[go: up one dir, main page]
More Web Proxy on the site http://driver.im/

WO2017034245A1 - 야누스 키나제 1 선택적 억제제 및 그 의약 용도 - Google Patents

야누스 키나제 1 선택적 억제제 및 그 의약 용도 Download PDF

Info

Publication number
WO2017034245A1
WO2017034245A1 PCT/KR2016/009205 KR2016009205W WO2017034245A1 WO 2017034245 A1 WO2017034245 A1 WO 2017034245A1 KR 2016009205 W KR2016009205 W KR 2016009205W WO 2017034245 A1 WO2017034245 A1 WO 2017034245A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
pyrrolo
methyl
pyrimidin
pyrrolidin
amine
Prior art date
Application number
PCT/KR2016/009205
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
조지연
이선민
정미숙
정현욱
문홍식
Original Assignee
양지화학 주식회사
한화제약주식회사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 양지화학 주식회사, 한화제약주식회사 filed Critical 양지화학 주식회사
Priority to JP2018509745A priority Critical patent/JP6605121B2/ja
Priority to US15/752,635 priority patent/US10407430B2/en
Priority to EP16839534.1A priority patent/EP3327021A4/en
Priority to CN201680061097.4A priority patent/CN108137608B/zh
Publication of WO2017034245A1 publication Critical patent/WO2017034245A1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Definitions

  • the present invention relates to a Janus kinase inhibitor, and more particularly, to a compound having high selectivity for a Janus kinase 1 inhibitor and a medicinal use thereof.
  • T-cells transmit signals from antigen presenting cells through T-cell receptors (TCRs) on the cell surface to activate various protein kinases in cells such as Janus kinase. By passing it to the sub-effector. At this time, T-cells secrete several interleukin (IL) or interferon- ⁇ (interferon; IFN) to activate various leukocytes as well as to activate B-cells.
  • IL interleukin
  • IFN interferon- ⁇
  • Protein kinases involved in signaling in T-cells are typically four Janus kinase isozymes, namely JAK1, JAK2, JAK3 and TYK2 (tyrosine kinase 2).
  • JAK1, JAK2, JAK3 and TYK2 tyrosine kinase 2
  • JAK has been widely studied as a target for autoimmune and / or inflammatory diseases
  • JAK inhibitors are rheumatoid arthritis, psoriasis, atopic dermatitis, lupus, multiple sclerosis, complications of type I diabetes and diabetes, asthma, autoimmune thyroid disorders
  • Agents including autoimmune diseases, immune system dysfunction, viral diseases, and cancer, such as ulcerative colitis, Crohn's disease, Alzheimer's disease, cancer, leukemia and organ transplant or xenograft rejection It has been reported to be useful for the treatment of symptoms ( Imunmun . Rev. , 2008 , 223 (1) , 132-142; Proc . Natl . Acad . Sci . USA , 1995 , 92 (19) , 8724-8728; Science , 1995 , 270 (5237) , 800-802; Trends Pharmacol . Sci . , 2004 , 25 (11) , 558-562).
  • autoimmune diseases such as rheumatoid arthritis (RA) by JAK3 selective inhibitory activity.
  • Xeljanz ® component name: tofacitinib
  • JAK3 selective inhibitory activity has been approved by the FDA as a therapeutic agent for rheumatoid arthritis.
  • tofacitinib which was known to have JAK3 selective inhibitory activity at the beginning of development, has since been found to be a pan-JAK inhibitor with overall inhibitory activity against the JAK kinase family, and thus its efficacy as a therapeutic agent for rheumatoid arthritis.
  • JAK isozyme inhibitory activity is the most important factor.
  • JAK kinases play a key role in the signaling process by T-cell receptors It is JAK1 and JAK3 is found to play a very minor role.
  • JAK inhibitors focuses on JAK1, not JAK3, and recently, substances having JAK1 selective activity have been published one after another ( J. Med . Chem . , 2012) . , 55 (12) , 5901-5921; J. Med . Chem . , 2012 , 55 (13) , 6176-6193).
  • the tofacitinib found as the pan-JAK inhibitor is an infection caused by headache, nausea, diarrhea, and lowered immunity, hyperlipidemia, nasopharyngitis, increase of alanine transaminase (ALT) and aspartate transaminase (AST), severe anemia, reduction of neutrophils, etc. It has been reported to have side effects ( Mod. Rheumatol . , 2013 , 23 (3) , 415-424). In contrast, filgotinib is a JAK1 selective inhibitor and has not been reported to have the side effects of tofacitinib ( Arthritis Rheum. , 2012 , 64 ( Suppl . 10) , 2489).
  • JAK inhibitors have significantly higher therapeutic limits than other JAK isozyme inhibitors or non-selective inhibitors ( Expert Opin. Investig. Drugs, 2014, 23 (8), 1067-1077).
  • JAK1 is effective in the treatment of rheumatoid arthritis
  • JAK2 plays an essential role in the EPO signaling pathway essential for erythrocyte formation, so inactivation of JAK2 causes anemia in animal models.
  • compounds with a high rate of enzyme inhibition of JAK1 relative to JAK2 can broaden the relative therapeutic index for JAK2-dependent anemia. Therefore, selective inhibitors of JAK1 against JAK2 have potential as effective and low side effects therapeutics for rheumatoid arthritis and other immune diseases ( J. Med. Chem. , 2012 , 55 (13) , 6176-6193).
  • Patent document 1 discloses a very wide range of compounds having the following formula as a JAK inhibitor:
  • Patent Document 1 discloses a method for assaying inhibitory activity against JAK 1, 2, and 3, but does not provide specific data for any compound having the above formula, and also relates to selective inhibitory activity of JAK1. There is no mention.
  • Patent Document 2 describes that a compound having the following formula has an inhibitory activity against JAK3, and although there is a description of a method for assaying the inhibitory activity against JAK3, specific data are presented for any compound having the following formula. In addition, there is no mention of JAK1's selective inhibitory activity:
  • the patent document 2 is 3- ⁇ 4-methyl-3- [methyl- (7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl)-corresponding to the FDA approved drug tofacitinib. Amino] -piperidin-1-yl ⁇ -3-oxo-propionitrile is disclosed.
  • Patent Document 1 WO 2006/069080
  • Patent Document 2 US 6,956,041
  • One aspect provides a compound of Formula 1 or 2, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof.
  • Another aspect provides a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising a compound of Formula 1 or 2, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof and a pharmaceutically acceptable carrier.
  • Another aspect provides a method of inhibiting JAK activity using a compound of Formula 1 or 2, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof.
  • Another aspect provides a method of treating a disease in a subject by administering to the subject a compound of Formula 1 or 2, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof.
  • Another aspect provides a method of preparing a compound of Formula 1 or 2.
  • One aspect of the invention provides a compound of Formula 1, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof:
  • R 1 is hydrogen, C 1-2 alkyl, or cyclopropylmethyl
  • R 2 is 2-cyanoacetyl, 2-cyanoethyl, butyl, 2-azidoacetyl, 3-methylbutanoyl, isobutoxycarbonyl, anilinocarbonyl, methylsulfonyl, (trifluoromethyl) sul Ponyl, ethylsulfonyl, propylsulfonyl, isopropylsulfonyl, (1-methyl-1H-imidazol-4-yl) sulfonyl, phenylsulfonyl, (2-fluorophenyl) sulfonyl, (3-fluoro Rophenyl) sulfonyl, (4-fluorophenyl) sulfonyl, (2-cyanophenyl) sulfonyl, (3-cyanophenyl) sulfonyl, (4-cyanophenyl) sulfonyl, (2-cyanopheny
  • One embodiment of the compound of Formula 1 is a compound selected from the group consisting of the compounds listed below, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof:
  • Another aspect of the invention provides a compound of Formula 2, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof:
  • X is nitrogen or oxygen
  • R 1 is methyl
  • R 2 is 1- (2-cyanoacetyl) piperidin-4-yl, 1- (phenylsulfonyl) piperidin-4-yl, 1- (3-cyanophenylsulfonyl) piperidine- 4-yl, 1- (2-cyanoacetyl) piperidin-3-yl, 1- (3-cyanophenylsulfonyl) piperidin-3-yl, 1- (3-cyanophenylsulfonyl ) -4-methyl-piperidin-3-yl, 1- (2-cyanoacetyl) -3,3-dimethylpyrrolidin-4-yl, [1- (2-cyanoacetyl) piperidine -3-yl] methyl, or [1- (3-cyanophenylsulfonyl) piperidin-3-yl] methyl,
  • One embodiment of the compound of Formula 2 is a compound selected from the group consisting of the compounds listed below, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof:
  • the compound of the present invention may be substituted with a detectable label.
  • the detectable label can be an optical label, an electrical label, a magnetic label, or an indirect label.
  • An optical label is a substance that generates a detectable optical signal, and may be a luminescent substance such as a radioactive substance or a fluorescent substance.
  • An indirect label refers to an enzyme that converts a substrate to a chromophoric substance or a substance capable of generating a detectable label as a result of binding to a specific substance, such as its substrate, antibody or antigen.
  • the optical label may be an isotope of the elements constituting the compound of the present invention.
  • the compounds of the present invention may be those in which one or more of the elements constituting them are substituted with their isotopes, such as radioisotopes.
  • isotopes are 2 H (can be represented as D, which means deuterium), 3 H (can be represented by T, which means tritium), 11 C, 13 C, 14 C, 13 N, 15 N, 15 O, 17 O, 18 O, 18 F, 35 S, 36 Cl, 82 Br, 75 Br, 76 Br, 77 Br, 123 I, 124 I, 125 I, 131 I and the like.
  • Compounds of formulas (1) and (2) of the invention substituted with a detectable label can be used to identify the location of JAK in a cell or individual. Accordingly, it can be used to identify and treat disease sites associated with increased JAK activity.
  • the compounds of the present invention may be in the form of their pharmaceutically acceptable salts.
  • the salts are salts derived from conventional acid addition salts used in the field of JAK inhibitors, such as hydrochloric acid, bromic acid, sulfuric acid, sulfamic acid, phosphoric acid or nitric acid, and acetic acid, propionic acid, succinic acid, glycolic acid, stearic acid.
  • the salts also include salts derived from conventional metal salt forms, such as metals such as lithium, sodium, potassium, magnesium, or calcium.
  • the acid addition salts or metal salts may be prepared according to conventional methods known in the organic chemistry art.
  • the compounds of the present invention may also be in the form of solvates thereof.
  • solvate means a complex or aggregate formed by one or more solute molecules, ie, a compound of Formula 1 or 2 or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and one or more solvent molecules.
  • Solvates can be complexes or aggregates formed with, for example, water, methanol, ethanol, isopropanol or acetic acid.
  • the compounds of the present invention may also be in the form of their stereoisomers.
  • stereoisomers include all stereoisomers such as enantiomers and diastereomers.
  • the compound may be a stereoisomerically pure form of a stereoisomer or a mixture of one or more stereoisomers, for example a racemic mixture. Separation of certain stereoisomers may be carried out by one of the conventional methods known in the art.
  • Another aspect of the invention provides a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising a therapeutically effective amount of a compound of Formula 1 or 2, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof.
  • the compound of Formula 1 or 2 may exhibit an effect of inhibiting one or two or more activities of JAK isozyme.
  • “Inhibition” herein includes reducing one or more JAK isozyme activities.
  • JAK includes all enzymes of the Janus kinase family.
  • Compounds of some embodiments of the invention may inhibit the activity of JAK1, JAK2, JAK3 and TYK2.
  • Compounds of some embodiments of the invention may inhibit the activity of JAK1, JAK3 and TYK2.
  • the compounds of some embodiments of the present invention can mainly inhibit only JAK1.
  • the JAK inhibitory effect of this compound of the present invention was demonstrated by Test Example 1.
  • the compounds of the present invention showed real anti-inflammatory effects in croton oil-induced inflammatory animal models.
  • the JAK inhibitory effect is a measure of the extent to which JAK inhibits the conversion of ADP to ATP in the presence of the compound.
  • the inhibitory effect has a negative value. Measured below the negative control value, substantially equal to 0% showing no inhibitory efficacy.
  • any disease known to be treatable by JAK inhibitory activity may be used for the treatment of the called) (Immunol Rev., 2008, 223 (1.), 132-142;.... Proc Natl Acad Sci USA, 1995, 92 (19), 8724-8728; Science, 1995 , 270 (5237) , 800-802; Trends Pharmacol . Sci. , 2004 , 25 (11) , 558-562).
  • Diseases associated with JAK include autoimmune diseases, immune system dysfunction, viral diseases, allergic diseases, skin diseases, diseases associated with the IL-6 pathway, immune responses, hyperproliferative disorders, or cancer.
  • the autoimmune diseases include skin disease, multiple sclerosis, rheumatoid arthritis, juvenile arthritis, type I diabetes, lupus, psoriasis, inflammatory bowel disease, ulcerative colitis, Crohn's disease or autoimmune thyroid disease, and the immune system dysfunction Include allograft rejection, host disease, allograft rejection or graft-versus-host disease, wherein the viral disease is Epstein Barr virus (EBV), hepatitis B, hepatitis C, HIV, HTLV 1, chickenpox, subject Herpes virus (VZV) or human papilloma virus (HPV) disease, the cancer comprising prostate cancer, kidney cancer, liver cancer, pancreatic cancer, gastric cancer, breast cancer, lung cancer, cancer of the head and neck, glioblastoma, leukemia, lymphoma, or Including but not limited to multiple myeloma.
  • EBV Epstein Barr virus
  • VZV Herpes virus
  • HPV human papilloma
  • the immune response includes diarrhea, skin irritation, skin rash, contact dermatitis or allergic contact hypersensitivity, and the allergic disease includes asthma, food allergies, atopic dermatitis or rhinitis and is associated with the IL-6 pathway Diseases include, but are not limited to, Castleman's disease and Kaposi's sarcoma.
  • the compounds of the present invention can selectively inhibit JAK1 relative to JAK2 (see Test Example 1).
  • the term " selectively " herein refers to a case in which a compound exhibits higher inhibitory activity on a particular JAK compared to at least one JAK.
  • Compounds of the invention may optionally have at least 1-fold, 1.1-fold, 5-fold, 10-fold, 20-fold, 40-fold, 100-fold, 200-fold, 500-fold, 1000-fold, or infinity of JAK1 relative to JAK2. ( ⁇ ) can be suppressed.
  • Selectively inhibiting JAK1 to "infinity" with respect to JAK2 means that JAK2 suppresses JAK1 substantially without suppressing it at all.
  • the compounds of the present invention selectively inhibit JAK1 over JAK2, they can be used to treat diseases associated with JAK while alleviating or avoiding any side effects that may be caused by inhibition of JAK2.
  • Side effects that may be caused by inhibition of JAK2 include, for example, headaches, nausea, diarrhea, and infections due to decreased immunity, hyperlipidemia, nasopharyngitis, increased alanine transaminase (ALT) and aspartate transaminase (AST), and severe anemia , Neutrophil reduction, and the like, but is not limited thereto.
  • the pharmaceutical composition comprising the compound of the present invention has an advantage of increasing the compliance of the patient because it can reduce the number of administration of the drug.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may comprise a therapeutically effective amount of a compound of Formula 1 or 2, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof.
  • a "therapeutically effective amount” means an amount sufficient to produce a therapeutic effect when administered to a subject in need thereof.
  • treatment means treating a disease or medical condition, such as a disease associated with JAK, in a subject, eg, a mammal, including a human, which includes: (a) occurrence of the disease or medical condition Prevention, ie prophylactic treatment of patients; (b) alleviation of the disease or medical condition, ie, causing removal or recovery of the disease or medical condition in the patient; (c) inhibiting the disease or medical condition, ie, slowing or stopping the progression of the disease or medical condition in the individual; Or (d) alleviate the disease or medical condition in the subject.
  • a disease or medical condition such as a disease associated with JAK
  • the term "effective amount” may be appropriately selected by those skilled in the art.
  • the “effective amount” may be 0.01 mg to 10,000 mg, 0.1 mg to 1,000 mg, 1 mg to 100 mg, 0.01 mg to 1,000 mg, 0.01 mg to 100 mg, 0.01 mg to 10 mg, or 0.01 mg to 1 mg. .
  • the compound of Formula 1 or 2 or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof is as described above.
  • the pharmaceutical composition may be administered to various mammals including rats, mice, livestock, humans, and the like by various routes, for example, oral, rectal, intravenous, intramuscular, subcutaneous, intrauterine dural or intracerebroventricular injection. It can be administered by. Accordingly, the pharmaceutical composition may be formulated in conventional pharmaceutical formulations known in the art.
  • the pharmaceutical composition may be formulated and administered in any dosage form including, but not limited to, oral, injectable, suppository, transdermal and non-administrative agents, but preferably liquids, suspensions, powders, granules, It may be formulated in oral dosage forms such as tablets, capsules, pills, emulsions, syrups, aerosols, or extracts.
  • each of the above formulations When formulated into each of the above formulations, it can be prepared by adding the pharmaceutically acceptable additives required for the preparation of each formulation.
  • one or more of diluents, lubricants, binders, disintegrants, sweeteners, stabilizers, and preservatives may be used as the additive, and optionally one of the fragrances, vitamins, and antioxidants. The above can be selected and used.
  • the additives can be any pharmaceutically acceptable, specifically, as a diluent, lactose, dextrose, sucrose, corn starch, soybean oil, microcrystalline cellulose, sorbitol, xylitol, or mannitol, magnesium stearate or talc as a lubricant,
  • a diluent lactose, dextrose, sucrose, corn starch, soybean oil, microcrystalline cellulose, sorbitol, xylitol, or mannitol, magnesium stearate or talc as a lubricant
  • the binder polyvinylpyrrolidone or hydroxypropyl cellulose is preferable.
  • carboxymethyl cellulose calcium, sodium starch glycolate, potassium polyacrylic acid, or crospovidone sweetener as white sugar, fructose, sorbitol, or aspartame
  • sweetener as white sugar, fructose, sorbitol, or aspartame
  • stabilizer as carboxymethyl cellulose sodium, beta-cyclodextrin, As lead, or xanthan gum, and preservative, methyl paraoxybenzoate, propyl paraoxybenzoate, or potassium sorbate is preferable.
  • natural flavors such as plum, lemon, pineapple, herbal flavor, natural pigments such as fruit juice, chlorophyllin, flavonoids, fructose, honey, sugar alcohol, sugar Sweetening ingredients such as, or may be used by mixing an acidulant such as citric acid, sodium citrate.
  • aqueous solutions there are sterilized aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations and suppositories.
  • non-aqueous solvents and suspending agents propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive oil, injectable esters such as ethyl oleate and the like can be used.
  • injectable esters such as ethyl oleate and the like
  • suppositories witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerol gelatin and the like can be used.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be combined with one or more other therapeutic agents for treating a disease associated with JAK.
  • Other therapeutic agents may vary depending on the type of disease associated with the JAK, including but not limited to chemotherapeutic agents, anti-inflammatory agents, immunosuppressants, anticancer agents, or any combination thereof.
  • Combination with therapeutic agents, in particular for multiple myeloma can increase the therapeutic response more than a single regimen of JAK inhibitors, without additional toxicity issues.
  • agents for combination therapy in the treatment of multiple myeloma include melphalan, a combination of melphalan and prednisone, doxorubicin, dexamethasone, velcade, and the like. Combination therapy can produce synergistic effects.
  • the formulation of the compounds of the present invention may solve the problem of resistance to drugs as shown by dexamethasone in the treatment of multiple myeloma.
  • Agents for combination therapy may be combined with a JAK inhibitor in a single or continuous dosage form, or may be administered simultaneously or sequentially in separate dosage forms.
  • Another aspect of the invention provides the use of a compound of Formulas 1 and 2, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof, as defined above in the treatment of a disease associated with JAK.
  • Another aspect of the invention provides the use of a compound of Formulas 1 and 2 as defined above, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof, for use in treating a disease associated with JAK. .
  • Another aspect of the present invention is the activity of JAK comprising the step of inhibiting the activity of JAK by contacting JAK with a compound of Formulas 1 and 2 or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof as defined above It provides a way to suppress.
  • the contact may be performed in vitro or in vivo.
  • the JAK may be present in the cell.
  • the JAK may be JAK1, JAK2, JAK3, or TYK2.
  • Inhibition of the JAK activity may be to reduce JAK activity. Inhibition of the JAK activity may be to inhibit the activity of a particular JAK type to a higher degree than other JAK types. For example, the inhibition includes JAK1 and selective inhibition of JAK1 among JAK2, JAK3, and TYK2.
  • the method of inhibiting the activity of JAK is a method of selectively inhibiting the activity of JAK1 to the activity of JAK2.
  • selectively here refers to a case in which a compound exhibits higher inhibitory activity on a particular JAK compared to at least one JAK isozyme.
  • Compounds of the invention may optionally comprise at least more than 1 times, 1.1 times, 1.2 times, 5 times, 10 times, 20 times, 40 times, 100 times, 200 times, 500 times, or 1,000 times more than JAK1 to JAK2, or It can be suppressed to infinity ( ⁇ ).
  • Another aspect of the invention provides a method of treating a disease in an individual comprising administering to the individual a therapeutically effective amount of a compound of Formulas 1 and 2, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof. to provide.
  • the administration can be oral, parenteral, or topical administration.
  • the therapeutically effective amount may be determined by a physician according to various factors including the race, ethnicity, sex, age, weight, drug sensitivity, type of disease, degree of disease, concomitant medication, etc., as described above. It can add or subtract appropriately.
  • the therapeutically effective amount can be estimated from dose-response curves obtained in in vitro experiments or animal model tests.
  • the proportions and concentrations of the compounds of the present invention in the compositions to be administered may be determined by chemical properties, route of administration, therapeutic dosage, and the like.
  • the therapeutically effective amount can be from about 1 ⁇ g / kg to about 1 g / kg per day, or from about 0.1 mg / kg to about 500 mg / kg per day to an individual.
  • the disease may be a disease associated with JAK.
  • Diseases associated with JAK include autoimmune diseases, immune system dysfunction, viral diseases, allergic diseases, skin diseases, diseases associated with the IL-6 pathway, immune responses, hyperproliferative disorders, or cancer. These are as described above.
  • a therapeutically effective amount of a compound of Formula 1 or 2, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof, of the present invention may be administered in combination with one or more other therapeutic agents for treating a disease associated with JAK. Can be.
  • Other therapeutic agents are as described above.
  • L 1 and L 2 in Formulas 3, 4, 5, 6, 7, and 8 each represent a leaving group
  • Pr 1 and Pr 2 represent an amino-protecting group
  • X is F, Cl, Br, or I is represented
  • R 1 and R 2 are as defined in Chemical Formula 1.
  • the method comprises the steps of (a) reacting a compound of Formula 3 or a salt thereof with a compound of R 1 -X 1 to produce a compound of Formula 4; And reacting the compound of Formula 4 with 6-halo-7-deazapurin to produce the compound of Formula 6; Or (b) reacting the compound of Formula 3 or a salt thereof with 6-halo-7-deazapurin to produce a compound of Formula 5; And reacting the compound of Formula 5 with the compound of R 1 -X 1 to produce the compound of Formula 6; (c) deprotecting the nitrogen of the pyrrolidine ring of the compound of formula 6 to produce a compound of formula 7; (d) reacting the compound of Formula 7 with R 4 -X 2 to produce a compound of Formula 8; And (e) deprotecting the compound of Formula 8 to produce the compound of Formula 1.
  • (d) "reacting a compound of Formula 7 with R 4 -X 2 to generate a compound of Formula 8" may be performed by substitution of X 2 by N.
  • leaving group means a functional group or atom that can be replaced by another functional group or atom in a substitution reaction, for example a nucleophilic substitution reaction.
  • representative leaving groups include chloro, bromo and iodine groups; Sulfonic ester groups such as tosylate, brosylate and nosylate and the like; And alkyloxy groups such as acetoxy and trifluoroacetoxy and the like.
  • protected means that one or more functional groups of the compound are protected from unwanted reactions using protecting or blocking groups.
  • Functional groups that can be protected include, for example, carbamates (such as tert-butoxycarbonyl), which are representative protecting groups for amino groups.
  • amino-protecting group means a protecting group suitable for preventing unwanted reactions in amino groups.
  • Representative amino-protecting groups are tert-butoxycarbonyl (BOC), trityl (Tr), benzyloxycarbonyl (Cbz), 9-fluorenylmethoxycarbonyl (Fmoc), formyl, trimethylsilyl (TMS) and tert-butyldimethylsilyl (TBS) and the like.
  • Compound of the formula (2), or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof of the present invention is to change the compound of the pyrrolidine structure of the formula (3) to the compound of the piperidine structure, etc.
  • a person skilled in the art of organic chemistry can manufacture appropriately.
  • the compounds of the present invention can be prepared from starting materials that are readily available using common methods and procedures or using other information readily available to those skilled in the art.
  • Compounds of the present invention including salts of compounds, and solvates including hydrates, can be prepared using generally known organic synthesis techniques and can be synthesized according to one of a number of possible synthetic routes.
  • the reactions for synthesizing the compounds of the present invention can be carried out in a suitable solvent which can be easily selected by one skilled in the art of organic synthesis.
  • suitable solvents are generally nonreactive with the starting materials or reactants, intermediates or reaction products at the temperature at which the reaction is carried out, ie at temperatures ranging from the freezing point of the solvent to the boiling point of the solvent.
  • the given reaction may be carried out in one solvent or a mixture of two or more solvents.
  • a solvent suitable for the specific reaction step can be selected.
  • Synthesis of the compounds of the present invention may include protection and deprotection of various chemical functional groups.
  • the need for protection and deprotection and the selection of appropriate protecting groups can be readily determined by one skilled in the art.
  • the reaction can be followed up according to any suitable method known in the art.
  • the formation of the reaction product may be performed by spectroscopic methods such as nuclear magnetic resonance spectroscopy (eg, 1 H or 13 C), infrared spectroscopy, spectrophotometry (eg, UV-visible), and mass spectrometry; Chromatography, such as, high performance liquid chromatography (HPLC) and thin layer chromatography (TLC), can be followed.
  • spectroscopic methods such as nuclear magnetic resonance spectroscopy (eg, 1 H or 13 C), infrared spectroscopy, spectrophotometry (eg, UV-visible), and mass spectrometry; Chromatography, such as, high performance liquid chromatography (HPLC) and thin layer chromatography (TLC), can be followed.
  • HPLC high performance liquid chromatography
  • TLC thin layer chromatography
  • the compounds of the present invention can be synthesized according to a number of synthetic routes well known in the literature.
  • the compound of formula 1 or 2, or a pharmaceutically acceptable salt or solvate or stereoisomer thereof according to the present invention has JAK inhibitory activity and therefore has JAK such as autoimmune disease, immune system dysfunction, viral disease, or cancer. It can be used for the treatment of diseases associated with.
  • the compound according to the present invention has a high selective inhibitory activity of JAK1 to JAK2 compared to the conventional FDA-approved drug tofacitinib, there is an advantage that can avoid side effects that can be caused by the inhibition of JAK2.
  • the compound according to the present invention has a significantly higher half-life of the drug compared to the conventional FDA-approved drug tofacitinib, there is an advantage that can increase the dosage interval can increase the patient's medication compliance.
  • 1 and 2 are graphs showing the results of anti-inflammatory test in the croton oil-induced inflammation model for the compound according to an embodiment of the present invention as edema inhibition rate.
  • reagents, starting materials and solvents were purchased from commercial suppliers (eg Aldrich, Fluka, Sigma, Acros, Gold, TCI, etc.) and used without further purification. Purification used in the synthesis was carried out by flash column chromatography using Merck Silica gel 60 (0.040 ⁇ 0.063 mm).
  • 720 mg of tert-butyl (S)-(1-benzylpyrrolidin-3-yl) carbamate was placed in a 100 mL round bottom flask and 11.5 mL of tetrahydrofuran was added. Then 623 mg of lithium aluminum hydride (LiAlH 4 ) was added. The reaction mixture was refluxed for 4 hours. Cooled at 0 o C. 1.16 mL of deionized water was slowly added while cooling. After stirring for 5 minutes, 1.16 mL of 15% aqueous sodium hydroxide (NaOH) solution was added. After stirring for another 5 minutes, 3.80 mL of deionized water was added to terminate the reaction.
  • LiAlH 4 lithium aluminum hydride
  • the reaction mixture was filtered through a layer of Celite TM 545, a filter agent.
  • the filtered solution was distilled under reduced pressure. As a result, 2.22 g of 1-benzyl-N-methylpiperidin-4-amine were obtained in quantitative yield.
  • the reaction mixture was filtered through a layer of Celite TM 545, a filter agent.
  • the filtered solution was distilled under reduced pressure. 10.0 mL of ethyl acetate (EtOAc) and 10.0 mL of saturated brine (brine) were added to the reaction mixture and extracted. Sodium sulfate (Na 2 SO 4 ) was added to the organic layer and filtered. The filtered solution was concentrated under reduced pressure. As a result, 254 mg of (S) -4,4-dimethyl-1-((R) -1-phenylethyl) pyrrolidin-3-amine was obtained in a yield of 90.4%.
  • the reaction mixture was concentrated under reduced pressure.
  • the reaction mixture was extracted with 100 mL of ethyl acetate (EtOAc) and 100 mL of deionized water.
  • Sodium sulfate (Na 2 SO 4 ) was added to the organic layer and filtered.
  • the filtered solution was distilled under reduced pressure.
  • kinases were used in human-derived JAK1, JAK2, JAK3 and TYK2 (Millipore, Germany) and diluted with the appropriate buffer for each enzyme described below and mixed with the reaction reagents.
  • TIS Tris (hydroxymethyl) aminomethane
  • EDTA ethylenediaminetetraacetic acid
  • JAK1 dilution buffer was prepared by adding ⁇ L ⁇ -mercaptoethanol, 10 ⁇ L Brij-35 TM , and 5 mL glycerol.
  • 3-morpholinopropane-1-sulfonic acid (MOPS) and EDTA were dissolved in deionized water to 20 mM and 1 mM, respectively, and 100 ⁇ L ⁇ - at 100 mL.
  • Mercaptoethanol, 10 ⁇ L Brij-35 TM , 5 mL glycerol and 100 mg BSA were added to prepare JAK2, JAK3, and TYK2 dilution buffers.
  • ⁇ - 33 P-ATP was prepared from non-radiolabelled ATP (Sigma, Cat. no. A-7699). After reacting for 40 minutes at room temperature, the reaction was stopped by adding 5 ⁇ L of a 3 (v / v)% phosphoric acid solution. After the reaction, 10 ⁇ L of the solution was dropped into a GF / P30 filtermat (PerkinElmer TM , 1450-523) and washed three times with 75 mM phosphoric acid solution for 5 minutes. Methanol drying was performed and scintillation was measured. Methanol drying refers to the addition of methanol in an aqueous solution and drying using an azeotrope effect.
  • ⁇ - 33 P-ATP was prepared from non-radiolabelled ATP (Sigma, Cat. no. A-7699). After reacting for 40 minutes at room temperature, the reaction was stopped by adding 5 ⁇ L of a 3 (v / v)% phosphoric acid solution. After the reaction, 10 ⁇ L of the solution was dropped into a GF / P30 filtermat (PerkinElmer TM , 1450-523) and washed three times with 75 mM phosphoric acid solution for 5 minutes. Methanol drying was performed and scintillation was measured.
  • ⁇ - 33 P-ATP was prepared from non-radiolabelled ATP (Sigma, Cat. no. A-7699). After reacting for 40 minutes at room temperature, the reaction was stopped by adding 5 ⁇ L of a 3 (v / v)% phosphoric acid solution. After the reaction, 10 ⁇ L of the solution was dropped into a GF / P30 filtermat (PerkinElmer TM , 1450-523) and washed three times with 75 mM phosphate solution for 5 minutes. Methanol drying was performed and scintillation was measured.
  • ⁇ - 33 P-ATP was prepared from non-radiolabelled ATP (Sigma, Cat. no. A-7699). After reacting for 40 minutes at room temperature, the reaction was stopped by adding 5 ⁇ L of a 3 (v / v)% phosphoric acid solution. After the reaction, 10 ⁇ L of the solution was dropped into a GF / P30 filtermat (PerkinElmer TM , 1450-523) and washed three times with 75 mM phosphoric acid solution for 5 minutes. Methanol drying was performed and scintillation was measured.
  • Examples 1 to 48 For some compounds of Examples 1 to 48 (e.g., Examples 1 and 38) at different concentrations, the inhibitory effects on JAK1, JAK2, JAK3 and TYK2 were measured according to the methods described above and IC 50 values were determined. . IC 50 values of the test compounds were calculated from each percent inhibition of the compound using the Chang-Furothor method ( Biochem . Pharmacol. , 1973 , 22 (23) , 3099-3108).
  • Table 5 and Table 6 show the results of measuring the extent to which the compounds synthesized in Examples 1 to 48 inhibit the phosphorylation activity of JAK1, JAK2, JAK3 and TYK2 according to the above method.
  • Example numbers in Tables 5 and 6 represent the compounds synthesized in the examples, and the values of the JAK1, JAK2, JAK3 and TYK2 columns indicate inhibition of the phosphorylation activity of these enzymes at 1 ⁇ M concentration of the compound synthesized in the example. The degree is expressed as a percentage. In Tables 5 and 6, negative values indicate substantially no inhibitory effect.
  • the degree of inhibition represents the reduced percentage of phosphorylation activity measured in the experimental group relative to the phosphorylation activity obtained in the negative control experiment without the compound.
  • Table 7 shows the results of measuring IC 50 values for JAK1, JAK2, JAK3 and TYK2 of the compounds of Examples 1 and 38.
  • ICR mice (6 weeks old, males) were obtained through Japanese SLC, and lighting was adjusted for a 12 hour day / night cycle (07: 00 ⁇ 19: 00), and the temperature was maintained at 22 ° C to freely feed and drink water. I made it possible. Feed restriction was carried out 2 hours before administration of the test substance.
  • Croton oil, a edema causing substance (croton oil, Sigma-Aldrich, Cat # C6719) was diluted to acetone (acetone, Sigma-Aldrich, Cat # 650501) to 0.2 (v / v)%.
  • Croton oil was treated 30 minutes after the oral administration of the test substance according to the weight of the individual animals of each group. Treatment was applied evenly to 20 ⁇ l of croton oil inside and outside the right ear of the animal.
  • a test was conducted on a croton oil-induced proinflammatory mouse animal model. Mice were randomly divided into 10 animals in each group. To confirm the anti-inflammatory efficacy of the test drug, as mentioned in (2), the negative control group and all drugs were administered orally once 30 minutes before croton oil treatment. Excipients used for administration were 0.45 (v / v)% carboxymethylcellulose in deionized water (Sigma-Aldrich, Cat # C5678, 0.5 (v / v)% in deionized water) and An aqueous solution containing 10 (v / v)% ethanol was used.
  • the negative control group administered only the excipient based on 1 mL of solution per 100 g of body weight
  • the positive control group administered the excipient containing 100 mg / 10 mL of indomethacin (indomethacin) based on 1 mL of solution per 100 g of body weight.
  • the dose is 100 mg per kg.
  • Each test drug was prepared at a concentration of 100 mg / 10 mL, which was administered based on 1 mL of solution per 100 g of body weight, respectively, to 100 mg per kg of body weight.
  • Indomethacin is a non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) -based drug that shows the effects of reducing inflammation, pain, and fever, and exhibits anti-inflammatory effects through the inhibition of cycloxylase (COX) enzyme.
  • NSAID non-steroidal anti-inflammatory drug
  • COX cycloxylase
  • the degree of inflammation was confirmed by measuring the thickness of the experimental animal ears.
  • the thickness was used as a digital external measuring instrument (Digimatic micrometer, Mitutoyo corporation, Japan, Cat # MDC-25SB). The measurement was performed 4 hours after croton oil treatment. The thickness of the right ear treated with croton oil and the left ear treated with acetone alone was measured, and the results obtained in terms of% of the increased amount compared to the left ear thickness are shown in FIGS. 1 and 2.
  • hydrochloride salt of the compound of Example 1 was administered orally and intravenously to rats, and blood was collected for up to 24 hours after administration to analyze pharmacokinetic profiles.
  • Example 49 (hydrochloride of Example 1) was used and tofacitinib citrate was used as a comparative drug.
  • the resulting pharmacokinetic profile is shown in Table 8 below.
  • the compound according to the present invention can significantly increase the interval between administrations compared to the conventional tofacitinib has the advantage of increasing the drug compliance.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

야누스 키나제 1 선택적 억제제 및 그 의약 용도를 제공한다.

Description

야누스 키나제 1 선택적 억제제 및 그 의약 용도
본 발명은 야누스 키나제 억제제에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 야누스 키나제 1 (Janus kinase 1) 억제제에 대한 선택성이 높은 화합물 및 그의 의약 용도에 관한 것이다.
T-세포는 세포 표면의 T-세포 수용체 (T-cell receptor; TCR)를 통해 항원 제시 세포 (antigen presenting cell)로부터 전달된 신호를 야누스 키나제 (Janus kinase)와 같은 세포내 다양한 단백질 키나제의 활성화에 의해 하위 효과기 (effector)에 전달하는 역할을 한다. 이때 T-세포는 여러 인터루킨 (interleukin; IL)이나 인터페론-γ (interferon; IFN)를 분비하여 다양한 백혈구들을 활성화시키는 것은 물론 B-세포를 활성화시킨다. T-세포에서 신호전달에 관여하는 단백질 키나제로는 대표적으로 4종의 야누스 키나제 이소자임, 즉 JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2 (tyrosine kinase 2)가 있다. 이하에서는 "야누스 키나제"를 "JAK"라고 약칭한다.
JAK는 자가면역 및/또는 염증성 질환의 표적으로 널리 연구되어 왔으며, JAK 저해제는 류마티스 관절염, 건선, 아토피성 피부염, 낭창, 다발성 경화증, 유형 I의 당뇨병 및 당뇨에 의한 합병증, 천식, 자가면역 갑상선 장애, 궤양성 대장염, 크론씨병 (Crohn's disease), 알쯔하이머병 (Alzheimer's disease), 암, 백혈병 및 장기이식 또는 이종이식 거부반응 등과 같은, 자가면역질환, 면역체계 기능장애, 바이러스성 질환, 및 암을 포함한 제증상의 치료에 유용한 것으로 보고되었다 (Immunol. Rev., 2008, 223(1), 132-142; Proc . Natl . Acad . Sci . U. S. A., 1995, 92(19), 8724-8728; Science, 1995, 270(5237), 800-802; Trends Pharmacol . Sci ., 2004, 25(11), 558-562).
많은 제약회사들은 JAK 중에서도 JAK3의 선택적 저해활성에 의해 류마티스성 관절염 (Rheumatoid arthritis; RA)과 같은 자가면역질환 치료제를 개발할 수 있을 것으로 기대하고 경쟁적으로 JAK3 저해제 개발 연구를 진행하였으며, 그 결과 최근 Pfizer사의 Xeljanz®(성분명: 토파시티닙)가 류마티스성 관절염 치료제로서 FDA에 의해 승인되기에 이르렀다. 그러나 개발 초기에 JAK3 선택적 저해활성을 갖는 것으로 알려졌던 토파시티닙은 그 이후 JAK 키나제 패밀리 (JAK kinase family)에 대한 전반적인 저해활성을 갖는 pan-JAK 억제제임이 밝혀졌으며, 따라서 류마티스성 관절염 치료제로서의 효능에 어떠한 JAK 이소자임의 저해활성이 가장 중요한 요소인지에 대한 논란이 계속되어져 왔다.
또한, 최근 일련의 연구결과들을 종합하면 (Cell, 1998, 93(3), 373-383; Immunity, 2000, 13(4), 561-571; Cell, 1998, 93(3), 385-395; Lancet, 2008, 371(9617), 987-997; Chem . Biol ., 2011, 18(3), 314-323), T-세포 수용체에 의한 신호전달 과정에 있어 핵심적인 역할을 수행하는 JAK 키나제는 JAK1이며 JAK3는 매우 보조적인 역할 밖에는 담당하지 않는 것으로 확인되었다. 따라서, 자가면역질환 및/또는 염증성 질환 치료제 분야에 있어 JAK 저해제 개발은 JAK3가 아닌 JAK1에 집중하고 있으며, 최근 JAK1 선택적인 활성을 갖는 물질들이 속속 발표 되어지고 있다 (J. Med . Chem ., 2012, 55(12), 5901-5921; J. Med . Chem ., 2012, 55(13), 6176-6193).
상기 pan-JAK 억제제로서 밝혀진 토파시티닙은 두통, 메스꺼움, 설사, 및 면역력 저하로 인한 감염, 고지혈증, 비인두염, ALT (alanine transaminase) 및 AST (aspartate transaminase)의 증가, 심각한 빈혈증, 호중구 감소 등의 부작용을 갖는 것으로 보고되었다 (Mod. Rheumatol ., 2013, 23(3), 415-424). 이에 반해, 필고티닙 (filgotinib)은 JAK1 선택적 억제제이며, 상기 토파시티닙이 갖는 부작용을 갖지 않는 것으로 보고되었다 (Arthritis Rheum., 2012, 64( Suppl . 10), 2489). 또한, JAK 억제제로서 공지된 여러가지 약물에 대한 임상시험 결과, JAK1 선택적 억제제에 해당하는 필고티닙 및 INCB-039110이 다른 JAK 이소자임 억제제 혹은 비선택적 억제제에 비해 치료한계가 현저히 높은 것으로 보고되었다 (Expert Opin . Investig. Drugs, 2014, 23(8), 1067-1077).
JAK1에 대한 선택적 억제제는 류마티스 관절염 치료에 효과가 있으며, JAK2는 적혈구 형성에 필수적인 EPO 신호전달 경로 (EPO signaling pathway)에서 필수적인 역할을 하므로, JAK2의 불활성화는 동물 모델에서 빈혈을 유발한다. 따라서, JAK2에 대한 JAK1의 효소 억제 비율이 높은 화합물이 JAK2 의존 빈혈에 대한 상대적인 치료계수 (therapeutic index)를 넓힐 수 있다. 그러므로, JAK2에 대한 JAK1의 선택적 억제제가 류마티스 관절염 및 다른 면역질환에 있어 효과적이면서 부작용이 낮은 치료제로서 가능성이 있다 (J. Med. Chem., 2012, 55(13), 6176-6193).
특허문헌 1은 JAK 억제제로서 하기 화학식을 갖는 매우 광범위한 화합물을 개시하고 있다:
Figure PCTKR2016009205-appb-I000001
상기 특허문헌 1은 JAK 1, 2, 및 3에 대한 억제활성 어세이 방법에 대한 기재는 있으나, 상기 화학식을 갖는 어떠한 화합물에 대해서도 구체적인 데이터를 제시하고 있지 않을 뿐만 아니라, JAK1의 선택적 억제활성에 대해서는 언급조차 없다.
또한, 특허문헌 2는 하기 화학식을 갖는 화합물이 JAK3에 대한 억제활성이 있음을 기재하고 있고, JAK3에 대한 억제활성 어세이 방법에 대한 기재는 있으나, 하기 화학식을 갖는 어떠한 화합물에 대해서도 구체적인 데이터를 제시하고 있지 않을 뿐만 아니라, JAK1의 선택적 억제활성에 대해서는 언급조차 없다:
Figure PCTKR2016009205-appb-I000002
상기 특허문헌 2는 상기 언급한 FDA 승인 약물인 토파시티닙에 해당하는 3-{4-메틸-3-[메틸-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)-아미노]-피페리딘-1-일}-3-옥소-프로피오니트릴을 개시하고 있다.
[선행기술문헌]
[특허문헌]
(특허문헌 1) WO 2006/069080
(특허문헌 2) US 6,956,041
일 양상은 화학식 1 또는 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체를 제공한다.
다른 양상은 화학식 1 또는 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
다른 양상은 화학식 1 또는 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체를 이용한 JAK의 활성을 억제하는 방법을 제공한다.
다른 양상은 화학식 1 또는 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체를 개체에 투여하여 개체에서 질병을 치료하는 방법을 제공한다.
다른 양상은 화학식 1 또는 2의 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 또한, 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다. 본 명세서에 참고문헌으로 기재되는 모든 간행물의 내용은 전체가 본 명세서에 참고로 통합된다.
본 발명의 일 양상은 화학식 1의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체를 제공한다:
[화학식 1]
Figure PCTKR2016009205-appb-I000003
상기 화학식 1에서,
R1은 수소, C1-2 알킬, 또는 시클로프로필메틸이고;
R2는 2-시아노아세틸, 2-시아노에틸, 부틸, 2-아지도아세틸, 3-메틸부타노일, 이소부톡시카르보닐, 아닐리노카르보닐, 메틸설폰일, (트리플루오로메틸)설폰일, 에틸설폰일, 프로필설폰일, 이소프로필설폰일, (1-메틸-1H-이미다졸-4-일)설폰일, 페닐설폰일, (2-플루오로페닐)설폰일, (3-플루오로페닐)설폰일, (4-플루오로페닐)설폰일, (2-시아노페닐)설폰일, (3-시아노페닐)설폰일, (4-시아노페닐)설폰일, (2-니트로페닐)설폰일, (3-니트로페닐)설폰일, (4-니트로페닐)설폰일, m-톨릴설폰일, 토실, (4-메톡시페닐)설폰일, ((4-트리플루오로메틸)페닐)설폰일, 나프탈렌-2-일설폰일, 피페리딘-1-일설폰일, 모폴리노설폰일이다.
상기 화학식 1의 화합물의 일 구체예는 하기 열거된 화합물로 구성된 군에서 선택된 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체이다:
(R)-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
(R)-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)프로판니트릴;
(R)-N-(1-부틸피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-2-아지도-1-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)에탄-1-온;
(R)-3-메틸-1-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)부탄-1-온;
이소부틸 (R)-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트;
(R)-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-N-페닐피롤리딘-1-카르복스아미드;
(R)-N-메틸-N-(1-(메틸설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-메틸-N-(1-((트리플루오로메틸)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-(1-(에틸설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-메틸-N-(1-(프로필설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-(1-(이소프로필설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-메틸-N-(1-((1-메틸-1H-이미다졸-4-일)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-메틸-N-(1-(페닐설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-(1-((2-플루오로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-(1-((3-플루오로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-(1-((4-플루오로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-2-((3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
(R)-3-((3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
(R)-4-((3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
(R)-N-메틸-N-(1-((2-니트로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-메틸-N-(1-((3-니트로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-메틸-N-(1-((4-니트로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-메틸-N-(1-(m-톨릴설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-메틸-N-(1-토실피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-(1-((4-메톡시페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-메틸-N-(1-((4-(트리플루오로메틸)페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-메틸-N-(1-(나프탈렌-2-일설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-메틸-N-(1-(피페리딘-1-일설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(R)-N-메틸-N-(1-(모폴리노설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
(S)-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
(R)-3-((3-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
(R)-3-(3-(에틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
(R)-3-((3-(에틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
(R)-3-(3-((시클로프로필메틸)(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴; 및
(R)-3-((3-((시클로프로필메틸)(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴.
본 발명의 다른 일 양상은 하기 화학식 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체를 제공한다:
[화학식 2]
Figure PCTKR2016009205-appb-I000004
상기 화학식 2에서,
X는 질소 또는 산소이고,
--- 은 상기 X가 질소일 경우 단일결합이고, 상기 X가 산소일 경우 존재하지 않고,
R1은 메틸이고;
R2는 1-(2-시아노아세틸)피페리딘-4-일, 1-(페닐설폰일)피페리딘-4-일, 1-(3-시아노페닐설폰일)피페리딘-4-일, 1-(2-시아노아세틸)피페리딘-3-일, 1-(3-시아노페닐설폰일)피페리딘-3-일, 1-(3-시아노페닐설폰일)-4-메틸-피페리딘-3-일, 1-(2-시아노아세틸)-3,3-디메틸피롤리딘-4-일, [1-(2-시아노아세틸)피페리딘-3-일]메틸, 또는 [1-(3-시아노페닐설폰일)피페리딘-3-일]메틸이고,
또는 R1 및 R2가 X와 함께 6-(2-시아노아세틸)옥타하이드로-6H-피롤로-[3,4-b]피리딘-1-일을 형성한다.
상기 화학식 2의 화합물의 일 구체예는 하기 열거된 화합물로 구성된 군에서 선택된 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체이다:
3-(4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
N-메틸-N-(1-(페닐설폰일)피페리딘-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
3-((4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
(R)-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
(R)-3-((3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
3-(((3R,4R)-4-메틸-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
(R)-3-(3,3-디메틸-4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
(S)-3-(3,3-디메틸-4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
3-(4-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
3-((4-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
3-(3-(((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)메틸)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
3-((3-(((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)메틸)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
3-((4aR,7aR)-1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일)-3-옥소프로판니트릴; 또는
3-((4aS,7aS)-1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일)-3-옥소프로판니트릴.
이하에서는, 상기 화학식 1의 화합물, 상기 화학식 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체 모두를 포괄하여 "본 발명의 화합물"이라고 지칭한다.
본 발명의 화합물은 검출가능한 표지로 치환된 것일 수 있다. 상기 검출가능한 표지는 광학적 표지, 전기적 표지, 자기적 표지, 또는 간접 표지일 수 있다. 광학적 표지는 검출가능한 광학적 신호를 발생시키는 물질로서, 방사성 물질, 또는 형광 물질과 같은 발색 물질일 수 있다. 간접 표지는 기질을 발색 물질로 전환시키는 효소 또는 그 기질, 항체 또는 항원과 같이 특정 물질과 결합한 결과, 검출가능한 표지를 발생시킬 수 있는 물질을 나타낸다. 상기 광학적 표지는 본 발명의 화합물을 구성하는 원소의 동위원소일 수 있다. 따라서, 본 발명의 화합물은 그를 구성하는 원소 중 하나 이상이 그의 동위원소, 예를 들면 방사성 동위원소로 치환된 것일 수 있다. 상기 동위원소의 예는 2H (중수소를 의미하는 D로 나타낼 수 있음),　3H (삼중수소를 의미하는 T로 나타낼 수 있음), 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 18F, 35S, 36Cl, 82Br, 75Br, 76Br, 77Br, 123I, 124I, 125I, 131I 등을 포함한다. 검출가능한 표지로 치환된 본 발명의 화학식 1과 2의 화합물은 세포 또는 개체 중의 JAK의 위치를 확인하는데 사용될 수 있다. 그에 따라서, JAK 활성 증가와 관련된 질병 부위를 확인하고 치료하는데 사용될 수 있다.
본 발명의 화합물은 그의 약제학적으로 허용가능한 염 (salt)의 형태일 수 있다. 상기 염은 JAK 억제제 분야에서 사용되는 통상의 산 부가염, 예를 들면 염산, 브롬산, 황산, 설팜산, 인산 또는 질산과 같은 무기산으로부터 유도된 염 및 아세트산, 프로피온산, 숙신산, 글리콜산, 스테아르산, 시트르산, 말레산, 말론산, 메탄설폰산, 타르타르산, 말산, 페닐아세트산, 글루탐산, 벤조산, 살리실산, 2-아세톡시벤조산, 푸마르산, 톨루엔설폰산, 옥살산 또는 트리플루오로아세트산과 같은 유기산으로부터 유도된 염을 포함한다. 또한, 상기 염은 통상의 금속 염 형태, 예를 들면 리튬, 소듐, 칼륨, 마그네슘, 또는 칼슘과 같은 금속으로부터 유도된 염을 포함한다. 상기 산 부가염 또는 금속염은 유기화학 분야에 공지되어 있는 통상의 방법에 따라 제조될 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 그의 용매화물 (solvate)의 형태일 수 있다.
용어 "용매화물"이란 하나 이상의 용질 분자, 즉 화학식 1 또는 2의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 하나 이상의 용매 분자에 의해 형성되는 복합체 또는 집합체를 의미한다. 용매화물은 예를 들면 물, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올 또는 아세트산과 형성된 복합체 또는 집합체일 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 그의 입체이성질체의 형태일 수 있다. 상기 입체이성질체는 거울상 이성질체 (enantiomer) 및 부분입체이성질체 (diastereomer)와 같은 모든 입체이성질체를 포함한다. 상기 화합물은 입체이성질체의 순수 형태 (stereoisomerically pure form) 또는 하나 이상의 입체이성질체의 혼합물, 예를 들면 라세미 혼합물일 수 있다. 특정 입체이성질체의 분리는 당해 분야에 공지된 통상의 방법 중 하나에 의해 수행될 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 양상은 치료학적 유효량의 화학식 1 또는 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
상기 화학식 1 또는 2의 화합물은 JAK 이소자임 중 하나 또는 2 이상의 활성을 억제하는 효과를 보일 수 있다. 여기서 "억제 (inhibition)"는 하나 또는 2 이상의 JAK 이소자임 활성을 감소시키는 것을 포함한다.
본 발명에서 사용된 "JAK"는 야누스 키나제 계열의 효소 모두를 포함한다. 본 발명의 일부 구체예의 화합물은 JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2의 활성을 억제할 수 있다. 본 발명의 일부 구체예의 화합물은 JAK1, JAK3 및 TYK2의 활성을 억제할 수 있다. 본 발명의 일부 구체예의 화합물은 JAK1만 주로 억제할 수 있다. 이러한 본 발명의 화합물의 JAK 억제 효과는 시험예 1에 의해 입증되었다. 또한, 본 발명의 화합물은 크로톤 오일-유도 염증 동물모델에서 실제 항염증 효과를 나타내었다.
상기 JAK 억제 효과는 상기 화합물의 존재 하에서 JAK가 ADP를 ATP로 전환하는 것을 억제하는 정도를 측정한 것으로서, 측정되는 흡광도 값이 표준 흡광도 곡선보다 낮게 측정되는 경우, 억제 효과가 음의 값을 갖는데 이는 공시험 (negative control) 값보다 낮게 측정된 것으로, 억제 효능을 전혀 보이지 않는 0%와 실질적으로 동일하다.
상기 약학적 조성물이 함유하는 화학식 1 또는 2의 화합물은 JAK 억제 활성을 가지므로 (시험예 1 참조), JAK 억제 활성에 의해 치료할 수 있는 것으로 공지된 임의의 질병 (이하, "JAK와 연관된 질병"이라고 함)의 치료를 위해 사용될 수 있다 (Immunol . Rev., 2008, 223(1), 132-142; Proc . Natl . Acad . Sci . U. S. A., 1995, 92(19), 8724-8728; Science, 1995, 270(5237), 800-802; Trends Pharmacol . Sci., 2004, 25(11), 558-562). 상기 JAK와 연관된 질병은 자가면역질환, 면역체계 기능장애, 바이러스성 질환, 알러지 질환, 피부 질환, IL-6 경로와 연관된 질병, 면역반응, 과증식 장애, 또는 암을 포함한다. 상기 자가면역질환은 피부 질환, 다발성 경화증, 류마티스성 관절염, 소아 관절염, 유형 I 당뇨병, 루푸스, 건선, 염증성 장 질환, 궤양성 대장염, 크론병 또는 자가면역 갑상선 질환을 포함하고, 상기 면역체계 기능장애는 동종이식거부, 대 숙주 질환, 동종 이식 거부 반응 또는 이식편대숙주병을 포함하고, 상기 바이러스성 질환은 엡스타인 바 바이러스 (EBV), B형 간염, C형 간염, HIV, HTLV 1, 수두, 대상포진 바이러스 (VZV) 또는 인간 유두종 바이러스 (HPV) 질환을 포함하고, 상기 암은 전립선암, 신장암, 간암, 췌장암, 위암, 유방암, 폐암, 머리와 목의 암, 교아종, 백혈병, 림프종, 또는 다발성 골수종을 포함하며, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 면역 반응은 설사, 피부자극, 피부 발진, 접촉성 피부염 또는 알러지성 접촉 과민반응을 포함하고, 상기 알러지 질환은 천식, 음식 알러지, 아토피성 피부염 또는 비염을 포함하고, 상기 IL-6 경로와 연관된 질병은 캐슬만 병 및 카포시 육종을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 화합물은 JAK2에 대해 JAK1을 선택적으로 억제할 수 있다 (시험예 1 참조). 여기서 "선택적으로(selectively)"라는 용어는 어떤 화합물이 적어도 하나 이상의 JAK에 비해서 특정 JAK에 보다 높은 억제 활성을 보이는 경우를 이른다. 본 발명의 화합물은 JAK2에 대해 JAK1을 선택적으로 적어도 1 배 이상, 1.1배, 1.2배, 5배, 10배, 20배, 40배, 100배, 200배, 500배, 1000배 이상, 또는 무한대 (∞)로 억제할 수 있다. 상기 JAK2에 대해 JAK1을 선택적으로 "무한대"로 억제한다는 것은 JAK2는 실질적으로 전혀 억제하지 않고, JAK1를 억제한다는 것을 의미한다.
본 발명의 화합물은 JAK2에 대해 JAK1을 선택적으로 억제하므로, JAK2의 억제에 의해 발생될 수 있는 임의의 부작용을 경감 또는 회피하면서 상기 JAK와 연관된 질병을 치료하는데 사용될 수 있다. 상기 JAK2의 억제에 의해 발생될 수 있는 부작용은 예를 들어, 두통, 메스꺼움, 설사, 및 면역력 저하로 인한 감염, 고지혈증, 비인두염, ALT (alanine transaminase) 및 AST (aspartate transaminase)의 증가, 심각한 빈혈증, 호중구 감소 등을 포함하며, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 화합물은 종래 FDA 허가 JAK 억제제인 토파시티닙에 비해 약물의 반감기가 현저히 높으므로, 약물의 투여간격을 증가시킬 수 있다 (시험예 3 참조). 따라서, 본 발명의 화합물을 포함하는 약학 조성물은 약물의 투여 횟수를 줄일 수 있으므로 환자의 순응도를 증가시킬 수 있다는 장점이 있다.
상기 본 발명의 약학 조성물은 치료학적 유효량의 화학식 1 또는 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체를 포함할 수 있다.
상기 약학 조성물에 있어서, "치료학적 유효량"은 치료를 필요로 하는 개체에게 투여되는 경우 치료 효과를 나타내기에 충분한 양을 의미한다.
상기 용어 "치료"는 개체, 예를 들면 사람을 포함한 포유류에서 질환 또는 의학적 증상, 예를 들면 JAK와 연관된 질병을 치료함을 의미하고, 이는 다음을 포함한다: (a) 질환 또는 의학적 증상의 발생을 예방, 즉, 환자의 예방적 치료; (b) 질환 또는 의학적 증상의 완화, 즉, 환자에서 질환 또는 의학적 증상의 제거 또는 회복 야기; (c) 질환 또는 의학적 증상의 억제, 즉, 개체에서 질환 또는 의학적 증상의 진행을 늦춤 또는 정지; 또는 (d) 개체에서 질환 또는 의학적 증상을 경감.
상기 용어 "유효량"은 당업자가 적절하게 선택할 수 있다. 상기 "유효량"은 0.01 mg 내지 10,000 mg, 0.1 mg 내지 1,000 mg, 1 mg 내지 100 mg, 0.01 mg 내지 1,000 mg, 0.01 mg 내지 100 mg, 0.01 mg 내지 10 mg, 또는 0.01 mg 내지 1 mg일 수 있다.
본 발명의 약학 조성물에 있어서, 상기 화학식 1 또는 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체에 대하여는 위에서 설명한 바와 같다.
상기 약학 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등을 포함한 각종 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있으며, 예를 들어 경구, 직장, 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 (intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다. 이에 따라, 상기 약학 조성물은 당해 기술분야에 공지되어 있는 통상적인 약제학적 제형으로 제제화될 수 있다. 상기 약학 조성물은 경구투여제제, 주사제, 좌제, 경피투여제제 및 경비투여제제를 포함하지만, 이에 한정되지 않는 임의의 제형으로 제제화되어 투여될 수도 있으나, 바람직하게는 액제, 현탁제, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 환제, 유제, 시럽제, 에어로졸, 또는 엑스제와 같은 경구 투여용 제형으로 제제화될 수 있다.
상기 각각의 제형으로 제제화 시, 각각의 제형의 제조에 필요한 약제학적으로 허용 가능한 첨가제를 부가하여 제조할 수 있다. 대표적으로 경구 투여용 제형으로 제제화 시 상기 첨가제로서 희석제, 활택제, 결합제, 붕해제, 감미제, 안정제 및 방부제 중에서 1종 이상을 선택하여 사용할 수 있으며, 선택적으로 향료, 비타민류 및 항산화제 중에서 1종 이상을 선택하여 사용할 수 있다.
상기 첨가제는 약제학적으로 허용 가능한 것은 모두 가능하며, 구체적으로 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 옥수수 전분, 대두유, 미정질 셀룰로오스, 솔비톨, 자일리톨, 또는 만니톨, 활택제로는 스테아린산 마그네슘 또는 탈크, 결합제로는 폴리비닐피롤리돈 또는 히드록시프로필셀룰로오스가 바람직하다. 또한, 붕해제로는 카르복시메틸셀룰로오스 칼슘, 전분글리콜산나트륨, 폴라크릴린칼륨, 또는 크로스포비돈, 감미제로는 백당, 과당, 솔비톨, 또는 아스파탐, 안정제로는 카르복시메틸셀룰로오스나트륨, 베타-사이클로덱스트린, 백납, 또는 잔탄검, 방부제로는 파라옥시안식향산메틸, 파라옥시안식향산프로필, 또는 솔빈산칼륨이 바람직하다.
또한, 상기 성분 이외에도 공지의 첨가제로서 미각을 돋구기 위하여, 매실향, 레몬향, 파인애플향, 허브향 등의 천연향료, 천연과즙, 클로로필린, 플라보노이드 등의 천연색소, 과당, 벌꿀, 당알코올, 설탕과 같은 감미성분, 또는 구연산, 구연산 나트륨과 같은 산미제를 혼합하여 사용할 수도 있다.
상기 제제 중 비경구투여를 위한 제제로는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제 등이 있다. 비수성용제, 현탁제의 제조를 위해서는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈61, 카카오지, 라우린지, 또는 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 JAK와 관련된 질환을 치료하기 위한 하나 이상의 다른 치료제와 함께 조합될 수 있다. 다른 치료제는 상기 JAK와 관련된 질환의 종류에 따라 달라질 수 있으며, 예를 들어 화학요법제, 항염증제, 면역억제제, 항암제, 또는 이들의 임의의 조합을 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 특히 다발성 골수종에 대한 치료제와의 병용은, 추가적인 독성 문제없이, JAK 억제제의 단독 처방보다 더욱 치료 반응을 증가시킬 수 있다. 다발성 골수종에 대한 치료에서 병용 치료를 위한 약제의 예는 멜팔란, 멜팔란과 프레드니손의 복합제, 독소루비신, 덱사메타손, 벨케이드 등이 있다. 병용치료는 상승효과를 발생시킬 수 있다. 게다가, 본 발명의 화합물의 처방은 다발성 골수종 치료에서 덱사메타손이 보여주는 것과 같은 약제에 대한 저항문제를 해결할 수 있다. 병용치료를 위한 약제는 JAK 억제제와 단회 투여 또는 연속적인 투여 형태로 병용할 수 있거나, 또는 동시에 또는 순차적으로 분리된 투여 형태로서 투여할 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 양상은 JAK와 연관된 질병의 치료에 있어서의 상기에서 정의된 화학식 1과 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체의 용도를 제공한다.
본 발명의 또 다른 일 양상은 상기 JAK와 연관된 질병을 치료하는데 사용하기 위한, 상기에서 정의된 화학식 1과 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체의 용도를 제공한다.
본 발명의 또 다른 일 양상은 상기에서 정의된 화학식 1과 2의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체를 JAK와 접촉시켜 JAK의 활성을 억제하는 단계를 포함하는 JAK의 활성을 억제하는 방법을 제공한다.
상기 방법에 있어서, 상기 접촉은 인 비트로 또는 인 비보에서 수행될 수 있다. 상기 방법에서, 상기 JAK는 세포 내에서 존재하는 것일 수 있다. 상기 JAK는 JAK1, JAK2, JAK3, 또는 TYK2일 수 있다.
상기 JAK 활성의 억제는 JAK 활성을 감소시키는 것일 수 있다. 상기 JAK 활성의 억제는 다른 JAK 타입에 비하여 특정 JAK 타입의 활성을 더 높은 정도로 억제시키는 것일 수 있다. 예를 들면, 상기 억제는 JAK1과, JAK2, JAK3, 및 TYK2 중 JAK1의 선택적 억제를 포함한다.
일 구체예에서, 상기 JAK의 활성을 억제하는 방법은 JAK1의 활성을 JAK2의 활성에 대해 선택적으로 억제하는 방법이다. 여기서 "선택적으로(selectively)"라는 용어는 어떤 화합물이 적어도 하나 이상의 JAK 이소자임에 비해서 특정 JAK에 보다 높은 억제 활성을 보이는 경우를 이른다. 본 발명의 화합물은 JAK2에 대해 JAK1을 선택적으로 적어도 1배 초과, 1.1배, 1.2배, 5배, 10배, 20배, 40배, 100배, 200배, 500배, 또는 1,000배 이상, 또는 무한대 (∞)로 억제할 수 있다.
본 발명의 다른 양상은 치료학적으로 유효량의 화학식 1과 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체를 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 질병을 치료하는 방법을 제공한다.
상기 방법에 있어서, 당업자는 투여시 투여경로를 환자의 상태에 따라 적절하게 선택할 수 있다. 상기 투여는 경구, 비경구, 또는 국부 투여일 수 있다.
상기 방법에 있어서, 치료학적 유효량은 전술한 바와 같이 개체의 인종, 민족, 성별, 나이, 체중, 약물 감수성, 구체적인 질병의 종류, 질병의 증세 정도, 병용약물 등을 포함한 다양한 인자에 따라 전문의사가 적절히 가감할 수 있다. 치료학적 유효량은 체외 실험 또는 동물 모델 시험에서 얻어진 용량-반응곡선으로부터 추정할 수 있다. 투여되는 조성물에 존재하는 본 발명의 화합물의 비율 및 농도는 화학적 특성, 투여 경로, 치료적 투여량 등에 따라 결정될 수 있다. 상기 치료학적 유효량은 개체에게 약 1 ㎍/kg 내지 약 1 g/kg per day, 또는 약 0.1 mg/kg 내지 약 500 mg/kg per day일 수 있다.
상기 질병은 JAK와 연관된 질병일 수 있다. 상기 JAK와 연관된 질병은 자가면역질환, 면역체계 기능장애, 바이러스성 질환, 알러지 질환, 피부 질환, IL-6 경로와 연관된 질병, 면역반응, 과증식 장애, 또는 암을 포함한다. 이들에 대하여는 상기한 바와 같다. 또한, 본 발명의 치료학적으로 유효량의 화학식 1 또는 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체는 JAK와 관련된 질환을 치료하기 위한 하나 이상의 다른 치료제와 함께 조합되어 투여될 수 있다. 다른 치료제에 대하여는 상기한 바와 같다.
본 발명의 화학식 1의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체는 하기 반응식 1에 따른 제조방법에 의하여 제조될 수 있다:
[반응식 1]
Figure PCTKR2016009205-appb-I000005
반응식 1에서, 화학식 3, 4, 5, 6, 7, 및 8 중 L1과 L2는 각각 이탈기를 나타내고, Pr1과 Pr2는 아미노-보호기를 나타내고, X는 F, Cl, Br, 또는 I를 나타내고, R1 및 R2는 상기 화학식 1에서 정의된 바와 같다.
상기 방법은 (a) 화학식 3의 화합물 또는 그의 염을 R1-X1의 화합물과 반응시켜 화학식 4의 화합물을 생성하는 단계; 및 화학식 4의 화합물과 6-할로-7-데아자푸린과 반응시켜 화학식 6의 화합물을 생성하는 단계; 또는 (b) 화학식 3의 화합물 또는 그의 염을 6-할로-7-데아자푸린과 반응시켜 화학식 5의 화합물을 생성하는 단계; 및 화학식 5의 화합물과 R1-X1의 화합물과 반응시켜 화학식 6의 화합물을 생성하는 단계; (c) 화학식 6의 화합물의 피롤리딘 (pyrrolidine) 고리의 질소를 탈보호시켜 화학식 7의 화합물을 생성하는 단계; (d) 화학식 7의 화합물을 R4-X2와 반응시켜 화학식 8의 화합물을 생성하는 단계; 및 (e) 화학식 8의 화합물을 탈보호시켜 화학식 1의 화합물을 제조하는 단계를 포함하는 화학식 1의 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.
상기 방법에서, (a) 단계의 "화학식 3의 화합물 또는 그의 염을 R1-X1의 화합물과 반응시켜 화학식 4의 화합물을 생성하는 단계" 및 "화학식 5의 화합물과 R1-X1의 화합물과 반응시켜 화학식 6의 화합물을 생성하는 단계"는 알킬화 (예를 들면, 메틸화), 알케닐화, 또는 알키닐화를 포함한다.
상기 방법에서, (a) 단계의 "화학식 4의 화합물과 6-할로-7-데아자푸린과 반응시켜 화학식 6의 화합물을 생성하는 단계" 및 "화학식 3의 화합물 또는 그의 염을 6-할로-7-데아자푸린과 반응시켜 화학식 5의 화합물을 생성하는 단계"는 적절한 용매하에서 가열하면서 또는 환류 조건에서 수행될 수 있다. 상기 6-할로-7-데아자푸린은 상업적으로 구입할 수 있다. 상기 할로는 예를 들면 클로로일 수 있다.
상기 방법에서, (c) "화학식 6의 화합물의 피롤리딘 (pyrrolidine) 고리의 질소를 탈보호시켜 화학식 7의 화합물을 생성하는 단계"; 및 (e) "화학식 8의 화합물을 탈보호시켜 화학식 1의 화합물을 제조하는 단계"는 임의의 알려진 탈보호 방법에 의하여 수행될 수 있다.
또한, 상기 방법에서, (d) "화학식 7의 화합물을 R4-X2와 반응시켜 화학식 8의 화합물을 생성하는 단계"는 N에 의한 X2의 치환에 의하여 수행될 수 있다.
상기 방법에서, 용어 "이탈기 (leaving group)"는 치환 반응, 예를 들면 친핵성 치환 반응에서 다른 기능적 기 또는 원자에 의해 교체될 수 있는 기능적 기 또는 원자를 의미한다. 예컨대, 대표적인 이탈기는 클로로, 브로모 및 요오드 기; 설포닉 에스테르기, 예컨대 토실레이트, 브로실레이트 및 노실레이트 등; 및 알킬옥시 기, 예컨대 아세트옥시 및 트리플루오로아세트옥시 등을 포함한다.
용어 "보호된 (protected)"은 화합물의 하나 이상의 기능기가 보호기 또는 차단기를 이용하여 원하지 않는 반응으로부터 보호되는 것을 의미한다. 보호될 수 있는 기능기는, 예컨대, 아미노기를 위한 대표적인 보호기인 카르바메이트 (예컨대 tert-부톡시카르보닐)를 포함한다.
용어 "아미노-보호기 (amino-protecting group)"는 아미노기에서 원하지 않는 반응을 방지하는데 적합한 보호기를 의미한다. 대표적인 아미노-보호기는 tert-부톡시카르보닐 (BOC), 트리틸 (Tr), 벤질옥시카르보닐 (Cbz), 9-플루오렌일메톡시카르보닐 (Fmoc), 포르밀, 트리메틸실릴 (TMS) 및 tert-부틸디메틸실릴 (TBS) 등을 포함한다.
본 발명의 화학식 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체는 상기 반응식 1의 제조방법에서 화학식 3의 피롤리딘 구조의 화합물을 피페리딘 구조의 화합물로 변경하는 등의 상기 제조방법의 적절한 변경에 의해 유기화학분야에서의 통상의 기술자가 적절히 제조할 수 있다.
상기 방법에 있어서, 본 발명의 화합물은 일반적인 방법 및 과정을 이용하거나 당업자가 용이하게 입수할 수 있는 다른 정보를 이용하여 용이하게 입수할 수 있는 출발물질로부터 제조될 수 있다.
상기 본 발명의 화합물의 제조방법의 상세는 하기 실시예를 참조할 수 있다.
화합물의 염, 및 수화물을 포함한 용매화물을 포함하는, 본 발명의 화합물은 일반적으로 널리 알려진 유기 합성 기법을 사용하여 제조될 수 있고, 다수의 가능한 합성 경로 중 하나에 따라 합성될 수 있다.
본 발명의 화합물을 합성하기 위한 반응들은 유기 합성 분야의 당업자들이 쉽게 선택할 수 있는 적절한 용매에서 수행될 수 있다. 적절한 용매는 반응이 수행될 때의 온도, 즉, 용매의 어는점에서 용매의 끓는점까지의 범위의 온도에서 출발 물질 또는 반응물, 중간체 또는 반응결과물과 대체로 비 반응성이다. 주어진 반응은 하나의 용매 또는 둘 이상의 용매의 혼합물 중에서 수행될 수도 있다. 특정 반응 단계에 따라, 특정 반응 단계에 적합한 용매가 선택될 수 있다.
본 발명의 화합물의 합성은 다양한 화학 작용기의 보호 및 탈보호를 포함할 수 있다. 보호 및 탈보호의 필요성과 적절한 보호기의 선택은 당해 분야의 전문가에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
반응은 당업계에 공지된 임의의 적합한 방법에 따라 추적 관찰할 수 있다. 예를 들어, 반응 결과물의 형성은 핵자기 공명 분광학 (예를 들어,　1H or 13C), 적외선 분광학, 분광 광도 측정법 (예를 들어, UV-visible), 및 질량분석법 등의 분광학적 방법이나, 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC) 및 박층 크로마토그래피 (TLC)와 같은 크로마토그래피를 이용하여 추적 관찰할 수 있다. 본 발명의 화합물들은 문헌들에서 잘 알려진 수많은 합성 경로에 따라서 합성될 수 있다.
본 발명에 따른 화학식 1 또는 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체는 JAK 억제 활성을 가지므로 자가면역질환, 면역체계 기능장애, 바이러스성 질환, 또는 암과 같은 JAK와 연관된 질병의 치료에 사용될 수 있다. 더욱이, 상기 본 발명에 따른 화합물은 종래 FDA 허가 약물인 토파시티닙에 비해 JAK2에 대한 JAK1의 선택적 억제 활성이 높으므로, JAK2의 억제에 의해 발생 가능한 부작용을 회피할 수 있다는 장점이 있다. 또한, 상기 본 발명에 따른 화합물은 종래 FDA 허가 약물인 토파시티닙에 비해 약물의 반감기가 현저히 높으므로, 투여간격을 늘릴 수 있어 환자의 복약 순응도를 증가시킬 수 있는 장점이 있다.
도 1 및 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 화합물에 대한 크로톤 오일-유도 염증 모델에서의 항염증 시험 결과를 부종 억제율로서 나타낸 그래프이다.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
본 실시예에서 달리 언급이 없으면, 시약, 출발 물질 및 용매는 상업적 공급자들 (예컨대 Aldrich, Fluka, Sigma, Acros, 대정화금, TCI 등)로부터 구입했고 추가 정제 없이 사용하였다. 합성과정에서 사용된 정제는 Merck사의 Silica gel 60 (0.040~0.063 mm)을 사용하여 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 통해 진행하였다.
1. 중간체 제조예
하기 실시예에서 제조된 화합물은 일부 하기 중간체를 사용하여 합성되었다.
(1.1) 중간체 1: 터트 -부틸 (R)-(1- 벤질피롤리딘 -3-일) 카바메이트
Figure PCTKR2016009205-appb-I000006
500 mL 둥근바닥 플라스크에 5.000 g의 (3R)-(-)-1-벤질-3-아미노피롤리딘 염산염 (Hangzhou Tacon Co., Ltd.)을 넣고, 117.5 mL의 증류수 (deionized water)와 117.5 mL의 아세토니트릴 (acetonitrile)을 넣었다. 이후 5.924 g의 탄산수소 나트륨 (NaHCO3)을 넣었다. 그리고 6.218 g의 디-터트-부틸 디카바메이트 (Boc2O)를 넣었다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 격렬히 교반시켰다. 반응혼합물 중에서 유기층을 분리했다. 그리고 수용액층을 50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 2회 추출하였다. 모아진 유기층을 감압증류했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 그 결과 4.235 g의 터트-부틸 (R)-(1-벤질피롤리딘-3-일)카바메이트를 65.2%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.36-7.26 (m, 5H), 4.86 (bs, 1H), 4.18 (bs, 1H), 3.61 (s, 2H), 2.79 (bs, 1H), 2.65-2.61 (m, 1H), 2.54 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 2.34-2.25 (m, 2H), 1.61-1.51 (m, 1H), 1.46 (s, 9H).
(1.2) 중간체 2: (R)-1- 벤질 -N- 메틸피롤리딘 -3- 아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000007
100 mL 둥근바닥 플라스크에 3.204 g의 터트-부틸 (R)-(1-벤질피롤리딘-3-일)카바메이트를 넣고, 58.0 mL의 테트라하이드로퓨란 (tetrahydrofuran)을 넣었다. 이후 2.639 g의 리튬 알루미늄 하이드라이드 (LiAlH4)를 넣었다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 환류시켰다. 0oC에서 냉각시켰다. 냉각시키면서 2.7 mL의 증류수 (deionized water)를 천천히 넣었다. 5분 동안 교반 후, 2.7 mL의 15% 수산화 나트륨 (NaOH) 수용액을 넣었다. 다시 5분 동안 교반 후, 8.1 mL의 증류수 (deionized water)를 넣어서 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) (대정화금) 층을 통해 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2:NH4OH=5:90:5). 그 결과 2.174 g의 (R)-1-벤질-N-메틸피롤리딘-3-아민을 98.6%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.34-7.24 (m, 5H), 3.62 (s, 2H), 3.25-3.19 (m, 1H), 2.74 (dd, J = 9.4, 6.8 Hz, 1H), 2.64 (dt, J = 8.6, 6.0 Hz, 1H), 2.52 (dt, J = 8.4, 6.0 Hz, 1H), 2.41-2.37 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.19-2.09 (m, 1H), 2.02 (bs, 1H), 1.63-1.56 (m, 1H).
(1.3) 중간체 3: (R)-N-(1- 벤질피롤리딘 -3-일)-N- 메틸 -7H- 피롤로[2,3-d]피리 미딘-4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000008
50 mL 둥근바닥 플라스크에 419.5 mg의 (R)-1-벤질-N-메틸피롤리딘-3-아민을 넣고, 11.0 mL의 증류수 (deionized water)를 넣었다. 이후 372.4 mg의 6-클로로-7-데아자퓨린 (6-chloro-7-deazapurine) (Acros)을 넣었다. 반응혼합물에 609.4 mg의 탄산 칼륨 (K2CO3)을 넣었다. 이 혼합물을 24시간 동안 환류시켰다. 24시간 이후 상온에서 냉각시켰다. 반응혼합물을 20.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 세 번 추출했다. 모아진 유기층을 감압농축했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 그 결과 506.9 mg의 (R)-N-(1-벤질피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 74.8%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.40 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.51-7.20 (m, 5H), 7.03 (s, 1H), 6.59 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.66 (s, 1H), 3.65 (dd, J = 62.5, 12.9 Hz, 2H), 3.42 (s, 3H), 2.98 (dd, J = 13.5, 7.8 Hz, 1H), 2.83 (dd, J = 10.3, 3.4 Hz, 1H), 2.69-2.53 (m, 1H), 2.44-2.21 (m, 2H), 1.96-1.83 (m, 1H).
(1.4) 중간체 4: (R)-N- 메틸 -N-( 피롤리딘 -3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000009
100 mL 둥근바닥 플라스크에 638.1 mg의 (R)-N-(1-벤질피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 20.8 mL의 메탄올 (methanol)로 용해시켰다. 이후 638.1 mg의 10w/w% 팔라듐/탄소 (Pd/C) (Acros)를 넣고, 수소 풍선을 반응 플라스크 위에 장치하였다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 격렬히 교반했다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 필터한 용액을 감압농축했다. 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 324.6 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 72.0%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ12.16 (bs, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.09 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 5.62-5.42 (m, 1H), 3.42-3.32 (m, 3H), 3.29 (dd, J = 11.5, 8.4 Hz, 1H), 3.24-3.12 (m, 1H), 3.10-3.01 (m, 1H), 2.98 (dd, J = 11.5, 6.2 Hz, 1H), 2.66 (bs, 1H), 2.26-2.10 (m, 1H), 1.91 (td, J = 14.9, 7.6 Hz, 1H).
실시예 1. (R)-3-(3-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노) 피롤리딘 -1-일)-3-옥소프로판니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000010
10 mL 둥근바닥 플라스크에 103 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 4.70 mL의 n-부탄올 (n-butanol)로 녹였다. 이 용액에 0.505 mL의 에틸 시아노아세테이트 (ethyl cyanoacetate)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0360 mL의 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔 (DBU)으로 처리했다. 이후 24시간 동안 80oC로 가열했다. 반응을 끝낸 후 반응액을 감압증류하여 용매를 제거했다. 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 101 mg의 (R)-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴을 74.8%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ11.48 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 5.74 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.79-3.57 (m, 2H), 3.48 (s, 2H), 3.34 (d, J = 14.9 Hz, 3H), 2.46-2.11 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C14H16N6O + H+) 285.2, found 285.2.
실시예 2. (R)-3-(3-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노) 피롤리딘 -1-일)프로판니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000011
5 mL 둥근바닥 플라스크에 60.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0240 mL의 3-브로모프로피오니트릴 (3-bromopropionitrile)을 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0720 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 5시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 55.3 mg의 (R)-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)프로판니트릴을 74.7%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.65 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.05 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.75-5.73 (m, 1H), 3.44 (s, 3H), 3.11-3.06 (m, 1H), 2.98-2.95 (m, 1H), 2.87-2.83 (m, 1H), 2.78-2.72 (m, 1H), 2.67 (dd, J = 8.8, 9.6 Hz, 1H), 2.60 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.41-2.30 (m, 2H), 1.99-1.90 (m, 1H).
LRMS (ESI) calcd for (C14H18N6 + H+) 271.2, found 271.1.
실시예 3. (R)-N-(1- 부틸피롤리딘 -3-일)-N- 메틸 -7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000012
5 mL 둥근바닥 플라스크에 80.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0420 mL의 1-브로모부탄 (1-bromobutane)을 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0960 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 이 혼합물에 20방울의 N,N-디메틸폼아미드 (N,N-dimethylformamide)를 넣었다. 반응혼합물을 5시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 90.0 mg의 (R)-N-(1-부틸피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 83.3%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.05 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.09 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.69 (s, 1H), 3.50 (d, J = 4.4 Hz, 4H), 2.92-2.85 (m, 3H), 2.39 (s, 2H), 1.76 (s, 4H), 1.48-1.44 (m, 2H), 0.99 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
LRMS (ESI) calcd for (C15H23N5 + H+) 274.2, found 274.2.
실시예 4. (R)-2- 아지도 -1-(3-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)에탄-1-온
Figure PCTKR2016009205-appb-I000013
25 mL 둥근바닥 플라스크에, 247 mg의 2-아지도아세트산 (2-azidoacetic acid)을 8.00 mL의 N,N-디메틸폼아미드 (N,N-dimethylformamide)로 녹인다. 그리고 503 mg의 디시클로헥실카보이미드 (dicyclohexylcarbodiimide)와 0.850 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)을 넣었다. 반응혼합물을 15분 동안 교반했다. 다른 25 mL 둥근바닥 플라스크에 265 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣었다. 2-아지도아세트산 혼합물을 다른 25 mL 둥근바닥 플라스크에 넣었다. 이 혼합물을 하룻밤 동안 환류시켰다. 상온으로 냉각 뒤, 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 얻어진 분액을 감압농축하고 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 19.3 mg의 (R)-2-아지도-1-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)에탄-1-온을 5.27%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.64 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.11-7.02 (m, 1H), 6.62-6.61 (m, 1H), 5.81-5.71 (m, 1H), 3.97-3.90 (m, 3H), 3.84-3.78 (m, 1H), 3.69-3.51 (m, 2H), 3.37-3.33 (m, 3H), 2.26-2.12 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C13H16N8O + H+) 301.2, found 301.1.
실시예 5. (R)-3- 메틸 -1-(3-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노) 피롤리딘 -1-일)부탄-1-온
Figure PCTKR2016009205-appb-I000014
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0390 mL의 이소발러릴 클로라이드 (isovaleryl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 66.7 mg의 (R)-3-메틸-1-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)부탄-1-온을 68.7%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.87 (d, J = 14.8 Hz, 1H), 8.35 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.11-7.08 (m, 1H), 6.62-6.61 (m, 1H), 5.78-5.66 (m, 1H), 3.92-3.69 (m, 2H), 3.61-3.39 (m, 2H), 3.36 (d, J = 12.4 Hz, 3H), 2.33 (m, 5H), 1.03-0.99 (m, 6H).
LRMS (ESI) calcd for (C16H23N5O + H+) 302.2, found 302.2.
실시예 6. 이소부틸 (R)-3-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노) 피롤리딘 -1-카르복실레이트
Figure PCTKR2016009205-appb-I000015
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0420 mL의 이소부틸 클로로포메이트 (isobutyl chloroformate)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0560 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 41.0 mg의 이소부틸 (R)-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트를 40.2%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.52 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 5.73-5.71 (m, 1H), 3.92 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.78-3.68 (m, 2H), 3.55-3.39 (m, 2H), 3.34 (s, 3H), 2.22-2.12 (m, 2H), 1.97-1.96 (m, 1H), 0.97-0.95(m, 6H). LRMS
(ESI) calcd for (C16H23N5O2 + H+) 318.2, found 318.2.
실시예 7. (R)-3-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노)-N- 페닐피롤리딘 -1-카르복스아미드
Figure PCTKR2016009205-appb-I000016
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0350 mL의 페닐 이소사이아네이트 (phenyl isocyanate)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 5시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 81.5 mg의 (R)-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-N-페닐피롤리딘-1-카르복스아미드를 75.4%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.61 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.45 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.33 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.12 (m, 1H), 7.05 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.25 (s, 1H), 5.83-5.72 (m, 1H), 3.90 (q, J = 8.4, 10 Hz, 1H), 3.83-3.77 (m, 1H), 3.61-3.54 (m, 1H), 3.52-3.47 (m, 1H), 3.38 (s, 3H), 2.35-2.20 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C18H20N6O + H+) 337.2, found 337.2.
실시예 8. (R)-N- 메틸 -N-(1-( 메틸설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000017
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0250 mL의 메탄설포닐 클로라이드(methanesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 40.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(1-(메틸설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 42.1%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.63 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.62 (s, 1H), 5.85-5.77 (m, 1H), 3.80-3.69 (m, 1H), 3.66-3.61 (m, 1H), 3.44-3.30 (m, 5H), 2.93 (s, 3H), 2.36-2.17 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C12H17N5O2S + H+) 296.1, found 296.1.
실시예 9. (R)-N- 메틸 -N-(1-(( 트리플루오로메틸 ) 설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000018
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0340 mL의 트라이플루오로메탄설포닐 클로라이드 (trifluoromethanesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 72.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(1-((트리플루오로메틸)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 64.3%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.00 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.13-7.12 (m, 1H), 6.62-6.60 (m, 1H), 5.93-5.79 (m, 1H), 4.02-3.86 (m, 2H), 3.68-3.61 (m, 1H), 3.57 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 3.38 (s, 3H), 2.39-2.23 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C12H14F3N5O2S + H+) 350.1, found 350.1.
실시예 10. (R)-N-(1-( 에틸설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-N- 메틸 -7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000019
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0310 mL의 에탄설포닐 클로라이드 (ethanesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 53.4 mg의 (R)-N-(1-(에틸설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 53.6%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.30 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 5.83-5.79 (m, 1H), 3.76-3.67 (m, 2H), 3.55-3.40 (m, 2H), 3.38 (s, 3H), 3.12-3.07 (m, 2H), 2.34-2.15 (m, 2H), 1.46 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
LRMS (ESI) calcd for (C13H19N5O2S + H+) 310.1, found 310.1.
실시예 11. (R)-N- 메틸 -N-(1-( 프로필설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000020
5 mL 둥근바닥 플라스크에 60.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 0.600 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0320 mL의 1-프로판설포닐 클로라이드 (1-propanesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0720 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 5시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 49.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(1-(프로필설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 54.9%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.64 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.09-7.08 (m, 1H), 6.62-6.61 (m, 1H), 5.83-5.77 (m, 1H), 3.74-3.65 (m, 2H), 3.44-3.38 (m, 2H), 3.37 (s, 3H), 3.04-3.00 (m, 2H), 2.40-2.25 (m, 1H), 2.24-2.12 (m, 1H), 1.97-1.87 (m, 2H), 1.13 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
LRMS (ESI) calcd for (C14H21N5O2S + H+) 324.1, found 324.1.
실시예 12. (R)-N-(1-( 이소프로필설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-N- 메틸 -7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000021
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0360 mL의 2-프로판설포닐 클로라이드 (2-propanesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 36.0 mg의 (R)-N-(1-(이소프로필설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 34.6%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.93 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.07-7.02 (m, 1H), 6.62-6.61 (m, 1H), 5.90-5.75 (m, 1H), 3.80-3.68 (m, 2H), 3.50-3.44 (m, 2H), 3.36 (s, 3H), 3.33-3.26 (m, 1H), 2.30-2.13 (m, 2H), 1.44 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
LRMS (ESI) calcd for (C14H21N5O2S + H+) 324.2, found 324.1.
실시예 13. (R)-N- 메틸 -N-(1-((1- 메틸 -1H-이미다졸-4-일) 설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000022
5 mL 둥근바닥 플라스크에 50.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 39.7 mg의 1-메틸-1H-이미다졸-4-설포닐 클로라이드 (1-methyl-1H-imidazole-4-sulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0370 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 17.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(1-((1-메틸-1H-이미다졸-4-일)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 22.4%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.32 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.54 (dd, J = 11.2, 3.6 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.36 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 5.71-5.63 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.78-3.67 (m, 2H), 3.50-3.42 (m, 2H), 3.34 (s, 3H), 2.22-2.09 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C15H19N7O2S + H+) 362.1, found 362.1.
실시예 14. (R)-N- 메틸 -N-(1-( 페닐설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-7H- 피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000023
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0410 mL의 벤젠설포닐 클로라이드 (benzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 101 mg의 (R)-N-메틸-N-(1-(페닐설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 84.2%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.32 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.90 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.69-7.54 (m, 3H), 7.02 (s, 1H), 6.48 (s, 1H), 5.65-5.58 (m, 1H), 3.69-3.65 (m, 1H), 3.59-3.35 (m, 2H), 3.29 (s, 3H), 3.15-3.04 (m, 1H), 2.32-2.02 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C17H19N5O2S + H+) 358.1, found 358.1.
실시예 15. (R)-N-(1-((2- 플루오로페닐 ) 설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-N- 메틸 -7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000024
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0450 mL의 2-플루오로벤젠설포닐 클로라이드 (2-fluorobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 96.8 mg의 (R)-N-(1-((2-플루오로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 80.6%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.71 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.97-7.93 (m, 1H), 7.67-7.61 (m, 1H), 7.35-7.27 (m, 2H), 7.08-7.02 (m, 1H), 6.58 (dd, J = 3.6, 2.0 Hz, 1H), 5.76-5.68 (m, 1H), 3.80-3.75 (m, 1H), 3.64 (dd, J = 10.4, 8.4 Hz, 1H), 3.45 (dd, J = 10.4, 6.8 Hz, 1H), 3.40-3.36 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 2.28-2.16 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C17H18FN5O2S + H+) 376.1, found 376.1.
실시예 16. (R)-N-(1-((3- 플루오로페닐 ) 설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-N- 메틸 -7H- 피 롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000025
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0450 mL의 3-플루오로벤젠설포닐 클로라이드 (3-fluorobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 101 mg의 (R)-N-(1-((3-플루오로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 84.0%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.54 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.69 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.62-7.57 (m, 2H), 7.38 (dt, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 7.07 (t, J = 2.8 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 5.67-5.59 (m, 1H), 3.72-3.67 (m, 1H), 3.47 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 3.39 (dd, J = 10.4, 6.8 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H), 3.18-3.11 (m, 1H), 2.25-2.10 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C17H18FN5O2S + H+) 376.1, found 376.1.
실시예 17. (R)-N-(1-((4- 플루오로페닐 ) 설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-N- 메틸 -7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000026
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 66.2 mg의 4-플루오로벤젠설포닐 클로라이드 (4-fluorobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 93.5 mg의 (R)-N-(1-((4-플루오로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 77.8%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.35 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.91 (dd, J = 9.2, 5.2 Hz, 2H), 7.31-7.25 (m, 2H), 7.09 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 5.67-5.59 (m, 1H), 3.70-3.65 (m, 1H), 3.45 (dd, J = 10.4, 8.4 Hz, 1H), 3.37 (dd, J = 10.8, 6.8 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H), 3.15-3.08 (m, 1H), 2.25-2.06 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C17H18FN5O2S + H+) 376.1, found 376.1.
실시예 18. (R)-2-((3-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노) 피롤리딘 -1-일)설폰일)벤조니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000027
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 68.6 mg의 2-시아노벤젠설포닐 클로라이드 (2-cyanobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 68.8 mg의 (R)-2-((3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴을 56.0%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.70 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.14 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.82-7.73 (m, 2H), 7.08 (t, J = 3.2 Hz, 1H), 6.60 (dd, J = 3.2, 1.6 Hz, 1H), 5.82-5.74 (m, 1H), 3.87-3.82 (m, 1H), 3.68 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 3.52-3.41 (s, 2H), 3.35 (s, 3H), 2.33-2.23 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C18H18N6O2S + H+) 383.1, found 383.1.
실시예 19. (R)-3-((3-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노) 피롤리딘 -1-일)설폰일)벤조니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000028
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 68.6 mg의 3-시아노벤젠설포닐 클로라이드 (3-cyanobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 88.6 mg의 (R)-3-((3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴을 72.4%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.04 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.11 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.75 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.10 (t, J = 3.2 Hz, 1H), 6.57 (t, J = 1.6 Hz, 1H), 5.62 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.75-3.70 (m, 1H), 3.51 (dd, J = 10.4, 8.4 Hz, 1H), 3.40 (dd, J = 10.4, 6.8 Hz, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.20-3.13 (m, 1H), 2.27-2.14 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C18H18N6O2S + H+) 383.1, found 383.1.
실시예 20. (R)-4-((3-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노) 피롤리 딘-1-일)설폰일)벤조니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000029
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 68.6 mg의 4-시아노벤젠설포닐 클로라이드 (4-cyanobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 80.5 mg의 (R)-4-((3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴을 65.8%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.72 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.00 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.90 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.09 (dd, J = 3.6, 2.4 Hz, 1H), 6.56 (dd, J = 3.6, 2.0 Hz, 1H), 5.66-5.58 (m, 1H), 3.74-3.68 (m, 1H), 3.50 (dd, J = 10.4, 8.4 Hz, 1H), 3.40 (dd, J = 10.4, 6.8 Hz, 1H), 3.31 (s, 3H), 3.20-3.14 (m, 1H), 2.26-2.09 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C18H18N6O2S + H+) 383.1, found 383.1.
실시예 21. (R)-N- 메틸 -N-(1-((2- 니트로페닐 ) 설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000030
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 75.4 mg의 2-니트로벤젠설포닐 클로라이드 (2-nitrobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 101 mg의 (R)-N-메틸-N-(1-((2-니트로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 78.1%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.83 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.08 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.78-7.66 (m, 3H), 7.09 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 5.82-5.74 (m, 1H), 3.82-3.74 (m, 2H), 3.53-3.45 (m, 2H), 3.35 (s, 3H), 2.33-2.18 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C17H18N6O4S + H+) 403.1, found 403.1.
실시예 22. (R)-N- 메틸 -N-(1-((3- 니트로페닐 ) 설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-7H- 피롤 로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000031
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 75.4 mg의 3-니트로벤젠설포닐 클로라이드 (3-nitrobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 104 mg의 (R)-N-메틸-N-(1-((3-니트로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 81.0%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.51 (s, 1H), 8.73 (t, J = 1.6 Hz, 1H), 8.52 (dd, J = 8.0, 1.6 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.22 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.83 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.10 (dd, J = 3.6, 2.0 Hz, 1H), 6.56 (dd, J = 3.2, 1.6 Hz, 1H), 5.67-5.61 (m, 1H), 3.78-3.73 (m, 1H), 3.54 (dd, J = 10.4, 8.4 Hz, 1H), 3.43 (dd, J = 10.4, 6.8 Hz, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.23-3.17 (m, 1H), 2.27-2.14 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C17H18N6O4S + H+) 403.1, found 403.1.
실시예 23. (R)-N- 메틸 -N-(1-((4- 니트로페닐 ) 설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000032
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 75.4 mg의 4-니트로벤젠설포닐 클로라이드 (4-nitrobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 95.3 mg의 (R)-N-메틸-N-(1-((4-니트로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 74.0%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.10 (s, 1H), 8.44 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 8.25 (s, 1H), 8.08 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.09 (s, 1H), 6.55 (t, J = 1.6 Hz, 1H), 5.65-5.57 (m, 1H), 3.76-3.70 (m, 1H), 3.53 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 3.41 (dd, J = 10.0, 6.8 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H), 3.23-3.17 (m, 1H), 2.27-2.11 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C17H18N6O4S + H+) 403.1, found 403.0.
실시예 24. (R)-N- 메틸 -N-(1-(m- 톨릴설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-7H- 피롤로[2,3- d]피리미딘-4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000033
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 2.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0470 mL의 3-톨루엔설포닐 클로라이드 (3-toluenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 101 mg의 (R)-N-메틸-N-(1-(m-톨릴설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 84.9%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.33 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.69 (s, 2H), 7.47 (s, 2H), 7.06 (s, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.63-5.58 (m, 1H), 3.69-3.65 (m, 1H), 3.48-3.35 (m, 2H), 3.30 (s, 3H), 3.13-3.06 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.19-2.02 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C18H21N5O2S + H+) 372.2, found 372.1.
실시예 25. (R)-N- 메틸 -N-(1- 토실피롤리딘 -3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000034
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 64.8 mg의 p-톨루엔설포닐 클로라이드 (p-toluenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 87.4 mg의 (R)-N-메틸-N-(1-토실피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 73.5%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.94 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.39 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.07 (t, J = 2.8 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.66-5.58 (m, 1H), 3.68-3.63 (m, 1H), 3.43-3.34 (m, 2H), 3.31 (s, 3H), 3.11-3.05 (m, 1H), 2.49 (s, 3H), 2.22-2.02(m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C18H21N5O2S + H+) 372.2, found 372.1.
실시예 26. (R)-N-(1-((4- 메톡시페닐 ) 설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-N- 메틸 -7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000035
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 70.3 mg의 4-메톡시벤젠설포닐 클로라이드 (4-methoxybenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 107 mg의 (R)-N-(1-((4-메톡시페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 86.2%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.82 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.83 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 8.4 Hz, 3H), 6.55 (s, 1H), 5.66-5.58 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.67-3.62 (m, 1H), 3.42-3.34 (m, 2H), 3.31 (s, 3H), 3.11-3.04 (m, 1H), 2.23-2.04 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C18H21N5O3S + H+) 388.1, found 388.1.
실시예 27. (R)-N- 메틸 -N-(1-((4-( 트리플루오로메틸 )페닐) 설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000036
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 83.2 mg의 4-(트리플루오루메틸)벤젠설포닐 클로라이드 (4-(trifluoromethyl)benzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 99.2 mg의 (R)-N-메틸-N-(1-((4-(트리플루오로메틸)페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 72.9%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.24 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.87 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.09 (dd, J = 3.6, 2.4 Hz, 1H), 6.55 (dd, J = 3.6, 2.4 Hz, 1H), 5.66-5.58 (m, 1H), 3.74-3.68 (m, 1H), 3.49 (dd, J = 10.4, 8.4 Hz, 1H), 3.40 (dd, J = 10.4, 6.8 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H), 3.19-3.12 (m, 1H), 2.26-2.08 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C18H18F3N5O2S + H+) 426.1, found 426.1.
실시예 28. (R)-N- 메틸 -N-(1-(나프탈렌-2- 일설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000037
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 2.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 73.0 mg의 2-나프탈렌설포닐 클로라이드 (2-naphthalenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 112 mg의 (R)-N-메틸-N-(1-(나프탈렌-2-일설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 84.7%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.51 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.04-7.97 (m, 3H), 7.90 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz, 1H), 7.73-7.53 (m, 2H), 7.00-6.99 (m, 1H), 6.49-6.48 (m, 1H), 5.59-5.50 (m, 1H), 3.74-3.71 (m, 1H), 3.53-3.49 (m, 1H), 3.44-3.40 (m, 1H), 3.28 (s, 3H), 3.22-3.11 (m, 1H), 2.21-2.11 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C21H21N5O2S + H+) 408.2, found 408.1.
실시예 29. (R)-N- 메틸 -N-(1-(피페리딘-1- 일설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000038
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0450 mL의 피페리딘-1-설포닐 클로라이드 (piperidine-1-sulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 91.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(1-(피페리딘-1-일설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 77.8%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.57 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.61 (s, 1H), 5.87-5.81 (m, 1H), 3.65-3.59 (m, 2H), 3.40-3.33 (m, 5H), 3.31-3.27 (m, 4H), 2.33-2.10 (m, 2H), 1.69-1.58 (m, 6H).
LRMS (ESI) calcd for (C16H24N6O2S + H+) 365.2, found 365.2.
실시예 30. (R)-N- 메틸 -N-(1-( 모폴리노설폰일 ) 피롤리딘 -3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000039
50 mL 둥근바닥 플라스크에 10.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)을 넣고 얼음 저온조에서 냉각시켰다. 0.300 mL의 설푸릴 클로라이드 (SO2Cl2)를 넣었다. 얼음 저온조에서 냉각하면서, 3.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)에 213 mg의 모폴린 (morpholine)을 녹인 용액을 천천히 넣었다. 반응혼합물을 520 mg의 트리에틸아민 (trimethylamine)으로 처리했다. 2시간 동안 교반했다. 반응물을 20.0 mL의 클로로폼 (chloroform)에 녹이고, 20.0 mL의 얼음물로 세척했다. 클로로폼 (chloroform) 층을 분리하여 황산 마그네슘 (MgSO4)으로 건조시키고, 필터했다. 필터된 용액을 감압증류했다. 그 결과 160 mg의 모폴린-4-설포닐 클로라이드를 23.3%의 수율로 얻었다.
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0390 mL의 모폴린-4-설포닐 클로라이드 (morpholine-4-sulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0590 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 47.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(1-(모폴리노설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 40.2%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.06 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.11-7.10 (m, 1H), 6.62-6.61 (m, 1H), 5.84-5.76 (m, 1H), 3.78-3.77 (m, 4H), 3.70-3.64 (m, 2H), 3.45-3.29 (m, 9H), 2.36-2.17 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C15H22N6O3S + H+) 367.2, found 367.1.
실시예 31. (S)-3-(3-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노) 피롤리딘 -1-일)-3-옥소프로판니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000040
100 mL 둥근바닥 플라스크에 720 mg의 터트-부틸 (S)-(1-벤질피롤리딘-3-일)카바메이트를 넣고, 11.5 mL의 테트라하이드로퓨란 (tetrahydrofuran)을 넣었다. 이후 623 mg의 리튬 알루미늄 하이드라이드 (LiAlH4)를 넣었다. 반응혼합물을 4시간 동안 환류시켰다. 0oC에서 냉각시켰다. 냉각시키면서 1.16 mL의 증류수 (deionized water)를 천천히 넣었다. 5분 동안 교반 후, 1.16 mL의 15% 수산화 나트륨 (NaOH) 수용액을 넣었다. 다시 5분 동안 교반 후, 3.80 mL의 증류수 (deionized water)를 넣어서 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2:NH4OH=5:90:5). 그 결과 440 mg의 (S)-1-벤질-N-메틸피롤리딘-3-아민을 89.9%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 440 mg의 (S)-1-벤질-N-메틸피롤리딘-3-아민을 넣고, 9.00 mL의 증류수 (deionized water)를 넣었다. 이후 373 mg의 6-클로로-7-데아자퓨린 (6-chloro-7-deazapurine)을 넣었다. 반응혼합물에 639 mg의 탄산 칼륨 (K2CO3)을 넣었다. 이 혼합물을 36시간 동안 환류시켰다. 36시간 이후 상온에서 냉각시켰다. 반응혼합물을 40.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 세 번 추출했다. 모아진 유기층을 감압농축했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 그 결과 544 mg의 (S)-N-(1-벤질피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 76.6%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 534 mg의 (S)-N-(1-벤질피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 5.00 mL의 메탄올 (methanol)로 용해시켰다. 이후 534 mg의 10w/w% 팔라듐/탄소 (Pd/C)를 넣고, 수소 풍선을 반응 플라스크 위에 장치하였다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 격렬히 교반했다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 필터한 용액을 감압농축했다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 250 mg의 (S)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 66.1%의 수율로 얻었다.
5 mL 둥근바닥 플라스크에 150 mg의 (S)-N-메틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 2.25 mL의 n-부탄올 (n-butanol)로 녹였다. 이 용액에 0.0730 mL의 에틸 시아노아세테이트 (ethyl cyanoacetate)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0520 mL의 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔 (DBU)으로 처리했다. 이후 24시간 동안 80oC로 가열했다. 반응을 끝낸 후 반응액을 감압증류하여 용매를 제거했다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 140 mg의 (S)-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴을 71.4%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.39 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.12 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 5.89-5.56 (m, 1H), 3.96-3.72 (m, 2H), 3.69-3.49 (m, 2H), 3.46 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.35 (d, J = 14.9 Hz, 3H), 2.40-2.13 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C14H16N6O + H+) 285.2, found 285.1.
실시예 32. (R)-3-((3-((7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-일)아미노) 피롤리딘 -1-일)설폰일)벤조니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000041
25 mL 둥근바닥 플라스크에 300 mg의 (3R)-(+)-1-벤질-3-아미노피롤리딘을 넣고, 6.00 mL의 증류수 (deionized water)를 넣었다. 이후 274 mg의 6-클로로-7-데아자퓨린 (6-chloro-7-deazapurine)을 넣었다. 반응혼합물에 470 mg의 탄산 칼륨 (K2CO3)을 넣었다. 이 혼합물을 24시간 동안 환류시켰다. 24시간 이후 상온에서 냉각시켰다. 반응혼합물을 10.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 세 번 추출했다. 모아진 유기층을 감압농축했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 그 결과 292 mg의 (R)-N-(1-벤질피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 58.5%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 294 mg의 (R)-N-(1-벤질피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 4.00 mL의 메탄올 (methanol)로 용해시켰다. 이후 280 mg의 10w/w% 팔라듐/탄소 (Pd/C)를 넣고, 수소 풍선을 반응 플라스크 위에 장치하였다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 격렬히 교반했다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 필터한 용액을 감압농축했다. 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 191 mg의 (R)-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 94.8%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 60.0 mg의 (R)-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 59.6 mg의 3-시아노벤젠설포닐 클로라이드 (3-cyanobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0770 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 42.0 mg의 (R)-3-((3-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴을 38.2%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ11.51 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 8.03 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.65 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.06(s, 1H), 6.40 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.43-4.39 (m, 1H), 3.53-3.47 (m, 2H), 3.39-3.26 (m, 2H), 2.14-2.05 (m, 1H), 1.96-1.88 (m, 1H).
LRMS (ESI) calcd for (C17H16N6O2S + H+) 369.1, found 369.1.
실시예 33. (R)-3-(3-( 에틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노) 피롤리딘 -1-일)-3-옥소프로판니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000042
50 mL 둥근바닥 플라스크에 2.00 g의 (R)-1-벤질피롤리딘-3-아민을 넣고, 14.7 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 1.07 mL의 아세트산무수물 (acetic anhydride)을 넣고 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 정제 과정없이 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 2.12 g의 (R)-N-(1-벤질피롤리딘-3-일)아세트아미드를 85.0%의 수율로 얻었다.
100 mL 둥근바닥 플라스크에 2.11 g의 (R)-N-(1-벤질피롤리딘-3-일)아세트아미드를 넣고, 47.6 mL의 테트라하이드로퓨란 (tetrahydrofuran)을 넣었다. 이후 1.61 g의 리튬 알루미늄 하이드라이드 (LiAlH4)를 넣었다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 환류시켰다. 0oC에서 냉각시켰다. 냉각시키면서 2.00 mL의 증류수 (deionized water)를 천천히 넣었다. 5분 동안 교반 후, 1.50 mL의 15% 수산화 나트륨 (NaOH) 수용액을 넣었다. 다시 5분 동안 교반 후, 3.80 mL의 증류수 (deionized water)를 넣어서 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 그 결과 1.85 g의 (R)-1-벤질-N-에틸피롤리딘-3-아민을 94.0%의 수율로 얻었다.
100 mL 둥근바닥 플라스크에 1.85 g의 (R)-1-벤질-N-에틸피롤리딘-3-아민을 넣고, 46.0 mL의 증류수 (deionized water)를 넣었다. 이후 1.46 g의 6-클로로-7-데아자퓨린 (6-chloro-7-deazapurine)을 넣었다. 반응혼합물에 1.56 g의 탄산 칼륨 (K2CO3)을 넣었다. 이 혼합물을 18시간 동안 환류시켰다. 18시간 이후 상온에서 냉각시켰다. 반응혼합물을 10.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 세 번 추출했다. 모아진 유기층을 감압농축했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 그 결과 296 mg의 (R)-N-(1-벤질피롤리딘-3-일)-N-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 10.0%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 296 mg의 (R)-N-(1-벤질피롤리딘-3-일)-N-에틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 9.20 mL의 메탄올 (methanol)로 용해시켰다. 이후 330 mg의 10w/w% 팔라듐/탄소 (Pd/C)를 넣고, 수소 풍선을 반응 플라스크 위에 장치하였다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 격렬히 교반했다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 필터한 용액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 189 mg의 (R)-N-에틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 88.8%의 수율로 얻었다.
5 mL 둥근바닥 플라스크에 117 mg의 (R)-N-에틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 2.10 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0610 mL의 클로로아세틸 클로라이드 (chloroacetyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.223 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 96.0 mg의 (R)-2-클로로-1-(3-(에틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)에탄-1-온을 61.0%의 수율로 얻었다.
5 mL 둥근바닥 플라스크에 96.0 mg의 (R)-2-클로로-1-(3-(에틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)에탄-1-온을 넣고, 2.00 mL의 N,N-디메틸폼아미드 (N,N-dimethylformamide)로 녹였다. 이 용액에 40.4 mg의 청산 칼륨 (potassium cyanide)을 넣었다. 그리고 반응혼합물을 1시간 동안 30~40℃에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물에 10.0 mL의 증류수 (deionized water)와 10.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)을 넣고 5분간 교반했다. 유기층을 분리하여 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 50.9 mg의 (R)-3-(3-(에틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴을 55.0%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.47 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.15 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 5.55-5.53 (m, 1H), 4.05-3.90 (m, 2H), 3.83-3.63 (m, 2H), 3.55-3.44 (m, 3H), 2.42-2.27 (m, 3H), 1.42 (q, J = 6.8 Hz, 3H).
LRMS (ESI) calcd for (C15H18N6O + H+) 299.2, found 299.1.
실시예 34. (R)-3-((3-( 에틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노) 피롤리딘 -1-일)설폰일)벤조니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000043
5 mL 둥근바닥 플라스크에 67.0 mg의 (R)-N-에틸-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.45 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 60.5 mg의 3-시아노벤젠설포닐 클로라이드 (3-cyanobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0500 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 84.3 mg의 (R)-3-((3-(에틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴을 73.3%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.34 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.12 (d, J = 10.0 Hz, 2H), 7.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.45 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.32-5.24 (m, 1H), 3.81-3.63 (m, 4H), 3.38-3.27 (m, 2H), 3.27-2.19 (m, 3H), 1.37 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
LRMS (ESI) calcd for (C19H20N6O2S + H+) 397.1, found 397.1.
실시예 35. (R)-3-(3-(( 시클로프로필메틸 )(7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000044
100 mL 둥근바닥 플라스크에 2.00 g의 (R)-1-벤질피롤리딘-3-아민을 넣고, 54.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.890 mL의 싸이클로프로판카보닐 클로라이드 (cyclopropanecarbonyl chloride)를 넣고 1시간 동안 상온에서 교반했다. 정제 과정없이 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 3.02 g의 (R)-N-(1-벤질피롤리딘-3-일)싸이클로프로판카르복스아미드를 정량적인(quantitative) 수율로 얻었다.
100 mL 둥근바닥 플라스크에 2.77 g의 (R)-N-(1-벤질피롤리딘-3-일)싸이클로프로판카르복스아미드를 넣고, 57.0 mL의 테트라하이드로퓨란 (tetrahydrofuran)을 넣었다. 이후 1.90 g의 리튬 알루미늄 하이드라이드 (LiAlH4)를 넣었다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 환류시켰다. 0oC에서 냉각시켰다. 냉각시키면서 10.0 mL의 증류수 (deionized water)를 천천히 넣었다. 5분 동안 교반 후, 2.00 mL의 15% 수산화 나트륨 (NaOH) 수용액을 넣었다. 다시 5분 동안 교반 후, 10.0 mL의 증류수 (deionized water)를 넣어서 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 그 결과 1.68 g의 (R)-1-벤질-N-(싸이클로프로필메틸)피롤리딘-3-아민을 64.0%의 수율로 얻었다.
100 mL 둥근바닥 플라스크에 1.68 g의 (R)-1-벤질-N-(싸이클로프로필메틸)피롤리딘-3-아민을 넣고, 40.0 mL의 증류수 (deionized water)를 넣었다. 이후 1.17 g의 6-클로로-7-데아자퓨린 (6-chloro-7-deazapurine)을 넣었다. 반응혼합물에 1.26 g의 탄산 칼륨 (K2CO3)을 넣었다. 이 혼합물을 18시간 동안 환류시켰다. 18시간 이후 상온에서 냉각시켰다. 반응혼합물을 40.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 세 번 추출했다. 모아진 유기층을 감압농축했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 그 결과 313 mg의 (R)-N-(1-벤질피롤리딘-3-일)-N-(싸이클로프로필메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 12.4%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 310 mg의 (R)-N-(1-벤질피롤리딘-3-일)-N-(싸이클로프로필메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 8.90 mL의 메탄올 (methanol)로 용해시켰다. 이후 310 mg의 10w/w% 팔라듐/탄소 (Pd/C)를 넣고, 수소 풍선을 반응 플라스크 위에 장치하였다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 격렬히 교반했다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 필터한 용액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 162 mg의 (R)-N-(싸이클로프로필메틸)-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 70.7%의 수율로 얻었다.
5 mL 둥근바닥 플라스크에 100 mg의 (R)-N-(싸이클로프로필메틸)-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.60 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0470 mL의 클로로아세틸 클로라이드 (chloroacetyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0170 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 72.6 mg의 (R)-2-클로로-1-(3-((싸이클로프로필메틸)(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)에탄-1-온을 56.0%의 수율로 얻었다.
5 mL 둥근바닥 플라스크에 72.0 mg의 (R)-2-클로로-1-(3-((싸이클로프로필메틸)(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)에탄-1-온을 넣고, 1.50 mL의 N,N-디메틸폼아미드 (N,N-dimethylformamide)로 녹였다. 이 용액에 28.7 mg의 청산 칼륨 (potassium cyanide)을 넣었다. 그리고 반응혼합물을 1시간 동안 30~40℃에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물에 10.0 mL의 증류수 (deionized water)와 10.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)을 넣고 5분간 교반했다. 유기층을 분리하여 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 38.4 mg의 (R)-3-(3-((시클로프로필메틸)(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴을 54.0%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.15 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.15 (t, J = 3.6 Hz, 1H), 6.71 (dd, J = 5.6, 3.6 Hz, 1H), 5.37-5.30 (m, 1H), 4.05-3.94 (m, 2H), 3.69-3.53 (m, 4H), 3.48 (d, J = 14.4 Hz, 2H), 2.50-2.30 (m, 2H), 1.23-1.16 (m, 1H), 0.73 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 0.30 (t, J = 4.8 Hz, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C17H20N6O + H+) 325.2, found 325.2.
실시예 36. (R)-3-((3-(( 시클로프로필메틸 )(7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000045
5 mL 둥근바닥 플라스크에 62.0 mg의 (R)-N-(싸이클로프로필메틸)-N-(피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.20 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 50.4 mg의 3-시아노벤젠설포닐 클로라이드 (3-cyanobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0420 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 62.2 mg의 (R)-3-((3-((시클로프로필메틸)(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴을 61.0%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.08 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.12 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.75 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.10-5.06 (m, 1H), 3.72-3.61 (m, 4H), 3.52-3.48 (m, 1H), 3.34-3.28 (m, 1H), 2.31-2.25 (m, 2H), 1.17-1.10 (m, 1H), 0.71-0.67 (m, 2H), 0.38-0.35 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C21H22N6O2S + H+) 423.2, found 423.1.
실시예 37. 3-(4-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000046
100 mL 둥근바닥 플라스크에 2.00 g의 4-아미노-1-벤질피페리딘을 넣고, 20.0 mL의 증류수 (deionized water)와 20.0 mL의 포화된 탄산수소 나트륨 (NaHCO3)을 넣었다. 그리고 2.41 g의 디-터트-부틸 디카바메이트 (Boc2O)를 넣었다. 반응혼합물을 4시간 동안 격렬히 교반시켰다. 반응혼합물을 감압농축했다. 그리고 수용액층을 20.0 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)로 추출하였다. 유기층을 15.0 mL의 증류수 (deionized water)와 5.00 mL의 포화 소금물 (brine)로 세척했다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 그 결과 3.04 g의 터트-부틸 (1-벤질피페리딘-4-일)카바메이트를 99.7%의 수율로 얻었다.
100 mL 둥근바닥 플라스크에 3.04 g의 터트-부틸 (1-벤질피페리딘-4-일)카바메이트를 넣고, 45.0 mL의 테트라하이드로퓨란 (tetrahydrofuran)을 넣었다. 이후 2.50 g의 리튬 알루미늄 하이드라이드 (LiAlH4)를 넣었다. 반응혼합물을 4시간 동안 환류시켰다. 4시간 뒤 상온에서 냉각시켰다. 냉각시키면서 4.50 mL의 증류수 (deionized water)를 천천히 넣었다. 5분 동안 교반 후, 4.50 mL의 15% 수산화 나트륨 (NaOH) 수용액을 넣었다. 다시 5분 동안 교반 후, 13.5 mL의 증류수 (deionized water)를 넣어서 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 그 결과 2.22 g의 1-벤질-N-메틸피페리딘-4-아민을 정량적인(quantitative) 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 1.00 g의 1-벤질-N-메틸피페리딘-4-아민을 넣고, 20.0 mL의 증류수 (deionized water)를 넣었다. 이후 790 mg의 6-클로로-7-데아자퓨린 (6-chloro-7-deazapurine)을 넣었다. 반응혼합물에 1.35 g의 탄산 칼륨 (K2CO3)을 넣었다. 이 혼합물을 24시간 동안 환류시켰다. 24시간 이후 상온에서 냉각시켰다. 반응혼합물을 10.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 세 번 추출했다. 모아진 유기층을 감압농축했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 그 결과 607 mg의 N-(1-벤질피페리딘-4-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 38.7%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 350 mg의 N-(1-벤질피페리딘-4-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 7.00 mL의 메탄올 (methanol)과 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)로 용해시켰다. 이후 350 mg의 10w/w% 팔라듐/탄소 (Pd/C)를 넣고, 수소 풍선을 반응 플라스크 위에 장치하였다. 반응혼합물을 24시간 동안 격렬히 교반했다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 필터한 용액을 감압농축했다. 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 220 mg의 N-메틸-N-(피페리딘-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 87.7%의 수율로 얻었다.
5 mL 둥근바닥 플라스크에 150 mg의 N-메틸-N-(피페리딘-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 n-부탄올 (n-butanol)로 녹였다. 이 용액에 0.690 mL의 에틸 시아노아세테이트 (ethyl cyanoacetate)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0485 mL의 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔 (DBU)으로 처리했다. 이후 24시간 동안 80oC로 가열했다. 반응을 끝낸 후 반응액을 감압증류하여 용매를 제거했다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 6.20 mg의 3-(4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴을 3.20%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ12.65 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 6.90 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.75 (s, 1H), 4.52 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 4.08 (s, 2H), 3.81 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 3.27-3.20 (m, 3H), 2.82-2.75 (m, 1H), 2.03-1.91 (m, 1H), 1.77 (s, 2H), 1.23-1.18 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C15H18N6O + H+) 299.2, found 299.1.
실시예 38. N- 메틸 -N-(1-( 페닐설폰일 )피페리딘-4-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민
Figure PCTKR2016009205-appb-I000047
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 N-메틸-N-(피페리딘-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 2.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0400 mL의 벤젠설포닐 클로라이드 (benzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0780 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 50.0 mg의 N-메틸-N-(1-(페닐설폰일)피페리딘-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 45.5%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.97 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.81 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.66 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.59 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.03 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.91-4.85 (m, 1H), 3.99 (d, J = 12 Hz, 2H), 3.26 (s, 3H), 2.50-5.45 (m, 2H), 2.04-1.82 (m, 4H).
LRMS (ESI) calcd for (C18H21N5O2S + H+) 372.2, found 372.1.
실시예 39. 3-((4-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000048
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 N-메틸-N-(피페리딘-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 61.0 mg의 3-시아노벤젠설포닐 클로라이드 (3-cyanobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0790 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 23.1 mg의 3-((4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴을 19.6%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.22 (s, 1H), 8.10 (t, J = 1.2 Hz, 1H), 8.05-8.02 (m, 1H), 7.95-7.92 (m, 1H), 7.76 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.00-4.97 (m, 1H), 4.05-4.02 (m, 3H), 3.34 (s, 2H), 2.58-2.50 (m, 3H), 2.08-1.97 (m, 2H), 1.93 (d, J = 12.0 Hz, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C19H20N6O2S + H+) 397.1, found 397.1.
실시예 40. (R)-3-(3-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000049
100 mL 둥근바닥 플라스크에 500 mg의 (R)-3-아미노-1-벤질피페리딘을 넣고, 5.00 mL의 증류수 (deionized water)와 5.00 mL의 포화된 탄산수소 나트륨 (NaHCO3)을 넣었다. 그리고 602 mg의 디-터트-부틸 디카바메이트 (Boc2O)를 넣었다. 반응혼합물을 4시간 동안 격렬히 교반시켰다. 반응혼합물을 감압농축했다. 그리고 수용액층을 20.0 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)로 추출하였다. 유기층을 10.0 mL의 증류수 (deionized water)와 15.0 mL의 포화 소금물 (brine)로 세척했다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 그 결과 730 mg의 터트-부틸 (R)-(1-벤질피페리딘-3-일)카바메이트를 95.7%의 수율로 얻었다.
100 mL 둥근바닥 플라스크에 730 mg의 터트-부틸 (R)-(1-벤질피페리딘-3-일)카바메이트를 넣고, 12.0 mL의 테트라하이드로퓨란 (tetrahydrofuran)을 넣었다. 이후 601 mg의 리튬 알루미늄 하이드라이드 (LiAlH4)를 넣었다. 반응혼합물을 4시간 동안 환류시켰다. 4시간 뒤 상온에서 냉각시켰다. 냉각시키면서 1.5 mL의 증류수 (deionized water)를 천천히 넣었다. 5분 동안 교반 후, 1.5 mL의 15% 수산화 나트륨 (NaOH) 수용액을 넣었다. 다시 5분 동안 교반 후, 2.0 mL의 증류수 (deionized water)를 넣어서 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 그 결과 580 mg의 (R)-1-벤질-N-메틸피페리딘-3-아민을 정량적인 (quantitative) 수율로 얻었다.
100 mL 둥근바닥 플라스크에 580 mg의 (R)-1-벤질-N-메틸피페리딘-3-아민을 넣고, 12.0 mL의 증류수 (deionized water)를 넣었다. 이후 458 mg의 6-클로로-7-데아자퓨린 (6-chloro-7-deazapurine)을 넣었다. 반응혼합물에 785 mg의 탄산 칼륨 (K2CO3)을 넣었다. 이 혼합물을 24시간 동안 환류시켰다. 24시간 이후 상온에서 냉각시켰다. 반응혼합물을 10.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 세 번 추출했다. 모아진 유기층을 감압농축했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 그 결과 440 mg의 (R)-N-(1-벤질피페리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 48.2%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 438 mg의 (R)-N-(1-벤질피페리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 5.00 mL의 메탄올 (methanol)로 용해시켰다. 이후 400 mg의 10w/w% 팔라듐/탄소 (Pd/C)를 넣고, 수소 풍선을 반응 플라스크 위에 장치하였다. 반응혼합물을 24시간 동안 격렬히 교반했다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 필터한 용액을 감압농축했다. 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 310 mg의 (R)-N-메틸-N-(피페리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 98.4%의 수율로 얻었다.
5 mL 둥근바닥 플라스크에 90.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피페리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.70 mL의 n-부탄올 (n-butanol)로 녹였다. 이 용액에 0.414 mL의 에틸 시아노아세테이트 (ethyl cyanoacetate)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0291 mL의 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔 (DBU)으로 처리했다. 이후 24시간 동안 80oC로 가열했다. 반응을 끝낸 후 반응액을 감압증류하여 용매를 제거했다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 42.0 mg의 (R)-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴을 36.2%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.41 (d, J = 84 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.13-7.12 (m, 1H), 6.62-6.59 (m, 1H), 4.79-4.72 (m, 1H), 4.67 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.91-3.55 (m, 3H), 3.38 (s, 2H), 3.27 (s, 1H), 3.12 (q, J = 11.2, 13.2 Hz, 1H), 2.65-2.58 (m, 1H), 2.11-2.08 (m, 1H), 2.02-1.69 (m, 3H).
LRMS (ESI) calcd for (C15H18N6O + H+) 299.2, found 299.1.
실시예 41. (R)-3-((3-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000050
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 (R)-N-메틸-N-(피페리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 64.0 mg의 3-시아노벤젠설포닐 클로라이드 (3-cyanobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0790 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 70.0 mg의 (R)-3-((3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴을 59.3%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.81 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.15 (t, J = 1.2 Hz, 1H), 8.10-8.08 (m, 1H),7.93-7.91 (m, 1H), 7.74 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.11 (q, J = 2.4, 3.6 Hz, 1H), 6.60 (q, J = 1.6, 3.6 Hz, 1H), 4.95-4.90 (m, 1H), 4.06 (dd, J = 4.4, 11.6 Hz, 1H), 3.94 (d, J = 12 Hz, 1H), 3.24 (s, 3H), 2.52 (t, J = 11.2 Hz, 1H), 2.46-2.40 (m, 1H), 2.00-1.94 (m, 1H), 1.93-1.91 (m, 1H), 1.84-1.73 (m, 1H), 1.71-1.67 (m, 1H).
LRMS (ESI) calcd for (C19H20N6O2S + H+) 397.1, found 397.1.
실시예 42. 3-((( 3R,4R )-4- 메틸 -3-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000051
25 mL 둥근바닥 플라스크에 500 mg의 (3R,4R)-1-벤질-N,4-디메틸피페리딘-3-아민 디히드로클로라이드를 넣고, 5.00 mL의 증류수 (deionized water)를 넣었다. 이후 277 mg의 6-클로로-7-데아자퓨린 (6-chloro-7-deazapurine)을 넣었다. 반응혼합물에 1.08 g의 탄산 칼륨 (K2CO3)을 넣었다. 이 혼합물을 24시간 동안 환류시켰다. 24시간 이후 상온에서 냉각시켰다. 반응혼합물을 10.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 세 번 추출했다. 모아진 유기층을 감압농축했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 그 결과 282 mg의 N-((3R,4R)-1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 48.9%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 282 mg의 N-((3R,4R)-1-벤질-4-메틸피페리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 3.00 mL의 메탄올 (methanol)로 용해시켰다. 이후 280 mg의 10w/w% 팔라듐/탄소 (Pd/C)를 넣고, 수소 풍선을 반응 플라스크 위에 장치하였다. 반응혼합물을 24시간 동안 격렬히 교반했다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 필터한 용액을 감압농축했다. 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 200 mg의 N-메틸-N-((3R,4R)-4-메틸피페리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 97.1%의 수율로 얻었다.
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 N-메틸-N-((3R,4R)-4-메틸피페리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 57.0 mg의 3-시아노벤젠설포닐 클로라이드 (3-cyanobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0750 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 85.9 mg의 3-(((3R,4R)-4-메틸-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴을 73.4%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.40 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.09-8.08 (m, 1H), 8.03-8.01 (m, 1H), 7.95-7.92 (m, 1H), 7.64 (t, J = 3.6 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.49 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 3.79 (dd, J = 4.4, 12.4 Hz, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.10 (dd, J = 4.4, 12.4 Hz, 1H), 2.83-2.77 (m, 1H), 2.20-2.11 (m, 1H), 1.92-1.86 (m, 3H), 0.98 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
LRMS (ESI) calcd for (C20H22N6O2S + H+) 411.2, found 411.1.
실시예 43. (R)-3-(3,3-디메틸-4-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000052
100 mL 둥근바닥 플라스크에 6 g의 에틸 아세토아세테이트 (ethyl acetoacetate)를 넣고, 60 mL의 톨루엔 (toluene)으로 녹였다. 이 용액에 4.78 mL의 벤질 알코올 (benzyl alcohol)을 넣었다. 그리고 반응혼합물을 1.21 g의 트리페닐포스핀 (triphenylphosphine)으로 처리했다. 이후 12시간 동안 환류시켰다. 환류를 끝낸 후 반응액을 감압증류하여 용매를 제거했다. 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (EtOAc:n-Hexane=1:20). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 6.69 g의 벤질 3-옥소부타노에이트를 75.1%의 수율로 얻었다.
250 mL 둥근바닥 플라스크에 6.69 g의 3-옥소부타노에이트를 넣고, 67.0 mL의 테트라하이드로퓨란 (tetrahydrofuran)으로 용해시켰다. 이후 3.48 g의 소듐 하이드라이드 (sodium hydride, 60wt%)를 0℃에서 넣었다. 반응혼합물을 상온에서 1시간동안 교반시켰다. 1시간 뒤 6.48 mL의 아이오도메탄 (iodomethane)을 0℃에서 넣었다. 반응혼합물을 상온에서 12시간 동안 교반시켰다. 교반을 끝낸 후 반응액을 감압증류하여 용매를 제거했다. 이후 100 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 100 mL의 포화 소금물 (brine)과 50 mL의 염화암모늄 (NH4Cl)을 넣고 추출하였다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (EtOAc:n-Hexane=1:8). 그 결과 6.91 g의 벤질 2,2-디메틸-3-옥소부타노에이트를 90.1%의 수율로 얻었다.
250 mL 둥근바닥 플라스크에 9.69 g의 2,2-디메틸-3-옥소부타노에이트를 넣고, 195 mL의 벤젠 (benzene)을 넣었다. 이후 4.90 mL의 에틸렌 글라이콜 (ethylene glycol)을 넣는다. 반응혼합물에 0.41 g의 p-톨루엔술폰산 수화물 (p-toluenesulfonic acid monohydrate)을 넣었다. 이 혼합물을 24시간 동안 딘-스탁 트랩 (Dean-Stark trap)을 사용하여 120℃에서 환류시켰다. 환류를 끝낸 후 반응액을 감압증류하여 용매를 제거했다. 이후 100 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 200 mL의 포화 소금물 (brine)과 100 mL의 탄산수소 나트륨 (NaHCO3) 포화수용액을 넣고 추출하였다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (EtOAc:n-Hexane=1:10). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 9.47 g의 벤질 2-메틸-2-(2-메틸-1,3-디옥솔란-2-일)프로파노에이트를 81.6%의 수율로 얻었다.
100 mL 둥근바닥 플라스크에 9.47 g의 벤질 2-메틸-2-(2-메틸-1,3-디옥솔란-2-일)프로파노에이트를 넣고 95.0 mL의 메탄올 (methanol)로 녹였다. 이 용액에 9.47 g의 10w/w% 팔라듐/탄소 (Pd/C)를 넣고, 수소 풍선을 반응 플라스크 위에 장치하였다. 반응혼합물을 24시간 동안 격렬히 교반했다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 필터한 용액을 감압농축했다. 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 5.94 g의 2-메틸-2-(2-메틸-1,3-디옥솔란-2-일)프로판산을 95.2%의 수율로 얻었다.
100 mL 둥근바닥 플라스크에 5.94 g의 2-메틸-2-(2-메틸-1,3-디옥솔란-2-일)프로산을 넣고, 53 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)을 넣었다. 이후 9.51 mL의 트리에틸아민 (triethylamine)을 -20℃에서 넣었다. 반응혼합물에 3.59 mL의 에틸 클로로포메이트 (ethyl chloroformate)를 넣고 -20℃에서 40분 동안 교반했다. 이후 -20℃에서 4.78 mL의 (R)-(+)-1-페닐에틸아민 ((R)-(+)-1-phenylethylamine)을 천천히 적가했다. 반응혼합물을 상온에서 12시간 동안 교반했다. 이후 50 mL의 물을 넣고 추출하였다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (EtOAc:n-Hexane=1:8). 그 결과 1.89 g의 (R)-2-메틸-2-(2-메틸-1,3-디옥솔란-2-일)-N-(1-페닐에틸)프로판아미드를 20.0%의 수율로 얻었다.
100 mL 둥근바닥 플라스크에 1.89 g의 (R)-2-메틸-2-(2-메틸-1,3-디옥솔란-2-일)-N-(1-페닐에틸)프로판아미드를 넣고, 18.0 mL의 디에틸에테르(diethyl ether)와 8.00 mL의 1,4-디옥산 (1,4-dioxane)으로 용해시켰다. 이후 30.0 mL의 1,4-디옥산 (1,4-dioxane)에 0.590 mL의 브롬 (bromine)을 용해시킨 혼합물을 0℃에서 천천히 적가한다. 반응혼합물을 12시간 동안 상온에서 교반하였다. 반응혼합물을 감압농축하여 용매를 제거했다. 이후 18.0 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 18.0 mL의 포화 소금물 (brine)과 18.0 mL의 티오황산 나트륨 (Na2S2O3) 포화용액을 넣고 추출하였다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (EtOAc:n-Hexane=1:10). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 2.29 g의 (R)-2-(2-(브로모메틸)-1,3-디옥솔란-2-일)-2-메틸-N-(1-페닐에틸)프로판아미드를 94.2 %의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 2.29 g의 (R)-2-(2-(브로모메틸)-1,3-디옥솔란-2-일)-2-메틸-N-(1-페닐에틸)프로판아미드를 넣고 22.0 mL의 N,N-디메틸폼아미드 (N,N-dimethylformamide)로 용해시켰다. 이후 0.440 g의 소듐 하이드라이드 (sodium hydride, 60wt%)를 0℃에서 넣었다. 반응혼합물을 0℃에서 3시간 동안 교반했다. 반응혼합물에 200 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 500 mL의 포화 소금물 (brine)을 넣고 추출하였다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (EtOAc:CH2Cl2=1:100). 그 결과 1.07 g의 (R)-9,9-디메틸-7-(1-페닐에틸)-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-8-온을 60.5%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥플라스크에 1.07 g의 (R)-9,9-디메틸-7-(1-페닐에틸)-1,4-디옥사-7-아자스피로[4.4]노난-8-온을 넣고, 11.0 mL의 아세톤 (acetone)을 넣었다. 이후 4.67 mL의 1N 염산 용액 (1N HCl)을 상온에서 넣었다. 반응혼합물을 60℃에서 12시간 동안 환류시켰다. 반응혼합물을 감압농축했다. 그리고 반응혼합물에 50.0 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 50.0 mL의 포화 소금물 (brine)을 넣고 추출하였다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압농축했다. 그 결과 0.840 g의 (R)-3,3-디메틸-1-(1-페닐에틸)피롤리딘-2,4-디온을 93.2%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 0.840 g의 (R)-3,3-디메틸-1-(1-페닐에틸)피롤리딘-2,4-디온을 넣고, 9.00 mL의 에탄올 (ethanol)을 넣었다. 이후 395 mg의 하이드록시아민 하이드로클로라이드 (hydroxylamine hydrochloride), 0.782 mL의 트리에틸아민 (triethylamine)을 넣었다. 반응혼합물을 상온에서 5시간 동안 교반했다. 반응혼합물을 감압농축했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (EtOAc:CH2Cl2=1:3). 그 결과 730 mg의 (R)-4-(히드록시이미노)-3,3-디메틸-1-(1-페닐에틸)피롤리딘-2-온을 94.1%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 730 mg의 (R)-4-(히드록시이미노)-3,3-디메틸-1-(1-페닐에틸)피롤리딘-2-온을 넣고, 36.5 mL의 메탄올 (methanol)을 넣었다. 이후 1.56 mL의 라니-니켈 (Raney®-nickel)을 넣고, 수소 풍선을 반응 플라스크 위에 장치하였다. 반응혼합물을 12시간 동안 격렬히 교반했다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 필터한 용액을 감압농축했다. 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 그 결과 264 mg의 (R)-4-아미노-3,3-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-2-온을 38.4 %의 수율로 얻었고, 300 mg의 (S)-4-아미노-3,3-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-2-온을 43.7%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 264 mg의 (R)-4-아미노-3,3-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-2-온을 넣고, 13.0 mL의 테트라하이드로퓨란 (tetrahydrofuran)을 넣었다. 이후 189 mg의 리튬 알루미늄 하이드라이드 (LiAlH4)를 0℃에서 천천히 적가하였다. 반응혼합물을 12시간 동안 환류시켰다. 12시간 후 0℃에서 냉각시켰다. 냉각시키면서 1.15 mL의 증류수 (deionized water)를 천천히 넣었다. 5분 동안 교반 후 1.15 mL의 15% 수산화나트륨 (NaOH) 수용액을 넣어 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 그리고 반응혼합물에 10.0 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 10.0 mL의 포화 소금물 (brine)을 넣고 추출하였다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압농축했다. 그 결과 240 mg의 (R)-4,4-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-아민을 96.8%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 240 mg의 (R)-4,4-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-아민을 넣고, 2.40 mL의 테트라하이드로퓨란 (tetrahydrofuran)과 2.40 mL의 탄산수소 나트륨 (NaHCO3) 포화 수용액을 넣었다. 이후 252 mg의 디-터트-부틸 디카바메이드 (Boc2O)를 넣었다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 격렬히 교반시켰다. 반응혼합물을 감압농축했다. 그리고 반응혼합물에 5.00 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 5.00 mL의 포화 소금물 (brine)을 넣고 추출하였다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압농축했다. 그 결과 335 mg의 터트-부틸 ((R)-4,4-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-일)카바메이트를 95.7%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 335 mg의 터트-부틸 ((R)-4,4-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-일)카바메이트를 넣고 5.03 mL의 테트라하이드로퓨란 (tetrahydrofuran)을 넣었다. 이후 252 mg의 리튬 알루미늄 하이드라이드 (LiAlH4)를 0℃에서 천천히 적가하였다. 반응혼합물을 12시간 동안 환류시켰다. 12시간후 0℃에서 냉각시켰다. 냉각시키면서 1.00 mL의 증류수 (deionized water)를 천천히 넣었다. 5분 동안 교반후, 1.00 mL의 15% 수산화나트륨 (NaOH) 수용액을 넣어 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 여과된 용액을 감압농축했다. 그 결과 238 mg의 (R)-N,4,4-트리메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-아민을 97.9%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 238 mg의 (R)-N,4,4-트리메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-아민을 넣고, 4.80 mL의 증류수 (deionized water)를 넣었다. 이후 165 mg의 6-클로로-7-데아자퓨린 (6-chloro-7-deazapurine)을 넣었다. 반응혼합물에 284 mg의 탄산 칼륨 (K2CO3)을 넣었다. 이 혼합물을 24시간 동안 환류시켰다. 24시간 이후 상온에서 냉각시켰다. 반응혼합물을 10.0 mL의 디클로로메테인 (CH2Cl2)으로 세번 추출했다. 모아진 유기층을 감압농축했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 그 결과 106 mg의 N-((R)-4,4-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 30.7%의 수율로 얻었다.
10 mL 둥근바닥 플라스크에 106 mg의 N-((R)-4,4-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.06 mL의 메탄올 (methanol)로 용해시켰다. 이후 106 mg의 10w/w% 팔라듐/탄소 (Pd/C)를 넣고, 수소 풍선을 반응 플라스크 위에 장치하였다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 격렬히 교반했다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 필터한 용액을 감압농축했다. 그 결과 58.2 mg의 (R)-N-(4,4-디메틸피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 79.1%의 수율로 얻었다.
10 mL 둥근바닥 플라스크에 57.0 mg의 (R)-N-(4,4-디메틸피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.14 mL의 n-부탄올 (n-butanol)로 녹였다. 이 용액에 0.247 mL의 에틸 시아노아세테이트 (ethyl cyanoacetate)를 넣었다. 그리고 반응혼합물에 0.0174 mL의 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔 (DBU)으로 처리했다. 이후 24시간 동안 80oC로 가열했다. 반응을 끝낸 후 반응액을 감압증류하여 용매를 제거했다. 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 41.4 mg의 (R)-3-(3,3-디메틸-4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴을 57.1%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.58 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.07 (q, J = 3.6, 5.6 Hz, 1H), 6.61 (q, J = 2.0, 3.6 Hz, 1H), 5.76-5.63 (m, 1H), 4.08-3.97 (m, 1H), 3.87-3.76 (m, 1H), 3.57-3.52 (m, 1H), 3.47 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.41-3.35 (m, 1H), 3.34 (d, J = 11.6 Hz, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.04 (s, 3H).
LRMS (ESI) calcd for (C16H20N6O + H+) 313.1, found 313.2.
실시예 44. (S)-3-(3,3-디메틸-4-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000053
50 mL 둥근바닥 플라스크에 300 mg의 (S)-4-아미노-3,3-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-2-온 (실시예 43 합성시 얻어진 중간체)을 넣고, 15.0 mL의 테트라하이드로퓨란 (tetrahydrofuran)을 넣었다. 이후 215 mg의 리튬 알루미늄 하이드라이드 (LiAlH4)를 0℃에서 천천히 적가하였다. 반응혼합물을 12시간 동안 환류시켰다. 12시간후 0℃에서 냉각시켰다. 냉각시키면서 1.50 mL의 증류수 (deionized water)를 천천히 넣었다. 5분 동안 교반후, 1.50 mL의 15% 수산화나트륨 (NaOH) 수용액을 넣어 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 그리고 반응혼합물에 10.0 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 10.0 mL의 포화 소금물 (brine)을 넣고 추출하였다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압농축했다. 그 결과 254 mg의 (S)-4,4-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-아민을 90.4%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 250 mg의 (S)-4,4-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-아민을 넣고, 2.50 mL의 테트라하이드로퓨란 (tetrahydrofuran)과 2.50 mL의 탄산수소 나트륨 (NaHCO3) 포화수용액을 넣었다. 이후 262 mg의 디-터트-부틸 디카바메이트 (Boc2O)를 넣었다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 격렬히 교반시켰다. 반응혼합물을 감압농축했다. 그리고 반응혼합물에 3.00 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 6.00 mL의 포화 소금물 (brine)을 넣고 추출하였다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압농축했다. 그 결과 354 mg의 터트-부틸 ((S)-4,4-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-일)카바메이트를 96.7%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 354 mg의 터트-부틸 ((S)-4,4-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-일)카바메이트를 넣고, 5.30 mL의 테트라하이드로퓨란 (tetrahydrofuran)를 넣었다. 이후 265 mg의 리튬 알루미늄 하이드라이드 (LiAlH4)를 0℃에서 천천히 적가하였다. 반응혼합물을 12시간 동안 환류시켰다. 12시간후 0℃에서 냉각시켰다. 냉각시키면서 1.00 mL의 증류수 (deionized water)를 천천히 넣었다. 5분 동안 교반후 1.00 mL의 15% 수산화나트륨 (NaOH) 수용액을 넣어 반응을 종료시켰다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 여과된 용액을 감압농축했다. 그 결과 247 mg의 (S)-N,4,4-트리메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-아민을 96.1%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 247 mg의 (S)-N,4,4-트리메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-아민을 넣고, 4.94 mL의 증류수 (deionized water)를 넣었다. 이후 171 mg의 6-클로로-7-데아자퓨린 (6-chloro-7-deazapurine)을 넣었다. 반응혼합물에 293 mg의 탄산 칼륨 (K2CO3)을 넣었다. 이 혼합물을 24시간 동안 환류시켰다. 24시간 이후 상온에서 냉각시켰다. 반응혼합물을 5 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 세번 추출했다. 모아진 유기층을 감압 농축했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 그 결과 97.0 mg의 N-((S)-4,4-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 26.2%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 96.8 mg의 N-((S)-4,4-디메틸-1-((R)-1-페닐에틸)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.00 mL의 메탄올 (methanol)로 용해시켰다. 이후 96.8 mg의 10w/w% 팔라듐/탄소 (Pd/C)를 넣고, 수소 풍선을 반응 플라스크 위에 장치하였다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 격렬히 교반했다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 필터한 용액을 감압농축했다. 그 결과 63.0 mg의 (S)-N-(4,4-디메틸피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 92.6%의 수율로 얻었다.
10 mL 둥근바닥 플라스크에 63.0 mg의 (S)-N-(4,4-디메틸피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민을 넣고, 1.26 mL의 n-부탄올 (n-butanol)로 녹였다. 이 용액에 0.237 mL의 에틸 시아노아세테이트 (ethyl cyanoacetate)를 넣었다. 그리고 반응혼합물에 0.0192 mL의 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔 (DBU)으로 처리했다. 이후 24시간 동안 80℃로 가열했다. 반응을 끝낸 후 반응액을 감압증류하여 용매를 제거했다. 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압증류하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 26.3 mg의 (S)-3-(3,3-디메틸-4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴을 32.8%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.45 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.07 (q, J = 3.2, 5.6 Hz, 1H), 6.61 (q, J = 2.0, 3.6 Hz, 1H), 5.76-5.63 (m, 1H), 4.08-3.97 (m, 1H), 3.89-3.75 (m, 1H), 3.59-3.52 (m, 1H), 3.47 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 3.43-3.35 (m, 1H), 3.34 (d, J = 11.6 Hz, 3H), 1.28 (s, 3H), 1.04 (s, 3H).
LRMS (ESI) calcd for (C16H20N6O + H+) 313.1, found 313.1.
실시예 45. 3-(4-((7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-일) 옥시 )피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000054
100 mL 둥근바닥 플라스크에 2.00 g의 4-하이드록시피페리딘 (4-hydroxypiperidine)을 넣고, 20.0 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)과 20.0 mL의 포화된 탄산수소 나트륨 (NaHCO3)을 넣었다. 그리고 4.32 g의 디-터트-부틸 디카바메이트 (Boc2O)를 넣었다. 반응혼합물을 15시간 동안 격렬히 교반시켰다. 반응혼합물을 감압농축했다. 그리고 수용액층을 20.0 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)로 추출하였다. 유기층을 10.0 mL의 증류수 (deionized water)와 15.0 mL의 포화 소금물 (brine)로 세척했다. 유기층에 황산 나트륨(Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 그 결과 3.871 g의 터트-부틸 4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트를 97.2%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 300 mg의 6-클로로-7-데아자퓨린 (6-chloro-7-deazapurine)을 넣고, 3.75 mL의 N,N-디메틸폼아미드 (N,N-dimethylformamide)를 넣었다. 이후 86.0 mg의 소듐 하이드라이드(sodium hydride, 60wt%)를 0℃에서 넣었다. 반응혼합물을 상온에서 15분 동안 환류시켰다. 15분 뒤 0.403 mL의 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드 (2-(trimethylsillyl)ethoxymethyl chloride)를 넣고 30분간 교반했다. 반응혼합물을 감압농축했다. 그리고 반응혼합물을 4.50 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 4.50 mL의 증류수 (deionized water)로 추출하였다. 유기층에 황산 마그네슘 (MgSO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 그 결과 534 mg의 4-클로로-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 96.6%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 408 mg의 터트-부틸 4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트를 넣고, 5.60 mL의 디메틸설폭사이드 (DMSO)을 넣었다. 이후 61.4 mg의 소듐 하이드라이드(sodium hydride, 60wt%)를 0℃에서 넣었다. 반응혼합물을 상온에서 1.5시간 동안 환류시켰다. 1.5시간 뒤 4.60 mL의 디메틸설폭사이드 (DMSO)에 용해된 574 mg의 4-클로로-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 천천히 적가했다. 반응혼합물을 50℃에서 2시간 동안 교반했다. 2시간 이후 상온으로 냉각했다. 그리고 반응혼합물을 10.0 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 10.0 mL의 증류수 (deionized water)로 추출하였다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (EtOAc:Hexane=1:5). 그 결과 457 mg의 터트-부틸 4-((7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)피페리딘-1-카복실레이트를 66.6%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 452 mg의 터트-부틸 4-((7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)피페리딘-1-카복실레이트를 넣고, 5.00 mL의 테트라히드로퓨란 (tetrahydrofuran)을 넣었다. 이후 20.4 mL의 1.0 M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 테트라히드로퓨란 용액 (1.0 M tetrabutylammonium fluoride in tetrahydrofuran)을 넣었다. 반응혼합물을 상온에서 5시간 동안 환류시켰다. 5시간 이후 상온으로 냉각했다. 반응혼합물을 감압농축했다. 그리고 반응혼합물을 100 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 100 mL의 증류수 (deionized water)로 추출하였다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (EtOAc:Hexane=1:6). 그 결과 310 mg의 터트-부틸 4-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)피페리딘-1-카복실레이트를 95.7%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 310 mg의 터트-부틸 4-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)피페리딘-1-카복실레이트를 넣고, 6.00 mL의 1,4-디옥산 (1,4-dioxane)을 넣었다. 이후 10.0 mL의 4N 염산 (HCl)를 넣었다. 반응혼합물을 상온에서 2시간 동안 교반시켰다. 그리고 반응혼합물을 20.0 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)를 넣고 10% 암모니아수 (ammonium hydroxide)로 염기화시켰다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 그 결과 230 mg의 4-(피페리딘-4-일옥시)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 정량적인 (quantitative) 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 177 mg의 4-(피페리딘-4-일옥시)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 넣고, 3.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0480 mL의 클로로아세틸 클로라이드 (chloroacetyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.211 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (EtOAc:Hexane=1:6). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 56.0 mg의 1-(4-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)피페리딘-1-일)-2-클로로에탄-1-온을 23.5%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 55.6 mg의 1-(4-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)피페리딘-1-일)-2-클로로에탄-1-온을 넣고, 1.00 mL의 N,N-디메틸폼아미드 (N,N-dimethylformamide)로 녹였다. 이 용액에 24.3 mg의 청산 칼륨 (potassium cyanide)을 넣고 30~40℃에서 하룻밤 동안 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (EtOAc:Hexane=1:1). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 35.4 mg의 3-(4-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴을 49.4%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ12.03 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.35 (t, J = 3.2 Hz, 1H), 6.47 (q, J = 2.0, 3.6 Hz, 1H), 5.58-5.43 (m , 1H), 4.08 (s, 2H), 3.90-3.86 (m, 1H), 3.63-3.59 (m, 1H), 3.47-3.32 (m, 2H), 2.09-2.00 (m, 2H), 1.82-1.77 (m, 1H), 1.69-1.61 (m, 1H).
LRMS (ESI) calcd for (C14H15N5O2 + H+) 286.1, found 286.1.
실시예 46. 3-((4-((7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-일) 옥시 )피페리딘-1-일) 설폰일 )벤조니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000055
25 mL 둥근바닥 플라스크에 50.0 mg의 4-(피페리딘-4-일옥시)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 넣고, 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 46.0 mg의 3-시아노벤젠설포닐 클로라이드 (3-cyanobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0600 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (EtOAc:Hexane=1:1). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 27.7 mg의 3-((4-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴을 31.4%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ12.02 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.26-8.21 (m, 2H), 8.11-8.08 (m, 1H), 7.89 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.32 (q, J = 2.4, 2.8 Hz, 1H), 6.30 (q, J = 2.0, 3.2 Hz, 1H), 5.32-5.27 (m, 1H), 3.38-3.50 (m, 2H), 3.01-2.95 (m, 2H), 2.11-2.07 (m, 2H), 1.85-1.77 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C18H17N5O3S + H+) 384.1, found 384.1.
실시예 47. 3-(3-(((7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-일) 옥시 ) 메틸 )피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000056
100 mL 둥근바닥 플라스크에 1.05 g의 3-피페리딘메탄올 (3-piperidinemethanol)을 넣고, 19.0 mL의 테트라히드로퓨란 (tetrahydrofuran)과 19.0 mL의 포화된 탄산수소 나트륨 (NaHCO3)을 넣었다. 그리고 1.19 g의 디-터트-부틸 디카바메이트 (Boc2O)를 넣었다. 반응혼합물을 48시간 동안 교반시켰다. 그리고 24시간 동안 환류했다. 반응혼합물에 2.53 mL의 트리에틸아민 (triethylamine)을 넣고 1시간 동안 상온에서 교반했다. 그리고 수용액층을 20.0 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)로 추출하였다. 유기층을 10.0 mL의 증류수 (deionized water)와 15.0 mL의 포화 소금물 (brine)로 세척했다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 얻어진 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 그 결과 964 mg의 터트-부틸 3-(하이드록시메틸)피페리딘-1-카복실레이트를 49.0%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 307 mg의 6-클로로-7-데아자퓨린 (6-chloro-7-deazapurine)을 넣고, 4.00 mL의 N,N-디메틸폼아미드 (N,N-dimethylformamide)를 넣었다. 이후 132 mg의 소듐 하이드라이드 (sodium hydride, 60wt%)를 0℃에서 넣었다. 반응혼합물을 상온에서 20분 동안 교반시켰다. 20분 뒤 0.370 mL의 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드 (2-(trimethylsillyl)ethoxymethyl chloride)를 넣고 상온에서 1시간 동안 교반했다. 반응혼합물을 감압농축했다. 그리고 반응혼합물을 5.00 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 5.00 mL의 증류수 (deionized water)로 추출하였다. 유기층에 황산 마그네슘 (MgSO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 그 결과 252 mg의 4-클로로-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 45.0%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 192 mg의 터트-부틸 3-(히드록시메틸)피페리딘-1-카복실레이트를 넣고, 2.50 mL의 디메틸설폭사이드 (DMSO)를 넣었다. 이후 53.4 mg의 소듐 하이드라이드 (sodium hydride, 60wt%)를 0℃에서 넣었다. 반응혼합물을 상온에서 1.5시간 동안 교반시켰다. 1.5시간 뒤 2.00 mL의 디메틸설폭사이드 (DMSO)에 용해된 252 mg의 4-클로로-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 천천히 적가했다. 반응혼합물을 50℃에서 2시간 동안 교반했다. 2시간 이후 상온으로 냉각했다. 그리고 반응혼합물을 10.0 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 10.0 mL의 증류수 (deionized water)로 추출하였다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 그 결과 282 mg의 터트-부틸 3-(((7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)메틸)피페리딘-1-카복실레이트를 71.0%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 280 mg의 터트-부틸 3-(((7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)메틸)피페리딘-1-카복실레이트를 넣고, 3.00 mL의 테트라히드로퓨란 (tetrahydrofuran)을 넣었다. 이후 2시간에 걸쳐 6.20 mL의 1.0 M 테트라부틸암모늄 플루오라이드 테트라히드로퓨란 용액 (1.0 M tetrabutylammonium fluoride in tetrahydrofuran)을 넣었다. 반응혼합물을 상온에서 24시간 동안 교반시켰다. 24시간 이후 반응혼합물을 감압농축했다. 그리고 반응혼합물을 100 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)와 100 mL의 증류수 (deionized water)로 추출하였다. 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 그 결과 120 mg의 터트-부틸 3-(((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)메틸)피페리딘-1-카복실레이트를 58.0%의 수율로 얻었다.
50 mL 둥근바닥 플라스크에 203 mg의 터트-부틸 3-(((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)메틸)피페리딘-1-카복실레이트를 넣고, 2.00 mL의 1,4-디옥산 (1,4-dioxane)을 넣었다. 이후 4.00 mL의 4N 염산 (HCl)을 넣었다. 반응혼합물을 상온에서 2시간 동안 교반시켰다. 2시간 이후 반응혼합물을 감압증류했다. 그리고 10.0 mL의 에틸 아세테이트 (EtOAc)를 넣고 10.0 mL의 10% 암모니아수 (ammonium hydroxide)를 넣어 염기화시켰다 (pH=10). 유기층에 황산 나트륨 (Na2SO4)을 넣고 필터했다. 여과된 용액을 감압증류했다. 그 결과 141 mg의 4-(피페리딘-3-일메톡시)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 61%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 140 mg의 4-(피페리딘-3-일메톡시)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 넣고, 2.50 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 0.0710 mL의 클로로아세틸 클로라이드(chloroacetyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.250 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 54.9 mg의 1-(3-(((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)메틸)피페리딘-1-일)-2-클로로에탄-1-온을 30.0%의 수율로 얻었다.
5 mL 둥근바닥 플라스크에 54.9 mg의 1-(3-(((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)메틸)피페리딘-1-일)-2-클로로에탄-1-온을 넣고, 1.10 mL의 N,N-디메틸폼아미드 (N,N-dimethylformamide)로 녹였다. 이 용액에 22.4 mg의 청산 칼륨 (potassium cyanide)을 넣었다. 그리고 반응혼합물을 1시간 동안 30~40℃에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물에 5.00 mL의 증류수 (deionized water)와 5.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)을 넣고 5분간 교반했다. 유기층을 분리하여 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 34.4 mg의 3-(3-(((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)메틸)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴을 64.0 %의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ12.03 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.54-6.46 (m, 1H), 4.43-4.39 (m, 1H), 4.35-4.26 (m, 2H), 4.06-4.02 (m, 2H), 3.07-3.01 (m, 1H), 2.76-2.67 (m, 2H), 1.98-1.91 (m, 1H), 1.90-1.84 (m, 1H), 1.74-1.66 (m, 1H), 1.45-1.37 (m, 2H).
LRMS (ESI) calcd for (C15H17N5O2 + H+) 300.2, found 300.1.
실시예 48. 3-((3-(((7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-일) 옥시 ) 메틸 )피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000057
25 mL 둥근바닥 플라스크에 32.4 mg의 4-(피페리딘-3-일메톡시)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 넣고, 1.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 녹였다. 이 용액에 30.2 mg의 3-시아노벤젠설포닐 클로라이드 (3-cyanobenzenesulfonyl chloride)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0250 mL의 N,N-디이소프로필에틸아민 (N,N-diisopropylethylamine)으로 처리했다. 반응혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반했다. 감압농축 후 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=0:100→1:80→1:50). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 30.1 mg의 3-((3-(((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)메틸)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴을 54.0%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.45 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 8.00 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.70 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 4.57 (dd, J = 10.8, 5.2 Hz, 1H), 4.45 (dd, J = 10.8, 8.0 Hz, 1H), 3.92-3.84 (m, 1H), 3.65 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 2.60-2.55 (m, 1H), 2.45 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 2.42-2.34 (m, 2H), 1.90-1.87 (m, 2H), 1.79-1.74 (m, 1H).
LRMS (ESI) calcd for (C19H19N5O3S + H+) 398.1, found 398.1.
실시예 49. 3-(( 4aR,7aR )-1-(7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-일) 옥타하이드로 -6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일)-3-옥소프로판니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000058
25 mL 둥근바닥 플라스크에 100 mg의 (R,R)-6-벤질-옥타하이드로-피롤로[3,4-b]피리딘 디히드로클로라이드를 넣고, 2.00 mL의 증류수 (deionized water)를 넣었다. 이후 55.8 mg의 6-클로로-7-데아자퓨린 (6-chloro-7-deazapurine)을 넣었다. 반응혼합물에 191 mg의 탄산 칼륨 (K2CO3)을 넣었다. 이 혼합물을 36시간 동안 환류시켰다. 36시간 이후 상온에서 냉각시켰다. 반응혼합물을 3.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 세 번 추출했다. 모아진 유기층을 감압농축했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 그 결과 93.6 mg의 4-((4aR,7aR)-6-벤질-옥타하이드로-1H-피롤로[3,4-b]피리딘-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 81.4%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 93.6 mg의 4-((4aR,7aR)-6-벤질-옥타하이드로-1H-피롤로[3,4-b]피리딘-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 넣고, 1.00 mL의 메탄올 (methanol)로 용해시켰다. 이후 40.0 mg의 10w/w% 팔라듐/탄소 (Pd/C)를 넣고, 수소 풍선을 반응 플라스크 위에 장치하였다. 반응혼합물을 24시간 동안 격렬히 교반했다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 필터한 용액을 감압농축했다. 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 60.1 mg의 4-((4aR,7aR)-옥타하이드로-1H-피롤로[3,4-b]피리딘-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 88.4%의 수율로 얻었다.
5 mL 둥근바닥 플라스크에 60.1 mg의 4-((4aR,7aR)-옥타하이드로-1H-피롤로[3,4-b]피리딘-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 넣고, 1.50 mL의 n-부탄올 (n-butanol)로 녹였다. 이 용액에 0.237 mL의 에틸 시아노아세테이트 (ethyl cyanoacetate)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0169 mL의 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔 (DBU)으로 처리했다. 이후 24시간 동안 80oC로 가열했다. 반응을 끝낸 후 반응액을 감압증류하여 용매를 제거했다. 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 50.0 mg의 3-((4aR,7aR)-1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일)-3-옥소프로판니트릴을 63.3%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ10.04 (s, 1H), 8.36 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.15-7.12 (m, 1H), 6.58-6.54 (m, 1H), 5.65-5.51 (m, 1H), 4.65-4.57 (m, 1H), 4.01-3.49 (m, 4H), 3.46 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 3.41-3.20 (m, 1H), 2.53-2.39 (m, 1H), 2.01-1.94 (m, 2H), 1.80-1.69 (m, 1H), 1.54-1.42 (m, 1H).
LRMS (ESI) calcd for (C16H18N6O + H+) 311.2, found 311.1.
실시예 50. 3-(( 4aS,7aS )-1-(7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-일) 옥타하이드로 -6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일)-3-옥소프로판니트릴
Figure PCTKR2016009205-appb-I000059
25 mL 둥근바닥 플라스크에 100 mg의 (S,S)-6-벤질-옥타하이드로-피롤로[3,4-b]피리딘 디히드로클로라이드를 넣고, 2.00 mL의 증류수 (deionized water)를 넣었다. 이후 55.8 mg의 6-클로로-7-데아자퓨린 (6-chloro-7-deazapurine)을 넣었다. 반응혼합물에 191 mg의 탄산 칼륨 (K2CO3)을 넣었다. 이 혼합물을 36시간 동안 환류시켰다. 36시간 이후 상온에서 냉각시켰다. 반응혼합물을 3.00 mL의 디클로로메탄 (CH2Cl2)으로 세 번 추출했다. 모아진 유기층을 감압농축했다. 얻어진 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography)를 사용하여 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 그 결과 114 mg의 4-((4aS,7aS)-6-벤질옥타하이드로-1-피롤로[3,4-b]피리딘-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 99.1%의 수율로 얻었다.
25 mL 둥근바닥 플라스크에 114 mg의 4-((4aS,7S)-6-벤질옥타하이드로-1-피롤로[3,4-b]피리딘-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 넣고, 1.50 mL의 메탄올 (methanol)로 용해시켰다. 이후 20.0 mg의 10w/w% 팔라듐/탄소 (Pd/C)를 넣고, 수소 풍선을 반응 플라스크 위에 장치하였다. 반응혼합물을 24시간 동안 격렬히 교반했다. 반응혼합물을 여과제 (filter agent)인 셀라이트 545 (CeliteTM 545) 층을 통해 필터했다. 필터한 용액을 감압농축했다. 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 370 mg의 4-((4aS,7aS)-옥타히드로피롤로[3,4-b]피리딘-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 66.0%의 수율로 얻었다.
5 mL 둥근바닥 플라스크에 70.0 mg의 4-((4aS,7aS)-옥타히드로피롤로[3,4-b]피리딘-1-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘을 넣고, 1.50 mL의 n-부탄올 (n-butanol)로 녹였다. 이 용액에 0.240 mL의 에틸 시아노아세테이트(ethyl cyanoacetate)를 넣었다. 그리고 반응혼합물을 0.0170 mL의 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔 (DBU)으로 처리했다. 이후 12시간 동안 80oC로 가열했다. 반응을 끝낸 후 반응액을 감압증류하여 용매를 제거했다. 잔류물을 컬럼으로 정제했다 (MeOH:CH2Cl2=2:98). 얻어진 분액을 감압농축하고, 진공하에서 농축시켰다. 그 결과 36.0 mg의 3-((4aS,7aS)-1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일)-3-옥소프로판니트릴을 56.4%의 수율로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.28 (s, 1H), 8.37 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.18-7.13 (m, 1H), 6.58-6.54 (m, 1H), 5.66-5.54 (m, 1H), 4.65-4.54 (m, 1H), 4.01-3.49 (m, 4H), 3.46 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 3.45-3.38 (m, 1H), 2.52-2.39 (m, 1H), 2.03-1.95 (m, 2H), 1.78-1.71 (m, 1H), 1.54-1.42 (m, 1H).
LRMS (ESI) calcd for (C16H18N6O + H+) 311.2, found 311.1.
실시예 51. (R)-3-(3-( 메틸(7H-피롤로[2,3-d] 피리미딘-4-일)아미노) 피롤리딘 -1-일)-3-옥소프로판니트릴 하이드로클로라이드 ( 실시예 1의 염산염 제조)
Figure PCTKR2016009205-appb-I000060
50 mL 둥근바닥 플라스크에 750 mg의 (R)-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴 (실시예 1)을 넣고, 48.0 mL의 무수 테트라하이드로퓨란 (tetrahydrofuran)를 넣었다. 이 혼합물을 투명한 용액이 될 때까지 환류시켰다. 이 용액에 2.77 mL의 디에틸에테르 (diethyl ether)에 녹은 1M 염산용액 (HCl) (Aldrich)을 천천히 적가했다. 5분간 환류시키면서 교반했다. 5분 후 상온으로 냉각시킨 뒤 1시간 동안 교반했다. 반응혼합물을 필터 후, 얻어진 고체를 진공하에서 건조하였다. 그 결과 596 mg의 (R)-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴 하이드로클로라이드을 70.7%의 수율로 얻었다.
상기 실시예 1 내지 36의 각 화합물을 정리하면 다음과 같다.
Figure PCTKR2016009205-appb-I000061
Figure PCTKR2016009205-appb-I000062
Figure PCTKR2016009205-appb-I000063
시험예 1: JAK 억제 효과
1. 시험관적 인산화효소 억제 실험법
(1) 인산화효소 희석
인산화효소 (kinase)는 사람 유래 JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2 (Millipore, 독일)를 사용하였으며, 아래에 명시된 각 효소별로 적합한 완충액에 희석한 후 반응시약과 혼합하였다.
(1.1) JAK1 희석 완충액 조성
증류수 (deionized water)에 트리스(히드록시메틸)아미노메탄 (tris(hydroxymethyl)aminomethane: TRIS)과 에틸렌디아민테트라아세트산 (ethylenediaminetetraacetic acid: EDTA)을 각각 20 mM 및 0.2 mM이 되게 용해시키고, 100 mL 기준 100 μL β-메르캅토에탄올, 10 μL Brij-35TM, 및 5 mL 글리세롤을 첨가하여, JAK1 희석 완충액을 제조하였다.
(1.2) JAK2 , JAK3 , 및 TYK2 희석 완충액 조성
증류수 (deionized water)에 3-모르폴리노프로판-1-설폰산 (3-morpholinopropane-1-sulfonic acid: MOPS)과 EDTA를 각각 20 mM 및 1 mM이 되게 용해시키고, 100 mL 기준 100 μL β-메르캅토에탄올, 10 μL Brij-35TM, 5 mL 글리세롤 및 100 mg BSA를 첨가하여, JAK2, JAK3, 및 TYK2 희석 완충액을 제조하였다.
(2) 화합물 준비 및 실험 수행 방법
모든 화합물은 100% DMSO 용액에 50 μM 농도로 용해시킨다. 이렇게 만든 용액을 96-웰 플레이트의 각 웰에서 반응시약과 반응시키는데, 최종 농도는 1 μM이 되게 하였다. 각 인산화효소별 상세 실험법은 아래와 같다.
(2.1) JAK1
25 μL의 반응용액이 포함하는 물질의 최종 농도는 아래 표 1과 같다.
[표 1]
Figure PCTKR2016009205-appb-I000064
γ-33P-ATP는 비방사능 표지된 ATP (non-radiolabelled ATP) (Sigma 사, Cat. no. A-7699)로부터 제조된 것을 사용하였다. 상온에서 40분 동안 반응시킨 후, 3(v/v)% 인산 용액 5 μL를 첨가하여 반응을 정지시켰다. 반응이 끝난 후 용액 10 μL를 GF/P30 filtermat (PerkinElmerTM, 1450-523)에 점적하고, 5분 동안 75 mM 인산 용액으로 3번 세척하였다. 메탄올 건조를 시행하고 신틸레이션을 측정하였다. 메탄올 건조란 수성 용액 중에 메탄올 (methanol)을 첨가하고 공비 (azeotrope) 효과를 이용하여 건조시키는 것을 나타낸다.
(2.2) JAK2
25 μL의 반응용액이 포함하는 물질의 최종 농도는 하기 표 2와 같다.
[표 2]
Figure PCTKR2016009205-appb-I000065
γ-33P-ATP는 비방사능 표지된 ATP (non-radiolabelled ATP) (Sigma 사, Cat. no. A-7699)로부터 제조된 것을 사용하였다. 상온에서 40분 동안 반응시킨 후, 3(v/v)% 인산 용액 5 μL를 첨가하여 반응을 정지시켰다. 반응이 끝난 후 용액 10 μL를 GF/P30 filtermat (PerkinElmerTM, 1450-523)에 점적하고, 5분 동안 75 mM 인산 용액으로 3번 세척하였다. 메탄올 건조를 시행하고 신틸레이션을 측정하였다.
(2.3) JAK3
25 μL의 반응용액이 포함하는 물질의 최종 농도는 하기 표 3과 같다.
[표 3]
Figure PCTKR2016009205-appb-I000066
γ-33P-ATP는 비방사능 표지된 ATP (non-radiolabelled ATP) (Sigma 사, Cat. no. A-7699)로부터 제조된 것을 사용하였다. 상온에서 40분 동안 반응시킨 후, 3(v/v)% 인산 용액 5 μL를 첨가하여 반응을 정지시켰다. 반응이 끝난 후 용액 10 μL를 GF/P30 filtermat (PerkinElmerTM, 1450-523)에 점적하고, 5분 동안 75 mM 인산용액으로 3번 세척하였다. 메탄올 건조를 시행하고 신틸레이션을 측정하였다.
(2.4) TYK2
25 μL의 반응 용액이 포함하는 물질의 최종 농도는 아래의 표 4와 같다.
[표 4]
Figure PCTKR2016009205-appb-I000067
γ-33P-ATP는 비방사능 표지된 ATP (non-radiolabelled ATP) (Sigma 사, Cat. no. A-7699)로부터 제조된 것을 사용하였다. 상온에서 40분 동안 반응시킨 후, 3(v/v)% 인산 용액 5 μL를 첨가하여 반응을 정지시켰다. 반응이 끝난 후 용액 10 μL를 GF/P30 filtermat (PerkinElmerTM, 1450-523)에 점적하고, 5분 동안 75 mM 인산 용액으로 3번 세척하였다. 메탄올 건조를 시행하고 신틸레이션을 측정하였다.
(2.5) IC50 값의 측정
실시예 1 내지 48 중 일부 화합물 (예, 실시예 1 및 38)에 대하여는 농도를 달리하여, JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2에 대한 저해 효과를 상기한 방법에 따라 측정하고, IC50 값을 측정하였다. 시험 화합물의 IC50 값은 챙-푸로소프 방법 (Biochem . Pharmacol., 1973, 22(23), 3099-3108)을 사용하여 화합물의 각 % 억제값으로부터 계산하였다.
(3) 시험 결과
표 5 및 표 6은 실시예 1 내지 48에서 합성된 화합물이 JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2의 인산화 활성을 억제하는 정도를 상기 방법에 따라 측정한 결과를 나타낸다. 표 5 및 표 6에서 실시예 번호는 해당 실시예에서 합성된 화합물을 나타내고, JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2란의 수치는 해당 실시예에서 합성된 화합물 1 μM 농도에서 이들 효소의 인산화 활성에 대한 억제 정도를 백분율로 표시한 것이다. 표 5 및 표 6에서, 음의 수치는 실질적으로 저해 효과가 없다는 것을 나타낸다.
상기 억제 정도는 상기 화합물을 포함하지 않은 음성 대조군 실험에서 얻어진 인산화 활성 대비 해당 실험군에서 측정된 인산화 활성의 감소된 백분율을 나타낸다.
% 억제 = (시험물질 비처리군의 신틸레이션 측정값-시험물질 처리군의 신틸레이션 측정값)/(시험물질 처리군의 신틸레이션 측정값)x100
대조군으로서, Tofacitinib citrate (Hangzhou Tacon Co., Ltd.) 1 μM을 사용하였으며, JAK1, JAK2, JAK3, 및 TYK2에 대한 억제 비율은 각각 99%, 98%, 99% 및 100%이었다.
[표 5]
Figure PCTKR2016009205-appb-I000068
[표 6]
Figure PCTKR2016009205-appb-I000069
하기 표 7은 실시예 1 및 38의 화합물의 JAK1, JAK2, JAK3 및 TYK2에 대한 IC50 값을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
[표 7]
Figure PCTKR2016009205-appb-I000070
시험예 2: 크로톤 오일 유도 염증 모델에 대한 항염증 시험
(1) 동물
ICR 마우스 (6주령, 수컷)를 일본 SLC를 통해 입수하였으며, 12시간 낮/밤 주기 (07:00~19:00)를 지켜 조명을 조정하였고, 온도는 22℃를 유지하며 사료와 음수를 자유롭게 할 수 있게 했다. 사료 제한은 실험 물질 투여 2시간 전에 실시했다.
(2) 크로톤 오일 유도 염증( 귀부종 ) 유발법 ( Croton oil-induced ear edema)
부종 유발 물질인 크로톤 오일 (croton oil, Sigma-Aldrich, Cat # C6719)을 0.2(v/v)%가 되게 아세톤 (acetone, Sigma-Aldrich, Cat # 650501)에 희석하였다. 각 군별 실험동물 개체 몸무게에 따른 실험물질의 투여량을 경구 투여 30분 후 크로톤 오일을 처리하였다. 처리는 크로톤 오일 20 ㎕를 실험동물 우측 귀 안쪽과 바깥쪽에 고르게 도포하였다.
(3) 실험 계획
화합물의 항염증 효능 확인을 위해 크로톤 오일 유도 염증유발 마우스 동물모델에 대한 시험을 실시하였다. 마우스들은 무작위로 각 군당 10마리로 분리하였다. 시험 약물의 항염증효능 확인을 위하여, (2)에서 언급한 바와 같이 음성대조군 및 모든 약물은 크로톤 오일 처리 30분 전에 1회 경구 투여하였다. 투여를 위해 사용한 부형제는 증류수 (deionized water)에 0.45(v/v)% 카복시메틸셀룰로스 (Sigma-Aldrich, Cat # C5678, 증류수 (deionized water)에 0.5(v/v)%로 제조 후 사용)와 10(v/v)% 에탄올이 포함된 수용액을 사용하였다. 음성대조군은 상기 부형제만을 체중 100 g 당 용액 1 mL 기준으로 투여하였고, 양성대조군은 상기 부형제에 인도메타신 (indomethacin) 100 mg/10 mL 함유 용액을 체중 100 g 당 용액 1 mL 기준으로 투여하여 체중 1 kg 당 100 mg 용량이 되게 하였다. 각 시험 약물은 100 mg/10 mL 농도로 준비하여, 이를 각각 체중 100 g 당 용액 1 mL 기준으로 투여하여 체중 1 kg당 100 mg이 되게 하였다. 인도메타신 (indomethacin)은 NSAID (non-steroidal anti-inflammatory drug)계열 약물로 각종 염증, 통증 및 열을 내리는 효능을 나타내며 COX (Cyclooxygenase) 효소 억제를 통해 항염증 효능을 나타낸다.
(4) 염증( 귀부종 ) 모델 시험의 평가
염증 발생 정도는 실험동물 귀의 두께 측정을 통해 확인하였다. 두께는 디지털 외경측정기 (Digimatic micrometer, Mitutoyo corporation, Japan, Cat # MDC-25SB)를 사용하였다. 크로톤 오일 처리 4시간 후 측정을 실시하였다. 크로톤 오일을 처리한 오른쪽 귀와 아세톤만 처리한 왼쪽 귀 두께를 측정하여, 왼쪽 귀 두께 대비 증가한 양을 %로 환산한 결과를 도 1 및 2에 나타내었다.
시험예 3: 약물동력학적 시험( Pharmacokinetic Test)
실시예 1의 화합물의 염산염을 랫트에 경구 및 정맥으로 투여하고, 투여 후 24시간까지 채혈하여 약물동태 프로파일을 분석을 수행하였다. 실시예 49 (실시예 1의 염산염)를 사용하였으며, 토파시티닙 시트레이트를 비교약물로서 사용하였다.
투여용량은 20 mg/kg으로 단회 경구 및 정맥으로 투여하였으며, 채혈 시간당 3마리에서 경정맥으로 채혈하였고, 투여 후 0, 0.25 (15 분), 0.5 (30 분), 1, 2, 4, 6, 12, 24 시간에 각각 채혈을 실시하여, 약물 농도를 측정하였다. 그 결과 얻어진 약물동력학적 프로파일을 하기 표 8에 나타내었다
[표 8]
Figure PCTKR2016009205-appb-I000071
상기 시험 결과에 따르면, 약물의 반감기가 길수록 투여간격은 길어질 수 있으므로, 본 발명에 따른 화합물은 종래 토파시티닙에 비해 투여간격을 현저히 늘릴 수 있어 약물의 복약순응도를 증가시킬 수 있는 장점이 있다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로, 상기 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims (12)

  1. 화학식 1의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체로서,
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2016009205-appb-I000072
    상기 화학식 1에서,
    R1은 수소, C1-2 알킬, 또는 시클로프로필메틸이고;
    R2는 2-시아노아세틸, 2-시아노에틸, 부틸, 2-아지도아세틸, 3-메틸부타노일, 이소부톡시카르보닐, 아닐리노카르보닐, 메틸설폰일, (트리플루오로메틸)설폰일, 에틸설폰일, 프로필설폰일, 이소프로필설폰일, (1-메틸-1H-이미다졸-4-일)설폰일, 페닐설폰일, (2-플루오로페닐)설폰일, (3-플루오로페닐)설폰일, (4-플루오로페닐)설폰일, (2-시아노페닐)설폰일, (3-시아노페닐)설폰일, (4-시아노페닐)설폰일, (2-니트로페닐)설폰일, (3-니트로페닐)설폰일, (4-니트로페닐)설폰일, m-톨릴설폰일, 토실, (4-메톡시페닐)설폰일, ((4-트리플루오로메틸)페닐)설폰일, 나프탈렌-2-일설폰일, 피페리딘-1-일설폰일, 모폴리노설폰일이다.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 화학식 1의 화합물은
    (R)-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
    (R)-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)프로판니트릴;
    (R)-N-(1-부틸피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-2-아지도-1-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)에탄-1-온;
    (R)-3-메틸-1-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)부탄-1-온;
    이소부틸 (R)-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-카르복실레이트;
    (R)-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)-N-페닐피롤리딘-1-카르복스아미드;
    (R)-N-메틸-N-(1-(메틸설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-메틸-N-(1-((트리플루오로메틸)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-(1-(에틸설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-메틸-N-(1-(프로필설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-(1-(이소프로필설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-메틸-N-(1-((1-메틸-1H-이미다졸-4-일)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-메틸-N-(1-(페닐설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-(1-((2-플루오로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-(1-((3-플루오로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-(1-((4-플루오로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-2-((3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
    (R)-3-((3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
    (R)-4-((3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
    (R)-N-메틸-N-(1-((2-니트로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-메틸-N-(1-((3-니트로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-메틸-N-(1-((4-니트로페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-메틸-N-(1-(m-톨릴설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-메틸-N-(1-토실피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-(1-((4-메톡시페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-N-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-메틸-N-(1-((4-(트리플루오로메틸)페닐)설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-메틸-N-(1-(나프탈렌-2-일설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-메틸-N-(1-(피페리딘-1-일설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (R)-N-메틸-N-(1-(모폴리노설폰일)피롤리딘-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    (S)-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
    (R)-3-((3-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
    (R)-3-(3-(에틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
    (R)-3-((3-(에틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
    (R)-3-(3-((시클로프로필메틸)(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴; 또는
    (R)-3-((3-((시클로프로필메틸)(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴인
    화학식 1의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체.
  3. 화학식 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체로서,
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2016009205-appb-I000073
    상기 화학식 2에서,
    X는 질소 또는 산소이고,
    --- 은 상기 X가 질소일 경우 단일결합이고, 상기 X가 산소일 경우 존재하지 않고,
    R1은 메틸이고;
    R2는 1-(2-시아노아세틸)피페리딘-4-일, 1-(페닐설폰일)피페리딘-4-일, 1-(3-시아노페닐설폰일)피페리딘-4-일, 1-(2-시아노아세틸)피페리딘-3-일, 1-(3-시아노페닐설폰일)피페리딘-3-일, 1-(3-시아노페닐설폰일)-4-메틸-피페리딘-3-일, 1-(2-시아노아세틸)-3,3-디메틸피롤리딘-4-일, [1-(2-시아노아세틸)피페리딘-3-일]메틸, 또는 [1-(3-시아노페닐설폰일)피페리딘-3-일]메틸이고,
    또는 R1 및 R2가 X와 함께 6-(2-시아노아세틸)옥타하이드로-6H-피롤로-[3,4-b]피리딘-1-일을 형성한다.
  4. 청구항 3에 있어서, 상기 화학식 2의 화합물은
    3-(4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
    N-메틸-N-(1-(페닐설폰일)피페리딘-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민;
    3-((4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
    (R)-3-(3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
    (R)-3-((3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
    3-(((3R,4R)-4-메틸-3-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
    (R)-3-(3,3-디메틸-4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
    (S)-3-(3,3-디메틸-4-(메틸(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)아미노)피롤리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
    3-(4-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
    3-((4-((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
    3-(3-(((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)메틸)피페리딘-1-일)-3-옥소프로판니트릴;
    3-((3-(((7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥시)메틸)피페리딘-1-일)설폰일)벤조니트릴;
    3-((4aR,7aR)-1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일)-3-옥소프로판니트릴; 또는
    3-((4aS,7aS)-1-(7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-일)옥타하이드로-6H-피롤로[3,4-b]피리딘-6-일)-3-옥소프로판니트릴인
    화학식 2의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체.
  5. 청구항 1 내지 청구항 4 중 어느 한 항의 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체를 포함하는 JAK와 연관된 질병 치료용 약학적 조성물.
  6. 청구항 5에 있어서, 상기 질병은 자가면역질환, 면역체계 기능장애, 바이러스성 질환, 또는 암인 것인 약학적 조성물.
  7. 청구항 6에 있어서, 상기 자가면역질환은 피부 질환, 다발성 경화증, 류마티스성 관절염, 소아 관절염, 유형 I 당뇨병, 루푸스, 건선, 염증성 장 질환, 크론병 또는 자가면역 갑상선 질환이고, 상기 면역체계 기능장애는 동종이식거부, 대 숙주 질환, 동종 이식 거부 반응 또는 이식편대숙주병이고, 상기 바이러스성 질환은 엡스타인 바 바이러스(EBV), B형 간염, C형 간염, HIV, HTLV 1, 수두, 대상포진 바이러스(VZV) 또는 인간 유두종 바이러스(HPV) 질환이고, 상기 암은 전립선암, 림프종, 백혈병 또는 다발성 골수종인 것인 약학적 조성물.
  8. 청구항 1 내지 청구항 4 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체를 JAK와 접촉시켜 JAK의 활성을 억제하는 단계를 포함하는 JAK의 활성을 억제하는 방법.
  9. 제8항에 있어서, JAK1의 활성을 JAK2의 활성에 대해 선택적으로 억제하는 것인 JAK의 활성을 억제하는 방법.
  10. 청구항 1 내지 청구항 4 중 어느 한 항의 화합물 또는 약제학적으로 허용가능한 그의 염 또는 용매화물 또는 입체이성질체를 치료학적으로 유효한 양으로 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 JAK와 연관된 질병을 치료하는 방법.
  11. 청구항 10에 있어서, 상기 질병은 자가면역질환, 면역체계 기능장애, 바이러스성 질환, 또는 암인 것인 방법.
  12. 청구항 11에 있어서, 상기 자가면역질환은 피부 질환, 다발성 경화증, 류마티스성 관절염, 소아 관절염, 유형 I 당뇨병, 루푸스, 건선, 염증성 장 질환, 크론병 또는 자가면역 갑상선 질환이고, 상기 면역체계 기능장애는 동종이식거부, 대 숙주 질환, 동종 이식 거부 반응 또는 이식편대숙주병이고, 상기 바이러스성 질환은 엡스타인 바 바이러스(EBV), B형 간염, C형 간염, HIV, HTLV 1, 수두, 대상포진 바이러스(VZV) 또는 인간 유두종 바이러스(HPV) 질환이고, 상기 암은 전립선암, 림프종, 백혈병 또는 다발성 골수종인 것인 방법.
PCT/KR2016/009205 2015-08-21 2016-08-19 야누스 키나제 1 선택적 억제제 및 그 의약 용도 WO2017034245A1 (ko)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2018509745A JP6605121B2 (ja) 2015-08-21 2016-08-19 ヤヌスキナーゼ１選択的阻害剤及びその医薬用途
US15/752,635 US10407430B2 (en) 2015-08-21 2016-08-19 Janus kinase 1 selective inhibitor and pharmaceutical use thereof
EP16839534.1A EP3327021A4 (en) 2015-08-21 2016-08-19 Janus kinase 1 selective inhibitor and pharmaceutical use thereof
CN201680061097.4A CN108137608B (zh) 2015-08-21 2016-08-19 Janus激酶1选择性抑制剂及其药物用途

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020150118268A KR101771219B1 (ko) 2015-08-21 2015-08-21 야누스 키나제 1 선택적 억제제 및 그 의약 용도
KR10-2015-0118268 2015-08-21

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2017034245A1 true WO2017034245A1 (ko) 2017-03-02

Family

ID=58100462

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2016/009205 WO2017034245A1 (ko) 2015-08-21 2016-08-19 야누스 키나제 1 선택적 억제제 및 그 의약 용도

Country Status (6)

Country Link
US (1) US10407430B2 (ko)
EP (1) EP3327021A4 (ko)
JP (1) JP6605121B2 (ko)
KR (1) KR101771219B1 (ko)
CN (1) CN108137608B (ko)
WO (1) WO2017034245A1 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019216409A1 (ja) * 2018-05-11 2019-11-14 学校法人慶應義塾 ピロロピリミジン化合物を有効成分とする炎症性疾患の予防及び／又は治療剤

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107098908B (zh) * 2016-02-23 2021-01-08 欣凯医药科技(上海)有限公司 一种吡咯并嘧啶类化合物的制备方法和应用
CN109535164B (zh) * 2017-09-21 2022-01-18 上海华汇拓医药科技有限公司 Jak激酶抑制剂及其制备方法和在医药领域的应用
US20240166651A1 (en) * 2021-03-15 2024-05-23 Chiesi Farmaceutici S.P.A. Heterocyclic derivatives as janus kinase inhibitors

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999065908A1 (en) * 1998-06-19 1999-12-23 Pfizer Products Inc. PYRROLO[2,3-d]PYRIMIDINE COMPOUNDS
WO2014101295A2 (zh) * 2012-12-28 2014-07-03 浙江导明医药科技有限公司 一种詹纳斯激酶（JAKs）抑制活性的异恶唑衍生物
WO2014140310A1 (en) * 2013-03-15 2014-09-18 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Pyrrolidine derivatives, pharmaceutical compositions containing them, and their use in therapy
WO2015083028A1 (en) * 2013-12-05 2015-06-11 Pfizer Inc. Pyrrolo[2,3-d]pyrimidinyl, pyrrolo[2,3-b]pyrazinyl and pyrrolo[2,3-d]pyridinyl acrylamides

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PA8474101A1 (es) * 1998-06-19 2000-09-29 Pfizer Prod Inc Compuestos de pirrolo [2,3-d] pirimidina
ES2208433T3 (es) 1999-12-10 2004-06-16 Pfizer Products Inc. Compuestos de pirrolo(2,3-d)pirimidina como inhibidores de proteina quinasas.
AP1911A (en) 2000-06-26 2008-10-30 Pfizer Prod Inc Pyrrolo[2,3-d]pyrimidine compounds.
US7301023B2 (en) * 2001-05-31 2007-11-27 Pfizer Inc. Chiral salt resolution
AR054416A1 (es) * 2004-12-22 2007-06-27 Incyte Corp Pirrolo [2,3-b]piridin-4-il-aminas y pirrolo [2,3-b]pirimidin-4-il-aminas como inhibidores de las quinasas janus. composiciones farmaceuticas.
EP2629777B1 (en) * 2010-10-22 2018-12-19 Merck Sharp & Dohme Corp. Bicyclic diamines as janus kinase inhibitors

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1999065908A1 (en) * 1998-06-19 1999-12-23 Pfizer Products Inc. PYRROLO[2,3-d]PYRIMIDINE COMPOUNDS
WO2014101295A2 (zh) * 2012-12-28 2014-07-03 浙江导明医药科技有限公司 一种詹纳斯激酶（JAKs）抑制活性的异恶唑衍生物
WO2014140310A1 (en) * 2013-03-15 2014-09-18 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Pyrrolidine derivatives, pharmaceutical compositions containing them, and their use in therapy
WO2015083028A1 (en) * 2013-12-05 2015-06-11 Pfizer Inc. Pyrrolo[2,3-d]pyrimidinyl, pyrrolo[2,3-b]pyrazinyl and pyrrolo[2,3-d]pyridinyl acrylamides

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FLANAGAN, M. E. ET AL.: "Discovery of CP-690,550: A Potent and Selective Janus Kinase (JAK) Inhibitor for the Treatment of Autoimmune Diseases and Organ Transplant Rejection", J. MED. CHEM., vol. 53, no. 24, 23 December 2010 (2010-12-23), pages 8468 - 8484, XP055222844 *
See also references of EP3327021A4 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019216409A1 (ja) * 2018-05-11 2019-11-14 学校法人慶應義塾 ピロロピリミジン化合物を有効成分とする炎症性疾患の予防及び／又は治療剤
JPWO2019216409A1 (ja) * 2018-05-11 2021-07-26 学校法人慶應義塾 ピロロピリミジン化合物を有効成分とする炎症性疾患の予防及び／又は治療剤
US20210393634A1 (en) * 2018-05-11 2021-12-23 Keio University Prophylactic and/or therapeutic agent for inflammatory diseases which contains pyrrolopyrimidine compound as active ingredient
JP7268264B2 (ja) 2018-05-11 2023-05-08 慶應義塾 ピロロピリミジン化合物を有効成分とする炎症性疾患の予防及び／又は治療剤
US12115161B2 (en) 2018-05-11 2024-10-15 Keio University Prophylactic and/or therapeutic agent for inflammatory diseases which contains pyrrolopyrimidine compound as active ingredient

Also Published As

Publication number Publication date
JP6605121B2 (ja) 2019-11-13
KR101771219B1 (ko) 2017-09-05
CN108137608A (zh) 2018-06-08
KR20170022803A (ko) 2017-03-02
US10407430B2 (en) 2019-09-10
JP2018528197A (ja) 2018-09-27
CN108137608B (zh) 2020-06-19
US20180237440A1 (en) 2018-08-23
EP3327021A4 (en) 2019-01-02
EP3327021A1 (en) 2018-05-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2021194318A1 (en) Plk1 selective degradation inducing compound
WO2017026718A1 (ko) Ret 키나아제 저해제인 신규 3-(이속사졸-3-일)-피라졸로[3,4-디]피리미딘-4-아민 화합물
WO2019078522A1 (ko) 세레브론 단백질의 분해 유도 화합물, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2017142325A1 (ko) 단백질 키나아제 저해제인 신규 2,3,5-치환된 싸이오펜 화합물
WO2021040356A1 (en) C-nucleosides, c-nucleotides and their analogs, equivalents and prodrugs thereof for ectonucleotidase inhibition
WO2022055181A1 (ko) Egfr 돌연변이 암의 억제용 화합물 및 이들의 의약 용도
WO2023017442A1 (en) Novel plk1 degradation inducing compound
WO2017034245A1 (ko) 야누스 키나제 1 선택적 억제제 및 그 의약 용도
WO2016032209A2 (ko) 야누스인산화효소 억제제로서의 치환된 n-(피롤리딘-3-일)-7h-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민
WO2014109530A1 (ko) 2-(페닐에티닐)티에노[3,4-b]피라진 유도체 및 이를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2022010150A1 (ko) 신규한 tnf 활성 억제제 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염
AU2017256488B2 (en) Quinazoline derivative or its salt and pharmaceutical composition comprising the same
WO2020242204A1 (ko) Jak 저해제 화합물, 및 이를 포함하는 의약 조성물
WO2018139883A1 (ko) 다중 표적 키나아제 저해제로서 융합피리미딘 유도체
WO2024063578A1 (ko) 신규한 테트라헤테로사이클 화합물
WO2022177307A1 (ko) 벤즈이미다졸 유도체를 유효 성분으로 포함하는 인터페론 유전자 자극제 조성물
WO2021172871A1 (ko) 단백질 인산화 효소 저해 활성을 갖는 신규한 이미다졸 유도체 및 이의 용도
WO2023113457A1 (ko) 폴리유비퀴틴화에 의한 표적 단백질 또는 폴리펩티드의 분해용 신규 화합물
WO2024039210A1 (ko) Cdk2 및/또는 cdk9의 억제 또는 분해용 화합물 및 이들의 의약 용도
WO2022114905A1 (ko) 신규한 jak 특이 저해제 화합물, 및 이의 제조방법
WO2019198940A1 (ko) 우수한 카이네이즈 저해 활성을 보이는 다양한 치환기를 갖는 피리미딘 유도체
WO2021182914A1 (ko) 신규한 cdk7 억제 화합물 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염
WO2023277583A1 (ko) 신규 plk1 단백질 분해 유도 화합물
WO2023121207A1 (ko) Aak1을 억제하는 바이러스성 질환 또는 뇌 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2023075479A1 (ko) 신규한 티에노[2,3-d]피리미딘 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 암 또는 자가면역질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 16839534

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 15752635

Country of ref document: US

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2018509745

Country of ref document: JP

Kind code of ref document: A

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2016839534

Country of ref document: EP