CN104388236B - 一种葡萄酒及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于葡萄酒酿制领域,公开了一种白藜芦醇含量高的葡萄酒及其制备方法与应用。本发明所述葡萄酒由药食同源的中药枸杞、茯苓、花生藤、黄精、肉桂、桑椹和葡萄制成。不仅具有葡萄酒的养生功效,而且使其具有了中药的养生药效。同时改善了传统保健酒的口感欠佳的不足,保持了葡萄酒的浓郁醇香的口感。实验表明本发明所述葡萄酒白藜芦醇含量明显高于现有的葡萄酒,质量更优。本发明所述葡萄酒符合中医中药配伍要求,无毒副作用,达到阴阳平衡同补的目的,不仅适用于男性群体,同时也适用于女性群体,可温和补肾、益肝肾、补精血、强筋骨,有明显壮阳、提高性能力、抗疲劳、抗衰老、增强免疫、软化血管、美容养颜、增强免疫、延缓衰老等功效。
Description
技术领域
本发明属于葡萄酒酿制领域,具体涉及一种葡萄酒及其制备方法与应用,尤其是涉及一种白藜芦醇含量高的葡萄酒及其制备方法与应用。
背景技术
白黎芦醇(Resveratrol,简称Res),又称芪三酚,化学名为反式-3,4,5-三羟基-1,2-二苯乙烯(3,4,5-trihydrolystilbence),它是植物体内用于抵抗病原侵染的多酚物质,在自然界以游离态白黎芦醇或结合态白黎芦醇苷存在,白黎芦醇苷的含量一般高于其苷元白黎芦醇的含量。白黎芦醇及白黎芦醇苷都有顺式和反式之分,植物中常以稳定的反式形式存在,其反式异构体生理活性要强于顺式异构体,在紫外线照射下,反式白黎芦醇能转化为顺式异构体。白黎芦醇(苷)的分子结构如下
白黎芦醇早在1924年就被发现,1940年首次从毛叶黎(Yeramtrum grandiflorum)的根部获得,1963年Nonomura等提出白黎芦醇是某些中草药治疗炎症、心血管疾病、调节脂类代谢等的有效成分。近年来,国内外越来越多的研究表明,白藜芦醇具有多种生物学效用。白藜芦醇能与人体内雌性激素受体结合,调节血液中胆固醇水平,有效减少人罹患心血管病的危险;白藜芦醇还能抑制低密度脂蛋白过氧化和血小板凝集,调节脂类蛋白代谢水平,降低人体脂蛋白,具有良好预防动脉粥样硬化和冠心病效果。白藜芦醇还具有强抗氧化和抗自由基功能,1.3g/mL的白藜芦醇能明显抑制大鼠红细胞的自氧化溶血和由H2O2引起的氧化溶血,并对小鼠心、肝、脑、肾的体内外过氧化脂质的产生有明显抑制作用。1997年美国科学家在《科学》杂志上发表了白黎芦醇具有抗癌活性的论文引起了科学界的轰动。白藜芦醇具有抗突变以及抗癌作用,能抑制环加氧酶和过氧化氢酶的活性,在癌细胞的起始、增殖、发展3个主要阶段均有抑制乃至逆转作用;白藜芦醇可使老鼠皮肤癌细胞最多可减少98%,能诱导人早幼粒细胞性白血病细胞株HL-60的分化,被喻为继紫杉醇之后的又一新的绿色抗癌药物。同年,Gehm博士等发现白黎芦醇的化学结构与一种雌性激素-己烯雌酚非常相似,可与体内雌性激素受体结合并对其活化,起雌性激素的信号传导作用,能作为天然植物雌性激素改善与女性更年期综合症相关的骨质疏松。白藜芦醇具有明显的辐射保护作用,并影响骨骼代谢等。此外,白藜芦醇及其衍生物在肝脏保护、激活长寿基因、防治神经性疾病等方面也起着重要作用。因此白黎芦醇已成为当今世界功能食品、医药等领域研究的热点之一。
1976年Langcake和Pryce发现在葡萄叶片中存在白黎芦醇,其合成在遭受紫外照射、机械伤害及真菌感染时急剧增强,能抵抗灰霉\霜霉等葡萄病原菌的侵染,被称为植物抗菌素,白黎芦醇由此开始受到葡萄育种学家和植物病理学家的重视。1989年世界卫生组织(WHO)进行的“世界心血管疾病控制系统”研究得出“法国悖论”,法国人的生活习惯包含了引发冠心病的高危因素-高胆固醇、吸烟和缺乏运动,但他们冠心病的发病率却比北美人低得多,研究发现这与法国人爱喝红葡萄酒有关,因为红葡萄酒中富含生理活性成分白黎芦醇。由此可见葡萄酒中的白藜芦醇对人体具有重要的保健功效。
目前葡萄酒的销量日益增长,产品种类繁多,质量良莠混杂。目前国产普通干红葡萄酒中的白藜芦醇的含量在0.3-2.67mg/L,而白藜芦醇的理想保健剂量是每日摄取2-10mg/天,要达到保健效果需要饮用大量的干红葡萄酒,但大量的饮用葡萄酒会导致摄入过多的酒精,且不符合葡萄酒高贵、典雅的品酒文化。
目前已经有了提高白藜芦醇含有量的葡萄酒的制备方法,主要可以归纳为以下几类:
1、以高白藜芦醇含量的葡萄为原料制备葡萄酒。如申请号为CN200610129321.7的中国专利,该发明通过选取特定产区的富含白藜芦醇的葡萄品种和紫外辐射诱导白藜芦醇的合成,采用特定的工艺尽可能地溶出葡萄皮中的白藜芦醇,并且最大程度地防止白藜芦醇的氧化,酒质细腻醇和,香气优雅高贵,呈清亮的宝石红色。该发明的方法和普通的葡萄酒酿造工艺没有冲突,不需特定的设备,工艺参数调整相当方便,社会效益巨大。高白藜芦醇的葡萄品种是紫外辐射诱导的,其培养成本高,且高白藜芦醇的性状不容易遗传继承,一旦高白藜芦醇的性状消失之后,将不能持续生产高白藜芦醇的葡萄酒。
2、向葡萄酒中添加白藜芦醇。如申请号为CN200880122683.0的中国专利公开的方法包括:向桶装葡萄酒的一部分中添加得自于葡萄的白藜芦醇,形成白藜芦醇浓缩物,和向桶装葡萄酒中添加所述白藜芦醇浓缩物,产生白藜芦醇增加的葡萄酒。该方法的生产成本低。如申请号为CN03112486.0的的中国专利说明书中公开了高含量白藜芦醇酒生产工艺具体实施方式公开了一吨高含量白藜芦醇酒类生产实例:按每升葡萄酒白藜芦醇含量增加10mg计算,需准备白藜芦醇10克,葡萄酒1000kg,取葡萄酒适量,低温蒸馏得70%v/v以上葡萄酒精液50mL,将10g白藜芦醇加入上述葡萄酒精液中,待充分溶解后,加入1000mL葡萄酒中,充分均匀后,然后将此酒加入一吨葡萄酒中,搅拌混合均匀,制得高含量白藜芦醇葡萄酒。上述方法需要额外提供白藜芦醇,而白藜芦醇如果是天然提取的话成本较高,且天然资源有限,而化学合成的方法提供白藜芦醇会环境造成不利影响,不符合绿色环保的理念。
3、将白藜芦醇苷转化成白藜芦醇。申请号为CN 201210539571.3的中国专利开了一种在酒酿造过程中富集白藜芦醇的方法,所述方法包括:由酿造酒开始,在曲霉菌和/或酵母菌作用下逐步发酵生成酒精和多种副产物,同时添加的白藜芦醇苷转化成白藜芦醇。该方法不会改变酒的酿制工艺,但白藜芦醇苷转化成白藜芦醇的酶为葡萄糖苷酶,所以无法保证白藜芦醇苷转化成白藜芦醇的转化率。
4、提高葡萄中的白藜芦醇含量。申请号为CN 201010509046.8的中国专利中公布了一种升高葡萄叶、葡萄茎及葡萄果实中白藜芦醇含量的方法,运用胶体铝诱导剂对葡萄材料诱导。可诱导葡萄果实及葡萄生产相关副产品(叶片、茎干)中白藜芦醇升高,高效、稳定、低残留、低毒。但铝盐的残留对人体的危害是不容忽视的,而且大量铝盐对环境的污染也是相当严重的。
因此,如何提高白藜芦醇在葡萄酒中的含量成了一个新的研究方向。
发明内容
有鉴于此,本发明针对现有技术的缺陷,提供一种白藜芦醇含量高的葡萄酒及其制备方法与用途。
为实现本发明的目的,本发明采用如下技术方案:
一种葡萄酒,由如下重量份原料制成:枸杞50份-100份、茯苓40份-100份、花生藤50份-100份、黄精50份-70份、肉桂25份-50份、桑椹45份-60份、葡萄20000份-34000份。
本发明还提供了一种葡萄酒的制备方法,将20000重量份-34000重量份经预处理的葡萄与50重量份-100重量份枸杞、40重量份-100重量份茯苓、50重量份-100重量份花生藤、50重量份-70重量份黄精、25重量份-50重量份肉桂、45重量份-60重量份桑椹混合进行酒精发酵,之后经后发酵、陈酿、后调配;
或者先将20000重量份-34000重量份经预处理的葡萄进行酒精发酵,之后经后发酵、陈酿,然后与50重量份-100重量份枸杞、40重量份-100重量份茯苓、50重量份-100重量份花生藤、50重量份-70重量份黄精、25重量份-50重量份肉桂、45重量份-60重量份桑椹混合调配。
在一些实施方案中,所述制备方法中所述葡萄为梅鹿辄、赤霞珠。
在一些实施方案中,所述制备方法中所述预处理为采用水杨酸喷施处理后用紫外线照射诱导葡萄中白藜芦醇的合成。
在一些实施方案中,所述制备方法中,所述SA浓度为60mg/L-100mg/L,所述UV诱导量0.9KJ/m2-1.28KJ/m2、310秒-430秒。
在一些实施方案中,所述制备方法中,所述酒精发酵为调整葡萄汁含糖量为18%-25%,含酸量为0.6%-0.8%,接种0.3wt%-0.5wt%的酵母、0.3wt%-0.5wt%果胶酶和0.3wt%-0.5wt%葡萄糖苷酶进行发酵,发酵期间控制发酵温度在28-30℃以下,发酵至发酵液残糖降至0.06%以下。
在一些实施方案中,所述制备方法中,所述酵母为贝酵母。
在一些实施方案中,所述制备方法中,所述果胶酶为HE GRAND CRU果胶酶。
本发明还提供了所述制备方法制得的葡萄酒。
本发明还提供了所述葡萄酒在制备治疗肾虚的药物中的用途。
本发明所述葡萄酒由药食同源的中药枸杞、茯苓、花生藤、黄精、肉桂、桑椹和葡萄制成。不仅具有葡萄酒本身的养生功效,而且使其具有了中药的养生药效。同时也改善了传统保健酒的口感欠佳的不足,保持了葡萄酒的浓郁醇香的口感。实验表明本发明所述葡萄酒白藜芦醇含量明显高于进口和国产的葡萄酒,质量更优。本发明所述葡萄酒符合中医中药配伍要求,无毒副作用,达到阴阳平衡同补的目的,不仅适用于男性群体,同时也适用于女性群体,可温和补肾、益肝肾、补精血、强筋骨,有明显壮阳、提高性能力、抗疲劳、抗衰老、增强免疫、软化血管、美容养颜、增强免疫、延缓衰老等功效,对肾虚症状起到显著疗效,适宜于机体疲乏、腰膝酸痛、畏寒怕冷、阳痿不举、失眠多梦的肾虚人群。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
为实现本发明的目的,本发明采用如下技术方案:
一种葡萄酒,由如下重量份原料制成:枸杞50份-100份、茯苓40份-100份、花生藤50份-100份、黄精50份-70份、肉桂25份-50份、桑椹45份-60份、葡萄20000份-34000份。
其中,所述枸杞指的是商品“枸杞子”,基本是指来源于宁夏枸杞的干燥成熟果实。枸杞性平、味甘,归肝、肾经,具有滋补肝肾、益精明目的功效,用于虚劳精亏、腰膝酸痛、眩晕耳鸣、阳萎遗精、内热消渴、血虚萎黄、目昏不明等症。
茯苓,为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf的干燥菌核。茯苓味甘、淡,性平,归心、肺、脾、肾经,具有利水渗湿、健脾、宁心之功效,用于水肿尿少、痰饮眩悸、脾虚食少、便溏泄泻、心神不安、惊悸失眠等症。
黄精(学名:Polygonatum sibiricum),又名:鸡头黄精、黄鸡菜、笔管菜、爪子参、老虎姜、鸡爪参。为百合科黄精属黄精、囊丝黄精、热河黄精、滇黄精、卷叶黄精等的根茎。黄精性味甘甜,具有补脾,润肺生津的作用。
肉桂(拉丁学名:Cinnamomum cassia Presl),又名玉桂、牡桂、玉树、大桂、辣桂、平安树、中国桂皮,为樟科植物肉桂的干燥树皮。补元阳,暖脾胃,除积冷,通血脉。治命门火衰,肢冷脉微,亡阳虚脱,腹痛泄泻,寒疝奔豚,腰膝冷痛,经闭症瘕,阴疽,流注,及虚阳浮越,上热下寒。
桑椹为桑科落叶乔木桑树的成熟果实,肝肾不足和血虚精亏的头晕目眩;腰酸耳鸣;须发早白;失眠多梦;津伤口渴;消渴;肠燥便秘。
本发明所述葡萄酒由药食同源的中药枸杞、茯苓、花生藤、黄精、肉桂、桑椹和葡萄制成。不仅具有葡萄酒本身的养生功效,而且使其具有了中药的养生药效。同时,也改善了传统保健酒的口感欠佳的不足,保持了葡萄酒的浓郁醇香的口感。实验表明本发明所述葡萄酒白藜芦醇含量明显高于进口和国产的葡萄酒,质量更优。
本发明还提供了一种葡萄酒的制备方法,将20000重量份-34000重量份经预处理的葡萄与50重量份-100重量份枸杞、40重量份-100重量份茯苓、50重量份-100重量份花生藤、50重量份-70重量份黄精、25重量份-50重量份肉桂、45重量份-60重量份桑椹混合进行酒精发酵,之后经后发酵、陈酿后调配;
或者先将20000重量份-34000重量份经预处理的葡萄进行酒精发酵,之后经后发酵、陈酿,然后与50重量份-100重量份枸杞、40重量份-100重量份茯苓、50重量份-100重量份花生藤、50重量份-70重量份黄精、25重量份-50重量份肉桂、45重量份-60重量份桑椹混合调配。
药物与鲜葡萄一起发酵处理不但可以保留原料中的营养成分,还可以得到许多微生物代谢产生的有益物质,对人体健康十分有利。
实验表明,将所述药材与鲜葡萄一起发酵制得的葡萄酒白藜芦醇含量明显高于鲜葡萄发酵后与中药混合配制葡萄酒。因此,在一些优选实施方案中,所述葡萄酒的制备方法为将20000重量份-34000重量份经预处理的葡萄与50重量份-100重量份枸杞、40重量份-100重量份茯苓、50重量份-100重量份花生藤、50重量份-70重量份黄精、25重量份-50重量份肉桂、45重量份-60重量份桑椹混合进行酒精发酵,之后经后发酵、陈酿后调配。
其中,在一些实施方案中,所述与葡萄混合的药材预先粉碎过筛。
在一些优选实施方案中,所述过筛为过14目筛。
本发明所述制备方法中,所述葡萄可以选择本领域技术人员已知的任意葡萄品种。在一些实施方案中,本发明所述制备方法中所述葡萄为梅鹿辄或赤霞珠。
在一些实施方案中,所述制备方法中所述预处理为采用水杨酸喷施处理后用紫外线照射诱导葡萄中白藜芦醇的合成。
在一些实施方案中,所述制备方法中,所述SA的施用量为每公斤葡萄喷施100mlSA溶液,
在一些实施方案中,所述制备方法中,所述SA浓度为60mg/L-100mg/L。
在一些实施方案中,所述制备方法中,所述UV诱导量为0.9KJ/m2-1.28KJ/m2、310秒-430秒。
在一些具体实施例中,所述制备方法中,所述葡萄为梅鹿辄,SA浓度为100mg/L,UV诱导量为430秒,1.28KJ/m2。
在一些具体实施例中,所述制备方法中,所述葡萄为赤霞珠,SA浓度为60mg/L,UV诱导量为310秒,0.9KJ/m2。
经紫外线照射后葡萄在处理后于暗室存放72h,然后水洗后去杂、破碎得葡萄浆进行酒精发酵。
其中,在一些实施方案中,所述水洗为先用普通水清洗,再用去离子水清洗三次。
在一些实施方案中,所述去杂具体为采用手工或除梗破碎机去除果梗。
在一些实施方案中,所述制备方法中,所述酒精发酵为调整葡萄汁含糖量为18%-25%,含酸量为0.6%-0.8%,接种0.3wt%-0.5wt%的酵母、0.3wt%-0.5wt%果胶酶和0.3wt%-0.5wt%葡萄糖苷酶进行发酵,发酵期间控制发酵温度在28-30℃以下,发酵至发酵液残糖降至0.06%以下。
在一些优选实施方案中,所述酵母发酵力(CO2)>950ml,水份<5%。
在一些优选实施方案中,所述果胶酶酶活力40万。
在一些优选实施方案中,所述葡萄糖苷酶酶活力10万。
其中所述酒精发酵中的每天搅拌2-4次以使上浮的药粉和皮渣压入葡萄汁中。
在一些实施方案中,所述调整葡萄汁含糖量及含酸量的方法为在破碎的葡萄浆中加入亚硫酸溶液0.066%-0.117%,使二氧化硫浓度达0.004%-0.006%,加入蔗糖11.9wt%-23.4wt%,以使发酵后的酒精度控制在7°-18°。
在一些优选实施方案中,所述制备方法中,所述酵母为贝酵母。
在一些优选实施方案中,所述制备方法中,所述果胶酶为HE GRANDCRU果胶酶。
本发明所述制备方法中,在酒精发酵后进行后发酵及陈酿。
在一些实施方案中,所述后发酵为将发酵液温度控制在室温,过滤酒液分离皮渣得原酒液,在原酒液中补加0.3%-0.5%的二氧化硫进行后发酵。
后发酵后将酒液灌满贮酒容器密封保存,温度控制在18-25℃,期间本领域技术人员可根据需要进行苹乳发酵。
在一些实施方案中,所述陈酿为控制温度在10-15℃进行陈酿,相对湿度85%-90%,并进行倒桶、满桶和澄清处理。
本发明所述制备方法,在陈酿后对制得的酒液进行调配。
在一些实施方案中,所述调配为测定原酒液的糖度、酒度、酸度,按照成品的理化指标分别调整到规定值进行勾兑处理,贮存20-30天。
本发明所述制备方法,在调配后还包括精滤、灭菌分装等步骤。
在一些实施方案中,所述精滤为将酒液过0.45μm滤膜进行精滤。
在一些实施方案中,所述灭菌分装为通入杀菌器90℃/min快速杀菌,装瓶密封,在70~72℃的水中杀菌20min。
本发明所述制备方法中所述酒精发酵及后发酵可以在本领域技术人员已知的任意一种发酵罐中进行,如佳尼美德发酵罐、立式喷淋发酵罐等。
在一些实施方案中,所述发酵罐为佳尼美德发酵罐。
本发明还提供了所述制备方法制得的葡萄酒。
本发明所述葡萄酒的小鼠试验结果显示,安全性和不加药酒发酵的葡萄酒持平,其能够明显提高小鼠精子数量、活性以及存活率,增加小鼠睾丸以及附睾组织重量,纠正阳虚小鼠体重、血浆皮质醇含量、肾上腺重量,提高小鼠耐缺氧和游泳能力等,同时这些结果优于现有的保健壮阳酒(即补肾阳保健药酒)以及利用现有壮阳中药制剂配方制成的药酒,表明本发明所述的葡萄酒能阴阳互补,调解体内阴阳平衡,可养血安神,固肾涩精,对肾虚引起的所有疾病和亚健康状态都有明显疗效。
此外,本发明所述有水平条件经临床肾虚患者服用有明显疗效:
a、经临床90例阳痿患者服用,30-45天97%的患者感觉提神,精力充沛,连续服用6个月,95%的患者可以进行正常的性生活,停饮不反弹;
b、经临床10例患者服用,连续服用3个月,8例患者精子数量增长30-55%;经临床25例精冷患者服用,20-30天97%的患者感觉精冷现象缓解,2-3个月内,96%的患者无精冷现象发生;
c、经临床12例风湿、类风湿、关节炎患者服用,连饮30-45天96%患者的患病部位疼痛明显减轻,连饮4个月94%患者表示在饮用期间患病部位已无明显疼痛;
d、经临床23例频繁起夜患者服用,服用30-45天99%患者起夜频率明显减少,连饮3个月后98%患者已无起夜症状,且停饮后不反弹;
e、经临床9例痛经患者服用,连饮2-3个月97%患者表示痛经明显减轻,连饮3个月后,96%患者停饮后亦无明显痛经感;
f、经临床12例患者服用,连饮3-5个月95%患者表示皮肤的弹性和光泽度有所提高,连续饮用,94%的患者感觉效果明显:
因此本发明还提供了本发明所述葡萄酒在制备治疗肾虚的药物中的用途。
本领域的技术人员可以根据服用者的年龄、体重、性别、自然健康状况、营养状况等决定本发明所述葡萄酒具体的服用方法。在一些实施方案中,本发明所述葡萄酒服用方法为每日50-100ml,吃饭时服用最佳,连饮一周就可见明显疗效,长期服用可延年益寿,无副作用。
本发明所述葡萄酒由药食同源的中药枸杞、茯苓、花生藤、黄精、肉桂、桑椹和葡萄制成。不仅具有葡萄酒本身的养生功效,而且使其具有了中药的养生药效。同时也改善了传统保健酒的口感欠佳的不足,保持了葡萄酒的浓郁醇香的口感。实验表明本发明所述葡萄酒白藜芦醇含量明显高于进口和国产的葡萄酒,质量更优。本发明所述葡萄酒符合中医中药配伍要求,无毒副作用,达到阴阳平衡同补的目的,不仅适用于男性群体,同时也适用于女性群体,可温和补肾、益肝肾、补精血、强筋骨,有明显壮阳、提高性能力、抗疲劳、抗衰老、增强免疫、软化血管、美容养颜、增强免疫、延缓衰老等功效,对肾虚症状起到显著疗效,适宜于机体疲乏、腰膝酸痛、畏寒怕冷、阳痿不举、失眠多梦的肾虚人群。此外通过对肾脏的调节对腰椎间盘突出症、经络不通、风湿风寒、体虚畏寒、月经不调、气血不畅等多种疾病有缓解和改善。本发明提供的葡萄酒配方不添加任何非中药成分,同时这些中药口味极佳,自身带有甘甜之味,并且不影响葡萄酒本身的口感,和药物本身的有效成分作用及葡萄酒本身的作用。
为了进一步理解本发明,下面结合实施例对本发明提供的葡萄酒及其制备方法进行详细说明。其中HE GRAND CRU果胶酶购自法国laffort公司;贝酵母购自上海都宜生物科技有限公司。
实施例1:本发明所述制备方法制备葡萄酒
1、分别称取枸杞、茯苓、花生藤、黄精、肉桂、桑椹中药材各50克,粉碎过14目的筛,装入佳尼美德发酵罐中。
2、另外取20Kg鲜葡萄(梅鹿辄、赤霞珠等),先采用水杨酸(SA)喷施处理后用紫外线(UV)照射诱导葡萄中白藜芦醇的合成。具体方法为:
1)、20Kg鲜葡萄采用水杨酸(SA)喷施处理,每公斤葡萄喷施100mlSA溶液,SA喷施的适宜浓度梅鹿辄为100mg/L、赤霞珠为60mg/L处理后于暗室存放72h;
2)、取出SA喷施处理后的葡萄,用紫外线(UV)照射诱导葡萄中自藜芦醇的合成,UV诱导适宜剂量梅鹿辄为430秒(1.28KJ/m2)、赤霞珠为310秒(0.9KJ/m2),处理后于暗室存放72h;
3)、取出UV照射的葡萄,先用普通水清洗,再用去离子水清洗三次,采用手工或除梗破碎机去除果梗,将果粒破碎得到葡萄浆,加入佳尼美德发酵罐中。
3、在破碎的葡萄浆中加入亚硫酸0.066%,使二氧化硫浓度达0.004%,加入3.6kg蔗糖,搅拌均匀,调整葡萄汁含糖量为18%,含酸量为0.6%,接种0.3wt%的贝酵母(发酵力(CO2)>950ml水份<5%)和0.3wt%HE GRAND CRU果胶酶(酶活力40万)及0.3wt%葡萄糖苷酶(酶活力10万)进行发酵,发酵期间控制发酵温度在28-30℃以下,发酵至发酵液残糖降至0.06%以下进行发酵,发酵期间控制发酵温度在28-30℃以下,每天搅拌2-4次,使上浮的药粉和皮渣压入葡萄汁中;
4、发酵9天使发酵液残糖降至0.06%以下,发酵液温度控制在室温,过滤酒液分离皮渣得原酒液;在原酒液中补加0.3%的二氧化硫进行后发酵;
5、酒灌满贮酒容器密封保存,温度控制在18-25℃,期间根据需要进行苹乳发酵;
6、然后控制温度在10-15℃进行陈酿,相对湿度85%-90%,并进行倒桶、满桶和澄清处理;
7、测定原酒液的糖度、酒度、酸度,按照成品的理化指标分别调整到规定值进行勾兑处理,贮存28天;将酒液过0.45μm滤膜进行精滤,通入杀菌器90℃/min快速杀菌,装瓶密封,在70-72℃的水中杀菌20min,检验合格即可贴商标,装箱,入库。
实施例2:白藜芦醇含量测定
样品:反式白藜芦醇标准品(纯度大于99%),购自Sigma-Aldrich公司。
试剂:甲醇、乙腈为色谱纯,其余试剂为分析纯。
仪器设备:Waters e2695液相色谱仪(配有Waters2998二极管阵列检测器及Empower数据处理系统,美国Waters公司);色谱条件:色谱柱为Ultimate C18柱(4.6*250mm,5μm).流动相A为乙腈,流动相B为0.01%磷酸水溶液,等度洗脱,A:B=25:75(v/v)。流速1.0m L/min,进样量为20μL,检测波长为306nm,柱温为35℃。
样品处理:分别取实施例1制得葡萄酒样品及市售葡萄酒样品,离心浓缩除去乙醇,加10mL去离子水,用10mL乙酸乙酯萃取酶解液,萃取4次,收集萃取液离心浓缩除去乙酸乙酯,用250μL流动相(乙腈:0.01%磷酸水溶液=25:75(v/v))溶解后作为供试液。
标准品溶液的制备:称取25mg反式白藜芦醇标准品,用甲醇溶解并定容至25m L,制成1L储备液。取适量储备液用甲醇稀释成浓度为0.2mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L、5.0mg/L、10mg/L的反式白藜芦醇标准品溶液。
将其置于365nm紫外灯处照射2h,使反式白藜芦醇部分转化成顺式白藜芦醇,并通过差值法算出顺式白藜芦醇和反式白藜芦醇含量。
表1葡萄酒中白藜芦醇的含量
评价葡萄酒的优劣通常将白藜芦醇含量作为重要的参考指标,从表1结果可以看出,市售进口葡萄酒比国产葡萄酒白藜芦醇含量高,质量好,国产葡萄酒由于制作工艺和保存方法上的不足,导致白藜芦醇损失较严重。而本发明提供的葡萄酒白藜芦醇含量明显高于进口和国产的葡萄酒,质量更优。
实施例3:
按实施例1所述方法取20Kg鲜葡萄,先采用水杨酸(SA)喷施处理后用紫外线(UV)照射诱导葡萄中白藜芦醇的合成发酵制备葡萄酒;然后称取枸杞、茯苓、花生藤、黄精、肉桂、桑椹中药材各50克,粉碎过14目的筛,与发酵制备的葡萄酒混合,测定原酒液的糖度、酒度、酸度,按照成品的理化指标分别调整到规定值进行勾兑处理,贮存28天;将酒液过0.45μm滤膜进行精滤,通入杀菌器90℃/min快速杀菌,装瓶密封,在70-72℃的水中杀菌20min,检验合格即可贴商标,装箱,入库。
按照实施例2所述的检测方法检测白藜芦醇含量,与同时按照实施例1所述方法制备得到的葡萄酒进行比较,结果见表2。
表2不同制备方法白藜芦醇含量比较
处理方案 | 反式白藜芦醇mg/L | 顺式白藜芦醇mg/L |
1 | 1.91 | 0.25 |
2 | 1.71 | 0.18 |
注:处理方案1为按照实施例1所述方法药物与鲜葡萄一起发酵处理;处理方案2为鲜葡萄发酵制备葡萄酒后与中药混合配制葡萄酒。
由表2结果可见,药物与鲜葡萄一起发酵制得的葡萄酒白藜芦醇含量明显高于鲜葡萄发酵后与中药混合配制葡萄酒。
实施例4:不同酵母对发酵制备葡萄酒的白藜芦醇含量的影响
按实施例1所述方法,分别选用不同的酵母菌进行发酵,其他操作和材料配比和实施例1相同。按照实施例2所述的检测方法检测发酵后白藜芦醇含量,结果见表3。
表3不同酵母对发酵制备葡萄酒的白藜芦醇含量的影响
组别 | 反式白藜芦醇mg/L | 顺式白藜芦醇mg/L |
贝酵母 | 2.04 | 0.48 |
RC212酵母 | 1.82 | 0.34 |
F15酵母 | 1.63 | 0.18 |
由表3结果可见,按照实施例1所述方法,选用贝酵母发酵制备的葡萄酒白藜芦醇含量明显高于RC212酵母发酵和F15酵母。
实施例5:不同果胶酶对发酵制备葡萄酒的白藜芦醇含量的影响
按实施例1所述方法,分别选用不同的果胶酶进行发酵,其他操作和材料配比和实施例1相同。按照实施例2所述的检测方法检测发酵后白藜芦醇含量,结果见表4。
表4不同果胶酶对发酵制备葡萄酒的白藜芦醇含量的影响
组别 | 反式白藜芦醇mg/L | 顺式白藜芦醇mg/L |
HE GRAND CRU果胶酶 | 2.04 | 0.48 |
HE果胶酶 | 1.87 | 0.37 |
由表4结果可见,按照实施例1所述方法,选用HE GRAND CRU果胶酶发酵制备的葡萄酒白藜芦醇含量明显高于HE果胶酶。
实施例6:安全性评价实验
取本发明实施例1制备的葡萄酒和同一批次不加药材发酵的葡萄酒各1000ml,分别减压浓缩至50ml,作为葡萄酒供试液。另取清洁级昆明种小鼠60只,体重20±2克,雌雄各半,每天早、晚各给一次葡萄酒和葡萄酒浓缩液,每次为0.2ml/10g鼠重,连续给予7天,观察小鼠外观、行为、食欲、体重及大小便,结果显示两钟供试液均未出现异常现象,60只小鼠无一死亡,故无法求算出其半数致死量(LD50),仅能大致推算其口服给药的最大耐受力为1:20的浓度>40ml/kg体重,其为临床用量1000多倍,说明本发明所述葡萄酒食用安全无毒副性作用。
实施例7:小鼠精子影响试验
试验分组:市售三鞭酒组(产品批号20100725)、市售鹿茸酒组(产品批号20100618)、市售葡萄酒组(产品批号20100813)、实施例1组、市售劲酒组(产品批号20100821)以及生理盐水组。
试验方法:取清洁级雄性昆明种小鼠60只,体重20±2克,随机分为6组,分别给予上述药酒、葡萄酒和生理盐水,0.1ml/10g鼠重灌胃,每天一次,连续7天,第8天将动物脱颈椎处死,迅速摘取附睾组织,电子天平称重后,置于研钵中研磨,用任氏液稀释15倍,在显微镜下计数精子数量,并观察其活动状况、存活率,精子数折算为万/10mg附睾组织,结果见表5。
表5精子影响试验结果(n=10)
组别 | 精子数量(万/10mg附睾组织) | 精子存活率 |
生理盐水组 | 233.1±11.5 | 58.7±6.7% |
葡萄酒组 | 235.3±10.1 | 64.1±4.1% |
实施例1组 | 275.9±20.1 | 88.6±4.5% |
劲酒组 | 237.6±12.4 | 60.3±6.7% |
三鞭酒组 | 236.9±16.3 | 64.7±5.5% |
鹿茸酒组 | 247.3±13.6 | 68.6±7.3% |
对于男性肾阳虚最为直接的反应就是性能力的下降,精子数量及存活率是性能力的重要指标,这些指标的提高标志着性能力的提升,表明对肾阳虚具有改善作用。由表5结果可见,灌胃给予本发明所述葡萄酒,小鼠精子数量、存活率均较高,且明显优于现有市售药酒及葡萄酒产品组和生理盐水组,表明本发明所述葡萄酒能够提高性能力,对肾阳虚症状有显著疗效。
实施例8:小鼠性腺影响试验
试验分组:同实施例4分组方法。
试验方法:取清洁级雄性昆明种小鼠60只,体重20±2克,随机分为6组,分别给予上述药酒、葡萄酒和生理盐水,0.1m1/10g鼠重灌胃,每天一次,连续7天,第8天将动物脱颈椎处死,取各小鼠包皮腺、前列腺精囊,仔细除去组织上所附着的脂肪,用滤纸吸去表面上液体,在万分之一的天平上称重,并折算为平均每只老鼠睾丸和附睾组织湿重,结果见表6。
表6性腺影响试验结果(n=10)
组别 | 睾丸湿重(mg) | 附睾组织湿重(mg) |
生理盐水组 | 45.7±3.3 | 83.6±10.3 |
葡萄酒组 | 46.1±7.5 | 87.1±11.5 |
实施例1组 | 57.5±12.4 | 113.2±12.4 |
劲酒组 | 47.6±4.7 | 97.8±11.3 |
三鞭酒组 | 50.1±7.3 | 97.4±12.7 |
鹿茸酒组 | 48.5±6.2 | 97.8±12.3 |
促使性器官的发育是提升性能力的一个手段,而性能力提高是改善男性肾阳虚的一个反应。由表6结果可见,本发明所述葡萄酒能够增加睾丸以及附睾组织湿重,且明显优于现有市售药酒及葡萄酒产品组和生理盐水组。表明本发明所述葡萄酒具有雄激素样作用,可促使性器官的发育,对肾阳虚症状有显著疗效。
实施例9:对肾阳虚小鼠体重、血浆皮质醇含量、肾上腺精囊重量的影响
试验分组:同实施例4分组方法。
试验方法:清洁级雄性昆明种小鼠120只,体重20克左右,皮下注射一次0.5%氢化可的松0.2m1/只/日,连续7天。此间可见动物体重明显减轻,平均为21克左右,有约30%的动物死亡,存活动物均可见毛发疏松,畏寒,肢体发凉,食欲不振,萎靡等肾阳虚症状。试验第8天,将动物按体重随机均衡分为6组,分别给予上述4组药酒、葡萄酒和生理盐水,0.1ml/10g鼠重灌胃,每天一次,连续12天,试验期间,每4天记录体重一次。试验第21天,摘除小鼠眼球,由眼眶静脉取血,肝素抗凝,离心后,定量吸取血浆,按北方免疫试剂研究所方法,利用EJ-2008r免疫计数器,进行血浆皮质醇含量测定。用T检验方法比较组间差异。取血同时称体重,并摘取双侧肾上腺精囊,置Bownis液中固定24小时,然后用滤纸吸去表面液体,仔细除去脂肪等其他组织,在万分之一天平上称量湿重,并折算为平均每只老鼠肾上腺毫克湿重,由检验方法进行统计处理,结果见表7。
表7检测结果
由表7可知,本发明所述葡萄酒对肾阳虚小鼠有明显疗效,能够改善因皮下注射氢化可的松出现的体重降低、血浆皮质醇含量减少、肾上腺重量降低的情况,且结果优于生理盐水组和现有市售药酒及葡萄酒产品组。表明本发明所述葡萄酒不仅具有纠正“阳虚”小鼠体重和肾上腺内分泌功能低下的作用,而且还具有促进“阳虚”动物肾上腺增重的作用。
实施例10:小鼠交尾对比试验
试验分组:同实施例4分组方法。
试验方法:取健康雄性昆明种小鼠60只(体重20±2克)与同种雌素化(合笼前48h腹腔注射苯甲酸雌二醇20μg/只)雌性小鼠(体重20±2克)合笼2天使其获得性经验。取出雌鼠,使雄鼠休息3天。将雄鼠分为6组,各组分别给予上述4组药酒、葡萄酒和生理盐水,0.1ml/10g鼠重灌胃,每天1次,连续7天,第8天雄性小鼠与雌鼠按1:5数量合笼。记录其交尾潜伏期(从合笼开始到小鼠第1次交尾的时间)和1小时交尾次数,结果见表8。
表8小鼠交尾试验结果(n=10)
组别 | 平均交尾潜伏期(min) | 平均交尾次数/小时 |
生理盐水组 | 29.8±2.9 | 4.3±0.1 |
葡萄酒组 | 26.6±2.8 | 4.6±0.1 |
实施例1组 | 16.6±2.3 | 9.8±0.3 |
劲酒组 | 26.5±2.7 | 6.1±0.2 |
三鞭酒组 | 25.8±2.9 | 5.5±0.1 |
鹿茸酒组 | 26.2±3.3 | 5.3±0.4 |
性交能力的提高是改善男性肾阳虚的最直接体现。由表8结果可知,本发明所述葡萄酒与其余5组相比,缩短了交尾潜伏期,增加了交尾次数。表明本发明所述葡萄酒能够提高性交能力,对肾阳虚症状有显著疗效。
实施例11:小鼠耐缺氧对比试验
试验分组:同实施例4分组方法。
试验方法:取健康雄性昆明种小鼠(体重20±2克)60只,随机分为6组,每组10只,各组分别给予上述4组药酒和生理盐水,0.1mL/10g鼠重灌胃,每天1次,连续7天,于第8天灌胃1小时后将各组小鼠分别放入盛有5g钠石灰的250mL广口瓶内(每瓶放1只小鼠)。用凡士林密闭瓶口,立即计时,直至呼吸停止。以小鼠在密闭广口瓶内存活时间为指标,比较各组耐缺氧时间,结果见表9。
表9小鼠耐缺氧试验结果(n=10)
组别 | 耐缺氧时间(min) |
生理盐水组 | 15.9±1.5 |
葡萄酒组 | 21.1±1.3 |
实施例1组 | 23.4±1.2 |
劲酒组 | 18.1±1.1 |
三鞭酒组 | 17.3±1.7 |
鹿茸酒组 | 18.3±1.1 |
肾阳虚患者的除了性能力减退外,最主要表征就是易疲劳、精神不济,耐缺氧能力差是导致易疲劳、精神不济一个主要原因,因而提高小鼠耐缺氧能力可以改善易疲劳、精神不济,从而改善肾阳虚病症。由表9结果可知,本发明所述葡萄酒显著增加小鼠耐缺氧时间,且优于其他5组,表明其对易疲劳、精神不济等肾阳虚症状有显著疗效。
实施例12:小鼠游泳运动对比试验
试验分组:同实施例4分组方法。
试验方法:取健康雄性昆明种小鼠(体重20±2克)60只,随机分为6组,每组10只,各组分别给予上述4组药酒和生理盐水,0.1mL/10g鼠重灌胃,每天1次,连续7天,于第8天灌胃1小时后在各小鼠尾部线拴2克重小铁圈,将小鼠放入水深20cm的水桶中,立即计时,直至小鼠完全沉入水底不再上游为止,结果见表10。
表10小鼠游泳运动结果(n=10)
组别 | 游泳时间(min) |
生理盐水组 | 19.3±1.5 |
葡萄酒组 | 21.5±1.2 |
实施例1组 | 26.7±2.3 |
劲酒组 | 19.5±1.4 |
三鞭酒组 | 19.3±2.1 |
鹿茸酒组 | 19.6±1.9 |
运动体力耐力是反应身体精力是否旺盛一个重要指标,也是肾阳虚的中精力不济、易疲劳、反应迟钝等的直接表现,因而提高运动耐力和体力也是肾阳虚得到改善的直接体现。由表10结果可知,本发明所述葡萄酒显著增加小鼠游泳时间,且优于其他5组,表明其对精力不济、易疲劳、反应迟钝等肾阳虚症状有显著疗效。
实施例13:对肾阴虚小鼠血浆中CAMP、E2、T、Cu++、Zn++含量的影响
试验分组:正常对照组、肾阴虚模型对照组、市售三鞭酒组(产品批号:20100312)、市售鹿茸酒组(产品批号:20100619)、市售葡萄酒组(产品批号20100813)、实施例1组、市售劲酒组(产品批号20100821)。
试验方法:昆明种小鼠450只,雌雄各半,体重(20±2)g,购自重庆医科大学实验动物中心。实验前禁食12h,自由饮水。实验室温度(24±2)℃,湿度60%。模型小鼠皮下注射氢化可的松1mg/只,隔日1次,共3次,呈现肾阴虚症状。正常对照组注射等容量生理盐水。注射后2h,按下述分组分别灌药。正常对照组和肾阴虚模型对照组(生理盐水20ml/kg);葡萄酒组(20ml/kg);实施例1组(20ml/kg);劲酒组(20ml/kg);三鞭酒组(20ml/kg);鹿茸酒组(20ml/kg)。各组动物每日灌胃给药一次,连续7天。断头取血,分离血浆,用放射免疫法测定CAMP、E2、T含量,用原子吸收法测定Cu++、Zn++含量,结果见表11。
表11各组对小鼠血浆中CAMP、E2、T、Cu++、Zn++含量影响(n=10)
注:*表示实施例1组与正常对照组相比具有显著差异P<0.05
表11结果可知,服用本发明所述葡萄酒后CAMP、E2、Cu++、Zn++含量明显降低、T含量明显升高,表明本发明所述葡萄酒对肾阴虚小鼠有明显疗效,统计学差异显著。
实施例14:对肾阴虚小鼠吞噬碳粒廓清指数、体液免疫试验的影响
试验分组:同实施例13分组方法。
试验方法:按实施例13的方法得到肾阴虚小鼠模型。
按下述分组分别灌药。正常对照组和肾阴虚模型对照组(生理盐水20ml/kg);葡萄酒组(20ml/kg);实施例1组(20ml/kg);劲酒组(20ml/kg);三鞭酒组(20ml/kg);鹿茸酒组(20ml/kg)。各组动物每日灌胃给药一次,连续7天。
1、吞噬碳粒试验:取雄性小鼠70只,随机分为7组,每组10只,于末次给药后2h,尾静脉注射50%印度墨汁0.1ml/10g(原液用前2000rmp离心,弃去沉淀物,用0.9%N.S稀释2倍)后2min、10min,分别从眼底取血25ul,溶于2ml蒸馏水中,以正常小鼠血为空白对照,在72型分光光度计600nm波长处测吸光度(OD)。计算廓清指数K,K=1/8×lg(OD2/OD10),OD2、OD10分别为2min及10min OD值。
2、体液免疫试验:取雄性小鼠70只,随机分为7组,每组10只,给药第1日小鼠腹腔注射5%绵羊红细胞(SRBC)0.2ml进行初次免疫,于免疫后第5天摘除眼球取血,分离血清。取1:5000稀释血清1ml,5%SRBC0.5ml,豚鼠血清1ml,混匀,空白对照管以NS代替小鼠血清,其它同上。37℃水浴10min,水浴终止反应后2000rmp离心10min,取上清液1ml,加入都氏试剂3.25ml红细胞半数溶血对照管,取SRBC 0.25ml,加入4ml都氏试剂,充分摇匀。放置10min,于540nm处,分别测定各管吸光度值。计算半数溶血值(HC50)。
半数溶血值=样品吸光值/SRBC半数溶血吸光值*稀释倍数
统计分析采用NDST,计量资料用t检验,计数资料用X2检验,分析各组间的显著性,并进行两两对比,显著性水平为P=0.05。结果如表12所示:
表12各组用药后廓清指数和计算半数溶血值统计
组别 | 剂量(ml/kg) | 廓清指数(×10-3) | HC50 |
正常组 | 20 | 19.81±9.35 | 318.76±48.71 |
模型组 | 20 | 6.59±2.53 | 97.89±20.91 |
葡萄酒组 | 20 | 15.36±5.61 | 171.37±21.45 |
实施例1组 | 20 | 22.75±11.68 | 285.61±36.39 |
劲酒组 | 20 | 14.19±5.36 | 154.39±17.29 |
三鞭酒组 | 20 | 27.61±7.98 | 194.21±32.60 |
鹿茸酒组 | 20 | 44.78±11.34 | 255.26±47.83 |
由表12结果可见,肾阴虚小鼠吞噬碳粒廓清指数和HC50明显降低,而本发明所述葡萄酒能明显增强肾阴虚小鼠碳粒廓清指数及抗体生成能力,比市售保健酒和葡萄酒效果显著。
实施例15:本发明所述制备方法制备葡萄酒
分别称取100g枸杞、100g茯苓、100g花生藤、50g黄精、25g肉桂、50g桑椹,粉碎过14目的筛,装入佳尼美德发酵罐中。另外取34Kg鲜葡萄(梅鹿辄、赤霞珠等),先采用水杨酸(SA)喷施处理,每公斤葡萄喷施100mlSA溶液,SA喷施的适宜浓度梅鹿辄为100mg/L、赤霞珠为60mg/L,处理后于暗室存放72h;取出SA喷施处理后的葡萄,用紫外线(UV)照射诱导葡萄中自藜芦醇的合成,UV诱导适宜剂量梅鹿辄为430秒(1.28KJ/m2)、赤霞珠为310秒(0.9KJ/m2),处理后于暗室存放72h。取出UV照射的葡萄先用普通水清洗,再用去离子水清洗三次,葡萄采用手工或除梗破碎机去除果梗,将果粒破碎得到葡萄浆,加入佳尼美德发酵罐中;在破碎的葡萄浆中加入亚硫酸0.117%,使二氧化硫浓度达0.007%,加入8.5kg蔗糖,搅拌均匀。调整葡萄汁含糖量为25%,含酸量为0.6%,接种0.3wt%的贝酵母(发酵力(CO2)>950ml水份<5%)和0.3wt%HE GRAND CRU果胶酶(酶活力40万)及0.3wt%-0.5wt%葡萄糖苷酶(酶活力10万)进行发酵,发酵期间控制发酵温度在28-30℃以下,每天搅拌2-4次,使上浮的药粉和皮渣压入葡萄汁中;发酵8天后发酵液残糖降至0.06%以下,发酵液温度控制在室温,过滤酒液分离皮渣得原酒液;在原酒液中补加0.3%的二氧化硫进行后发酵,酒灌满贮酒容器密封保存,温度控制在18-25℃,期间根据需要进行苹乳发酵;然后控制温度在10-15℃进行陈酿,相对湿度85%-90%,并进行倒桶、满桶和澄清处理;测定原酒液的糖度、酒度、酸度,按照成品的理化指标分别调整到规定值进行勾兑处理,贮存28天;将酒液过0.45μm滤膜进行精滤,通入杀菌器90℃/min快速杀菌,装瓶密封,在70-72℃的水中杀菌20min,检验合格即可贴商标,装箱,入库。
按照实施例2、实施例6-14的方法进行相关检测,本实施例制备的葡萄酒对阳痿、性功能减退、易疲劳、免疫力低下、精力不济等肾阳虚症状和有显著疗效,效果优于现有保健产品。
实施例16:本发明所述制备方法制备葡萄酒
分别称取60g枸杞、40g茯苓、80g花生藤、50g黄精、25g肉桂、45g桑椹,粉碎过14目的筛,装入佳尼美德发酵罐中。
另外取20Kg鲜葡萄(梅鹿辄、赤霞珠等),先采用水杨酸(SA)喷施处理,每公斤葡萄喷施100mlSA溶液,SA喷施的适宜浓度梅鹿辄为100mg/L、赤霞珠为60mg/L,处理后于暗室存放72h;取出SA喷施处理后的葡萄,用紫外线(UV)照射诱导葡萄中自藜芦醇的合成,UV诱导适宜剂量梅鹿辄为430秒(1.28KJ/m2)、赤霞珠为310秒(0.9KJ/m2),处理后于暗室存放72h。取出UV照射的葡萄,先用普通水清洗,再用去离子水清洗三次,葡萄采用手工或除梗破碎机去除果梗,将果粒破碎得到葡萄浆,加入佳尼美德发酵罐中。
在破碎的葡萄浆中加入亚硫酸0.066%,使二氧化硫浓度达0.004%,加入4kg蔗糖,搅拌均匀。调整葡萄汁含糖量为20%,含酸量为0.6%,接种0.5wt%的贝酵母(发酵力(CO2)>950ml水份<5%)和0.5wt%HE GRAND CRU果胶酶(酶活力40万)及0.5wt%-0.5wt%葡萄糖苷酶(酶活力10万)进行发酵,发酵期间控制发酵温度在28-30℃以下,每天搅拌2-4次,使上浮的药粉和皮渣压入葡萄汁中;发酵9天使发酵液残糖降至0.06%以下,发酵液温度控制在室温,过滤酒液分离皮渣得原酒液;在原酒液中补加0.3%的二氧化硫进行后发酵,酒灌满贮酒容器密封保存,温度控制在18-25℃,期间根据需要进行苹乳发酵;然后控制温度在10-15℃进行陈酿,相对湿度85%-90%,并进行倒桶、满桶和澄清处理;测定原酒液的糖度、酒度、酸度,按照成品的理化指标分别调整到规定值进行勾兑处理,贮存28天;将酒液过0.45μm滤膜进行精滤,通入杀菌器90℃/min快速杀菌,装瓶密封,在70-72℃的水中杀菌20min,检验合格即可贴商标,装箱,入库。
按照实施例2、实施例6-14的方法进行相关检测,本实施例制备的葡萄酒对阳痿、性功能减退、易疲劳、免疫力低下、精力不济等肾阳虚症状有显著疗效,效果优于现有保健产品。
实施例17:本发明所述制备方法制备葡萄酒
分别称取100g枸杞、75g茯苓、80g花生藤、70g黄精、35g肉桂、60g桑椹,粉碎过14目的筛,装入佳尼美德发酵罐中。
另外取24Kg鲜葡萄(梅鹿辄、赤霞珠等),先采用水杨酸(SA)喷施处理,每公斤葡萄喷施100mlSA溶液,SA喷施的适宜浓度梅鹿辄为100mg/L、赤霞珠为60mg/L,处理后于暗室存放72h;取出SA喷施处理后的葡萄,用紫外线(UV)照射诱导葡萄中自藜芦醇的合成,UV诱导适宜剂量梅鹿辄为430秒(1.28KJ/m2)、赤霞珠为310秒(0.9KJ/m2),处理后于暗室存放72h。取出UV照射的葡萄,先用普通水清洗,再用去离子水清洗三次,葡萄采用手工或除梗破碎机去除果梗,将果粒破碎得到葡萄浆,加入佳尼美德发酵罐中。
在破碎的葡萄浆中加入亚硫酸0.1%,使二氧化硫浓度达0.006%,加入5.2kg蔗糖,搅拌均匀。调整葡萄汁含糖量为22%,含酸量为0.6%,接种0.3wt%的贝酵母(发酵力(CO2)>950ml水份<5%)和0.3wt%HE GRAND CRU果胶酶(酶活力40万)及0.3wt%-0.5wt%葡萄糖苷酶(酶活力10万)进行发酵,,发酵期间控制发酵温度在28-30℃以下,每天搅拌2-4次,使上浮的药粉和皮渣压入葡萄汁中;发酵9天发酵液残糖降至0.06%以下,发酵液温度控制在室温,过滤酒液分离皮渣得原酒液;在原酒液中补加0.3%的二氧化硫进行后发酵,酒灌满贮酒容器密封保存,温度控制在18-25℃,期间根据需要进行苹乳发酵;然后控制温度在10-15℃进行陈酿,相对湿度85%-90%,并进行倒桶、满桶和澄清处理;测定原酒液的糖度、酒度、酸度,按照成品的理化指标分别调整到规定值进行勾兑处理,贮存28天;将酒液过0.45μm滤膜进行精滤,通入杀菌器90℃/min快速杀菌,装瓶密封,在70-72℃的水中杀菌20min,检验合格即可贴商标,装箱,入库。
按照实施例2、实施例6-14的方法进行相关检测,本实施例制备的葡萄酒对阳痿、性功能减退、易疲劳、免疫力低下、精力不济等肾阳虚症状有显著疗效,效果优于现有保健产品。
实施例18:本发明所述制备方法制备葡萄酒
分别称取160g枸杞、110g茯苓、130g花生藤、120g黄精、60g肉桂、120g桑椹,粉碎过14目的筛,装入佳尼美德发酵罐中。
另外取56Kg鲜葡萄(梅鹿辄、赤霞珠等),先采用水杨酸(SA)喷施处理,每公斤葡萄喷施100mlSA溶液,SA喷施的适宜浓度梅鹿辄为100mg/L、赤霞珠为60mg/L,处理后于暗室存放72h;取出SA喷施处理后的葡萄,用紫外线(UV)照射诱导葡萄中自藜芦醇的合成,UV诱导适宜剂量梅鹿辄为430秒(1.28KJ/m2)、赤霞珠为310秒(0.9KJ/m2),处理后于暗室存放72h。取出UV照射的葡萄,先用普通水清洗,再用去离子水清洗三次,葡萄采用手工或除梗破碎机去除果梗,将果粒破碎得到葡萄浆,加入佳尼美德发酵罐中。
在破碎的葡萄浆中加入亚硫酸0.066%,使二氧化硫浓度达0.004%,加入10.08kg蔗糖,搅拌均匀。调整葡萄汁含糖量为18%,含酸量为0.6%,接种0.3wt%的贝酵母(发酵力(CO2)>950ml水份<5%)和0.3wt%HE GRAND CRU果胶酶(酶活力40万)及0.3wt%-0.5wt%葡萄糖苷酶(酶活力10万)进行发酵,,发酵期间控制发酵温度在28-30℃以下,每天搅拌2-4次,使上浮的药粉和皮渣压入葡萄汁中;发酵9天后发酵液残糖降至0.06%以下,发酵液温度控制在室温,过滤酒液分离皮渣得原酒液;在原酒液中补加0.3%的二氧化硫进行后发酵,酒灌满贮酒容器密封保存,温度控制在18-25℃,期间根据需要进行苹乳发酵;然后控制温度在10-15℃进行陈酿,相对湿度85%-90%,并进行倒桶、满桶和澄清处理;测定原酒液的糖度、酒度、酸度,按照成品的理化指标分别调整到规定值进行勾兑处理,贮存28天;将酒液过0.45μm滤膜进行精滤,通入杀菌器90℃/min快速杀菌,装瓶密封,在70-72℃的水中杀菌20min,检验合格即可贴商标,装箱,入库。
按照实施例2、实施例6-14的方法进行相关检测,本实施例制备的葡萄酒对阳痿、性功能减退、易疲劳、免疫力低下、精力不济等肾阳虚症状有显著疗效,效果优于现有保健产品。
实施例19:临床试验
1、冉某,男,40岁,平时自觉体力不支,阳痿举,气短,体力劳动无力气。经中医诊断为为肾虚。饮用本发明实施例1所述葡萄酒进行调养和治疗,每日晚饭后饮用50毫升,连续饮用3个月,体力得到恢复,精力充沛,阳痿症状消失,力挺而坚。经中医诊脉后认为,其肾功能达到与正常人一样。确认其病症得到治疗,体力与精力得到恢复。证明本发明所述葡萄酒对肾虚有效。
2、李某,男,38岁,自觉阴囊潮湿,体虚多汗,勃起不利。经中医诊断认为,肾阳不足。饮用本发明实施例1所述葡萄酒进行调理,每日1次,每次80毫升,晚饭后饮用。经饮用45天,疗状消失。阴囊不再潮湿,勃世迅速与坚挺,自觉感觉体力充沛。证明本发明所述葡萄酒产生了治疗和调节的效果。
3、朱某,男,47岁,自觉浑身无力,气短,盗汗。经中医诊断认为,肾虚所致。饮用本发明实施例1所述葡萄酒进行调养。每次饮用50毫升,每天晚饭后和睡觉前各饮用1次,每天共饮用100毫升。经2个月饮用后,浑身有力,气短现象消失,盗汗停至。证明本发明所述葡萄酒产生了调理的作用。
4、李某,男,52岁,自觉亏气,头迷,阳痿,小能行房事。经中医诊断认为,严重肾虚所敛。饮用本发明实施例1所述葡萄酒进行治疗与调理。每天饮用50毫升,晚饭后饮用,饮用3个月后,自我感觉不再亏气,肺活量增加,头迷症状消失,不再阳痿,而且行房时,阳具刚劲有力,证明本发明所述葡萄酒产生了治疗和调理作用。
5、钱某,男,56岁,行房困难,有时阳痿,有时早泄,时常困扰其正常生活。经中医诊断认为肾阳不足,性功能低下,建议用补肾方法进行治疗。饮用本发明实施例15所述葡萄酒每天60毫升,经饮用2个月后,杜某面带笑容去向中医生说明情况,说行房如年青人,心情愉悦。证明本发明所述葡萄酒对治疗男人性功能减弱效果明显。
6、赵某,男,63岁,2006年患性功能障碍,伴有肾虚、腰膝酸软病症,经医院治疗效果不佳,自2008年10月开始饮用此葡萄酒,半年后病情逐渐好转,此后每晚坚持喝本发明实施例16所述葡萄酒50毫升,至今已4年多,不但治愈了肾虚及性功能障碍等病,而且容颜不老,身体强健,看上去像50几岁的人。
7、李某,男,42岁,患盗汗,肾虚腰痛,性功能失常病症,久治小愈,时好时坏,服用本发明实施例16所述葡萄酒3个月后明显好转,半年后完全康复,目前仍在坚持服用,体质越来越好。
8、江某,男,49岁,患肝肾不足,腰膝乏力,经络不通病症。身体虚弱,精神不振,经多方医治疗效甚微。2009年5月开始服用本发明实施例17所述葡萄酒,10月份病情好转,2010年上半年基本痊愈,服至现在,身体状况良好。
9、杜某,男,60岁,患者2008年骑摩托车摔跤后,腰杆扭伤一直未痊愈,常现腰痛,2010年11月发现摔伤部位出项明显骨质增生,其冬天手脚冰凉,畏寒怕冷,腰困乏力,失眠多梦,阳痿不举。2011年8月26号起开始服用本发明实施例17所述葡萄酒,每晚晚饭时服用70毫升,连服15天后腰痛明显减轻,后来连续服用45天,腰痛完全消失,去医院照片发现骨质增生明显消除,睡眠好而梦少,手脚暖和,体壮,精力充沛,阳具粗壮有力如30岁小伙。
10、郑某,女,52岁,患风湿、类风湿、关节炎,每逢下雨,变天的时候都会膝盖疼痛,经多方医治疗效甚微。2010年10月开始服用本发明实施例18所述葡萄酒,连饮15天,疼痛部位有明显减轻,连续饮用2个月,在饮用的期间患病部位已无明显疼痛。
11、黄某,女,47岁,患尿频,尿急,频繁起夜等症状,服用本发明实施例18所述葡萄酒7-15天,起夜频率明显减少,尿频尿急也得以改善,连饮1-2个月,已无起夜症状,停饮后也没有反弹。
12、戴某,女,36岁,患腰膝酸软、两腿无力,眩晕耳鸣,失眠多梦,本以为是自己各方压力大导致的,经中医诊断为肾阴虚。服用本发明实施例18所述葡萄酒15-25天,体质明显改善,睡眠质量明显提高,连饮2个月以上,病症基本没有发生,停饮期间也没有反弹症状发生。
13、代某,女,28岁,患者经少,形体消瘦,潮热盗汗。服用本发明实施例18所述葡萄酒15天-1个月(经期期间停用),症状有明显改善,连饮3个月,无病症发生,体质也得到明显的改善和提高。
以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以对本发明进行若干改进和修饰,这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。
Claims (9)
1.一种葡萄酒,由如下重量份原料制成:
枸杞50份-100份、茯苓40份-100份、花生藤50份-100份、黄精50份-70份、肉桂25份-50份、桑椹45份-60份、葡萄20000份-34000份;
所述葡萄酒由如下方法制备得到:
将20000重量份-34000重量份经预处理的葡萄与50重量份-100重量份枸杞、40重量份-100重量份茯苓、50重量份-100重量份花生藤、50重量份-70重量份黄精、25重量份-50重量份肉桂、45重量份-60重量份桑椹混合进行酒精发酵,之后经后发酵、陈酿后调配;
所述预处理为采用水杨酸喷施处理后用紫外线照射诱导葡萄中白藜芦醇的合成;所述SA浓度为60mg/L-100mg/L,所述UV诱导量0.9KJ/m2-1.28KJ/m2、310秒-430秒;
所述酒精发酵为调整葡萄汁含糖量为18%-25%,含酸量为0.6%-0.8%,接种0.3wt%-0.5wt%的酵母、0.3wt%-0.5wt%果胶酶和0.3wt%-0.5wt%葡萄糖苷酶进行发酵,发酵期间控制发酵温度在28-30℃,发酵至发酵液残糖降至0.06%以下。
2.一种如权利要求1所述的葡萄酒的制备方法,将20000重量份-34000重量份经预处理的葡萄与50重量份-100重量份枸杞、40重量份-100重量份茯苓、50重量份-100重量份花生藤、50重量份-70重量份黄精、25重量份-50重量份肉桂、45重量份-60重量份桑椹混合进行酒精发酵,之后经后发酵、陈酿后调配。
3.根据权利要求2所述的制备方法,所述葡萄为梅鹿辄、赤霞珠。
4.根据权利要求2所述的制备方法,所述预处理为采用水杨酸喷施处理后用紫外线照射诱导葡萄中白藜芦醇的合成。
5.根据权利要求4所述的制备方法,所述SA浓度为60mg/L-100mg/L,所述UV诱导量0.9KJ/m2-1.28KJ/m2、310秒-430秒。
6.根据权利要求2所述的制备方法,所述酒精发酵为调整葡萄汁含糖量为18%-25%,含酸量为0.6%-0.8%,接种0.3wt%-0.5wt%的酵母、0.3wt%-0.5wt%果胶酶和0.3wt%-0.5wt%葡萄糖苷酶进行发酵,发酵期间控制发酵温度在28-30℃,发酵至发酵液残糖降至0.06%以下。
7.根据权利要求6所述的制备方法,所述酵母为贝酵母。
8.根据权利要求6所述的制备方法,所述果胶酶为HE GRAND CRU果胶酶。
9.权利要求1所述葡萄酒在制备治疗肾虚的药物中的用途。
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