MX2012007678A - ß-CARBOLINAS PARA TRATAMIENTO DE DAÑOS A LA AUDICION Y VERTIGO. - Google Patents

Abstract

La invención es concerniente con ß-carbo1inas, 9-alquil-ß-carbolinas preferidas (9-alquil-ß-BC), su manufactura, también como su uso en profilaxis y tratamiento de daños a la audición, tinnitus, trauma acústico agudo, vértigo y alteración vestibular, también como composiciones farmacéuticas que contienen estas ß-carbolinas.

Description

ß-CARBOLINAS PARA TRATAMIENTO DE DAÑOS A LA AUDICION Y VERTIGO DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención es concerniente con ß-carbolinas preferiblemente 9-alquil-p-carbolinas (9-alquil-BC) , su producción, también como su uso en profilaxis y tratamiento de daños de la audición, vértigo y alteraciones vestibulares y composiciones farmacéuticas que contienen estos derivados.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los compuestos de acuerdo con la invención sirven para tratamiento de alteraciones del oído agudas y crónicas y daños de la audición, vértigo y alteraciones vestibulares, en particular perdida de audición aguda, trauma acústico agudo, trauma de explosión, sordera de laberinto debido a exposición al ruido crónica, presbiacusia, trauma durante el implante de prótesis de oído interno (trauma de inserción) , vértigo debido a enfermedades del oído interno, vértigo en relación y/o como un síntoma de enfermedad de Meniére, alteraciones vestibulares en relación con y/o como síntoma de enfermedad de Meniére, tinnitus y daños a la audición debido a antibióticos y citostáticos .

Aproximadamente 250 millones de personas mundialmente sufren de daños a la audición moderadas o severas de acuerdo con los hallazgos de la Organización Mundial de la Salud (WHO) . En los Estados Unidos de América de treinta a cuarenta millones de gente están afectadas por daños a la audición y pérdidas de audición. Los costos de tratamientos suman aproximadamente 50 billones de dólares estadounidenses anualmente para los Estados Unidos de América solamente. La Sociedad alemana de gente con audición deteriorada reporto para el año 2007 que aproximadamente el 19% de la población alemana mayor de catorce sufre de deterioro de la audición.

El porcentaje de gente con audición deteriorada es incrementado con la edad incrementada. Los deterioros en la audición en personas mayores de 65 años de edad vienen en cuarto lugar de deterioros crónicamente físicos después de enfermedades de los huesos y articulaciones, hipertensión y enfermedades del corazón. 37% de gente entre 60 y 69 y 54% de septuagenarios y mayores de la población son afectados por deterioro de la audición.

Aproximadamente 12 a 15 millones de pacientes sufren de sordera de laberinto y aproximadamente 2.9 millones de pacientes sufren de tinnitus en la República Federal Alemana .

El término "tinnitus aurium" (en latín por el "zumbido de los oídos") o tinnitus en su forma breve describe un síntoma o síndrome también mediante el cual la persona afectada percibe ruidos que no tienen ninguna fuente percibible para otras personas. En contraste, el "tinnitus objetivo" esta basado en una fuente de sonido percibible externa o por lo menos mensurable endógena. Sin embargo, el tinnitus objetivo es muy raro en comparación con tinnitus sub etivo.

Tinnitus es una percepción acústica que es percibida por el paciente independientemente de sonidos que actúan sobre el oído. Esta percepción esta basada en el deterioro de la función de la audición del laberinto del oído interno. Por consiguiente, la impresión auditiva de tinnitus no tiene nada que ver con el sonido en el medio ambiente del paciente. Los tipos de ruidos evidentes, que el paciente percibe, son muy multifacéticos . Se resumen las siguientes impresiones acústicas entre otros por el término "tinnitus": -Ruidos de zumbido y silbido; -Silbido; -Ruido aleatorio y -Chasquido o crujido El ruido puede ser de intensidad no variante; sin embargo, puede tener un carácter punzante rítmico también. No hay siempre un ruido real, que provoque las mismas impresiones acústicas como tinnitus. Se debe distinguir claramente tinnitus de alucinaciones acústicas también. } Aproximadamente 10 a 20% de la población están afectadas permanentemente por tinnitus. Solo menos del 40% detectan tal ruido del oído por lo menos una vez en la vida. Aproximadamente, un tercio de las personas de edad adulta afirma percibir un ruido del oído todo el tiempo. El inicio de la enfermedad radica usualmente entre la edad de 40 a 50, en donde las mujeres y hombres son afectados asi mismo. El numero de pacientes con tinnitus se ha elevado en naciones industrializadas del mundo occidental en particular.

La presente invención esta basada en el problema de proveer fármacos también como formulaciones farmacéuticas que sean apropiadas para la profilaxis y tratamiento de daños de la audición, prebiacuscia, vértigo y alteraciones vestibulares .

Las enseñanzas técnicas de las reivindicaciones independientes resuelven este problema. Modalidades, aspectos y detalles ventajosos adicionales de la invención resultan de las reivindicaciones dependientes, la descripción y los ejemplos.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La invención es concerniente con el uso de compuestos de formula general (I) en donde : R1 significa una de las siguientes porciones: -R12, -CR4R5R6, ' -NR12R13, -CO-NH-R12, -CO-0-R12; R2 - R5 representan independientemente entre si las 7 8 9 10 11 siguientes porciones: R , -R , -R , -R , -R , -H, -OH, -0R7, -0CH3 , -ÓC2H5, -OC3H7 , -0-ciclo-C3H5, OCH(CH3)2, -OC(CH3)3, -0C4H9, -OPh, -0CH2-Ph, -OCPh3, -SH, -SCH3, -SC2H5, -SC3H7, -S-CÍCI0-C3H5 , -SCH(CH3)2, -SC(CH3)3, -NO2 , -F, -Cl, -Br, -I, -N3, -CN, -OCN, -NCO, -SCN, -NCS, -CHO, -COCH3 , -COC2H5, -COC3H-7, CO-CÍCI0-C3H5 , -COCH(CH3)2, -COC(CH3)3, -COOH, -COCN, COOCH3 , -COOC2H5 , -COOC3H7, -COO-ciclo-C3H5, -COOCH (CH3) 2, -COOC(CH3)3, -OOC-CH3, -OOC-C2H5 , -OOC-C3H7, -OOC- CÍCI0-C3H5, -OOC-CH (CH3)2, -OOC-C (CH3) 3, . -CONH2; CONHCH3, -CONHC2H5, -CONHC3H7, -CONH-CÍCI0-C3H5, CONH [CH (CH3) 2] , -CONH[C (CH3) 3] , -CON(CH3)2, -CON(C2H5)2, -CON(C3H7)2, -CON(ciclo-C3H5)2, -CON [CH (CH3) 2] 2, CON[C(CH3)3]2,-NHCOCH3, -NHCOC2H5, -NHCOC3H7 , -NHCO-ciclo-C3H5,-NHCO-CH(CH3)2, -NHCO'-C (CH3) 3, -NHCO-OCH3, -NHCO- OC2H5, -NHCO-OC3H7, -NHCO-O-CÍCI0-C3H5, -NHCO-OCH (CH3) 2, -NHCO-OC(CH3) 3/ -NH2, -NHCH3, -NHC2H5, -NHC3H7, -NH-C ÍC I0 -C3H5 , -NHCH(CH3)2, -NHC(CH3)3, -N(CH3)2, -N(C2H5)2, -N(C3H7)2, .-N(ciclo-C3H5)2, -N [CH (CH3) 2] 2, -N [C (CH3) 3 ] 2 , -SOCH3 , -SOC2H5, -SOC3H7, -SO-ciclo-C3H5, -SOCH(CH3)2, -SOC(CH3)3, -SO2CH3, -SO2C2H5, -SO2C3H7, -SO2-CÍ C I0-C3H5, -S02CH(CH3)2, -S02C(CH3)3, -S03H, -SO3CH3 , -S03C2H5, S03C3H7, -S03-ciclo-C3H5, -S03CH(CH3) 2, -S03C(CH3)3, OCF3, -OC2F5, -0-COOCH3, -O-COOC2H5, -0-COOC3H7, -O-COO-CÍCI0-C3H5, -0-COOCH(CH3)2, -O-COOC (CH3)3, -NH-CO-NH2, NH-CO-NHCH3 , -NH-CO-NHC2H5 , -NH-CO-NHC3H7 , -NH-CO-NH- CÍ CI0-C3H5 , -NH-CO-NH[CH(CH3)2] , -NH-CO-NH [C (CH3) 3 ] , -NH-CO-N (CH3) 2, -NH-CO-N (C2H5) 2, -NH-CO-N (C3H7) 2, -NH-CO-N(ciclo-C3H5)2, -NH-CO-N[CH(CH3)2]2, -NH-CO-N [C (CH3) 3 ] 2, NH-CS-NH2, -NH-CS-NHCH3, -NH-CS-NHC2H5, -NH-CS-NHC3H7, -NH-CS-NH-CÍCI0-C3H5 , -NH-CS-NH [CH (CH3) 2] , -NH-CS- NH [C(CH3) 3 ] / -NH-CS-N(CH3)2, 7NH-CS-N (C2H5) 2, -NH-CS- N(C3H7)2, -NH-CS-N (CÍCI0-C3H5 ) 2, -NH-CS-N [CH (CH3) 2]2, -NH-CS-N[C(CH3)3]2, -NH-C (=NH) -NH2, -NH-C (=NH) -NHCH3 , -NH- C (=NH) -NHC2H5, -NH-C (=NH) -NHC3H7, -OC6H4-OCH3, -NH- C (=NH) -NH-ciclo-C3H5, -NH-C (=NH) -NH [CH (CH3) 2] , -CF2C1, NH-C (=NH) -NH[C (CH3)3] , -NH-C (=NH) -N (CH3) 2, -NH-C(=NH)- N(C2H5)2, -NH-C (=NH) -N (C3H7)2, -NH-C (=NH) -N (ciclo-C3H5) 2, -OC6H4-CH3, -NH-C(=NH)-N[CH(CH3)2]2, -NH-C (=NH) -N [C (CH3) 3] 2, -0-CO-NH2, -0-CO-NHCH3, -0-CO-NHC2H5, -0-CO-NHC3H7, -0-CO-NH-ciclo-C3H5, -0-CO-NH[CH(CH3)2] , -0-CO-NH [C (CH3) 3] , -0-C0-N (CH3)2, -0-CO-N(C2H5)2, -0-C0-N (C3H7) 2, -0-C0- N(ciclo-G3H5)2, -0-CO-N[CH(CH3)2]2, -0-CO-N [C ( CH3) 3 ] 2 , -0-C0-0CH3, -0-CO-OC2H5> -0-CO-OC3H7, -0-CO-0-ciclo-C3H5, 0-C0-0CH (CH3) 2, -0-C0-0C (CH3) 3(-CH2-COOH, -CH2-COOCH3, -CH2- COOC2H5, -CH2-COC3H7, -CH2-CO-ciclo-C3H5 -CH2-C0CH ( CH3 ) 2, -CH2-COC (CH3) 3.

R7 - R13 representan independientemente entre si las siguientes porciones :-CH2F, -CHF2, -CF3, -CH2C1, -CH2Brf -CH2I, -CH2-CH2F, -CH2-CHF2, -CH2-CF3, -CH2-CH2C1, -CH2-CH2Br, -CH2-CH2I, ciclo-C3H5, ciclo-C4H7, CÍCI0-C5H9, ciclo-C6Hn, ciclo-C7Hi3, ciclo-C8Hi5, -Ph, -CH2-Ph, -CPh3/ -CH3, -C2H5, -C3H7, -CH(CH3)2, -C4H9/ -CH2-CH (CH3)2, -CH (CH3)-C2H5, -C(CH3)3, -C5H11, -CH(CH3)-C3H7, -CH2-CH (CH3) -C2H5, -CH(CH3)-CH(CH3)2, -C (CH3) 2-C2H5, -CH2-C(CH3) 3, -CH(C2H5)2, -C2H4-CH(CH3)2, -C6H13, -C3H6- CH(CH3)2, -C2H4-CH(CH3)-C2H5, -CH (CH3) -C4H9, -CH2-CH (CH3 ) -C3H7,-CH(CH3) -CH2-CH(CH3)2, -CH (CH3 ) -CH ( CH3 ) -C2H5 , -CH2-CH(CH3)-CH(CH3)2, -CH2-C (CH3) 2-C2H5, -C (CH3) 2-C3H7, C(CH3)2-CH(CH3)2, -C2H4-C(CH3)3, -CH (CH3) -C (CH3) 3, -CH=CH2, -CH2-CH=CH2, -C(CH3)=CH2, -CH=CH-CH3, -C2H4-CH=CH2 , -C7H15, -C8Hi7, -CH2-CH=CH-CH3, -CH=CH-C2H5, -CH2- C(CH3)=CH2, -CH (CH3) -CH=CH, -CH=C(CH3)2, -C (CH3) =CH-CH3, -CH=CH-CH=CH2, -C3H6-CH=CH2, -C2H4-CH=CH-CH3, -CH2-CH=CH- C2H5, -CH=CH-C3H7, -CH2-CH=CH-CH=CH2, -CH=CH-CH=CH-CH3, -CH=CH-CH2-CH=CH2, -C (CH3) =CH-CH=CH2, -CH=C (CH3) -CH=CH2, CH=CH-C (CH3)=CH2, -C2H4-C (CH3) =CH2, -CH2-CH (CH3) -CH=CH2; CH (CH3) -CH2-CH=CH2, -CH2-CH=C (CH3) 2, -CH2-C (CH3) =CH-CH3, CH (CH3) -CH=CH-CH3, -CH=CH-CH (CH3 ) 2 , -CH=C (CH3) -C2H5, C(CH3) =CH-C2H5, -C (CH3) =C (CH3)2, -C (CH3) 2-CH=CH2, CH (CH3) -C (CH3) =CH2, -C (CH3)=CH-CH=CH2, -CH=C ( CH3 ) -CH=CH2 , -CH=CH-C (CH3) =CH2, -C4H8-CH=CH2, -C3H6-CH=CH-CH3 , -C2H4-CH=CH-C2H5 -CH2-CH=CH-C3H7, -CH=CH-C4H9, -C3H6-C (CH3) =CH2, -CH2-CH2-CH2-OCH3, -C2H4-CH (CH3) -CH=CH2, -CH2-CH (CH3) -CH2- CH=CH2, -CH2NH2, -CH (CH3) -C2H4-CH=CH2, -C2H4-CH=C (CH3) 2, C2H4-C (CH3) =CH-CH3, -CH2-CH (CH3) -CH=CH-CH3, -CH ( CH3 ) -CH2- CH=CH-CH3, -CH2OH, -CH2SH, -CH2-CH=CH-CH (CH3) 2, -CH2-CH=C (CH3) -C2H5, -CH2-CH2-CH2NH2, -CH2-C (CH3) =CH-C2H5, CH (CH3) -CH=CH-C2H5, -CH2-CH2NH2, -CH=CH-CH2-CH (CH3) 2, -CH=CH-CH (CH3) -C2H5, -CH=C (CH3) -C3H7, -C (CH3) =CH-C3H7, -CH2-CH (CH3 ) -C(CH3) =CH2, -CH2-CH2SH, -CH (CH3) -CH2-C (CH3) =CH2, -CH (CH3) - CH (CH3) -CH=CH2, -CH2-CH2-CH2OH, -CH2-C (CH3) 2-CH=CH2, -C (CH3) 2-CH2-CH=CH2, -CH2-C (CH3) =C (CH3)2, -CH (CH3) -CH=C (CH3) 2, C (CH3) 2-CH=CH-CH3, -CH2-CH2-CH2SH, -CH (CH3) -C (CH3) =CH-CH3, -CH=C (CH3) -CH (CH3) 2, -C (CH3) =CH-CH (CH3) 2, -C (CH3) =C (CH3) - C2H5, -CH=CH-C (CH3) 3, -C (CH3) 2-C (CH3) =CH2, -CH (C2H5) - C (CH3) =CH2, -C (CH3) (C2H5) -CH=CH2, -CH (CH3) -C (C2H5) =CH2, CH2-C (C3H7) =CH2, -CH2-C (C2H5) =CH-CH3, -CH (C2H5) -CH=CH-CH3, -C (C4H9) =CH2, -C (C3H7) =CH-CH3, -C (C2H5) =CH-C2H5, C (C2H5)=C(CH3) 2, -C[C (CH3) 3] =CH2, -C [CH (CH3) (C2H5) ] =CH2, C[CH2-CH (CH3) 2]=CH2, -C2H4-CH=CH-CH=CH2, -C6H4-OCH3, -CH2-CH=CH-CH2-CH=CH2, -CH=CH-C2H4-CH=CH2 , -C6H4-OH, -CH2- CH=CH-CH=CH-CH3, -CH=CH-CH2-CH=CH-CH3, -CH2-CH2-OCH3, CH=CH-CH=CH-C2H5, -CH2-CH=C'H-C (CH3) =CH2, -CH2-CH2OH, -CH2-CH=C (CH3) -CH=CH2, -CH2-C (CH3) =CH-CH=CH2 -CH2-OCH3, CH (CH3) -CH=CH-CH=CH2, -CH=CH-CH2-C (CH3) =CH2, -CH=CH- CH (CH3) -CH=CH2, -CH=C (CH3) -CH2-CH=CH2, -C (CH3) =CH-CH2- CH=CH2, -CH=CH-CH=C (CH3) 2, -CH2-C6H4-OCH3 , -CH=CH-C(CH3) =CH-CH3, -CH=C (CH3) -CH=CH-CH3, -CH2-C6H4-OH, C(CH3) =CH-CH=CH-CH3, -CH=C (CH3) -C (CH3) =CH2, -C (CH3) =CH- C(CH3) =CH2, -C (CH3) =C (CH3) -CH=CH2, -CH=CH-CH=CH-CH=CH2 , -C=CH, -C=C-CH3, -CH2-C=CH, -C2H4-C=CH, -CH2-C=C-CH3, -C=C-C2H5, -C3H6-C=CH, -C2H4-C=C-CH3, -CH2-C=C-C2H5 , C=C-C3H7, -CH (CH3) -C=CH, -CH2-CH (CH3) -C=CH, -CH (CH3) -CH2-C=CH, -CH (CH3) -C=C-CH3, -C4H8-C=CH, -C3H6-C=C-CH3, C2H4-C=C-C2H5, -CH2-C=C-C3H7, -C=C-C4H9, -C=C-C (CH3) 3, C2H4-CH (CH3) -C=CH, -CH2-CH (CH3) -CH2-C=CH, -CH2-C=C-CH (CH3) 2, -CH (CH3) -C2H4-C=CH, -CH2-CH (CH3) -C=C-CH3, -CH (CH3) -CH2-C=C-CH3, -CH (CH3) -C=C-C2H5, -C=C-CH (CH3) -C2H5, -C=C-CH2-CH (CH3) 2, -CH (C2H5) -C=C-CH3, -C (CH3) 2-C=C-CH3, -CH (C2H5) -CH2-C=CH, CH2-CH(C2H5) -C=CHr -C (CH3) 2-CH2-C=CH, -CH2-C (CH3) 2-C=CH, CH (CH3) -CH (CH3) -C=CH, -CH (C3H7) -C=CH, -C (CH3) (C2H5) -C=CH, -C=C-C=CH, -CH2-C=C-C=CH, -C=C-C=C-CH3, -CH (C=CH) 2, C2H4-C=C-C=CH,-CH2-C=C-CH2-C=CH, -C=C-C2H4-C=CH, -CH2-C=C- C=C-CH3, -C=C-CH2-C=C-CH3, -C=C-C=C-C2H5/ -C=C-CH (CH3) - C=CH, -CH (CH3) -C=C-C=CH, -CH (C=CH) -CH2-C=CH, -C (C=CH)2-CH3, -CH2-CH (C=CH)2, -CH (C=CH) -C=C-CH3, -Ci4H29, -CH2-CH2-N (CH3) 2; también como sales, solvatos, hidratos, compuestos complejos , enantiomeros, diastereomeros, mezclas de diastereomeros, tautomeros, también como racematos aceptables farmacológicamente de los compuestos mencionados anteriormente para la profilaxis y tratamiento de daños de la audición, vértigo y alteraciones vestibulares.

El término "profármaco" como se usa en la presente es definida como una sustancia farmacológica gue es suministrada en una forma inactiva y forma menos efectiva. Después de la administración, es metabolizado a su forma efectiva activa en el cuerpo.

El término "tautometro" como se usa en la presente es definido como una sustancia orgánica que se puede interconvertir a su isómero en equilibrio mediante una reacción química, tautomerizacion . Preferiblemente, ácidos, bases u otras sustancias apropiadas pueden catalizar la tautomerizacion.

Síntesis general de 9-alquil-p-carbolina El compuesto de partida, norharman, puede ser producido mediante protocolos conocidos en la literatura, como se describe en el ejemplo 1 por ejemplo.

De acuerdo con reacciones de alquilación bien establecidas, la N-alquilación de la posición 9 resulta de ioruros de alquilo, bromuros de alquilo, cloruros de alquilo, mesilatos de alquilo, tosilatos de alquilo y otros reactivos de alquilación de acuerdo con el esquema de reacción a continuación: LG significa un grupo saliente. Las reacciones de alquilación preferiblemente son a base de catalizador.

Protocolo de reacción general para alquilación: Una equivalente en mol de norharman es disuelto en un solvente anhidro tal como DMF, THF, cloruro de metileno, etc. Bajo una atmósfera de gas inerte. La desprotonacion resulta de un exceso de base fuerte, preferiblemente hidróxido de sodio (aproximadamente 2 equivalentes en mol) , a bajas temperaturas (.78°C a 0°C) . 1.0 a 1.2 equivalentes en mol de un reactivo de alquilación, que pueden ser disueltos en un solvente anhidro son también agregados a una temperatura de 0°C. Se agita la mezcla de la noche a la mañana, mediante lo cual la solución de reacción se puede calentar por si misma a temperatura ambiente. El procesamiento es efectuado de manera conocida para la persona experimentada. El norharman si convertir puede ser removido mediante cromatografía de intercambio iónico o mediante extracción de par iónico. Usualmente, los rendimientos están en el intervalo de 30 a 75% del rendimiento teórico.

Los siguientes compuestos fueron sintetizados de acuerdo con la alcjuilación anterior.

Síntesis general de ß-carbolina 1 , 6-bi-sustituidas Los derivados de indol se hicieron reaccionar con los aldehidos correspondientes para obtener ß-carbolina 1,6-bi-sustituidas de acuerdo con el esquema de reacción anterior.

Mediante esto, 0.1 moles del derivado de indol fueron disueltos en DMF y se agregaron 0.12 moles del aldehido con agitación. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente por 16 horas. Después de la remoción del solvente, el sólido resultante fue recristalizado dos veces en tolueno y secado. En una etapa de síntesis adicional, 0.07 moles del sólido recristalizado en tolueno y secado fueron disueltos en 600 mi eumeno y calentados a reflujo con 2.6 gramos de Pd/c (10%) en una atmósfera de nitrógeno por 60 minutos. Después de la adición de 100 mi de etanol, la solución caliente fue filtrada y el carbón fue extraído tres veces mediante 30 mi de etanol caliente. La fracciones liquidas combinadas fueron liberadas de solvente en vacio y el residuo fue cristalizado en tolueno para obtener el derivado 1,3 bi-sustituido de norharman.

Si R3 es un átomo de hidrógeno, entonces se obtienen las ß-carbolina 1-sustituidas correspondientes.

Después de la reacción de cierre de anillo, se lleva a cabo la N-alquilación de la posición 9 por una base, preferiblemente un hidruro y adición subsecuente de un reactivo de alquilacion, por ejemplo un yoduro de alquilo. Se incluye un protocolo detallado en la sección experimental. Los siguientes compuestos fueron sintetizados de acuerdo con este protocolo.

Los siguientes compuestos de formulas generales (II) -(v) y (XXI) son preferidos.

Las 9-alquil-p-carbolinas de acuerdo con la invención muestran sorprendentemente un efecto farmacológico sobre los daños a la audición, vértigo y alteraciones vestibulares, también como otras enfermedades de la audición y asi, son usado de acuerdo con la invención para la profilaxis y tratamientos de daños de la audición, vértigo y alteración vestibular. Las indicaciones de daños de la audición, vértigo y alteración vestibular también comprenden particularmente sordera de laberinto, presbiacuscia, perdida de audición aguda, perdida de audición, trauma durante el implante de prótesis de oído interno (trauma de inserción) , sordera de laberinto de oído a la exposición al ruido crónica, trauma acústico agudo, episodios de vértigo rotacional, nausea y emesis debido a daños a la audición, vértigo debido a enfermedades del odio interno, vértigo en relación y/o como síntoma de enfermedad de Meniére, alteraciones vestibulares en relación con y/o como síntoma de enfermedad de Meniére, tinnitus y daños a la audición debidos a antibióticos tales como peniclinas, tales como penicilina V, propicilina, azidocilina, aminopenicilinas tales como ampicilina, amoxicilina; cefalosporinas tales como cefaclor, cefradina, ; lincomicinas tales como lincomicina, clindamicina; tertraciclinas como la doxiciclina, tetraciclina, notroimidazol tal como metronidazol; macrólatos como la eritromicina, aminoglicósidos como la gentamicina, estreptomicina y citostáticos tales como la actinomicina D, aminoglutetimida, amsacrina, anastrozol, los antagonistas de purina y bases de pirimidina, antraciclinas, los inhibidores de la aromatasa, asparaginasa, anti-estrogenos y bexaroteno, bleomicina, buselerina, busulfano, derivados camptotecina, la capecitabina, carboplatino, carmustina, el clorambucilo, el cisplatino, la cladribina, ciclofosfamida, citarabina, citosinarabinoside, citostáticos alquilantes, dacarbazina, dactinomicina, daunorrubicina, docetaxel, doxorubicina (adriamicina) , epirubicina, estramustina, etoposid, exemestan, fludarabin, fluorouracilo, antagonistas del ácido fólico, formestan, Gemcitabina, Glucocorticoides, goselerina, las hormonas y los antagonistas de hormonas, Hicamtina, hidroxiurea, idarubicina, ifosfamida, imatinib, irinotecan, letrozol, leuprorelina, lomustina, melfalána mercaptopurina, metotrexato, miltefosina, mitomicina, inhibidores de mitosis, la mitoxantrona, nimustina, oxaliplatino, pentostatina paclitaxel, procarbazina, el tamoxifeno, la temozolomida, tenipósido, testolactona, tiotepa, tioguanina, inhibidores de la topoisomerasa, topotecana, treosulfan, tretinoina, triptorelina, trofosfamida, vinblastina, vincristina, vindesina, Vinorelbina, , antibióticos citostáticos- efectivos.

Las indicaciones, daños de la audición y pérdida de la audición, pueden también ser ruido-inducidas y/o están asociadas con trauma acústico agudo y/o trauma de explosión. Los actores mas nombrados de trauma acústica, tal como trauma acústica aguda o trauma de explosión son contaminación de ruido. en el lugar de trabajo y durante el tiempo de descanso Tinnitus y daños de la audición pueden también ' estar basados en isquemia vascular, alteraciones autoinmunes, enfermedades infecciosas, ostoesclerosis trauma craneal. De aquí, la presente invención también esta dirigida a daños de la audición y perdida de audición provocadas' por trauma acústico agudo, trauma de explosión, contaminación de ruido, isquemia vascular, enfermedades autoinmunes, enfermedades infecciosas, osteoesclerosis y trauma craneal.

El vértigo en relación con la enfermedad de Meniére es una indicación tratable de acuerdo con la invención debido a que el oído interno participa en esta forma de vértigo. Esto se aplica a disfunciones del equilibrio también debido a que el órgano vestibular del laberinto es parte del oido interno. La enfermedad de Meniére o morbus Meniére se muestra en si mismo en episodios de vértigo rotacional que ocurren repentinamente, nausea , emesis, zumbido en los oídos (tinnitus aurium) y perdida del oído unilateral. Las características de esta enfermedad que pueden Ocurrir sin causa reconocible a cualquier hora del día o noche, son repentinos que ocurren con vértigo rotacional junto con nausea hasta emesis. Duran de minutos a horas y se repetirán a intervalos de diferente duración. El vértigo puede ser tan intenso que el paciente no es apto de permanecer parado más. Además, hay una perdida de audición fluctuante (se presenta temporalmente) de la audición 'en relación con zumbido del oído (Tinnitus) y un sentido de presión en el oído afectado.

Los sustituyentes en posición 9 (Rx)y 6 (R6)del sistema de anillo de ß-carbolina son precedidos. El patrón de sustitución de R1 comprende preferiblemente sustituyentes alquilo, el sustituyente de metilo particularmente preferido. Las porciones de R2 y R3 comprenden sustituyentes alquilo particularmente preferidos, aluros y sustituyentes alcoxis. Sustituyentes R3 es preferiblemente una porción alcoxi tal como -OCF3, -OCH2-CH2F, -OCH2-CF3, -OCH2-CH2CI, CÍCI0-OC3H5, CÍCI0-OC5H9, ciclo-OC6Hn, -OPh, -OCH2-Ph, -OCH3, -OC2H5, -OC3H7, -OCH(CH3)2, -OC4H9, -OC5Hu, -OCH(C2H5}2, -OC6H13, -OCH=CH2, -OCH2-CH=CH2, -OC7Hi5, -OC8Hi7, OCH2-CH=CH-CH3, -OCH2OH, -OCH2-CH2NH2, -OCH2-CH2-CH2OH, -OCH2-CH2-OCH3, -OCH2-CH2OH, -OCH2-OCH3, -OCH2-C=CH.

R1 es preferiblemente una porción alquilo con hasta 6 átomos de carbono, mas preferidos hasta 4 átomos de carbono.

Las sustancias 9-metil- -carbolina y 9-fluoroenil- ß-carbolina son particularmente preferidas, Los compuestos preferidos son: Los compuestos de la presente invención y de los compuestos particularmente preferidos de formulas generales (I-XX) pueden ser usados para la manufactura de una formulación farmacéutica para el tratamiento y/o profilaxis de alteraciones del oído agudas y crónicas y daños de la audición, vértigo y alteraciones vestibulares, en particular pérdida de audición aguda, trauma acústico agudo, sordera de laberinto debido a exposición al ruido crónica, presbiacusia, trauma durante el implante de prótesis de oído interno (trauma de inserción) , vértigo debido a enfermedades del oído interno, vértigo en relación con y/o como síntoma de enfermedad Meniére, alteraciones vestibulares en relación co y/o como síntoma de enfermedad de Meniére, tinnitus y daños de la audición debido a antibióticos y citostáticos .

Los compuestos de acuerdo con la presente invención pueden ser administrados netos en forma de una sal efectiva farmacológica. Debido a que los compuestos de la presente invención pueden tener propiedades alcalinas, sales de estos compuestos pueden ser generadas mediante métodos establecidos .

Los siguientes ácidos pueden ser enlistados como ácidos, que formaran una sal de adición de compuestos de la presente invención: ácido sulfúrico, ácido sulfónico, ácido fosfórico, ácido nítrico, ácido nitroso, ácido perclórico, ácido bromhídrico, ácido clorhídrico, ácido fórmico, ácido acético, ácido propiónico, ácido succínico, ácido oxálico, ácido glucónico (Glicon, ácido ) , ácido láctico , ácido mélico, ácido tartárico, ácido dihidroxitartarico (ácido hidroximaleico, ácido hidroxipropanoico) , ácido fumárico, ácido cítrico, ácido ascórbico, ácido maleico, ácido malónico, ácido hidroximaleico, ácido pirúvico, ácido fenilacético, (o-, m-, p-) ácido toluico, ácido benzoico, ácido p-aminobenzoico, ácido p-hidroxibenzoico, ácido salicílico, ácido p-aminosalicílico, ácido metanosulfónico, etanosulfónico, hidroxietanosulfónico, ácido etilensulfonico, ácido p-tolueno sulfónico, ácido nafthilsulfonico, naftilamino-sulfónico , ácido sulfanílico, ácido canforsulfónico, ácido quínico (ácido quinina) , o-metil-mandélico, el hidrógeno ácido bencenosulfónico, ácido pícrico (2, , 6-trinitrofenol) , ácido adípico, do-tolil-tartárico, tales ácidos amino como metionina, triptófano, arginina y en particular, amino ácidos tales como ácido glutámico o ácido asparagico.

Formas de Betaina son posibles dependiendo del tipo de compuesto.

La presente invención es concerniente además con composiciones farmacéuticas que fueron manufacturadas mediante el uso de por lo menos un compuesto de acuerdo con la invención o una sal del mismo.

Además de por lo menos un compuesto de la presente invención, las composiciones farmacéuticas pueden contener un portador excipiente y/o solvente farmacológico.

Tales formulaciones son apropiadas para inhalación o administración intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, subcutánea, mucocutanea, oral, rectal, transdermica, tópica, bucal, intradérmica, intragastral , intracutanea, intranasal, intrabucal, percutánea o sublingual. La administración o inyección al oído medio, también como aplicación tópica a la membrana timpánica es particularmente preferida.

Las composiciones farmacéuticas pueden ser manufacturadas y administradas en forma de sistemas de aplicación transdermica (banda-auxiliar, película) gotas, pildoras, tabletas, tabletas de película, tabletas de tapa, geles, pomadas, jarabes, granulados, supositorios, emulsiones, dispersiones, microcapsulas , capsulas, polvos o soluciones de inyección. Formulaciones farmacéuticas en forma de liposomas, geles y emulsiones son preferidas.

El oído esta integrado como sigue. El meatus acústico conduce de la aurícula al interno del oído. El meatus acústico termina en la membrana timpánica. Esta parte del oído es llamada el oído externo. Un espacio, el llamado oído medio, que esta unido a la trompa de eustaquio, ya separado del oído externo. El oído medio esta separado por la membrana timpánica en un lado y por las ventanas ovales redondas en el lado adyacente. Un espacio llamado el oído interno sirve detrás de ambas ventanas. El oído interno alberga varios órganos del oído, la llamada cóclea entre otros. Esta a su vez contiene el órgano de Corti. La cóclea también como el órgano de Corti yace próxima a la ventana redonda. Además la cóclea esta unida al nervio acústico.

Así, la membrana de la ventana redonda es la barrera biológica al espacio del oído interno y representa el obstáculo más grande para terapia local de daños de la audición. El fármaco aplicado debe pasar a través de esta membrana para ayudar al espacio del oído interno. El fármaco no puede ser aplicado a través de la membrana mecánicamente puesto que esto dañara la membrana mediante la manipulación. Sin embargo, puede ser administrado localmente a la membrana de la ventana redonda de manera quirúrgica, por ejemplo, mediante inyección a través de la membrana timpánica y luego puede penetrar a la membrana de la ventana redonda. Las células sensoriales (células vellosas internas y externas) del órgano de la audición están localizadas al interior de la cóclea y su número total es llamado el órgano de Corti. La células vellosas son dañadas inicialmente en enfermedad de laberinto de cualquier causa (edad, fármacos tales como ciertos antibióticos y citoestáticos) y en tinnitus. La ventana redonda termina alejada del · tímpano de Scalae y vestíbulo que es un compartimiento dentro de la cóclea. Los tímpanos de Scalae y vestíbulo son llenados con perilimpa y endolimpa, de tal manera que las células vellosas están en contacto directo con la perilimpa. Por consiguiente las sustancias que entran por la ventana redonda, son expresadas en la perilimpa y llegaran a las células vellosas de esta manera. Además, el sistema de perilimpa esta en contacto con el laberinto. Mediante esto, los fármacos también llegan a la perilimpa del laberinto, esto es, el órgano de equilibrio vía la perilimpa de la cóclea.

De aquí, todas las formulaciones farmacéuticas son preferidas que son apropiadas para aplicar el fármaco localmente en la membrana de la ventana redonda. Es preferido además si la formulación farmacéutica contiene un mej orador de la penetración de membrana que soporta el paso de ß-carbolina a través de la membrana de la ventana redonda. Así, formulaciones liquidas o semejantes a gel son preferidas en particular. También es posible aplicar el fármaco oralmente por supuesto.

Las formulaciones liquidas comprenden soluciones, suspensiones, atomizaciones y emulsiones tales como soluciones de inyección a base de agua o a base de agua-propilenglicol para inyección parenteral.

Ceras debajo o junto de fusión, esteres de acido graso y glicéridos son usados para la preparación de supositorios preferiblemente.

Las composiciones farmacéuticas para cualquier clase de administración contienen ß-carbolina en una concentración suficiente para obtener un efecto terapéutico y si es necesario excipientes aceptables farmacéuticamente inorgánicos u orgánicos, líquidos o sólidos. Las composiciones farmacéuticas apropiadas para administración tópica en el oído medio contienen soluciones o suspensiones acuosas que pueden ser preparadas antes de la administración en el oído medio, tales como formulaciones liofilizadas que contienen ß-carbolina netas o conjuntamente con un excipiente. Las composiciones farmacéuticas comprenden además geles acuosos o no acuosos o a base de microesferas biodegradables o no biodegradables . Ejemplos de tales geles comprenden poloxameros, hialuronatos, xiloglucanas , qitosanas, poliester, polilacturo, poliglicolato o co-polimeros de los mismos, PLGA, acetato isobutirato de sacarosa, monooleato de glicerol. Las composiciones farmacéuticas apropiadas para administración enteral o parenteral contienen tabletas o capsulas de gelatina o soluciones acuosas o suspensión, como se describe anteriormente .

Las composiciones farmacéuticas pueden ser esterilizadas y/o contener adyuvantes tales como conservadores, estabilizadores, humectantes y/o emulsificantes, sales para regulación de presión osmótica y/o soluciones reguladoras del pH. Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden contener, si se desea, sustancias activas adicionales. Las composiciones farmacéuticas pueden ser manufacturadas mediante cualquiera de los métodos comunes conocidos del arte previo, tales como combinación, granulación, confección, disolución y liofilización que contienen aproximadamente 0.01 a 100%, preferiblemente entre 0.1 a 50% y como liofilizados hasta 100% de ß-carbolina.

En una modalidad preferida, las composiciones farmacéuticas de la invención son formuladas como medicaciones tópicas. Excipientes apropiados para una medicación otogenica son sustancias orgánicas o inorgánicas que son aceptables farmacéuticamente y no reaccionan con ß-carbolina y/o cualesquier otras sustancias activas tales como sal común, alcoholes, aceites vegetales, alcohol bencílico, alquil glicol, polietilenglicol , poliacetato de glicerina, gelatina, carbohidratos tales como lactosa o almidón, carbonato de magnesio (magnesia) , y estearato (ceras) , talco y petrolato (vaselina) . Las composiciones descritas pueden ser esterilizadas y/o contener adyuvantes tales como lubricantes, conservadores tales como tiomersal (por ejemplo 50% en peso) estabilizadores y/o humectantes, emulsificantes, sales para regulación de presión osmótica, sustancias reguladoras del pH , agentes colorantes y/o saborizantes . Estas composiciones pueden también contener, en donde será apropiado, una o varias sustancias activas adicionales. Las composiciones otogenicas de acuerdo con la invención pueden comprender varias sustancias, que contienen otras sustancias biológicamente activas, tales como antibióticos, sustancia activas anti-inflamatorias tales como esteroides, cortisona, analgésicos, antipirina, benzocaina, procaina, etc.

Las composiciones para medicación tópica de acuerdo con la invención pueden contener otras sustancias aceptables farmacéuticamente. En una modalidad preferida de la presente invención, se usa un excipiente tópico que no mejora la liberación dé ß-carbolina y posiblemente de cualquier otra sustancia activa o sustancias activas al sistema de circulación sanguíneo o el sistema nervioso central, cuando son aplicadas en el oído, en el oído o al interior del canal auditivo. Es usualmente preferido que, por ejemplo el excipiente tópico no exhiba ninguna propiedad excluyente significativa que realzaría la transferencia percutánea sobre la mucosa en el sistema circulatorio sistémico. Tales excipientes contienen ácidos de hidrocarburo, agentes de absorción libres de agua, tales como petrolato hidroquimico (vaselina) y lanolina libre de agua (por ejemplo, Aquaphor) y sustancias basadas en emulsiones de agua-aceite tales como lanolina y Cold Cream. Mas preferidos son excipientes que son sustancialmente no excluyentes, que comprenden usualmente todos aquellos excipientes que son solubles en agua, también como sustancias a base de emulsiones, aceites en agua (cremas o pomadas hidroquimicas ) y sustancias en base soluble en agua, tales como excipientes a base de polietilenglicol y soluciones acuosas gelificadas con varias sustancias como metilcelulosa, hidroxietilcelulosa y hidroxipropilmetilcelulosa .

Para administración oral en forma de tabletas o capsulas la ß-carbolina de la invención pueden ser combinadas con cualquier adyuvante aceptable farmacéuticamente no toxico seleccionado de la lista que comprende aglutinantes, tales como almidón de maíz, polivinil pierrolidona o hidroxipropilmeticelulosa, rellenos tales como lactosa, sacarosa, glucosa, manitol, sorbitol y otros azúcares reductoes y no reductores, celulosa microcristalina, sulfato de calcio o fosfato hidrogeno de calcio; lubricantes tales como estearato de magnesio, talco o sílice, ácido esteárico, estearil sulfató de sodio, behanato glicerilo, estearato de calcio y similares; desintegrantes tales como almidón de patata o glicolato almidón de sodio; humectantes tales como dodecil sulfato de sodio; agentes colorantes; aromas; gelatina; endulzantes; hules naturales y sintéticos tales como goma arábiga, tragacanto o alginato; sales reguladores del pH; carboximetilcelulosa; polietilenglicol ; ceras y los semej antes .

Las tabletas pueden ser cubiertas con una solución de azúcar concentrada que comprende por ejemplo goma arábiga, gelatina, talco, dióxido de titanio y los semejantes. En otra modalidad, las tabletas pueden ser cubiertas con un polímero que es soluble en un solvente orgánico volátil ligero o una mezcla de solventes orgánicos. En modalidades preferidas, las ß-carbolinas de la invención son formuladas como tabletas para liberación inmediata o como tabletas para liberación extendida. Las formas de dosificación para liberación inmediata permiten la liberación de una mayoría de la cantidad total de ß-carbolinas en una extensión de tiempo relativamente corta de 60 minutos o menos y permiten la absorción rápida de ß-carbolinas . Las formulaciones de liberación prolongada para las formas de dosificación oral permiten una liberación retardada en periodos de tiempo más largos alcanzando mediante esto un nivel en el plasma terapéuticamente efectivo de ß-carbolinas y/o manteniendo este nivel de plasma efectivo terapéutico estable en un periodo mas largo y/o modificando otras características farmacocinéticas de las ß-carbolinas .

Las ß-carbolinas de la invención pueden ser formuladas como capsulas de gelatina blandas al mezclarlas, por ejemplo con un aceite vegetal o polietilenglicol . Las capsulas de gelatina dura pueden contener las ß-carbolinas en forma granular al usar ya sea uno u otro de los adyuvantes mencionados anteriormente para tabletas tales como lactosa, sacarosa, manitol, almidón tal como almidón de patata, almidón de maíz y amilopectina, derivados de celulosa o gelatina. Las formas liquidas y semiliquidas de las ß-carbolinas de la invención pueden también ser llenadas en capsulas de gelatina dura.

Las ß-carbolinas de la invención pueden también ser introducidas a microcapsulas o microperlas que son fabricadas de, por ejemplo de ácido poliglicólico/acido láctico (PGLA) . La liberación controlada de las ß-carbolinas de la invención de la composición farmacéutica pueden ser obtenidas al hacer uso de polímeros biocompatibles seleccionados de la lista que comprende ácido poliláctico, ácido poliglicólico, copolímeros de ácido poliláctico y ácido poliglicólico, poli-e-caprolactona, polihidroxibutírico, polioetester, Poliacetal, polihidropurane, policianoacrilato copolímeros de bloque y reticulados o anfipáticos de hidrogeles.

En otra modalidad de la invención las ß-carbolinas son provistas como una formulación liquida oral. Preparaciones liquidas para administración oral pueden ser provistas en forma de soluciones, jarabes, emulsiones o suspensiones. Alternativamente, las formulaciones liquidas orales pueden ser preparadas antes del uso mediante reconstitución de la formulación oral seca con agua u otro excipiente apropiado. Preparaciones para administración oral pueden ser formuladas apropiadamente de tal manera que se obtenga una liberación controlada o retardada de las ß-carbolinas de la invención y posiblemente de otra sustancia activa.

Si se pretende la administración oral en forma liquida las ß-carbolinas de la invención pueden ser mezcladas con excipientes inertes aceptables farmacéuticamente no tóxicos tales como etanol, glicerina, agua, agentes de suspensión tales como jarabe de sorbitol, derivados de celulosa o grasas hidrogenadas comestibles; endulzantes tales como lecitina o goma arábica; excipientes no acuosos tales como aceite de almendras, esteres aceitosos, etanol o aceites vegetales fraccionados; conservadores tales como metil- o propil. Hidroxibenzoato o acido sorbico y los semejantes. Estabilizadores, por ejemplo como antioxidantes tales como butilhidroxianisol , butilhidroxitolul, galato de propilo, ascorbato de sodio, acido cítrico pueden ser usados para estabilizar las formas de dosificación. Por ejemplo, las soluciones pueden contener aproximadamente 0.2% en peso hasta aproximadamente 20% en peso de ß-carbolinas, en donde el compuesto nivelador es azúcar y una mezcla de etanol, agua, glicerina y propilenglicol . Opcionalmente, estas formulaciones liquidas pueden contener colorantes, saborizantes, sacarina y carboxil celulosa como espesantes y/u otros adyuvantes.

En otra modalidad, una dosis terapéuticamente efectiva de las ß-carbolinas de la invención es administrada oralmente en una solución, en donde la solución contiene conservadores, endulzantes, solubilizadores y un solvente. La solución para administración oral pueden contener una o mas a soluciones reguladoras del pH, saborizantes o excipientes adicionales. En todavia otra modalidad, se agrega menta u otros saborizantes a la solución de las ß-carbolinas de la invención para administración oral.

Para administración mediante inhalación, las ß-carbolinas de la invención pueden ser administradas en formas apropiadas en forma farmacéutica, tal como una atomización en aerosol en un recipiente presurizado o un nebulizador con un repelente apropiado tal como diclorofluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono u otro gas apropiado. Cuando se usa un aerosol presurizado, la dosis puede ser determinada al proveer una válvula para administrar una cantidad medida. Capsulas y cartuchos fabricados de por ejemplo gelatina para uso en inhaladores o insufladores pueden ser formuladas, de tal manera que las capsulas y cartuchos contienen una mezcla en polvo de las ß-carbolinas de la invención y posiblemente una o mas sustancias activos y una sustancia de base de polvo apropiada tal como lactosa o almidón.

Soluciones para administración parenteral mediante inyección pueden ser preparadas en una solución acuosa de una sal aceptable farmacéuticamente soluble en agua de las ß-carbolinas de la invención en . una concentración de aproximadamente 5% en peso hasta aproximadamente 10% en peso. Estas soluciones pueden contener además estabilizadores y/o sustancias reguladoras del pH y pueden ser provistas de maneras apropiadas en ampolletas con diferentes unidades de dosis .

De aqui, todos los compuestos presentados en la presente son útiles para la manufactura de formulaciones farmacéuticas para profilaxis y/o prevención de alteraciones del oído agudas y crónicas y daños de la audición, vértigo y alteraciones vestibulares, en particular perdida de audición aguda, trauma acústico agudo, sordera laberíntica debido a exposición al ruido crónica, presbiacusia, traumas durante el implante de prótesis de oído interno (trauma de inserción) , vértigo debido a enfermedades del oído interno, vértigo en relación con y/o como síntoma de enfermedad de Meniére, alteraciones vestibulares en relación con y/o como síntoma de enfermedad de Meniére, tinnitus y daños de la audición debido a antibióticos y citostáticos .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 muestra cuenta gráfica de RT-PCR cuantitativa (PCR en tiempo real) de células del oído interno (órgano de corti de la cóclea) de rata después de exposición a 9-metil-p-carbolina (9-Me-BC) 90 µ? por 48 horas o solvente (100%), respectivamente. Los valores por encima del 100% significan que la transcripción 9-Me-BC activada del gen correspondiente en el curso de incubación mientras que lo opuesto es valido para valores menores del 100%.

Las abreviaturas usadas en la La Figura 1 tienen el siguiente significado: Armetll: factor neurotrófico de dopamina conservado; BDNF: factor neurotrófico derivado del cerebro; BMP2 : proteína morfogenética de hueso; Cblnl: proteína precursora de cerebelina 1; DAT: transportador de dopamina; DEXA: dexametasona ; DRD1: subtipo 1 de receptor de dopamina; DRD21 Variante larga del de receptor de dopamina subtipo 2; GDNF factor neurotrófico derivado de linea celular glial ; NGF: factor de crecimiento de nervio; NPY: neuropéptido Y; Nurr 1: proteína de receptor nuclear regulada 1: PTX: . como factor de transcripción homeodominio semejante apareado; Ret: rearreglado durante la transfección del receptor; RKIP : proteína de inhibidor de la cinasa Raf-1; Sirt: regulador de la información silente; Th: hidroxilasa tirosina; TNF: factor de necrosis de tumor La Figura 2 muestra una cuenta gráfica de los efectos de diferentes concentraciones y combinaciones del factor neurotrófico derivado de línea de célula glial (GDNF) , factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) , dexametasona (DEXA) sobre la supervivencia de células del ganglio espiral del oído interno después de 48 horas de cultivo. La altura de columna refleja la media más menos errores estándar y representa 24-32 observaciones de tres o cuatro diferentes experimentos. Los significados de las diferentes comparaciones con el grupo testigo son mostrados en las barras, mientras que otras comparaciones son ilustradas separadamente por paréntesis (P<0.05 *; P< 0.01 **; P<0.001 ***) . Fuentes: Jahresbericht Medizinische Hochschule Hannover 2005, Department of Ear, Nose and Throat Diseases (director: Th. Lenarz) .

La Figura 3 A muestra la longitud de neurita de células SH-SY5Y humanas tratadas con Harman por 14 días en cultivo, como se describe anteriormente. La diferencia entre el grupo testigo y el grupo testigo tratado con Harman 110 µ? fue significativa (P<0.001) . Asi, el tratamiento con Harman condujo a un incremento de longitud de neuritas.

La Figura 3 B muestra la longitud de neuritas de células SH-SY5Y humanas tratadas con 9-metil-9H-p-carbolina por 14 días, como se describe anteriormente. La diferencia entre el grupo testigo y los grupos tratados con 9-metil-9H-ß-carbolina 70, 90 o 110 µ? fue significativa (P<0.001) . Asi, el tratamiento con 9-metil-9H- -carbolina condujo a un incremento en longitud de neurita.

La Figura 3C muestra la longitud de neurita de células SH-SY5Y humanas, tratadas con 6-metoxi-9-metil-9H-p-carbolina como se describe anteriormente. La diferencia entre el grupo testigo y grupo tratado con 6-metoxi-9-metil-9H-p-carbolina 50 µ? fue significativa (P<0.001) . Así, el tratamiento con 6-metoxi-9-metil-9H-p-carbolina condujo a un incremento en longitud de neurita.

La Figura 3D muestra la longitud de neurita de células SH-SY5Y humanas, tratadas 9 - (2-fluoroetil) -9?-ß-carbolina, como se describe anteriormente. La diferencia entre el grupo testigo y los grupos tratados con 9 - (2-fluoroetilo) -9H- -carbolina 30, 50 o 70 mM, fue significativa (p <0,001) . Asi el tratamiento con, 9 - tratamiento (2-fluoroetilo) -9H- -carbolina condujo a un incremento en la longitud de neuritas..

La Figura 4A muestra la expresión genética relativa de BDNF (factor neurotrófico derivado del cerebro) en células SH-SY5Y humanas. La transcripción de BNDF después de dos días fue estimulada solamente a la concentración mas alta (110 µ?) de LE-02 ( 9-metil-9H-p-carbolina) , mientras que, después de 14 días de exposición, las concentraciones mas bajas de 30 y 50 µ? indujeron estimulación. Tal desplazamiento fue también encontrado para 9-fluoroet??-ß-carbolina (sustancia no. 559, en la Figura A, después de dos dias: estimulación por 70 y 90 mM; después de 14 dias al 30 y 50 mM) . En contraste 6-metoxi-9-metil-9H-p-carbolina (sustancia no. 513 en la Figura 4 A) condujo a un incremento enorme dependiente de la dosis de transcripción de BDNF.

La Figura 4B muestra la expresión genética relativa de la proteina precursora cerebellina-1 (CBLN) . La proteina precursora de cerebellina-1 fue incrementada solamente después de 2 dias de exposición a 9-fluoroetil-9H- ~ carbolina. Después de 14 dias de exposición, todas las ß-carbolinas incrementaron la exposición de CBLN. Las concentraciones mas bajas de las sustancias de prueba tuvieron un efecto mas fuerte que las concentraciones mas altas con la excepción de 9-fluoretil-p-carbolina que muestra aproximadamente las misma estimulación a todas las concentraciones investigadas.

La Figura 4C muestra la expresión genética relativa de GDNF (factor neurotrófico derivado de linea de célula glial) . A consideraciones individuales, 14 días de exposición condujeron a una estimulación de hasta 3 veces.

. La Figura 4D muestra la expresión genética relativa de NGF (factor de crecimiento de nervio) . Después de 14 días de exposición, la expresión genética fue incrementada por 20 a 50 veces. Otra vez, las concentraciones mas bajas fueron bastantes mas efectivas para incrementar NGF.

La Figura 4E muestra la expresión genética relativa NPY (Neuropéptido Y) . Después de 14 días de exposición, la expresión genética fue incrementada por 1.3 a 4 veces. En el caso de 9-metil-9H- -carbolina y 9-fluoretil- ß-carbolina las concentraciones mas bajas fueron mas efectivas que las concentraciones mas altas.

La Figura 5 muestra un efecto de activación dependiente de la dosis de 9-metil-9H-P-carbolina, 9-fluoroetil--carbolina y 6-metoxi9-metil-9H-p-carbolina sobre la formación del factor de transcripción de CREB, hasta diez veces el nivel de las células testigo SH-SY5Y (tres experimentos independientes, incubación de 48 horas).

La Figura 6. Las Figuras 6A a 6F muestran cromatogramas de perilimpa que fueron obtenidas por los experimentos del ejemplo 29. Los cromatogramas de acuerdo con la Figura 6A y 6B fueron registrados para perilimpa que había sido obtenido después de una inyección de tres horas (Figura 6 A) o inyección de diez horas (Figura 6B) de 9-Me-BC a la región del oído interno de conejillos de indias por tres horas. Los cromatogramas de acuerdo con las Figuras 6C y 6D fueron registrados para perilimpa que había sido obtenida después de una inyección directa de tres horas a setenta y cuatro horas de 9-Me-BC a la cóclea de conejillo de indias. El cromatograma de acuerdo con la Figura 6E fue registrado para perilimpa que había sido expuesta a ningún tratamiento con 9-Me-BC. El cromatograma de acuerdo con la Figura 6F ilustra una línea de calibración recta, en donde la concentración de 9-Me-BC fue asignada a un área de bajo del máximo cromatográfico obtenido para la misma.

EJEMPLOS Ejemplo 1: Síntesis de 9-metil-9H- -carbolina Esquema de síntesis para 9-metil-9H-p-carbolina Una solución agitada de 13g (0.0756 Mol) 1,2,3,4, -tetrahidrilo-P-carbolina, manufacturada mediante clorhidrato de triptamina y acido gloxilico como se describe e por Ho and Walker (1988), y 2.6 g Pd/C (10%) en 600 mi de eumeno fue sometida a reflujo en una atmósfera del hidrogeno por 90 min. Después de adición de 100 mi de etanol, la solución caliente fue filtrada y el carbón fue extraído tres veces mediante 30 mi · de etanol caliente. Las fracciones liquidas fueron combinadas concentradas y los residuos fueron cristalizados en tolueno para producir 10.5 g(82%)de norharman. La metilación en posición 9 fue efectuada como se describe en la literatura (Ho BT, Mclsaac WM, Walker KE, Estevez V, J Pharm Sci 57: 269, 1968) todavía con un reprocesamiento mejorado. Un gramo (5.95 mmol) de norharman fue disuelto en 10 mi de DMF anhidro de en una atmósfera de nitrógeno. Después de esto, 0.36, (14.9 mmol) de hidruro de sodio fueron agregados en forma de una dispersión al 60% en parafina a 0°C. Después de enfriamiento de la mezcla de reacción a temperatura ambiente, esta fue enfriada a menos 10°C y se agregaron 0.84g (5.95mmol)de yodometano. Después de agitación adicional por 12 horas se permite que la mezcla se enfrié a temperatura ambiente una vez mas. Todos los ingredientes volátiles fueron removidos en presión reducida. Después de esto, se agregaron 100 mi de agua y la mezcla fue extraída mediante 2x50 mi de CHCI3 . Las fracciones orgánicas combinadas fueron lavadas con 5x20 mi de agua y fueron evaporadas para el secado. El residuo fue suspendido en 100 mi de acido clorhídrico 2 N. para separa el educto del producto metilado deseado, se llevo a cabo extracción de intercambio de par iónico de la sal HCI CHCI3 mediante un extractor liquido /liquido por 2 días. Después de la remoción del solvente, se produjeron 0.7g (64%) de cristales amarillos de clorhidrato de 9-metil-9H-p-carbolino .

Punto de fusión : 295°C; GC/MSs de la base libre: m/z = 182 (100%), 167 (5%), 140 (10%), 127 (10%), 113 (5%), 91 (10%) . 1H-NMR (HCI salt) : d (ppm) methanol d4 , 250 MHz: 4.06 s, 3H, N-CH3; 7.28 - 7.35, dt, J = 1.2; 6.8, 1H, H6; 7.58 -7.70, m, 2H, H7, H8; 8.13 - 8.16, d, J = 5.4, 1H, H4; 8.18 -8.21, d, J = 7.9, 1H H5; 8.31 - 8.33, d, J = 5.4, 1H, H3; 8.89, s, 1H, Hl.

Ejemplos 2-13: Producción de los compuestos A a L.

La síntesis de los compuestos A a L se lleva a cabo de acuerdo con el ejemplo 1 en que se usaron los yoduros de alquilo, bromuros de alquilo o tosilatos de alquilo correspondientes. Los rendimientos fueron de entre 30 y 75% del rendimiento teórico.

Ejemplo 14: Estudios de células de oído interno (cóclea) de rata.

Se llevaron a cabo experimentos para la prueba de efectividad de las ß-carbolinas de acuerdo con la invención del fin de determinar cuales efectos de esta clase de compuestos tendrán sobre enfermedades del oído, . daños de la audición y vértigo. 9-metil-p-carbolina (9-Me-BC,VI) fue seleccionado como un compuesto ejemplar. La efectividad de las otras sustancias de pruebas será puesta en relación con la efectividad de 9-metil-p-carbolina (9-Me-BC,VI) .

Inicialmente, cultivos de órgano del órgano de corti de la cóclea de ratas fueron preparadas, que fueron traídos en contacto con 9-metil-p-carbolina en una etapa siguiente. La expresión de diferentes neurodrofinas fue medida como marcador de los efectos de9-metil-p-carbolina sobre los órganos de corti. Para esto, el ARN fue aislado del tejido de corti, transcrito en cADN y las concentraciones de los cADN de las neurotrofinas fueron determinadas con la ayuda del método de RT-PCR en tiempo real. Órganos de corti de la cóclea de 40 ratas fueron preparados en varias sesiones en el dia 4 post-parto. Luego, el cultivo de órgano fue expuesto ya sea 9-Me-BC a una concentración de 90 mM por 48 horas o a -una cantidad correspondiente de solvente (comisiones testigo) . Después de esto, el cultivo de órgano fue lavado con PBS-EDTA (PBS-EDTA de Bio Chrom, diluido 1:27 mediante PBS) . Luego, la muestra fue congelada a -80°C. el ARN total fue aislado utilizando el Mini Kit de Tejido de RNEasy de Qiagen, Hilden. Se llevo a cabo la digestión de ADN asa con la muestra de ARN aislada con varias etapas de lavado subsecuentes de acuerdo con las instrucciones del fabricante del kit. El ARN fue eluido mediante agua libre de Rnasa . La cantidad y calidad del ARN fueron determinadas fotométricamente . Un microgramo de ADN de cada muestra fue transcrito a ADN complementario (cADN) utilizando un kit de Roche Applied Science, Mannheim. Se llevo a cabo reacción en cadena de polimerasa de transcriptasa inversa en tiempo real (RT-PCR en tiempo real) con el sistema LigthCycler de Roche Applied Science, Manheim, utilizando el métodos de transferencia de energía de resonancia de fluorescencia (FRET) . Para esto, se uso el kit de sonda de hibridización Maestra de ADN FastStart de LightCycler de la ¦ misma compañía. El Gen para hidroximetilbilano sintasa (HMBS)fue seleccionada como un llamado gen de mantenimiento para la cuantificación relativa. Sebadores y sondas apropiados fueron diseñados y sintetizados por TIB olbiol, Berlín. Veinticinco microgamos de ADN fueron agregados a cada reacción. Las condiciones de ciclo fueron como sigue: desnaturalización a 24°C por 5 minutos, 55 ciclos de 7 segundos con condiciones de desnaturalización, enlace de cebadores y sondas a la temperatura apropiada por 10 segundos y alargamiento a 72°C por 10 segundos. Luego, se llevo a cabo el análisis de curva de punto de fusión. La fluoresencia medida de cada ciclo fue analizada mediante los análisis de programación LightCycler. La cantidad relativa de objetivo de cada muestra resulto de la comparación con lá cantidad del gen de mantenimiento de la misma muestra. La cuantificación se llevo a cabo mediante el método de 2~AA(t) de Livak y Schmittgen Schmittgen (Livak KJ and Schmittgen TD. Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2 (-Delta Delta C(T)) Methods 2001;25:402-8) .

Las cantidades de ARN obtenido en cada ronda individual fueron muy pequeñas en comparación con aquellas obtenidas comúnmente de reacciones del cerebro. Por consiguiente, los objetivos tenían que ser seleccionados cuidadosamente en base al estado de los hallazgos científicos. Resulto de esto: en primer lugar, un medicamento debe de tener o aun invertir la degeneración de células de nervio en general que, por supuesto, son dañadas en todas las enfermedades del oído interno, debido a una sola causa por las diferencias en las enfermedades del oído interno pueden ser excluidas. De acuerdo con el estado del arte solamente las nerurotrofinas (factores de crecimiento de células de nervio) vienen en consideración. Las nerurotrofinas son péptidos endógenos que juegan un papel importante en la generación, diferenciación y viabilidad de células de nervio, para esto, los tipos individuales de células de nervio son particularmente dependientes de las células de neurotrofinas especificas. El segundo hallazgo científico es como sigue: la sordera esta basada en una alteración de células de nervio- de los tipos de nervio dopaminaticos en particular, por consiguiente un medicamento preferiblemente activar mecanismos dopaminergicos .

Como se muestra en la figura 1, la generación de varias neurotrofinas fue activada, de quienes se sabe que poseen propiedades neuroprotectoras en general. Esta son Armetl BDNF, Cbln 1, NGF y NPY (para una explicación de las abreviaturas, véase leyenda de la Figura 1) . Además, las proteínas dopaminergicas fueron incrementadamente activadas, de tal manera que el detector de dopamina subtipo 1 e hidroxilasa tirosina, que sintetizan dopamina en células de nervio. Es conocido que el receptor de dopamina 1 es el subtipo y es el subtipo a ser mostrado en su mayoría en el oído interno bastante. Varios experimentos independientes de resultados casi idénticos se llevaron a cabo (desvaicion estándar <10%) . Por consiguiente, los resultados fueron reproducibles muy bien.

Estos resultados prueban que 9-Me-BC activa específicamente proteínas características de células de nervio dopaminergico . Ninguna sustancia ha sido descrita hasta ahora que tenga tal espectro de efectos. Esto es excepcionalmente ventajoso ya que los efectos en detalle contrarrestan precisamente losprocesos que juegan un papel eminente en sordera laberíntica de acuerdo con el conocimiento actual. Así, 9- e -BC es un compuesto con un modo de efectividad único que es particularmente apropiado para detener o aun invertir procesos degenarativos de células de nervios, en particular de tipos de nervios dopaminergicos .

Th. Lenarz y sus colaboradores del Medizinische Hochschule Hannover, que ponen en operación el centro de implante coclear mas grande mundial, prepararon la investigación presentada en la Figura 2 en 2005. Expusieron el ganglio espiral, esto es una parte del nervio acústico a diferentes sustancias por 48 horas para probar cuales de ellos tendrán propiedades neuroprotectoras . Como se muestra en la Figura 2, ' estos particularmente son BDNF y GDNF. La conclusión de este estudio fue que las sustancias que exhiban el BDNF y GNDF son terapéuticos, promisores contra daños del oido interno. En aquel tiempo, esto es 2005, tales sustancias eran desconocidas. Estos resultados de un grupo diferente con reconocimiento mundial delinean por consiguiente, el potencial terapéutico de 9-metil-BC. Se notara que, como péptidos grandes niBDNF ni GDNF por si mismos son aplicados localmente. En contraste, 9-metil-BC es una sustancia relativamente pequeña (MW:183) que es lipofilico y químicamente estable y es metabolizado lentamente (véase ejemplo 29) .

Ejemplos 15-28: Modelo de diferenciación de células de neuroblastoma humana (SH-SY5Y) Los ejemplos previos se llevaron a cabo en modelos de animales con ratas y conejillos de indias, para los siguientes ejemplos fue un aspecto esencial probar si las ß-carbolinas también actuarían en tejido humano de prodiferenciación por medio de inducción de factores de crecimiento. Por consiguiente, se llevaron a cabo varios experimentos con células de neuroblastoma SH-SY5Y humanas. Órganos de corti de mas de 40 ratas tenían que ser preparados y analizados para obtener información reprocible y confiable acerca del espectro de efectividad de 9-Me-BC. Esta es una enorme entrada de trabajo y números de animales. Por consiguiente, compuestos XI, XII, XVIII, XIX también como C a L fueron analizados en el modelo de diferenciación como se describe posteriormente en la presente. Puesto que ninguna línea celular o modelos de diferenciaciónpara células vellosas del oído medio existen, otras líneas celulares, tales como líneas celulares de neuroblastoma tenían que ser utilizadas que muestran características de diferenciación similares como las células vellosas del oído medio.

Células de neuroblastoma humanas fueron utilizadas para este modleo. Estas son células permanentes, que están presentes como un tipo indiferente en cultivo. Pueden ser activadas para diferenciar, esto es, transformación en células neuronales, mediante adición de sustancias especificas tales como acido retinoico, factor de crecimiento de nervio del cerebro (BDNF)o activador de la enzima, cinasa C proteína al medio de cultivo. Se uso este sistema de células para analizar si las ß-carbolinas pueden transformar células indiferentes al tipo neuronal. Los criterios fueron: menos proliferación (menos células por campo de edición) ; cuerpos celulares mas pequeños (transformación del tipo indiferente al tipo neuronal) ; citodendritas (neuritis) , que proveen conexiones a células vecinas o grupo de células vecinas. Esto dio los siguientes resultados-: Tabla 1: ß-carbolinas adicionales en comparación con 9-metil. ß-carbolinas Como es mostrado por la Tabla 1, las ß-carbolinas analizadas po supuesto son aptas de promover la diferenciación a extensiones variables.

Las Figuras 3 a 5 complementan e ilustran los datos como se muestran en la Tabla 1.

Mediciones ¦ de longitud de neuritas como indicación por efectos de pro-diferenciación: Células de neuroblastoma SH-SY5Y humanas fueron incubadas en cultivos por 14 días con solvente (Ko) o sustancia de prueba. Un desplazamiento de la gráfica al lado derecho para una sustancia de prueba, apuntaba a un incremento de longitud de neurita, cuando se compara con la gráfica para la sustancia testigo. Diferencias estadísticas entre los tipos tratados fueron calculadas con la Prueba de Comparación ultiple de Tukey.

La Figura 3 A muestra la longitud de neurita de SH-SY5Y humanas tratadas con Harman como se describe anteriormente. la diferencia entre el grupo testigo y el grupo tratado con Harman 110 mM fue significativa (P<0.001) . Así, el tratamiento de Harman condujo a un incremento en longitud de neurita.

La Figura 3B muestra la longitud de neurita de células de SH-SY5Y humanas tratadas con 9-met ?-9?-ß-carbolinas como se describe anteriormente . la diferencia entre grupos testigo y los grupos tratados con 9-metil-9H-p-carbolinas 70,90 o 110 m fue significativa (P<0.001) . Asi, el tratamiento con 9-metil-9H-p-carbolinas condujo a un incremento en longitud de neurita.

La Figura 3C muestra la longitud de neurita de células de SH-SY5Y humanas tratadas con 6-metoxi-9-metil-9H-ß-carbolinas, como se describe anteriormente. La diferencia entre el grupo testigo y el grupo tratado con 6-metoxi-9-metil-9H-p-carbolinas 50 mM fue signficativa (P<0.001) . Asi, el tratamiento con 6-metoxi-9-metil-9H-p-carbolinas condujo a un incremento en longitud de neurita.

La Figura 3D muestra la longitud de neurita de células de SH-SY5Y humanas tratadas con 9- (2-fluroetil ) -9?-ß-carbolinas, como se describe anteriormente. La diferencia entre el grupo testigo y los grupos tratados con 9- (2-fluoroetil) -9H- -carbolinas 30, 40, 50 o 60 mM fue signficativa (P0.001) . Asi, el tratamiento con 9-(2-fluoroetil) -9H-p-carbolinas, condujo a un incremento en longitud de neurita.

La incubación de células de neuroblastoma de SH- SY5Y humanas por 14 días en cultivo, condujo a un incremento en longitud de neurita. Se muestran las distribuciones de frecuencias acumulitivas de longitudes de neuritas determinadas en por lo menos 20 campos visuales seleccionados aleatoriamente (cada uno de 640, 000 µ??2) en tres experimentos independientes. Una elevación empinada apunto a una predominancia de neuritas cortas, en donde por ejemplo en células testigo, una elevación menos empinada significo un números mayor de neuritas mas largas. El máximo horizontal indico la longitud de neuritas máxima del grupo de tratamiento respectivo . los resultados muestran que las p-carbolinas de la invención promueven la germinación de neuritas. Los efectos son dependientes de la dosis y dependiente de la sustancia: l-metil-p-carbolinas<6-metoxi-9-metil-P-carbolinas<9-metil- -carbolinas<9-fluoroetil-ß-carbolinas<9-fluoroetil-p-carbolinas ) . De aquí, ß-carbolinas tienen un efecto de pro-diferenciación.

Los efectos de otra ß-carbolinas de la invención (compuestos A-L y VIX-XX) sobre la longitud de neurias fueron determinados como se describe anteriormente, en células de neuroblastomas SH-SY5Y humanas después de 14 días. La Tabla 1 resume los resultados de muerte.

Inducción sobre la formación de factor de crecimiento: Enseguida, se investigo si las sutancias podrían inducir la formación de factores de crecimiento del nervio en células de neuroblastomas de SH-SY5Y humana. Después de 2 y 14 días, las células fueron cosechadas y la expresión del gen objetivo y gen de mantenimiento fue determinada via PCR de transcriptasa inversa. La Figura 5 muestra los valores promedio de tres experimentos independientes para factores de crecimiento de nervio , para los cuales un efecto de regenracion sobre células vellosas seleccionadas es conocido.

La Figura 4 A muestra la expresión genética relativa de BNDF (factor neurotrófico derivado del cerebro) en células de SH-SY5Y humanas. La transcripción de BNDF después de dos días fue estimulada solamente a la concentración mas alta (110 µ?)?? LE-02 (9-metil-p-carbolinas) , mientras que después de 14 días de la exposición, las concentraciones mas bajas de 30 y 50 mM indujeron la estimulación. Tal desplazamiento fue también encontrado para 9-metil- -carbolinas (sustancia no. 559; después de dos días: estimulación por una concentración de 70 y 90 mM; después de 14 dias por 30 y 50 mM) en contraste el 6-metoxi-9-metil-p-carbolinas (sustancia no.513 en la figura 4A · ) condujo a un incremento de la dosis enorme de transcripción de BDNF.

La Figura 4B muestra la expresión genética relativa de la proteina del precursor de cerebellina-1 (CBLN) . La proteina precursora de cerebellina-1 fue incrementada solamente después de 2 dias de exposición a 9-fluoroetil-ß-carbolinas. Después de 14 dias de exposición, todas las ß-carbo.linas probadas incrementaron la expresión de CBLN. Las concentraciones mas bajas de las sustancias de prueba tuvieron un efecto mas fuerte que las concentraciones mas altas con la excepción de 9-fluoroetil-p-carbolinas , que muestra aproximadamente la misma estimulación a todas las concentraciones investigadas. 9-fluoroetil- -carbolinas de cerebellina-1 mostró efectos similares en la expresión de CBLDN también como sobre la longitud de neurita (véase Figura 3D) .

La Figura 4C muestran la expresión genética relativa de GDNF (factor neurotrófico derivado de linea de célula glial) . A concentraciones individuales, 14 días de exposición condujeron a una estimulación de hasta 3 veces.

NGF (factor de crecimiento de nervio) y N-PY (neuropéptido Y) son factores de crecimiento, en general necesarios para la supervivencia de células de nervio. La eliminación de biosintesis conduce a la muerte de célula .de nervio. Esto permite la diferenciación de, por ejemplo formación de sinapsi que es indispensable para adaptaciones a nuevas situaciones, tales como nuevos ruidos de fondo, nuevas melodías "y así sucesivamente. Estos factores de crecimiento también hacen posible y regulan el crecimiento externo renovado de células de nervio dañadas y de aqui permiten la reintegración de las extensiones . de células de henee cultivadas a los sistemas y circuitos de nervios presentes. Son una parte importante del mecanismo de reparación natural para lesiones de la audición agudas y crónicas.

La Figura 4B muestra la expresión genética relativa de NGF (factor de crecimiento de nervios) después de 14 días de exposición, la expresión genética fue incrmentada de 20 a 50 veces. Otra vez, las concentraciones mas bajas fueron bastante mas efectivas para incrementar NGF.

La Figura 4E muestra la expresión genética relativa de NP Y ( neuropéptido Y) . Después de 14 días de exposición, la expresión genética fue incrementada por 1.3 a 4 veces. En el caso de 9-metil- -carbolinas y 9-fluoroetil-ß-carbolinas , las concentraciones mas bajas fueron mas efectivas que las concentraciones mas altas.

Los efectos de las otras ß-carbolinas de la invención (compuestos A-L y VI-XX) sobre la expresión genética de BDNF, GDNF, NGF y NPY fueron determinadas, como se describe anteriormente en células de neuroblastoma SH-SY5Y humanas después de 2 y 14 dias . La Tabla 2 resume estos resultados .

Tabla 2: ß-carbonilos adicionales en comparación 9-metil-p-carbolina Las investigaciones en la activación de cascadas intracelulares para la clarificación de aquellos factores de transcripción que estimulan sustancialemente la diferenciación de transcripción genéticas: Los efectos de ß-carbolina sobre varias cascadas intracelulares fueron investigados. De ellos es conocido que en sus extremos respectivos, varios actores de transición son formados en el núcleo de las células, qeu a su vez activan la transcripción de un grupo de genes adicionales. Se uso el método de luciferasa doble. Una luciferasa sirvió como control de transección, mientras que la segunda es acoplada a la secuencia de enlace especifica apropiada del ADN.

La Figura 5 muestra un efecto de activación dependiente de la dosis 9-metil-p-carbolina, 9-fluoroetil-ß-carbolina y 6-metoxi-9-metil-9H-p-carbolina sobre la formación del factor de transcripción C ED, hasta 10 veces del nivel de la células testigo SH-SY5Y (tres experimentos independientes, incubación de 49 horas) .

Estos hallazgos muestran claramente que las ß-carbolinas de la invención examinadas, tienen efectos de prodiferenciación. La inducción sobre la expresión de varios factores de crecimiento, de los cuales es conocido, pueden actuar como neuroprotectores y en varios modelos de lesión también efecto neurodegenerativo, provee un efecto terapéutico de las sustancias activas. Los efectos moderados por la activación de cascadas intracelulares activan los factores de transición. Estos factores transcripción trasncriben un grupo de genes que ínter codifican los facores de crecimiento.

Ejemplo 29 Experimentos farmacocinéticos en un modelo de animal En este ejemplo, se administra localmente 9-metil-ß-carbolina al hueco enfrente de la membrana de la ventana redonda, ß-carbolina se puede difundir desde el hueco a lá perilinfa (liquido que protege las células sensoriales) del oído interno (cóclea) y canal semicircular del órgano del equilibrio a través de la ventana redonda.

La aplicación local evita efectos indeseables, que son esperados en caso de aplicación sistémica, debido a. que, por una parte, se requiere una dosis comparativamente alta y por otra parte, el riesgo de efectos indeseables es incrementada empíricamente para aplicación crónica, tal como es requerido en el caso de sordera y posiblemente vértigo. Por consiguiente, el pre-requisito para el uso de tales sustancias es que se difunda principalmente a través de la membrana de la ventana redonda.

Para probar esto, se disolvió 9-metil-fi-carbolina-HC1 (9-Me-BC) en solución salina de pH regulado de fosfato (PBS) estéril y luego fue aplicada mediante infusión continuamente a la membrana de la ventana redonda de conejillos de indias- mediante una mini-bomba osmótica a una velocidad de flujo de 0.5 L/h por hasta 10 horas. Asi, la infusión tomó lugar al oido medio y por consiguiente al exterior de la cóclea del oido interno, mediante lo cual la membrana del tímpano no fue dañana. Después de tres horas, se obtuvieron 5 µ? de perilinfa del ápice, la punta de la cóclea, esto es, la parte de la cóclea más distanciada de la membrana de la ventana redonda, mediante una cánula previamente implantada. La muestra fue diluida y fue separada inmediatamente mediante cromatografía líquida de alta presión (HPLC) sin procesamiento adicional y se determinó la fluorescencia natural de ß-carbolina mediante un detector de fluorescencia. El experimento fue repetido con un segundo conejillo de indias y condiciones idénticas, pero la muestra fue obtenida después de una infusión de 10 horas. Se obtuvo la perilinfa de un tercer conejillo de indias que. no había sido tratado con 9-Me-BC antes (testigo de valor en blanco) .

En una segunda serie, se aplicaron 20 g de 9-Me-BC a la perilinfa directamente a través de la membrana de la ventana redonda, esto es, intra-cóclear . Después de tres horas y después de 20 horas en el caso de otro animal, se obtuvo la perilinfa y fue analizada como se describe anteriormente. Los. resultados son ilustrados en la figura 6 junto con una serie de calibración. La serie de calibración muestra que 10 pg de 9-Me-BC pueden ser detectados confiablemente mediante este método. Un solo máximo, que representa 9-Me-BC, puede ser visto después de 7 minutos en el cromatograma superior de la figura 6. Claramente, no se verá ningún máximo adicional; asi, 9-Me-BC no es degradado. Además, el cromatograma muestra claramente que 9-Me-BC penetra la membrana de la ventana redonda.

Ambos cromatogramas de la hilera media muestran que 9-Me-BC está todavía presente después de 20 horas en el caso de aplicación directa a la perilinfa. Esto es de significado eminente para uso terapéutico. Además, estos cromatogramas muestran que 9-Me-BC no es ni degradado ni decae durante este período largo. Así, 9-Me-BC es química y metabólicamente inerte (nota bene, se detectan nanogramos por las hileras superiores y nanogramos en la hilera media; por consiguiente, los llamados picos de inyección pueden ser vistos en el cromatograma izquierdo de las hileras media e inferior y el ruido de la línea base) .

Un cromatograma, que muestra que nada de 9-Me-BC está presente en la perilinfa de un animal sin tratar, es ilustrado a la izquierda de la hilera inferior (testigo de valor en blanco) . El animal sin tratar es un animal en donde solamente se efectuaron etapas quirúrgicas, como para los otros conejillos de indias, pero no se aplicó 9-Me-BC. Los resultados son muy ventajosos en comparación con otras sustancias (dexametasona, gentamicina, ácido 2-metil-tiazolidin-2 , -dicarboxilico [tialina] ) en términos de la terapia .

Los medicamentos que son usados para el tratamiento de enfermedades de un sistema son también efectivos para enfermedades del otro sistema, debido a que las células sensoriales del órgano de la audición, esto es, células vellosas, se ' comportan muy similarmente a las células sensoriales del órgano del equilibrio.

Ejemplo 30 Profilaxis de daños auditivos en un modelo de animal Una solución que contiene ß-carbolina fue aplicada mediante infusión continuamente al hueco enfrente de la membrana de la ventana redonda de conejillos de indias mediante una mini-bomba osmótica por tres días. Las siguientes ß-carbolinas fueron probadas individualmente en este experimento: 9-metil^-carbolina, compuestos XI, XII, XVIII, XIX también como C a L.

Luego, una dosis estándar de gentamicina y ácido etacrinico fue inyectada intravenosamente a conejillos de indias. La gentamicina y el ácido etacrinico dañan el oído interno. Comúnmente, son usados como toxinas para inducir sordera en tales estudios. La infusión fue proseguida por dos días adicionales. Luego, se dedujo la actividad electrofisiológica de las células de nervio del tallo cerebral, que transmiten los impulsos del oído interno, después de irradiación acústica del oído con 2, 4, 8, y 20 Hz . El oído sin tratar con ß-carbolina sirvió como testigo individual (Prieskorn DM, Miller * JM. Technical report: chronic and acute intracochlear infusión in rodents. Hear Res, 2000; 140 (1-2) : 212-215). Además, los animales fueron infusionados con 9- e-BC solamente pero no con gentamicina, como testigo adicional.

La actividad electrofisiológica medida de las células de nervio del nervio acústico (umbral de audición) sirvió como medida del grado de efecto terapéutico de las ß-carbolinas usadas en el oído interno. Como se puede aprender de la tabla 3, las ß-carbolinas usadas muestran un incremento en la actividad electrofisiológica de las células de nervio del nervio acústico. Se puede concluir de esto que las ß-carbolinas son útiles para el tratamiento de daños de la audición, vértigo y alteraciones vestibulares.

Tabla 3: Efectos de diferentes ß-carbolinas sobre el oído interno en comparación con 9-metil-p-carbolina .

Ejemplo 31 Formulación de 9-metil-p-carbolina para aplicación tópica Una formulación con 9-metil-p-carbolina 50 µ? para aplicación tópica consiste de 0.7 por ciento en peso de ácido hialurónico en solución salina de pH regulado de fosfato, tal como Hylumed Sterile de Genzyme Corp., con una concentración de 9-metil- -carbolina de 50 µ?.

Ejemplo 32 Formulación de 9-metil-p-carbolina para aplicación tópica Para aplicación tópica de 9-metil-p-carbolina en forma de gotas para el oído, se prepara una solución de 3 mg/ml de 9-metil-p-carbolina en agua purificada con el uso de uno de los siguientes adyuvantes: cloruro de benzalconio, acetato de sodio x 3 H'20, ácido acético, manitol (Ph. Eur.), edentato de sodio (Ph. Eur.) y ácido clorhidrico/hidróxido de sodio (para el ajuste del pH) .

Ejemplo 33 Formulación de 9-metil-p-carbolina para aplicación tópica Se agregan 100 mg de 9-metil-p-carbolina a una solución de 0.1 mg de butilhidroxianisol (Ph. Eur.) en 939.9 mg de glicerol. La solución resultante puede ser aplicada tópicamente en el oído. Opcionalmente se pueden agregar mejoradotes de penetración, tal como D SO.

Ejemplo 34 Formulación de 9-metil-p-carbolina para aplicación oral Este ejemplo es concerniente con la formulación para una tableta recubierta de película con 12.5 mg de 9-metil-p-carbolina . El núcleo de tableta consiste de: 9-metil- -carbolina 12,50 mg Celulosa, microcristalina 103.25 mg Croscaramelosa-Na 6.24 mg Dióxido de silicio, coloidal 1,25 mg Talco 1.25 mg Estearato de magnesio 0.50 mg Peso total 125.0 mg El núcleo de tableta es recubierto con 5 mg de hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC) , por ejemplo con Opadry o Sepifilm. La tableta de película resultante tiene un peso total de 130 mg y contiene, además de los adyuvantes mencionados, 12.5 mg 9-metil^-carbolina .

Ejemplo 35 Formulación de 9-metil-p-carbolina para aplicación oral Este ejemplo es concerniente con la formulación de una tableta recubierta de película con 50.0 mg 9-raetil-p-carbolina. El núcleo de tableta consiste de: 9-metil-p-carbolina 50.0 mg Celulosa, microcristalina 413.0 mg Croscaramelosa-Na 25.0 mg Dióxido de silicio, coloidal 5.0 mg Talco 5.0 mg Estearato de magnesio 2.0 mg Peso total 500.0 mg El núcleo de tableta es recubierto con 20 mg de HPMC, por ejemplo con Opadry o Sepifilm. La tableta de película resultante tiene un peso total de 520 mg y contiene, además de los adyuvantes mencionados, 50 mg 9-metil^-carbolina .

Ejemplo 36 Formulación de 6-metoxi-9-metil-9íí-3-carbolina para aplicación oral Este ejemplo es concerniente con la formulación de una tableta recubierta de película con 50.0 mg de 6-metoxi-9-metil-9H- -carbolina . El núcleo de tableta consiste de: 6-metoxi-9-metil-9H-p-carbolina 50.0 mg Celulosa, microcristalina 413.0 mg Croscaramelosa-Na 25.0 mg Dióxido de silicio, coloidal 5.0 mg Talco 5.0 mg Estearato de magnesio 2.0 mg Peso total 500.0 mg El núcleo de tableta es recubierto con 20 mg de HPMC, por ejemplo con Opadry o Sepifilm. La tableta de película resultante tiene un peso total de 520 mg y contiene, además de los adyuvantes mencionados, 50 mg de 6-metoxi-9-metil-9H-p-carbolina .

Ejemplo 37 Formulación de 9-fluoroetil- -carbolina para aplicación oral Este ejemplo es concerniente con la formulación para una tableta recubierta de película con 37.5 mg de 9-fluoroetil-p-carbolina . El núcleo de tableta consiste de: 9-fluoroetil- -carbolina 37.50 mg Celulosa, microcristalina 309.75 mg Croscaramelosa-Na 18.75 mg Dióxido de silicio, coloidal 3.75 mg Talco 3.75 mg Estearato de magnesio 1.5 mg Peso total 375.00 mg El núcleo de tableta es recubierto con 15 mg de HPMC, por ejemplo, con Opadry o Sepifilm. La tableta de película resultante tiene un peso total de 390 mg y contiene, además de los adyuvantes mencionados, 37.5 mg de 9-fluoroetil-p-carbolina .

Ejemplo 38 Formulación de 9-fluoroetil-p-carbolina para aplicación tópica Se prepara un mililitro de una suspensión de 250 mg de 9-fluoroetil-p-carbolina para aplicación tópica con 250 mg de 250 mg 9-fluoroetil-p-carbolina, 1 mg de metil éster del ácido p-hidroxibenzoico como conservador, alcohol cetilestearilico, monolaurato de sorbitán, polisorbato y agua purificada. La suspensión resultante puede ser administrada tópicamente.

Claims (5)

REIVINDICACIONES

1. Compuestos de fórmula general (I) ) en donde: Rl significa -R12; R2 y R3 representan independientemente entre si las siguientes porciones: -R7, -R8, -H, -OH, -OR7, -OCH3, - OC2H5, -OC3H7, -0-ciclo-C3H5, -OCH(CH3)2, -OC(CH3)3, OC4H9 -OPh, -0CH2-Ph, -OCPh3, -F, -Cl, -Br, -I, - NH2, -NHCH3, -NHC2H5, -NHC3H7, -NH-ciclo-C3H5, -NHCH(CH3)2, -NHC(CH3)3, -N(CH3)2 -N(C2H5)2 -N(C3H7)2, -N ( ciclo-C3H5) 2 , - N[CH(CH3)2]2, -N[C(CH3)3]2, -OCF3, -OC2F5, R7, R8 y R12 representan independientemente entre si las siguientes porciones: -CH2F, -CHF2, -CF3 -CH2C1, CH2Br, -CH2I, -CH2-CH2F, -CH2-CHF2, -CH2-CF3, -CH2-CH2C1, -CH2-CH2Br -CH2-CH2I, ciclo-C3H5, ciclo-C4H7, ciclo-C5H9, ciclo-C6Hu, ciclo-C7H13, ciclo-C8Hi5,-Ph, -CH2-Ph, -CPh3, CH3, -C2H5, -C3H7, -CH(CH3)2, -C4H9, -CH2-CH (CH3 ) 2 , CH(CH3)-C2H5, -C(CH3)3, -C5Hn, -CH (CH3) -C3H7, -CH2-CH(CH3)-C2H5, -CH(CH3)-CH(CH3)2, -C (CH3) 2-C2H5, -CH2-C(CH3)3, -CH(C2H5)2, -C2H4-CH(CH3) 2, -C6H13 -C3H6-CH (CH3) 2, -C2H4-CH (CH3) -C2H5, -CH (CH3) -C4H9, -CH2-CH (CH3) -C3H7/ -CH (CH3) -CH2-CH(CH3) 2, -CH (CH3) -CH (CH3) -C2H5, -CH2-CH (CH3) -CH (CH3) 2, -CH2-C (CH3)2-C2H5, -C (CH3) 2-C3H7, -C (CH3) 2-CH (CH3) 2, -C2H4-C (CH3) 3, -CH (CH3) -C (CH3) 3, -CH=CH2, -CH2-CH=CH2, -C (CH3)=CH2, -CH=CH-CH3, -C2H4-CH=CH2, -C7H15, -C8Hi7, -CH2-CH=CH-CH3, -CH=CH-C2H5, -CH2-C (CH3) =CH2, CH (CH3) -CH=CH, -CH=C (CH3)2, -C (CH3) =CH-CH3, -CH=CH-CH=CH2, -C3H6-CH=CH2, -C2H4-CH=CH-CH3, -CH2-CH=CH-C2H5, -CH=CH-C3H7, -CH2-CH=CH-CH=CH2, -CH=CH-CH=CH-CH3, -CH=CH-CH2-CH=CH2, -C (CH3) =CH-CH=CH2, -CH=C (CH3) -CH=CH2, -CH=CH-C (CH3) =CH2, -C2H4-C (CH3) =CH2, . -CH2-CH (CH3) -CH=CH2, CH (CH3) -CH2-CH=CH2 -CH2-CH=C (CH3) 2, -CH2-C (CH3) =CH-CH3, CH (CH3) -CH=CH-CH3, -CH=CH-CH (CH3) 2, -CH=C (CH3) -C2H5, C(CH3) =CH-C2H5, -C (CH3) =C (CH3) 2, -C (CH3) 2-CH=CH2, CH (CH3) -C (CH3) =CH2, -C (CH3 ) =CH-CH=CH2 , -CH=C (CH3) -CH=CH2, -CH=CH-C (CH3) =CH2, -C4H8-CH=CH2, -C3H6-CH=CH-CH3, -C2H4-CH=CH-C2H5, -CH2-CH=CH-C3H-7, -CH=CH-C4H9, -C3H6-C (CH3) =CH2, -CH2-CH2-CH2-OCH3, -C2H4-CH (CH3) -CH=CH2, -CH2-CH (CH3) -CH2~ CH=CH2, -CH2NH2, -CH (CH3) -C2H4-CH=CH2, -C2H4-CH=C (CH3) 2, -C2H4-C (CH3) =CH-CH3, -CH2-CH (CH3) -CH=CH-CH3, — CH (GH3) -CH2— CH=CH-CH3, -CH2OH, -CH2-CH=CH-CH (CH3) 2, -CH2-CH=C (CH3) -C2H5, -CH2-CH2-CH2NH2, -CH2-C (CH3) =CH-C2H5, -CH (CH3) -CH=CH-C2H5, -CH2-CH2NH2, -CH=CH-CH2-CH (CH3) 2, -CH=CH-CH (CH3) -C2H5, -CH=C (CH3) -C3H7, -C (CH3) =CH-C3H7 -CH2-CH (CH3 ) -C (CH3 ) =CH2 , -CH (CH3) -CH2-C (CH3) =CH2, -CH (CH3) -CH (CH3) -CH=CH2, -CH2-CH2- CH2OH, -CH2-C (CH3) 2-CH=CH2, -C (CH3) 2-CH2-CH=CH2 , -CH2-C(CH3) =C (CH3) 2, -CH (CH3) -CH=C (CH3) 2, -C (CH3) 2-CH=CH-CH3, CH (CH3) -C (CH3) =CH-CH3, -CH=C (CH3) -CH (CH3) 2, -C (CH3) =CH-CH (CH3) 2, -C(CH3) =C (CH3) -C2H5, -CH=CH-C (CH3) 3/ -C (CH3)2-C (CH3) =CH2, -CH (C2H5) -C(CH3) =CH2, -C (CH3) (C2H5) -CH=CH2, CH (CH3) -C (C2H5)=CH2 -CH2-C (C3H7) =CH2, -CH2-C (C2H5 ) =CH-CH3 , -CH (C2H5) -CH=CH-CH3, -C (C4H9) =CH2, -C (C3H7) =CH-CH3, C (C2H5)=CH-C2H5, -C (C2H5) =C (CH3)2, -C [C (CH3) 3] =CH2, C[CH(CH3) (C2H5) ]=CH2, -C [CH2-CH(CH3) 2] =CH2, -C2H4-CH=CH-CH=CH2, -CH2-CH=CH-CH2-CH=CH2, -CH=CH-C2H4-CH=CH2 , -CH2-CH=CH-CH=CH-CH3, -CH=CH-CH2-CH=CH-CH3, -CH2-CH2-OCH3/ CH=CH-CH=CH-C2H5, -CH2-CH=CH-C ( CH3 ) =CH2 , -CH2-CH2OH, -CH2-CH=C (CH3) -CH=CH2, -CH2-C (CH3) =CH-CH=CH2, -CH2-OCH3, CH (CH3) -CH=CH-CH=CH2, -CH=CH-CH2-C (CH3) =CH2, -CH=CH-CH (CH3) -CH=CH2, -CH=C (CH3) -CH2-CH=CH2/ -C (CH3 ) =CH-CH2-CH=CH2, -CH=CH-CH=C (CH3) 2, -CH=CH-C (CH3) =CH-CH3, CH=C (CH3) -CH=CH-CH3, -C (CH3) =CH-CH=CH-CH3, -CH=C (CH3) -C (CH3) =CH2, -C (CH3) =CH-C (CH3) =CH2, -C (CH3) =C (CH3) -CH=CH2, -CH=CH-CH=CH-CH=CH2, -C=CH, -C=C-CH3, -CH2-C=CH, -C2H4-C=CH, -CH2-C=C-CH3, -C=C-C2H5, -C3H6-C=CH, -C2H4-C=C-CH3, -CH2-C=C-C2H5, -C=C-C3H7, -CH (CH3) -C=CH, -CH2-CH (CH3) -C=CH, ' -CH (CH3) -CH2-C=CH, -CH (CH3) -C=C-CH3, -C4HB-C=CH, -C3H6-C=C-CH3, -C2H4-C=C-C2H5, -CH2-C=C-C3H7 , C=C-C4H9, -C=C-C (CH3) 3, -C2H4-CH (CH3) -C=CH, -CH2-CH (CH3) -CH2-C=CH, -CH2-C=C-CH (CH3) 2, -CH (CH3) -C2H4-C=CH, -CH2- CH (CH3) -C=C-CH3, -CH(CH3)-CH2-C=C-CH3, -CH (CH3) -C=C-C2H5, -C=C-CH(CH3) -C2H5, -C=C-CH2-CH(CH3)2, -CH (C2H5) -C=C-CH3, -C (CH3) 2-C=C-CH3, -CH(C2H5) -CH2-C=CH, -CH2-CH (C2H5) -C=CH, -C (CH3) 2-CH2-C=CH, -CH2-C (CH3)2-C=CH, -CH (CH3) -CH (CH3) -C=CH, -CH(C3H7) -C=CH, -C (CH3) (C2H5) -C=CH, -C14H29, -CH2-CH2-N(CH3)2; -CH2F, -CHF2, -CF3, -CH2CI, -CH2Br, -CH2I, -CH2-CH2F, -CH2-CHF2, -CH2-CF3, -CH2-CH2C1, -CH2-CH2Br, -CH2-CH2I, ciclo-C3H5, ciclo-C4H7, ciclo-C5H9 ciclo-CeH , ciclo-C7Hi3, ciclo-C8Hi5,-Ph, -CH2-Ph, -CPh3, -CH3, -C2H5, -C3H7, -CH(CH3)2, -C4H9, -CH2-CH(CH3)2, -CH ( CH3 ) -C2H5/ -C ( CH3 ) 3 , -C5H11 , ' -CH ( CH3 ) -C3H7 , -CH2-CH ( CH3 ) -C2H5 , CH(CH3)-CH(CH3)2, -C(CH3)2-C2H5, -CH2-C (CH3) 3, -CH(C2H5)2, C2H4-CH(CH3)2, -C3Hi3, -C3H6-CH(CH3)2, -C2H4-CH (CH3) -C2H5, -CH (CH3) -C4H9, -CH2-CH (CH3) -C3H7f -CH (CH3) -CH2-CH (CH3) 2, CH (CH3) -CH (CH3) -C2H5, -CH2-CH(CH3)-CH(CH3)2, -CH2-C (CH3) 2- C2H5, -C(CH3)2-C3H7, -C(CH3)2-CH(CH3)2, -C2H4-C (CH3 ) 3 , CH (CH3) -C(CH3) 3, -CH=CH2, -CH2-CH=CH2, ¦ -C(CH3)=CH2, -CH=CH-CH3, -C2H4-CH=CH2 -C7H15, -C8H17, -CH2-CH=CH-CH3 , -CH=CH-C2H5, -CH2-C (CH3) =CH2, -CH (CH3) -CH=CH, -CH=C(CH3)2, -C (CH3) =CH-CH3, -CH=CH-CH=CH2, -C3H6-CH=CH2, -C2H4-CH=CH-CH3, -CH2-CH=CH-C2H5, -CH=CH-C3H7, -CH2-CH=CH-CH=CH2, CH=CH-CH=CH-CH3/ -CH=CH-CH2-CH=CH2 , -C (CH3) =CH-CH=CH2, CH=C(CH3)-CH=CH2, -CH=CH-C(CH3)=CH2, -C2H4-C (CH3) =CH2, CH2-CH(CH3) -CH=CH2, -CH (CH3) -CH2-CH=CH2, -CH2-CH=C (CH3) 2, -CH2-C(CH3) =CH-CH3, -CH (CH3) -CH=CH-CH3, -CH=CH-CH (CH3) 2, -CH=C (CH3) -C2H5, -C (CH3)=CH-C2H5, -C (CH3) =C (CH3) 2, C (CH3) 2-CH=CH2, -CH (CH3)-C (CH3)=CH2, -C (CH3) =CH-CH=CH2, CH=C (CH3) -CH=CH2, -CH=CH-C (CH3) =CH2, -C4H8-CH=CH2, -C3H6-CH=CH-CH3, -C2H4-CH=CH-C2H5, -CH2-CH=CH-C3H7 , -CH=CH-C4H9, -C3H6-C (CH3)=CH2, -CH2-CH2-CH2-OCH3, -C2H4-CH (CH3) -CH=CH2, -CH2-CH (CH3) -CH2-CH=CH2, -CH2NH2, -CH (CH3) -C2H4-CH=CH2 , C2H4-CH=C (CH3) 2, -C2H4-C (CH3) =CH-CH3, -CH2-CH (CH3) -CH=CH-CH3 -CH (CH3) -CH2-CH=CH-CH3, -CH2OH, -CH2SH, -CH2~CH=CH-CH (CH3) 2, -CH2-CH=C (CH3) -C2H5, -CH2-CH2-CH2NH2 , -CH2- C (CH3) =CH-C2H5, -CH (CH3) -CH=CH-C2H5, -CH2-CH2NH2, -CH=CH-CH2-CH (CH3) 2, -CH=CH-CH (CH3) -C2H5, -CH=C ( CH3 ) -C3H7 , -C (CH3) =CH- C3H7, -CH2-CH(CH3) -C (CH3) =CH2, -CH2-CH2SH, -CH (CH3) -CH2- C (CH3) =CH2, -CH(CH3) -CH(CH3) -CH=CH2, -CH2-CH2-CH2OH, -CH2-C (CH3) 2-CH=CH2, -C (CH3)2-CH2-CH=CH2, -CH2-C (CH3) =C (CH3) 2, CH (CH3) -CH=C (CH3)2, -C (CH3) 2-CH=CH-CH3, -CH2-CH2-CH2SH, CH (CH3) -C (CH3) =CH-CH3, -CH=C (CH3) -CH (CH3) 2, -C (CH3) =CH- CH (CH3) 2, -C (CH3)=C(CH3) -C2H5, -CH=CH-C (CH3) 3, -C (CH3)2-C (CH3) =CH2f -CH (C2H5) -C (CH3)=CH2, -C (CH3) (C2H5) -CH=CH2, CH (CH3) -C (C2H5) =CH2/ -CH2-C (C3H7)=CH2, -CH2-C (C2H5) =CH-CH3, -CH(C2H5) -CH=CH-CH3, -C (C4H9) =CH2, -C (C3H7) =CH-CH3, C (C2H5)=CH-C2H5, -C (C2H5) =C (CH3) 2, -C [C (CH3) 3] =CH2, C [CH (CH3) (C2H5) ]=CH2, -C [CH2-CH(CH3) 2]=CH2, -C2H4-CH=CH- CH=CH2f -C6H4-OCH3, -CH2-CH=CH-CH2-CH=CH2, -CH=CH-C2H4-CH=CH2, -C6H4-OH, -CH2-CH=CH-CH=CH-CH3, -CH=CH-CH2-CH=CH- CH3, -CH2-CH2-OCH3, -CH=CH-CH=CH-C2H5, -CH2-CH=CH- C(CH3)=CH2, -CH2-CH2OH, -CH2-CH=C (CH3) -CH=CH2, -CH2- C (CH3) =CH-CH=CH2, -CH2-OCH3, -CH (CH3) -CH=CH-CH=CH2, CH=CH-CH2-C (CH3) =CH2, -CH=CH-CH (CH3) -CH=CH2, -CH=C(CH3) -CH2-CH=CH2, -C(CH3)=CH-CH2-CH=CH2, -CH=CH-CH=C (CH3) 2, -CH2-C6H4-OCH3, -CH=CH-C (CH3) =CH-CH3, -CH=C (CH3) -CH=CH-CH3, -CH2-C6H4-OH, -C (CH3) =CH-CH=CH-CH3, -CH=C (CH3) -C (CH3) =CH2, -C(CH3)=CH-C(CH3)=CH2, -C (CH3) =C (CH3) -CH=CH2, -CH=CH-CH=CH-CH=CH2, -C=CH, -C=C-CH3, -CH2-C=CH, -C2H4-C=CH, -CH2-C=C-CH3, -C=C-C2H5, -C3H6-C=CH, -C2H4-C=C-CH3, -CH2-C=C-C2H5, -C=C-C3H7, -CH (CH3) -C=CH, -CH2-CH (CH3) -C=CH, CH (CH3) -CH2-C=CH, -CH (CH3) -C=C-CH3, -C4H8-C=CH, -C3H6-C=C-CH3, — C2H — C=C— C2H5 , — CH2— C^C- C3H7 , — C=C— C4H9, — C=C— C(CH3) 3, -C2H4-CH (CH3) -C=CH, -CH2-CH (CH3) -CH2-C=CH, -CH2-C=C-CH(CH3) 2, -CH (CH3) -C2H4-C=CH, -CH2-CH (CH3) -C=C-CH3, CH (CH3) -CH2-C=C-CH3, -CH (CH3) -C=C-C2H5, -C=C-CH (CH3) -C2H5, C=C-CH2-CH (CH3) 2, -CH (C2H5) -C=C-CH3, -C (CH3) 2-C=C-CH3, CH (C2H5) -CH2-C=CH, · -CH2-CH (C2H5) -C=CH, -C (CH3) 2-CH2-C=CH, CH2-C (CH3) 2-C=CH, -CH (CH3) -CH (CH3) -C=CH, -CH (C3H7) -C=CH, C (CH3) (C2H5) -C=CH, -C=C-C=CH, -CH2-C=C-C=CH, -C=C-C=C- CH3, -CH(C=CH)2, -C2H4-C=C-C=CH, -CH2-C=C-CH2-C=CH, -C=C-C2H4-C=CH, -CH2-C=C-C=C-CH3, -C=C-CH2-C=C-CH3, -C=C-C=C- C2H5, -C=C-CH (CH3) -C=CH, -CH (CH3) -C=C-C=CH, -CH(C=CH) - CH2-C=CH, -C(C=CH)2-CH3, -CH2-CH (C=CH) 2/ -CH (C=CH) -C=C-CH3, -C14H29, -CH2-CH2-N(CH3)2; también como sales, solvatos, hidratos, compuestos complejos, enantióraeros, diastereo i someros aceptables farmacológicos, tabién como racematos de los compuestos mencionados anteriormente para la manufactura de una composición farmacéutica para profilaxis y tratamiento de daños de la audición, vértigo y alteraciones vestibulares.

2. El uso de acuerdo con la reivindicación 1 de compuestos de fórmula general (V) : caracterizado porque las porciones R12 y R3 tienen el significado descrito en la reivindicación 1.

3. El uso de acuerdo con la reivindicación 1 de los compuestos seleccionados del grupo que consiste de: 9-metil-9H-p-carbolina, 6-metoxi-9-isopropil-9H-p-carbolina, 9-[lZ]-l- metilprop-1-enil] -9tf-p-carbolina, l-cloro-9- [ (12, 3E) -2-metilpenta-l, 3-dienil] -9H-p-carbolina, 9-metil-6-propoxy-9fí-P-carbolina, 9-ciclopropil-6-metoxi-9H-P-carbolina, 6-trifluormetoxi-9-metil-9H-p-carbolina, 6-dimetilamino-9-metil-9fí-p-carbolina, l-metoxi-6-cloro-9-metil-9.fí-p-carbolina, 1, 9-dimetil-9íí-p-carbolina, l-isopropil-6, 9-dimetil-9ñ-p-carbolina, 6, 9-dimetil-9H-p-carbolina, 6-metoxi-9-metil-9#-p-carbolina, 9-(2-fluoretil)-9H-p-carbolina and 9-alil-9fí-p-carbolina.

4. El uso de acuerdo con cualquier . reivindicación 1 - 3, caracterizado porque las alteraciones a la audición agudas y crónicas, vértigo y alteraciones vestibulares son en particular, pérdida de audición aguda, trauma acústico agudo, trauma de explosión, sordera laberíntica debida a exposición al ruido crónica, presbiacusia, trauma durante implante de prótesis de oído interno (trauma de inserción) , vértigo debido a enfermedades del oído interno, vértigo en relación con y/o como síntoma de enfermedad de Meniere, alteraciones vestibulares en relación con y/o como síntoma de enfermedad de Meniere, tinnitus y daños de la audición debido a antibióticos y citostáticos.

5. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende por lo menos un compuesto de acuerdo con cualquier reivindicación 1 - 3, en forma de gotas, pomadas, atomizaciones, liposomas, geles, emulsiones o soluciones de inyección para el tratamiento de enfermedades del oído y daños de la audición.