两个七通阀的②和⑥号口之间，系统泵溶液由第一个七通阀1的①号口进入，样品泵溶液由第一个阀1的③号口进入，通过切换两个七通阀1、2的阀位状态实现两条流路并行同时运行两根柱子，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，且具有自动切换的功能。
如图2所示，一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其中所述的方法为：在层析仪上使用两个阀，所述的两个阀为七通阀1、2时，将第一个七通阀1的③号口与⑤号口用三通连接并接于第一根柱子3的上端，将第二个七通阀2的③号口与⑤号口用三通连接并接于第一根柱子3的下端，将第一个七通阀1的①号口接于第二根柱子4的上端，第二个七通阀的①号口接于第二根柱子4的下端，将第一个七通阀的④号口与⑥号口用三通连接并接于第三根柱子5的上端，将第二个七通阀的④号口与⑥号口用三通连接并接于第三根柱子5的下端，第二个七通阀2的②号口为废液口，第二个七通阀2的⑦号口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，系统泵溶液由第一个七通阀1的⑦号口进入，样品泵溶液由第一个七通阀1的②号口进入，通过切换两个七通阀1、2的阀位状态实现两条流路并行，三根柱子两两运行，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，具有自动切换的功能，且方便连续生产时更换柱子。
具体步骤如下：
(1)在层析仪Explorer上按图1连接管线，将第二个七通阀设置为系统的FlowDirection阀；
(2)将系统阀位设置为LOAD，Up Flow时，样品泵中的料液进入柱3并从第一个七通阀的④号口流出；系统泵的溶液进入柱4进行平衡、淋洗、洗脱等层析步骤并流经系统的检测器及出口阀，样品泵和系统泵可同时运转。
(3)将系统阀位设置为INJECT，Down Flow时，样品泵中的料液进入柱4并从第二个七通阀的④号口流出；系统泵的溶液进入柱3进行平衡、淋洗、洗脱等层析步骤并流经系统的检测器及出口阀，样品泵和系统泵可同时运转
(4)两个七通阀不断重复(2)和(3)的状态可实现两条流路并行同时运行两根柱子，且具有自动切换的功能。
实施例2
如图3、图9d、图9e和图9f所示，一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其中所述的方法为：在层析仪上使用一个七通阀1和三个八通阀6、7、8代替两个阀，将七通阀1的③号口与⑤号口用三通连接并接于第一根柱子3的上端，第一根柱子的下端连接第一个八通阀6，将七通阀1的①号口接于第二根柱子4的上端，第二根柱子4的下端接第二个八通阀7，将七通阀1的④号口与⑥号口用三通连接并接于第三根柱子5的上端，第三根柱子5的下端接第三个八通阀8，所述的三个八通阀6、7、8的②号出口为废液口，三个八通阀的①号出口通过三通或四通汇成一条流路为产品出口、接于系统仪器的检测器上，第一个八通阀6的③号口和④号口分别通过三通接于第三根柱子5和第二根柱子4上端，第二个八通阀7的③号口和④号口分别通过三通接于第三根柱子5和第一根柱子3上端，第三个八通阀8的③号口和④号口分别通过三通接于第二根柱子4和第一根柱子3上端，系统泵溶液由七通阀1的⑦号口进入，样品泵溶液由七通阀1的②号口进入，通过切换七通阀1和三个八通阀6、7、8的阀位状态实现具有两条流路并行同时运行三根柱子的仪器，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，第三根柱子可以接受来自另外两根柱子的流出液，且三根柱子能自动切换循环进行，从而达到在不牺牲收率的条件下大幅节约成本的目的。
如图8所示，一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其中所述的方法为：在层析仪上使用六个七通阀1、2、15、16、17、18，其中三个七通阀1、2、15的②号口分别接于三根柱子3、4、5的上端，另外三个七通阀16、17、18的⑦号口分别接于三根柱子3、4、5的下端，第一个七通阀1、第二个七通阀2和第三个七通阀15的④号口与第四个七通阀16、第五个七通阀17和六个七通阀18的⑥号口用三通或四通连在一起，系统泵溶液由第一个七通阀1、第二个七通阀2和第三个七通阀15的①号口进入，样品泵溶液由第一个七通阀1、第二个七通阀2和第三个七通阀15的③号口进入，所述的第一个七通阀1、第二个七通阀2和第三个七通阀15的⑤、⑥、⑦号口封死，所述的第四个七通阀16、第五个七通阀17和六个七通阀18的⑤号口为废液口、①号口为产品出口接于系统的检测器上，②号口封死，柱子后的三个七通阀16、17、18的③号口和④号口短接，通过切换六个七通阀1、2、15、16、17、18的阀位状态，实现具有两条流路并行同时运行三根柱子的仪器，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，第三根柱子可以接受来自另外两根柱子的流出液，且三根柱子能自动切换循环进行，从而达到在不牺牲收率的条件下大幅节约成本的目的。
具体步骤如下：
(1)在层析仪Explorer上按图3连接管线。
(2)系统阀位切换顺序及状态如表1所示。
(3)系统阀位不断重复步骤(2)中的A-F状态可实现两条流路并行同时运行三根柱子，且具有自动切换的功能。实现每根柱子满载从而在不牺牲收率的条件下达到大幅节约成本的目的。
表1系统阀位状态及功能-一个七通阀和三个八通阀三根柱子的改装方案
| 阀 | A | B | C | D | E | F |
| 七通阀 | Load | Load | Waste | Waste | Inject | Inject |
| 第一根柱子后-八通阀 | 2 | 3 | 4 | 1 | 2 | 2 |
| 第二根柱子后-八通阀 | 3 | 1 | 2 | 2 | 2 | 4 |
| 第三根柱子后-八通阀 | 2 | 2 | 2 | 3 | 4 | 1 |
| 第一根柱子状态 | 上样 | 上样 | 上样后淋洗 | 洗脱及再平衡 | 来自柱3淋洗液 | 来自柱1的穿透液 |
| 第二根柱子状态 | 上样后淋洗 | 洗脱及再平衡 | 来自柱1淋洗液 | 来自柱1的穿透液 | 上样 | 上样 |
| 第三根柱子状态 | 来自柱2淋洗液 | 来自柱1的穿透液 | 上样 | 上样 | 上样后淋洗 | 洗脱及再平衡 |
实施例3
如图4所示，一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其中所述的方法为：在层析仪上使用五个八通阀6、7、8、9、10代替两个阀，柱上端用两个八通阀9、10，第四个八通阀9的①、②、③号口分别与第五个八通阀10的③、①、②号口连接、并通过三通分别连接于第一根柱子3、第二根柱子4和第三根柱子5上端，且第一根柱子3、第二根柱子4和第三根柱子5的下端分别接第一个八通阀6、第二个八通阀7和第三个八通阀8，第一个八通阀6的③号口和④号口分别通过三通接于第三根柱子5和第二根柱子4上端，第二个八通阀7的③号口和④号口分别通过三通接于第三根柱子5和第一根柱子3上端，第三个八通阀8的③号口和④号口分别通过三通接于第二根柱子4和第一根柱子3上端，第一个、第二个和第三个八通阀6、7、8的②号出口为废液口，①号口通过三通或四通汇成一条流路为产品出口、接于仪器的检测器上，系统泵溶液由第四个八通阀9中心进入，样品泵溶液由第五个八通阀10中心进入，通过切换八通阀的阀位状态实现两条流路并行，三根柱子两两运行，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，具有自动切换的功能，且方便连续生产时更换柱子，或具有两条流路并行同时运行三根柱子的仪器，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，第三根柱子可以接受来自另外两根柱子的流出液，且三根柱子能自动切换循环进行，从而达到在不牺牲收率的条件下大幅节约成本的目的。
具体步骤如下：
(1)在层析仪Explorer上按图4连接管线。
(2)系统阀位切换顺序及状态如表2所示。
(3)系统阀位不断重复步骤(2)中的A-F状态可实现两条流路并行同时运行三根柱子，且具有自动切换的功能。实现每根柱子满载从而在不牺牲收率的条件下达到大幅节约成本的目的。
表2系统阀位状态及功能-五个八通(或等效)三根柱子的改装方案
| 阀 | A | B | C | D | E | F |
| 三个柱前端-两个八通阀 | 1 | 1 | 3 | 3 | 2 | 2 |
| 第一根柱子后-八通阀 | 2 | 3 | 4 | 1 | 2 | 2 |
| 第二根柱子后-八通阀 | 3 | 1 | 2 | 2 | 2 | 4 |
| 第三根柱子后-八通阀 | 2 | 2 | 2 | 3 | 4 | 1 |
| 第一根柱子状态 | 上样 | 上样 | 上样后淋洗 | 洗脱及再平衡 | 来自柱3淋洗液 | 来自柱1的穿透液 |
| 第二根柱子状态 | 上样后淋洗 | 洗脱及再平衡 | 来自柱1淋洗液 | 来自柱1的穿透液 | 上样 | 上样 |
| 第三根柱子状态 | 来自柱2淋洗液 | 来自柱1的穿透液 | 上样 | 上样 | 上样后淋洗 | 洗脱及再平衡 |
实施例4
如图5所示，一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其中所述的方法为：在新型层析仪上使用两个阀，所述的两个阀为七通阀11、12时，第一根柱子3和第二根柱子4分别接于两个七通阀11、12的LoopE口和LoopF口之间，第一个七通阀11的Syp口与第二个七通阀的Col口连接，第一个七通阀11的W2口与第二个七通阀的Sap口连接，系统泵溶液由第一个七通阀11的Col口进入，样品泵溶液由第一个七通阀11的Sap口进入，两个七通阀11、12的W1均为废液口，第二个七通阀12的Syp口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，通过切换两个七通阀11、12的阀位状态，实现两条流路并行同时运行两根柱子，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，且具有自动切换的功能。
如图6、图9a和图9b所示，一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其中所述的方法为：在新型层析仪上使用两个阀，所述的两个阀其中一个为七通阀11和另一个为柱位阀13，所述的七通阀11的LoopE口和LoopF口短接、Col口连接第一根柱子3上端，且W1口和W2口通过三通连接于第二根柱子4上端，所述的柱位阀13的2A口和1B口通过三通连接于第一根柱子3下端，将柱位阀的2B和1A通过三通连接于第二根柱子4的下端，系统泵溶液由七通阀11的Syp口进入，样品泵溶液由七通阀11的Sap口进入，柱位阀进口为废液口，柱位阀出口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，通过切换七通阀11的阀位状态和柱位阀13的不同柱位，实现两条流路并行同时运行两根柱子，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，且具有自动切换的功能。
具体步骤如下：
(1)在新型层析仪Pure M上按图6连接管线。
(2)将系统阀位设置为Direct Inject，一号柱位时，样品泵中的料液进入柱3并从柱位阀的进口流出；系统泵的溶液进入柱4进行平衡、淋洗、洗脱等层析步骤并流经系统的检测器及出口阀，样品泵和系统泵可同时运转。
(3)将系统阀位设置为Inject，二号柱位时，样品泵中的料液进入柱4并从柱位阀的进口流出；系统泵的溶液进入柱3进行平衡、淋洗、洗脱等层析步骤并流经系统的检测器及出口阀，样品泵和系统泵可同时运转
(4)系统阀位不断重复(2)和(3)的状态可实现两条流路并行同时运行两根柱子，且具有自动切换的功能。
实施例5
如图7、图9a、图9b和图9c所示，所述的两个阀其中一个为柱位阀14和另一个为七通阀11，所述的柱位阀14的3A口与1B口通过三通连接于第一根柱子3上端、1A口与2B口通过三通连接于第二根柱子4的上端和2A口与3B口通过三通接于第三根柱子5上端，所述的七通阀11的LoopE口与LoopF口通过三通接于第一根柱子3下端、W1口与W2口通过三通接于第二根柱子4下端和Col口接于第一根柱子3下端，系统泵溶液由柱位阀的进口进入，样品泵溶液由柱位阀的出口进入，所述的七通阀11的Sap口为废液口，所述的七通阀11的Syp口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，通过切换七通阀11的阀位状态和柱位阀14的不同柱位，实现两条流路并行，三根柱子两两运行，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，具有自动切换的功能，且方便连续生产时更换柱子。
所述的两个阀也可是两个柱位阀或两个七通阀，且其连接流路与柱位阀14和七通阀11流路一致，通过切换两个七通阀或两个柱位阀的阀位状态，实现两条流路并行，三根柱子两两运行，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，具有自动切换的功能，且方便连续生产时更换柱子。
具体步骤如下：
(1)在新型层析仪Pure M仪器上按图7连接管线。
(2)将系统阀位设置为一号柱位，Inject时，样品泵中的料液进入柱4并从七通阀的Sap口流出；系统泵的溶液进入柱3进行平衡、淋洗、洗脱等层析步骤并流经系统的检测器及出口阀，样品泵和系统泵可同时运转。
(3)将系统阀位设置为二号柱位，Direct Inject时，样品泵中的料液进入柱5并从七通阀的Syp口流出；系统泵的溶液进入柱4进行平衡、淋洗、洗脱等层析步骤并流经系统的检测器及出口阀，样品泵和系统泵可同时运转。
(4)将系统阀位设置为三号柱位，Sample Pump Load时，样品泵中的料液进入柱3并从七通阀的Sap口流出；系统泵的溶液进入柱5进行平衡、淋洗、洗脱等层析步骤并流经系统的检测器及出口阀，样品泵和系统泵可同时运转。
(5)系统阀位不断重复(2)、(3)、(4)的状态可实现两条流路并行同时运行三根柱子，且具有自动切换的功能。
Claims (9)
1.一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其特征在于：所述的方法为：在层析仪上使用两个阀，所述的两个阀为七通阀(1、2)时，将第一个七通阀(1)的⑤号口和⑦号口分别与第二个七通阀(2)的③号口、①号口连接，所述的第二个七通阀(2)的⑤号口封死，所述的第二个七通阀(2)的⑦号口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，所述的两个七通阀(1、2)的④号口均为废液口，两根柱子(3、4)分别装在两个七通阀的②和⑥号口之间，系统泵溶液由第一个七通阀(1)的①号口进入，样品泵溶液由第一个阀(1)的③号口进入，通过切换两个七通阀(1、2)的阀位状态实现两条流路并行同时运行两根柱子，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，且具有自动切换的功能。
2.如权利要求1所述的一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其特征在于：所述的两个阀为七通阀(1、2)时，将第一个七通阀(1)的③号口与⑤号口用三通连接并接于第一根柱子(3)的上端，将第二个七通阀(2)的③号口与⑤号口用三通连接并接于第一根柱子(3)的下端，将第一个七通阀(1)的①号口接于第二根柱子(4)的上端，第二个七通阀的①号口接于第二根柱子(4)的下端，将第一个七通阀的④号口与⑥号口用三通连接并接于第三根柱子(5)的上端，将第二个七通阀的④号口与⑥号口用三通连接并接于第三根柱子(5)的下端，第二个七通阀(2)的②号口为废液口，第二个七通阀(2)的⑦号口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，系统泵溶液由第一个七通阀(1)的⑦号口进入，样品泵溶液由第一个七通阀(1)的②号口进入，通过切换两个七通阀(1、2)的阀位状态实现两条流路并行，三根柱子两两运行，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，具有自动切换的功能，且方便连续生产时更换柱子。
3.如权利要求1所述的一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其特征在于：所述的两个阀用一个七通阀(1)和三个八通阀(6、7、8)代替，将七通阀(1)的③号口与⑤号口用三通连接并接于第一根柱子(3)的上端，第一根柱子的下端连接第一个八通阀(6)，将七通阀(1)的①号口接于第二根柱子(4)的上端，第二根柱子(4)的下端接第二个八通阀(7)，将七通阀(1)的④号口与⑥号口用三通连接并接于第三根柱子(5)的上端，第三根柱子(5)的下端接第三个八通阀(8)，所述的三个八通阀(6、7、8)的②号出口为废液口，三个八通阀的①号出口通过三通或四通汇成一条流路为产品出口、接于系统仪器的检测器上，第一个八通阀(6)的③号口和④号口分别通过三通接于第三根柱子(5)和第二根柱子(4)上端，第二个八通阀(7)的③号口和④号口分别通过三通接于第三根柱子(5)和第一根柱子(3)上端，第三个八通阀(8)的③号口和④号口分别通过三通接于第二根柱子(4)和第一根柱子(3)上端，系统泵溶液由七通阀(1)的⑦号口进入，样品泵溶液由七通阀(1)的②号口进入，通过切换七通阀(1)和八通阀(6、7、8)的阀位状态，实现具有两条流路并行同时运行三根柱子的仪器，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，第三根柱子接受来自另外两根柱子的流出液，且三根柱子能自动切换循环进行，从而达到在不牺牲收率的条件下大幅节约成本的目的。
4.如权利要求1所述的一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其特征在于：所述的两个阀用五个八通阀(6、7、8、9、10)代替，柱上端两个八通阀(9、10)，第四个八通阀(9)的①、②、③号口分别与第五个八通阀(10)的③、①、②号口连接、并通过三通分别连接于第一根柱子(3)、第二根柱子(4)和第三根柱子(5)上端，且第一根柱子(3)、第二根柱子(4)和第三根柱子(5)的下端分别接第一个八通阀(6)、第二个八通阀(7)和第三个八通阀(8)，第一个八通阀(6)的③号口和④号口分别通过三通接于第三根柱子(5)和第二根柱子(4)上端，第二个八通阀(7)的③号口和④号口分别通过三通接于第三根柱子(5)和第一根柱子(3)上端，第三个八通阀(8)的③号口和④号口分别通过三通接于第二根柱子(4)和第一根柱子(3)上端，第一个、第二个和第三个八通阀(6、7、8)的②号出口为废液口，①号口通过三通或四通汇成一条流路为产品出口、接于仪器的检测器上，系统泵溶液由第四个八通阀(9)中心进入，样品泵溶液由第五个八通阀(10)中心进入，通过切换五个八通阀(6、7、8、9、10)的阀位状态实现两条流路并行，三根柱子两两运行，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，具有自动切换的功能，且方便连续生产时更换柱子，或具有两条流路并同时运行三根柱子的仪器，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，第三根柱子接受来自另外两根柱子的流出液，且三根柱子能自动切换循环进行，从而达到在不牺牲收率的条件下大幅节约成本的目的的功能。
5.如权利要求1所述的一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其特征在于：所述的两个阀用六个七通阀(1、2、15、16、17、18)代替，其中三个七通阀(1、2、15)的②号口分别接于三根柱子(3、4、5)的上端，另外三个七通阀(16、17、18)的⑦号口分别接于三根柱子(3、4、5)的下端，第一个七通阀(1)、第二个七通阀(2)和第三个七通阀(15)的④号口与第四个七通阀(16)、第五个七通阀(17)和六个七通阀(18)的⑥号口用三通或四通连在一起，系统泵溶液由第一个七通阀(1)、第二个七通阀(2)和第三个七通阀(15)的①号口进入，样品泵溶液由第一个七通阀(1)、第二个七通阀(2)和第三个七通阀(15)的③号口进入，所述的第一个七通阀(1)、第二个七通阀(2)和第三个七通阀(15)的⑤、⑥、⑦号口封死，所述的第四个七通阀(16)、第五个七通阀(17)和六个七通阀(18)的⑤号口为废液口、①号口为产品出口接于系统的检测器上，②号口封死，每个柱子后的三个七通阀的③号口和④号口短接，通过切换六个七通阀(1、2、15、16、17、18)的阀位状态，实现具有两条流路并行同时运行三根柱子的仪器，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，第三根柱子接受来自另外两根柱子的流出液，且三根柱子能自动切换循环进行，从而达到在不牺牲收率的条件下大幅节约成本的目的。
6.一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其特征在于：所述的方法为：在层析仪上使用两个阀，所述的两个阀为七通阀(11、12)时，第一根柱子(3)和第二根柱子(4)分别接于两个七通阀(11、12)的LoopE口和LoopF口之间，第一个七通阀(11)的Syp口与第二个七通阀的Col口连接，第一个七通阀(11)的W2口与第二个七通阀的Sap口连接，系统泵溶液由第一个七通阀(11)的Col口进入，样品泵溶液由第一个七通阀(11)的Sap口进入，两个七通阀(11、12)的W1口均为废液口，第二个七通阀(12)的Syp口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，通过切换两个七通阀(11、12)的阀位状态，实现两条流路并行同时运行两根柱子，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，且具有自动切换的功能。
7.如权利要求6所述的一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其特征在于：所述的两个阀其中一个为七通阀(11)，另一个为柱位阀(13)时，所述的七通阀(11)的LoopE口和LoopF口短接、Col口连接第一根柱子(3)上端，且W1口和W2口通过三通连接于第二根柱子(4)上端，所述的柱位阀(13)的2A口和1B口通过三通连接于第一根柱子(3)下端，将柱位阀的2B和1A通过三通连接于第二根柱子(4)的下端，系统泵溶液由七通阀(11)的Syp口进入，样品泵溶液由七通阀(11)的Sap口进入，柱位阀进口为废液口，柱位阀出口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，通过切换七通阀(11)的阀位状态和柱位阀(13)的不同柱位，实现两条流路并行同时运行两根柱子，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，且具有自动切换的功能。
8.如权利要求6所述的一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其特征在于：所述的两个阀其中一个为柱位阀(14)和另一个为七通阀(11)时，所述的柱位阀(14)的3A口与1B口通过三通连接于第一根柱子(3)上端、1A口与2B口通过三通连接于第二根柱子(4)的上端，2A口与3B口通过三通接于第三根柱子(5)上端，所述的七通阀(11)的LoopE口与LoopF口通过三通接于第一根柱子(3)下端、W1口与W2口通过三通接于第二根柱子(4)下端和Col口接于第三根柱(5)下端，系统泵溶液由柱位阀的进口进入，样品泵溶液由柱位阀的出口进入，所述的七通阀(11)的Sap口为废液口，所述的七通阀(11)的Syp口为产品出口、接于系统仪器的检测器上，通过切换七通阀(11)的阀位状态和柱位阀(14)的不同柱位，实现两条流路并行，三根柱子两两运行，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，具有自动切换的功能，且方便连续生产时更换柱子。
9.根据权利要求8所述的一种层析仪改装用于灌流培养纯化的方法，其特征在于：所述的两个阀为两个柱位阀或两个七通阀时，其连接流路与一个柱位阀(14)和一个七通阀(11)流路一致，通过切换两个七通阀的阀位状态或两个柱位阀的不同柱位，实现两条流路并行，三根柱子两两运行，一条流路和柱子用于样品上样，另一条流路和柱子同时进行平衡洗脱，具有自动切换的功能，且方便连续生产时更换柱子。
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Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101226153A (zh) * | 2007-12-25 | 2008-07-23 | 洪陵成 | 流动注射氨氮比色检测方法及装置 |
| US20120048734A1 (en) * | 2010-08-25 | 2012-03-01 | Arkray, Inc. | Analysis Apparatus and Analysis Method |
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Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101226153A (zh) * | 2007-12-25 | 2008-07-23 | 洪陵成 | 流动注射氨氮比色检测方法及装置 |
| US20120048734A1 (en) * | 2010-08-25 | 2012-03-01 | Arkray, Inc. | Analysis Apparatus and Analysis Method |
| CN204073502U (zh) * | 2014-09-18 | 2015-01-07 | 北京佰纯润宇生物科技有限公司 | 基于七通阀实现多种自动上样模式的层析系统 |
| CN204073503U (zh) * | 2014-09-18 | 2015-01-07 | 北京佰纯润宇生物科技有限公司 | 基于四通阀与双柱阀实现旁路与正反流的多柱并联层析系统 |
| CN104455559A (zh) * | 2014-10-24 | 2015-03-25 | 北京佰纯润宇生物科技有限公司 | 多柱位柱阀及基于多柱位柱阀实现多柱正反流与旁路功能的层析系统 |
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