CN104257668A - 阿司匹林、氯吡格雷与叶酸类化合物的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种含有阿司匹林、氯吡格雷、叶酸类化合物的药物组合物，其中，叶酸类化合物包括叶酸、5-甲基四氢叶酸、甲酰四氢叶酸、亚叶酸、左亚叶酸钙、叶酸可药用盐等。该药物组合物优选剂量为阿司匹林50～150mg，氯吡格雷50～100mg，叶酸类化合物0.4～2mg。本发明还涉及该组合物在制备用于预防血栓栓塞性疾病的药物中的用途。由本药物组合物制成的药物，在有效抑制血小板聚集的基础上，具有更显著的抑制血栓形成的效果。此外，本发明还可使患者服药方便，增加依从性。

Description

阿司匹林、氯吡格雷与叶酸类化合物的药物组合物

技术领域

本发明涉及一种含有阿司匹林、氯吡格雷及叶酸类化合物的药物组合物及其用途，尤指一种预防或延缓血管栓塞性疾病的药物组合物，属于药学领域。 

背景技术

我国心脑血管疾病发病率呈逐年上升趋势，据卫生部统计，我国目前约有7000万中风及其后遗症患者，有6000万冠心病患者。血栓形成和栓塞是心肌梗塞、缺血性脑卒中等心脑血管事件发生的直接原因，血栓栓塞性疾病已成为人类健康的主要杀手，而抗血小板治疗是预防这类疾病发生的重要干预手段【高旭光.预防缺血性卒中的抗血小板治疗.中华脑血管病杂志，2010；4(1)：37～41】。 

血小板是外周血液中三种有形成分之一，其基本生理功能包括粘附、变形、聚集、释放和分泌颗粒内容物(如ADP、5-HT)等，一旦血管内壁受损，处于静息状态的血小板被激活，形成聚集体，并提供磷脂表面，促进血液凝固，最终纤维蛋白包绕血小板聚集体形成血栓。抗血小板药物(或称血小板抑制药)能够抑制血小板粘附、聚集和释放等，阻止血栓形成，故可用于血栓栓塞性疾病的一级、二级预防。根据作用机制，抗血小板药物可分为环氧化酶抑制剂、血小板ADP受体拮抗剂、血小板膜糖蛋白复合物GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂、磷酸二酯酶抑制剂等。 

阿司匹林(aspirin)属于环氧化酶抑制剂，以不可逆的方式使血小板内的环氧酶氨基酸残基乙酰化，破坏酶的活性中心。小剂量阿司匹林是目前唯一有大量循证医学证据支持、可用于心脑血管事件一级和二级预防的抗血小板药物，但仍有10％-20％的患者反复发生血管事件，且相当一部分出现阿司匹林抵抗。此外，阿司匹林对卒中的二级预防作用有限，只有13％左右的疗效，增加剂量也不能增加疗效，只能增加不良反应。氯吡格雷(clopidogrel，波立维)属于血小板ADP受体拮抗剂，在肝脏转变成活性代谢产物发挥作用，引起血小板膜ADP受体不可逆改变，逐渐产生抗血小板作用，长期使用也易致氯吡格雷抵抗，发生率约5％-35％。 

阿司匹林联合氯吡格雷是目前临床上针对血栓栓塞性疾病高危患者的抗血小板治疗标准组合。大量临床试验证实双重抗血小板治疗对动脉血栓事件的预防作用显著 优于单用阿司匹林,对心脑血管疾病的预防和治疗具有积极作用【①Yusuf S,et al.Effects of clopidogrel in addition to aspirin in patients with acute coronary syndromes without ST-segment elevation.N Engl J Med，2001；345(7):494。②Bowry A，et al.Meta analysis of the efficacy and safety of clopidogrel plus aspirin as compared to antiplatelet monotherapy for the prevention of vascular events.Am J Cardial，2008；101(7):960】。从循证医学研究看，阿司匹林、氯吡格雷虽然对于血栓形成都有较好的预防效果，但也存在着一些弊端，其中最令人担忧的副作用是出血风险【Sibbing D,et al.Antiplatelet effects of clopidogrel and bleeding in patients undergoing coronary stent placement.J Thromb Haemost,2010；8(2):250】，这一副作用也与药物使用剂量和疗程有关；另一方面，血管内皮损伤是诱导血栓形成的重要因素，而阿司匹林、氯吡格雷的药理作用机制并不涉及血管内皮保护。因此，阿司匹林、氯吡格雷在联合用于预防血栓栓塞性疾病时仍有待改进或需要对治疗方案进行优化。 

叶酸类化合物包括叶酸、5-甲基四氢叶酸、甲酰四氢叶酸、亚叶酸、左亚叶酸钙等，它们均属于水溶性维生素，经由肠道吸收，由尿排出体外，在人体内存留时间短暂，很少蓄积，所以必须经常从体外摄取以满足营养和代谢需要。人体内叶酸缺乏时影响同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)的代谢，目前认为Hcy是一种心血管危险因素，与血管内皮损伤、诱导血栓形成等可能有关。 

发明内容

本发明的目的是克服阿司匹林、氯吡格雷在临床上联合应用时仍存在的不足，提供一种更为有效的防治血栓栓塞性疾病的药物组合物，这种效果体现在该组合物除了具有抑制血小板聚集作用外，还能同时提供血管内皮保护、从而更有效地预防血栓形成，其应用价值优于阿司匹林与氯吡格雷合用。 

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案： 

一种药物组合物，包括： 

(1)药用剂量的阿司匹林； 

(2)药用剂量的氯吡格雷； 

(3)药用剂量的叶酸类化合物的一种； 

(4)药剂学上可接受的载体。 

上述的“药用剂量”是指具有协同、预防或治疗的药理作用的量。 

本发明所述组合物中，叶酸类化合物包括叶酸、甲酰四氢叶酸、5-甲基四氢叶酸(L-甲基叶酸)、亚叶酸、左亚叶酸钙、叶酸或叶酸盐的活性代谢产物和可在体内释放生成叶酸的物质。 

在本发明中，阿司匹林药用剂量为25～200mg，氯吡格雷药用剂量为25～200mg，叶酸类化合物药用剂量为0.1～5mg，这些药物更佳的药用剂量分别为阿司匹林50～150mg，氯吡格雷50～100mg，叶酸类化合物0.4～2mg。 

通过实验研究发现，叶酸对血管内皮损伤具有一定保护作用，当与阿司匹林、氯吡格雷合用时，能增强后者组合物对血栓形成的抑制效果，并能适量减少后者的使用剂量(有利于减少后者引起出血的副作用)。 

根据本发明，药物组合物中的活性成分是组合物中的基本组分，它们分别是阿司匹林、氯吡格雷以及叶酸类化合物的一种，该药物组合物的剂型包括但不限于普通片剂、双层片剂、多层片剂、缓释片剂、单室控释片剂、双室控释片剂、微孔型控释片剂、舌下含片、口腔速崩片、分散片、肠溶片、延迟释放片、定时/位释放片、普通胶囊、肠溶胶囊、缓释胶囊、控释胶囊、含有微丸或小片的胶囊、含有微丸或小片的pH依赖型胶囊、颗粒剂、丸剂、口服液、膜剂或贴剂。 

在本发明中，可药用载体或赋形剂可制成普通口服制剂，包括普通片剂、普通胶囊、颗粒剂等，制成片剂时所述可药用载体包括有助于将活性化合物配制成药用制剂的赋形剂和辅料，如微晶纤维素、无机盐类、乳糖、氯化钠、柠檬酸、亚硫酸钠、淀粉、纤维素衍生物、预胶化淀粉，羧甲基淀粉钠，羟丙基淀粉，低取代羟丙基纤维素，交联羧甲基淀粉钠，交联聚乙烯吡咯烷酮，蔗糖、糊精、糖粉、葡萄糖等的一种或几种物质的组合物，属于本领域常识。 

在本发明中，可药用载体或赋形剂可制成缓释制剂，包括赋形剂和辅料等。 

在本发明中，可药用载体或赋形剂可制成缓释胶囊、控释胶囊，含有微丸或小片的胶囊，含有微丸或小片的pH依赖型胶囊，二联胶囊等，包括赋形剂和辅料等。 

术语“药用剂量”是指为达到有效控制或治疗疾病的目的，临床医生根据患病个体病情严重程度对患病个体施与药物的剂量。应当理解本发明提供的药物药用剂量不是对本发明的限制，而是对本发明的优选，通常情况下，在该剂量优选范围内，该药物能够对患病个体产生有效的治疗效果。患病个体是指患有疾病的独立存在的生命体，在本发明中，生命体尤指人类。应当理解，现有技术中，人类药用剂量或药用剂量范 围可与哺乳动物，如大鼠、小鼠等进行换算以得出适合相应动物适用的药用剂量或剂量范围。 

本发明提供的药物组合物中的化合物在相同的制剂中可以同时施与患病个体，也可分别地相继施与患病个体。若是相继施与患病个体，则第二或第三个(或附加的)活性成分施与的延迟不应当导致活性成分联合带来的有益效果的损失。若是同时施与患病个体，组合物中的化合物可以混合存在于同一个药物制剂形式中，也可以以同样的制剂形式分别独立存在。若是以同样的制剂形式分别独立存在，则药物组合物可以变通的以“组合药盒”形式存在。“组合药盒”是一种盒状容器，内置一种或多种剂量形式的药物组合及其使用说明书，在本发明中优选所述的两种抗血小板药物和一种叶酸类化合物。 

本发明的另一个目的是提供含有药用剂量的阿司匹林、药用剂量的氯吡格雷、药用剂量的叶酸类化合物的一种和可药用载体的药物组合物在制备用于抑制血栓形成、预防血栓栓塞性疾病的药物中的用途。 

本发明的优点：本发明提供了含有药用剂量的阿司匹林、氯吡格雷、叶酸类化合物的一种和可药用载体的药物组合物。抗血小板药物与叶酸类化合物的联合效果并不是各个活性物质的各自作用的简单相加，而是在药物抗血小板作用得到更佳改善的基础上减少药物副作用、进一步降低血栓栓塞性疾病发生的风险。也就是说，上述两种抗血小板药物与叶酸类化合物联合用药取得了协同防治效果，因此是更适宜的抗血小板药物。 

下面结合具体实施方式对本发明做进一步说明，并非对本发明的限定，凡依照本发明内容进行的任何本领域的等同替换，均属于本发明的保护范围。 

具体实施方式

实施例1.制备复方阿司匹林/氯吡格雷/叶酸片(1000片量) 

配方： 

制备方法：将辅料过80目筛，备用。取阿司匹林100g、氯吡格雷75g、叶酸0.8g、微晶纤维素112g、乳糖40g混合均匀，加入适量的10％羟丙甲纤维素，制软材，过20目尼龙筛制成湿粒，60±5℃干燥2小时，控制颗粒的含水量为1.5％以下，20目筛整粒，再与硬脂富马酸钠混合均匀，压片。制备过程中注意避光，制成的片剂需铝塑泡罩包装，避光保存。制成的复方片剂中每片含阿司匹林100mg、氯吡格雷75mg、叶酸0.8mg。 

实施例2.制备复方阿司匹林/氯吡格雷/5-甲基四氢叶酸薄膜包衣片(1000片量) 

配方： 

包衣处方 

包衣材料：薄膜包衣预混剂  9g 

包衣溶剂：纯化水          66g 

制备方法：按处方量称量阿司匹林、氯吡格雷、5-甲基四氢叶酸和PEG6000，备用。将称量好的处方量阿司匹林、氯吡格雷、5-甲基四氢叶酸和PEG6000加入制粒机中，50℃±5℃制粒。过30目筛整粒，得药物颗粒，称量羟丙纤维素、甘露醇、乳糖、微晶纤维素和山嵛酸甘油酯，将称量好的药物颗粒和辅料投入混合机中混合 20min，出料，得中间体颗粒。将中间体检验，合格后进行压片，硬度4-8kg，即得素片。素片取样检验合格后进行薄膜包衣。称取薄膜包衣预混剂欧巴代，用纯化水配制成12％的混悬液作为包衣液进行包衣，即得薄膜衣片。制备过程中注意避光，制成的片剂需铝塑泡罩包装，避光保存。制成的复方每片含阿司匹林75mg、氯吡格雷75mg、5-甲基四氢叶酸0.85mg。 

实施例3.制备复方阿司匹林/氯吡格雷/叶酸胶囊(1000粒量) 

配方： 

制备方法：取处方量叶酸、阿司匹林、氯吡格雷按照等量递增法混合均匀，备用；再与甘露醇、交联聚维酮、磷酸氢钙混合均匀后，过80目筛，加入聚乙二醇400、5％羟丙甲纤维素溶液适量，制软材，24目筛制粒，50℃干燥约6h过24目筛整粒，控制颗粒的含水量为2-3％，将干燥后的颗粒与处方量氢化蓖麻油、滑石粉混合均匀，得到的颗粒中间体进行含量检测，检测合格后，装入空心胶囊即得。制成的胶囊中每粒含阿司匹林100mg、氯吡格雷75mg、叶酸1.6mg。 

实施例4.阿司匹林/氯吡格雷/叶酸对大鼠血小板聚集的抑制作用 

【方法】 

SD大鼠30只，雌雄各半，体重250～280g，随机分3组，每组10只。对照组(生理盐水)、阿司匹林/氯吡格雷+叶酸组(10+7.5+0.08mg/kg)、阿司匹林/氯吡格 雷组(10+7.5mg/kg)，灌胃给药，每日一次，共7天。动物经上述给药方法给药后，禁食12小时不禁水，于次日给药2小时后，用戊巴比妥钠30-40mg/kg腹腔麻醉，仰卧位固定，分离腹主动脉，插入聚乙烯管取血5ml于试管内(管内按血和抗凝剂9:1预置0.5ml枸橼酸钠抗凝)，全血按1000r/min离心10分钟，上层即为富含血小板血浆(PRP)。再将余液按4000r/min离心10分钟，取上清即为少含血小板血浆(PPP)。调PRP中血小板浓度约600-700×10⁹个/L。根据比浊法，将有300ul PRP和磁力搅拌棒的比浊管置于血小板聚集仪，37℃±0.1恒温2分钟，经PPP标定后，搅拌情况下，加入诱导剂ADP诱导聚集，测定血小板最大聚集率。 

【结果】 

实验结果表明，与对照组相比，阿司匹林/氯吡格雷组和阿司匹林/氯吡格雷+叶酸组的血小板最大聚集率均有明显降低，差异有显著性(均P<0.01)，且阿司匹林/氯吡格雷和叶酸合用对降低血小板最大聚集率强于阿司匹林/氯吡格雷联用(P<0.05)，提示叶酸在抗血小板聚集中起一定作用(表1)。 

表1阿司匹林/氯吡格雷/叶酸对大鼠血小板的影响(X±SD，n＝10) 

注：与生理盐水组比较，^*P<0.01，与阿司匹林/氯吡格雷组比较，^△P<0.05。 

实施例5.阿司匹林/氯吡格雷/叶酸对载脂蛋白E基因敲出小鼠的影响 

【方法】 

载脂蛋白E基因敲出小鼠30只，雌雄各半，体重20～25g，每组10只，以西方饮食(普通饲料+猪油+胆固醇)喂养，建立动脉硬化模型，随机分3组，即模型组(生理盐水)、阿司匹林/氯吡格雷+叶酸组(10+7.5+0.16mg/kg)、阿司匹林/氯吡格雷组(10+7.5mg/kg)，3组均灌胃给药，每日一次，并继续西方饮食喂养，共8周。动物经上述方法给药后，禁食12小时但不禁水，于次日给药2小时后，用戊巴比妥钠30-40mg/kg腹腔麻醉，眼球取血，测定可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)、可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)。分离胸主动脉分3段，剥离外膜脂肪组织，制成病理切片，采用图像分析系统测量血管横断面的管壁厚度、斑块截面积，3段标本 加以平均。 

【结果】 

通过实验发现，与模型组相比，阿司匹林/氯吡格雷组和阿司匹林/氯吡格雷+叶酸组sVCAM-1和sICAM-1浓度降低，差异有显著性；主动脉横截面组织切片，模型组有明显斑块形成，含大量泡沫细胞，管壁厚度、斑块截面积显著大于用药组；在实验中，阿司匹林/氯吡格雷和叶酸合用对载脂蛋白E基因敲出小鼠的影响明显强于仅联用阿司匹林/氯吡格雷(P<0.05)，提示叶酸在保护血管内膜损伤中起一定作用(表2)。 

表2阿司匹林/氯吡格雷/叶酸对载脂蛋白E基因敲出小鼠的影响(X±SD，n＝10) 

注：与生理盐水组比较，^*P<0.05，与阿司匹林/氯吡格雷组比较，^△P<0.05 

实施例6.阿司匹林/氯吡格雷/叶酸对大鼠血栓湿重的影响 

【方法】 

SD大鼠30只，雌雄各半，体重250～280g，随机分3组，每组10只。对照组(生理盐水)、阿司匹林/氯吡格雷+叶酸组(7.5+7.5+0.12mg/kg)、阿司匹林/氯吡格雷组(7.5+7.5mg/kg)，灌胃给药，每日一次，共7天。动物经上述给药方法给药后，禁食12小时不禁水，于次日给药2小时后，用戊巴比妥钠30-40mg/kg腹腔麻醉，仰卧位固定，分离右侧颈总动脉和左侧颈外静脉，在聚乙烯管中放一段长5cm的预先称重的4号丝线，并用肝素生理盐水充满聚乙烯管。当聚乙烯管的一端插入左颈外静脉后，在将聚乙烯管的另一端插入右颈总动脉。打开动脉夹，开放血流15分钟后中断血流，迅速取出丝线称重，总重量减去原丝线重量即为血栓湿重。 

【结果】 

实验表明，与对照组相比，阿司匹林/氯吡格雷组和阿司匹林/氯吡格雷+叶酸组静脉血栓湿重分别减小38％和55％，差异有显著性。在实验中，阿司匹林/氯吡格雷和叶酸合用对减小血栓大小明显强于仅联用阿司匹林/氯吡格雷(P<0.05)，提示叶酸在抑 制血栓的形成中起一定作用(表3)。 

表3阿司匹林/氯吡格雷/叶酸对大鼠血栓湿重的影响(X±SD，n＝10) 

注：与生理盐水组比较，^*P<0.05，与阿司匹林/氯吡格雷组比较，^△P<0.05 

实施例7.阿司匹林/氯吡格雷/5-甲基四氢叶酸(5-MTHF)对大鼠血栓形成时间的影响 

【方法】 

SD大鼠30只，雌雄各半，体重245～275g，随机分3组，每组10只。对照组(生理盐水)、阿司匹林/氯吡格雷+5-MTHF组(10+7.5+0.1mg/kg)、阿司匹林/氯吡格雷组(10+7.5mg/kg)，灌胃给药，每日一次，共7天。动物经上述给药方法给药后，禁食12小时不禁水，于次日给药2小时后，用戊巴比妥钠30-40mg/kg腹腔麻醉，仰卧位固定，分离右侧颈总动脉，钩上实验性体内血栓形成仪的刺激电极和温度探头，在刺激强度为2mA的条件下持续刺激4分钟，记录动脉血栓形成的时间。 

【结果】 

实验结果表明，与对照组相比，阿司匹林/氯吡格雷组和阿司匹林/氯吡格雷+5-MTHF组的动脉血栓形成时间分别延迟，差异有显著性。另一方面，阿司匹林/氯吡格雷与5-MTHF合用对血栓形成时间的延长明显强于仅使用阿司匹林/氯吡格雷(P<0.05)，提示5-MTHF在抑制血栓形成中发挥一定作用(表4)。 

表4阿司匹林/氯吡格雷/5-MTHF对大鼠血栓形成时间的影响(X±SD，n＝10) 

注：与生理盐水组比较，^*P<0.01，与阿司匹林/氯吡格雷组比较，^△P<0.05。 

Claims (7)

1.一种药物组合物，由药用含量的阿司匹林、氯吡格雷、叶酸类化合物以及药剂学上可接受的载体组成。

2.权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述的叶酸类化合物包括叶酸、5-甲基四氢叶酸、甲酰四氢叶酸、亚叶酸、左亚叶酸钙、叶酸可药用盐、叶酸或叶酸可药用盐的活性代谢产物和可在体内代谢和/或生成叶酸的物质。

3.权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：所述阿司匹林含量为25～200mg，氯吡格雷含量为25～200mg，更加优选含量为阿司匹林50～150mg，氯吡格雷50～100mg。

4.权利要求2所述的药物组合物，其特征在于：所述的叶酸类化合物含量为0.1～5mg，优选0.4～2mg。

5.权利要求1～4中任一项所述的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物的制药剂型为口服制剂，包括片剂、胶囊剂或颗粒剂等。

6.权利要求1～5中任一项所述的药物组合物在制备用于预防、延缓血栓栓塞性疾病的药物中的用途。

7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于：所述血栓栓塞性疾病包括缺血性脑卒中、心肌梗塞、急性冠状动脉综合征、外周动脉栓塞。