WO2024128147A1 - 組成物、剤、及び、それらの製造方法。 - Google Patents
組成物、剤、及び、それらの製造方法。 Download PDFInfo
- Publication number
- WO2024128147A1 WO2024128147A1 PCT/JP2023/043949 JP2023043949W WO2024128147A1 WO 2024128147 A1 WO2024128147 A1 WO 2024128147A1 JP 2023043949 W JP2023043949 W JP 2023043949W WO 2024128147 A1 WO2024128147 A1 WO 2024128147A1
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- growth factor
- hepatocyte growth
- ginseng
- lotus
- lotus seed
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 79
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 21
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 58
- 235000003255 Carthamus tinctorius Nutrition 0.000 claims abstract description 29
- 244000020518 Carthamus tinctorius Species 0.000 claims abstract description 29
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 claims abstract description 29
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 claims abstract description 28
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 claims abstract description 28
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims abstract description 27
- 235000006200 Glycyrrhiza glabra Nutrition 0.000 claims abstract description 19
- 241000180649 Panax notoginseng Species 0.000 claims abstract description 19
- 235000003143 Panax notoginseng Nutrition 0.000 claims abstract description 19
- 235000001453 Glycyrrhiza echinata Nutrition 0.000 claims abstract description 18
- 235000017382 Glycyrrhiza lepidota Nutrition 0.000 claims abstract description 18
- 229940010454 licorice Drugs 0.000 claims abstract description 18
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 claims abstract description 18
- 241001106041 Lycium Species 0.000 claims abstract description 12
- 235000013073 Acorus gramineus Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 244000001632 Acorus gramineus Species 0.000 claims abstract description 11
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 claims abstract description 8
- 240000004670 Glycyrrhiza echinata Species 0.000 claims abstract 4
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 claims description 80
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 claims description 80
- 235000006510 Nelumbo pentapetala Nutrition 0.000 claims description 79
- 230000012378 hepatocyte growth factor production Effects 0.000 claims description 27
- 230000037319 collagen production Effects 0.000 claims description 24
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims description 22
- 230000032683 aging Effects 0.000 claims description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 19
- 241000132012 Atractylodes Species 0.000 claims description 18
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 17
- 241001247821 Ziziphus Species 0.000 claims description 15
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 15
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 13
- 235000015459 Lycium barbarum Nutrition 0.000 claims description 12
- 235000015468 Lycium chinense Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000000411 inducer Substances 0.000 claims description 10
- 235000017089 Scutellaria baicalensis Nutrition 0.000 claims description 9
- 240000004534 Scutellaria baicalensis Species 0.000 claims description 9
- 244000205574 Acorus calamus Species 0.000 claims description 8
- 235000011996 Calamus deerratus Nutrition 0.000 claims description 8
- 241000207929 Scutellaria Species 0.000 claims description 7
- 229940126670 AB-836 Drugs 0.000 claims description 3
- 235000007652 Arbutus Nutrition 0.000 claims description 3
- 240000008327 Arbutus unedo Species 0.000 claims description 3
- MIBATSHDJRIUJK-ROJLCIKYSA-N Neferine Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@@H]1C2=CC(OC=3C(=CC=C(C[C@@H]4C5=CC(OC)=C(OC)C=C5CCN4C)C=3)O)=C(OC)C=C2CCN1C MIBATSHDJRIUJK-ROJLCIKYSA-N 0.000 claims description 3
- MIBATSHDJRIUJK-UHFFFAOYSA-N Neferine Natural products C1=CC(OC)=CC=C1CC1C2=CC(OC=3C(=CC=C(CC4C5=CC(OC)=C(OC)C=C5CCN4C)C=3)O)=C(OC)C=C2CCN1C MIBATSHDJRIUJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 241000208367 Euonymus Species 0.000 claims description 2
- 241000205585 Aquilegia canadensis Species 0.000 claims 3
- 244000241838 Lycium barbarum Species 0.000 claims 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 17
- 235000003373 curcuma longa Nutrition 0.000 abstract description 15
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 abstract description 9
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 abstract description 9
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 abstract description 9
- 244000163122 Curcuma domestica Species 0.000 abstract description 6
- 244000126002 Ziziphus vulgaris Species 0.000 abstract description 4
- 244000084791 Curculigo orchioides Species 0.000 abstract description 2
- 240000009138 Curcuma zedoaria Species 0.000 abstract description 2
- 235000017617 Lonicera japonica Nutrition 0.000 abstract description 2
- 244000167230 Lonicera japonica Species 0.000 abstract description 2
- 235000003405 Curcuma zedoaria Nutrition 0.000 abstract 1
- 241000804384 Cynomorium songaricum Species 0.000 abstract 1
- 210000000630 fibrocyte Anatomy 0.000 abstract 1
- 102000003745 Hepatocyte Growth Factor Human genes 0.000 description 33
- 108090000100 Hepatocyte Growth Factor Proteins 0.000 description 33
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 25
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 240000004371 Panax ginseng Species 0.000 description 23
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 21
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 19
- 239000010434 nepheline Substances 0.000 description 17
- 229910052664 nepheline Inorganic materials 0.000 description 17
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 15
- 241001570521 Lonicera periclymenum Species 0.000 description 14
- 235000003392 Curcuma domestica Nutrition 0.000 description 13
- 241000202807 Glycyrrhiza Species 0.000 description 13
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 13
- 235000013976 turmeric Nutrition 0.000 description 13
- 244000008991 Curcuma longa Species 0.000 description 11
- 244000241872 Lycium chinense Species 0.000 description 11
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 11
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 10
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerol Natural products OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100021866 Hepatocyte growth factor Human genes 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 3
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 3
- VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N curcumin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(\C=C\C(=O)CC(=O)\C=C\C=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 3
- -1 etc.) Chemical compound 0.000 description 3
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 3
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 241001290610 Abildgaardia Species 0.000 description 2
- 241000208838 Asteraceae Species 0.000 description 2
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 description 2
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 description 2
- 208000020084 Bone disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 244000166124 Eucalyptus globulus Species 0.000 description 2
- 244000303040 Glycyrrhiza glabra Species 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 2
- 235000002789 Panax ginseng Nutrition 0.000 description 2
- 244000082204 Phyllostachys viridis Species 0.000 description 2
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 description 2
- 241000219100 Rhamnaceae Species 0.000 description 2
- 241000245665 Taraxacum Species 0.000 description 2
- 241000234299 Zingiberaceae Species 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 description 2
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 210000004720 cerebrum Anatomy 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 2
- 229940107131 ginseng root Drugs 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 244000237330 gutta percha tree Species 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 2
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 2
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 2
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- JLPULHDHAOZNQI-ZTIMHPMXSA-N 1-hexadecanoyl-2-(9Z,12Z-octadecadienoyl)-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC JLPULHDHAOZNQI-ZTIMHPMXSA-N 0.000 description 1
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005541 ACE inhibitor Substances 0.000 description 1
- WBZFUFAFFUEMEI-UHFFFAOYSA-M Acesulfame k Chemical compound [K+].CC1=CC(=O)[N-]S(=O)(=O)O1 WBZFUFAFFUEMEI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 241000234270 Amaryllidaceae Species 0.000 description 1
- 241000209524 Araceae Species 0.000 description 1
- 235000003826 Artemisia Nutrition 0.000 description 1
- 235000003261 Artemisia vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 240000006891 Artemisia vulgaris Species 0.000 description 1
- 200000000007 Arterial disease Diseases 0.000 description 1
- 241000512259 Ascophyllum nodosum Species 0.000 description 1
- 238000009020 BCA Protein Assay Kit Methods 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 241000208828 Caprifoliaceae Species 0.000 description 1
- WLYGSPLCNKYESI-RSUQVHIMSA-N Carthamin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1[C@@]1(O)C(O)=C(C(=O)\C=C\C=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)C(\C=C\2C([C@](O)([C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)C(O)=C(C(=O)\C=C\C=3C=CC(O)=CC=3)C/2=O)=O)=C1O WLYGSPLCNKYESI-RSUQVHIMSA-N 0.000 description 1
- 241000208809 Carthamus Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 description 1
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 1
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 1
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 1
- 102000001187 Collagen Type III Human genes 0.000 description 1
- 108010069502 Collagen Type III Proteins 0.000 description 1
- 241000190633 Cordyceps Species 0.000 description 1
- 235000014375 Curcuma Nutrition 0.000 description 1
- 235000003398 Curcuma aromatica Nutrition 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 229920000045 Dermatan sulfate Polymers 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 208000007342 Diabetic Nephropathies Diseases 0.000 description 1
- 206010014561 Emphysema Diseases 0.000 description 1
- 239000000940 FEMA 2235 Substances 0.000 description 1
- 241000220485 Fabaceae Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 229920000855 Fucoidan Polymers 0.000 description 1
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 1
- 235000000554 Glycyrrhiza uralensis Nutrition 0.000 description 1
- 240000008917 Glycyrrhiza uralensis Species 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010019663 Hepatic failure Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 235000014486 Hydrangea macrophylla Nutrition 0.000 description 1
- 244000267823 Hydrangea macrophylla Species 0.000 description 1
- 241000270322 Lepidosauria Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 235000009811 Momordica charantia Nutrition 0.000 description 1
- 244000302512 Momordica charantia Species 0.000 description 1
- 206010058116 Nephrogenic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000007072 Nerve Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 241000209477 Nymphaeaceae Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 235000011432 Prunus Nutrition 0.000 description 1
- 241000220299 Prunus Species 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241000405414 Rehmannia Species 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 1
- 241000208292 Solanaceae Species 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 239000004376 Sucralose Substances 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 241000292546 Taraxacum mongolicum Species 0.000 description 1
- 235000005187 Taraxacum officinale ssp. officinale Nutrition 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 241000219995 Wisteria Species 0.000 description 1
- 206010048222 Xerosis Diseases 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 235000008529 Ziziphus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 235000010358 acesulfame potassium Nutrition 0.000 description 1
- 229960004998 acesulfame potassium Drugs 0.000 description 1
- 239000000619 acesulfame-K Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002333 angiotensin II receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940044094 angiotensin-converting-enzyme inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000003510 anti-fibrotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 235000009052 artemisia Nutrition 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 235000013871 bee wax Nutrition 0.000 description 1
- 239000012166 beeswax Substances 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000003913 calcium metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 208000015114 central nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 201000007717 corneal ulcer Diseases 0.000 description 1
- 235000012754 curcumin Nutrition 0.000 description 1
- 229940109262 curcumin Drugs 0.000 description 1
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- AVJBPWGFOQAPRH-FWMKGIEWSA-L dermatan sulfate Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H](OS([O-])(=O)=O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C([O-])=O)O1 AVJBPWGFOQAPRH-FWMKGIEWSA-L 0.000 description 1
- 229940051593 dermatan sulfate Drugs 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 208000033679 diabetic kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N diferuloylmethane Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C=CC(=O)CC(=O)C=CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 208000000718 duodenal ulcer Diseases 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 235000021323 fish oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 208000023589 ischemic disease Diseases 0.000 description 1
- MDWCIKACMBMJFA-UHFFFAOYSA-N isoquinolin-1-yl(phenyl)methanone Chemical class N=1C=CC2=CC=CC=C2C=1C(=O)C1=CC=CC=C1 MDWCIKACMBMJFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 208000007903 liver failure Diseases 0.000 description 1
- 231100000835 liver failure Toxicity 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 230000009245 menopause Effects 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000004031 neuronal differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000003900 neurotrophic factor Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 206010035653 pneumoconiosis Diseases 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 208000008128 pulmonary tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 229940083466 soybean lecithin Drugs 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 1
- 235000019408 sucralose Nutrition 0.000 description 1
- BAQAVOSOZGMPRM-QBMZZYIRSA-N sucralose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](Cl)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@]1(CCl)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CCl)O1 BAQAVOSOZGMPRM-QBMZZYIRSA-N 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 239000001052 yellow pigment Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/25—Araliaceae (Ginseng family), e.g. ivy, aralia, schefflera or tetrapanax
- A61K36/258—Panax (ginseng)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
- A61K36/286—Carthamus (distaff thistle)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/35—Caprifoliaceae (Honeysuckle family)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
- A61K36/484—Glycyrrhiza (licorice)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/72—Rhamnaceae (Buckthorn family), e.g. buckthorn, chewstick or umbrella-tree
- A61K36/725—Ziziphus, e.g. jujube
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/81—Solanaceae (Potato family), e.g. tobacco, nightshade, tomato, belladonna, capsicum or jimsonweed
- A61K36/815—Lycium (desert-thorn)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
- A61K36/888—Araceae (Arum family), e.g. caladium, calla lily or skunk cabbage
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
- A61K36/906—Zingiberaceae (Ginger family)
- A61K36/9066—Curcuma, e.g. common turmeric, East Indian arrowroot or mango ginger
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
- A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
- A61K8/9794—Liliopsida [monocotyledons]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
Definitions
- the present invention provides a composition that has excellent fibroblast proliferation promoting effects, collagen production promoting effects, and/or hepatocyte growth factor production inducing effects.
- Collagen is said to account for 30% of the proteins that make up the human body, and is present not only in the skin but in every part of the body. Specifically, collagen is found in large amounts in bones, ligaments, tendons, blood vessels, dermis, etc., and is known to play a very important role in building these tissues. For example, osteoporosis caused by aging or menopause is thought to be caused by an imbalance in calcium metabolism, but a lack of collagen is also one of the causes. Collagen present inside the bones maintains the flexibility of the bones, preventing them from becoming brittle or prone to breaking.
- fibroblasts are cells that not only produce collagen, but also produce various extracellular matrices, and because a decrease in fibroblasts leads to tissue aging, there is a need for the development of a composition that promotes fibroblast proliferation.
- plant-derived extracts that have fibroblast activation and collagen production promotion effects are known (see Patent Document 1).
- plant-derived herbal medicines or extracts thereof that have type III collagen production promotion effects are also known (see Patent Document 2).
- Hepatocyte growth factor is a type of cytokine involved in tissue regeneration and repair in the body. Hepatocyte growth factor acts on various cells other than hepatocytes. Specifically, hepatocyte growth factor is known to promote the proliferation of epithelial cells and endothelial cells, and to act as a neurotrophic factor for nerve cells. Hepatocyte growth factor also exhibits anti-fibrotic, anti-inflammatory, angiogenesis-promoting, and cell death-inhibiting effects, and is thought to be effective in the treatment and/or prevention of various diseases.
- hepatocyte growth factor production inducers include angiotensin-converting enzyme inhibitors and angiotensin II receptor antagonists (see Patent Document 3), those that contain glycosaminoglycans such as dermatan sulfate and chondroitin sulfate as active ingredients (see Patent Document 4), and sugar compounds such as fucoidan derived from Kagome kelp (see Patent Document 5).
- extracts derived from plants and having hepatocyte growth factor production inducing activity there are known ones that use processed bitter melon as the active ingredient (see Patent Document 6), ones that use processed cordyceps as the active ingredient (see Patent Document 7), ones that use as the active ingredient an extract obtained from dandelion (Hokouei), which is the whole plant with roots of various Taraxacum plants such as Taraxacum mongolicum of the Asteraceae family (see Patent Document 8), extracts of Goji berries, Rehmannia rotunda, Eucommia ulmoides, etc. (see Patent Document 9), extracts of bamboo leaves, Artemisia sativa, Atractylodes orbiculatus, etc.
- Patent Document 10 Panax notoginseng, Turmeric, and snake gall
- Patent Document 11 granular foods containing Panax notoginseng, Turmeric, and snake gall
- the present inventors have disclosed a hepatocyte growth factor production inducer consisting of multiple plant extracts such as lotus seed core, safflower, Goji berries, Calamus umbellata, and Eucommia ulmoides (see Patent Document 12).
- the problem that the present invention aims to solve is to provide a composition that has the effect of inducing the production of hepatocyte growth factor, and further has the effect of promoting fibroblast proliferation and/or collagen production.
- the present invention was completed after discovering that an extract extracted using a polar solvent from two or more selected from safflower, atractylodes atractylodes, lycium berry, acorus gramineus, corn syrup, ginseng, Panax notoginseng, honeysuckle, jujube, licorice, Xiangyang, Scutellaria baicalensis, Euonymus nigra and lotus seed core exhibits excellent fibroblast proliferation promoting effects and/or collagen production promoting effects, as well as hepatocyte growth factor production inducing effects.
- the present invention is a medicinal, edible, and/or cosmetic composition containing lotus seed core, acorus gramineus, ginseng, and Panax notoginseng.
- another aspect of the present invention may be a medicinal, edible, and/or cosmetic composition containing one or more selected from the group consisting of safflower, lycium bark, wolfberry, scutellaria, honeysuckle, jujube, licorice, xianmou, scutellaria baicalensis, and ginseng root.
- the present invention also relates to a medicinal, edible, and/or cosmetic composition containing lotus seed core, Acorus gramineus, ginseng, Panax notoginseng, safflower, Atractylodes arvensis, Lycium frutescens, Scutellaria baicalensis, honeysuckle, jujube, licorice, Xianbao, Scutellaria baicalensis, and Eucalyptus rhizome, and may also be a medicinal, edible, and/or cosmetic composition containing a polar solvent extract of lotus seed core, Acorus gramineus, ginseng, Panax notoginseng, safflower, Atractylodes arvensis, Lycium frutescens, Scutellaria baicalensis, honeysuckle, jujube, licorice, Xianbao, Scutellaria baicalensis, and Eucalyp
- Another aspect of the present invention may be a fibroblast proliferation promoter, a composition for promoting fibroblast proliferation, a collagen production promoter, and/or a composition for promoting collagen production, which contain the composition as an active ingredient, or a hepatocyte growth factor production inducer and/or a composition for inducing hepatocyte growth factor production, which contain the composition as an active ingredient.
- the present invention provides a method for producing a composition, in which the lotus seed core is obtained from lotus seeds that have been aged through an aging process, and the aging process is a process of preserving lotus seeds whose surface color tone has a value of 5 or more on the Munsell color scale until the value of the surface becomes 4 or less.
- the aging step may be a step of storing the lotus seeds at a temperature of 10°C to 50°C for 5 to 100 days.
- the lotus seed core contains 0.3% or more by weight of nepheline per dry weight, and further, the nepheline content of the lotus seed core obtained from a lotus seed having a surface color tone with a value of 5 or more on the Munsell color system can be 0.01% or less by weight per dry weight.
- the present invention provides a method for producing a fibroblast proliferation promoter and/or a collagen production promoter, and a method for producing a hepatocyte growth factor production inducer, which includes the method for producing the composition.
- a composition having a fibroblast proliferation promoting effect and/or a collagen production promoting effect can be obtained. Furthermore, since the composition of the present invention has an effect of inducing the production of hepatocyte growth factor, it can exhibit superior effects in the prevention of various diseases and in cosmetic treatments, etc., compared to conventional compositions, and can also be used in regenerative medicine, etc.
- the present invention also provides a method for producing a composition that has the effect of promoting fibroblast proliferation and/or collagen production, and the effect of inducing hepatocyte growth factor production.
- the composition produced by the method of the present invention has a higher content of useful substances, such as neferine, than compositions produced by other production methods, and is expected to have excellent effects.
- FIG. 1 is a diagram showing the fibroblast proliferation promoting effect of an example of the present invention, in which an asterisk (*) indicates a statistically significant difference compared to the negative control (N.C.) (p ⁇ 0.01).
- 1 is a diagram showing the collagen production promoting effect of an example of the present invention, in which an asterisk (*) indicates that there was a statistically significant difference compared to the negative control (N.C.) (p ⁇ 0.01).
- FIG. 2 is a diagram showing the color tone of lotus seeds used in the examples of the present invention.
- the medicinal, edible, and/or cosmetic composition of the present invention has a fibroblast proliferation promoting effect or collagen production promoting effect, and further has an effect of inducing hepatocyte growth factor production.
- the medicinal, edible, and/or cosmetic composition of the present invention contains at least lotus seed core, calamus, ginseng, and Panax notoginseng, and may further contain one or more selected from the group consisting of safflower, lycium bark, wolfberry, scutellaria, honeysuckle, jujube, licorice, xianbao, sappanth, and ginseng root.
- Safflower (kouka) is an annual or biennial plant of the genus Carthamus in the Asteraceae family, safflower (Carthamus tinctorius L.), and any part of the plant, such as the leaves, stems, flowers, and roots, or the whole plant can be used as is or dried, but flowers or the whole above-ground part are preferred, and it is more preferable to use the tubular flowers as is or safflower with most of the yellow pigment removed. Safflower can also be preferably used after being pressed into sheets.
- the rhizome or parboiled rhizome of the perennial plant Curcuma zedoaria a species of the genus Curcuma in the family Zingiberaceae, can be preferably used as is or dried.
- the fruit of wolfberry (Lycium chinense Miller or Lycium barbatum L.), a deciduous shrub of the Solanaceae family native to China, can be preferably used as is or dried.
- the roots, stems, or leaves of Acorus gramineus a member of the Araceae family that grows wild in clear streams throughout Japan, can be preferably used as is, or dried.
- turmeric the dried roots or stems of turmeric, a perennial plant of the ginger family, can be preferably used.
- spring turmeric scientific name: Curcuma aromatica S
- autumn turmeric scientific name: Curcuma longa L
- Curcumin the main medicinal ingredient
- the rhizomes of Curculigo orchioides GAERIN. which belongs to the Amaryllidaceae family, can be used either as is or dried.
- Ginseng can be the root of Panax ginseng C.A. Meyer, a perennial plant of the Araliaceae family, with the fine roots removed, or lightly parboiled ginseng.
- White ginseng which is made by peeling the skin and drying naturally or with hot air at 60°C or less to reduce the moisture content to 15%, and red ginseng, which is steamed and then dried, can also be preferably used.
- Tenshichi ginseng is also called denshichi ginseng or sanshichi ginseng, and the roots or stems of the perennial plant of the Araliaceae family (Panax notoginseng) can be used as is or dried.
- Honeysuckle wisteria also known simply as honeysuckle, is preferably made from the leaves and stems of honeysuckle (Lonicera japonica Thunberg Caprifoliaceae) either as is or dried.
- the fruit of Zizyphus jujuba Mill. var. inermis Rehder (Rhamnaceae) of the Rhamnaceae family or a variety thereof can be preferably used as is or dried.
- the roots and stolons of Glycyrrhiza uralensis Fisch or Glycyrrhiza glabra Linne (Leguminosae) of the legume family, or their roots and stolons with the periderm removed (peeled licorice), can be preferably used as is or dried.
- Sakuy ⁇ is the fleshy stem of the perennial parasitic plant, Sakuy ⁇ , and has been used as a medicinal herb since ancient times. Sakuy ⁇ can be used as is or dried.
- the germ part of the seed of the lotus (Nelumbo nucifera), a plant of the Nymphaeaceae family, can be preferably used as is or dried. Extracts of lotus seed cores using polar solvents contain many useful components, including benzoylisoquinoline derivatives and bisbenzoylisoquinoline derivatives.
- lotus seed cores obtained from lotus seeds that have been aged through an aging process are preferably used. Whether or not a lotus seed is aged can be determined by the color tone of the lotus seed's surface. For example, the color tone can be quantified using the Munsell color system.
- the aging process is a process of storing lotus seeds with a high surface brightness until the surface brightness decreases. Specifically, it can be a process of storing lotus seeds with a surface brightness of 5 or more until the surface brightness decreases to 4 or less. More specifically, the surface color tone of lotus seeds used in the aging process is green (G) in hue, brightness of 5 to 7, and chroma of 4 to 8, and the aging process is a process of storing the seeds until the brightness decreases to 4 or less, 3 or less, or 2 or less.
- G green
- the process involves storing lotus seeds at a temperature between 10°C and 50°C for 5 to 100 days.
- lotus seeds immediately after harvesting may be stored for a certain period of time while being dried in the sun.
- the brightness of the lotus seed surface can be reduced from 5 or more to 4 or less, 3 or less, or 2 or less.
- the lotus seed core obtained from lotus seeds matured by the maturation process of the present invention has a higher content of useful ingredients such as nepheline compared to lotus seed core obtained from lotus seeds before maturation. More specifically, lotus seed core obtained from lotus seeds with a surface brightness of 5 or more contains only 0.01% or less by weight of nepheline per dry weight, whereas lotus seed core obtained from lotus seeds that have been matured to a surface brightness of 4 or less contains 0.3% or more by weight of nepheline per dry weight, more preferably 0.5% or more by weight.
- the maturation process in one embodiment of the present invention is a process for increasing the nepheline content of the lotus seed core. More specifically, it can be a process for transforming lotus seeds having a lotus seed core with a nepheline content of 0.01% by weight or less into lotus seeds having a lotus seed core with a nepheline content of 0.3% by weight or more, more preferably 0.5% by weight or more.
- the polar solvent extract used in the present invention must be selected from the plants mentioned above (preferably dried plants). These plants can be extracted as is, or cut, shredded, crushed (preferably cut, shredded, or crushed to a size of about several millimeters to 1 cm), or pulverized, or powdered, and then mixed, or can be obtained by mixing the plants and then extracting with an extraction solvent. It is more preferable to extract from a mixture obtained by mixing the plants rather than a composition obtained by mixing the extracts.
- the extraction is preferably carried out using a polar solvent.
- the polar solvent include water (e.g., purified water, distilled water, tap water, etc.), ethanol, a mixed solvent of water and ethanol (hydrous ethanol), acetic acid, a mixed solvent of acetic acid and water, or a mixed solvent of water, ethanol, and acetic acid.
- Water or hydrous ethanol is preferred.
- the water content of hydrous ethanol is 1 to 99% by volume.
- An acid may be added to the water or hydrous ethanol.
- the acid include inorganic acids such as hydrochloric acid, and organic acids such as malic acid and citric acid.
- the extraction method is not particularly limited, and the immersion method or countercurrent extraction method can be used.
- extraction can be performed at room temperature or by heating up to the boiling point of the solvent under normal pressure, and extraction can be performed under reduced pressure or pressure if necessary.
- the pressure may be any pressure greater than 1 atmosphere, and approximately 2 to 3 atmospheres is preferable.
- Example amounts of each plant in the mixture are, in terms of dry weight, 1g-15g parts by weight of lotus seed core, 2g-15g parts by weight of Xiangyang and/or Hydrangea officinalis, 1g-15g parts by weight of safflower, 2g-15g parts by weight of Atractylodes amygdalus chinensis, 8g-30g parts by weight of Chinese wolfberry, 2g-15g parts by weight of Calamus chinensis, 2g-15g parts by weight of Turmeric, 1g-15g parts by weight of ginseng, 1g-10g parts by weight of Panax notoginseng, 6g-25g parts by weight of honeysuckle, 1g-10g parts by weight of jujube, and sweet 1g to 9g of grass is preferred, 2g to 10g of lotus seed core, 4g to 12g of xiangyang and/or sappan yang, 1g to 9g of safflower, 2g to 10g of atract
- a mixture of lotus seed core, calamus, ginseng, and Panax notoginseng, or a mixture of lotus seed core, calamus, ginseng, Panax notoginseng, safflower, lycium bark, wolfberry, scutellaria, honeysuckle, jujube, licorice, sedge, scutellaria, and scutellaria root, is added with an extraction solvent (polar solvent) in an amount of 10 to 100 times, preferably 10 to 40 times, the amount of the mixture of herbal medicines, and the mixture is soaked for 30 minutes to 5 hours, preferably 1 to 3 hours (1, 2, or 3 hours) at room temperature to the boiling point of the solvent under normal pressure or pressure, and then filtered by a known method to obtain an extract.
- the extract can be used as it is.
- the extract can also be concentrated, or concentrated and dried or freeze-dried and used as an extract.
- the extract can be concentrated by a known method, for example, vacuum concentration. It
- composition of the present invention can be easily prepared as a medicine or food that can be taken orally by mixing the polar solvent extract with a medicamentally or food hygienically acceptable carrier, which is optionally added, by a known method to prepare the formulation.
- Food includes health foods, functional foods, and supplements. It can also be prepared as a medicine to be taken nasally or transdermally, a medicine to be administered by injection, or a cosmetic product to be used transdermally.
- the composition of the present invention may be formulated using a medicamentally, cosmetically, or food hygienically acceptable carrier.
- the formulation include solid preparations and liquid preparations.
- medicamentally, cosmetically, or food hygienically acceptable carriers various organic or inorganic carrier substances commonly used as formulation materials are used, and examples of such carriers include excipients, lubricants, binders, and disintegrants in solid preparations, and solvents, solubilizers, and suspending agents (emulsifiers, thickeners) in liquid preparations.
- formulation additives such as preservatives, antioxidants, colorants, sweeteners, and flavors can also be used as necessary.
- the composition of the present invention can be prepared as a food or drink, medicine, or cosmetic.
- the content of the composition in the medicine, food, or cosmetic of the present invention is, for example, about 1 to 99% by weight of the formulation, preferably about 5 to 90% by weight, and more preferably about 10 to 80% by weight, in the case of a solid preparation, as an extract of active ingredients derived from plants.
- the content is about 0.0001 to 80% by weight of the formulation, preferably about 10 to 50% by weight, and more preferably about 20 to 35% by weight, in the case of a dried extract.
- the liquid preparation can be made by using the polar solvent extract as is or by concentrating the concentrate.
- the liquid preparation can be made from an extract that has an extraction rate (recovery rate of the extract) of 25% to 33% when extracted for 1 to 3 hours using 10 to 40 times the polar solvent (preferably water) of the plant from which the active ingredient is derived.
- the food, beverage, and pharmaceutical products of the present invention are preferably taken orally. It is more preferable to take them after, before, or between meals.
- the intake amount and frequency of intake in the present invention will vary depending on age, body weight, dosage form, etc., but typically, an adult can take about 1 mg to 500 mg, and preferably about 5 mg to 300 mg, of an extract of plant-derived active ingredients per kg of body weight per day. It is preferable to take this amount, usually 1 to several times, preferably 1 to 3 times in divided doses.
- liquid preparations it is preferable to ingest the extract obtained by extraction with a polar solvent (preferably water), and it is more preferable to ingest it in one or several doses, preferably one to three doses.
- a polar solvent preferably water
- the pharmaceutical product of the present invention may be administered intranasally or transdermally, or may be administered intravenously, intraperitoneally, intradermally, subcutaneously, or intramuscularly using a syringe.
- the cosmetic product of the present invention is administered transdermally.
- the composition of the present invention has a fibroblast proliferation-promoting effect or a collagen production-promoting effect, and further induces the production of hepatocyte growth factor in the body. Therefore, it is effective against various diseases that are treated and/or prevented by the production of hepatocyte growth factor, fibroblast proliferation, and/or collagen production.
- liver diseases hepatitis, cirrhosis, liver failure, and other liver disorders
- kidney diseases glomerulonephritis, renal failure, renal anemia, diabetic nephropathy, and other kidney disorders
- skin diseases eye diseases (corneal ulcers, etc.)
- lung diseases pneumonia, emphysema, pulmonary tuberculosis, chronic obstructive pulmonary disease, pneumoconiosis, pulmonary fibrosis, and other lung disorders
- gastroduodenal diseases gastritis, gastric ulcers, duodenal ulcers, and other gastroduodenal disorders
- cancer diseases and disorders in cancer treatment ischemic diseases or arterial diseases of the heart or limbs, blood diseases (thrombocytopenia, blood flow disorders, etc.), bone diseases (osteoporosis, osteodysplasia, osteoarthritis, and other bone disorders), or central nervous diseases (neuronal differentiation disorders, etc.), and skin diseases (atopic dermatiti
- the foods, beverages, medicines, and cosmetics of the present invention are preferably administered to or ingested by humans, but may also be administered to or ingested by mammals such as mice, rats, rabbits, dogs, cats, cows, monkeys, and pigs, as well as pet animals, livestock and farmed species, and experimental animals, including birds, reptiles, amphibians, and fish.
- NHDF human dermal fibroblasts
- the collagen production promoting effect of the examples and comparative examples was also measured using the same NHDF.
- NHDF was seeded in a 96-well microplate at a cell density of 2 x 104 cells/well using a growth medium.
- the cells were cultured for 24 hours in a CO2 incubator at 37°C and 5% CO2 .
- the medium was replaced with a medium containing a given concentration of the test substance and a negative control, and the cells were cultured for another 24 hours.
- the culture supernatant was collected, and the cells were washed with PBS(-), dissolved in a 0.5% Triton X-100 solution, and protein was quantified using a BCA protein Assay Kit (Thermo Fisher).
- the amount of collagen in the culture supernatant was measured using a type I collagen measurement kit.
- hepatocyte growth factor production-inducing activity of the examples and comparative examples was measured using human skin fibroblasts (SF4-1 cells) capable of producing hepatocyte growth factor.
- SF4-1 cells were seeded in a 96-well plate at a cell density of 1.5 ⁇ 10 4 cells/well. The medium was replaced with DMEM medium supplemented with 1% by weight of FCS, and the test substance was added to the culture solution of SF4-1 cells at various concentrations.
- 1 ⁇ g/mL of heparin which is known to have hepatocyte growth factor production activity, was added as a positive control, and distilled water was added as a negative control.
- SF4-1 cells were cultured for 48 hours, and the amount of hepatocyte growth factor in the culture solution was measured by ELISA.
- safflower-derived extract Dried safflower was cut into pieces of several millimeters to about 1 cm. Water was added to the resulting safflower, and the mixture was boiled and extracted for 2 hours at 2-3 atmospheres in a pressurized extractor, followed by filtration. The filtrate was divided into aluminum packs to produce an extract containing the active ingredients derived from safflower.
- the fibroblast proliferation promoting effect of adding 0.2% by weight of safflower-derived extract (Comparative Example 1) is shown in Figure 1, and the collagen production promoting effect is shown in Figure 2.
- Preparation of an extract derived from Atractylodes arvensis Dried Atractylodes arvensis was cut into pieces of several millimeters to approximately 1 cm. Water was added to the obtained Atractylodes arvensis, and the pieces were boiled and extracted for 2 hours at 2-3 atmospheres in a pressurized extractor, and then filtered. The obtained filtrate was packaged in aluminum bags to prepare an extract containing the active ingredients derived from Atractylodes arvensis.
- the fibroblast proliferation promoting effect of adding 0.2 wt% of Atractylodes macrocarpa extract is shown in Figure 1, and the collagen production promoting effect is shown in Figure 2.
- the fibroblast proliferation promoting effect of adding Example 1 at various concentrations is shown in Figure 1, and the collagen production promoting effect is shown in Figure 2. It was found that the use of multiple mixed polar solvent extracts significantly increased the fibroblast proliferation promoting effect and collagen production promoting effect compared to the case where nothing was added (negative control; N.C.) and Comparative Examples 1 and 2.
- Figure 3 shows an example of a lotus seed before and after aging.
- the lotus seed surface before aging ( Figure 3A) was G5/10 on the Munsell color system, but after the aging process ( Figure 3B) this had changed to G2/2.
- composition 1 1600 mL of water was added to 3 g of lotus seed core, which was obtained from lotus seeds with a Munsell value of G2/4 on the surface and had a nepheline content of 0.56% by weight (1.126 g/200 g), 9 g of calamus, 6 g of ginseng, 6 g of Panax notoginseng, 6 g of safflower, 9 g of Atractylodes arbutus, 9 g of Lycium frutescens, 6 g of Turmeric, 9 g of Honeysuckle, 6 g of Jujube, 3 g of Licorice, and 6 g of Xiangyang, and the mixture was boiled and extracted for 2 hours at 2 to 3 atmospheres using a pressurized extractor, and then filtered. The obtained filtrate (composition 1; 1200 mL) was divided into 8 portions and packaged in aluminum packs. The above-mentioned herbal medicines were dried herbal
- the hepatocyte growth factor production-inducing activity of the extract of Example 2 was measured using human skin fibroblasts (SF4-1 cells) capable of producing hepatocyte growth factor.
- SF4-1 cells human skin fibroblasts capable of producing hepatocyte growth factor.
- the amount of hepatocyte growth factor produced was 12.8 times the amount of hepatocyte growth factor in the negative control, taken as 1.
- the hepatocyte growth factor production-inducing activity of the extract of Example 3 was measured using human skin fibroblasts (SF4-1 cells) capable of producing hepatocyte growth factor.
- SF4-1 cells human skin fibroblasts capable of producing hepatocyte growth factor.
- the amount of hepatocyte growth factor produced was 10.5 times the relative amount of the amount of hepatocyte growth factor in the negative control, which was set at 1.
- the hepatocyte growth factor production-inducing activity of the extract of Example 4 was measured using human skin fibroblasts (SF4-1 cells) capable of producing hepatocyte growth factor.
- SF4-1 cells human skin fibroblasts capable of producing hepatocyte growth factor.
- the amount of hepatocyte growth factor produced was 6.5 times the relative amount of the hepatocyte growth factor produced in the negative control, with the amount of hepatocyte growth factor taken as 1.
- the hepatocyte growth factor production-inducing activity of the extract of Example 5 was measured in the same manner as in Example 2, and the amount of hepatocyte growth factor produced was 7.1 times the amount of hepatocyte growth factor in the negative control, relative to the amount of hepatocyte growth factor in the negative control, which was set at 1.
- the hepatocyte growth factor production-inducing activity of the extract of Example 6 was measured in the same manner as in Example 2, and the amount of hepatocyte growth factor produced was 5.1 times the amount of hepatocyte growth factor in the negative control, relative to the amount of hepatocyte growth factor in the negative control, which was set at 1.
- Method for producing the hepatocyte growth factor production inducer of the present invention Two volumes of distilled water were added to the extract of Example 3, mixed at room temperature for 1 hour, and centrifuged. The supernatant after centrifugation was loaded onto a Sephadex LH-20 column (GE Healthcare Biosciences) equilibrated with a 20% ethanol/water mixture, eluted with the same solution, and the fraction eluted most quickly was added to the culture medium at 5% and the hepatocyte growth factor production-inducing activity was measured by ELISA. The amount of hepatocyte growth factor produced was 18.3 times the amount of hepatocyte growth factor in the negative control, taken as 1.
- Hepatocyte growth factor production-inducing activity of hepatocyte growth factor production inducers in mice The extract fraction of Example 7 was administered to mice, and the amount of HGF in the plasma and cerebrum was measured. 30 mg of the extract was orally administered once a day to healthy mice (ICR, 8 weeks old, female), and blood and cerebrum were collected after 7 days. As shown in Table 1, the administration of the extract of Example 6 increased the amount of HGF produced, confirming that the extract has a significant HGF-inducing activity.
- hepatocyte growth factor production-inducing activity was measured using human skin fibroblasts (SF4-1 cells) capable of producing hepatocyte growth factor.
- the amount of hepatocyte growth factor in each culture medium was measured as a relative amount, with the amount of hepatocyte growth factor in the negative control taken as 1.
- the amount of hepatocyte growth factor in each culture medium was 1.1 times, 1.1 times, 1 time, 1.2 times, and 1.2 times, respectively, relative to 1 part of distilled water. Compared with the compositions of Examples 2, 3, 4, 5, and 6, it was found that almost no hepatocyte growth factor was produced.
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Birds (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
【課題】優れた線維細胞増殖促進作用もしくはコラーゲン産生促進作用を有する組成物を提供する。 【解決手段】紅花、莪朮、枸杞子、石菖蒲、欝金、人参、田七、忍冬藤、大棗、甘草、仙茅、鎖陽、益智仁及び蓮子芯の極性溶媒抽出エキスを利用することで高い線維芽細胞増殖促進作用もしくはコラーゲン産生促進作用を有する組成物を提供する。
Description
本発明は、優れた線維芽細胞増殖促進作用、コラーゲン産生促進作用、及び／又は肝細胞増殖因子産出誘導作用を有する組成物を提供する。
コラーゲンは、人間の身体を構成するタンパク質のうち、３０％を占めると言われており、肌のみならず、身体全体のあらゆる部分に存在している。具体的には、コラーゲンは、骨、靱帯、腱、血管、真皮などに多く存在しており、これらの組織を構築するために非常に重要な役割を担っていることが知られている。例えば、加齢や閉経による骨粗しょう症は、カルシウム代謝バランスが崩れることが原因と考えられているが、コラーゲン不足も原因の１つである。骨の内側に存在するコラーゲンは、骨の柔軟性を保つことで、骨が脆くなったり、折れやすくなったりすることを防止している。
そのため、コラーゲン産生を促進する組成物が多く開発されており、植物由来で、安全性の高いコラーゲン産生促進剤が開示されている。また、線維芽細胞は、コラーゲンを産生する細胞であるとともに、様々な細胞外マトリックスを産生する細胞でもあり、線維芽細胞の減少は組織の老化につながるため、線維芽細胞増殖促進作用を有する組成物の開発が望まれている。
例えば、植物由来の線維芽細胞賦活作用やコラーゲン産生促進作用を有する抽出物（特許文献１参照）が知られている。また、III型コラーゲン産生促進作用を有する植物由来の生薬又はその抽出物（特許文献２参照）も知られている。
一方、肝細胞増殖因子（Hepatocyte Growth Factor）とは、生体内で組織再生や修復に関与するサイトカインの一種である。肝細胞増殖因子は、肝細胞以外にもさまざまな細胞に作用する。具体的には、肝細胞増殖因子は、上皮細胞や内皮細胞の増殖を促進することや、神経細胞に対し神経栄養因子として働くことが知られている。また、肝細胞増殖因子は、抗線維化、抗炎症、血管新生促進や細胞死抑制作用などを示し、さまざまな疾患の治療及び／又は予防に有効であると考えられている。
肝細胞増殖因子産出誘導剤としては、アンジオテンシン変換酵素阻害剤及びアンジオテンシンII受容体拮抗薬（特許文献３参照）、デルマタン硫酸やコンドロイチン硫酸等のグリコサミノグリカンを有効成分とするもの（特許文献４参照）、ガゴメコンブ由来のフコイダン等の糖化合物（特許文献５参照）等が知られている。
また、植物由来で、肝細胞増殖因子産出誘導活性を有する抽出物としては、ニガウリ加工処理物を有効成分とするもの（特許文献６参照）、冬虫夏草加工処理物を有効成分とするもの（特許文献７参照）、キク科のモウコタンポポ（Taraxacum mongolicum）等の各種Taraxacum属植物の根つき全草である蒲公英（ホコウエイ）から得られる抽出物を有効成分とするもの（特許文献８参照）、枸杞子、熟地黄、杜仲等の抽出物（特許文献９参照）、タケの葉、サザバルヨモギ、莪朮等の抽出物（特許文献１０参照）、田七人参、鬱金、及び蛇胆を配合した顆粒状食品（特許文献１１参照）等が知られている。本願発明者らは、蓮子芯、紅花、枸杞子、石菖蒲、益智仁など複数の植物抽出物からなる肝細胞増殖因子産出誘導剤（特許文献１２参照）を開示している。
本発明が解決しようとする課題は、肝細胞増殖因子産出誘導作用を有し、さらに線維芽細胞増殖促進作用、及び／又は、コラーゲン産生促進作用を有する組成物を提供することである。
本発明は、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、紅花、莪朮、枸杞子、石菖蒲、欝金、人参、田七、忍冬藤、大棗、甘草、仙茅、鎖陽、益智仁及び蓮子芯から選ばれる２種以上から極性溶媒を用いて抽出した抽出物が、優れた線維芽細胞増殖促進作用、及び／又はコラーゲン産生促進作用、並びに肝細胞増殖因子産出誘導作用を示すことを見出して、本発明を完成した。
すなわち、本発明は、蓮子芯、石菖蒲、人参、及び田七を含有する、医薬用、食用、及び／又は美容用組成物である。さらに、別の本発明は、紅花、莪朮、枸杞子、欝金、忍冬藤、大棗、甘草、仙茅、鎖陽、及び、益智仁からなる群から選ばれる１又は複数を含有する、医薬用、食用、及び／又は美容用組成物であり得る。
また、本発明は、蓮子芯、石菖蒲、人参、田七、紅花、莪朮、枸杞子、欝金、忍冬藤、大棗、甘草、仙茅、鎖陽、及び、益智仁を含有する医薬用、食用、及び／又は美容用組成物であり、蓮子芯、石菖蒲、人参、田七、紅花、莪朮、枸杞子、欝金、忍冬藤、大棗、甘草、仙茅、鎖陽、及び、益智仁の極性溶媒抽出エキスを含有する医薬用、食用、及び／又は美容用組成物でもあり得る。
別の本発明は、前記組成物を有効成分として含有する線維芽細胞増殖促進剤、線維芽細胞増殖促進用組成物、コラーゲン産生促進剤、及び／又は、コラーゲン産生促進用組成物、前記組成物を有効成分として含有する肝細胞増殖因子産出誘導剤、及び／又は肝細胞増殖因子産出誘導用組成物であり得る。
本発明は、組成物の製造方法を提供し、前記蓮子芯が、熟成工程により熟成された蓮の実から得られたものであり、前記熟成工程が、表面の色調がマンセル表色系で明度が５以上である蓮の実を、前記表面の明度が４以下になるまで保存する工程である。
また、本発明の組成物の製造方法では、前記熟成工程が、前記蓮の実を、１０℃～５０℃の温度で、５日～１００日間、保存する工程であり得る。
また、本発明の組成物の製造方法では、前記蓮子芯が、乾燥重量当たり０．３重量％以上のネフェリンを含有し、さらに、前記表面の色調がマンセル表色系で明度が５以上である蓮の実から得られた蓮子芯のネフェリンの含有量は、乾燥重量当たり０．０１重量％以下であり得る。
さらに、本発明は、前記組成物の製造方法を含む、線維芽細胞増殖促進剤及び／又はコラーゲン産生促進剤の製造方法、肝細胞増殖因子産出誘導剤の製造方法を提供する。
本発明によれば、線維芽細胞増殖促進作用及び／又はコラーゲン産生促進作用を有する組成物を得ることができる。さらに、本発明の組成物は、肝細胞増殖因子産出誘導作用を有するため、従来の組成物と比較して、各種疾病の予防や美容等に優れた効果を発揮することができ、再生医療等に用いることも可能である。
また、本発明は、線維芽細胞増殖促進作用、及び／又はコラーゲン産生促進作用、並びに肝細胞増殖因子産出誘導作用を有する組成物の製造方法を提供する。本発明の製造方法で製造された組成物は、他の製造方法で製造された組成物と比較して、ネフェリンに代表される有用物質の含有量が高く、優れた効果が期待できる。
以下、本発明について詳細に説明する。本発明の医薬用、食用、及び／又は美容用組成物は、線維芽細胞増殖促進作用もしくはコラーゲン産生促進作用、さらには、肝細胞増殖因子産出誘導作用を有する。本発明の医薬用、食用、及び／又は美容用組成物は、蓮子芯、石菖蒲、人参、並びに田七を少なくとも含有し、さらに、紅花、莪朮、枸杞子、欝金、忍冬藤、大棗、甘草、仙茅、鎖陽、及び、益智仁からなる群から選ばれる１又は複数を含有する組成物であり得る。
紅花（コウカ）は、キク科ベニバナ属の一年草又は越年草のベニバナ（Carthamus tinctorius L）で、その葉、茎、花、根などの各部位及び全草をそのまま又は乾燥したものを用いることができるが、花もしくは地上部位全草が好ましく、管状花をそのまま又は黄色色素の大部分を除いた紅花を用いることがより好ましい。紅花は、ときに圧搾して板状としたものも好ましく用いることができる。
莪朮（ガジュツ）は、ショウガ科ウコン属の１種である多年草のガジュツ（Curcuma zedoaria）の根茎もしくは湯通ししたものをそのまま、又は乾燥したものを好ましく用いることができる。
枸杞子（クコシ）は、中国原産のナス科の落葉低木であるクコ（Lycium chinense Miller又はLycium barbatum L.）の果実をそのまま、又は乾燥したものを好ましく用いることができる。
石菖蒲は、日本の各地の清流に自生しているサトイモ科のセキショウ（Acorusg gramineus）の根又は茎、葉をそのまま、又は乾燥したものを好ましく用いることができる。
鬱金は、ショウガ科の多年草ウコンの根又は茎をそのまま乾燥したものを好ましく用いることができる。また、ウコンには春に赤色の花をつける春ウコン（学名；Curcuma aromatica S）と秋に白色の花をつける秋ウコン（学名；Curcuma longa L）があり、主な薬効成分であるクルクミンを多く含む秋ウコンがより好ましい。
仙茅は、ヒガンバナ科のキンバイザサ（Curculigo orchioides GAERIN.）の根茎をそのまま、又は乾燥したものを好ましく用いることができる。
人参は、ウコギ科の多年草オタネニンジン（Panax ginseng C.A. Meyer）の細根を除いた根又は軽く湯通ししたものを用いることができる。また人参の皮を剥ぎ、自然乾燥又は６０℃以下で熱風乾燥させて水分を１５％以下とした白参、蒸気を当てて蒸したものを乾燥した紅参も好ましく用いることができる。
田七は、田七人参（デンシチニンジン）や三七人参（サンシチニンジン）とも呼ばれ、ウコギ科の多年草（Panax notoginseng）の根又は茎をそのまま、又は乾燥したものを好ましく用いることができる。
忍冬藤は、単に忍冬ともいわれ、スイカズラ（Lonicera japonica Thunberg Caprifoliaceae）の葉及び茎をそのまま、又は乾燥したものを好ましく用いることができる。
大棗（タイソウ）は、クロウメモドキ科のナツメ（Zizyphus jujuba Mill. var. inermis Rehder（Rhamnaceae））又はその品種の果実をそのまま、又は乾燥したものを好ましく用いることができる。
甘草は、マメ科のウラルカンゾウ（Glycyrrhiza uralensis Fisch）又はナンキンカンゾウ（Glycyrrhiza glabra Linne（Leguminosae））の根及びストロン、又はそれらの周皮を除いたもの（皮去リカンゾウ）をそのまま、あるいは乾燥したものを好ましく用いることができる。
鎖陽は、多年生の寄生植物であるオシャグジタケの肉質茎であり古くから薬草として用いられてきた。鎖陽は、そのまま、もしくは乾燥したものを好ましく用いることができる。
蓮子芯は、スイレン科の植物である蓮（Nelumbo nucifera）の種子の胚芽部分をそのまま、又は乾燥したものを好ましく用いることができる。極性溶媒による蓮子芯の抽出物には、ベンゾイルイソキノリン誘導体及びビスベンゾイルイソキノリン誘導体が有用成分として多く含まれる。
本発明では、熟成工程により熟成された蓮の実から得られた蓮子芯が好ましく用いられる。蓮の実が熟成されたものであるか否かは、蓮の実の表面の色調で把握することができる。例えば、色調は、マンセル表色系を用いて数値化され得る。
マンセル表色系は、色相、明度、及び彩度から色を表示する手法である。色相（「Ｈ」と省略され得る。)は、赤（Ｒ）・黄（Ｙ）・緑（Ｇ）・青（Ｂ）・紫（Ｐ）の５色と、それぞれの間の黄赤(ＹＲ)・黄緑(ＧＹ)・青緑(ＢＧ)・青紫(ＰＢ)・赤紫(ＰＲ)の５色の中間色相を加えた１０色として表現される。明度(「Ｖ」と省略され得る。)は、完全な黒を０、完全な白を１０として、この間を等間隔に１１段階に数値化される。さらに、彩度(「Ｃ」と省略され得る。)は無彩色を０として最大１４段階に数値化される。マンセル表色系においては、ＨＶ／Ｃとして色が表現される。
本発明の一実施形態においては、熟成工程は、表面の明度が高い蓮の実を、表面の明度が低くなるまで保存する工程である。具体的には、表面の明度が５以上である蓮の実を、表面の明度が４以下になるまで保存する工程であり得る。より具体的には、熟成工程に用いる蓮の実表面の色調は、色相は緑（Ｇ）であり、明度が５～７、彩度が４～８であるところ、熟成工程により、明度を４以下、３以下、又は２以下となるまで保存する工程である。
また、本発明の別の実施形態においては、蓮の実を、１０℃～５０℃の温度で、５日～１００日間、保存する工程である。例えば、収穫された直後の蓮の実を天日乾燥しながら、一定期間保存すればよい。かかる条件で保存することで、蓮の実表面の明度を５以上から４以下、３以下、又は２以下とすることができる。
本発明の熟成工程により熟成された蓮の実から得られた蓮子芯は、熟成前の蓮の実から得られた蓮子芯と比較して、ネフェリン等の有用成分の含有量が高いことが見出された。より具体的には、表面の明度が５以上の蓮の実から得られた蓮子芯は、乾燥重量当たり０．０１重量％以下のネフェリンしか含有しないが、熟成され、表面の明度が４以下となった蓮の実から得られた蓮子芯は、乾燥重量当たり０．３重量％以上、より好ましくは０．５重量％以上のネフェリンを含有する。
すなわち、本発明の一実施形態における熟成工程は、蓮子芯のネフェリン含有量を高める工程である。より具体的には、ネフェリン含有量が０．０１重量％以下の蓮子芯を有する蓮の実を、ネフェリン含有量が０．３重量％以上、より好ましくは０．５重量％以上の蓮子芯を有する蓮の実とする工程であり得る。
蓮子芯中のネフェリン含有量は、アルコール等の極性溶媒により得られた抽出液を高速液体クロマトグラフ（以下、「HPLC」とも呼称され得る。）により分析することで測定される。より詳しくは、以下の方法で実施する。蓮の実から、蓮胚芽を竹の棒やピンセット等を用いて取り出し、蓮胚芽の８倍量（重量比）の７０容量％～９５容量％のメタノール又はエタノールを加えて、４０℃～８０℃で、２～３時間抽出する。好ましくは、この操作をあと２回繰り返す。操作後、３０メッシュと１５０メッシュの篩で濾過して得られる抽出液をサンプリングして、HPLCで分析する。抽出液中のネフェリンは、ネフェリンの標準品を用いて、その存在量を推定することが出来る。
本発明で用いられる極性溶媒抽出エキスは、上述した植物（好ましくは、乾燥植物）から選ばれることが必要である。これらの植物は、そのまま、又は、裁断、細切、破砕（好ましくは、数ミリ～１ｃｍ前後に裁断、細切、破砕）、もしくは粉砕したもの、あるいは粉末にしたものを各々抽出した後に混合する方法、又は、植物を混合した後に抽出溶媒にて抽出することによって得ることができる。抽出エキスを混合して得られた組成物よりも各植物を混合して得られた混合物から抽出することがより好ましい。
抽出溶媒は、極性溶媒を使用して実施することが好ましい。前記極性溶媒としては、例えば、水（例えば、精製水、蒸留水、水道水など）、エタノール、又は水とエタノールの混合溶媒（含水エタノール）、又は、酢酸もしくは酢酸と水の混合溶媒、あるいは、水とエタノールと酢酸との混合溶媒等が挙げられる。好ましくは水、又は含水エタノールである。含水エタノールにおける含水率は１～９９容量％である。水又は含水エタノールには、酸を添加してもよい。酸としては、例えば、塩酸などの無機酸、リンゴ酸又はクエン酸などの有機酸などが好ましく挙げられる。
抽出方法は特に限定されず、浸漬法や向流抽出法を採用することができる。また、常温抽出又は常圧下で溶媒の沸点までの範囲で加熱抽出でき、必要により、減圧又は加圧下で抽出してもよい。加圧は、１気圧を超える圧力であればよく、約２～３気圧が好ましい。
前記混合物における各植物の例示の配合量は、乾燥重量として、蓮子芯１ｇ～１５ｇ重量部、仙茅及び／又は鎖陽２ｇ～１５ｇ重量部、紅花１ｇ～１５ｇ重量部、莪朮２ｇ～１５ｇ重量部、枸杞子８ｇ～３０ｇ重量部、石菖蒲２ｇ～１５ｇ重量部、鬱金２ｇ～１５ｇ重量部、人参１ｇ～１５ｇ重量部、田七１ｇ～１０ｇ重量部、忍冬藤６ｇ～２５ｇ重量部、大棗１ｇ～１０ｇ重量部、甘草１ｇ～９ｇ重量部が好ましく、蓮子芯２ｇ～１０ｇ重量部、仙茅及び／又は鎖陽４ｇ～１２ｇ重量部、紅花１ｇ～９ｇ重量部、莪朮２ｇ～１０ｇ重量部、枸杞子１０ｇ～１８ｇ重量部、石菖蒲３ｇ～９ｇ重量部、鬱金４ｇ～９ｇ重量部、人参３ｇ～９ｇ重量部、田七人参１ｇ～９ｇ重量部、忍冬藤６ｇ～２０ｇ重量部、大棗２ｇ～８ｇ重量部、甘草１ｇ～６ｇ重量部がさらに好ましい。
蓮子芯、石菖蒲、人参、及び田七の混合物、又は、蓮子芯、石菖蒲、人参、田七、紅花、莪朮、枸杞子、欝金、忍冬藤、大棗、甘草、仙茅、鎖陽、及び、益智仁の混合物に、抽出溶媒（極性溶媒）を生薬の混合物に対し１０～１００倍量、好ましくは１０～４０倍量を加え、通常、常温から常圧下又は加圧下で溶媒の沸点までの範囲で３０分～５時間、好ましくは１～３時間（１、２、３時間）浸漬し、公知の方法で濾過することにより抽出液を得ることができる。抽出液は、そのまま抽出物として使用することができる。また、前記抽出液を濃縮したもの又は、濃縮乾燥もしくは凍結乾燥したものを抽出物として使用することもできる。抽出液の濃縮自体は公知の方法を使用でき、例えば、減圧濃縮などが好ましく挙げられる。抽出液は、適宜滅菌されることが好ましい。
本発明の組成物は、極性溶媒抽出エキスと所望により配合される医薬上又は食品衛生上許容される担体とを、公知の方法により混合して製剤化することにより、経口的に摂取できる医薬又は食品として容易に調製できる。食品とは、健康食品、機能性食品及びサプリメントを含む。また、経鼻的又は経皮的に摂取する医薬や、注射により投与する医薬、経皮的に使用する美容品としての調製も可能である。
本発明の組成物は、医薬上、化粧品上、又は食品衛生上許容される担体を用いて製剤化してもよい。製剤としては、例えば固形製剤又は液状製剤が挙げられる。医薬上、化粧品上、又は食品衛生上許容される担体としては、製剤素材として慣用の各種有機又は無機担体物質が用いられ、固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤や、液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤（乳化剤、増粘剤）等が挙げられる。また必要に応じて、保存剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤、香料等の製剤添加物を用いることもできる。
本発明の組成物は、飲食品、医薬品、化粧品として調製することができる。本発明の医薬品、食品、化粧品における組成物の含有量は、例えば固形製剤であれば、植物由来の有効成分を抽出した抽出物として、製剤の約１～９９重量％であり、好ましくは約５～９０重量％であり、より好ましくは、約１０～８０重量％である。液状製剤であれば、抽出乾燥物として製剤の約０．０００１～８０重量％であり、好ましくは約１０～５０重量％であり、より好ましくは、約２０～３５重量％である。
また液状製剤は、極性溶媒抽出エキスをそのまま又は濃縮した濃縮物をそのまま使用することもできる。好ましくは、有効成分の由来となる植物に対し、１０～４０倍の極性溶媒（好ましくは、水）を用い、１～３時間抽出した場合の抽出率（エキスの回収率）が２５％～３３％である抽出液を液状製剤とすることができる。
本発明の飲食品、医薬品は、経口的に摂取されることが好ましい。食後、食前又は食間に摂取することがより好ましい。本発明における摂取量及び摂取回数は、年齢、体重、投与形態などにより異なるが、通常成人一日あたり植物由来の有効成分を抽出した抽出物として、体重１ｋｇあたり約１ｍｇ～５００ｍｇ、好ましくは約５ｍｇ～３００ｍｇとなるように服用できる。この量を、通常１～数回、好ましくは１～３回に分けて服用することが好ましい。
液状製剤の場合、極性溶媒（好ましくは、水）で抽出して得られる抽出液を摂取することが好ましく、通常１～数回、好ましくは１～３回に分けて摂取することがさらに好ましい。
さらに、本発明の医薬品は、経鼻的、経皮的に投与されるものでもよく、注射器を用いて、静脈、腹腔、皮内、皮下、筋肉等に投与されてもよい。本発明の化粧品は、経皮的に投与されるものである。
本発明の組成物は、線維芽細胞の増殖促進作用もしくはコラーゲン産生促進作用を有しており、さらには生体内での肝細胞増殖因子の産出を誘導する。したがって、肝細胞増殖因子の産出、線維芽細胞の増殖、及び／又はコラーゲン産生によって治療及び／又は予防されるさまざまな疾患に効果を発揮する。具体的には、肝疾患（肝炎、肝硬変、肝不全、その他の肝障害）、腎疾患（糸球体腎炎、腎不全、腎性貧血症、糖尿病性腎症、その他の腎障害）、皮膚疾患、眼疾患（角膜潰瘍等）、肺疾患（肺炎、肺気腫、肺結核、慢性閉塞性肺疾患、塵肺、肺線維症、その他の肺障害）、胃十二指腸疾患（胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、その他の胃十二指腸障害）、癌疾患や癌治療における障害、心臓又は四肢の虚血性疾患又は動脈疾患、血液疾患（血小板減少症、血流障害等）、骨疾患（骨粗鬆症、骨異形成症、変形性関節炎、その他の骨障害）、又は中枢疾患（神経分化異常症等）、皮膚疾患（アトピー性皮膚炎、老人性乾皮症）等が挙げられる。本発明の飲食品、医薬品、化粧品は、これらの疾患の治療及び／又は予防に用いることができる。
本発明の飲食品、医薬品、化粧品の投与又は摂取対象としては、ヒトが好ましいが、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、サル、ブタ等の哺乳類や、鳥類、爬虫類、両生類、魚類に属する愛玩動物や畜産・養殖種、実験用動物等に投与又は摂取させてもよい。
以下、実施例を通じて本発明をさらに詳細に説明する。ただし、本発明の範囲がこれら実施例に限定されるものではない。
実施例及び比較例の線維芽細胞増殖促進作用はヒト皮膚線維芽細胞（NHDF）（クラボウ社製、新生児由来）を用いて測定した。5%FBSを含有するDMEMを用いて96穴マイクロプレートにNHDFを2×104 cells/wellの細胞密度で播種し、CO2インキュベーターにて37℃、5%CO2条件下で24時間培養した。培地を除去後、あらかじめ0.5%FBSを含有するDMEMを用いて調製した試験試料含有培地を100μLずつ添加し、24時間培養した。培地を除去後、MTT溶液を各ウェルに100μLずつ添加し、CO2インキュベーターにて37℃、5%CO2条件下で2時間培養した。MTT溶液を除去後、isopropanolを100μLずつ添加し、生成したformazanを抽出した。マイクロプレートリーダーを用いて570 nmおよび650 nmにおける吸光度を測定し、その差分（Abs(570-650)）を算出した。陰性対照のAbs(570-650)を100%として被験物質のMTT還元能を算出し、その結果から被験物質の細胞増殖促進効果の有無を評価した。
実施例及び比較例のコラーゲン産生促進作用についても同じNHDFを用いて測定した。増殖培地を用いて96穴マイクロプレートにNHDFを2×104cells/wellの細胞密度で播種した。CO2インキュベーターにて37℃、5%CO2下で24時間培養した。所定の濃度の被験物質を含む培地及び陰性対照に培地交換を行い、さらに24時間培養した。培養後、培養上清を回収したのち、細胞をPBS(-)で洗浄し、0.5%Triton X-100溶液で溶解して、BCA protein Assay Kit（Thermo Fisher）を用いてタンパク定量を行った。培養上清中のコラーゲン量は、Ｉ型コラーゲン測定キットを用いて測定した。
実施例及び比較例の肝細胞増殖因子産出誘導活性は、肝細胞増殖因子産出能を有するヒト皮膚線維芽細胞（SF4-1細胞）を用いて測定した。SF4-1細胞を、1.5×104cells/wellの細胞密度で、96穴プレートに播種した。1重量％のFCSを添加したDMEM培地に交換し、被験物質をSF4-1細胞の培養液に複数の濃度となるよう添加した。また、陽性対照として肝細胞増殖因子産出活性を有することが知られているヘパリンを1μg/mL添加し、陰性対照として蒸留水を添加した。SF4-1細胞を48時間培養し、培養液中の肝細胞増殖因子量をELISA法で測定した。
紅花由来抽出物の作製
乾燥された紅花を数ミリ～１ｃｍ前後に裁断加工した。得られた紅花に水を加え、加圧抽出機にて、２～３気圧で２時間煮沸抽出後濾過した。得られた濾液をアルミパックに分包し、紅花由来の有効成分を含む抽出物を作製した。
乾燥された紅花を数ミリ～１ｃｍ前後に裁断加工した。得られた紅花に水を加え、加圧抽出機にて、２～３気圧で２時間煮沸抽出後濾過した。得られた濾液をアルミパックに分包し、紅花由来の有効成分を含む抽出物を作製した。
紅花由来抽出物（比較例１）を０．２重量％で添加した線維芽細胞増殖促進作用を図１に、コラーゲン産生促進作用を図２に示した。
莪朮由来抽出物の作製
乾燥された莪朮を数ミリ～１ｃｍ前後に裁断加工した。得られた莪朮に水を加え、加圧抽出機にて、２～３気圧で２時間煮沸抽出後濾過した。得られた濾液をアルミパックに分包し、莪朮由来の有効成分を含む抽出物を作製した。
乾燥された莪朮を数ミリ～１ｃｍ前後に裁断加工した。得られた莪朮に水を加え、加圧抽出機にて、２～３気圧で２時間煮沸抽出後濾過した。得られた濾液をアルミパックに分包し、莪朮由来の有効成分を含む抽出物を作製した。
莪朮由来抽出物（比較例２）を０．２重量％で添加した線維芽細胞増殖促進作用を図１に、コラーゲン産生促進作用を図２に示した。
複数種の極性溶媒抽出エキスの作製
乾燥された紅花、莪朮、枸杞子、石菖蒲、欝金、人参、田七、忍冬藤、大棗、甘草、仙茅及び蓮子芯を、それぞれ数ミリ～１ｃｍ前後に裁断加工し、混合した。得られた混合物に水を加え、加圧抽出機にて、２～３気圧で２時間煮沸抽出後濾過した。得られた濾液をアルミパックに分包し、これら１２種類の植物由来の有効成分を含む抽出物を作製した。
乾燥された紅花、莪朮、枸杞子、石菖蒲、欝金、人参、田七、忍冬藤、大棗、甘草、仙茅及び蓮子芯を、それぞれ数ミリ～１ｃｍ前後に裁断加工し、混合した。得られた混合物に水を加え、加圧抽出機にて、２～３気圧で２時間煮沸抽出後濾過した。得られた濾液をアルミパックに分包し、これら１２種類の植物由来の有効成分を含む抽出物を作製した。
実施例１を様々な濃度で添加した線維芽細胞増殖促進作用を図１に、コラーゲン産生促進作用を図２に示した。複数の混合した極性溶媒抽出エキスを使用することで、何も添加しない場合（陰性対照；N.C.）や、比較例１及び２と比べて、線維芽細胞増殖促進作用及びコラーゲン産生促進作用が顕著に高くなることが分かった。
蓮の実の熟成工程
蓮の実の熟成を行った。収穫直後の蓮の実を１０～５０℃の温度で、５～１００日間、保存した。熟成前後の蓮の実の一例の写真を図３に示す。熟成前の蓮の実表面（図３A）は、マンセル表色系でＧ５／１０であったが、熟成工程後の蓮の実表面（図３B）は、Ｇ２／２に変化した。
蓮の実の熟成を行った。収穫直後の蓮の実を１０～５０℃の温度で、５～１００日間、保存した。熟成前後の蓮の実の一例の写真を図３に示す。熟成前の蓮の実表面（図３A）は、マンセル表色系でＧ５／１０であったが、熟成工程後の蓮の実表面（図３B）は、Ｇ２／２に変化した。
〔組成物１の調製〕
表面のマンセル値がG2/4の蓮の実から得られ、ネフェリン含量が０．５６重量％（1.126g/200g）の蓮子芯３ｇ、石菖蒲９ｇ、人参６ｇ、田七人参６ｇ、紅花６ｇ、莪朮９ｇ、枸杞子９ｇ、鬱金６ｇ、忍冬藤９ｇ、大棗６ｇ、甘草３ｇ、仙茅６ｇに水を１６００ｍＬ加え、加圧抽出機にて、２～３気圧で２時間煮沸抽出後、濾過した。得られた濾液（組成物１；１２００ｍＬ）を８分してアルミパックに分包した。上記各生薬は、乾燥生薬を数ミリ～１ｃｍ前後に裁断加工されたものを使用した。
表面のマンセル値がG2/4の蓮の実から得られ、ネフェリン含量が０．５６重量％（1.126g/200g）の蓮子芯３ｇ、石菖蒲９ｇ、人参６ｇ、田七人参６ｇ、紅花６ｇ、莪朮９ｇ、枸杞子９ｇ、鬱金６ｇ、忍冬藤９ｇ、大棗６ｇ、甘草３ｇ、仙茅６ｇに水を１６００ｍＬ加え、加圧抽出機にて、２～３気圧で２時間煮沸抽出後、濾過した。得られた濾液（組成物１；１２００ｍＬ）を８分してアルミパックに分包した。上記各生薬は、乾燥生薬を数ミリ～１ｃｍ前後に裁断加工されたものを使用した。
実施例２の抽出物が有する肝細胞増殖因子産出誘導活性を、肝細胞増殖因子産出能を有するヒト皮膚線維芽細胞（SF4-1細胞）を用いて測定した。0.5μg当量/mLの実施例２の抽出物をSF4-1細胞の培養液に添加した場合、肝細胞増殖因子産出量は、陰性対照における肝細胞増殖因子量を1とした相対量で12.8倍であった。
〔組成物２の調製〕
表面のマンセル値がG3/4の蓮の実から得られ、ネフェリン含量が０．５５重量％（0.997g/180g）の蓮子芯４８ｋｇ、石菖蒲７２ｋｇ、人参３２ｋｇ、田七人参３２ｋｇ、紅花６４ｋｇ、莪朮６４ｋｇ、枸杞子１２８ｋｇ、鬱金６４ｋｇ、忍冬藤１１２ｋｇ、大棗６４ｋｇ、甘草４８ｋｇ、鎖陽７２ｋｇ（全８００ｋｇ）を３０メッシュ抽出バスケットに入れ、抽出容器に収容した。混合物の約１４倍の水を加え、９０～９５℃で、２時間熱水抽出した。抽出後、抽出バスケットを吊り上げ固液分離した。分離した抽出エキスを９５℃で、１時間加熱した。ついで、濾過助剤としてファインフローＢ（昭和化学工業株式会社製）及びラヂオライト＃２０００（昭和化学工業株式会社製）を添加し、６０℃になるまで攪拌後、濾過した。濾液は、まずステンレス製の１０メッシュの金網にて粗濾過し、その後フィルタープレスで濾過した。次いで、濾液中の固形分が約７０％になるまで減圧濃縮し、約２００ｋｇの黒褐色の粘稠な軟エキスを得た。得られた軟エキスは９５℃で１時間加熱滅菌し、組成物２とした。上記各生薬は、乾燥生薬を数ミリ～１ｃｍ前後に裁断加工されたものを使用した。
表面のマンセル値がG3/4の蓮の実から得られ、ネフェリン含量が０．５５重量％（0.997g/180g）の蓮子芯４８ｋｇ、石菖蒲７２ｋｇ、人参３２ｋｇ、田七人参３２ｋｇ、紅花６４ｋｇ、莪朮６４ｋｇ、枸杞子１２８ｋｇ、鬱金６４ｋｇ、忍冬藤１１２ｋｇ、大棗６４ｋｇ、甘草４８ｋｇ、鎖陽７２ｋｇ（全８００ｋｇ）を３０メッシュ抽出バスケットに入れ、抽出容器に収容した。混合物の約１４倍の水を加え、９０～９５℃で、２時間熱水抽出した。抽出後、抽出バスケットを吊り上げ固液分離した。分離した抽出エキスを９５℃で、１時間加熱した。ついで、濾過助剤としてファインフローＢ（昭和化学工業株式会社製）及びラヂオライト＃２０００（昭和化学工業株式会社製）を添加し、６０℃になるまで攪拌後、濾過した。濾液は、まずステンレス製の１０メッシュの金網にて粗濾過し、その後フィルタープレスで濾過した。次いで、濾液中の固形分が約７０％になるまで減圧濃縮し、約２００ｋｇの黒褐色の粘稠な軟エキスを得た。得られた軟エキスは９５℃で１時間加熱滅菌し、組成物２とした。上記各生薬は、乾燥生薬を数ミリ～１ｃｍ前後に裁断加工されたものを使用した。
実施例３の抽出物が有する肝細胞増殖因子産出誘導活性を、肝細胞増殖因子産出能を有するヒト皮膚線維芽細胞（SF4-1細胞）を用いて測定した。0.5μg当量/mLの実施例２の抽出物をSF4-1細胞の培養液に添加した場合、肝細胞増殖因子産出量は、陰性対照における肝細胞増殖因子量を1とした相対量で10.5倍であった。
〔組成物３の調製〕
表面のマンセル値がG2/2の蓮の実から得られ、ネフェリン含量が０．６２重量％(1.18g/190g）の蓮子芯３ｇ、人参６ｇ、田七人参６ｇ、紅花６ｇ、莪朮９ｇ、枸杞子９ｇ、鬱金６ｇ、大棗６ｇ、甘草３ｇに水を１４００ｍＬ加え、９０～９５℃で２時間熱水抽出した後、濾布を用いて濾過し、濾液（１０００ｍＬ）が得られた。
表面のマンセル値がG2/2の蓮の実から得られ、ネフェリン含量が０．６２重量％(1.18g/190g）の蓮子芯３ｇ、人参６ｇ、田七人参６ｇ、紅花６ｇ、莪朮９ｇ、枸杞子９ｇ、鬱金６ｇ、大棗６ｇ、甘草３ｇに水を１４００ｍＬ加え、９０～９５℃で２時間熱水抽出した後、濾布を用いて濾過し、濾液（１０００ｍＬ）が得られた。
実施例４の抽出物が有する肝細胞増殖因子産出誘導活性を、肝細胞増殖因子産出能を有するヒト皮膚線維芽細胞（SF4-1細胞）を用いて測定した。0.5 μg当量/mLの実施例３の抽出物をSF4-1細胞の培養液に添加した場合、肝細胞増殖因子産出量は、陰性対照における肝細胞増殖因子量を1とした相対量で6.5倍であった。
〔組成物４の調製〕
表面のマンセル値がG3/4の蓮の実から得られ、ネフェリン含量が０．５１重量％（1.02g/200g）の蓮子芯３ｇ、石菖蒲９ｇ、人参４ｇ、田七４ｇ、紅花６ｇ、鬱金６ｇ、大棗４ｇ、甘草４ｇに、水を１６００ｍＬ加え、加圧抽出機にて、２～３気圧で２時間煮沸抽出後、濾過した。得られた濾液１２００ｍＬを８分してアルミパックに分包した。上記各生薬は、乾燥生薬を数ミリ～１ｃｍ前後に裁断加工されたものを使用した。
表面のマンセル値がG3/4の蓮の実から得られ、ネフェリン含量が０．５１重量％（1.02g/200g）の蓮子芯３ｇ、石菖蒲９ｇ、人参４ｇ、田七４ｇ、紅花６ｇ、鬱金６ｇ、大棗４ｇ、甘草４ｇに、水を１６００ｍＬ加え、加圧抽出機にて、２～３気圧で２時間煮沸抽出後、濾過した。得られた濾液１２００ｍＬを８分してアルミパックに分包した。上記各生薬は、乾燥生薬を数ミリ～１ｃｍ前後に裁断加工されたものを使用した。
実施例５の抽出物が有する肝細胞増殖因子産出誘導活性を、実施例２と同様の方法で測定したところ、肝細胞増殖因子産出量は、陰性対照における肝細胞増殖因子量を1とした相対量で7.1倍であった。
〔組成物５の調製〕
表面のマンセル値がG3/4の蓮の実から得られ、ネフェリン含量が０．５１重量％(0.89g/175g)の蓮子芯５ｇ、鎖陽９ｇ、人参４ｇ、紅花６ｇをそれぞれ数ミリ～１ｃｍ前後に裁断加工して混合した。得られた混合物に水を１３００ｍＬ加え、加圧抽出機にて、２～３気圧で２時間煮沸抽出後濾過した。得られた濾液をアルミパックに分包し、これら１２種類の植物由来の有効成分を含む抽出物を作製した。
表面のマンセル値がG3/4の蓮の実から得られ、ネフェリン含量が０．５１重量％(0.89g/175g)の蓮子芯５ｇ、鎖陽９ｇ、人参４ｇ、紅花６ｇをそれぞれ数ミリ～１ｃｍ前後に裁断加工して混合した。得られた混合物に水を１３００ｍＬ加え、加圧抽出機にて、２～３気圧で２時間煮沸抽出後濾過した。得られた濾液をアルミパックに分包し、これら１２種類の植物由来の有効成分を含む抽出物を作製した。
実施例６の抽出物が有する肝細胞増殖因子産出誘導活性を、実施例２と同様の方法で測定したところ、肝細胞増殖因子産出量は、陰性対照における肝細胞増殖因子量を1とした相対量で5.1倍であった。
〔本発明の肝細胞増殖因子産出誘導剤の製造方法〕
実施例３の抽出物に２倍量の蒸留水を加え、室温で１時間混和し、遠心した。遠心後の上清を20% エタノール/水混合液により平衡化したSephadex LH-20カラム（GEヘルスケアバイオサイエンス社製）に添加し、同溶液を用いて溶出し、最も早く溶出される画分を培養液に5%添加して肝細胞増殖因子産出誘導活性をELISA法で測定した。肝細胞増殖因子産出量は、陰性対照における肝細胞増殖因子量を1とした相対量で18.3倍であった。
実施例３の抽出物に２倍量の蒸留水を加え、室温で１時間混和し、遠心した。遠心後の上清を20% エタノール/水混合液により平衡化したSephadex LH-20カラム（GEヘルスケアバイオサイエンス社製）に添加し、同溶液を用いて溶出し、最も早く溶出される画分を培養液に5%添加して肝細胞増殖因子産出誘導活性をELISA法で測定した。肝細胞増殖因子産出量は、陰性対照における肝細胞増殖因子量を1とした相対量で18.3倍であった。
〔マウスに対する肝細胞増殖因子産出誘導剤の肝細胞増殖因子産出誘導活性〕
実施例７の抽出物画分をマウスに投与して血漿および大脳中の肝細胞増殖因子量の測定を行った。健常マウス（ICR、8週齢、雌）に１日１回 30 mg量の抽出物を経口投与し、７日後に血液および大脳を回収した。表１に示すように、実施例６の抽出物の投与によって肝細胞増殖因子の産出量の増加が認められたことから、顕著な肝細胞増殖因子誘導活性を有することが確認された。
実施例７の抽出物画分をマウスに投与して血漿および大脳中の肝細胞増殖因子量の測定を行った。健常マウス（ICR、8週齢、雌）に１日１回 30 mg量の抽出物を経口投与し、７日後に血液および大脳を回収した。表１に示すように、実施例６の抽出物の投与によって肝細胞増殖因子の産出量の増加が認められたことから、顕著な肝細胞増殖因子誘導活性を有することが確認された。
〔比較組成物の調製〕
実施例２、３、４、５、６で用いた蓮子芯を、蓮の採取直後の蓮の実（表面のマンセル値がG5/10）から得られた蓮子芯で、ネフェリン含量が0.004%（0.04g/1kg）のものに置き換えて、それぞれ同様の配合で組成物を調製した。
実施例２、３、４、５、６で用いた蓮子芯を、蓮の採取直後の蓮の実（表面のマンセル値がG5/10）から得られた蓮子芯で、ネフェリン含量が0.004%（0.04g/1kg）のものに置き換えて、それぞれ同様の配合で組成物を調製した。
［比較例３、４、５、６、７の肝細胞増殖因子産出誘導活性測定］
肝細胞増殖因子産出誘導活性を、肝細胞増殖因子産出能を有するヒト皮膚繊維芽細胞（ＳＦ４-１細胞）を用いて測定した。各培養液中における肝細胞増殖因子の量を、陰性対照における肝細胞増殖因子量を１とした相対量で測定した。（比較例３、４、５、６、７）各培養液中における肝細胞増殖因子の量は、蒸留水１に対してそれぞれ1.1倍、1.1倍、1倍、1.2及び1.2倍であった。実施例２、３、４、５、６の組成物と比較して、肝細胞増殖因子がほとんど産出されていないことが分かった。
肝細胞増殖因子産出誘導活性を、肝細胞増殖因子産出能を有するヒト皮膚繊維芽細胞（ＳＦ４-１細胞）を用いて測定した。各培養液中における肝細胞増殖因子の量を、陰性対照における肝細胞増殖因子量を１とした相対量で測定した。（比較例３、４、５、６、７）各培養液中における肝細胞増殖因子の量は、蒸留水１に対してそれぞれ1.1倍、1.1倍、1倍、1.2及び1.2倍であった。実施例２、３、４、５、６の組成物と比較して、肝細胞増殖因子がほとんど産出されていないことが分かった。
〔軟カプセル剤の調製〕
実施例２の組成物で得られたアルミパック2包（300ml）に１２ｇ、ＥＰＡ及びＤＨＡ含有魚油500ml、ミツロウ３ｇ、グリセリン脂肪酸エステル1ｇ及び大豆レシチン0.３ｇを混合し、ペースト状の組成物６とする。ロータリー法にてグリセリン及びカラメル色素を含むゼラチンシート間に組成物６を０．１ｇずつ注入、充填した軟カプセル剤５ｇを製造した。
実施例２の組成物で得られたアルミパック2包（300ml）に１２ｇ、ＥＰＡ及びＤＨＡ含有魚油500ml、ミツロウ３ｇ、グリセリン脂肪酸エステル1ｇ及び大豆レシチン0.３ｇを混合し、ペースト状の組成物６とする。ロータリー法にてグリセリン及びカラメル色素を含むゼラチンシート間に組成物６を０．１ｇずつ注入、充填した軟カプセル剤５ｇを製造した。
〔ドリンク剤の調製〕
精製水約９００ｍＬに実施例３で得られた組成物２を２５ｇ、ハチミツ３０ｇ、クエン酸３ｇ、アセスルファムカリウム０．００2ｇ、及び甘味料スクラロース０．０6ｇを加えて全量を１Ｌとした後、攪拌機で攪拌し、ろ過後加熱滅菌した。滅菌した溶液をクリーンルームで2０ｍＬずつ瓶に充填、密栓し、ドリンク剤とした。
精製水約９００ｍＬに実施例３で得られた組成物２を２５ｇ、ハチミツ３０ｇ、クエン酸３ｇ、アセスルファムカリウム０．００2ｇ、及び甘味料スクラロース０．０6ｇを加えて全量を１Ｌとした後、攪拌機で攪拌し、ろ過後加熱滅菌した。滅菌した溶液をクリーンルームで2０ｍＬずつ瓶に充填、密栓し、ドリンク剤とした。
Claims (12)
- 蓮子芯、石菖蒲、人参、及び田七を含有する、医薬用、食用、及び／又は美容用組成物。
- さらに、紅花、莪朮、枸杞子、欝金、忍冬藤、大棗、甘草、仙茅、鎖陽、及び、益智仁からなる群から選ばれる１又は複数を含有する、請求項１に記載の医薬用、食用、及び／又は美容用組成物。
- 蓮子芯、石菖蒲、人参、田七、紅花、莪朮、枸杞子、欝金、忍冬藤、大棗、甘草、仙茅、鎖陽、及び、益智仁を含有する医薬用、食用、及び／又は美容用組成物。
- 極性溶媒抽出エキスを含有する医薬用、食用、及び／又は美容用組成物であって、前記極性溶媒抽出エキスが、蓮子芯、石菖蒲、人参、田七、紅花、莪朮、枸杞子、欝金、忍冬藤、大棗、甘草、仙茅、鎖陽、及び、益智仁の極性溶媒抽出エキスである、医薬用、食用、及び／又は美容用組成物。
- 請求項１～４いずれか一項に記載の組成物を有効成分として含有する線維芽細胞増殖促進剤及び／又はコラーゲン産生促進剤。
- 前記蓮子芯が、熟成工程により熟成された蓮の実から得られたものであり、前記熟成工程が、表面の色調がマンセル表色系で明度が５以上である蓮の実を、前記表面の明度が４以下になるまで保存する工程である、請求項５に記載の線維芽細胞増殖促進剤及び／又はコラーゲン産生促進剤の製造方法。
- 前記熟成工程が、前記蓮の実を、１０℃～５０℃の温度で、５日～１００日間、保存する工程である、請求項６に記載の線維芽細胞増殖促進剤及び／又はコラーゲン産生促進剤の製造方法。
- 前記蓮子芯が、乾燥重量当たり０．３重量％以上のネフェリンを含有する、請求項６に記載の線維芽細胞増殖促進剤及び／又はコラーゲン産生促進剤の製造方法。
- 請求項１～４いずれか一項に記載の組成物を有効成分として含有する肝細胞増殖因子産出誘導剤。
- 前記蓮子芯が、熟成工程により熟成された蓮の実から得られたものであり、前記熟成工程が、表面の色調がマンセル表色系で明度が５以上である蓮の実を、前記表面の明度が４以下になるまで保存する工程である、請求項９に記載の肝細胞増殖因子産出誘導剤の製造方法。
- 前記熟成工程が、前記蓮の実を、１０℃～５０℃の温度で、５日～１００日間、保存する工程である、請求項１０に記載の肝細胞増殖因子産出誘導剤の製造方法。
- 前記蓮子芯が、乾燥重量当たり０．３重量％以上のネフェリンを含有する、請求項１１に記載の肝細胞増殖因子産出誘導剤の製造方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2022200729 | 2022-12-16 | ||
| JP2022-200729 | 2022-12-16 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| WO2024128147A1 true WO2024128147A1 (ja) | 2024-06-20 |
Family
ID=91484924
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PCT/JP2023/043949 WO2024128147A1 (ja) | 2022-12-16 | 2023-12-08 | 組成物、剤、及び、それらの製造方法。 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| WO (1) | WO2024128147A1 (ja) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH1036279A (ja) * | 1996-07-18 | 1998-02-10 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | 植物抽出物含有線維芽細胞増殖促進剤 |
| JP2002029980A (ja) * | 2000-07-12 | 2002-01-29 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | エストロゲン様作用剤及びコラーゲン産生促進剤、線維芽細胞増殖作用剤、美容用食品並びに皮膚化粧料 |
| WO2016117705A1 (ja) * | 2015-01-23 | 2016-07-28 | 株式会社ニューロゲン | 肝細胞増殖因子産出誘導剤 |
| JP2016216365A (ja) * | 2015-05-14 | 2016-12-22 | 医療環境テクノ株式会社 | 皮膚を修復し活性化するための医薬組成物およびその製造方法 |
-
2023
- 2023-12-08 WO PCT/JP2023/043949 patent/WO2024128147A1/ja unknown
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH1036279A (ja) * | 1996-07-18 | 1998-02-10 | Ichimaru Pharcos Co Ltd | 植物抽出物含有線維芽細胞増殖促進剤 |
| JP2002029980A (ja) * | 2000-07-12 | 2002-01-29 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | エストロゲン様作用剤及びコラーゲン産生促進剤、線維芽細胞増殖作用剤、美容用食品並びに皮膚化粧料 |
| WO2016117705A1 (ja) * | 2015-01-23 | 2016-07-28 | 株式会社ニューロゲン | 肝細胞増殖因子産出誘導剤 |
| JP2016216365A (ja) * | 2015-05-14 | 2016-12-22 | 医療環境テクノ株式会社 | 皮膚を修復し活性化するための医薬組成物およびその製造方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| KHAN ABIDULLAH, BAI HONGLIANG, SHU MAOGUO, CHEN MINGXIA, KHAN AMIN, BAI ZHUANLI: "Antioxidative and antiphotoaging activities of neferine upon UV-A irradiation in human dermal fibroblasts", CELL DEATH AND DISEASE, vol. 38, no. 6, 21 December 2018 (2018-12-21), XP093180986, ISSN: 0144-8463, DOI: 10.1042/BSR20181414 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101279598B1 (ko) | 녹용, 산수유, 당귀, 진피, 구기자, 연근, 산약, 울금, 천마, 배초향, 계피, 복분자, 오미자 및 홍삼의 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역증강 조성물 | |
| KR101346244B1 (ko) | 생약 제제를 포함하는 숙취 예방 또는 해소용 조성물 | |
| KR100795976B1 (ko) | 한약재 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 또는치료용 약학 조성물 | |
| KR101229254B1 (ko) | 녹용, 당귀, 산수유, 구기자, 울금, 산약, 진피, 배초향, 천마, 계피, 오미자, 홍삼, 맥문동 및 감귤분말의 추출물을 유효성분으로 포함하는 면역증강 조성물 | |
| EP2436388B1 (en) | Composition for increasing the bioavailability of saponin | |
| JP7471393B2 (ja) | 呼吸器疾患の予防、改善又は効果がある茶組成物及びこれを含む薬学組成物 | |
| KR100860080B1 (ko) | 항염, 항알레르기 및 항천식 활성을 갖는 꼬리풀속 식물추출물을 함유하는 약학조성물 | |
| JP2009126853A (ja) | 治療剤 | |
| JP6712056B2 (ja) | 肝細胞増殖因子産出誘導剤 | |
| KR100800359B1 (ko) | 탈모방지 및 발모촉진효과를 나타내는 조성물 | |
| US20220257688A1 (en) | Composition comprising salvia miltiorrhiza or paeonia lactiflora extract as active ingredient for prevention or treatment of lipid metabolism disorder | |
| WO2024128147A1 (ja) | 組成物、剤、及び、それらの製造方法。 | |
| KR101910898B1 (ko) | 새콩 분말 또는 이의 추출물을 포함하는 당뇨병 및 당뇨 합병증 예방 및 치료를 위한 조성물 | |
| KR20210050034A (ko) | 엉겅퀴, 민들레, 여주, 돼지감자, 양파, 꾸지뽕, 아로니아 및 생강을 포함하는 당뇨의 예방, 치료 또는 개선용 조성물 | |
| KR20030079075A (ko) | 탈모방지 및 발모촉진 효능을 지닌 조성물 및 그 이용 방법 | |
| KR20190136786A (ko) | 대장암의 예방 또는 치료용 약학 조성물 | |
| KR20120115471A (ko) | 돌콩의 열처리 분말 또는 추출물을 유효성분으로 하는 당뇨병 및 당뇨합병증의 예방 및 치료를 위한 조성물 | |
| KR100526945B1 (ko) | 민들레 환 및 그의 제조방법 | |
| KR101131719B1 (ko) | 백두옹 추출물을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 치료 및 예방용 조성물 | |
| KR101816200B1 (ko) | 한약재 유래의 간 질환의 예방 또는 치료용 생약조성물 | |
| US9132160B2 (en) | Composition for preventing and/or alleviating hangover comprising extracts of sophora flavescens | |
| KR102355104B1 (ko) | 순무를 포함한 복합추출물을 유효성분으로 하는 호흡기 질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물 및 식품 조성물 | |
| KR102639283B1 (ko) | 건강 추출물 및 석류 추출물을 포함하는 위장 장애의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
| KR20140083493A (ko) | 참모자반 추출물 또는 괭생이모자반 추출물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물 | |
| KR101241338B1 (ko) | 편축 추출물을 유효성분으로 함유하는 지질 관련 심혈관 질환 또는 비만의 예방 및 치료용 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| 121 | Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application |
Ref document number: 23903434 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |