[go: up one dir, main page]
More Web Proxy on the site http://driver.im/

NO137427B - APPARATUS FOR MANUFACTURE OF STEPED BUILDING ELEMENTS - Google Patents

APPARATUS FOR MANUFACTURE OF STEPED BUILDING ELEMENTS Download PDF

Info

Publication number
NO137427B
NO137427B NO1870/73A NO187073A NO137427B NO 137427 B NO137427 B NO 137427B NO 1870/73 A NO1870/73 A NO 1870/73A NO 187073 A NO187073 A NO 187073A NO 137427 B NO137427 B NO 137427B
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
streptokinase
column
phosphate buffer
concentration
solution
Prior art date
Application number
NO1870/73A
Other languages
Norwegian (no)
Other versions
NO137427C (en
Inventor
David John Leonard
William Edgar Mitchell
John Paul Mcgrew
Original Assignee
Span Deck Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Span Deck Inc filed Critical Span Deck Inc
Publication of NO137427B publication Critical patent/NO137427B/en
Publication of NO137427C publication Critical patent/NO137427C/en

Links

Classifications

    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B28WORKING CEMENT, CLAY, OR STONE
    • B28BSHAPING CLAY OR OTHER CERAMIC COMPOSITIONS; SHAPING SLAG; SHAPING MIXTURES CONTAINING CEMENTITIOUS MATERIAL, e.g. PLASTER
    • B28B15/00General arrangement or layout of plant ; Industrial outlines or plant installations
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B28WORKING CEMENT, CLAY, OR STONE
    • B28BSHAPING CLAY OR OTHER CERAMIC COMPOSITIONS; SHAPING SLAG; SHAPING MIXTURES CONTAINING CEMENTITIOUS MATERIAL, e.g. PLASTER
    • B28B23/00Arrangements specially adapted for the production of shaped articles with elements wholly or partly embedded in the moulding material; Production of reinforced objects
    • B28B23/02Arrangements specially adapted for the production of shaped articles with elements wholly or partly embedded in the moulding material; Production of reinforced objects wherein the elements are reinforcing members
    • B28B23/04Arrangements specially adapted for the production of shaped articles with elements wholly or partly embedded in the moulding material; Production of reinforced objects wherein the elements are reinforcing members the elements being stressed
    • B28B23/06Arrangements specially adapted for the production of shaped articles with elements wholly or partly embedded in the moulding material; Production of reinforced objects wherein the elements are reinforcing members the elements being stressed for the production of elongated articles
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B28WORKING CEMENT, CLAY, OR STONE
    • B28BSHAPING CLAY OR OTHER CERAMIC COMPOSITIONS; SHAPING SLAG; SHAPING MIXTURES CONTAINING CEMENTITIOUS MATERIAL, e.g. PLASTER
    • B28B7/00Moulds; Cores; Mandrels
    • B28B7/0029Moulds or moulding surfaces not covered by B28B7/0058 - B28B7/36 and B28B7/40 - B28B7/465, e.g. moulds assembled from several parts
    • B28B7/0035Moulds characterised by the way in which the sidewalls of the mould and the moulded article move with respect to each other during demoulding
    • B28B7/0041Moulds characterised by the way in which the sidewalls of the mould and the moulded article move with respect to each other during demoulding the sidewalls of the mould being moved only parallelly away from the sidewalls of the moulded article
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B28WORKING CEMENT, CLAY, OR STONE
    • B28BSHAPING CLAY OR OTHER CERAMIC COMPOSITIONS; SHAPING SLAG; SHAPING MIXTURES CONTAINING CEMENTITIOUS MATERIAL, e.g. PLASTER
    • B28B7/00Moulds; Cores; Mandrels
    • B28B7/10Moulds with means incorporated therein, or carried thereby, for ejecting or detaching the moulded article

Landscapes

  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Ceramic Engineering (AREA)
  • Mechanical Engineering (AREA)
  • Manufacturing & Machinery (AREA)
  • Devices For Post-Treatments, Processing, Supply, Discharge, And Other Processes (AREA)
  • Manufacturing Of Tubular Articles Or Embedded Moulded Articles (AREA)
  • Moulds, Cores, Or Mandrels (AREA)
  • Coating Apparatus (AREA)
  • Casting Devices For Molds (AREA)
  • Panels For Use In Building Construction (AREA)
  • Road Signs Or Road Markings (AREA)
  • Apparatuses And Processes For Manufacturing Resistors (AREA)

Description

Fremgangsmåte til rensing av uren streptokinase. Process for purification of impure streptokinase.

Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte til rensing av uren streptokinase. The present invention relates to a method for purifying impure streptokinase.

Streptokinase er et fermentas]' onspro-dukt fra hemolytiske streptokokker. Det ble for noen tid siden fastslått at streptokinasen spiller en rolle ved oppløsning av blodpropper og særlig av eksudater som er rike på fibrin-bestanddeler. I avhengighet av blodproppenes natur og størrelse frembringer streptokinase, eller streptokinase i nærvær av plasminogen fra mennesker, oppløsning av disse. Imidlertid har hittil anvendelsen av. streptokinase (og av plasmin fremstillet fra plasminogen og streptokinase) vært begrenset på grunn av den kjennsgjerning at streptokinasen har vært forurenset med streptokokk-protein-bipro-dukter som frembringer giftvirkninger hos mennesker. Slike virkninger viser seg ved økning av legemstemperaturen, senkning av blodtrykket, rystelser, kuldegysninger, anoksi, cyanose og lignende. Streptokinase is a fermentation product from hemolytic streptococci. It was established some time ago that streptokinase plays a role in the dissolution of blood clots and especially of exudates that are rich in fibrin components. Depending on the nature and size of the clots, streptokinase, or streptokinase in the presence of human plasminogen, dissolves them. However, to date the application of streptokinase (and of plasmin produced from plasminogen and streptokinase) has been limited by the fact that the streptokinase has been contaminated with streptococcal protein by-products that produce toxic effects in humans. Such effects are manifested by an increase in body temperature, lowering of blood pressure, tremors, chills, anoxia, cyanosis and the like.

Ved hjelp av foreliggende oppfinnelse By means of the present invention

muliggjøres det å fjerne de forurensende proteiner fra streptokinase-preparater så at man får i høy grad ren streptokinase. Herved blir altså en i høy grad ren streptokinase tilgjengelig, hva der gjør det mulig makes it possible to remove the contaminating proteins from streptokinase preparations so that you get highly pure streptokinase. This means that a highly pure streptokinase is available, what makes this possible

å behandle pasienter etter ønske med streptokinase eller med plasminogen som er aktivert med streptokinase. Slike be-handlinger er funnet å være av enestående to treat patients as desired with streptokinase or with streptokinase-activated plasminogen. Such treatments have been found to be exceptional

viktighet ved behandling av forskjellige sykdommer som tromboflebit, flebothrom- importance in the treatment of various diseases such as thrombophlebitis, phlebothrom-

bose, lunge-emboli, coronær trombose og lignende. bose, pulmonary embolism, coronary thrombosis and the like.

Den urene streptokinase som renses ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen, kan erholdes ved hjelp av kjente fremgangsmå-ter. I alminnelighet fremstilles den ved å anvende Streptococcus hemolyticus som podningsmiddel i et næringsmedium og la The impure streptokinase which is purified by the method according to the invention can be obtained using known methods. In general, it is prepared by using Streptococcus hemolyticus as an inoculum in a nutrient medium and la

veksten av bakteriene foregå i 8—10 timer. Etter forløpet av dette tidsrom avbrytes the growth of the bacteria takes place for 8-10 hours. After the expiry of this period, it is cancelled

fermentasjonen ved å lede kulturvæsken gjennom kjøleslanger hvorpå bakteriecel-lene fjernes ved sentrifugering eller filtre-ring. Streptokinasen kan isoleres fra kulturvæsken ved hjelp av hvilken som helst kjent metode. I alminnelighet har materialet som er isolert på denne måte, en renhet fra 15 til 60 %, bestemt ved fysikalske homogenitetsmetoder. Foreliggende oppfinnelse angår altså en fremgangsmåte til rensning av slike urene produkter. the fermentation by passing the culture liquid through cooling hoses, whereupon the bacterial cells are removed by centrifugation or filtration. The streptokinase can be isolated from the culture fluid by any known method. In general, the material isolated in this way has a purity of 15 to 60%, as determined by physical homogeneity methods. The present invention therefore relates to a method for cleaning such impure products.

Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er karakterisert ved at en oppløsning av The method according to the invention is characterized in that a solution of

uren streptokinase i en fosfatpuffer med molkonsen tras jon fra 0,005 til 0,015, fortrinnsvis 0,01, bringes i kontakt med DEAE-cellulose, hvorefter cellulosen vaskes med en fosfatpuffer hvis molkonsentrasjon ligger mellom 0,02 og 0,05, fortrinsvis 0,06, hvorved forurensninger fjernes, hvorpå streptokinasen elueres fra cellulosen med en fosfatpuffer hvis molkonsentrasjon ligger mellom 0,06 og 0,15, fortrinsvis 0,08. impure streptokinase in a phosphate buffer with a molar concentration of from 0.005 to 0.015, preferably 0.01, is brought into contact with DEAE cellulose, after which the cellulose is washed with a phosphate buffer whose molar concentration is between 0.02 and 0.05, preferably 0.06, whereby impurities are removed, after which the streptokinase is eluted from the cellulose with a phosphate buffer whose molar concentration is between 0.06 and 0.15, preferably 0.08.

Kromatograferingen kan foregå i kolonne eller chargevis. DEAE-cellulose (dietylaminoetylcellulose) vil si cellulose av den art som er beskrevet av Peterson og Sober (JACS 78:751, 1956). Chromatography can take place in a column or batchwise. DEAE cellulose (diethylaminoethyl cellulose) means cellulose of the kind described by Peterson and Sober (JACS 78:751, 1956).

Mange av forurensningene adsorberes ved den lave ionestyrke og bindes fast til harpiksen så at det erholdte streptokinase-eluat er fritt for disse stoffer. Andre forurensninger adsorberes ikke i nogen stor utstrekning og er tilstede i gjennomløpet. Many of the contaminants are adsorbed by the low ionic strength and are firmly bound to the resin so that the streptokinase eluate obtained is free of these substances. Other pollutants are not adsorbed to any great extent and are present in the flow-through.

Ved på riktig måte å velge fosfatpuf-ferens konsentrasjoner og den passende fraksjon, er det mulig med meget godt ut-bytte og på enkel måte å oppnå en meget ren streptokinase med høy terapeutisk ef-fektivitet og uten forurensninger som frembringer bivirkninger. By correctly choosing the concentrations of the phosphate buffer and the appropriate fraction, it is possible with very good yield and in a simple way to obtain a very pure streptokinase with high therapeutic effectiveness and without contaminants that produce side effects.

Der kan i fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen anvendes en hvilkensomhelst vanlig fosfatpuffer, men det foretrekkes å bruke natriumfosfat eller kaliumfosfat. Imidlertid kan der også med godt resultat anvendes mono-di- eller trifosfater av jordalkalimetallene, foruten sådanne fos-fater av alkalimetallene. In the method according to the invention, any common phosphate buffer can be used, but it is preferred to use sodium phosphate or potassium phosphate. However, mono-di- or triphosphates of the alkaline earth metals can also be used with good results, in addition to such phosphates of the alkali metals.

Ved elueringen av streptokinasen med fosfatpuffere som har en molar konsentrasjon innen det foran angitte område, er fraksjoner med en molar konsentrasjon fra 0,06 til 0,08 funnet å inneholde de største mengder streptokinase. In the elution of the streptokinase with phosphate buffers having a molar concentration within the range indicated above, fractions with a molar concentration from 0.06 to 0.08 have been found to contain the largest amounts of streptokinase.

En meget egnet utførelsesform for fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen under anvendelse av økende konsentrasjon av fos-fatpufferen ved elueringen, er å la denne strømme gjennom en kolonne med opprin-nelig molar konsentrasjon på 0,01 og grad-vis tilføre kolonnen en fosfatpuffer med molar konsentrasjon på 0,15. På denne måte økes kontinuerlig den molare konsentrasjon av pufferen som anvendes til elueringen. Den fraksjon som går gjennom kolonnen opp til en molar konsentrasjon på 0,06, kastes vekk, mens den fraksjon som har en molar konsentrasjon over 0,06 og opp til 0,15 oppsamles. I stedet for kontinuerlig å øke den molare konsentrasjon på denne måte, er det mulig å vaske harpiksen suksessivt med adskilte pufferoppløs-ninger med økende konsentrasjon. Således kan f.eks. en første vaskning utføres med en 0,02 M oppløsning, den annen med en 0,04 M oppløsning og den tredje med en 0,06 M oppløsning, idet alle de herved erholdte vaskevæsker kastes vekk. Vaske-væskene med de derpå følgende høyere molare konsentrasjoner, nemlig 0,07 M, 0,09 og 0,15 oppsamles da de inneholder de største mengder streptokinase. A very suitable embodiment of the method according to the invention, using increasing concentration of the phosphate buffer during the elution, is to let this flow through a column with an initial molar concentration of 0.01 and gradually add to the column a phosphate buffer with a molar concentration of 0.15. In this way, the molar concentration of the buffer used for the elution is continuously increased. The fraction that passes through the column up to a molar concentration of 0.06 is thrown away, while the fraction that has a molar concentration above 0.06 and up to 0.15 is collected. Instead of continuously increasing the molar concentration in this way, it is possible to wash the resin successively with separate buffer solutions of increasing concentration. Thus, e.g. a first washing is carried out with a 0.02 M solution, the second with a 0.04 M solution and the third with a 0.06 M solution, with all the wash liquids obtained thereby being thrown away. The washings with the subsequent higher molar concentrations, namely 0.07 M, 0.09 and 0.15 are collected as they contain the largest amounts of streptokinase.

En del streptokinase vil finnes i den første eluerings-pufferoppløsning med konsentrasjon 0,06 M, følgelig kan en annen vaskning med samme molare konsentrasjon utføres og vaskevæsken oppsamles da den inneholder en betydelig mengde streptokinase. Alternativt er det mulig å fjerne forurensningene med en enkel pufferopp-løsning hvis konsentrasjon er 0,06 M og å oppsamle streptokinasen med en enkel puf-feroppløsning med konsentrasjon f.eks. 0,08 M. Herved vil imidlertid utbyttet av streptokinase bli relativt lavt. Some streptokinase will be present in the first elution buffer solution with a concentration of 0.06 M, therefore another wash with the same molar concentration can be performed and the wash liquid collected as it contains a significant amount of streptokinase. Alternatively, it is possible to remove the contaminants with a simple buffer solution whose concentration is 0.06 M and to collect the streptokinase with a simple buffer solution with a concentration of e.g. 0.08 M. In this way, however, the yield of streptokinase will be relatively low.

I det følgende beskrives som eksempler noen utførelsesformer for oppfinnelsen. In the following, some embodiments of the invention are described as examples.

Eksempel I Example I

Dette eksempel viser rensing av urent streptokinase ved kromatografi i DEAE-celluloseharpiks fremstillet i overensstem-melse med det ovenfor anførte litteratur-sted. This example shows the purification of impure streptokinase by chromatography in DEAE cellulose resin prepared in accordance with the literature reference cited above.

Det foretrekkes å kondisjonere harpiksen før anvendelsen på følgende måte: 400 g DEAE-cellulose suspenderes i 8 liter vann og suspensjonens pH-verdi innstilles på 2 med IN saltsyre. Der-tilsettes derpå natriumklorid så at konsentrasjonen bringes på 5 %. Blandingen filtreres gjennom osteklede og vaskes med 8 liter 5 %'s natriumkloridoppløsning. Materialet suspenderes i vann og suspensjonens pH-verdi innstilles på 10,5 med IN natriumhydroxyd-oppløsning. Natriumkloridkonsentrasj onen bringes på 5 %, hvorpå blandingen filtreres og det tilbakeværende på filteret vaskes med 8 liter 5 %'s natriumkloridoppløs-ning. DEAE-cellulosen suspenderes påny og suspensjonens pH-verdi innstilles på 3 med IN saltsyre. Konsentrasjonen bringes påny til 5 % og harpiksen vaskes med 8 liter 5 %' s natriumkloridoppløsning. Derpå vaskes DEAE-cellulosen med 20 liter pyrogenfritt vann og filtreres. It is preferred to condition the resin before use in the following way: 400 g of DEAE cellulose is suspended in 8 liters of water and the pH value of the suspension is adjusted to 2 with IN hydrochloric acid. Sodium chloride is then added so that the concentration is brought to 5%. The mixture is filtered through cheesecloth and washed with 8 liters of 5% sodium chloride solution. The material is suspended in water and the pH value of the suspension is adjusted to 10.5 with IN sodium hydroxide solution. The sodium chloride concentration is brought to 5%, after which the mixture is filtered and what remains on the filter is washed with 8 liters of 5% sodium chloride solution. The DEAE cellulose is resuspended and the pH value of the suspension is adjusted to 3 with 1N hydrochloric acid. The concentration is again brought to 5% and the resin is washed with 8 liters of 5% sodium chloride solution. The DEAE cellulose is then washed with 20 liters of pyrogen-free water and filtered.

DEAE-cellulosen suspenderes i 0,01 M fosfatpuffer, suspensjonen omrøres og man lar de faste stoffer bunnfelles flere ganger for å fjerne findelte bestanddeler. Det er av vesentlig betydning at findelte bestanddeler fjernes for å kunne få kolonner med en passende strømningshastighet. Den kolonne som ble anvendt i dette eksempel, har en strømningshastighet på ca. 500 ml pr. time. Det er meget fordelaktig å om-røre kolonnens innhold umiddelbart før anvendelsen for å forhindre adskillelse av de faste stoffer fra glass-overflaten. The DEAE cellulose is suspended in 0.01 M phosphate buffer, the suspension is stirred and the solids are allowed to settle several times to remove finely divided components. It is of essential importance that finely divided constituents are removed in order to obtain columns with a suitable flow rate. The column used in this example has a flow rate of approx. 500 ml per hour. It is very advantageous to stir the contents of the column immediately before use to prevent separation of the solids from the glass surface.

I en kolonne med 30 cm lengde og inn-vendig diameter 52 mm anbringes DEAE-cellulose suspendert i 0,01 M fosfatpuffer. Der tilsettes DEAE-cellulose i slik mengde at der etter bunnfelning dannes en kolonne med høyde 6—7 cm. DEAE cellulose suspended in 0.01 M phosphate buffer is placed in a column with a length of 30 cm and an internal diameter of 52 mm. DEAE cellulose is added in such a quantity that, after sedimentation, a column with a height of 6-7 cm is formed.

Oppløsningen av den urene streptokinase dialyceres mot en fosfatpuffer med følgende sammensetning (konsentrasjon 0,005—0,015 M, fortrinnsvis 0,01 M): Mononatriumfosfat (NaH2P04) H20 — 27,6 g/liter Oppi. A Dinatriumfosfat (Na2HPOi) — 28,4 g pr. liter Oppi. B 16 ml av A fortynnes til 200 ml med destil-84 ml av B lert vann så at man får en fosfatpuffer med konsentrasjon 0,1 M og pH-verdi 7,5. Denne fortynnes til en fosfatkonsen-trasjon på 0,01 M. The solution of the impure streptokinase is dialyzed against a phosphate buffer with the following composition (concentration 0.005-0.015 M, preferably 0.01 M): Monosodium phosphate (NaH2P04) H20 — 27.6 g/liter Oppi. A Disodium phosphate (Na2HPOi) — 28.4 g per liters Uppi. B 16 ml of A is diluted to 200 ml with 84 ml of B distilled water so that a phosphate buffer with a concentration of 0.1 M and a pH value of 7.5 is obtained. This is diluted to a phosphate concentration of 0.01 M.

Etter at likevekt har innstillet seg, er streptokinase-materialet ferdig til rensing. Innstillingen av likevekt kan bedømmes ved å måle oppløsningens elektriske mot-stand. After equilibrium has been established, the streptokinase material is ready for purification. The setting of equilibrium can be judged by measuring the electrical resistance of the solution.

Den streptokinase som anvendes som utgangsmateriale kan fåes i handelen. I en konsentrasjon på 16° enheter/ml, eller i det hele 100 X 16e enheter oppløst i 100 ml vann, dialyseres i 16—18 timer ved 3° C mot 2 liter 0,01 M fosfatpuffer, pH-verdi 7,5. Streptokinaseoppløsningen innføres i kolonnen og elueres med fosfatpuffer. Ved en konsentrasjon av avløpet på 0,06 og 0,07 M elueres hovedparten av streptokinasen som et produkt med høy renhet, og viser seg i avløpet. Fraksjonene undersøkes på innhold av streptokinase og protein, og de en-kelte fraksjoners renhet bestemmes ved å beregne den spesifikke aktivitet (enheter streptokinase pr. gamma nitrogen). De fraksjoner som er rike på streptokinase kan lyofiliseres eller kan anvendes til over-føring av plasminogen til plasmin. The streptokinase used as starting material is commercially available. In a concentration of 16° units/ml, or a total of 100 X 16e units dissolved in 100 ml of water, dialyze for 16-18 hours at 3° C against 2 liters of 0.01 M phosphate buffer, pH value 7.5. The streptokinase solution is introduced into the column and eluted with phosphate buffer. At an effluent concentration of 0.06 and 0.07 M, most of the streptokinase is eluted as a product of high purity, and appears in the effluent. The fractions are examined for content of streptokinase and protein, and the purity of the individual fractions is determined by calculating the specific activity (units of streptokinase per gamma nitrogen). The fractions that are rich in streptokinase can be lyophilized or can be used to transfer plasminogen to plasmin.

Eksempel II Example II

Fremstilling av kolonnen: Der fremstilles en suspensjon av 1,5 g DEAE-cellulose i 30 ml 0,005 M kaliumfosfatpuffer med pH 7,0. Denne suspensjon helles i en krom-atografisk kolonne (med høyde 30 cm og indre diameter 1 cm) forsynt med en tet-ningsskive og en kapillarhevert. Man lar harpiksen bunnfelles ved sin tyngde, hvorpå man pakker den til en høyde på 15 cm ved påsetning av trykkluft (filtrert luft med et trykk ganske lite høyere enn atmosfæretrykk). Et tynt lag bomull anbringes over harpiksen i kolonnen for å beskytte denne mot mekaniske forstyrrel-ser. Denne pakning av kolonnen nedsetter strømningshastigheten gjennom denne til 10—20 ml pr. time. Anbringelse av prøven på kolonnen: Uren streptokinase med ca. 250 mg protein, oppløses i ca. 15 ml vann og den erholdte oppløsning dialyseres ved lavere tempera-tur (2—5° C) mot en 0,005 M fosfatpuffer. Den tilføres derpå kolonnen. Man lar den urene streptokinase-oppløsning perkolere gjennom kolonnen (under det samme lave trykk som ble anvendt ved pakningen av kolonnen) før tilsetning av puffer med økende ionestyrke. Preparation of the column: A suspension of 1.5 g of DEAE cellulose in 30 ml of 0.005 M potassium phosphate buffer with pH 7.0 is prepared. This suspension is poured into a chrome-atographic column (with a height of 30 cm and an internal diameter of 1 cm) provided with a sealing disk and a capillary sieve. The resin is allowed to settle to the bottom by its own weight, after which it is packed to a height of 15 cm by applying compressed air (filtered air with a pressure slightly higher than atmospheric pressure). A thin layer of cotton is placed over the resin in the column to protect it from mechanical disturbances. This packing of the column reduces the flow rate through it to 10-20 ml per hour. Placing the sample on the column: Impure streptokinase with approx. 250 mg protein, dissolves in approx. 15 ml of water and the resulting solution are dialysed at a lower temperature (2-5° C) against a 0.005 M phosphate buffer. It is then fed to the column. The impure streptokinase solution is allowed to percolate through the column (under the same low pressure used when packing the column) before adding buffers of increasing ionic strength.

Eluering fra kolonnen: Kaliumfosfatpuffer med pH-verdi 7,0 og med kontinuerlig økende konsentrasjon tilføres kolonnen. Konsentrasjonsgradienten ble erholdt ved å la 0,3 M kaliumfosfat (pH-verdi 7,0) strømme inn i en 250 ml beholder med 0,005 M puffer. Puffer-oppløsningene blan-des ved hjelp av et magnetisk røreverk. Oppløsning fra blandingsbeholderen strøm-mer gjennom kolonnen, idet strømnings-hastigheten gjennom denne bestemmer strømningshastigheten av 0,3 M kaliumfos-fatoppløsningen til 250 ml beholderen. Den hydrostatiske søyle som driver pufferen gjennom kolonnen, kan varieres ved å heve eller senke pufferbeholderen. Elution from the column: Potassium phosphate buffer with a pH value of 7.0 and with continuously increasing concentration is added to the column. The concentration gradient was obtained by allowing 0.3 M potassium phosphate (pH value 7.0) to flow into a 250 ml container with 0.005 M buffer. The buffer solutions are mixed using a magnetic stirrer. Solution from the mixing container flows through the column, the flow rate through which determines the flow rate of the 0.3 M potassium phosphate solution into the 250 ml container. The hydrostatic column that drives the puffer through the column can be varied by raising or lowering the puffer container.

Hvert påfølgende 10 ml eluat ble opp-samlet separat. Undersøkelser på streptokinase-innhold i de således oppsamlede fraksjoner viser at under de angitte betin-gelser er hovedmengden av ren streptokinase i det 100. til 150. ml eluat, i hvilke fosfatkonsentrasjonen varierer fra 0,07 til 0,12 M. Ved lavere fosfatkonsentrasjoner ble forurensninger i den urene streptokinase eluert. Each subsequent 10 ml eluate was collected separately. Investigations into streptokinase content in the thus collected fractions show that under the specified conditions the main amount of pure streptokinase is in the 100 to 150 ml eluate, in which the phosphate concentration varies from 0.07 to 0.12 M. At lower phosphate concentrations impurities in the impure streptokinase were eluted.

Eksempel III Example III

Man går frem således som angitt i eksempel II, men under anvendelse av na-triumfosfatpuffer i stedet for kaliumfosfat-puffer. Hovedmengden av ren streptokinase er da tilstede i det 100. til 150. ml eluat, således som i eksempel II. The procedure is as indicated in example II, but using sodium phosphate buffer instead of potassium phosphate buffer. The main amount of pure streptokinase is then present in the 100 to 150 ml eluate, as in example II.

Claims (1)

Fremgangsmåte til rensning av streptokinase, karakterisert ved at en oppløsning av uren streptokinase i en fosfatpuffer med molkonsentrasjon fra 0,005 til 0,015, fortrinnsvis 0,01, bringes i kontakt med dietylaminoetyl-cellulose, hvorefter cellulosen vaskes med en fosfatpuffer hvis molkonsentrasjon ligger mellom 0,02 og 0,06, fortrinnsvis 0,06] hvorved forurensninger fjernes, hvorpå streptokinasen elueres fra cellulosen med en fosfatpuffer hvis molkonsentrasjon ligger mellom 0,06 og 0,15, fortrinnsvis 0,08.Process for purifying streptokinase, characterized in that a solution of impure streptokinase in a phosphate buffer with a molar concentration of from 0.005 to 0.015, preferably 0.01, is brought into contact with diethylaminoethyl cellulose, after which the cellulose is washed with a phosphate buffer whose molar concentration is between 0.02 and 0.06, preferably 0.06] whereby impurities are removed, after which the streptokinase is eluted from the cellulose with a phosphate buffer whose molar concentration is between 0.06 and 0.15, preferably 0.08.
NO1870/73A 1972-05-08 1973-05-07 APPARATUS FOR MANUFACTURE OF CAST BUILDING ELEMENTS NO137427C (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US00251358A US3832118A (en) 1972-05-08 1972-05-08 Apparatus for production of cast concrete members

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO137427B true NO137427B (en) 1977-11-21
NO137427C NO137427C (en) 1978-03-01

Family

ID=22951607

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO1870/73A NO137427C (en) 1972-05-08 1973-05-07 APPARATUS FOR MANUFACTURE OF CAST BUILDING ELEMENTS

Country Status (31)

Country Link
US (1) US3832118A (en)
JP (1) JPS5516045B2 (en)
AR (1) AR198311A1 (en)
AT (1) AT330638B (en)
AU (1) AU464377B2 (en)
BE (1) BE799248A (en)
BG (1) BG27060A3 (en)
BR (1) BR7303329D0 (en)
CA (1) CA1000936A (en)
CH (1) CH579973A5 (en)
CS (1) CS168652B2 (en)
DD (1) DD105152A5 (en)
DE (1) DE2322542A1 (en)
ES (1) ES414526A1 (en)
FI (1) FI50943C (en)
FR (1) FR2184316A5 (en)
GB (1) GB1434797A (en)
IE (1) IE37587B1 (en)
IL (1) IL42129A (en)
IN (1) IN139764B (en)
IT (1) IT994859B (en)
KE (1) KE2884A (en)
NL (1) NL7306389A (en)
NO (1) NO137427C (en)
OA (1) OA04382A (en)
PL (1) PL96612B1 (en)
RO (1) RO65677A (en)
SE (1) SE382008B (en)
SU (1) SU615844A3 (en)
YU (1) YU111673A (en)
ZA (1) ZA733117B (en)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4004874A (en) * 1974-06-19 1977-01-25 Span-Deck, Inc. Apparatus for production of cast concrete members
FI61281C (en) * 1978-10-02 1982-07-12 Span Deck Inc BETONGGJUTESUNDERLAGSANLAEGGNING
US4289293A (en) * 1978-10-02 1981-09-15 Span-Deck, Inc. Combination bed concrete casting apparatus
US4252293A (en) * 1979-10-31 1981-02-24 Norwalk Concrete Industries, Inc. Hydraulic mold release mechanism for precast concrete products
EP0030247A1 (en) * 1979-12-10 1981-06-17 T.R.-Plast Kunststoffverarbeitung Inh. Theo Rosbach Moulding apparatus for toy construction-elements
DE3336655C2 (en) * 1983-10-08 1995-07-27 Karl Munte Betonwerke Gmbh Casting mold and method for producing a quiver foundation
ATE133601T1 (en) * 1990-06-21 1996-02-15 Nord Immobiliare Centro METHOD AND APPARATUS FOR PRODUCING REINFORCED CONCRETE ITEMS
BE1004584A3 (en) * 1990-08-29 1992-12-15 Coussee Marc Method and device for producing t-shaped beams from pre-stressed concrete
NL9002531A (en) * 1990-11-20 1992-06-16 Schokbeton Bv Apparatus for the production of prestressed concrete sleepers for railway tracks, as well as sleepers manufactured using this apparatus.
US5393033A (en) * 1993-07-21 1995-02-28 Wilson Concrete Company Adjustable side form concrete mold
ES2155293B1 (en) * 1997-02-04 2001-12-16 Extremadura 2000 De Estructura MANUFACTURING PROCEDURE OF PRETENSED PLATES TYPE PI BY EXTRUSION.
US20050183357A1 (en) * 2004-02-10 2005-08-25 The Cretex Companies, Inc. Pre-formed concrete section
FR2892740A1 (en) * 2006-02-10 2007-05-04 Conseil Service Investissement Method of producing a concrete beam with a base plate with a top surface carrying a rib involves provision of an enclosure in the form of the beam, concrete pouring into the enclosure, and beam extraction
US20160312466A1 (en) * 2014-10-10 2016-10-27 Norfa Enterprises Pty Ltd. Components for masonry construction
US11701795B1 (en) * 2019-02-27 2023-07-18 Hamilton Form Company, Ltd. Concrete mold form
CN112895116B (en) * 2021-01-19 2022-03-11 陕西中天建筑工业有限公司 Auxiliary equipment for prefabricated plate material distribution and processing technology thereof
CN113246285B (en) * 2021-05-25 2022-07-08 中交(福州)建设有限公司 Automatic assembly line prefabrication construction method for concrete revetment hooking block

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US1068613A (en) * 1912-05-07 1913-07-29 William J Volz Mold for forming irregular bricks and tiles.
US1642947A (en) * 1927-01-31 1927-09-20 Goliath Rubber Company Mold
US1770368A (en) * 1929-04-18 1930-07-08 Permold Co Mold
US2916795A (en) * 1957-05-03 1959-12-15 Henderson Albert Apparatus for molding reinforced concrete building slabs, columns and girders
US3132403A (en) * 1961-06-22 1964-05-12 Fmc Corp Concrete beam molding apparatus
CA763876A (en) * 1962-07-06 1967-07-25 Span-Deck Apparatus and method for forming concrete planks or slabs
US3168771A (en) * 1963-01-28 1965-02-09 Alfred T Nelson Adjustable wing t form
US3523343A (en) * 1967-12-05 1970-08-11 Span Deck Inc System for the production of cast concrete members

Also Published As

Publication number Publication date
DE2322542A1 (en) 1973-12-13
BR7303329D0 (en) 1974-08-29
DD105152A5 (en) 1974-04-12
US3832118A (en) 1974-08-27
IT994859B (en) 1975-10-20
IN139764B (en) 1976-07-31
PL96612B1 (en) 1978-01-31
CS168652B2 (en) 1976-06-29
AU5497673A (en) 1974-10-31
SE382008B (en) 1976-01-12
ES414526A1 (en) 1976-02-01
IE37587B1 (en) 1977-08-31
CH579973A5 (en) 1976-09-30
FI50943C (en) 1976-09-10
ATA403973A (en) 1975-09-15
NL7306389A (en) 1973-11-12
FR2184316A5 (en) 1973-12-21
RO65677A (en) 1979-07-15
ZA733117B (en) 1974-04-24
FI50943B (en) 1976-05-31
AT330638B (en) 1976-07-12
IL42129A0 (en) 1973-06-29
OA04382A (en) 1980-02-15
BE799248A (en) 1973-11-08
BG27060A3 (en) 1979-08-15
JPS4954421A (en) 1974-05-27
IE37587L (en) 1973-11-08
AU464377B2 (en) 1975-08-21
SU615844A3 (en) 1978-07-15
YU111673A (en) 1982-05-31
NO137427C (en) 1978-03-01
AR198311A1 (en) 1974-06-14
IL42129A (en) 1976-10-31
CA1000936A (en) 1976-12-07
GB1434797A (en) 1976-05-05
JPS5516045B2 (en) 1980-04-28
KE2884A (en) 1978-09-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO137427B (en) APPARATUS FOR MANUFACTURE OF STEPED BUILDING ELEMENTS
US4704274A (en) Method for the purification of LPF-HA
AU596159B2 (en) Method and apparatus for separating proteins
JP2538224B2 (en) Purification of pertussis antigen
EP0477285B1 (en) Processes for the recovery of microbially produced chymosin
DK147408B (en) PROCEDURE FOR THE EXTRACTION OF THROMBINIC ENZYMES FROM HOSE POISTS OR HOSE POISON FRACTIONS
HU219828B (en) Process for the isolation and purification of vitamin k dependent proteins
KR870001650B1 (en) Culturing method and medium of bordetella micro-organism
Dombrose et al. Ac-globulin (factor V): Preparation of a practical product
JPS6176422A (en) Component vaccine for pertussis and preparation of mixed vaccine for pertussis, diphthelia and tetanus
US3657416A (en) Thrombin-like defibrinating enzyme from the venom ancistrodon rhodostoma
US3042586A (en) Purification of streptokinase
US3107203A (en) Streptokinase purification process
Lee et al. Effect of culture conditions on the structure of Streptococcus pneumoniae type 19A (57) capsular polysaccharide
US2989440A (en) Urokinase-alpha plasminogen activator and methods of obtaining the same
US3978209A (en) Endotoxin free meningococcus polysaccharides
EP0536564B1 (en) Method to purify streptolysin O, intact streptolysin O obtainable by this method and its use
US3478145A (en) Chromatographic purification of virus with brushite modified by autoclaving
US3444045A (en) Process for purifying streptokinase
US4885359A (en) Method for the purification of LPF-HA
JPS60218326A (en) Purification of fibrous hemagglutinin
Tylewska et al. Application of percoll density gradients in studies of the adhesion of Streptococcus pyogenes to human epithelial cells
US3368867A (en) Chromatographic purification of influenza virus with brushite modified by autoclaving
SU767121A1 (en) Method of isolating and purifying trypsin and chymotrypsin
CN108570098A (en) A kind of isolation and purification method of a variety of antigenic components of pertussis