[go: up one dir, main page]
More Web Proxy on the site http://driver.im/

BG66459B1 - Методи за прилагане на анти -tnf алфа антитела - Google Patents

Методи за прилагане на анти -tnf алфа антитела Download PDF

Info

Publication number
BG66459B1
BG66459B1 BG108514A BG10851404A BG66459B1 BG 66459 B1 BG66459 B1 BG 66459B1 BG 108514 A BG108514 A BG 108514A BG 10851404 A BG10851404 A BG 10851404A BG 66459 B1 BG66459 B1 BG 66459B1
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
antibody
human
seq
composition
antibodies
Prior art date
Application number
BG108514A
Other languages
English (en)
Other versions
BG108514A (bg
Inventor
Joachim Kempeni
Roberta Weiss
Steven Fischkoff
Original Assignee
Abbvie Biotechnology Ltd.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=23144283&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=BG66459(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Abbvie Biotechnology Ltd. filed Critical Abbvie Biotechnology Ltd.
Publication of BG108514A publication Critical patent/BG108514A/bg
Priority to BG111719A priority Critical patent/BG66936B1/bg
Publication of BG66459B1 publication Critical patent/BG66459B1/bg

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/395Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61MDEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M5/00Devices for bringing media into the body in a subcutaneous, intra-vascular or intramuscular way; Accessories therefor, e.g. filling or cleaning devices, arm-rests
    • A61M5/178Syringes
    • A61M5/28Syringe ampoules or carpules, i.e. ampoules or carpules provided with a needle
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00Drugs for disorders of the respiratory system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00Drugs for disorders of the urinary system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00Drugs for dermatological disorders
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/06Antigout agents, e.g. antihyperuricemic or uricosuric agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00Drugs for disorders of the nervous system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00Drugs for disorders of the senses
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02Ophthalmic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A61P29/02Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID] without antiinflammatory effect
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04Antibacterial agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • A61P31/14Antivirals for RNA viruses
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • A61P31/20Antivirals for DNA viruses
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02Immunomodulators
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02Immunomodulators
    • A61P37/06Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08Antiallergic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P41/00Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K16/00Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K16/00Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K16/00Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/241Tumor Necrosis Factors
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52Constant or Fc region; Isotype
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565Complementarity determining region [CDR]
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K2317/00Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)

Abstract

Изобретението се отнася до използване на TNFалфа антитяло за лечение на заболявания, при които активността на TNFалфа е нежелателна. Човешки антитела, за предпочитане на рекомбинантни човешки антитела, които се свързват специфично с човешки тумор некрозис фактор алфа (hTNFалфа) се прилагат през седмица подкожно. Антитялото може да се приложи със или без метотрексат. То има висок афинитет за hTNFалфа (например, Kd = 10-8 М или по-малко), ниска скорост на дисоциация за hTNFалфа (например, Koff = 10-3 sec-1) и неутрализира in vitro и in vivo активността на hTNFалфа. Антитялото може да бъде антитяло с пълната дължина или антиген свързваща негова част. Изобретението се отнася също до китове, съдържащи фармацевтичен състав, до инструкции за дозиране и до предварително напълнени спринцовки, съдържащи съставите.

Description

Област на техниката
Изобретението се отнася до методи за прилагане на анти-ТИЕалфа антитела.
Предшестващо състояние на техниката
Тумор некрозис фактор алфа (Т№алфа) е цитокин, който се продуцира от много голям брой клетки, включващи моноцити и макрофаги, който първоначално е идентифициран въз основа на способността му да индуцира некрозис на някои миши тумори (виж например, Old, L. (1985) Science 230: 630-632).
Впоследствие е показано, че фактор наречен кахектин, свързан с хронична умствена слабост, е същата молекула както и ТИЕалфа. ТИЕалфа е включен в медиирането на шоково състояние (виж например, Beutler, В. и Cerami, А. (1988) Annu. Rev. Biochem. 57: 505-518; Beutler, В. и Cerami, A. (1989) Annu. Rev. Immunol. 7: 625-655). Освен това ТИЕалфа е включен в патофизиологията на много други болести при човека и нарушения, включващи сепсис, инфекции, автоимунни заболявания, отхвърляне на присадка и заболяване свързано с отхвърляне на присадка на донора от реципиента (виж например, Vasilli, Р. (1992) Annu. Rev. Immunol. 10:41Г452; Tracey, К. J. и Cerami, A. (1994) Annu. Rev. Med. 45: 491-503).
Разработени са терапевтични стратегии за инхибиране или неутрализиране на активността на ИТЪТалфа, поради вредната роля на човешкия ТМРалфа (ЬТМРалфа) при различни болестни състояния на човека.
По-специално, като средство за потискане на активността на ЬТЛРалфа, се търсят антитела, които се свързват с и неутрализират ЬТТЧРалфа. Някои от първите такива антитела са мишите моноклонални антитела (mAbs), секретирани от хибридоми, получени от лимфоцити на мишки, имунизирани с ЬТИРалфа (виж например, Hahn Т; et al., (1985) Proc Natl Acad Sci USA 82: 3814' 3818; Liang, C-M., etal. (1986) Biochem. Biophys. Res. Commun. 137:847'854; Hirai, M., etal. (1987) J. Immunol. Methods 96: 57-62; Fendly, В. M., et al. (1987) Hybridoma 6: 359*370; Moller, A., et al.
(1990) Cytokine 2: 162'69; U. S. Patent No. 5,231,024 от Moeller et al.; Европейска патентна ЗаявкаИо. 186 833 Bl от Wallach, D.; Европейска патентна Заявка No. 218 868 Al от Old et al.; 5 Европейска патентна Заявка No. 260 610 В1 от Moeller, A., et al.). Докато тези миши антийТОТалфа антитела често показват силен афинитет към ИТИРалфа (например, Kd ΙΟ-9 М) и са способни да неутрализират активността на 10 ЬПЧРалфа, използването им in vivo може да бъде ограничено, поради проблеми свързани с прилагането на миши антитела при хора, такива като проблем свързан с кратък полуживот в серума, неспособност да инициират някои 15 човешки ефекторни функции и да предизвикват нежелан имунен отговор срещу мишото антитяло в човек (човешко анти-мишо антитяло (НАМА) реакция).
Един опит за да се преодолеят проблемите, свързани с използването на напълно-миши антитела при хора, е създаването по генно инженерен път на миши анти-Ь1Ъ1Еалфа антитела, които да са антитела наподобяващи повече човешките. Например, получени са химерни антитела, в които вариабилните области на антитяло веригите са с миши произход, а константните области на антитяло веригите са с човешки произход (Knight, D. М., et al., (1993) Mol. Immunol. 30:1443 '453; PCT Публикация No WO 1992/016553 от Daddona, P. E., et al.). B допълнение, получени са също така антитела наподобяващи човешките, в които хипер вариабилните домени на антитяло вариабилните области са с миши произход, но останалата част от вариабилните области и антитяло константните области са с човешки произход (РСТ публикация No WO 1992/011383 от Adair, J. R., et al.). Обаче, тъй като тези химерни и наподобяващи човешките антитела все още запазват някои миши секвенции, те все още могат да предизвикват нежелана имунна реакция, реакция срещу човешко антихимерно антитяло (НАСА), особено когато се прилагат за по-дълги периоди от време, например при хронични индикации, такива като ревматоидни артрити (виж например, Elliott, М. J., et al. (1994) Lancet 344: 1125-427; Elliot, Μ. J., etal. (1994) Lancet 344: 1105'110).
Предпочитано ЬТИРалфа инхибиторно средство срещу миши mAbs или техни производни (например химерни или es*H*W5WS^
66459 Bl наподобяващи човешките антитела), ще бъде напълно човешко анти-ЬТЛРалфа антитяло, тъй като това средство не ще предизвиква НАМА реакция, дори и ако се използва за по-дълги периоди от време.
Чрез използване на човешки хибридомни техники са получени човешки моноклонални авто-антитела срещу йТЖалфа (Boyle, Р., et al. (1993) Cell. Immunol. 152: 556-568; Boyle, P., et al. (1993) Cell. Immunol. 152: 569-581; Европейска Патентна Заявка Публикация No. 614 984 А2 от Boyle, et al.). Съобщава се обаче, че тези моноклонални авто-антителат получени от хибридома имат афинитет към йТ№алфа, който е твърде слаб, за да може да се изчисли чрез стандартните методи, не са способни да се свързват с разтворим ЬТОТалфа и не са способни да неутрализират индуцираната от ЬТЪ1Ралфа цитотоксичност (виж Boyle, et al.; погоре). Освен това, успехът по отношение на човешките хибридомни техники зависи от естественото присъствие на лимфоцити в човешката периферна кръв, продуциращи автоантитела, специфични за ЬПЧРалфа. В някои изследвания са открити серумни автоантитела срещу ЬТЖалфа в човешки индивиди (Fomsgaard, A., et al. (1989) Scand. J. Immunol. 30: 219-223; Bendtzen, K„ et al. (1990) Prog. Leukocyte Biol. 10B: 447-452), докато в други не са (Leusch, H-G., et al. (1991) J. Immunol. Methods 139: 145-'47).
Алтернатива на естествено срещащите се човешки анти-ЬТЖалфа антитела ще бъде рекомбинантното ЬТЪ1Ралфа антитяло. Описани са рекомбинантни човешки антитела, които се свързват с ЬТОТалфа с относително нисък афинитет (т. е., Kd ~ 10'7 М) и със скорост на дисоциация (т. е., Koff~ Ю'2 sec1) (Griffiths, A. D., et al. (1993) EMBO J. 12: 725 734). Обаче, поради техните относително бързи кинетики на дисоциация, тези антитела могат да не са подходящи за терапевтично използване. В допълнение, описано е рекомбинантно човешко анти-Ь174Ралфа антитяло, което не неутрализира активността на1ТПЧРалфа, а увеличава по-скоро свързването на ЬТКРалфа с повърхността на клетките и повишава интернализацията на йТ№алфа (Lidbury, A., et al. (1994) Biotechnol. Ther. 5: 27*45; PCT Публикация No. WO 1992/ 003145 от Aston, R. et al.)
Описани са също така рекомбинантни човешки антитела, които се свързват с разтворим ЬТ^алфа с висок афинитет и слаби дисоциационни кинетики и които имат способността 5 да неутрализират активността на ЬТОТалфа, включващи ЬТЖалфа-индуцираната цитотоксичност (in vitro и in vivo) и ЬТ^алфа-индуцираното клетъчно активиране (виж U. S. Патент No. 6,090,382). Типичните протоколи за прила10 гане на антитела са на базата на интравенозно седмично приложение. Седмичното дозиране с антитела и/или с който и да е друг лекарствен препарат, може да е скъпо, неудобно и да доведе до увеличаване на броя на страничните ефекти, 15 поради честотата на прилагане. Интравенозното приложение също така има ограничения поради това, че прилагането обикновено се прави от някой, който има медицински опит.
2θ Техническа същност на изобретението
Настоящото изобретение осигурява методи за лечение на свързаните с ТИРалфа нарушения, при които дозирането е през седмица, предимно подкожно. Дозирането през седмица има много 25 предимства, отколкото дозирането един път седмично, включващо, но не ограничаващо се само до по-малък общ брой инжекции, намаляване на броя на страничните реакции от инжекциите (например локална болка и подуване), увеличава се желанието на пациента (т. е. поради по-малкия брой инжекции) и не е толкова скъпо за пациента, така както и за лицето, което се грижи за здравето. Подкожното дозиране има предимство, тъй като пациентът може сам да прилага терапевтичната субстанция, например човешко Т№алфа антитяло, което е удобно както за пациента, така и за лицето, което се грижи за здравето.
Това изобретение осигурява методи за 4θ лечение на нарушения, при които е нежелателна активността на Т№алфа. Методите включват подкожно прилагане през седмица, чрез инжектиране на антитела на лицето. За предпочитане74, антителата са рекомбинантни човешки антитела, 45 които се свързват специфично с човешки Т№алфа. Това изобретение осигурява по-нататък методи за лечение на нарушения, при които активността на ТЖалфа е вредна. Тези методи включват използването комбинирана терапия, при 5θ която човешките антитела се прилагат на лицето
Ί
66459 Bl c друго терапевтично средство, такова като едно или повече допълнителни антитела, които се свързват с други мишени (например антитела, които свързват други цитокини или които свързват клетъчно повърхностни молекули), един или повече цитокини, разтворим ТЖалфа рецептор (виж например, РСТ Публикация No. WO 1994/006476) и/или едно или повече химични средства, които потискат продукцията или активността на ЬТТМРалфа (такива като производни на циклохексанилиден, както е описано в РСТ Публикация No. WO 1993/019751), за предпочитане метотрексат. За предпочитане е антителата да са рекомбинантни човешки антитела, които се свързват специфично с човешки ТЖалфа. Антителата от изобретението се характеризират с това, че се свързват с ИТМРалфа със силен афинитет и ниски дисоциационни кинетики и че неутрализират активността на ЬТ№алфа, включващи ЬТЖалфа-индуцираната цитотоксичност (in vitro и in vivo) и ЬТ№алфа-индуцираното клетъчно активиране. Антителата могат да бъдат целите антитела (например IgG 1 или IgG4 антитяло) или могат да включват само антиген-свързващата част (например Fab, F (ab')2, scFv фрагмент или единичен домен). Най-предпочитаното рекомбинантно антитяло от изобретението, наречено D2E7, има CDR3 домен от леката верига, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 3 и CDR3 домен от тежката верига, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 4 (изложена в Приложение В). За предпочитане е антитялото D2E7 да има вариабилна област от леката верига (LCVR), включваща аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 1 и вариабилната област от тежката верига (HCVR), включваща аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 2. Тези антитела са описани в U. S. Патент No. 6,090,382, включен изцяло тук в цитираната литература.
В един вариант изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които активността на ТИРалфа е вредна. Тези методи включват потискане на активността на човешки Т\Ралфа, чрез подкожно прилагане през седмица, на анти-ТИРалфа антитяло, така че нарушението се лекува. Нарушението може да бъде например сепсис, автоимунно заболяване (например ревматоидни артрити, алергия, мултитиплена склероза, автоимунни диабети, автоимунни увеити и нефротичен синдром), инфекциозни болести, малигнизация, отхвърляне на присадка на донора от реципиента, пулмонарно нарушение, костно нарушение, чревно нарушение или сърдечно нарушение.
В друг вариант, изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които активността наТ№алфа е вредна. Тези методи включват потискане на активността на човешки ТИРалфа, чрез подкожно прилагане на антиТ№алфа антитяло и метотрексат, така че нарушението да се лекува. В друг вариант, метотрексатьт се прилага заедно с анти-ТМРалфа антитяло. В друг вариант, метотрексатът се прилага преди прилагането на анти-ТЖалфа антитялото. В още един друг вариант, метотрексатът се прилага след прилагането на антиТЖалфа антитялото.
В предпочитан вариант, анти-ТХРалфа антитялото, използвано за лечение на нарушения, при които активността на ТИЕалфа е вредна, е човешко анти-ТИРалфа антитяло. Още по-добре е дори лечението да се провежда чрез подкожно инжектиране, през седмица на изолирано човешко антитяло или на негова антиген-свързваща част. За предпочитане е антитялото или негова антиген-свързваща част да дисоциират от човешки Т№алфа с Kd от 1 х 10‘8 М или по-малко и Koff скоростна константа от 1 х 10'3 s’1 или по-малко, като и двете са определени чрез повърхностен плазмен резонанс и неутрализират човешката TNFaлφa цитотоксичност в стандартен in vitro L929 анализ, с 1С50 от 1 х ΙΟ’7 М или по-малко. Още подобре е изолираното човешко антитяло или негова антиген свързваща част да дисоциира от човешки ТЖалфа с Ко(Тот 5 х 10-4 s4 или помалко, или още по-добре е с КоЯ.от 1 х 104 s4 или по-малко. Още по-добре е, изолираното човешко антитяло или негова антигенсвързваща част, да неутрализира човешка Т№алфа цитотоксичност в стандартен in vitro L929 анализ с 1С50 от 1 х ΙΟ-8 М или по-малко, а още по-добре е с 1С50 от 1 х ΙΟ-9 М или по-малко, а най-добре е с 1С50 от 1 х 10'10 М или помалко.
В друг предпочитан вариант изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които активността на Т№алфа е вредна, чрез подкожно прилагане на лицето през седмица, на
459 Bl a HCVR да има CDR1 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 8.
В друг вариант изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които 5 активността на ТЖалфа е вредна, чрез подкожно прилагане на лицето, през седмица, на изолирано човешко антитяло или на негова антиген-свързваща част. За предпочитане е антитялото или неговата антиген-свързваща част 10 да съдържа LCVR, включваща аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 1 и HCVR, включваща аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 2. В някои варианти антитялото има IgG 1 константна област от тежката верига или констант15 на област от тежката верига на IgG 4. В други варианти антитялото е Fab фрагмент, F (ab')2 фрагмент или едноверижен Fv фрагмент.
В други варианти изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които прилагането на анти-ТИРалфа антитяло е полезно чрез подкожно прилагане на лицето, през седмица, на едно или повече анти-ТХРалфа антитела или на техни антиген-свързващи части. За предпочитане е антитялото или неговата антиген-свързваща част да съдържа LCVR, притежаваща CDR3 домен, включващ аминокиселинна секвенция, избрана от групата, съставена от SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 30 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26 или HCVR, притежаваща CDR3 домен, включващ 3 5 аминокиселинна секвенция, избрана от групата, съставена от SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34 и SEQ ID NO: 35.
Друг вариант от изобретението се отнася до китове, съдържащи формулировка, включваща фармацевтичен състав. Китовете включват анти-ТЖалфа антитяло и фармацевтично приемлив носител. Китовете съдържат инструкции за подкожно дозиране през седмица на фармацевтичен състав за лечение на нарушение, при което прилагането на анти-ТТЧРалфа антитяло е полезно. В друг вариант изобретението се отнася до китове, съдържащи формулировка, включваща фармацевтичен състав, освен това човешко антитяло или на негова антигенсвързваща част. За предпочитане е антитялото или неговата антиген свързваща част да имат следните характеристики:
а) да дисоциира от човешки ТЯРалфа с KoffOT 1 х IO'3 s'1 или по-малко, както е определено чрез повърхностен плазмен резонанс;
б) да има домен CDR3 от леката верига, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 3 или модифицирана от SEQ ID NO: 3 чрез единично заместване на аланина в позиция 1, 4, 5, 7 или 8, или чрез едно до пет консервативни аминокиселинни замествания, в позиции 1, 3, 4, 6, 7, 8 и/или 9;
в) да има домен CDR3 от тежката верига, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 4 или модифицирано от SEQ ID NO: 4, чрез единично заместване на аланина в позиция 2, 3,4, 5,6, 8, 9, 10 или 11, или чрез едно до пет консервативни аминокиселинни замествания в 20 позиции 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10, 11 и/или 12.
За предпочитане е антитялото или неговата антигенсвързваща част да дисоциира от човешки ТЖалфа с КоЯют 5 х 1 O'4 s-1 или по-малко. Още по-добре е антитялото или неговата антиген- 25 свързваща част да дисоциира от човешки ТЖалфа с Koff от 1 х 10-4 s’1 или по-малко.
В друг вариант изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които активността на ТЖалфа е вредна. Тези методи включват подкожно прилагане на лицето през седмица на човешко антитяло или на негова антиген-свързваща част. За предпочитане е антитялото или неговата антиген-свързваща част да съдържа LCVR, притежаваща CDR3 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 3 или модифицирана от SEQ ID NO: 3 чрез единично заместване на аланин в позиция 1, 4, 5, 7 или 8 и HCVR притежаваща CDR3 домен, включващ аминокиселинната секвенция 40 от SEQ ID NO: 4, или модифицирана от SEQ ID NO: 4, чрез единично заместване на аланина в позиция 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 или 11. Още подобре е освен това LCVR да има CDR2 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ 45 ID NO: 5, а в допълнение HCVR да има CDR2 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 6. Още по-добре е LCVR в допълнение да има CDR1 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 7, 50
66459 Bl включваща анти-ТИРалфа антитяло, метотрексат и фармацевтично приемлив носител. Китовете съдържат инструкции за подкожно дозиране на фармацевтичния състав, за лечение на нарушения, при които е полезно прилагането на 5 анти-Т1МРалфа антитяло.
Друг вариант от изобретението осигурява предварително напълнена спринцовка, съдържаща фармацевтичен състав, включващ антиТИРалфа антитяло и фармацевтично приемлив 10 носител. В друг вариант изобретението осигурява предварително напълнена спринцовка, съдържаща фармацевтичен състав, включващ антиТИРалфа антитяло, метотрексат и фармацевтично приемлив носител. 15
Кратко описание на графиките
Фигури 1А и 1В означават отговорите от American College of Rheumatology 20 (ACR20) и ACR50 на пациенти, страдащи от ревматоидни 20 артрити (RA), след подкожно дозиране с антитялото D2E7, всяка седмица, общо за дванадесет седмици (1А), или подкожно дозиране с антитялото D2E7 и метотрексат през седмица (1В), общо за двадесет и четири седмици. Тези 25 данни показват, че дозирането през седмица е ефективно така, както и ежеседмичното дозиране.
Фигура 2 показва ACR20, ACR50 и ACR70 отговорите на пациенти, страдащи от RA след подкожно дозиране с антитялото D2E7 и мето- 3θ трексат през седмица за двадесет и четири седмици.
Фигури ЗА и ЗВ показват курсовете на лечение на резултата за болезнена става (ЗА) и резултата за подута става (ЗВ) в течение на 25 двадесет и четири седмици, за пациенти, страдащи от RA, след подкожно дозиране с D2E7 и метотрексат през седмица, за двадесет и четири седмици.
Фигура 4 показва резултатите от кратката 40 форма от здравния преглед (SF‘36) от пациенти, страдащи от RA, след подкожно дозиране с антитялото D2E7 и метотрексат през седмица, за двадесет и четири седмици. RP, физична роля; PF, физична функция; ВР, телесна болка; GH, 45 общо здравословно състояние; V, жизненост; SF, обществена длъжност; RE, емоционална роля; и МЕ, психическо здравословно състояние.
Фигура 5 показва процентът на ACR
А отговорите след еднократна венозна инжекция от антитяло D2E7 и метотрексат, при пациенти страдащи от RA.
Подробно описание на изобретението
Това изобретение се отнася до методи за лечение на нарушения, при които прилагането на анти-ТМРалфа антитяло е полезно, включващи прилагането на изолирани човешки антитела или техни антиген-свързващи части, които се свързват с човешки Т\Ралфа с висок афинитет, ниска скорост на дисоциация и силно неутрализират способността така, че нарушението се лекува. Различни варианти от изобретението се отнасят до лечение с антитела и антитяло фрагменти и техни фармацевтични състави.
За да може настоящото изобретение да бъде по-лесно разбрано, най-напред ще бъдат определени някои термини.
Използваният тук термин дозиране се отнася до прилагане на субстанция (например анти-Т№алфа антитяло), за да се постигне терапевтичната цел (например лечението на свързано с ТЪ1Ралфа нарушение).
Използваните тук термини дозов режим през седмица, дозиране през седмица и прилагане през седмица, се отнасят до времето на прилагане на субстанция (например антиТИРалфа антитяло) на пациент, за да се постигне терапевтичната цел (например лечението на свързано с ТИРалфа нарушение). Дозовият режим през седмица няма за цел да включва седмичния дозов режим. За предпочитане е субстанцията да се прилага на всеки 9 '9 дни, по-добре е на всеки IF'7 дни, още по-добре е на всеки 13'5 дни, а най-добре е на всеки 14 дни.
Използваният тук термин комбинирана терапия, се отнася до прилагането на две или повече терапевтични субстанции, например антиТКРалфа антитяло и лекарственият препарат метотрексат. Метотрексатът може да се приложи едновременно със, преди или след прилагането на анти-ТИйалфа антитялото.
Използваният тук термин човешки ТКРалфа (съкратено тук ЬТИРалфа, или просто hTNF), се отнася до човешки цитокин, който съществува като 17 kD секретирана форма и 26 kD мембранно свързана форма, биологично активната форма на които е съставена от тример
459 Bl фрагмента свързани с дисулфиден мост в шарнирната област; (3) Fd фрагмент, съставен от VH и СН1 домени; (4) Fv фрагмент, съставен от VL и VH домени на едното рамо на антитялото, 5 (5) dAb фрагмент (Ward et al., (1989) Nature 341:
544-546), който се състои от VH домен; и (6) изолирана комплементарна детерминираща област (CDR). Освен това, въпреки че двата домена на Fv фрагмента, VL и VH, се кодират от 10 отделни гени, те могат да се свържат, като се използват рекомбинантните методи, чрез синтетичен линкер, който им позволява да бъдат като едноверижна белтъчна верига, в която VL и VH областите са свързани, за да образуват 15 моновалентни молекули (известна като едноверижен Fv (scFv); виж например, Bird et al. (1988) Science 242: 423-426; и Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883). Такива едноверижни антитела са включени също така в термина антиген-свързваща част на антитялото. Включени са също така и други форми на едноверижни антитела, такива като двойни антитела.
Двойните антитела са бивалентни, биспецифични антитела, в които VH и VL домените се експресират в единична полипептидна верига, но като се използва линкер, който е твърде къс, за да позволи свързването между двата домена в същата верига, като по 30 този начин индуцират домените да се свързват с комплементарните домени от друга верига и създава две антиген-свързващи места (виж например, Holliger, Р., et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448; Poljak, R. J., et al. 35 (1994) Structure 2: 112F423).
Освен това антитяло или негова антигенсвързваща част може да е част от по-големи имуноадхезивни молекули, образувани чрез ковалентно или нековалентно свързване на антитялото или на част от антитялото с един или повече други белтъци или пептиди. Примери за такива имуноадхезивни молекули включват използването на стрептавидинова корова област, за да се направи тетрамерна scFv молекула (Kipriyanov, S. М., et al. (1995) Human Antibodies and Hybridomas 6: 93-1) и използване на цистеинов остатък, маркерен пептид и С-крайна полихистидинова опашка, за да се получат бивалентни и биотинилирани scFv молекули (Kipriyanov, S. М., et al. (1994) Mol. Immunol.
от нековалентно свързани 17 kD молекули. Структурата на ТТЧРалфа е описана освен това, например от a, D., et al. (1984) Nature 312: 724729; Davis, J. M., et al. (1987) Biochemistry 26: 1322‘'326; и Jones, E. Y., et al. (1989) Nature 338: 225-228. Терминът човешки ТИРалфа има за цел да включва рекомбинантен човешки ТИРалфа (rh ТИРалфа), който може да се приготви чрез стандартните рекомбинантни методи за експресия или да се закупи от търговската мрежа (R & D Systems, Catalog No 21 O-TA, Minneapolis, MN).
Използваният тук термин антитяло се отнася до имуноглобулинови молекули, включващи четири полипептидни вериги, две тежки (Н) вериги и две леки (L) вериги, свързани помежду си с дисулфидни връзки. Всяка тежка верига е съставена от вариабилна област на тежката верига (тук означена със съкращението като HCVR или VH) и константна област на тежката верига. Константната област на тежката верига е съставена от три домена, CHI, СН2 и СНЗ. Всяка лека верига е съставена от вариабилна област на леката верига (тук означена със съкращението като LCVR или VL) и константна област на леката верига. Константната 25 област на леката верига е съставена от един домен, CL. Областите VH и VL могат да бъдат по-нататък разделени допълнително на области от хипервариабилност, наречени комплементарни детерминиращи области (CDR), разпръснати области, които са по-консервативни, наречени рамкови области (FR). Всяка VH и VL е съставена от три CDRs и четири FRs, организирани от амино-края до карбокси-края в следната последователност: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
Използваният тук термин антигенсвързваща част от антитяло (или просто част от антитяло) се отнася до един или повече фрагмента от антитялото, които запазват 40 способността да се свързват специфично с антигена (например йТИРалфа). Показано е, че антиген-свързващата функция на антитялото може да се изпълни от фрагменти на цялото антитяло. Примери за свързващи фрагменти, 45 които са включени в термина антигенсвързваща част от антитялото включват (1) Fab фрагмент, моновалентен фрагмент, съставен от VL, VH, CL и СН1 домени; (2) F(ab’)2 фрагмент, бивалентен фрагмент, включващ два Fab 50
.... , >V .·
66459 Bl
31:1O47'°58). Части от антитялото, такива като Fab и F (ab')2 могат да се получат от целите антитела, като се използват конвенционални техники, такива като разграждане с папаин или пепсин, респективно на целите антитела. Освен 5 това антитела, части от антитела и имуноадхезивни молекули могат да се получат като се използват стандартните рекомбинантни ДНК техники, които са описани тук.
Използваният тук термин човешко 10 антитяло има за цел да включва антитела, притежаващи вариабилни и константни области, получени от човешки герминативни имуноглобулинови секвенции. Човешките антитела от изобретението могат да включват амино- 15 киселинни остатъци, които не са кодирани от човешки герминативни имуноглобулинови секвенции (например мутации, въведени чрез случаен или място-специфичен мутагенезис in vitro или чрез соматична мутация in vivo), 20 например в CDRs и по-специално CDR3. Обаче използваният тук термин човешко антитяло, няма за цел да включва антитела, в които CDR секвенциите, получени от герминативната линия на други видове бозайници, такива като мишка, 25 са присадени към човешки рамкови секвенции.
Използваният тук термин рекомбинантно човешко антитяло има за цел да включва всички човешки антитела, които са приготвени, експресирани, създадени или изолирани чрез 30 рекомбинантни средства, такива като експресирани антитела чрез използване на рекомбинантен експресионен вектор, трансфектиран в клетка гостоприемник (описан по-нататък в Раздел II, по-долу), антитела изолирани от 35 рекомбинантна, комбинаторна библиотека за човешко антитяло (описани по-нататък в Раздел III по-долу), антитела, изолирани от животно (например мишка), която е трансгенна за човешки имуноглобулинови гени (виж например, 40 Taylor, L. D., et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20: 6287-6295), или антитела получени, експресирани, създадени или изолирани чрез други средства, които включват сплайсинг на човешките имуноглобулинови генни секвенции в 45 сравнение с други ДНК секвенции. Тези рекомбинантни човешки антитела имат вариабилни и константни области, получени от човешки герминативни имуноглобулинови секвенции. Обаче в някои варианти такива рекомбинантни 50 човешки антитела се подлагат на in vitro мутагенезис (или когато се използва животно, трансгенно за човешки 1g секвенции, in vivo соматичен мутагенезис) и по този начин аминокиселинните секвенции на VH и VL областите от рекомбинантните антитела са секвенции, които когато са получени от и се отнасят до човешки герминативни VH и VL секвенции, могат да не съществуват естествено в човешкия антитяло герминативен репертоар in vivo.
Използваният тук термин изолирано антитяло се отнася до антитяло, което по същество е свободно от други антитела, притежаващи различни антигенни специфичности (например изолирано антитяло, което се свързва специфично с ЬПЧРалфа, фактически е свободно от антитела, които се свързват специфично с антигени, различни от ЬЮТалфа). Обаче, изолирано антитяло, което се свързва специфично с ЬТТЧРалфа, може да реагира кръстосано с други антигени, такива като ИТКЕалфа молекули от други видове (дискутирани с подробности подолу). Освен това изолираното антитяло може да е по същество свободно от други клетъчни материали и/или химикали.
Използваният тук термин неутрализиращо антитяло (или антитяло, което неутрализира активността на ЬТ1ЧРалфа) се отнася до антитяло, чието свързване с ИТКРалфа води до инхибиране на биологичната активност на ЬТЖалфа. Това потискане на биологичната активност на ЬТЪТалфа може да се оцени чрез измерване на един или повече индикатори на биологичната активност на йТМРалфа, такива като ЬТЪ1Ралфа-индуцирана цитотоксичност (или in vitro или in vivo), ЬТ1\1Еалфа-индуцирано клетъчно активиране и свързване на ИТКРалфа с ЬТКРалфа рецепторите. Тези индикатори за биологичната активност на ЬТМРалфа могат да се оценят чрез един или повече от няколкото стандартни in vitro или in vivo анализи, известни от областта на техниката (виж Пример 4). За предпочитане е способността на антитялото да неутрализира активността на ЬТ\Ралфа да се оценява чрез инхибиране на индуцираната от ЬТЯРалфа цитотоксичност в L929 клетки. Като допълнение или като алтернативен параметър за активността на ЬТКРалфа може да се оцени способността на антитялото да инхибира индуцираната от йТТЧРалфа експресия на ELAM'
66459 Bl 1 в HUVEC, като мярка за индуцирането от ЬТИЕалфа клетъчно активиране.
Използваният тук термин повърхностен плазмен резонанс се отнася до един оптичен феномен, който позволява да се направи анализ на биоспецифичните взаимодействия в реално време, чрез детектиране на промените в белтъчните концентрации в биосензорен матрикс, например чрез използване на BIAcore system (Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Sweden and Piscataway, NJ). Като допълнително описание, виж Пример 1 и Johnson, U., et al. (1993) Ann. Biol. Clin. 51:19-26; Johnson, U., et al. (1993), Ann. Biol. Clin. 51: 19-26; Johnson, U., et al. (1991) Biotechniques 11: 620-627; Johnson, B., et al. (1995) J. Mol. Recognit. 8: 125 '31; и Johnson, B„ et al. (1991) Anal. Biochem. 198: 268-277.
Използваният тук термин Koff1 се отнася до скоростна константа на дисоциация на антитялото от комплекса антитяло/антиген.
Използваният тук термин Kd се отнася до дисоциационна константа при специфично взаимодействие на антитяло-антиген.
Използваният тук термин молекула нуклеинова киселина има за цел да включва ДНК молекули и РНК молекули. Молекулата нуклеинова киселина може да бъде едноверижна или двойноверижна, но за предпочитане е двойноверижна ДНК.
Използваният тук термин изолирана молекула нуклеинова киселина по отношение на нуклеиновите киселини, кодиращи антитела или части от антитела (например VH, VL, CDR3), които се свързват с ЬТНРалфа, се отнася до молекула нуклеинова киселина, в която нуклеотидните секвенции, кодиращи антитялото или част от антитялото, са свободни от други нуклеотидни секвенции, кодиращи антитела или части от антитела, които се свързват с антигени, различни от ЬТТЧРалфа, които други секвенции могат естествено да фланкират нуклеиновата киселина в човешката геномна ДНК. Следователно, например изолираната нуклеинова киселина от изобретението кодираща VH област от антиЬТИРалфа антитяло не съдържа други секвенции, кодиращи други VH области, които се свързват с антигени различни от ЬТЖалфа.
Използваният тук термин вектор се отнася до молекула нуклеинова киселина, способна да транспортира друга нуклеинова киселина, с която тя е свързана. Един такъв тип вектор е плазмида, който се отнася до циклична двойноверижна кръгова ДНК, в която могат да бъдат лигирани допълнителни ДНК сегменти. Друг тип вектор е вирусният вектор, където могат да бъдат лигирани допълнителни ДНК сегмени във вирусния геном. Някои вектори могат да се реплицират автономно в клетката гостоприемник, в която те са въведени (например бактериалните вектори имат начало за репликацията и епизомалните вектори на бозайниците). Други вектори (например неепизомалните вектори на бозайниците) могат да се интегрират в генома на клетката гостоприемник при въвеждане в клетката гостоприемник и по този начин те се реплицират заедно с генома на гостоприемника.
Нещо повече, някои вектори са способни да насочват експресията на гени, с които те са свързани по оперативен път. Такива вектори тук се отнасят до рекомбинантни експресионни вектори (или просто до експресионни вектори). Обикновено експресионните вектори, които се използват в рекомбинантните ДНК техники, често са под формата на плазмиди. В настоящата спецификация плазмид и вектор могат да се използват като взаимозаменяеми, тъй като плазмидът е най-често използваната форма на вектор. Обаче изобретението има за цел да включва и други такива форми на експресионни вектори като вирусни вектори (например дефектни по репликация ретровируси, аденовируси и аденоасоциирани вируси), които имат еквивалентни функции.
Използваният тук термин рекомбинантна клетка гостоприемник (или просто клетка гостоприемник) се отнася до клетка, в която е въведен рекомбинантен експресионен вектор. Трябва да е ясно, че тези термини се отнасят не само до определен вид клетка, но и до потомството на такава клетка. Тъй като могат да се срещат някои модификации в онаследените поколения, дължащи се или на мутация или поради действието на околната среда, такива поколения фактически могат да не са идентични с родителската клетка, но въпреки това те са в обхвата на термина клетка гостоприемник, който е използван тук.
В следващите подглави са описани в детайли различни варианти от изобретението.
66459 Bl
I. Човешки антитела, които се свързват с човешки TN Еалфа
Това изобретение осигурява методи за лечение на нарушения, при които прилагането на анти-Т\Галфа антитяло е благоприятно. Тези 5 методи включват подкожно прилагане, през седмица, на изолирани човешки антитела или на техни антиген-свързващи части, които се свързват с човешки ТИРалфа с висок афинитет и ниска скорост на дисоциация и с висок капацитет за 10 неутрализиране. За предпочитане е човешките антитела от изобретението да са рекомбинантни, неутрализиращи човешките анти-ИТКРалфа антитела. Най-предпочитаното рекомбинантно, неутрал изиращо антитяло от изобретението тук, 15 се отнася до D2E7 (аминокиселинната секвенция на D2E7 VL областта е показана в SEQ ID NO: 1; аминокиселинната секвенция на D2E7 VH областта е показана в SEQ ID NO: 2). Свойствата на D2E7 са описани от Salfeld et al., U. S. Патент 20 No. 6,090,382, който е включен тук в цитираната литература.
В един вариант изобретението се отнася до лечение на нарушения, при които прилагането на анти-ТКЕалфа антитялото е благоприятно. Тези 25 лечения включват подкожно прилагане, през седмица, на D2E7 антителата и части от антителата, сходни с D2E7 антитела и части от антитела и други човешки антитела и части от антитела с еквивалентни свойства на D2E7, такива, които 30 имат висок афинитет за свързване с йТИРалфа, с ниски дисоциационни кинетики и висок неутрализиращ капацитет. В един вариант изобретението осигурява лечение с изолирано човешко антитяло или негова антиген-свързваща 3 5 част, което дисоциира от човешки TN Еалфа с Kd от 1 х ΙΟ'8 М или по-малко и Koff скоростна константа от 1 х 1 O'3 s_| или по-малко, като и двете са определени чрез повърхностен плазмен резонанс и което неутрализира човешка TNЕалфа 40 цитотоксичност в стандартен in vitro L929 анализ, с 1С50 от I х 10'7М или по-малко. По-добре е изолираното човешко антитяло или неговата антиген-свързваща част да дисоциира от човешки ПЧЕалфа с Ко(Гот 5 х 104 s'1 или по- 45 малко, или още по-добре с Ко(Гот 1 х 10-4 s1 или по-малко. За предпочитане е изолираното човешко антитяло или неговата антигенсвързваща част да неутрализира човешка TNЕалфа цитотоксичност в стандартен in vitro 50
L929 анализ с 1С50 от 1 х 10'8 М или по-малко, още по-добре е с 1С50 от 1 х 10‘9 М или по-малко, а най-добре е с 1С50 от 1 х 10’10 М или по-малко. В предпочитан вариант антитялото е изолирано човешко рекомбинантно антитяло, негова антиген-свързваща част.
От областта на техниката е добре известно, че CDR3 домените от леката и тежка верига на антитялото имат важна роля в специфичността/афинитета на свързване на антитялото за антигена. Съответно, в друг вариант изобретението се отнася до методи за лечение на нарушения, при които прилагането на антиТКЕалфа антитяло е полезно, чрез подкожно прилагане на човешки антитела, които имат ниски дисоциационни кинетики за свързване с ЬТТЧЕалфа и които имат CDR3 домени от леката и тежката верига, които структурно са идентични или сходни с тези от D2E7. Позиция 9 от D2E7 VL CDR3 може да бъде заета от Ala или Thr, без да се повлияе съществено Кoff. Съответно, консенсус мотива за D2E7 VL CDR3 включва аминокиселинната секвенция: Q-R-Y-N-R-A-PY- (Т/А) (SEQ ID NO: 3).
В допълнение позиция 12 от D2E7 VH CDR3 може да бъде заета от Туг или Asn, без да се повлияе съществено Koff. Съответно консенсус мотива за D2E7 VH CDR3 включва аминокиселинната секвенция: V-S-Y-L-S-T-A-SS-L-D-(Y/N) (SEQ ID NO: 4).
Освен това, както е показано в Пример 2, CDR3 доменът от тежката и лека верига на D2E7 е податлив на заместване с единичен аланинов остатък (в позиция 1, 4, 5, 7 или 8, в VL CDR3 или в позиция 2, 3, 4 4, 5, 6, 8, 9, 10 или 11, в VH CDR3), без да се повлиява по същество Koff. Освен това, специалистите в областта ще оценят, че като се приема дадената податливост на D2E7 VL и VH CDR3 домените за замествания с аланин, може да е възможно и заместването на други аминокиселини в CDR3 домените, докато все още е запазена ниската скоростна константа на дисоциация на антитялото, по-специално замествания с консервативни аминокиселини. Използваният тук термин консервативно аминокиселинно заместване е това, при което един аминокиселинен остатък е заместен с друг аминокиселинен остатък, който има сходна странична верига. Семействата от аминокиселинни остатъци, притежаващи сходни странични
Ш
66459 Bl вериги, определени от областта на техниката, включват базични странични вериги (например лизин, аргинин, хистидин), кисели странични вериги (например аспаргинова киселина, глутаминова киселина), незаредени полярни странични вериги (например глицин, аспаргин, глутамин, серии, треонин, тирозин, цистеин), неполярни странични вериги (например аланин, валии, левцин, изолевцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-разклонени странични вериги (например треонин, валин, изолевцин) и ароматни странични вериги (например тирозин, фенилаланин, триптофан, хистидин).
За предпочитане е не повече от едно до пет консервативни аминокиселинни замествания да се правят в D2E7 VL и/или VH CDR3 домените. По-добре е не повече от едно до три консервативни аминокиселинни замествания да се правят в D2E7 VL и/или VH CDR3 домените. В допълнение, не трябва да се правят консервативни аминокиселинни замествания в аминокиселинни позиции, критични за свързването с ЬТКРалфа. Позициите 2 и 5 от D2E7 VL CDR3 и позиции 1 и 7 otD2E7 VH CDR3 изглежда, че са критични за взаимодействието с йТИРалфа и следователно за предпочитане е да не се правят консервативни аминокиселинни замествания в тези позиции (въпреки че заместване на аланин в позиция 5 от D2E7 VL CDR3 е допустимо, както е описано по-горе) (виж U. S. Патент No. 6,090,382).
Съответно в друг вариант, изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които прилагането на анти-ТИРалфа антитяло е полезно, чрез подкожно прилагане, през седмица, на изолирано човешко антитяло или на негова антиген-свързваща част. За предпочитане е антитялото или неговата антиген-свързваща част да имат следните характеристики:
а) да дисоциира от човешки ТЖалфа с Kffскоростна константа от 1 х IO’3 s'1 или помалко, както е определено чрез повърхностен плазмен резонанс;
б) да има CDR3 домен от леката верига, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 3 или модифицирана от SEQ ID NO: 3, чрез единично заместване на аланин в позиция 1, 4, 5, 7 или 8, или чрез едно до пет консервативни аминокиселинни замествания в позиции
1, 3, 4, 6, 7, 8 и/или 9;
в) да има CDR3 домен от тежката верига, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 4 или модифицирана от SEQ ID NO: 4, 5 чрез единично заместване на аланин в позиция 2, 3, 4, 5,6, 8,9, 10 или 11, или чрез едно до пет консервативни аминокиселинни замествания в позиции 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10, 11 и/или 12.
Още по-добре е антитялото или неговата 10 антиген-свързваща част да дисоциира от човешки ТНРалфа с KoffOT 5 х 10'4 s'1 или помалко. Дори още по-добре е антитялото или неговата антиген-свързваща част да дисоциира от човешки ТПМЕалфа с К. от 1 х 1 O'4 s'1 или по15 малко.
В друг вариант изобретението се отнася до методи за лечение на нарушения, при които прилагането на анти-ТЖалфа е полезно, чрез подкожно прилагане, през седмица, на изолирано 20 човешко антитяло или на негова антигенсвързваща част. За предпочитане е, антитялото или неговата антиген-свързваща част да съдържат вариабилна област от леката верига (LCVR), притежаваща CDR3 домена, включващ 25 аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 3 или модифицирана от SEQ ID NO: 3, чрез единично заместване на аланин в позиция 1,4, 5,7 или 8, и вариабилна област от тежката верига (HCVR), притежаваща CDR3 домен, включващ 30 аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 4, или модифицирана от SEQ ID NO: 4, чрез единично заместване на аланина в позиция 2,3, 4, 5, 6, 8,9, 10 или 11. За предпочитане е освен това LCVR да има CDR2 домен, включващ 35 аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 5 (т. е. D2E7 VL CDR2), а освен това HCVR да има CDR2 домен, включващ аминокиселинната секвенция на SEQ ID NO: 6 (т. е. D2E7 VH CDR2). Още по-добре е освен това LCVR да има 40 CDR1 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 7 (т. е. D2E7 VL CDR1), a HCVR да има CDR1 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 8 (т. е. D2E7 VH CDR1). За предпочитане е очер45 таните в рамка области на VL да са от семейството на VK.I човешка герминативна линия, още по-добре от А20 човешка герминативна линия на Vk гена, а най-добре от D2E7 VL секвенциите, очертани в рамка, показани на Фигури 1А и 1В 50 от D. S. ПатентИо. 6,090,382. За предпочитане е
1
66459 Bl очертаните в рамка области за VH да са от семейството VH3 човешка герминативна линия, още по-добре е да са от DP-31 човешка герминативна линия на VH гена, а най-добре е да са от D2E7 VH очертаните в рамка секвенции, 5 показани на Фигури 2А и 2В U. S. Патент No. 6,090,382.
В друг вариант изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които прилагането на анти-ТЪТалфа антитяло е полезно, 10 чрез подкожно прилагане, през седмица, на изолирано човешко антитяло или на негова антиген-свързваща част. За предпочитане е антитялото или неговата антиген-свързваща част да съдържа вариабилна област от леката верига 15 (LCVR), включваща аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 1 (т. е. D2E7 VL) и вариабилна област от тежката верига (HCVR), включваща аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 2 (т. е. D2E7 VH). В някои варианти антитялото 20 включва константна област от тежката верига, такава като IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM или IgD константна област. За предпочитане е константната област на тежката верига да е IgG 1 константна област от тежката верига или IgG4 25 константна област от тежката верига. Освен това антитялото може да включва константна област от леката верига или константна област от капа леката верига, или константна област от ламбда леката верига. За предпочитане е антитялото да 30 включва константна област от капа леката верига.
Съответно, частта от антитялото може да е например Fab фрагмент или едноверижен Fv фрагмент.
В друг вариант изобретението осигурява 35 методи за лечение на нарушения, при които прилагането на анти-ТПРалфа антитяло е полезно, чрез подкожно прилагане, през седмица, на изолирано човешко антитяло, или на негови антиген-свързващи части. За предпочитане е 40 антитялото или неговата антиген-свързваща част да съдържа VL и VH CDR3 домени, отнасящи се до D2E7, например антитела или техни антигенсвързващи части, с вариабилна област от леката верига (LCVR), притежаваща CDR3 домен, 45 включващ аминокиселинна секвенция, избрана от групата, съставена от SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID 50
NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 и SEQ ID NO: 26 или вариабилна област от тежката верига (HCVR), притежаваща CDR3 домен, включващ аминокиселинна секвенция, избрана от групата, съставена от SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34 и SEQ ID NO: 35.
Антитяло или част от антитяло от изобретението може да е дериватизирано или свързано с друга функционална молекула (например друг пептид или белтък). Съответно, планирано е антителата и частите от антителата от изобретението да включват дериватизирани и по друг начин модифицирани форми на човешки анти-ИТ^алфа антитела, описани тук, включващи имуноадхезивни молекули. Например антитяло или част от антитяло от изобретението може да бъде функционално свързана (чрез химично свързване, генетично сливане, нековалентно свързване или по друг начин) с една или повече други молекулни единици, такива като друго антитяло (например биспецифично или двойно тяло), средство за детектиране, цитотоксично средство, фармацевтично средство и/или белтък или пептид, който може да медиира свързването на антитялото или на част от антитялото с друга молекула (такава като стрептавидинова корова област или полихистидинова опашка).
Един тип дериватизирано антитяло се получава чрез крос-свързване на две или повече антитела (от един и същи вид или от различни видове, например, за да се създадат биспецифични антитела). Подходящи крослинкери включват тези, които са хетеробифункционални, притежаващи две отчетливи реактивни групи, разделени чрез подходящ спейсер (например тмалеимидобензоил^-хидроксисукцинимид естер) или хомобифункционални (например дисукцинимидил суберат). Такива линкери са налични от Pierce Chemical Company, Rockford, IL.
Полезни детектиращи средства, чрез които антитялото или част от антитялото от изобретението може да бъде дериватизирано, включват флуоресцентни съединения. Примерни флуоресцентни детектиращи средства включват флуоресцеин, флуоресцеин изотиоцианат, родамин, 5-диметиламин-1-нафталенсулфонил хлорид, фикоеритрин и други подобни. Едно антитяло може да бъде дериватизирано също така с детектиращи ензими, такива като алкална фосфатаза, пероксидаза от хрян, глюкозооксидаза и други подобни. Когато антитялото е дериватизирано с детектиращи ензими, то се детектира чрез добавяне на допълнителни реагенти, които ензимът използва, за да се получи реакционен продукт, който може да се детектира.
Например когато присъства като детектиращо средство пероксидаза от хрян, добавянето на водороден пероксид и диаминобензидин, води до получаването на цветен продукт от реакцията, който може да се детектира. Антитялото може да бъде дериватизирано също така с биотин и да се детектира чрез индиректно измерване на свързването с авидин или стрептавидин. 20
II. Експресия на антитела
Антитяло или част от антитяло от изобретението може да се получи чрез рекомбинантна експресия на леката и тежка верига от имуноглобулиновите гени в клетка гостоприемник. За да се експресира рекомбинантно антитяло, клетката гостоприемник се трансфектира с един или повече рекомбинантно експресионни вектори, носещи ДНК фрагменти, кодиращи имуноглобулиновата лека и тежка верига на антитялото, така че леката и тежката верига се експресират в клетката гостоприемник и се секретират предимно в средата, в която са култивирани клетките гостоприемници, от която среда могат да се получат антителата. Използват 3 5 се стандартни рекомбинантни ДНК методологии за получаване на гени за леката и тежка верига на антитялото, включване на тези гени в рекомбинантни експресионни вектори и въвеждане на векторите в клетки гостоприемници, като тези 40 описани от Sambrook, Fritsch and Maniais (eds), Molecular Cloning; A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor, N. Y., (1989), Ausubel, F. M. et al. (eds.) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates, (1989) и в 45 U. S. Патент No. 4,816,397 от Boss et al.
За да се експресира D2E7 или сходното с D2E7 антитяло, най-напред се получават ДНК фрагменти, кодиращи вариабилните области на леката и тежка верига. Тези ДНКи могат да се 50
459 В1 получат чрез амплифициране и модифициране на вариабилните секвенции от герминативната линия на леката и тежка верига, като се използва полимеразната верижна реакция (PCR).
Герминативните ДНК секвенции за вариабилните области на гените за леката и тежка верига са известни от областта на техниката (виж например, the Vbase human germline sequence database; виж също така Kabat, E. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U. S. Department of Health and Human Services, N1H Publication No. 9T3242; Tomlinson, 1. M., et al. (1992) The Repertoire of Human Germline VH Sequences Reveals about Fifty Groups of VH Segments with Different Hypervariable Loops J. Mol. Biol. 227: 776 798; и Cox, J. P. L. et al. (1994) A Directory of Human Germ-line V78 Segments Reveals a Strong Bias in their Usage Eur. J. Immunol. 24: 827‘836; като съдържанието на всяка една от които е включено специално в цитираната литература). За да се получи ДНК фрагмент, кодиращ вариабилната област на тежка верига на D2E7 или на сходното с D2E7 антитяло, чрез стандартен PCR се амплифицира представител на VH3 семейството на човешки герминативни VH гени. Най-добре е да се амплифицира DP-31 VH герминативната секвенция. За да се получи ДНК фрагмент, кодиращ вариабилната област на леката верига 30 на D2E7 или на сходното с D2E7 антитяло чрез стандартен PCR се амплифицира представител на VK1 семейството на човешки герминативни VL гени. Най-добре е да се амплифицира А20 VL герминативната секвенция. PCR праймерите, подходящи за използване при амплификация на DP-31 герминативната секвенция VH и А20 герминативната VL секвенция могат да се конструират въз основа на нуклеотидните секвенции, описани в цитираната литература погоре, като се използват стандартните методи.
След като вече са получени герминативните VH и VL фрагменти, тези секвенции могат да се променят чрез мутация, за да кодират D2E7 или сходните с D2E7 аминокиселинни секвенции, описани тук. Аминокиселинните секвенции, кодирани от герминативните VH и VL ДНК секвенции, най-напред се сравняват с D2E7 или сходните с D2E7 VH и VL аминокиселинни секвенции, за да се идентифицират аминокиселинните остатъци в D2E7 или сходната с D2E7
66459 Bl секвенция, които се различават от герминативната линия. След това, се променят чрез мутация подходящите нуклеотиди от герминативните ДНК секвенции така, че мутиралата герминативна секвенция, кодира D2E7 или сходната с D2E7 5 аминокиселинна секвенция, като се използва генетичният код, за да се определи какви нуклеотидни промени трябва да се направят. Мутагенезисът на герминативните секвенции се провежда чрез стандартни методи, такива като 10 PCR-медииран мутагенезис (при който мутантните нуклеотиди се включват в PCR праймерите така, че PCR продуктът съдържа мутациите) или чрез място-насочен мутагенезис.
След като вече се получат ДНК 15 фрагментите, кодиращи D2E7 или сходните с D2E7 VH и VL сегменти (чрез амплификация и мутагенезис на герминативните VH и VL гени, както е описано по-горе), тези ДНК фрагменти могат след това да се манипулират чрез 20 стандартните рекомбинантни ДНК техники, например за да се превърнат вариабилните области на гените до гени с цялата дължина на антитяло веригата, до гени за Fab фрагменти или до scFv ген. При тези манипулации VL- или VH- 25 кодиращият ДНК фрагмент се свързва по оперативен път с друг ДНК фрагмент, кодиращ друг белтък, такъв като константна област от антитяло или гъвкав линкер. Използваният тук термин свързан по оперативен път, използван 30 в този контекст, означава, че два ДНК фрагмента са свързани така, че аминокиселинните секвенции, кодирани от двата ДНК фрагмента остават в рамка.
Изолираната ДНК, кодираща VH областта 3 5 може да се превърне в ген с пълната дължина на тежката верига, чрез свързване по оперативен път на VH-кодиращата ДНК с друга ДНК молекула, кодираща константните области (CH 1, СН2 и СНЗ) на тежката верига. Секвенциите на гените за 40 константната област на човешката тежка верига са известни от областта на техниката (виж например, Kabat, Е. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U. S. Department of Health and Human Services, 45 NIH Публикация No. 91-3242), а ДНК фрагменти, включващи тези области могат да се получат чрез стандартна PCR амплификация. Константната област на тежката верига може да бъде IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM или IgD 50 константна област, но най-добре е да е IgGI или IgG4 константна област. За гена на тежката верига от Fab фрагмента, VH-кодиращата ДНК, може да бъде свързана по оперативен път с друга ДНК молекула, кодираща само константната СН1 област от тежката верига.
Изолираната ДНК, кодираща VL областта може да се превърне в ген с цялата дължина на леката верига (така както и в ген с леката верига на Fab), чрез свързване по оперативен път на VL-кодиращата ДНК с друга ДНК молекула, кодираща константната област на леката верига, CL. Секвенциите на гените за константната област на човешката лека верига са известни от областта на техниката (виж например, Kabat, Е. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U. S. Department of Health and Human Services, NIH Публикация No. 91‘3242), а ДНК фрагментите, включващи тези области могат да се получат чрез стандартна PCR амплификация. Константната област на леката верига може да е капа или ламбда константна област, но най-добре е да е капа константна област.
За да се създаде scFv ген, VH- и VL ДНК кодиращите фрагменти се свързват по оперативен път с друг фрагмент, кодиращ гъвкав линкер, например кодиращ аминокиселинната секвенция (Gly4-Ser)3, така че VH и VL секвенциите могат да се експресират като съседен едноверижен белтък с VL и VH области, свързани чрез гъвкав линкер (виж например, Bird et al. (1988) Science 242 : 423’426; Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 58795883; McCafferty et al., Nature (1990) 348: 552554).
За да се експресират антитела или части от антитела от изобретението, ДНКи кодиращи част или цялата дължина на леките и тежки вериги, получени както е описано по-горе се включват в експресионни вектори така, че гените са свързани по оперативен път с транскрипционни и транслационни контролни секвенции. В този контекст терминът свързан по оперативен път означава, че генът за антитялото е лигиран във вектор, така че транскрипционните и транслационни контролни секвенции във вектора, изпълняват своята функция да регулират транскрипцията и транслацията на гена за антитялото. Експресионният вектор и експресионните . ·,.»;^*.ς.»ι».^®ί«Λιτ»4Η»ίΐΛΛ·Λί>12Λ;νΚίω«(ΐΙΛι*τ.;4Λ·^-..·.....·......
контролни секвенции се избират така, че да са съвместими с използваната за експресия клетка гостоприемник. Генът за леката верига на антитялото и генът за тежката верига на антитялото могат да се включат в отделен вектор или найчесто и двата гена се включват в един и същи експресионен вектор. Гените за антителата се включват в експресионния вектор чрез стандартните методи (например лигиране на комплементарни рестрикционни места в генния фрагмент за антитялото и вектора или чрез лигиране на тъп край, ако не присъстват рестриктазни места). Преди въвеждане на D2E7 или на сходните с D2E7 секвенции от леката или тежка верига, експресионният вектор вече може да съдържа секвенции за константната област на антитялото. Например един подход за превръщане на D2E7 или на сходните с D2E7 VH и VL секвенции в гени с пълната дължина на антитялото, е те да се включат в експресионните 20 вектори, вече кодиращи съответно константните области на леката и тежка верига, така че VH сегментът е свързан по оперативен път със СН сегмента(ите) във вектора, a VL сегментът е свързан по оперативен път с CL сегмента във 25 вектора. В допълнение или съответно, рекомбинантният експресионен вектор може да кодира сигнален пептид, който улеснява секрецията на антитяло веригата от клетката гостоприемника. Генът за антитяло веригата може да се клонира във вектор така, че сигналният пептид да е свързан в рамка с аминокрая в гена за антитяло веригата. Сигналният пептид може да е имуноглобулинов сигнален пептид или хетероложен сигнален пептид (т. е., сигнален пептид от неимуноглобулинов белтък).
В допълнение към гените за веригата на антитялото, рекомбинантният експресионен вектор от изобретението носи регулаторни секвенции, които контролират експресията на гените за веригата на антитялото в клетката гостоприемник. Използваният тук термин регулаторна секвенция има за цел да включва промотори, енхансери и други експресионни контролни 45 елементи (например полиаденилирани сигнали), които контролират транскрипцията или транслацията на гените за веригата на антитялото. Такива регулаторни секвенции са описани например от Goeddel; Gene Expression Technology: Methods 50
459 Bl in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, C A (1990). За специалистите в областта ще е ясно, че конструирането на експресионен вектор, включващ селекция на регулаторни секвенции 5 може да зависи от такива фактори като избора на клетка гостоприемник, която ще се трансформира, нивото на експресия на желания белтък и т.н. Предпочитани регулаторни секвенции за експресия в клетки от бозайник 10 като гостоприемник включва вирусни елементи, които управляват високи нива на белтъчна експресия в клетките от бозайник, такива като промотори и/или енхансери, получени от цитомегаловирус (CMV) (такива като CMV 15 промотор/енхансер), Simian Virus 40 (S V40) (такива като S V40 промотор/енхансер), аденовирус, (например, аденовирусният главен късен промотор (AdMLP)) и полиома. За допълнително описание на вирусните регулаторни елементи и техните секвенции, виж например U. S. Патент No. 5,168,062 от Stinski, U. S. Патент No. 4,510,245 от Bell et al. и U. S. Патент No. 4,968,615 от Schaffner et al.
В допълнение към гените за веригата на антитялото и регулаторните секвенции, рекомбинантните експресионни вектори от изобретението могат да носят допълнителни секвенции, такива като секвенции, които регулират репликацията на вектора в клетките гостоприемници (например начала на репликация) и избрани маркерни гени. Подбраните маркерни гени улесняват селекцията на клетките гостоприемници, в които е въведен вектора (виж например, U. S. Патенти Nos. 35 4,399,216,4,634,665 и 5,179,017, всички от Axel et al.). Например обикновено селектираният маркерен ген придава резистентност към лекарствените препарати, такива като G418, хигромицин или метотрексат, на клетката госто40 приемник, в която е въведен вектора. Предпочитани селективни маркерни гени включват гена за дихидрофолат редуктазата (DHFR) (за използване в dhfr-клетки гостоприемници с метотрексат селекция/амплификация) и нео гена (за G418 селекция).
За експресия на леката и тежка верига експресионният вектор(и), кодиращи тежката и лека вериги се трансфектира в клетка гостоприемник чрез стандартните техники. Различните форми на термина трансфекция имат за цел да <
66459 Bl включват разнообразни техники, които се използват обикновено за въвеждане на екзогенна ДНК в прокариотната или еукариотната клетка гостоприемник, например електропорация, калциево-фосфатна преципитация, DEAE- 5 декстран трансфекция и други подобни. Въпреки че теоретично е възможно антителата от изобретението да се експресират или в прокариотни, или в еукариотни клетки гостоприемници, найпредпочитана е експресията на антителата в 10 еукариотни клетки, а най-добре в клетки гостоприемници от бозайник, защото такива еукариотни клетки и по-специално клетките от бозайник са по-надеждни от прокариотните клетки за сглобяването и секрецията на правилно 15 нагънатото и имунологично активно антитяло. Показано е, че прокариотната експресия за гените на антитялото не е ефективно за получаване на високи добиви от активно антитяло (Boss, М. А. and Wood, С. R. (1985) Immunology Today 6: 12- 20 13).
Предпочитани клетки гостоприемници от бозайник за експресия на рекомбинантните антитела от изобретението включват клетки от яйчник на Китайски хамстер (СНО клетки) 25 (включващи dhfr-CHO клетки, описани от Urlaub и Chasin, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4216‘4220, използвани c DHFR селективен маркер, например както е описано от R. J. Kaufman и Р. A. Sharp (1982), Mol. Biol. 159:601- 30 621), NSO миеломни клетки, COS клетки и SP2 клетки. Когато рекомбинантни експресионни вектори, кодиращи гените за антитялото се въведат в клетки гостоприемници от бозайник, антителата се получават чрез култивиране на 35 клетките гостоприемници за период от време, достатъчен за да се осъществи експресията на антитялото в клетките гостоприемници или още по-добре секрецията на антитялото в културалната среда, в която растат клетките гостоприемници. 40 Антителата могат да се получат в културалната среда, като се използват стандартните методи за пречистване на белтък.
Клетките гостоприемници могат да се използват също така и за получаване на части от 45 интактни антитела, такива като Fab фрагменти или scFv молекули. Ясно е, че различните по-горе процедури са в обхвата на настоящото изобретение. Например може да е необходимо да се трансфектира клетка гостоприемник с ДНК, 50
А кодираща или леката верига или тежката верига (но не и двете) на антитялото от изобретението. Могат да се използват също така и рекомбинантни ДНК технологии, за да се отстрани част или цялата ДНК, кодираща едната или и двете леката и тежката верига, която не е необходима за свързване с ЬТНРалфа. Молекулите, експресирани от такива скъсени ДНК молекули са включени също така за антителата от изобретението. В допълнение могат да се получат бифункционални антитела, в които една тежка и една лека верига са на антитяло от изобретението, а другата тежка и лека верига са специфични за антиген, различен от йТИРалфа, чрез кръстосано свързване на антитяло от изобретението с второ антитяло, чрез стандартните химични методи за кръстосано свързване.
В предпочитана система за рекомбинантна експресия на антитяло или на негова антигенсвързваща част от изобретението се въвежда рекомбинантен експресионен вектор в dhfr-CHO клетки, чрез калциево-фосфатна медиирана трансфекция, кодиращ както тежката верига на антитялото, така и леката верига на антитялото. В рекомбинантния експресионен вектор, всеки един от гените за тежката и леката верига на антитялото е свързан по оперативен път с CM V енхансерни/AdMLP промоторни регулаторни елементи, за да се активират високи нива на транскрипция на тези гени. Рекомбинантният експресионен вектор носи също така DHFR ген, който позволява селекция на СНО клетки, които са трансфектирани с вектора, като се използва метотрексат селекция/амплификация. Селективно трансформираните клетки гостоприемници се култивират, за да се осъществи експресията на тежката и леката верига на антитялото и интакгното антитяло се получава в културалната среда. Използват се стандартни молекулярно биологични техники, за да се приготви рекомбинантен експресионен вектор, за да се трансфектират клетките гостоприемници, за да се селектират трансформантите, за да се култивират клетките гостоприемници и за да се получи антитялото от културалната среда.
III. Избор на рекомбинантни човешки антитела
Рекомбинантните човешки антитела от изобретението в допълнение към D2E7 или неговата антиген-свързваща част, или сходни с
D2E7 антитела, описани тук, могат да се изолират чрез скриниране на библиотека от рекомбинантни комбинаторни антитела, предимно на scFv фагов дисплей библиотека, получена чрез използване на човешки VL и VH кДНКи, получени от иРНК от човешки лимфоцити. Методологиите за получаване и скриниране на такива библиотеки са известни от областта на техниката. В допълнение към наличните в търговската мрежа китове за създаване на фагов дисплей библиотеки (например, Pharmacia Recombinant Phage Antibody System, Каталожен No. 27-940001; и Stratagene SurfZAP™ phage display kit, Каталожен No. 240612), примери за методи и реагенти, особено податливи за използване при създаването и скринирането на антитяло дисплей библиотеки, могат да се намерят например в Ladner et al. U. S. Патент No. 5,223,409; Kang et al., PCT Публикация No. WO 1992/018619; Dower et al., PCT Публикация No. WO 1991/017271; 20 Winter et al., PCT Публикация No. WO 1992/ 020791; Markland et al., PCT Публикация No. WO 1992/015679; Breitling et al., PCT Публикация No. WO 1993/001288; McCafferty et al., PCT Публикация No. WO 1992/001047; Garrard et al., PCT Публикация No. WO 1992/009690; Fuchs et al., (1991) Bio/Technology 9: 1370-1372; Hay et al., (1992) Hum Antibod Hybridomas 3:81-85; Huse et al., (1989) Science 246: 1275-1281; McCafferty et al., Nature (1990) 348: 552-554; Griffiths et al., (1993) EMBO J 12:725-734; Hawkins et al., (1992) J Mol Biol 226: 889-896; Clackson et aL, (1991) Nature 352: 624-628; Gram et al., (1992) PNAS 89: 3576-3580; Garrard et al., (1991) Bio/Technology 9: 1373-1377; Hoogenboom et al., (1991) 35 Nucl Acid Res 19: 4133-4137; и Barbas et al., (1991) PNAS 88: 7978-7982.
В предпочитан вариант, за да се изолират човешки антитела с висок афинитет и ниска скоростна константа на дисоциация за ЬТМЕалфа, 40 най-напред се използва мишо анти-йТИРалфа антитяло, притежаващо висок афинитет и ниска скоростна константа на дисоциация за ЬТИРалфа (например МАК 195, хибридома, която има депозитен номер ЕСАСС 87 050801), за да се 45 изолират секвенции от човешка тежка и лека верига, притежаващи сходна свързваща активност по отношение на ИТИРалфа, като се използват епитоп импринтинг методите, описани от Hoogenboom et al., РСТ Публикация No. WO 50
459 Bl
1993/006213. Използваните в този метод библиотеки от антитела са предимно scFv библиотеки, приготвени и скринирани както е описано от McCafferty et al., РСТ Публикация 5 No. WO 1992/001047, McCafferty et aL, Nature (1990) 348; 552-554; и Griffiths et al, (1993) EMBO J 12:725'734. За предпочитане е тези scFv антитяло библиотеки да се скринират чрез използване на рекомбинантен човешки ТИРалфа 10 като антиген.
След като най-напред се изберат човешките VL и VH сегменти, провеждат се комбинирани и съответстващи експерименти, при които различни части от първоначално 15 избраните VL и VH сегменти се скринират за свързване с йТИРалфа, за да се изберат предпочитаните VL/VH двойки комбинации. В допълнение, за да се подобрят по-нататък афинитетът и/или ниската скоростна константа на дисоциация за свързване с йТИРалфа, VL и VH сегментите от предпочитаната VL/VH двойка(и), могат произволно да се променят чрез мутация, за предпочитане в CDR3 областта на VH и/или VL, чрез метод, аналогичен на метода за соматична in vivo мутация, отговорен за афинитетното съзряване на антителата по време на естествения имунен отговор. Това in vitro афинитетно съзряване може да се осъществи чрез амплифициране на VH и VL областите, като 30 се използват PCR праймери, комплементарни съответно на VH CDR3 или на VL CDR3, които праймери са с лепливи краища със случайна смес от четири нуклеотидни бази в някои позиции така, че получените PCR продукти да кодират VH и VL сегментите, в които са въведени произволни мутации във VH и/или VL CDR3 областите. Тези произволни мутации в VH и VL сегментите, могат да се скринират отново за свързване с ЬТИРалфа и могат да се изберат секвенции, които показват висок афинитет и ниска скоростна константа на дисоциация за свързване с ЬТИРалфа.
След скринирането и изолирането на антийТИРалфа антитяло от изобретението от рекомбинантната имуноглобулинови дисплей библиотека, може да се получи нуклеинова киселина, кодираща избраното антитяло от дисплей пакета (например от фаговия геном) и да се субклонира в други експресионни вектори чрез стандартните рекомбинантни ДНК техники.
7
66459 Bl
Ако е необходимо по-нататък нуклеиновата киселина може да се използва, за да се създадат други антитяло форми от изобретението (например свързани с нуклеиновата киселина, кодираща допълнителни имуноглобулинови 5 домени, такива като допълнителни константни области). За да се експресира рекомбинантно човешко антитяло, изолирано чрез скриниране на комбинаторна библиотека, ДНК кодираща антитялото се клонира в рекомбинантен експр- 10 есионен вектор и се въвежда в клетки гостоприемници от бозайник, както е описано подробно в детайли в Глава II по-горе.
IV. Фармацевтични състави и фармацевтично приложение 15
Антителата и части от антителата от изобретението могат да се включат във фармацевтични състави, подходящи за прилагане на лице, съгласно методите описани тук, например за подкожно дозиране, през седмица. Типично е 20 фармацевтичният състав да включва антитяло (или част от антитяло) от изобретението и/или метотрексат и фармацевтично приемлив носител. Използваният тук термин, фармацевтично приемлив носител включва всеки един и всички 25 разтворители, дисперсионна среда, покрития, антибактериални и противогъбични средства, изотонични и абсорбционно задържащи средства и други подобни, които са физиологично съвместими и са подходящи за прилагане на лице, 30 съгласно методите описани тук. Примери за фармацевтично приемливи носители включват едно или повече от вода, сол, фосфатно-солеви буфер, декстроза, глицерол, етанол и други подобни, така както и комбинации от тях. В много 35 случаи за предпочитане е в състава да се включат изотонични средства, например, захари, полиалкохоли такива като манитол, сорбитол или натриев хлорид. Фармацевтично приемливите носители могат по-нататък да включват минорни 40 количества от допълнителни субстанции, такива като овлажняващи или емулгиращи средства, консерванти или буфери, които увеличават живота или ефективността на антитялото или на частта от антитялото. 45
Съставите от това изобретение могат да имат разнообразни форми. Те включват например течни, полутечни и твърди дозирани форми, такива като течни разтвори (например инжекционни и инфузионни разтвори), дисперсии 5 0 или суспензии, таблетки, пилюли, прахове, липозоми и супозитории. Предпочитаната форма зависи от начина, по който е планирана да се приложи и терапевтичното приложение. Предпочитаните типични състави са под формата на инжекционни или инфузионни разтвори, такива като състави сходни с тези, използвани за пасивна имунизация на хора с други антитела. Предпочитаният начин на приложение е парентерално (например интравенозно, подкожно, интраперитонеално, интрамускулно). В предпочитан вариант антитялото се прилага чрез интравенозна инфузия или инжекция. В друг предпочитан вариант антитялото се прилага чрез интрамускулна инжекция. В особено предпочитан вариант антитялото се прилага чрез подкожна инжекция (например подкожна инжекция през седмица).
Терапевтичните състави нормално трябва да са стерилни и стабилни при условията на производство и съхранение. Съставите могат да бъдат формулирани като разтвор, микроемулсия, дисперсия, липозоми или като други общоприети структури, подходящи за висока концентрация на лекарствения препарат. Стерилните инжекционни разтвори могат да се приготвят чрез включване на активно съединение (например антитяло или част от антитяло) в необходимото количество, в подходящ разтворител, с една или комбинация от съставки, изброени по-горе, както е необходимо, след филтърна стерилизация. Обикновено дисперсиите се приготвят чрез включване на активното съединение в стерилен носител, който съдържа основна дисперсионна среда и необходимите други съставки от тези, изброени по-горе. В случай на стерилни прахове за получаване на стерилни инжекционни разтвори, предпочитаните методи за приготвяне са изсушаване под вакуум и изсушаване чрез замразяване, които водят до получаване на прах от активната съставна част, плюс каквато и да е допълнителна желана съставка от предварително стерилизирания чрез филтруване техен разтвор. Типичният флуидитет на разтвора може да се поддържа например чрез използване на покритие, такова като лектин, чрез поддържане на нужния размер на частиците в случай на дисперсия и чрез използване на сърфактанти. Продължителна абсорбция на инжекционните
66459 Bl състави може да се постигне чрез включване в състава на средство, което задържа абсорбцията, например моностеаратни соли и желатин.
Антителата и частите от антителата от изобретението могат да се прилагат чрез 5 различни методи, известни от областта на техниката, въпреки че за много терапевтични приложения предпочитаният път/начин на прилагане е чрез подкожна инжекция. За специалистите в областта ще е ясно, че пътят/ 10 начинът на прилагане ще варира в зависимост от желаните резултати.
В някои варианти активното съединение може да се приготви с носител, който ще протектира съединението срещу бързо 15 освобождаване, такъв като формулировка с контролирано освобождаване, включваща импланти, трансдермални пластири и микрокапсулирани системи да доставяне. Могат да се използват биодеградиращи, биосъвмес- 20 и допълнителни активни съединения. В някои варианти антитялото или част от антитялото от изобретението е формулирано едновременно и/ или се прилага едновременно с едно или повече допълнителни терапевтични средства. Например анти-ЬТМЕалфа антитялото или част от антитялото от изобретението може да се формулира едновременно с и/или приложи едновременно с метотрексат, с едно или повече допълнителни антитела, които се свързват с други мишени (например антитела, които се свързват с други цитокини или които се свързват с клетъчно повърхностни молекули), с един или повече цитокини, с разтворим ТИРалфа рецептор (виж например, РСТ Публикация No. WO 1994/ 006476) и/или с едно или повече химични средства, които потискат продукцията или активността на йТПРалфа (такива като циклохексанилиден деривативи, както е описано в РСТ Публикация No. WO 1993/019751). Освен това могат тими полимери, такива като етилен винил ацетат, полиетилен гликол (PEG), полианхидриди, полигликолова киселина, колаген, полиортоестери и полимлечна киселина. Много от тези методи за приготвяне на такива формулировки са 25 патентовани или са известни обикновено на специалистите в областта. Виж например, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978.
В някои варианти антитялото или част от антитялото от изобретението може да се прилага орално, например с инертен разредител или с асимилиращ се хранителен носител. Съединението (и ако е желателно и други съставки) може да бъде обвито в твърда или мека желатинова капсула, компресирано в таблетки или включено директно в диетата на лицето. За орално терапевтично приложение съединенията могат да бъдат включени с ексципиенти и да се използват под формата на таблетки за поглъщане, букални таблетки, хапчета, капсули, тинктури, суспензии, сиропи, лепенки и други подобни. За да се приложи съединение от изобретението чрез друг начин, различен от парентералния, може да е необходимо да се покрие съединението с или съединението да се приложи едновременно с материал, който предпазва неговото инактивиране.
В съставите могат да се включат също така да се използват едно или повече антитела от изобретението в комбинация с две или повече от предшестващите терапевтични средства. Такива комбинирани терапии могат да използват с предимство по-ниски дози от приложените терапевтични средства, като по този начин се избягват възможните токсичности или усложнения, свързани с различните монотерапии. Използването на антителата или на части от 30 антителата от изобретението в комбинация с други терапевтични средства, се дискутира понататък в подглава IV.
Нелимитиращи примери на терапевтични средства за ревматоидни артрити, с които едно 35 антитяло или част от антитяло от изобретението може да се комбинира, включват следните: нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат(и) (NSAIDs); цитокин супресивен противовъзпалителен лекарствен препарат(и) 40 (CSAIDs);CDP-571/BAY-10-3356 (наподобяващо човешкото анти-TN калфа антитяло; Celltech/ Bayer); сА2 (химерно анти-ТЖалфа антитяло; Centocor); 75 kd TNFR-IgG (75 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Immunex;
виж например Arthritis & Rheumatism (1994) Vol.
37, S295; J. Invest. Med. (1996) Vol. 44, 235A);
kd TNFR-IgG (55 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Hoffmann-LaRoche); IDEC-CE9. 1/SB 210396 (активно пригодено за 50 примати анти-СО4 антитяло; IDEC/Smith Kline;
1Q
66459 Bl виж например Arthritis & Rheumatism (1995) Vol. 38, S 185); DAB 486-IL-2 и/или DAB 389-IL-2 (IL-2 рекомбинантни белтъци; Seragen; виж например Arthritis & Rheumatism (1993) Vol. 36, 1223); Anti-Tac (наподобяващо човешкото-IL- 5 2Raлφa; Protein Design Labs/Roche); IL-4 (противовъзпалителен цитокин; DNAX/Schering); IL-10 (SCH 52000; рекомбинантен IL-10, противовъзпалителен цитокин; DNAX/Schering); IL-4; IL-10 и/или IL-4 агонисти (например 10 антитела агонисти); IL-IRA (IL-1 рецепторен антагонист; Synergen/Amgen); TNF-bp/s-TNFR (разтворим TNF свързващ белтък; виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S284; Amer. J. Physiol.-Heart and 15 Circulatory Physiology (1995) Vol. 268, pp. 37-42); R973401 (фосфодиестеразенТип IV инхибитор; виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S282); MK.-966 (COX-2 инхибитор; виж например, Arthritis & Rheuma- 20 tism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S81); Илопрост (виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S82); метотрексат; талидомид (виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), 25 S282) и сходни с талидомид лекарствени препарати (например, Celgen); лефлуномид (противовъзпалителен и цитокин инхибитор; виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), SI31; Inflammation Research 30 (1996) Vol. 45, pp. 103-107); транексамова киселина (инхибитор на активирането на плазминогена; виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S284);
T-614 (цитокин инхибитор; виж например, Arthri- 3 5 tis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S282); простагландин El (виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S282); Тенидап (нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат; виж 40 например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S280); Напроксен (нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат; виж например Neuro Report (1996) Vol. 7, pp. 1209-1213); Мелоксикам (нестероиден противо- 45 възпалителен лекарствен препарат); Ибупрофен (нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат); Пироксикам (нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат); Диклофенак (нестероиден противовъзпалителен лекарствен 50 тп препарат); Индометацин (нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат); Сулфасалазин (виж например Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S281); Азатиоприн (виж например Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S281); ICE инхибитор (инхибитор на ензима интерлевкин-1бета превръщащ ензим); zap-70 и/или Ick инхибитор (инхибитор на тирозин киназата zap-70 или Ick); VEGF инхибитор и/или VEGFR инхибитор (инхибитори на растежния фактор за васкуларните ендотелни клетки или на рецептора за растежния фактор на васкуларните ендотелни клетки; инхибитори на ангиогенезата); кортикостероидни противовъзпалителни лекарствени препарати (например SB 203580); TNF-конвертазни инхибитори; анти-1Ь-12 антитела; интерлевкин-11 (виж например Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S296); интерлевкин-13 (виж например Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S308); интерлевкин-17 инхибитори (виж например Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), SI20); злато; пенициламин; хлорохин; хидроксихлорохин; хлорамбуцил; циклофосфамид; циклоспорин; обща лимфоидна ирадиация; антитимоцитен глобулин; анти-СО4 антитела; СО5-токсини; орално прилагани пептиди и колаген; динатриев лобензарит; Цитокин регулиращи средства (CRAs) НР228 и НР466 (Houghten Pharmaceuticals, Inc.); ICAM-1 антисенс фосфоротиоат олигодезоксинуклеотиди (ISIS 2302; Isis Pharmaceuticals, Inc.); разтворим комплемент рецептор 1 (ΤΡΙΟ; Т Cell Sciences, Inc.); преднизон; орготеин; глюкозаминогликан полисулфат; миноциклин; aHTH-IL2R антитела; морски и ботанически липиди (мастни киселини от растителни семена и рибен хайвер; виж например DeLuca et al., (1995) Rheum. Dis. Clin. North Am. 21: 759-777); ауранофин; фенилбутазон; меклофенамова киселина; флуфенамова киселина; интравенозен имуноглобулин; цилеутон; микофенолова киселина (RS61443); такролимус (FK-506); зиролимус (рапамицин); амиприлоз (терафектин); кладрибин (2-хлородезоксиаденозин); и азарибин.
Нелимитиращи примери на терапевтични средства за възпалителни чревни заболявания,
66459 Bl c които може да се комбинира антитяло или част от антитяло от изобретението, включват следните: буденозид; епидермален растежен фактор; кортикостероиди; циклоспорин, сулфасалазин; аминосалицилати; 6-меркаптопурин; азатиоприн; метронидазол; липоксигеназни инхибитори; мезаламин; олсалазин; балсалазид; антиоксиданти; инхибитори натромбоксана; IL-1 рецепторни антагонисти; анти-IL-l бета моноклонални антитела; анти-1Ь-6 моноклонални антитела; растежни фактори; еластазни инхибитори; пиридинил-имидазолни съединения; CDP-571/ BAY-10-3356 (наподобяващо човешкото антиТИРалфа антитяло; Celltech/Bayer); сА2 (химерно анти-ТИРалфа антитяло; Centocor); 75 kd TNFR-IgG (75 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Immunex; виж например Arthritis & Rheumatism (1994) Vol. 37, S295; J. Invest. Med. (1996) Vol. 44, 235A); 55 kd TNFRIgG (55 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Hoffmann-LaRoche); интерлевкин-10 (SCH 52000; Schering Plough); IL-4; IL-10 и/или IL-4 агонисти (например антитела агонисти); интерлевкин-11; глюкуронид- или декстранконюгирани пролекарствени препарати на преднизолон, дексаметазон или будезонид; ICAM-I антисенс фосфоротиоат олигодезоксинуклеотиди (ISIS 2302; Isis Pharmaceuticals, Inc.); разтворим комплемент рецептор 1 (ΤΡΙΟ; Т Cell Sciences, Inc.); бавно освобождаващ се мезалазин; метотрексат; антагонисти на Тромбоцитния активиращ фактор (PAF); ципрофлоксацин; илигнокаин.
Нелимитиращи примери на терапевтични средства за мултитиплена склероза, с които може да се комбинира антитяло или част от антитяло от изобретението включват следните: кортикостероиди; преднизолон; метилпреднизолон; азатиоприн; циклофосфамид; циклоспорин; метотрексат; 4-аминопиридин; тизанидин; интерферон-бета la (Avonex™; Biogen); интерферон-бета lb (Betaseron™; Chiron/Berlex); Кополимер 1 (Cop-1; Copaxone™; Teva Pharmaceutical Industries, Inc.); кислород под свръхналягане; интравенозен имуноглобулин; клабрибин; CDP-571/BAY-10-3356 (наподобяващо човешкото анти-ТИГалфа антитяло; Celltech/Bayer); сА2 (химерно анти-ТЖалфа антитяло; Centocor); 75 kd TNFR-IgG (75 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък;
Immunex; виж например Arthritis & Rheumatism (1994) Vol. 37, S295; J. Invest. Med. (1996) Vol. 44, 235A); 55 kd TNFR-IgG (55 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; 5 Hoffmann-LaRoche); IL-10; IL-4; и IL-10 и/или IL-4 агонисти (например антитела агонисти).
Нелимитиращи примери на терапевтични средства за сепсис, с които може да се комбинира антитяло или част от антитяло от 10 изобретението, включват следните: хипертонични солеви разтвори; антибиотици; интравенозен гамаглобулин; непрекъсната хемофилтрация; карбапенеми (например меропенем); антагонисти на цитокините, такива като ТИРалфа, Ш-1бета, 15 IL-6 и/или IL-8; CDP-571/BAY-10-3356 (наподобяващо човешкото анти-ТИРалфа антитяло; Celltech/Bayer); сА2 (химерно антиТИРалфа антитяло; Centocor); 75 kd TNFR-IgG (75 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен 20 белтък; Immunex; виж например Arthritis & Rheumatism (1994) Vol. 37, S295; J. Invest. Med. (1996) Vol. 44, 235A); 55 kd TNFR-IgG (55 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Hoffmann-La Roche); Цитокин регулиращи 25 средства (CRAs) HP228 и HP466 (Houghten Pharmaceuticals, Inc.); SK & F 107647 (ниско молекулен пептид; SmithKline Beecham); тетравалентен гуанилхидразон CNI-1493 (Picower Institute); Инхибитор на обменния път на тъканния 30 фактор (TFPI; Chiron); PHP (химически модифициран хемоглобин; APEX Bioscience); железни хелатори и хелати, включващи диетилентриамин пентаоцетна киселина-желязо (III) комплекс (DTPA желязо (III); Molichem Medi35 cines); лизофулин (синтетична малка молекула метилксантин; Cell Therapeutics, Inc.); PGGГлюкан (воден разтворим бета1, 3-глюкан; Alpha-Beta Technology); аполипо-протеин А-1 реконструиран с липиди; хирални хидроксалови 40 киселини (синтетични антибактериални, които инхибират биосинтезата на липид А); антиендотоксинови антитела; Е5531 (синтетичен липид А антагонист; Eisai America, Inc.); rBP121 (рекомбинантен N-краен фрагмент от човешки 45 белтък, увеличаващ бактерицидностга/пермеабилитета); и Синтетични анти-ендотоксин пептиди (SAEP; BiosYnth Research Laboratories);
Нелимитиращи примери на терапевтични средства за респираторен дистрес синдром 50 (ARDS) при възрастни хора, с които може да се
66459 Bl комбинира антитяло или част от антитяло от изобретението включват следните: анти-IL’8 антитела; сърфактант заместваща терапия; CDP571/BAY103356 (наподобяващо човешкото антиTN Еалфа антитяло; Celltech/Bayer); сА2 (химерно 5 анти-ТПРалфа антитяло; Centocor); 75 kd TNFRIgG (75 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Immunex; виж например, Arthritis & Rheumatism (1994) Vol. 37, S295; J. Invest. Med. (1996) Vol. 44, 235A); и 55 kd TNFR-IgG (55 kD 10 TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Hoffmann-LaRoche).
Фармацевтичните състави от изобретението могат да включват терапевтично ефективно количество или профилактично ефективно 15 количество от антитяло или част от антитяло от изобретението. Терапевтично ефективно количество се отнася до количество ефективно при дозите и за периода от време, необходим за постигане на желания терапевтичен резултат. 20 Терапевтично ефективното количество от антитялото или част от антитялото може да варира съгласно фактори, такива като етап на заболяването, възраст, пол и тегло на индивида и способността на антитялото или на част от 25 антитялото, да предизвиква желания отговор в индивида. Терапевтично ефективно количество е това, при което всички токсични или нежелани ефекти на антитялото или на част от антитялото да са превъзмогнати от благоприятните 30 терапевтични ефекти. Профилактично ефективно количество се отнася до количество, ефективно при дозите и периодите от време, необходими за постигане на желаният профилактичен резултат. Нормално е, тъй като профилактичната доза се 35 използва при лица преди или в ранните етапи на болестта, профилактичното ефективно количество да бъде по-малко от терапевтично ефективното количество.
Дозовите режими могат да се коригират 40 така, че да осигурят оптимално желания отговор (например терапевтичен или профилактичен отговор). Например може да се приложи еднократна болус доза, могат да се приложат няколко отделни дози за даден период от време 45 или дозата може да бъде пропорционално намалена или увеличена, което зависи от необходимата терапевтична ситуация. Особено предимство е да се формулират парентерални състави в единично дозирани форми за лесно 50 приложение и еднаквост на дозата. Използваната тук единично дозирана форма се отнася до физично дискретни единици, комплектовани като цели дози за лечение на индивиди, отнасящи се до бозайниците; всяка единица, съдържаща предварително определено количество от активно съединение, изчислено за да осигури желания терапевтичен ефект свързан с необходимия фармацевтичен носител. Спецификацията за единично дозираните форми от изобретението е продиктувана от и зависи директно от (а) уникалните характеристики на активното съединение и от постигането на специфичния терапевтичен или профилактичен ефект, и (б) типичните ограничения в техниката на смесване на активно съединение за лечение на чувствителността при пациентите.
Един примерен, нелимитиращ обхват за терапевтично или профилактично ефективно количество от антитяло или част от антитяло от изобретението е 10-100 mg, за предпочитане 2080 mg, а най-добре е да е около 40 mg. Трябва да се отбележи, че стойностите на дозата могат да варират в зависимост от вида и тежестта на заболяването, което трябва да се облекчи. Освен това трябва да е ясно, че за всеки отделен пациент, трябва да се направи специфичен дозов режим за определен период от време, съгласно нуждите на пациента и професионалното решение на човека, наблюдаващ или ръководещ прилагането на съставите и че поредицата от дози, изложени тук са само примерни и нямат за цел да ограничават обхвата или приложението на заявения състав.
V. Използване на антитела от изобретението
Склонността им да се свързват с йТИРалфа, анти-ЬТИЕалфа антителата или части от тях от изобретението, могат да се използват за детектиране на ЬТ№алфа (например в биологична проба, такава като серум или плазма), като се използва стандартен имуноанализ, такъв като свързан имуносорбентен анализ (ELISA), радиоимуноанализ (RIA) или тъканна имунохистохимия. Изобретението осигурява метод за детектиране на hTN Еалфа в биологична проба, включващ контактуване на биологичната проба с антитяло или част от антитяло от изобретението и детектиране или на антитялото (или на част от антитялото), свързано с ЬТИРалфа, или на несвързаното антитяло (или на част от антитялото), за да се детектира ЬТПРалфа в биологичната проба. Антитялото е белязано директно или индиректно със субстанция, която може да се детектира, за да се улесни детекцията на свързаното или несвързаното антитяло. Подходящи субстанции за детектиране включват различни ензими, простетични групи, флуоресцентни материали, луминесцентни материали и радиоактивни материали. Примери за подходящи ензими включват пероксидаза от хрян, алкална фосфатаза, бета-галактозидаза или ацетилхолинестераза; примери за подходящи комплекси от простетични групи включват стрептавидин/биотин иавидин/биотин; примери за подходящи флуоресцентни материали включват умбелиферон, флуоресцеин, флуоресцеин изотиоцианат, родамин, дихлоротриазиниламин флуоресцеин, данзил хлорид или фикоеритрин; пример за луминесцентен материал 20 включва луминол; и примери за подходящ радиоактивен материал включва 1251,1311,35S или ЗН.
Освен чрез белязане на антитялото ЬТНРалфа може да се анализира в биологични течности чрез конкурентен имуноанализ, като се използват гЬТНРалфа стандарти, белязани със субстанция, която може да се детектира и небелязано анти-ЬТНРалфа антитяло. В този анализ биологичната проба, белязаните гЬТИРалфа стандарти и анти-ЬТКРалфа антитялото се комбинират и се определя количеството на белязания rh ЬТЛРалфа стандарт, свързан с небелязаното антитяло. Количеството на ЬТИРалфа в биологичната проба е обратно 35 пропорционално на количеството на белязания ЬТИРалфа стандарт, свързан с анти-ЬТЛРалфа антитялото.
Може да се използва също така и D2E7 антитялото от изобретението за детектиране на 40 ТИРалфа от видове, различни от човек, поспециално ТПРалфа от примати (например шимпанзе, павиан, мармозетка, циномолгус и резус), прасе и мишка, тъй като D2E7 може да се свързва с всеки един от тези Т1МРалфа. 45 Антителата и частите от антителата от изобретението са способни да неутрализират активността на йТИРалфа както in vitro, така и in vivo (виж U. S. Патент No. 6,090,382). Освен това поне някои от антителата от изобретението 5 0
459 В1 като D2E7, може да неутрализира активността на ЬТЖалфа от други видове. Съответно, антителата и части от антителата от изобретението могат да се използват за инхибиране на 5 активността на ЬТИРалфа, например в клетъчна култура, съдържаща ЬТ74Ралфа, в хора или други представители на бозайниците, притежаващи Т№алфа, с които антитялото от изобретението крос-реагира (например шимпанзе, павиан, 10 мармозетка, циномолгус и резус, прасе или мишка). В един вариант изобретението осигурява метод за потискане на активността на ТТЧЕалфа, включващ контактуване наТ№алфа с антитяло или част от антитяло от изобретението, така че 15 активността на ТИРалфа се потиска. За предпочитане е ТЪГЕалфа да е човешки TNFanфа. Например в клетъчна култура, съдържаща или за която се предполага, че съдържа ТЛЕалфа може да се добави антитяло или част от антитяло от изобретението, за да се потисне активността на ТПРалфа в културата.
В предпочитан вариант изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които прилагането на анти-ТИРалфа антитяло е 25 благоприятно, включващи подкожно прилагане на лице, през седмица, на антитяло или на част от антитяло от изобретението, така че нарушението се лекува. В по-специален предпочитан вариант антитялото се прилага подкожно, по 30 схема през седмица. В друг особено предпочитан вариант, антитялото се прилага подкожно преди, по време на или след прилагането на метотрексат. За предпочитане е субектът да е човек. Съответно субектът може да е бозайник, експресиращ Т^алфа, с който антитялото от изобретението крос-реагира. Освен това субектът може да е бозайник, в който е въведен ЬТЪШалфа (например чрез прилагане на ИТОТалфа или чрез експресия на ЬТОТалфа трансген). Антитялото от изобретението може да се приложи на човек е терапевтични цели (дискутира се по-нататък, по-долу). Освен това антитяло от изобретението може да се приложи на бозайник, различен от човек, експресиращ ТЖалфа, с който антитялото крос-реагира (например маймуна, прасе или мишка), с ветеринарна цел или като животински модел за човешко заболяване. По отношение на последното, такива животински модели могат да са полезни за оценка на терапевтичния ефект на антителата от изобретението
66459 Bl (например за анализ на дозите и времето на прилагане).
Използваният тук термин нарушение, при което прилагането на анти-ТИРалфа е благоприятно има за цел да включва заболявания 5 и други нарушения, при които е показано, че или се предполага, че наличието на TN Ралфа в лице, страдащо от нарушение е или отговорно за патофизиологията на нарушението, или е фактор, който допринася за влошаване на нарушението, 10 или при което е показано, че друго анти-TNРалфа антитяло или биологично активна негова част се използва успешно за лечение на заболяването. Съответно нарушение, при което е определена активността на ТЖалфа е нарушение, при което 15 се очаква, че потискането на активността на ТИРалфа ще облекчи симптомите и/или развитието на нарушението. Такива нарушения могат да се докажат например чрез увеличаване на концентрацията на ТЯРалфа в биологичната 20 течност на лице, страдащо от нарушение (например увеличаване на концентрацията на TN Ралфа в серум, плазма, синовиална течност и т. н. от лицето), което може да се детектира например чрез използване на анти-TNРалфа 25 антитяло, както е описано по-горе. Има доста голям брой примери за нарушения, при които активността на ТОТалфа не е желателна. Използването на антитела и части от антитела от изобретението за лечение на специфични 30 нарушения се дискутира по-долу в детайли.
А. Сепсис
Тумор некрозис факторът има определено установена роля в патофизиологията на сепсиса, с биологични ефекти, които включват хипотензия, 3 5 миокардиална супресия, синдром на съдово изтичане, органна некроза, стимулиране на освобождаването на токсични вторични медиатори и активиране на каскадата за съсирване (виж например, Tracey, К. J. and 40 Cerami, A. (1994) Annu. Rev. Med. 45: 491-503; Russell, D and Thompson, R. C. (1993) Curr. Opin. Biotech. 4: 714'721).
Съответно, човешките антитела и части от антителата от изобретението могат да се използват 4 5 за лечение на сепсис, в които и да са от неговите клинични прояви, включващи септичен шок, ендотоксичен шок, грам отрицателен сепсис и токсичен шоков синдром.
Освен това за лечението на сепсис, анти- 50
КПЧРалфа антитялото или част от антитялото от изобретението може да се приложи едновременно с едно или повече допълнителни терапевтични средства, които могат по-нататък да облекчат сепсиса, такива като интерлевкин'1 инхибитор (такъв като този, описан в РСТ Публикация Nos. WO 1992/016221 и WO 1992/ 017583), цитокинът интерлевкин-6 (виж например РСТ Публикация No. WO 1993/ 011793) или антагонист на активиращия тромбоцитите фактор (виж например Европейска патентна заявка, Публикация No. ЕР 374 510).
В допълнение, в предпочитан вариант анти-TN Ралфа антитялото или част от антитялото от изобретението се прилага на човек, в подгрупа от пациенти със сепсис, имащи серумна или плазмена концентрация от IL-6 над 500 pg/ml и по-добре 1000 pg/ml, в момента на лечението (виж РСТ Публикация No. WO 1995/ 020978 от Daum, L., et al.).
Б. Автоимунни заболявания
Тумор некрозис факторът участва и има важна роля в патофизиологията на различни автоимунни заболявания. Например TN Ралфа участва в активирането натъканното възпаление и причинява разрушаване на ставите при ревматоидни артрити (виж например Tracey and Cerami, по-горе; Arend, W. P. and Dayer, J-M. (1995) Arth. Rhum. 38: 151'60; Fava, R. A., et al., (1993) Clin. Exp. Immunol. 94: 261-266). ТИРалфа участва също така в активирането на клетките от островчетата към клетъчна смърт и в медиирането на инсулиновата резистентност при диабети (виж например Tracey and Cerami, по-горе; РСТ Публикация No. WO 1994/008609). ТИРалфа участва също така в медиирането на цитотоксичността към олигодендроцитите и в индукцията на възпалителни плаки при мултитиплената склероза (виж например Tracey and Cerami, по-горе). Химерните и наподобяващите човешки миши анти-ЬТИРалфа антитела са преминали клиничните тестове за лечение на ревматоидни артрити (виж например Elliott, М. J., et al., (1994) Lancet 344: 1125-'127; Elliot, Μ. J., et al, (1994) Lancet 344: 1105-'110; Rankin, E. C., et al., (1995) Br. J. Rheumatol. 34: 334'342).
Човешките антитела и части от антитела от изобретението могат да се използват за лечение на автоимунни заболявания, поспециално на тези, свързани с възпаление, включващи ревматоидни артрити, ревматоидни спондилити, остеоартрити и артрити вследствие на подагра, алергии, мултитиплена склероза, автоимунни диабети, автоимунни увеити и нефротичен синдром. Обикновено антитялото или част от антитялото се прилага на целия организъм, въпреки че при някои нарушения може да е по-благоприятно да се използва локално приложение на антитялото или на част от антитялото в мястото на възпалението (например локално приложение в ставите при ревматоидни артрити или местно приложение при диабетни улцерити, самостоятелно или в комбинация с производно на циклохексанилиден, както е описано в РСТ Публикация No. WO 1993/019751).
В. Инфекциозни болести
Тумор некрозис факторът участва в медиирането на биологичните ефекти, наблюдавани при различни инфекциозни 20 заболявания. Например ТЖалфа участва в медиирането на мозъчно възпаление и капилярната тромбоза и при инфаркт при малария (виж например Tracey and Cerami, по-горе). ТПРалфа участва също така в медиирането на мозъчно възпаление, индуцирайки увреждане на кръвно-мозъчната бариера, като инициира септичен шоков синдром и активирайки венозен инфаркт при менингити (виж например Tracey and Cerami, по-горе). ТиТалфа участва също така и в индуцирането на психическо умствено разстройство, като стимулира вирусната пролиферация и като медиира увреждането на централната нервна система, в синдром на придобитата имунна недостатъчност (AIDS) (виж например Tracey and Cerami, по-горе).
Съответно антителата и части от антителата от изобретението могат да се използват за лечение на инфекциозни заболявания, включващи бактериални менингити (виж например 40 Европейска патентна заявка, Публикация No. ЕР 585 705), церебрална малария, AIDS и сходен с AIDS комплекс (ARC) (виж например Европейска патентна заявка, Публикация No. ЕР 230 574), така както и цитомегаловирусна инфек- 45 ция, вторична по отношение натрансплантацията (виж например Fietze, Е., et al., (1994) Transplantation 58: 675-680). Антителата и части от антителата от изобретението могат да се използват също така и за облекчаване на симптомите, 50
459 В1 свързани с инфекциозните заболявания, включващи треска и миалгия, дължащи се на инфекция (такава като грипна) и умствено разстройство, вторично по отношение на 5 инфекцията (например вторично по отношение на AIDS или ARC).
Г. Трансплантация
Тумор некрозис факторът участва като ключов медиатор при отхвърляне на хомоложна 10 присадка на донора от реципиента (GVHD) и при медииране на неблагоприятна реакция, която може да се наблюдава, когато се използва плъшото антитяло ОКТЗ, насочено срещу Тклетъчния рецепторен CD3 комплекс, за да се потисне отхвърлянето на бъбречни присадки (виж например Tracey and Cerami, по-горе; Eason, J. D., et al., (1995) Transplantation 59:300' 305; Suthanthiran, M. and Strom, T. B. (1994) New Engl. J. Med. 331:365'375). Съответно антителата и части от антителата от изобретението, могат да се използват за потискане на отхвърлянето на присадка, включващо отхвърляне на хомоложна и кръстосана присадка и за потискане на GVHD. Въпреки че антитялото или част от антитялото може да се използва самостоятелно, за предпочитане е то да се използва в комбинация с едно или повече други средства, които потискат имунния отговор срещу хомоложната присадка или потискат GVHD. Например в един вариант 3 0 антитяло или част от антитяло от изобретението се използва в комбинация с ОКТЗ, за да се инхибират ОКТЗ-индуцираните реакции. В друг вариант антитяло или част от антитяло от изобретението се използва в комбинация с едно 35 или повече антитела, насочени срещу други мишени, включени в регулирането на имунния отговор, такива като клетъчно повърхностните молекули CD25 (интерлевкин-2 рецептор-алфа), CD 11 a (LFA-1), CD54 (ICAM-1), CD4, CD45, CD28/CTLA4, CD80 (В7-1) и/или CD86 (В7-2). В друг вариант антитяло или част от антитяло от изобретението се използва в комбинация с едно или повече общи имуносупресивни средства, такива като циклоспорин А или FK506.
Д. Малигнизация
Тумор некрозис факторът участва при индуциране на умствено разстройство, като стимулира туморният растеж, повишава възможностите за метастазиране и медиира цитотоксичността при малигнезации (виж
μ.л: .ibu, MWi·»- X---
66459 Bl например Tracey and Cerami, по-горе). Съответно антителата и части от антителата от изобретението могат да се използват за лечение на малигнизации, за да потиснат туморния растеж или метастазирането и/или за да облекчат 5 умствените разстройства, вторични за малигнизацията. Антитялото или част от антитялото може да се приложи върху целия организъм или локално върху мястото на тумора.
Е. Белодробни нарушения 10
Тумор некрозис факторът участва в патофизиологията на респираторен дистрес синдром при възрастни, включващ стимулиране на левкоцит-ендотелно активиране, насочване на цитотоксичностга към пневмоцитите и индуциране 15 на васкуларния синдром за изтичане (виж например Tracey and Cerami, по-горе). Съответно антителата и части от антителата от изобретението, могат да се използват за лечение на различни белодробни нарушения, включващи респираторен 20 дистрес синдром при възрастни (виж например РСТ Публикация No. WO 1991/004054), белодробен шок, хронично белодробно възпалително заболяване, белодробна саркоидоза, белодробна фиброза и силикоза. 25 Антитялото или част от антитялото, може да се прилага върху целия организъм или локално върху белодробната повърхност, например като аерозол.
Ж. Чревни нарушения 30
Тумор некрозис факторът участва в патофизиологията на чревните възпалителни процеси и нарушения (виж например, Tracy, К. J., et al., (1986) Science, 234: 470-474; Sun, X-M, et al., (1988) J. Clin. Invest. 81: 1328-1331; 35 MacDonald, T. T., et al., (1990) Clin. Exp. Immunol. 81: 301-305). Химерни миши анти-ЬТКРалфа антитела са преминали през клинично изпитание за лечение на заболяването на Crohn (van Dullemen, Η. Μ., et al., (1995) Gastroenterology 40 109: 129-135). Човешките антитела и части от антитела от изобретението могат да се използват също така и за лечение на чревни нарушения, такива като идиопатично възпалително чревно заболяване, което включва два синдрома, болест 45 на Крон и улцеративни колити.
3. Сърдечни нарушения
Антителата и части от антителата от изобретението могат да се използват също така и за лечение на различни сърдечни нарушения, 50 включващи исхемия на сърцето (виж например Европейска патентна заявка, Публикация No. ЕР 453 898) и сърдечна недостатъчност (слабост на сърдечния мускул) (виж например РСТ Публикация No. WO 1994/020139).
И. Други
Антителата и части от антителата от изобретението могат да се използват също така и за лечение на различни други нарушения, при които активността наТИРалфа не е желателна. Примери задруги заболявания и нарушения, при които е включена активността на ТИРалфа в патофизиологията и следователно, които могат да се лекуват като се използва антитяло или част от антитяло от изобретението, включват възпалителни костни нарушения и костно резорбционно заболяване (виж например Bertolini, D. R., et al., (1986) Nature 319: 516518; Konig, A., et al., (1988) J. Bone Miner. Res. 3: 621-627; Lerner, U. H. and Ohlin, A. (1993) J. Bone Miner. Res. 8:147-155; and Shankar, G. and Stem, P. H. (1993), Bone 14: 871-876), хепатити, включващи хепатити вследствие на алкохол (виж например McClain, С. J. and Cohen, D. A. (1989) Hepatology 9:349-351; Felver, Μ. E., et al., (1990) Alcohol. Clin. Exp. Res. 14: 255-259; и Hansen, J., et al., (1994), Hepatology, 20: 461-474) и вирусни хепатити (Sheron, N., et al., (1991) J. Hepatol. 12: 241-245; и Hussain, M. J., et al., (1994) J. Clin. Pathol. 47: 1112-1115), смущения в коагулацията (виж например van der Poll, T., et al., (1990) N. Engl. J. Med. 322: 1622-1627; и van der Poll, T., et al., (1991) Prog. Clin. Biol. Res. 367: 55-60), изгаряния (виж например Giroir, В. P., et al., (1994), Am. J. Physiol. 267: Hl 18-124; и Liu, X. S., et al., (1994), Bums 20: 40-44), реперфузионно увреждане (виж например Scales, W. E., et al., (1994) Am. J. Physiol. 267: G1122-1127; Serrick, C„ et al., (1994) Transplantation, 58:1158-1162; и Yao, Y. M., et al., (1995) Resuscitation, 29: 157-168), келоидна формация (виж например McCauley, R. L., et al., (1992), J. Clin. Immunol. 12: 300-308), образуване на белег в тъканта и треска.
Това изобретение по-нататък е илюстрирано със следните примери, които не трябва да се считат като лимитиращи. Съдържанието на всички цитати, патенти и публикувани патентни заявки, цитирани в цялата тази заявка са включени в литературната справка.
66459 Bl
Примери за изпълнение на изобретението
Пример 1
Лечение е анти-ТИРалфа антитяло
Ефективност на D2E7 след подкожно приложение
В това изследване са третирани двайсет и четири пациента с активен RA, със седмични дози от 0.5 mg/kg D2E7 (п=18) или плацебо (п=6), чрез подкожно инжектиране в рамките на три месеца. Пациентите, участващи в това изследване имат средно времетраене на заболяването от 10.1 години, с резултат от активното заболяване (DAS) резултат от 4.87 и средно от 3.4 DMARDs (заболяване, модифицирано от анти-ревматоидните лекарствени препарати), преди да постъпят в изследването; отново като се отчита значителната активност на болестта. Отговарящите продължават лечението с белязано D2E7, докато пациентите, които не успяват да отговорят на дозата от 0.5 mg/kg или при които е изчезнал DAS отговора при 0.5 mg/ kg доза, получават повишена доза от 1 mg/kg, чрез подкожно инжектиране, след дванадесетата седмица от изследването.
Първите записани пациенти получават до шестдесет инжекции и следователно са били в изследването с лекарствената терапия шестдесет седмици. Ефективността на подкожните дози е сходна с тази на интравенозните инжекции. До 78 % от пациентите достигат DAS и ACR20 отговор през време на първите седмици от лечението.
Подкожно, D2E7 с доза от 0.5 mg/kg/ седмица редуцира подутата става (S WJ) с 54 %, болезнената става (TJC) с 61 % и CRP с 39 % за дванадесет седмици, в сравнение с базовата линия, докато всички параметри се увеличават в групата, приемаща плацебо. След завършване на плацебо-контролния период от това изследване пациентите продължават лечението до четиринадесет месеца с продължителна ефективност. Тези резултати показват, че подкожното прилагане на D2E7, с доза от 0.5 mg/kg/седмица, следователно може да се прилага благополучно самостоятелно с добра локална поносимост.
Прилагане на D2E7 и на метотрексат
В това изследване пациентите получават подкожно или интравенозно плацебо или D2E7, с доза от 1 mg/kg, в допълнение към тяхното лечение с (метотрексат) МТХ. Петдесет и четири пациента са постъпили в изследването и осемнадесет пациента са получили интравенозно D2E7 и подкожно плацебо, осемнадесет пациента са получили интравенозно плацебо и подкожно D2E7, и осемнадесет пациента са получили плацебо интравенозно и подкожно. Пациентите получават своята втора доза само след като е изчезнал техният статус за сляп отговор, не порано от четири седмици след първата доза. След това всички пациенти получават подкожна инжекция, през седмица от белязано D2E7.
Демографските характеристики от изследваната популация в това изследване, включват средна продължителност на RA от 11. 1 години, преди излагане до средното от 3.6 DMARDs (различно от МТХ), и средно DAS при встъпване в изследването от 4.81. На двадесет и деветия ден, 72 % от пациентите третирани интравенозно с D2E7 и 44 % от пациентите, третирани подкожно с D2E7, достигнаха отговор чрез DAS критериите, в сравнение само с 28 % от плацебо третираните пациенти (показано на Фигура 5). От отговорилите в това изследване, 28 % от третираните с плацебо пациенти, поддържат ACR20 отговор до ден 29, в сравнение със 72 % от третираните с D2E7 интравенозно пациенти и 67 % от третираните с D2E7 пациенти подкожно, които поддържат техните отговори между един и три месеца.
Пример 2
Обща телесна доза на подкожно приложеното анти-ТМЕалфа антитяло
Седмично, подкожно прилагане на D2E7 В това изследване са постъпили двеста осемдесет и четири пациента с RA и то има за цел да се определи оптималната, обща телесна доза на подкожно приложеното D2E7. Пациентите получават произволно или 20,40 или 80 mg D2E7 или плацебо, седмично за дванадесет седмици, след което време плацебо-третираните пациенти преминават случайно на 40 mg О2Е7/седмично.
Приблизително 49 % от пациентите достигат ACR20 с 20 mg, 55 % от пациентите достигат ACR20 с 40 mg, и 54 % от пациентите достигат ACR20 с 80 mg, докато само 10 % от пациентите, получаващи плацебо достигат ACR20 (показано е на Фигура 1 А). Приблизително 23 % от пациентите достигат ACR50 с 20 mg, 27 % от
66459 Bl пациентите достигат ACR50 с 40 mg, и 20 % от пациентите достигат ACR50 с 80 mg и само 2 % от пациентите, получаващи плацебо достигат ACR50. Тези данни илюстрират, че подкожното прилагане на D2E7, по-специално с доза от 40 mg/седмица предизвиква добър отговор.
Пример 3
Подкожно приложение, през седмица на анти-ТЛРалфа антитяло
Подкожно приложение, през седмица на D2E7
Изследвани са клиничните ефекти, безопасността, имуногенностга и поносимостта на RA пациентите с частични отговори към МТХ, след подкожна инжекция (s. с.) през седмица на плацебо или D2E7, с няколко дозови нива за двадесет и четири седмици, заедно с продължително МТХ лечение.
Модел на изследването
Проведено е плацебо-контролирано, двойно-сляпо, произволно, мулти-центърно изследване на пациенти с RA, които имат недостатъчен ефект или поносимост към МТХ.
По време на курса на лечение пациентите се поддържат със стабилна доза от МТХ, с доза определена във включените критерии, описани по-долу.
Това изследване се състои от две части: 1) а празен период от четири седмици преди прилагането на първата доза медикамент, през което време липсват DMARDs (с изключение на МТХ); и 2) плацебо контролиран период, през което време пациентите се разпределят произволно в една от четирите групи от шестдесет и седем пациента, за да получат плацебо 20, 40 или 80 mg D2E7 (като обща телесна доза), давана през седмица подкожно, за 24 седмици. Всяка доза от изследвания лекарствен препарат се прилага като две подкожни инжекции от 1.6 ml всяка. Първата доза на пациентите се прилага от медицински персонал като част от подготовката на пациента. Следващите дози се прилагат самостоятелно от пациента в изследването, под директното наблюдение на квалифицирания персонал, през първите четири седмици. След това дозите се прилагат извън мястото на изследване от пациента, трениран индивид посочен от пациента или от медицински персонал.
След всяка клинична оценка се определя лечението с лекарствените препарати за четири или пет седмици. Пациентите се изследват серийно в седмици - една, две, три, четири, шест, осем, дванадесет, шестнадесет, двадесет и двадесет и четири от изследването, с изследване на ставите, което се провежда от случаен оценител, независимо от лекуващия лекар.
В това изследване са записани двеста седемдесет и един пациента с RA. Изследваната популация е представена от популация със среден до тежък RA в Северна Америка: приблизително 70 % жени и то с преобладаваща възраст над четиридесет. Популацията е избрана, като се използват предварително определени включващи и изключващи критерии, известни на специалистите в областта, например пациентът трябва да има диагноза RA, която е определена от ревизираните критерии от 1987 на Американския колеж по ревматология (ACR) (изложени в Приложение А).
Резултати
Фигури 1В и 2'4 показват, че подкожното, през седмица, лечение с D2E7 в комбинация с метотрексат, е значително по-добро отколкото плацебо, за редуциране на сигналите и симптомите на RA за двадесет и четири седмици. Всичките три дози от D2E7 са статистически значимо по-ефективни, отколкото плацебо, даван ежеседмично. Освен това, D2E7 с доза от 40 mg и 80 mg има по-добър ефект отколкото дозата от 20 mg.
66459 Bl
ПРИЛОЖЕНИЕA
ACR Определение за RA Класификация от 1987 по три критерия и функции за ревматоидни артрити (RA)
Критерии Определение
1. Артрити от 3 или повече ставни области Поне в три ставни области има едновременно подуване на меките тъкани или течност (не само свръх костен растеж), наблюдавано от лекар. 14 възможни ставни области са дясно или ляво PIP, МОР, китка, лакът, коляно, глезен и МТР стави.
2. Артрити при стави на ръка Китка МСР МСР или китка МСР и китка Подути меки тъкани или течност (не само костен свръх растеж), в специфична област наблюдавана от лекар. Там където са специфицирани 2 области, усложнението трябва да е едновременно
3. Симетрично подуване (артрити) Едновременно усложнение на същите ставни области (както е определено в 1 от двете страни на тялото (билатералното усложнение на PIPs, MCPs или MTPs е приемливо без абсолютна симетрия)
4. Серумен ревматоиден фактор Демонстрация на аномални количества от серумен ревматоиден фактор, чрез който и да е метод, за който резултатите за положителни в < 5 % от нормалните контролни субекта
5. Радиографски промени при ревматоидни артрити Радиографски промени, типични за ревматоидните артрити в задно-предната част на ръката и радиография на китка, които трябва да включват износване или недвусмислено костна декалцификация, локализирани в или в най-забележимите места съседни на ставните усложнения. (Само остеоартритните промени не са анализирани по отношение на качеството)
* за пациента се казва, че има RA ако той/тя е включен в 1 от SRA под- групите, изброени в Таблица 7 и има клинична диагноза от
RA от неговия/нейния лекар. Критерий 1,2 и 3 трябва да присъстват поне 6 седмици.
Arthitis and Rheumatism, Vol. 31, No. 3 (March 1988)
66459 Bl
ПРИЛОЖЕНИЕ В
SEQ ID NO: 1:
Asp He Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Vai Gly 15 1015
Asp Arg Vai Thr He Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly He Arg Asn Tyr 20 2530
Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu He 35 4045
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gin Ser Gly Vai Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 5560
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr He Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 7580
Glu Asp Vai Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Arg Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr 85 9095
Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Vai Glu He Lys 100105
SEQ ID NO :2:
Glu Vai Gin Leu Vai Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Gly Arg 15 1015
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr 20 2530
Ala Met His Trp Vai Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai
4045
Ser Ala He Thr Trp Asn Ser Gly His He Asp Tyr Ala Asp Ser Vai 50 5560
Glu Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 7580
66459 Bl
Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 9095
Ala Lys Val Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Asp Tyr Trp Gly 100 105110
Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115120
SEQ ID NO :3:
Gin Arg Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Xaa 15
SEQ ID NO :3:
Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Arg 15 1015
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr 20 2530
Ala Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Asp Trp Val 35 4045
Ser Ala He Thr Trp Asn Ser Gly His He Asp Tyr Ala Asp Ser Val 50 5560
Glu Gly Arg Phe Ala Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ala Leu Tyr 65 70 7580
Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 9095
Thr Lys Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Asn Trp Gly 100 105HO
Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115120
66459 Bl
SEQ ID NO:4:
Vai Ser'Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Asp Xaa 1510
SEQ ID NO:5:
Ala Ala Ser Thr Leu Gin Ser 15
SEQ ID NO:6:
Ala lie Thr Trp Asn Ser Gly His lie Asp Tyr Ala Asp Ser Vai Glu 1 5 1015
Gly
SEQ ID NO:7:
Arg Ala Ser Gin Gly He Arg Asn Tyr Leu Ala 1510
SEQ ID NO:8.’ Asp Tyr Ala Met His 15
66459 Bl
SEQ ID NO: п
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr Ala 15
SEQ ID NO : 12:
Gin Lys Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Ala 15
SEQ ID NO: 13:
Gin Lys Tyr Gin Arg Ala Pro Tyr Thr 15
SEQ ID NO : 14:
Gin Lys Tyr Ser Ser Ala Pro Tyr Thr
SEQ ID NO: 15:
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr Thr
SEQ ID NO : 16:
Gin Lys Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Thr
SEQ ID NO : 17:
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr Tyr 15
SEQ ID NO: 18:
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr Asn 15
66459 Bl
SEQ ID NO :19:
Gin Lys Tyr Thr Ser Ala Pro Tyr Thr
SEQ ID NO: 20:
Gin Lys Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Asn
SEQ ID NO :21:
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Ala Tyr Ser
1· 5
SEQ ID NO :22:
Gin Gin Tyr Asn Ser Ala Pro Asp Thr
SEQ ID NO : 23:
Gin Lys Tyr Asn Ser Asp Pro Tyr Thr
SEQ ID NO : 24:
Gin Lys Tyr He Ser Ala Pro Tyr Thr
SEQ ID NO :25:
Gin Lys Tyr Asn Arg Pro Pro Tyr Thr
SEQ ID NO : 26:
Gin Arg Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Ala
66459 Bl
SEQ ID NO :27:
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Asn
1 5 10
SEQ ID NO :28: Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Lys 1 5 10
SEQ ID NO : 29: Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Tyr 1 5 10
SEQ ID NO : 30: Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Asp 1 5 10
SEQIDNO:31: Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Phe Ser Leu Asp Tyr 1 5 10
SEQ ID NO : 32: Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu His Tyr 1 5 10
SEQ ID NO :33: Ala Ser Phe Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Glu Tyr 1 5 10
SEQ ID NO :34:

Claims (15)

  1. Патентни претенции
    1. Състав, включващ количество от 40 mg от изолирано човешко анти-ТИРалфа антитяло, за използване при лечение на автоимунно нарушение в човек, където съставът се прилага подкожно на човек, нуждаещ се от него при режим на дозиране два пъти седмично на всеки 13'5 дни и където човешкото анти-Т№алфа антитяло неутрализира човешката ТИРалфа цитотоксичност при стандартен in vitro L929 анализ с IC50 от 1 х ΙΟ'9 М или по-малко, което включва вариабилната област на леката верига LCVR, включваща CDR3 домен, включващ аминокиселинната секвенция на SEQ ID NO: 3, CDR2 домен, включващ аминокиселинната секвенция на SEQ ID NO: 5 и CDR1 домен, включващ аминокиселинната секвенция на SEQ ID NO: 7, и което включва вариабилната област на тежката верига - HCVR, включваща CDR3 домен, включващ аминокиселинната секвенция на SEQ ID NO: 4, CDR2 домен, включващ аминокиселинната секвенция на SEQ ID NO: 6 и CDR1 домен, включващ аминокиселинната секвенция на SEQ ID NO: 8.
  2. 2. Състав за използване съгласно претенция 1, където споменатото човешко антитяло има вариабилна област на леката верига - LCVR, включваща аминокиселинната секвенция на SEQ ID NO: 1 и вариабилна област на тежката верига - HCVR, включваща аминокиселинната секвенция на SEQ ID NO: 2.
  3. 3. Състав за използване съгласно претенция 1, където споменатото човешко антитяло е антитялото D2E7.
  4. 4. Състав за използване съгласно претенция 1, където споменатото човешко антитяло или негова антиген-свързваща част неутрализира човешката ТИРалфа цитотоксичност при стандартен in vitro L929 анализ с 1С50 от 1 х 10 '0 М или по-малко.
  5. 5. Състав за използване съгласно претенция 1, където споменатото човешко антитяло потиска индуцираната от човешки ТИРалфа експресия на ELAM'1 в човешки ендотелни клетки от пъпната вена.
  6. 6. Състав за използване съгласно претенция 1, където споменатото човешко антитяло има IgGl тежковерижна константна област или където споменатото човешко анти тяло има IgG4 тежковерижна константна област.
  7. 7. Състав за използване съгласно всяка една от предходните претенции, където съставът се прилага при режим на дозиране два пъти седмично на всеки 14 дни.
  8. 8. Състав за използване съгласно всяка една от предходните претенции, където съставът се прилага в комбинация с допълнително терапевтично средство.
  9. 9. Състав за използване съгласно претенция 8, където допълнителното терапевтично средство е избрано от групата, съставена от нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат - NSAID, цитокин супресиращ противовъзпалителен лекарствен препарат, цитокин IL'4 и цитокин IL10.
  10. 10. Състав за използване съгласно претенция 10, където NSAID е избран от групата, съставена от тенидап, напроксен, мелоксикам, ибупрофен, пироксикам и индометацин.
  11. 11. Състав за използване съгласно претенция 8, където допълнителното терапевтично средство е метотрексат.
  12. 12. Състав за използване съгласно всяка една от предходните претенции, където споменатото автоимунно заболяване е избрано от групата, съставена от ревматоиден артрит, ревматоиден спондилит, остеоартрит и подагрозен артрит, по-специално ревматоиден артрит или е избрано от групата, съставена от алергия, множествена склероза, автоимунен диабет, автоимунен увеит и нефротичен синдром.
  13. 13. Предварително напълнена спринцовка, включваща състав съгласно всяка една от претенции от 1 до 7 и фармацевтично приемлив носител, където съставът е за използване за лечение на автоимунно нарушение в човек и се прилага подкожно на човек, нуждаещ се от него, при режим на дозиране два пъти седмично на всеки 13‘5 дни.
  14. 14. Предварително напълнена спринцовка съгласно претенция 13, където споменатото автоимунно заболяване е избрано от групата, съставена от ревматоиден артрит, ревматоиден спондилит, остеоартрит и подагрозен артрит, поспециално ревматоиден артрит или е избрано от групата, съставена от алергия, множествена склероза, автоимунен диабет, автоимунен увеит и нефротичен синдром.
    66459 Bl
  15. 15. Предварително напълнена спринцовка съгласно претенция 13 или 14, където съставът се прилага при режим на дозиране два пъти седмично на всеки 14 дни,
BG108514A 2001-06-08 2004-01-06 Методи за прилагане на анти -tnf алфа антитела BG66459B1 (bg)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
BG111719A BG66936B1 (bg) 2001-06-08 2014-03-12 Изолирано човешко анти-tnf алфа антитяло

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US29696101P 2001-06-08 2001-06-08
PCT/US2002/017790 WO2002100330A2 (en) 2001-06-08 2002-06-05 METHODS OF ADMINISTERING ANTI-TNFα ANTIBODIES

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BG108514A BG108514A (bg) 2005-04-30
BG66459B1 true BG66459B1 (bg) 2014-10-31

Family

ID=23144283

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG108514A BG66459B1 (bg) 2001-06-08 2004-01-06 Методи за прилагане на анти -tnf алфа антитела
BG111719A BG66936B1 (bg) 2001-06-08 2014-03-12 Изолирано човешко анти-tnf алфа антитяло

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG111719A BG66936B1 (bg) 2001-06-08 2014-03-12 Изолирано човешко анти-tnf алфа антитяло

Country Status (32)

Country Link
US (16) US8889135B2 (bg)
EP (6) EP2940044B8 (bg)
JP (7) JP2005517629A (bg)
KR (8) KR20040030661A (bg)
CN (5) CN1638796A (bg)
AR (3) AR034429A1 (bg)
AU (1) AU2002314922C1 (bg)
BG (2) BG66459B1 (bg)
BR (1) BR0206289A (bg)
CA (3) CA2868614A1 (bg)
CL (1) CL2012000856A1 (bg)
CY (1) CY1120540T1 (bg)
CZ (1) CZ309160B6 (bg)
DK (2) DK1406656T3 (bg)
EC (1) ECSP034867A (bg)
ES (2) ES2400458T3 (bg)
HU (1) HU230947B1 (bg)
IL (4) IL158831A0 (bg)
LT (1) LT2940044T (bg)
MX (2) MXPA03011316A (bg)
NO (2) NO334490B1 (bg)
NZ (6) NZ545649A (bg)
PE (2) PE20160999A1 (bg)
PH (3) PH12013500297A1 (bg)
PL (4) PL217666B1 (bg)
PT (2) PT1406656E (bg)
SA (1) SA02230384B1 (bg)
SI (2) SI2940044T1 (bg)
SK (1) SK288509B6 (bg)
TW (1) TWI473622B (bg)
WO (1) WO2002100330A2 (bg)
ZA (1) ZA200308861B (bg)

Families Citing this family (119)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6090382A (en) * 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
NZ536216A (en) 1996-02-09 2006-08-31 Abbott Biotech Ltd Use of an isolated antibody D2E7 for the treatment of a disorder in which TNF(alpha) activity is detrimental
CA2868614A1 (en) 2001-06-08 2002-12-08 Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. Methods of administering anti-tnf.alpha. antibodies
US20040009172A1 (en) * 2002-04-26 2004-01-15 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
US20030206898A1 (en) * 2002-04-26 2003-11-06 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
US20090280065A1 (en) * 2006-04-10 2009-11-12 Willian Mary K Uses and Compositions for Treatment of Psoriasis
PT1944322E (pt) * 2002-07-19 2015-07-01 Abbvie Biotechnology Ltd Tratamento de distúrbios relacionados com tnf-alfa
US20040033228A1 (en) 2002-08-16 2004-02-19 Hans-Juergen Krause Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders
MY150740A (en) * 2002-10-24 2014-02-28 Abbvie Biotechnology Ltd Low dose methods for treating disorders in which tnf? activity is detrimental
WO2004087730A2 (en) * 2003-03-27 2004-10-14 The Johns Hopkins University Method for producing diverse libraries of encoded polymers
US7344716B2 (en) * 2003-05-13 2008-03-18 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of specific inhibitors of pro-inflammatory cytokines
US8273347B2 (en) * 2003-05-13 2012-09-25 Depuy Spine, Inc. Autologous treatment of degenerated disc with cells
US7892563B2 (en) * 2003-05-20 2011-02-22 Wyeth Holdings Corporation Methods for treatment of severe acute respiratory syndrome (SARS)
US8361467B2 (en) * 2003-07-30 2013-01-29 Depuy Spine, Inc. Trans-capsular administration of high specificity cytokine inhibitors into orthopedic joints
US8895540B2 (en) * 2003-11-26 2014-11-25 DePuy Synthes Products, LLC Local intraosseous administration of bone forming agents and anti-resorptive agents, and devices therefor
TW201705980A (zh) * 2004-04-09 2017-02-16 艾伯維生物技術有限責任公司 用於治療TNFα相關失調症之多重可變劑量療法
AU2011218744B2 (en) * 2004-04-09 2012-09-20 Abbvie Biotechnology Ltd Multiple-variable dose regimen for treating TNFalpha-related disorders
GB0414054D0 (en) 2004-06-23 2004-07-28 Owen Mumford Ltd Improvements relating to automatic injection devices
EP1769003A1 (en) * 2004-07-06 2007-04-04 Bioren, Inc. HIGH AFFINITY ANTI-TNF-alpha ANTIBODIES AND METHOD
EP1807111A4 (en) * 2004-10-08 2009-05-27 Abbott Biotech Ltd SYNCYTIAL RESPIRATORY VIRUS INFECTION (RSV)
US20060253100A1 (en) 2004-10-22 2006-11-09 Medtronic, Inc. Systems and Methods to Treat Pain Locally
EP1874821B1 (de) 2005-04-26 2013-04-17 Trion Pharma Gmbh Kombination von antikörpern mit glukokortikoiden zur behandlung von krebs
AU2012254978C1 (en) * 2005-05-16 2017-06-01 Abbvie Biotechnology Ltd Use of TNF inhibitor for treatment of erosive polyarthritis
TWI399384B (zh) * 2005-05-16 2013-06-21 Abbott Biotech Ltd TNFα抑制劑於治療侵蝕型多發性關節炎之用途
US20070041905A1 (en) * 2005-08-19 2007-02-22 Hoffman Rebecca S Method of treating depression using a TNF-alpha antibody
KR20140012160A (ko) 2005-11-01 2014-01-29 애브비 바이오테크놀로지 리미티드 바이오마커를 사용하여 강직성 척추염을 진단하기 위한 방법 및 조성물
US20100226920A1 (en) * 2006-03-27 2010-09-09 Ablynx N.V. Medical delivery device for therapeutic proteins based on single domain antibodies
ES2560864T3 (es) 2006-04-04 2016-02-23 Singulex, Inc. Sistema de alta sensibilidad y métodos de análisis de la troponina
TW201333030A (zh) 2006-04-05 2013-08-16 Abbott Biotech Ltd 抗體之純化
US20090317399A1 (en) * 2006-04-10 2009-12-24 Pollack Paul F Uses and compositions for treatment of CROHN'S disease
EP2708242A3 (en) 2006-04-10 2014-03-26 Abbott Biotechnology Ltd Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
EP2007426A4 (en) 2006-04-10 2010-06-16 Abbott Biotech Ltd COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF PSORIASTIC POLYARTHRITIS AND THEIR APPLICATIONS
CA2564435A1 (en) 2006-04-10 2007-10-10 Abbott Biotechnology Ltd. Methods for monitoring and treating intestinal disorders
US9605064B2 (en) 2006-04-10 2017-03-28 Abbvie Biotechnology Ltd Methods and compositions for treatment of skin disorders
WO2007120626A2 (en) 2006-04-10 2007-10-25 Abbott Biotechnology Ltd. Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
EP2010213A4 (en) * 2006-04-10 2010-08-11 Abbott Biotech Ltd USE AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF JUVENIL RHEUMATOID ARTHRITIS
WO2007120656A2 (en) * 2006-04-10 2007-10-25 Abbott Biotechnology Ltd. Uses and compositions for treatment of rheumatoid arthritis
US20080131374A1 (en) * 2006-04-19 2008-06-05 Medich John R Uses and compositions for treatment of rheumatoid arthritis
WO2007121491A1 (en) * 2006-04-25 2007-11-01 Intercell Ag Hcv vaccinations
US20100021451A1 (en) 2006-06-08 2010-01-28 Wong Robert L Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
US20080311043A1 (en) * 2006-06-08 2008-12-18 Hoffman Rebecca S Uses and compositions for treatment of psoriatic arthritis
BRPI0713802A2 (pt) * 2006-06-30 2012-11-06 Abbott Biotech Ltd dispositivo de injeção automático
SG176427A1 (en) 2006-10-27 2011-12-29 Abbott Biotech Ltd Crystalline anti-htnfalpha antibodies
WO2008150491A2 (en) * 2007-05-31 2008-12-11 Abbott Laboratories BIOMARKERS PREDICTIVE OF THE RESPONSIVENESS TO TNFα INHIBITORS IN AUTOIMMUNE DISORDERS
EP2171451A4 (en) 2007-06-11 2011-12-07 Abbott Biotech Ltd METHOD FOR TREATING JUVENILIAN IDIOPATHIC ARTHRITIS
JP2010533181A (ja) * 2007-07-13 2010-10-21 アボツト・バイオテクノロジー・リミテツド TNFα阻害剤の肺投与のための方法及び組成物
WO2009020654A1 (en) 2007-08-08 2009-02-12 Abbott Laboratories Compositions and methods for crystallizing antibodies
US8883146B2 (en) 2007-11-30 2014-11-11 Abbvie Inc. Protein formulations and methods of making same
EP2231175A4 (en) 2007-11-30 2014-07-16 Abbvie Inc PROTEIN FORMULATIONS AND MANUFACTURING METHOD
US8986696B2 (en) 2007-12-21 2015-03-24 Depuy Mitek, Inc. Trans-capsular administration of p38 map kinase inhibitors into orthopedic joints
HUE024903T2 (en) 2007-12-26 2016-02-29 Xencor Inc Fc variants with altered binding to fcrn
JP2011510267A (ja) * 2008-01-03 2011-03-31 アボツト・バイオテクノロジー・リミテツド 乾癬の治療における化合物の長期的効力の予測
JP6078217B2 (ja) 2008-01-15 2017-02-08 アッヴィ・ドイチュラント・ゲー・エム・ベー・ハー・ウント・コー・カー・ゲー 粉末化されたタンパク質組成物及びその作製方法
US20100040630A1 (en) * 2008-03-24 2010-02-18 Aake Elden Methods and compositions for treating bone loss
USRE48948E1 (en) 2008-04-18 2022-03-01 Warsaw Orthopedic, Inc. Clonidine compounds in a biodegradable polymer
US20100239632A1 (en) 2009-03-23 2010-09-23 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug depots for treatment of pain and inflammation in sinus and nasal cavities or cardiac tissue
US8722860B2 (en) 2009-04-16 2014-05-13 Abbvie Biotherapeutics Inc. Anti-TNF-α antibodies and their uses
MX2011011541A (es) 2009-04-29 2012-02-28 Abbott Biotech Ltd Dispositivo de inyeccion automatico.
TWI619521B (zh) 2009-12-15 2018-04-01 艾伯維生物技術有限責任公司 自動注射裝置、自動注射方法及防止不發射情況之方法
AU2010330907A1 (en) 2009-12-16 2012-06-14 Bosch, Phillip Methods of treating interstitial cystitis
JO3417B1 (ar) 2010-01-08 2019-10-20 Regeneron Pharma الصيغ المستقرة التي تحتوي على الأجسام المضادة لمضاد مستقبل( interleukin-6 (il-6r
EP2531613A2 (en) 2010-02-02 2012-12-12 Abbott Biotechnology Ltd. Methods and compositions for predicting responsiveness to treatment with tnf-alpha inhibitor
KR20130092418A (ko) 2010-04-21 2013-08-20 애브비 바이오테크놀로지 리미티드 치료제의 제어된 전달을 위한 착용형 자동 주사 디바이스
US20110287018A1 (en) 2010-05-19 2011-11-24 Philip Bosch Methods of Treating Interstitial Cystitis
DK2575884T3 (en) 2010-06-03 2018-09-03 Abbvie Biotechnology Ltd APPLICATIONS AND COMPOSITIONS TO TREAT HIDRADENITIS SUPPURATIVA (HS)
AR083495A1 (es) 2010-10-22 2013-02-27 Esbatech Alcon Biomed Res Unit Anticuerpos estables y solubles
NZ609469A (en) 2010-11-11 2015-02-27 Abbvie Biotechnology Ltd Improved high concentration anti-tnfα antibody liquid formulations
SG192119A1 (en) 2011-01-24 2013-08-30 Abbvie Biotechnology Ltd Automatic injection devices having overmolded gripping surfaces
EP2702077A2 (en) 2011-04-27 2014-03-05 AbbVie Inc. Methods for controlling the galactosylation profile of recombinantly-expressed proteins
KR102308938B1 (ko) * 2011-05-02 2021-10-01 밀레니엄 파머슈티컬스 인코퍼레이티드 항-α4β7 항체에 대한 제형
SG10201604767TA (en) 2011-06-13 2016-08-30 Abgenomics Cooperatief Ua Anti-psgl-1 antibodies and uses thereof
CA2857597A1 (en) 2011-11-30 2013-06-06 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Methods and compositions for determining responsiveness to treatment with a tnf-alpha inhibitor
US9334319B2 (en) 2012-04-20 2016-05-10 Abbvie Inc. Low acidic species compositions
US9181572B2 (en) 2012-04-20 2015-11-10 Abbvie, Inc. Methods to modulate lysine variant distribution
US9067990B2 (en) 2013-03-14 2015-06-30 Abbvie, Inc. Protein purification using displacement chromatography
US9249182B2 (en) 2012-05-24 2016-02-02 Abbvie, Inc. Purification of antibodies using hydrophobic interaction chromatography
CA2883272A1 (en) 2012-09-02 2014-03-06 Abbvie Inc. Methods to control protein heterogeneity
US9512214B2 (en) 2012-09-02 2016-12-06 Abbvie, Inc. Methods to control protein heterogeneity
SG10201705668XA (en) 2012-09-07 2017-08-30 Coherus Biosciences Inc Stable aqueous formulations of adalimumab
AU2013381687A1 (en) 2013-03-12 2015-09-24 Abbvie Inc. Human antibodies that bind human TNF-alpha and methods of preparing the same
US8921526B2 (en) 2013-03-14 2014-12-30 Abbvie, Inc. Mutated anti-TNFα antibodies and methods of their use
US9017687B1 (en) 2013-10-18 2015-04-28 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography
WO2014151878A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Abbvie Inc. Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosacharides
WO2015051293A2 (en) 2013-10-04 2015-04-09 Abbvie, Inc. Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins
WO2015057910A1 (en) 2013-10-16 2015-04-23 Oncobiologics, Inc. Buffer formulations for enhanced antibody stability
US8946395B1 (en) 2013-10-18 2015-02-03 Abbvie Inc. Purification of proteins using hydrophobic interaction chromatography
US9181337B2 (en) 2013-10-18 2015-11-10 Abbvie, Inc. Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same
US9085618B2 (en) 2013-10-18 2015-07-21 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same
US20150139988A1 (en) 2013-11-15 2015-05-21 Abbvie, Inc. Glycoengineered binding protein compositions
US9763992B2 (en) 2014-02-13 2017-09-19 Father Flanagan's Boys' Home Treatment of noise induced hearing loss
GB201407852D0 (en) * 2014-05-02 2014-06-18 Iontas Ltd Preparation of libraries od protein variants expressed in eukaryotic cells and use for selecting binding molecules
US11548940B2 (en) 2014-05-15 2023-01-10 Rani Therapeutics, Llc Anti-interleukin antibody preparations for delivery into a lumen of the intestinal tract using a swallowable drug delivery device
US10689460B2 (en) 2014-05-15 2020-06-23 Incube Labs, Llc PCSK9 antibody preparations for delivery into a lumen of the intestinal tract using a swallowable drug delivery device
CA3198322A1 (en) 2014-05-15 2015-11-19 Rani Therapeutics, Llc Pharmaceutical compositions and methods for fabrication of solid masses comprising polypeptides and/or proteins
EP3145951A1 (en) 2014-06-24 2017-03-29 InSight Biopharmaceuticals Ltd. Methods of purifying antibodies
JP7081923B2 (ja) 2014-07-31 2022-06-07 ユーエイビー リサーチ ファンデーション アポe模倣ペプチド及び血漿コレステロールを取り除くためのより高い効果
CN104382977A (zh) * 2014-11-17 2015-03-04 昆明朗盛生物科技有限公司 一种女性专用的玛咖组合物
WO2016103093A1 (en) 2014-12-23 2016-06-30 Pfizer Inc. Stable aqueous antibody formulation for anti tnf alpha antibodies
WO2016118707A1 (en) 2015-01-21 2016-07-28 Oncobiologics, Inc. Modulation of charge variants in a monoclonal antibody composition
EP3078675A1 (en) 2015-04-10 2016-10-12 Ares Trading S.A. Induction dosing regimen for the treatment of tnf alpha mediated disorders
CN107847446A (zh) 2015-05-01 2018-03-27 因库博实验室有限责任公司 药物组合物和用于制备包含多肽和/或蛋白质的固体块的方法
US11229702B1 (en) 2015-10-28 2022-01-25 Coherus Biosciences, Inc. High concentration formulations of adalimumab
WO2017083525A1 (en) 2015-11-11 2017-05-18 Opi Vi- Ip Holdco Llc Composition and methods for anti-tnfr2 antibodies
WO2017136433A1 (en) 2016-02-03 2017-08-10 Oncobiologics, Inc. Buffer formulations for enhanced antibody stability
SG10202012182YA (en) * 2016-03-07 2021-01-28 Sanofi Biotechnology Compositions and methods for treating rheumatoid arthritis
WO2017184880A1 (en) 2016-04-20 2017-10-26 Coherus Biosciences, Inc. A method of filling a container with no headspace
RS62040B1 (sr) 2016-06-02 2021-07-30 Abbvie Inc Agonist receptora glukokortikoida i njegovi imunokonjugati
EP3824906A1 (en) 2016-12-21 2021-05-26 Amgen Inc. Anti-tnf alpha antibody formulations
KR20190024572A (ko) * 2017-08-30 2019-03-08 (주)셀트리온 TNFα 관련 질환을 치료하기 위한 피하 투여 요법
EP3456739A1 (en) * 2017-09-19 2019-03-20 Tillotts Pharma Ag Use of anti-tnfalpha antibodies for treating wounds
RU2020117698A (ru) 2017-12-01 2022-01-04 Эббви Инк. Агонист глюкокортикоидного рецептора и его иммуноконъюгаты
KR20210049871A (ko) 2018-08-29 2021-05-06 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 류마티스성 관절염을 갖는 대상체를 치료하기 위한 방법 및 조성물
SG11202107735SA (en) 2019-01-31 2021-08-30 Sanofi Biotechnology Anti-il-6 receptor antibody for treating juvenile idiopathic arthritis
AR118191A1 (es) 2019-02-28 2021-09-22 Celltrion Inc MÉTODOS PARA EL TRATAMIENTO DE ENFERMEDADES RELACIONADAS CON TNFa
WO2020183471A1 (en) * 2019-03-14 2020-09-17 Biond Biologics Ltd. A method for immunosuppression
WO2020247461A1 (en) 2019-06-04 2020-12-10 Sanofi Biotechnology Compositions and methods for treating pain in subj ects with rheumatoid arthritis
TW202128748A (zh) * 2020-01-24 2021-08-01 日商西斯美股份有限公司 提升抗體對抗原之親和性的方法及其用途
WO2025006419A1 (en) * 2023-06-26 2025-01-02 Flagship Pioneering Innovations Vii, Llc Engineered plasmodia and related methods
KR20250031013A (ko) * 2023-08-23 2025-03-06 (주)셀트리온 TNFα 관련 질환을 치료하는 방법

Family Cites Families (123)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4634665A (en) 1980-02-25 1987-01-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
EP0101681B1 (en) 1981-09-08 1994-12-14 The Rockefeller University Antibody to a mediator activity composition and its use in a pharmaceutical composition
US4510245A (en) 1982-11-18 1985-04-09 Chiron Corporation Adenovirus promoter system
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US5672347A (en) * 1984-07-05 1997-09-30 Genentech, Inc. Tumor necrosis factor antagonists and their use
IL73883A (en) 1984-12-20 1990-12-23 Yeda Res & Dev Monoclonal antibodies against tnf-alpha,hybridomas producing them and method for the purification of tnf-alpha
US5168062A (en) 1985-01-30 1992-12-01 University Of Iowa Research Foundation Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence
ATE114673T1 (de) 1985-08-16 1994-12-15 Univ Rockefeller Modulator der anabolischen aktivität und seine verwendungen.
US4870163A (en) 1985-08-29 1989-09-26 New York Blood Center, Inc. Preparation of pure human tumor necrosis factor and hybridomas producing monoclonal antibodies to human tumor necrosis factor
US5246714A (en) 1985-10-11 1993-09-21 Aktiebolaget Hassle Drug preparation
GB8528234D0 (en) 1985-11-15 1985-12-18 Wyeth John & Brother Ltd Heterocyclic compounds
US4968615A (en) 1985-12-18 1990-11-06 Ciba-Geigy Corporation Deoxyribonucleic acid segment from a virus
EP0230574A3 (en) 1986-01-31 1989-03-22 Yale University Pharmaceutical compositions against infections caused by lav/htlv iii virus and the use thereof
DE3631229A1 (de) 1986-09-13 1988-03-24 Basf Ag Monoklonale antikoerper gegen humanen tumornekrosefaktor (tnf) und deren verwendung
NZ229922A (en) 1988-07-18 1992-04-28 Chiron Corp Monoclonal antibodies specifically binding cachectin (tumor necrosis factor) and compositions
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
DE68914244T2 (de) 1988-10-24 1994-10-27 Otsuka Pharma Co Ltd Monoklonaler Antikörper.
US5750373A (en) 1990-12-03 1998-05-12 Genentech, Inc. Enrichment method for variant proteins having altered binding properties, M13 phagemids, and growth hormone variants
ES2096553T3 (es) 1988-12-19 1997-03-16 American Cyanamid Co Metodo para el tratamiento de choque endotoxico en un animal mamifero.
DK0486526T3 (da) 1989-08-07 1996-06-24 Peptide Technology Ltd Bindingsligander for tumornekrosefaktor
FR2651130B1 (fr) 1989-08-23 1991-12-13 Roussel Uclaf Sequence d'oligonucleotides anti-sens, anti-arn message du tnf alpha, procede de preparation, application a titre de medicaments et compositions pharmaceutiques.
GB8921123D0 (en) * 1989-09-19 1989-11-08 Millar Ann B Treatment of ards
GB8928874D0 (en) 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
US5859205A (en) * 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
US6075181A (en) * 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5945098A (en) * 1990-02-01 1999-08-31 Baxter International Inc. Stable intravenously-administrable immune globulin preparation
DE4037604A1 (de) 1990-04-25 1991-10-31 Bayer Ag Verwendung von anti-tnf-antikoerpern als arzneimittel bei der behandlung von ischaemien und deren folgen
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9014932D0 (en) * 1990-07-05 1990-08-22 Celltech Ltd Recombinant dna product and method
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
WO1992020791A1 (en) 1990-07-10 1992-11-26 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
JPH06500323A (ja) 1990-08-27 1994-01-13 ペプチド テクノロジィ リミテッド ウイルス性感染の治療方法
US5994510A (en) * 1990-12-21 1999-11-30 Celltech Therapeutics Limited Recombinant antibodies specific for TNFα
GB9109645D0 (en) 1991-05-03 1991-06-26 Celltech Ltd Recombinant antibodies
GB2279077B (en) 1990-12-21 1995-06-14 Celltech Ltd Therapeutic compositions comprising recombinant antibodies specific for the TNFalpha
GB9028123D0 (en) 1990-12-28 1991-02-13 Erba Carlo Spa Monoclonal antibodies against human tumor necrosis factor alpha
ES2287206T3 (es) 1991-03-01 2007-12-16 Dyax Corporation Proceso para el desarrollo de mini-proteinas de union.
CA2288429C (en) 1991-03-15 2006-04-25 Synergen, Inc. Pegylation of polypeptides
US5698195A (en) * 1991-03-18 1997-12-16 New York University Medical Center Methods of treating rheumatoid arthritis using chimeric anti-TNF antibodies
EP1905782A1 (en) 1991-03-18 2008-04-02 New York University Monoclonal and chimeric antibodies specific for human tumor necrosis factor
US6277969B1 (en) 1991-03-18 2001-08-21 New York University Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US20060246073A1 (en) * 1991-03-18 2006-11-02 Knight David M Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US20040120952A1 (en) * 2000-08-07 2004-06-24 Centocor, Inc Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US20070298040A1 (en) * 1991-03-18 2007-12-27 Centocor, Inc. Methods of treating seronegative arthropathy with anti-TNF antibodies
DE69130262T2 (de) 1991-03-29 1999-03-18 Immunex Corp., Seattle, Wash. Isolierte virale proteine als cytokinantagonisten
JP3672306B2 (ja) 1991-04-10 2005-07-20 ザ スクリップス リサーチ インスティテュート ファージミドを使用するヘテロ二量体受容体ライブラリー
EP0590058B1 (en) * 1991-06-14 2003-11-26 Genentech, Inc. HUMANIZED Heregulin ANTIBODy
DE4122599C2 (de) 1991-07-08 1993-11-11 Deutsches Krebsforsch Phagemid zum Screenen von Antikörpern
DK0605522T3 (da) 1991-09-23 2000-01-17 Medical Res Council Fremgangsmåde til fremstilling af humaniserede antistoffer
WO1993011793A1 (en) 1991-12-17 1993-06-24 Schering Corporation Use of the combination of anti-tumor necrosis factor plus interleukin-6 to treat septic shock
US5195967A (en) * 1992-02-18 1993-03-23 Nakao Naomi L Anticlotting device and method for use with IV catheters
DE69331265T2 (de) 1992-04-02 2002-08-08 Smithkline Beecham Corp., Philadelphia Verbindungen zur behandlung von entzündlichen erkrankungen und zur hemmung der produktion von tumornekrosefaktor
EP0585705B1 (en) 1992-08-28 1998-11-04 Bayer Corporation Use of monoclonal antibodies to TNF to treat bacterial meningitis
KR100232688B1 (ko) 1992-09-15 1999-12-01 스코트 쥐. 홀퀴스트 종양 괴사 인자 길항제를 함유하는 tnf-의존성 염증 치료용 제약 조성물
US6270766B1 (en) 1992-10-08 2001-08-07 The Kennedy Institute Of Rheumatology Anti-TNF antibodies and methotrexate in the treatment of arthritis and crohn's disease
JPH08509203A (ja) 1992-10-15 1996-10-01 ダナ−ファーバー キャンサー インステテュート インコーポレイテッド TNF−α作用の拮抗剤を用いる肥満関連糖尿病▲II▼型のインスリン耐性の治療
ES2159529T5 (es) * 1993-03-05 2011-03-09 Bayer Corporation Anticuerpos monoclonales humanos anti-tnf alfa.
DE4307508A1 (de) 1993-03-10 1994-09-15 Knoll Ag Verwendung von anti-TNF-Antikörpern als Arzneimittel bei der Behandlung von Herzinsuffizienz (Herzmuskelschwäche)
GB2294267B (en) 1993-06-03 1996-11-20 Therapeutic Antibodies Inc Anti-TNFalpha Fab fragments derived from polyclonal IgG antibodies
US5500227A (en) 1993-11-23 1996-03-19 Euro-Celtique, S.A. Immediate release tablet cores of insoluble drugs having sustained-release coating
EP0659766A1 (en) 1993-11-23 1995-06-28 Schering-Plough Human monoclonal antibodies against human cytokines and methods of making and using such antibodies
NZ278607A (en) * 1994-02-07 1999-05-28 Knoll Ag Use of tnf antagonists for treating disorders involving elevated serum levels of il-6 wherein the serum levels are 500pg/ml or above
WO1995023813A1 (en) 1994-03-04 1995-09-08 Merck & Co., Inc. In vitro antibody affinity maturation using alanine scanning mutagenesis
ZA955642B (en) * 1994-07-07 1997-05-06 Ortho Pharma Corp Lyophilized imaging agent formulation
US6267958B1 (en) * 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
EP2275119B1 (en) 1995-07-27 2013-09-25 Genentech, Inc. Stable isotonic lyophilized protein formulation
US6090382A (en) * 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
NZ536216A (en) * 1996-02-09 2006-08-31 Abbott Biotech Ltd Use of an isolated antibody D2E7 for the treatment of a disorder in which TNF(alpha) activity is detrimental
GB9610992D0 (en) * 1996-05-24 1996-07-31 Glaxo Group Ltd Concentrated antibody preparation
JP2000516594A (ja) 1996-07-26 2000-12-12 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 免疫細胞介在全身性疾患の改良された治療法
ATE230277T1 (de) 1997-06-13 2003-01-15 Genentech Inc Stabilisierte antikörperformulierung
US6171586B1 (en) * 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
US5971953A (en) * 1998-01-09 1999-10-26 Bachynsky; Nicholas Dual chamber syringe apparatus
TR200103058T2 (tr) 1998-06-15 2002-06-21 Sepracor Inc. Apne, bulimi ve başka bozuklukların tedavi edilmesi için optik açıdan saf (+)-norsisapridin kullanımı.
JP3889197B2 (ja) * 1999-02-22 2007-03-07 中外製薬株式会社 プランジャロッド付きシリンジ製剤の製造方法及びその組付装置
US6423321B2 (en) * 1999-02-24 2002-07-23 Edward L. Tobinick Cytokine antagonists for the treatment of sensorineural hearing loss
US6537549B2 (en) * 1999-02-24 2003-03-25 Edward L. Tobinick Cytokine antagonists for the treatment of localized disorders
US6419944B2 (en) * 1999-02-24 2002-07-16 Edward L. Tobinick Cytokine antagonists for the treatment of localized disorders
US6015557A (en) * 1999-02-24 2000-01-18 Tobinick; Edward L. Tumor necrosis factor antagonists for the treatment of neurological disorders
DK1159003T3 (da) 1999-03-02 2011-02-07 Centocor Inc Anti-tnfalfa-antistoffer til terapi af steroid-resistent astma
ES2200783T3 (es) * 1999-03-31 2004-03-16 Pfizer Products Inc. Acidos dioxociclopentil hidroxamicos.
SE9901366D0 (sv) * 1999-04-16 1999-04-16 Pharmacia & Upjohn Ab Injector device and method for its operation
EP1174148A4 (en) 1999-04-28 2005-05-04 Yamanouchi Pharma Co Ltd PARENTAL MEDICAL COMPOSITIONS CONTAINING FRAGMENTS OF HUMANIZED MONOCLONAL ANTIBODIES AND METHOD FOR STABILIZING THE SAME
US6502867B2 (en) 1999-06-16 2003-01-07 United States Pipe & Foundry Flanged pipe fitting
WO2001000229A1 (en) 1999-06-24 2001-01-04 Pharmacia Corporation Combination of tumors necrocis factor (tnf) antagonists and cox-2 inhibitors for the treatment of inflammation
WO2001017542A1 (fr) * 1999-09-08 2001-03-15 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Preparation de solution de proteines et procede de stabilisation associe
WO2001037874A2 (en) 1999-11-24 2001-05-31 Centocor, Inc. Treatment of psoriasis by using an antibody to tnf alpha
US20030124119A1 (en) 1999-12-28 2003-07-03 Tadao Yamazaki Stable antibody compositions and injection preparations
GB0013810D0 (en) 2000-06-06 2000-07-26 Celltech Chiroscience Ltd Biological products
UA81743C2 (uk) * 2000-08-07 2008-02-11 Центокор, Инк. МОНОКЛОНАЛЬНЕ АНТИТІЛО ЛЮДИНИ, ЩО СПЕЦИФІЧНО ЗВ'ЯЗУЄТЬСЯ З ФАКТОРОМ НЕКРОЗУ ПУХЛИН АЛЬФА (ФНПα), ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ, ЩО ЙОГО МІСТИТЬ, ТА СПОСІБ ЛІКУВАННЯ РЕВМАТОЇДНОГО АРТРИТУ
US20060018907A1 (en) * 2000-08-07 2006-01-26 Centocor, Inc. Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US20050249735A1 (en) * 2000-08-07 2005-11-10 Centocor, Inc. Methods of treating ankylosing spondylitis using anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US20030012786A1 (en) * 2001-05-25 2003-01-16 Teoh Leah S. Use of anti-TNF antibodies as drugs in treating septic disorders of anemic patients
CA2868614A1 (en) 2001-06-08 2002-12-08 Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. Methods of administering anti-tnf.alpha. antibodies
IL160358A0 (en) * 2001-08-23 2004-07-25 Genmab As Human antibodies specific for interleukin 15 (il-15)
US20030161828A1 (en) * 2002-02-19 2003-08-28 Abbott Gmbh & Co. Kg Use of TNF antagonists as drugs for the treatment of patients with an inflammatory reaction and without suffering from total organ failure
KR100708398B1 (ko) 2002-03-22 2007-04-18 (주) 에이프로젠 인간화 항체 및 이의 제조방법
US20040009172A1 (en) * 2002-04-26 2004-01-15 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
US20090280065A1 (en) * 2006-04-10 2009-11-12 Willian Mary K Uses and Compositions for Treatment of Psoriasis
PT1944322E (pt) * 2002-07-19 2015-07-01 Abbvie Biotechnology Ltd Tratamento de distúrbios relacionados com tnf-alfa
US7226426B2 (en) 2002-07-25 2007-06-05 Thomson Paul E Apparatus and method for the detection and quantification of joint and tissue inflammation
US20040033228A1 (en) * 2002-08-16 2004-02-19 Hans-Juergen Krause Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders
MY150740A (en) * 2002-10-24 2014-02-28 Abbvie Biotechnology Ltd Low dose methods for treating disorders in which tnf? activity is detrimental
TW201705980A (zh) * 2004-04-09 2017-02-16 艾伯維生物技術有限責任公司 用於治療TNFα相關失調症之多重可變劑量療法
EP1807111A4 (en) * 2004-10-08 2009-05-27 Abbott Biotech Ltd SYNCYTIAL RESPIRATORY VIRUS INFECTION (RSV)
TWI399384B (zh) * 2005-05-16 2013-06-21 Abbott Biotech Ltd TNFα抑制劑於治療侵蝕型多發性關節炎之用途
US20070041905A1 (en) * 2005-08-19 2007-02-22 Hoffman Rebecca S Method of treating depression using a TNF-alpha antibody
KR20140012160A (ko) * 2005-11-01 2014-01-29 애브비 바이오테크놀로지 리미티드 바이오마커를 사용하여 강직성 척추염을 진단하기 위한 방법 및 조성물
TW201333030A (zh) * 2006-04-05 2013-08-16 Abbott Biotech Ltd 抗體之純化
US9605064B2 (en) * 2006-04-10 2017-03-28 Abbvie Biotechnology Ltd Methods and compositions for treatment of skin disorders
BRPI0713802A2 (pt) * 2006-06-30 2012-11-06 Abbott Biotech Ltd dispositivo de injeção automático
SG176427A1 (en) * 2006-10-27 2011-12-29 Abbott Biotech Ltd Crystalline anti-htnfalpha antibodies
WO2009020654A1 (en) * 2007-08-08 2009-02-12 Abbott Laboratories Compositions and methods for crystallizing antibodies
WO2014152463A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Cyberheart, Inc. Apparatus and method for real-time tracking of tissue structures
MX2011011541A (es) * 2009-04-29 2012-02-28 Abbott Biotech Ltd Dispositivo de inyeccion automatico.
RU2560701C2 (ru) * 2009-05-04 2015-08-20 Эббви Байотекнолоджи Лтд. Стабильные композиции с высокими концентрациями белков антител человека против tnf-альфа
CN102167741B (zh) 2010-02-25 2014-05-14 上海百迈博制药有限公司 一种全人源抗TNF-α单克隆抗体、其制备方法及用途
DK2575884T3 (en) * 2010-06-03 2018-09-03 Abbvie Biotechnology Ltd APPLICATIONS AND COMPOSITIONS TO TREAT HIDRADENITIS SUPPURATIVA (HS)
GB201112429D0 (en) 2011-07-19 2011-08-31 Glaxo Group Ltd Antigen-binding proteins with increased FcRn binding
JP6274421B2 (ja) 2013-03-22 2018-02-07 キヤノンメディカルシステムズ株式会社 超音波診断装置及びその制御プログラム
KR102197477B1 (ko) 2014-07-04 2020-12-31 주식회사 유풍 모자

Also Published As

Publication number Publication date
SI1406656T1 (sl) 2013-04-30
LT2940044T (lt) 2017-01-10
EP2359855A3 (en) 2011-11-02
NZ573478A (en) 2011-02-25
PH12013500865A1 (en) 2016-02-01
CZ200420A3 (cs) 2005-01-12
CN101574520A (zh) 2009-11-11
TWI473622B (zh) 2015-02-21
US20150071945A1 (en) 2015-03-12
MXPA03011316A (es) 2004-12-06
JP2015003922A (ja) 2015-01-08
IL212419A (en) 2015-03-31
KR20140012210A (ko) 2014-01-29
IL158831A (en) 2014-06-30
KR101497363B1 (ko) 2015-03-03
KR101282807B1 (ko) 2013-07-05
HU230947B1 (hu) 2019-05-28
ECSP034867A (es) 2004-01-28
PL217666B1 (pl) 2014-08-29
US20140322232A1 (en) 2014-10-30
PH12013500866A1 (en) 2016-02-22
US9546212B2 (en) 2017-01-17
AR090099A2 (es) 2014-10-22
BG108514A (bg) 2005-04-30
EP2364731A9 (en) 2012-06-20
EP2364731A2 (en) 2011-09-14
BG66936B1 (bg) 2019-08-15
US20140271637A1 (en) 2014-09-18
SI2940044T1 (sl) 2017-03-31
HUP0600688A2 (en) 2006-11-28
IL222495A (en) 2015-03-31
HUP0600688A3 (en) 2012-09-28
US8889135B2 (en) 2014-11-18
JP5832952B2 (ja) 2015-12-16
EP2324851A1 (en) 2011-05-25
EP2940044B8 (en) 2017-01-18
CY1120540T1 (el) 2019-07-10
JP2009167193A (ja) 2009-07-30
NZ529574A (en) 2006-05-26
US20030235585A1 (en) 2003-12-25
CA2385745C (en) 2015-02-17
JP6074462B2 (ja) 2017-02-01
US8974790B2 (en) 2015-03-10
EP2364731A3 (en) 2011-11-02
NO334490B1 (no) 2014-03-17
NZ596878A (en) 2013-07-26
CN105412922A (zh) 2016-03-23
WO2002100330A9 (en) 2007-06-21
CA2868614A1 (en) 2002-12-08
NZ586063A (en) 2012-02-24
ZA200308861B (en) 2004-09-13
CN1638796A (zh) 2005-07-13
JP2015166389A (ja) 2015-09-24
SK16462003A3 (sk) 2004-08-03
KR20120139851A (ko) 2012-12-27
PL399548A1 (pl) 2012-11-05
EP2940044B1 (en) 2016-11-16
US20130004507A1 (en) 2013-01-03
US20150175691A1 (en) 2015-06-25
US8992926B2 (en) 2015-03-31
US9073987B2 (en) 2015-07-07
JP2013100311A (ja) 2013-05-23
IL158831A0 (en) 2004-05-12
US20150165023A1 (en) 2015-06-18
CN103495165A (zh) 2014-01-08
BG111719A (bg) 2014-06-30
AR077572A2 (es) 2011-09-07
EP2359855A2 (en) 2011-08-24
EP2940044A1 (en) 2015-11-04
PL399491A1 (pl) 2012-10-08
PL217217B1 (pl) 2014-06-30
DK2940044T3 (en) 2017-02-20
IL212419A0 (en) 2011-06-30
CL2012000856A1 (es) 2012-09-14
PL217702B1 (pl) 2014-08-29
JP2005517629A (ja) 2005-06-16
PT2940044T (pt) 2017-01-12
SA02230384B1 (ar) 2009-08-19
AR034429A1 (es) 2004-02-25
US20200181252A1 (en) 2020-06-11
KR101715028B1 (ko) 2017-03-10
PH12013500865B1 (en) 2018-06-27
CA2817619A1 (en) 2002-12-08
US20140186368A1 (en) 2014-07-03
HK1065471A1 (en) 2005-02-25
MX341001B (es) 2016-08-03
US20150071939A1 (en) 2015-03-12
KR20090035746A (ko) 2009-04-10
PL215861B1 (pl) 2014-02-28
US20150079101A1 (en) 2015-03-19
TW201332570A (zh) 2013-08-16
US20150023982A1 (en) 2015-01-22
KR20160096222A (ko) 2016-08-12
DK1406656T3 (da) 2013-04-15
PL366694A1 (en) 2005-02-07
KR20100075698A (ko) 2010-07-02
SK288509B6 (sk) 2017-11-03
WO2002100330A3 (en) 2004-02-12
CZ309160B6 (cs) 2022-03-30
BR0206289A (pt) 2004-11-30
PH12013500866B1 (en) 2016-02-22
US20120177596A1 (en) 2012-07-12
JP2017031213A (ja) 2017-02-09
EP1406656A2 (en) 2004-04-14
PH12013500297A1 (en) 2015-09-07
CN103110944A (zh) 2013-05-22
KR20080089681A (ko) 2008-10-07
EP1406656A4 (en) 2006-05-24
NO343721B1 (no) 2019-05-20
AU2002314922C1 (en) 2017-11-09
JP6302529B2 (ja) 2018-03-28
EP1406656B1 (en) 2013-01-09
KR101142825B1 (ko) 2012-05-08
ES2612436T3 (es) 2017-05-16
EP2359855A9 (en) 2012-06-20
KR20110039505A (ko) 2011-04-18
US9017680B2 (en) 2015-04-28
ES2400458T3 (es) 2013-04-10
NO20035426L (no) 2004-02-03
NO20035426D0 (no) 2003-12-05
NO20120288L (no) 2004-02-03
US20150246968A1 (en) 2015-09-03
US20150017175A1 (en) 2015-01-15
US8911737B2 (en) 2014-12-16
CA2385745A1 (en) 2002-12-08
PE20160999A1 (es) 2016-10-08
AU2002314922B2 (en) 2008-05-15
PE20030065A1 (es) 2003-02-12
NZ560792A (en) 2009-09-25
PL394085A1 (pl) 2011-07-04
WO2002100330A2 (en) 2002-12-19
JP2012184242A (ja) 2012-09-27
US20160280777A1 (en) 2016-09-29
KR20040030661A (ko) 2004-04-09
EP3190124A1 (en) 2017-07-12
PT1406656E (pt) 2013-03-25
NZ545649A (en) 2009-04-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20200181252A1 (en) Methods of administering anti-tnfalpha antibodies
AU2013204359B2 (en) Methods of administering anti-TNFalpha antibodies
AU2012209040B2 (en) Methods of administering anti-TNFalpha antibodies
AU2008202001A1 (en) Methods of administering anti-TNFalpha antibodies
HK1065471B (en) Methods of administering anti-tnf-alpha antibodies