KR102333863B1

KR102333863B1 - 신규한 피라졸 유도체

Info

Publication number: KR102333863B1
Application number: KR1020210004079A
Authority: KR
Inventors: 이수진; 문성환; 반수호; 이은실; 신은정; 고유경; 이승찬; 유현경
Original assignee: 압타바이오 주식회사
Priority date: 2020-01-13
Filing date: 2021-01-12
Publication date: 2021-12-03
Also published as: MX2022008665A; US20230067461A1; EP4105206A1; WO2021145655A1; KR20210091063A; CN114945561A; EP4105206A4; CL2022001888A1; JP2024153885A; AU2021208915B2; BR112022013849A2; CA3167675A1; IL294674A; AU2021208915A1; CO2022010431A2; JP2023511302A

Abstract

본 발명은 화학식 I로 표시되는 신규한 피라졸 유도체 화합물 또는 이의 염, 및 이를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
<화학식 I>

(상기에서 X, Y, R4 등은 발명의 설명에서 정의한 바와 같다.)

Description

신규한 피라졸 유도체{Novel pyrazole derivatives}

본 발명은 산화성 스트레스 억제 활성이 우수한 신규한 피라졸 유도체, 이의 제조방법 및 이의 약학적 조성물에 관한 것이다.

산화성 스트레스(oxidative stress)는 생체 내 생체 분자, 세포, 조직에서 활성산소종 또는 활성질소종 생산과 항산화 방어기전이 균형을 잃고 활성산소종 또는 활성질소종의 생산이 상대적으로 과다해지는 현상을 의미하며, 이때 통상적으로 조직 손상이 야기된다.

활성산소종(reactive oxygen species, ROS)은 산소가 지닌 화학적 특성으로 인해 생산되는 산소 유리기(oxygen free radical) 및 이들로부터 유래된 산소화합물로 superoxide anion(O₂-·), 과산화수소(Hydogenperoxide: H₂O₂), 수산기(OH·), alkoxyl기(RO·), peroxyl기(ROO·) 등을 총칭한다. 활성질소종(Reactive nitrogen species, RNS)은 일산화질소(NO·)와 superoxide anion(O₂-·)가 생체 내 NOS(nitric oxide synthase)에 의해 만들어진 반응성이 높은 peroxinitrite(ONOO^-) 및 peroxinitrite로부터 생성되는 nitrogen dioxide(·NO₂), nitrosoperoxycarbonate(ONOOCO₂ ^-), carbonate radical(O=C(O·)O^-) 등을 총칭한다.

이러한 활성산소종 또는 활성질소종은 화학적으로 매우 불안하고 반응성이 크기 때문에 생체 내에서 효소 촉매 반응, 미토콘드리아 내 전자 전달, 세포 신호 전달계와 유전자 발현, 전사인자의 활성화 및 생체 분자, 세포, 조직 등에 광범위한 산화적 손상을 줌으로써 주위에 염증을 유발하고 조직섬유화의 주요인자로 관여한다. 이러한 산화적 손상은 인체 전 조직에서 각종 질병을 유발하게 된다. 구체적으로는 피부, 신장, 심장, 관절, 폐, 뇌, 혈관, 장관, 눈 등의 조직에서의 암 발생 및 발생된 암의 진행에 관여한다는 것이 알려져 있을 뿐 아니라, 심혈관 질환, 염증, 섬유화 질환, 당뇨병 등 거의 모든 질병에서 중요하게 작용하는 것으로 알려지고 있다.

최근 종양 미세환경과 암세포 사이의 상호작용이 종양 성장, 전이, 항암제 내성 발현에 주요한 역할을 하는 것으로 알려져 있는데, 이때 암 관련 섬유아세포(Cancer Associated Fibroblast; CAF)가 중요하게 작용한다. 암 관련 섬유아세포는 ROS에 의해 활성화됨으로써 종양면역 회피를 촉진하게 되어 암의 악성화 및 전이에 작용한다고 알려지고 있다. 따라서, 최근 암 치료의 새로운 타겟으로 암 관련 섬유아세포가 대두되고 있다.

간섬유화가 진행되는 환자의 간조직에서는 TGF-β 자극으로 간세포의 ROS 생성 증가가 유발됨에 따라, 섬유화에 중요한 collagen과 αSMA의 발현이 증가됨이 보고되었다. 특발성 폐 섬유증 환자의 폐 조직에서 ROS로 인해 폐 섬유화증이 악화되는 것이 보고되었다.

뇌는 신진대사가 매우 높은 조직이므로 산화 손상에 매우 취약하다. 따라서, 다양한 신경 퇴행성 질환(파킨슨병, 헌팅턴병, 근위축성 측삭 경화증, 알츠하이머병, 다발성 경화증, 허혈성 및 외상성 뇌 손상 등)의 치료를 위해 ROS를 효과적으로 제거하려는 연구가 많이 진행되었으나 성공하지 못했다. 최근 ROS가 이러한 뇌 질환의 중요인자로 밝혀짐에 따라, ROS 저해를 통한 치료 가능성이 보고되었다.

켈로이드는 피부의 결합조직이 병적으로 증식하여 단단한 융기를 만들고 표피가 얇아져서 광택을 띠며 불그스름하게 보이는 양성종양 질환의 일종이다. 켈로이드의 발병 및 악화 역시 TGF-β자극에 의해 생성된 ROS에 의한 결합조직성장인자(connective tissue growth factor, CTGF)의 과발현이 그 이유 중 하나라는 것이 보고되었다.

당뇨병의　경우,　오랜　기간　고혈당　상태가　지속되면서　당뇨병성　신증,　당뇨병성　망막증과　같은　합병증이　동반될　수　있는데,　ROS가　합병증　발생에　중요한역할을　하는　것으로　알려져　있다.　즉　고혈당이　ROS의　생성　증가를　야기하고,　이때　발생한　ROS는　신장세포　및　망막세포의　사멸을　유도하는　일련의　과정을　통해　당뇨병성　신증(diabetic nephropathy)　및　당뇨병성　망막증(diabetic　retinopathy)　등을　유발할　수　있다.

또한 켈로이드 질환에서 관찰된 바와 같이 눈의 망막에서도 CTGF 유전자가 과발현 되는 경우 망막섬유화증 및 황반변성 등을 유발하는 것으로 보고되었다.

따라서 본 발명자들은 산화성 스트레스의 생성을 억제하는 분자적 기전을 이용하여 산화성 스트레스로 인한 암, 염증성 질환, 섬유증성 질환, 퇴행성 신경 질환, 간질환, 피부질환 또는 망막질환 등에 대한 치료제를 개발할 수 있다는 점에 착안하여 연구한 결과, 본 발명의 신규한 피라졸 유도체가 ROS 생성 억제 활성이 우수함을 발견하여 산화성 스트레스와 관련된 다양한 질병의 치료에 사용할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

WO 2016-207785 WO 2015-144801

Mengjia Song, Xinfeng Chen, et al. Chinese Journal of Cancer Research, 2018, 30(2):157-172. Lan T, Kisseleva T, Brenner DA. PLoS One 2015;10:e0129743. Merry W. Ma, Jin Wang, et al. Molecular neurodegeneration, 12:7, 2017. Alessandro G. Fois. Panagiotis Paligiannis et al. Respir Res. 2018, 19:51. Rohan Samarakoon, Jessica M. Overstreet et al. Cell Signal, 2013.Jan, 25(1), 264-268.

본 발명은 신규한 피라졸 유도체인 화학식 I의 화합물, 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 화학식 I의 화합물, 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 화학식 I의 화합물, 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 이용하여 ROS의 생성을 조절하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 화학식 I의 화합물, 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 개체에 투여하여 산화성 스트레스와 관련된 질병을 치료하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 화학식 I의 화합물을 제조하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 산화성 스트레스와 관련된 질병의 예방 또는 치료를 위한 약학 조성물의 제조를 위한, 화학식 I의 화합물, 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도를 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 신규한 피라졸 유도체인 하기 화학식 I로 표시되는 화합물, 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

<화학식 I>

상기 식에서,

X, Y는 CR1R2 또는 NR3이고;

R1, R2 또는 R3은 서로 같거나 상이하고, 각각 독립적으로 Ra-L-, Ra-LCO-, Ra-L-NHCO-, Ra-L-OCO-, Ra-L-SO₂-에서 선택되고;

상기 Ra는 수소, 중수소, 시안, 할로겐, 나이트로, 할로알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C10 직쇄 또는 분지된 알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C8 사이클로알킬, 치환 또는 비치환된 C5-C20 아릴, 또는 치환 또는 비치환된 C5-C20 헤테로아릴 중에서 선택되며, 상기 헤테로아릴은 O, N, S 중 1, 2 또는 3개의 헤테로원자를 포함하고;

상기 L은 직접 결합, C1-C5 알킬렌, 치환 또는 비치환된 C5-C10 아릴렌 중에서 선택되며;

상기 R4는 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1-C10 알킬 중에서 선택되며;

A는 CR5 또는 N, B는 CR6 또는 N, D는 CR7 또는 N, E는 CR8 또는 N, G는 CR9 또는 N이고;

상기 R5 내지 R9는 같거나 상이하고, 각각 독립적으로 수소, 중수소, 시안, 할로겐, 할로알킬, 카보닐, 나이트로, 카복실, C1-C5 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C10 직쇄 또는 분지된 알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C8 사이클로알킬, 치환 또는 비치환된 아민, 치환 또는 비치환된 C5-C20 아릴, 또는 치환 또는 비치환된 C5-C20 헤테로아릴 중에서 선택되고, 서로 인접하는 2 이상의 기는 서로 결합하여 치환 또는 비치환된 방향족 탄화수소 고리를 형성할 수 있고, 이때 방향족 탄화수소 고리는 N, O, S로부터 선택된 0, 1, 2 또는 3개의 헤테로원자를 포함하는 C5~C10의 헤테로아릴 고리 또는 아릴 고리를 형성할 수 있고;

상기 치환된 C1-C10 직쇄 또는 분지된 알킬은 임의로 부분 불포화일 수 있고, 독립적으로 중수소, 할로겐, 시안, 나이트로, 카복실, 치환 또는 비치환된 아민, 치환 또는 비치환된 C5-C20 아릴 또는 C5-C20 헤테로아릴, 치환 또는 비치환된 C3-C8 사이클로알킬에서 선택되는 1개 이상의 치환기로 치환될 수 있고;

상기 치환된 C3-C8 사이클로알킬은 독립적으로 중수소, 할로겐, 시안, 나이트로, 카복실, 치환 또는 비치환된 아민, 치환 또는 비치환된 C5-C20 아릴 또는 C5-C20 헤테로아릴, C1-C5 알콕시, C1-C5 할로알킬에서 선택되는 1개 이상의 치환기 또는 같거나 상이한 2 이상의 치환기가 연결되어 치환될 수 있고;

상기 치환된 C5-C20 아릴 또는 치환된 C5-C20 헤테로아릴은 독립적으로 중수소, 할로겐, 시안, 나이트로, 카복실, 치환 또는 비치환된 아민, C1-C5 알콕시, C1-C5 할로알킬, C1-C10 알킬, C3-C8 사이클로알킬 C1-C10 알킬, C5-C20 아릴 C1-C10 알킬에서 선택되는 1개 이상의 치환기 또는 같거나 상이한 2 이상의 치환기가 연결되어 치환될 수 있고;

상기 치환된 아민은 하나 또는 둘의 C1-C5 알킬기로 치환될 수 있고;

상기 치환된 C5-C10 아릴렌은 C1-C3 알킬, 할로겐, 시안, 아민, 나이트로, 중수소 중에서 선택되는 1개 이상의 치환기 또는 같거나 상이한 2 이상의 치환기가 연결되어 치환될 수 있다.

또한, 본 발명은 산화성 스트레스와 관련된 질환의 치료용으로 사용되는 상기 화학식 I로 표시되는 화합물, 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

또한, 본 발명은 유효성분으로서 상기 화학식 I로 표시되는 화합물, 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 및 허용가능한 담체를 포함하는 산화성 스트레스와 관련된 질환을 치료하기 위한 약학적 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 화학식 I로 표시되는 화합물, 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효량으로 치료가 필요한 대상에게 투여하는 것을 포함하는 산화성 스트레스와 관련된 질환을 치료하는 방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 산화성 스트레스와 관련된 질병의 예방 또는 치료를 위한 약학 조성물의 제조를 위한, 화학식 I의 화합물, 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 용도를 제공한다.

본 발명의 신규한 피라졸 유도체 및 이를 포함하는 약제학적 조성물은 산화성 스트레스와 관련된 질환에 우수한 효과를 제공한다.

또한, 상기 신규한 피라졸 유도체는 다양한 세포에서 산화성 스트레스 및 αSMA, 세포외기질, 또는 IL-1β생성을 효과적으로 억제하였으며, 특히 산화성 스트레스로 인한 암, 염증성 질환, 섬유증성 질환, 퇴행성 신경 질환, 간질환, 피부질환 또는 망막질환 등을 효과적으로 개선하는 효과를 가진다.

도 1은 합성예 화합물들이 LX-2 및 NHLF 세포에서 PMA에 의해 유도된 ROS 생성을 억제하는 효과를 나타낸다.
도 2는 합성예 화합물들이 ARPE19 세포에서 TGF-β1에 의해 유도된 αSMA의 발현을 억제하는 효과를 나타낸다.
도 3a 및 도 3b은 합성예 3 화합물이 다양한 세포에서 TGF-β1에 의해 유도된 αSMA의 발현을 억제하는 효과를 나타낸다.
도 4는 합성예 3 화합물이 N27 세포에서 MPP+로 유도된 ROS의 생성을 억제하는 효과를 나타낸다.
도 5는 합성예 3 화합물이 LX-2 및 NHLF 세포에서 LPS에 의해 유도된 IL-1b의 발현을 억제하는 효과를 나타낸다.
도 6은 폐섬유화 모델의 폐조직에서 합성예 화합물에 의해 αSMA의 발현을 억제하는 효과를 나타낸다.

이하, 본 발명에 대하여 구현예를 들어 상세하게 설명한다. 다만, 이는 예시로서 제시하는 것으로서, 이에 의해 본 발명이 제한되지 않으며, 본 발명은 후술하는 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다. 또한, 본 발명을 실시하는데 꼭 필요한 구성이라 하더라도 통상의 기술자가 공지 기술로부터 용이하게 실시할 수 있는 구성에 대해서는 구체적인 설명을 생략한다.

이하에서 별도의 설명이 없는 한, 용어 "본 발명의 화합물" 또는 "화학식 I의 화합물"은, 화합물 그 자체, 용매화물, 입체이성질체 및 이의 염을 모두 포함하는 개념으로 사용된다.

본 명세서에서 용어 "직쇄 또는 분지된 알킬" 은 직쇄상, 분지상의 1가의 포화 탄화수소기를 의미한다. 달리 정의되지 않는다면, 상기 알킬기는 일반적으로 1~10개, 1~8개, 1~6개, 1~4개 또는 1~3개의 탄소 원자를 포함한다. 알킬기의 예는 메틸, 에틸, 프로필(예. n-프로필 및 이소프로필), 부틸(예. n-부틸, 이소부틸, 및 t-부틸), 펜틸(예. n-펜틸, 이소펜틸, 및 네오펜틸), n-헥실, n-헵틸, n-옥틸, n-노닐 및 n-데실을 포함한다. 본 명세서에 있어서, 상기 알킬기는 임의로 부분 불포화되어 하기의 알케닐 또는 알키닐일 수 있다. 또한, 상기 알킬기는 다른 치환기에 의해 추가 치환될 수 있다.

본 명세서에서 용어 "알케닐"은 직쇄상 또는 분지상의 1개 이상의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 1가의 불포화 탄화수소기를 의미한다. 달리 정의되지 않는다면, 상기 알케닐기는 일반적으로 2~10개, 2~8개, 2~6개, 2~4개 또는 2~3개의 탄소 원자를 포함한다. 알케닐기는 예를 들면, 에테닐, n-프로페닐, 이소프로페닐, 사이클로헥세닐 등을 포함하고, 다른 치환기에 의해 추가 치환될 수 있다.

본 명세서에서 용어 "알키닐"은 직쇄상 또는 분지상의 1개 이상의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖는 1가의 불포화 탄화수소기를 의미한다. 달리 정의되지 않는다면, 상기 알키닐기는 일반적으로 2~10개, 2~8개, 2~6개, 2~4개 또는 2~3개의 탄소 원자를 포함한다. 알키닐기는 예를 들면, 에티닐, n-프로피닐 등을 포함하고 다른 치환기에 의해 추가 치환될 수 있다.

본 명세서에서 용어 "알콕시"는 직쇄, 분지쇄 또는 고리쇄일 수 있다. 알콕 시기의 탄소수는 특별히 한정되지 않으나, 탄소수 1 내지 5인 것이 바람직하다. 구체적으로, 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, 이소부톡시, tert-부톡시, sec-부톡시, n-펜틸옥시, 네오펜틸옥시, 이소펜틸옥시, 등이 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 명세서에서 용어 "할로알킬"은 하나 이상의 할로겐 치환기를 갖는 알킬기를 의미한다. 할로알킬은 -CF₃, -C₂F₅, -CHF₂, -CCl₃, -CHCl₂, 및 -C₂Cl₅을 포함한다. 달리 정의되지 않는다면, 상기 할로알킬기는 일반적으로 1~6개, 1~5개, 1~4개 또는 1~3개의 탄소 원자를 포함하고, 다른 치환기에 의해 추가로 치환될 수 있다.

본 명세서에서 용어 "사이클로알킬"은 고리화된 알킬, 알케닐 및 알키닐기를 포함하는 비방향성 탄소고리를 나타낸다. 상기 사이클로알킬기는 단환 또는 다환을 포함할 수 있다. 상기 다환은 예를 들면, 2개, 3개 또는 4개의 융합된 고리를 갖는 것이다. 달리 정의되지 않는다면, 상기 사이클로알킬기는 일반적으로 3 내지 10개, 또는 3 내지 7개의 고리 탄소 원자를 포함한다. 사이클로알킬기는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 사이클로헥사디에닐, 사이클로헵타트리에닐 등을 포함하고, 다른 치환기에 의해 추가 치환될 수 있다.

본 명세서에서 용어 "아릴"은 단환 또는 다환을 갖는 방향족 탄화수소기를 의미하며, 다른 치환기에 의하여 추가로 치환될 수 있다. 여기서 다환이란 아릴기가 다른 고리기와 직접 연결되거나 축합된 기를 의미한다. 여기서 다른 고리기란 아릴기일 수도 있으나, 다른 종류의 고리기, 예컨대 사이클로알킬기, 헤테로아릴기 등일 수 있다. 상기 다환은 예를 들면, 2개, 3개 또는 4개의 고리를 갖는 것일 수 있다. 달리 정의되지 않는다면, 상기 아릴기는 일반적으로 5 내지 20개, 6 내지 15개, 6 내지 12개, 또는 6 내지 10개의 탄소 고리 원자를 가진다. 상기 아릴기는 예를 들면, 페닐, 나프틸(예, 나프틸-1-일 및 나프틸-2-일), 비페닐, 안트라세닐, 페난트레닐 등을 포함한다.

본 명세서에서 용어 "헤테로아릴"은 N, O 및 S로부터 선택된 하나 이상의 헤테로 원자를 고리 구성원으로 갖는 1가의 방향성기를 의미한다. 헤테로아릴기는 단환 혹은 다환 구조를 포함한다. 상기 다환은 예를 들면, 2개, 3개 또는 4개의 축합 고리를 갖는 것일 수 있다. 달리 정의되지 않는다면, 상기 헤테로아릴기는 일반적으로 3 내지 10개, 3 내지 7개, 또는 3 내지 5개의 고리 원자를 포함한다. 상기 헤테로아릴기는 1개, 2개 또는 3개의 헤테로 원자를 포함하는 것일 수 있다. 헤테로아릴기는 예를 들면, 퓨라닐, 피리딜, N-옥소피리딜, 피리미디닐, 피라지닐, 피리다지닐, 트리아지닐, 푸릴(furyl), 퀴놀릴, 이소퀴놀릴, 티에닐(thienyl), 이미다졸릴, 푸란일(furanyl), 티아졸릴(thiazolyl), 인돌릴, 피릴, 옥사졸릴, 벤조푸릴, 벤조티에닐, 벤즈티아졸릴, 이소옥사졸릴, 피라졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 인다졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴, 이소티아졸릴, 벤조티에닐, 푸리닐, 벤즈이미다졸릴, 인돌린일 등을 포함하고, 다른 치환기에 의해 추가 치환될 수 있다.

본 명세서에서 용어 "할로겐(halogen)"은 플루오로, 클로로, 브로모, 또는 요오도를 나타낸다.

본 명세서에서 용어 "아릴알킬"은 아릴기에 의해 치환된 알킬기를 나타낸다. "아릴" 및 "알킬"에 대하여는 상기 정의한 바와 같다

본 명세서에서 용어 "헤테로아릴알킬"은 헤테로아릴기에 의해 치환된 알킬기를 나타낸다. "헤테로아릴" 및 "알킬"에 대하여는 상기 정의한 바와 같다.

본 명세서에서, 상기 "치환 또는 비치환된 아민기"는 모노알킬아민기, -NH2, 디알킬아민기로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있으며, "알킬"에 대하여는 상기 정의한 바와 같다. 상기 치환 또는 비치환된 아민기의 구체적인 예로는 NH2, 메틸아민기, 디메틸아민기, 에틸아민기, 디에틸아민기 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다

본 명세서에서, 상기 "아릴렌기"는 아릴기에 결합 위치가 두 개 있는 것, 즉 2가기를 의미한다. 이들은 각각 2가기인 것을 제외하고는 전술한 아릴기의 설명이 적용될 수 있다.

본 명세서에서, 용어 "치환"은, 화합물의 탄소 원자에 결합된 수소 원자가 다른 치환기로 바뀌는 것을 의미하며, 치환되는 위치는 수소 원자가 치환되는 위치 즉, 치환기가 치환 가능한 위치라면 한정하지 않으며, 2 이상 치환되는 경우, 2 이상의 치환기는 서로 동일하거나 상이할 수 있으며, 동일하거나 상이한 2 이상의 치환기가 연결되어 치환될 수 있다.

본 명세서에서 용어 "치환된 직쇄 또는 분지된 알킬"은 C1-C10 직쇄 또는 분지된 알킬의 탄소원자에 다음의 치환기로 치환된 형태이다. 구체적으로는 중수소, 할로겐, 시안, 나이트로, 카복실, 치환 또는 비치환된 아민, 치환 또는 비치환된 C5-C20 아릴 또는 C5-C20 헤테로아릴, C1-C5 알콕시, C1-C5 할로알킬에서 선택되는 1개 이상의 치환기 또는 같거나 상이한 2 이상의 치환기가 연결되어 치환된 형태이다. 예시적인 치환기로는 트리플루오로메틸, 할로겐, 시안, 메톡시, 카복실, 메틸, 아미노, 나이트로 다이메틸아미노, 사이클로프로필 치환된 이미다졸 등이 사용될 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.

본 명세서의 용어 "치환된 사이클로알킬"은 C3-C8 사이클로알킬에 중수소, 할로겐, 시안, 나이트로, 카복실, 치환 또는 비치환된 아민, 치환 또는 비치환된 C5-C20 아릴 또는 C5-C20 헤테로아릴, C1-C5 알콕시, C1-C5 할로알킬에서 선택되는 1개 이상의 치환기 또는 같거나 상이한 2 이상의 치환기가 연결되어 치환된 형태이다. 예시적인 치환기로는 트리플루오로메틸, 할로겐, 시안, 메톡시, 카복실, 메틸, 아미노, 나이트로 다이메틸아미노, 사이클로프로필 치환된 이미다졸 등이 사용될 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.

본 명세서의 용어 "치환된 아릴" 또는 "치환된 헤테로아릴"은 C5-C20 아릴 또는 C5-C50 헤테로아릴에 중수소, 할로겐, 시안, 나이트로, 카복실, 치환 또는 비치환된 아민, C1-C5 알콕시, C1-C5 할로알킬, C1-C10 알킬, C3-C8 사이클로알킬 C1-C10 알킬, C5-C20 아릴 C1-C10 알킬에서 선택되는 1개 이상의 치환기 또는 같거나 상이한 2 이상의 치환기가 연결되어 치환된 형태이다. 예시적인 치환기로는 트리플루오로메틸, 할로겐, 시안, 메톡시, 카복실, 메틸, 아미노, 나이트로 다이메틸아미노, 사이클로프로필 치환된 이미다졸 등이 사용될 수 있지만, 이에 제한되지 않는다.

본 명세서에서, "인접한" 기는 해당 치환기가 치환된 원자와 직접 연결된 원자에 치환된 치환기, 해당 치환기와 입체구조적으로 가장 가깝게 위치한 치환기, 또는 해당 치환기가 치환된 원자에 치환된 다른 치환기를 의미할 수 있다. 예컨대, 벤젠고리에서 오쏘(ortho)위치로 치환된 2개의 치환기 및 지방족 고리에서 동일 탄소에 치환된 2개의 치환기는 서로 "인접한"기로 해석될 수 있다.

본 발명은 하기 화학식 I로 표시되는 화합물, 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

<화학식 I>

상기 식에서,

X, Y는 CR1R2 또는 NR3이고;

R1, R2 또는 R3은 서로 같거나 상이하고, 각각 독립적으로 Ra-L-, Ra-L-CO-, Ra-L-NHCO-, Ra-L-OCO-, Ra-L-SO₂-에서 선택되고;

추가적으로 상기 화학식 I은 하기 화학식 I-1로 표시된다.

<화학식 I-1>

상기 식에서,

X는 NR3이고,

R3는 Ra-L-, Ra-L-CO-, Ra-L-NHCO-, Ra-L-OCO-, Ra-L-SO₂-에서 선택되고;

추가적으로, 상기 화학식 I은 하기 화학식 I-2로 표시된다.

<화학식 I-2>

상기 식에서,

Y는 NR3이고,

R3는 Ra-L-, Ra-L-CO-, Ra-L-NHCO-, Ra-L-OCO-, Ra-L-SO₂-에서 선택되고;

추가적으로, 화학식 I-1 또는 I-2의 화합물은

상기 R3는 Ra-L-이고;

L은 직접 결합, C1-C3 알킬렌 중에서 선택되고;

A, B, D, E, G 중 N은 0 또는 1개이고;

상기 R5 내지 R9는 같거나 상이하고, 각각 독립적으로 수소, 중수소, 시안, 할로겐, 할로알킬, 카보닐, 나이트로, 카복실, C1-C5 알콕시, C1-C5 알킬, 하나 이상의 할로겐 치환된 C1-C5 할로알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C8 사이클로알킬, 치환 또는 비치환된 아민, 치환 또는 비치환된 C5-C10 아릴, 또는 치환 또는 비치환된 C5-C10 헤테로아릴 중에서 선택되고, 서로 인접하는 2 이상의 기는 서로 결합하여 치환 또는 비치환된 방향족 탄화수소 고리를 형성할 수 있고, 이때 방향족 탄화수소 고리는 N, O, S로부터 선택된 0, 1, 2 또는 3개의 헤테로원자를 포함하는 C5~C10의 헤테로아릴 고리 또는 아릴 고리를 형성할 수 있고;

R4는 수소 또는 치환 또는 비치환된 C1-C5 알킬 중에서 선택될 수 있다.

추가적으로, 화학식 I-1 또는 I-2의 화합물은

상기 R3는 Ra-L-CO-이고;

L은 직접 결합, C1-C3 알킬렌, 치환된 페닐렌 중에서 선택되고;

A, B, D, E, G 중 N은 0 또는 1개이고;

추가적으로, 화학식 I-1 또는 I-2의 화합물은,

상기 R3는 Ra-L-NHCO-이고;

L은 직접 결합, C1-C3 알킬렌 중에서 선택되고;

A, B, D, E, G 중 N은 0 또는 1이고;

추가적으로, 화학식 I-1 또는 I-2의 화합물은,

상기 R3는 Ra-L-OCO-이고;

L은 직접 결합, C1-C3 알킬렌 중에서 선택되고;

A, B, D, E, G 중 N은 0 또는 1이고;

추가적으로, 화학식 I-1 또는 I-2의 화합물은,

상기 R3는 Ra-L-SO₂-이고;

L은 직접 결합, C1-C3 알킬렌 중에서 선택되고;

A, B, D, E, G 중 N은 0 또는 1이고;

상기 화학식 I의 화합물은 하기 화합물들 중 어느 하나일 수 있다.

2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-인다졸-3-올;

2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-인다졸-3-올;

6-벤질-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

삭제

6-벤질-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-(4-플루오로벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-(4-메틸벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

4-((3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)메틸)벤조나이트릴;

6-(3,5-다이플루오로벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

2-(피리딘-2-일)-6-(3-(트리플루오로메틸)벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-(나프탈렌-2-일메틸)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

1-(4,5-다이하이드로-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6(7H)-일)부탄-1-온;

1-(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)에탄-1-온;

6-(4-메톡시벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-에틸-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-(프로프-2-인-1-일)-2(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-프로필-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-알릴-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)(페닐)메타논;

벤질 3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복실레이트;

(4-클로로페닐)(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-5-일)메타논;

에틸 3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복실레이트;

N-사이클로헥실-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드;

퓨란-2-일(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)메타논;

6-(메틸술포닐)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-(페닐술포닐)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

N-(4-플루오로페닐)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드;

N-(4-플루오로벤질)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드;

N-(퓨란-2-일메틸)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드;

N-(4-클로로페네틸)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드;

6-(나프탈렌-2-일술포닐)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

4-나이트로벤질 3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복실레이트;

(5-(4-사이클로프로필-1H-이미다졸-1-일)-2-플루오로-4-메틸페닐)(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)메타논;

5-벤질-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

6-벤질-2-(5-클로로피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

4-(6-벤질-3-하이드록시-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-2-일)벤조산;

6-벤질-2-(4-브로모페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-벤질-2-페닐-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

5-벤질-2-(5-트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-벤질-2-페닐-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-벤질-2-(4-브로모페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-벤질-2-(2-클로로페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

6-벤질-2-(2-클로로페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-벤질-2-(2-메톡시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

5-벤질-2-(5-클로로피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-벤질-2-(6-메틸-4-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)- 4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-벤질-2-(티에노[3,2-c]피리딘-4-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-(나프탈렌-2-일메틸)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-(나프탈렌-2-일메틸)-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-(3-(트리플루오로메틸)벤질)-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-(3,5-다이플루오로벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-(3,5-다이플루오로벤질)-2-(5-트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

6-벤질-3-메톡시-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘;

6-(6-벤질-3-하이드록시-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-2-일)니코티노나이트릴;

6-벤질-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-벤질-2-(3-플루오로피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-벤질-2-(6-메틸피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-벤질-2-(6-메틸-4-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

5-벤질-2-(6-메틸피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-벤질-2-(6-트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

6-(5-벤질-3-하이드록시-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-2-일)니코티노나이트릴;

5-벤질-2-(3-플루오로피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-벤질-2-(6-메틸-4-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

6-벤질-2-(티에노[3,2-c]피리딘-4-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

2-(피리딘-2-일)-6-(피리딘-2-일메틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

2-(피리딘-2-일)-6-(피리딘-4-일메틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-(4-(다이메틸아미노)벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-(3-(다이메틸아미노)벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

2-(6-아미노피리딘-2-일)-6-벤질-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

5-(4-(다이메틸아미노)벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-(3-(다이메틸아미노)벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

2-(피리딘-2-일)-6-(퀴놀린-6-일메틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

6-(이소퀴놀린-3-일메틸)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;

4-((3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,6,7-테트라하이드로-5H-피라졸로[4,3-c]피리딘-5-일)메틸)벤조나이트릴;

4-((3-하이드록시-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,4,6,7-테트라하이드로-5H-피라졸로[4,3-c]피리딘-5-일)메틸)벤조나이트릴;

2-(피리딘-2-일)-5-(3-(트리플루오로메틸)벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-(이소퀴놀린-3-일메틸)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

5-(이소퀴놀린-3-일메틸)-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;

4-(5-벤질-3-하이드록시-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-2-일)벤조산.

본 발명이 화합물은 NHLF(normal human lung fibroblast), LX-2(human hepatic stellate), ARPE19(human retinal pigment epithelial), KEL-FIB(keloid fibroblast) 세포 모두에서 PMA, TGF-β1, palmitate 또는 고농도-글루코스 등의 자극을 통해 생성된 ROS의 수준을 효과적으로 낮출 뿐 아니라, 분화된 HL-60(human leukemia cells)에 합성예 화합물 각각을 0.5 uM 처리한 경우 30%에서 70% 이상의 ROS 생성 억제 효과를 보였다. 따라서, 본 발명의 화합물은 산화성 스트레스와 관련된 질환의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다.

섬유아세포(fibroblast)가 근섬유아세포(myofibroblast)로 분화함에 따라 암 연관 섬유아세포(cancer associated fibroblast, CAF)를 형성하거나 여러 조직의 섬유화가 유발되는 것으로 보고되고 있다. TGF-β1 처리에 의해 섬유화를 유도한 HFF-1, LX-2, NHLF, ARPE19, KEL-FIB 세포에 본 발명의 화합물들을 처리한 결과 섬유화의 지표인 αSMA 발현이 억제되는 효과를 보였다. 따라서, 본 발명의 화합물은 섬유화와 관련된 질환의 예방 또는 치료에 사용될 수 있으며, 종양미세환경 상호작용에 중요한 지표인 암 연관 섬유아세포 조절을 통한 암의 치료에 사용될 수 있다.

신경세포에서 ROS 수준이 높아지는 경우 지질 산화를 유도하고, 이는 신경세포사멸에 중요한 요소로 알려져 있다. N27 세포(rat dopaminergic neural cell)에 ROS를 유도하는 MPP+(1-methyl-4-phenylptridinium) 및 합성예 화합물을 동시에 처리하는 경우, ROS 생성이 효과적으로 저해되는 효과를 보였다. 따라서, 본 발명의 화합물은 산화성 스트레스로 인한 신경세포사멸과 관련된 질환의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다.

피부 섬유성 질환의 원인으로 켈로이드 섬유아세포로부터 CTGF에 의한 collagen type I 등의 세포외기질 생성이 주요 원인 중 하나이다. KEL-FIB(keloid fibroblast) 세포에 합성예 화합물을 처리한 후 TGF-1을 처리하여 섬유화를 유도하는 경우 CTGF 유전자 및 collagen type I 유전자의 발현이 효과적으로 저해되었다. 따라서, 본 발명의 화합물은 피부 켈로이드성 질환의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다.

IL-1β는 대표적인 염증성 질환과 관련된 사이토카인이다. LX-2 및 NHLF 세포에 LPS 처리 후, 합성예 화합물을 처리하는 경우, IL-1β의 발현을 효과적으로 저해하였다. 따라서, 본 발명의 화합물은 염증성 질환의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다.

본 발명의 화합물은 폐섬유화 마우스 모델에서 폐섬유화의 지표인 αSMA 및 Collagen I의 발현을 억제하였을 뿐 아니라, 폐포(alveolar) 및 세기관지(bronchiole)에 염증세포의 침투를 낮추는 등의 폐섬유증을 개선하는 효과를 확인하였다. 특히 본 발명의 화합물은 기존의 특발성 폐섬유증의 치료제로 사용되는 닌테다닙에 비하여 효과적으로 폐섬유증을 개선한 결과를 나타내었다. 따라서, 본 발명의 화합물은 폐섬유증을 비롯한 섬유성 질환의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다.

본 발명이 화합물은 비알코올성 지방간염 및 섬유화가 유도된 STAM 마우스의 간 섬유화 및 간염 증상을 개선하는 결과는 보였다. 따라서, 본 발명의 합성예 화합물은 비알코올성 간염 또는 간섬유화를 포함하는 간 질환의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다.

본 발명의 화합물은 파킨슨 모델 마우스의 행동장애 증상을 개선시켰으며, 뇌 조직에서의 a-synuclein의 엉킴(aggregation) 및 축적을 50%이상 개선하였다. 따라서, 본 발명의 화합물은 파킨슨병 등의 퇴행성 신경질환의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 산화성 스트레스와 연관된 질병을 치료하기 위한 것일 수 있다. 상기 질병은 암, 염증성 질환, 섬유증성 질환, 퇴행성 신경 질환, 간 질환, 피부 질환, 또는 망막 질환 일수 있다.

상기 암은, 간암, 간세포 암종, 위장관암, 위암, 신경섬 유종증과 연관된 뇌수막종, 췌장암, 백혈병, 골수증식성/골수이형성 질환, 피부섬유육종, 유방암, 폐암, 갑상선암, 대장암, 전립선암, 유방암, 난소암, 뇌종양, 머리와 목의 암, 교아종 등으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 또한, 암은 상기 다양한 종류의 암으로부터 다른 장기로 전이된 이차 암일 수 있다.

상기 염증성 질환은 염증을 수반하는 류마티스즘성 관절염, 골관절염, 폐렴, 간염, 염증성 대장질환, 장내 장염, 사구체 신염, 위염, 혈관염, 췌장염, 복막염, 기관지염, 심근육염, 뇌염, 후 허혈 재관류 손상(postischemic reperfusion injury)에 있어서의 염증, 조직 및 기관의 이식 후 면역 거부 현상에서 일어나는 염증, 화상, 알레르기성 접촉성 피부염 등 피부에 발생하는 다양한 염증, 다수의 기관 장애시 발생하는 염증, 당뇨병성 신증을 포함하는 당뇨성 염증, 바이러스 또는 박테리아 감염으로 인한 감염성 염증, 또는 루푸스, 건선, 죽상경화증 등의 자가 면역성 질환일 수 있다.

상기 섬유증성 질환은 대사 질환-유도 간 섬유증 또는 간경변증, NAFLD-유도 섬유증 또는 간경변증, NASH-유도 섬유증 또는 간경변증, 알코올-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 약물-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 감염체-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 기생충 감염-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 박테리아 감염-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 바이러스 감염-유도 섬유증 또는 간경변증, HBV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, HCV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, HIV-감염 유도 간 섬유 증 또는 간경변증, 이중 HCV 및 HIV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, 방사선- 또는 화학요법-유도 섬유증 또는 간경변증, 쓸개관 섬유증, 임의의 만성 담즙울체성 질환으로 인한 간 섬유증 또는 간경변증, 임의 병인의 소화관 섬유증, 크론병-유도 섬유증, 궤양성 대장염-유도 섬유증, 소장 섬유증, 결장 섬유증, 위 섬유증, 폐(lung) 섬유증, 피부 섬유증, 표피 섬유증, 내피 섬유증, 피부 경화증/전신 경화증으로 인한 피부 섬유증, 만성 염증성 기도 질환(Chronic Obstructive Pulmonary Disease; COPD), 천식, 폐기종, 흡연자의 폐, 결핵, 폐 섬유증, 특발성 폐 섬유증(IPF) 에 이은 폐(lung) 섬유증, 심장 섬유증, 신장 섬유증, 신원성 전신 섬유증, 근육 섬유증, 연조직 섬유증, 골수 섬유증, 관절 섬유증, 건 섬유증, 연골 섬유증, 췌장 섬유증, 자궁 섬유증, 신경계 섬유증, 고환 섬유증, 난소 섬유증, 부신 섬유증, 동맥 섬유증, 정맥 섬유증, 안구 섬유증, 심근내막 섬유증, 종격동 섬유증, 골수섬 유증, 후복막 섬유증, 진폐증의 합병증인 진행성 거대 섬유증, 증식성 섬유증, 신생물성 섬유증, 이식부 주변 섬유증, 석면증, 관절섬유증, 또는 유착성관절낭염 일 수 있다.

상기 퇴행성 신경 질환은 알츠하이머병(경증 또는 초기 알츠하이머병, 경증 내지 중등도 알츠하이머 병, 중등도 또는 중기 알츠하이머병, 중등도 내지 중증 알츠하이머병, 중등도 중증(moderately severe) 알츠하이머병, 중증 알츠하이머병, 루이소체가 있는 알츠하이머병(AD)을 포함함), 파킨슨병(살충제, 살곤충제, 또는 제초제와 같은 환경 작용제 및/또는 망간, 알루미늄, 카드뮴, 구리, 또는 아연과 같은 금속에의 노출에 의해 화 학적으로 유도된 파킨슨병, SNCA 유전자-연관 파킨슨병, 산발성 또는 특발성 파킨슨병, 또는 파킨슨- 또는 LRRK2-연관 파킨슨병(PD)을 포함함), 상염색체우성 파킨슨병, 미만성 루이소체병(Diffuse Lewy Body Disease; DLBD)(또한 루이소체 치매(Dementia with Lewy Bodies; DLB)로도 알려짐), 순수성 자율신경실조증, 루이소체 연하장애, 우연성 LBD, 유전적 LBD(예를 들어, 알파-시누클레인 유전자, PARK3 및 PARK4의 돌연변이), 다계통 위축증(올리브교소뇌위축증, 줄무늬체흑색질 변성, 샤이-드래거 증후군(MSA)을 포함함), 복합 알츠하이머 및 파 킨슨병 및/또는 MSA, 헌팅턴병, 시누클레인병증, 루이소체의 존재를 특징으로 하는 장애 또는 병태, 다발성 경화증, 근위축성 측삭경화증(Amyotrophic lateral sclerosis; ALS) 치매(혈관성 치매, 루이소체 치매, 파킨슨 치매, 전두측두엽 치매를 포함함), 정신증(신경퇴행성 질환에 의해 야기되거나 도파민 요법, 예를 들면 파킨슨병 정신증, 알츠하이머병 정신증, 루이소체 치매 정신증(이에 한정되는 것은 아님)과 연관된 불안을 포함함), 이상운동증(신경퇴행성 질환에 의해 야기되거나 도파민 요법과 연관된 불안을 포함함), 불안(신경퇴행성 질환에 의해 야기되거나 도파민 요법과 연관된 불안을 포함함), 도파민 요법과 연관된 병태(근육긴장이상, 근육간대경련, 또는 떨림을 포함함), 시누클레인병증, 또는 α시누클레인의 비정상적 발현과 관련된 질환일 수 있다.

간 질환은 대사성 간 질환, 비-알코올성 지방간 질환(NAFLD), 비-알코올성 지방간염(NASH), 약물유도 간 질환, 알코올-유도 간 질환, 감염체 유도 간 질환, 염증성 간 질환, 면역계 기능이상-매개 간 질환, 또는 이상지질혈증 일 수 있다.

피부 질환은 켈로이드 질환, 건선 또는 밴반증이고, 망막질환은 망막섬유화증, 황반변성, 당뇨병성 망막증, 백내장 또는 신생혈관녹내장 일 수 있다.

본 발명의 화합물은 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 형태일 수 있다. 상기 염은 본 발명이 속하는 의약업계에서 통상적으로 사용되는 염을 의미하며, 예를 들어 염산, 질산, 인산, 브롬산, 요오드산, 과염소산, 주석산 및 황산 등으로 제조된 무기산염일수 있다. 또한, 아세트산, 프리플루오로아세트산, 시트르산, 말레인산, 숙신산, 옥살산, 벤조산, 타르타르산, 푸마르산, 만데르산, 프로피온산, 구연산, 젖산, 글리콜산, 글루콘산, 갈락투론산, 글루탐산, 글루타르산, 아스파르트산, 아스코르브산, 카본산, 등으로 제조된 유기산염일 수 있다. 또한, 리튬, 소듐, 칼륨, 마그네슘, 또는 칼슘과 같은 금속으로부터 유도된 염을 포함한다. 또한, 메탄설폰산, 에탄솔폰산, 벤젠설폰산, p-톨루엔설폰산 및 나프탈렌설폰산 등으로 제조된 설폰산 등일 수 있으며, 열거된 이들 염에 의해 본 발명에서 의미하는 염의 종류가 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 화합물은 또한 그의 용매화물(solvate)의 형태일 수 있다. "용매화물"이란 하나 이상의 용질 분자, 즉 화학식 I의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 하나 이상의 용매 분자에 의해 형성되는 복합체 또는 집합체를 의미한다. 용매화물은 예를 들면 물, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올 또는 아세트산 등의 다양한 용매 분자와 형성된 복합체 또는 집합체일 수 있다.

본 발명의 화합물은 또한 그의 입체이성질체의 형태일 수 있다. 상기 입체이성질체는 거울상이성질체(enantiomer) 및 부분입체이성질체(diastereomer)와 같은 모든 입체이성질체를 포함한다. 상기 화합물은 입체 이성질체의 순수 형태(stereoisomerically pure form) 또는 하나 이상의 입체이성질체의 혼합물, 예를 들면 라세미 혼합물일 수 있다. 특정 입체이성질체의 분리는 당해 분야에 공지된 통상의 방법 중 하나에 의해 수행될 수 있다. 본 발명의 화합물의 일부 예는 그 라세미 혼합물에 비하여 특정 입체이성질체의 산화 스트레스 억제 효과가 더 큰 것일 수 있다. 이 경우, 특정 입체이성질체를 사용함으로써, 투여량을 줄일 수 있다. 따라서, 산화성 스트레스에 대한 억제 효과가 큰 특정 입체이성질체, 예를 들면 거울상 이성질체 또는 부분구조이성질체를 분리함으로써, 산화성 스트레스와 관련된 질병을 효율적으로 치료할 수 있다.

본 발명의 다른 양상은 치료학적 유효량의 상기에서 정의한 화학식 I의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물에 있어서, 상기 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체에 대하여는 위에서 설명한 바와 같다.

본 발명의 조성물에 있어서, "약제학적으로 허용가능한 담체"는 활성 성분의 적용을 돕기 위하여 활성 성분과 조합되어 사용되는 물질, 일반적으로 불활성 물질을 나타낸다. 상기 담체는 통상적인 약제학적으로 허용가능한 부형제, 첨가제 또는 희석제를 포함한다. 상기 담체는 예를 들면 충전제(filler), 결합제(binder), 붕해제(disintergrant), 버퍼, 보존제, 항산화제, 활택제, 향미제, 점증제(thickener), 발색제(coloring agent), 유화제, 현탁화제, 안정화제, pH 조절제, 및 등장화제로부터 선택된 하나 이상을 포함하는 것일 수 있다.

희석제는 슈가, 전분, 미결정셀룰로오스, 유당(유당수화물), 포도당, 디-만니톨, 알기네이트, 알칼리토금속류염, 클레이, 폴리에틸렌글리콜, 무수인산수소칼슘, 또는 이들의 혼합물 등을 사용할 수 있으며; 결합제는 전분, 미결정셀룰로오스, 고분산성 실리카, 만니톨, 디-만니톨, 자당, 유당수화물, 폴리에틸렌글리콜, 폴리비닐피롤리돈(포비돈), 폴리비닐필롤리돈 공중합체(코포비돈), 히프로벨로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 천연검, 합성검, 젤라틴, 또는 이들의 혼합물 등을 사용할 수 있다.

붕해제는 전분글리콘산나트륨, 옥수수전분, 감자전분, 전호화전분 등의 전분 또는 변성전분; 벤토나이트, 몬모릴로나이트 또는 비검(veegum) 등의 클레이; 미결정셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스 또는 카복실메틸셀룰로오스 등의 셀룰로오스류; 알긴산나트륨 또는 알긴산 등의 알긴류; 크로스카멜로스(croscarmellose)나트륨 등의 가교 셀룰로오스류; 구아검, 잔탄검 등의 검류; 가교 폴리비닐피롤리든(crospovidone) 등의 가교 중합체; 중탄산나트륨, 시트르산 등의 비등성 제제 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있다.

윤활제는 탈크, 스테아린산, 스테아린산 마그네슘, 스테아린산 칼슘, 라우릴설페이트나트륨, 수소화식물성오일, 나트륨벤조에이트, 나트륨스테아릴푸마레이트, 글리세릴 모노레이트, 글리세릴모노스테아레이트, 글리세릴 팔미토스테아레이트, 콜로이드성 이산화규소 또는 이들의 혼합물 등을 사용할 수 있다.

pH 조절제는 초산, 아스코르빈산, 아스코르빈산 나트륨, 에테르산 나트륨, 사과산, 숙신산, 주석산, 푸마르산, 구연산(시트르산)과 같은 산성화제와 침강 탄산 칼슘, 암모니아수, 메글루민, 탄산 나트륨, 산화 마그네슘, 탄산 마그네슘, 구연산 나트륨, 삼염기칼슘인산염과 같은 염기성화제 등을 사용할 수 있다.

산화방지제는 디부틸히드록시 톨루엔, 부틸레이티드 히드록시아니솔, 초산 토코페롤, 토코페롤, 프로필 갈레이트, 아황산수소나트륨, 피로아황산나트륨 등을 사용할 수 있다. 본 발명의 선방출성 구획에서, 용해보조제는 라우릴황산나트륨, 폴리소르베이트 등의 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테류, 도큐세이트 나트륨, 폴록사머(poloxamer) 등을 사용할 수 있다.

또한, 지연방출성 제제를 만들기 위해 장용성 고분자, 수불용성 중합체, 소수성 화합물, 및 친수성 고분자를 포함할 수 있다.

상기 장용성 고분자는 pH 5 미만의 산성 조건하에서 불용성이거나 또는 안정한 것으로, pH 5 이상인 특정 pH 조건하에서 용해되거나 또는 분해되는 고분자를 말하며, 예를 들어, 히프로멜로오스아세테이트숙시네이트, 히프로멜로오스프탈레이트(히드록시프로필메틸셀룰로오스 프탈레이트), 히드록시메틸에틸셀룰로오스프탈레이트, 셀룰로오스아세테이트프탈레이트, 셀룰로오스아세테이트숙시네이트, 셀룰로오스아세테이트말레이트, 셀룰로오스벤조에이트프탈레이트, 셀룰로오스프로피오네이트프탈레이트, 메틸셀룰로오스프탈레이트, 카르복시메틸에틸셀룰로오스 및에틸히드록시에틸셀룰로오스프탈레이트, 메틸히드록시에틸셀룰로오스과 같은 장용성 셀룰로오스 유도체; 스티렌 -아크릴산 공중합체, 아크릴산메틸-아크릴산 공중합체, 아크릴산메틸메타크릴산 공중합체(예를 들면, 아크릴-이즈), 아크릴산부틸-스티렌-아크릴산 공중합체, 및 아크릴산메틸-메타크릴산-아크릴산옥틸공중합체과 같은 상기 장용성 아크릴산계 공중합체; 폴리(메타크릴산 메틸 메타크릴레이트) 공중합체(예를 들면, 유드라짓 L, 유드라짓S, 에보닉, 독일), 폴리(메타크릴산 에틸아크릴레이트) 공중합체(예를 들면, 유드라짓 L100-55)와 같은 장용성 폴리메타크릴레이트 공중합체; 아세트산비닐-말레인산 무수물 공중합체, 스티렌-말레인산 무수물 공중합체, 스티렌-말레인산모노에스테를 공중합체, 비닐메틸에테르-말레인산 무수물 공중합체, 에틸렌-말레인산 무수물 공중합체, 비닐부틸에테르-말레인산 무수물 공중합체, 아크릴로니트릴-크릴산메틸ㆍ말레인산 무수물 공중합체, 및아크릴산부틸-스티렌-말레인산 무수물 공중합체와 같은 장용성 말레인산계 공중합체; 및 폴리비닐알콜프탈레이트, 폴리비닐아세탈프탈레이트, 폴리비닐부틸레이트프탈레이트 및 폴리비닐아세트아세탈프탈레이트와 같은 장용성 폴리비닐 유도체가 있다.

상기 수불용성 중합체는 약물의 방출을 제어하는 약제학적으로 허용가능한 물에 용해되지 않는 고분자를말한다. 예를 들어, 수불용성 중합체는 폴리비닐아세테이트(예를 들면, 콜리코트 SR30D), 수불용성 폴리메타크릴레이트 공중합체[예를 들면, 폴리(에틸아크릴레이트-메틸 메타크릴레이트) 공중합체(예를 들면, 유드라짓 NE30D, 폴리(에틸아크릴레이트-메틸 메타크릴레이트-트리메틸아미노에틸메타크릴레이트)공중합체(예를 들면, 유드라짓RSPO) 등], 에틸셀룰로오스, 셀룰로오스 에스테르, 셀룰로오스 에테르, 셀룰로오스 아실레이트, 셀룰로오스 디아실 레이트, 셀룰로오스 트리아실레이트, 셀룰로오스 아세테이트, 셀룰로오스 디아세테이트 및 셀룰로오스 트리아세테이트 등이 있다.

상기 소수성 화합물은 약물의 방출을 제어하는 약제학적으로 허용가능한 물에 용해되지 않는 물질을 말한다. 예를 들어, 글리세릴 팔미토스테아레이트, 글리세릴 스테아레이트, 글리세릴 비헤네이트, 세틸 팔미테이트, 글리세릴 모노 올레이트 및 스레아린산과 같은 지방산 및 지방산 에스테르류; 세토스테아릴 알코올, 세틸알코올 및 스테아릴알코올과 같은 지방산 알코올류; 카르나우바 왁스, 밀납, 및 미결정 왁스와 같은 왁스류; 탈크, 침강탄산칼슘, 인산일수소칼슘, 산화아연, 산화티탄, 카올린, 벤토나이트, 몬모릴로나이트 및 비검과 같은 무기질 물질 등이 있다.

상기 친수성 고분자는 약물의 방출을 제어하는 약제학적으로 허용가능한 물에 용해되는 고분자 물질을 말한다.예를 들어, 덱스트린, 폴리덱스트린, 덱스트란, 펙틴 및 펙틴 유도체, 알긴산염, 폴리갈락투론산, 자일란, 아라비노자일란, 아라비노갈락탄, 전분, 히드록시프로필스타치, 아밀로오스, 및 아밀로펙틴와 같은 당류; 히프로멜로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 메틸셀룰로오스 및 카르복시메틸셀룰로오스 나트륨과 같은 셀룰로오스 유도체; 구아검, 로커스트 콩 검, 트라가칸타, 카라기난, 아카시아검, 아라비아검, 젤란검, 및 잔탄검과 같은 검류; 젤라틴, 카제인, 및 제인과 같은 단백질; 폴리비닐 알코올,폴리비닐 피롤리돈, 및 폴리비닐아세탈디에틸아미노아세테이트과 같은 폴리비닐유도체; 폴리(부틸 메타크릴레이트-(2-디메틸아미노에틸)메타크릴레이트-메틸메타크릴레이트) 공중합체(예를 들면, 유드라짓E100, 에보닉, 독일),폴리(에틸 아크릴레이트-메틸 메타크릴레이드-트리에틸아미노에틸- 메타크릴레이트 클로라이드) 공중합체(예를 들면, 유드라짓 RL, RS, 에보닉, 독일)과 같은 친수성 폴리메타크릴레이트 공중합체; 폴리에틸렌 글리콜, 및 폴리에틸렌 옥사이드와 같은 폴리에틸렌 유도체; 카보머 등이 있다.

이외에도 착색제, 향료 중에서 선택된 다양한 첨가제로서 약학적으로 허용 가능한 첨가제를 선택 사용하여 본 발명의 제제를 제제화할 수 있다.

본 발명에서 첨가제의 범위가 상기 첨가제를 사용하는 것으로 한정되는 것은 아니며, 상기한 첨가제를 선택에 의하여 통상 범위의 용량을 함유하여 제제화할 수 있다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물은 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 및 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물은 경구 투여하거나, 정맥내, 복강내, 피하, 직장 및 국소투여를 포함한 비경구로 투여될 수 있다.

본 발명의 다른 양상은 치료학적으로 유효량의 화학식 I의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체를 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 질병을 치료하는 방법을 제공한다.

상기 방법에 있어서, 당업자는 투여시 투여경로는 환자의 상태에 따라 적절하게 선택할 수 있다. 상기 투여는 경구, 비경구일 수 있다. 비경구 투여로는 정맥내, 복강내, 피하, 직장 및 국소투여를 포함한다.

상기 방법에 있어서, 투여량은 전술한 바와 같이 환자의 상태, 투여 경로, 주치의의 판단 등과 같은 다양한 인자들에 따라서 다양하게 변경될 수 있다. 효과적인 투여량은 체외실험 또는 동물 모델 시험에서 얻어진 용량-반응곡선으로부터 추정할 수 있다. 투여되는 조성물에 존재하는 본 발명의 화합물의 비율 및 농도는 화학적 특성, 투여 경로, 치료적 투여량 등에 따라 결정될 수 있다. 상기 투여량은 개체에게 약 1 μg/kg 내지 약 1 g/kg/day, 또는 약 0.1 mg/kg 내지 약 500 mg/kg/day의 유효량으로 투여될 수 있다. 상기 용량은 개체의 나이, 체중, 감수성, 또는 증상에 따라 변경될 수 있다.

나아가 본 발명의 화합물 또는 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물은 이를 필요로 하는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 암, 켈로이드증, 간섬유화증, 간경화증, 폐섬유화증. 파킨슨병, 헌팅턴병, 근위축성 측상 경화증, 다발성 경화증, 허혈성 또는 외상성 뇌 손상, 망막섬유화중, 황반변성, 염증성 질환에서 선택되는 질환의 예방 또는 치료방법에 사용될 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 사람에 있어서 자명하다.

본 발명의 화학식 I로 표시되는 화합물은 하기 반응식에 예시된 방법에 의해 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

일반 합성 과정 1(합성예 1 ~ 4)

합성예 1 내지 4는 하기와 같은 방법에 의해 합성되며, 구체적인 합성예를 기재하였다.

100mL 둥근 바닥 플라스크에 에탄올(30 ~ 50 mL)에 용해한 2-히드라지노피리딘 유도체(100 mmol) 및 베타-케토 에스테르(100 mmol)를 채우고 24시간 동안 140 ^oC로 가열한다. 이때 에탄올은 대기압 하에 3시간 가량 천천히 증류 제거시킨다. 반응의 진행 정도 및 중간체(하이드라진이민) 소모는 LCMS로 모니터링 한다. 생성물은 뜨거운 에탄올에 용해하고 냉각시켜 재결정법으로 정제하여 백색 고체로서 수득 하였다(수율 40 ~ 70%).

합성예 1. 2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-인다졸-3-올

1H-NMR(600 MHz, CDCL3) δ 8.23-8.55(m, 1H), 7.71-8.04(m, 2H), 7.10(m, 1H), 2.44-1.95-2.77(m, 4H), 1.50-1.80(m, 3H), 1.07(2d, 2H), Mass[M + H]⁺: 216.0, conformational isomer mixture.

합성예 2. 2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-인다졸-3-올

1H-NMR(600 MHz, CDCL3) δ 11.80(s, 0.5H), 8.81(s, 0.5H), 8.67(d, J = 9.0 Hz, 0.5H), 8.53(d, J = 11.0 Hz, 1H), 8.02(dd, J = 9.0, 2.1 Hz, 0.5H), 7.94-7.96(m, 1H), 2.59-2.65(dt, J = 64.0, 6.2 Hz, 2H), 2.35-2.45(dt, J = 59.0, 6.0 Hz, 2H), 1.72-1.87(m, 4H), Mass[M + H]⁺: 284.0, conformational isomer mixture.

합성예 3. 6-벤질-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸[3,4-c]피리딘-3-올

1H -NMR(400 MHz, DMSO-d₆,) δ 11.75(s, 1H), 8.39(s, 1H), 7.94(s, 1H), 7.65(s, 2H), 7.45(s, 3H), 7.35 ~7.15(m, 2H), 4.42(bs, 2H), 4.11(bs, 2H), 3.56(bs, 1H), 3.21(bs, 1H), 2.8 ~ 2.6(m, 2H), Mass[M+H]⁺; 307.1; HPLC retention time: 3.4 min,

_max: 304 nm, purity 97.8%.

합성예 4. 6-벤질-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, CDCL3) δ 8.52(s, 1H), 8.00(s, 2H), 7.20-7.37(m, 5H), 3.72(d, J = 11.0 Hz, 2H), 3.53(s, 2H), 2.74(bs, 2H), 2.56(bs, 2H), Mass[M + H]⁺: 375.2.

일반 합성 과정 2(합성예 중 알킬 유도체)

합성예 중 알킬 유도체의 일반 합성과정은 하기와 같다.

1 단계 반응

메탄올(20 mL)에 에틸 1-벤질-3-옥소피페리딘-4-카르복실레이트(1.0 g, 3.35 mmol), ZnCl(0.46 g, 3.36 mmol) 및 NaBH₄(0.13 g, 3.36 mmol)의 혼합물을 용해하고 70^oC에서 밤새 교반 하였다. 용매를 감압 하에서 제거하고 잔류물을 물(50 mL)로 희석하였다. 수층을 에틸아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, 무수 Na₂SO₄상에서 건조시키고 농축하여 원하는 생성물을 담황색 오일로서 수득하였다.

2 단계 반응

메탄올(20 mL) 용매에 에틸1-벤질-3-하이드록시피페리딘-4-카르복실레이트(0.5 g, 2.01 mmol), Pd/C(10%, 50 mg)의 혼합물을 수소가스 풍선 압력 하에 실온에서 밤새 교반 하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 원하는 생성물을 담황색 오일로서 수득 하였다.

3 단계 반응

이차 아민(0.5 g, 1 mol 당량), N,N-디이소프로필 에틸아민(1.5 mol 당량), 알킬 할라이드(1.1 mol 당량) 및 10 mL DMF를 둥근 바닥 플라스크에 넣고 질소 하에 실온에서 교반하였다. 반응 완료 후(TLC에 모니터링) 반응 혼합물을 감압 하에서 증발 건조시켰다. 잔류물을 5 mL의 메틸렌클로라이드에 용해시키고 5 mL의 증류수로 세척하였다. 수성 층을 3 x 5 mL 분획의 메틸렌클로라이드로 세척하였다. 수집된 유기 분획을 MgSO₄로 건조시키고 여과한 후 용매를 감압 하에 제거하여 생성물을 수득하였다.

4 단계 반응

40 mL의 아세토니트릴에(1.19 g, 5.15 mmol)의 H₅IO₆를 첨가하고 실온에서 15분 동안 격렬하게 교반하였다. 이어서 알코올 중간체를(얼음 냉각 하에서) 첨가한 다음, 10 mL 아세토니트릴에 용해한 PCC를 2차에 걸쳐 첨가하고, 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 100 mL 에틸아세테이트로 희석하고 1 : 1 염수 : 물, 포화 수성 Na₂SO₃ 용액 및 염수로 각각 세척하고, 무수 Na₂SO₄상에서 건조시키고 농축시켜 생성물을 수득하였다.

5 단계 반응

10 mL 둥근 바닥 플라스크에 에탄올(0.5 ~ 5mL)에 용해된 2-히드라지노피리딘 유도체(1.1 몰 당량) 및 베타-케토에스테르(1 몰 당량)를 채우고 12시간 동안 140 ^oC로 가열하였다. 반응 시작 후 에탄올은 3시간 동안 대기압에서 증류 제거한다. 생성물을 실리카겔 상에서 정제하였(수율 5 ~ 30%).

일반 합성 과정 3 (합성예 5 내지 33, 35 내지 38, 43, 44, 53 내지 58, 65 내지 70, 73, 74)

합성예 5 내지 33, 35 내지 38, 43, 44, 53 내지 58, 65 내지 70, 73, 74는 상기의 일반 반응식에 따라 합성되며, 구체적인 화합물을 적용한 합성 방법의 예시는 하기와 같다.

1 단계 반응

100mL 둥근 바닥 플라스크에 에탄올(40mL)에 용해한 2-히드라지노피리딘 유도체(2 g, 1.1 몰 당량) 및 베타-케토에스테르(5 g, 1 몰 당량)를 채우고 24시간 동안 140 ^oC로 가열한다. 이때 반응 시작 후 에탄올은 대기압 하에 3시간 가량 천천히 증 제거시킨다. 반응의 진행 정도 및 중간체(하이드라진 이민) 소모는 LCMS에 의해 모니터링 한다. 생성물은 뜨거운 에탄올(50mL)에 용해하고 냉각시켜 재결정법으로 정제하여 백색 고체로서 수득하였다(수율 3.7g, 85%).

2 단계 반응

6-벤질-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로 [3,4-c] 피리딘-3-올 염산염(0.5 g, 2.01 mmol)을 메탄올(20 mL)에 용해하고 Pd/C(수분함유, 10%, 250 mg)를 수소가스 풍선압력 하에서 2일 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 담황색 고체 염산염의 생성물을 수득하였다.

3-1 단계 반응(알킬 유도체)

2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올(50 mg, 0.12 mmol)을 5 mL의 디메틸아세트아미드에 용해시켰다. 반응 용액에, 트리에틸아민(97 uL, 3 당량) 및 알킬할라이드(1.2 당량)를 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물 용액을 실온에서 2시간 동안 교반 하였다. 에틸아세테이트(50 mL)로 희석하고 염수/NaHCO₃ 포화수용액을 혼합하여 세척에 사용하였다. 생성물을 재결정법으로 정제하였고 수율은 10 ~ 50% 범위였다.

3-2 단계 반응(아미드, 카보내이트, 유레아, 설폰아미드 유도체 합성법)

2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올(20 mg, 0.08 mmol)을 5mL의 아세토니트릴, 물 1 mL 혼합용액에 용해하고 NaHCO₃ 포화용액(200 uL)을 첨가하였다. 각각의 유도체 합성을 위해, 카르복실 클로라이드, 클로로 포르메이트, 이소시아네이트, 설포닐 클로라이드 중에서 선택하고 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물 용액을 실온에서 1시간 동안 교반 하고 LC-MS로 반응 완결을 확인한 후 에틸아세테이트 50mL를 가하여 희석하고 염수와 NaHCO₃ 혼합 포화용액으로 세척하였다. 생성물을 정제용 TLC에 의해 분리 정제하였고 수율은 10 ~ 70% 범위였다. 나아가 상기 일반 합성방법 및 구체물질을 이용한 합성 방법에 따라 제조된 합성예의 데이터를 기재하였다.

합성예 5. 2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, DMSO-D6) δ 9.74(bs, 1H), 8.45(d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.05-7.92(1H), 7.37-7.24(1H), 4.14(s, 2H), 3.31(t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.50(s, 2H), Mass[M + H]⁺: 217.0.

합성예 6. 6-(4-플루오로벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.24(d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.80(m, 2H), 7.35(dd, J = 8.3, 5.5 Hz, 2H), 7.00-7.12(m, 3H), 3.68(d, J = 4.8 Hz, 2H), 3.54(s, 2H), 2.74(t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.58(t, J = 5.9 Hz, 2H), Mass[M + H]⁺: 325.0.

합성예 7. 6-(4-메틸벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.23(m, 1H), 7.80(m, 2H), 7.00-7.12(m, 5H), 3.68(s, 2H), 3.54(s, 2H), 2.72(m, 2H), 2.56(m, 2H), 2.34(s, 3H), Mass[M + H]⁺: 321.0.

합성예 8. 4-((3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)메틸)벤조나이트릴

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.25(d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.81(m, 2H), 7.64(m, 3H), 7.52(d, J = 7.6 Hz, 2H), 3.77(d, J = 4.8 Hz, 2H), 3.55(s, 2H), 2.74-2.78(m, 2H), 2.59(t, J = 5.9 Hz, 2H), Mass[M + H]⁺: 332.0.

합성예 9. 6-(3,5-다이플루오로벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.22(d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.79(t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.09(s, 1H), 6.92(d, J = 6.2 Hz, 1H), 6.67-6.69(m, 2H), 3.67(s, 3H), 3.53(s, 2H), 2.73(m, 2H), 2.57(t, J = 5.5 Hz, 2H), Mass[M + H]⁺: 343.0.

합성예 10. 2-(피리딘-2-일)-6-(3-(트리플루오로메틸)벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.24(d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.80(m, 2H), 7.35(m, 2H), 7.00-7.12(m, 3H), 3.68(d, J = 4.8 Hz, 2H), 3.54(s, 2H), 2.74(t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.58(t, J = 5.9 Hz, 2H), Mass[M + H]⁺: 374.9.

합성예 11. 6-(나프탈렌-2-일메틸)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.56(s, 1H), 7.77-7.88(m, 6H), 7.43-7.47(m, 3H), 7.18(m, 1H), 3.92(s, 2H), 3.73(s, 2H), 3.01(t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.80(m, 2H), Mass[M + H]⁺: 356.9.

합성예 12. 1-(4,5-다이하이드로-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6(7H)-일)부탄-1-온

1H-NMR(600 MHz, CDCL3) δ 8.27(q, J = 5.3 Hz, 1H), 7.81-7.89(m, 2H), 7.13-7.17(m, 1H), 4.65(ss, 2H), 3.76(rotational isomer mixture dt, J = 5.7 Hz, 2H), 2.58(dt, J = 29.4, 5.9 Hz, 2H), 2.41(m, 2H), 1.64-1.74(m, 2H), 0.96-1.01(m, 3H), Mass[M + H]⁺: 286.9.

합성예 13. 1-(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)에탄-1-온

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.27(q, J = 5.7 Hz, 1H), 7.82-7.90(m, 2H), 7.14-7.18(m, 1H), 4.64(2s, 2H,), 3.74(2t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.59(2t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.18-2.20(2s, 3H), Mass[M + H]⁺: 258.1: conformational isomer mixture.

합성예 14. 6-(4-메톡시벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.24(d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.81(bs, 2H), 7.29(d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.10(m, 1H), 6.86(d, J = 8.6 Hz, 2H), 3.80(s, 3H), 3.67(s, 2H), 3.55(s, 2H), 2.74(t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.57(t, J = 5.9 Hz, 2H), Mass[M + H]⁺: 337.0.

합성예 15. 6-에틸-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, DMSO-D6) δ 8.34(bs, 1H), 7.85-7.96(m, 2H), 7.26-7.28(bs, 1H), 4.31(2bs, 2H), 3.60(bs, 2H), 3.22(q, J = 7.3 Hz, 1H), 2.86-2.96(m, 2H), 1.47-1.56(m, 3H), Mass[M + H]⁺: 244.9.

합성예 16. 6-(프로프-2-인-1-일)-2(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.25(bd, J = 4.8 Hz, 1H), 7.84(bs, 2H), 7.12(dd, J = 8.3, 5.5 Hz, 1H), 3.72(s, 2H), 3.55(d, J = 2.1 Hz, 2H), 2.83(t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.63(t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.30(t, J = 2.4 Hz, 1H), Mass[M + H]⁺: 254.9.

합성예 17. 6-프로필-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, DMSO-D6) δ 8.24(s, 1H), 7.79(b, 2H), 7.16(s, 1H), 4.16(b, 2H), 3.33-3.48(m, 2H), 3.13(bs, 2H), 2.77-2.92(m, 2H), 1.7 - 2.0(m, 5H), Mass[M + H]⁺: 258.9.

합성예 18. 6-알릴-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, CDCL3) δ 8.24(bs, 1H), 7.82 b(s, 2H), 7.11(bs, 2H), 5.19-5.27(m, 3H), 3.72(bs, 2H), 3.22(d, J = 6.2 Hz, 3H), 2.75(bs, 2H), 2.59(bs, 2H), Mass[M + H]⁺: 257.0.

합성예 19.(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)(페닐)메타논

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.19-8.20(m, 1H), 7.66-7.85(m, 2H), 7.39-7.49(m, 5H), 7.11(broad, 1H), 4.76(m, 2H), 3.58-4.13(m, 2H), 2.59-2.76(m, 2H), Mass[M + H]⁺: 320.9: conformational isomer mixture.

합성예 20. 벤질 3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복실레이트

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.24(d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.80-7.85(m, 2H), 7.34(m, 5H), 7.13(t, J = 6.5 Hz, 1H), 5.16(s, 2H), 4.61(s, 2H), 3.72(bs, 2H), 2.57(bs, 2H), Mass[M + H]⁺: 350.9.

합성예 21. (4-클로로페닐)(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-5-일)메타논

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.13(d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.71-7.86(m, 2H), 7.41-7.44(m, 4H), 7.09-7.15(m, 1H), 4.54-4.92(m, 2H), 3.59-4.01(m, 2H), 2.64(m, 2H), Mass[M + H]⁺: 354.9, conformational isomer mixture.

합성예 22. 에틸 3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복실레이트

1H-NMR(600 MHz, CDCL3) δ 8.24-8.39(m, 1H), 7.70-7.86(m, 2H), 7.12-7.18(m, 1H), 4.58-4.80(m, 2H), 4.17-4.23(m, 2H), 3.67(m, 2H), 2.44-2.60(m, 2H), 1.21-1.30(m, 3H), Mass[M + H]⁺: 288.9, conformational isomer mixture.

합성예 23. N-사이클로헥실-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드

1H-NMR(600 MHz, CDCL3) δ 8.28(d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.84-7.89(m, 2H), 7.17(t, J = 6.2 Hz, 1H), 4.49(s, 2H), 3.67-3.71(m, 1H), 3.65(t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.59(t, J = 5.9 Hz, 2H), 1.35-1.99(m, 10H), Mass[M + H]⁺: 341.9

합성예 24. 퓨란-2-일(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)메타논

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.31(d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.90(m, 2H), 7.56(s, 1H), 7.19(t, J = 6.5 Hz, 1H), 7.10(s, 1H), 6.54(s, 1H), 5.08-4.76(m, 2H), 4.00(m, 2H), 2.76(bs, 2H), Mass[M + H]⁺: 310.9.

합성예 25. 6-(메틸설포닐)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.28(d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.83-7.90(m, 2H), 7.18(t, J = 6.2 Hz, 1H), 4.45(s, 2H), 3.59-3.62(m, 2H), 3.38(s, 2H), 3.11(s, 3H), Mass[M + H]⁺: 294.8.

합성예 26. 6-(페닐설포닐)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, CDCL3) δ 8.25(d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.83-7.85(m, 2H), 7.51-7.60(m, 5H), 7.15(t, J = 6.2 Hz, 1H), 4.26(s, 2H), 3.39(t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.60(t, J = 5.9 Hz, 2H), Mass[M + H]⁺: 356.9.

합성예 27. N-(4-플루오로페닐)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드

1H-NMR(600 MHz, CDCL3) δ 8.26(d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.82-7.87(m, 2H), 7.29-7.31(m, 2H), 7.15(t, J = 6.5 Hz, 1H), 6.97(t, J = 9.0 Hz, 2H), 6.56(bs, 1H), 4.60(s, 2H), 3.72(t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.63(t, J = 5.9 Hz, 2H), Mass[M + H]⁺: 353.9.

합성예 28. N-(4-플루오로벤질)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드

1H-NMR(600 MHz, CDCL3) δ 8.26(d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.78-7.86(m, 2H), 7.26(dd, J = 8.6, 5.9 Hz, 2H), 7.14(t, J = 6.2 Hz, 1H), 6.99(t, J = 8.6 Hz, 2H), 4.49(s, 2H), 4.38(d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.63(t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.56(t, J = 5.2 Hz, 2H), Mass[M + H]⁺: 367.9.

합성예 29. N-(퓨란-2-일메틸)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드

1H-NMR(600 MHz, CDCL3) δ 8.26(d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.79-7.86(m, 2H), 7.35(s, 1H), 7.14(t, J = 6.2 Hz, 1H), 6.31(t, J = 2.4 Hz, 1H), 6.23(d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.49(s, 2H), 4.43(d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.62-3.65(m, 2H), 2.56(m, 2H), Mass[M + H]⁺: 339.9.

합성예 30. N-(4-클로로페네틸)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.26(bs, 1H), 7.83(d, J = 30.3 Hz, 2H), 7.25-7.27(m, 2H), 7.07-7.15(m, 3H), 4.42(s, 2H), 3.58(s, 2H), 3.47(m, 2H), 2.77-2.81(m, 2H), 2.54(s, 2H), Mass[M + H]⁺: 397.9.

합성예 31. 6-(나프탈렌-2-일술포닐)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.38(s, 1H), 7.94(d, J = 6.9 Hz, 2H), 7.52-7.60(m, 7H), 7.11(bs, 1H), 4.29(s, 2H), 3.54(m, 2H), 2.57(bs, 2H), Mass[M + H]⁺: 406.8.

합성예 32. 4-나이트로벤질 3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복실레이트

1H-NMR(600 MHz, CDCl3) δ 8.27(bs, 1H), 8.23(m, 2H), 7.82-7.87(m, 2H), 7.54(d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.16(bs, 1H), 5.28(d, J = 10.3 Hz, 2H), 4.66(s, 2H), 3.75(t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.61(bs, 2H), Mass[M + H]⁺: 395.9.

합성예 35. 6-벤질-2-(5-클로로피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올의 제조

에틸 1-벤질-3-옥소-4-피페리딘-카르복실레이트 염산염(0.50 g, 1.68 mmol)과 5-클로로-2-하이드라지노 피리딘(0.24 g, 1.68 mmol)을 10 mL의 에탄올에 용해하고 아세트산 2 방울을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드(0.53 g, 2.52 mmol)를 첨가해준 뒤 30시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압농축한 후 물과 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 황산마그네슘으로 건조하고 여과하여 감압농축하였다. 상기 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 재결정하여 표제화합물(0.12 g, 22 %)을 수득하였다.

¹H NMR(600 MHz, DMSO-d₆) δ 11.54(brs, 1H), 8.40(d, J=2.4 Hz, 1H), 8.35(s, 1H), 7.97(dd, J=8.4, 2.4 Hz, 1H), 7.34 - 7.28(m, 4H), 7.26 - 7.20(m, 1H), 3.64(s, 2H), 3.33(s, 2H), 2.63(t, J=5.8 Hz, 2H), 2.23(t, J=5.3 Hz, 2H). MS Calcd.: 340.1; MS Found: 341.1([M+H]⁺).

합성예 36. 4-(6-벤질-3-하이드록시-4,5,6,7-테트라하이드로피라졸로[3,4-c]피리딘-2-일)-벤조산 염산염의 제조

에틸 1-벤질-3-옥소-4-피페리딘-카르복실레이트 염산염(0.50 g, 1.68 mmol)과 4-하이드라지노 벤조산 염산염(0.31 g, 1.68 mmol)을 이용하여 하기 합성예 38의 제조방법에 따라 표제화합물(0.28 g, 43 %)을 수득하였다.

¹H NMR(600 MHz, DMSO-d₆) δ 12.96(brs, 1H), 10.61(brs, 1H), 7.97(d, J=8.8Hz, 2H), 7.84(d, J=8.8 Hz, 2H), 7.61 - 7.52(m, 2H), 7.51 - 7.43(m, 3H), 4.52 - 4.36(m, 2H), 4.28 - 4.12(m, 2H), 3.75 - 3.51(m, 1H), 3.30 - 3.15(m, 1H), 2.90 - 2.65(m, 2H). MS Calcd.: 349.1; MS Found: 350.1([M+H]⁺).

합성예 37. 6-벤질-2-(4-브로모페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올 염산염의 제조

에틸 1-벤질-3-옥소-4-피페리딘-카르복실레이트 염산염(0.50 g, 1.68 mmol)과 4-브로모페닐하이드라진 염산염(0.35 g, 1.68 mmol)을 이용하여 하기 합성예 38의 제조방법에 따라 표제화합물(0.29 g, 41 %)을 수득하였다.

¹H NMR(600 MHz, DMSO-d₆) δ 10.65(brs, 1H), 7.65 - 7.59(m, 4H), 7.59 - 7.53(m, 2H), 7.51 - 7.41(m, 3H), 4.50 - 4.38(m, 2H), 4.22 - 4.07(m, 2H), 3.65 - 3.50(m, 1H), 3.27 - 3.10(m, 1H), 2.85 - 2.65(m, 2H). MS Calcd.: 383.1; MS Found: 384.1([M+H]⁺).

합성예 38. 6-벤질-2-페닐-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올 염산염의 제조

에틸 1-벤질-3-옥소-4-피페리딘-카르복실레이트 염산염(0.50 g, 1.68 mmol)과 페닐하이드라진 염산염(0.24 g, 1.68 mmol)을 10 mL의 에탄올에 용해시킨 후 아세트산 2 방울을 첨가하였다. 반응 혼합물을 120^oC에서 1시간 동안 교반한 후 감압농축하였다. 상기 반응 혼합물을 에탄올과 디에틸에테르로 재결정하여 표제화합물(0.25 g, 44 %)을 수득하였다.

¹H NMR(600 MHz, DMSO-d₆) δ 10.30(brs, 1H), 7.63(d, J=8.0 Hz, 2H), 7.60 - 7.51(m, 2H), 7.50 - 7.44(m, 3H), 7.41(t, J=7.7 Hz, 2H), 7.31 - 7.20(m, 1H), 4.44(s, 2H), 4.30 - 4.07(m, 2H), 3.63(dd, 1H), 3.25 - 3.19(m, 1H), 2.84 - 2.60(m, 2H). MS Calcd.: 305.1; MS Found: 306.1([M+H]⁺).

일반 합성 과정 4 (합성예 34, 39 내지 42, 45 내지 52, 59 내지 64, 71, 72, 75 내지 81)

합성예 34, 39 내지 42, 45 내지 52, 59 내지 64, 71, 72, 75 내지 81는 상기의 일반 반응식에 따라 합성되며, 구체적인 화합물을 적용한 합성 방법의 예시는 하기와 같다. 나아가 상기 합성 방법에 따른 합성예의 데이터를 기재하였다.

합성예 39. 5-벤질-2-(5-트리플루오로메틸-피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올 염산염의 제조

에틸 1-벤질-4-옥소-3-피페리딘-카르복실레이트 염산염(0.50 g, 1.68 mmol)과 2-하이드라지닐-5-(트리플루오로메틸)피리딘(0.29 g, 1.68 mmol)을 10 mL의 아세트산에 용해하고 65^oC에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압농축한 후 에탄올로 재결정하여 표제화합물(0.14 g, 21 %)을 수득하였다.

¹H NMR(600 MHz, DMSO-d₆) δ 10.99(brs, 1H), 8.90 - 8.78(m, 1H), 8.60 - 8.45(m, 1H), 8.30(d, J=9.8 Hz, 1H), 7.65 - 7.55(m, 2H), 7.48 - 7.43(m, 3H), 4.60 - 4.30(m, 2H), 3.90 - 3.60(m, 3H), 3.50 - 3.20(m, 1H), 3.10 - 2.80(m, 2H). MS Calcd.: 374.1; MS Found: 375.1([M+H]⁺).

합성예 40. 5-벤질-2-페닐-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올 염산염의 제조

에틸 1-벤질-4-옥소-3-피페리딘-카르복실레이트 염산염(1.02 g, 3.46 mmol)과 페닐하이드라진 염산염(0.50 g, 3.46 mmol)을 이용하여 상기 합성예 38의 제조방법에 따라 표제화합물(0.48 g, 41 %)을 수득하였다.

¹H NMR(600 MHz, DMSO-d₆) δ 10.94(brs, 1Hz), 7.68 - 7.60(m, 4H), 7.50 - 7.44(m, 3H), 7.40(t, J=7.7 Hz, 2H), 7.22(t, J=7.3 Hz, 1H), 4.54 - 4.46(m, 1H), 4.36(dd, J=12.6, 5.9 Hz, 1H), 4.06 - 3.87(m, 2H), 3.72 - 3.66(m, 1H), 3.38 - 3.28(m, 1H), 3.08 - 2.96(m, 1H), 2.90 - 2.81(m, 1H). MS Calcd.: 305.1; MS Found: 306.2([M+H]⁺).

합성예 41. 5-벤질-2-(4-브로모페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올 염산염의 제조

에틸 1-벤질-4-옥소-3-피페리딘-카르복실레이트 염산염(0.50 g, 1.68 mmol)과 4-브로모페닐하이드라진 염산염(0.38 g, 1.68 mmol)을 이용하여 상기 합성예 38의 제조방법에 따라 표제화합물(0.17 g, 24 %)을 수득하였다.

¹H NMR(600 MHz, DMSO-d₆) δ 11.10(brs, 1H), 7.66 - 7.61(m, 4H), 7.67 - 7.61(m, 2H), 7.47 - 7.43(m, 3H), 4.54 - 4.42(m, 1H), 4.40 - 4.30(m, 1H), 4.05 - 3.85(m, 2H), 3.70 - 3.60(m, 1H), 3.40 - 3.21(m, 1H), 3.10 - 2.95(m, 1H), 2.90 - 2.80(m, 1H). MS Calcd.: 383.1; MS Found: 384.1([M+H]⁺).

합성예 42. 5-벤질-2-(2-클로로페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올 염산염의 제조

에틸 1-벤질-4-옥소-3-피페리딘-카르복실레이트 염산염(0.50 g, 1.68 mmol)과 2-클로로페닐하이드라진 염산염(0.30 g, 1.68 mmol)을 이용하여 상기 합성예 38의 제조방법에 따라 표제화합물(0.23 g, 36 %)을 수득하였다.

¹H NMR(600 MHz, DMSO-d₆) δ 11.19(brs, 1H), 7.71 - 7.67(m, 2H), 7.65 - 7.60(m, 1H), 7.52 - 7.45(m, 5H), 7.41(d, J=7.3 Hz, 1H), 4.54(dd, J=12.6, 3.5 Hz, 1H), 4.39(dd, J= 12.6, 6.3 Hz, 1H), 4.09 - 3.91(m, 2H), 3.68(t, J=13.6 Hz, 1H), 3.45 - 3.31(m, 1H), 3.14 - 3.00(m, 1H), 2.93 - 2.79(m, 1H). MS Calcd.: 339.1; MS Found: 340.2([M+H]⁺).

합성예 1 내지 81의 화합물

	구조	ESI-MS[M+H] ⁺	명칭
1		216.1	2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-인다졸-3-올
2		284.1	2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-인다졸-3-올
3		307.2	6-벤질-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
4		375.1	6-벤질-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
5		217.1	2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
6		325.1	6-(4-플루오로벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
7		321.2	6-(4-메틸벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
8		332.1	4-((3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)메틸)벤조나이트릴
9		343.1	6-(3,5-다이플루오로벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
10		375.1	2-(피리딘-2-일)-6-(3-(트리플루오로메틸)벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
11		357.2	6-(나프탈렌-2-일메틸)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
12		287.1	1-(4,5-다이하이드로-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6(7H)-일)부탄-1-온
13		259.1	1-(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)에탄-1-온
14		337.2	6-(4-메톡시벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
15		245.1	6-에틸-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
16		255.1	6-(프로프-2-인-1-일)-2(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
17		259.2	6-프로필-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
18		257.1	6-알릴-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
19		321.1	(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)(페닐)메타논
20		351.1	벤질 3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복실레이트
21		355.1	(4-클로로페닐)(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-5-일)메타논
22		289.1	에틸 3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복실레이트
23		342.2	N-사이클로헥실-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드
24		311.1	퓨란-2-일(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)메타논
25		295.1	6-(메틸술포닐)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
26		357.1	6-(페닐술포닐)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
27		354.1	N-(4-플루오로페닐)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드
28		368.1	N-(4-플루오로벤질)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드
29		340.1	N-(퓨란-2-일메틸)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드
30		398.1	N-(4-클로로페네틸)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드
31		407.1	6-(나프탈렌-2-일술포닐)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
32		396.1	4-나이트로벤질 3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복실레이트
33		459.2	(5-(4-사이클로프로필-1H-이미다졸-1-일)-2-플루오로-4-메틸페닐)(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)메타논
34		307.2	5-벤질-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
35		341.1	6-벤질-2-(5-클로로피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
36		350.1	4-(6-벤질-3-하이드록시-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-2-일)벤조산
37		384.1	6-벤질-2-(4-브로모페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
38		306.2	6-벤질-2-페닐-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
39		375.1	5-벤질-2-(5-트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
40		306.2	5-벤질-2-페닐-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
41		384.1	5-벤질-2-(4-브로모페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
42		340.1	5-벤질-2-(2-클로로페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
43		340.1	6-벤질-2-(2-클로로페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
44		336.2	6-벤질-2-(2-메톡시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
45		341.1	5-벤질-2-(5-클로로피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
46		389.2	5-벤질-2-(6-메틸-4-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)- 4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
47		363.1	5-벤질-2-(티에노[3,2-c]피리딘-4-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
48		357.2	5-(나프탈렌-2-일메틸)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
49		425.1	5-(나프탈렌-2-일메틸)-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
50		443.1	5-(3-(트리플루오로메틸)벤질)-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
51		343.1	5-(3,5-다이플루오로벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
52		411.1	5-(3,5-다이플루오로벤질)-2-(5-트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
53		321.2	6-벤질-3-메톡시-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘
54		332.1	6-(6-벤질-3-하이드록시-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-2-일)니코티노나이트릴
55		375.1	6-벤질-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
56		325.1	6-벤질-2-(3-플루오로피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
57		321.2	6-벤질-2-(6-메틸피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
58		389.2	6-벤질-2-(6-메틸-4-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
59		321.2	5-벤질-2-(6-메틸피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
60		375.1	5-벤질-2-(6-트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
61		332.1	6-(5-벤질-3-하이드록시-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-2-일)니코티노나이트릴
62		325.1	5-벤질-2-(3-플루오로피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
63		363.1	5-벤질-2-(티에노[3,2-c]피리딘-4-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
64		389.2	5-벤질-2-(6-메틸-4-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
65		363.1	6-벤질-2-(티에노[3,2-c]피리딘-4-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
66		308.1	2-(피리딘-2-일)-6-(피리딘-2-일메틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
67		308.1	2-(피리딘-2-일)-6-(피리딘-4-일메틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
68		350.2	6-(4-(다이메틸아미노)벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
69		350.2	6-(3-(다이메틸아미노)벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
70		322.2	2-(6-아미노피리딘-2-일)-6-벤질-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
71		350.2	5-(4-(다이메틸아미노)벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
72		350.2	5-(3-(다이메틸아미노)벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
73		358.2	2-(피리딘-2-일)-6-(퀴놀린-6-일메틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
74		358.2	6-(이소퀴놀린-3-일메틸)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
75		332.1	4-((3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,6,7-테트라하이드로-5H-피라졸로[4,3-c]피리딘-5-일)메틸)벤조나이트릴
76		400.1	4-((3-하이드록시-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,4,6,7-테트라하이드로-5H-피라졸로[4,3-c]피리딘-5-일)메틸)벤조나이트릴
77		375.1	2-(피리딘-2-일)-5-(3-(트리플루오로메틸)벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
78		443.1	5-(3-(트리플루오로메틸)벤질)-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
79		358.2	5-(이소퀴놀린-3-일메틸)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
80		426.2	5-(이소퀴놀린-3-일메틸)-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올
81		350.1	4-(5-벤질-3-하이드록시-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-2-일)벤조산

<실시예 1>

합성예 화합물이 섬유아세포 및 특정기질 세포로부터의 ROS 생성에 미치는 영향을 확인하기 위하여, DMSO의 처리를 통해 호중구 세포로 분화된 HL-60 세포(한국세포주은행), NHLF(normal human lung fibroblast, Lonza), LX-2(human hepatic stellate cells, Sigma), ARPE19(human retinal pigment epithelial cell, ATCC), KEL-FIB(Keloid fibroblast, ATCC) 세포를 대상으로 PMA(phorbol 12-myristate 13-acetate), TGF-β1, palmitate 또는 고농도-글루코스 등의 자극을 통해 ROS 생성을 유도하고, 이 조건 하에서 합성예 화합물의 ROS 생성 억제 효능을 관찰하였다.

HL-60 세포(human leukemia cells, ATCC)는 1.25% DMSO가 포함된 배지(RPMI+10% FBS)에 현탁하여 5% CO₂, 37°C 조건에서 6일 동안 배양함으로써 호중구 세포로의 분화를 유도하였다. 호중구 세포로 분화된 HL-60 세포는 96 well plate에 2x10⁴ cells/well의 농도로 분주하고, 합성예 화합물을 0.5 mM 농도로 세포에 30분 동안 처리하였다. 이후, 세포와 약물이 포함된 각 well에 200nM의 PMA를 처리함으로써 ROS의 생성을 유도하였으며, 이러 ROS의 생성은 100μM L-012를 사용하여 각 well의 발광(luminescence) 정도를 관찰함으로써 측정되었다.

NHLF(normal human lung fibroblast, Lonza), LX-2(human hepatic stellate cells, Sigma), ARPE19(human retinal pigment epithelial cell, ATCC), KEL-FIB(keloid fibroblast, ATCC)세포는 10% FBS가 포함된 배양 배지에 현탁하여 96 well plate에 분주한 후 5% CO₂, 37°C 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 합성예 화합물을 30 분에서 1시간 동안 선처리한 후, ROS 자극원을 세포와 약물을 포함한 각 well에 처리하였다. 48시간 추가 배양 후, ROS 생성 정도를 L-012 또는 DCF-DA를 사용하여 확인하였다.

실험 결과, 합성예 화합물들은 NHLF, LX-2, ARPE19, KEL-FIB 세포 모두에서 ROS 자극원에 의한 ROS 생성을 억제하였다. 표 2의 결과는 호중구로 유도된 HL-60 세포에서 PMA에 의해 유도된 ROS 생성을 합성예 화합물(0.5 uM) 들이 억제하는 결과를 나타낸 것이고, 도 1은 LX-2 및 NHLF 세포에서 PMA에 의해 유도된 ROS의 생성을 합성예 3 및 합성예 34가 모두 억제하는 결과를 나타낸다.

따라서, ROS 생성이 유도된 분화된 HL-60 세포 또는 다양한 섬유아세포 또는 특정기질 세포에 합성예 화합물을 처리한 경우 ROS의 생성을 효과적으로 저해함을 확인하였다.

분화된 HL-60 세포에서의 ROS 생성 억제 효과

합성예 번호	ROS 생성 억제 효과
1	*
2	*
3	***
4	**
6	**
7	**
8	***
9	***
10	**
15	*
16	*
23	*
26	***
32	**
34	**
35	***
36	****
37	****
38	****
39	*
40	***
41	***
42	*
50	**
75	***
76	**
77	**
78	***
79	***
80	***
81	****

<* : <30 %, ** : 30< <50%, *** : 50< <70%, **** : >70%>

<실시예 2> TGF-β1에 의해 유도된 αSMA의 발현 변화 분석

섬유아세포(fibroblast)가 근섬유아세포(myofibroblast)로 분화함으로 인해 암 연관 섬유아세포(cancer associated fibroblast, CAF)를 형성하거나 여러 조직의 섬유화가 유발되는 것으로 보고되고 있다.

본 발명의 합성예 화합물이 섬유아세포(fibroblast)의 근섬유아세포로의 분화에 영향을 미치는지 확인하기 위하여, HL-60 세포(한국세포주은행), HFF-1(human foreskin fibroblast, ATCC), NHLF(normal human lung fibroblast, Lonza), LX-2(human hepatic stellate cells, Sigma), ARPE19(human retinal pigment epithelial cell, ATCC), KEL-FIB(Keloid fibroblast, ATCC) 세포를 대상으로 TGF-β1로 유도된 αSMA(근섬유아세포로의 분화 확인을 위한 바이오마커)의 발현 증가에 대한 합성예 화합물의 억제 효능을 관찰하고자 하였다.

각 세포는 10% FBS가 포함된 DMEM 배지에 현탁하여 4-well chamber slide(Nunc)에 1x10⁴ 세포/well의 농도로 분주하고, 합성예 화합물 및 TGF-β1(TGF β1, TGF-β는 모두 동일한 의미임)을 처리하여 αSMA 발현 확인에 사용할 세포를 준비하였다. 준비된 세포에서의 αSMA 발현 확인은 다음과 같이 면역세포염색(immunocytochemistry)을 통해 수행하였다. 세포를 4% paraformaldehyde로 10분 동안 고정(fixation), 0.1% Triton x-100을 이용하여 투과(permeabilization)를 수행한 후, αSMA에 대한 1차 항체(anti-αSMA Ab, 1:200, 4^oC에서 16시간) 및 2차 항체(Alexa-594 conjugated Ab, 1:800, 상온에서 1시간)처리 과정을 순차적으로 진행한 후, αSMA의 발현 정도를 형광현미경을 사용하여 관찰하였다.

도 2는 ARPE19 세포에 TGF-β1(5 μM) 처리로 αSMA 발현을 유도한 후, 다양한 합성예 화합물(5 μM)들을 처리했을 때의 효과를 관찰한 것이다. 합성예 3, 8, 9, 26 화합물은 정도의 차이는 있지만, 모두 35%~70% 이상 αSMA 발현을 억제하는 효과를 보였다.

또한, HFF-1, LX-2, NHLF, ARPE19, KEL-FIB 세포에서도 도 3a 및 도 3b에서 확인할 수 있듯이, TGF-β1(10 ng/ml)으로 유도된 αSMA의 발현 증가는 5 μM 합성예 3 화합물 처리에 의해 현저히 억제됨이 관찰되었다.

<실시예 3> 도파민성 신경세포 대상, ROS 생성 변화 분석

신경세포에서의 높은 ROS 수준은 산화된 지질을 유도하며, 이는 신경세포사멸에 중요한 요소로 알려져 있다. 합성예 화합물이 도파민성 신경 세포로부터의 ROS 생성에 미치는 영향을 확인하기 위하여, N27(rat dopaminergic neural cell, Sigma) 세포를 대상으로 MPP+(1-methyl-4-phenylptridinium) 자극을 통해 ROS 생성을 유도하고 이 조건 하에서 합성예 화합물의 ROS 생성 억제 효능을 관찰하고자 하였다.

N27 세포는 10% FBS, 1 μM angiotensin II 가 포함된 RPMI 배지에서 배양하였으며, 배양된 세포는 6 well plate에 5 x10³ ~ 6 x10³ 세포/well 농도로 분주하였다. ROS 생성 자극원인 MPP+(1-methyl-4-phenylptridinium) 및 합성예 화합물 3(1 μM )을 세포에 처리하였다. 합성예 화합물 처리 24시간 후에, DCF-DA를 사용하여 각 well의 형광(fluorescence)을 측정함으로써 ROS 생성 정도를 확인하였다.

실험 결과, 도 4에서 확인할 수 있듯, MPP+로 유도된 ROS의 생성은 합성예 화합물 처리에 의해 효과적으로 억제되는 것이 관찰되었다.

<실시예 4> 켈로이드 섬유아세포 대상, CTGF 및 COL1A1 유전자 발현 변화 분석

합성예 화합물이 켈로이드 섬유아세포로부터 세포외기질(extracellular matrix)이 생성되는 과정에 미치는 영향을 확인하기 위하여, KEL-FIB(keloid fibroblast) 세포를 대상으로 합성예 3 화합물 처리에 따른 세포외기질 형성 촉진 인자인 CTGF 및 대표적 세포외기질인 collagen type I의 발현 변화를 유전자 수준에서 분석하였다.

KEL-FIB 세포주는 2% FBS가 포함된 DMEM에서 24시간 동안 적응시킨 후 5μM 또는 10μM 농도의 합성예 3 화합물을 1시간 동안 선처리 하였다. CTGF 및 collagen type I 유전자의 발현 유도를 위해 2ng/ml TGF-β1을 처리하고, 24 또는 48시간 이후에 세포로부터 mRNA를 추출하였다. CTGF 및 collagen type 1 유전자의 mRNA 존재 여부 및 발현 정도는 qRT-PCR(Quantitative real-time PCR)을 통해 확인하였다.

실험 결과, 2ng/ml TGF-β1 처리에 의해 CTGF 유전자 및 collagen type I 유전자의 발현이 각각 26배 및 2.3배 증가하였으며, 이때 5μM 또는 10 μM 합성예 3 화합물의 처리에 의해 두 유전자의 발현이 76% 및 75 % 가 억제됨을 확인하였다.

<실시예 5> LPS에 의해 유도된 IL-1β의 발현 변화 분석

인간유래 섬유아세포에서 본 발명의 합성예 화합물의 염증반응에 대한 영향을 확인하기 위해 여러 조직으로부터 유래된 섬유아세포에서 LPS 처리로 증가시킨 IL-1b가 합성예 화합물에 의해 발현이 억제되는지 관찰하였다.

6 well plate에 2x10⁵ 수의 세포를 접종 후 24시간 배양한 뒤 serum이 없는 배양액에서 16시간동안 더 배양한 후에 각 조건에 맞게 합성예 3 화합물을 30분간 전처리하고 LPS로 6시간동안 염증반응을 유도시켰다. IL-1β의 발현은 RT-PCR를 이용하여 확인하였다. 세포로부터 RNeasy mini kit(Qiagen)을 이용하여 total RNA를 분리하고, 분리한 RNA 2ug을 PrimeScript^TM II 1^st strand cDNA synthesis kit(TaKaRa)를 이용하여 cDNA를 합성한 뒤 AccuPower® PCR PreMix(Bioneer)로 PCR을 수행하여 유전자를 증폭시켰다. Target primer에 대한 염기서열은 아래와 같다. IL-1β(forward: 5'-CCACAGACCTTCCAGGAGAATG-3', reverse: 5′-GTGCAGTTCAGTGATCGTACAGG-3'); GAPDH(forward: 5′-GTGGCTGGCTCAGAAAAAGG-3′, reverse: 5′-GGTGGTCCAGGGGTCTTACT-3′); β-actin(forward: 5'-CACCATTGGCAATGAGCGGTTC-3', reverse: 5'-AGGTCTTTGCGGATGTCCACGT-3'). PCR 산물은 1.5% agarose gel에서 전기영동하여 확인하였다.

실험 결과, 도 5에서 확인할 수 있듯, LPS로 유도된 IL-1β는 합성예 3 화합물 처리에 의해 농도 의존적으로 효과적으로 억제됨이 관찰되었다.

<실시예 7> 블레오마이신 유도 폐섬유화 마우스 모델에서 폐섬유증 억제 효과 확인

블레오마이신 유도 폐섬유화 마우스 모델은 5주령, 체중 20 g 전 후의 C57BL/6J계 수컷 마우스를 사용하였다. 실험동물은 각 군당 7마리씩으로 증류수를 경구 투여한 대조군(Control), 블레오마이신으로 폐섬유화를 유발시킨 군(BLM), 블레오마이신을 투여하고 3주 후 양성대조군으로서 100 ㎎/㎏의 닌테다닙(nintedanib)을 매일 경구투여 한 실험군(BLM + NIN), 및 블레오마이신을 투여하고 3주 후 3 mg/kg의 본 발명의 합성예 화합물을 매일 경구투여 한 실험군(BLM + 합성예)으로 나누어 실험을 진행하였다.

닌테다닙과 합성예 화합물은 28일간 1일 1회 경구투여 하였다. 닌테다닙 혹은 합성예 화합물의 마지막 투여 다음날 각각의 동물을 마취한 후 심장천자법으로 채혈 후 희생하였고, BALF(broncho-alveolar lavage fluid) 및 폐조직을 분리하여 추가시험에 사용하였다. 세포 염색인 Hematoxylin & Eosin(H&E) 염색, 섬유화 확인을 위한 Masson's trichrome(MT) 염색을 실시하였으며, 폐조직에서의 αSMA 및 Collagen I 발현율을 확인하였다.

종합적으로 위 조직학적, 면역학적 결과들을 바탕으로, 폐 섬유화 조직분석 분야에서 널리 사용되는 개선된 애쉬크로프트 점수(modified Ashcroft scale)로 정량화하여 음성대조군(control), 실험군(BLM), 양성대조군(BLM + NIN) 대비 합성예 화합물 투여군(BLM + 합성예) 각각의 폐섬유증의 심각도를 평가하였다. 제작된 조직 슬라이드에 대한 조직병리학적 검사는 광학현미경(Carl Zeiss, Oberkochen, Germany)을 이용하여 확인하였다. 실험결과는 SPSS ver. 22.0 통계 프로그램(SPSS Inc., Chicago, IL, USA)을 이용하여 평균과 표준 편차를 구하였으며, 실험군간의 차이의 유의성은 student t-test에 의하여 p<0.05 수준에서 검증하였다.

실험결과, 도 6에서 확인할 수 있듯, H&E 염색법 및 MT 염색법을 통한 조직학적 분석결과, 폐섬유화를 유발시킨 실험군(BLM + vehicle), 양성대조군(BLM + NIN), 합성예 화합물 투여군(BLM + 합성예) 중 합성예 화합물 투여군(BLM + 합성예)에서 폐포(alveolar) 및 세기관지(bronchiole)에 염증세포의 침투 정도가 실험군 및 양성대조군에 비해서 현저하게 낮은 것을 확인하였고, 상피세포 비대의 감소, 폐 구조 변형 저하 및 비정상적인 조직 침착 부위가 감소되었음을 확인하였다.

또한 합성예 화합물 투여군(BLM + 합성예)에서 실험군 및 양성대조군 대비, 섬유화 영역의 크기 및 섬유화에 의한 콜라겐 침착이 현저하게 감소된 것을 확인하였으며, αSMA 발현이 정상군의 수준으로 현저하게 억제되었음을 확인하였다. 따라서 합성예 화합물이 효과적으로 폐섬유증을 개선하는 것으로 확인되었다.

종합적으로 위 조직학적, 면역학적 결과들을 바탕으로, 폐 섬유화 조직분석 분야에서 널리 사용되는 개선된 애쉬크로프트 점수(modified Ashcroft scale)로 정량화하여 음성대조군(control), 실험군(BLM), 양성대조군(BLM + NIN) 대비 합성예 화합물 투여군(BLM + 합성예) 각각의 폐섬유증의 심각도를 평가한 결과, 정상소견을 보이는 음성대조군(PBS)에서는 점수가 0.4±0.55 이었으며, 블레오마이신에 의하여 폐섬유화를 유발시킨 실험군(BLM)은 5.4±0.5이었다. 양성대조군(BLM + NIN)의 개선된 애쉬크로프트 점수는 5.0±0로 감소하였고, 합성예 화합물이 투여된 실험군(BLM + 합성예)에서의 개선된 애쉬크로프트 점수는 3.44±0.88으로서 본 발명의 화합물이 기존의 특발성 폐섬유증의 치료제로 사용되던 닌테다닙에 비하여 효과적으로 폐섬유증을 개선하는 것으로 확인되었다.

<실시예 8> STAM 마우스 모델에서 비알코올성 지방간염 및 간섬유화 치료 효과 확인

본 발명의 합성예 화합물의 비알코올성 지방간염 및 간섬유화 치료 효과를 확인하기 위하여 비알코올성 지방간염 및 섬유화가 유도된 STAM mice(6주령, female, SMC laborlabories Inc, Japan)를 사용하였다. 마우스들은 모두 표준조건에서 유지하였다. 실험동물은 각 군당 7마리씩으로 증류수를 경구 투여한 정상대조군(negative control), 비알코올성 지방간염 및 섬유화가 유도된 STAM 군(vehicle control), STAM 양성대조군으로서 10mg/kg의 텔미사탄(telmisartane)을 매일 경구투여한 실험군(STAM + TEL), 및 3 또는 10 mg/kg의 합성예 화합물을 매일 경구투여한 실험군(STAM + 합성예)으로 나누어 실험을 진행하였다. 텔미사탄과 합성예 화합물은 28일간 1일 1회 경구투여 하였다.

시험 종료 후, 동물을 마취하여 개체 별로 간 조직을 적출하고, 검사를 위한 혈액을 취하였다. 간 조직의 중량을 측정하고, 사진을 찍었다. 조직을 10 % 중성 완충 포르말린용액(10 % buffered neutral formalin)에 고정하였다. 고정된 조직을 일정한 두께로 삭정한 다음, 일반적인 조직처리과정을 거쳐 파라핀 포매 하여 4~5 ㎛의 조직절편을 제작한 후, 일반적인 염색방법인 Hematoxylin & Eosin(H&E stain) 염색, 섬유화 확인을 위한 Sirius red 염색 및 지질의 생성 정도를 확인하기 위해 Oil red O working solution 염색을 실시하여 조직병리학적 소견을 관찰하였다.

종합적으로 위 조직학적 결과들을 바탕으로, 간염 및 섬유화 조직분석 분야에서 널리 사용되는 개선된 NAS(Nonalcoholic Fatty Liver Disease Activity Dcore) 점수로 정량화하여 음성대조군(control), 실험군(STAM), 양성대조군(STAM + TEL) 대비 합성예 화합물 투여군(STAM + 합성예) 각각의 간염 및 간선유화의 심각도를 평가한 결과, 정상소견을 보이는 정상대조군(normal control)에서는 점수가 0.0±0.0 이었으며, STAM 실험군(STAM + vehicle)은 4.8±0.7이었다. 양성대조군(STAM + TEL)의 개선된 NAS 점수는 2.8±0.7로 감소하였고, 합성예 화합물이 투여된 실험군(STAM + 합성예)에서의 개선된 NAS 점수는 2.6±0.7으로 확인되었다.

또한 간 섬유화 정도 확인을 위한 Sirius red 염색 결과에 의하면, 정상소견을 보이는 정상대조군(normal control)에서는 간 섬유화 영역(fibrosis area)가 0.29±0.06 이었으며, STAM 실험군(STAM + vehicle)은 0.93±0.36이었다. 양성대조군(STAM + TEL)의 개선된 섬유화 영역은 0.44±0.15로 감소하였고, 합성예 화합물이 투여된 실험군(STAM + 합성예)의 개선된 섬유화 영역은 0.49±0.16으로 감소함을 확인하였다.

본 발명의 합성예 화합물이 비알코올성 간염 및 간섬유화을 효과적으로 개선하는 것으로 확인되었다.

<실시예 9> 뇌손상 치료 효과 확인

합성예 화합물의 뇌질환 또는 질병을 예방 또는 치료하는 효과를 시험하기 위하여 파킨슨 질환 마우스(alpha-Synuclein A53T mutant transgenic mouse)모델을 확립하였다.

마우스들은 모두 표준조건에서 유지하였다. 실험동물은 각 군당 8마리씩으로 증류수를 경구 투여한 정상대조군(negative control), 파킨슨 질환 유도군(vehicle control), 25 mg/kg의 합성예 화합물을 매일 경구투여한 실험군(합성예)으로 나누어 실험을 진행하였다. 정상대조군은 생리식염수를 투여하고, 합성예 화합물은 2주간 1일 1회 경구투여 한 후, 행동변화 실험 및 조직병리학적 실험을 수행하였다.

행동변화는 로타로드(Rota rod), 극(pole) 테스트 및 뒷다리 걸쇠(hindlimb clasping)로 분석하였으며, 각 동물당 3번의 실험의 평균값을 측정하였다.

시험 종료 후, 동물을 마취하여 개체 별로 뇌 조직을 적출하고, 조직을 4 % 중성 완충 포르말린용액(10 % buffered neutral formalin)에 고정하였다. 고정된 조직을 일정한 두께로 삭정한 다음, 일반적인 조직처리과정을 거쳐 파라핀 포매 하여 4~5 ㎛의 조직절편을 제작하였다. 이후, 선조체(striatum)에서의 단백질 응집 수준에 따른 파킨슨 병 병리 지표의 개선 여부를 확인하기 위하여 먼저 인산화된-Serin-129 alpha-synuclein으로 표지한 다음 Thioflavin-T 염색을 실시하여 조직병리학적 소견을 관찰하였다.

실험결과, 합성예 화합물 투여군에서 로타로드(Rota rod), 극(pole) 테스트 및 뒷다리 걸쇠(hindlimb clasping)등의 행동변화 분석 결과 파킨슨 유사 행동 증상이 50%이상 개선되었으며, 파킨슨 병증의 중요 병리학적 지표인 a-synuclein의 엉킴(aggregation) 및 축적이 50%이상 개선되는 것을 관찰하였다.

결론적으로, 본 발명의 합성예 화합물이 파킨슨 병증을 효과적으로 개선하는 것으로 확인되었다.

Claims

삭제
하기 화학식 I-1로 표시되는 화합물, 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
<화학식 I-1>

상기 식에서,
X는 NR3이고,
R3는 Ra-L-, Ra-L-CO-, Ra-L-NHCO-, Ra-L-OCO-, 또는 Ra-L-SO₂-에서 선택되고;
상기 Ra는 수소, 중수소, 시안, 할로겐, 나이트로, 치환 또는 비치환된 C1-C5 직쇄 또는 분지된 알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C8 사이클로알킬, 치환 또는 비치환된 C5-C20 아릴, 또는 치환 또는 비치환된 C3-C20 헤테로아릴 중에서 선택되며, 상기 헤테로아릴은 O, N, S 중 1, 2 또는 3개의 헤테로원자를 포함하고;
상기 L은 직접 결합, C1-C5 알킬렌, 또는 치환 또는 비치환된 C5-C10 아릴렌 중에서 선택되며;
상기 R4는 수소, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C5 알킬 중에서 선택되며;
A는 CR5 또는 N, B는 CR6 또는 N, D는 CR7, E는 CR8 또는 N, G는 CR9 또는 N이며, A, B, E 및 G 중 N은 0 또는 1개이고;
상기 R5 내지 R9는 같거나 상이하고, 각각 독립적으로 수소, 중수소, 시안, 할로겐, 카보닐, 나이트로, 카복실, C1-C5 알콕시, 치환 또는 비치환된 C1-C5 직쇄 또는 분지된 알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C8 사이클로알킬, 치환 또는 비치환된 아민, 또는 치환 또는 비치환된 C5-C20 아릴 중에서 선택되고, 상기 R5 내지 R9 중 오쏘(ortho) 위치로 치환된 2개의 치환기는 서로 결합하여 치환 또는 비치환된 방향족 탄화수소 고리를 형성할 수 있고, 이때 방향족 탄화수소 고리는 N, O, S로부터 선택된 0, 1, 2 또는 3개의 헤테로원자를 포함하는 C3~C10의 헤테로아릴 고리 또는 아릴 고리를 형성할 수 있고;
상기 치환된 C1-C5 직쇄 또는 분지된 알킬은 임의로 부분 불포화일 수 있고, 독립적으로 중수소, 할로겐, 시안, 나이트로, 카복실, 치환 또는 비치환된 아민, 치환 또는 비치환된 C5-C20 아릴 또는 C3-C20 헤테로아릴, 치환 또는 비치환된 C3-C8 사이클로알킬에서 선택되는 1개 이상의 치환기로 치환될 수 있고;
상기 치환된 C3-C8 사이클로알킬은 독립적으로 중수소, 할로겐, 시안, 나이트로, 카복실, 치환 또는 비치환된 아민, 치환 또는 비치환된 C5-C20 아릴 또는 C3-C20 헤테로아릴, C1-C5 알콕시, C1-C5 할로알킬에서 선택되는 1개 이상의 치환기로 치환될 수 있고;
상기 치환된 C5-C20 아릴 또는 치환된 C3-C20 헤테로아릴은 독립적으로 중수소, 할로겐, 시안, 나이트로, 카복실, 치환 또는 비치환된 아민, C1-C5 알콕시, C1-C5 할로알킬, C1-C10 알킬, C3-C8 사이클로알킬 C1-C10 알킬, C5-C20 아릴 C1-C10 알킬에서 선택되는 1개 이상의 치환기로 치환될 수 있고;
상기 치환된 아민은 하나 또는 둘의 C1-C5 알킬기로 치환될 수 있고;
상기 치환된 C5-C10 아릴렌은 C1-C3 알킬, 할로겐, 시안, 아민, 나이트로, 중수소 중에서 선택되는 1개 이상의 치환기로 치환될 수 있다.
하기 화학식 I-2로 표시되는 화합물, 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
<화학식 I-2>

상기 식에서,
Y는 NR3이고,
R3는 Ra-L-이고;
상기 Ra는 수소, 중수소, 시안, 할로겐, 나이트로, 치환 또는 비치환된 C1-C5 직쇄 또는 분지된 알킬, 치환 또는 비치환된 C3-C8 사이클로알킬, 치환 또는 비치환된 C5-C10 아릴, 또는 치환 또는 비치환된 C3-C10 헤테로아릴 중에서 선택되며, 상기 헤테로아릴은 O, N, S 중 1, 2 또는 3개의 헤테로원자를 포함하고;
상기 L은 C1-C5 알킬렌이고;
상기 R4는 수소, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C5 알킬 중에서 선택되며;
A는 CR5 또는 N, B는 CR6 또는 N, D는 CR7, E는 CR8 또는 N, G는 CR9 또는 N이며, A, B, E 및 G 중 적어도 어느 하나는 N이고;
상기 R5 내지 R9는 같거나 상이하고, 각각 독립적으로 수소, 중수소, 시안, 할로겐, 카복실, 또는 치환 또는 비치환된 C1-C5 직쇄 또는 분지된 알킬 중에서 선택되고, 상기 R5 내지 R9 중 오쏘(ortho)위치로 치환된 2개의 치환기는 서로 결합하여 치환 또는 비치환된 방향족 탄화수소 고리를 형성할 수 있고, 이때 방향족 탄화수소 고리는 N, O, S로부터 선택된 0, 1, 2 또는 3개의 헤테로원자를 포함하는 C3~C10의 헤테로아릴 고리 또는 아릴 고리를 형성할 수 있고;
상기 치환된 C1-C5 직쇄 또는 분지된 알킬은 임의로 부분 불포화일 수 있고, 독립적으로 중수소, 할로겐, 시안, 나이트로, 카복실, 치환 또는 비치환된 아민, 치환 또는 비치환된 C5-C10 아릴 또는 C3-C10 헤테로아릴, 치환 또는 비치환된 C3-C8 사이클로알킬에서 선택되는 1개 이상의 치환기로 치환될 수 있고;
상기 치환된 C3-C8 사이클로알킬은 독립적으로 중수소, 할로겐, 시안, 나이트로, 카복실, 치환 또는 비치환된 아민, 치환 또는 비치환된 C5-C10 아릴 또는 C3-C10 헤테로아릴, C1-C5 알콕시, C1-C5 할로알킬에서 선택되는 1개 이상의 치환기로 치환될 수 있고;
상기 치환된 C5-C10 아릴 또는 치환된 C3-C10 헤테로아릴은 독립적으로 중수소, 할로겐, 시안, 나이트로, 카복실, 치환 또는 비치환된 아민, C1-C5 알콕시, C1-C5 할로알킬, C1-C10 알킬, C3-C8 사이클로알킬 C1-C10 알킬, C5-C20 아릴 C1-C10 알킬에서 선택되는 1개 이상의 치환기로 치환될 수 있고;
상기 치환된 아민은 하나 또는 둘의 C1-C5 알킬기로 치환될 수 있다.
제2항에 있어서,
상기 R3는 Ra-L-, Ra-L-CO-, Ra-L-NHCO-, Ra-L-OCO-, 또는 Ra-L-SO₂-에서 선택되고;
L은 직접 결합, C1-C3 알킬렌, 또는 치환 또는 비치환된 페닐렌 중에서 선택되고;
A는 CR5 또는 N, B는 CR6, D는 CR7, E는 CR8, G는 CR9 또는 N이며, A 및 G 중 적어도 어느 하나는 N인 것인,
화합물 또는 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
제3항에 있어서,
상기 R3는 Ra-L-이고;
L은 C1-C3 알킬렌이고;
A는 CR5 또는 N, B는 CR6, D는 CR7, E는 CR8, G는 CR9 또는 N이며, A 및 G 중 적어도 어느 하나는 N인 것인,
화합물 또는 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
삭제
삭제
삭제
제2항에 있어서,
상기 R3는 Ra-L-, Ra-L-CO-, Ra-L-NHCO-, Ra-L-OCO-, 또는 Ra-L-SO₂-에서 선택되고;
L은 직접 결합, C1-C3 알킬렌, 또는 치환 또는 비치환된 페닐렌 중에서 선택되며;
A는 CR5, B는 CR6, D는 CR7, E는 CR8 및 G는 CR9인 것인,
화합물 또는 용매화물, 입체이성질체 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
제2항에 있어서,
상기 화학식 I-1로 표시되는 화합물은 하기 화합물로부터 선택되는 것인, 화학식 I-1로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
6-벤질-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-벤질-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올
6-(4-플루오로벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-(4-메틸벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
4-((3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)메틸)벤조나이트릴;
6-(3,5-다이플루오로벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
2-(피리딘-2-일)-6-(3-(트리플루오로메틸)벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-(나프탈렌-2-일메틸)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
1-(4,5-다이하이드로-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6(7H)-일)부탄-1-온;
1-(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)에탄-1-온;
6-(4-메톡시벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-에틸-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-(프로프-2-인-1-일)-2(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-프로필-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-알릴-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)(페닐)메타논;
벤질 3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복실레이트;
(4-클로로페닐)(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-5-일)메타논;
에틸 3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복실레이트;
N-사이클로헥실-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드;
퓨란-2-일(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)메타논;
6-(메틸술포닐)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-(페닐술포닐)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
N-(4-플루오로페닐)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드;
N-(4-플루오로벤질)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드;
N-(퓨란-2-일메틸)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드;
N-(4-클로로페네틸)-3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복사마이드;
6-(나프탈렌-2-일술포닐)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
4-나이트로벤질 3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-카복실레이트;
5-(4-사이클로프로필-1H-이미다졸-1-일)-2-플루오로-4-메틸페닐)(3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,5,7-테트라하이드로-6H-피라졸로[3,4-c]피리딘-6-일)메타논;
6-벤질-2-(5-클로로피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
4-(6-벤질-3-하이드록시-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-2-일)벤조산;
6-벤질-2-(4-브로모페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-벤질-2-페닐-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-벤질-2-(2-클로로페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-벤질-2-(2-메톡시페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-벤질-3-메톡시-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘;
6-(6-벤질-3-하이드록시-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-2-일)니코티노나이트릴;
6-벤질-2-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-벤질-2-(3-플루오로피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-벤질-2-(6-메틸피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-벤질-2-(6-메틸-4-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-벤질-2-(티에노[3,2-c]피리딘-4-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
2-(피리딘-2-일)-6-(피리딘-2-일메틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
2-(피리딘-2-일)-6-(피리딘-4-일메틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-(4-(다이메틸아미노)벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-(3-(다이메틸아미노)벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
2-(6-아미노피리딘-2-일)-6-벤질-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
2-(피리딘-2-일)-6-(퀴놀린-6-일메틸)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올;
6-(이소퀴놀린-3-일메틸)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[3,4-c]피리딘-3-올.
제3항에 있어서,
상기 화학식 I-2로 표시되는 화합물은 하기 화합물로부터 선택되는 것인, 화학식 I-2로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염.
5-벤질-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-벤질-2-(5-트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-벤질-2-(5-클로로피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-벤질-2-(6-메틸-4-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-벤질-2-(티에노[3,2-c]피리딘-4-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-(나프탈렌-2-일메틸)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-(나프탈렌-2-일메틸)-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-(3-(트리플루오로메틸)벤질)-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-(3,5-다이플루오로벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-(3,5-다이플루오로벤질)-2-(5-트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-벤질-2-(6-메틸피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-벤질-2-(6-트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
6-(5-벤질-3-하이드록시-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-2-일)니코티노나이트릴;
5-벤질-2-(3-플루오로피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-벤질-2-(티에노[3,2-c]피리딘-4-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-벤질-2-(6-메틸-4-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-(4-(다이메틸아미노)벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-(3-(다이메틸아미노)벤질)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
4-((3-하이드록시-2-(피리딘-2-일)-2,4,6,7-테트라하이드로-5H-피라졸로[4,3-c]피리딘-5-일)메틸)벤조나이트릴;
4-((3-하이드록시-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-2,4,6,7-테트라하이드로-5H-피라졸로[4,3-c]피리딘-5-일)메틸)벤조나이트릴;
2-(피리딘-2-일)-5-(3-(트리플루오로메틸)벤질)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-(3-(트리플루오로메틸)벤질)-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-(이소퀴놀린-3-일메틸)-2-(피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-(이소퀴놀린-3-일메틸)-2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올.
하기 화합물로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
2-(5-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-인다졸-3-올;
5-벤질-2-(4-브로모페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
5-벤질-2-(2-클로로페닐)-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-3-올;
4-(5-벤질-3-하이드록시-4,5,6,7-테트라하이드로-2H-피라졸로[4,3-c]피리딘-2-일)벤조산.
제2항 또는 제3항에 있어서,
상기 염은 염산, 브롬화수소산, 황산, 인산, 질산, 아세트산, 글리콜산, 락트산, 피루브산, 말론산, 석신산, 글루타르산, 푸마르산, 말산, 만델산, 타르타르산, 시트르산, 아스코르브산, 팔미트산, 말레산, 벤조산, 하이드록시벤조산, 페닐아세트산, 신남산, 살리실산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 벤젠설폰산 및 톨루엔설폰산으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 산에 의해 유도된 염 형태인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
유효성분으로서 제2항, 제3항 및 제10항 내지 제12항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염; 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 암, 켈로이드증, 간섬유화증, 간경화증, 폐섬유화증, 파킨슨병, 헌팅턴병, 근위축성 측상 경화증, 다발성 경화증, 허혈성 또는 외상성 뇌 손상, 망막섬유화중, 황반변성, 염증에서 선택되는 산화성 스트레스와 관련된 질환을 예방 또는 치료하기 위한 약제학적 조성물.
제14항에 있어서,
상기 약제학적으로 허용가능한 담체는 부형제, 희석제, 붕해제, 결합제, 활택제, 계면활성제, 유화제, 현탁제 및 희석제로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.